JP2014133720A - Ameba extermination method for fish, bath medicine for ameba extermination for fish, ameba extermination agent for fish, and feeding stuff - Google Patents

Ameba extermination method for fish, bath medicine for ameba extermination for fish, ameba extermination agent for fish, and feeding stuff Download PDF

Info

Publication number
JP2014133720A
JP2014133720A JP2013003016A JP2013003016A JP2014133720A JP 2014133720 A JP2014133720 A JP 2014133720A JP 2013003016 A JP2013003016 A JP 2013003016A JP 2013003016 A JP2013003016 A JP 2013003016A JP 2014133720 A JP2014133720 A JP 2014133720A
Authority
JP
Japan
Prior art keywords
fish
amoeba
extermination
ppm
ameba
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Pending
Application number
JP2013003016A
Other languages
Japanese (ja)
Inventor
Yukitoki Fujita
幸辰 藤田
Kenzo Mishiro
建造 三代
Kyoko Chida
京子 千田
Kaoru Ichiki
薫 市来
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Hayashikane Sangyo Co Ltd
Original Assignee
Hayashikane Sangyo Co Ltd
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Hayashikane Sangyo Co Ltd filed Critical Hayashikane Sangyo Co Ltd
Priority to JP2013003016A priority Critical patent/JP2014133720A/en
Publication of JP2014133720A publication Critical patent/JP2014133720A/en
Pending legal-status Critical Current

Links

Classifications

    • YGENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y02TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
    • Y02ATECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE
    • Y02A40/00Adaptation technologies in agriculture, forestry, livestock or agroalimentary production
    • Y02A40/80Adaptation technologies in agriculture, forestry, livestock or agroalimentary production in fisheries management
    • Y02A40/81Aquaculture, e.g. of fish
    • YGENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y02TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
    • Y02ATECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE
    • Y02A40/00Adaptation technologies in agriculture, forestry, livestock or agroalimentary production
    • Y02A40/80Adaptation technologies in agriculture, forestry, livestock or agroalimentary production in fisheries management
    • Y02A40/81Aquaculture, e.g. of fish
    • Y02A40/818Alternative feeds for fish, e.g. in aquacultures

Landscapes

  • Feed For Specific Animals (AREA)
  • Farming Of Fish And Shellfish (AREA)
  • Fodder In General (AREA)
  • Agricultural Chemicals And Associated Chemicals (AREA)

Abstract

PROBLEM TO BE SOLVED: To provide an ameba extermination method for fish having a high extermination effect to ameba at a low concentration and inexpensively and safely utilizable, a bath medicine for ameba extermination for fish, an ameba extermination agent for fish, and a feeding stuff.SOLUTION: Provided is a bath medicine obtained by dissolving or dispersing active ingredients into water and used for exterminating protist of ameba parasitic to fish. The active ingredients being one or more kinds of compounds selected from the group consisting of thymol, cinnamaldehyde, perillaldehyde, geraniol and their isomers and derivatives, and the concentration thereof is 0.3 to 20 ppm, and also provided are an ameba extermination method for fish where fish is immersed into the bath medicine, an ameba extermination agent for fish including the active ingredients, and a feeding stuff for fish including the same.

Description

本発明は、魚類に寄生するアメーバの駆除に有用な魚類のアメーバ駆除方法、魚類のアメーバ駆除用薬浴液、魚類用のアメーバ駆除剤および飼料に関する。   TECHNICAL FIELD The present invention relates to a fish amoeba extermination method, a fish amoeba extermination bath, a fish amoeba extermination agent, and a feed useful for extermination of amoeba parasitic on fish.

アメーバは、欧米やオーストラリアの養殖サーモンを始めとする養殖魚等に深刻な経済的損害を引き起こしている。このアメーバは、顕微鏡でしか見えない単細胞からなる原生生物である。魚類に寄生するアメーバの殆どは、宿主のエラに寄生し、ガス交換を阻害することにより発育障害を起こすため、そのまま処置をしなければ、養殖魚が大量に斃死する。ある推計によると、アメーバは、全世界の養殖魚業界において、年間10億ドル以上の損失を生じさせている。   Amoeba causes serious economic damage to farmed fish such as cultured salmon in Europe and America and Australia. This amoeba is a protist consisting of single cells that can only be seen with a microscope. Most of the amoeba parasitizing the fish parasitize the host gills and inhibits gas exchange, thereby causing developmental disorders. Unless treated as such, a large number of cultured fish are drowned. According to one estimate, amoeba causes more than $ 1 billion annually in the global aquaculture industry.

養殖魚のアメーバ対策として、現在では2時間の淡水浴が実施されているが、定期的に繰り返し実施しなければ効果が認められず、経済的および肉体的な負担が非常に高い上に、養殖魚にも多大なストレスを与えるおそれがある。さらに、淡水浴後でも、6%〜10%以上のアメーバが生存することが報告されており(非特許文献1参照)、これが再感染の原因となることが示唆されている。すべてのアメーバを死滅させることができない原因の1つとして、淡水浴中では、水がエラ組織の内部まで浸透しないため、エラ表面のアメーバしか死滅せず、組織に侵入したアメーバには淡水浴の効果がないことが考えられる。またアメーバはバイオフィルム(生物膜)を形成するため、バイオフィルム内のアメーバに対して淡水浴では効果があまり期待できないことが示唆されている。このバイオフィルムは、最も対策が難しいことが知られている。   Currently, a freshwater bath for 2 hours is being implemented as a measure for cultured fish amoebae. However, if it is not repeated regularly, it will not be effective, and the economic and physical burden will be very high. There is also a risk of applying a great deal of stress. Furthermore, it has been reported that 6% to 10% or more of amoebae survive even after a fresh water bath (see Non-Patent Document 1), which is suggested to cause reinfection. One reason why all amoeba cannot be killed is that in the freshwater bath, water does not penetrate into the gill tissue, so only the amoeba on the surface of the gill is killed. It may be ineffective. In addition, since amoeba forms a biofilm (biofilm), it has been suggested that the effect of a fresh water bath on the amoeba in the biofilm cannot be expected so much. This biofilm is known to be the most difficult to counter.

過大な労力や時間、費用を要せず、しかも養殖魚にストレスを与えることなく、養殖魚に寄生する寄生虫を軽減することのできる養殖魚の寄生虫寄生軽減剤として、例えば、特許文献1では、カフェイン、オイゲノール、カルバクロール、チモール、パラクレゾール、シトロネラール、アニスアルデヒド、ケイヒアルデヒド及びコイクセノライドから選ばれる1種または2種以上を有効成分とすることを特徴とするものが開示されている。   As a parasite parasitism reducing agent for cultured fish that can reduce parasites infested fish without excessive labor, time, and cost, and without giving stress to the cultured fish, for example, in Patent Document 1 , Caffeine, eugenol, carvacrol, thymol, paracresol, citronellal, anisaldehyde, cinhydraldehyde, and coixenolide are used as active ingredients.

In vitroでのアメーバに対する殺効果の評価は、多くの研究機関で実施されている。この中で、最も効果が高いと思われているビチオノールを用いた場合、最終濃度5ppm、24時間で、生存数が減少したが、死滅できなかったことが報告されている(非特許文献1参照)。   Evaluation of the killing effect on amoeba in vitro has been carried out by many research institutions. Among these, when using bithionol, which is considered to be the most effective, it has been reported that the number of survivors decreased but could not be killed at a final concentration of 5 ppm for 24 hours (see Non-Patent Document 1). ).

ガーリック抽出物を用いた実験でも、25ppm、24時間の条件下でアメーバが完全には死滅しなかったことが報告されている。   Experiments using garlic extract also reported that amoeba was not completely killed at 25 ppm for 24 hours.

特開2006−306777号公報JP 2006-306777 A

V. L. Findlay, B. L. Munday, Furtherstudies on acquired resistance to amoebic gill disease (AGD) in Atlanticsalmon, Salmo salar L. Journal of Fish Diseases, Volume 21, Issue 2, 1998年3月, 121-125ページ, DOI: 10.1046/j.1365-2761.1998.00086.xVL Findlay, BL Munday, Furtherstudies on acquired resistance to amoebic gill disease (AGD) in Atlanticsalmon, Salmo salar L. Journal of Fish Diseases, Volume 21, Issue 2, March 1998, 121-125, DOI: 10.1046 / j .1365-2761.1998.00086.x R. L. Florent, J. Becker, M. D. Powell,Further development of bithionol therapy as a treatment for amoebic gilldisease in Atlantic salmon, Salmo salar L., Journal of Fish Diseases, Volume32, Issue 5, 2009年5月, 391-400ページ, DOI: 10.1111/j.1365-2761.2008.01001.xRL Florent, J. Becker, MD Powell, Further development of bithionol therapy as a treatment for amoebic gilldisease in Atlantic salmon, Salmo salar L., Journal of Fish Diseases, Volume32, Issue 5, May 2009, 391-400, DOI: 10.1111 / j.1365-2761.2008.01001.x

しかしながら、特許文献1記載の養殖魚の寄生虫寄生軽減剤は、ベネデニア等の体表寄生虫を対象とするものであるため、エラの外側や組織内に寄生するアメーバに対する効果については必ずしも明らかではない。また、同文献記載の養殖魚の寄生虫軽減剤は、飼料に混合して使用するものであり、薬浴液等の外用剤としての用途への適用可能性については必ずしも明らかでない。さらにベネデニアは単性類に属する寄生虫であり、アメーバのような原生生物とは全く異なる生物と考えられており、原虫での軽減効果については明らかにされていない。   However, the parasitic infestation agent for cultured fish described in Patent Literature 1 is intended for body surface parasites such as Benedenia, and therefore the effect on amoeba that is parasitic on the outside of the gills and in the tissue is not always clear. . Moreover, the parasite-reducing agent for cultured fish described in the same document is used by mixing with feed, and its applicability to use as an external preparation such as a medicinal bath solution is not necessarily clear. Furthermore, Benedenia is a protozoan parasite and is considered to be a completely different organism from protozoa such as amoeba, and its mitigation effect on protozoa has not been clarified.

また、魚類に寄生するアメーバの駆除については、淡水浴や上記方法以外の有効な治療法や、高い駆除効果を有する治療・予防薬が確立していないのが現状である。   In addition, regarding the control of amoeba parasitic on fish, there are currently no effective treatment methods other than fresh water baths and the above methods, and treatment / preventive drugs having a high control effect have not been established.

本発明はかかる事情に鑑みてなされたもので、低濃度かつ短時間でアメーバに対する高い駆除効果を有し、安価かつ安全に利用可能な魚類のアメーバ駆除方法、魚類のアメーバ駆除用薬浴液、魚類用のアメーバ駆除剤および飼料を提供することを目的とする。   The present invention has been made in view of such circumstances, and has a high concentration-controlling effect on amoeba in a low concentration and in a short time, a fish amoeba-controlling method that can be used safely and inexpensively, a medicinal bath solution for fish amoeba-controlling, An object is to provide an amoeba control agent and feed for fish.

本発明は、下記の[1]〜[7]に記載の魚類のアメーバ駆除方法、下記の[8]〜[9]に記載の魚類のアメーバ駆除用薬浴液、下記の[10]〜[11]に記載の魚類用のアメーバ駆除剤および下記の[12]〜[14]に記載の魚類用の飼料を提供することにより上記課題を解決するものである。   The present invention provides a fish amoeba extermination method according to the following [1] to [7], a fish amoeba extermination chemical bath solution according to the following [8] to [9], and the following [10] to [10] The above-mentioned problems are solved by providing the amoeba-controlling agent for fish described in [11] and the feed for fish described in [12] to [14] below.

[1] 魚類に寄生するアメーバ属の原生生物を駆除する方法であって、有効成分として、チモール、シンナムアルデヒド、ペリルアルデヒド、ゲラニオールならびにこれらの異性体および誘導体からなる群より選択される1または複数種の化合物を、0.3〜20ppmの濃度で水中に溶解または分散させた薬浴液中に魚類を浸漬する魚類のアメーバ駆除方法。
[2] 前記水が淡水または海水である上記[1]記載の魚類のアメーバ駆除方法。
[3] 前記水が淡水である上記[2]記載の魚類のアメーバ駆除方法。
[4] 魚類に寄生するアメーバ属の原生生物を駆除する方法であって、有効成分として、チモール、シンナムアルデヒド、ペリルアルデヒド、ゲラニオールならびにこれらの異性体および誘導体からなる群より選択される1または複数種の化合物を含む組成物を魚類に経口投与し、または摂食させる魚類のアメーバ駆除方法。
[5] 前記組成物に含まれる前記化合物の含有量が50〜4000ppmである上記[4]記載の魚類のアメーバ駆除方法。
[6] 前記魚類が、サケ科(Salmoniformes)サケ目(Salmonidae)に属するものである上記[1]から[5]のいずれか1項記載の魚類のアメーバ駆除方法。
[7] 前記原生生物がNeoparamoeba spp.である上記[1]から[6]のいずれか1項記載の魚類のアメーバ駆除方法。
[1] A method for controlling protists of the genus Amoeba parasitic on fish, wherein the active ingredient is one or more selected from the group consisting of thymol, cinnamaldehyde, perillaldehyde, geraniol and isomers and derivatives thereof A fish amoeba extermination method for immersing fish in a chemical bath solution in which a seed compound is dissolved or dispersed in water at a concentration of 0.3 to 20 ppm.
[2] The fish amoeba extermination method according to the above [1], wherein the water is fresh water or seawater.
[3] The fish amoeba extermination method according to the above [2], wherein the water is fresh water.
[4] A method for controlling protists of the genus Amoeba parasitic on fish, wherein the active ingredient is one or more selected from the group consisting of thymol, cinnamaldehyde, perillaldehyde, geraniol and isomers and derivatives thereof. A method for controlling fish amoebae, wherein a composition containing a seed compound is orally administered or fed to fish.
[5] The fish amoeba extermination method according to the above [4], wherein the content of the compound contained in the composition is 50 to 4000 ppm.
[6] The method of controlling amoebic fish according to any one of [1] to [5] above, wherein the fish belongs to the Salmoniformes salmonidae.
[7] The fish amoeba extermination method according to any one of [1] to [6], wherein the protist is Neoparamoeba spp.

[8] 魚類に寄生するアメーバ属の原生生物を駆除するために用いられる、水中に有効成分を溶解または分散させた薬浴液であって、前記有効成分は、チモール、シンナムアルデヒド、ペリルアルデヒド、ゲラニオールならびにこれらの異性体および誘導体からなる群より選択される1または複数種の化合物であり、前記有効成分の濃度が0.3〜20ppmである魚類のアメーバ駆除用薬浴液。
[9] 前記水が淡水である上記[8]記載の魚類のアメーバ駆除用薬浴液。
[8] A medicinal bath solution in which an active ingredient is dissolved or dispersed in water, which is used to combat amoebial protists that parasitize fish, wherein the active ingredient comprises thymol, cinnamaldehyde, perylaldehyde, A medicinal bath solution for controlling amoeba for fish, which is one or more compounds selected from the group consisting of geraniol and isomers and derivatives thereof, and the concentration of the active ingredient is 0.3 to 20 ppm.
[9] The medicinal bath solution for controlling amoebic fish according to the above [8], wherein the water is fresh water.

[10] チモール、シンナムアルデヒド、ペリルアルデヒド、ゲラニオールならびにこれらの異性体および誘導体からなる群より選択される1または複数種の化合物を有効成分として含む魚類用のアメーバ駆除剤。
[11] 前記有効成分の含有量が50〜4000ppmである上記[10]記載の魚類用のアメーバ駆除剤。
[10] An amoeba controlling agent for fish comprising as an active ingredient one or more compounds selected from the group consisting of thymol, cinnamaldehyde, perillaldehyde, geraniol and isomers and derivatives thereof.
[11] The amoeba controlling agent for fish according to the above [10], wherein the content of the active ingredient is 50 to 4000 ppm.

[12] チモール、シンナムアルデヒド、ペリルアルデヒド、ゲラニオールならびにこれらの異性体および誘導体からなる群より選択される1または複数種の化合物を含む魚類用の飼料。
[13] 前記化合物の含有量が50〜4000ppmである上記[12]記載の魚類用の飼料。
[14] サケ科(Salmoniformes)サケ目(Salmonidae)に属する魚類用の飼料である上記[12]または[13]記載の魚類用の飼料。
[12] A fish feed comprising one or more compounds selected from the group consisting of thymol, cinnamaldehyde, perillaldehyde, geraniol and isomers and derivatives thereof.
[13] The feed for fish according to the above [12], wherein the content of the compound is 50 to 4000 ppm.
[14] The fish feed according to the above [12] or [13], which is a feed for fish belonging to the Salmoniformes Salmonidae.

なお、本発明において、「1ppm」は、薬浴液、アメーバ駆除剤または飼料1,000,000重量部に対し、有効成分または化合物1重量部が含まれていることを意味する。   In the present invention, “1 ppm” means that 1 part by weight of the active ingredient or compound is contained with respect to 1,000,000 parts by weight of the medicinal bath solution, amoeba controlling agent or feed.

チモール、シンナムアルデヒド、ペリルアルデヒド、ゲラニオール、これらの異性体および誘導体を有効成分とする薬浴液を用いる本発明のアメーバ駆除方法によると、0.5〜100ppmという低濃度で、かつ短時間のうちに魚類のエラの内部に寄生するアメーバについてもほぼ完全に死滅させることが可能である。また、飼料に添加した場合にも、短期間の投与でアメーバ等に対する高い駆除効果を発揮する。これらの有効成分は、天然のハーブや精油より得られるものであり、ごく少量かつ短期間の使用で優れた効果を発揮するため、ビチオノール等に見られるような摂食障害やそれに伴う斃死等の副作用のリスクが低く、安価かつ安全に利用可能であるという優れた効果を有している。かくして、本発明によると、低濃度かつ短時間でアメーバに対する高い駆除効果を有し、安価かつ安全に利用可能な魚類のアメーバ駆除方法、魚類のアメーバ駆除用薬浴液、魚類用のアメーバ駆除剤および飼料が提供される。   According to the amoeba control method of the present invention using a drug bath solution containing thymol, cinnamaldehyde, perillaldehyde, geraniol, isomers and derivatives thereof as active ingredients, the concentration is as low as 0.5 to 100 ppm and within a short time. In addition, the amoeba parasitizing the fish gills can be almost completely killed. In addition, even when added to feed, it exerts a high control effect against amoeba and the like by short-term administration. These active ingredients are obtained from natural herbs and essential oils, and they exhibit excellent effects in very small amounts and short-term use. It has an excellent effect that the risk of side effects is low, and it can be used cheaply and safely. Thus, according to the present invention, a fish amoeba extermination method, a fish ameba extermination chemical bath solution, and a fish amoeba extermination agent which has a high extinction effect on amoeba in a low concentration and in a short time and can be used safely and inexpensively And feed is provided.

本発明の第1の実施の形態に係る魚類のアメーバ駆除方法(以下、「アメーバ駆除方法」、「本方法」と略称する場合がある。)は、有効成分として、チモール、シンナムアルデヒド、ペリルアルデヒド、ゲラニオールならびにこれらの異性体および誘導体からなる群より選択される1または複数種の化合物を、0.3〜20ppmの濃度で水中に溶解または分散させた薬浴液中に魚類を浸漬することにより、魚類に寄生するアメーバ属の原生生物(以下「アメーバ等」と略称する場合がある。)を駆除する方法である。   The fish amoeba extermination method according to the first embodiment of the present invention (hereinafter may be abbreviated as “amoeba extermination method” or “the present method”) includes thymol, cinnamaldehyde, perylaldehyde as active ingredients. By immersing fish in a chemical bath solution in which one or more compounds selected from the group consisting of geraniol and isomers and derivatives thereof are dissolved or dispersed in water at a concentration of 0.3 to 20 ppm This is a method for extermination of amoebia protists (hereinafter sometimes abbreviated as “amoeba etc.”) parasitic on fish.

本方法に使用される薬浴液は、チモール、シンナムアルデヒド、ペリルアルデヒド、ゲラニオールならびにこれらの異性体および誘導体からなる群より選択される1または複数種の化合物を、0.3〜20ppmの濃度で水中に溶解または分散させたものである。   The chemical bath used in the present method comprises one or more compounds selected from the group consisting of thymol, cinnamaldehyde, perillaldehyde, geraniol and isomers and derivatives thereof at a concentration of 0.3 to 20 ppm. Dissolved or dispersed in water.

有効成分であるチモール、シンナムアルデヒド、ペリルアルデヒド、ゲラニオールは、それぞれ、下記の構造式化1〜化4で表される分子構造を有する化合物であり、主に植物より得られる精油の構成成分として知られている。これらの化合物は、それらの植物の植物体または精油(たとえば、チモールの場合はタチジャコウソウ(タイム)、シンナムアルデヒドの場合はケイ皮油、ペリルアルデヒドの場合はシソまたはシソ油、ゲラニオールの場合はゼラニウム)から任意の公知の方法を用いて単離してもよく、任意の方法を用いて化学的に合成したものを用いてもよい。   The active ingredients thymol, cinnamaldehyde, perillaldehyde, and geraniol are compounds having molecular structures represented by the following structural formulas 1 to 4, respectively, and are known as components of essential oils obtained mainly from plants. It has been. These compounds are plant or essential oils of those plants (eg, thyme (thyme) for thymol, cinnamon oil for cinnamaldehyde, perilla or perilla oil for perilaldehyde, geranium for geraniol ) May be isolated using any known method, or may be chemically synthesized using any method.

Figure 2014133720
Figure 2014133720

Figure 2014133720
Figure 2014133720

Figure 2014133720
Figure 2014133720

Figure 2014133720
Figure 2014133720

薬浴液の有効成分としては、魚類に寄生するアメーバ属に属する原生生物の駆除活性を有している限りにおいて、上記の化合物以外に、これらの異性体または誘導体を用いてもよい。上記の化合物の異性体の例としては、構造異性体(例えば、チモールの構造異性体であるカルバクロールや3−メチル−4−イソプロピルフェノール等)、幾何異性体(例えば、(Z)−シンナムアルデヒド)、光学異性体(例えば、4(R)−ペリルアルデヒド)等が挙げられる。また、上記の化合物の誘導体の例としては、アルデヒド基が窒素化合物と反応して生じるオキシム、イミド(Schiff塩基)、ヒドラジド、セミカルバジド等、芳香族環に置換基を有するもの等が挙げられる。
なお、上記の化合物ならびにそれらの異性体および誘導体のうち任意の2種類以上を任意の割合で混合したものを薬浴液の有効成分として使用してもよい。
In addition to the above compounds, these isomers or derivatives may be used as the active ingredient of the medicinal bath solution as long as it has the activity of controlling protozoa belonging to the genus Amoeba parasitic on fish. Examples of the isomers of the above compounds include structural isomers (for example, carvacrol and 3-methyl-4-isopropylphenol, which are structural isomers of thymol), and geometric isomers (for example, (Z) -cinnamaldehyde. ), Optical isomers (for example, 4 (R) -perylaldehyde) and the like. Examples of the derivatives of the above compounds include those having a substituent in the aromatic ring, such as oxime, imide (Schiff base), hydrazide, semicarbazide, etc. produced by the reaction of an aldehyde group with a nitrogen compound.
In addition, you may use what mixed arbitrary 2 or more types of said compounds and those isomers and derivatives in arbitrary ratios as an active ingredient of a chemical bath liquid.

これらの化合物のうち特に好ましいのがシンナムアルデヒドであり、数ppm程度の低濃度で、短時間(数分〜数十分)の薬浴液中への浸漬により、エラの内部に寄生したアメーバ等をほぼ完全に駆除することができる。   Among these compounds, cinnamaldehyde is particularly preferable, and amoeba parasitized inside the gill by being immersed in a chemical bath solution at a low concentration of about several ppm for a short time (several minutes to several tens of minutes). Can be removed almost completely.

薬浴液に含まれる有効成分の濃度は、0.3〜20ppm、好ましくは0.5〜10ppm、より好ましくは3〜10ppmである。有効濃度の濃度が0.3ppmを下回ると、アメーバ等の駆除を十分に行うことができず、逆に20ppmを上回ると、麻酔作用に伴う斃死の危険性の増大等、魚類への副作用が顕著に発現するおそれがある。   The concentration of the active ingredient contained in the chemical bath solution is 0.3 to 20 ppm, preferably 0.5 to 10 ppm, more preferably 3 to 10 ppm. If the concentration of the effective concentration is less than 0.3 ppm, the amoeba and the like cannot be sufficiently controlled. If the concentration exceeds 20 ppm, adverse effects on fish such as an increase in the risk of drowning due to anesthetic action are remarkable. May develop.

薬浴液の製造に用いられる水は、海水でもよいが、人工海水、淡水およびこれらの任意の割合での混合物であってもよい。薬浴液の製造に使用する水は、必要に応じて、浮遊物、細菌、重金属等の有害成分を除去するための処理に供してもよい。処理については、限外ろ過、任意の公知の方法を用いて行うことができる。
水としては、それ単独である程度の殺アメーバ活性を有する淡水を使用することが好ましい。
The water used for the production of the chemical bath may be seawater, but may be artificial seawater, fresh water, and a mixture thereof in any ratio. The water used for the production of the chemical bath may be subjected to a treatment for removing harmful components such as suspended matters, bacteria, and heavy metals, if necessary. About a process, it can carry out using ultrafiltration and arbitrary well-known methods.
As water, it is preferable to use fresh water having a certain amount of amoeba activity alone.

有効成分として用いられる化合物の水への溶解度または分散性を向上させるために、薬浴液は、魚油等の油脂、アルコール、乳化剤、非イオン性界面活性剤等を含んでいてもよい。また、魚類用の薬浴液に一般に使用される任意の添加剤を含んでいてもよい。そのような添加剤の例としては、抗生物質等の他の薬剤、保存料、酸化防止剤等が挙げられる。   In order to improve the solubility or dispersibility of the compound used as the active ingredient in water, the chemical bath solution may contain fats and oils such as fish oil, alcohols, emulsifiers, nonionic surfactants and the like. Moreover, you may contain the arbitrary additives generally used for the medicine bath liquid for fish. Examples of such additives include other drugs such as antibiotics, preservatives, antioxidants and the like.

薬浴液の製造方法は特に制限されず、上記の各成分を混合し、有効成分を水中に溶解または分散させるための任意の公知の方法を用いて行うことができる。あらかじめ、有効成分として用いられる化合物を水、アルコール等の水溶性有機溶媒、油脂、またはこれらの任意の2種類以上を任意の割合で混合して得られる混合溶媒等の適当な溶媒に上記濃度範囲よりも高濃度で溶解した原液を作製しておき、これを水中に所定の割合で添加して、最終的に上記濃度範囲となるように希釈することにより製造してもよい。   The method for producing the chemical bath liquid is not particularly limited, and can be carried out using any known method for mixing the above-described components and dissolving or dispersing the active ingredient in water. In advance, the concentration range described above is applied to an appropriate solvent such as a water-soluble organic solvent such as water or alcohol, an oil or fat, or a mixed solvent obtained by mixing any two or more of these at an arbitrary ratio. Alternatively, a stock solution dissolved at a higher concentration may be prepared, added at a predetermined ratio in water, and finally diluted so as to be in the above concentration range.

本方法の適用対象となる魚種については、アメーバ感染症を発症する任意の魚類が挙げられるが、特に、エラへのアメーバ等の寄生が大きな問題になっているターボット(イシビラメ)や、サケ科(Salmoniformes)サケ目(Salmonidae)に属する魚類が挙げられ、その具体例としては、シロザケ、アトランティックサーモン、ベニザケ、ギンザケ、キングサーモン、カラフトマス、サツキマス、サクラマス、マスノスケ、スチールヘッド等が挙げられる。   The fish species to which this method is applied include any fish that develops an amoeba infection, but in particular, the turbot (shrimp) and salmonids, where parasitism such as amoeba to Ella is a major problem (Salmoniformes) Fish belonging to the order Salmonidae, specific examples include chum salmon, atlantic salmon, sockeye salmon, coho salmon, king salmon, calaf trout, salmon trout, cherry salmon, trout salmon, steelhead and the like.

本方法による駆除の対象となるアメーバ属に属する原生生物としては、魚類に寄生して疾患を発症させ、斃死による養殖魚の歩留まりの低下や、商品価値の低下の原因となる任意のものが挙げられるが、特に、アメーバ性鰓病(AGD)の原因寄生体であるNeoparamoeba pemaquidensis等が挙げられる。   Protozoa belonging to the genus Amoeba that are subject to extermination by this method include those that parasitize fish and cause disease, causing a decline in the yield of cultured fish due to drowning and a reduction in commercial value. However, Neoparamoeba pemaquidensis etc. which are causative parasites of amoeba mania (AGD) are mentioned especially.

数ppmの有効成分を含む薬浴液の場合、薬浴液への魚類の浸漬を数十分〜数時間程度行えば、寄生したアメーバ等をほぼ完全に死滅させることができる。有効成分の種類によっては、魚類が麻酔されたような状態を呈することがあるが、薬浴終了後に有効成分を含まない水に戻すことで速やかに回復する。   In the case of a medicinal bath solution containing several ppm of active ingredients, parasitic amoeba and the like can be almost completely killed by immersing fish in the medicinal bath solution for several tens of minutes to several hours. Depending on the type of the active ingredient, the fish may be in an anesthetized state, but it recovers quickly by returning to water that does not contain the active ingredient after the medicine bath.

本発明の第2の実施の形態に係る魚類のアメーバ駆除方法は、魚類に寄生するアメーバ属の原生生物を駆除する方法であって、有効成分として、チモール、シンナムアルデヒド、ペリルアルデヒド、ゲラニオールならびにこれらの異性体および誘導体からなる群より選択される1または複数種の化合物を含む組成物を魚類に経口投与し、または摂食させることにより、魚類に寄生するアメーバ属の原生生物を駆除する方法である。   The fish amoeba extermination method according to the second embodiment of the present invention is a method of exterminating amoebia protists that are parasitic on fish, and as active ingredients, thymol, cinnamaldehyde, perilaldehyde, geraniol and these A method of controlling amoebial protists parasitic on fish by orally administering or feeding a fish with a composition comprising one or more compounds selected from the group consisting of isomers and derivatives of is there.

組成物に含まれる化合物の種類、対象となる魚種、駆除対象となるアメーバ等については、第1の実施の形態に係る薬浴液の場合と同様であるので、詳しい説明を省略する。経口投与または摂食に供する場合の上記化合物の組成物への含有量は特に制限されないが、例えば、50〜4000ppmであり、魚種、体重、養殖条件、化合物の種類等に応じて適宜調節される。   The type of compound contained in the composition, the fish species to be controlled, the amoeba to be controlled, and the like are the same as in the case of the chemical bath solution according to the first embodiment, and thus detailed description thereof is omitted. The content of the above compound in the composition for oral administration or feeding is not particularly limited, but is, for example, 50 to 4000 ppm, and is appropriately adjusted according to the fish species, body weight, culture conditions, type of compound, etc. The

組成物は、飼料に含有させて摂餌時に摂食させることにより経口投与してもよい。飼料の形態は特に制限されず、通常の養殖時に使用される餌に所定の含有量となるように配合すればよい。   The composition may be orally administered by being contained in feed and fed at the time of feeding. The form of the feed is not particularly limited, and may be blended so as to have a predetermined content in the feed used during normal cultivation.

次に、本発明の作用効果を確認するために行った実施例について説明する。   Next, examples carried out for confirming the effects of the present invention will be described.

実施例1:in vitroでの殺アメーバ活性の評価
殺アメーバ活性の評価は、Florent らの「In
vitro toxicity of bithionol and bithionol sulphoxide to Neoparamoeba spp., the
causative agent of amoebic gill disease (AGD)」 Dis
Aquat Organ. 2010 Sep 17;91(3):257-62 記載の方法に準拠して実施した。方法の概略を以下に示す。
(1)丸型シャーレ底面に、均一にアメーバを付着させたシャーレを準備した。
(2)使用前に滅菌海水で1回洗浄した。
(3)添加物の最終濃度が任意の濃度(5ppm,1ppm,0.3ppm)になるように調整した滅菌海水を加えた
(4)添加物で調整した海水を添加してから10分後、1時間後、2時間後、24時間後に顕微鏡下でシャーレを観察し、アメーバの生存状態を観察した。
(5)アメーバがシャーレ底面に付着して、形態に異常が認められないものについては、生存と判定し、底面から離れたものについては、遠心分離機を用いて回収した。
(6)回収したアメーバについては、ニュートラルレッド染色を用いて生死を確認した。
Example 1: Evaluation of amoebicidal activity in vitro The evaluation of amoebicidal activity is described in Florent et al.
in vitro toxicity of bithionol and bithionol sulphoxide to Neoparamoeba spp., the
causative agent of amoebic gill disease (AGD) '' Dis
Aquat Organ. 2010 Sep 17; 91 (3): 257-62. The outline of the method is shown below.
(1) A petri dish having an amoeba uniformly attached to the bottom of a round petri dish was prepared.
(2) Washed once with sterile seawater before use.
(3) Sterile seawater adjusted so that the final concentration of the additive becomes an arbitrary concentration (5 ppm, 1 ppm, 0.3 ppm) was added. (4) Ten minutes after adding the seawater adjusted with the additive, Petri dishes were observed under a microscope after 1 hour, 2 hours, and 24 hours, and the survival state of amoeba was observed.
(5) Amoebae adhered to the bottom of the petri dish and no abnormalities were observed in its morphology, and those that were separated from the bottom were collected using a centrifuge.
(6) The recovered amoeba was confirmed to be alive or dead using neutral red staining.

シンナムアルデヒド、ペリルアルデヒド、ゲラニオールについての実験結果を、対照(ブランク)および比較例としてビチオノールに行った同様の実験結果と共に、下記の表1に示した。   The experimental results for cinnamaldehyde, perillaldehyde, and geraniol are shown in Table 1 below, along with similar experimental results performed on bithionol as a control (blank) and comparative example.

Figure 2014133720
Figure 2014133720

表1の結果より、シンナムアルデヒドについては、最終濃度1ppm以上で、10分間以内に抗アメーバ効果を示すことが認められた。また、ペリルアルデヒドは、5ppm以上1時間以内、ゲラニオールは5ppm以上10分間以内で抗アメーバ効果が認められた。一方、何も加えない対照区では、24時間後でも、ほとんどすべてのアメーバが生存した。一方、ビチオノールを添加したものでは、5ppm、1時間で生存数の減少は認められたものの、アメーバが生存した。   From the results of Table 1, it was confirmed that cinnamaldehyde exhibited an anti-amoeba effect within 10 minutes at a final concentration of 1 ppm or more. In addition, an anti-amoeba effect was observed when perillaldehyde was 5 ppm or more and within 1 hour, and geraniol was observed within 5 ppm or more and 10 minutes. On the other hand, in the control group where nothing was added, almost all amoeba survived even after 24 hours. On the other hand, in the case of adding bithionol, although the decrease in the number of survival was observed at 5 ppm for 1 hour, the amoeba survived.

ビチオノールでは、最終濃度5ppmで24時間接触させたにもかかわらず、アメーバの生存が認められたのに対し、今回の3種類の披検物質では5pppm1時間以内ですべてのアメーバが死滅した。このことより、これらの化合物は、低濃度の投与で短時間のうちに高い抗アメーバ活性をしめすことが確認された。   In the case of bithionol, the survival of amoeba was observed despite contact for 24 hours at a final concentration of 5 ppm, whereas all the amoeba died within 1 hour of 5 pppm for these three test substances. From these results, it was confirmed that these compounds showed high anti-amoeba activity in a short time by administration at a low concentration.

特にシンナムアルデヒドについては、最終濃度1ppm以上の低濃度で、10分間以内に抗アメーバ効果が認められた。また、最終濃度が0.3ppm,10分間以内でも、アメーバの減少効果が認められたことより、これらの被験物質のうち最も優れた抗アメーバ活性を持つ物質であることが示唆された。   Especially for cinnamaldehyde, an anti-amoeba effect was observed within 10 minutes at a low concentration of 1 ppm or more. Moreover, even when the final concentration was 0.3 ppm and within 10 minutes, the effect of reducing amoeba was observed, suggesting that it was the substance having the most excellent anti-amoeba activity among these test substances.

実施例2:安全性の検討
実施例1の結果を受けて、上記3種類の被験物質について、実際に野外で使用する場合の条件について検討を行った。使用に際して最も考慮しなければならないことは、アメーバはエラの表面もしくは組織に寄生し、さらにバイオフィルムを生成することより、これらの物質がある一定の濃度および一定時間、エラに感作していなければならない。
Example 2: Examination of safety Based on the results of Example 1, the above three types of test substances were examined for conditions when actually used outdoors. The most important thing to consider in use is that amoeba parasitizes the surface or tissue of the gills, and further sensitizes them to gera for a certain concentration and time by generating biofilms. I must.

実施例1の結果によると、理論的には、シンナムアルデヒドの場合、1ppmの濃度で10分間、ペリルアルデヒドの場合5ppmで1時間、ゲラニオールは5ppmで10分間の濃度と時間があれば、アメーバ対策の効果が期待できる。これらを簡易に、しかも持続的にエラに感作させる方法としては、魚では薬浴が用いられている。薬浴を実施する場合、これらの物質の類似物質は効率的に皮膚から吸収され組織に浸透することが報告されている。たとえば、これらと同じモノテルペンの仲間であるオイゲノールやカルバクロールは、皮膚やエラからの吸収に優れ、魚の全身麻酔薬として広く使用されている。このため、淡水浴もしくは海水で混合することにより使用することは、組織内に侵入したアメーバに対して効果があることが期待される。さらにバイオフィルムに浸透性の高い物質としてシンナムアルデヒド、ペリルアルデヒド、ゲラニオール等が報告されている。   According to the results of Example 1, theoretically, cinnamaldehyde has a concentration of 1 ppm for 10 minutes, perylaldehyde has a concentration of 5 ppm for 1 hour, and geraniol has a concentration of 5 ppm for 10 minutes. Can be expected. A fish bath is used as a method to sensitize these easily and continuously to gills. When performing a medicinal bath, analogs of these substances have been reported to be efficiently absorbed from the skin and penetrate tissue. For example, eugenol and carvacrol, which are the same monoterpenes, are excellent in absorption from the skin and gills, and are widely used as general anesthetics for fish. For this reason, using it by mixing with a fresh water bath or seawater is expected to be effective against an amoeba that has entered the tissue. Furthermore, cinnamaldehyde, perillaldehyde, geraniol, etc. have been reported as substances having high permeability to biofilms.

したがって淡水または海水において、これらの物質の最低有効濃度が保たれれば、エラの表面だけではなく、組織内のアメーバについても効率的に減少することが期待できる。また、最も駆除が難しいとされるバイオフィルム内のアメーバに対しても治療が期待できる。この方法としては、海水もしくは淡水に最小有効濃度以上の濃度が必要である。これを実行するためには、海水もしくは淡水に混合したときの、魚への安全性が担保されなければならない。以上に鑑みて、これらの被験物質の安全性を担保するため下記の実験を実施した。   Therefore, if the minimum effective concentration of these substances is maintained in fresh water or seawater, it can be expected that not only the surface of the gills but also the amoeba in the tissue is effectively reduced. Treatment can also be expected for amoeba in biofilm, which is considered to be the most difficult to remove. This method requires a concentration greater than the minimum effective concentration in seawater or fresh water. In order to do this, the safety to the fish when mixed with seawater or fresh water must be ensured. In view of the above, the following experiments were conducted to ensure the safety of these test substances.

350L海水もしくは淡水のタンクに100g程度のサーモン30尾を準備した。これらのタンクの海水および淡水について、それぞれの物質の最終濃度が20ppm、10ppm、5ppm、1ppmに調整した。ただし、最小有効濃度の関係で1ppmの試験はシンナムアルデヒドのみとした。試験開始後、それぞれの魚の状態を確認し、すべての魚が安全である時間を計測した。試験時間は最大で2時間(120分間)で実施した。海水を用いて調製した薬浴液についての検討結果を下記の表2に示す。   30 salmons of about 100 g were prepared in a tank of 350 L seawater or fresh water. The final concentration of each substance was adjusted to 20 ppm, 10 ppm, 5 ppm, and 1 ppm for seawater and fresh water in these tanks. However, the test of 1 ppm was only cinnamaldehyde because of the minimum effective concentration. After the start of the test, the state of each fish was confirmed and the time during which all fish were safe was measured. The test time was a maximum of 2 hours (120 minutes). Table 2 below shows the results of studies on the chemical bath prepared using seawater.

Figure 2014133720
Figure 2014133720

海水を用いて調製した薬浴中での最終濃度10ppmでの安全性(すべての魚が生存可能な最大浸漬時間)は、シンナムアルデヒドで60分間、ペリルアルデヒドで45分間、ゲラニオールで75分間であった。試験終了後は、全ての魚が麻酔された状態になるが、通常のタンクに戻したところ蘇生した。最終濃度5ppmでは、すべての魚が2時間の薬浴中に浸漬しても問題なく生存した。   Safety at a final concentration of 10 ppm in a medicinal bath prepared with seawater (maximum immersion time for all fish to survive) was 60 minutes for cinnamaldehyde, 45 minutes for perilaldehyde, and 75 minutes for geraniol. It was. After completion of the test, all fish were anesthetized, but were resuscitated when returned to normal tanks. At a final concentration of 5 ppm, all fish survived without any problems when immersed in a 2-hour bath.

これらと同じモノテルペンの仲間であるオイゲノールやカルバクロールを用いて、海水で麻酔を実施した場合、アメーバが減少することが報告されている。ただし、実験1のin vitroの実験では、オイゲノールやカルバクロールの抗アメーバ活性の最終濃度は20ppmであった(データ未発表)。このことより、オイゲノールやカルバクロールより抗アメーバ活性が高く、同様な組織浸透性を持つ、上記3種類の物質は薬浴に最も優れた物質であることが期待できる。海水で薬浴を実施する場合は、最終濃度10ppmであった場合、それぞれの物質について30分間以内に抑えて実施することが望ましいことが確認された。また濃度を変えて検討する場合、最終濃度5ppmで60分間以内に抑えて実施することが望ましい。万が一、魚が麻酔にかかった状態に陥った場合、即座に薬浴を中止し海水に戻すことで安全性が担保されるため、薬浴を即座に中止することにより即座に蘇生するため、本方法の安全性は極めて高いと思われる。   It has been reported that amoeba decreases when anesthesia is performed in seawater using eugenol and carvacrol, which are the same monoterpene friends. However, in the in vitro experiment of Experiment 1, the final concentration of anti-amoeba activity of eugenol or carvacrol was 20 ppm (data not shown). From this, it can be expected that the above-mentioned three kinds of substances having higher anti-amoeba activity than eugenol and carvacrol and having similar tissue permeability are the most excellent substances for a chemical bath. In the case of carrying out a chemical bath in seawater, it was confirmed that it is desirable to carry out each substance within 30 minutes if the final concentration is 10 ppm. Moreover, when examining by changing a density | concentration, it is desirable to carry out by suppressing within 60 minutes by 5 ppm of final density | concentration. In the unlikely event that a fish falls into an anesthesia state, safety is ensured by immediately stopping the medicine bath and returning it to seawater. The safety of the method seems very high.

淡水を用いて調製した薬浴液についての検討結果を下記の表3に示す。   Table 3 below shows the results of studies on the chemical bath solution prepared using fresh water.

Figure 2014133720
Figure 2014133720

淡水での安全性については最終濃度10ppmでの安全性は、シンナムアルデヒド60分間、ペリルアルデヒド50分間、ゲラニオール65分間であった。海水を用いて調製した薬浴液の場合と同様、全ての魚が麻酔状態になったあと、通常のタンクに戻したところ即座に蘇生した。最終濃度5ppmの場合、全ての魚が2時間の薬浴後、問題なく生存した。   Regarding safety in fresh water, safety at a final concentration of 10 ppm was cinnamaldehyde 60 minutes, perilaldehyde 50 minutes, and geraniol 65 minutes. As in the case of the drug bath solution prepared using seawater, after all fish were anesthetized, they were returned to normal tanks and immediately revived. At a final concentration of 5 ppm, all fish survived after 2 hours of bathing.

淡水での安全性も、海水とほとんど変わらなかった。このため、薬浴については、海水と同じ条件で実施することが可能である。これらの物質を投与することにより、淡水浴のみでは殺せなかった組織内のアメーバが殺せる可能性が高い。また、対応の難しいバイオフィルムにも対応できる可能性が高い。このため、淡水浴と併用しながら実施するとより高い治療効果が期待できる。   The safety in fresh water was almost the same as seawater. For this reason, about a chemical bath, it is possible to implement on the same conditions as seawater. By administering these substances, there is a high possibility of killing amoeba in tissues that could not be killed by a fresh water bath alone. In addition, it is highly possible to handle biofilms that are difficult to handle. For this reason, a higher therapeutic effect can be expected when implemented in combination with a fresh water bath.

実施例3:飼料への添加によるエラ寄生アメーバの殺効果の検討
実施例2の薬浴でアメーバ対策を実施する以外に、これらの物質を餌に添加後、経口で投与することにより、アメーバの感染を防ぐ可能性が考えられる。この方法は、薬浴と比較して少ない労働力で実施でき魚への負担も少ないものと思われる。ただし、これらの物質の吸収、体内動態、代謝、排出について、魚類での報告は皆無であり、実際に魚を用いて評価を実施する以外方法はない。これらの物質を経口投与することにより、アメーバに感染した魚に対する治療効果を証明するためには、アメーバに感染しているサーモンにこれらの飼料を投与し、対照区と比較してアメーバの数が減少していれば効果が認められたことになる。
Example 3: Examination of killing effect of gill parasite amoeba by addition to feed In addition to carrying out amoeba countermeasures in the medicinal bath of Example 2, by adding these substances to the diet and orally administering them, There is a possibility of preventing infection. This method can be carried out with less labor compared to medicinal baths, and the burden on fish seems to be small. However, there are no reports on the absorption, pharmacokinetics, metabolism, and excretion of these substances in fish, and there is no method other than actual evaluation using fish. In order to prove the therapeutic effect on fishes infected with amoeba by orally administering these substances, these diets are administered to salmon infected with amoeba, and the number of amoeba compared to the control group If it decreases, the effect is recognized.

アメーバに感染した末期の感染魚を準備する。これらは、試験開始前に肉眼的にアメーバの感染を評価し、同程度のものを選択して使用する。これらの評価は、エラのアメーバによる炎症度合いを5段階に分類し、最も炎症が激しいものを使用した。最終濃度が2000ppmになるように調整した飼料を2.5%/Kg・BWの割合で、3日間サーモンに強制的に投与した(強制的に投与することにより、添加物の吸収、体内動態が確実に判定できる。)。3日後に、取り上げてエラのアメーバ寄生数を評価した。評価数は各3尾とした。
評価は、Philip らの方法(Int J Parasitol. 2005
Nov;35(13):1417-23. Epub 2005 Jul 18)に準拠して実施した。具体的には次のとおりである。
(1)すべてのエラを摘出した。
(2)5分間試験管の中に滅菌海水を入れゆっくり攪拌し、アメーバをエラから離した。
(3)シャーレに撒き2時間後、シャーレに付着したアメーバを計測する。
(4)計測方法は、10〜30の視野を確認しその平均を出した。
(5)対照区と比較してその効果を検証した。
Prepare end-stage infected fish infected with amoeba. These should be used after evaluating the amoeba infection macroscopically before the start of the test and selecting similar ones. In these evaluations, the degree of inflammation caused by Ella amoeba was classified into five levels, and the one with the most intense inflammation was used. The feed adjusted to a final concentration of 2000 ppm was forcibly administered to the salmon for 3 days at a rate of 2.5% / Kg · BW. Can be judged reliably.) Three days later, it was taken up and the number of gills of amoeba was evaluated. The number of evaluations was 3 each.
Evaluation was performed by the method of Philip et al. (Int J Parasitol. 2005
Nov; 35 (13): 1417-23. Epub 2005 Jul 18). Specifically, it is as follows.
(1) All the gills were extracted.
(2) Sterile seawater was placed in a test tube for 5 minutes and stirred slowly to release the amoeba from the gills.
(3) 2 hours after seeding the petri dish, the amoeba adhering to the petri dish is measured.
(4) The measuring method confirmed the visual field of 10-30, and took the average.
(5) The effect was verified in comparison with the control group.

各披検物質を経口で3日間投与後のアメーバの各視野の平均個数を下記の表4に示す。   Table 4 below shows the average number of amoeba fields after oral administration of each test substance for 3 days.

Figure 2014133720
Figure 2014133720

何も投与しない対照区では、すべての実験に供された魚のエラから多数の寄生虫が分離され、シャーレ底面に付着し、すべての視野で50以上のアメーバが確認できた。シンナムアルデヒドを投与した区の3尾では各視野でアメーバがほとんど認められない、もしくは2個から5個以内であった。ペリルアルデヒドを投与した区の3尾では各視野でアメーバがほとんど認められない、から10個以内であった。ゲラニオールを投与した区の3尾では各視野でアメーバがほとんど認められない、から10個以内であった。
これら3種類の披検物質を投与することにより、エラのアメーバの寄生数が減少した。
In the control group to which nothing was administered, a large number of parasites were isolated from the gills of fish used in all experiments, adhered to the bottom of the petri dish, and more than 50 amoeba could be confirmed in all fields of view. Almost no amoeba was observed in each field of view in the 3 mice treated with cinnamaldehyde, or 2 to 5. The number of amoeba was almost not recognized in each visual field in the 3 tails of the group to which perylaldehyde was administered. The number of amoeba was almost not recognized in each visual field in the 3 fishes in the geraniol-administered group.
By administering these three test substances, the number of gills of amoeba in Ella was reduced.

上記の結果より、これら3種類の化合物を経口投与することにより、アメーバ感染症が制されることが示唆された。このことは、これら3 種類の披検物質の経口投与により、確実に腸管内から吸収され、エラに分布し、排出され寄生虫を殺したことを示唆している。このため、経口投与によりアメーバ症を抑えることは可能だと思われる。   From the above results, it was suggested that these three kinds of compounds are orally administered to control amoeba infection. This suggests that by oral administration of these three test substances, they were reliably absorbed from the intestinal tract, distributed in gills, excreted and killed parasites. Therefore, it seems possible to suppress amoebiasis by oral administration.

本発明により提供される魚類のアメーバ駆除方法、魚類のアメーバ駆除用薬浴液、魚類用のアメーバ駆除剤および飼料は、サーモン等の養殖魚のエラに寄生するアメーバの駆除等に利用可能である。   The fish amoeba extermination method, the fish amoeba extermination chemical bath solution, the fish amoeba extermination agent and the feed provided by the present invention can be used for exterminating amoeba parasitizing the salmon and other cultured fish.

Claims (14)

魚類に寄生するアメーバ属の原生生物を駆除する方法であって、
有効成分として、チモール、シンナムアルデヒド、ペリルアルデヒド、ゲラニオールならびにこれらの異性体および誘導体からなる群より選択される1または複数種の化合物を、0.3〜20ppmの濃度で水中に溶解または分散させた薬浴液中に魚類を浸漬することを特徴とする魚類のアメーバ駆除方法。
A method of combating amoebial protists that parasitize fish,
As an active ingredient, one or more compounds selected from the group consisting of thymol, cinnamaldehyde, perillaldehyde, geraniol and isomers and derivatives thereof were dissolved or dispersed in water at a concentration of 0.3 to 20 ppm. A method for combating fish amoeba, comprising immersing fish in a chemical bath.
前記水が淡水または海水であることを特徴とする請求項1記載の魚類のアメーバ駆除方法。   The fish amoeba extermination method according to claim 1, wherein the water is fresh water or seawater. 前記水が淡水であることを特徴とする請求項2記載の魚類のアメーバ駆除方法。   The fish amoeba extermination method according to claim 2, wherein the water is fresh water. 魚類に寄生するアメーバ属の原生生物を駆除する方法であって、
有効成分として、チモール、シンナムアルデヒド、ペリルアルデヒド、ゲラニオールならびにこれらの異性体および誘導体からなる群より選択される1または複数種の化合物を含む組成物を魚類に経口投与し、または摂食させることを特徴とする魚類のアメーバ駆除方法。
A method of combating amoebial protists that parasitize fish,
A composition comprising one or more compounds selected from the group consisting of thymol, cinnamaldehyde, perillaldehyde, geraniol and isomers and derivatives thereof as an active ingredient is orally administered or fed to fish. Characteristic amoeba extermination method for fish.
前記組成物に含まれる前記化合物の含有量が50〜4000ppmであることを特徴とする請求項4記載の魚類のアメーバ駆除方法。   The fish amoeba extermination method according to claim 4, wherein the content of the compound contained in the composition is 50 to 4000 ppm. 前記魚類が、サケ科(Salmoniformes)サケ目(Salmonidae)に属するものであることを特徴とする請求項1から5のいずれか1項記載の魚類のアメーバ駆除方法。   6. The fish amoeba extermination method according to any one of claims 1 to 5, wherein the fish belongs to the family Salmoniformes (Salmonidae). 前記原生生物がNeoparamoeba spp.であることを特徴とする請求項1から6のいずれか1項記載の魚類のアメーバ駆除方法。   7. The fish amoeba extermination method according to any one of claims 1 to 6, wherein the protist is Neoparamoeba spp. 魚類に寄生するアメーバ属の原生生物を駆除するために用いられる、水中に有効成分を溶解または分散させた薬浴液であって、
前記有効成分は、チモール、シンナムアルデヒド、ペリルアルデヒド、ゲラニオールならびにこれらの異性体および誘導体からなる群より選択される1または複数種の化合物であり、
前記有効成分の濃度が0.3〜20ppmであることを特徴とする魚類のアメーバ駆除用薬浴液。
A medicinal bath solution in which an active ingredient is dissolved or dispersed in water, used to control amoebial protists that parasitize fish.
The active ingredient is one or more compounds selected from the group consisting of thymol, cinnamaldehyde, perillaldehyde, geraniol and isomers and derivatives thereof,
A medicinal bath solution for controlling amoebic fish, wherein the concentration of the active ingredient is 0.3 to 20 ppm.
前記水が淡水であることを特徴とする請求項8記載の魚類のアメーバ駆除用薬浴液。   9. The fish bath solution for controlling amoeba of fish according to claim 8, wherein the water is fresh water. チモール、シンナムアルデヒド、ペリルアルデヒド、ゲラニオールならびにこれらの異性体および誘導体からなる群より選択される1または複数種の化合物を有効成分として含むことを特徴とする魚類用のアメーバ駆除剤。   An amoebic control agent for fish, comprising as an active ingredient one or more compounds selected from the group consisting of thymol, cinnamaldehyde, perillaldehyde, geraniol and isomers and derivatives thereof. 前記有効成分の含有量が50〜4000ppmであることを特徴とする請求項10記載の魚類用のアメーバ駆除剤。   The amoeba control agent for fish according to claim 10, wherein the content of the active ingredient is 50 to 4000 ppm. チモール、シンナムアルデヒド、ペリルアルデヒド、ゲラニオールならびにこれらの異性体および誘導体からなる群より選択される1または複数種の化合物を含むことを特徴とする魚類用の飼料。   A fish feed comprising one or more compounds selected from the group consisting of thymol, cinnamaldehyde, perillaldehyde, geraniol and isomers and derivatives thereof. 前記化合物の含有量が50〜4000ppmであることを特徴とする請求項12記載の魚類用の飼料。   The feed for fish according to claim 12, wherein the content of the compound is 50 to 4000 ppm. サケ科(Salmoniformes)サケ目(Salmonidae)に属する魚類用の飼料であることを特徴とする請求項12または13記載の魚類用の飼料。   14. The fish feed according to claim 12 or 13, which is a fish feed belonging to the Salmoniformes salmonidae (Salmonidae).
JP2013003016A 2013-01-11 2013-01-11 Ameba extermination method for fish, bath medicine for ameba extermination for fish, ameba extermination agent for fish, and feeding stuff Pending JP2014133720A (en)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
JP2013003016A JP2014133720A (en) 2013-01-11 2013-01-11 Ameba extermination method for fish, bath medicine for ameba extermination for fish, ameba extermination agent for fish, and feeding stuff

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
JP2013003016A JP2014133720A (en) 2013-01-11 2013-01-11 Ameba extermination method for fish, bath medicine for ameba extermination for fish, ameba extermination agent for fish, and feeding stuff

Publications (1)

Publication Number Publication Date
JP2014133720A true JP2014133720A (en) 2014-07-24

Family

ID=51412291

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
JP2013003016A Pending JP2014133720A (en) 2013-01-11 2013-01-11 Ameba extermination method for fish, bath medicine for ameba extermination for fish, ameba extermination agent for fish, and feeding stuff

Country Status (1)

Country Link
JP (1) JP2014133720A (en)

Cited By (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2016056520A1 (en) * 2014-10-06 2016-04-14 扶桑化学工業株式会社 Feed for aquatic animals, growth promoter for aquatic animals, and method for raising farmed fish using same
JP2016163558A (en) * 2014-10-06 2016-09-08 扶桑化学工業株式会社 Feed for aquatic animals, growth improving agents for aquatic animals, and methods for rearing cultured fishes using the same feed and agents
WO2017216541A1 (en) * 2016-06-13 2017-12-21 Benchmark Animal Health Limited Treatment. of marine parasite infection
JP2018127491A (en) * 2018-05-11 2018-08-16 地方独立行政法人北海道立総合研究機構 Infectious disease prophylactic agent for salmon fry to be released into river

Cited By (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2016056520A1 (en) * 2014-10-06 2016-04-14 扶桑化学工業株式会社 Feed for aquatic animals, growth promoter for aquatic animals, and method for raising farmed fish using same
JP2016163558A (en) * 2014-10-06 2016-09-08 扶桑化学工業株式会社 Feed for aquatic animals, growth improving agents for aquatic animals, and methods for rearing cultured fishes using the same feed and agents
WO2017216541A1 (en) * 2016-06-13 2017-12-21 Benchmark Animal Health Limited Treatment. of marine parasite infection
JP2018127491A (en) * 2018-05-11 2018-08-16 地方独立行政法人北海道立総合研究機構 Infectious disease prophylactic agent for salmon fry to be released into river

Similar Documents

Publication Publication Date Title
Reed et al. Monogenean parasites of fish
US9320771B2 (en) TTO-based wide spectrum therapeutics, disinfectants and anesthetics for use in aquaculture
Zhang et al. The efficacy of four common anthelmintic drugs and traditional Chinese medicinal plant extracts to control Dactylogyrus vastator (Monogenea)
Kamble et al. The efficacy of clove oil as anesthetic in common carp (Cyprinus carpio) and its potential metabolism reducing capacity
Guo et al. The effects of garlic-supplemented diets on antibacterial activities against Photobacterium damselae subsp. piscicida and Streptococcus iniae and on growth in Cobia, Rachycentron canadum
Wafer et al. Fish lice (Argulus japonicus) in goldfish (Carassius auratus)
AU2017373823B2 (en) Treatment for removing ectoparasites from fish
Nagasawa Sea lice, Lepeophtheirus salmonis and Caligus orientalis (Copepoda: Caligidae), of wild and farmed fish in sea and brackish waters of Japan and adjacent regions: a review
KR101817817B1 (en) Fish parasite extermination agent and extermination method
JP2014133720A (en) Ameba extermination method for fish, bath medicine for ameba extermination for fish, ameba extermination agent for fish, and feeding stuff
TWI343807B (en) Materials and methods for improving shellfish health, immunity and growth
Jithendran et al. Crustacean parasites and their management in brackishwater fi nfi sh culture
JP2020096599A (en) Fish ectoparasite disinfestation method using low density hydrogen peroxide water
Jaafar et al. Comparative efficacies of sodium percarbonate, peracetic acid, and formaldehyde for control of Ichthyobodo necator—an ectoparasitic flagellate from rainbow trout
NO20100234A1 (en) Fish lice removal product.
Suzuki et al. Efficacy of green tea extract on removal of the ectoparasitic flagellate Ichthyobodo necator from chum salmon, Oncorhynchus keta, and masu salmon, O. masou
CN108721345B (en) Compound preparation for treating ichthyophthiriasis of bulk freshwater fish
Koyuncu The First Record ofArgulus japonicus Thiele, 1900 Infestations on Telescope fish (Carassius auratus) of Mersin in Turkey
KR101850697B1 (en) Composition for preventing or treating scuticociliatosis in fishes, and natural feed having the same
Toksen et al. Treatment Trials Of Parasites Of Sea Bass (Dicentrarchus labrax) and Sea Bream (Sparus Aurata) in Turkey
EP3801023A1 (en) Treatment for removing ectoparasites from fish
CN105267237B (en) A kind of compound formulation for being used to treat large yellow croaker stimulation cryptocaryoniosis
CN104288131A (en) Application of eugenol for killing ichthyophthirius multifiliis
Kizak et al. The effects of clove oil on adult males and females of rainbow trouts(Oncorhynchus mykiss) and brown trouts (Salmo trutta fario)
Mawardi et al. Curcuma xanthorrhiza Roxb.: Control gyrodactyliasis in catfish Clarias gariepinus