JP2013544822A - インテグリン結合キナーゼ阻害剤 - Google Patents

Abstract

多くの化合物、および被験体においてその被験体に式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容可能な塩を含む薬学的組成物を投与することによって癌を処置するまたは予防する方法におけるその化合物の使用が記載される。その化合物をまた、細胞におけるインテグリン結合キナーゼを阻害するために使用し得、それはＡｋｔシグナル伝達経路に影響を有する。本発明の化合物は、さらなるＩＬＫ阻害剤を提供し、そして当該分野において以前に公知であったものよりも高いインビトロおよびインビボ有効性を示す多くの化合物を含む。

Description

相互参照
本出願は、２０１０年１１月２４日に出願された米国仮特許出願第６１／４１６，８０４号の利益を主張し、この出願は本明細書において参照として援用される。

政府の資金提供
本発明は、ｔｈｅ Ｏｆｆｉｃｅ ｏｆ ｔｈｅ Ｄｉｒｅｃｔｏｒ， Ｎａｔｉｏｎａｌ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅｓ ｏｆ Ｈｅａｌｔｈ （ＯＤ）により資金提供されたｔｈｅ Ｎａｔｉｏｎａｌ Ｃｅｎｔｅｒ ｆｏｒ Ｒｅｓｅａｒｃｈ Ｒｅｓｏｕｒｃｅｓからの助成金番号Ｒ０１ ＣＡ１１２２５０によって援助を受けた。政府は本発明における一定の権利を有する。

Ａｋｔシグナル伝達経路は、アポトーシス、細胞増殖、および代謝のような、複数の生物学的過程の重要な制御因子である。この経路は、多くの場合、ヒト癌において多くの異なるメカニズムによってアップレギュレートされており、それによって癌細胞の生存を促進し、そして癌患者の処置の臨床的困難に寄与する。Ａｋｔの完全な活性化は、２つのアミノ酸残基：ホスホイノシチド依存性キナーゼ１（ＰＤＫ１）によってリン酸化されるスレオニン−３０８（Ｔ３０８）、およびＰＤＫ２部位として公知であり、そして多くの異なるキナーゼによってリン酸化されることが報告されているセリン−４７３（Ｓ４７３）におけるリン酸化を必要とする。これらの１つ、インテグリン結合キナーゼ（ＩＬＫ）は、その発現および活性が、様々な型の癌において増加し、そしてその阻害はアポトーシスおよび細胞周期の停止を誘発することによって癌細胞の生存を抑制し得るので、有望な抗癌標的として同定されてきた（非特許文献１）。新規の、強力な、および安全なＩＬＫの阻害剤の開発は、癌の処置のために新しい標的化治療薬を提供し得る。

発明者らは以前に、ＰＤＫ−１／Ａｋｔシグナル伝達阻害剤として使用するために、または他の適用のために、多くのセレコキシブ誘導体を調製した。例えば、特許文献１および特許文献２、および特許文献３は、ＰＤＫ−１／Ａｋｔシグナル伝達阻害剤および抗癌剤として有用な多くの化合物を記載する。発明者らによる米国特許出願第１２／４２８，０３５号は、Ｆｒａｎｃｉｓｅｌｌａ細菌による感染を処置するために有用な、多くのセレコキシブ誘導体を記載する。

ＩＬＫの低分子阻害剤も報告されてきた。これらのうち、ＱＬＴ０２６７が、前臨床試験において有効性を示したので、最近の関心を集めているようである（非特許文献２；非特許文献３；非特許文献４）。乳癌細胞において、細胞生存能の阻害に関してＱＬＴ０２６７の報告されたＩＣ_５０値は、インビトロで７２時間の処理後９．８〜７０．９μＭの範囲であり、そして経口または腹腔内経路によるインビボにおける投薬は、マウスにおいて腫瘍の増殖を抑制するために１００ｍｇ／ｋｇまたは２００ｍｇ／ｋｇを必要とした／使用した。しかし、さらなるＩＬＫ阻害剤、特に高レベルの活性を示すものに対する必要性が依然として存在する。

米国特許第７，０２６，３４６号明細書 米国特許第７，５７６，１１６号明細書 米国特許出願公開第２００８／０２６９３０９号明細書

Ｈａｎｎｉｇａｎら、Ｎａｔｕｒｅ Ｒｅｖｉｅｗｓ Ｃａｎｃｅｒ ５、５１（２００５） Ｋａｌｒａら、Ｂｒｅａｓｔ Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ １１、Ｒ２５（２００９） Ｅｋｅら、ＰＬｏＳ ＯＮＥ ４：ｅ６４３４（２００９） Ｅｄｗａｒｄｓら、Ｍｏｌ Ｃａｎｃｅｒ Ｔｈｅｒ ７、５９（２００８）

本発明の化合物は、さらなるＩＬＫ阻害剤を提供し、そして当該分野において以前に公知であったものよりも高いインビトロおよびインビボ有効性を示す多くの化合物を含む。

１つの局面において、本発明は、式Ｉによる化合物：

式中、Ａｒは、置換または非置換の、ビフェニル基、ナフチル基、アントリル基、およびフェナントリル基から成る群から選択され；Ｙはスルホンアミド、

、および

から成る群から選択され、式中、ｎは０〜３の整数であり、Ｒ^１はＨ、メチル、エチル、プロピル、ｉ−プロピル、またはベンジルであり；そしてＲ^２はＨ、メチル、またはエチルであり；Ｘはモルホリン、グアニジン、ニトロ、

および

から成る群から選択され、式中、Ｒ^３は、Ｈ、ＳＯ_２ＮＨ_２、Ｌ−Ｌｙｓ、Ｄ−Ｌｙｓ、β−Ａｌａ、Ｌ−Ｌｕｅ、Ｌ−Ｉｌｅ、Ｐｈｅ、Ａｓｐ、Ａｓｎ、Ｇｌｕ、またはＧｌｎであり、そしてＲ^４はＨ、メチル、エチル、アリル、ＣＨ_２ＣＨ_２ＯＨ、またはＣＨ_２ＣＮである；またはその薬学的に許容可能な塩を提供する。

別の局面において、本発明は、被験体に、本明細書中で記載するような式Ｉの化合物、またはその薬学的に許容可能な塩を含む薬学的組成物を投与することを含む、被験体において癌を処置するまたは予防する方法を提供する。本発明の実施態様において、その癌は、白血病、非小細胞肺癌、結腸癌、中枢神経系癌、黒色腫、卵巣癌、腎臓癌、前立腺癌、または乳癌であり得る。

さらなる局面において、本発明は、細胞を、本明細書中で記載するような式Ｉの化合物、またはその薬学的に許容可能な塩と接触させることによって、細胞におけるインテグリン結合キナーゼを阻害する方法を提供する。

図１は、化合物１〜１３の合成を示す模式図を提供する。 図１は、化合物１〜１３の合成を示す模式図を提供する。 図２は、（Ａ）５％胎児ウシ血清（ＦＢＳ）の存在下で、２．５μＭにおける２４時間の処理後の、ＰＣ−３ヒト前立腺癌細胞におけるＰＤＫ１（Ｔ３０８）およびＰＤＫ２（Ｓ４７３）部位のＡｋｔリン酸化に対する、化合物１〜９の効果のウェスタンブロット分析、および（Ｂ）上記のＡにおいて記載したように処理したＰＣ−３細胞の生存能に対する化合物１〜９の用量依存性効果を提供する。細胞生存能を、ＭＴＴアッセイによって評価した。点、平均値；バー、±ＳＤ。 図３は、前立腺癌細胞系および乳癌細胞系および非悪性前立腺上皮細胞および乳腺上皮細胞のパネルにおける、化合物２の抗増殖性効果を示す。（Ａ）前立腺癌細胞（ＰＣ−３、ＬＮＣａＰ）および非悪性前立腺上皮細胞（ＰｒＥＣ）、および（Ｂ）乳癌細胞（ＭＤＡ−ＭＢ−４６８、ＭＤＡ−ＭＢ−２３１、ＣＡＬ５１、ＭＣＦ−７、ＳＫＢＲ３）および非悪性乳腺上皮細胞（ＭＥＣ）における、細胞生存能に対する化合物２の時間および／または用量依存性効果を決定した。細胞を、示した濃度で１２時間、２４時間、または４８時間処理し、そして細胞生存能をＭＴＴアッセイによって決定した。点、平均値；バー、±ＳＤ。 図４は、化合物２がＩＬＫシグナル伝達経路を抑制するという証拠を提供する。ＰＣ−３細胞およびＭＤＡ−ＭＢ−２３１細胞におけるＩＬＫの下流標的（Ａｋｔ−Ｓ４７３；ＧＳＫ３β−Ｓ９）に対する、化合物２の用量依存性効果のウェスタンブロット分析。細胞を、５％ＦＢＳの存在下で、示した濃度において２４時間処理した。 図５は、化合物１０〜１３のスクリーニングの結果を提供する。（Ａ）５％ＦＢＳ存在下で、２．５μＭにおいて２４時間処理した後の、ＰＣ−３細胞の生存能に対する、化合物１０〜１３および２の用量依存性効果。細胞生存能を、ＭＴＴアッセイによって評価した。点、平均値；バー、±ＳＤ。（Ｂ）ＰＣ−３細胞における、ＩＬＫの下流標的のリン酸化状態に対する、化合物２および１３の効果のウェスタンブロット分析。 図６は、乳癌細胞における化合物４〜９の抗増殖性活性を示す。５％ＦＢＳの存在下における２４時間の処理後の、ＭＣＦ−７細胞（上のパネル）およびＳＫＢＲ３細胞（下）における化合物４〜９の用量依存性効果。細胞生存能を、ＭＴＴアッセイによって評価した。点、平均値；バー、±ＳＤ。 図７は、胸腺欠損ヌードマウスにおける確立したＰＣ−３腫瘍の増殖に対する、化合物２の経口投与の効果を示す。５０％のマトリゲルを含む、０．１ｍｌの全容積の血清を含まない培地中、５×１０^５のＰＣ−３細胞の皮下注射によって、ＰＣ−３腫瘍をオス胸腺欠損ヌードマウスにおいて確立した。確立した腫瘍を有するマウスを、１日１回、強制栄養法によって３５日間、示した処置を受ける３つの群に無作為化した。腫瘍サイズおよび体重を、週１回測定した。点、平均腫瘍体積；バー、±ＳＤ。

発明者らは、インテグリン結合キナーゼ阻害剤として、および被験体において癌を処置するまたは予防するために使用され得る、多くの新規化合物を開発してきた。これらの化合物は、本明細書中でより詳細に定義される置換基を有する、式Ｉによって記載される。

定義
本明細書中で述べる用語は、実施態様の説明のためのみであり、そして本発明を全体として制限するものと解釈されるべきではない。本発明の説明および添付の特許請求の範囲において使用される場合、単数形「ａ」、「ａｎ」、および「ｔｈｅ」は、その周囲の文脈によって禁忌でなければ、その複数形を含む。

本明細書中で使用される場合、「有機基」という用語は、脂肪族基、環式基、または脂肪族基および環式基の組み合わせ（例えばアルカリール基およびアラルキル基）として分類される炭化水素基を意味して使用される。アルカリール基は、介在するアルキル基によって残りの構造に結合しているアリール基であり、一方アラルキル基は、構造に直接結合しているが、それに結合した１つ以上のさらなるアルキル基を含むアリール基である。本発明の文脈において、本発明の化合物のために適当な有機基は、その化合物の望ましい活性（例えばその抗癌活性）を妨害しないものである。本発明の文脈において、「脂肪族基」という用語は、飽和または不飽和の、鎖状または分枝状の炭化水素基を意味する。この用語を、例えばアルキル基、アルケニル基、およびアルキニル基を含むよう使用する。

本明細書中で使用される場合、「アルキル」、「アルケニル」という用語、および接頭辞「アルカ−（ａｌｋ−）」は、直鎖基および分枝鎖基を含む。他に特定しなければ、これらの基は、１から２０個の炭素原子を含み、アルケニル基は２から２０個の炭素原子を含む。いくつかの実施態様において、これらの基は、全部で多くとも１０個の炭素原子、多くとも８個の炭素原子、多くとも６個の炭素原子、または多くとも４個の炭素原子を有する。４個またはそれより少ない炭素原子を含むアルキル基はまた、低級アルキル基とも呼ばれ得る。アルキル基はまた、それらが含む炭素原子の数によっても呼ばれ得る（すなわち、Ｃ_１〜Ｃ_４アルキル基は、１〜４個の炭素原子を含むアルキル基である）。

本明細書中で使用される場合、シクロアルキルは、環構造を形成するアルキル基（すなわち、アルキル基、アルケニル基、またはアルキニル基）を指す。環式基は、単環式または多環式であり得、そして好ましくは３から１０個の環炭素原子を含む。シクロアルキル基は、４個またはそれより少ない炭素原子を含むアルキル基を介して主構造に結合され得る。代表的な環式基は、シクロプロピル、シクロプロピルメチル、シクロペンチル、シクロヘキシル、アダマンチル、ならびに置換および非置換の、ボルニル、ノルボルニル、およびノルボルネニルを含む。

他に特定されなければ、「アルキレン」および「アルケニレン」は、上記で定義した「アルキル」基および「アルケニル」基の二価の形態である。「アルキレニル」および「アルケニレニル」という用語は、「アルキレン」および「アルケニレン」がそれぞれ置換された場合に使用する。例えば、アリールアルキレニル基は、アリール基が結合したアルキレン部分を含む。

「ハロアルキル」という用語は、過フッ素化基を含む、１つ以上のハロゲン原子で置換された基を含む。これはまた、接頭辞「ハロ」を含む他の基にもあてはまる。適当なハロアルキル基の例は、クロロメチル、トリフルオロメチル等である。ハロ部分は、塩素、臭素、フッ素、およびヨウ素を含む。

本明細書中で使用される「アリール」という用語は、炭素環式芳香環または環系を含む。アリール基は、単一の芳香環、複数の別々の芳香環、または縮合した芳香環系を含み得る。炭素環式芳香環は、ヘテロ原子を含まない。アリール基の例は、フェニル、ナフチル、ビフェニル、フルオレニルおよびインデニルを含む。アリール基は、置換または非置換であり得る。

他に示さなければ、「ヘテロ原子」という用語は、原子Ｏ、Ｓ、またはＮを指す。「ヘテロアリール」という用語は、少なくとも１つの環ヘテロ原子（例えばＯ、Ｓ、Ｎ）を含む芳香環または環系を含む。いくつかの実施態様において、「ヘテロアリール」という用語は、２から１２個の炭素原子、１から３個の環、１から４個のヘテロ原子、およびヘテロ原子としてＯ、Ｓ、および／またはＮを含む環または環系を含む。適当なヘテロアリール基の例は、フリル、チエニル、ピリジル、キノリニル、イソキノリニル、インドリル、イソインドリル、トリアゾリル、ピロリル、テトラゾリル、イミダゾリル、ピラゾリル、オキサゾリル、チアゾリル、ベンゾフラニル、ベンゾチオフェニル、カルバゾリル、ベンゾオキサゾリル、ピリミジニル、ベンゾイミダゾリル、キノキサリニル、ベンゾチアゾリル、ナフチリジニル、イソオキサゾリル、イソチアゾリル、プリニル、キナゾリニル、ピラジニル、１−オキシドピリジル、ピリダジニル、トリアジニル、テトラジニル、オキサジアゾリル、チアジアゾリル等を含む。

「縮合アリール基」という用語は、縮合した炭素環式芳香環または環系を含む。縮合アリール基は、縮合して単一の芳香族系を形成する、複数の芳香環を含む。縮合アリール基の例は、ナフタレン（Ｃ_１０）、アントラセン（Ｃ_１４）、フェナントレン（Ｃ_１４）、およびピレン（Ｃ_１６）縮合アリール基を含む。集団的に、縮合アリール基を、それらが含む炭素環の数に関して、すなわちＣ_１０〜Ｃ_１８カルボアリール基と呼び得る。

「縮合ヘテロアリール基」という用語は、縮合して単一の芳香族系を形成する複数の芳香環を含む芳香環系を指し、ここで１つ以上の芳香環が複素芳香環である。縮合ヘテロアリール基は、その他は縮合アリール基と同様である。縮合ヘテロアリール基の例は、ベンゾフラン、イソベンゾフラン、ベンゾチオフェン（ｂｅｚｏｔｈｉｏｐｅｎｅ）、インドール、イソインドール、キノリン由来のＣ_１０ヘテロアリール基、イソキノリン、ベンゾジアジン（ｂｅｎｏｄｉａｚｉｎｅ）、ピリドピリジン、およびアクリジン由来のＣ_１４ヘテロアリール基およびキサンテンを含む。

基が本明細書中で記載されるあらゆる式または図式において１回より多く存在する場合、それぞれの基（または置換基）は、明白に述べられているかどうかに関わらず、独立に選択される。例えば、式−Ｃ（Ｏ）−ＮＲ_２に関して、各Ｒ基は独立に選択される。

本出願中で使用されるある用語の考察および引用を簡単にする手段として、「基」および「部分」という用語を、置換が可能であるまたは置換され得る化学種、および置換が可能でないまたは置換され得ない化学種の間を区別するために使用する。従って、「基」という用語を、化学的置換基を説明するために使用する場合、その説明された化学物質は、非置換基および１つ以上の非過酸化性Ｏ、Ｎ、Ｓ、またはＦ置換基またはメチル基のような他の従来の置換基を有する基を含む。「部分」という用語を、化学的化合物または置換基を説明するために使用する場合、非置換の化学物質のみを含むよう意図される。例えば、「アルキル基」という語句は、メチル、エチル、プロピル、ｔｅｒｔ−ブチル等のような、純粋な直鎖（ｏｐｅｎ ｃｈａｉｎ）飽和炭化水素アルキル置換基だけでなく、ヒドロキシ、アルコキシ、アルキルスルホニル、ハロゲン原子、シアノ、ニトロ、アミノ、カルボキシル等のような、当該分野で公知のさらなる置換基を有するアルキル置換基も含むよう意図される。従って、「アルキル基」は、エーテル基、ハロアルキル、ニトロアルキル、カルボキシアルキル、ヒドロキシアルキル、シアノアルキル等を含む。他方、「アルキル部分」という語句は、メチル、エチル、プロピル、ｔｅｒｔ−ブチル等のような、純粋な直鎖（ｏｐｅｎ ｃｈａｉｎ）飽和炭化水素アルキル置換基のみを含むよう限定される。

基において任意で置換され得るさらなる置換基を、下記でさらに定義する。

エステル（カルボキシレート、カルボン酸エステル、オキシカルボニル）：−Ｃ（＝Ｏ）ＯＲ、式中、Ｒはエステル置換基、例えばＣ_１〜７アルキル基、またはＣ_５〜２０アリール基、好ましくはＣ_１〜７アルキル基（Ｃ_１〜７アルキルエステル）である。エステル基の例は、−Ｃ（＝Ｏ）ＯＣＨ_３、−Ｃ（＝Ｏ）ＯＣＨ_２ＣＨ_３、−Ｃ（＝Ｏ）Ｏ（ＣＨ_３）_２、−（ＣＨ_２）_３Ｃ（＝Ｏ）ＯＣＨ_３、および−Ｃ（＝Ｏ）ＯＰｈを含むがこれに限らない。

アミド（カルバモイル、カルバミル、アミノカルボニル、カルボキサミド）：−Ｃ（＝Ｏ）ＮＲ^１Ｒ^２、式中、Ｒ^１およびＲ^２は、独立にアミノ基に関して定義したようなアミノ置換基である。アミド基の例は、−Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ_２、−Ｃ（＝Ｏ）ＮＨＣＨ_３、−Ｃ（＝Ｏ）Ｎ（ＣＨ_３）_２、−Ｃ（＝Ｏ）ＮＨＣＨ_２ＣＨ_３、および−Ｃ（＝Ｏ）Ｎ（ＣＨ_２ＣＨ_３）_２を含むがこれに限らない。

アミノ：−ＮＲ^１Ｒ^２、式中、Ｒ^１およびＲ^２は独立にアミノ置換基、例えば水素またはＣ_１〜７アルキル基である。アミノ基の例は、−ＮＨ_２、−ＮＨＣＨ_３、−ＮＨＣＨ（ＣＨ_３）_２、−Ｎ（ＣＨ_３）_２、−Ｎ（ＣＨ_２ＣＨ_３）_２、および−ＮＨＰｈを含むがこれに限らない。環式アミノ基の例は、アジリジニル、アゼチジニル、ピロリジニル、ピペリジノ、ピペラジニル、ペルヒドロジアゼピニル、モルホリノ、およびチオモルホリノを含むがこれに限らない。

アシルアミド（アシルアミノ）：−ＮＲ^１Ｃ（＝Ｏ）Ｒ^２、式中、Ｒ^１はアミド置換基、例えば水素またはＣ_１〜７アルキル基である。アシルアミド基の例は、−ＮＨＣ（＝Ｏ）ＣＨ_３、−ＮＨＣ（＝Ｏ）ＣＨ_２ＣＨ_３、および−ＮＨＣ（＝Ｏ）Ｐｈを含むがこれに限らない。アシルアミド基は置換され得る；例えば、そのアシルアミド基は、式−ＮＨ−ＣＯ−（ＣＨ_２）_Ｘ−ＮＨ_２を有する、アミン置換アシルアミド基であり得、式中、ｘは１〜４の整数である。

ウレイド：−Ｎ（Ｒ^１）ＣＯＮＲ^２Ｒ^３、式中、Ｒ^２およびＲ^３は、独立にアミノ基に関して定義されたようなアミノ置換基であり、そしてＲ^１はウレイド置換基、例えば水素またはＣ_１〜７アルキル基である。ウレイド基の例は、−ＮＨＣＯＮＨ_２、−ＮＨＣＯＮＨＭｅ、−ＮＨＣＯＮＨＥｔ、−ＮＨＣＯＮＭｅ_２、−ＮＨＣＯＮＥｔ_２、−ＮＭｅＣＯＮＨ_２、−ＮＭｅＣＯＮＨＭｅ、−ＮＭｅＣＯＮＨＥｔ、−ＮＭｅＣＯＮＭｅ_２、−ＮＭｅＣＯＮＥｔ_２、および−ＮＨＣ（＝Ｏ）ＮＨＰｈを含むがこれに限らない。

スルホンアミド−Ｓ（＝Ｏ）_２ＮＲＲ^１、式中、Ｒ^１は、アミノ基に関して定義したようなアミノ置換基であり、そしてＲはスルホンアミノ置換基、例えばＣ_１〜７アルキル基またはＣ_５〜２０アリール基である。スルホンアミド基の例は、−Ｓ（＝Ｏ）_２ＮＨＣＨ_３、−Ｓ（＝Ｏ）_２ＮＨＰｈ、および−Ｓ（＝Ｏ）_２Ｎ（Ｍｅ）_２を含むがこれに限らない。

本発明は、異性体（例えばジアステレオマーおよびエナンチオマー）、互変異性体、塩、溶媒和物、多形、プロドラッグ等を含む、その薬学的に許容可能な形態のいずれかで、本明細書中で記載された化合物を含む。特に、もし化合物が光学活性なら、本発明は明確に、上記化合物のエナンチオマーのそれぞれ、およびそのエナンチオマーのラセミ混合物を含む。「化合物」という用語は、明白に述べられているかどうかに関わらず（時々、「塩」は明白に述べられているが）、あらゆるまたは全てのそのような形態を含むことが理解されるべきである。

「処置する」、「処置すること」および「処置」等は、本明細書中で使用される場合、少なくとも１つの症状の減弱または抑制による病状の改善、疾患の進行の遅延、疾患の発症の予防または遅延等を含む、癌のような病状または疾患に冒された被験体に利益を提供するあらゆる行為を指す。

予防は、本明細書中で使用される場合、癌の発症の回避、または癌が発現する疾患の１つ以上の症状の抑制を含む、癌のような病状または疾患に冒されるリスクのある被験体に利益を提供するあらゆる行為を指す。その被験体は、発癌物質への曝露のために、または家族歴の結果として、危険な状態であり得る。

本明細書中で使用される「薬学的に許容可能な」は、その化合物または組成物が、疾患の重症度および処置の必要性を考慮して過度に有害な副作用なく、本明細書中で記載される方法のために被験体へ投与するために適当であることを意味する。

「治療的に有効な」および「薬理学的に有効な」という用語は、典型的に代替治療に関連するもののような副作用を回避しながら、疾患の重症度を低下させる目標を達成する、各薬剤の量を認定することを意図する。その治療的に有効な量を、１回以上の用量で投与し得る。

本発明は、抗癌剤またはインテグリン結合キナーゼ阻害剤として使用され得る、多くの化合物を提供する。これらの化合物は、式Ｉによって記載され得る：

式中、Ａｒは、置換または非置換の、ビフェニル基、ナフチル基、アントリル基、およびフェナントリル基から成る群から選択され；Ｙは、スルホンアミド、

、および

から成る群から選択され、式中、ｎは０〜３の整数であり、Ｒ^１は、Ｈ、メチル、エチル、プロピル、ｉ−プロピル、またはベンジルであり；そしてＲ^２は、Ｈ、メチル、またはエチルであり；Ｘはモルホリン、グアニジン、ニトロ、

、および

から成る群から選択され、式中、Ｒ^３は、Ｈ、ＳＯ_２ＮＨ_２、Ｌ−Ｌｙｓ、Ｄ−Ｌｙｓ、β−Ａｌａ、Ｌｕｅ、Ｌ−Ｉｌｅ、Ｐｈｅ、Ａｓｐ、Ａｓｎ、Ｇｌｕ、またはＧｌｎであり、そしてＲ^４はＨ、メチル、エチル、アリル、ＣＨ_２ＣＨ_２ＯＨ、またはＣＨ_２ＣＮである；またはその薬学的に許容可能な塩であり得る。Ｘ、Ｙ、およびＡｒの置換基は全て互いに独立に変化され得る。

いくつかの実施態様において、式Ｉの化合物は、式ＩＩによるビフェニル基としてＡｒを含む

式中、Ｒ^５は、Ｈ、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ｔｅｒｔ−ブチル、ＣＦ_３、ＣＣｌ_３、ヒドロキシル、ＯＭｅ、ＣＮ、ＮＯ_２、ＮＨ_２、ＣＯＮＨ_２、ＣＯＮＨＭｅ、アセテート、ＣＯ_２Ｈ、ＣＯ_２Ｍｅ、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、またはＩである。いくつかの実施態様において、Ｒ^５は、ハロメチル基のようなハロアルキル基であり、一方さらなる実施態様において、Ｒ^５はトリフルオロメチル部分（ＣＦ_３）である。

式Ｉの化合物のさらなる実施態様において、Ａｒ基は、縮合アリール基である。例えば、Ａｒ基は、ナフチル基、アントリル基、またはフェナントリル基であり得る。縮合アリール基は、環のあらゆる位置で残りの化合物に結合され得る。

いくつかの実施態様において、式Ｉの化合物のＹ置換基は、スルホンアミド、カルボキサミド（すなわち

）、およびエステル（すなわち

）から選択され得、式中、ｎは０〜３の整数であり、Ｒ^１はＨ、メチル、エチル、プロピル、ｉ−プロピル、またはベンジルであり；そしてＲ^２はＨ、メチル、またはエチルである。例えば、Ｙは

または

であり得る。

さらなる実施態様において、置換基Ｘは変化され得る。例えば、Ｘは、モルホリン、グアニジン、ニトロ、アルキルアミン（すなわち

）およびピペラジン（すなわち

）から選択され得る。アルキルアミンのＲ^３基は、Ｈ、ＳＯ_２ＮＨ_２、Ｌ−Ｌｙｓ、Ｄ−Ｌｙｓ、β−Ａｌａ、Ｌ−Ｌｕｅ、Ｌ−Ｉｌｅ、Ｐｈｅ、Ａｓｐ、Ａｓｎ、Ｇｌｕ、またはＧｌｎであり得る。本発明の好ましい実施態様において、Ｒ^３基はβ−アラニンである。Ｒ^３のアミノ酸は、そのカルボキシル部分によってアミンに結合し、アミド結合または「ペプチド」結合を形成する。ピペラジンのＲ^４基は、Ｈ（ピペラジンを生じる）、メチル、エチル、アリル、ＣＨ_２ＣＨ_２ＯＨ、またはＣＨ_２ＣＮであり得る。

上記で記載した置換基の特定の組み合わせを、本発明のさらなる実施態様において使用する。例えば、式Ｉの化合物のさらなる実施態様は、Ａｒをフェナントリルとして、Ｘをピペラジンとして、Ｙを

として、およびＲ^１をＨ、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、またはベンジルとして提供する。

本発明の多くの実施態様において、Ａｒ基は、下記に示すような、４’−トリフルオロメチル，１，１’−ビフェニル部分である：

Ａｒが４’−トリフルオロメチル，１，１’−ビフェニル部分である実施態様において、Ｘはピペラジンであり、Ｙは

または

であり、そしてＲ^１はＨ、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、またはベンジルである。あるいは、Ｒ^１はメチルまたはエチルのいずれかであり得る。

Ａｒが４’−トリフルオロメチル，１，１’−ビフェニル部分であるさらなる実施態様において、Ｘは

であり、Ｙは

または

であり、そしてＲ^１はＨ、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、またはベンジルである。

式Ｉの化合物の多くの実施態様において、Ａｒは式ＩＩ

によるビフェニル基であり、そしてＸはピペラジンである。これらの実施態様のいくつかにおいて、Ｒ^５はＣＮ、メチル、または水素であり、Ｙは

であり、そしてＲ^１はＨ、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、またはベンジルである。

候補薬剤を、動物モデルにおいて試験し得る。典型的には、その動物モデルは、癌の研究のためのものである。動物モデル（例えばマウス）における様々な癌の研究は、ヒト癌の研究のために通常受け入れられる行為である。例えば、ヒト腫瘍細胞を動物に注射するヌードマウスモデルは、広く様々な癌の研究のために有用な一般的なモデルとして広く受け入れられている（例えば、Ｐｏｌｉｎら、Ｉｎｖｅｓｔｉｇ．Ｎｅｗ Ｄｒｕｇｓ、１５：９９−１０８（１９９７）を参照のこと）。典型的には、候補薬剤で処置したコントロール動物および処置を受けなかったコントロール同腹仔の間で結果を比較する。トランスジェニック動物モデルも利用可能であり、そしてヒト疾患のモデルとして通常受け入れられている（例えば、Ｇｒｅｅｎｂｅｒｇら、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ、９２：３４３９−３４４３（１９９５）を参照のこと）。候補薬剤をこれらの動物モデルにおいて使用して、候補薬剤が、例えば癌転移、癌細胞運動性、癌細胞侵襲性、またはその組み合わせを含む、癌に関連する１つ以上の症状を減少させるかどうかを決定し得る。

本発明の化合物を用いた癌処置
本発明は、式Ｉの化合物またはその薬学的に許容可能な塩を含む薬学的組成物を被験体に投与することによって、被験体において癌を処置するまたは癌の発症を予防する方法を提供する。癌は、異常なおよび過剰な細胞増殖の疾患である。癌は、一般的に環境による傷害、または複製のエラーによって始まり、それは細胞の小さい画分が増殖に対する正常なコントロールを回避し、そしてその数を増やすことを可能にする。その損傷またはエラーは一般的に、腫瘍抑制因子遺伝子のような、細胞周期チェックポイントのコントロール、または細胞増殖コントロールの関連する局面をコードするＤＮＡに影響する。この細胞の画分が増殖する時に、さらなる遺伝変異体が産生され得、そしてもしそれらが増殖優位性を提供するなら、進化的な様式で選択される。増殖優位性を発現したが、まだ完全に癌性になっていない細胞は、前癌性細胞と呼ばれる。癌は、被験体において癌細胞の数の増加を引き起こす。これらの細胞は、腫瘍と呼ばれる細胞の異常な塊を形成し得、その細胞は腫瘍細胞と呼ばれる。被験体の体内の腫瘍細胞の全体量は、腫瘍量と呼ばれる。腫瘍は、良性または悪性のいずれかであり得る。良性腫瘍は、増殖しているが、特定の部位に留まり、そして多くの場合被包性の細胞を含む。他方、悪性腫瘍の細胞は、浸潤および付近の組織を破壊し、そして転移と呼ばれる過程によって体の他の部分へ広がる。

癌は一般的に、そのもとの組織に基づいて名付けられる。いくつかの主要な型の癌が存在する。癌腫は、皮膚または内臓を裏打ちもしくは覆う組織において始まる癌である。肉腫は、骨、軟骨、脂肪、筋肉、血管、または他の結合もしくは支持組織で始まる癌である。白血病は、骨髄のような血液形成組織において始まり、そして多数の異常な血液細胞が産生され、そして血流に入ることを引き起こす癌である。リンパ腫および多発性骨髄腫は、免疫系の細胞において始まる癌である。本発明の化合物を用いて処置され得る癌の型の例は、白血病、非小細胞肺癌、結腸癌、中枢神経系の癌、黒色腫、卵巣癌、腎臓癌、前立腺癌、および乳癌から成る群から選択される癌を含む。

癌性または潜在的に癌性の細胞内のシグナル伝達経路を調節して過剰な増殖を防止する、または細胞内の他の異常な過程の調節を提供することによって、癌を処置または予防し得る。理論に拘束されることを意図しないが、本発明の化合物は、Ａｋｔシグナル伝達経路の調節を提供することによって、癌を処置または予防し得る。Ａｋｔシグナル伝達経路は、セリン／スレオニン特異的タンパク質キナーゼファミリーのメンバーである酵素を含み、そして例えばアポトーシス過程を阻害することによって、細胞生存経路に関与する。Ａｋｔの活性化は、２つのアミノ酸残基におけるリン酸化を必要とし、そのうち１つはホスホイノシチド依存性キナーゼ２（ＰＤＫ２）部位である。インテグリン結合キナーゼ（ＩＬＫ）は、ＰＤＫ２部位をリン酸化し得ると同定されたキナーゼの１つである。本明細書中で提供される実施例において示されるように、本発明の化合物は、インテグリン結合キナーゼの阻害の結果として、ＰＤＫ２リン酸化を防止し得、そしてそれによってＡｋｔの活性化を減少させる。よって、本発明の１つの局面は、細胞を、式Ｉの化合物またはその薬学的に許容可能な塩と接触させることによって、細胞におけるインテグリン結合キナーゼを阻害する方法を提供する。細胞を、インビボ、インビトロ、またはエキソビボにおいて接触させ得る。いくつかの実施態様において、その接触させる細胞は癌細胞であり得る。

本発明の化合物を使用して、予防的および／または治療的処置を提供し得る。本発明の化合物を、例えば癌の発生に先だって、被験体に予防的に投与し得る。予防的（ｐｒｏｐｈｙｌａｃｔｉｃ）（すなわち予防の（ｐｒｅｖｅｎｔｉｖｅ））投与は、被験体において癌が続いて起こる可能性を減少させる、または続いて起こる癌の重症度を減少させるために有効である。癌の家族歴を有する被験体、または高レベルの発癌物質への曝露のような、癌を発症するリスクの高い被験体に、予防的処置を提供し得る。あるいは、本発明の化合物を、例えば既に癌に罹患した被験体に治療的に投与し得る。治療的投与の１つの実施態様において、化合物の投与は、癌を排除するために有効であり、別の実施態様において、その化合物の投与は、癌の重症度を減少させるために、または罹患した被験体の寿命を延長するために有効である。その被験体は、好ましくは家畜化された農場動物（例えばウシ、ウマ、ブタ）、またはペット（例えばイヌ、ネコ）のような哺乳類である。より好ましくは、その被験体はヒトである。

本発明の化合物の投与および処方
本発明はまた、活性成分として式Ｉによって定義されるもののような化合物、およびその活性成分と組み合わせて薬学的に許容可能な液体または固体の担体（単数または複数）を含む薬学的組成物を提供する。上記で癌の処置のために適当であると記載したあらゆる化合物が、本発明の薬学的組成物に含まれ得る。

その化合物を、薬学的に許容可能な塩として投与し得る。薬学的に許容可能な塩は、化合物の比較的無毒性の、無機および有機酸付加塩を指す。これらの塩を、化合物の性質によって、本発明の化合物の最終的な単離および精製の間に系中で、または精製した本発明の化合物を、適当な対イオンと別に反応させ、そして形成された塩を単離することによって調製し得る。代表的な対イオンは、塩化物、臭化物、硝酸塩、アンモニウム塩、硫酸塩、トシラート、リン酸塩、酒石酸塩、エチレンジアミン、およびマレイン酸塩等を含む。例えばＨａｙｎｅｓら、Ｊ．Ｐｈａｒｍ．Ｓｃｉ．９４、２１１１−２１２０頁（２００５）を参照のこと。

その薬学的組成物は、当業者に公知の様々な希釈剤または賦形剤を含む、１つ以上の、様々な患者に伝達するための生理学的に許容可能な担体と共に、１つ以上の本発明の化合物を含む。例えば、非経口投与に関して、等張食塩水が好ましい。局所投与に関して、ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）のような担体、またはその化合物の活性を遮断または阻害しない、局所クリームにおいて典型的に見出される他の薬剤を含むクリームを使用し得る。他の適当な担体は、アルコール、リン酸緩衝化食塩水、および他の平衡塩類溶液を含むがこれに限らない。

その処方物を、単位投与形態において簡便に提示し得る、および調剤の分野において周知のあらゆる方法によって調製し得る。好ましくは、そのような方法は、活性薬剤を、１つ以上の補助成分を構成する担体と一緒にする工程を含む。一般的に、その活性薬剤を、液体担体、細かく分割した固体担体、または両方と均一におよび緊密に結合させ、そして次いで、もし必要なら、その生成物を望ましい処方物に成形することによって、その処方物を調製する。本発明の方法は、被験体、好ましくは哺乳類、およびより好ましくはヒトに、本発明の組成物を、望ましい効果を生じるのに有効な量で投与することを含む。その処方された化合物を、単回用量として、または複数回用量で投与し得る。活性薬剤の有用な投与量を、動物モデルにおけるそのインビトロ活性およびインビボ活性を比較することによって決定し得る。マウス、および他の動物における有効な投与量のヒトへの外挿の方法は、当該分野で公知である；例えば、米国特許第４，９３８，９４９号を参照のこと。

本発明の薬剤を、好ましくは薬学的組成物に処方し、そして次いで、本発明の方法によって、ヒト患者のような被験体に、選択された投与経路に適合させた様々な形態で投与する。その処方物は、経口、直腸内、膣内、局所、鼻、眼、または非経口（皮下、筋肉内、腹腔内、腫瘍内、および静脈内を含む）投与のために適当なものを含むがこれに限らない。

経口投与のために適当な本発明の処方物を、それぞれ前もって決定した量の活性薬剤を粉末または顆粒として含む、錠剤、トローチ、カプセル、ロゼンジ、ウエハ、またはカシェ剤のような分離した単位として、活性化合物を含むリポソームとして、またはシロップ、エリキシル、エマルション、または水薬のような水性液体または非水性液体における溶剤または懸濁剤として提示し得る。そのような組成物および調製物は、典型的には少なくとも約０．１ｗｔ％の活性薬剤を含む。本発明の化合物（すなわち活性薬剤）の量は、その投与量レベルが、被験体において望ましい結果を生じるために有効である量である。

鼻用スプレー処方物は、保存剤および等張剤と共に、活性薬剤の精製水溶液を含む。そのような処方物を、好ましくは鼻粘膜と適合性のｐＨおよび等張状態に調整する。直腸内または膣内投与のための処方物を、カカオバター、または水素化脂肪または水素化脂肪カルボン酸のような、適当な担体を含む坐剤として提示し得る。眼用処方物を、ｐＨおよび等張因子を好ましくは眼のものと調和するように調整する以外は、鼻用スプレーと同様の方法によって調製する。局所処方物は、鉱油、石油、ポリヒドロキシアルコール、または局所薬学的処方物に使用される他の基剤のような、１つ以上の媒体に溶解または懸濁された活性薬剤を含む。

錠剤、トローチ、丸剤、カプセル等はまた、１つ以上の以下のものを含み得る：トラガカントゴム、アカシア、コーンスターチまたはゼラチンのような結合剤；リン酸ジカルシウムのような賦形剤；コーンスターチ、ジャガイモデンプン、アルギン酸等のような崩壊剤；ステアリン酸マグネシウムのような滑沢剤；スクロース、フルクトース、ラクトースまたはアスパルテームのような甘味料；および天然または人工香料。その単位投与形態がカプセルである場合、それはさらに植物油またはポリエチレングリコールのような液体担体を含み得る。様々な他の物質が、コーティング剤として、または他の方法でその固体単位投与形態の物理的形態を改変するために存在し得る。例えば、錠剤、丸剤、またはカプセルを、ゼラチン、ワックス、シェラック、糖等でコーティングし得る。シロップ、またはエリキシルは、１つ以上の甘味料、メチルパラベンまたはプロピルパラベンのような保存剤、糖の結晶化を遅らせる薬剤、多価アルコール、例えばグリセロールまたはソルビトールのような、あらゆる他の成分の溶解度を増加させる薬剤、色素、および香料を含み得る。あらゆる単位投与形態を調製するために使用する材料は、採用される量で実質的に無毒性である。活性薬剤を、徐放調製物および装置に組込み得る。

化合物の調製
本発明の化合物を、特に本明細書中に含まれる説明を考慮して、化学的分野において周知のものと同様の過程を含む合成経路によって合成し得る。出発材料は、一般的にＡｌｄｒｉｃｈ Ｃｈｅｍｉｃａｌｓ（Ｍｉｌｗａｕｋｅｅ、Ｗｉｓｃｏｎｓｉｎ、ＵＳＡ）のような市販の供給源から入手可能である、または当業者に周知の方法を用いて容易に調製される（例えば、一般的にＬｏｕｉｓ Ｆ．ＦｉｅｓｅｒおよびＭａｒｙ Ｆｉｅｓｅｒ、Ｒｅａｇｅｎｔｓ ｆｏｒ Ｏｒｇａｎｉｃ Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ、ｖ．１−１９、Ｗｉｌｅｙ、Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ（１９６７−１９９９編）；Ａｌａｎ Ｒ．Ｋａｔｒｉｔｓｋｙ、Ｏｔｔｏ Ｍｅｔｈ−Ｃｏｈｎ、Ｃｈａｒｌｅｓ Ｗ．Ｒｅｅｓ、Ｃｏｍｐｒｅｈｅｎｓｉｖｅ Ｏｒｇａｎｉｃ Ｆｕｎｃｔｉｏｎａｌ Ｇｒｏｕｐ Ｔｒａｎｓｆｏｒｍａｔｉｏｎｓ、ｖ１−６、Ｐｅｒｇａｍｏｎ Ｐｒｅｓｓ、Ｏｘｆｏｒｄ、Ｅｎｇｌａｎｄ（１９９５）；Ｂａｒｒｙ Ｍ．ＴｒｏｓｔおよびＩａｎ Ｆｌｅｍｉｎｇ、Ｃｏｍｐｒｅｈｅｎｓｉｖｅ Ｏｒｇａｎｉｃ Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ、ｖ．１−８、Ｐｅｒｇａｍｏｎ Ｐｒｅｓｓ、Ｏｘｆｏｒｄ、Ｅｎｇｌａｎｄ（１９９１）；または増補を含むＢｅｉｌｓｔｅｉｎｓ Ｈａｎｄｂｕｃｈ ｄｅｒ ｏｒｇａｎｉｓｃｈｅｎ Ｃｈｅｍｉｅ、４、Ａｕｆｌ．Ｅｄ．Ｓｐｒｉｎｇｅｒ−Ｖｅｒｌａｇ、Ｂｅｒｌｉｎ、Ｇｅｒｍａｎｙ（Ｂｅｉｌｓｔｅｉｎオンラインデータベースからも入手可能）において記載された方法によって調製される）。

当業者は、本発明の化合物を合成するために、他の合成経路を使用し得ることを認識する。特定の出発材料および試薬が、反応概略図において示され、そして下記で議論されるが、様々な誘導体および／または反応条件を提供するために、他の出発材料および試薬で容易に置き換えられ得る。さらに、下記で記載した方法によって調製される多くの化合物を、当業者に周知の従来の方法を用いて、この開示を考慮してさらに改変し得る。

本発明を、以下の実施例によって説明する。特定の実施例、材料、量、および手順は、本明細書中で述べるような本発明の範囲および趣旨によって、広く解釈されることが理解される。

実施例１：式Ｉの化合物の調製
本発明の化合物の調製の一般的な経路を図１に示す。

１−（４’−（トリフルオロメチル）−［１，１’−ビフェニル］−４−イル）エタノン前駆体の合成を、図１の工程１で示す。４−ブロモアセトフェノン（１１．８ｇ、５９ｍｍｏｌ）、トリクロロメチルフェニルボロン酸（１１．４ｇ、６０ｍｍｏｌ）、酢酸パラジウム（ＩＩ）（２５０ｍｇ、２ｍｏｌ％）、粉末炭酸カリウム（２０．３ｇ、１４７ｍｍｏｌ）、およびテトラブチルアンモニウムブロミド（２０．１ｇ、６２ｍｍｏｌ）の混合物を、アルゴンでフラッシュし、そして水（５００ｍＬ）をシリンジで導入した。生じた懸濁液を、撹拌および６０度まで２時間加熱し、次いで室温まで冷却し、水で希釈し、酢酸エチルで抽出し、Ｎａ_２ＳＯ_４で乾燥し、そして減圧下で乾燥するまで濃縮して、生成物を得た（淡黄色の固体；１５．６ｇ、定量的収率）。その生成物を、さらなる精製無しに工程２において使用した。

（Ｚ）−エチル２−ヒドロキシ−４−オキソ−４−（４’−（トリフルオロメチル）−［１，１’−ビフェニル］−４−イル）ブタ−２−エノエート前駆体の合成を、工程２に示す。１００ｍＬの無水テトラヒドロフラン（ＴＨＦ）中の水素化ナトリウム（鉱油中６０％；６．３ｇ、１５７ｍｍｏｌ）の懸濁液に、シュウ酸エチル（１４．４ｇ、９９ｍｍｏｌ）をアルゴン下で加えた。室温（ＲＴ）で１０分間撹拌した後、５０ｍＬのテトラヒドロフラン溶液中の１−（４’−（トリフルオロメチル）−［１，１’−ビフェニル］−４−イル）エタノン（１３．７ｇ、５２ｍｍｏｌ）を滴下してその溶液に加えた。その混合物は、ＲＴで３０分以内に透明および暗赤色になった。その混合物を、次いで減圧下で濃縮し、そして水に懸濁させ、塩酸（２Ｎ）で中和し、その混合物は山吹色の懸濁液になった。その混合物を減圧ろ過して生成物を得る（黄色固体；１８．５ｇ、定量的収率）。その生成物を、さらなる精製無しに工程３において使用した。

エチル１−（４−ニトロフェニル）−５−（４’−（トリフルオロメチル）−［１，１’−ビフェニル］−４−イル）−１Ｈ−ピラゾール−３−カルボキシレート（１４）の合成を、工程３において示したように行った。２００ｍＬのエタノール中、（Ｚ）−エチル２−ヒドロキシ−４−オキソ−４−（４’−（トリフルオロメチル）−［１，１’−ビフェニル］−４−イル）ブタ−２−エノエート（１０ｇ、２７ｍｍｏｌ）の懸濁液に、４−ニトロ−フェニルヒドラジン塩酸塩（５ｇ、３３ｍｍｏｌ）を加えた。室温で１６時間撹拌した後、その混合物は褐色の懸濁液を含む暗褐色の溶液になった。その溶液を減圧によって濃縮し、そしてエタノールで再結晶化して生成物を得た（褐色固体；８．２ｇ、６３％）。その生成物を、さらなる精製無しに、工程４において使用した。

Ｎ−エチル−１−（４−ニトロフェニル）−５−（４’−（トリフルオロメチル）−［１，１’−ビフェニル］−４−イル）−１Ｈ−ピラゾール−３−カルボキサミド（１５）の合成を、工程４において示したように行った。５ｍＬのエタノール中、化合物１４（２１８ｍｇ、０．４５ｍｍｏｌ）の懸濁液に、エチルアミン（メタノール中７０％、５ｍＬ）を加えた。その混合溶液を、密封チューブの中に移し、ビンを脱気および密封した。そのビンを１２０℃に加熱し、そして１６時間撹拌した。その反応混合物は、黄色の懸濁液を有する黒色の溶液になった。加熱後、溶媒を減圧下で除去し、そしてエタノールで再結晶化して、生成物を得た（黄色固体；１５３ｍｇ、７０％）。

１−（４−アミノフェニル）−Ｎ−エチル−５−（４’−（トリフルオロメチル）−［１，１’−ビフェニル］−４−イル）−１Ｈ−ピラゾール−３−カルボキサミド（１６）の合成を、図１の工程５において示したように行った。２０ｍＬのメタノール中、化合物１５（１５３ｍｇ、０．３２ｍｍｏｌ）の溶液に、活性炭上のパラジウム（Ｐｄ／Ｃ；１５ｍｇ）を加え、Ｈ_２下で、７０ｐｓｉで１２時間撹拌した。その溶液を次いでセライトフィルターパッドを通してろ過して触媒を除去し、そして減圧下で乾燥するまで濃縮した。その未精製の生成物を、次いでクロロホルムによって再結晶化して、生成物を得た（白色固体；１３０ｍｇ、９１％）。

Ｎ−メチル−３−（１−（４−（ピペラジン−１−イル）フェニル）−５−（４’−（トリフルオロメチル）−［１，１’−ビフェニル］−４−イル）−１Ｈ−ピラゾール−３−イル）プロパンアミド（２）の合成を、工程６で示したように行った。２０ｍＬのキシレン中、化合物２０（２ｇ、４．３ｍｍｏｌ）の懸濁液に、ビス（２−クロロエチル）アミン塩酸塩（１０５３ｍｇ、５．９ｍｍｏｌ）を加え、その後その混合物を１７０℃まで加熱した。２０時間撹拌した後、その溶液は褐色の粘着性の混合物になった。減圧を用いて溶媒を除去し、そして未精製の生成物を、シリカゲルクロマトグラフィーによって精製し、続いて酢酸エチルによって再結晶して、生成物を得た（白色固体；１３３４ｍｇ、５８％）。

１−（４−（３−アミノプロパンアミド）フェニル）−Ｎ−メチル−５−（４’−（トリフルオロメチル）−［１，１’−ビフェニル］−４−イル）−１Ｈ−ピラゾール−３−カルボキサミド（４）の合成を、工程７および８において示すように行った。１５ｍＬの無水テトラヒドロフラン中、化合物１６（９５ｍｇ、０．２１ｍｍｏｌ）の溶液に、β−Ａｌａ−ＯＨ（１１１ｍｇ、０．５９ｍｍｏｌ）および１−エチル−３−（３−ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド（ＥＤＣ、２４８ｍｇ、１．６ｍｍｏｌ）を加えた。次いでその混合物を室温で１６時間撹拌し、そして次いで減圧下で乾燥するまで濃縮した。その残渣を水中に懸濁し、そしてその生成物をジクロロメタンによって抽出した。有機相を硫酸ナトリウムで乾燥し、そして減圧下で乾燥するまで濃縮して化合物１７（６１ｍｇ、４７％）を得た。化合物１７（６１ｍｇ、０．１ｍｍｏｌ）を、１０ｍＬの塩酸メタノール溶液（３Ｎ、４１ｍＬ）に溶解し、室温で２時間撹拌し、そして減圧下で乾燥するまで濃縮した。その未精製の生成物を、シリカゲルクロマトグラフィーによって精製して、化合物４を白色粉末として得た（５９ｍｇ、定量的収率）。

（Ｚ）−エチル４−ヒドロキシ−６−オキソ−６−（４’−（トリフルオロメチル）−［１，１’−ビフェニル］−４−イル）ヘキサ−４−エノエート前駆体の合成を、工程９で示したように行った。５００ｍＬのジクロロメタン中、１−（４’−（トリフルオロメチル）−［１，１’−ビフェニル］−４−イル）エタノン（１７ｇ、６４ｍｍｏｌ）の溶液に、調製済みのエチル４−（１Ｈ−ベンゾ［ｄ］［１，２，３］トリアゾール−１−イル）−４−オキソブタノエート（１９．８ｇ、８０ｍｍｏｌ）、臭化マグネシウムエチルエーテラート（２２ｇ、８５ｍｍｏｌ）を、アルゴン下で加えた。室温で１０分間撹拌した後、Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（ＤＩＰＥＡ、２０ｍｌ、１１５ｍｍｏｌ）を、アルゴン下でその溶液に滴下して加えた。室温で１６時間撹拌した後、そして水で洗浄した（２００ｍＬ×２）。有機相を硫酸ナトリウムで乾燥し、そして減圧下で乾燥するまで濃縮した。その未精製の生成物を、次いでシリカゲルクロマトグラフィーによって精製し、続いてエタノールによって再結晶して、生成物を得た（白色結晶；２０．９ｇ、８３％）。

多くのさらなる化合物を、上記で記載した方法を用いて調製した。Ａｒ基は、当業者に公知の技術を用いて、容易に図１に示したものから変化し得ることに注意する。これらのさらなる化合物の名前および関連する^１Ｈ ＮＭＲ（プロトン核磁気共鳴）および高分解能質量分析データを下記で提供する。

Ｎ−エチル−１−（４−（ピペラジン−１−イル）フェニル）−５−（４’−（トリフルオロメチル）−［１，１’−ビフェニル］４−イル）−１Ｈ−ピラゾール−３−カルボキサミド（１）：

ＨＲＭＳ（Ｍ＋Ｈ^＋）：理論質量、５２０．２３２４；実際の質量、５２０．２３１２。

Ｎ−メチル−３−（１−（４−（ピペラジン−１−イル）フェニル）−５−（４’−（トリフルオロメチル）−［１，１’−ビフェニル］−４−イル）−１Ｈ−ピラゾール−３−イル）プロパンアミド（２）：

ＨＲＭＳ（Ｍ＋Ｈ^＋）：理論質量、５３４．２４８１；実際の質量、５３４．２４６７。

Ｎ−エチル−３−（１−（４−（ピペラジン−１−イル）フェニル）−５−（４’−（トリフルオロメチル）−［１，１’−ビフェニル］−４−イル）−１Ｈ−ピラゾール−３−イル）プロパンアミド（３）；

ＨＲＭＳ（Ｍ＋Ｈ^＋）：理論質量、５４８．２６３７；実際の質量、５４８．２６２３。

１−（４−（３−アミノプロパンアミド）フェニル）−Ｎ−メチル−５−（４’−（トリフルオロメチル）−［１，１’−ビフェニル］−４−イル）−１Ｈ−ピラゾール−３−カルボキサミド（４）：

ＨＲＭＳ（Ｍ＋Ｈ^＋）：理論質量、５０８．１９６０；実際の質量、５０８．１９５３。

１−（４−（３−アミノプロパンアミド）フェニル）−Ｎ−エチル−５−（４’−（トリフルオロメチル）−［１，１’−ビフェニル］−４−イル）−１Ｈ−ピラゾール−３−カルボキサミド（５）：

ＨＲＭＳ（Ｍ＋Ｈ^＋）：理論質量、５２２．２１１７；実際の質量、５２２．２１１２。

１−（４−（３−アミノプロパンアミド）フェニル）−Ｎ−イソプロピル−５−（４’−（トリフルオロメチル）−［１，１’−ビフェニル］−４−イル）−１Ｈ−ピラゾール−３−カルボキサミド（６）；（^１Ｈ−ＮＭＲデータは入手可能でない）；

：理論質量、５３６．２２７３；実際の質量、５３６．２２６９。

３−アミノ−Ｎ−（４−（３−（３−（メチルアミノ）−３−オキソプロピル）−５−（４’−（トリフルオロメチル）−［１，１’−ビフェニル］−４−イル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）フェニル）プロパンアミド（７）：

ＨＲＭＳ（Ｍ＋Ｈ^＋）；理論質量、５３６．２２７３；実際の質量、５３６．２２６９。

３−アミノ−Ｎ−（４−（３−（３−（エチルアミノ）−３−オキソプロピル）−５−（４’−（トリフルオロメチル）−［１，１’−ビフェニル］−４−イル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）フェニル）プロパンアミド（８）：

ＨＲＭＳ（Ｍ＋Ｈ^＋）：理論質量、５５０．２４３０；実際の質量、５５０．２４２９。

３−アミノ−Ｎ−（４−（３−（３−（イソプロピルアミノ）−３−オキソプロピル）−５−（４’−（トリフルオロメチル）−［１，１、’−ビフェニル］−４−イル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）フェニル）プロパンアミド（９）：

ＨＲＭＳ（Ｍ＋Ｈ^＋）：理論質量、５６４．２５８６；実際の質量、５６４．２５７９。

３−（５−（４’−シアノ−［１，１’−ビフェニル］−４−イル）−１−（４−（ピペラジン−１−イル）フェニル）−１Ｈ−ピラゾール−３−イル）−Ｎ−メチルプロパンアミド（１０）：

Ｎ−メチル−３−（５−（４’−メチル−［１，１’−ビフェニル］−４−イル）−１−（４−（ピペラジン−１−イル）フェニル）−１Ｈ−ピラゾール−３−イル）プロパンアミド（１１）：

３−（５−（［１，１’−ビフェニル］−４−イル）−１−（４−（ピペラジン−１−イル）フェニル）−１Ｈ−ピラゾール−３−イル）−Ｎ−メチルプロパンアミド（１２）：

Ｎ−メチル−３−（５−（フェナントレン−２−イル）−１−（４−（ピペラジン−１−イル）フェニル）−１Ｈ−ピラゾール−３−イル）プロパンアミド（１３）：

実施例２：化合物１〜１３の薬理学
化合物１〜９を、ＰＣ−３ヒト前立腺癌細胞において、（ａ）ＰＤＫ２阻害活性の証拠（すなわち、ＰＤＫ１部位［Ｔ３０８］に対してＰＤＫ２部位［Ｓ４７３］においてＡｋｔリン酸化を選択的に阻害する能力）、および（ｂ）ウェスタンブロット分析およびＭＴＴアッセイそれぞれによる抗増殖性活性に関してスクリーニングした。図２Ａに示すように、スクリーニングした化合物のうち２つ（２および３）が、Ａｋｔ−Ｓ４７３リン酸化の明白な選択的阻害を誘発し、ＰＤＫ２阻害活性を示した。さらに、化合物２および３はまた、抗増殖性活性に関して９つの化合物のうち最も強力であった（図２Ｂ）。

構造的に関連する化合物２および３は、Ｎ−アルキル部分においてのみ異なる（すなわちメチル対エチル）ので、より詳細な評価のために化合物２を選択した。細胞生存能に対する化合物２の用量依存性および時間依存性効果を、２つの前立腺癌細胞系（ＰＣ−３、ＬＮＣａＰ）および５つの乳癌細胞系（ＭＤＡ−ＭＢ−４６８、ＭＤＡ−ＭＢ−２３１、ＣＡＬ５１、ＭＣＦ−７、ＳＫＢＲ３）のパネルで決定した（図３ＡおよびＢ）。さらに、癌細胞系をまた、非悪性前立腺および乳腺上皮細胞と並行して評価した（図３Ａ、下パネル；３Ｂ右下パネル）。重要なことに、化合物２は、その非悪性対応物に対して、癌細胞に関して選択的な細胞毒性を示した。

そのデータは、化合物２は、インテグリン結合キナーゼの推定阻害剤であることを示す。Ａｋｔの完全な活性化は、２つのアミノ酸残基：ホスホイノシチド依存性タンパク質キナーゼ−１（ＰＤＫ１）によってリン酸化されるＴ３０２、およびＰＤＫ２部位として公知であり、そして多くの異なるキナーゼによってリン酸化され得るＳ４７３、におけるリン酸化を必要とする。これらのうちの１つ、インテグリン結合キナーゼ（ＩＬＫ）は、その発現および活性が、様々な型の癌において増加しており、そしてその阻害はアポトーシスおよび細胞周期停止を誘発することによって癌細胞の生存を抑制し得るので、有望な抗癌標的として同定された。

ホスホ−Ａｋｔ−Ｔ３０８のものと相対的なホスホ−Ａｋｔ−Ｓ４７３レベルの選択的抑制を示すウェスタンブロットデータに基づいて（図２Ａ）、化合物２を、ＰＤＫ２活性の阻害剤として同定した。ＩＬＫシグナル伝達を阻害する能力に関して化合物２を評価するために、ＩＬＫの下流の標的に対するその効果を、ＰＣ−３細胞およびＭＤＡ−ＭＢ−４６８細胞において、ウェスタンブロッティングによって評価した（図４）。ホスホ−Ｓ４７３−Ａｋｔレベルにおける明白なおよび選択的な減少を引き起こすことに加えて、化合物２はまた、別のＩＬＫ基質、ＧＳＫ３βのリン酸化を抑制し、このことは化合物２がＩＬＫの阻害剤であることを示唆した。

別のシリーズの試験において、化合物１０〜１３を、化合物２と並行して、ＰＣ−３ヒト前立腺癌細胞におけるＭＴＴアッセイによって、抗増殖性活性に関してスクリーニングした。図５Ａに示すように、化合物１１および１３は、２〜３μＭの範囲で、ＩＣ_５０値で最も高い効力を示したが、どちらも化合物２を超えなかった。ＰＣ−３細胞におけるＩＬＫの下流の標的のリン酸化状態に対する、化合物１３対化合物２の効果を、ウェスタンブロッティングによって評価した。化合物１３は、ホスホ−Ａｋｔ−Ｔ３０８と比較してホスホ−Ａｋｔ−Ｓ４７３の強力な抑制を誘発したが、化合物２とは異なり、ＧＳＫ３βリン酸化に対する実質的な抑制効果を示さなかった（図５Ｂ）。

以前に前立腺癌細胞系においてスクリーニングした（図２）化合物４〜９を、ＭＣＦ−７ヒト乳癌細胞およびＳＫＢＲ３ヒト乳癌細胞において抗増殖性活性に関して評価した。化合物５は、試験したものの中で、いずれの細胞系においても活性を示した（４〜５μＭの範囲のＩＣ_５０値）唯一の化合物であり（図６）、それはこれらの同じ細胞系において化合物２が示したよりも強力ではなかった（図３Ｂ）。

ＰＣ−３前立腺腫瘍異種移植モデルにおける化合物２のインビボ腫瘍抑制活性も評価した。上記で記載した結果に基づいて、化合物２を新規ＩＬＫ／ＰＤＫ２阻害剤として開発するリード薬剤として同定した。化合物２のインビボ抗腫瘍活性を評価するために、確立した皮下ＰＣ−３腫瘍異種移植片（平均開始腫瘍体積、１５７．１±２９．１ｍｍ^３）を有する胸腺欠損ヌードマウスを、２５ｍｇ／ｋｇまたは５０ｍｇ／ｋｇで１日１回の化合物２、またはビヒクル（滅菌水中０．５％メチルセルロースおよび０．１％Ｔｗｅｅｎ ８０）で、３５日間、経口で処置した（ｎ＝５匹のマウス）。図７に示すように、２５ｍｇ／ｋｇおよび５０ｍｇ／ｋｇの化合物２によるマウスの毎日の処置は、処置３５日目に、ビヒクル処置コントロールと比較して、ＰＣ−３腫瘍の増殖をそれぞれ４２％（Ｐ＝０．１０）および５６％（Ｐ＝０．０３）阻害した。経口投与後の化合物２のインビボ有効性は、その経口生物学的利用能を示す。さらに、その化合物は、マウスによってよく許容され、研究の過程において、毒性の明白な徴候、または体重の有意な変化を示さなかった。

本明細書中で引用される全ての特許、特許出願、および刊行物の完全な開示、および電子的に入手可能な資料は、参考文献に組み込まれる。前述の詳細な説明および実施例は、理解の明確さのためにのみ提供された。不必要な制限はそこから理解されない。特に、本発明の化合物が有効であることを通して可能性のあるメカニズムを説明する理論を提示し得るが、発明者らは、本明細書中で記載された理論によって拘束されない。当業者に明らかな変更は、特許請求の範囲によって定義される本発明に含まれるので、本発明は、示されたおよび記載された正確な詳細に制限されない。

Claims (21)

1. 式Ｉによる化合物：
   またはその薬学的に許容可能な塩であって、
   式中、Ａｒは、置換または非置換の、ビフェニル基、ナフチル基、アントリル基、およびフェナントリル基から成る群から選択され；
   Ｙは、スルホンアミド、
   、および
   から成る群から選択され、式中、ｎは０〜３の整数であり、
   Ｒ^１は、Ｈ、メチル、エチル、プロピル、ｉ−プロピル、またはベンジルであり；そしてＲ^２は、Ｈ、メチル、またはエチルであり；
   Ｘは、モルホリン、グアニジン、ニトロ、
   、および
   から成る群から選択され、
   式中、Ｒ^３は、Ｈ、ＳＯ_２ＮＨ_２、Ｌ−Ｌｙｓ、Ｄ−Ｌｙｓ、β−Ａｌａ、Ｌ−Ｌｕｅ、Ｌ−Ｉｌｅ、Ｐｈｅ、Ａｓｐ、Ａｓｎ、Ｇｌｕ、またはＧｌｎであり、そしてＲ^４は、Ｈ、メチル、エチル、アリル、ＣＨ_２ＣＨ_２ＯＨ、またはＣＨ_２ＣＮである、化合物またはその薬学的に許容可能な塩。
2. Ａｒは、式ＩＩによるビフェニル基であり、
   式中、Ｒ^５は、Ｈ、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ｔｅｒｔ−ブチル、ＣＦ_３、ＣＣｌ_３、ヒドロキシル、ＯＭｅ、ＣＮ、ＮＯ_２、ＮＨ_２、ＣＯＮＨ_２、ＣＯＮＨＭｅ、アセテート、ＣＯ_２Ｈ、ＣＯ_２Ｍｅ、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、またはＩである、請求項１に記載の化合物。
3. Ａｒは、ナフチル基、アントリル基、またはフェナントリル基である、請求項１に記載の化合物。
4. Ａｒは、フェナントリルであり、Ｘは、ピペラジンであり、Ｙは、
   であり、そしてＲ^１は、Ｈ、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、またはベンジルである、請求項１に記載の化合物。
5. Ｒ^５は、ＣＦ_３である、請求項２に記載の化合物。
6. Ｘは、ピペラジンであり、Ｙは、
   であり、そしてＲ^１は、Ｈ、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、またはベンジルである、請求項５に記載の化合物。
7. Ｘは、ピペラジンであり、Ｙは、
   であり、そしてＲ^１は、Ｈ、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、またはベンジルである、請求項５に記載の化合物。
8. Ｒ^１は、メチル、またはエチルである、請求項７に記載の化合物。
9. Ｘは、
   であり、Ｙは、
   であり、そしてＲ^１は、Ｈ、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、またはベンジルである、請求項５に記載の化合物。
10. Ｘは、
    であり、Ｙは、
    であり、そしてＲ^１は、Ｈ、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、またはベンジルである、請求項５に記載の化合物。
11. Ｘは、ピペラジンである、請求項２に記載の化合物。
12. Ｒ^５は、ＣＮであり、Ｙは、
    であり、そしてＲ^１は、Ｈ、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、またはベンジルである、請求項１１に記載の化合物。
13. Ｒ^５は、メチルであり、Ｙは、
    であり、そしてＲ^１は、Ｈ、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、またはベンジルである、請求項１１に記載の化合物。
14. Ｒ^５は、水素であり、Ｙは、
    であり、そしてＲ^１は、Ｈ、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、またはベンジルである、請求項１１に記載の化合物。
15. 被験体において癌を処置するまたは予防する方法であって、該方法は、該被験体に式Ｉの化合物またはその薬学的に許容可能な塩を含む薬学的組成物を投与することを含み、
    式中、Ａｒは、置換または非置換の、ビフェニル基、ナフチル基、アントリル基、およびフェナントリル基から成る群から選択され；
    Ｙは、スルホンアミド、
    、および
    から成る群から選択され、式中、ｎは０〜３の整数であり、
    Ｒ^１は、Ｈ、メチル、エチル、プロピル、ｉ−プロピル、またはベンジルであり；そしてＲ^２は、Ｈ、メチル、またはエチルであり；
    Ｘは、モルホリン、グアニジン、ニトロ、
    、および
    から成る群から選択され、
    式中、Ｒ^３は、Ｈ、ＳＯ_２ＮＨ_２、Ｌ−Ｌｙｓ、Ｄ−Ｌｙｓ、β−Ａｌａ、Ｌ−Ｌｕｅ、Ｌ−Ｉｌｅ、Ｐｈｅ、Ａｓｐ、Ａｓｎ、Ｇｌｕ、またはＧｌｎであり、そしてＲ^４は、メチル、エチル、アリル、ＣＨ_２ＣＨ_２ＯＨ、またはＣＨ_２ＣＮである、
    方法。
16. 前記癌は、白血病、非小細胞肺癌、結腸癌、中枢神経系癌、黒色腫、卵巣癌、腎臓癌、前立腺癌、および乳癌から成る群から選択される、請求項１５に記載の方法。
17. Ｘは、ピペラジンであり、Ｙは、
    であり、そしてＡｒは、式ＩＩによるビフェニル基であり、
    式中、Ｒ^１は、Ｈ、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、またはベンジルであり、そしてＲ^５は、Ｈ、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ｔｅｒｔ−ブチル、ＣＦ_３、ＣＣｌ_３、ヒドロキシル、ＯＭｅ、ＣＮ、ＮＯ_２、ＮＨ_２、ＣＯＮＨ_２、ＣＯＮＨＭｅ、アセテート、ＣＯ_２Ｈ、ＣＯ_２Ｍｅ、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、またはＩである、請求項１５に記載の方法。
18. Ｒ^１は、メチル、またはエチルであり、そしてＲ^５は、ＣＦ_３である、請求項１７に記載の方法。
19. 細胞を式Ｉの化合物またはその薬学的に許容可能な塩と接触させることによって、該細胞におけるインテグリン結合キナーゼを阻害する方法であって、
    式中、Ａｒは、置換または非置換の、ビフェニル基、ナフチル基、アントリル基、およびフェナントリル基から成る群から選択され；
    Ｙは、スルホンアミド、
    、および
    から成る群から選択され、式中、ｎは０〜３の整数であり、
    Ｒ^１は、Ｈ、メチル、エチル、プロピル、ｉ−プロピル、またはベンジルであり；そしてＲ^２は、Ｈ、メチル、またはエチルであり；
    Ｘは、モルホリン、グアニジン、ニトロ、
    および
    から成る群から選択され、式中、Ｒ^３は、Ｈ、ＳＯ_２ＮＨ_２、Ｌ−Ｌｙｓ、Ｄ−Ｌｙｓ、β−Ａｌａ、Ｌ−Ｌｕｅ、Ｌ−Ｉｌｅ、Ｐｈｅ、Ａｓｐ、Ａｓｎ、Ｇｌｕ、またはＧｌｎであり、そしてＲ^４は、メチル、エチル、アリル、ＣＨ_２ＣＨ_２ＯＨ、またはＣＨ_２ＣＮである、
    方法。
20. Ｘは、ピペラジンであり、Ｙは、
    であり、そしてＡｒは、式ＩＩによるビフェニル基であり、
    式中、Ｒ^１は、Ｈ、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、またはベンジルであり、そしてＲ^５は、Ｈ、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ｔｅｒｔ−ブチル、ＣＦ_３、ＣＣｌ_３、ヒドロキシル、ＯＭｅ、ＣＮ、ＮＯ_２、ＮＨ_２、ＣＯＮＨ_２、ＣＯＮＨＭｅ、アセテート、ＣＯ_２Ｈ、ＣＯ_２Ｍｅ、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、またはＩである、請求項１９に記載の方法。
21. Ｒ^１は、メチル、またはエチルであり、そしてＲ^５は、ＣＦ_３である、請求項２０に記載の方法。