JP2012215610A - ウェルプレート、およびウェルプレートを用いた観察方法 - Google Patents

Abstract

【課題】ウェルの端の近傍についても良好な画像を得ることができるウェルプレート等を提供する。
【解決手段】ウェルの側壁面に、鉛直方向に対して傾いた角度が与えられ、前記角度は、前記ウェルに収容される液体の前記側壁面の近傍における液面がほぼ水平になるように設定されている。前記側壁面の角度が鉛直方向について連続的に変化し、前記液体の前記側壁面の近傍における前記液面の角度が前記液面の高さに応じて変化するように構成してもよい。
【選択図】図１

Description

本発明は、顕微鏡による観察の対象となる試料を収容するウェルを備えるウェルプレート等に関する。

創薬スクリーニング等の分野では、一度に多数の条件の細胞試料を観察するため、プレパラートの代わりにウェルプレート（マイクロタイタープレートあるいはマイクロプレート等とも呼ばれる）を用いることが多い。ウェルプレートの寸法は、Society of Biomolecular Screening（ＳＢＳ）により標準規格が制定されている。

一方、細胞試料の観察等に用いられる位相差観察とは、Zernike（１９５３年ノーベル賞受賞）が発明した観察手法で、細胞のような無色透明な観察対象であっても、観察対象とその周辺部との屈折率の違いを利用して画像のコントラストを発生させることで、観察対象を観察できる方法である。創薬分野に限らず、生物学分野、生命科学分野で広く使われている。生物学の観点からすると、蛍光標識等の方法のように観察対象を染色する必要がないため、染色による生物学的な影響（毒性）を与えることなく、生きた細胞をそのままの姿で観察する手法として重要である。

特開２００６−９１５０６号公報

一般に、位相差観察を行うための位相差顕微鏡の照明は透過照明を用いる。つまり、対物レンズとは反対側から光を照射し、観察対象を透過した（観察対象により散乱された）光を観察する。このため、光路のうち、対物レンズの後段だけでなく、照明光（上流）側の光路に存在するあらゆるもの、例えば、埃、ゴミ、細胞を培養するための培地（液体）も観察像に影響を与えることになる。

図７は、ウェルプレートに形成されたウェルの部分の断面形状を示しているが、この例では、上方（図７の上方に相当）から照明してウェル１０１の底面１０１ａに貼り付いた細胞を下方にある対物レンズ１０３から上向きに観察する。このように、いわゆる倒立型の顕微鏡が構成されている。このとき、ウェル１０１の周辺部において、細胞を培養するための液体である培地が表面張力によりウェル１０１の側壁１０１ｂに対してある接触角を持つことが観察に影響を与える。すなわち、図７に示すように、培地は一般には上方の空気および培地の蒸気とは異なる屈折率を持つため、ウェル１０１の側壁１０１ｂに近い、培地の表面１０２が水平でない領域では、培地の液面がレンズ効果を持ち、照明の光線が設計通りの光路を通らなくなり、正しい位相差観察ができなくなる。

この効果の影響は、とくに９６ウェルプレート（ウェルが縦横に１２×８＝９６個配置されたウェルプレート）等、個々のウェルの径が小さい場合に大きくなり、視野の中心部では位相差観察が可能であるが、視野の中心から少しでも離れると位相差によるコントラストが付かないという問題がある。ウェルの端のほうに存在する細胞を観察できないと、１個のウェルから得られる画像データ、つまり、１個のウェルで観察できる細胞数が少なくなり、多数の細胞を用いた高い統計精度のデータが得られなくなってしまう。

上記特許文献１には、培地の曲面によるレンズ効果を相殺するような屈折力可変レンズ機構によりこのような問題を解決する装置が開示されている。しかし、このような機構は大掛かりで複雑であり、装置のコストアップを招くという問題がある。

本発明の目的は、ウェルの端の近傍についても良好な画像を得ることができるウェルプレート等を提供することにある。

本発明のウェルプレートは、顕微鏡による観察の対象となる試料を収容するウェルを備えるウェルプレートにおいて、前記ウェルの側壁面に、鉛直方向に対して傾いた角度が与えられ、前記角度は、前記ウェルに収容される液体の前記側壁面の近傍における液面がほぼ水平になるように設定されていることを特徴とする。
このウェルプレートによれば、ウェルの側壁面にウェルに収容される液体の側壁面の近傍における液面がほぼ水平になるような角度が与えられているので、ウェルの端の近傍についても良好な画像を得ることができる。

前記側壁面の角度が鉛直方向について連続的に変化し、前記液体の前記側壁面の近傍における前記液面の角度が前記液面の高さに応じて変化するように構成されていてもよい。

本発明の観察方法は、顕微鏡による観察の対象となる試料を収容するウェルを備えるウェルプレートを用いて、前記試料を観察する観察方法において、前記ウェルに液体を入れるステップと、前記液体が収容された前記ウェル内の前記試料を顕微鏡により観察するステップと、を備え、前記ウェルの側壁面に、鉛直方向に対して傾いた角度が与えられ、前記角度は、前記ウェルに収容された前記液体の前記側壁面の近傍における液面がほぼ水平になるように設定されていることを特徴とする。
この観察方法によれば、ウェルの側壁面にウェルに収容される液体の側壁面の近傍における液面がほぼ水平になるような角度が与えられているので、ウェルの端の近傍についても良好な画像を得ることができる。

前記観察するステップによる観察の前に、前記ウェルに入れられた液体の液面と、前記ウェルの側壁面との相対的な位置関係を調整するステップを備え、前記側壁面の角度が鉛直方向について連続的に変化し、前記液体の前記側壁面の近傍における前記液面の角度が前記液面の高さに応じて変化するように構成され、前記位置関係を調整するステップでは、前記ウェルに収容される液体の前記側壁面の近傍における液面がほぼ水平になるように前記位置関係を調整してもよい。

前記ウェル内の前記試料に、前記液面を介して照明光を照射するステップを備え、前記観察するステップでは、前記照明光により前記試料を観察してもよい。

本発明のウェルプレートによれば、ウェルの側壁面にウェルに収容される液体の側壁面の近傍における液面がほぼ水平になるような角度が与えられているので、ウェルの端の近傍についても良好な画像を得ることができる。

本発明の観察方法によれば、ウェルの側壁面にウェルに収容される液体の側壁面の近傍における液面がほぼ水平になるような角度が与えられているので、ウェルの端の近傍についても良好な画像を得ることができる。

実施例１のウェルプレートの構成を示す図であり、図１（ａ）はウェルプレートに形成されたウェルの鉛直断面図、図１（ｂ）は図１（ａ）のＢ−Ｂ線方向から見た上面図。 実施例２のウェルプレートの構成を示す図であり、図２（ａ）はウェルプレートに形成されたウェルの鉛直断面図、図２（ｂ）は図２（ａ）のＢ−Ｂ線方向から見た上面図。 実施例３のウェルプレートの構成を示す図であり、図３（ａ）はウェルプレートに形成されたウェルの鉛直断面図、図３（ｂ）は図３（ａ）のＢ−Ｂ線方向から見た上面図。 実施例４のウェルプレートの構成を示す図であり、図４（ａ）はウェルプレートに形成されたウェルの鉛直断面図、図４（ｂ）は図４（ａ）のＢ−Ｂ線方向から見た上面図。 実施例５および実施例６のウェルプレートの構成を示す図であり、（ａ）は実施例５のウェルプレートに形成されたウェルの鉛直断面図、（ｂ）は実施例６のウェルプレートに形成されたウェルの鉛直断面図。 実施例７のウェルプレートの構成を示す図であり、（ａ）はウェルの構成を示す斜視図、（ｂ）はジグの構成を示す鉛直断面図。 従来のウェルプレートに形成されたウェルの断面図。

本発明は、液体である培地が固体であるウェルの側壁に接触する際の接触角を利用したものである。接触角は表面張力で決まっており、それは固体の材質、液体の種類の組み合わせと、固体の表面状態（粗さや洗浄度など）で決まる固有の角度である。ウェルの側壁近傍でも、培地の液面がほぼ水平になっていれば、その領域でも位相差観察に支障がでない。そのような条件を満足させるため、本発明では、ウェルの側壁面を鉛直方向に対して傾かせることで、この固有の接触角を利用してウェルの側壁面近傍における培地の液面がほぼ水平になるようにしている。

以下、本発明によるウェルプレートの実施形態について説明する。

図１は本発明による実施例１のウェルプレートの構成を示す図であり、図１（ａ）はウェルプレートに形成されたウェルの鉛直断面図、図１（ｂ）は図１（ａ）のＢ−Ｂ線方向から見た上面図である。

本実施例のウェルプレートは、図１（ａ）および図１（ｂ）に示すウェル１，１，・・・を所定数（例えば、縦横に１２×８＝９６個）配列して構成される。

図１（ａ）および図１（ｂ）に示すように、ウェル１は鉛直軸を中心とする回転対称の形状に形成されている。ウェル１の側壁１１は鉛直方向に対する傾き角が異なる２つの領域が交互に繰り返された形状とされている。このような繰り返し形状により、ウェル１の水平方向の径を一定の範囲に収めることができる。ウェル１の内部には、試料となる液状の培地が収容される。

本実施例のウェルプレートでは、培地の液面１２が接触すべきウェル１の側壁１１の傾き（鉛直方向に対する角度）は一定とされている。このような構成は、予めウェル１の側壁１１の材質と培地の組み合わせが固定され、接触角が既知であり安定している場合に好適である。

また、本実施例のウェルプレートでは、鉛直方向の位置が異なる複数個所（３箇所）の領域で、同一の傾きを側壁１１に与えているので、培地の液面１２の位置、すなわち、培地の分量を広い範囲で選択可能となる。

このように液面１２が接する領域における側壁１１の傾きを最適化することにより、側壁１１の近傍において液面１２をほぼ水平に保つことができる。また、側壁１１から離れたウェル１の中央領域では、接触角の影響は小さいため側壁１１の傾きに依らず液面１２は水平となる。このため、本実施例のウェルプレートでは、培地の液面１２をウェル１の中心部から側壁１１の近傍に至る広い範囲で、ほぼ水平にすることができる。このため、ウェル１の上方からの照明の光線が設計通りの光路を通り、ウェル１の下方に配置された対物レンズ１０３を介する正しい位相差観察が広範囲で可能となる。

本実施例では、ウェルの形状を、鉛直軸を中心とする回転対称の形状としているが、このような形状は培地の液面の全体を水平に近づける観点で望ましい。しかし、充分な効果が得られる場合には、ウェルの形状を回転対称の形状と異なるものとしてもよい。

また、ウェルの側壁の傾きが極端に大きくなると、上方から見たときのウェルの実質的な開口が小さくなってしまうので、可能な限り接触角が９０度に近くなるような側壁の物質を選択し、ウェルの側壁の傾きを小さくすることが望ましい。

なお、図１はウェルの形状を例示したものであり、ウェルの形状は任意である。例えば、ウェルの側壁の向きが鉛直方向にごく近い場合には、上記の繰り返し形状をとらず、ウェルの底部から上部に向かって連続して径が拡大するような形状としてもよい。

図２は本発明による実施例２のウェルプレートの構成を示す図であり、図２（ａ）はウェルプレートに形成されたウェルの鉛直断面図、図２（ｂ）は図２（ａ）のＢ−Ｂ線方向から見た上面図である。

本実施例のウェルプレートは、図２（ａ）および図２（ｂ）に示すウェル２，２，・・・を所定数（例えば、縦横に１２×８＝９６個）配列して構成される。

図２（ａ）および図２（ｂ）に示すように、ウェル２は鉛直軸を中心とする回転対称の形状に形成されている。ウェル２の側壁２１は鉛直方向に対する傾き角が異なる２つの領域が交互に繰り返された形状とされている。このような繰り返し形状により、ウェル２の水平方向の径を一定の範囲に収めることができる。ウェル２の内部には、液状の培地が収容される。

本実施例のウェルプレートでは、培地の液面２２が接触すべきウェル２の側壁２１の傾き（鉛直方向に対する角度）は一定とされている。ただし、その傾きは実施例１と異なっており、傾きの方向も反転している。このような構成は、予めウェル２の側壁２１の材質と培地の組み合わせが固定され、接触角が既知であり安定している場合に好適である。

また、本実施例のウェルプレートでは、鉛直方向の位置が異なる複数個所（３箇所）の領域で、同一の傾きを側壁２１に与えているので、培地の液面２２の位置、すなわち、培地の分量を広い範囲で選択可能となる。

このように液面２２が接する領域における側壁２１の傾きを最適化することにより、側壁２１の近傍において液面２２をほぼ水平に保つことができる。また、側壁２１から離れたウェル２の中央領域では、接触角の影響は小さいため側壁２１の傾きに依らず液面２２は水平となる。このため、本実施例のウェルプレートでは、培地の液面２２をウェル２の中心部から側壁２１の近傍に至る広い範囲で、ほぼ水平にすることができる。このため、ウェル２の上方からの照明の光線が設計通りの光路を通り、ウェル２の下方に配置された対物レンズを介する正しい位相差観察が広範囲で可能となる。

本実施例では、ウェルの形状を、鉛直軸を中心とする回転対称の形状としているが、このような形状は培地の液面の全体を水平に近づける観点で望ましい。しかし、充分な効果が得られる場合には、ウェルの形状を回転対称の形状と異なるものとしてもよい。

また、ウェルの側壁の傾きが極端に大きくなると、上方から見たときのウェルの実質的な開口が小さくなってしまうので、可能な限り接触角が９０度に近くなるような側壁の物質を選択し、ウェルの側壁の傾きを小さくすることが望ましい。

なお、図２はウェルの形状を例示したものであり、ウェルの形状は任意である。例えば、ウェルの側壁の向きが鉛直方向にごく近い場合には、上記の繰り返し形状をとらず、ウェルの底部から上部に向かって連続して径が拡大するような形状としてもよい。

図３は本発明による実施例３のウェルプレートの構成を示す図であり、図３（ａ）はウェルプレートに形成されたウェルの鉛直断面図、図３（ｂ）は図３（ａ）のＢ−Ｂ線方向から見た上面図である。

本実施例のウェルプレートは、図３（ａ）および図３（ｂ）に示すウェル３，３，・・・を所定数（例えば、縦横に１２×８＝９６個）配列して構成される。

図３（ａ）および図３（ｂ）に示すように、ウェル３は鉛直軸を中心とする回転対称の形状に形成されている。ウェル３の側壁３１はウェル３の内側に向けて半円状に突出した形状の領域が連続して繰り返された形状とされている。このような繰り返し形状により、ウェル３の水平方向の径を一定の範囲に収めることができる。ウェル３の内部には、液状の培地が収容される。

本実施例のウェルプレートでは、培地の液面３２が接触するウェル３の側壁３１の傾き（鉛直方向に対する角度）が、液面３２の高さに応じて連続的に変化する。このような構成は、予めウェル３の側壁３１の材質と培地の組み合わせで決まる接触角に応じて、最適な状態を獲得したい場合に好適である。液面３２の高さを接触角に応じて調整することにより、側壁３１の近傍における液面３２の水平性を確保することができる。

ウェル３の形状は既知であるので、ウェル３に充填される培地（および薬剤）の体積と、液面３２の位置との関係は解析的ないし数値的に算出できるため、ウェル３に充填すべき培地の分量を求めることができる。培地の量はディスペンサ等の機構により培地を追加または吸引することで調整できる。

また、本実施例のウェルプレートでは、鉛直方向の位置が異なる複数個所（３箇所）の領域で、同一の形状が繰り返される形状を側壁３１に与えているので、培地の液面３２の位置を３箇所の中から選択でき、培地の分量が１つに制限されることがない。

このように液面３２が接する領域における側壁３１の傾きを最適化することにより、側壁３１の近傍において液面３２をほぼ水平に保つことができる。また、側壁３１から離れたウェル３の中央領域では、接触角の影響は小さいため側壁３１の傾きに依らず液面３２は水平となる。このため、本実施例のウェルプレートでは、培地の液面３２をウェル３の中心部から側壁３１の近傍に至る広い範囲で、ほぼ水平にすることができる。このため、ウェル３の上方からの照明の光線が設計通りの光路を通り、ウェル３の下方に配置された対物レンズを介する正しい位相差観察が広範囲で可能となる。

本実施例では、ウェルの形状を、鉛直軸を中心とする回転対称の形状としているが、このような形状は培地の液面の全体を水平に近づける観点で望ましい。しかし、充分な効果が得られる場合には、ウェルの形状を回転対称の形状と異なるものとしてもよい。

なお、図３はウェルの形状を例示したものであり、ウェルの形状は任意である。

図４は本発明による実施例４のウェルプレートの構成を示す図であり、図４（ａ）はウェルプレートに形成されたウェルの鉛直断面図、図４（ｂ）は図４（ａ）のＢ−Ｂ線方向から見た上面図である。

本実施例のウェルプレートは、図４（ａ）および図４（ｂ）に示すウェル４，４，・・・を所定数（例えば、縦横に１２×８＝９６個）配列して構成される。

図４（ａ）および図４（ｂ）に示すように、ウェル４は鉛直軸を中心とする回転対称の形状に形成されている。ウェル４の側壁４１はウェル４の外側に向けて半円状に突出した形状の領域が連続して繰り返された形状とされている。このような繰り返し形状により、ウェル４の水平方向の径を一定の範囲に収めることができる。ウェル４の内部には、液状の培地が収容される。

本実施例のウェルプレートでは、培地の液面４２が接触するウェル４の側壁４１の傾き（鉛直方向に対する角度）が、液面４２の高さに応じて連続的に変化する。このような構成は、予めウェル４の側壁４１の材質と培地の組み合わせで決まる接触角に応じて、最適な状態を獲得したい場合に好適である。液面４２の高さを接触角に応じて調整することにより、側壁４１の近傍における液面４２の水平性を確保することができる。

ウェル４の形状は既知であるので、ウェル４に充填される培地（および薬剤）の体積と、液面４２の位置との関係は解析的ないし数値的に算出できるため、ウェル４に充填すべき培地の分量を求めることができる。培地の量はディスペンサ等の機構により培地を追加または吸引することで調整できる。

また、本実施例のウェルプレートでは、鉛直方向の位置が異なる複数個所（３箇所）の領域で、同一の形状が繰り返される形状を側壁４１に与えているので、培地の液面４２の位置を３箇所の中から選択でき、培地の分量が１つに制限されることがない。

このように液面４２が接する領域における側壁４１の傾きを最適化することにより、側壁４１の近傍において液面４２をほぼ水平に保つことができる。また、側壁４１から離れたウェル４の中央領域では、接触角の影響は小さいため側壁４１の傾きに依らず液面４２は水平となる。このため、本実施例のウェルプレートでは、培地の液面４２をウェル４の中心部から側壁４１の近傍に至る広い範囲で、ほぼ水平にすることができる。このため、ウェル４の上方からの照明の光線が設計通りの光路を通り、ウェル４の下方に配置された対物レンズを介する正しい位相差観察が広範囲で可能となる。

本実施例では、ウェルの形状を、鉛直軸を中心とする回転対称の形状としているが、このような形状は培地の液面の全体を水平に近づける観点で望ましい。しかし、充分な効果が得られる場合には、ウェルの形状を回転対称の形状と異なるものとしてもよい。

なお、図４はウェルの形状を例示したものであり、ウェルの形状は任意である。

図５（ａ）は本発明による実施例５のウェルプレートに形成されたウェルの鉛直断面図である。

図５（ａ）に示すように、本実施例のウェルプレートでは、実施例３のウェルプレートを構成する各ウェル３に、容積調整用の棒状の部材６を鉛直方向に出し入れすることにより、ウェル３の実質的な容積ないし、液体の容積と液面の高さとの関係を調整し、培地の液面３２の高さを調整する。これにより、ウェル３に充填する培地の分量の調整が困難な場合に対応することができる。

部材６は観察領域から離れた位置に配置することで観察を妨害しないようにする必要がある。また、部材６を介する薬剤によるコンタミネーションを防止するために、部材６を洗浄せずに異なるウェルに浸すことは好ましくない。したがって、異なるウェルに対して同一の部材６を使用する場合には洗浄が必要となる。この場合、ウェルと同数の部材６をウェルの配列と同様に配列（例えば９６個を配列）させ、部材６群を同時に上下動、平行移動する機構を設けることで、プレート単位でまとめて部材６群を洗浄でき、高速化の点で有利である。

図５（ｂ）は本発明による実施例６のウェルプレートに形成されたウェルの鉛直断面図である。

図５（ｂ）に示すように、本実施例のウェルプレートでは、実施例４のウェルプレートを構成する各ウェル４に、容積調整用の棒状の部材６を鉛直方向に出し入れすることにより、ウェル４の実質的な容積ないし、液体の容積と液面の高さとの関係を調整し、培地の液面４２の高さを調整する。これにより、ウェル４に充填する培地の分量の調整が困難な場合に対応することができる。

部材６は観察領域から離れた位置に配置することで観察を妨害しないようにする必要がある。また、部材６を介する薬剤によるコンタミネーションを防止するために、部材６を洗浄せずに異なるウェルに浸すことは好ましくない。したがって、異なるウェルに対して同一の部材６を使用する場合には洗浄が必要となる。この場合、ウェルと同数（例えば９６個）の部材６をウェルの配列と同様に配列し、部材６群を同時に上下動、平行移動する機構を設けることで、プレート単位でまとめて部材６群を洗浄でき、高速化の点で有利である。

図６（ａ）は本発明による実施例７のウェルプレートの構成を示す斜視図、図６（ｂ）はジグの構成を示す鉛直断面図である。本実施例のウェルプレートでは、実施例１〜６のウェルプレートにおけるウェルの側壁の機能をジグに持たせることにより、培地の液面を水平に近づける。

図６（ａ）および図６（ｂ）に示すように、本実施例のウェルプレートには、円柱状のウェル９，９，・・・が所定数（例えば、縦横に１２×８＝９６個）形成されている。各ウェル９には外周が円錐台形状のジグ７１が挿入される。ジグ７１は上下方向に開口する筒状とされ、その内壁面７１に培地に応じた傾きを与えることにより、ジグ７１の内側における培地の液面９１を水平にしている。

ジグ７が光沢を持ち、あるいは透明であると光学的に不都合を生じさせるため、黒色とするなどして、照明光の拡散が防止される。上方からの平行照明光は、ジグ７１の下方の開口によって径が絞り込まれ、図６（ａ）に示す照明光７２が試料に照射される。

このように、本実施例のウェルプレートでは、ウェルと別にジグ７を設けているため、培地の液面の高さに応じてジグ７の位置を上下に移動させることができる。

図６（ｃ）はジグ７Ａの構成を示す鉛直断面図である。

図６（ｃ）に示すように、ジグ７Ａはその内壁面７１Ａがジグ７Ａの内側に突出する形状とされ、鉛直方向に沿って内壁面７１Ａの傾きが連続的に変化する。したがって、液面９１の接触位置における内壁面７１Ａの傾きが適切となるように、ジグ７Ａの位置を調整することで、ジグ７Ａの内部における液面９１を水平に近づけることができる。この場合、観察画像を取得しながらモータ等でジグ７Ａを上下方向に駆動しながら観察画像の画像処理を行って位相差のコントラストを算出し、そのコントラストが最大になる位置、すなわち液面９１が水平になる位置でジグ７Ａを停止させてもよい。

なお、ジグ７およびジグ７Ａは、本発明におけるウェルプレートを構成する「ウェル」の一部に対応し、内壁面７１および内壁面７１Ａは、それぞれ本発明における「側壁面」に対応する。

以上説明したように、本発明のウェルプレートによれば、ウェル内部の液体とウェルの材質などにより決まる固有の接触角を利用して、ウェル内部の液体の液面の角度を制御できる。このため、ウェルの端部まで液面を水平にして液面によるレンズ効果を排除することができ、ウェル内の広範囲での観察が可能となる。また、基本的に、従来のウェルプレートと同様、合成樹脂などの材料を使用でき、従来のウェルプレートに対してウェルの形状を変えるだけで足りるため、顕微鏡観察にかかるコストアップを招くこともない。

本発明の適用範囲は上記実施形態に限定されることはない。本発明は、位相差観察を行う場合に限定されることなく、顕微鏡による観察の対象となる試料を収容するウェルを備えるウェルプレート等に対し、広く適用することができる。

１，２，３，４ ウェル
７，７Ａ ジグ（ウェル）
１２，２２，３２，４２，９１ 液面
７１，７１Ａ 内壁面（側壁面）

Claims (5)

1. 顕微鏡による観察の対象となる試料を収容するウェルを備えるウェルプレートにおいて、
   前記ウェルの側壁面に、鉛直方向に対して傾いた角度が与えられ、前記角度は、前記ウェルに収容される液体の前記側壁面の近傍における液面がほぼ水平になるように設定されていることを特徴とするウェルプレート。
2. 前記側壁面の角度が鉛直方向について連続的に変化し、前記液体の前記側壁面の近傍における前記液面の角度が前記液面の高さに応じて変化するように構成されていることを特徴とする請求項１に記載のウェルプレート。
3. 顕微鏡による観察の対象となる試料を収容するウェルを備えるウェルプレートを用いて、前記試料を観察する観察方法において、
   前記ウェルに液体を入れるステップと、
   前記液体が収容された前記ウェル内の前記試料を顕微鏡により観察するステップと、
   を備え、
   前記ウェルの側壁面に、鉛直方向に対して傾いた角度が与えられ、前記角度は、前記ウェルに収容された前記液体の前記側壁面の近傍における液面がほぼ水平になるように設定されていることを特徴とする観察方法。
4. 前記観察するステップによる観察の前に、前記ウェルに入れられた液体の液面と、前記ウェルの側壁面との相対的な位置関係を調整するステップを備え、
   前記側壁面の角度が鉛直方向について連続的に変化し、前記液体の前記側壁面の近傍における前記液面の角度が前記液面の高さに応じて変化するように構成され、
   前記位置関係を調整するステップでは、前記ウェルに収容される液体の前記側壁面の近傍における液面がほぼ水平になるように前記位置関係を調整することを特徴とする請求項３に記載の観察方法。
5. 前記ウェル内の前記試料に、前記液面を介して照明光を照射するステップを備え、
   前記観察するステップでは、前記照明光により前記試料を観察することを特徴とする請求項３または４に記載の観察方法。

Images