JP2012507573A - ニューロテンシン誘導分岐ペプチドおよびその使用 - Google Patents
ニューロテンシン誘導分岐ペプチドおよびその使用 Download PDFInfo
- Publication number
- JP2012507573A JP2012507573A JP2011535105A JP2011535105A JP2012507573A JP 2012507573 A JP2012507573 A JP 2012507573A JP 2011535105 A JP2011535105 A JP 2011535105A JP 2011535105 A JP2011535105 A JP 2011535105A JP 2012507573 A JP2012507573 A JP 2012507573A
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- tumor
- branched
- peptide
- drug
- multimeric molecule
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 title claims description 63
- PCJGZPGTCUMMOT-ISULXFBGSA-N neurotensin Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O)NC(=O)[C@H]1N(CCC1)C(=O)[C@H](CCCN=C(N)N)NC(=O)[C@H](CCCN=C(N)N)NC(=O)[C@H]1N(CCC1)C(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@H](CC(N)=O)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H]1NC(=O)CC1)C1=CC=C(O)C=C1 PCJGZPGTCUMMOT-ISULXFBGSA-N 0.000 title description 222
- 101800001814 Neurotensin Proteins 0.000 title description 111
- 102400001103 Neurotensin Human genes 0.000 title description 109
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 title description 22
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 claims abstract description 60
- 238000003745 diagnosis Methods 0.000 claims abstract description 7
- 239000003814 drug Substances 0.000 claims description 53
- 210000001072 colon Anatomy 0.000 claims description 17
- 208000021045 exocrine pancreatic carcinoma Diseases 0.000 claims description 12
- 210000000496 pancreas Anatomy 0.000 claims description 11
- 208000008443 pancreatic carcinoma Diseases 0.000 claims description 11
- 206010060862 Prostate cancer Diseases 0.000 claims description 10
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 claims description 10
- 201000001514 prostate carcinoma Diseases 0.000 claims description 10
- 238000011282 treatment Methods 0.000 claims description 10
- 206010009944 Colon cancer Diseases 0.000 claims description 7
- 239000002246 antineoplastic agent Substances 0.000 claims description 5
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 5
- FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 4-amino-1-[(2r)-6-amino-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-amino-3-phenylpropanoyl]amino]-3-phenylpropanoyl]amino]-4-methylpentanoyl]amino]hexanoyl]piperidine-4-carboxylic acid Chemical compound C([C@H](C(=O)N[C@H](CC(C)C)C(=O)N[C@H](CCCCN)C(=O)N1CCC(N)(CC1)C(O)=O)NC(=O)[C@H](N)CC=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1 FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 0.000 claims description 4
- 230000000259 anti-tumor effect Effects 0.000 claims description 4
- 238000002405 diagnostic procedure Methods 0.000 claims description 2
- 239000003085 diluting agent Substances 0.000 claims description 2
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 claims description 2
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 claims description 2
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims description 2
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 claims description 2
- 239000002904 solvent Substances 0.000 claims description 2
- 125000003275 alpha amino acid group Chemical group 0.000 claims 1
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 abstract description 8
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 48
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 43
- 230000027455 binding Effects 0.000 description 26
- LGZKGOGODCLQHG-CYBMUJFWSA-N 5-[(2r)-2-hydroxy-2-(3,4,5-trimethoxyphenyl)ethyl]-2-methoxyphenol Chemical compound C1=C(O)C(OC)=CC=C1C[C@@H](O)C1=CC(OC)=C(OC)C(OC)=C1 LGZKGOGODCLQHG-CYBMUJFWSA-N 0.000 description 15
- LGZKGOGODCLQHG-UHFFFAOYSA-N combretastatin Natural products C1=C(O)C(OC)=CC=C1CC(O)C1=CC(OC)=C(OC)C(OC)=C1 LGZKGOGODCLQHG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 15
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 15
- FBOZXECLQNJBKD-ZDUSSCGKSA-N L-methotrexate Chemical compound C=1N=C2N=C(N)N=C(N)C2=NC=1CN(C)C1=CC=C(C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O)C=C1 FBOZXECLQNJBKD-ZDUSSCGKSA-N 0.000 description 13
- 230000003013 cytotoxicity Effects 0.000 description 13
- 231100000135 cytotoxicity Toxicity 0.000 description 13
- 229960000485 methotrexate Drugs 0.000 description 13
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 12
- ODKNJVUHOIMIIZ-RRKCRQDMSA-N floxuridine Chemical compound C1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1N1C(=O)NC(=O)C(F)=C1 ODKNJVUHOIMIIZ-RRKCRQDMSA-N 0.000 description 12
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 description 11
- 102000005962 receptors Human genes 0.000 description 11
- 108020003175 receptors Proteins 0.000 description 11
- LOBCDGHHHHGHFA-LBPRGKRZSA-N (S)-monastrol Chemical class CCOC(=O)C1=C(C)NC(=S)N[C@H]1C1=CC=CC(O)=C1 LOBCDGHHHHGHFA-LBPRGKRZSA-N 0.000 description 10
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N Diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 10
- 229960004630 chlorambucil Drugs 0.000 description 10
- GLVAUDGFNGKCSF-UHFFFAOYSA-N mercaptopurine Chemical compound S=C1NC=NC2=C1NC=N2 GLVAUDGFNGKCSF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- JCKYGMPEJWAADB-UHFFFAOYSA-N chlorambucil Chemical compound OC(=O)CCCC1=CC=C(N(CCCl)CCCl)C=C1 JCKYGMPEJWAADB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 8
- 238000013268 sustained release Methods 0.000 description 8
- 239000012730 sustained-release form Substances 0.000 description 8
- 210000004881 tumor cell Anatomy 0.000 description 8
- 239000012729 immediate-release (IR) formulation Substances 0.000 description 7
- 229950002376 tirapazamine Drugs 0.000 description 7
- QVMPZNRFXAKISM-UHFFFAOYSA-N tirapazamine Chemical compound C1=CC=C2[N+]([O-])=NC(=N)N(O)C2=C1 QVMPZNRFXAKISM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 5
- 230000001413 cellular effect Effects 0.000 description 5
- 201000010897 colon adenocarcinoma Diseases 0.000 description 5
- 208000029742 colonic neoplasm Diseases 0.000 description 5
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 5
- 229960001428 mercaptopurine Drugs 0.000 description 5
- 230000004614 tumor growth Effects 0.000 description 5
- FWBHETKCLVMNFS-UHFFFAOYSA-N 4',6-Diamino-2-phenylindol Chemical compound C1=CC(C(=N)N)=CC=C1C1=CC2=CC=C(C(N)=N)C=C2N1 FWBHETKCLVMNFS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 206010052747 Adenocarcinoma pancreas Diseases 0.000 description 4
- WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N Formaldehyde Chemical compound O=C WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 239000000579 Gonadotropin-Releasing Hormone Substances 0.000 description 4
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 4
- 229960002685 biotin Drugs 0.000 description 4
- 239000011616 biotin Substances 0.000 description 4
- 238000002512 chemotherapy Methods 0.000 description 4
- 230000008878 coupling Effects 0.000 description 4
- 238000010168 coupling process Methods 0.000 description 4
- 238000005859 coupling reaction Methods 0.000 description 4
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 4
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 4
- 201000002094 pancreatic adenocarcinoma Diseases 0.000 description 4
- 238000011160 research Methods 0.000 description 4
- 230000008685 targeting Effects 0.000 description 4
- 206010061902 Pancreatic neoplasm Diseases 0.000 description 3
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 3
- 239000013592 cell lysate Substances 0.000 description 3
- 210000000170 cell membrane Anatomy 0.000 description 3
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 3
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 3
- GNBHRKFJIUUOQI-UHFFFAOYSA-N fluorescein Chemical compound O1C(=O)C2=CC=CC=C2C21C1=CC=C(O)C=C1OC1=CC(O)=CC=C21 GNBHRKFJIUUOQI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 3
- 102000014187 peptide receptors Human genes 0.000 description 3
- 108010011903 peptide receptors Proteins 0.000 description 3
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 3
- YBJHBAHKTGYVGT-ZKWXMUAHSA-N (+)-Biotin Chemical group N1C(=O)N[C@@H]2[C@H](CCCCC(=O)O)SC[C@@H]21 YBJHBAHKTGYVGT-ZKWXMUAHSA-N 0.000 description 2
- BUOYTFVLNZIELF-UHFFFAOYSA-N 2-phenyl-1h-indole-4,6-dicarboximidamide Chemical compound N1C2=CC(C(=N)N)=CC(C(N)=N)=C2C=C1C1=CC=CC=C1 BUOYTFVLNZIELF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- QNAYBMKLOCPYGJ-UHFFFAOYSA-N D-alpha-Ala Natural products CC([NH3+])C([O-])=O QNAYBMKLOCPYGJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108700012941 GNRH1 Proteins 0.000 description 2
- DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N Glycine Chemical compound NCC(O)=O DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- WZUVPPKBWHMQCE-UHFFFAOYSA-N Haematoxylin Chemical compound C12=CC(O)=C(O)C=C2CC2(O)C1C1=CC=C(O)C(O)=C1OC2 WZUVPPKBWHMQCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- OAKJQQAXSVQMHS-UHFFFAOYSA-N Hydrazine Chemical compound NN OAKJQQAXSVQMHS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 206010025323 Lymphomas Diseases 0.000 description 2
- 102000003939 Membrane transport proteins Human genes 0.000 description 2
- 108090000301 Membrane transport proteins Proteins 0.000 description 2
- 241000699660 Mus musculus Species 0.000 description 2
- 101000857870 Squalus acanthias Gonadoliberin Proteins 0.000 description 2
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 2
- 208000009956 adenocarcinoma Diseases 0.000 description 2
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 2
- UCMIRNVEIXFBKS-UHFFFAOYSA-N beta-alanine Chemical compound NCCC(O)=O UCMIRNVEIXFBKS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000001588 bifunctional effect Effects 0.000 description 2
- 238000001574 biopsy Methods 0.000 description 2
- 125000003178 carboxy group Chemical group [H]OC(*)=O 0.000 description 2
- 239000006143 cell culture medium Substances 0.000 description 2
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 2
- 230000000973 chemotherapeutic effect Effects 0.000 description 2
- 229940127089 cytotoxic agent Drugs 0.000 description 2
- 239000000412 dendrimer Substances 0.000 description 2
- 229920000736 dendritic polymer Polymers 0.000 description 2
- 238000010586 diagram Methods 0.000 description 2
- 229960000961 floxuridine Drugs 0.000 description 2
- XLXSAKCOAKORKW-AQJXLSMYSA-N gonadorelin Chemical compound C([C@@H](C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)NCC(N)=O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)NC(=O)[C@H](CC=1N=CNC=1)NC(=O)[C@H]1NC(=O)CC1)C1=CC=C(O)C=C1 XLXSAKCOAKORKW-AQJXLSMYSA-N 0.000 description 2
- 229940035638 gonadotropin-releasing hormone Drugs 0.000 description 2
- 230000007062 hydrolysis Effects 0.000 description 2
- 238000006460 hydrolysis reaction Methods 0.000 description 2
- 238000011081 inoculation Methods 0.000 description 2
- 230000001404 mediated effect Effects 0.000 description 2
- 230000009061 membrane transport Effects 0.000 description 2
- 239000002858 neurotransmitter agent Substances 0.000 description 2
- 238000011580 nude mouse model Methods 0.000 description 2
- 201000002528 pancreatic cancer Diseases 0.000 description 2
- 239000003504 photosensitizing agent Substances 0.000 description 2
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 2
- 238000007619 statistical method Methods 0.000 description 2
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 2
- 230000001988 toxicity Effects 0.000 description 2
- 231100000419 toxicity Toxicity 0.000 description 2
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 2
- OYINILBBZAQBEV-UWJYYQICSA-N (17s,18s)-18-(2-carboxyethyl)-20-(carboxymethyl)-12-ethenyl-7-ethyl-3,8,13,17-tetramethyl-17,18,22,23-tetrahydroporphyrin-2-carboxylic acid Chemical compound N1C2=C(C)C(C=C)=C1C=C(N1)C(C)=C(CC)C1=CC(C(C)=C1C(O)=O)=NC1=C(CC(O)=O)C([C@@H](CCC(O)=O)[C@@H]1C)=NC1=C2 OYINILBBZAQBEV-UWJYYQICSA-N 0.000 description 1
- CVFXPOKENLGCID-KRWDZBQOSA-N (2s)-5-[[amino-[(2,2,4,6,7-pentamethyl-3h-1-benzofuran-5-yl)sulfonylamino]methylidene]amino]-2-[(2-methylpropan-2-yl)oxycarbonylamino]pentanoic acid Chemical compound CC1=C(S(=O)(=O)NC(N)=NCCC[C@H](NC(=O)OC(C)(C)C)C(O)=O)C(C)=C2CC(C)(C)OC2=C1C CVFXPOKENLGCID-KRWDZBQOSA-N 0.000 description 1
- PIFPEOIFYCDCNA-TXSOCPGVSA-N (2s,3s)-2-[[(2s)-2-[[(2s)-1-[(2s)-2-[[(2s)-2-[[(2s)-1-[(2s)-6-amino-2-[[(2s)-4-amino-2-[[2-[[(2s)-2-[[(2s)-2-[[(2s)-2-amino-4-carboxybutanoyl]amino]-4-methylpentanoyl]amino]-3-(4-hydroxyphenyl)propanoyl]amino]acetyl]amino]-4-oxobutanoyl]amino]hexanoyl]pyr Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(O)=O)NC(=O)[C@H]1N(CCC1)C(=O)[C@H](CCCN=C(N)N)NC(=O)[C@H](CCCN=C(N)N)NC(=O)[C@H]1N(CCC1)C(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@H](CC(N)=O)NC(=O)CNC(=O)[C@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@@H](N)CCC(O)=O)C1=CC=C(O)C=C1 PIFPEOIFYCDCNA-TXSOCPGVSA-N 0.000 description 1
- 125000003088 (fluoren-9-ylmethoxy)carbonyl group Chemical group 0.000 description 1
- AZKSAVLVSZKNRD-UHFFFAOYSA-M 3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide Chemical compound [Br-].S1C(C)=C(C)N=C1[N+]1=NC(C=2C=CC=CC=2)=NN1C1=CC=CC=C1 AZKSAVLVSZKNRD-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 208000003200 Adenoma Diseases 0.000 description 1
- 206010001233 Adenoma benign Diseases 0.000 description 1
- 201000009030 Carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 241001677188 Coccus viridis Species 0.000 description 1
- 239000012624 DNA alkylating agent Substances 0.000 description 1
- 230000005778 DNA damage Effects 0.000 description 1
- 231100000277 DNA damage Toxicity 0.000 description 1
- 208000030453 Drug-Related Side Effects and Adverse reaction Diseases 0.000 description 1
- 208000000632 Experimental Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- 239000004471 Glycine Substances 0.000 description 1
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 1
- 208000008900 Pancreatic Ductal Carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 206010033645 Pancreatitis Diseases 0.000 description 1
- 229940124158 Protease/peptidase inhibitor Drugs 0.000 description 1
- 206010041067 Small cell lung cancer Diseases 0.000 description 1
- 238000000692 Student's t-test Methods 0.000 description 1
- WDLRUFUQRNWCPK-UHFFFAOYSA-N Tetraxetan Chemical compound OC(=O)CN1CCN(CC(O)=O)CCN(CC(O)=O)CCN(CC(O)=O)CC1 WDLRUFUQRNWCPK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010070863 Toxicity to various agents Diseases 0.000 description 1
- 230000001133 acceleration Effects 0.000 description 1
- 230000009471 action Effects 0.000 description 1
- 125000003277 amino group Chemical group 0.000 description 1
- 229940041181 antineoplastic drug Drugs 0.000 description 1
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 1
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 1
- 230000033228 biological regulation Effects 0.000 description 1
- 235000020958 biotin Nutrition 0.000 description 1
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 1
- 239000000969 carrier Substances 0.000 description 1
- 210000003169 central nervous system Anatomy 0.000 description 1
- 201000011024 colonic benign neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 238000004624 confocal microscopy Methods 0.000 description 1
- 238000011161 development Methods 0.000 description 1
- 238000009792 diffusion process Methods 0.000 description 1
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 1
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 1
- 238000012377 drug delivery Methods 0.000 description 1
- 230000009977 dual effect Effects 0.000 description 1
- YQGOJNYOYNNSMM-UHFFFAOYSA-N eosin Chemical compound [Na+].OC(=O)C1=CC=CC=C1C1=C2C=C(Br)C(=O)C(Br)=C2OC2=C(Br)C(O)=C(Br)C=C21 YQGOJNYOYNNSMM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000001747 exhibiting effect Effects 0.000 description 1
- 230000008014 freezing Effects 0.000 description 1
- 238000007710 freezing Methods 0.000 description 1
- 125000000524 functional group Chemical group 0.000 description 1
- 230000009036 growth inhibition Effects 0.000 description 1
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 1
- 239000005556 hormone Substances 0.000 description 1
- 229940088597 hormone Drugs 0.000 description 1
- 238000003384 imaging method Methods 0.000 description 1
- 238000010166 immunofluorescence Methods 0.000 description 1
- 230000006872 improvement Effects 0.000 description 1
- 230000002779 inactivation Effects 0.000 description 1
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 1
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 1
- 238000011221 initial treatment Methods 0.000 description 1
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 1
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 1
- 210000004153 islets of langerhan Anatomy 0.000 description 1
- 238000012417 linear regression Methods 0.000 description 1
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 1
- 230000004807 localization Effects 0.000 description 1
- 239000006166 lysate Substances 0.000 description 1
- 230000036210 malignancy Effects 0.000 description 1
- 208000015486 malignant pancreatic neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 238000004949 mass spectrometry Methods 0.000 description 1
- 238000001840 matrix-assisted laser desorption--ionisation time-of-flight mass spectrometry Methods 0.000 description 1
- 230000010534 mechanism of action Effects 0.000 description 1
- 238000001000 micrograph Methods 0.000 description 1
- 238000000386 microscopy Methods 0.000 description 1
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 1
- 239000000178 monomer Substances 0.000 description 1
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 1
- 231100000065 noncytotoxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000002020 noncytotoxic effect Effects 0.000 description 1
- 231100000252 nontoxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000003000 nontoxic effect Effects 0.000 description 1
- 238000010899 nucleation Methods 0.000 description 1
- 238000011275 oncology therapy Methods 0.000 description 1
- 210000004923 pancreatic tissue Anatomy 0.000 description 1
- 239000000137 peptide hydrolase inhibitor Substances 0.000 description 1
- 238000010647 peptide synthesis reaction Methods 0.000 description 1
- 239000008055 phosphate buffer solution Substances 0.000 description 1
- 125000006239 protecting group Chemical group 0.000 description 1
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 1
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 1
- 230000002797 proteolythic effect Effects 0.000 description 1
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 1
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 1
- BOLDJAUMGUJJKM-LSDHHAIUSA-N renifolin D Natural products CC(=C)[C@@H]1Cc2c(O)c(O)ccc2[C@H]1CC(=O)c3ccc(O)cc3O BOLDJAUMGUJJKM-LSDHHAIUSA-N 0.000 description 1
- 230000008439 repair process Effects 0.000 description 1
- 239000011347 resin Substances 0.000 description 1
- 229920005989 resin Polymers 0.000 description 1
- 230000009291 secondary effect Effects 0.000 description 1
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 description 1
- 208000000587 small cell lung carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 1
- 238000010186 staining Methods 0.000 description 1
- 230000002459 sustained effect Effects 0.000 description 1
- 238000002626 targeted therapy Methods 0.000 description 1
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 1
- 238000010257 thawing Methods 0.000 description 1
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 1
- 230000032258 transport Effects 0.000 description 1
- 239000003981 vehicle Substances 0.000 description 1
- 210000003462 vein Anatomy 0.000 description 1
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K7/00—Peptides having 5 to 20 amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
- C07K7/04—Linear peptides containing only normal peptide links
- C07K7/08—Linear peptides containing only normal peptide links having 12 to 20 amino acids
- C07K7/083—Neurotensin
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
- A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
- A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
- A61K47/62—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being a protein, peptide or polyamino acid
- A61K47/64—Drug-peptide, drug-protein or drug-polyamino acid conjugates, i.e. the modifying agent being a peptide, protein or polyamino acid which is covalently bonded or complexed to a therapeutically active agent
- A61K47/641—Branched, dendritic or hypercomb peptides
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K49/00—Preparations for testing in vivo
- A61K49/0002—General or multifunctional contrast agents, e.g. chelated agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K49/00—Preparations for testing in vivo
- A61K49/001—Preparation for luminescence or biological staining
- A61K49/0013—Luminescence
- A61K49/0017—Fluorescence in vivo
- A61K49/0019—Fluorescence in vivo characterised by the fluorescent group, e.g. oligomeric, polymeric or dendritic molecules
- A61K49/0021—Fluorescence in vivo characterised by the fluorescent group, e.g. oligomeric, polymeric or dendritic molecules the fluorescent group being a small organic molecule
- A61K49/0041—Xanthene dyes, used in vivo, e.g. administered to a mice, e.g. rhodamines, rose Bengal
- A61K49/0043—Fluorescein, used in vivo
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K49/00—Preparations for testing in vivo
- A61K49/001—Preparation for luminescence or biological staining
- A61K49/0013—Luminescence
- A61K49/0017—Fluorescence in vivo
- A61K49/005—Fluorescence in vivo characterised by the carrier molecule carrying the fluorescent agent
- A61K49/0056—Peptides, proteins, polyamino acids
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
- A61P1/04—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system for ulcers, gastritis or reflux esophagitis, e.g. antacids, inhibitors of acid secretion, mucosal protectants
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
- A61P1/18—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system for pancreatic disorders, e.g. pancreatic enzymes
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P13/00—Drugs for disorders of the urinary system
- A61P13/08—Drugs for disorders of the urinary system of the prostate
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P35/00—Antineoplastic agents
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
- G01N33/574—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor for cancer
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
Abstract
本発明は、一般式(A)または(B)を有する多量体分子、ならびに腫瘍の診断および/または療法におけるその使用に関する。
Description
発明の分野
本発明は、ニューロテンシン(NT)の配列から誘導されたインビボで安定な分岐ペプチドに関する。これらのペプチドは、癌細胞を特異的に標的化する機能単位(functional unit)に結合することができる。したがって、これらのペプチドは、腫瘍の診断および/または療法に用いることができる。
本発明は、ニューロテンシン(NT)の配列から誘導されたインビボで安定な分岐ペプチドに関する。これらのペプチドは、癌細胞を特異的に標的化する機能単位(functional unit)に結合することができる。したがって、これらのペプチドは、腫瘍の診断および/または療法に用いることができる。
古典的な化学療法の主要な問題の1つは、ほとんどの抗癌剤の、正常細胞にも非特異的な毒性である。そのため、腫瘍の特異的標的化は、癌の療法および診断の研究における主要な課題である。
現在、革新的な腫瘍特異的療法は、特に腫瘍細胞に発現または過剰発現する、腫瘍関連タンパク質を標的化するストラテジーに従う。
様々な内因性調節ペプチドの受容体がいくつかのヒト原発性癌に発現するという観察は、腫瘍選択的標的化のための合成ペプチドの使用に新しい展望を切り開いた1〜3。
ニューロテンシン(NT)は、中枢神経系における神経伝達物質または神経修飾物質および末梢における局所ホルモンの二元機能を有する、アミノ酸13個のペプチドである。NT受容体は、小細胞肺癌、結腸、膵臓、および前立腺癌腫などの重度の悪性腫瘍に過剰発現する。NT安定化類似体は、数年前に腫瘍療法のために提示されており4〜10、NTは依然として、これらの腫瘍においてNT受容体の発生率および密度が高いことから、膵臓外分泌癌腫(exocrine pancreatic carcinoma)のペプチドベースの療法の可能な最良の候補であるとみなされている11。すべての膵臓腺管癌腫の75%超がNT受容体を過剰発現するのに対して、正常な膵臓組織、膵炎、および膵臓内分泌部(endocrine pancreas)は過剰発現しない12。
腫瘍受容体標的化は、癌化学療法の非特異的毒性の問題へのアプローチにおいて基本となるものであり、放射性同位体による腫瘍局在の貴重なツールである。それにもかかわらず、ペプチドのインビボでの使用は、それらの短い半減期によって大きく制限されている。
本発明の発明者らは以前に、分岐デンドリマー形態のペプチドの合成によって、ペプチド生物活性を保持することができ、生物流体のタンパク分解活性に非常に耐性であり、したがって単量体ペプチドに対して著しく高い半減期を有する分子が得られることを実証した13〜14。
本発明は、NTから誘導されたインビボで安定なデンドリマーペプチドに関する。そのようなペプチドはまた、癌細胞を標的化するために用いられる機能単位に結合している。具体的には、NT4(8−13)と光感受性物質(Photosensitizer)Che6または化学療法分子MTXとの結合は、腫瘍細胞に特異的であり、健康な細胞に非毒性であり、そのためマウスに全身投与されたとき、古典的な化学療法剤の二次作用を克服することが示されている15。
本発明では、分子の特異性に加えて、遊離非カップリング薬物と比較して増大した結合分子の活性が観察された。本発明の分子は、本発明者らが合成した多数の類似体のプールから選択された。「担体」ペプチド(ニューロテンシン)は、他のいくつかの担体のなかで最良の担体である。たとえば、性腺刺激ホルモン放出ホルモン(GnRH)(QHWSYGLRPG、配列番号3)としても知られる黄体化ホルモン放出ホルモン(LHRH)は、NTより低いインビトロでの結合プロファイルを示した。さらに、本発明で用いられるリンカーは、分子の活性に大きく影響するため、それぞれ新しい分子のために選択された。たとえば、NT(8−13)4−β−Ala−ビオチンは、NT(8−13)4と比較してNT受容体に対する結合活性が緩やかであることが示されたが、NT4−peg−ビオチンは、NT4のIC50値に匹敵するIC50値を維持した。NT(1−13)4−フルオレセインおよびNT(8−13)4−フルオレセインは、NT(8−13)4−β−Ala−K(PEG−フルオレセイン)より有効に癌細胞および組織を染色することができ、フルオロフォアもより安定である。最後に、化学療法剤部分は選択的であり、カップリングに一義的(univocally)に用いられるように、その官能基に基づいて選択された。結合の強さは、薬物自体の作用部位および様式に応じて調節され、最良の結合が選択された。例として、「切断不能な」リンカーを介してニューロテンシンに結合した6−メルカプトプリンは完全に非細胞毒性であり、「切断可能な」リンカーを介して結合した同薬物は活性であったが、その活性はさらなる開発を考慮するには不十分であった。同様に、モナストロール誘導体は、本発明における化合物の第1の選択肢ではない。総合すると、これらの特定の特徴のために本発明の目的は可能な任意の類似体より独自性があり好ましいものになる。
Reubi JC. J NuclMed. 1995; 36(10) 1825-35
Reubi JC. EndocrRev. 2003; 24(4): 389-427
本発明の目的は、一般式AまたはBを有し、
式中、
n=1〜5であり、
n=1〜5であり、
(式中、m=9〜12であり、p=1〜5である)
(式中、q=1〜5であり、m=9〜12である)
であり、Z=NH2またはOHである多量体分子である。
好ましくは、ペプチドは、以下のアミノ酸配列:QLYENKPRRPYIL(ニューロテンシン、配列番号1)、pyroELYENKPRRPYIL(配列番号2)、またはRRPYIL(ニューロテンシン8−13、すなわち配列番号1のアミノ酸8からアミノ酸13)を含む。
好ましくは、本発明の多量体分子は医療に使用するためのものである。さらに好ましくは抗腫瘍剤としてである。さらに好ましくは、腫瘍は、結腸または膵臓または前立腺癌腫である。本発明のさらなる目的は、薬剤を調製するための本発明の多量体分子の使用である。好ましくは前記薬剤は抗腫瘍活性を有する。
本発明のさらなる目的は、腫瘍を診断するための本発明の多量体分子の使用である。好ましくは、腫瘍は結腸または膵臓または前立腺癌腫である。本発明のさらなる目的は、本発明の多量体分子、または医薬的に許容され有効なその塩、ならびに希釈剤、および/または溶媒、および/または担体、および/または賦形剤、および/またはビヒクルを含む医薬組成物である。
本発明のさらなる目的は、本発明の多量体分子を投与または曝露することを含む治療方法である。好ましくは前記治療は抗腫瘍治療である。
本発明のさらなる目的は、本発明の多量体分子を投与または曝露することを含む診断方法である。好ましくは前記診断は腫瘍診断である。さらに好ましくは、腫瘍は結腸または膵臓または前立腺癌腫である。
本発明を、以下の図面を参照しながら非限定的な例によって説明する。
図1は、四分岐NT(8−13)4−PEG−K(PEG−フルオレセイン)[NT4(8−13)−FLUO]1、NT(8−13)4−βAla−K(PEG−クロラムブシル)[NT4(8−13)−CLB]2、四分岐NT(8−13)−βAla−K(PEG−5−フルオロデオキシウリジン)[NT4(8−13)−5−FdU]3、四分岐NT(8−13)−βAla−K(PEG−6−メルカプトプリン)[NT4(8−13)−6−MP]4、四分岐NT(8−13)−βAla−K(PEG−コンブレタスタチン)[NT4(8−13)−CBTST]5、四分岐NT(8−13)−βAla−K(PEG−モナストロール)[NT4(8−13)−Mon]6、四分岐NT(8−13)−βAla−K(PEG−チラパザミン)[NT4(8−13)−TPZ]7、四分岐NT(8−13)−βAla−K(PEG−Asp−DOTA)[NT4(8−13)−DOTA]8、ならびに四分岐NT(8−13)−βAla−K(PEG−コンブレタスタチンエーテル)[NT4(8−13)−O−CBTST]9、および四分岐NT(8−13)−βAla−K(PEG−モナストロールエーテル)[NT4(8−13)−O−Mon]10の合成を示す図である。NT(1−13)4類似体は、アミノ酸配列pyroELYENKPRRPYIL(配列番号2)を有する。
図2は、腫瘍細胞系における結合および内在化(internalization)を示す図である。HT−29、PC−3、およびPANC−1を30分間(0時点)、NT(1−13)4−フルオレセインに曝露した。0時点、ならびに37℃で培地中1時間および2時間インキュベートした後に画像を撮影した。細胞膜はレクチン−Cy3(赤色)で染色し、核はDAPI(青色)で染色した。
図3は、HT−29、PC−3、およびPANC−1細胞に対する薬物結合徐放性分岐NTの細胞毒性を示す図である。パネルA)左から:メトトレキサート(MTX)に結合したNT(8−13)、遊離MTX;MTXに結合した非関連ペプチド(U4)、A1:MTXに結合したNT(1−13)。パネルB)左から:クロラムブシル−化合物2−(CLB)に結合したNT(8−13)、遊離CLB;CLBに結合した非関連ペプチド(U4)。パネルC)左から:コンブレタスタチンエーテル−化合物9−(O−CBTST)に結合したNT(8−13)、遊離CBTST;CBTSTに結合した非関連ペプチド(U4)。パネルD)左から:モナストロールエーテル−化合物10−(MON)に結合したNT(8−13)、遊離MON;MONに結合した非関連ペプチド(U4)。パネルE)左から:チラパザミン−化合物7−(TPZ)に結合したNT(8−13)、遊離TPZ;TPZに結合した非関連ペプチド(U4)。
図4は、HT−29、PC−3、およびPANC−1細胞に対する薬物結合速放性分岐NTの細胞毒性を示す図である。パネルF)左から:5−フルオロデオキシウリジン−化合物3−(5FdU)に結合したNT(8−13)、遊離5FdU、5FdUに結合した非関連ペプチド(U4)、F1:5FdUに結合したNT(1−13)。パネルG)左から:コンブレタスタチンエステル−化合物5−(CBTST)に結合したNT(8−13)、遊離CBTST、CBTSTに結合した非関連ペプチド(U4)。
図5は、NT(1−13)4−フルオレセイン)で染色した結腸および膵臓腺癌(K)ならびに対応する健康な組織(H)を示す図である。共焦点顕微鏡画像(A)を、ImageJソフトウェアによってピクセル分布に関して分析し、RGBシステムの緑色スケールのピクセル数として報告した。(B)結腸(n=17)および膵臓(n=12)ヒト検体に関して、正常(薄い灰色)および癌(灰色)サンプルの平均蛍光値の比較。
図6は、箱ひげ図(ボックスプロット、boxplot)である。各カテゴリーの箱は四分位範囲(25〜75%)を表し、箱内部の黒い線は中央値である。ひげの下部および上部の細い線は、それぞれ10%および90%を示す。外れ値は白丸で示し、2群間のp値が示される。
図7は、マウスでの腫瘍増殖低下を示す図である。A、NT(1−13)−5FdU(1群)、遊離5FdU(2群)、および食塩水(3群)を注射したマウスの腫瘍体積;B、未処置マウスの腫瘍体積(3群、100%とする)とNT(1−13)−5FdUおよび遊離5FdUで処置したマウスの腫瘍体積(1群および2群)との間の差異として算出した腫瘍増殖の阻害、C、腫瘍重量。
発明の詳細な説明
ペプチド合成
第2アミノ酸がβ−AlaではなくFmoc−PEG−OHである[NT4(8−13)−Fluo]1を除いて、Novasyn TGR樹脂で第1アミノ酸としてFmoc−Lys(Dde)−OHおよび第2アミノ酸としてβ−Alaを用いて、四分岐NT(8−13)−PEG−K(PEG_フルオレセイン)[NT4(8−13)−Fluo]1、NT(8−13)−PEG−クロラムブシル[NT4(8−13)−CLB]2、四分岐NT(8−13)−PEG−5−フルオロデオキシウリジン[NT4(8−13)−5−FdU]3、四分岐NT(8−13)−PEG−6−メルカプトプリン[NT4(8−13)−6−MP]4、四分岐NT(8−13)−PEG−コンブレタスタチン[NT4(8−13)−CBTST]5、四分岐NT(8−13)−PEG−モナストロール[NT4(8−13)−Mon]6、四分岐NT(8−13)−PEG−チラパザミン[NT4(8−13)−TPZ]7、四分岐NT(8−13)−PEG−DOTA)[NT4(8−13)−DOTA]8、ならびに四分岐NT(8−13)−PEG−コンブレタスタチンエーテル[NT4(8−13)−O−CBTST]9、および四分岐NT(8−13)−PEG−モナストロールエーテル[NT4(8−13)−O−Mon]10を合成した(図1)。その後、上記のとおりであるが、最終2つのカップリングステップが側鎖アームで選択的に起こるように、ニューロテンシン配列の最後のアミノ酸としてBoc−Arg(Pbf)−OHを用いて、四量体を構築した。アミノ酸配列が完了したら、Dde保護基をヒドラジンで除去し、中間体をPEGとカップリングする。PEGからFmocを除去した後、リンカーに遊離カルボキシル基を有する機能単位(W)に化合物をカップリングする。
ペプチド合成
第2アミノ酸がβ−AlaではなくFmoc−PEG−OHである[NT4(8−13)−Fluo]1を除いて、Novasyn TGR樹脂で第1アミノ酸としてFmoc−Lys(Dde)−OHおよび第2アミノ酸としてβ−Alaを用いて、四分岐NT(8−13)−PEG−K(PEG_フルオレセイン)[NT4(8−13)−Fluo]1、NT(8−13)−PEG−クロラムブシル[NT4(8−13)−CLB]2、四分岐NT(8−13)−PEG−5−フルオロデオキシウリジン[NT4(8−13)−5−FdU]3、四分岐NT(8−13)−PEG−6−メルカプトプリン[NT4(8−13)−6−MP]4、四分岐NT(8−13)−PEG−コンブレタスタチン[NT4(8−13)−CBTST]5、四分岐NT(8−13)−PEG−モナストロール[NT4(8−13)−Mon]6、四分岐NT(8−13)−PEG−チラパザミン[NT4(8−13)−TPZ]7、四分岐NT(8−13)−PEG−DOTA)[NT4(8−13)−DOTA]8、ならびに四分岐NT(8−13)−PEG−コンブレタスタチンエーテル[NT4(8−13)−O−CBTST]9、および四分岐NT(8−13)−PEG−モナストロールエーテル[NT4(8−13)−O−Mon]10を合成した(図1)。その後、上記のとおりであるが、最終2つのカップリングステップが側鎖アームで選択的に起こるように、ニューロテンシン配列の最後のアミノ酸としてBoc−Arg(Pbf)−OHを用いて、四量体を構築した。アミノ酸配列が完了したら、Dde保護基をヒドラジンで除去し、中間体をPEGとカップリングする。PEGからFmocを除去した後、リンカーに遊離カルボキシル基を有する機能単位(W)に化合物をカップリングする。
NT4(8−13)−FLUO1、NT4(8−13)−CLB2、NT4(8−13)−TPZ7、NT4(8−13)−DOTA8、ならびにNT4(8−13)−O−CBTST9、およびNT4(8−13)−O−Mon10は、フルオロフォアまたは薬物に存在する遊離カルボキシル基およびペプチドのアミン基に由来するアミド結合を介して分岐担体に結合した(図1)。一方、NT4(8−13)−5−FdU3、NT4(8−13)−CBTST5、およびNT4(8−13)−Mon6は、ペプチド側にアミド結合を提供し、薬物側にエステル結合を提供する二官能リンカーを介して、担体ペプチドに結合した。NT(8−13)4−6−MPは、ペプチド側にアミド結合を提供し、6−MP側にチオ−エン(thio-enoic)結合を提供する二官能リンカーを介して、担体ペプチドに結合した。これら3種の結合配置は、異なる薬物放出パターンを生じさせた、すなわち、NT4(8−13)−FLUO1、NT4(8−13)−CLB2、NT4(8−13)−TPZ7、NT4(8−13)−DOTA8、NT4(8−13)−O−CBTST9、およびNT4(8−13)−O−Mon10は、FLUO、CLB、TPZ、DOTA、CBTST、およびMonをほとんど放出しない。それに対して、NT4(8−13)−5−FdU3、NT4(8−13)−CBTST5、NT4(8−13)−Mon6、およびNT(8−13)4−6−MP4は、FdU、CBTST、Mon、および6−MPを付加物から容易に放出する。
配列pyroELYENKPRRPYIL(配列番号2)を有する四分岐ペプチドを上記のとおり合成した。
配列AcDDHSVA(配列番号4)を有する非関連分岐ペプチドを上記のとおり合成し、コントロールとして用いた。
ペプチド内在化および薬物放出
分岐結合ペプチド1〜10は、分岐ペプチドと機能単位とのカップリングに用いるリンカーによって異なる。リンカーは、本明細書では担体ペプチドから機能単位を放出する能力によって、速放性または徐放性とみなされる。
分岐結合ペプチド1〜10は、分岐ペプチドと機能単位とのカップリングに用いるリンカーによって異なる。リンカーは、本明細書では担体ペプチドから機能単位を放出する能力によって、速放性または徐放性とみなされる。
5FdU、モナストロール、およびコンブレタスタチンの放出
106PANC−1細胞を、37℃において様々な時間間隔で、NT結合分岐ペプチドNT(8−13)4−5−FdU3、NT4(8−13)−CBTST5、NT4(8−13)−O−CBTST9、NT4(8−13)−Mon6、およびNT4(8−13)−O−Mon10(100μM)、ならびに非関連分岐ペプチド(100μM)と共にインキュベートした。細胞を遠心分離し、洗浄し、次いで、凍結融解した後、水中で溶解した。加速電圧20kV、リフレクトロンモードでEttan MALDI−Tof質量分析計を用い、内部標準としてNT(8−13)4を添加した後、上清および溶解細胞を質量分析法によって分析した。
106PANC−1細胞を、37℃において様々な時間間隔で、NT結合分岐ペプチドNT(8−13)4−5−FdU3、NT4(8−13)−CBTST5、NT4(8−13)−O−CBTST9、NT4(8−13)−Mon6、およびNT4(8−13)−O−Mon10(100μM)、ならびに非関連分岐ペプチド(100μM)と共にインキュベートした。細胞を遠心分離し、洗浄し、次いで、凍結融解した後、水中で溶解した。加速電圧20kV、リフレクトロンモードでEttan MALDI−Tof質量分析計を用い、内部標準としてNT(8−13)4を添加した後、上清および溶解細胞を質量分析法によって分析した。
NT4(8−13)−O−CBTST9およびNT4(8−13)−O−Mon10は、細胞培地中で徐々に減少したが、細胞溶解物では増加し、これは1時間後に出現し、インキュベーションから48時間後に最大濃度に達した。非関連四分岐ペプチドは、細胞培地中、48時間後に完全体で見出され、溶解細胞中では検出されなかった。
NT(8−13)4−5−FdUは、細胞溶解物および細胞培地中で徐々に減少した。5FdUに結合した非関連四分岐ペプチド[(AcDDHSVA)4−5FdU]は、4時間、細胞溶解物では見出されず、培地中で完全体のままであった。実際、NT(8−13)4−5−FdUおよび(AcDDHSVA)4−5FdUは、5−FdUの加水分解によって攻撃され、5−FdUがエステルリンカーから放出され、したがってより短い半減期を示す。
NT4(8−13)−CBTST5、NT4(8−13)−Mon6は、エステル結合の加水分解によって、2時間後にCBSTSおよびMONを放出したが、エーテル結合薬物9および10は、上清または溶解物において完全体で見出された。
NT(8−13)4−6−MPからの6−MPの放出
NT(8−13)4−6−MPを、1、5、および15当量のGSHの存在下、リン酸緩衝溶液(pH=7.4)中、37℃でインキュベートした。次いで、粗混合物を様々な時間間隔でHPLCに注入し、6−MPの放出を測定した。NT(8−13)4−6−MPは、1当量のGSHの存在下、135分後に86%の6−MPを放出し、5当量のGSHでは30分後に100%放出した。
NT(8−13)4−6−MPを、1、5、および15当量のGSHの存在下、リン酸緩衝溶液(pH=7.4)中、37℃でインキュベートした。次いで、粗混合物を様々な時間間隔でHPLCに注入し、6−MPの放出を測定した。NT(8−13)4−6−MPは、1当量のGSHの存在下、135分後に86%の6−MPを放出し、5当量のGSHでは30分後に100%放出した。
その後、官能化分岐ペプチドを速放性または徐放性/非放出性に分類した。NT4(8−13)−Fluo1、NT4(8−13)−CLB2、NT4(8−13)−TPZ7、NT4(8−13)−DOTA8、NT4(8−13)−O−CBTST9、およびNT4(8−13)−O−Mon10は徐放性付加物であり、NT4(8−13)−5−FdU3、NT4(8−13)−CBTST5、NT4(8−13)−Mon6、およびNT4(8−13)−6−MP4は速放性である。
機能単位に結合した分岐NTペプチドのインビトロ活性
ヒト癌細胞系におけるペプチド結合および内在化
ビオチンに結合した四分岐NT(8−13)(NT(8−13)4−PEG−ビオチン)のペプチド結合および内在化を、ヒト結腸腺癌(HT29)、ヒト膵臓癌腫(Panc−1)、およびヒト前立腺癌腫(PC3)細胞系において、共焦点顕微鏡法によって分析した15。
ヒト癌細胞系におけるペプチド結合および内在化
ビオチンに結合した四分岐NT(8−13)(NT(8−13)4−PEG−ビオチン)のペプチド結合および内在化を、ヒト結腸腺癌(HT29)、ヒト膵臓癌腫(Panc−1)、およびヒト前立腺癌腫(PC3)細胞系において、共焦点顕微鏡法によって分析した15。
本発明において、NT(1−13)4−フルオレセインおよびNT(8−13)4−フルオレセインは、NT受容体を発現する3種の細胞系に特異的に結合することが見出された(図2)。細胞を播種し、24時間増殖させ、TBS中3%BSAを用いて37℃で30分間ブロックし、その後、4倍モル過剰の単量体類似体と比較して、ペプチド(TBS−0.3%BSA中2μM)と共にインキュベートした。プロテアーゼ阻害剤カクテルを、単量体ペプチドによる実験の緩衝液に添加した。細胞を37℃で1、2または4時間、培地で増殖させ、その後、4%ホルマリンで固定し、原形質膜をレクチン−Cy3(TBS−0.3%BSA中0.5μg/ml)で染色し、核を4,6−ジアミジノ−2−フェニルインドール(DAPI)(TBS−1%BSA中1μg/ml)で染色した。共焦点レーザー顕微鏡(Leica TCS SP5)で画像を撮影した。
結合ペプチドの内在化は1時間で完了した。ペプチドは、18時間以内に細胞内で分解した15。細胞結合または内在化速度の差異は、NT(1−13)とNT(8−13)四分岐ペプチドとの間に検出されなかった。単量体NT(1−13)−フルオレセイン(M)は、シグナルを示さなかった。
NT受容体を介して癌細胞系に結合し、細胞内で迅速に内在化され、4時間後に依然として検出可能である、機能単位に結合した四分岐ペプチドの能力は、そのようなペプチドの治療適用例における重要性を示している。
種々の腫瘍細胞系における薬物結合NT4の細胞毒性
臨床の実践に用いられる古典的な化学療法剤は、異なる腫瘍に対して異なる活性を有することがよく知られている。これは、細胞による薬物の取り込みの低下もしくは送出の増大、細胞内部での薬物不活化の増大、またはDNAアルキル化剤によって生成されたDNA損傷の修復の増強を含む様々な機序に起因する、薬物に対する癌細胞の自然の耐性によるものである。
臨床の実践に用いられる古典的な化学療法剤は、異なる腫瘍に対して異なる活性を有することがよく知られている。これは、細胞による薬物の取り込みの低下もしくは送出の増大、細胞内部での薬物不活化の増大、またはDNAアルキル化剤によって生成されたDNA損傷の修復の増強を含む様々な機序に起因する、薬物に対する癌細胞の自然の耐性によるものである。
本発明の筆者らによってHT−29で行われた、以前に報告された細胞毒性実験は15、メトトレキサート(MTX)または光感受性物質、塩素e6の四分岐NT(8−13)との結合は、プロドラッグ様分子を生じさせることを実証した。そのような分子は、対応する遊離薬物の機序によって、もはや原形質膜を通って輸送されることはできず、ペプチド−受容体結合によってのみ「活性化」され得、したがって非特異的薬物毒性が大いに低減される。
ペプチド受容体によって仲介される、薬物の細胞内在化の新規な機序の導入により、自然な細胞耐性の機序を回避できる可能性がある。そのため、筆者らは、古典的な腫瘍化学療法に通常用いられるいくつかの異なる分子、メトトレキサート(MTX、クロラムブシル(CLB)、6−メルカプトプリン、および5−フルオロ−2'−デオキシウリジン(5−FdU)、または新興の薬物、コンブレタスタチン(CBTST)16、モナストロール(MON)17、チラパザミン(TPZ)18を選択した。HT−29、PANC−1、およびPC−3腫瘍細胞系において、遊離薬物または四分岐結合として、これらの分子を試験した(図3および4)。詳細には、HT−29、PANC−1、およびPC−3細胞を、96ウェルマイクロプレートにおいて、1ウェル当たり2.5×104の密度で播種した。0.15から30μmol/Lの様々な濃度の遊離またはNT結合薬物を、播種の24時間後に添加した。6日間、培地を交換せずに、細胞を増殖させた。3−(4,5−ジメチルチアゾール−2−イル)−2,5−ジフェニルテトラゾリウムブロミドによって、増殖阻害を評価した。GraphPaD prism3.02ソフトウェアを用い、非線形回帰分析によってEC50値を算出した。得られた最良のEC50値(モル濃度で表す)は以下のとおりであった:HT29においてNT(8−13)4−CLBでは1.9e−006、HT29においてNT(8−13)4−5FdUでは3.3e−007、PC3においてNT(8−13)−TPZでは1.4e−7、PANC−1においてNT(8−13)4−CBTSTでは4.7e−007、およびHT29においてNT(1−13)4−5FdUでは1.1e−007。
すべての薬物結合NT4の細胞毒性を3種の細胞系で試験し、対応する遊離薬物の細胞毒性、および同じ薬物に同様に結合した非関連四分岐ペプチド(U4)の細胞毒性と比較した。
5−FdU、モナストロール、およびCBTSTは、付加物から速く放出された。そこで、細胞を遊離またはNT結合薬物の1時間パルス(pulse)に曝露し、洗浄し、6日間インキュベートするか、または別法としてさらに洗浄することなく、ペプチドと共に6日間インキュベートする実験で、HT−29、PANC−1、およびPC−3において速放性薬物結合四分岐ペプチドの細胞毒性を試験した。さらなる洗浄は、その後の6日間で細胞内に遊離薬物が拡散するのを回避するために行った。
四分岐NT(8−13)との結合は薬物活性を大いに改変し、これはi)薬物の細胞感受性、ii)薬物の作用機序、iii)薬物に対する細胞耐性の機序、iv)結合薬物の膜輸送の効率を含む、細胞および薬物両方の特徴の組合せに起因する可能性がある。
予期されるとおり、遊離薬物の活性は互いに非常に異なり、また細胞系によって非常に異なる(図3および4、左から2番目のパネル)。原理上、四分岐NTとの結合は、結果として以下を生じさせる可能性がある。
・薬物特異性の増大、
・薬物活性の増大、
・特異性および活性両方の増大、または遊離薬物の改善なし。
・薬物特異性の増大、
・薬物活性の増大、
・特異性および活性両方の増大、または遊離薬物の改善なし。
PC−3におけるMTXおよびCLBのように、一部の例では、分岐NTに結合することによって、薬物に対する自然の細胞耐性を回避し(図3)、細胞を完全に非感受性から十分な応答性に転換することができる。分岐ペプチド担体の確実な利点は、その標的特異性であり、これは非関連分岐ペプチドにカップリングしたとき、3種の細胞系でいずれの薬物も活性が欠如していることで実証される。(図3および4のすべて左から3番目のパネルを参照)。四分岐NT(8−13)−PEG−6−メルカプトプリン[NT4(8−13)−6−MP]4および四分岐NT(8−13)−PEG−モナストロール[NT4(8−13)−Mon]6は、親遊離薬物と比較して、改善が得られなかった。速放性四分岐NTによる結果は、5−FdUおよびCBTSTいずれの場合においても、分岐NT4との結合によって薬物の活性が明らかに増大するため、非常に興味深い(図4パネルFおよびG)。徐放性分子および速放性分子でCBTSTによって得られた結果の比較は、速放性分子が徐放性化合物よりさらに活性であり得ることを示している。
興味深いことに、MTX、CLB、および5−FdUによるPC−3など、ある薬物に影響を受けない細胞は、分岐NTと結合したとき、その薬物に感受性となり得る(図4パネルA、BおよびF)。ペプチド受容体に仲介される機序に転換することによって、膜輸送の機序が変化することで、細胞の外部から内部への薬物輸送が大きく改変され得る。さらに、分岐ペプチドとの結合は、細胞内部から外部への薬物送出の機序も損ない、結合薬物を標的細胞に封入する可能性がある。これは、NT受容体を過剰発現し、古典的な化学療法に応答しない腫瘍の療法に極めて重要である。
フルオロフォア結合NT4を用いる、外科的切除片からのヒト腫瘍サンプルの分析
結腸または膵臓腺癌の療法の可能な標的化剤として、本発明のNT分岐ペプチドを確認するために、健康な組織と比較して、ヒト腫瘍外科的サンプルに対する四分岐NTペプチドの結合を分析し、定量化した。16件の結腸腫瘍および12件の膵臓腫瘍の外科的切除片を採集した。腫瘍サンプルを、腫瘍端から5cm離れたところで得た同じ患者の健康な組織と比較した。同じ生検の一連の切片を、ヘマトキシリン/エオシン(H&E)光学顕微鏡および蛍光共焦点顕微鏡によって分析した。詳細には、サンプルをtissue tekに包埋し、液体窒素中に保管した。2800 Frigocut N(Reichert−Jung、Depew、NY)を用いて得た厚さ10μmの切片を、37℃で30分間乾燥し、室温で15分間、4%ホルマリンで固定し、4℃で12時間、グリシン0.1M中でインキュベートした。FBSを用いて37℃で30分間ブロックし、その後、NT(1−13)4−フルオレセイン(TBS−0.3%BSA中1μg/ml)と共に室温で30分間インキュベートした。各ステップ後、TBSで洗浄した。最後に、切片を4,6−ジアミジノ−2−フェニルインドール(DAPI)(TBS−1%BSA中1μg/ml)と共に5分間インキュベートした。各ステップ後、TBSで洗浄した。非関連フルオレセイン結合四分岐ペプチドを用いて、コントロールを行った。類似体単量体ペプチドを比較のためにアッセイした。ペプチド結合は、フルオレセインでは488nm吸収波長および500〜540発光波長、DAPIでは405吸収波長および420〜460発光波長を用い、共焦点レーザー顕微鏡(Leica TCS SP5)によって分析した。すべての画像は、ImageJソフトウェア(NIH)を用いて処理した。得られた電子データをRGBシステムの緑色範囲のピクセル分布として報告した。
結腸または膵臓腺癌の療法の可能な標的化剤として、本発明のNT分岐ペプチドを確認するために、健康な組織と比較して、ヒト腫瘍外科的サンプルに対する四分岐NTペプチドの結合を分析し、定量化した。16件の結腸腫瘍および12件の膵臓腫瘍の外科的切除片を採集した。腫瘍サンプルを、腫瘍端から5cm離れたところで得た同じ患者の健康な組織と比較した。同じ生検の一連の切片を、ヘマトキシリン/エオシン(H&E)光学顕微鏡および蛍光共焦点顕微鏡によって分析した。詳細には、サンプルをtissue tekに包埋し、液体窒素中に保管した。2800 Frigocut N(Reichert−Jung、Depew、NY)を用いて得た厚さ10μmの切片を、37℃で30分間乾燥し、室温で15分間、4%ホルマリンで固定し、4℃で12時間、グリシン0.1M中でインキュベートした。FBSを用いて37℃で30分間ブロックし、その後、NT(1−13)4−フルオレセイン(TBS−0.3%BSA中1μg/ml)と共に室温で30分間インキュベートした。各ステップ後、TBSで洗浄した。最後に、切片を4,6−ジアミジノ−2−フェニルインドール(DAPI)(TBS−1%BSA中1μg/ml)と共に5分間インキュベートした。各ステップ後、TBSで洗浄した。非関連フルオレセイン結合四分岐ペプチドを用いて、コントロールを行った。類似体単量体ペプチドを比較のためにアッセイした。ペプチド結合は、フルオレセインでは488nm吸収波長および500〜540発光波長、DAPIでは405吸収波長および420〜460発光波長を用い、共焦点レーザー顕微鏡(Leica TCS SP5)によって分析した。すべての画像は、ImageJソフトウェア(NIH)を用いて処理した。得られた電子データをRGBシステムの緑色範囲のピクセル分布として報告した。
これにより各サンプルに関して、腫瘍組織および健康な組織の免疫蛍光シグナルを、RGBシステムの範囲の平均緑色染色を表す数に翻訳することができた(図5パネルB)。
NT(1−13)4−フルオレセインで処理したとき、結腸および膵臓腺癌両方の腫瘍組織はいずれも、同じ患者の正常組織と比較して、著しく高い蛍光発光を示した(図5パネルA)。NT(1−13)4のいずれの組織サンプルとの結合も、NT(8−13)4の同一サンプルとの結合と同じであった。
16件の結腸癌のうち14件は組織学的に腺癌、2件は腺腫と特徴づけられた。後者は、K/Hランクの最低範囲に相当するK/H値を有した。膵臓のサンプルでは、12件のサンプルのうち11件は腺癌、1件はリンパ腫であり、すなわち、1件は非常に異なる細胞起源を有した。このサンプルは、試験を行ったすべての外科的サンプルのなかで最低のK/Hを有した。結腸または膵臓の腫瘍の病期分類と受容体発現(K/H値)との間に相関は見出されなかった。これは、疾患の初期段階であっても、K組織とH組織との間の差異が統計的に有意(relevant)であることを意味している。これは、腫瘍細胞に独自には発現されず、むしろ腫瘍細胞によって過剰発現される腫瘍マーカーにとって非常に重要なポイントである。そのため、NT受容体は分岐ペプチドによる初期治療の標的として用いられる可能性がある(表1、図6)。
細胞起源が完全に異なるためリンパ腫を除いて、結腸および膵臓癌腫に関して、採集したすべての外科的サンプルの健康組織と腫瘍組織とのペプチド結合における差異の有意性を評価するために、統計的分析を行った。箱ひげ図に示したとおり(図6)、健康な対照物に対して、膵臓および結腸癌ではいずれも著しいシグナルの差異が観察された。健康サンプルと腫瘍サンプルとの比較では、両側検定の有意性水準は膵臓でp<0.01および結腸でp<0.02であった。この結果は、これらのペプチドが健康サンプルと癌サンプルを識別することができ、したがって腫瘍マーカーとして使用できることを意味している。
この結果は、NT分岐ペプチドによる結腸癌腫および膵臓外分泌癌腫の可能な療法にとって非常に有望である。腫瘍生検の画像化は、NTをベースとする標的療法の有効性を治療前に推定することを可能にし得、これは各患者において、腫瘍組織と健康組織で測定された分岐ペプチド結合の差異に基づいて評価することができる。さらに、健康組織と腫瘍組織との間でそのように明確に識別されるシグナルは、分岐NTが結腸および膵臓癌腫の特異的診断において顕著な役割を果たす可能性のあることを示している。
機能単位に結合した分岐NTペプチドのインビボ活性
マウスにおける腫瘍増殖低下
右側腹部にHT29腫瘍を有するヌードマウスに、6回用量のNT(1−13)−5FdUを注射した。化合物NT(1−13)−5FdUは、MTXにカップリングした類似体ペプチドと比較したときのHT29に対するインビトロでの細胞毒性を考慮して、すべてのなかからインビボ実験に選択した。
マウスにおける腫瘍増殖低下
右側腹部にHT29腫瘍を有するヌードマウスに、6回用量のNT(1−13)−5FdUを注射した。化合物NT(1−13)−5FdUは、MTXにカップリングした類似体ペプチドと比較したときのHT29に対するインビトロでの細胞毒性を考慮して、すべてのなかからインビボ実験に選択した。
詳細には、5から6週齢(平均体重20g)のCD−1雌ヌードマウス(Charles River Laboratories,Inc.)の右側腹部に、1×106HT29細胞を皮下注射した。腫瘍が直径3から4mmに達したとき(腫瘍接種から5日後)、マウスを無作為に群に分け(1群当たりマウス4匹)、0.9%NaCl中の以下の溶液500μl:(a)1mg/mL NT(1−13)4−5FdU(3.05μmol/kg);(b)30μg/mL 5FdU(3.05μmol/kg);および(c)0.9%NaClを尾静脈に繰り返し注射した(初回注射後0、30、70、140、190、240時間)。
次式を用い、腫瘍体積をカリパスで毎日測定した:体積=長さ×幅2×π/6。腫瘍接種から21日後、すなわち、最終処置の6日後、マウスを屠殺し、腫瘍を切除し、秤量した。実験は、癌研究で動物を使用するための地方倫理委員会の承認に従って行った。動物の使用に関連する手順は、UKCCCR(1998)United Kingdom Co−ordinating Committee on Cancer Research guidelines for the welfare of animals in experimental neoplasia.2nd ed Br J Cancer77:1〜10を含む、研究目的で用いられる動物を保護するすべての規則に従う。統計的分析は、スチューデントt検定(p<0.05)を用いて行った。最終処置後(240時間)、NT(1−13)−5FdUで処置したマウスの平均腫瘍体積は、遊離5FdUまたは食塩水で処置した動物の平均腫瘍体積の約50%であった(図7A)。最終処置から5日後(360時間)に測定した腫瘍重量は、薬物結合ペプチドで処置したマウスでは、コントロール群より40%少なかった(図7C)。10日の期間に用量3μ/kgで6回投与した遊離5−FdUは、腫瘍増殖を10%だけ阻害した。
参考文献
Claims (15)
- ペプチドが、以下のアミノ酸配列:QLYENKPRRPYIL(配列番号1)、pyroELYENKPRRPYIL(配列番号2)、またはRRPYIL(配列番号1のアミノ酸8からアミノ酸13)を含む、請求項1に記載の多量体分子。
- 医療に使用するための、請求項1または2に記載の多量体分子。
- 抗腫瘍剤としての、請求項1または2に記載の多量体分子。
- 前記腫瘍が、結腸、膵臓または前立腺癌腫である、請求項5に記載の多量体分子。
- 薬剤を調製するための、請求項1に記載の多量体分子の使用。
- 前記薬剤が抗腫瘍活性を有する、請求項6に記載の使用。
- 前記腫瘍を診断するための、請求項1に記載の多量体分子の使用。
- 前記腫瘍が、結腸、膵臓または前立腺癌腫である、請求項7または8に記載の使用。
- 請求項1から5のいずれか一項に記載の多量体分子、または医薬的に許容され有効なその塩、ならびに希釈剤、および/または溶媒、および/または担体、および/または賦形剤を含む医薬組成物。
- 請求項1に記載の多量体分子を投与または曝露することを含む、治療方法。
- 前記治療が抗腫瘍治療である、請求項11に記載の方法。
- 請求項1に記載の多量体分子を投与または曝露することを含む、診断方法。
- 前記診断が腫瘍診断である、請求項13に記載の方法。
- 前記腫瘍が、結腸、膵臓または前立腺癌腫である、請求項12または14に記載の方法。
Applications Claiming Priority (3)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
US11197008P | 2008-11-06 | 2008-11-06 | |
US61/111,970 | 2008-11-06 | ||
PCT/EP2009/064619 WO2010052243A2 (en) | 2008-11-06 | 2009-11-04 | Neurotensin-derived branched peptides and uses thereof |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
JP2012507573A true JP2012507573A (ja) | 2012-03-29 |
Family
ID=41571344
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2011535105A Pending JP2012507573A (ja) | 2008-11-06 | 2009-11-04 | ニューロテンシン誘導分岐ペプチドおよびその使用 |
Country Status (5)
Country | Link |
---|---|
US (1) | US20110319339A1 (ja) |
EP (1) | EP2362784A2 (ja) |
JP (1) | JP2012507573A (ja) |
CN (1) | CN102271713B (ja) |
WO (1) | WO2010052243A2 (ja) |
Families Citing this family (5)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO2012014046A2 (en) * | 2010-07-27 | 2012-02-02 | Diego Tesauro | Supramolecular aggregates as drug carriers on cell expressing receptors for branched neurotensin |
US10093741B1 (en) | 2017-05-05 | 2018-10-09 | Fusion Pharmaceuticals Inc. | IGF-1R monoclonal antibodies and uses thereof |
EA201992595A1 (ru) | 2017-05-05 | 2020-04-21 | Фьюжн Фармасьютикалс Инк. | Усиление фармакокинетики бифункциональных хелатов и их применения |
KR20200004861A (ko) | 2017-05-05 | 2020-01-14 | 퓨전 파마슈티칼즈 인크. | Igf-1r 모노클로날 항체 및 그의 용도 |
WO2023019912A1 (zh) * | 2021-08-16 | 2023-02-23 | 杭州瑞臻医药有限公司 | 苯并三嗪双氧化物及其药物组合物 |
Citations (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US5019A (en) * | 1847-03-13 | Shirt-bosom | ||
WO2007093373A2 (en) * | 2006-02-14 | 2007-08-23 | Università Degli Studi Di Siena | Branched multimeric peptides for tumor diagnosis and therapy |
WO2008010463A1 (fr) * | 2006-07-19 | 2008-01-24 | Nippon Kayaku Kabushiki Kaisha | Conjugué polymère d'une combrétastatine |
-
2009
- 2009-11-04 CN CN2009801537891A patent/CN102271713B/zh not_active Expired - Fee Related
- 2009-11-04 JP JP2011535105A patent/JP2012507573A/ja active Pending
- 2009-11-04 EP EP09749103A patent/EP2362784A2/en not_active Withdrawn
- 2009-11-04 US US13/127,346 patent/US20110319339A1/en not_active Abandoned
- 2009-11-04 WO PCT/EP2009/064619 patent/WO2010052243A2/en active Application Filing
Patent Citations (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US5019A (en) * | 1847-03-13 | Shirt-bosom | ||
WO2007093373A2 (en) * | 2006-02-14 | 2007-08-23 | Università Degli Studi Di Siena | Branched multimeric peptides for tumor diagnosis and therapy |
WO2008010463A1 (fr) * | 2006-07-19 | 2008-01-24 | Nippon Kayaku Kabushiki Kaisha | Conjugué polymère d'une combrétastatine |
Non-Patent Citations (3)
Title |
---|
JPN6014017695; Cancer Research, 2001, Vol.61, p.7971-7977 * |
JPN6014017698; J. Am. Chem. Soc., 2005, Vol.127, p.13253-13261 * |
JPN6014017701; Current Protein and Peptide Science, 2008.10, Vol.9, p.468-477 * |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
CN102271713A (zh) | 2011-12-07 |
US20110319339A1 (en) | 2011-12-29 |
WO2010052243A2 (en) | 2010-05-14 |
WO2010052243A3 (en) | 2010-08-19 |
CN102271713B (zh) | 2013-07-31 |
EP2362784A2 (en) | 2011-09-07 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
US10124077B2 (en) | Plectin-1 targeted agents for detection and treatment of pancreatic ductal adenocarcinoma | |
US6919425B2 (en) | Isolation of a cell-specific internalizing peptide that infiltrates tumor tissue for targeted drug delivery | |
ES2882634T3 (es) | Compuestos peptídicos y conjugados con péptidos para el tratamiento del cáncer mediante quimioterapia mediada por receptores | |
Falciani et al. | Modular branched neurotensin peptides for tumor target tracing and receptor-mediated therapy: a proof-of-concept | |
US10370410B2 (en) | Cancer cell-targeting peptide and use thereof | |
EP1991561B1 (en) | Branched multimeric peptides for tumor diagnosis and therapy | |
US10947275B2 (en) | Caged cell penetrating peptide-polymer conjugates for diagnostic and therapeutic applications | |
JP2012507573A (ja) | ニューロテンシン誘導分岐ペプチドおよびその使用 | |
KR101467676B1 (ko) | 암 표적용 펩타이드 및 이의 의학적 용도 | |
KR101456026B1 (ko) | 종양선택적 투과기능성을 가지는 펩타이드 및 그 용도 | |
Yamada et al. | Biological evaluation of paclitaxel-peptide conjugates as a model for MMP2-targeted drug delivery | |
KR102228272B1 (ko) | 항암 상승효과를 나타내는 종양세포 특이적 자기조립 나노약물 복합체 | |
Guo et al. | Peptides for diagnosis and treatment of ovarian cancer | |
EP1581790B1 (en) | Peptides that home to tumor lymphatic vasculature and methods of using same | |
Chen et al. | An auristatin-based peptide-drug conjugate targeting Kita-Kyushu lung cancer antigen 1 for precision chemoradiotherapy in gastric cancer | |
US10858396B2 (en) | HER2 peptide regents and methods | |
KR102436012B1 (ko) | 항암제 프로드러그 컨쥬게이트의 새로운 용도 | |
US20070128116A1 (en) | Multifunctional core for molecular imaging and targeted delivery of macromolecules and drugs | |
CN108314741A (zh) | 一种肿瘤血管靶向抗癌肽nkl-dota及其制备方法 | |
Liu et al. | Conclusions: The developed GnRHR-targeted imaging agent GnRHa-ICG could specifically detected peritoneal tumor lesions from normal peritoneal and intestines | |
CA3232979A1 (en) | Fibronectin-binding peptides for use in tumor or fibrosis diagnosis and therapy | |
KR20240068777A (ko) | 종양 또는 섬유증 진단 및 치료에 사용하기 위한 피브로넥틴-결합 펩타이드 |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
A621 | Written request for application examination |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A621 Effective date: 20121017 |
|
RD04 | Notification of resignation of power of attorney |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A7424 Effective date: 20140410 |
|
A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20140513 |
|
A02 | Decision of refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A02 Effective date: 20141028 |