JP2011170074A - Attachment lens and fluorescence measuring device to which the same is attached - Google Patents

Attachment lens and fluorescence measuring device to which the same is attached Download PDF

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明 阪口
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Abstract

<P>PROBLEM TO BE SOLVED: To provide a high-performance attachment lens which can suppress the reduction of an ambient light quantity and the occurrence of color shading, and can photograph a wide area, while reducing the weight and size with a small number of lenses; and to provide a fluorescence measuring device provided with the attachment lens. <P>SOLUTION: The attachment lens PA for correcting optical performance forms the fluorescent image of a sample S, in such a state that the attachment lens PA is combined with a master lens PB. The attachment lens PA is telecentric on the side of the sample S and includes an exit pupil in the vicinity of the entrance pupil of the master lens PB. The attachment lens PA includes: three groups of a first group Gr1 having positive power; a second group Gr2 having negative power; and a third group Gr3 having positive power in order from the side of the sample S, as a lens group having optical power, wherein, the first group Gr1 includes one Fresnel lens or two or more lenses made of the same glass material, and the second group Gr2 and the third group Gr3 include one single lens respectively. <P>COPYRIGHT: (C)2011,JPO&INPIT

Description

本発明はアタッチメントレンズ及びそれを装着した蛍光測定装置に関するものであり、例えば、蛍光撮影装置,蛍光光度測定装置等の蛍光測定装置、及びそれに搭載される撮像光学系において光学性能を補正するためのアタッチメントレンズに関するものである。   The present invention relates to an attachment lens and a fluorescence measurement device equipped with the attachment lens. For example, a fluorescence measurement device such as a fluorescence imaging device or a fluorescence photometric measurement device, and an imaging optical system mounted thereon, for correcting optical performance. The present invention relates to an attachment lens.

生化学・分子生物学の分野では、励起光により自ら蛍光発光する試料や蛍光試薬で染色された試料を撮影して、その濃度,形状,色等を測定する蛍光測定装置が使用されている。蛍光測定装置を用いた測定では、試料(例えば培養細胞)が多数のウェルに収容されたマイクロプレート(細胞培養容器)の全体をカメラユニットで一時に撮影し、その撮影画像に基づいて各ウェルに収容されている試料の濃度,形状,色,化学発光・蛍光発光の強度等を定量することが一般に行われている。   In the field of biochemistry and molecular biology, a fluorescence measuring apparatus is used that photographs a sample that emits fluorescence by excitation light or a sample that is stained with a fluorescent reagent and measures its concentration, shape, color, and the like. In measurement using a fluorescence measuring apparatus, a whole microplate (cell culture container) in which a sample (for example, cultured cells) is accommodated in a number of wells is photographed at once with a camera unit, and each well is measured based on the photographed image. In general, the concentration, shape, color, chemiluminescence / fluorescence intensity, etc. of the contained sample are quantified.

蛍光測定装置による撮影を普通の撮影レンズで行うと、マイクロプレートの周辺部(容器内のウェルで容器外縁付近)に位置する試料から撮影レンズに入る主光線が、撮影レンズの光軸に対して斜めになる。このため、ウェルの壁面が写り込んでしまって、ウェルの底面が撮影できなくなる。これを防ぐために、マイクロプレートの近傍にフレネルレンズ等のアタッチメントレンズを設置して、物体側にテレセントリックにする補正が一般的に行われている(例えば、特許文献1,2参照。)。また、既存の撮像レンズをマスターレンズとしてその補正をアタッチメントレンズで行うのではなく、撮像光学系全体として新規に設計したものも従来より提案されている(例えば、特許文献3,4参照。)。   When photographing with a fluorescence measuring device is performed with an ordinary photographing lens, the principal ray entering the photographing lens from the sample located in the periphery of the microplate (near the outer edge of the container in the well in the container) is relative to the optical axis of the photographing lens. It becomes diagonal. For this reason, the wall surface of the well is reflected, and the bottom surface of the well cannot be photographed. In order to prevent this, correction is generally performed by installing an attachment lens such as a Fresnel lens in the vicinity of the microplate to make it telecentric on the object side (see, for example, Patent Documents 1 and 2). Further, instead of using an existing imaging lens as a master lens and correcting it with an attachment lens, a newly designed imaging optical system as a whole has been proposed (see, for example, Patent Documents 3 and 4).

特開2000−74837号公報JP 2000-74837 A 特開2004−151565号公報JP 2004-151565 A 米国特許第6,198,577号明細書US Pat. No. 6,198,577 特開2003−195166号公報JP 2003-195166 A

特許文献1,2で提案されているような構成は簡便であるが、アタッチメントレンズのレンズ枚数が少ないため、後続のマスターレンズとの瞳のマッチングを良好に行うことができない。つまり、マスターレンズの入射位置付近での瞳の球面収差を補正することができず、マイクロプレートの周辺部に位置する試料からの主光線が強く曲げられてしまう。このため、マスターレンズに対する入射光量が減って、像面での周辺光量の低下が生じることになる。   The configurations proposed in Patent Documents 1 and 2 are simple, but the number of lenses of the attachment lens is small, so that the pupil matching with the subsequent master lens cannot be performed satisfactorily. In other words, the spherical aberration of the pupil in the vicinity of the incident position of the master lens cannot be corrected, and the principal ray from the sample located in the peripheral portion of the microplate is strongly bent. For this reason, the amount of light incident on the master lens is reduced, and the amount of peripheral light on the image plane is reduced.

また、落射照明(同軸照明)で励起光を照射するタイプの蛍光測定装置には、励起フィルタ,ダイクロイックミラー及び吸収フィルタを1つにユニット化した蛍光キューブを備えたものが知られているが、特許文献1,2で提案されているような構成において、マスターレンズの直前に蛍光キューブを配置すると、ダイクロイックミラーに対する主光線の入射角が物高により異なるため、カラーシェーディングが大きく発生することになる。つまり、マイクロプレートの中心部と周辺部とでダイクロイックミラーへの光線の入射角が大きく異なるため、マイクロプレートの中心部から離れた試料ほど光のスペクトルが短波長側にシフトしてしまうのである。   In addition, as a type of fluorescence measuring apparatus that irradiates excitation light with epi-illumination (coaxial illumination), one that includes a fluorescence cube in which an excitation filter, a dichroic mirror, and an absorption filter are unitized is known. In a configuration as proposed in Patent Documents 1 and 2, if a fluorescent cube is arranged immediately before the master lens, the color ray shading occurs greatly because the incident angle of the principal ray on the dichroic mirror varies depending on the object height. . In other words, since the incident angle of the light beam to the dichroic mirror is greatly different between the central portion and the peripheral portion of the microplate, the light spectrum shifts to the short wavelength side as the sample is farther from the central portion of the microplate.

特許文献3で提案されている構成では、光束がレンズ枠でケラレないように撮像光学系全体を専用レンズとして構成しているが、寸法が大きく(全長1.6m)、レンズ枚数が多くて重量が重いという問題がある。また、複雑な構成をとっているため組み立てが困難であり、蛍光キューブを配置するためのスペースの確保も困難である。   In the configuration proposed in Patent Document 3, the entire imaging optical system is configured as a dedicated lens so that the luminous flux is not vignetted by the lens frame, but the size is large (total length 1.6 m), the number of lenses is large, and the weight is large. There is a problem that is heavy. Moreover, since it has a complicated configuration, it is difficult to assemble, and it is difficult to secure a space for arranging the fluorescent cubes.

特許文献4で提案されている構成では、試料側のコリメータ部を構成している第1〜第3レンズ群がそれぞれ独立に収差補正されているため、レンズ枚数が多くて重量が重いという問題がある。また、レンズ枚数が多い分だけ空気との接触面数が多いため、表面反射に起因する迷光の発生量も多く、微弱蛍光撮影には不利な構成となっている。   In the configuration proposed in Patent Document 4, the first to third lens groups constituting the sample-side collimator section are independently subjected to aberration correction, so there is a problem that the number of lenses is large and the weight is heavy. is there. In addition, since the number of contact surfaces with the air is increased by the number of lenses, the amount of stray light generated due to surface reflection is large, which is disadvantageous for weak fluorescence photography.

本発明はこのような状況に鑑みてなされたものであって、その目的は、少ないレンズ枚数で軽量小型化を達成しながら、周辺光量の低下抑制、カラーシェーディングの発生抑制、及び広い面積の撮影を可能とする高性能のアタッチメントレンズと、それを備えた蛍光測定装置を提供することにある。   The present invention has been made in view of such a situation, and the object thereof is to achieve a reduction in the amount of peripheral light, suppression of occurrence of color shading, and shooting of a large area while achieving light weight and downsizing with a small number of lenses. It is an object to provide a high-performance attachment lens capable of realizing the above and a fluorescence measuring apparatus including the same.

上記目的を達成するために、本発明のアタッチメントレンズは、マスターレンズと組み合わされた状態で測定対象物の蛍光像を形成する光学性能補正用のアタッチメントレンズであって、測定対象物側にテレセントリックであり、射出瞳を前記マスターレンズの入射瞳付近に有し、光学的なパワーを有するレンズ群として、測定対象物側から順に、正パワーの第1群と、負パワーの第2群と、正パワーの第3群と、の3群を有し、前記第1群が1枚のフレネルレンズ又は同じ硝材から成る2枚以上のレンズで構成されており、前記第2群及び第3群がそれぞれ1枚の単レンズで構成されていることを特徴とする。   In order to achieve the above object, an attachment lens of the present invention is an attachment lens for optical performance correction that forms a fluorescent image of a measurement object in combination with a master lens, and is telecentric on the measurement object side. Yes, a lens group having an exit pupil near the entrance pupil of the master lens and having optical power, in order from the measurement object side, a first group of positive power, a second group of negative power, and a positive group The third group of power, and the first group is composed of one Fresnel lens or two or more lenses made of the same glass material, and the second group and the third group are respectively It is composed of a single lens.

この構成によると、測定対象物側にテレセントリックであり、射出瞳がマスターレンズの入射瞳付近に位置しているため、大きい面積に広がって位置する測定対象物の全体を一度に撮影することができる。正負正のパワー配置を有しているため、少ないレンズ枚数で倍率の色消しを行うことができ、また、撮影画像の周辺光量の低下やカラーシェーディングの発生を抑えることができる。第1群が1枚のフレネルレンズ又は同じ硝材から成る2枚以上のレンズで構成されており、第2群及び第3群がそれぞれ1枚の単レンズで構成されているため、レンズ枚数の削減が可能になるとともに、ガラスと空気との境界面による不要な表面反射が低減されて、より微弱な蛍光を発生する測定対象物の撮影が可能となる。   According to this configuration, since the object to be measured is telecentric and the exit pupil is located near the entrance pupil of the master lens, the entire measurement object positioned over a large area can be photographed at a time. . Since it has a positive and negative power arrangement, it is possible to erase the magnification with a small number of lenses, and it is possible to suppress a decrease in the amount of peripheral light of the captured image and the occurrence of color shading. The first group is composed of one Fresnel lens or two or more lenses made of the same glass material, and the second group and the third group are each composed of one single lens, so the number of lenses is reduced. In addition, unnecessary surface reflection due to the interface between the glass and air is reduced, and a measurement object that generates weaker fluorescence can be imaged.

本発明のアタッチメントレンズは、測定対象物を照明する励起光と、測定対象物で発生した蛍光と、の光路分離を行う蛍光キューブを、前記第3群とマスターレンズとの間に有する構成であってもよい。   The attachment lens of the present invention has a configuration in which a fluorescence cube that performs optical path separation between excitation light that illuminates the measurement object and fluorescence generated in the measurement object is provided between the third group and the master lens. May be.

本発明のアタッチメントレンズでは蛍光キューブを配置するためのスペースの確保が容易であるため、この構成によると、カラーシェーディングの発生量を低下させることができ、マスターレンズのレンズ枠のケラレによる周辺光量低下も抑えることができる。   In the attachment lens of the present invention, it is easy to secure a space for placing the fluorescent cube. Therefore, according to this configuration, the amount of color shading can be reduced, and the amount of peripheral light is reduced due to vignetting of the lens frame of the master lens. Can also be suppressed.

本発明のアタッチメントレンズは、以下の条件式(1)を満足することが好ましい。
|φ1+φ2+φ3|<0.002 …(1)
ただし、
φ1:第1群のパワー(mm-1)、
φ2:第2群のパワー(mm-1)、
φ3:第3群のパワー(mm-1)、
である。
The attachment lens of the present invention preferably satisfies the following conditional expression (1).
| Φ1 + φ2 + φ3 | <0.002 (1)
However,
φ1: Power of the first group (mm -1 ),
φ2: Power of second group (mm −1 ),
φ3: Third group power (mm −1 ),
It is.

この構成によると、像面湾曲の良好な補正が可能となる。   According to this configuration, it is possible to satisfactorily correct field curvature.

本発明のアタッチメントレンズは、以下の条件式(2)を満足することが好ましい。
d3>40 …(2)
ただし、
d3:第3群からアタッチメントレンズの射出瞳までの間隔(mm)、
である。
The attachment lens of the present invention preferably satisfies the following conditional expression (2).
d3> 40 (2)
However,
d3: Distance from the third group to the exit pupil of the attachment lens (mm),
It is.

この構成によると、励起光と蛍光との光路分離を良好に行うためのスペースを確保することができる。   According to this configuration, a space for satisfactorily separating the optical path between excitation light and fluorescence can be secured.

本発明のアタッチメントレンズは、以下の条件式(3)〜(6)を満足することが好ましい。
ν1≧55 …(3)
ν2≧55 …(4)
ν3≧55 …(5)
|ν2−ν3|≦20 …(6)
ただし、
ν1:第1群のアッベ数、
ν2:第2群のアッベ数、
ν3:第3群のアッベ数、
である。
The attachment lens of the present invention preferably satisfies the following conditional expressions (3) to (6).
ν1 ≧ 55 (3)
ν2 ≧ 55 (4)
ν3 ≧ 55 (5)
| Ν2-ν3 | ≦ 20 (6)
However,
ν1: Abbe number of the first group,
ν2: Abbe number of the second group,
ν3: Abbe number of the third group,
It is.

この構成によると、倍率色収差を良好に補正することが可能となる。   According to this configuration, it is possible to satisfactorily correct lateral chromatic aberration.

本発明の蛍光測定装置は、本発明に係るアタッチメントレンズと、そのアタッチメントレンズをコリメータ光学系として瞳がマッチングするように配置されたマスターレンズと、マスターレンズによって結像した蛍光像を記録する撮像装置と、蛍光試料を励起するための照明装置と、を備えたことを特徴とする。   The fluorescence measurement device of the present invention includes an attachment lens according to the present invention, a master lens arranged so that the pupil matches the attachment lens as a collimator optical system, and an imaging device that records a fluorescence image formed by the master lens. And an illumination device for exciting the fluorescent sample.

この構成によると、高画質の蛍光像や正確な測定結果を得ることが可能となる。   According to this configuration, a high-quality fluorescent image and an accurate measurement result can be obtained.

本発明によれば、少ないレンズ枚数で軽量小型化を達成しながら、周辺光量の低下抑制、カラーシェーディングの発生抑制、及び広い面積の撮影を可能とする高性能のアタッチメントレンズを実現することができる。そして、本発明に係るアタッチメントレンズを備えることにより、高画質の蛍光像や正確な測定結果が得られる蛍光測定装置を実現することが可能となる。   According to the present invention, it is possible to realize a high-performance attachment lens that can reduce the amount of peripheral light, suppress the occurrence of color shading, and can shoot a wide area while achieving light weight and size reduction with a small number of lenses. . And by providing the attachment lens which concerns on this invention, it becomes possible to implement | achieve the fluorescence measuring apparatus from which a high quality fluorescent image and an exact measurement result are obtained.

本発明に係る蛍光測定装置の概略構成例を模式的に示す斜視図。The perspective view which shows typically the example of schematic structure of the fluorescence measuring apparatus which concerns on this invention. 本発明に係る蛍光測定装置の概略構成例を模式的に示す水平断面図。The horizontal sectional view which shows typically the example of schematic structure of the fluorescence measuring apparatus which concerns on this invention. 本発明に係る蛍光測定装置の概略構成例を模式的に示す垂直断面図。1 is a vertical sectional view schematically showing a schematic configuration example of a fluorescence measuring apparatus according to the present invention. 第1の実施の形態(実施例1)の光学構成を示す光路図。1 is an optical path diagram showing an optical configuration of a first embodiment (Example 1). 第2の実施の形態(実施例2)の光学構成を示す光路図。The optical path figure which shows the optical structure of 2nd Embodiment (Example 2). 実施例1の球面収差,非点収差,歪曲収差及び倍率色収差を示す収差図。FIG. 3 is an aberration diagram illustrating spherical aberration, astigmatism, distortion, and lateral chromatic aberration of Example 1. 実施例2の球面収差,非点収差,歪曲収差及び倍率色収差を示す収差図。FIG. 6 is an aberration diagram illustrating spherical aberration, astigmatism, distortion, and lateral chromatic aberration in Example 2. 実施例1の横収差図。FIG. 4 is a lateral aberration diagram of Example 1. 実施例2の横収差図。FIG. 4 is a lateral aberration diagram of Example 2.

以下、本発明に係るアタッチメントレンズ,蛍光測定装置等を説明する。本発明に係るアタッチメントレンズは、マスターレンズと組み合わされた状態で測定対象物の蛍光像を形成する光学性能補正用のアタッチメントレンズであって、測定対象物側にテレセントリックであり、射出瞳を前記マスターレンズの入射瞳付近に有している。そして、光学的なパワーを有するレンズ群として、測定対象物側から順に、正パワーの第1群と、負パワーの第2群と、正パワーの第3群と、の3群を有し(パワー:焦点距離の逆数で定義される量)、前記第1群が1枚のフレネルレンズ又は同じ硝材から成る2枚以上のレンズで構成されており、前記第2群及び第3群がそれぞれ1枚の単レンズで構成されている。   Hereinafter, an attachment lens, a fluorescence measuring apparatus, and the like according to the present invention will be described. An attachment lens according to the present invention is an optical performance correction attachment lens that forms a fluorescent image of a measurement object in a state of being combined with a master lens, is telecentric on the measurement object side, and an exit pupil is disposed on the master lens. Near the entrance pupil of the lens. And as a lens group having optical power, there are three groups of a first group of positive power, a second group of negative power, and a third group of positive power in order from the measurement object side ( Power: an amount defined by the reciprocal of the focal length), the first group is composed of one Fresnel lens or two or more lenses made of the same glass material, and each of the second group and the third group is 1 It consists of a single lens.

測定対象物側にテレセントリックなアタッチメントレンズを、その射出瞳がマスターレンズの入射瞳付近に位置するように配置すると、測定対象物(マイクロプレート全域の試料)のどの部分に位置する試料についても、アタッチメントレンズに入る主光線が光軸に対して平行になるため、マイクロプレートのウェル底面の撮影を画面全体について良好に行うことが可能となる。したがって、大きい面積に広がって位置する測定対象物の全体を一度に撮影することができる。   When a telecentric attachment lens is placed on the measurement object side so that its exit pupil is located near the entrance pupil of the master lens, it can be attached to any part of the measurement object (sample on the entire microplate). Since the chief ray entering the lens is parallel to the optical axis, it is possible to satisfactorily capture the entire bottom surface of the well of the microplate. Therefore, it is possible to take an image of the entire measurement object located over a large area at a time.

正負正のパワー配置を採用することにより、マスターレンズとの組み合わせ状態で効果的な光学性能の補正が可能なコリメータ光学系を構成することができる。物体側にテレセントリックなアタッチメントレンズが、測定対象物から発生する蛍光を集光して射出瞳から略平行光として射出するように、コリメータ光学系として作用する構成にすれば、マスターレンズと組み合わせたときの光学系全体の結像倍率βは、β=−fm/fa(fm:マスターレンズの焦点距離、fa:アタッチメントレンズの焦点距離)となる。したがって、マスターレンズと組み合わせたときの総合倍率をβ=−fm/faで決定することが可能となるため、タンデム系の構成をとることも可能となる。例えば、撮影対象物を一般的な大きさのマイクロプレート128mm×85mmとし、撮像素子を2/3インチCCD素子(受光面サイズ8.8mm×6.6mm)とすると、光学系全体の結像倍率を0.069倍(=8.8mm/128mm)より小さくすれば、容器全体の撮影が可能となる。このことから、後述する実施例ではマスターレンズの焦点距離fm=28mm、アタッチメントレンズの焦点距離fa≒500mmとして、結像倍率を約−0.056倍としている。   By adopting positive and negative power arrangement, it is possible to configure a collimator optical system capable of effectively correcting optical performance in combination with the master lens. When combined with a master lens, the telecentric attachment lens on the object side acts as a collimator optical system so that the fluorescence generated from the measurement object is collected and emitted from the exit pupil as approximately parallel light. The imaging magnification β of the entire optical system is β = −fm / fa (fm: focal length of the master lens, fa: focal length of the attachment lens). Accordingly, since the total magnification when combined with the master lens can be determined by β = −fm / fa, a tandem configuration can also be adopted. For example, if the object to be photographed is a microplate of general size 128 mm × 85 mm and the image sensor is a 2/3 inch CCD element (light receiving surface size 8.8 mm × 6.6 mm), the imaging magnification of the entire optical system If the value is smaller than 0.069 times (= 8.8 mm / 128 mm), the entire container can be photographed. For this reason, in the embodiment described later, the focal length fm of the master lens is 28 mm, the focal length of the attachment lens is fa≈500 mm, and the imaging magnification is about −0.056.

また、正負正のパワー配置を有するアタッチメントレンズでは、測定対象物からの近軸光線の高さが第1群,第2群及び第3群のすべてについて正の値となり、瞳からの近軸光線の高さが第1群,第2群及び第3群のすべてについて負の値となるため、パワー配置が正負正であることと合わせて、倍率の色収差の発生の符号が負正負となることにより、3つのレンズ群で倍率色収差を打ち消し合う作用が発生する。この作用により、貼り合わせレンズを使用しなくても、パワーとアッベ数の条件から3群全体で倍率の色消しを行うことが可能となる。したがって、それぞれのレンズ群で色消しを行う必要がないので、使用するレンズの枚数を減らすことができる。   In addition, in the attachment lens having the positive and negative power arrangement, the height of the paraxial light beam from the measurement object becomes a positive value for all of the first group, the second group, and the third group, and the paraxial light beam from the pupil. Is negative for all of the first group, the second group, and the third group. Therefore, the sign of the occurrence of chromatic aberration of magnification is negative and positive in addition to the positive and negative power arrangement. As a result, an effect of canceling out the lateral chromatic aberration by the three lens groups occurs. With this action, it is possible to achromatic all magnifications in the entire three groups from the conditions of power and Abbe number without using a bonded lens. Therefore, since it is not necessary to achromatic each lens group, the number of lenses used can be reduced.

倍率色収差を補正するために、第2,第3レンズ群に正負の組み合わせレンズを用いると、レンズ枚数が増えてガラスと空気との境界面での表面反射量が大きくなる。このため、微弱蛍光(照明エネルギーの数千分の1〜数万分の1)の撮影に正負の組み合わせレンズは適していない。しかも、コリメータ部には有効径が大きなレンズが必要とされるため、正負の組み合わせレンズや正負の貼り合わせレンズはレンズ部及び鏡筒部の重量増加を招く。それに対し、第1群を1枚のフレネルレンズ又は同じ硝材から成る2枚以上のレンズで構成し、第2群及び第3群をそれぞれ1枚の単レンズで構成すると、レンズ枚数の削減が可能になるとともに、ガラスと空気との境界面による不要な表面反射を低減することができるため、より微弱な蛍光を発生する測定対象物の撮影が可能となる。   If positive and negative combination lenses are used in the second and third lens groups in order to correct lateral chromatic aberration, the number of lenses increases and the amount of surface reflection at the interface between glass and air increases. For this reason, positive and negative combination lenses are not suitable for photographing weak fluorescence (one thousandths to several tens of thousands of illumination energy). In addition, since a lens having a large effective diameter is required for the collimator unit, a positive / negative combination lens or a positive / negative bonded lens increases the weight of the lens unit and the lens barrel unit. On the other hand, if the first group is composed of one Fresnel lens or two or more lenses made of the same glass material, and the second group and the third group are each composed of one single lens, the number of lenses can be reduced. In addition, since unnecessary surface reflection due to the interface between the glass and air can be reduced, it is possible to image a measurement object that generates weaker fluorescence.

アタッチメントレンズによる補正を正パワーのみで行おうとすると、画面周辺部ほど光束が強く曲げられるため(瞳の球面収差)、画面中心部に比べて画面周辺部ほどマスターレンズに入射する光量が減ってしまう。それに対し、正負正のパワー配置を有するアタッチメントレンズでは、正パワーのレンズ群で発生する瞳の球面収差を負パワーの第2群で補正することができるので、マスターレンズとの瞳のマッチングが良くなり、測定対象物からの光束が蛍光キューブの開口部やマスターレンズの鏡筒等でケラレて周辺光量の低下が起こるのを防ぐことができる。したがって、撮影画像の周辺光量の低下を抑えた蛍光撮影が可能となる。   If correction with an attachment lens is performed with only positive power, the luminous flux is strongly bent at the periphery of the screen (spherical aberration of the pupil), so the amount of light incident on the master lens is reduced at the periphery of the screen compared to the center of the screen. . On the other hand, in an attachment lens having positive and negative power arrangements, the spherical aberration of the pupil that occurs in the positive power lens group can be corrected by the second group of negative power, so the matching of the pupil with the master lens is good Therefore, it is possible to prevent the light flux from the measurement object from being vignetted at the opening of the fluorescent cube, the lens barrel of the master lens, and the like, thereby causing a decrease in the peripheral light amount. Therefore, it is possible to perform fluorescence imaging while suppressing a decrease in the amount of peripheral light of the captured image.

落射照明で励起光を照射するタイプの蛍光測定装置には、励起フィルタ,ダイクロイックミラー及び吸収フィルタを1つにユニット化した蛍光キューブを備えたものが知られているが、マスターレンズの直前に蛍光キューブを配置すると、前述したように、ダイクロイックミラーに対する主光線の入射角が物高により異なるため、カラーシェーディングが大きく発生することになる。それに対し、正負正のパワー配置を有するアタッチメントレンズでは、蛍光キューブ設置位置を光束が通過する前に、第1群で折り曲げた軸外光束の角度を第2群の負パワーで小さくすることができるので、ダイクロイックミラーへの光線入射角度を小さくした状態に揃えることができる。したがって、カラーシェーディングの発生量を低下させることができる。マスターレンズへの光線入射角も小さくなるので、マスターレンズのレンズ枠のケラレによる周辺光量低下も抑えることができる。   A type of fluorescence measuring apparatus that irradiates excitation light with epi-illumination is known to have a fluorescence cube that is a unit of excitation filter, dichroic mirror, and absorption filter. When the cube is arranged, as described above, since the incident angle of the principal ray with respect to the dichroic mirror varies depending on the object height, a large amount of color shading occurs. On the other hand, in the attachment lens having positive and negative power arrangement, the angle of the off-axis light beam bent in the first group can be reduced by the negative power of the second group before the light beam passes through the fluorescent cube installation position. Therefore, it is possible to make the incident angle of light incident on the dichroic mirror small. Therefore, the amount of color shading generated can be reduced. Since the light incident angle to the master lens is also reduced, it is possible to suppress a decrease in the amount of peripheral light due to vignetting of the lens frame of the master lens.

上述した特徴的構成によると、少ないレンズ枚数で軽量小型化を達成しながら、周辺光量の低下抑制、カラーシェーディングの発生抑制、及び広い面積の撮影を可能とする高性能のアタッチメントレンズを実現することができる。また、既存の撮影レンズ(例えば、一般的なライカ判等の写真撮影用レンズ)をマスターレンズ(主レンズ系)としてそのまま使用することができ、マスターレンズと組み合わされた状態で測定対象物の蛍光像を形成する光学性能補正用アタッチメントレンズとして、充分な光学性能を維持しながら枚数削減による光量低下の防止,コンパクト化,低コスト化等を達成することができる。そして、本発明に係るアタッチメントレンズを備えることにより、高画質の蛍光像や正確な測定結果が得られる蛍光測定装置を実現することが可能となる。こういった効果をバランス良く得るとともに、更に高い光学性能,軽量小型化等を達成するための条件等を以下に説明する。   According to the characteristic configuration described above, a high-performance attachment lens that can reduce the amount of peripheral light, suppress the occurrence of color shading, and shoot a large area while achieving light weight and size reduction with a small number of lenses. Can do. In addition, an existing photographing lens (for example, a general Leica-like photographic lens) can be used as it is as a master lens (main lens system), and the fluorescence of the measurement object is combined with the master lens. As an optical performance correction attachment lens for forming an image, it is possible to achieve a reduction in the amount of light by reducing the number of sheets, a reduction in size, a reduction in cost, etc. while maintaining a sufficient optical performance. And by providing the attachment lens which concerns on this invention, it becomes possible to implement | achieve the fluorescence measuring apparatus from which a high quality fluorescent image and an exact measurement result are obtained. The conditions for achieving such effects in a well-balanced manner and achieving higher optical performance, lighter weight, and the like will be described below.

アタッチメントレンズは、測定対象物を照明する励起光と、測定対象物で発生した蛍光と、の光路分離を行う蛍光キューブを、前記第3群とマスターレンズとの間に有することが望ましい。前述したアタッチメントレンズの構成によると、蛍光キューブを配置するためのスペースの確保が容易であり、第3群とマスターレンズとの間に蛍光キューブを配置しても、前述したように、カラーシェーディングの発生量を低下させることができ、マスターレンズのレンズ枠のケラレによる周辺光量低下も抑えることができる。したがって、励起光と蛍光との光路分離の位置を第3群とマスターレンズとの間に設定することが好ましい。   It is desirable that the attachment lens has a fluorescence cube for performing optical path separation between excitation light for illuminating the measurement object and fluorescence generated by the measurement object between the third group and the master lens. According to the configuration of the attachment lens described above, it is easy to secure a space for arranging the fluorescent cube. Even if the fluorescent cube is arranged between the third group and the master lens, as described above, the color shading can be performed. The amount of generated light can be reduced, and a decrease in peripheral light amount due to vignetting of the lens frame of the master lens can also be suppressed. Therefore, it is preferable to set the position of the optical path separation between the excitation light and the fluorescence between the third group and the master lens.

以下の条件式(1)を満足することが望ましい。
|φ1+φ2+φ3|<0.002 …(1)
ただし、
φ1:第1群のパワー(mm-1)、
φ2:第2群のパワー(mm-1)、
φ3:第3群のパワー(mm-1)、
である。
It is desirable to satisfy the following conditional expression (1).
| Φ1 + φ2 + φ3 | <0.002 (1)
However,
φ1: Power of the first group (mm -1 ),
φ2: Power of second group (mm −1 ),
φ3: Third group power (mm −1 ),
It is.

条件式(1)は、アタッチメントレンズのペッツバール和を0に近い値にする上で好ましい条件範囲を規定している。撮像素子の大きさ:10mm(受光面の対角サイズ)とし、マスターレンズとして焦点距離28mmのダブルガウス又はレトロフォーカスタイプの結像レンズを使用すると仮定した場合、マスターレンズが持つペッツバール和はおよそ0.005〜0.008の値である。また、アタッチメントレンズのペッツバール和:Pzは、Pz=φ1/n1+φ2/n2+φ3/n3(n1:第1群の屈折率、n2:第2群の屈折率、n3:第3群の屈折率)であるが、ガラスの屈折率をn1=n2=n3=n=1.5と近似すると、Pz=0となる条件は、n(φ1+φ2+φ3)=φ1+φ2+φ3=0と表現できる。条件式(1)が成り立っていれば、アタッチメントレンズのペッツバール和はおよそPz<0.002/n(=1.5)=0.0013となり、マスターレンズのペッツバール和に大きな影響を与えることは無い。逆に、この条件範囲から外れるにしたがって、アタッチメントレンズ部のペッツバール和が正又は負で大きくなり、マスターレンズのペッツバール和に与える影響が大きくなってきてマスターレンズの収差補正のバランスを崩してしまう。したがって、条件式(1)を満たすことにより、像面湾曲の良好な補正が可能となる。   Conditional expression (1) defines a preferable condition range for setting the Petzval sum of the attachment lens to a value close to zero. Assuming that the size of the image sensor is 10 mm (diagonal size of the light receiving surface) and a double Gauss or retrofocus type imaging lens having a focal length of 28 mm is used as the master lens, the Petzval sum of the master lens is approximately 0. A value of 0.005 to 0.008. Also, the Petzval sum of the attachment lens: Pz is Pz = φ1 / n1 + φ2 / n2 + φ3 / n3 (n1: refractive index of the first group, n2: refractive index of the second group, n3: refractive index of the third group). However, when the refractive index of glass is approximated as n1 = n2 = n3 = n = 1.5, the condition of Pz = 0 can be expressed as n (φ1 + φ2 + φ3) = φ1 + φ2 + φ3 = 0. If the conditional expression (1) is satisfied, the Petzval sum of the attachment lens is approximately Pz <0.002 / n (= 1.5) = 0.0013, which does not greatly affect the Petzval sum of the master lens. . On the other hand, the Petzval sum of the attachment lens portion increases positively or negatively as it deviates from this condition range, and the influence on the Petzval sum of the master lens becomes large, and the aberration correction balance of the master lens is lost. Therefore, when the conditional expression (1) is satisfied, it is possible to correct the field curvature favorably.

以下の条件式(2)を満足することが望ましい。
d3>40 …(2)
ただし、
d3:第3群からアタッチメントレンズの射出瞳までの間隔(mm)、
である。
It is desirable to satisfy the following conditional expression (2).
d3> 40 (2)
However,
d3: Distance from the third group to the exit pupil of the attachment lens (mm),
It is.

条件式(2)は、開口絞り位置付近に蛍光キューブを設置するためのスペースを確保する上で好ましい条件範囲を規定している。既存のマスターレンズに前置するアタッチメントレンズを想定した場合、条件式(2)を満たすスペースを確保すれば、蛍光キューブで励起光と蛍光との光路分離を良好に行うことができる。また、90>d3>60を満たすことが更に好ましい。   Conditional expression (2) defines a preferable condition range for securing a space for installing the fluorescent cube in the vicinity of the aperture stop position. Assuming an attachment lens placed in front of an existing master lens, if a space satisfying conditional expression (2) is secured, the optical path separation between the excitation light and the fluorescence can be performed satisfactorily with the fluorescent cube. Further, it is more preferable to satisfy 90> d3> 60.

以下の条件式(3)〜(6)を満足することが望ましい。
ν1≧55 …(3)
ν2≧55 …(4)
ν3≧55 …(5)
|ν2−ν3|≦20 …(6)
ただし、
ν1:第1群のアッベ数、
ν2:第2群のアッベ数、
ν3:第3群のアッベ数、
である。
It is desirable to satisfy the following conditional expressions (3) to (6).
ν1 ≧ 55 (3)
ν2 ≧ 55 (4)
ν3 ≧ 55 (5)
| Ν2-ν3 | ≦ 20 (6)
However,
ν1: Abbe number of the first group,
ν2: Abbe number of the second group,
ν3: Abbe number of the third group,
It is.

例えば、測定対象物が細胞を蛍光試薬で染色した試料である場合、蛍光試薬は励起光を受けると離散的な点光源の集合として撮影されるので、倍率色収差があるとRGB合成時に点像のズレが目立つことになる。つまり、複数の蛍光試薬で染色した画像(単色画像)をRGB合成し、重ね合わせて細胞の分布の様子を見る等の画像処理操作を行った際、色ズレが生じてしまう。これを主として補正する必要がある。条件式(3)〜(6)は、第2群及び第3群がそれぞれ1枚の単レンズから成る構成において、倍率色消しを効果的に行う上で好ましい条件範囲を規定している。条件式(3)〜(5)を満たすことにより、各レンズ群を紫外光の透過率の良いクラウン系や合成石英の光学ガラスで構成することが可能になる。条件式(6)は、条件式(3)〜(5)を満たすときに、第2群と第3群により倍率の色収差が打ち消しされる条件を規定している。この条件式(6)の条件範囲を外れると、倍率の色収差が大きくなってしまうため、簡単なレンズ構成では収差補正が困難になる。したがって、条件式(3)〜(6)を満たすことにより、倍率色収差を良好に補正することが可能となる。   For example, when the measurement object is a sample obtained by staining cells with a fluorescent reagent, the fluorescent reagent is photographed as a set of discrete point light sources when receiving excitation light. Misalignment will be noticeable. In other words, when image processing operations such as combining RGB images (monochromatic images) stained with a plurality of fluorescent reagents and superimposing them to see the state of cell distribution are performed, color misregistration occurs. This mainly needs to be corrected. Conditional expressions (3) to (6) define a preferable condition range for effectively performing magnification achromaticity in a configuration in which the second group and the third group are each composed of one single lens. By satisfying the conditional expressions (3) to (5), it is possible to configure each lens group with a crown system or a synthetic quartz optical glass having a high ultraviolet light transmittance. Conditional expression (6) defines a condition in which the chromatic aberration of magnification is canceled by the second group and the third group when the conditional expressions (3) to (5) are satisfied. If the condition range of the conditional expression (6) is not satisfied, the chromatic aberration of magnification increases, so that it is difficult to correct aberrations with a simple lens configuration. Therefore, it is possible to satisfactorily correct lateral chromatic aberration by satisfying conditional expressions (3) to (6).

上記と同様の観点から、ν1>60,ν2>50,ν3>60を満たすことが好ましく、58<ν1<70,56<ν2<70,58<ν3<70を満たすことが更に好ましい。また、上記アッベ数の条件式(3)〜(6)を満たす硝材の一般性を考慮した場合、各レンズ群に用いるレンズの屈折率nは、n<1.55を満たすことが好ましい。   From the same viewpoint as described above, it is preferable to satisfy ν1> 60, ν2> 50, ν3> 60, and it is further preferable to satisfy 58 <ν1 <70, 56 <ν2 <70, 58 <ν3 <70. In consideration of the generality of the glass material that satisfies the above Abbe number conditional expressions (3) to (6), the refractive index n of the lens used in each lens group preferably satisfies n <1.55.

例えば、利用が容易なマスターレンズの焦点距離fm=28mmと、2/3インチ及び1/2インチのCCD素子での撮像に好適な結像倍率となる範囲と、を考慮すると、以下の条件式(7)を満足することが望ましく、条件式(3)〜(7)を満足することが更に望ましい。
400≦fa≦600 …(7)
ただし、
fa:アタッチメントレンズの焦点距離(mm)、
である。
For example, in consideration of the focal length fm = 28 mm of an easy-to-use master lens and the range in which the imaging magnification is suitable for imaging with 2/3 inch and 1/2 inch CCD elements, the following conditional expression It is desirable to satisfy (7), and it is more desirable to satisfy conditional expressions (3) to (7).
400 ≦ fa ≦ 600 (7)
However,
fa: Focal length (mm) of the attachment lens,
It is.

蛍光試薬には、Tryptophan,DAPI,FURA2,テトラサイクリン等、紫外励起を必要とするものがある。このため、同軸落射照明を行うように蛍光キューブを絞り位置付近に配置する場合、アタッチメントレンズを構成するガラス材料として、紫外光で透過率が低下しない材料を用いる必要がある。そのようなガラス材料の具体例としては、例えば、第1群に合成石英、第2群にK10、第3群にBK7が挙げられる。ランタンやバリウム等を含む高屈折率のガラスは、紫外光領域で透過率が悪い傾向があるので、紫外励起を必要とする蛍光撮影用には望ましくない。   Some fluorescent reagents require ultraviolet excitation, such as Tryptophan, DAPI, FURA2, and tetracycline. For this reason, when the fluorescent cube is arranged in the vicinity of the aperture position so as to perform coaxial epi-illumination, it is necessary to use a material that does not decrease transmittance with ultraviolet light as a glass material that constitutes the attachment lens. Specific examples of such glass materials include synthetic quartz for the first group, K10 for the second group, and BK7 for the third group. High refractive index glass containing lanthanum, barium, etc. tends to have poor transmittance in the ultraviolet region, and is not desirable for fluorescent imaging that requires ultraviolet excitation.

上述したアタッチメントレンズと、そのアタッチメントレンズをコリメータ光学系として瞳がマッチングするように配置されたマスターレンズと、を備えることにより、高画質の蛍光像や正確な測定結果が得られる蛍光測定装置を実現することが可能となる。その蛍光測定装置の概略構成例を図1〜図3に模式的に示す。図1は蛍光測定装置10の主要部の外観を模式的に示しており、図2は蛍光測定装置10の水平断面構造を模式的に示しており、図3は蛍光測定装置10の垂直断面構造を模式的に示している。   Realizing a fluorescence measurement device that can provide high-quality fluorescence images and accurate measurement results by including the attachment lens described above and a master lens arranged so that the pupil matches the attachment lens as a collimator optical system It becomes possible to do. A schematic configuration example of the fluorescence measuring apparatus is schematically shown in FIGS. 1 schematically shows the external appearance of the main part of the fluorescence measuring apparatus 10, FIG. 2 schematically shows a horizontal sectional structure of the fluorescence measuring apparatus 10, and FIG. 3 shows a vertical sectional structure of the fluorescence measuring apparatus 10. Is schematically shown.

蛍光測定装置10は、光源ユニット1,カメラユニット2,撮像光学系OP等を備えており、撮像光学系OPはアタッチメントレンズPA(補正レンズ系)とマスターレンズ(主レンズ系)PBとで構成されている。アタッチメントレンズPAは、マイクロプレート3側から順に、第1群Gr1,折り返しミラーMR,第2群Gr2,第3群Gr3及び蛍光キューブCUを有しており、光源ユニット1は、ランプ1a,ライトパイプ1b及び集光レンズ1cを有している。   The fluorescence measuring apparatus 10 includes a light source unit 1, a camera unit 2, an image pickup optical system OP, and the like. The image pickup optical system OP includes an attachment lens PA (correction lens system) and a master lens (main lens system) PB. ing. The attachment lens PA has a first group Gr1, a folding mirror MR, a second group Gr2, a third group Gr3, and a fluorescent cube CU in order from the microplate 3 side. The light source unit 1 includes a lamp 1a, a light pipe. 1b and a condenser lens 1c.

蛍光測定装置10は、図1に示すように、光源ユニット1からの白色光L1を蛍光キューブCUで励起光L2に分光変換し、マイクロプレート3上にセットされた試料Sを励起光L2(照明光)で落射照明して蛍光L3(観察光)を発生させる構成になっている。また、蛍光キューブCUを複数装備しており、ターレット式の交換機構(図2,図3中、X:ターレット軸)により複数の蛍光キューブCUのうちの1つを選択して所定位置に交換配置することが可能になっている。   As shown in FIG. 1, the fluorescence measuring apparatus 10 spectrally converts the white light L1 from the light source unit 1 into excitation light L2 with the fluorescence cube CU, and the sample S set on the microplate 3 is excited with light L2 (illumination). It is configured to generate fluorescence L3 (observation light) by epi-illumination with light. In addition, a plurality of fluorescent cubes CU are installed, and one of the fluorescent cubes CU is selected and replaced at a predetermined position by a turret type exchange mechanism (X: turret shaft in FIGS. 2 and 3). It is possible to do.

蛍光キューブCUは、励起フィルタ,ダイクロイックミラー,吸収フィルタ等を内蔵しており、試料Sから発せられた蛍光L3をダイクロイックミラーで励起光L2から光路分離する。また、複数の蛍光キューブCUは、射出する励起光L2の波長が互いに異なるように、内蔵されている励起フィルタ等がそれぞれ異なっている。したがって、前記交換機構で蛍光キューブCUを交換配置することにより、励起光L2及び蛍光L3の波長を切り替えることが可能である。   The fluorescent cube CU incorporates an excitation filter, a dichroic mirror, an absorption filter, and the like, and separates the optical path of the fluorescence L3 emitted from the sample S from the excitation light L2 by the dichroic mirror. Further, the plurality of fluorescent cubes CU have different built-in excitation filters or the like so that the wavelengths of the emitted excitation light L2 are different from each other. Therefore, it is possible to switch the wavelengths of the excitation light L2 and the fluorescence L3 by exchanging the fluorescent cube CU with the exchange mechanism.

光源ユニット1からの白色光L1が蛍光キューブCUに入射して励起フィルタに照射されると、所定波長の励起光L2(例えば青色光)が励起フィルタを透過する。その励起光L2はダイクロイックミラーで反射した後(光軸AXの折り曲げ角度:90°)、蛍光キューブCUから射出し、アタッチメントレンズPAで試料Sに照射される。試料Sには、例えば、青色光の照明光で励起すると緑色光の蛍光が発生するように(短波長励起・長波長発光)、人工骨上に培養した骨芽細胞のカルシウムに結合する蛍光試薬が用いられている。試料Sから発生した蛍光L3(例えば緑色光)は、アタッチメントレンズPAを再び通過した後、蛍光キューブCUに入射してダイクロイックミラーを透過する。そして、S/N比を向上させるための吸収フィルタを透過して、蛍光キューブCUから射出する。蛍光キューブCUを射出した蛍光L3は、マスターレンズPBを通過し、蛍光測定用のカメラユニット2に入射して、撮像素子SRの受光面上に蛍光像IMを形成する。蛍光像IMは撮像素子SRで電気的な信号に変換され、蛍光像IMの撮影,測定,観察等が行われる。   When the white light L1 from the light source unit 1 enters the fluorescent cube CU and is irradiated to the excitation filter, excitation light L2 (for example, blue light) having a predetermined wavelength passes through the excitation filter. The excitation light L2 is reflected by the dichroic mirror (bending angle of the optical axis AX: 90 °), then exits from the fluorescent cube CU, and is irradiated onto the sample S by the attachment lens PA. For the sample S, for example, a fluorescent reagent that binds to calcium of osteoblasts cultured on an artificial bone so that green light fluorescence is generated when excited with blue illumination light (short wavelength excitation / long wavelength light emission). Is used. The fluorescence L3 (for example, green light) generated from the sample S passes through the attachment lens PA again, and then enters the fluorescence cube CU and passes through the dichroic mirror. And it permeate | transmits the absorption filter for improving S / N ratio, and inject | emits from the fluorescent cube CU. The fluorescence L3 emitted from the fluorescence cube CU passes through the master lens PB, enters the fluorescence measurement camera unit 2, and forms a fluorescence image IM on the light receiving surface of the image sensor SR. The fluorescent image IM is converted into an electrical signal by the imaging element SR, and the fluorescent image IM is photographed, measured, observed, and the like.

図4,図5に、撮像光学系OPの具体的な光学構成として、アタッチメントレンズPAの第1,第2の実施の形態を有する撮像光学系OPをそれぞれ光学断面で示す。第1,第2の実施の形態のアタッチメントレンズPAはいずれも、マスターレンズPBと組み合わされた状態で試料Sの蛍光像IMを形成する光学性能補正用のアタッチメントレンズであって、物面OB側にテレセントリックであり、射出瞳をマスターレンズPBの入射瞳付近に有している。また、光学的なパワーを有するレンズ群として、物面OB側から順に、正パワーの第1群Gr1と、負パワーの第2群Gr2と、正パワーの第3群Gr3と、の3群を有し、第1群Gr1が同じ硝材から成る2枚のレンズで構成されており、第2群Gr2及び第3群Gr3がそれぞれ1枚の単レンズで構成されている。   FIGS. 4 and 5 show, as a specific optical configuration of the imaging optical system OP, the imaging optical system OP having the first and second embodiments of the attachment lens PA in an optical cross section. Each of the attachment lenses PA of the first and second embodiments is an optical performance correction attachment lens that forms the fluorescent image IM of the sample S in a state combined with the master lens PB, and is on the object surface OB side. Telecentric and has an exit pupil near the entrance pupil of the master lens PB. Further, as a lens group having optical power, three groups of a first group Gr1 having a positive power, a second group Gr2 having a negative power, and a third group Gr3 having a positive power are sequentially arranged from the object surface OB side. The first group Gr1 is composed of two lenses made of the same glass material, and the second group Gr2 and the third group Gr3 are each composed of a single lens.

マスターレンズPBは、例えば一般的なライカ判等の写真撮影用レンズであり、図4,図5では理想レンズとして示してある。マスターレンズPBに前置されているアタッチメントレンズPAは、いずれの実施の形態においても、第1群Gr1が両凸の正レンズと物体側に凸の正メニスカスレンズから成っており、第2群Gr2が像側に凹の負メニスカスレンズから成っており、第3群Gr3が像側に凸の正メニスカスレンズから成っている。また、第1の実施の形態では球面のみで構成されており、第2の実施の形態では第2群Gr2の像側面と第3群Gr3の像側面が非球面で構成されている。第2の実施の形態では、第2群Gr2の位置が歪曲収差の補正に適した位置からズレるので、それを補正するために、第2群Gr2と第3群Gr3の各単レンズの像側面を非球面としている。また、第1群Gr1と第2群Gr2との間隔をあけて、その空間に90度の折り返しミラーMRを容易に配置できるように構成している。   The master lens PB is a photography lens such as a general Leica size, and is shown as an ideal lens in FIGS. In any of the embodiments, the attachment lens PA disposed in front of the master lens PB is configured such that the first group Gr1 is composed of a biconvex positive lens and a positive meniscus lens convex on the object side, and the second group Gr2. Is composed of a negative meniscus lens concave on the image side, and the third lens unit Gr3 is composed of a positive meniscus lens convex on the image side. In the first embodiment, only the spherical surface is configured. In the second embodiment, the image side surface of the second group Gr2 and the image side surface of the third group Gr3 are configured as aspheric surfaces. In the second embodiment, the position of the second group Gr2 deviates from a position suitable for correction of distortion. In order to correct this, the image side surfaces of the single lenses of the second group Gr2 and the third group Gr3 are corrected. Is an aspherical surface. In addition, the first group Gr1 and the second group Gr2 are spaced from each other, and the 90 degree folding mirror MR can be easily arranged in the space.

アタッチメントレンズPAは、測定対象物S側にテレセントリックであり、射出瞳がマスターレンズPBの入射瞳付近に位置しているため、大きい面積に広がって位置する測定対象物Sの全体を一度に撮影することができる。正負正のパワー配置を有しているため、少ないレンズ枚数で倍率の色消しを行うことができ、また、撮影画像の周辺光量の低下やカラーシェーディングの発生を抑えることができる。第1群Gr1が同じ硝材から成る2枚のレンズで構成されており、第2群Gr2及び第3群Gr3がそれぞれ1枚の単レンズで構成されているため、レンズ枚数の削減が可能になるとともに、ガラスと空気との境界面による不要な表面反射が低減されて、より微弱な蛍光を発生する測定対象物の撮影が可能となる。したがって、少ないレンズ枚数で軽量小型化を達成しながら、周辺光量の低下抑制、カラーシェーディングの発生抑制、及び広い面積の撮影を可能とする高性能のアタッチメントレンズPAが実現される。   Since the attachment lens PA is telecentric on the measurement object S side and the exit pupil is located in the vicinity of the entrance pupil of the master lens PB, the entire measurement object S that is spread over a large area is photographed at a time. be able to. Since it has a positive and negative power arrangement, it is possible to erase the magnification with a small number of lenses, and it is possible to suppress a decrease in the amount of peripheral light of the captured image and the occurrence of color shading. Since the first group Gr1 is composed of two lenses made of the same glass material, and the second group Gr2 and the third group Gr3 are each composed of a single lens, the number of lenses can be reduced. At the same time, unnecessary surface reflection due to the interface between the glass and air is reduced, and it becomes possible to image a measurement object that generates weaker fluorescence. Therefore, a high-performance attachment lens PA that can reduce the amount of peripheral light, suppress the occurrence of color shading, and can shoot a wide area while achieving light weight and downsizing with a small number of lenses is realized.

アタッチメントレンズPAでは、蛍光キューブCUを配置するためのスペースの確保が容易であるため、蛍光キューブCUを第3群Gr3とマスターレンズPBとの間に有する構成によると、カラーシェーディングの発生量を低下させることができ、マスターレンズのレンズ枠のケラレによる周辺光量低下も抑えることができる。   In the attachment lens PA, it is easy to secure a space for arranging the fluorescent cube CU. Therefore, according to the configuration having the fluorescent cube CU between the third group Gr3 and the master lens PB, the amount of color shading is reduced. It is also possible to suppress a decrease in the amount of peripheral light due to vignetting of the lens frame of the master lens.

アタッチメントレンズPAでは、前記条件式(1)を満たすことにより、像面湾曲の良好な補正が可能となる。前記条件式(2)を満たすことにより、励起光と蛍光との光路分離を良好に行うためのスペースを確保することが可能となる。また、前記条件式(3)〜(6)を満たすことにより、倍率色収差を良好に補正することが可能となる。   The attachment lens PA can satisfactorily correct field curvature by satisfying the conditional expression (1). By satisfying the conditional expression (2), it is possible to secure a space for satisfactorily performing optical path separation between excitation light and fluorescence. Further, by satisfying the conditional expressions (3) to (6), it is possible to satisfactorily correct lateral chromatic aberration.

蛍光測定装置10は、アタッチメントレンズPAと、そのアタッチメントレンズPAをコリメータ光学系として瞳がマッチングするように配置されたマスターレンズPBと、マスターレンズPBによって結像した蛍光像IMを記録するカメラユニット2と、蛍光試料Sを励起するための光源ユニット1と、を備えた構成になっているので、高画質の蛍光像や正確な測定結果を得ることが可能である。   The fluorescence measuring apparatus 10 includes an attachment lens PA, a master lens PB arranged so that the pupil is matched using the attachment lens PA as a collimator optical system, and a camera unit 2 that records a fluorescence image IM formed by the master lens PB. And the light source unit 1 for exciting the fluorescent sample S, it is possible to obtain high-quality fluorescent images and accurate measurement results.

以下、本発明を実施したアタッチメントレンズPA,マスターレンズPB及びそれらを有する撮像光学系OPの構成等を、実施例のコンストラクションデータ等を挙げて更に具体的に説明する。ここで挙げる実施例1,2(ex1,2)は、前述した第1,第2の実施の形態にそれぞれ対応する数値実施例であり、第1,第2の実施の形態の光学構成を表す光路図(図4,図5)は、対応する実施例1,2の光学配置,光路等をそれぞれ示している。   Hereinafter, the configuration and the like of the attachment lens PA, the master lens PB, and the imaging optical system OP having the same according to the present invention will be described more specifically with reference to the construction data of the examples. Examples 1 and 2 (ex1, 2) listed here are numerical examples corresponding to the first and second embodiments described above, and represent the optical configurations of the first and second embodiments. The optical path diagrams (FIGS. 4 and 5) show the optical arrangement, optical paths, and the like of the corresponding first and second embodiments.

各実施例のコンストラクションデータでは、面データとして、左側の欄から順に、面番号i,曲率半径r(mm),軸上での面間隔d(mm),d線(波長587.56nm)に関する屈折率nd,d線に関するアッベ数vd,及び有効直径Deを示す。実施例2では、面番号に*が付された面が非球面であり、その面形状は面頂点を原点とするローカルな直交座標系(x,y,z)を用いた以下の式(AS)で定義される。非球面データとして円錐定数を示す(表記の無い項の係数は0である。)。
z=(c・h2)/[1+√{1−(1+K)・c2・h2}]+Σ(Aj・hj) …(AS)
ただし、
h:z軸(光軸AX)に対して垂直な方向の高さ(h2=x2+y2)、
z:高さhの位置での光軸AX方向のサグ量(面頂点基準)、
c:面頂点での曲率(曲率半径rの逆数)、
K:円錐定数、
Aj:j次の非球面係数、
である。
In the construction data of each example, as surface data, in order from the left column, surface number i, radius of curvature r (mm), on-axis surface interval d (mm), refraction with respect to d-line (wavelength 587.56 nm). The Abbe number vd and the effective diameter De for the rate nd and d lines are shown. In Example 2, the surface numbered with * is an aspheric surface, and the surface shape is expressed by the following equation (AS) using a local orthogonal coordinate system (x, y, z) with the surface vertex as the origin. ). A conic constant is shown as aspherical data (the coefficient of a term not described is 0).
z = (c · h 2 ) / [1 + √ {1− (1 + K) · c 2 · h 2 }] + Σ (Aj · h j ) (AS)
However,
h: height in the direction perpendicular to the z axis (optical axis AX) (h 2 = x 2 + y 2 ),
z: the amount of sag in the direction of the optical axis AX at the position of the height h (based on the surface vertex),
c: curvature at the surface vertex (the reciprocal of the radius of curvature r),
K: conic constant,
Aj: j-order aspheric coefficient,
It is.

各種データとして、撮像光学系OP全体の焦点距離(f,mm),Fナンバー(Fno.),物体側の開口数(NA),物高yobの最大値(mm),像高yimの最大値(mm),レンズ全長(TL,mm),バックフォーカス(BF,mm),像倍率(β)等を示す。バックフォーカスBFは、レンズ最終面から近軸像面までの距離を空気換算長により表記しており、レンズ全長TLは、レンズ最前面からレンズ最終面までの距離にバックフォーカスBFを加えたものである。また、各条件式に対応する実施例の値を表1に示す。   As various data, the focal length (f, mm) of the entire imaging optical system OP, F number (Fno.), Numerical aperture (NA) on the object side, maximum value of object height yob (mm), maximum value of image height yim (Mm), total lens length (TL, mm), back focus (BF, mm), image magnification (β), and the like. In the back focus BF, the distance from the lens final surface to the paraxial image surface is expressed in terms of air length, and the total lens length TL is obtained by adding the back focus BF to the distance from the lens front surface to the lens final surface. is there. In addition, Table 1 shows values of examples corresponding to each conditional expression.

図6,図7は、実施例1,2(ex1,2)にそれぞれ対応する収差図であり、(A)は球面収差図(mm)、(B)は非点収差図(μm)、(C)は歪曲収差図(%)、(D)は倍率色収差図(μm)である。図6,図7中、縦軸prは入射瞳半径(実施例1:167.4380mm,実施例2:348.7123mm)、縦軸yimは撮像素子SRの受光面上での像高(物高yobの最大値80mmに対応する。)であり、破線はF線(波長486.130nm)、実線はd線(波長587.560nm)、一点鎖線はC線(波長656.280nm)に対する各収差量(mm)を表している。また、非点収差図では、Tがタンジェンシャル像面(メリディオナル像面)、Sがサジタル像面を表している。   6 and 7 are aberration diagrams corresponding to Examples 1 and 2 (ex1 and 2, respectively), (A) is a spherical aberration diagram (mm), (B) is an astigmatism diagram (μm), ( C) is a distortion diagram (%), and (D) is a chromatic aberration diagram (μm). 6 and 7, the vertical axis pr is the entrance pupil radius (Example 1: 167.4380 mm, Example 2: 348.7123 mm), and the vertical axis yim is the image height (object height) on the light receiving surface of the image sensor SR. The maximum value of yob corresponds to 80 mm. (Mm). In the astigmatism diagram, T represents a tangential image plane (meridional image plane), and S represents a sagittal image plane.

図8,図9は、実施例1,2(ex1,2)にそれぞれ対応する横収差図である。図8,図9中、(A),(B)は物高yob=0.00mm、(C),(D)は物高yob=−40.00mm、(E),(F)は物高yob=−56.00mm、(G),(H)は物高yob=−80.00mmでの横収差をそれぞれ示しており、(A),(C),(E),(G)はメリディオナル像の横収差(EYの最大スケール:±5μm、PYの最大スケール:±入射瞳半径)、(B),(D),(F),(H)はサジタル像の横収差(EXの最大スケール:±5μm、PXの最大スケール:±入射瞳半径)をそれぞれ示している。また、破線はF線、実線はd線、一点鎖線はC線に対する各横収差を表している。   8 and 9 are lateral aberration diagrams corresponding to Examples 1 and 2 (ex1 and 2), respectively. 8 and 9, (A) and (B) are the object height yob = 0.00 mm, (C) and (D) are the object height yob = −40.00 mm, and (E) and (F) are the object heights. yob = −56.00 mm, (G), (H) respectively indicate lateral aberrations when the object height is yob = −80.00 mm, and (A), (C), (E), (G) are meridional. Transverse aberration of image (maximum scale of EY: ± 5 μm, maximum scale of PY: ± radius of entrance pupil), (B), (D), (F), (H) are lateral aberrations of sagittal image (maximum scale of EX : ± 5 μm, maximum scale of PX: ± incidence pupil radius). The broken line represents the F-line, the solid line represents the d-line, and the alternate long and short dash line represents each lateral aberration with respect to the C-line.

実施例1
単位:mm
面データ
i r d nd vd De
物面 ∞ 46.500 160.00
1 496.153 22.000 1.45844 67.830 172.00
2 -513.044 1.000 172.00
3 170.640 24.000 1.45844 67.830 172.00
4 516.895 138.000 172.00
5 155.187 4.000 1.50137 56.409 70.00
6 59.513 130.100 70.00
7 -92.413 5.000 1.51680 64.167 40.00
8 -70.335 70.600 40.00
9(絞りST) ∞ 28.000 14.84
10(PB:理想レンズ)- 29.487 24.70
像面 ∞ 9.07
Example 1
Unit: mm
Surface data
ird nd vd De
Surface ∞ 46.500 160.00
1 496.153 22.000 1.45844 67.830 172.00
2 -513.044 1.000 172.00
3 170.640 24.000 1.45844 67.830 172.00
4 516.895 138.000 172.00
5 155.187 4.000 1.50137 56.409 70.00
6 59.513 130.100 70.00
7 -92.413 5.000 1.51680 64.167 40.00
8 -70.335 70.600 40.00
9 (Aperture ST) ∞ 28.000 14.84
10 (PB: ideal lens)-29.487 24.70
Image plane ∞ 9.07

各種データ
f = 631.841
Fno.= 1.95
NA(物体側) = 0.015
yob(最大値)=80
yim(最大値)= 4.529
TL=452.187
BF= 29.487
β= -0.0566
入射瞳位置:11114.78mm
射出瞳位置:1×1010mm
アタッチメントレンズPA(i=1〜9:第1面から絞りまでのコリメータ部)の焦点距離:516.1mm
マスターレンズPB(i=10:理想レンズ設定)の焦点距離:28mm
物点位置(物面との面間隔):-46.5mm
第1面から絞りまでの長さ:394.7mm
Various data
f = 631.841
Fno. = 1.95
NA (object side) = 0.015
yob (maximum value) = 80
yim (maximum value) = 4.529
TL = 452.187
BF = 29.487
β = -0.0566
Entrance pupil position: 11114.78mm
Exit pupil position: 1 × 10 10 mm
Focal length of attachment lens PA (i = 1 to 9: collimator from first surface to aperture): 516.1mm
Focal length of master lens PB (i = 10: ideal lens setting): 28mm
Object position (surface distance to the object surface): -46.5mm
Length from first side to aperture: 394.7mm

実施例2
単位:mm
面データ
i r d nd vd De
物面 ∞ 46.500 160.00
1 603.444 19.000 1.45844 67.830 172.00
2 -694.837 1.000 172.00
3 221.810 20.000 1.45844 67.830 172.00
4 856.288 222.600 172.00
5 103.272 4.000 1.50137 56.409 56.00
6* 49.542 69.500 56.00
7 -80.116 5.000 1.51680 64.167 44.00
8* -57.565 71.600 44.00
9(絞りST) ∞ 28.000 14.91
10(PB:理想レンズ)- 29.594 24.79
像面 ∞ 9.03
Example 2
Unit: mm
Surface data
ird nd vd De
Surface ∞ 46.500 160.00
1 603.444 19.000 1.45844 67.830 172.00
2 -694.837 1.000 172.00
3 221.810 20.000 1.45844 67.830 172.00
4 856.288 222.600 172.00
5 103.272 4.000 1.50137 56.409 56.00
6 * 49.542 69.500 56.00
7 -80.116 5.000 1.51680 64.167 44.00
8 * -57.565 71.600 44.00
9 (Aperture ST) ∞ 28.000 14.91
10 (PB: ideal lens)-29.594 24.79
Image plane ∞ 9.03

第6面の非球面データ
K= 0.2549332
Aspherical data of 6th surface
K = 0.2549332

第8面の非球面データ
K= 0.2115807
Aspherical data of 8th surface
K = 0.2115807

各種データ
f =1374.341
Fno.= 1.94
NA(物体側) = 0.015
yob(最大値)=80
yim(最大値)= 4.507
TL=470.294
BF= 29.594
β= -0.0563
入射瞳位置:24350.31mm
射出瞳位置:1×1010mm
アタッチメントレンズPA(i=1〜9:第1面から絞りまでのコリメータ部)の焦点距離:507.5mm
マスターレンズPB(i=10:理想レンズ設定)の焦点距離:28mm
物点位置(物面との面間隔):-46.5mm
第1面から絞りまでの長さ:412.7mm
Various data
f = 1374.341
Fno. = 1.94
NA (object side) = 0.015
yob (maximum value) = 80
yim (maximum value) = 4.507
TL = 470.294
BF = 29.594
β = -0.0563
Entrance pupil position: 24350.31mm
Exit pupil position: 1 × 10 10 mm
Focal length of attachment lens PA (i = 1 to 9: collimator from the first surface to the aperture): 507.5mm
Focal length of master lens PB (i = 10: ideal lens setting): 28mm
Object position (surface distance to the object surface): -46.5mm
Length from first side to aperture: 412.7mm

Figure 2011170074
Figure 2011170074

なお、前述の実施例1及び実施例2では第1群、第2群、第3群のそれぞれに異なる光学ガラスを用いているが、これに限られず、前記条件式を満たす光学ガラスであれば三つのレンズ群にすべて同じ光学ガラスを使用してアタッチメントレンズを構成することも可能である。例えば、第1群、第2群、第3群のガラス材料として合成石英を用いれば、効率の良い紫外光の同軸落射照明が可能な蛍光撮影用アタッチメントレンズが構成できる。   In Examples 1 and 2 described above, different optical glasses are used for each of the first group, the second group, and the third group. However, the present invention is not limited to this, and any optical glass that satisfies the above conditional expression may be used. It is also possible to construct an attachment lens using the same optical glass for all three lens groups. For example, when synthetic quartz is used as the glass material of the first group, the second group, and the third group, a fluorescent photographing attachment lens capable of efficient coaxial epi-illumination of ultraviolet light can be configured.

本発明の実施の形態や実施例は、特許請求の範囲に示された技術的思想の範囲内において、適宜、種々の変更が可能である。以上の実施の形態や実施例は、あくまでも、本発明の一つの実施の形態等であって、本発明ないし各構成要件の用語の意義は、以上の実施の形態や実施例に記載されたものに制限されるものではない。   Various changes and modifications can be appropriately made to the embodiments and examples of the present invention within the scope of the technical idea shown in the claims. The above embodiments and examples are only one embodiment of the present invention, and the meanings of the terms of the present invention or each component are described in the above embodiments and examples. It is not limited to.

1 光源ユニット(照明装置)
1a ランプ
1b ライトパイプ
1c 集光レンズ
2 カメラユニット(撮像装置)
3 マイクロプレート
10 蛍光測定装置
OP 撮像光学系
PA アタッチメントレンズ(コリメータ光学系)
PB マスターレンズ
CU 蛍光キューブ
Gr1 第1群
Gr2 第2群
Gr3 第3群
MR 折り返しミラー
ST 絞り
S 試料(測定対象物)
SR 撮像素子
OB 物面(測定対象物)
IM 像面(蛍光像)
L1 白色光
L2 励起光
L3 蛍光
X ターレット軸
AX 光軸
1 Light source unit (lighting device)
1a lamp 1b light pipe 1c condenser lens 2 camera unit (imaging device)
3 Microplate 10 Fluorescence measurement device OP Imaging optical system PA Attachment lens (collimator optical system)
PB Master lens CU Fluorescent cube Gr1 First group Gr2 Second group Gr3 Third group MR Folding mirror ST Aperture S Sample (measurement object)
SR Image sensor OB Object surface (object to be measured)
IM image plane (fluorescent image)
L1 White light L2 Excitation light L3 Fluorescence X Turret axis AX Optical axis

Claims (6)

マスターレンズと組み合わされた状態で測定対象物の蛍光像を形成する光学性能補正用のアタッチメントレンズであって、測定対象物側にテレセントリックであり、射出瞳を前記マスターレンズの入射瞳付近に有し、光学的なパワーを有するレンズ群として、測定対象物側から順に、正パワーの第1群と、負パワーの第2群と、正パワーの第3群と、の3群を有し、前記第1群が1枚のフレネルレンズ又は同じ硝材から成る2枚以上のレンズで構成されており、前記第2群及び第3群がそれぞれ1枚の単レンズで構成されていることを特徴とするアタッチメントレンズ。   An optical performance correction attachment lens that forms a fluorescent image of a measurement object in combination with a master lens, is telecentric on the measurement object side, and has an exit pupil near the entrance pupil of the master lens. As a lens group having optical power, in order from the measurement object side, there are three groups of a first group of positive power, a second group of negative power, and a third group of positive power, The first group is composed of one Fresnel lens or two or more lenses made of the same glass material, and each of the second group and the third group is composed of one single lens. Attachment lens. 測定対象物を照明する励起光と、測定対象物で発生した蛍光と、の光路分離を行う蛍光キューブを、前記第3群とマスターレンズとの間に有することを特徴とする請求項1記載のアタッチメントレンズ。   The fluorescent cube for performing optical path separation between excitation light for illuminating the measurement object and fluorescence generated in the measurement object is provided between the third group and the master lens. Attachment lens. 以下の条件式(1)を満足することを特徴とする請求項1又は2記載のアタッチメントレンズ;
|φ1+φ2+φ3|<0.002 …(1)
ただし、
φ1:第1群のパワー(mm-1)、
φ2:第2群のパワー(mm-1)、
φ3:第3群のパワー(mm-1)、
である。
The attachment lens according to claim 1, wherein the following conditional expression (1) is satisfied:
| Φ1 + φ2 + φ3 | <0.002 (1)
However,
φ1: Power of the first group (mm -1 ),
φ2: Power of second group (mm −1 ),
φ3: Third group power (mm −1 ),
It is.
以下の条件式(2)を満足することを特徴とする請求項1〜3のいずれか1項に記載のアタッチメントレンズ;
d3>40 …(2)
ただし、
d3:第3群からアタッチメントレンズの射出瞳までの間隔(mm)、
である。
The attachment lens according to any one of claims 1 to 3, wherein the following conditional expression (2) is satisfied;
d3> 40 (2)
However,
d3: Distance from the third group to the exit pupil of the attachment lens (mm),
It is.
以下の条件式(3)〜(6)を満足することを特徴とする請求項1〜4のいずれか1項に記載のアタッチメントレンズ;
ν1≧55 …(3)
ν2≧55 …(4)
ν3≧55 …(5)
|ν2−ν3|≦20 …(6)
ただし、
ν1:第1群のアッベ数、
ν2:第2群のアッベ数、
ν3:第3群のアッベ数、
である。
The attachment lens according to any one of claims 1 to 4, wherein the following conditional expressions (3) to (6) are satisfied:
ν1 ≧ 55 (3)
ν2 ≧ 55 (4)
ν3 ≧ 55 (5)
| Ν2-ν3 | ≦ 20 (6)
However,
ν1: Abbe number of the first group,
ν2: Abbe number of the second group,
ν3: Abbe number of the third group,
It is.
請求項1〜5のいずれか1項に記載のアタッチメントレンズと、そのアタッチメントレンズをコリメータ光学系として瞳がマッチングするように配置されたマスターレンズと、マスターレンズによって結像した蛍光像を記録する撮像装置と、蛍光試料を励起するための照明装置と、を備えたことを特徴とする蛍光測定装置。   An attachment lens according to any one of claims 1 to 5, a master lens arranged so that the pupil is matched using the attachment lens as a collimator optical system, and an imaging for recording a fluorescent image formed by the master lens A fluorescence measuring apparatus comprising: an apparatus; and an illumination device for exciting a fluorescent sample.
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