JP2014133760A - Oviposition inhibitor for hemiptera pest, thysanoptera pest or acarina pest - Google Patents

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Abstract

PROBLEM TO BE SOLVED: To provide an oviposition inhibitor effective for Hemiptera pests, such as Aleyrodidae and Pentatomidae, Thysanoptera pests, or Acarina pests.SOLUTION: An oviposition inhibitor of the invention contains, as an active ingredient, squalene. The invention includes an oviposition inhibitor composition containing the oviposition inhibitor and a base material.

Description

本発明は、スクアレンを有効成分として含有する半翅目害虫、アザミウマ目害虫、またはダニ目害虫の産卵阻害剤に関するものである。   TECHNICAL FIELD The present invention relates to an egg-laying inhibitor of a hemipod pest, thrips pest, or mite pest that contains squalene as an active ingredient.

コナジラミ類やカメムシ類などの半翅目害虫による作物被害が深刻化している。   Crop damage caused by hemipods such as whiteflies and stink bugs is becoming more serious.

例えば、コナジラミ類は、半翅目コナジラミ科の昆虫で、世界的に広く分布し、トマト、イチゴ、キュウリなどの作物に寄生する吸汁性の有害な害虫である。コナジラミ類としては、例えば、オンシツコナジラミ(Trialeurodes vaporariorum)、シルバーリーフコナジラミ(Bemisia argentifolii)、タバココナジラミ(Bemisia tabaci)、イチゴコナジラミなどが挙げられる。ただし、コナジラミ種の命名法は一律でなく、上記のほか、シルバーリーフコナジラミとタバココナジラミを同種として扱い、シルバーリーフコナジラミをタバココナジラミ・バイオタイプB(Bemisia tabaci B−biotype)と呼び、タバココナジラミをタバココナジラミ・バイオタイプQ(Bemisia tabaci Q−biotype)と呼ぶ場合もあるが、本明細書では、前者の命名法に沿って説明する。   For example, whiteflies are insects of the order Hemiptera, Whiteflies, which are widely distributed around the world and are sucking harmful pests parasitic on crops such as tomatoes, strawberries and cucumbers. Examples of the whitefly include Trileuredes vaporiarum, Silverleaf whitefly, Bemisia tabaci, strawberry whitefly, and the like. However, the nomenclature of whitefly species is not uniform. In addition to the above, silver leaf whitefly and tobacco whitefly are treated as the same species, and silver leaf whitefly is called tobacco whitefly biotype B (Bemisia tabaci B-biotype), and tobacco whitefly is called Although it may be called tobacco whitefly biotype Q (Bemisia tabaci Q-biotype), in this specification, it explains along the former nomenclature.

オンシツコナジラミは典型的な広食性昆虫であり、キク科、ウリ科、ナス科、アオイ科など宿主植物の範囲が非常に広いため、分布の拡大や発生の増加をもたらすと考えられている。オンシツコナジラミの成虫・幼虫は、吸汁や、甘露と呼ばれる排泄物などによるすす病発生、ウイルス病の伝播などにより、作物の生育を阻害する。一方、シルバーリーフコナジラミは、形態、生態ともにオンシツコナジラミに似ており、オンシツコナジラミと同様の弊害を作物にもたらす。また、シルバーリーフコナジラミ特有の弊害として、トマトにおける着色異常果実の発生や多くの緑黄色野菜などにみられる白化症(シルバーリング)が挙げられる。この症状は幼虫の寄生によって起こり、これが、シルバーリーフの名前の由来である。   Onsite whitefly is a typical phagocytic insect, and its range of host plants such as asteraceae, cucurbitaceae, solanaceae, mallowaceae is very wide, and is thought to cause an increase in distribution and an increase in development. Adult white larvae of the whitefly white lice inhibit the growth of crops due to the occurrence of soot disease due to sucking juice, excrement called honeydew, and transmission of viral diseases. On the other hand, silver leaf whiteflies are similar to Onsuji whiteflies in both form and ecology, and bring the same harmful effects to crops. Moreover, as a harmful effect peculiar to silver leaf whitefly, the occurrence of colored abnormal fruits in tomatoes and whitening (silver ring) seen in many green-yellow vegetables can be mentioned. This symptom is caused by a larval infestation, which is the origin of the silver leaf name.

上述した作物被害のほか、最近では、既存の殺虫剤に対して抵抗性を獲得した薬剤耐性のものが出現するなどし、コナジラミ類による被害が深刻化している。上記と同じ問題は、コナジラミ類のほか、カメムシ類、アブラムシ類、カイガラムシ類など、コナジラミ類以外の半翅目害虫、更にはアザミウマ目害虫においても見られる。   In addition to the crop damage described above, recently, damage caused by whiteflies has become serious due to the emergence of drug-resistant ones that have acquired resistance to existing insecticides. The same problem as described above is observed not only in whiteflies, but also in bugs other than whiteflies such as stink bugs, aphids and scale insects, and also in thrips pests.

そこで、半翅目害虫用の殺虫剤・防除剤として、種々の化合物を有効成分として含有する技術が提案されている(例えば特許文献1〜3)。また、特許文献4には、アカマツの特定抽出成分を含むホソヘリカメムシの防除剤が開示されている。   Then, the technique which contains a various compound as an active ingredient as an insecticide and control agent for a hemipoda insect is proposed (for example, patent documents 1-3). Further, Patent Document 4 discloses a control agent for the beetle bug that contains a specific extract component of red pine.

また、植物寄生性のハダニ科、フシダニ科、ホコリダニ科、コナダニ科などダニ目害虫による作物被害も知られている。ダニの体長は非常に小さく、例えばハダニ類の体長は約0.5mm程度、ホコリダニ類の体長は更に小さく約0.2mm程度であるが、繁殖力が非常に高いため、様々な植物に対して被害をもたらす。ダニ目害虫に対する防除法としては、太陽光や風雨などに弱いという性質を利用して巨大な換気扇やミスト等を用いる方法のほか、上述したアザミウマ類などの天敵昆虫による駆除が行なわれている。また、特許文献5には、新規なキノリン誘導体を有効成分として含む防除剤が開示されている。   In addition, crop damage caused by mite-like pests such as plant parasitic spider mites, fliesid mites, dust mites, and acarids is also known. The body length of mites is very small. For example, the body length of spider mites is about 0.5 mm, and the body length of dust mites is about 0.2 mm, but the fertility is very high. Cause damage. As a method for controlling tick insect pests, in addition to a method using a huge ventilation fan, mist, etc. by utilizing the property of being vulnerable to sunlight and wind and rain, extermination by natural enemy insects such as thrips is performed. Patent Document 5 discloses a control agent containing a novel quinoline derivative as an active ingredient.

特開2007−70334号公報JP 2007-70334 A 特開2007−211015号公報JP 2007-2111015 A 特開平6−41086号公報JP-A-6-41086 特開平8−53318号公報JP-A-8-53318 特開2009−155340号公報JP 2009-155340 A

本発明の目的は、コナジラミ類やカメムシ類などの半翅目害虫、アザミウマ目害虫、またはダニ目害虫の産卵阻害剤を提供することにある。半翅目害虫について言えば、半翅目害虫の産卵行動を強く抑制することによって優れた防除効果を発揮し得る半翅目害虫産卵阻害剤を提供することにある。   An object of the present invention is to provide an egg-laying inhibitor for hemipod pests such as whiteflies and stink bugs, thrips pests, or mite pests. As for the Hemiptera pests, it is to provide a Hemiptera pest egg laying inhibitor that can exert an excellent control effect by strongly suppressing the oviposition behavior of the Hemiptera pests.

上記課題を解決し得た本発明の半翅目害虫、アザミウマ目害虫、またはダニ目害虫の産卵阻害剤は、スクアレンを有効成分として含有するところに要旨を有するものである。   The egg-laying inhibitor of the Hemiptera pests, Thripidae pests, or Acarina pests, which has solved the above problems, has a gist in that it contains squalene as an active ingredient.

好ましい実施形態において、上記半翅目害虫はコナジラミ類、カメムシ類、またはアブラムシ類である。   In a preferred embodiment, the Hemiptera pest is a whitefly, stink bug, or aphid.

本発明には、上記の産卵阻害剤、および基材を含有する産卵阻害剤組成物も包含される。   The present invention also includes an egg-laying inhibitor composition containing the above-mentioned egg-laying inhibitor and a base material.

本発明によれば、コナジラミ類やカメムシ類などの半翅目害虫、アザミウマ目害虫、およびダニ目害虫の全てに対して、著しい駆除作用を発揮し得る産卵阻害剤を提供することができた。本発明に用いられるスクアレンは、半翅目害虫産卵阻害剤として極めて有用であり、しかも、いずれも人体に対する影響が非常に少ない。そのため、本発明の産卵阻害剤は、害虫駆除に一般に用いられる有害な物質とは異なって、農作物や土壌などに悪影響をもたらすことがなく、環境破壊を招かない点でも有用である。また、本発明の産卵阻害剤は、殺虫作用によって防除効果を発揮するものではないため、近年、導入されている天敵昆虫を利用した防除技術、すなわち、天敵として利用されているテントウムシ、寄生蜂、捕食性カメムシ、クサカゲロウなどの昆虫を利用した防除技術との併用も可能である。更に、本発明産卵阻害剤の使用により殺虫剤の使用を減らすことができるため、減農薬・無農薬作物の栽培も可能になるなどの利点もある。   ADVANTAGE OF THE INVENTION According to this invention, the egg-laying inhibitor which can exhibit a remarkable extermination action with respect to all of the Hemiptera pests, Thripidae pests, and Mite pests, such as whitefly and stink bugs, was able to be provided. The squalene used in the present invention is extremely useful as an oviposition inhibitor for hemiptera pests, and all have very little influence on the human body. Therefore, unlike the harmful substances generally used for pest control, the egg-laying inhibitor of the present invention is useful in that it does not adversely affect crops and soil, and does not cause environmental destruction. In addition, since the egg-laying inhibitor of the present invention does not exhibit a control effect by insecticidal action, recently, control techniques using natural enemy insects that have been introduced in recent years, that is, ladybirds, parasitic bees that are used as natural enemies, It can also be used in combination with control techniques using insects such as predatory stink bugs and lacewing. Furthermore, since the use of the insecticide can be reduced by using the egg-laying inhibitor of the present invention, there is an advantage that cultivation of reduced agricultural chemicals and agricultural chemical-free crops becomes possible.

図1は、実施例1において、コナジラミ類の生物試験(産卵阻害試験)に用いた装置の概略図である。FIG. 1 is a schematic view of an apparatus used in Example 1 for a whitefly biological test (spawning inhibition test). 図2は、実施例1において、供試植物の抽出・分画法の手順を示すフロー図である。FIG. 2 is a flowchart showing the procedure of the extraction / fractionation method of the test plant in Example 1. 図3は、実施例1において、メタノール粗抽出液の分画画分を用いた生物試験の結果を示すグラフである。なお図3では「水画分」等を「水」等と略称する。FIG. 3 is a graph showing the results of a biological test using a fraction fraction of a crude methanol extract in Example 1. In FIG. 3, “water fraction” or the like is abbreviated as “water” or the like. 図4は、実施例1において、シリカゲルオープンカラムによる分画画分を用いた生物試験の結果を示すグラフである。なお図4では「ヘキサン画分」等を「ヘキサン」等と、「エーテル/ヘキサン」を「E/H」と略称する。FIG. 4 is a graph showing the results of a biological test using a fractionated fraction by a silica gel open column in Example 1. In FIG. 4, “hexane fraction” or the like is abbreviated as “hexane” or the like, and “ether / hexane” is abbreviated as “E / H”. 図5は、実施例1において、シリカゲルオープンカラムによるヘキサン画分(シリカゲル−ヘキサン画分)をHPLC分析して得られたクロマトグラムである。FIG. 5 is a chromatogram obtained by HPLC analysis of the hexane fraction (silica gel-hexane fraction) using a silica gel open column in Example 1. 図6は、実施例1において、シリカゲル−ヘキサン画分のHPLC画分を用いた生物試験の結果を示すグラフである。6 is a graph showing the results of a biological test using the HPLC fraction of silica gel-hexane fraction in Example 1. FIG. 図7は、実施例1において、シリカゲル−ヘキサン画分の画分B(上)及びスクアレン(下)の13C−NMRスペクトルである。7 is a 13 C-NMR spectrum of fraction B (top) and squalene (bottom) of the silica gel-hexane fraction in Example 1. FIG. 図8は、実施例1において、シリカゲル−ヘキサン画分の画分B(上)及びスクアレン(下)の1H−NMRスペクトルである。8 is a 1 H-NMR spectrum of fraction B (top) and squalene (bottom) of the silica gel-hexane fraction in Example 1. FIG. 図9は、実施例1において、スクアレンの濃度変化による活性(産卵阻害率)を示すグラフである。FIG. 9 is a graph showing the activity (spawning inhibition rate) due to a change in squalene concentration in Example 1. 図10は、実施例1において、シリカゲルオープンカラムによる5%エーテル/ヘキサン画分(シリカゲル−5%エーテル/ヘキサン画分)をHPLC分析して得られたクロマトグラムである。FIG. 10 is a chromatogram obtained by HPLC analysis of the 5% ether / hexane fraction (silica gel-5% ether / hexane fraction) using a silica gel open column in Example 1. 図11は、実施例1において、シリカゲル−5%エーテル/ヘキサン画分中、化合物Cの生物試験結果を示すグラフである。FIG. 11 is a graph showing the biological test results of Compound C in the silica gel-5% ether / hexane fraction in Example 1. 図12は、実施例1において、シリカゲル−5%エーテル/ヘキサン画分中、化合物Cの13C−NMRスペクトルである。FIG. 12 is a 13 C-NMR spectrum of compound C in silica gel-5% ether / hexane fraction in Example 1. 図13は、実施例1において、シリカゲル−5%エーテル/ヘキサン画分中、化合物Cの1H−NMRスペクトルである。FIG. 13 is a 1 H-NMR spectrum of compound C in silica gel-5% ether / hexane fraction in Example 1. 図14は、実施例2において、カメムシ類の生物試験(産卵阻害試験)に用いた装置の概略図である。FIG. 14 is a schematic view of an apparatus used in a biological test (spawning inhibition test) for stink bugs in Example 2. 図15は、実施例2における生物試験の結果を示すグラフである。FIG. 15 is a graph showing the results of a biological test in Example 2. 図16は、実施例3において、コナジラミ類の防除効果を示すグラフである。FIG. 16 is a graph showing the control effect of whitefly in Example 3. 図17は、実施例3において、ミナミキイロアザミウマ類の防除効果を示すグラフである。FIG. 17 is a graph showing the control effect of southern thrips in Example 3. 図18は、実施例3において、ホコリダニ類の防除効果を示すグラフである。FIG. 18 is a graph showing the control effect of dust mites in Example 3. 図19は、実施例3において、ワタアブラムシ類の防除効果を示すグラフである。FIG. 19 is a graph showing the control effect of cotton aphids in Example 3. 図20は、実施例4において、キクヒメヒゲナガアブラムシ類の防除効果を示すグラフである。FIG. 20 is a graph showing the control effect of Chrysanthemum aphids in Example 4. 図21は、実施例5において、スクアレンによるナミハダニの防除効果を示すグラフである。FIG. 21 is a graph showing the effect of controlling spider mite by squalene in Example 5.

本発明者らは、コナジラミ類やカメムシ類などの半翅目害虫、アザミウマ目害虫、またはダニ目害虫に対する防除剤を提供するため、検討を重ねてきた。その結果、非環式トリテルペン類のスクアレンが、コナジラミ類やカメムシ類などの半翅目害虫に対して強い産卵阻害作用を有しており、半翅目害虫に対する防除剤として極めて有用であること;更に、上記のスクアレンは、ダニ目害虫に対する防除剤としても極めて有用であることを見出し、本発明を完成した。   The inventors of the present invention have made extensive studies in order to provide a control agent for hemipod pests, thrips pests, or mite pests such as whiteflies and stink bugs. As a result, the acyclic triterpene squalene has a strong egg-laying inhibitory effect against hemipod pests such as whiteflies and stink bugs and is extremely useful as a control agent against hemipod pests; Furthermore, the above-described squalene was found to be extremely useful as a control agent against mite-like pests, and the present invention was completed.

ここで、産卵阻害作用によって半翅目害虫を防除(駆除)できた点は、非常に有用である。害虫防除剤のなかには、例えば殺虫剤のように、害虫を殺して防除作用を発揮するものもあるが、殺虫剤では、殺虫効果を奏する前の害虫による作物被害を充分防止することができない。また、殺虫剤の殆どは、昆虫を非選択的に殺してしまうなど、毒性が非常に強いものが多いため、天敵昆虫を利用した防除技術と併用することができない、といった問題もある。一方、害虫防除剤のなかには、例えば忌避剤のように、害虫を作物から遠ざけることによって害虫を防除するものもあるが、忌避剤では、例えば、害虫が忌避剤と接触する前に、ビニール栽培などに侵入した害虫による産卵行動を有効に防止することはできず、次世代の防除効果が充分でないといった問題がある。これに対し、本発明のように半翅目害虫の産卵行動を強く阻害することによって害虫を防除できれば、上記の問題を解消できる点で、極めて有用である。   Here, the ability to control (exterminate) the Hemiptera pests by the egg-laying inhibitory action is very useful. Some insecticides, such as insecticides, kill insects and exert their controlling action. However, insecticides cannot sufficiently prevent crop damage caused by insects before exerting the insecticidal effect. In addition, most insecticides are very toxic, such as killing insects non-selectively, and there is a problem that they cannot be used in combination with a control technique using natural enemy insects. On the other hand, some pest control agents, such as repellents, control pests by keeping them away from the crop, but repellents, for example, vinyl cultivation before the pests come into contact with the repellent There is a problem that the spawning behavior by the pests that have invaded can not be effectively prevented, and the control effect of the next generation is not sufficient. On the other hand, if the insect pest can be controlled by strongly inhibiting the egg-laying behavior of the hemiptera insect as in the present invention, it is extremely useful in that the above problem can be solved.

まず、本発明に用いられる有効成分(スクアレン)について説明する。   First, the active ingredient (squalene) used in the present invention will be described.

スクアレンは、イソプレン残基6個からなる非環式トリテルペン(炭素数30)の一つであり、下式で表される。スクアレンは、サメ類の肝油などに多く含まれており、これまでは、例えば、香粧料、表面活性剤などの原料として用いられていたが、半翅目害虫、アザミウマ目害虫、ダニ目害虫に対する防除作用は知られていない。   Squalene is one of acyclic triterpenes (having 30 carbon atoms) consisting of six isoprene residues, and is represented by the following formula. Squalene is abundant in shark liver oil and has been used as a raw material for cosmetics, surface active agents, etc., but it has been used in the past, for example, Hemiptera pests, Thrips pests, and Mite pests. The control action against is not known.

スクアレンは市販されており、本発明では、市販のスクアレンを用いても良い。   Squalene is commercially available, and commercially available squalene may be used in the present invention.

あるいは、スクアレンは、サメ類の肝油などに多く含まれる他、植物にも含まれていることから、公知の抽出方法によって抽出されたスクアレンを用いることもできる。スクアレンの抽出方法は、例えば、Siti Zullaikahらの文献(Bioresource Technology 100, 2009, 299-302)、Setiyo Gumawanらの文献(Industrial & Engineering Chemistry Research, 2008, 47, 7013-7018)などの文献に詳しく記載されており、詳細はこれらを参照すれば良い。後記する実施例では、ベトナム由来ウコギ科ヤツデ属(Schefflera heptaphylla)の植物から抽出して得られたスクアレンを用いて実験を行なった。   Alternatively, since squalene is contained in a large amount in shark liver oil and the like and also in plants, squalene extracted by a known extraction method can also be used. The method for extracting squalene is detailed in, for example, documents such as Siti Zullaikah et al. (Bioresource Technology 100, 2009, 299-302) and Setiyo Gumawan et al. (Industrial & Engineering Chemistry Research, 2008, 47, 7013-7018). These are described, and these may be referred to for details. In the examples described later, experiments were conducted using squalene obtained by extraction from plants of the genus Schefflera heptaphylla from Vietnam.

本発明の産卵阻害剤は、上記有効成分のほか、防除剤に通常用いられる添加剤を更に含有しても良い。上記添加剤としては、製剤に通常用いられる補助剤などが挙げられ、本発明の作用を損なわない範囲で、適宜選択して用いることができる。具体的には、例えば、非イオン界面活性剤、陰イオン界面活性剤などの界面活性剤;カゼイン、ゼラチン、多糖類などの分散剤:キサンタンガム、カルボキシメチルセルロースなどの増粘剤;安息香酸ナトリウム、パラヒドロキシ安息香酸などの防腐剤;酸性リン酸イソプロピルなどの安定剤;大豆油などのアジュバントなどが挙げられる。また、農薬の分野で汎用される添加剤として、例えば、展着剤(非イオン界面活性剤、非イオン界面活性剤+陰イオン界面活性剤など)、乳化剤、分散剤、湿潤剤などを添加しても良い。   The egg-laying inhibitor of the present invention may further contain, in addition to the above active ingredients, additives usually used for controlling agents. Examples of the additive include adjuvants ordinarily used in preparations, and can be appropriately selected and used as long as the effects of the present invention are not impaired. Specifically, for example, surfactants such as nonionic surfactants and anionic surfactants; dispersants such as casein, gelatin and polysaccharides; thickeners such as xanthan gum and carboxymethylcellulose; sodium benzoate, para Preservatives such as hydroxybenzoic acid; stabilizers such as acidic isopropyl phosphate; and adjuvants such as soybean oil. Additives commonly used in the agrochemical field include, for example, spreading agents (nonionic surfactants, nonionic surfactants + anionic surfactants, etc.), emulsifiers, dispersants, wetting agents, etc. May be.

本発明に係る産卵阻害剤の剤型は特に限定されず、例えば、農薬に通常用いられる剤型(例えば、粉剤、粒剤、ベート剤など)としても良い。また、半翅目害虫への散布のし易さなどを考慮すると、溶媒に溶解した液剤とすることが好ましい。具体的には、水和剤、乳剤、フロアブル剤などのような溶液とすることが好ましい。使用可能な溶媒としては、有効成分であるスクアレンを溶解し得、且つ、人畜無害で環境汚染の弊害が少ないものを選択して用いることが好ましい。このような溶媒として、例えば、食品添加物や食品加工などに汎用されるエタノール、ヘキサンなどが好適に用いられる。   The dosage form of the egg-laying inhibitor according to the present invention is not particularly limited, and for example, it may be a dosage form usually used for agricultural chemicals (for example, powder, granule, bait). In consideration of easiness of spraying to the hemiptera pests, it is preferable to use a solution dissolved in a solvent. Specifically, a solution such as a wettable powder, an emulsion, or a flowable agent is preferable. As a usable solvent, it is preferable to select and use a solvent that can dissolve squalene, which is an active ingredient, and is harmless to humans and causes less environmental pollution. As such a solvent, for example, ethanol, hexane or the like widely used for food additives or food processing is preferably used.

スクアレンを液剤として用いる場合、優れた防除効果を得るためのスクアレンの好ましい濃度は、おおむね、0.001質量%以上であり、より好ましくは0.002質量%以上である。防除効果の観点からすればスクアレン濃度は高いほど良いが、経済性などとのバランスを考慮すると、おおむね、10質量%以下とすることが好ましく、0.1質量%以下がより好ましい。具体的には、スクアレンの精製度、使用環境などによってスクアレンの濃度を適宜適切に制御することができる。   When squalene is used as a liquid agent, the preferable concentration of squalene for obtaining an excellent control effect is generally 0.001% by mass or more, more preferably 0.002% by mass or more. From the viewpoint of the control effect, the higher the squalene concentration, the better. However, considering the balance with the economy and the like, it is generally preferably 10% by mass or less, and more preferably 0.1% by mass or less. Specifically, the concentration of squalene can be appropriately controlled according to the degree of purification of squalene, the usage environment, and the like.

本発明では、上記の産卵阻害剤を基材に担持させた成形物(製品)を用いても良い。例えば、有効成分であるスクアレンを直接、基材に担持させても良いし、有効成分を溶媒に溶解した液剤の形態で基材に担持させても良い。あるいは、有効成分と添加剤を含む産卵阻害剤を基材に担持させても良い。上記基材としては、防除剤として通常用いられるものであれば特に限定されず、例えば、紙、繊維、布帛、フィルターなどの紙・繊維製品類;木材、石膏ボードなどの建材製品;フィルム、プラスチック、金属、ガラスなどの素材が挙げられる。   In the present invention, a molded product (product) in which the above egg-laying inhibitor is supported on a substrate may be used. For example, squalene, which is an active ingredient, may be directly supported on a base material, or may be supported on a base material in the form of a solution obtained by dissolving an active ingredient in a solvent. Or you may carry | support the egg-laying inhibitor containing an active ingredient and an additive on a base material. The base material is not particularly limited as long as it is usually used as a control agent. For example, paper and fiber products such as paper, fiber, fabric, and filter; building material products such as wood and gypsum board; film and plastic , Materials such as metal and glass.

基材に担持させる方法は特に限定されず、基材の種類に応じて、通常用いられる方法を適宜採用すれば良い。例えば、基材を製品に加工した後、スクアレンの溶液を当該製品の表面に被覆したり、当該製品に浸漬するなどの方法が挙げられる。あるいは、製品に加工する前に、基材とスクアレンを混合するなどの方法を採用しても良い。   The method of supporting the substrate is not particularly limited, and a commonly used method may be appropriately employed depending on the type of the substrate. For example, after processing the base material into a product, a method of coating the surface of the product with a squalene solution or immersing the product in the product may be mentioned. Or you may employ | adopt methods, such as mixing a base material and squalene, before processing into a product.

基材に担持する有効成分の配合量は、使用する基材の種類や用途などに応じ、適宜適切に制御すればよい。例えば、紙類や布帛類などの基材に対する、スクアレンの好ましい濃度は概ね、0.001〜50質量%である。勿論、これに限定する趣旨では決してない。   The compounding amount of the active ingredient supported on the base material may be appropriately controlled according to the type and use of the base material to be used. For example, the preferable concentration of squalene with respect to a substrate such as papers and fabrics is generally 0.001 to 50% by mass. Of course, this is not intended to be limited to this.

本発明の防除対象である半翅目(セミ目)害虫としては、例えば、シルバーフリーコナジラミ、タバココナジラミ、イチゴコナジラミ、オンシツコナジラミなどのコナジラミ科;ワタアブラムシ、キクヒメヒゲナガアブラムシ、エンドウヒゲナガアブラムシ、リンゴアブラムシ、ダイコンアブラムシなどのアブラムシ科;ヒメトビウンカなどのウンカ科;イネマダラヨコバイ、リンゴマダラヨコバイなどのヨコバイ科;ヒメヨコバイ科;ホソヘリカメムシ、アオクサカメムシ、イネカメムシなどのカメムシ科;ツチカメムシ科;マルカメムシ科;ツノカメムシ科;ヘリカメムシ科;ナガカメムシ科;メクラカメムシ科;イネネコナカイガラムシ、ミカンコナカイガラムシなどのコナカイガラムシ科;カタカイガラムシ科;マルカイガラムシ科;リンゴキジラミ、ナシキジラミなどのキジラミ科などが挙げられる。   Examples of the Hemiptera (Cemiptera) pests to be controlled according to the present invention include, for example, silver-free whitefly, tobacco whitefly, strawberry whitefly, whitefly whitefly and other whiteflies; cotton aphids, bark aphids, pea aphids, apple aphids, apple aphids, Aphidaceae such as Japanese radish aphids; Carcass departments such as Japanese beetle; Leafhoppers such as rice scallops and apple madara beetles; Scarabaeidae; Steller's beetle, Aokusakamushi, Inokamemushi, Stinkidae; Family: Helicobacteridae; Nagamekamushiidae; Mekuramemushiidae; Rice-scale scale insects such as the rice beetle and citrus scale insects; Ringokijirami, and the like psyllid family such as Nashikijirami.

また、本発明の防除対象であるアザミウマ目(総翅目)害虫としては、例えば、ミナミキイロアザミウマ、ミカンキイロアザミウマ、ネギアザミウマ、ハナアザミウマ、チャノキイロアザミウマ、ヒラズハナアザミウマ、カキクダアザミウマなどが挙げられる。   Examples of the thrips (total lepidoptera) pests to be controlled according to the present invention include, for example, the southern thrips, the thrips, the thrips, the thrips, the thrips of thrips, the thrips of thrips, and the thrips of thrips.

また、本発明の防除対象であるダニ目害虫としては、例えば、ナミハダニ、ミカンハダニ、カンザワハダニ、ニセナミハダニ、オウトウハダニ、アシノワハダニ、リンゴハダニなどのハダニ類;ミカンサビダニ、トマトサビダニ、カキサビダニ、モモサビダニ、ニセナシサビダニなどのフシダニ類;チャノホコリダニ、シクラメンホコリダニなどのホコリダニ類;ネダニなどのコナダニ類;ヒメハダニ類;ハシリダニ類などが挙げられる。   In addition, examples of mite pests to be controlled according to the present invention include spider mites such as nymph mite, citrus spider mite, kanzawa spider mite, spider mite, spider mite, reindeer spider mite, apple spider mite; Mite, mite, cyclamen mite, mite, mite, mite, mite, mite, etc.

本発明に係る産卵阻害剤の使用方法は特に限定されず、通常用いられる方法を採用すれば良い。具体的には、例えば、使用時に所定の濃度に調製した溶剤を、上記の半翅目害虫や農作物に対し、散布、噴霧、含浸などする方法が挙げられる。あるいは、上記のようにして産卵阻害剤を基材に担持させた成形品を設置しても良い。   The method for using the egg-laying inhibitor according to the present invention is not particularly limited, and a commonly used method may be employed. Specifically, for example, there is a method of spraying, spraying, impregnating, etc., a solvent prepared to a predetermined concentration at the time of use with respect to the above-mentioned hemiptera pests and agricultural products. Or you may install the molded article which carry | supported the egg-laying inhibitor on the base material as mentioned above.

本発明の産卵阻害剤を用いれば、半翅目害虫については、後記する実施例に示すように、コナジラミ類などの半翅目害虫の産卵が効果的に阻害される結果、所望の防除効果が有効に発揮される。また、アザミウマ目害虫やダニ目害虫については、公知の気門封鎖剤であるヒドロキシプロピルデンプン液剤などと同様、気門封鎖によって防除作用が発揮されると推察される。   If the egg-laying inhibitor of the present invention is used, as for the Hemiptera pests, as shown in the examples to be described later, the egg-laying of Hemiptera pests such as whiteflies is effectively inhibited. Effectively demonstrated. Further, it is presumed that the thrips pests and mite pests exert a controlling action by the air gate blockage, similar to hydroxypropyl starch solution which is a known air gate blocker.

以下、実施例を挙げて本発明をより具体的に説明するが、本発明は下記実施例によって制限されず、前・後記の趣旨に適合し得る範囲で適宜変更を加えて実施することも可能であり、それらはいずれも本発明の技術的範囲に包含される。   Hereinafter, the present invention will be described in more detail with reference to examples, but the present invention is not limited by the following examples, and can be implemented with appropriate modifications within a range that can meet the gist of the preceding and following descriptions. These are all included in the technical scope of the present invention.

実施例1
本実施例では、ウコギ科ヤツデ属の生葉を用い、図2に示す公知の抽出手順で得られたスクアレンおよびビタミンEが、代表的な園芸害虫であるコナジラミに対する強い産卵阻害活性を示すことを調べた。この抽出手順に従えば、シリカゲルオープンカラムによるヘキサン画分中にスクアレンが抽出され、シリカゲルオープンカラムによる5%エーテル/ヘキサン画分中にビタミンEが抽出されるようになる。以下、詳細に説明する。
Example 1
In this example, it was examined that squalene and vitamin E obtained by the known extraction procedure shown in FIG. 2 show a strong egg-laying inhibitory activity against whitefly, a typical gardening pest, using fresh leaves of the scorpion department of the urchinaceae family. It was. According to this extraction procedure, squalene is extracted in the hexane fraction by the silica gel open column, and vitamin E is extracted in the 5% ether / hexane fraction by the silica gel open column. Details will be described below.

1.供試虫
高知大学農学部内のハウス内において採取したシルバーリーフコナジラミ(Bemisia argentifolii)を用いた。
1. Test insect Silver leaf whiteflies (Bemisia argentifolii) collected in a house in the Faculty of Agriculture, Kochi University were used.

2.生物試験(産卵阻害試験)
下記4の方法で抽出・分画した植物1g相当量(植物体1gから得られた抽出物のこと)を溶媒1mlに溶解した溶液を用い、以下の産卵阻害試験を行った。
2. Biological test (spawning inhibition test)
The following egg-laying inhibition test was conducted using a solution obtained by dissolving 1 g of a plant (extract obtained from 1 g of a plant) equivalent to 1 g of a plant extracted / fractionated by the following 4 methods.

まず、上記溶液の中に、直径15mmのキュウリの葉(リーフディスク)を浸漬してすぐに取り出し、風乾させたものを用意する。次に、市販の50mlバイアルビンにコナジラミを10匹入れ、直径10mmの穴の開いた内蓋と外蓋との間に、上記のリーフディスクと、脱イオン水で湿らしたろ紙(直径90mmの濾紙を1/4にカットした扇方のもの)とを入れ、約27℃で24時間飼育した(図1を参照)。   First, a cucumber leaf (leaf disc) having a diameter of 15 mm is immersed in the above solution and immediately taken out and air-dried. Next, 10 whiteflies were placed in a commercially available 50 ml vial, and the leaf disk and filter paper moistened with deionized water (filter paper with a diameter of 90 mm) between the inner lid and the outer lid with a hole with a diameter of 10 mm. And was bred at about 27 ° C. for 24 hours (see FIG. 1).

試験後、リーフディスクの葉の裏を顕微鏡下で観察し、産卵の数を調べた。1つの試料につき6反復行い、実験結果をT−testで検定した。危険率pがp<0.01のとき、産卵阻害活性ありと判断した。   After the test, the back of the leaf disc was observed under a microscope to examine the number of eggs laid. Each sample was repeated 6 times, and the experimental results were tested by T-test. When the risk factor p was p <0.01, it was judged that there was an egg-laying inhibitory activity.

比較のため、生物試験を行なう毎に、試料を塗布しないコントロール群を設け、試料を塗布した実験群との比較検討を行なった。生物試験コントロール群、各実験群ともに、n=6とした。なお、生物試験を行なう度にコントロール群を設けたのは、コナジラミの採取時期などによって産卵数が相違するためであり、これにより、同一実験系内での平均産卵数の対比が容易になる。   For comparison, each time a biological test was performed, a control group to which no sample was applied was provided, and a comparative study with an experimental group to which the sample was applied was performed. In both the biological test control group and each experimental group, n = 6. The reason why the control group is provided every time the biological test is performed is that the number of eggs laid varies depending on the time of collecting whiteflies, and this makes it easy to compare the average number of eggs laid in the same experimental system.

3.供試植物
高知大学農学部内のハウス内で栽培された、ベトナム由来ウコギ科ヤツデ属(Schefflera heptaphylla)の生葉を用いた。
3. Test plant The fresh leaves of the genus Schefflera heptaphylla from Vietnam, which were cultivated in a house in the Faculty of Agriculture, Kochi University, were used.

4.供試植物の抽出・分画法
図2に示す手順で、上記供試植物を抽出・分画した。
4). Extraction and fractionation method of test plant The test plant was extracted and fractionated by the procedure shown in FIG.

4−1.抽出法
上記供試植物の生葉900gに100%メタノールを1500mL加えて3日間浸漬した後、抽出液と抽出残渣(生葉)をろ別した。この抽出残渣に対し、更にメタノールを1500mL加えて3日間浸漬し、抽出液と抽出残渣(生葉)をろ別した。このようにして得られた抽出液をエバポレーターで減圧濃縮し、メタノール粗抽出物を得た後、メタノールを加えて5g/mLの濃度に調整した。
4-1. Extraction method After adding 1500 mL of 100% methanol to 900 g of fresh leaves of the test plant and immersing for 3 days, the extract and the extraction residue (live leaves) were separated by filtration. To this extraction residue, 1500 mL of methanol was further added and immersed for 3 days, and the extract and the extraction residue (live leaves) were separated by filtration. The extract thus obtained was concentrated under reduced pressure using an evaporator to obtain a crude methanol extract, and then methanol was added to adjust the concentration to 5 g / mL.

4−2.メタノール粗抽出液の分画
上記供試植物の生葉800g当量の粗抽出液(植物体800gから得られた抽出液)をエバポレーターで乾固した後、水360mlに懸濁させ、これをヘキサン250mlで3回、ジエチルエーテル250mlで3回、酢酸エチル250mlで3回、水飽和ブタノール(ブタノールに最大限溶ける量の水を溶解させたものであり、ここでは7.7%の水をブタノールに溶解させた)250mlで3回分配し、それぞれの画分を得た。
4-2. Fractionation of crude methanol extract The crude extract of 800 g equivalent of raw leaves of the above-mentioned test plant (extract obtained from 800 g of plant body) was evaporated to dryness and suspended in 360 ml of water. 3 times, 3 times with 250 ml of diethyl ether, 3 times with 250 ml of ethyl acetate, water-saturated butanol (water dissolved to the maximum extent in butanol, in which 7.7% of water was dissolved in butanol I) Partitioned 3 times with 250 ml to obtain each fraction.

4−3.シリカゲルオープンカラムによるヘキサン画分の分画
上記メタノール粗抽出液の分画によって得られた上記供試植物の生葉700gに相当するヘキサン画分を、シリカゲルオープンカラム(100g、40mmφ×1000mm)にチャージした後、ヘキサン、5体積%エーテル/ヘキサン、10体積%エーテル/ヘキサン、50体積%エーテル/ヘキサン、エーテル、メタノールで順次溶出し、それぞれの画分を得た。
4-3. Fractionation of hexane fraction by silica gel open column The hexane fraction corresponding to 700 g of fresh leaves of the test plant obtained by fractionation of the crude methanol extract was charged into a silica gel open column (100 g, 40 mmφ × 1000 mm). Thereafter, elution was successively performed with hexane, 5% by volume ether / hexane, 10% by volume ether / hexane, 50% by volume ether / hexane, ether and methanol to obtain respective fractions.

5.上記供試植物の分画画分の活性
5−1.メタノール粗抽出液の分画画分の活性
メタノール粗抽出液から得られた各画分の試料を用い、上記の生物試験を行った。詳細には、各画分の植物1g相当量1gをそれぞれの溶媒1mlに溶解した溶液を、生物試験用の試料として用いた。例えば、ヘキサン画分の試料を溶解する溶媒としては、ヘキサンを用いた。
5. 5. Activity of fraction of said test plant 5-1. Activity of fractions of crude methanol extract The biological test was performed using samples of each fraction obtained from the crude methanol extract. Specifically, a solution prepared by dissolving 1 g of an equivalent amount of 1 g of each fraction in 1 ml of each solvent was used as a sample for a biological test. For example, hexane was used as a solvent for dissolving the sample of the hexane fraction.

その結果を図3に示す。各画分の産卵数の平均およびT−test値を表1に示す。図3及び表1に示されるように、ヘキサン画分は最も高い産卵阻害活性を示すが(p=0.0020)、他の画分では阻害活性は殆ど見られなかった。   The result is shown in FIG. Table 1 shows the average number of eggs laid and the T-test value of each fraction. As shown in FIG. 3 and Table 1, the hexane fraction showed the highest egg-laying inhibitory activity (p = 0.020), but almost no inhibitory activity was observed in the other fractions.

5−2.シリカゲルオープンカラムによる分画画分の活性
上記4−3.に記載するように、メタノール粗抽出液のヘキサン画分からシリカゲルオープンカラムを用いて得られたヘキサン画分、5%エーテル/ヘキサン画分、10%エーテル/ヘキサン画分、50%エーテル/ヘキサン画分、エーテル画分およびメタノール画分の各試料を用い、上記の生物試験を行った。詳細には、各画分の植物1g相当量をそれぞれの溶媒1mlに溶解した溶液を、生物試験用の試料として用いた。例えば、ヘキサン画分の試料を溶解する溶媒としては、ヘキサンを用いた。
5-2. Activity of fractions by silica gel open column 4-3. Hexane fraction, 5% ether / hexane fraction, 10% ether / hexane fraction, 50% ether / hexane fraction obtained from silica gel open column from hexane fraction of crude methanol extract as described in The biological test was performed using each sample of the ether fraction and the methanol fraction. Specifically, a solution in which 1 g of a plant corresponding to each fraction was dissolved in 1 ml of each solvent was used as a sample for a biological test. For example, hexane was used as a solvent for dissolving the sample of the hexane fraction.

その結果を図4及び表2に示す。これらの結果から、ヘキサン画分は最も高い産卵阻害活性を示し(p=0.00027)、次いで、5%エーテル/ヘキサン画分が高い活性を示した(p=0.0020)。   The results are shown in FIG. From these results, the hexane fraction showed the highest egg-laying inhibitory activity (p = 0.00027), and then the 5% ether / hexane fraction showed high activity (p = 0.020).

6.シリカゲルオープンカラムによるヘキサン画分(以下「シリカゲル−ヘキサン画分」と略称する)に含まれる成分の分析
活性が最も高かったシリカゲル−ヘキサン画分に含まれる成分を、以下のように分析した。
6). Analysis of components contained in hexane fraction by silica gel open column (hereinafter abbreviated as “silica gel-hexane fraction”) Components contained in silica gel-hexane fraction having the highest activity were analyzed as follows.

6−1.使用機器
(1)HPLC
ポンプ:HITACHI L-7100 Pump
検出器:HITACHI L-7490 RI Detecter
(2)NMR
JEOL JNM-LA400
13C−NMR:100MHz
1H−NMR:400MHz
6-1. Equipment used (1) HPLC
Pump: HITACHI L-7100 Pump
Detector: HITACHI L-7490 RI Detecter
(2) NMR
JEOL JNM-LA400
13 C-NMR: 100 MHz
1 H-NMR: 400 MHz

6−2.HPLC分析
シリカゲル−ヘキサン画分をHPLC分析した結果、図5に示すクロマトグラムが得られた。HPLCの分析条件は図5に併記したとおりである。
6-2. HPLC analysis As a result of HPLC analysis of the silica gel-hexane fraction, the chromatogram shown in FIG. 5 was obtained. The HPLC analysis conditions are as shown in FIG.

6−3.HPLC画分の活性
上記クロマトグラムの画分A〜画分D(図5で「Fr.A」〜「Fr.D」と記載)を単離精製した試料を用意し、上記の生物試験を行った。これらの結果を図6に示す。図6中、「MIX」は、画分A、B、C、Dの混合物である。図6に示すように画分Bが最も優れた産卵阻害活性を示した。
6-3. HPLC Fraction Activity Samples obtained by isolating and purifying fraction A to fraction D (denoted as “Fr. A” to “Fr. D” in FIG. 5) of the above chromatogram are prepared, and the above biological tests are performed. It was. These results are shown in FIG. In FIG. 6, “MIX” is a mixture of fractions A, B, C, and D. As shown in FIG. 6, fraction B showed the most excellent egg-laying inhibitory activity.

6−4.画分Bの構造解析
最も優れた産卵阻害活性を示す画分Bの構造解析を行った。13C−NMR、及び1H−NMRの分析結果から、画分Bはスクアレンであると同定した。画分Bの13C−NMR、および1H−NMRを図7、および図8に示す。
6-4. Structural analysis of fraction B The structural analysis of fraction B showing the most excellent egg-laying inhibitory activity was performed. From the analysis results of 13 C-NMR and 1 H-NMR, the fraction B was identified as squalene. The 13 C-NMR and 1 H-NMR of fraction B are shown in FIG. 7 and FIG.

6−5.スクアレン濃度による活性変化
上記のように、産卵阻害活性が最も高い画分Bはスクアレンであることが判明したので、次に、溶媒としてメタノールを用い、スクアレン濃度を変えて生物試験を行い、各濃度による活性変化を調べた。詳細には、各スクアレン濃度の実験群の平均産卵数(A)、およびスクアレンを塗布しないコントロール群の平均産卵数(B)を算出し、下式に基づいて産卵阻害率(%)を算出した。
産卵阻害率(%)={(B−A)/B}×100
6-5. Change in activity depending on squalene concentration As described above, it was found that fraction B having the highest egg-laying inhibitory activity was squalene. Next, using squalene as the solvent, the squalene concentration was changed, and biological tests were performed. The change in activity was investigated. Specifically, the average number of eggs laid (A) in the experimental group at each squalene concentration and the average number of eggs laid (B) in the control group without squalene were calculated, and the rate of inhibition of egg production (%) was calculated based on the following formula. .
Spawning inhibition rate (%) = {(B−A) / B} × 100

その結果を図9に示す。図9に示すように、スクアレンの濃度が高くなるにつれて産卵阻害率も上昇する傾向が見られた。詳細には、植物体に含まれていた濃度と同等の濃度である20ppmでは約90%程度の高い阻害活性が見られ、100ppmで略100%程度の阻害活性が見られた。この実験結果をT−testで検定したところ、スクアレン濃度が20ppm以上のとき、p<0.01の結果が得られた。よって、有意な産卵阻害活性が得られるスクアレンの限界活性濃度は概ね20ppmであると推認される。   The result is shown in FIG. As shown in FIG. 9, the egg-laying inhibition rate tended to increase as the squalene concentration increased. Specifically, a high inhibitory activity of about 90% was observed at 20 ppm, which is a concentration equivalent to the concentration contained in the plant body, and an inhibitory activity of about 100% was observed at 100 ppm. When this experimental result was tested by T-test, a result of p <0.01 was obtained when the squalene concentration was 20 ppm or more. Therefore, it is presumed that the limit active concentration of squalene from which significant egg-laying inhibitory activity is obtained is approximately 20 ppm.

7.シリカゲルオープンカラムによる5%エーテル/ヘキサン画分(以下「シリカゲル−5%エーテル/ヘキサン画分」と略称する)に含まれる成分の分析
上記シリカゲル−ヘキサン画分の次に高い活性が認められたシリカゲル−5%エーテル/ヘキサン画分に含まれる成分を、以下のようにして分析した。なお分析機器は上記と同じものを使用した。
7). Analysis of components contained in 5% ether / hexane fraction (hereinafter abbreviated as “silica gel-5% ether / hexane fraction”) by silica gel open column Silica gel with the next highest activity in the silica gel-hexane fraction Components contained in the -5% ether / hexane fraction were analyzed as follows. The same analytical equipment as above was used.

7−1.HPLC分析
シリカゲル−5%エーテル/ヘキサン画分をHPLC分析した結果、図10に示すクロマトグラムが得られた。HPLCの詳細な分析条件は図10に併記している。
7-1. HPLC analysis As a result of HPLC analysis of the silica gel-5% ether / hexane fraction, the chromatogram shown in FIG. 10 was obtained. Detailed analysis conditions for HPLC are also shown in FIG.

7−2.HPLC画分の活性
次に、上記クロマトグラムにおいて、リテンションタイムRt=30〜35minの画分に含まれる化合物(化合物Cと命名)について、生物試験を行った。これらの結果を図11及び表3に示すこれらの結果から、化合物Cに強い産卵阻害活性が認められた(p=0.0046)。
7-2. Activity of HPLC fraction Next, in the above chromatogram, a biological test was performed on a compound (named as Compound C) contained in the fraction having a retention time Rt = 30 to 35 min. From these results shown in FIG. 11 and Table 3, the compound C showed a strong egg-laying inhibitory activity (p = 0.0006).

7−3.化合物Cの構造解析
単一ピークであり、活性が認められた化合物Cの構造解析を行った。化合物Cの13C−NMR、および1H−NMRを図12、および図13に示す。また化合物Cの13C−NMR及び1H−NMRのケミカルシフトの実測値を、α−トコフェロールの文献値と対比して表4及び5に示す。これらの分析結果より、化合物Cはα−トコフェロールであると同定した。
7-3. Structural analysis of compound C The structural analysis of compound C, which was a single peak and recognized activity, was performed. 13 C-NMR and 1 H-NMR of Compound C are shown in FIG. 12 and FIG. The measured values of 13 C-NMR and 1 H-NMR chemical shifts of Compound C are shown in Tables 4 and 5 in comparison with the literature values of α-tocopherol. From these analysis results, Compound C was identified as α-tocopherol.

実施例2
本実施例では、スクアレンおよびビタミンEが、豆類の主要害虫であるホソヘリカメムシ(Riptortus clavatus)に対する強い産卵阻害活性を示すことを調べた。
Example 2
In this example, it was examined that squalene and vitamin E exhibited strong egg-laying inhibitory activity against leguminous insects (Riptortus clavatus).

詳細には、スクアレン(和光純薬製のスクアレン)およびビタミンE(ナカライテスク製のα−トコフェロール)をヘキサンで希釈し、それぞれ、100ppmの濃度に調整した。この各溶液を、1cm3程度の脱脂綿に0.2mLずつ含ませ、充分乾燥させたものを、カメムシの産卵基質として用いた。比較のため、溶媒であるヘキサンのみを0.2mL脱脂綿に含ませたものも用意した。 Specifically, squalene (squalene manufactured by Wako Pure Chemical Industries) and vitamin E (α-tocopherol manufactured by Nacalai Tesque) were diluted with hexane, and each was adjusted to a concentration of 100 ppm. Each solution containing 0.2 mL each of about 1 cm 3 of absorbent cotton and sufficiently dried was used as an egg-laying substrate for stink bugs. For comparison, 0.2 mL absorbent cotton containing only hexane as a solvent was also prepared.

次に、図14に示すアクリル製昆虫飼育容器(30cm×30cm×25cm)にホソヘリカメムシ10匹、および上記の各脱脂綿を6個ずつ合計18個入れた。12時間後に、それぞれの脱脂綿に産卵された卵の数を数え、平均産卵数を算出した。この結果を図15に示す。   Next, in the acrylic insect breeding container (30 cm × 30 cm × 25 cm) shown in FIG. After 12 hours, the number of eggs laid on each absorbent cotton was counted, and the average number of eggs laid was calculated. The result is shown in FIG.

図15に示すように、溶媒のみを用いたコントロール群の平均産卵数は36個であったのに対し、スクアレンおよびビタミンEを塗布した群の平均産卵数はそれぞれ、6個および5個と、平均産卵数が著しく抑制された。よって、スクアレンおよびビタミンEは、コナジラミ以外の半翅目害虫にも強い産卵阻害活性を奏することが確認された。   As shown in FIG. 15, the average number of eggs laid in the control group using only the solvent was 36, whereas the average number of eggs laid in the group to which squalene and vitamin E were applied was 6 and 5, respectively. The average egg production was significantly suppressed. Therefore, it was confirmed that squalene and vitamin E have a strong egg-laying inhibitory activity against hemipod pests other than whitefly.

実施例3(野外実験その1)
本実施例では、スクアレンおよびビタミンEによるハウス園芸作物(ナス)の害虫防除効果を調べた。詳細には、前述した実施例2と同様、スクアレン(和光純薬製)およびビタミンE(ナカライテスク製のα−トコフェロール)をヘキサンで希釈し、それぞれ、100ppmの濃度に調整した水溶液(被験物質)を用意し、ビニールハウス内で生育させたナスに対して定期的に上記の被験物質を散布した。以下の対象害虫のうち、タバココナジラミ、ミナミキイロアザミウマ、ワタアブラムシはナス1個につき5葉に自然発生により寄生する寄生数を計測した。一方、ホコリダニは、1試験区あたり30個のリーフディスク(直径8mm)を作製し、実態顕微鏡下でホコリダニの寄生数を計測した。詳細な試験方法は、以下のとおりである。
Example 3 (field experiment 1)
In this example, the pest control effect of house horticultural crops (eggplants) by squalene and vitamin E was examined. Specifically, as in Example 2 described above, squalene (manufactured by Wako Pure Chemical Industries) and vitamin E (α-tocopherol manufactured by Nacalai Tesque) were diluted with hexane, and each was adjusted to a concentration of 100 ppm (test substance). And the above test substance was sprayed periodically on eggplants grown in a greenhouse. Among the following target pests, tobacco whitefly, southern blue thrips, and cotton aphid were counted for the number of parasitic infestation that occurred naturally on five leaves per eggplant. On the other hand, for dust mites, 30 leaf disks (diameter 8 mm) were prepared per test section, and the number of dust mite parasites was measured under a microscope. The detailed test method is as follows.

対象作物:ナス
栽培方法:ビニールハウス栽培(高知大学)
品種:千両2号
被験物質の散布時期:草丈約60cm・生育期
被験物質の散布濃度・量:100ppm、100mL/株
散布回数:約5日間隔で合計5回
対象害虫:タバココナジラミ(Bemisia tabaci)
ミナミキイロアザミウマ(Thrips palmi)
ホコリダニ(Polyphagotarsonemus latus)
ワタアブラムシ(Aphis gossypii)
Target crop: Eggplant cultivation method: Greenhouse cultivation (Kochi University)
Variety: Thousand No. 2 Test substance spraying time: Plant height of about 60 cm ・ Growth test substance spraying concentration / amount: 100 ppm, 100 mL / strain Number of spraying: 5 times in total every five days Target pest: Tobacco whitefly (Bemisia tabaci)
Southern thrips (Thrips palmi)
Dust mite (Polyphagotarsononemus latus)
Cotton aphid (Aphis gossypii)

これらの結果を図16〜図19に示す。各図中、成分Aはスクアレンを、成分BはビタミンEを示す。比較のため、被験物質を全く散布しなかった無処理群の結果を併記する。   These results are shown in FIGS. In each figure, component A represents squalene and component B represents vitamin E. For comparison, the results of the untreated group in which no test substance was sprayed are also shown.

図16は、ナスに寄生するコナジラミ成虫の寄生数の推移を示すグラフである。無処理群では、試験開始約2週間後にコナジラミ成虫の寄生数が10頭/5葉まで増加したのに対し、スクアレン(成分A)およびビタミンE(成分B)を散布した群はいずれも、試験開始時とほぼ同様の寄生状態で推移しており、コナジラミの寄生数は5頭/5葉以下に抑制されていた。これらの化合物は、コナジラミに対して強い産卵阻害活性を示すことから、産卵できない被験物質処理群から無処理群へとコナジラミ成虫が移動し、結果として忌避的な効果が観察されたものと思われる。なお、上記の実験と同時に行ったコナジラミ類の卵・幼虫の寄生数調査においても同様の傾向が観察された。   FIG. 16 is a graph showing the transition of the number of parasitic whitefly adults parasitic on eggplants. In the untreated group, the number of adult whiteflies increased to 10/5 leaves about 2 weeks after the start of the test, whereas all the groups sprayed with squalene (component A) and vitamin E (component B) were tested. The parasitic state was almost the same as that at the start, and the number of parasitic whitefly was suppressed to 5/5 leaves or less. Since these compounds have strong egg-laying inhibitory activity against whiteflies, adult whiteflies are likely to move from the test substance-treated group to the untreated group, which cannot lay eggs, and as a result, repellent effects are observed. . The same tendency was observed in the investigation of the number of parasites of whitefly eggs and larvae conducted simultaneously with the above experiment.

図17は、ナスに寄生するミナミキイロアザミウマの寄生数の推移を示すグラフである。無処理群において、ミナミキイロアザミウマの発生が漸増していったのに対し、スクアレン(成分A)およびビタミンE(成分B)を散布した群はいずれも、被験物質を3回散布した以降は、寄生数を2頭/5葉以下と、低く抑えることができた。   FIG. 17 is a graph showing the change in the number of parasitic thrips parasitic on eggplants. In the untreated group, the occurrence of southern blue thrips gradually increased, whereas in the group sprayed with squalene (component A) and vitamin E (component B), all of the groups after spraying the test substance three times, The number of infestations could be kept as low as 2/5 leaves or less.

図18は、ナスに寄生するホコリダニ成虫の寄生数の推移を示すグラフである。無処理群ではホコリダニの発生が漸増していったのに対し、ビタミンE(成分B)を散布した群は、3回散布した以降は、寄生数を1頭/5葉以下に抑えることができた。また、スクアレン(成分A)の防除効果はビタミンE(成分B)に比べて顕著であり、全期間中1頭/5葉以下に抑えることができた。   FIG. 18 is a graph showing changes in the number of adult dust mite parasites infesting eggplants. In the untreated group, the occurrence of dust mites gradually increased, but in the group sprayed with vitamin E (component B), the number of parasites can be suppressed to 1 head / 5 leaves or less after spraying 3 times. It was. Moreover, the control effect of squalene (component A) was more remarkable than that of vitamin E (component B), and could be suppressed to 1 head / 5 leaves or less during the whole period.

図19は、ナスに寄生するワタアブラムシ成虫の寄生数の推移を示すグラフである。試験後半において、無処理群ではワタアブラムシの寄生数が急増したのに対し、ビタミンE(成分B)およびスクアレン(成分A)を散布した群では、その増加傾向を抑えることができた。ビタミンEに比べてスクアレンの抑制効果が高いことから、スクアレンの防除効果が高いことが判明した。   FIG. 19 is a graph showing the transition of the number of parasites of adult cotton aphids parasitic on eggplants. In the latter half of the test, the number of cotton aphid parasites increased rapidly in the untreated group, whereas the increase in the group sprayed with vitamin E (component B) and squalene (component A) could be suppressed. Since the squalene inhibitory effect was higher than that of vitamin E, it was found that the squalene control effect was high.

実施例4(野外実験その2)
本実施例では、スクアレンおよびビタミンEによるハウス園芸作物(キク)の害虫防除効果を調べた。詳細には、前述した実施例3と同様にしてスクアレンおよびビタミンEの水溶液(被験物質)を用意し、ビニールハウス内で生育させたキクに対して定期的に上記の被験物質を散布し、キク1本につき5茎に自然発生により寄生する害虫を計測した。キク6本(合計30茎)について同様の試験を行い、キク5茎に寄生する害虫の平均を算出した。詳細な試験方法は、以下のとおりである。
Example 4 (field experiment 2)
In this example, the pest control effect of house horticultural crops (Chrysanthemum) by squalene and vitamin E was examined. Specifically, an aqueous solution (test substance) of squalene and vitamin E is prepared in the same manner as in Example 3 described above, and the above test substance is periodically sprayed on chrysanthemum grown in a greenhouse. Pests that were parasitic on naturally occurring on 5 stems per tree were measured. A similar test was performed on 6 chrysanthemum (30 stems in total), and the average of pests parasitic on 5 chrysanthemum stems was calculated. The detailed test method is as follows.

対象作物:キク
栽培方法:ビニールハウス栽培(高知大学)
品種:小菊
被験物質の散布時期:草丈約30cm・生育期
被験物質の散布濃度・量:100ppm、24mL/株
散布回数:約7日間隔で合計3回
対象薬剤:市販のデンプン原料液剤(気門封鎖剤)
対象害虫:キクヒメヒゲナガアブラムシ
(Macrosiphoniella sanborni)
Target crop: Chrysanthemum cultivation method: Greenhouse cultivation (Kochi University)
Variety: Kogiku test substance spraying time: plant height approx. 30 cm ・ Growth test substance spraying concentration / amount: 100 ppm, 24 mL / strain spraying frequency: approx. 3 times every 7 days Target drug: commercially available starch raw material solution (Air Gate) Blocker)
Target pest: Kikuhime Higenaga Aphid
(Macrosifoniella samboni)

これらの結果を図20に示す。各図中、成分Aはスクアレンを、成分BはビタミンEを示す。比較のため、被験物質を全く散布しなかった無処理群、および市販のデンプン原料液剤(気門封鎖剤)を用いた対照群の結果を併記する。   These results are shown in FIG. In each figure, component A represents squalene and component B represents vitamin E. For comparison, the results of an untreated group in which no test substance was sprayed and a control group using a commercially available starch raw material liquid (air gate blocking agent) are also shown.

図20より、無処理群では、試験開始後キクヒメヒゲナガアブラムシ成虫の寄生数が経日的に増加していったのに対し、スクアレン(成分A)およびビタミンE(成分B)を散布した群はいずれも、対照群と同様、試験開始時とほぼ同様の寄生状態で推移しており、キクヒメヒゲナガアブラムシの寄生数は約5頭以下(スクアレン:成分A)および約20頭以下(成分B:ビタミンE)/5茎以下に抑制されていた。特にビタミンEに比べ、スクアレンを用いた場合は、高い防除効果が得られた。   From FIG. 20, in the untreated group, the number of adults of Kakuhihigenaga aphid increased after the start of the test, whereas the group sprayed with squalene (component A) and vitamin E (component B) As in the control group, all remained in the same parasitic state as at the start of the test, and the number of parasitic aphids was about 5 or less (squalene: component A) and about 20 or less (component B: vitamins). E) It was suppressed to 5 stems or less. In particular, when squalene was used as compared with vitamin E, a high control effect was obtained.

実施例5(野外実験その3)
本実施例では、スクアレンによるハウス園芸作物(キュウリ)の害虫防除効果を調べた。詳細には、前述した実施例3と同様にしてスクアレンの水溶液(被験物質)を用意し、ビニールハウス内で生育させたキュウリに対して定期的に上記の被験物質を散布し、キュウリ1本につき2葉に自然発生により寄生する害虫を計測した。キュウリ6本(合計12葉)について同様の試験を行い、キュウリ6葉に寄生する害虫の平均を算出した。詳細な試験方法は、以下のとおりである。
Example 5 (field experiment 3)
In this example, the pest control effect of squalene on house horticultural crops (cucumber) was examined. Specifically, an aqueous solution (test substance) of squalene is prepared in the same manner as in Example 3 described above, and the above-mentioned test substance is periodically sprayed on cucumbers grown in a greenhouse, and each cucumber is Pests that parasitize naturally on 2 leaves were measured. The same test was performed on 6 cucumbers (12 leaves in total), and the average of pests parasitic on 6 cucumber leaves was calculated. The detailed test method is as follows.

対象作物:キュウリ
栽培方法:ビニールハウス栽培(高知大学)
品種:青山キュウリ
被験物質の散布時期:草丈約20cm・生育期
被験物質の散布濃度・量:100ppm、50mL/株
散布回数:約7日間隔で合計2回
対象害虫:ナミハダニ(Tetranychus urticae)
Target crop: Cucumber cultivation method: Greenhouse cultivation (Kochi University)
Variety: Aoyama cucumber test substance spraying time: Plant height of about 20 cm ・ Growth test substance spraying concentration / amount: 100 ppm, 50 mL / strain number of sprays: 2 times in total at intervals of about 7 days

比較のため、被験物質を全く散布しなかった無処理群についても、同様の実験を行なった。これらの結果を図21に示す。図21には、被験物質の各散布時期(0日、7日後、14日後)において、無処理群の結果を100としたときの処理群の比率(対無処理比)を示している。   For comparison, the same experiment was performed for the untreated group in which no test substance was sprayed. These results are shown in FIG. FIG. 21 shows the ratio of the treated group (vs. the untreated ratio) when the result of the untreated group is 100 at each spraying time of the test substance (0 day, 7 days, and 14 days later).

図21より、スクアレンは、ナミハダニ雌成虫に対する防除効果を示すことが分かった。   From FIG. 21, it was found that squalene has a control effect against female adult spider mites.

上記実施例3〜5の結果より、スクアレンおよびビタミンEは、いずれも、コナジラミ、ワタアブラムシ、キクヒメヒゲナガアブラムシなどの半翅目害虫、ミナミキイロアザミウマなどのアザミウマ目害虫、およびホコリダニ、ナヒマダニなどのダニ目害虫の両方に対して高い防除効果を示すことが確認された。スクアレンやビタミンEは生体の必須成分であり毒性は考えられず、また、これらの構造的特徴から、タバココナジラミ以外の害虫に対する防除作用は、気門封鎖によると推察される。   From the results of Examples 3 to 5 above, squalene and vitamin E are both mite, such as whitefly, cotton aphid, Hemiptera aphid, and thrips pests such as Thrips thrips, and mites such as dust mite, It was confirmed that it exhibits a high control effect against both eye pests. Squalene and vitamin E are essential components of the living body and are not considered to be toxic. From these structural features, it is presumed that the control action against insect pests other than whiteflies is due to airway blockade.

Claims (3)

スクアレンを有効成分として含有することを特徴とする半翅目害虫、アザミウマ目害虫、またはダニ目害虫の産卵阻害剤。   An egg-laying inhibitor for hemiptera pests, thrips pests, or mite pests, comprising squalene as an active ingredient. 前記半翅目害虫は、コナジラミ類、カメムシ類、またはアブラムシ類である請求項1に記載の産卵阻害剤。   The egg-laying inhibitor according to claim 1, wherein the Hemiptera pest is a whitefly, stink bug, or aphid. 請求項1または2に記載の産卵阻害剤、および基材を含有する産卵阻害剤組成物。   The egg-laying inhibitor composition containing the egg-laying inhibitor of Claim 1 or 2, and a base material.
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Families Citing this family (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP2618415B1 (en) 2010-09-17 2018-03-21 Nissan Motor Co., Ltd Fuel cell system
WO2013123229A1 (en) * 2012-02-14 2013-08-22 Albemarle Corporation A process for producing a powder comprising an extruded carrier with an active compound
WO2022044948A1 (en) * 2020-08-26 2022-03-03 クラレトレーディング株式会社 Ambulatory agricultural pest capturing system
WO2023095780A1 (en) * 2021-11-24 2023-06-01 アース製薬株式会社 Stinkbug repellent for plant application
WO2023167248A1 (en) * 2022-03-01 2023-09-07 国立研究開発法人産業技術総合研究所 New pest control method targeting respiratory organ forming mechanism of pests

Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP2002501007A (en) * 1998-01-27 2002-01-15 ザイメッド・グループ・ピーエルシー Terpene treatment to kill lice and lice eggs
WO2007063267A1 (en) * 2005-11-30 2007-06-07 Eden Research Plc Terpene-containing compositions and methods of making and using them
JP2007326832A (en) * 2006-06-09 2007-12-20 Kao Corp Agricultural and horticultural insect pest repellent
CN101869103A (en) * 2010-06-22 2010-10-27 北京农学院 Plant miticide of squalene and applications thereof

Family Cites Families (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP1849363A1 (en) * 2006-03-09 2007-10-31 Cheminova A/S Synergistic combination of glutamate- and GABA-gated chloride agonist pesticide and at least one of Vitamin E or Niacin

Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP2002501007A (en) * 1998-01-27 2002-01-15 ザイメッド・グループ・ピーエルシー Terpene treatment to kill lice and lice eggs
WO2007063267A1 (en) * 2005-11-30 2007-06-07 Eden Research Plc Terpene-containing compositions and methods of making and using them
JP2007326832A (en) * 2006-06-09 2007-12-20 Kao Corp Agricultural and horticultural insect pest repellent
CN101869103A (en) * 2010-06-22 2010-10-27 北京农学院 Plant miticide of squalene and applications thereof

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