JP2012149977A - 分析装置及び分析方法 - Google Patents

Abstract

【課題】総Ｈｂ濃度の測定及びＨｂＡ１ｃ濃度の測定において、そのコストを下げ、かつ、処理速度を上げることが可能な分析装置及び分析方法を提供する。
【解決手段】ヘモグロビンＡ１ｃの濃度を測定するための試薬を試料に分注することにより、反応液を生成する分注手段と、前記反応液に含まれる酸素化ヘモグロビン及び還元ヘモグロビンの各吸光度を測定する測光ユニットと、前記各吸光度に基づいてヘモグロビンの濃度を算出する演算手段と、を有する。
【選択図】図２

Description

本発明の実施形態は、試料に試薬を混合することにより反応液を生成し、当該反応液に含まれる成分の濃度を測定する分析装置及び分析方法に関する。

ヘモグロビン（Ｈｂ）は赤血球中に含まれ、酸素を運搬する呼吸色素である。ヘモグロビンの中で、グルコースが結合したヘモグロビンＡ１ｃ（ＨｂＡ１ｃ）は糖化ヘモグロビンとも呼ばれる。ＨｂＡ１ｃの生体内での寿命は、１００〜１２０日といわれ、過去１から２か月の平均血糖を反映している。

ＨｂＡ１ｃの測定においては、総ヘモグロビン濃度に対するＨｂＡ１ｃ濃度の比率であるＨｂＡ１ｃ含有比（％）を求める。なお、以下の説明で、総ヘモグロビン濃度を、総Ｈｂ濃度または単にＨｂ濃度という場合がある。ＨｂＡ１ｃの含有比は、血中グルコースの平均濃度に依存し、血糖値のように食前・食後糖の日内変動がなく被検者の血糖状態を長期的に知る重要なマーカーであり、糖尿病診断には欠かせない測定項目といえる。ＨｂＡ１ｃの含有比が高値であって、高血糖である場合は糖尿病の疑いがあるといわれている。

わが国において、糖尿病患者数が年々増加しており、糖尿病を含む生活習慣病関連の疾患は、国民医療負担のうちの多くを占めるに至り、特定健診においては、ＨｂＡ１ｃ測定が必須項目として追加された。そのため、ＨｂＡ１ｃ測定にかかるコストを下げて、医療負担をできるだけ少なくし、かつ、処理速度を上げて、できるだけ多数の検体を処理したいという要請がある。

ＨｂＡ１ｃの測定には自動分析装置が用いられる。自動分析装置は、各測定項目（ＨｂＡ１ｃの測定項目の他、例えば、肝機能や腎機能などの血液生化学検査項目を含む）を測定する。自動分析装置は、各測定項目に対して何本かの反応容器を割り当てて、各反応容器に対し、試料及び試薬の分注工程、攪拌工程、測定工程、洗浄・乾燥工程の各処理を行う。自動分析装置は、その規模（所有する反応容器など）にもよるが、数人から十数人程度の数検体を一度に処理する。

分注工程では各反応容器に試料及び試薬を分注することにより反応液を生成する。攪拌工程では、生成された反応液を攪拌する。測定工程では、反応液に対する特定波長の吸光度を測定し、予め作成しておいた検量線を用いて、測定項目に対する成分濃度を測定する。洗浄・乾燥工程は反応容器を洗浄し、乾燥する。この洗浄・乾燥工程がその回の処理の最終段階であり、その洗浄・乾燥工程後に、測定すべき検体が残っていれば、それらの検体を次回の処理で測定する。

従来の自動分析では、総Ｈｂ濃度の測定とＨｂＡ１ｃ濃度の測定とを別々に行うのが一般的であった。すなわち、総Ｈｂ濃度及びＨｂＡ１ｃ濃度の両方の測定項目に対して所定本数の反応容器をそれぞれ割り当てる。

これに対し、総Ｈｂ濃度の測定とＨｂＡ１ｃ濃度の測定とを同時に行う技術がある（特許文献１）。

すなわち、光透過性支持体の上に試薬層、基質層が積層された乾式分析要素が用いられる。試薬層は、水浸透性層で構成されている。基質層は、水浸透性層で構成され、酵素標識抗体を含む。

総Ｈｂの測定は、基質層に溜められた総Ｈｂをヘモグロビン吸収波長で比色測定することにより行われる。ＨｂＡ１ｃは、基質層内に含まれる酵素標識抗体と反応するため、ＨｂＡ１ｃの濃度と反比例する拡散性生成物が試薬層に拡散・移行する。基質層から拡散・移行していく拡散性生成物は検出試薬組成物によって発色・変色が生じる。この発色・変色を測光し、予め作成しておいた検量線を用いて、拡散性生成物の濃度を求め、その拡散性生成物の濃度とは反比例するＨｂＡ１ｃの濃度を求める。

特開２００６−２６６８１１号公報

しかしながら、総Ｈｂ濃度の測定とＨｂＡ１ｃ濃度の測定とを別々に行う従来の自動分析装置では、総Ｈｂ濃度及びＨｂＡ１ｃ濃度の両方の測定項目に対して数本の反応容器をそれぞれ割り当てるため、その分だけ、他の測定項目に対して割り当てられる反応容器の数が少なくなり、その結果、一度に処理すべき検体数が少なくなるので、処理速度を向上させる際の支障となる。また、総Ｈｂ濃度を測定するための試薬とＨｂＡ１ｃ濃度を測定するための試薬とをそれぞれ使用するため、コストが嵩むという問題点があった。

また、総Ｈｂ濃度の測定とＨｂＡ１ｃ濃度の測定とを同時に行う前述の公報に記載された技術では、自動分析装置とは別に例えば前処理装置が必要になるという新たな課題がある。

この実施形態は、前述の問題を解決するものであり、総Ｈｂ濃度の測定及びＨｂＡ１ｃ濃度の測定において、そのコストを下げ、かつ、処理速度を上げることが可能な分析装置及び分析方法を提供することを目的とする。

上記課題を解決するために、一の実施形態の分析装置は、ヘモグロビンＡ１ｃの濃度を測定するための試薬を試料に分注することにより、反応液を生成する分注手段と、前記反応液に含まれる酸素化ヘモグロビン及び還元ヘモグロビンの各吸光度を測定する測光ユニットと、前記各吸光度に基づいてヘモグロビンの濃度を算出する演算手段と、を有することを特徴とする。
また、上記課題を解決するために、一の実施形態の分析方法は、ヘモグロビンＡ１ｃの濃度を測定するための試薬を試料に分注することにより、反応液を生成し、前記反応液に含まれる酸素化ヘモグロビン及び還元ヘモグロビンの各吸光度を測定し、前記各吸光度に基づいてヘモグロビンの濃度を算出することを特徴とする。

この実施形態に係る自動分析装置の内部を示す斜視図。 自動分析装置において、ＨｂＡ１ｃの測定を開始してからその測定を終了するまでの処理を示すフローチャート。 総Ｈｂの測定を開始してからその測定を終了するまでの処理を示すフローチャート。 酸素化ヘモグロビン、還元ヘモグロビン、及び、濁度の各吸収スペクトルを示す典型的なグラフ。

この自動分析装置の実施形態について各図を参照して説明する。

先ず、自動分析装置１００の基本構成について図１を参照して説明する。図１は、自動分析装置１００の内部を示す斜視図である。

この自動分析装置１００は、試料及び試薬をそれぞれ分注して攪拌することにより反応液を生成し、反応液中の成分を測定するものである。試料の一例としては、溶血検体が用いられる。また、ＨｂＡ１ｃ濃度の測定には、第１試薬の一例として、ＨｂＡ１ｃ血清液が用いられ、第２試薬の一例として、ポリハプテン溶液が用いられる。

図１に示す自動分析装置１００は、試薬ラック１、第１試薬庫２、第２試薬庫３、試薬容器４、反応庫５、ディスクサンプラ６、試料分注プローブ７、第１試薬分注プローブ８、第２試薬分注プローブ９の各アーム１０、攪拌ユニット１１、測光ユニット１２、洗浄ユニット１３、分析部１４、データ処理部１５、駆動部１６、制御部１７、反応容器５１、及び、試料容器６１を有する。試料分注プローブ７、第１試薬分注プローブ８、第２試薬分注プローブ９、及びこれらの各アーム１０がこの実施形態の分注手段の一例である。

試料は、試料容器６１に収納されている。試料容器６１は、回転可能な円形状のディスクサンプラ６に載置される。

ＨｂＡ１ｃ濃度を測定するための第１試薬が収容された試薬容器４は、第１試薬庫２に載置されている。また、ＨｂＡ１ｃ濃度を測定するための第２試薬が収納された試薬容器４は、第２試薬庫３に載置される。第１試薬庫２及び第２試薬庫３には、回動可能な円形状の試薬ラック１が収納されている。各試薬容器４は、この試薬ラック１に環状に並んで収納されている。

分析部１４は、測光ユニット１２を含み、試料と試薬との反応液を分析して、測定結果データを出力する。データ処理部１５は、分析部１４から出力された測定結果データを演算処理し、演算した結果を備え付けのモニタやプリンタに出力する。駆動部１６は、モータやギア等を含み構成され、駆動力を発生して分析部１４の各ユニットに伝達させることで、分析部１４の各ユニットを駆動させる。制御部１７は、駆動部１６に指示することで、分析部１４が有する各ユニットの駆動を制御する。各ユニットとしては、第１試薬庫２、第２試薬庫３、アーム１０を含む。

次に、自動分析装置の処理について図２を参照して説明する。図２は、自動分析装置において、ＨｂＡ１ｃの測定を開始してからその測定を終了するまでの処理を示すフローチャートである。各回ごとに、一度に各処理（試料及び試薬の分注工程、攪拌工程、測定工程、洗浄・乾燥工程）を行う。

（Ｓ１０１：ＨｂＡ１ｃ測定開始）
各回の処理を開始するにあたり、予め、ＨｂＡ１ｃ濃度を測定するための反応容器５１として、所定本数が割り当てられる。この実施形態における自動分析の特徴は、同じ反応容器５１を用いて、ＨｂＡ１ｃ濃度の測定及び総Ｈｂ濃度の側定を行うことにある。

（Ｓ１０２：試料分注）
各回の処理では、先ず、試料（溶血検体）の分注を行う。試料分注プローブ７は、ディスクサンプラ６の回動によって規定の吸引位置に搬送された試料容器６１から試料を吸引し、吐出位置に搬送された反応容器５１に試料を吐出する。

（Ｓ１０３：第１試薬分注）
次に、試薬の分注を行う。第１試薬分注プローブ８は、第１試薬庫２の試薬ラック１の回動によって規定の吸引位置に搬送された試薬容器４から第１試薬（ＨｂＡ１ｃ血清液）を吸引し、規定の吐出位置に搬送された反応容器５１に第１試薬を吐出する。

（攪拌）
試料及び第１試薬が分注された反応容器５１は、攪拌位置に搬送される。攪拌ユニット１１は、１サイクル毎に、攪拌位置に停止した反応容器５１内における試料及び第１試薬を攪拌する。攪拌することにより反応液を生成する。ここで、サイクルとは、反応容器５１が分注位置、攪拌位置、測定位置、洗浄・乾燥位置の各位置を通って元の分注位置に戻るまでの１周分をいう。

（Ｓ１０４：総Ｈｂ濃度測定）
第１試薬分注から所定時間を経過したとき（ステップＳ２０１：Ｙｅｓ）、総Ｈｂ濃度測定が行われる。所定時間を経過していないとき（ステップＳ２０１：Ｎｏ）、次のサイクルで、攪拌位置に停止した反応容器５１内における試料及び第１試薬を攪拌する。例えば、第１試薬分注から約５分後に第２試薬分注が行われる。例えば、総Ｈｂ濃度測定は、第１試薬分注から約３分経過後であって、第２試薬分注（第１試薬分注から約５分経過後に行われる）前に行われる。

次に、総Ｈｂ濃度の測定について図３及び図４を参照して説明する。図３は総Ｈｂの測定を開始してからその測定を終了するまでの処理を示すフローチャート、図４は、酸素化ヘモグロビン、還元ヘモグロビン、及び、濁度の各吸収スペクトルを示す典型的なグラフである。

（Ｓ２０２：指定波長を用いた吸光度算出）
試料及び第１試薬分注を攪拌することにより生成され、第１試薬分注から所定時間を経過した反応液が入った反応容器５１が測定位置に搬送されると、測光ユニット１２は、指定波長により、酸素と結合したヘモグロビンである酸素化ヘモグロビン（酸素化Ｈｂ）、酸素を放出した後のヘモグロビンである還元ヘモグロビン（還元Ｈｂ）、反応液の濁りの度合いである濁度の各吸光度を測定する。

ここで、反応液とは、ＨｂＡ１ｃ濃度の測定に用いられる第１試薬（ＨｂＡ１ｃ血清液）及び試料を攪拌することにより生成されたものである。すなわち、ＨｂＡ１ｃ濃度測定に用いられる第１試薬を、総Ｈｂ濃度測定をするための試薬としても用いる。

吸光度を測定するとき用いられる指定波長について図４を参照して説明する。図４から、指定波長には、例えば、酸素化Ｈｂ、還元Ｈｂの場合、それぞれの吸光スペクトルで吸収が顕著に現れる（吸光度が高い）波長を用いる。吸収が顕著に現れる箇所が２箇所ある場合はその前後の吸光度差が少ない方の波長を用いる。濁度の場合は、酸素化Ｈｂ、還元Ｈｂの吸収がほとんどない（吸光度が低い）箇所で、濁度のみ吸収がみられる（吸光度が高い）波長が用いられる。

すなわち、酸素化Ｈｂの吸光度が高く、前後の吸光度差が少ない波長の一つは５４０ｎｍであることがわかるので、指定波長５４０ｎｍ（λ１）を用いて、反応液の酸素化Ｈｂ測定用吸光度Ａ１を求める。また、還元Ｈｂの吸光度が、高い波長の一つは５６０ｎｍであることがわかるので、指定波長５６０ｎｍ（λ２）を用いて、反応液の還元Ｈｂ測定用吸光度Ａ２を求める。さらに、酸素化Ｈｂ、還元Ｈｂの吸光度がほとんどない箇所で、濁度の吸光度が高い波長の一つは６３０ｎｍであることがわかるので、指定波長６３０ｎｍ（λ３）を用いて、反応液の濁度測定用吸光度Ａ３を求める。

酸素化Ｈｂ測定用吸光度Ａ１、還元Ｈｂ測定用吸光度Ａ２、濁度測定用吸光度Ａ３を測定した後、その測定結果データをデータ処理部１５に出力する。ここで、データ処理部１５がこの実施形態の演算手段である。
演算に使用される係数ｘ１、ｘ２、ｘ３および係数ｙ１、ｙ２、ｙ３は以下の関係式に基づいて算出される。
成分ｘ（酸素化Ｈｂ）の濃度をＣｘ、成分ｘのλ１、λ２での特有係数をｅｘ１、ｅｘ２とした場合、および、成分ｙ（還元Ｈｂ）の濃度をＣｙ、成分ｙのλ１、λ２での特有係数をｅｙ１、ｅｙ２とした場合、また成分ｚ（濁度）の濃度をＣｚ、成分ｚのλ１、λ２、λ３での特有係数をｅｚ１、ｅｚ２、ｅｚ３とした場合、指定波長λ１で測定された酸素化Ｈｂ測定用吸光度Ａ１は、下記のように表される。
Ａ１＝酸素化Ｈｂの吸光度（ｅｘ１＊Ｃｘ）＋還元Ｈｂの吸光度（ｅｙ１＊Ｃｙ）＋濁度の吸光度（ｅｚ１＊Ｃｚ）
また、指定波長λ２で測定された還元Ｈｂ測定用吸光度Ａ２は、下記のように表される。
Ａ２＝酸素化Ｈｂの吸光度（ｅｘ２＊Ｃｘ）＋還元Ｈｂの吸光度（ｅｙ２＊Ｃｙ）＋濁度の吸光度（ｅｚ２＊Ｃｚ）
さらに、指定波長λ３で測定された濁度測定用吸光度Ａ３は、下記のように表される。
Ａ３＝濁度の吸光度（ｅｚ３＊Ｃｚ）
上記測定吸光度Ａ１、Ａ２、Ａ３と各成文Ｃｘ、Ｃｙ、Ｃｚの関係式から係数ｘ１、ｘ２、ｘ３および係数ｙ１、ｙ２、ｙ３が算出される。

（Ｓ２０３：総Ｈｂ濃度演算）
データ処理部１５は、Ｈｂ濃度を計算するためのプログラムと、それを実行するＣＰＵで構成される。

データ処理部１５は、上記プログラムに従って以下の式（１）及び吸光度Ａ１、Ａ２、Ａ３、係数ｘ１、ｘ２、ｘ３に基づいて、酸素化Ｈｂ濃度Ｃｘを算出し、また、上記プログラムに従って以下の式（２）及び吸光度Ａ１、Ａ２、Ａ３、係数ｙ１、ｙ２、ｙ３に基づいて、還元Ｈｂ濃度Ｃｙを算出し、上記プログラムに従って以下の式（３）、先に算出された酸素化Ｈｂ濃度Ｃｘ、還元Ｈｂ濃度Ｃｙに基づいて、総Ｈｂ濃度を算出する。

酸素化Ｈｂ濃度Ｃｘは次の式により求めることができる。
Ｃｘ＝ｘ１＊Ａ１＋ｘ２＊Ａ２＋ｘ３＊Ａ３ （１）
ここで、ｘ１、ｘ２、ｘ３、は、酸素化Ｈｂの濃度を算出するための係数として、指定波長に対応してそれぞれ定められる。各係数ｘ１、ｘ２、ｘ３、は、指定波長を用いて測定された吸光度と濃度との関係を表す検量線に基づいて、経験則により求められる。

また、還元Ｈｂ濃度Ｃｙは、次の式により求めることができる。
Ｃｙ＝ｙ１＊Ａ１＋ｙ２＊Ａ２＋ｙ３＊Ａ３ （２）
ここで、ｙ１、ｙ２、ｙ３、は、還元Ｈｂの濃度を算出するための係数として、指定波長に対応してそれぞれ予め定められる。各係数ｙ１、ｙ２、ｙ３、は、指定波長を用いて測定された吸光度と濃度との関係を表す検量線に基づいて、経験則により求められる。

さらに、Ｈｂ濃度は、次の式により求めることができる。
Ｈｂ濃度＝Ｃｘ＋Ｃｙ （３）

データ処理部１５には、式（１）、（２）、（３）及び、係数ｘ１、ｘ２、ｘ３、ｙ１、ｙ２、ｙ３が記憶されている。ここで、データ処理部１５が、本実施形態の第１記憶手段及び第２記憶手段である。

以上説明したように、ＨｂＡ１ｃ濃度を測定する処理の中で、総Ｈｂ濃度を求めることができる。また、ＨｂＡ１ｃ濃度を測定するための第１試薬及び上記式（１）〜（３）に基づいて、Ｈｂ濃度を求めることが可能となる。

（Ｓ１０５：第２試薬分注）
第２試薬分注プローブ９は、第２試薬庫３の試薬ラック１の回動によって規定の吸引位置に搬送された試薬容器４から第２試薬（ポリハプテン溶液）を吸引し、規定の吐出位置に搬送された反応容器５１（試料及び第１試薬を攪拌することにより生成された反応液が入っている）に第２試薬を吐出する。

（攪拌）
第２試薬がさらに分注された反応容器５１は、攪拌位置に搬送される。攪拌ユニット１１は、１サイクル毎に、攪拌位置に停止した反応容器５１内における反応液、及び、第２試薬（ポリハプテン溶液）を攪拌する。それにより、新たな反応液を生成する。

（Ｓ１０６：ＨｂＡ１ｃ濃度の測定）
次に、反応容器５１は、測定位置に搬送される。測光ユニット１２は、生成された新たな反応液を測定する。測光ユニット１２は、新たな反応液の吸光度を測定した後、その測定結果データをデータ処理部１５に出力する。データ処理部１５は、吸光度に基づいて、予め作成された検量線に基づいて、ＨｂＡ１ｃ濃度を求める。さらに、次の式からＨｂＡ１ｃの含有比（％）を求める。
ＨｂＡ１ｃ含有比（％）＝ＨｂＡ１ｃ濃度／総Ｈｂ濃度 （４）
データ処理部１５は、プログラムを読み出し、先に算出されたＨｂＡ１ｃ濃度、総Ｈｂ濃度を元に、ＨｂＡ１ｃ含有比を算出する。なお、ＨｂＡ１ｃ含有比を計算するためのプログラムは、例えば、データ処理部１５に記憶されている。

（Ｓ１０６：測定結果出力）
データ処理部１５は、求めたＨｂＡ１ｃ含有比（％）を制御部１７に出力する。制御部１７は、図示省略した表示部にＨｂＡ１ｃ含有比（％）を表示させる。

（洗浄）
さらに、反応容器５１は、洗浄・乾燥位置に搬送される。洗浄ユニット１３は、洗浄・乾燥位置に停止した反応容器５１内の測定を終えた反応液を吸引すると共に、反応容器５１内を洗浄・乾燥する。洗浄・乾燥によりこの回の処理が終了し、次の回の処理に備える。

以上説明した実施形態によれば、総Ｈｂ濃度を測定するとき、ＨｂＡ１ｃ濃度の測定に用いる試薬を用い、総Ｈｂ濃度を測定するための試薬をわざわざ用いる必要がないので、コストを下げることができる。また、ＨｂＡ１ｃ濃度及び総Ｈｂ濃度の各測定を同じ反応容器５１を用いて行うようにしたので、処理速度を上げることが可能となる。

なお、前記実施形態では、酸素化Ｈｂ濃度Ｃｘ及び還元Ｈｂ濃度Ｃｙを求める式に、濁度の吸光度を含ませたが、例えば、反応液の濁りの度合いが少ないとき、濁度の吸光度を含ませずに、酸素化Ｈｂ濃度Ｃｘ及び還元Ｈｂ濃度Ｃｙをそれぞれ求めても良い。

また、実施形態は、例として提示したものであり、発明の範囲を限定することは意図していない。これら新規な実施形態は、その他の様々な形態で実施されることが可能であり、発明の要旨を逸脱しない範囲で、種々の省略、書き換え、変更を行うことができる。実施形態やその変形は、発明の範囲や要旨に含まれるととともに、特許請求の範囲に記載された発明とその均等の範囲に含まれる。

１ 試薬ラック ２ 第１試薬庫 ３ 第２試薬庫 ４ 試薬容器 ５ 反応庫
６ ディスクサンプラ ７ 試料分注プローブ ８ 第１試薬分注プローブ
９ 第２試薬分注プローブ １０ アーム １１ 攪拌ユニット
１２ 測光ユニット １３ 洗浄ユニット １４ 分析部 １５ データ処理部
１６ 駆動部 １７ 制御部 ５１ 反応容器 ６１ 試料容器

Claims (6)

1. ヘモグロビンＡ１ｃの濃度を測定するための試薬を試料に分注することにより、反応液を生成する分注手段と、
   前記反応液に含まれる酸素化ヘモグロビン及び還元ヘモグロビンの各吸光度を測定する測光ユニットと、
   前記各吸光度に基づいてヘモグロビンの濃度を算出する演算手段と、
   を有する
   ことを特徴とする分析装置。
2. 前記分注手段は、ヘモグロビンＡ１ｃの濃度を測定するための種類が異なる第１試薬及び第２試薬を時間の間隔をあけて、試料に分注することにより、前記反応液を生成し、
   前記測光ユニットは、前記第１試薬の分注後、前記第２試薬の分注前の反応液に含まれる酸素化ヘモグロビン及び還元ヘモグロビンの各吸光度を測定し、
   前記演算手段は、前記各吸光度を基にヘモグロビンの濃度を算出する
   ことを特徴とする請求項１に記載の分析装置。
3. 前記各吸光度には、前記反応液の濁りの度合いである濁度の吸光度を含むことを特徴とする請求項１または請求項２に記載の分析装置。
4. 酸素化ヘモグロビンの濃度を算出するための係数として、特定波長に対応して予め定められ、酸素化ヘモグロビン、還元ヘモグロビン、濁度にそれぞれ関係する係数ｘ１、ｘ２、ｘ３を記憶する第１記憶手段と、
   還元ヘモグロビンの濃度を算出するための係数として、特定波長に対応して予め定められ、酸素化ヘモグロビン、還元ヘモグロビン、濁度にそれぞれ関係する係数ｙ１、ｙ２、ｙ３を記憶する第２記憶手段と、
   をさらに備え、
   前記分注手段は、ヘモグロビンＡ１ｃの濃度を測定するための試薬を試料に分注することにより反応液を生成し、
   前記測光ユニットは、前記特定波長により、酸素化ヘモグロビン、還元ヘモグロビン、前記反応液の濁りの度合いである濁度の各吸光度Ａ１、Ａ２、Ａ３をそれぞれ測定し、
   前記演算手段は、前記第１記憶手段から読み出された前記ｘ１、ｘ２、ｘ３、前記第１記憶手段から読み出された前記ｙ１、ｙ２、ｙ３、及び前記吸光度Ａ１、Ａ２、Ａ３を、
   次の式に代入することにより、
   ヘモグロビンの濃度＝（ｘ１＋ｙ１）＊Ａ１＋（ｘ２＋ｙ２）＊Ａ２＋（ｘ３＋ｙ３）＊Ａ３
   ヘモグロビンの濃度を計算する
   ことを特徴とする請求項１から請求項３のいずれかに記載の分析装置。
5. 前記係数は、前記試薬に対応して定められることを特徴とする請求項４に記載の分析装置。
6. ヘモグロビンＡ１ｃの濃度を測定するための試薬を試料に分注することにより、反応液を生成し、
   前記反応液に含まれる酸素化ヘモグロビン及び還元ヘモグロビンの各吸光度を測定し、
   前記各吸光度に基づいてヘモグロビンの濃度を算出する
   ことを特徴とする分析方法。

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