JP2014024817A

JP2014024817A - Preventive or therapeutic agent for chronic renal failure

Info

Publication number: JP2014024817A
Application number: JP2012167940A
Authority: JP
Inventors: Makoto Anraku; 誠安楽; Hisao Tomita; 久夫冨田; Toru Maruyama; 徹丸山; Masaki Odagiri; 優樹小田切; Yuuji Maesaki; 祐二前崎
Original assignee: Nippon Kayaku Co Ltd
Current assignee: Nippon Kayaku Co Ltd
Priority date: 2012-07-30
Filing date: 2012-07-30
Publication date: 2014-02-06

Abstract

PROBLEM TO BE SOLVED: To solve the problem in which: treatment of chronic renal failure requires maintenance of renal function as well as management of the risk of cardiovascular diseases caused by oxidative stress in the blood vessel; and preventive or therapeutic agent for chronic renal failure that suppresses exacerbation of pathology of chronic renal failure is needed.SOLUTION: The preventive or therapeutic agent containing chitosan can reduce the blood concentration of indoxyl sulfuric acid, an uremic substance in chronic renal failure as well as a causative substance inducing an environment of oxidative stress, to suppress progress of pathology of chronic renal failure.

Description

本発明は、キトサンを配合した製剤に関するものであり、摂取することにより、腎機能障害の指標である血清クレアチニン濃度を低下させるだけでなく、生体内酸化促進効果を持つ尿毒症物質であるインドキシル硫酸濃度を低下させ、血液中酸化の指標である酸化アルブミンを顕著に低下させることにより、慢性腎不全の進行を抑制する慢性腎不全予防剤又は慢性腎不全治療剤に関する。 The present invention relates to a preparation containing chitosan, and ingestion not only lowers serum creatinine concentration, which is an index of renal dysfunction, but also indoxyl, a uremic substance that has an in vivo oxidation promoting effect. The present invention relates to a preventive agent for chronic renal failure or a therapeutic agent for chronic renal failure, which suppresses the progression of chronic renal failure by lowering the concentration of sulfuric acid and significantly reducing albumin oxide, which is an index of blood oxidation.

わが国の腎臓透析患者数は年々増加し、２００５年末には２５万人を突破した。また、それを反映して、腎不全に関する医療費は糖尿病全体とほぼ等しく年間約１兆５千億円にものぼる。これは実に、医療費全体の約５％を占めている。そのため腎臓疾患治療は、保存期腎不全を適切に管理し、透析への移行を減らすような予防的医療が、生活の質（ＱＯＬ）の向上だけでなく、医療経済的な観点からも切望されている。その際、透析患者における死亡原因の第１位が心不全、心筋梗塞といったいわゆる心血管疾患（ＣＶＤ）であるため、透析予備軍である慢性腎不全患者に対しては、腎機能障害の進展抑制に加え、ＣＶＤのリスク管理を加味した治療戦略が重要視されてきている。事実、透析導入前の腎不全段階においても、血管内皮の肥厚を始めとした種々の血管傷害を生じていることが数多く報告されている。そのため、腎不全患者におけるＣＶＤのマネージメントは、いかに血管傷害を抑制するかに重点が置かれている。 The number of kidney dialysis patients in Japan has increased year by year, surpassing 250,000 at the end of 2005. Reflecting this, the medical expenses related to renal failure are approximately 1.5 trillion yen per year, almost equal to diabetes. This actually accounts for about 5% of all medical costs. Therefore, in the treatment of renal diseases, preventive medicine that appropriately manages conservative renal failure and reduces the shift to dialysis is eagerly desired not only from the viewpoint of improving quality of life (QOL) but also from a medical economic viewpoint. ing. At that time, the most common cause of death in dialysis patients is so-called cardiovascular disease (CVD) such as heart failure and myocardial infarction. In addition, treatment strategies that take risk management of CVD into account have become important. In fact, it has been reported many times that various vascular injuries such as thickening of the vascular endothelium have occurred in the renal failure stage before the introduction of dialysis. Therefore, the management of CVD in patients with renal failure is focused on how to suppress vascular injury.

腎不全は代表的な酸化ストレス疾患であり、腎機能の悪化に、活性酸素種（ＲＯＳ）の過剰産生に起因した酸化ストレスが重要な役割を果たしていることを、数多くの報告が明らかにしている（非特許文献１）。事実、酸化ストレスは、血管平滑筋細胞の肥大や増殖、細胞間物質の遊走や調節に関わっており、動脈硬化症、血管再狭窄を引き起こす要因の１つと位置付けられている（非特許文献２, 非特許文献３）。そのため、これまでの抗酸化治療としてはビタミンＣあるいはＥ製剤を始めとしたＲＯＳスカベンジャーの投与や、グルタチオン、スーパーオキシドジスムターゼ（ＳＯＤ）類似物質といった細胞内抗酸化物質を用いて、いかにＲＯＳを消去するかという点に関心が集まっていた（非特許文献４, 非特許文献５）。しかしながら、これらの抗酸化剤ではＣＶＤの発症及び腎不全の進行を抑制するという明確なエビデンスは得られておらず、現在ではむしろＲＯＳの発生を抑制するような新しいタイプの抗酸化剤の開発が望まれている。 Renal failure is a typical oxidative stress disease, and numerous reports reveal that oxidative stress due to excessive production of reactive oxygen species (ROS) plays an important role in the deterioration of renal function. (Non-Patent Document 1). In fact, oxidative stress is involved in hypertrophy and proliferation of vascular smooth muscle cells, migration and regulation of intercellular substances, and is positioned as one of the factors causing arteriosclerosis and vascular restenosis (Non-patent Document 2, Non-patent document 3). Therefore, as a conventional antioxidant treatment, how to eliminate ROS by using ROS scavengers such as vitamin C or E preparations and intracellular antioxidants such as glutathione and superoxide dismutase (SOD) analogues This has attracted attention (Non-Patent Document 4, Non-Patent Document 5). However, there is no clear evidence that these antioxidants suppress the onset of CVD and the progression of renal failure, and at present, the development of new types of antioxidants that rather suppress the occurrence of ROS has been developed. It is desired.

腎不全時に惹起される酸化ストレスの機序については、生理的、物理的、病態的因子など様々なものが提唱されている。腎不全の酸化ストレスが、他の酸化ストレス疾患と大きく異なる点は、いわゆる"尿毒症物質"と称される体内反応代謝産物の尿中排泄が遅延し、それに伴う蓄積が酸化ストレスをさらに惹起している点である。近年、特に、有機アニオン性尿毒症物質との関係が少しずつ明らかにされ、注目を集めている。有機アニオン性尿毒症物質の1つとして、インドキシル硫酸を挙げることができる。インドキシル硫酸は、食事中のタンパク質の代謝産物と考えられており、消化管で前駆物質のインドールが吸収された後、肝臓で硫酸抱合を受けて生成される。血中では大部分がアルブミンと結合した形で存在しており、代謝を受けずに主に腎臓から排泄される。そのため、腎機能の低下により血清中に高濃度に蓄積するようになり、透析患者では血中濃度が正常時の１００倍近くまで増加することもある（非特許文献６）。また最近、インドキシル硫酸が尿細管上皮細胞やメサンギウム細胞において、ＲＯＳの産生を誘導する可能性が明らかにされ、腎臓におけるインドキシル硫酸と酸化ストレスの関係に注目が集まっている（非特許文献７, 非特許文献８）。さらに、生体内で大部分のインドキシル硫酸が存在している血中、すなわち全身循環系においても、インドキシル硫酸の血中への蓄積が、好中球活性化や内皮細胞内への取り込みによるＮＡＤＰＨオキシダ−ゼの活性化による酸化ストレスを惹起している可能性が明らかにされている（非特許文献９）。 Various mechanisms such as physiological, physical, and pathological factors have been proposed for the mechanism of oxidative stress induced during renal failure. The difference between oxidative stress in renal failure and other oxidative stress diseases is that the urinary excretion of so-called "uremic substances" is delayed in urine, and the accumulation associated with it causes further oxidative stress. It is a point. In recent years, the relationship with organic anionic uremic substances has been revealed little by little, and has attracted attention. One of the organic anionic uremic substances is indoxyl sulfate. Indoxyl sulfate is considered to be a metabolite of protein in the diet, and is produced by sulfate conjugation in the liver after the indole precursor is absorbed in the digestive tract. Most of the blood exists in a form bound to albumin and is excreted mainly from the kidney without being metabolized. For this reason, a decrease in renal function causes accumulation in serum at high concentrations, and blood concentrations in dialysis patients may increase to nearly 100 times that in normal cases (Non-patent Document 6). Recently, it has been clarified that indoxyl sulfate induces ROS production in tubular epithelial cells and mesangial cells, and attention is focused on the relationship between indoxyl sulfate and oxidative stress in the kidney (Non-patent Document 7). , Non-Patent Document 8). Furthermore, in the blood in which most indoxyl sulfate is present in vivo, that is, in the systemic circulation system, the accumulation of indoxyl sulfate in the blood is due to neutrophil activation and uptake into endothelial cells. The possibility of causing oxidative stress due to activation of NADPH oxidase has been revealed (Non-patent Document 9).

腎不全をはじめとした酸化ストレス疾患の測定法として、血液中の酸化ストレス変動に最も敏感なアルブミンの酸化状態を指標とすることで、健常人から各種疾患患者まで幅広い対象範囲での測定を可能とする測定系が確立されている（非特許文献１０）。また、このアルブミンが酸化された状態である酸化アルブミンは、自ら酸化されるだけでなく、血液中の好中球を活性化し、生体内酸化をさらに促進させる可能性が明らかにされている（非特許文献１１）。 As a method for measuring oxidative stress diseases such as renal failure, it is possible to measure in a wide range of subjects from healthy people to patients with various diseases by using the oxidation state of albumin which is most sensitive to oxidative stress fluctuation in blood as an index. Is established (Non-Patent Document 10). Further, it has been clarified that oxidized albumin, which is in an oxidized state of albumin, is not only oxidized by itself, but also activates neutrophils in blood and further promotes in vivo oxidation (non-oxidation) Patent Document 11).

慢性腎不全は、腎臓の慢性の病気のために腎臓の機能が低下し、機能が正常時の３０％以下程度に落ちた状態を示す。腎臓は、老廃物、水分、電解質などを尿として排泄することで体の中の恒常性が保っているが、慢性腎不全の場合この機能が低下し、本来なら尿の中に排泄される尿毒素が体内に蓄積され、尿毒症状があらわれる。初期の段階では疲労感などの症状が現れ、さらに尿毒素の蓄積が進むと食欲不振、吐き気などの消化器症状、頭痛、注意力散漫などの神経系の症状が出る。さらに進行するとけいれんや意識障害を起こす。また、慢性腎不全では腎機能の低下により尿量が減るが、このことにより、むくみや血圧の上昇、また酸の排泄能力の低下により、血液が酸性に傾くアシドーシスを発症することがある。さらに、電解質バランスが高カリウム血症を生じ、エリスロポエチン（造血ホルモン）の分泌減少により貧血になる。慢性腎不全が進行して末期腎不全に至ると、腎臓の機能が極度に低下し、そのままでは生命を維持できなくなるので人工透析か腎臓移植が必要になる。 Chronic renal failure refers to a state in which the kidney function is reduced due to a chronic disease of the kidney, and the function is reduced to about 30% or less of the normal state. The kidneys maintain their homeostasis by excreting waste, water, electrolytes, etc. as urine, but this function declines in chronic renal failure, and uremic toxins that are normally excreted in the urine Elementary body accumulates in the body and uremia symptoms appear. Symptoms such as fatigue appear at an early stage, and further accumulation of uremic toxins causes digestive symptoms such as loss of appetite, nausea, headache, and distraction. Further progression causes convulsions and impaired consciousness. In chronic renal failure, the amount of urine decreases due to a decrease in renal function. This may cause acidosis in which blood tends to be acidic due to swelling, an increase in blood pressure, and a decrease in acid excretion. Furthermore, the electrolyte balance results in hyperkalemia and anemia due to decreased secretion of erythropoietin (hematopoietic hormone). When chronic renal failure progresses to end-stage renal failure, kidney function is extremely reduced and life cannot be maintained as it is, so artificial dialysis or kidney transplantation is necessary.

慢性腎不全は、現在の医学においては完治する疾病でないため、治療に際しては症状の進行を遅らせることに主眼が置かれ、食事療法、並びに薬物療法が採られる。
食事療法は、蛋白質、塩分、カリウム、リンの摂取が制限され、蛋白質制限により相対的に摂取カロリーが減少する。このため、油脂系を主体とした高カロリー食も適用される。これらの食事は味においてはおいしくなく、食事を取ること自体が苦痛になる場合が多い。また、水分に関しては適切な量の摂取が必要であるが、一般的には制限される場合が多く、その上カリウム、リンが多く含まれている野菜・果実は摂取が制限されるため、腎不全の食事療法を行う場合、食物繊維の摂取不足となり、多くの患者が重度の便秘の症状で苦しんでいる実態がある。 Since chronic renal failure is not a completely curable disease in current medicine, the main focus is on delaying the progression of symptoms in the treatment, and dietary therapy as well as drug therapy are employed.
In diet therapy, intake of protein, salt, potassium and phosphorus is restricted, and calorie intake is relatively reduced due to protein restriction. For this reason, high-calorie foods mainly composed of fats and oils are also applied. These meals are not delicious in taste and the eating itself is often painful. In addition, it is necessary to take an appropriate amount of water, but in general, it is often restricted, and in addition, the intake of vegetables and fruits that are high in potassium and phosphorus is restricted. In the case of an incomplete diet, dietary fiber intake is inadequate and many patients suffer from severe constipation symptoms.

一方、薬物療法に関しては、慢性腎不全の進行を遅らせる事と、合併症の予防観点で処方され、降圧薬、利尿薬、クレメジン、活性型ビタミンＤ、リン吸着薬、カリウム吸着薬、エリスロポエチン製剤、重炭酸ナトリウム、ステロイド、免疫抑制剤、抗酸化薬、等が用いられる。特に経口吸着炭薬であるクレメジンは、腎臓に負担となるような尿毒症を直接吸着・排泄する活性炭を主体とした製剤であり、一般的に処方されている。これは、カプセルの場合には、１日３０カプセルという大用量を服用しなければならず、患者に多くの苦痛と負担が生じる。
このように、慢性腎不全は過酷でおいしくない食事療法を続けなければならないこと、その副作用による重度の便秘、投薬による負荷を受け入れざるを得ない。さらに症状が進行した場合は人工透析か腎臓移植を行わなければならず、患者には経済的負担増加とともに、ＱＯＬが著しく低下する。このため、体に負荷のかからず、血中の尿毒素の量を軽減する慢性腎不全予防・治療食品および予防・治療剤が求められている。 On the other hand, as for pharmacotherapy, it is prescribed from the viewpoint of delaying the progression of chronic renal failure and the prevention of complications, antihypertensive, diuretic, cremedin, active vitamin D, phosphorus adsorbent, potassium adsorbent, erythropoietin preparation, Sodium bicarbonate, steroids, immunosuppressants, antioxidants, etc. are used. In particular, Cremedin, which is an orally adsorbed charcoal, is a preparation mainly composed of activated carbon that directly adsorbs and excretes uremia, which is a burden on the kidney, and is generally prescribed. This means that in the case of capsules, a large dose of 30 capsules per day must be taken, resulting in a lot of pain and burden on the patient.
Thus, chronic renal failure has to accept a severe and unpleasant diet, severe constipation due to its side effects, and the burden of medication. In addition, if the symptoms progress, artificial dialysis or kidney transplantation must be performed, and the patient's QOL significantly decreases with increasing economic burden. Therefore, there is a need for a food and a preventive / therapeutic agent for chronic renal failure prevention / treatment that reduces the amount of urine toxin in the blood without burdening the body.

腎機能不全に対するキトサン類の処方が報告されている。すなわち、特許文献１では、糖尿病性腎症予防組成物として、低分子キトサンを用いる事を記載している。これは、平均分子量１０，０００〜３０，０００のキトサンが、ストレプトゾトシン誘発進行性糖尿病マウス、または遺伝性糖尿病マウスであるＳＰＦ雄性ＫＫ’−Ａ’マウスにおいて、尿中アルブミン排泄量の有意な減少や、チオバルビツール酸（ＴＢＡ）反応物質量の低下により腎の酸化ストレスが低減し、糸球体の肥大を抑制することが見出されている。また、同マウスモデルにて、該キトサンの投与が、近位尿細管の巨核化、及び遠位尿細管の突出という腎の病理組織学的変化を抑制することを見出している。しかしながら、これらの結果は、低分子キトサンの経口摂取による、腎組織の病理組織学的変化の抑制作用に基づく知見であり、糖尿病性腎症の予防に限定される効果である。慢性腎不全の原因としては、糖尿病性腎症の他に、慢性糸球体腎炎、腎硬化症と様々な原因がある。すなわち、糖尿病性腎症は慢性腎不全への移行前病態であり、該特許文献は慢性腎不全の病態の進行抑制作用を開示するものではない。
特許文献２には、キトサン鉄錯体がリンとカルシウムのバランスを維持し、腎不全に由来する二次性副甲状腺機能亢進症に対して治療効果を示すことを開示している。しかしながら、これは腎不全に認められるリン成分の除去効果に基づく作用であり、キトサン鉄錯体のリン吸着能に由来する作用である。したがって、腎機能の悪化に寄与する活性酸素種（ＲＯＳ）の過剰産生に起因した酸化ストレスの低減効果を開示するものではない。また、キトサン鉄錯体に関しては、鉄独特の味の悪さがある上、安全性に関しては十分な知見がなく、長期に摂取するためには不適切である。さらに、鉄の過剰摂取は血中の鉄濃度を上昇させ、結果的に活性酸素発生を亢進させる危険性も考えられる。
さらに特許文献３には、キチン・キトサンを含むイカの腱の摂取が、糖尿病性腎症モデルラットに対して、尿中アルブミン濃度の上昇抑制、酸化ストレスマーカーである尿中８−ヒドロキシデオキシグアノシンの上昇抑制、および、腎糸球体領域におけるメザンギウム細胞の比率低下の効果を示すことを記載している。しかしながら、イカの腱自体に含まれるのは殆どがキチンであり、本発明に係るキトサンとは異なる物質である。また、これらの結果は糖尿病モデル動物での知見であり、これらの発見の効果は糖尿病に由来する腎不全に限定されたものである。 Prescription of chitosans for renal dysfunction has been reported. That is, Patent Document 1 describes the use of low-molecular chitosan as a diabetic nephropathy preventing composition. This is because chitosan having an average molecular weight of 10,000 to 30,000 significantly decreased urinary albumin excretion in streptozotocin-induced progressive diabetic mice or hereditary diabetic SPF male KK′-A ′ mice. It has been found that a decrease in the amount of thiobarbituric acid (TBA) reactive substance reduces renal oxidative stress and suppresses glomerular hypertrophy. Moreover, in the same mouse model, it has been found that administration of the chitosan suppresses histopathological changes in the kidney such as meganucleation of the proximal tubule and protrusion of the distal tubule. However, these results are findings based on the inhibitory action of the histopathological change of the renal tissue by the oral intake of low-molecular chitosan, and the effect is limited to the prevention of diabetic nephropathy. In addition to diabetic nephropathy, there are various causes of chronic renal failure such as chronic glomerulonephritis and nephrosclerosis. That is, diabetic nephropathy is a pathological condition before the transition to chronic renal failure, and this patent document does not disclose an effect of inhibiting the progression of the pathological condition of chronic renal failure.
Patent Document 2 discloses that the chitosan iron complex maintains a balance between phosphorus and calcium, and exhibits a therapeutic effect on secondary hyperparathyroidism derived from renal failure. However, this is an action based on the removal effect of the phosphorus component observed in renal failure, and is an action derived from the phosphorus adsorption ability of the chitosan iron complex. Therefore, it does not disclose the effect of reducing oxidative stress caused by excessive production of reactive oxygen species (ROS) that contribute to the deterioration of renal function. In addition, regarding the chitosan iron complex, there is a peculiar taste of iron and there is not enough knowledge about safety, and it is inappropriate for ingestion over a long period of time. Furthermore, there is a risk that excessive intake of iron increases the iron concentration in the blood and consequently increases the generation of active oxygen.
Furthermore, Patent Document 3 discloses that squid tendon containing chitin and chitosan is associated with suppression of urinary albumin concentration increase and urinary 8-hydroxydeoxyguanosine, which is an oxidative stress marker, in diabetic nephropathy model rats. It describes that it has the effect of suppressing elevation and decreasing the ratio of mesangial cells in the glomerular region. However, most of the squid tendon itself contains chitin, which is a substance different from chitosan according to the present invention. In addition, these results are findings in diabetes model animals, and the effects of these findings are limited to renal failure derived from diabetes.

Mastalerz-Migas et al., J Physiol Pharmacol 57: 199-205 (2006), Sasaki et al., J Pharm Pharmacol 58: 1515-25 (2006)Mastalerz-Migas et al., J Physiol Pharmacol 57: 199-205 (2006), Sasaki et al., J Pharm Pharmacol 58: 1515-25 (2006) Rajagopalan et al., J Clin Invest 98: 2572-9 (1996), Weberet al., Circ Res 94: 1219-26 (2004),Rajagopalan et al., J Clin Invest 98: 2572-9 (1996), Weberet al., Circ Res 94: 1219-26 (2004), Taniyama et al., Hypertension 42: 1075-81 (2003)Taniyama et al., Hypertension 42: 1075-81 (2003) McCord et al, Drug Discov Today 9: 781-2 (2004)McCord et al, Drug Discov Today 9: 781-2 (2004) Day et al., Drug Discov Today 9: 557-66 (2004)Day et al., Drug Discov Today 9: 557-66 (2004) Niwa et al., J Lab Clin Med 124: 96-104 (1994)Niwa et al., J Lab Clin Med 124: 96-104 (1994) Gelasco et al., Am J Physiol Renal Physiol 290: 1551-8 (2006)Gelasco et al., Am J Physiol Renal Physiol 290: 1551-8 (2006) Motojima et al., Kidney Int 63: 1671-80 (2003)Motojima et al., Kidney Int 63: 1671-80 (2003) Shimoishi et al., Pharm Res 24:1283-9 (2007)Shimoishi et al., Pharm Res 24: 1283-9 (2007) Anraku et al., Kidney Int. 66:841-8 (2004)Anraku et al., Kidney Int. 66: 841-8 (2004) Mera et al., Biochem Biophys Res Commun. 334:1322-8 (2005)Mera et al., Biochem Biophys Res Commun. 334: 1322-8 (2005)

特開２００６−２０６５０５号公報JP 2006-206505 A 特開平８−２０８４８９号公報Japanese Patent Laid-Open No. 8-208489 特開２００７−３９４０７号公報JP 2007-39407 A

糖尿病性腎症等を契機として結果的に至る慢性腎不全に対して、その病態増悪の進行を抑制する慢性腎不全予防剤または慢性腎不全治療剤を提供する事が求められている。特に慢性腎不全の治療に関し、慢性期への移行期、慢性期、及び人工透析への移行期に亘り、尿毒症を抑制すると共に、酸化ストレスに起因する心血管疾患リスクを管理する必要がある。そこで腎不全に特徴的な尿毒症物質を取り除き、酸化ストレス環境を回避できる慢性腎不全予防剤または慢性腎不全治療剤が求められている。すなわち、本発明は、経済的な負荷とＱＯＬの低下を伴う慢性腎不全患者に対して、尿毒症物質であるインドキシル硫酸を除去し、酸化ストレス環境を改善し、慢性腎不全の病態進行を抑制できる慢性腎不全予防剤または慢性腎不全治療剤を提供する事にある。 There is a need to provide a chronic renal failure preventive agent or a therapeutic agent for chronic renal failure that suppresses the progression of disease state progression for chronic renal failure resulting from diabetic nephropathy and the like. Especially for the treatment of chronic renal failure, it is necessary to control uremia and manage the risk of cardiovascular disease caused by oxidative stress throughout the transition to chronic phase, chronic phase, and transition to artificial dialysis . Therefore, there is a need for a chronic renal failure preventive agent or a chronic renal failure therapeutic agent that can remove uremic substances characteristic of renal failure and avoid an oxidative stress environment. That is, the present invention removes indoxyl sulfate, which is a uremic substance, for patients with chronic renal failure accompanied by an economic burden and a decrease in QOL, improves the oxidative stress environment, and progresses the pathology of chronic renal failure. It is to provide a chronic renal failure preventive agent or a chronic renal failure therapeutic agent that can be suppressed.

本発明者らは、キトサンの経口摂取が、腎機能障害の指標である血清クレアチニン濃度を低下させるだけでなく、生体内酸化促進効果を有する尿毒症物質であるインドキシル硫酸の血中濃度を低下させ、結果として血液中酸化の指標である酸化アルブミン濃度を著しく低減させることを見出し、本発明に至った。すなわち本発明は以下の内容を要旨とする。
（１）キトサンを含む慢性腎不全予防剤又は慢性腎不全治療剤。
（２）前記キトサンの平均分子量が３万より大きいキトサンであることを特徴とする前記（１）に記載の慢性腎不全予防剤又は慢性腎不全治療剤。
（３）前記キトサンの脱アセチル化度が７０％以上であることを特徴とする前記（１）または（２）に記載の慢性腎不全予防剤又は慢性腎不全治療剤。
（４）キトサン摂取量が１日あたり０．０１〜５０．０ｇであることを特徴とする前記（１）〜（３）の何れか１項に記載の慢性腎不全予防剤又は慢性腎不全治療剤。
（５）キトサンを含む血中インドキシル硫酸低下剤。
（６）前記キトサンの平均分子量が３万より大きいキトサンであることを特徴とする前記（５）に記載の血中インドキシル硫酸低下剤。
（７）キトサンを含む慢性腎不全疾患に対する抗酸化作用剤。
（８）慢性腎不全の治療において、血中インドキシル硫酸濃度及び／または血中アルブミン酸化度を指標とすることを含む慢性腎不全の治療方法。 The present inventors have shown that oral intake of chitosan not only decreases serum creatinine concentration, which is an indicator of renal dysfunction, but also decreases blood concentration of indoxyl sulfate, a uremic substance that has an in vivo oxidation promoting effect. As a result, the present inventors have found that the concentration of oxidized albumin, which is an indicator of blood oxidation, can be significantly reduced, leading to the present invention. That is, the gist of the present invention is as follows.
(1) An agent for preventing or treating chronic renal failure, comprising chitosan.
(2) The agent for preventing or treating chronic renal failure according to (1) above, wherein the chitosan has an average molecular weight of more than 30,000.
(3) The chronic renal failure preventive agent or chronic renal failure therapeutic agent according to (1) or (2) above, wherein the chitosan has a deacetylation degree of 70% or more.
(4) The chronic renal failure preventive agent or chronic renal failure treatment according to any one of (1) to (3) above, wherein chitosan intake is 0.01 to 50.0 g per day Agent.
(5) A blood indoxyl sulfate-lowering agent containing chitosan.
(6) The blood indoxyl sulfate lowering agent according to (5) above, wherein the chitosan has an average molecular weight greater than 30,000.
(7) Antioxidant for chronic renal failure disease containing chitosan.
(8) A method for treating chronic renal failure, which comprises using blood indoxyl sulfate concentration and / or blood albumin oxidation level as an index in the treatment of chronic renal failure.

キトサンを、慢性腎不全患者あるいは糖尿病等により腎機能が低下しはじめたヒトが経口摂取することにより、消化管内で分泌あるいは産生された尿毒症物質であるインドキシル硫酸を吸着し、これを糞中に排泄させることにより血中インドキシル硫酸濃度を低下させ、尿毒症症状の改善することができる。結果として、腎臓透析治療の導入期を遅延することができる。また、酸化ストレスにより病態進行が懸念される腎不全において、腎臓及び血中において酸化ストレスを惹起する原因物質であるインドキシル硫酸を、先の消化管内でのキトサンへの吸着により血中内へのインドキシル硫酸の移行を抑制することで、血中酸化ストレスの軽減を達成できる。最終的には心血管疾患（ＣＶＤ）発症リスクの軽減できる可能性が示唆される。すなわち、キトサンを有効成分として含む慢性腎不全の進行抑制剤を提供する事ができる。
また、キトサンはテンペ等の発酵食品に使用されるクモノスカビの細胞壁成分で十分な食経験があり、特定保健用食品や食品添加物にも使用される極めて安全性の高い食物繊維である。また、多くのキトサンがカニから製造されるが、それらのキトサンは食物繊維でありながら、植物由来ではないためリン・カリウム含量も少なく腎不全の患者に負荷をかけない。すなわち、本発明の実施は、慢性腎不全患者においては安心して摂取でき、医薬品のように体に負荷をかけずに高い腎不全の治療・予防効果が得られる。 When chitosan is taken orally by chronic renal failure patients or humans whose renal function has begun to decline due to diabetes, etc., adsorbed indoxyl sulfate, a uremic substance secreted or produced in the digestive tract, is absorbed in feces. By excreting in the blood, the blood indoxyl sulfate concentration can be lowered, and uremia symptoms can be improved. As a result, the introduction phase of renal dialysis treatment can be delayed. Moreover, in renal failure where pathological progression is a concern due to oxidative stress, indoxyl sulfate, a causative agent that causes oxidative stress in the kidney and blood, is absorbed into the blood by adsorption to chitosan in the digestive tract. Reduction of blood oxidative stress can be achieved by suppressing the transfer of indoxyl sulfate. Ultimately, the possibility of reducing the risk of developing cardiovascular disease (CVD) is suggested. That is, a progression inhibitor of chronic renal failure containing chitosan as an active ingredient can be provided.
Chitosan is a highly safe dietary fiber that is used in fermented foods such as tempeh and is a cell wall component of kumonskabi that has sufficient dietary experience and is also used in foods for specified health use and food additives. Although many chitosans are produced from crabs, these chitosans are dietary fiber but not derived from plants, so they have low phosphorus and potassium content and do not place a burden on patients with renal failure. In other words, the practice of the present invention can be taken with peace of mind in patients with chronic renal failure, and a high therapeutic / preventive effect on renal failure can be obtained without imposing a burden on the body like pharmaceuticals.

腎不全モデルラットに本発明のキトサンを含有する飼料並びに無添加飼料を投与し、摂取４週間後の血中インドキシル硫酸濃度を示す図である。It is a figure which shows the blood indoxyl sulfate density | concentration 4 weeks after ingesting the feed containing a chitosan of this invention and an additive-free feed to a renal failure model rat. 腎不全モデルラットに本発明のキトサンを含有する飼料並びに無添加飼料を投与し、摂取４週間後の血中アルブミン酸化度を示す図である。It is a figure which shows the albumin oxidation degree in blood 4 weeks after ingesting the diet containing chitosan of this invention and an additive-free diet to a renal failure model rat. 腎不全モデルラットに本発明のキトサンを含有する飼料並びに無添加飼料を投与した際の、血中インドキシル硫酸と血中アルブミン酸化度の関連性を示す図である。It is a figure which shows the relationship between blood indoxyl sulfate and a blood albumin oxidation degree when the diet containing the chitosan of this invention and an additive-free diet are administered to a renal failure model rat. キトサン及びカルボキシメチルセルロースのインドキシル硫酸吸着率を示す図である。It is a figure which shows the indoxyl sulfate adsorption rate of chitosan and carboxymethylcellulose.

本発明の慢性腎不全予防剤または慢性腎不全治療剤の有効成分であるキトサンは、キチンの脱アセチル化物として調製される。キトサンの製造方法は特に規定はないが、一般的には、カニやエビの外骨格を希塩酸で処理して脱カルシウムを行い、その後、ｐＨが中性になるまで水洗後、希水酸化ナトリウムで脱蛋白を行うことでキチンを製造する。その後、該キチンを３０〜４５％の濃水酸化ナトリウムで加熱処理して脱アセチル反応を行ない、水酸化ナトリウムが残存しないように十分に水洗することで、目的のキトサンを得ることができる。このとき、脱カルシウム工程の希塩酸濃度や反応温度および反応時間、脱アセチル工程の水酸化ナトリウムの濃度や反応温度および反応時間を変えることで、様々な分子量、脱アセチル化度の該キトサンを製造することができる。
たとえば、平均分子量３万程度のキトサンを製造する場合は、脱カルシウム工程での希塩酸濃度を９％（Ｗ／Ｗ）とし、反応温度を７０℃、反応時間を３時間とすることでキチンを得ることができる。さらに、得られたキチンを５０％（Ｗ／Ｗ）の水酸化ナトリウム水溶液で、反応温度１１０℃、反応時間を３時間で脱アセチル化反応を行うことでとすることで、平均分子量約３万のキトサンを得ることができる。さらに分子量が高いキトサンを得る場合は、上述脱カルシウム工程の希塩酸濃度を９％（Ｗ／Ｗ）から８〜５％程度に濃度を下げるか、反応温度を７０℃から３０℃に下げる、あるいは反応時間を３時間より短くするなど反応条件を緩和することで、分子量が５万より大きなキトサンを製造することができる。
本発明は、経口摂取可能なキトサンであれば特に限定されるものではないが、比較的高分子量のキトサンの方が、インドキシル硫酸に対する吸着能が高く血中インドキシル硫酸低下効果が高い事から、好ましいキトサンである。好ましくは平均分子量が１万以上のキトサンであり、より好ましくは平均分子量が３万以上のキトサンであり、特に好ましくは平均分子量が３万より大きいキトサンの使用が望ましい。平均分子量が３万より大きいキトサンとして、特に規定するならば、平均分子量が３万より大きく、３００万以下のキトサンを用いる事が好ましい。より好ましくは平均分子量が３万より大きく２００万以下であり、特に好ましくは平均分子量が３万より大きく１５０万以下のキトサンを用いる事である。
得られたキトサンは、乾燥後、摩砕式粉砕機、凍結粉砕機、衝撃式粉砕機、エアージェット式粉砕機、遠心カッター式粉砕機等の粉砕機で粉砕し、希望の目開きのメッシュを装着した篩別機で篩分けすることで、様々な粒径のキトサンを得ることができる。 Chitosan which is an active ingredient of the chronic renal failure preventive agent or chronic renal failure therapeutic agent of the present invention is prepared as a deacetylated product of chitin. The production method of chitosan is not particularly limited, but in general, the exoskeleton of crab or shrimp is treated with dilute hydrochloric acid to decalcify, and then washed with water until the pH becomes neutral, and then with dilute sodium hydroxide. Chitin is produced by deproteinization. Thereafter, the chitin is heat-treated with 30 to 45% concentrated sodium hydroxide to carry out a deacetylation reaction, and sufficiently washed with water so that sodium hydroxide does not remain, whereby the intended chitosan can be obtained. At this time, the chitosan having various molecular weights and deacetylation degrees is produced by changing the concentration of dilute hydrochloric acid in the decalcification step, reaction temperature and reaction time, and the concentration of sodium hydroxide in the deacetylation step, reaction temperature and reaction time. be able to.
For example, when producing chitosan having an average molecular weight of about 30,000, chitin is obtained by setting the dilute hydrochloric acid concentration in the decalcification step to 9% (W / W), the reaction temperature to 70 ° C., and the reaction time to 3 hours. be able to. Further, the obtained chitin is subjected to a deacetylation reaction with a 50% (W / W) aqueous sodium hydroxide solution at a reaction temperature of 110 ° C. and a reaction time of 3 hours. You can get chitosan. In order to obtain chitosan having a higher molecular weight, the dilute hydrochloric acid concentration in the decalcification step is lowered from 9% (W / W) to about 8 to 5%, or the reaction temperature is lowered from 70 ° C. to 30 ° C. Chitosan having a molecular weight greater than 50,000 can be produced by relaxing the reaction conditions such as shortening the time to less than 3 hours.
The present invention is not particularly limited as long as it is orally ingestible chitosan, but relatively high molecular weight chitosan has a higher ability to adsorb indoxyl sulfate and has a higher effect of reducing blood indoxyl sulfate. Preferred chitosan. Preferred is chitosan having an average molecular weight of 10,000 or more, more preferred is chitosan having an average molecular weight of 30,000 or more, and particularly preferred is use of chitosan having an average molecular weight of more than 30,000. If chitosan having an average molecular weight of more than 30,000 is specifically defined, it is preferable to use chitosan having an average molecular weight of more than 30,000 and 3 million or less. More preferably, chitosan having an average molecular weight of more than 30,000 and not more than 2 million is particularly preferable, and an average molecular weight of more than 30,000 and not more than 1.5 million is used.
The obtained chitosan is dried and then pulverized with a pulverizer such as a grinding pulverizer, freeze pulverizer, impact pulverizer, air jet pulverizer, centrifugal cutter pulverizer, etc. By sieving with the attached sieving machine, chitosan with various particle sizes can be obtained.

なお、キトサンの平均分子量の測定方法は、ゲル浸透クロマトグラフ(ＧＰＣ)法により測定されるＷ（高分子の総重量）、Ｗｉ(ｉ番目の高分子の重量)、Ｍｉ（ｉ番目の溶出時間における分子量）、Ｈｉ（ｉ番目の溶出時間における高さ）のパラメーターにより以下の計算式１により算出される重量平均分子量；Ｍｗで規定される。
［式１］

本発明のキトサンの平均分子量は、キトサン試料を０．５％酢酸に溶解した試料を、プルラン標準品を用いてゲル浸透クロマトグラフ(ＧＰＣ)により測定した重量平均分子量を採用した。 The measurement method of the average molecular weight of chitosan is W (total weight of polymer), Wi (weight of i-th polymer), Mi (i-th elution time) measured by gel permeation chromatography (GPC) method. The weight average molecular weight calculated by the following calculation formula 1 according to the parameters of the molecular weight) and Hi (height at the i-th elution time); defined by Mw.
[Formula 1]

As the average molecular weight of the chitosan of the present invention, a weight average molecular weight obtained by measuring a sample obtained by dissolving a chitosan sample in 0.5% acetic acid by gel permeation chromatography (GPC) using a pullulan standard product was adopted.

本発明で使用されるキトサンは、対応するキチンから脱アセチル化処理されて調製され、少なくとも５０％以上の脱アセチル化処理されたものであれば特に問題なく使用することができる。好ましくは脱アセチル化度が７０％以上のキトサンの使用が望ましい。より好ましくは脱アセチル化度が８０％以上であり、特に好ましくは脱アセチル化度が８５％以上のものを用いることが望ましい。
なお、得られたキトサンの脱アセチル化度は、キトサンを０．５％酢酸で溶解し、トルイジンブルーを指示薬として１／４００Ｎポリビニル硫酸カリウム（和光純薬工業製）をもちいてコロイド滴定を行い、遊離のアミノ基のモル数を測定することで算出する事ができる。 The chitosan used in the present invention can be used without any particular problem as long as it is prepared by deacetylation from the corresponding chitin and is at least 50% deacetylated. It is preferable to use chitosan having a degree of deacetylation of 70% or more. More preferably, the degree of deacetylation is 80% or more, and particularly preferably, the degree of deacetylation is 85% or more.
The degree of deacetylation of the obtained chitosan was determined by dissolving the chitosan with 0.5% acetic acid and conducting colloidal titration using 1 / 400N potassium potassium sulfate (manufactured by Wako Pure Chemical Industries) using toluidine blue as an indicator. It can be calculated by measuring the number of moles of free amino groups.

本発明のキトサンは、粒径が５００μｍ以下の粉末状キトサンを用いる事が好ましい。粒径は篩分け法により規定される。粒径５００μｍ以下のキトサンは、脱アセチル化反応後、摩砕式粉砕機、凍結粉砕機、衝撃式粉砕機、エアージェット式粉砕機、遠心カッター式粉砕機等の粉砕機で粉砕し、目開き５００μｍのメッシュを装着した篩別機で篩分けすることで、得ることができる。 The chitosan of the present invention is preferably powdered chitosan having a particle size of 500 μm or less. The particle size is defined by a sieving method. Chitosan with a particle size of 500 μm or less is pulverized with a pulverizer such as a grinding pulverizer, freeze pulverizer, impact pulverizer, air jet pulverizer, centrifugal cutter pulverizer, etc. after the deacetylation reaction. It can be obtained by sieving with a sieving machine equipped with a 500 μm mesh.

キトサンを摂取する方法としては、得られたキトサンをそのまま水等で懸濁して摂取して良い。しかしながら、キトサン自体が水に溶けないため、ザラツキ感があり摂取しにくい場合がある。摂取しやすい形態としては、キトサンに適当な賦形剤を添加し、摂取し易い製剤に調製して摂取する事が好ましい。例えば、キトサンに乳糖やセルロース等の賦形剤を加え、必要に応じてメチルセルロース等の結着剤を添加して、造粒することで顆粒剤を調製できる。また、該顆粒剤にグリセリン脂肪酸エステルや脂肪酸塩などの滑沢剤を添加し、錠剤に加工することも可能である。また、そのままゼラチン等のハードカプセルに充填したり、油に懸濁後ソフトカプセルに充填したりすることも可能である。
また、キトサンを小麦粉に添加して、パンまたはうどん等の麺類に加工することや、米と混合し炊飯してキトサン配合白米に加工して摂取しても良い。これらのキトサン添加食品は、摂取しやすい形態である。しかしながら、一方で、小麦や米由来の蛋白質が含まれているため、蛋白質の摂取量管理が必要な食事療法を行なっている慢性腎不全患者において、キトサン添加食品による摂取は注意が必要である。 As a method of ingesting chitosan, the obtained chitosan may be ingested as it is suspended in water or the like. However, since chitosan itself does not dissolve in water, it may be rough and difficult to take. As a form that is easy to ingest, it is preferable to add a suitable excipient to chitosan, prepare a preparation that is easy to ingest, and ingest. For example, granules can be prepared by adding excipients such as lactose and cellulose to chitosan, adding a binder such as methylcellulose as necessary, and granulating. It is also possible to add lubricants such as glycerin fatty acid esters and fatty acid salts to the granules and process them into tablets. It is also possible to fill a hard capsule such as gelatin as it is, or a soft capsule after being suspended in oil.
Moreover, chitosan may be added to wheat flour and processed into noodles such as bread or udon, or mixed with rice, cooked and processed into chitosan-containing white rice for consumption. These chitosan-added foods are easy to ingest. However, on the other hand, since wheat and rice-derived proteins are contained, in patients with chronic renal failure undergoing dietary therapy that requires protein intake control, caution is required when taking food with chitosan-added food.

本発明の有効成分であるキトサンを慢性腎不全の予防または治療に用いる場合は、１日あたり０．０１〜５０ｇを経口的に投与すれば良い。好ましくは１日あたり０．１〜３０ｇを経口摂取する。より好ましくは１日あたり０．５〜１０ｇを経口的に摂取することが挙げられる。経口摂取において、１日１回に所定量を投与しても良いし、数回に分割して投与しても良い。その場合の投与製剤剤形としては、錠剤、粉末剤、顆粒剤、カプセル剤、液剤等、通常の製剤学的に汎用されている製剤とすることができる。従来、慢性腎不全治療剤として、クレメジン製剤が慢性腎不全の進行を抑制する目的で用いられている。このクレメジンは、高純度の多孔性球状活性炭からなる経口吸着炭で、消化管で分泌または腸管で産生される尿毒症毒素を吸着し、便とともに体外に排泄することにより、尿毒症症状の改善や透析導入の遅延をもたらすものである。この製剤は、通常、成人は、1日６ｇ（２００ｍｇカプセルとして３０カプセル、または２ｇ／包の顆粒製剤として３包）を３回に分割し服用する。この服用量は通常の医薬品と比較するとかなり多い服用量であり、患者の負担も大きい。これに対し、本発明のキトサンは服用し易いものであり、慢性腎不全患者に負担なく、長期に亘り摂取できるものである。 When chitosan which is an active ingredient of the present invention is used for prevention or treatment of chronic renal failure, 0.01 to 50 g per day may be administered orally. Preferably, 0.1 to 30 g per day is taken orally. More preferably, 0.5 to 10 g per day is taken orally. In oral ingestion, a predetermined amount may be administered once a day, or divided into several times. In this case, the dosage form of the preparation may be an ordinary pharmaceutical formulation such as tablets, powders, granules, capsules, and liquids. Conventionally, as a therapeutic agent for chronic renal failure, cremedin preparations have been used for the purpose of suppressing the progression of chronic renal failure. This cremedin is an orally adsorbed charcoal made of high-purity porous spherical activated carbon that adsorbs uremic toxins secreted in the digestive tract or produced in the intestinal tract and excretes it outside the body together with stool. This delays the introduction of dialysis. In general, for adults, 6 g (30 capsules as 200 mg capsules, or 3 capsules as 2 g / pack granules) is divided into three doses per day. This dose is considerably higher than that of ordinary pharmaceuticals, and the burden on the patient is large. In contrast, the chitosan of the present invention is easy to take and can be taken over a long period of time without burdening patients with chronic renal failure.

慢性腎不全の予防効果及び治療効果の指標として、血中クレアチニン値、血中尿素窒素（ＢＵＮ）値等が知られている。一方、インドキシル硫酸は、体内ではトリプトファン由来のインドールが、肝臓で硫酸化されて合成される尿毒症毒素として知られ、腎機能低下時において高い血中濃度を示す物質である。インドキシル硫酸は、他の尿毒症物質と同様に腎障害の進展因子となる事が疑われる。すなわち、インドキシル硫酸が腎臓組織において、活性酸素の誘導、ラジカルスカベンジャーの減少を引き起こすことが知られており、腎の線維化及び糸球体硬化などへ関与することが考えられ、腎障害を悪化・進展させるリスク因子となる可能性がある。したがって、慢性腎不全の進行抑制として、血中インドキシル硫酸濃度の上昇抑制を課題として考える事ができる。
一方、血液中の酸化ストレス環境変化の指標として、血液中の酸化ストレス変動に最も敏感なアルブミンの酸化状態を指標とし、酸化アルブミンを酸化ストレス疾患のマーカーとすることが知られている。血中酸化ストレス状態が高い場合、心血管疾患（ＣＶＤ）の発症リスクが高まり、慢性腎不全の進行を促す原因となる。そこで、慢性腎不全の進行抑制には血中酸化ストレス状態の軽減を要するものであり、血中抗酸化作用を有する薬剤投与が考えられる。 Blood creatinine levels, blood urea nitrogen (BUN) levels, and the like are known as indicators of preventive and therapeutic effects for chronic renal failure. On the other hand, indoxyl sulfate is known as a uremic toxin in which indole derived from tryptophan is synthesized in the body by sulfation in the liver, and is a substance exhibiting a high blood concentration when renal function is lowered. Like other uremic substances, indoxyl sulfate is suspected to be a progressive factor of kidney damage. In other words, indoxyl sulfate is known to cause induction of active oxygen and decrease of radical scavenger in kidney tissue, and may be involved in renal fibrosis and glomerulosclerosis. It can be a risk factor for progress. Therefore, the suppression of the increase in blood indoxyl sulfate concentration can be considered as a problem as the suppression of the progression of chronic renal failure.
On the other hand, it is known that, as an index of changes in the oxidative stress environment in blood, the oxidation state of albumin most sensitive to oxidative stress fluctuations in blood is used as an index, and oxidized albumin is used as a marker of oxidative stress disease. If the blood oxidative stress state is high, the risk of developing cardiovascular disease (CVD) is increased, which causes the progression of chronic renal failure. Therefore, in order to suppress the progression of chronic renal failure, it is necessary to reduce the blood oxidative stress state, and administration of a drug having blood antioxidant activity is conceivable.

本発明者らは、キトサンの経口摂取が、血中インドキシル硫酸濃度を低下させる効果を有する事を見出した。すなわち本発明は、キトサンの血中インドキシル硫酸濃度の低下作用という新たな薬理活性を含む属性を見出した事に基づくものであり、キトサンを有効成分として含む血中インドキシル硫酸低下剤をその要旨とする。また、本発明の別の態様として、キトサンの経口摂取が、血中の酸化ストレス軽減作用を奏し、慢性腎不全疾患における血中抗酸化効果を有する事を見出した。すなわち、キトサンの慢性腎不全疾患における血中抗酸化作用剤としての新たな薬理活性を含む属性を見出した事に基づくものであり、本発明は、キトサンを有効成分として含む慢性腎不全疾患における血中抗酸化作用剤をその要旨とする。
本発明の血中インドキシル硫酸低下剤、または血中抗酸化作用剤の有効成分であるキトサンは、上述した慢性腎不全予防剤または慢性腎不全治療剤に用いる該キトサンと同義であり、同じ物性及び品質のものを用いる事ができる。すなわち、カニやエビの外骨格を脱カルシウム処理した後、脱蛋白処理する事によりキチンを取り出し、これをアルカリ処理により脱アセチル化を行い、該キトサンを得ることができる。この際、脱カルシウム処理及び／または脱アセチル化の反応条件の調整により、所望の分子量の該キトサンを得ることができる。該キトサンの脱アセチル化度は、少なくとも５０％以上の脱アセチル化処理されたものであれば特に問題なく使用することができる。好ましくは脱アセチル化度が７０％以上のキトサンの使用が望ましい。より好ましくは脱アセチル化度が８０％以上であり、特に好ましくは脱アセチル化度が９０％以上のものを用いることが望ましい。 The present inventors have found that oral intake of chitosan has an effect of reducing blood indoxyl sulfate concentration. That is, the present invention is based on the finding of an attribute including a new pharmacological activity called chitosan's blood indoxyl sulfate concentration-reducing action, and a gist of a blood indoxyl sulfate-lowering agent containing chitosan as an active ingredient. And Further, as another aspect of the present invention, it has been found that oral intake of chitosan has an effect of reducing blood oxidative stress and has a blood antioxidant effect in chronic renal failure disease. That is, the present invention is based on the finding of an attribute including a new pharmacological activity as a blood antioxidant in chronic renal failure disease of chitosan, and the present invention relates to blood in chronic renal failure disease containing chitosan as an active ingredient. The middle antioxidant is the gist.
Chitosan which is an active ingredient of the blood indoxyl sulfate lowering agent or blood antioxidant of the present invention is synonymous with the chitosan used for the above-mentioned preventive agent for chronic renal failure or therapeutic agent for chronic renal failure, and has the same physical properties. And quality can be used. That is, after decalcifying the crab or shrimp exoskeleton, chitin can be taken out by deproteinization and deacetylated by alkali treatment to obtain the chitosan. At this time, the chitosan having a desired molecular weight can be obtained by adjusting the decalcification treatment and / or the deacetylation reaction conditions. As long as the degree of deacetylation of the chitosan is at least 50% deacetylated, it can be used without any particular problem. It is preferable to use chitosan having a degree of deacetylation of 70% or more. More preferably, the degree of deacetylation is 80% or more, and particularly preferably, the degree of deacetylation is 90% or more.

本発明に係る該キトサンを含む血中インドキシル硫酸低下剤、または血中抗酸化作用剤に用いる場合、１日あたり０．０１〜５０ｇを経口的に投与すれば良い。好ましくは１日あたり０．１〜３０ｇを経口摂取する。より好ましくは１日あたり０．５〜１０ｇを経口的に摂取することが挙げられる。経口摂取において、１日１回に所定量を投与しても良いし、数回に分割して投与しても良い。その場合の投与製剤剤形としては、錠剤、粉末剤、顆粒剤、カプセル剤、液剤等、通常の製剤学的に汎用されている製剤とすることができる。 When used in the blood indoxyl sulfate-lowering agent or blood antioxidant containing the chitosan according to the present invention, 0.01 to 50 g per day may be administered orally. Preferably, 0.1 to 30 g per day is taken orally. More preferably, 0.5 to 10 g per day is taken orally. In oral ingestion, a predetermined amount may be administered once a day, or divided into several times. In this case, the dosage form of the preparation may be an ordinary pharmaceutical formulation such as tablets, powders, granules, capsules, and liquids.

慢性腎不全の治療効果の指標として、通常は血中クレアチニン値、または血中尿素窒素（ＢＵＮ）値が尿毒症物質として測定されている。しかしながら、慢性腎不全は腎機能障害の進展抑制と共に、心血管疾患（ＣＶＤ）のリスク管理が重要である。本発明者らは、慢性腎不全疾患において、血中インドキシル硫酸濃度と血中アルブミン酸化度が良く相関し、血中インドキシル硫酸のモニタリングが、慢性腎不全の病状進行の診断に有効であることを見出した。アルブミンは血液中の酸化ストレス変動に最も敏感であり、酸化アルブミンの生成が血中酸化ストレスの指標となる。したがって、血中インドキシル硫酸濃度の上昇が、酸化ストレス環境を惹起する因果関係が明らかとなった。すなわち、慢性腎不全疾患の病態把握において、血中インドキシル硫酸濃度の上昇が、腎機能障害の指標であると共に、血中酸化ストレスの指標として用いることができ、腎機能障害の進展抑制と心血管疾患（ＣＶＤ）のリスク管理を同時にモニタリングする事を可能とする。
すなわち本願は、血中インドキシル硫酸濃度をモニタリングする慢性腎不全の治療方法を開示するものである。または血中アルブミン酸化度をモニタリングする慢性腎不全の治療方法を開示するものである。若しくは、血中インドキシル硫酸濃度及び血中アルブミン酸化度をモニタリングする慢性腎不全の治療方法を開示するものである。血中インドキシル硫酸、または血中アルブミン酸化度の測定は、公知の方法で測定する事ができる。慢性腎不全疾患において、血中インドキシル硫酸濃度が高値または上昇傾向にある場合、腎機能障害が増悪していることを示し、同時に血液中が酸化ストレス環境に晒され、心血管疾患（ＣＶＤ）のリスクが高まる傾向を読み取る事ができる。 As an index of the therapeutic effect of chronic renal failure, blood creatinine level or blood urea nitrogen (BUN) level is usually measured as a uremic substance. However, risk management of cardiovascular disease (CVD) is important for chronic renal failure as well as suppression of progression of renal dysfunction. In the chronic renal failure disease, the present inventors have a good correlation between blood indoxyl sulfate concentration and blood albumin oxidation degree, and monitoring of blood indoxyl sulfate is effective for diagnosing the pathological progression of chronic renal failure. I found out. Albumin is most sensitive to fluctuations in oxidative stress in blood, and the production of oxidized albumin is an indicator of blood oxidative stress. Therefore, a causal relationship in which an increase in blood indoxyl sulfate concentration causes an oxidative stress environment was clarified. In other words, in understanding the pathophysiology of chronic renal failure disease, an increase in blood indoxyl sulfate concentration can be used as an index of renal dysfunction and as an index of blood oxidative stress. It is possible to simultaneously monitor risk management of vascular disease (CVD).
That is, the present application discloses a method for treating chronic renal failure by monitoring blood indoxyl sulfate concentration. Alternatively, a method for treating chronic renal failure that monitors the degree of blood albumin oxidation is disclosed. Alternatively, a method for treating chronic renal failure by monitoring blood indoxyl sulfate concentration and blood albumin oxidation degree is disclosed. The blood indoxyl sulfate or blood albumin oxidation degree can be measured by a known method. In chronic renal failure disease, a high or increasing blood indoxyl sulfate concentration indicates that renal dysfunction is worsening, and the blood is exposed to an oxidative stress environment, causing cardiovascular disease (CVD). It is possible to read the trend of increasing risk.

［製造例１及び２］供試キトサンの調製
供試キトサン試料は、ベニズワイガニの足の部分のカニ殻を約５ｍｍ角のチップ状態に粉砕したものを原料として、表１の製造条件にて平均分子量約１００万のキトサン（製造例１）、及び平均分子量が約３万のキトサン（製造例２）の２種類の分子量のキトサンを調製した。
得られたキトサンは十分に水洗を行い、水酸化ナトリウムを除去した後、８０℃で乾燥後、エアージェット式粉砕機で粒子径５００μｍ以下になるので粉砕を行い試験に供した。得られたキトサンの重量平均分子量、及び脱アセチル化率を表１にまとめた。キトサンの平均分子量測定条件を表２にまとめた。 [Production Examples 1 and 2] Preparation of test chitosan The test chitosan sample was obtained by pulverizing crab shells at the foot portion of the red crab into a chip of about 5 mm square, and using the raw material as an average molecular weight under the production conditions shown in Table 1. Two types of molecular weight chitosan were prepared: chitosan having about 1 million (Production Example 1) and chitosan having an average molecular weight of about 30,000 (Production Example 2).
The obtained chitosan was sufficiently washed with water to remove sodium hydroxide, dried at 80 ° C., and then pulverized with an air jet pulverizer so that the particle diameter was 500 μm or less, and then used for the test. Table 1 summarizes the weight average molecular weight and the deacetylation rate of the obtained chitosan. The conditions for measuring the average molecular weight of chitosan are summarized in Table 2.

［表１］実施例キトサンの調製条件及び物性値
製造例１（高分子キトサン）製造例２（低分子キトサン）
脱カルシウム工程６％(w/w)塩酸９％(w/w)塩酸
４０℃、５時間反応７０℃、３時間反応
脱タンパク工程８％(w/w)水酸化ナトリウム８％(w/w)水酸化ナトリウム
８０℃、２時間反応８０℃、２時間反応
脱アセチル化工程４８%(w/w) 水酸化ナトリウム５０%(w/w) 水酸化ナトリウム
６５℃、２０時間反応１１０℃、３時間反応
平均分子量（測定値）１，０８８，７０４３１，４２４
脱アセチル化率８５％８９％

製造例のキトサンの平均分子量は、キトサン試料を０．５％酢酸に溶解し、表２に示した条件でのゲル浸透クロマトグラフ（ＧＰＣ）により測定した重量平均分子量を採用した。
［表２］
カラム：TSK-gel GMPWXL（7.8mm×30cm）＋TSK-gel G2500PWXL（7.8mm×30cm）
ガードカラム：TSK-guardcolumn PWXL（6.0mm×4.0cm）
移動相：0.2M 酢酸−酢酸ナトリウム緩衝液（pH=4.0）
流速：1.0mL/min
温度：４０℃
検出器：示差屈折率検出器（ＲＩ検出器）
検量線作成標準品：プルラン標準(昭和電工社製Shodex STANDARD P82、MW;1300〜38万) [Table 1] Preparation conditions and physical property values of Example chitosan
Production example 1 (polymer chitosan) Production example 2 (low molecular chitosan)
Decalcification process 6% (w / w) hydrochloric acid 9% (w / w) hydrochloric acid
40 ° C, 5 hours reaction 70 ° C, 3 hours reaction deproteinization step 8% (w / w) sodium hydroxide 8% (w / w) sodium hydroxide
80 ° C., 2 hours reaction 80 ° C., 2 hours reaction deacetylation step 48% (w / w) sodium hydroxide 50% (w / w) sodium hydroxide
65 ° C., 20 hours reaction 110 ° C., 3 hours reaction average molecular weight (measured value) 1,088,704 31,424
Deacetylation rate 85% 89%

As the average molecular weight of the chitosan of the production example, a weight average molecular weight measured by gel permeation chromatography (GPC) under the conditions shown in Table 2 after dissolving a chitosan sample in 0.5% acetic acid was adopted.
[Table 2]
Column: TSK-gel GMPWXL (7.8mm x 30cm) + TSK-gel G2500PWXL (7.8mm x 30cm)
Guard column: TSK-guardcolumn PWXL (6.0mm × 4.0cm)
Mobile phase: 0.2M acetic acid-sodium acetate buffer (pH = 4.0)
Flow rate: 1.0mL / min
Temperature: 40 ° C
Detector: Differential refractive index detector (RI detector)
Calibration curve preparation standard product: Pullulan standard (Showa Denko Shodex STANDARD P82, MW; 1300 to 380,000)

［実施例１及び２］試験飼料の作成
製造例１のキトサン（高分子キトサン；平均分子量約１００万）、及び製造例２のキトサン（低分子キトサン；平均分子量約３万）をそれぞれ５％（Ｗ／Ｗ）含量にて高蛋白粉末飼料と混合し、高分子キトサン配合飼料（実施例１）、及び低分子キトサン配合飼料（実施例２）の各試験飼料を調製した。 [Examples 1 and 2] Preparation of test feed 5% each of chitosan of Production Example 1 (high molecular chitosan; average molecular weight of about 1 million) and chitosan of Production Example 2 (low molecular chitosan; average molecular weight of about 30,000) W / W) content was mixed with a high protein powder feed to prepare test feeds of a high molecular chitosan-containing feed (Example 1) and a low-molecular chitosan-containing feed (Example 2).

［試験例１］
本発明のキトサンを有効成分として含む配合飼料（実施例１、２）による慢性腎不全治療効果を、以下のプロトコールに従い腎不全モデルラットを用いた動物試験を行なった。
１．試験動物：清水実験材料株式会社で生産および作成された８週齢の５／６腎臓摘出ラットを使用した。８日間の馴化期間中、一般状態の観察と、体重測定を行ない、９週齢で実験に使用した。動物は、温度２３±２℃、相対湿度５５±１０％、換気回数１２〜１８回／時間、照射時間１２時間（７：００〜１９：００）に調整されたゲージ内にて飼育し、飼料は放射滅菌した市販の高蛋白粉末飼料を自由に摂取させた。
２．試験方法：血清クレアチニン値が１．５ｍｇ／ｄＬ以上を示した個体を選別後、腎不全ラットで３群（高分子キトサン（実施例１；平均分子量約１００万）投与群、低分子キトサン(実施例２；平均分子量約３万)投与群、キトサン無添加群（対照群））を設定した。動物数は、腎不全ラットを各群でそれぞれ６匹とした。
３．試料投与方法：投与は混餌とし、自由に摂取させ、１か月後に全例剖検した。
４．観察および検査項目：一般状態ならびに生死の確認を１日１回以上、体重測定を週１回および剖検日に行なった。また、群分け２日前、投与開始２週間後、４週間後の３回、尾静脈より採血し、血中クレアチニン、尿中アルブミン、カルシウム、無機リン、インドキシル硫酸濃度および抗酸化作用等の測定を行なった。剖検時（投与１か月後）には、各器官ならびに組織の肉眼的異常の有無を観察した。 [Test Example 1]
An animal test using a renal failure model rat according to the following protocol was performed on the therapeutic effect of chronic renal failure by the mixed feed (Examples 1 and 2) containing chitosan of the present invention as an active ingredient.
1. Test animals: 8-week-old 5/6 nephrectomized rats produced and prepared by Shimizu Experimental Materials Co., Ltd. were used. During the 8-day acclimatization period, the general condition was observed and the body weight was measured and used for the experiment at 9 weeks of age. Animals are kept in a gauge adjusted to a temperature of 23 ± 2 ° C., a relative humidity of 55 ± 10%, a ventilation rate of 12-18 times / hour, and an irradiation time of 12 hours (7: 0 to 19:00). Freely ingested radiation-sterilized commercial high protein powder feed.
2. Test method: After selecting individuals with serum creatinine value of 1.5 mg / dL or more, 3 groups (high molecular chitosan (Example 1; average molecular weight of about 1 million) administration group, low molecular chitosan (implemented) in renal failure rats Example 2: An average molecular weight of about 30,000) administration group and chitosan-free group (control group)) were set. The number of animals was 6 for each group of renal failure rats.
3. Sample administration method: Administration was mixed with food and allowed to freely ingest, one month later, all patients were necropsied.
4). Observation and examination items: General condition and confirmation of life and death were performed at least once a day, and body weight was measured once a week and on the day of autopsy. In addition, blood was collected from the tail vein 2 days before the start of grouping, 2 weeks after the start of administration, and 3 times after 4 weeks, and blood creatinine, urinary albumin, calcium, inorganic phosphorus, indoxyl sulfate concentration, antioxidant activity, etc. were measured. Was done. At the time of necropsy (1 month after administration), the presence or absence of gross abnormalities in each organ and tissue was observed.

腎不全モデルラットを用いた動物試験の結果、本発明のキトサンを含む飼料の１ヶ月の給餌によって、血液生化学的検査における血中クレアチニン値は、未添加群（対照群）の値２．２２±０．２２ｍｇ／ｄＬに対して、高分子キトサンで１．６８±０．３２ｍｇ／ｄＬ、低分子キトサンで１．８５±０．３１ｍｇ／ｄＬと低い値を示した。更に、尿中アルブミン値においても、未添加群（対照群）の値１５９．７±１４．２ｍｇ／ｄａｙに対して、高分子キトサンで９１．８±１５．４ｍｇ／ｄａｙ、低分子キトサンで９６．７±１３．２ｍｇ／ｄａｙと同様に低い値を示した。以上の結果から、実施例１及び２のキトサン摂取により、血液生化学値において腎不全症状の改善が認められた。
さらに、投与開始４週間後のインドキシル硫酸濃度の値を図１に示すが、図１中の結果から明らかなように、腎不全ラットにおけるキトサンの投与は、未添加群（対照群）に比べてインドキシル硫酸濃度の上昇を有意に抑制し、その値は正常値（７．６０±１．０８μＭ）へ回復傾向を示していた。これらの結果から、腎不全を発現したラットに対して、キトサンはクレアチニン値およびインドキシル硫酸濃度の増悪化を抑制し、アルブミンの尿細胞における再吸収能を維持しているものといえる。
また抗酸化作用について、血中アルブミンの酸化度を、上記非特許文献１０；Ａｎｒａｋｕｅｔ．ａｌ．，ＫｉｄｎｅｙＩｎｔ．６６：８４１−８（２００４）に記載の方法により評価した結果、本発明のキトサンを含む飼料の１か月の給餌によって、血中アルブミンの酸化度の有意な低下が確認され、正常値への回復傾向が示された。投与開始４週間後の血中アルブミン酸化度を図２に示した。図２の結果から明らかなように、腎不全ラットにおけるキトサンの投与は、無添加群（対照群）に比べてアルブミンの酸化を有意に抑制した。
本発明の有効成分であるキトサンを腎不全の治療に用いる場合には、１日０．５〜５ｇを経口的に投与すればよい。その場合の投与製剤剤形としては、錠剤、粉末剤、顆粒剤、カプセル剤、液剤等、通常の製剤学的に汎用されている製剤とすることができる。 As a result of the animal test using the renal failure model rat, the blood creatinine value in the blood biochemical test was found to be 2.22 in the unadded group (control group) by feeding the diet containing chitosan of the present invention for 1 month. In contrast to ± 0.22 mg / dL, low values of 1.68 ± 0.32 mg / dL for high molecular chitosan and 1.85 ± 0.31 mg / dL for low molecular chitosan were shown. Further, in the urinary albumin level, the value of 91.8 ± 15.4 mg / day for the high molecular chitosan and 96 for the low molecular chitosan, compared with the value of 159.7 ± 14.2 mg / day for the non-added group (control group). The value was as low as 0.7 ± 13.2 mg / day. From the above results, improvement of renal failure symptoms was observed in blood biochemical values by ingestion of chitosan of Examples 1 and 2.
Further, the value of indoxyl sulfate concentration after 4 weeks from the start of administration is shown in FIG. 1. As is clear from the results in FIG. 1, administration of chitosan in rats with renal failure is higher than that in the non-added group (control group). The increase in indoxyl sulfate concentration was significantly suppressed, and the value showed a recovery tendency to the normal value (7.60 ± 1.08 μM). From these results, it can be said that chitosan suppressed the deterioration of the creatinine level and the indoxyl sulfate concentration and maintained the reabsorption ability of albumin in urine cells in rats that developed renal failure.
Regarding the antioxidant activity, the degree of oxidation of blood albumin was determined according to the above-mentioned Non-Patent Document 10; al. , Kidney Int. 66: 841-8 (2004). As a result, a significant decrease in the degree of oxidation of blood albumin was confirmed by feeding the feed containing chitosan of the present invention for one month, and the normal level was reached. A recovery trend was shown. The degree of blood albumin oxidation 4 weeks after the start of administration is shown in FIG. As is clear from the results in FIG. 2, administration of chitosan in renal failure rats significantly suppressed albumin oxidation compared to the non-added group (control group).
When chitosan which is an active ingredient of the present invention is used for the treatment of renal failure, 0.5 to 5 g may be orally administered per day. In this case, the dosage form of the preparation may be an ordinary pharmaceutical formulation such as tablets, powders, granules, capsules, and liquids.

また、インドキシル硫酸濃度と、その時のアルブミン酸化度の関連性についての結果を図３に示した。図３より、インドキシル硫酸濃度とアルブミン酸化度との間に有意な相関関係が観察された。この結果から、腎不全において、血中インドキシル硫酸濃度の上昇は、血中酸化ストレス環境をもたらすことが明らかとなった。キトサンの経口的投与は、インドキシル硫酸の血中への放出を抑制することにより、血中の抗酸化作用を維持しているものといえる。 Moreover, the result about the relationship between an indoxyl sulfate concentration and the albumin oxidation degree at that time was shown in FIG. From FIG. 3, a significant correlation was observed between the indoxyl sulfate concentration and the degree of albumin oxidation. From this result, it became clear that in renal failure, an increase in blood indoxyl sulfate concentration leads to a blood oxidative stress environment. It can be said that oral administration of chitosan maintains the antioxidant effect in blood by suppressing the release of indoxyl sulfate into the blood.

また、投与開始１ヶ月後の剖検により、各器官ならびに組織の肉眼的異常の有無を確認したところ、腎不全ラットにおけるキトサンの投与は、無添加群（対照群）に比べて腎組織の異常亢進を有意に抑制した。キトサンを含む飼料の給餌は、低下した腎機能を回復、または増悪化を抑制するだけでなく、血中の酸化ストレスを抑制するものといえる。 In addition, autopsy one month after the start of administration confirmed the presence or absence of gross abnormalities in each organ and tissue. As a result, administration of chitosan in renal failure rats increased abnormalities in renal tissue compared to the non-added group (control group). Was significantly suppressed. Feeding a feed containing chitosan not only restores reduced kidney function or suppresses exacerbations, but also suppresses oxidative stress in the blood.

［試験例２］
本発明のキトサンと、食物繊維の例としてカルボキシメチルセルロース（ＣＭ−セルロース）のインドキシル硫酸の結合実験を以下の方法にて行なった。
製造例１（平均分子量約１００万）及び製造例２（平均分子量約３万）の各分子量のキトサン、並びにカルボキシメチルセルロース（入手先：和光純薬工業(株)、分子量：１３００−２２００ｃｐｓ）の各１．０ｍｇ／ｍＬ水溶液を、インドキシル硫酸水溶液（１０μＭ）と３０分インキュベート後、分子量３０００以下を限外ろ過キットに付し、１２，０００ｒｐｍで５分間遠心分離を行った。その後、下清をＨＰＬＣ（カラム; Mightysil RP-18、ポンプ; 日立655 A-11型、検出器; 日立L-7480型蛍光検出器、移動相; アセトニトリル：0.2M酢酸緩衝液(pH4.5)(v/v) =25:75、測定波長; 蛍光モニター（励起波長/蛍光波長=280nm/370nm））にて分析し、インドキシル硫酸の吸着率を算出した。結果を図４に示した。 [Test Example 2]
A binding experiment between the chitosan of the present invention and indoxyl sulfate of carboxymethyl cellulose (CM-cellulose) as an example of dietary fiber was performed by the following method.
Each of chitosan having each molecular weight of Production Example 1 (average molecular weight of about 1,000,000) and Production Example 2 (average molecular weight of about 30,000), and carboxymethylcellulose (source: Wako Pure Chemical Industries, Ltd., molecular weight: 1300-2200 cps) A 1.0 mg / mL aqueous solution was incubated with an indoxyl sulfate aqueous solution (10 μM) for 30 minutes, and then a molecular weight of 3000 or less was applied to an ultrafiltration kit, followed by centrifugation at 12,000 rpm for 5 minutes. After that, HPLC (column; Mightysil RP-18, pump; Hitachi 655 A-11 type, detector; Hitachi L-7480 type fluorescence detector, mobile phase; acetonitrile: 0.2 M acetate buffer (pH 4.5) (v / v) = 25: 75, measurement wavelength; analyzed with a fluorescence monitor (excitation wavelength / fluorescence wavelength = 280 nm / 370 nm), and the adsorption rate of indoxyl sulfate was calculated. The results are shown in FIG.

図４中の結果から明らかなように、他の食物繊維であるカルボキシメチルセルロース（ＣＭ−セルロース）と、平均分子量約１００万及び約３万のキトサンのｉｎｖｉｔｒｏにおけるインドキシル硫酸の結合実験を行ったところ、キトサンはＣＭ−セルロースと比較し、顕著に高いインドキシル硫酸の吸着率を示した。ＣＭ−セルロースにおけるインドキシル硫酸の吸着は殆ど認められなかった。インドキシル硫酸吸着率に関するキトサンの分子量の影響は、高分子キトサンの方が有意に高い吸着率を示した。したがって、本発明のキトサンを含む慢性腎不全予防剤・治療剤、または血中インドキシル硫酸低下剤に用いるキトサンは高分子キトサンであることが好ましく、平均分子量が３万より大きいキトサンを用いる事が望ましい。特に好ましくは、平均分子量が１００万程度の高分子キトサンを用いる事が望ましい。
以上のように本発明は、キトサンが消化管内において、インドキシル硫酸を吸着することにより、血中のインドキシル硫酸濃度を顕著に抑制するだけでなく、酸化ストレスの亢進も抑制することによって、低下した腎機能を回復することができる。特に腎不全患者における長期透析患者に合併症として発症する心血管疾患（ＣＶＤ）を治療する点においても新規なものであり、その医療上の効果は多大なものであるといえる。 As is clear from the results in FIG. 4, an in vitro indoxyl sulfate binding experiment was conducted with carboxymethyl cellulose (CM-cellulose), which is another dietary fiber, and chitosan having an average molecular weight of about 1 million and about 30,000. However, chitosan showed a significantly higher indoxyl sulfate adsorption rate than CM-cellulose. Adsorption of indoxyl sulfate on CM-cellulose was hardly observed. The influence of the molecular weight of chitosan on the indoxyl sulfate adsorption rate was significantly higher for the polymeric chitosan. Therefore, the chitosan used for the chronic renal failure preventive and therapeutic agent containing chitosan of the present invention or the blood indoxyl sulfate lowering agent is preferably a high molecular chitosan, and chitosan having an average molecular weight of more than 30,000 may be used. desirable. It is particularly preferable to use high molecular chitosan having an average molecular weight of about 1,000,000.
As described above, the present invention reduces chitosan not only by remarkably suppressing the concentration of indoxyl sulfate in the blood but also by enhancing oxidative stress by adsorbing indoxyl sulfate in the digestive tract. Can restore the kidney function. In particular, it is novel in terms of treating a cardiovascular disease (CVD) that develops as a complication in a long-term dialysis patient in a renal failure patient, and it can be said that the medical effect is enormous.

Claims

Chronic renal failure preventive agent or chronic renal failure therapeutic agent containing chitosan.

2. The chronic renal failure preventive agent or chronic renal failure therapeutic agent according to claim 1, wherein the chitosan has an average molecular weight of more than 30,000.

3. The agent for preventing or treating chronic renal failure according to claim 1 or 2, wherein the chitosan has a degree of deacetylation of 70% or more.

The chronic renal failure preventive agent or chronic renal failure therapeutic agent according to any one of claims 1 to 3, wherein chitosan intake is 0.01 to 50.0 g per day.

A blood indoxyl sulfate lowering agent containing chitosan.

6. The blood indoxyl sulfate lowering agent according to claim 5, wherein the chitosan has an average molecular weight greater than 30,000.

Antioxidant for chronic renal failure disease including chitosan.

A method for treating chronic renal failure, which comprises using blood indoxyl sulfate concentration and / or blood albumin oxidation level as an index in the treatment of chronic renal failure.