JP2011502266A - Fms治療に対する応答を評価するバイオマーカー - Google Patents
Fms治療に対する応答を評価するバイオマーカー Download PDFInfo
- Publication number
- JP2011502266A JP2011502266A JP2010532237A JP2010532237A JP2011502266A JP 2011502266 A JP2011502266 A JP 2011502266A JP 2010532237 A JP2010532237 A JP 2010532237A JP 2010532237 A JP2010532237 A JP 2010532237A JP 2011502266 A JP2011502266 A JP 2011502266A
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- csf
- drug
- fms
- compound
- treatment
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Withdrawn
Links
- GDDAPTJYHSCJHL-UHFFFAOYSA-N Cc1ncc(C2=C(C3=CCCCC3)c3cc(C#N)ccc3NC2=O)[nH]1 Chemical compound Cc1ncc(C2=C(C3=CCCCC3)c3cc(C#N)ccc3NC2=O)[nH]1 GDDAPTJYHSCJHL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/5005—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving human or animal cells
- G01N33/5008—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving human or animal cells for testing or evaluating the effect of chemical or biological compounds, e.g. drugs, cosmetics
- G01N33/5082—Supracellular entities, e.g. tissue, organisms
- G01N33/5088—Supracellular entities, e.g. tissue, organisms of vertebrates
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/5005—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving human or animal cells
- G01N33/5008—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving human or animal cells for testing or evaluating the effect of chemical or biological compounds, e.g. drugs, cosmetics
- G01N33/5011—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving human or animal cells for testing or evaluating the effect of chemical or biological compounds, e.g. drugs, cosmetics for testing antineoplastic activity
Abstract
FMSを阻害する薬物による治療と相関するバイオマーカーを開示する。該化合物に対する応答を評価するための有用性をこのバイオマーカーが有することが示された。このバイオマーカーの血漿レベルがFMS阻害化合物による治療の際に上昇したことは、このバイオマーカーがFMS活性に関与することを示している。
【選択図】図1
【選択図】図1
Description
(関連出願の相互参照)
本出願は、2007年10月31日に出願された出願第60/984,122号に対する優先権を主張し、その出願の全文は参照することにより本明細書に組み入れられる。
本出願は、2007年10月31日に出願された出願第60/984,122号に対する優先権を主張し、その出願の全文は参照することにより本明細書に組み入れられる。
(発明の分野)
本発明は、概して、薬力学の分野に関するものであり、より具体的には、癌患者を含む患者における薬物感度を特定するための材料、方法及び手順に関する。本発明は、分子レベルでの患者の応答に基づいて病気及び障害を治療するための助けとなる。
本発明は、概して、薬力学の分野に関するものであり、より具体的には、癌患者を含む患者における薬物感度を特定するための材料、方法及び手順に関する。本発明は、分子レベルでの患者の応答に基づいて病気及び障害を治療するための助けとなる。
FMSの活性を低減又は阻止する多くの薬物が現在開発されつつある。例えば、米国公開特許第2006−0148812−A1号及び同第2006−0189623−A1号が参照され、その出願の全文は参照により本明細書に組み込まれる。予測マーカーは、医療でそのような薬物に対する患者の応答を正確に予知するために必要である。そのようなマーカーは、一人一人の患者に合った個別の治療を容易にするであろう。
本発明は、FMSを低減又は阻止する薬物での治療又は療法に対する患者の感度をよりよく予測することができるバイオマーカーの同定を目的とする。このマーカーを薬物治療への患者の応答と関連づけることは、応答しない患者のための薬物開発の新しい機会をもたらすことを可能にし、また、その効能に対する確信が強まることにより、1つの薬物の適応症をその他の治療選択肢から区別することを可能にする。更に、薬物又は組み合わせ療法に良好に応答する可能性の高い患者を予め選択することで、治験に必要な患者数を減らすこと、又は、試験開発プログラムを完了するために必要な時間を短縮することが可能である(M.コケット(M. Cockett)ら、2000年、「現代のバイオテクノロジーの見解(Current Opinion in Biotechnology)」11:602〜609)。
研究の主目標は、医療で与えられた患者の薬物応答を正確に予測するマーカーを同定することである。そのような個別の評価は、個人に合った治療を大いに促進することができる。このような性質のアプローチは、一般に使用される薬物が、多くの患者にとって効果がなく、また副作用が頻繁な、癌の治療及び療法で特に必要とされる。薬物応答は標的細胞に固有の特性及び宿主の代謝特性の両方を反映するため、患者の薬物感度を予測する能力は、特に困難である。
当該技術では、病気及び障害、特に癌を治療するために、分子レベルでの患者応答に基づき、患者の薬物感度を特定するための材料、方法、及び手順を必要としている。本発明は、FMSを低減又は阻止する薬物と薬物感度を相関するバイオマーカーの同定に関する。マーカーを同定する本明細書の説明は、FMSを低減又は阻止する薬物への応答を予測するためにこのマーカーが使用される臨床状況もまた広く含むことができる。
バルトッチ(Bartocci)ら(Proc.Natl.Acad.Sci.USA,84:6179〜6183(1987年))は、肝臓マクロファージによってマウスの循環CSF−1がクリアされたことを開示している。このクリアランスは、明らかに、CSF−1受容体媒体エンドサイトーシス及び細胞内破壊による。
カールバーグ(Carlberg)ら(「EMBO Journal」、10(4):877〜883(1991年))は、CSF−1の結合誘導による内在化及び受容体の劣化を開示しており、キナーゼに欠陥のある変異受容体の劣化率は低減されたが除去はされなかった。
シューミン(Xu-Ming)ら(「Blood」、99(1):111〜120(2002年))は、マウスのCSF−1受容体遺伝子の不活性化が循環CSF−1の20倍の上昇をもたらしたことを開示している。
アーバイン(Irvine)ら(「FASEB J.」、20:1315〜1322(2006年))は、CYC10268がCSF−1受容体の阻害物質であることを開示しており、20分間のCSF−1の曝露の後にCSF−1誘導受容体の欠乏は阻害されなかった。
本発明は、CSF−1の血清又は血漿レベルの上昇がFMS受容体の阻害と相関していることの同定に関する。この「マーカー」は、宿主の薬物応答及び/又は薬物治療の予測において有用性を示す。
本発明の一観点において、FMSを調節する薬物で治療可能な病気を有する患者の治療を監視する方法を提供する。これは、FMS活性を阻害する薬物での治療前及び治療後の患者からのCSF−1の血清又は血漿レベルを比較することにより達成される。したがって、血清又は血漿CSF−1に観察される増加の相関に基づき、患者の応答がFMS阻害化合物による治療に対して敏感になれば、患者の治療予後は好ましいと限定でき、治療を継続できる。また、薬物による治療後に患者のCSF−1の血清又は血漿レベルが増加しなければ、それは、現行の治療を修正又は変更、あるいは中止さえすべきであるという指標として使うことができる。そのような監視プロセスは、薬物による患者の治療の成功又は失敗を示すことができ、この監視プロセスは、必要又は所望に応じて繰り返すことができる。
化合物2及びその使用は、米国特許出願第20050049274A1号に開示されている。
化合物2(5mg/kg及び15mg/kg)及び化合物1(40mg/kg)が子宮のマクロファージ含有量に与える影響。
本明細書で引用する全ての刊行物は、参照することにより組み入れられるものとする。特に規定のない限り、本明細書で使用される全ての技術用語及び科学用語は、本発明が属する分野の当業者に一般的に理解されるのと同じ意味を有する。
定義
本明細書で使用するとき、「含む」、「含有する」、「有する」及び「包含する」は、これらのオープンで非限定的な意味で用いられる。
本明細書で使用するとき、「含む」、「含有する」、「有する」及び「包含する」は、これらのオープンで非限定的な意味で用いられる。
本明細書で使用するとき、「生体試料」という用語は、被験体から単離された細胞又は生体液のような、細胞又は組織物質を含有する又はそれから成る試料を指す。「被験体」は、治療、観察又は実験の対象となっている、ラット、マウス、サル、又はヒトのような哺乳類であってもよい。生体試料の例としては、例えば、痰、血液、血球(例えば、白血球)、羊水、血漿、血清、精液、唾液、骨髄、組織又は細針生検試料、尿、腹水、胸水及び細胞培養物(cell cultures)が挙げられる。生体試料はまた、組織学的目的のためにとられた凍結切片のような、組織の切片を含んでもよい。試験生体試料は、分析、モニタリング、又は観察の対象となっている生体試料である。対照生体試料は、試験生体試料に対するポジティブ又はネガティブコントロールのいずれかであってもよい。しばしば、対照生体試料は、試験生体試料のものと同種の関心組織、細胞及び/又は生体液を含有する。具体的な実施形態では、生体試料は「臨床試料」であり、これはヒト患者由来の試料である。
「細胞」は、検出方法の感度に対して適当な、少なくとも1つの細胞又は複数の細胞を指す。細胞は、培養された細胞培養物中に存在してもよい。細胞はまた、生体組織又は生体液のような、その天然の環境に存在してもよい。本発明に好適な細胞は細菌細胞であってもよいが、好ましくは真核細胞、最も好ましくは哺乳類細胞である。
「ポリペプチド」、「タンパク質」及び「ペプチド」という用語は、本明細書では互換的に用いられ、アミノ酸残基がペプチド結合又は修飾ペプチド結合により結合したアミノ酸鎖を指す。アミノ酸鎖は、2アミノ酸を超える任意の長さのものであってもよい。特に指定のない限り、「ポリペプチド」、「タンパク質」及び「ペプチド」という用語は、その種々の修飾形態をも包含する。かかる修飾形態は、自然発生的に修飾された形態であっても化学的に修飾された形態であってもよい。修飾形態の例としては、グリコシル化形態、リン酸化形態、ミリストイル化形態、パルミトイル化形態、リボシル化形態、アセチル化形態、ユビキチン化形態等が挙げられるが、これらに限定はされない。修飾としては、分子内架橋、及び、脂質、フラビン、ビオチン、ポリエチレングリコール又はその誘導体のような種々の部分への共有結合等も挙げられる。更に、修飾はまた、環化、分枝及び架橋も含む。更に、遺伝子のコドンによりコードされた従来の20種のアミノ酸以外のアミノ酸もまた、ポリペプチドに含まれることができる。
「単離されたタンパク質」は、タンパク質の天然源中に存在する他のタンパク質の少なくとも1つから実質的に分離されたものであるか、又はタンパク質が化学的に合成される場合、化学的前駆体若しくは他の化学物質の少なくとも1つを実質的に含まない。タンパク質は、約30%、20%、10%又は5%(乾燥重量)未満の他のタンパク質又は他の化学物質(本明細書では「夾雑タンパク質」又は「夾雑化学物質」とも呼ばれる)が存在する場合、タンパク質の調製時に他のタンパク質若しくは他の化学物質「から実質的に分離される」又は他のタンパク質若しくは他の化学物質「を実質的に含まない」。
単離されたタンパク質は、いくつかの異なる物理的形態を有することができる。単離されたタンパク質は、完全長の新生若しくは未加工ポリペプチドとして、又は部分的に加工されたポリペプチドとして、又は加工されたポリペプチドの組み合わせとして存在できる。完全長の新生ポリペプチドは、完全長の新生ポリペプチドの断片形成をもたらす特異的タンパク質分解的切断により翻訳後(postranslationally)に修飾されてもよい。断片又は断片の物理的結合は、完全長ポリペプチドに関連する生物活性を有することができるが、個々の断片に付随する生物活性の程度は異なり得る。
単離されたタンパク質は非自然発生的ポリペプチドであってもよい。例えば、「単離されたポリペプチド」は、「ハイブリッドポリペプチド」であってもよい。「単離されたポリペプチド」はまた、アミノ酸の追加又は欠失又は置換による自然発生的ポリペプチド由来のポリペプチドであってもよい。単離されたポリペプチドはまた、他の細胞成分、他のポリペプチド、ウイルス性物質、若しくは培地、又はポリペプチドが化学的に合成される場合、化学的前駆体若しくは化学合成に付随する副生成物を実質的に含まない、実質的に均質な製剤中の特定のポリペプチドを意味するために本明細書で使用される「精製ポリペプチド」であってもよい。「精製ポリペプチド」は、当業者に明らかになるように、標準的な精製技術又は化学合成によって、天然又は組み換え宿主細胞から得ることができる。
本発明は、CSF−1の血清又は血小板レベルが、FMSの機能又は活性の直接又は間接の阻害又は拮抗作用によってFMS活性に影響する薬物応答を予測するための有用な分子ツールとして働くことの同定を説明する。
また、本発明は、FMS活性と相互作用する薬物か、又はFMS活性を阻害する薬物を使う薬物治療の進捗を監視する監視アッセイを提供する。そのような生体外アッセイは、FMS活性を阻害する薬物による治療前と治療後のCSF−1の血清又は血漿レベルを比較することによって、FMSを調節又はFMSと相互作用する薬物によって治療可能な病気を有する患者の治療を監視することができる。患者から単離した細胞を検定し、好ましくはFMS阻害剤である薬物への曝露前及び曝露後のCSF−1レベルを測定し、変化の有無によって、別の薬物による治療の正当性あるいは現行治療を中止すべきかを決定する。
別の実施形態において、ヒトのFMSバイオマーカーを用いて、多様な薬物スクリーニング技術で治療薬をスクリーニングすることができる。
本明細書で使用される用語「薬物」は、薬物治療として又は薬物製剤中に使用することが可能な物質を指す。本質的に、いかなる化学化合物も、本発明によるアッセイで薬物として使用できる。被験化合物は、任意の小さい化学化合物であってもよく、また、生物学的実体(例えば、アミノ酸鎖、タンパク質、糖、核酸、又は脂質)であってもよい。試験化合物は、通常、小化学分子及びペプチドである。概して、潜在的調整物質(potential modulators)として使用される化合物は、水性又は有機(例えばDMSOベース)溶液中に溶解することができる。これらのアッセイは、アッセイ工程を自動化し、任意の便利なソースから化合物を提供することによって、大きい化学ライブラリをスクリーニングするために設計される。アッセイは、通常、並列に、例えばロボットアッセイでは、マイクロタイタープレート上でマイクロタイターフォーマットにて実行される。数多くの化学化合物供給元があり、例えば、シグマアルドリッチ(Sigma-Aldrich)(ミズーリ州セントルイス)及び、フルカケミカ−バイオケミカアナリティカ(Fluka Chemika-Biochemica Analytika)(スイス、Buchs)が挙げられる。化合物は、また、当該技術分野で既知の方法により合成することができる。
本明細書の実施例は、本発明を実行する際の様々な観点を例示することを意図するものであって、本発明の範囲を限定する意図は一切ない。
(実施例1)
生体外骨髄由来マクロファージによるCSF−1のクリアランスは、化合物1によって阻害された。
生体外骨髄由来マクロファージによるCSF−1のクリアランスは、化合物1によって阻害された。
化合物1は、ジメチルスルホキシド(DMSO)中の10mMストックとして提供された。組み換えマウスCSF−1(416 ML 050)及びマウスCSF−1 ELISA(MNC00)は両方ともR&Dシステムズ社(R&D Systems Inc.)(ミネソタ州ミネアポリス)から購入した。
マウス骨髄由来マクロファージ(BMDM)を調製し、培養物(10%FCS及びグルタミンペン−ストレプ(glutamine PenStrep)含有αMEM)及びCSF−1 25ng/mlの存在下で12のウェルプレートに、約60%の密集度が達成されるまで3日間置いた。次に培養物を、CSF−1を伴わずに培地で2回洗浄し、CSF−1の欠如下で2時間培養して、ウェルに残留している可能性のあるCSF−1をマクロファージに消費させた。次に、培養物を調製して、表1(実験設計)に示すようにCSF−1及び化合物1を含ませ、37℃及び5%のCO2で培養を続けた。いくつかのウェルは細胞を有さず、デバイスバインディング及びCSF−1の安定のための対照としての役割りを果たす。時間をおいて(0、1.1、2.3、4.9、10.3、19.9、29及び44時間)、調整培地50μlをそれぞれのウェルから取り除き、冷蔵保存した。最終時点で収穫した後、全ての試料をCSF−1 ELISAにさらした。
それぞれのウェルのCSF−1濃度(pg/ml)対時間を、線形−線形及びログ線形の形式でプロットした。消費は、最初の4.9時間にかけてログ線形であった。4.9時間にかけてのそれぞれのウェルのCSF−1消費を表す最適な線形等式を計算するためにExcelを使い、相対消費率を決定するためにスロープを使った。
結果
細胞欠如では、組み換えマウス(murine)CSF−1は、現在の培養条件(37℃、5%CO2、1ml/ウェル(12ウェルプレートのウェル))で44時間安定であった(図1)。組み換えCSF−1欠如のBMDMの条件培地は、検出可能なCSF−1を含まなかった。1ng/mlのCSF−1をBMDMに加えた後、最初の数時間、CSF−1は毎時約37%の率で消費された。化合物1は、用量に依存してCSF−1の消費を阻害した。消費率は、0.001、0.01、0.1、及び1μMの化合物1で、それぞれ、16、56、64、及び64%低減した。
細胞欠如では、組み換えマウス(murine)CSF−1は、現在の培養条件(37℃、5%CO2、1ml/ウェル(12ウェルプレートのウェル))で44時間安定であった(図1)。組み換えCSF−1欠如のBMDMの条件培地は、検出可能なCSF−1を含まなかった。1ng/mlのCSF−1をBMDMに加えた後、最初の数時間、CSF−1は毎時約37%の率で消費された。化合物1は、用量に依存してCSF−1の消費を阻害した。消費率は、0.001、0.01、0.1、及び1μMの化合物1で、それぞれ、16、56、64、及び64%低減した。
考察
ここで、3つのことが発見された。第1に、BMDMは培地からCSF−1を効果的にクリアした。1mlの培地で1ngのCSF−1にさらされたとき、12ウェルプレート内の単層(〜60%コンフルエント)のBMDMは毎時約37%の率でCSF−1をクリアした。第2に、消費率に基づき、化合物1によってクリアランスの一部(〜64%)を阻害することができた。CSF−1誘導BMDM増殖(0.0026μM)の阻害では、化合物1のIC50と一致した、消費の半最大限の阻害が0.001μM〜0.01μMの化合物1で生じた。(データ図示せず。)したがって、この部分のクリアランスは、おそらくFMSキナーゼ依存型である。第3に、一部分(〜36%)は、1μMの化合物1でさえ阻害されなかった。この濃度はIC50値の100〜1000倍であるので、FMSキナーゼが最大に阻害されたと仮定することができ、これは、すでに0.1μMの化合物1で達成されたクリアランスのプラトー効果と一致する結論である。CSF−1クリアランスの阻害されなかった部分は、FMSキナーゼ独立型であることが可能である。この研究は、FMSキナーゼ独立型を、他の可能なFMS独立型機構と区別することはしない。全体として、生体内データは、化合物1によって引き起こされる生体内のCSF−1の上昇、すなわちFMSキナーゼを媒介とするCSF−1のクリアランスの直接的阻害と、組織のマクロファージの欠乏によるクリアランスの間接的阻害とのための機構的ベースを提供する。
ここで、3つのことが発見された。第1に、BMDMは培地からCSF−1を効果的にクリアした。1mlの培地で1ngのCSF−1にさらされたとき、12ウェルプレート内の単層(〜60%コンフルエント)のBMDMは毎時約37%の率でCSF−1をクリアした。第2に、消費率に基づき、化合物1によってクリアランスの一部(〜64%)を阻害することができた。CSF−1誘導BMDM増殖(0.0026μM)の阻害では、化合物1のIC50と一致した、消費の半最大限の阻害が0.001μM〜0.01μMの化合物1で生じた。(データ図示せず。)したがって、この部分のクリアランスは、おそらくFMSキナーゼ依存型である。第3に、一部分(〜36%)は、1μMの化合物1でさえ阻害されなかった。この濃度はIC50値の100〜1000倍であるので、FMSキナーゼが最大に阻害されたと仮定することができ、これは、すでに0.1μMの化合物1で達成されたクリアランスのプラトー効果と一致する結論である。CSF−1クリアランスの阻害されなかった部分は、FMSキナーゼ独立型であることが可能である。この研究は、FMSキナーゼ独立型を、他の可能なFMS独立型機構と区別することはしない。全体として、生体内データは、化合物1によって引き起こされる生体内のCSF−1の上昇、すなわちFMSキナーゼを媒介とするCSF−1のクリアランスの直接的阻害と、組織のマクロファージの欠乏によるクリアランスの間接的阻害とのための機構的ベースを提供する。
これまで誰も、マクロファージによるCSF消費におけるFMSキナーゼ阻害物質の役割りの調査をしていない。しかし、FMS内在化及び劣化におけるFMSキナーゼの役割りを調査した研究がいくつかある。カールバーグ(Carlberg)らは、野生型とFMSA614キナーゼ死亡変異体のCSF−1の誘導内在化率を比較した。CSF−1曝露の最初の5分間に、野生型の約85%及びキナーゼ死亡FMSの35%が内在化した。したがって、受容体内在化の有意な部分(〜41%)はFMSキナーゼ独立型であり、我々のCSF−1消費研究と一致している。より最近では、アーバイン(Irvine)らが、新たに記述されたFMSキナーゼ阻害物質であるCYC10268の、BMDMでのCSF−1誘導FMS内在化に与える効果を研究した。CSF−1依存型FMSリン酸化反応を著しく阻害したCYC10268の濃度では、20分でFMS内在化を低減することができなかった。これらの研究を総合し、我々は、FMS内在化及びCSF−1クリアランスのためのFMSキナーゼ依存型経路及び独立型経路が存在すると結論付ける。
結論
マクロファージはCSF−1を消費する。マクロファージを媒介とする消費のほぼ3分の2は、化合物1により阻害することができ、したがって、FMSキナーゼ依存型である。これらのデータは、化合物1の用量投与後の血漿CSF−1の上昇の機構的ベースを提供する。CSF−1の消費の3分の1強は、化合物1により阻害されず、したがって、第2の、キナーゼ独立型の消費経路を示唆する。
マクロファージはCSF−1を消費する。マクロファージを媒介とする消費のほぼ3分の2は、化合物1により阻害することができ、したがって、FMSキナーゼ依存型である。これらのデータは、化合物1の用量投与後の血漿CSF−1の上昇の機構的ベースを提供する。CSF−1の消費の3分の1強は、化合物1により阻害されず、したがって、第2の、キナーゼ独立型の消費経路を示唆する。
(実施例2)
ラットにおけるFMS阻害物質(化合物2及び化合物1)の忍容性及びバイオマーカー応答の検査
メスのスプラーグダウリーラット(n=5)の群に、5若しくは15mg/kgの化合物2、又は40mg/kgの化合物1を1日2回連続5日、経口投与し、化合物の忍容性を特性化した。賦形剤又は40mg/kgの化合物1で治療したラットの追加群は、様々なパラメータの中間的分析のために、1日目及び3日目の午前投与の1時間後に終了した。肝臓組織学評価を伴う標準剖検及び標準血液学・血清学を含む死後分析を、治療した全ての動物で実行した。予定の終了の前に、死亡又は安楽死(瀕死)した動物はなかった。いずれの治療も、体重、又は選択した器官(肝臓、胸腺、脾臓及び子宮)の器官対体重比に影響しなかった。両方の化合物で、5日目までにCSF−1の血漿濃度の上昇(4〜6倍)が見られた。どちらの化合物も、試験の最高用量で5日目に子宮内マクロファージ数が減少(化合物2では最高〜60%)したが、このパラメータは特にばらつきがある。これらの化合物は、用量を制限する明らかな毒性を生成しなかった。
ラットにおけるFMS阻害物質(化合物2及び化合物1)の忍容性及びバイオマーカー応答の検査
メスのスプラーグダウリーラット(n=5)の群に、5若しくは15mg/kgの化合物2、又は40mg/kgの化合物1を1日2回連続5日、経口投与し、化合物の忍容性を特性化した。賦形剤又は40mg/kgの化合物1で治療したラットの追加群は、様々なパラメータの中間的分析のために、1日目及び3日目の午前投与の1時間後に終了した。肝臓組織学評価を伴う標準剖検及び標準血液学・血清学を含む死後分析を、治療した全ての動物で実行した。予定の終了の前に、死亡又は安楽死(瀕死)した動物はなかった。いずれの治療も、体重、又は選択した器官(肝臓、胸腺、脾臓及び子宮)の器官対体重比に影響しなかった。両方の化合物で、5日目までにCSF−1の血漿濃度の上昇(4〜6倍)が見られた。どちらの化合物も、試験の最高用量で5日目に子宮内マクロファージ数が減少(化合物2では最高〜60%)したが、このパラメータは特にばらつきがある。これらの化合物は、用量を制限する明らかな毒性を生成しなかった。
本研究は、2つのFMS/FLT3チロシンキナーゼ抑制剤である化合物2及び化合物1の忍容性及び付随するバイオマーカー応答を特性付ける。
化合物2及び化合物1は合成した。試験品は−20℃で乾燥保管した。ヒドロキシプロピル−b−シクロデキストリン(CAS番号128446−35−5、シグマ)を20%(W:V)水溶液として調製し、試験品製剤の賦形剤及び試験品の投与用賦形剤対照として使用した。
化合物2は、2.78mg/ml及び8.33mg/mlの20%HPbCD透明溶液として毎日新しく調製し、1kg当たり5及び15mgを送達した。化合物1は、21.9mg/mlの20%HPbCD透明溶液として毎日新しく調製し、40mg/kgを送達した。
0日目にラットの耳にタグ付けし、治療群にランダムに割り当て(群1及び4はn=15、群2及び3はn=5)、体重測定し、賦形剤(20%HPbCD)又は試験品で表2(治療群の割り当て)のように治療(1日2回経口投与)した。
1日目及び3日目の午前投与の1時間後に、CO2窒息を用いて1群及び4群の5匹のラットを安楽死させ、心穿刺により放血させた。血液試料(〜500μL)を別々のエチレンジアミン四酢酸(EDTA)ミクロテナーに移し、アドビア(Advia)120血液学システム(バイエルダイアグノスティクス(Bayer Diagnostics)、ニューヨーク州タリータウン)を用いて完全血球算定(CBC)を行った。追加的な血液試料を別々のミクロテナーに(抗凝血剤あり又はなしに)移し、バイオマーカー(すなわちMCSF−1)及び血清学(すなわちAST/ALT)分析のために処理した。肝臓及び胸腺は重量を測定し、廃棄した。脾臓は重量を測定し、瞬間凍結し、子宮(卵巣を伴わず)は重量を測定して10%緩衝ホルマリンに静置した。マクロファージ特定(ED−1)抗体を用いて、子宮のマクロファージ含有量を免疫組織化学的に測定した。
5日目に、二酸化炭素を用いてラットを安楽死させ、心穿刺により放血させた。血液試料(〜500μL)を収集し、上述のようにCBC、バイオマーカー分析、血液学分析用に処理した。肝臓、脾臓、胸腺及び子宮(卵巣を伴わず)を隔離し、重量を測定し、緩衝ホルマリンに静置した。大腿と共に右膝を隔離し、トリムし、ホルマリンに静置した。左大腿を隔離し、骨髄細胞数を測定した。肝臓の組織病理学も行った。
データ分析
治療群と対照群との差をダンネットの多重比較検定及びANOVAにより統計的に解析した(p値は*:<0.05、**:<0.01)。
治療群と対照群との差をダンネットの多重比較検定及びANOVAにより統計的に解析した(p値は*:<0.05、**:<0.01)。
結果
15mg/kgのFMS阻害物質化合物2及び40mg/kgの化合物1で連続5日治療したラットでは、CSF−1血漿濃度の増加が対照の4〜6倍であった(図3A)より低い投与量(すなわち5mg/kg)の化合物2は、CSF−1血漿濃度に有意に影響しなかった。研究期間中の特定の日に行った、40mg/kgの化合物1治療ラットの血漿CSF−1濃度検査で、平均CSF−1濃度は1日目、3日目及び5日目にそれぞれ112、314及び526pg/mlであり、5日目に観察されたこの因子の上昇レベルが徐々に起きたことを示すものであった(対照値は〜75pg/ml、図3B)。
15mg/kgのFMS阻害物質化合物2及び40mg/kgの化合物1で連続5日治療したラットでは、CSF−1血漿濃度の増加が対照の4〜6倍であった(図3A)より低い投与量(すなわち5mg/kg)の化合物2は、CSF−1血漿濃度に有意に影響しなかった。研究期間中の特定の日に行った、40mg/kgの化合物1治療ラットの血漿CSF−1濃度検査で、平均CSF−1濃度は1日目、3日目及び5日目にそれぞれ112、314及び526pg/mlであり、5日目に観察されたこの因子の上昇レベルが徐々に起きたことを示すものであった(対照値は〜75pg/ml、図3B)。
FMS阻害物質によるラットの治療が、膣内ED−1陽性マクロファージの数を減少することが発見された。対照の膣は高強度(顕微鏡)照野につき200個のED−1陽性細胞を含んでおり、一方、化合物2による治療は、これらの照野当たりの細胞数の、用量に依存する減少(最高60%)を引き起こした(図4)。化合物1での治療は、また、子宮のマクロファージ含有量も減少したが、このパラメータは特にばらつきがあり、化合物2のみが15mg/kgで有意な影響を誘導した(p値<0.05)。
結論
5若しくは15mg/kgの化合物2又は40mg/kgの化合物1での、メスのスプラーグダウリーラットの連続5日治療(1日2回、経口)では、外観、行動、体重、又は肝臓・脾臓・胸腺を含む特定器官の器官対体重比に観察可能な影響がなかった。両方の化合物で、5日目までに対照レベルを超えるCSF−1血漿濃度の増加が見られた。どちらの化合物も、試験の最高用量で5日目に子宮内マクロファージ数が減少したが、このパラメータは非常にばらつきがある。これらの化合物は、用量を制限する明らかな毒性を生成しなかった。
5若しくは15mg/kgの化合物2又は40mg/kgの化合物1での、メスのスプラーグダウリーラットの連続5日治療(1日2回、経口)では、外観、行動、体重、又は肝臓・脾臓・胸腺を含む特定器官の器官対体重比に観察可能な影響がなかった。両方の化合物で、5日目までに対照レベルを超えるCSF−1血漿濃度の増加が見られた。どちらの化合物も、試験の最高用量で5日目に子宮内マクロファージ数が減少したが、このパラメータは非常にばらつきがある。これらの化合物は、用量を制限する明らかな毒性を生成しなかった。
このバイオマーカーを本発明に従って使用し、患者のFMS治療応答を評価することができる。例えば、臨床応答を予測するために、FMSの阻害若しくは阻害の欠如を特定することができる。
(実施例3)
効能研究に適切な用量を同定するために、ラットにおける薬力学活性を特定した。循環CSF−1は、FMSキナーゼ活性に部分的に依存するプロセスにおいてFMSによって結合及び内在化されると、正弦波形状マクロファージによってクリアされる。CSF−1レベルは、FMSが阻害されたとき、又はFMSの阻害がマクロファージの数/機能を低減したときに上昇する。子宮のマクロファージは短命で、FMS依存型である。したがって、子宮のマクロファージ密度及び血漿CSF−1レベルの定量化は、4日間投与後のラットにおける測定可能な薬力学終点を提供した。
効能研究に適切な用量を同定するために、ラットにおける薬力学活性を特定した。循環CSF−1は、FMSキナーゼ活性に部分的に依存するプロセスにおいてFMSによって結合及び内在化されると、正弦波形状マクロファージによってクリアされる。CSF−1レベルは、FMSが阻害されたとき、又はFMSの阻害がマクロファージの数/機能を低減したときに上昇する。子宮のマクロファージは短命で、FMS依存型である。したがって、子宮のマクロファージ密度及び血漿CSF−1レベルの定量化は、4日間投与後のラットにおける測定可能な薬力学終点を提供した。
方法:チャールズリバー(Charles River)のメスのスプラーグダウリーラット(体重150〜200g)に賦形剤又は10及び40mg/kgの化合物3を4日間、1日2回経口投与した。5日目に最終投与し、2時間後にこれらのラットを犠牲にした。ラットはCO2窒息により安楽死させ、心穿刺により放血させた。血液のアリコート(1000ml)をEDTA管に移し、血漿及び血漿化合物、並びにCSF−1バイオマーカーレベルの測定のために処理した。加えて、血液のアリコート(〜2ml)を、凝血剤を含まないミクロフュージ(microfuge)管に移し、室温で1時間培養した後、遠心分離によって血清を準備した。
脾臓、肝臓及び子宮(卵巣を含まず)を隔離し、重量を測定し、子宮はホルマリンに静置した。子宮の切片をED1で染色し、イメージプロプラス(Image-Pro Plus)ソフトウェアを用いて倍率200でED−1染色エリア(任意のユニット)を測定した。
結果:10及び40mg/kg最終投与後2時間の化合物3平均血漿レベルは、それぞれ2537ng/ml及び5370ng/mlであった。CSF−1レベルは、40mg/kgの化合物3を投与したラットでは5.5倍上昇し、10mg/kgの化合物3を投与したラットでは4.5倍上昇した(表3)。子宮マクロファージは10mg/kgで51%、40mg/kgで81%、それぞれ消耗された。40mg/kg投与ラットに存在するマクロファージは正常な網目状モホロジーを有さず、ED−1染色は大きい丸細胞か細胞破片と見られるもののいずれかに集中していた。CSF−1の上昇及びマクロファージの低減に基づき、10及び40mg/kgは堅固な薬力学活性を伴う用量であると同定された。
化合物3の構造を次に示す。
化合物3のような化合物及びそれらの使用は、米国特許出願第20070060577A1号及び同第20070060578A1号に開示されている。
(実施例4)
結果:10、20及び50mpkの最終投与後2時間の化合物4の平均血漿レベルは、それぞれ1414ng/ml、2636ng/ml及び6612ng/mlであった。CSF−1レベルは、10、20及び50mpkを投与したラットでそれぞれ28、79及び363%有意に上昇した(表4)。子宮マクロファージは、10、20、及び50mpkの化合物4でそれぞれ27%、28%及び44%消耗された。これらの結果に基づき、10mg/kgは、これらの終点に対する活性のしきいレベルを伴う用量として同定された。
化合物4の構造を次に示す。
化合物4及びその使用は、2007年10月17日付けで出願された米国特許出願第60/980,263号に開示されている。
(実施例5)
健康なオス被験体において化合物1の単一漸増経口用量の安全性及び忍容性を評価した。血液試料を、1日目に、投与前及び投与後2、4、8、12、24及び48時間に収集し、バイオマーカーで評価した。バイオマーカーの分析は、表5に示すように化合物1の少なくとも1回用量を受けた全被験体に対して行った。
健康なオス被験体において化合物1の単一漸増経口用量の安全性及び忍容性を評価した。血液試料を、1日目に、投与前及び投与後2、4、8、12、24及び48時間に収集し、バイオマーカーで評価した。バイオマーカーの分析は、表5に示すように化合物1の少なくとも1回用量を受けた全被験体に対して行った。
4mlの静脈血試料を1日目の投与前60分以内及び投与後2、4、8、12、24及び48時間、並びに3mlを1日目の投与前及び投与後2及び8時間に収集し、化合物1が血漿CSF−1に与える影響を評価した。
血漿CSF−1レベルは、R&Dシステムズ(R&D Systems)のヒトCSF−1ELISAを用いて測定した。試料をアッセイ用に1:5に希釈した。標準のアッセイ31〜2000pg/mlである。測定可能な最大血漿濃度は〜10000pg/mlである。現在の測定された最大濃度は〜4000pg/mlである。結果を下表に示す。
前述の明細書は、例示を目的として提供される実施例と共に、本発明の原理を教示するが、本発明の実践は、以下の特許請求の範囲及びそれらの等価物の範囲内に含まれる全ての通常の変形、改作及び/又は修正を包含することが理解されるであろう。
参照
1.バルトッチ(Bartocci)A、マストロヤンニ(Mastrogiannis)DS、ミグリオラティ(Migliorat)G、ストッカート(Stockert)RJ、ウォルコフ(Wolkoff)WW、スタンリー(Stanley)ER。マクロファージは、循環における独自の成長因子の濃度を特定的に調節する。(Proc Natl Acad Sci USA、1987年、84:6179−83)。
2.カールバーグ(Carlberg)K、タプリー(Tapley)P、ヘイステッド(Haystead)C、ローシュナイダー(Rohrschneider)L。リガンドのキナーゼ活性の役割り及びキナーゼインサート部位はCFMSタンパク質の内在化及び劣化を誘導した。EMBO J.10(4)(1991年)877−83。
3.アーバイン(Irvine)KM、バーンズ(Burns)CJ、ウィルクス(Wilks)AF、スー(Su)S、ヒューム(Hume)DA、スイート(Sweet)MJ。CSF−1受容体キナーゼ阻害物質は、エフェクター機能を標的とし、マウス(murine)マクロファージ母集団からの炎症性サイトカインの生成を阻害する。FASEB J (2006年)20:1921−3。
4.ダイ(Dai)XM、ライアン(Ryan)GR、ヘーペル(Hapel)AJ、ドミニゲス(Dominguez)MG、ラッセル(Russell)RG、カップ(Kapp)S、シルベスター(Sylvestre)V、スタンリー(Stanley)ER。マウスコロニー刺激因子1受容体遺伝子標的化断裂は、大理石骨病、単核食細胞欠乏症、原始前駆細胞頻度の増加、及び生殖機能欠陥をもたらす。Blood.99(2002年)111−20。
1.バルトッチ(Bartocci)A、マストロヤンニ(Mastrogiannis)DS、ミグリオラティ(Migliorat)G、ストッカート(Stockert)RJ、ウォルコフ(Wolkoff)WW、スタンリー(Stanley)ER。マクロファージは、循環における独自の成長因子の濃度を特定的に調節する。(Proc Natl Acad Sci USA、1987年、84:6179−83)。
2.カールバーグ(Carlberg)K、タプリー(Tapley)P、ヘイステッド(Haystead)C、ローシュナイダー(Rohrschneider)L。リガンドのキナーゼ活性の役割り及びキナーゼインサート部位はCFMSタンパク質の内在化及び劣化を誘導した。EMBO J.10(4)(1991年)877−83。
3.アーバイン(Irvine)KM、バーンズ(Burns)CJ、ウィルクス(Wilks)AF、スー(Su)S、ヒューム(Hume)DA、スイート(Sweet)MJ。CSF−1受容体キナーゼ阻害物質は、エフェクター機能を標的とし、マウス(murine)マクロファージ母集団からの炎症性サイトカインの生成を阻害する。FASEB J (2006年)20:1921−3。
4.ダイ(Dai)XM、ライアン(Ryan)GR、ヘーペル(Hapel)AJ、ドミニゲス(Dominguez)MG、ラッセル(Russell)RG、カップ(Kapp)S、シルベスター(Sylvestre)V、スタンリー(Stanley)ER。マウスコロニー刺激因子1受容体遺伝子標的化断裂は、大理石骨病、単核食細胞欠乏症、原始前駆細胞頻度の増加、及び生殖機能欠陥をもたらす。Blood.99(2002年)111−20。
Claims (6)
- FMS活性を阻害する薬物による治療に対する細胞応答を予測するバイオマーカー。
- 前記バイオマーカーが、FMS活性を阻害する薬物による治療に対する、ヒトである被験体又は他の動物の応答を予測するものである、請求項1に記載のバイオマーカー。
- 細胞内のFMS活性を阻害する能力が薬物にあるかどうかを予測する方法であって、a)前記薬物の投与前に第1の細胞試料を入手し、前記薬物の投与後に第2の細胞試料を入手する工程と、b)前記第1の細胞試料及び前記第2の細胞試料におけるCSF−1レベルを測定する工程と、c)前記CSF−1レベルを比較する工程と、d)CSF−1の任意の変化を、前記細胞におけるFMS活性を阻害する前記薬物の能力あるいは無能力と相関する工程と、を含む、方法。
- 請求項3の方法が、ヒトである被験体又は他の動物におけるFMS活性を阻害する能力が薬物にあるかどうかを予測するための方法であって、a)前記薬物の投与前に第1の血清又は血漿の試料を入手し、前記薬物の投与後に第2の血清又は血漿の試料を入手する工程と、b)前記第1の血清又は血漿の試料及び前記第2の血清又は血漿の試料におけるCSF−1レベルを測定する工程と、c)前記CSF−1レベルを比較する工程と、d)CSF−1の任意の変化を、前記ヒトである被験体又は他の動物におけるFMS活性を阻害する前記薬物の能力あるいは無能力と相関する工程と、を含む、請求項3に記載の方法。
- FMSの活性を阻害する能力のある候補薬物のスクリーニングの方法であって、a)試験薬物を細胞試料と接触させる工程と、b)前記細胞試料におけるCSF−1レベルを増加する試験薬物を候補薬物として選択する工程と、を含む、方法。
- 請求項5の方法が、ヒトである被験体又は他の動物におけるFMS活性を阻害する能力のある候補薬物をスクリーニングする方法であって、a)試験薬物をヒトである被験体又は他の動物と接触させる工程と、b)前記ヒトである被験体又は他の動物におけるCSF−1の血清又は血漿レベルを増加する試験薬物を候補薬物として選択する工程と、を含む、請求項5に記載の方法。
Applications Claiming Priority (2)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
US98412207P | 2007-10-31 | 2007-10-31 | |
PCT/US2008/081738 WO2009058968A2 (en) | 2007-10-31 | 2008-10-30 | Biomarker for assessing response to fms treatment |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
JP2011502266A true JP2011502266A (ja) | 2011-01-20 |
Family
ID=40276058
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2010532237A Withdrawn JP2011502266A (ja) | 2007-10-31 | 2008-10-30 | Fms治療に対する応答を評価するバイオマーカー |
Country Status (6)
Country | Link |
---|---|
US (1) | US20090148883A1 (ja) |
EP (1) | EP2215482A2 (ja) |
JP (1) | JP2011502266A (ja) |
AU (1) | AU2008318656A1 (ja) |
CA (1) | CA2704231A1 (ja) |
WO (1) | WO2009058968A2 (ja) |
Families Citing this family (17)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US20060281788A1 (en) | 2005-06-10 | 2006-12-14 | Baumann Christian A | Synergistic modulation of flt3 kinase using a flt3 inhibitor and a farnesyl transferase inhibitor |
SI2021335T1 (sl) | 2006-04-20 | 2011-09-30 | Janssen Pharmaceutica Nv | Heterocikliäśne spojine kot zaviralci c-fms kinaze |
EP2016070B1 (en) | 2006-04-20 | 2016-01-13 | Janssen Pharmaceutica N.V. | Inhibitors of c-fms kinase |
US8697716B2 (en) | 2006-04-20 | 2014-04-15 | Janssen Pharmaceutica Nv | Method of inhibiting C-KIT kinase |
FR2955109B1 (fr) * | 2010-01-08 | 2012-09-07 | Sanofi Aventis | Derives de 5-oxo-5,8-dihydro-pyrido[2, 3-d]pyrimidine, leur preparation et leur application en therapeutique |
NZ603193A (en) | 2010-05-04 | 2014-07-25 | Five Prime Therapeutics Inc | Antibodies that bind csf1r |
US20130302322A1 (en) | 2012-05-11 | 2013-11-14 | Five Prime Therapeutics, Inc. | Methods of treating conditions with antibodies that bind colony stimulating factor 1 receptor (csf1r) |
JOP20180012A1 (ar) | 2012-08-07 | 2019-01-30 | Janssen Pharmaceutica Nv | عملية السلفنة باستخدام نونافلوروبوتانيسولفونيل فلوريد |
WO2014025675A1 (en) | 2012-08-07 | 2014-02-13 | Janssen Pharmaceutica Nv | Process for the preparation of heterocyclic ester derivatives |
AU2013308635A1 (en) | 2012-08-31 | 2015-03-12 | Five Prime Therapeutics, Inc. | Methods of treating conditions with antibodies that bind colony stimulating factor 1 receptor (CSF1R) |
US9611259B2 (en) * | 2013-03-15 | 2017-04-04 | Janssen Pharmaceutica Nv | Substituted pyridine derivatives useful as C-FMS kinase inhibitors |
CN106795222A (zh) | 2014-06-23 | 2017-05-31 | 戊瑞治疗有限公司 | 用结合集落刺激因子1受体(csf1r)的抗体治疗病状的方法 |
EP3212670B1 (en) | 2014-10-29 | 2020-12-23 | Five Prime Therapeutics, Inc. | Combination therapy for cancer |
EP3237447B1 (en) | 2014-12-22 | 2020-12-02 | Five Prime Therapeutics, Inc. | Anti-csf1r antibodies for treating pvns |
PL3283527T3 (pl) | 2015-04-13 | 2021-06-14 | Five Prime Therapeutics, Inc. | Leczenie skojarzone nowotworów |
TWI752980B (zh) * | 2016-07-18 | 2022-01-21 | 比利時商健生藥品公司 | 4-氰基-n-(2-(4,4-二甲基環己-1-烯-1-基)-6-(2,2,6,6-四甲基四氫-2h-哌喃-4-基)吡啶-3-基)-1h-咪唑-2-甲醯胺之晶型 |
SG11202001606XA (en) | 2017-09-13 | 2020-03-30 | Five Prime Therapeutics Inc | Combination anti-csf1r and anti-pd-1 antibody combination therapy for pancreatic cancer |
Family Cites Families (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
AR045563A1 (es) * | 2003-09-10 | 2005-11-02 | Warner Lambert Co | Anticuerpos dirigidos a m-csf |
KR20070083705A (ko) * | 2004-10-18 | 2007-08-24 | 메드벳 싸이언스 피티와이. 리미티드 | 티로신 키나제 수용체 cfms를 억제하기 위한4-(4-메틸피페라진-1-일메틸)-n-[4-메틸-3-(4-(피리딘-3-일)피리미딘-2-일아미노)페닐]-벤즈아미드의 용도 |
-
2008
- 2008-10-30 CA CA2704231A patent/CA2704231A1/en not_active Abandoned
- 2008-10-30 AU AU2008318656A patent/AU2008318656A1/en not_active Abandoned
- 2008-10-30 JP JP2010532237A patent/JP2011502266A/ja not_active Withdrawn
- 2008-10-30 WO PCT/US2008/081738 patent/WO2009058968A2/en active Application Filing
- 2008-10-30 EP EP08843786A patent/EP2215482A2/en not_active Withdrawn
- 2008-10-30 US US12/261,558 patent/US20090148883A1/en not_active Abandoned
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
EP2215482A2 (en) | 2010-08-11 |
WO2009058968A2 (en) | 2009-05-07 |
US20090148883A1 (en) | 2009-06-11 |
AU2008318656A1 (en) | 2009-05-07 |
CA2704231A1 (en) | 2009-05-07 |
WO2009058968A3 (en) | 2009-07-09 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
JP2011502266A (ja) | Fms治療に対する応答を評価するバイオマーカー | |
Bryant et al. | Combination of ERK and autophagy inhibition as a treatment approach for pancreatic cancer | |
Bednash et al. | Targeting the deubiquitinase STAMBP inhibits NALP7 inflammasome activity | |
Lim et al. | Neutrophil gelatinase‐associated lipocalin (NGAL) an early‐screening biomarker for ovarian cancer: NGAL is associated with epidermal growth factor‐induced epithelio‐mesenchymal transition | |
Ho et al. | Egr-1 deficiency protects from renal inflammation and fibrosis | |
Ono et al. | Inhibition of canonical WNT signaling attenuates human leiomyoma cell growth | |
Sweeney Jr et al. | Src inhibition ameliorates polycystic kidney disease | |
Onori et al. | Secretin inhibits cholangiocarcinoma growth via dysregulation of the cAMP‐dependent signaling mechanisms of secretin receptor | |
Daniel et al. | Transgelin is a marker of repopulating mesangial cells after injury and promotes their proliferation and migration | |
Li et al. | The protective effect of sinapic acid in osteoarthritis: In vitro and in vivo studies | |
Mulder et al. | Heparin binding epidermal growth factor in renal ischaemia/reperfusion injury | |
Yu et al. | IL-17A promotes psoriasis-associated keratinocyte proliferation through ACT1-dependent activation of YAP–AREG axis | |
Zhang et al. | Up-regulation of DNA damage response signaling in autosomal dominant polycystic kidney disease | |
Kok et al. | Oncostatin M–induced CCL2 transcription in osteoblastic cells is mediated by multiple levels of STAT‐1 and STAT‐3 signaling: An implication for the pathogenesis of arthritis | |
JP2010503730A (ja) | 変形性関節症の治療のためのlxrアゴニストの使用 | |
US20120004160A1 (en) | Methods for identifying and compounds useful for the diagnosis and treatment of diseases involving inflammation | |
Delle Donne et al. | Targeted inhibition of ubiquitin signaling reverses metabolic reprogramming and suppresses glioblastoma growth | |
MX2012013305A (es) | Terapia combinada y metodo para evaluar resistencia al tratamiento. | |
Sun et al. | Activating PIK3CA mutation promotes adipogenesis of adipose-derived stem cells in macrodactyly via up-regulation of E2F1 | |
Strelau et al. | Expression and putative functions of GDF-15, a member of the TGF-β superfamily, in human glioma and glioblastoma cell lines | |
Nunez et al. | Neutrophil and NETosis modulation in traumatic heterotopic ossification | |
Mirzapoiazova et al. | Effects of selected deubiquitinating enzyme inhibitors on the proliferation and motility of lung cancer and mesothelioma cell lines | |
Jeddo et al. | Maternal embryonic leucine zipper kinase serves as a poor prognosis marker and therapeutic target in osteosarcoma | |
US20210023083A1 (en) | Diagnosis and regulation of epidermal differentiation and cancer cell activity | |
US20160069887A1 (en) | Biomarkers for prognosis |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
A621 | Written request for application examination |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A621 Effective date: 20111031 |
|
A072 | Dismissal of procedure [no reply to invitation to correct request for examination] |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A073 Effective date: 20130319 |
|
A300 | Application deemed to be withdrawn because no request for examination was validly filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A300 Effective date: 20130402 |