JP2012191859A - Culture apparatus for microscopic observation - Google Patents

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Abstract

PROBLEM TO BE SOLVED: To provide a culture apparatus for microscopic observation that is capable of efficiently keeping an atmosphere (humidity, temperature, gas composition) in a culture space constant without making a structure complex.SOLUTION: The culture apparatus for microscopic observation includes a storage unit 3 for storing a container holding a culture solution A and a sample B, and a lid body 21 for closing an opening on the upper surface side of the storage unit 3, and is installed on a stage S of a microscope and used to microscopically observe the sample B. The culture apparatus includes a gas concentration detection means 33 for detecting the concentration of a desired gas component in an atmospheric gas in the culture space, and a gas supply means for supplying a gas into the culture space according to concentration information from the gas concentration detection means 33. The gas is supplied as necessary so as to not only prevent the gas from leaking but also prevent resulting decreases in heat and moisture.

Description

本発明は、細胞等の試料を観察するのに適した顕微鏡観察用培養装置に関するものである。   The present invention relates to a culture apparatus for microscopic observation suitable for observing a sample such as a cell.

この種の顕微鏡観察用培養装置として典型的なものは、特許文献１に示されたものである。この顕微鏡観察用培養装置は、収容ユニットとその上面側開口を閉鎖する蓋体とで構成されており、収容ユニット内にはその内縁側に沿って水槽が設けられ、それより内方が収容空間となっており、この収容空間に、培養液と細胞等の試料を入れた容器、例えばウェルプレートを収納ユニットの下面を閉鎖するように収容した状態で、顕微鏡ステージに設置して使用するようになっている。
ところで、培養液に入った細胞等の試料を観察に適した条件下で保持するためには、収容ユニットとその蓋体と試料等の入った容器とによって殆ど密閉された、所謂培養空間内は、温度や湿度だけでなく、その中を満たす雰囲気ガスのガス組成も一定に維持する必要がある。 A typical example of this type of microscopic observation culture apparatus is that disclosed in Patent Document 1. This culture apparatus for microscopic observation is composed of a housing unit and a lid that closes the upper surface side opening, and a water tank is provided along the inner edge side in the housing unit, and the inside is a housing space. In this storage space, a container containing a sample such as a culture solution and cells, such as a well plate, is stored on the microscope stage so that the lower surface of the storage unit is closed. It has become.
By the way, in order to hold samples such as cells contained in the culture solution under conditions suitable for observation, the so-called culture space, which is almost sealed by the container unit, its lid, and the container containing the sample, In addition to temperature and humidity, it is necessary to maintain the gas composition of the atmospheric gas that fills it constant.

そのため、ホースを収容ユニットに連結し、そこから所定の組成に調整したガスを常時供給していた。
なお、ガスの排出については、培養空間は完全に密閉されているわけではないので、特に設けずとも自然に垂れ流し状態にできていた。 Therefore, the hose was connected to the accommodation unit, and gas adjusted to a predetermined composition was constantly supplied from there.
Regarding gas discharge, since the culture space was not completely sealed, it was allowed to flow down naturally without special provision.

特開２００８−２５９４３０号公報JP 2008-259430 A

而して、上記したようにガスを外に排出すると、そのガスに取り込まれた水蒸気や熱も共に外に逃げてしまい、水槽内からの水の蒸発やヒーターの駆動により追加で補充されても、僅かな時間であれ、培養空間の雰囲気に変動をもたらすことになる。
また、培養空間を満たす雰囲気ガスは未だ所望のガス組成範囲に維持されていても、絶えず新しいガスが供給されることになり、不必要に無駄な垂れ流し状態になっている場合がある。 Thus, when the gas is discharged to the outside as described above, both the water vapor and heat taken in by the gas escape to the outside, and even if it is additionally replenished by evaporation of water from the water tank or driving of the heater Even in a short time, the atmosphere of the culture space will be changed.
In addition, even if the atmospheric gas that fills the culture space is still maintained in the desired gas composition range, new gas is constantly supplied, which may be unnecessarily wasted.

それ故、本発明は、培養空間の雰囲気（湿度、温度、ガス組成）を、構造を複雑化すること無く、しかも効率的に一定に維持できる顕微鏡観察用培養装置を提供することを、その目的とする。   Therefore, an object of the present invention is to provide a culture apparatus for microscope observation that can maintain the atmosphere (humidity, temperature, gas composition) of the culture space efficiently and uniformly without complicating the structure. And

本発明は、上記課題を解決するものであり、請求項１の発明は、培養液と試料が入った容器を収容する収容ユニットと、前記収容ユニットの上面側開口を閉鎖する蓋体とを備え、顕微鏡のステージに設置して前記試料を顕微鏡観察するのに用いる顕微鏡観察用培養装置において、前記収容ユニットと前記蓋体との間に形成される培養空間内の雰囲気ガス中の所望のガス成分の濃度を検出するガス濃度検出手段と、前記ガス濃度検出手段からの濃度情報に基づいて前記培養空間内へガスを供給するガス供給手段とを備えることを特徴とする顕微鏡観察用培養装置である。   The present invention solves the above-mentioned problems, and the invention of claim 1 includes a storage unit that stores a container containing a culture solution and a sample, and a lid that closes an upper surface side opening of the storage unit. The desired gas component in the atmospheric gas in the culture space formed between the housing unit and the lid body in the microscope observation culture apparatus that is installed on the microscope stage and used for microscopic observation of the sample A culture apparatus for microscopic observation, comprising gas concentration detection means for detecting the concentration of gas and gas supply means for supplying gas into the culture space based on concentration information from the gas concentration detection means .

請求項２の発明は、請求項１に記載した顕微鏡観察用培養装置において、ガス濃度検出手段は、培養空間から雰囲気ガスをサンプリング用に抜き出すサンプリング手段を有し、培養空間外に取出したサンプリングガスで所望のガス成分の濃度を検出することを特徴とする顕微鏡観察用培養装置である。   The invention according to claim 2 is the microscope observing apparatus according to claim 1, wherein the gas concentration detecting means has sampling means for extracting the atmospheric gas from the culture space for sampling, and the sampling gas taken out of the culture space The culture apparatus for microscopic observation is characterized by detecting the concentration of a desired gas component.

請求項３の発明は、請求項１または２に記載したガス濃度検出手段は、培養空間から雰囲気ガスをサンプリング用に抜き出し、所望のガス成分の濃度を検出した後に、前記培養空間に戻す戻し手段を有することを特徴とする顕微鏡観察用培養装置である。   According to a third aspect of the present invention, the gas concentration detecting means according to the first or second aspect is characterized in that the atmospheric gas is extracted from the culture space for sampling, the concentration of a desired gas component is detected, and then returned to the culture space. A culture apparatus for microscopic observation, characterized by comprising:

請求項４の発明は、請求項２または３に記載した顕微鏡観察用培養装置において、所望のガス成分を炭酸ガスとし、サンプリング側流路に除湿手段を介装し、戻し手段が有る場合にはその戻し側流路に加湿手段を介装したことを特徴とする顕微鏡観察用培養装置である。   According to a fourth aspect of the present invention, in the culture apparatus for microscopic observation according to the second or third aspect, when the desired gas component is carbon dioxide, the dehumidifying means is interposed in the sampling-side flow path, and the return means is provided. A culture apparatus for microscopic observation, characterized in that humidification means is interposed in the return side channel.

本発明の顕微鏡観察用培養装置によれば、培養空間内の雰囲気（湿度、温度、ガス組成）を、構造を複雑化すること無く、しかも効率的に一定に維持できる。   According to the culture apparatus for microscopic observation of the present invention, the atmosphere (humidity, temperature, gas composition) in the culture space can be maintained efficiently and constant without complicating the structure.

本発明の実施の形態に係る顕微鏡観察用培養装置の全体の斜視図である。1 is a perspective view of an entire culture apparatus for microscope observation according to an embodiment of the present invention. 図１の顕微鏡観察用培養装置の収容ユニット側の分解斜視図である。It is a disassembled perspective view by the side of the accommodation unit of the culture apparatus for microscope observation of FIG. 図１の顕微鏡観察用培養装置のガスセンシング機構の説明図である。It is explanatory drawing of the gas sensing mechanism of the culture apparatus for microscope observation of FIG.

本発明の実施の形態に係る顕微鏡観察用培養装置１を図１から図３にしたがって説明する。
顕微鏡観察用培養装置１は、図１、図３に示すように、収容ユニット３側と、それに取り付けられたガスセンシング機構２７とによって構成されている。
先ず、収容ユニット３側の構造について図２にしたがって説明する。
収容ユニット３はほぼ長方形の枠状に形成されており、上面側開口５と下面側開口７とがそれぞれ形成されている。 A microscopic observation culture apparatus 1 according to an embodiment of the present invention will be described with reference to FIGS.
As shown in FIGS. 1 and 3, the microscope observing culture apparatus 1 includes a storage unit 3 side and a gas sensing mechanism 27 attached thereto.
First, the structure on the housing unit 3 side will be described with reference to FIG.
The accommodation unit 3 is formed in a substantially rectangular frame shape, and an upper surface side opening 5 and a lower surface side opening 7 are formed respectively.

この下面側開口７の縁にアダプター９の側面が嵌り込んで固定されている。このアダプター９もほぼ長方形の枠状に形成されており、そこに当該アダプター用のウェルプレートＷが着脱自在に嵌込まれる。
収容ユニット３の内側面とアダプター９の外側面とに囲まれたループ状凹状空間は水槽１１としての機能を担わされている。
収容ユニット３には、水供給用ホース１３と、ガス供給用ホース１５が取り付けられており、それぞれの先端は水槽１１内に入り込んでいる。
温度検知用には、細線状の検知部１７も取り付けられており、その先端も収容ユニット３内まで延びている。
また、収容ユニット３には、一対の灌流用ホース用の取付用ホルダー１９も備えられており、灌流培養も可能となっている。 The side surface of the adapter 9 is fitted and fixed to the edge of the lower surface side opening 7. The adapter 9 is also formed in a substantially rectangular frame shape, and a well plate W for the adapter is detachably fitted therein.
The loop-shaped concave space surrounded by the inner side surface of the accommodation unit 3 and the outer side surface of the adapter 9 has a function as the water tank 11.
A water supply hose 13 and a gas supply hose 15 are attached to the storage unit 3, and the respective tips of the storage unit 3 enter the water tank 11.
For temperature detection, a thin-line detection unit 17 is also attached, and its tip also extends into the accommodation unit 3.
The accommodation unit 3 is also provided with a mounting holder 19 for a pair of perfusion hoses so that perfusion culture is possible.

上記した構造の収容ユニット３に相対して、その上面側開口５を閉鎖するよう蓋体２１が設けられている。この蓋体２１はほぼ長方形を為しており、長方形板状の透明な透光部２３が周囲の枠体に保持されている。この透光部２３には透明導電膜が備えられており、この透明導電膜に電気コード２５を介して通電することにより発熱させて、透明面状トップヒーターとしての機能を担わせている。
図１に示すように、収容ユニット３のアダプター９にウェルプレートＷを嵌め込み、蓋体２１でその上面側開口５を閉鎖することで、その中に殆ど密閉された培養空間が形成される。 A lid 21 is provided so as to close the upper surface side opening 5 relative to the housing unit 3 having the above structure. The lid 21 has a substantially rectangular shape, and a transparent transparent portion 23 having a rectangular plate shape is held by a surrounding frame. The transparent portion 23 is provided with a transparent conductive film. The transparent conductive film 23 is heated by energizing the transparent conductive film 25 through an electric cord 25 to function as a transparent planar top heater.
As shown in FIG. 1, the well plate W is fitted into the adapter 9 of the accommodation unit 3, and the upper surface side opening 5 is closed by the lid body 21, thereby forming an almost sealed culture space therein.

上記した構造の収容ユニット３には、ガスセンシング機構２７が取り付けられている。
このガスセンシング機構２７は炭酸ガス（＝二酸化炭素、ＣＯ２）濃度を検出するものである。
符号２９は第１流通チューブを示し、この第１流通チューブ２９の一端側は収容ユニット３の一側面を貫通してその内部に入り込んでいる。第１流通チューブ２９を通って培養空間内から雰囲気ガスがサンプリング用に抜き出される。 A gas sensing mechanism 27 is attached to the housing unit 3 having the above-described structure.
The gas sensing mechanism 27 detects a carbon dioxide (= carbon dioxide, CO 2 ) concentration.
Reference numeral 29 denotes a first flow tube, and one end side of the first flow tube 29 penetrates through one side surface of the storage unit 3 and enters the inside thereof. Atmospheric gas is extracted from the culture space through the first flow tube 29 for sampling.

第１流通チューブ２９の途中には除湿部３１が介装されている。この除湿部３１には、脱水機能が有りしかも二酸化炭素と反応しない代表的な薬剤である塩化カルシウム（＝ＣａＣｌ2）やスルホン酸が収容されている。
また、その下流側には、ガス濃度センサー３３が介装されている。このガス濃度センサー３３は、一例であるが、センサーの検知方式に赤外線を用いたものである。 A dehumidifying unit 31 is interposed in the middle of the first distribution tube 29. The dehumidifying unit 31 contains calcium chloride (= CaCl 2 ) and sulfonic acid, which are representative drugs that have a dehydrating function and do not react with carbon dioxide.
Further, a gas concentration sensor 33 is interposed on the downstream side. The gas concentration sensor 33 is an example, but uses infrared rays as a sensor detection method.

符号３５は三角フラスコを示し、この三角フラスコ３５内には水が適当な高さまで入れられ、ゴム詮３７でその上端開口が閉鎖されている。
上記した第１流通チューブ２９の他端側には「く」の字状に屈曲したガラス管３９が接続されている。このガラス管３９がゴム詮３７を貫通し三角フラスコ３５内に下ろされており、その下端は水中に完全に没している。
また、第１流通チューブ２９には、ガス濃度センサー３３と他端側ガラス管３９との間に、ガス圧送手段としてのポンプ４３が介装されている。 Reference numeral 35 denotes an Erlenmeyer flask. Water is put in the Erlenmeyer flask 35 to an appropriate height, and an upper end opening thereof is closed by a rubber bowl 37.
A glass tube 39 bent in a “<” shape is connected to the other end side of the first flow tube 29 described above. This glass tube 39 penetrates the rubber bowl 37 and is lowered into the Erlenmeyer flask 35, and its lower end is completely submerged in water.
The first flow tube 29 is provided with a pump 43 as gas pressure feeding means between the gas concentration sensor 33 and the other end side glass tube 39.

符号４１は第２流通チューブを示し、この第２流通チューブ４１の一端側は収容ユニット３の一側面を貫通してその内部に入り込んでいる。貫通箇所は、第１流通チューブ２９の貫通箇所とは、収容ユニット３の対角線上にあり互いに離れている。第２流通チューブ４１を通って培養空間に雰囲気ガスが戻される。
また、第２流通チューブ４１の他端側には「く」の字状に屈曲したガラス管４５が接続されている。このガラス管４５がゴム詮３７を貫通し三角フラスコ３５内に下ろされており、その下端は水位よりも上方にある。 Reference numeral 41 denotes a second flow tube, and one end side of the second flow tube 41 penetrates through one side surface of the storage unit 3 and enters the inside thereof. The penetration locations are on the diagonal line of the storage unit 3 and are separated from the penetration location of the first flow tube 29. The atmospheric gas is returned to the culture space through the second flow tube 41.
Further, a glass tube 45 bent in a “<” shape is connected to the other end side of the second flow tube 41. The glass tube 45 passes through the rubber bowl 37 and is lowered into the Erlenmeyer flask 35, and the lower end thereof is above the water level.

ガスセンシング機構２７は上記した構成を採っており、ポンプ４３の作動により、培養空間内の雰囲気ガスは第１流通チューブ２９に引き抜かれ、第２流通チューブ４１を通って培養空間内に戻されるようになっている。
ガス濃度検出手段は、サンプリング手段としての第１流通チューブ２９及びポンプ４３とガス濃度センサー３３によって構成されており、第１流通チューブ２９に引き抜かれた雰囲気ガスは除湿部３１に通されて脱水された後に、ガス濃度センサー３３に通されて炭酸ガスの濃度が検出される。そして、その後には三角フラスコ３５内の水中に通されて加湿化された上で、戻し側流路である第２流通チューブ４１を通って培養空間に戻される。
ガス濃度センサー３３は湿気を嫌うが、予め除湿されているので検出精度に問題はない。また、加湿化してから戻すので、戻しにより培養空間の湿度を下げることもない。 The gas sensing mechanism 27 adopts the above-described configuration, and the operation gas of the pump 43 causes the atmospheric gas in the culture space to be extracted to the first flow tube 29 and returned to the culture space through the second flow tube 41. It has become.
The gas concentration detection means is constituted by a first flow tube 29 as a sampling means, a pump 43 and a gas concentration sensor 33, and the atmospheric gas drawn into the first flow tube 29 is passed through the dehumidifying unit 31 and dehydrated. After that, the gas concentration sensor 33 is passed to detect the concentration of carbon dioxide gas. Then, after passing through the water in the Erlenmeyer flask 35 and being humidified, it is returned to the culture space through the second flow tube 41 which is a return side flow path.
Although the gas concentration sensor 33 dislikes moisture, there is no problem in detection accuracy because it is dehumidified in advance. Moreover, since it returns after humidifying, the humidity of culture | cultivation space is not reduced by return.

図３において符号４７はコントローラを示す。このコントローラ４７はガス濃度センサー３３と、ガス供給用ホース１５に介装されたポンプ４９にそれぞれ接続されており、ガス濃度センサー３３からの濃度情報に基づいて、炭酸ガスの濃度がしきい値より下がった場合にはポンプ４９を作動させて培養空間へのガスの供給を促すようになっている。   In FIG. 3, reference numeral 47 denotes a controller. The controller 47 is connected to a gas concentration sensor 33 and a pump 49 interposed in the gas supply hose 15. Based on the concentration information from the gas concentration sensor 33, the concentration of carbon dioxide gas is greater than the threshold value. When lowered, the pump 49 is operated to encourage the supply of gas to the culture space.

次に、この顕微鏡観察用培養装置１の使用方法について説明する。
この顕微鏡観察用培養装置１の使用方法について説明する。
収容ユニット３には予めアダプター９を装着させてある。このアダプター９にダミー用のウェルプレートＷ（蓋体で閉鎖済み）を嵌め込み、蓋体２１で閉鎖して培養空間を画定した後に、ガス供給用ホース１５から炭酸ガス（ＣＯ２）を供給し、水供給用ホース１３から水槽１１へ水を供給すると共に、電気コード２５を介して透明面状トップヒーターをなす透光部２３の透明導電膜に通電し発熱させる。また、図示は省略しているが、水槽１１の底部側にもヒーターが設置されており、このヒーターの加熱により水槽１１内の水を蒸発させて培養空間内を所望の湿度にする。上記したガス供給用ホース１５や水供給用ホース１３やヒーターもコントローラ４７下の制御下にあり、培養空間が一定のものに維持されることになる。
その状態で、収容ユニット３を顕微鏡ステージＳに設置する。 Next, a method of using the microscope observation culture apparatus 1 will be described.
A method of using the culture apparatus for microscope observation 1 will be described.
An adapter 9 is attached to the storage unit 3 in advance. A dummy well plate W (closed with a lid) is fitted into the adapter 9 and closed with the lid 21 to define a culture space, and then carbon dioxide (CO 2 ) is supplied from the gas supply hose 15, Water is supplied from the water supply hose 13 to the water tank 11, and the transparent conductive film of the translucent portion 23 that forms a transparent planar top heater is energized through the electric cord 25 to generate heat. Although not shown, a heater is also installed on the bottom side of the water tank 11, and the water in the water tank 11 is evaporated by heating the heater to bring the culture space to a desired humidity. The gas supply hose 15, the water supply hose 13 and the heater described above are also under the control of the controller 47, and the culture space is maintained constant.
In this state, the accommodation unit 3 is installed on the microscope stage S.

一方で、顕微鏡観察用のウェルプレートＷを用意しておく。各ウェルｗには培養液Ａや試料Ｂを予め入れておくが、ウェルプレートＷの外縁側の一つのウェルｗは温度検知の専用とし、培養液Ａのみを入れておく。そして、この温度検知専用のウェルｗ内に温度検知用の検知部１７の保護チューブから裸出した先端を差し入れその底面付近まで下ろして培養液Ａに浸した状態とした上で、専用の蓋体でウェルプレートＷの上面側開口を閉鎖すると共に、ウェルプレート内導入手段により検知部１７を固定しておく。
ダミー用のウェルプレートＷを用いての一定時間の予備運転が終了すると、収容ユニット３の蓋体２１を開いてダミー用のウェルプレートＷを取出し、顕微鏡観察用のウェルプレートＷを嵌め込み、検知部ホルダーを介して温度検知用の検知部１７を固定した後に、蓋体２１で収容ユニット３を再び閉鎖する。
これで、培養空間内のウェルプレートＷの各ウェルｗに入れられた試料入りの培養液が培養に適した所定の湿度、温度等の環境に保たれて、観察可能モードに入る。 On the other hand, a well plate W for microscopic observation is prepared. The culture medium A and the sample B are placed in each well w in advance, but one well w on the outer edge side of the well plate W is dedicated to temperature detection, and only the culture medium A is placed. Then, the tip exposed from the protective tube of the temperature detection detector 17 is inserted into the temperature detection well w and lowered to the vicinity of the bottom surface so as to be immersed in the culture medium A, and then a dedicated lid. Then, the opening on the upper surface side of the well plate W is closed, and the detection unit 17 is fixed by the introduction means in the well plate.
When the preliminary operation for a certain time using the dummy well plate W is completed, the lid 21 of the storage unit 3 is opened, the dummy well plate W is taken out, the well plate W for microscopic observation is fitted, and the detection unit After fixing the temperature detection unit 17 via the holder, the housing unit 3 is closed again with the lid 21.
Thus, the culture solution containing the sample put in each well w of the well plate W in the culture space is maintained in an environment such as a predetermined humidity and temperature suitable for culture and enters an observable mode.

顕微鏡観察は、顕微鏡ステージＳを移動させながら複数のウェルｗ内に入った試料Ｂを対物レンズＲに対向させて観察する。
観察可能モード中は、培養空間へのガス供給は間欠的になっており、ガスセンシング機構２７により培養空間の雰囲気ガスの炭酸ガスの組成が逐次検出され、培養空間内のガス組成がしきい値より低くなったときにのみ、ポンプ４９が作動してガス供給用ホース１５からガスが供給されるようになっている。そして、ガス供給中のみ培養空間内にあった雰囲気ガスが自然に外に押し出される。
また、透明導電膜への通電や給水やヒーターによるその水の加温も、コントローラ４７の制御下にあり、培養空間内は一定の湿度、温度に維持されている。 In the microscopic observation, the sample B that has entered the plurality of wells w is moved to face the objective lens R while the microscope stage S is moved.
During the observable mode, the gas supply to the culture space is intermittent, and the gas sensing mechanism 27 sequentially detects the carbon dioxide composition of the atmospheric gas in the culture space, and the gas composition in the culture space is the threshold value. Only when the pressure becomes lower, the pump 49 is operated to supply gas from the gas supply hose 15. And the atmospheric gas which existed in the culture space only during gas supply is naturally pushed out.
In addition, energization of the transparent conductive film, water supply, and heating of the water by a heater are also under the control of the controller 47, and the culture space is maintained at a constant humidity and temperature.

以上、本発明の実施の形態について詳述してきたが、具体的構成は、これらの実施の形態に限られるものではなく、本発明の要旨を逸脱しない範囲における設計の変更などがあっても発明に含まれる。
例えば、炭酸ガスの濃度を検出対象とする場合には、ガス濃度センサーを湿気に耐えられるものに代替できれば、収容ユニットを大きくしたり、ガス濃度センサーを小型化したりすることで、収容ユニット内に組み込むように構成してもよい。炭酸ガス以外の酸素や窒素の濃度を検出対象とする場合には、湿気に対する配慮は必要無いので、組み込みも一層容易になる。
また、雰囲気ガスのサンプリング用の抜き出しを間欠的に行うのであれば、少量で済むので培養空間に戻さないように構成してもよい。 As described above, the embodiments of the present invention have been described in detail. However, the specific configuration is not limited to these embodiments, and the invention can be changed even if there is a design change without departing from the gist of the present invention. include.
For example, in the case where the concentration of carbon dioxide gas is to be detected, if the gas concentration sensor can be replaced with one that can withstand moisture, the housing unit can be made larger or the gas concentration sensor can be made smaller, so that You may comprise so that it may incorporate. In the case where the concentration of oxygen or nitrogen other than carbon dioxide gas is to be detected, consideration for moisture is not necessary, so that the incorporation becomes easier.
Moreover, if sampling for sampling of atmospheric gas is performed intermittently, a small amount may be used, so that it may not be returned to the culture space.

本発明の顕微鏡観察用培養装置は、顕微鏡の附属品として利用できる。   The culture apparatus for microscopic observation of the present invention can be used as an accessory of a microscope.

１…顕微鏡観察用培養装置 ３…収容ユニット ５…上面側開口
７…下面側開口 ９…アダプター １１…水槽
１３…水供給用ホース １５…ガス供給用ホース １７…検知部
１９…灌流用ホース用の取付用ホルダー ２１…蓋体
２３…透光部 ２５…電気コード
２７…ガスセンシング機構 ２９…第１流通チューブ
３１…除湿部 ３３…ガス濃度センサー ３５…三角フラスコ
３７…ゴム詮 ３９…ガラス管 ４１…第２流通チューブ
４３…（ガスセンシング用）ポンプ ４５…ガラス管
４７…コントローラ ４９…（ガス供給用）ポンプ
Ｗ…ウェルプレート ｗ…ウェル Ａ…培養液 Ｂ…試料
Ｓ…顕微鏡ステージ Ｒ…対物レンズ DESCRIPTION OF SYMBOLS 1 ... Microscopic observation culture apparatus 3 ... Accommodating unit 5 ... Upper surface side opening 7 ... Lower surface side opening 9 ... Adapter 11 ... Water tank 13 ... Water supply hose 15 ... Gas supply hose 17 ... Detection part 19 ... For perfusion hose Holder 21 ... Lid 23 ... Translucent part 25 ... Electric cord 27 ... Gas sensing mechanism 29 ... First flow tube 31 ... Dehumidifying part 33 ... Gas concentration sensor 35 ... Erlenmeyer flask 37 ... Rubber bowl 39 ... Glass tube 41 ... Second flow tube 43 ... (for gas sensing) 45 ... Glass tube 47 ... Controller 49 ... (for gas supply) Pump W ... Well plate w ... Well A ... Culture solution B ... Sample S ... Microscope stage R ... Objective lens

Claims (4)

培養液と試料が入った容器を収容する収容ユニットと、前記収容ユニットの上面側開口を閉鎖する蓋体とを備え、顕微鏡のステージに設置して前記試料を顕微鏡観察するのに用いる顕微鏡観察用培養装置において、
前記収容ユニットと前記蓋体との間に形成される培養空間内の雰囲気ガス中の所望のガス成分の濃度を検出するガス濃度検出手段と、前記ガス濃度検出手段からの濃度情報に基づいて前記培養空間内へガスを供給するガス供給手段とを備えることを特徴とする顕微鏡観察用培養装置。 A microscope unit for accommodating a container containing a culture solution and a sample, and a lid for closing an opening on the upper surface side of the container unit, which is placed on a microscope stage and used for observing the sample with a microscope In the culture device,
Based on the concentration information from the gas concentration detection means, gas concentration detection means for detecting the concentration of a desired gas component in the atmospheric gas in the culture space formed between the storage unit and the lid, A culture apparatus for microscopic observation, comprising gas supply means for supplying gas into the culture space. 請求項１に記載した顕微鏡観察用培養装置において、
ガス濃度検出手段は、培養空間から雰囲気ガスをサンプリング用に抜き出すサンプリング手段を有し、培養空間外に取出したサンプリングガスで所望のガス成分の濃度を検出することを特徴とする顕微鏡観察用培養装置。 In the culture apparatus for microscope observation according to claim 1,
The gas concentration detection means has sampling means for extracting an atmospheric gas from the culture space for sampling, and detects the concentration of a desired gas component with the sampling gas taken out of the culture space. . 請求項１または２に記載したガス濃度検出手段は、培養空間から雰囲気ガスをサンプリング用に抜き出し、所望のガス成分の濃度を検出した後に、前記培養空間に戻す戻し手段を有することを特徴とする顕微鏡観察用培養装置。   The gas concentration detection means according to claim 1 or 2 further comprises return means for extracting the atmospheric gas from the culture space for sampling, detecting the concentration of a desired gas component, and returning it to the culture space. Microscope observation culture device. 請求項２または３に記載した顕微鏡観察用培養装置において、
所望のガス成分を炭酸ガスとし、サンプリング側流路に除湿手段を介装し、戻し手段が有る場合にはその戻し側流路に加湿手段を介装したことを特徴とする顕微鏡観察用培養装置。 The culture apparatus for microscopic observation according to claim 2 or 3,
Microscope observation culture apparatus characterized in that carbon dioxide gas is used as a desired gas component, a dehumidifying means is interposed in the sampling-side flow path, and if there is a return means, a humidifying means is interposed in the return-side flow path. .
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