JP2010526767A - 標識された又は未標識のモノクローナル抗体の組成物 - Google Patents
標識された又は未標識のモノクローナル抗体の組成物 Download PDFInfo
- Publication number
- JP2010526767A JP2010526767A JP2009553981A JP2009553981A JP2010526767A JP 2010526767 A JP2010526767 A JP 2010526767A JP 2009553981 A JP2009553981 A JP 2009553981A JP 2009553981 A JP2009553981 A JP 2009553981A JP 2010526767 A JP2010526767 A JP 2010526767A
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- antibody
- tumor
- unlabeled
- monoclonal antibody
- labeled
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
- 239000000203 mixture Substances 0.000 title abstract description 36
- 238000011282 treatment Methods 0.000 claims abstract description 59
- 238000000034 method Methods 0.000 claims abstract description 25
- 101000938391 Homo sapiens Transmembrane protein Proteins 0.000 claims abstract description 24
- 230000002018 overexpression Effects 0.000 claims abstract description 18
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 claims description 196
- 239000007850 fluorescent dye Substances 0.000 claims description 47
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 claims description 44
- 229940126622 therapeutic monoclonal antibody Drugs 0.000 claims description 37
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 claims description 36
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 claims description 36
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 claims description 31
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims description 13
- 101001012157 Homo sapiens Receptor tyrosine-protein kinase erbB-2 Proteins 0.000 claims description 10
- 102100030086 Receptor tyrosine-protein kinase erbB-2 Human genes 0.000 claims description 10
- 239000003814 drug Substances 0.000 claims description 10
- 102100022005 B-lymphocyte antigen CD20 Human genes 0.000 claims description 6
- 102100028757 Chondroitin sulfate proteoglycan 4 Human genes 0.000 claims description 6
- 102100041003 Glutamate carboxypeptidase 2 Human genes 0.000 claims description 6
- 101000897405 Homo sapiens B-lymphocyte antigen CD20 Proteins 0.000 claims description 6
- 101000916489 Homo sapiens Chondroitin sulfate proteoglycan 4 Proteins 0.000 claims description 6
- 101000892862 Homo sapiens Glutamate carboxypeptidase 2 Proteins 0.000 claims description 6
- 108010000449 TNF-Related Apoptosis-Inducing Ligand Receptors Proteins 0.000 claims description 6
- 102000002259 TNF-Related Apoptosis-Inducing Ligand Receptors Human genes 0.000 claims description 6
- 108091008605 VEGF receptors Proteins 0.000 claims description 6
- 102000009484 Vascular Endothelial Growth Factor Receptors Human genes 0.000 claims description 6
- 102000052116 epidermal growth factor receptor activity proteins Human genes 0.000 claims description 5
- 108700015053 epidermal growth factor receptor activity proteins Proteins 0.000 claims description 5
- 238000002073 fluorescence micrograph Methods 0.000 claims description 5
- YOHYSYJDKVYCJI-UHFFFAOYSA-N n-[3-[[6-[3-(trifluoromethyl)anilino]pyrimidin-4-yl]amino]phenyl]cyclopropanecarboxamide Chemical compound FC(F)(F)C1=CC=CC(NC=2N=CN=C(NC=3C=C(NC(=O)C4CC4)C=CC=3)C=2)=C1 YOHYSYJDKVYCJI-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 5
- MZOFCQQQCNRIBI-VMXHOPILSA-N (3s)-4-[[(2s)-1-[[(2s)-1-[[(1s)-1-carboxy-2-hydroxyethyl]amino]-4-methyl-1-oxopentan-2-yl]amino]-5-(diaminomethylideneamino)-1-oxopentan-2-yl]amino]-3-[[2-[[(2s)-2,6-diaminohexanoyl]amino]acetyl]amino]-4-oxobutanoic acid Chemical compound OC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CCCN=C(N)N)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)CNC(=O)[C@@H](N)CCCCN MZOFCQQQCNRIBI-VMXHOPILSA-N 0.000 claims description 3
- 102100022014 Angiopoietin-1 receptor Human genes 0.000 claims description 3
- 102100038080 B-cell receptor CD22 Human genes 0.000 claims description 3
- 102100024222 B-lymphocyte antigen CD19 Human genes 0.000 claims description 3
- 101100481403 Bos taurus TIE1 gene Proteins 0.000 claims description 3
- 101710149863 C-C chemokine receptor type 4 Proteins 0.000 claims description 3
- 102100032976 CCR4-NOT transcription complex subunit 6 Human genes 0.000 claims description 3
- 101150013553 CD40 gene Proteins 0.000 claims description 3
- 108010021064 CTLA-4 Antigen Proteins 0.000 claims description 3
- 229940045513 CTLA4 antagonist Drugs 0.000 claims description 3
- 102100039498 Cytotoxic T-lymphocyte protein 4 Human genes 0.000 claims description 3
- 108090001101 Hepsin Proteins 0.000 claims description 3
- 102000004989 Hepsin Human genes 0.000 claims description 3
- 101000753291 Homo sapiens Angiopoietin-1 receptor Proteins 0.000 claims description 3
- 101000884305 Homo sapiens B-cell receptor CD22 Proteins 0.000 claims description 3
- 101000980825 Homo sapiens B-lymphocyte antigen CD19 Proteins 0.000 claims description 3
- 101000914324 Homo sapiens Carcinoembryonic antigen-related cell adhesion molecule 5 Proteins 0.000 claims description 3
- 101000914321 Homo sapiens Carcinoembryonic antigen-related cell adhesion molecule 7 Proteins 0.000 claims description 3
- 101000934338 Homo sapiens Myeloid cell surface antigen CD33 Proteins 0.000 claims description 3
- 101000617725 Homo sapiens Pregnancy-specific beta-1-glycoprotein 2 Proteins 0.000 claims description 3
- 101000914514 Homo sapiens T-cell-specific surface glycoprotein CD28 Proteins 0.000 claims description 3
- 101000914484 Homo sapiens T-lymphocyte activation antigen CD80 Proteins 0.000 claims description 3
- 101100369992 Homo sapiens TNFSF10 gene Proteins 0.000 claims description 3
- 108010091221 Lymphotoxin beta Receptor Proteins 0.000 claims description 3
- 102100028198 Macrophage colony-stimulating factor 1 receptor Human genes 0.000 claims description 3
- 101710150918 Macrophage colony-stimulating factor 1 receptor Proteins 0.000 claims description 3
- 102100025243 Myeloid cell surface antigen CD33 Human genes 0.000 claims description 3
- 102100022019 Pregnancy-specific beta-1-glycoprotein 2 Human genes 0.000 claims description 3
- 102100029986 Receptor tyrosine-protein kinase erbB-3 Human genes 0.000 claims description 3
- 101710100969 Receptor tyrosine-protein kinase erbB-3 Proteins 0.000 claims description 3
- 102100029981 Receptor tyrosine-protein kinase erbB-4 Human genes 0.000 claims description 3
- 101710100963 Receptor tyrosine-protein kinase erbB-4 Proteins 0.000 claims description 3
- 102100027213 T-cell-specific surface glycoprotein CD28 Human genes 0.000 claims description 3
- 102100027222 T-lymphocyte activation antigen CD80 Human genes 0.000 claims description 3
- 108700012411 TNFSF10 Proteins 0.000 claims description 3
- 108060008682 Tumor Necrosis Factor Proteins 0.000 claims description 3
- 102000000852 Tumor Necrosis Factor-alpha Human genes 0.000 claims description 3
- 102100024598 Tumor necrosis factor ligand superfamily member 10 Human genes 0.000 claims description 3
- 102100040245 Tumor necrosis factor receptor superfamily member 5 Human genes 0.000 claims description 3
- 230000004913 activation Effects 0.000 claims description 3
- 230000006907 apoptotic process Effects 0.000 claims description 3
- 210000002950 fibroblast Anatomy 0.000 claims description 3
- 239000000411 inducer Substances 0.000 claims description 3
- 102000014909 interleukin-1 receptor activity proteins Human genes 0.000 claims description 3
- 108040006732 interleukin-1 receptor activity proteins Proteins 0.000 claims description 3
- 102100032202 Cornulin Human genes 0.000 claims 1
- 101000920981 Homo sapiens Cornulin Proteins 0.000 claims 1
- 102000018170 Lymphotoxin beta Receptor Human genes 0.000 claims 1
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 abstract description 18
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 abstract description 11
- 201000010099 disease Diseases 0.000 abstract description 9
- 238000003745 diagnosis Methods 0.000 abstract description 3
- 230000002349 favourable effect Effects 0.000 abstract description 2
- 230000009885 systemic effect Effects 0.000 abstract description 2
- 231100000957 no side effect Toxicity 0.000 abstract 1
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 27
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 27
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 25
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 23
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 19
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 19
- 229960000575 trastuzumab Drugs 0.000 description 18
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 17
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 15
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 14
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 13
- 238000012423 maintenance Methods 0.000 description 13
- 230000037396 body weight Effects 0.000 description 12
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 12
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 12
- 239000000427 antigen Substances 0.000 description 11
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 description 11
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 description 11
- 238000003384 imaging method Methods 0.000 description 11
- 210000004881 tumor cell Anatomy 0.000 description 11
- 206010006187 Breast cancer Diseases 0.000 description 9
- 208000026310 Breast neoplasm Diseases 0.000 description 9
- 108010047041 Complementarity Determining Regions Proteins 0.000 description 9
- 238000011068 loading method Methods 0.000 description 8
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 8
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 7
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 7
- 206010009944 Colon cancer Diseases 0.000 description 6
- 238000002965 ELISA Methods 0.000 description 6
- 101001034652 Homo sapiens Insulin-like growth factor 1 receptor Proteins 0.000 description 6
- 102100039688 Insulin-like growth factor 1 receptor Human genes 0.000 description 6
- 230000008859 change Effects 0.000 description 6
- 230000005284 excitation Effects 0.000 description 6
- 230000002285 radioactive effect Effects 0.000 description 6
- 108090000144 Human Proteins Proteins 0.000 description 5
- 102000003839 Human Proteins Human genes 0.000 description 5
- 210000000601 blood cell Anatomy 0.000 description 5
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 5
- 210000004602 germ cell Anatomy 0.000 description 5
- 238000011503 in vivo imaging Methods 0.000 description 5
- 201000007270 liver cancer Diseases 0.000 description 5
- 208000014018 liver neoplasm Diseases 0.000 description 5
- 230000003211 malignant effect Effects 0.000 description 5
- 238000012634 optical imaging Methods 0.000 description 5
- 238000006862 quantum yield reaction Methods 0.000 description 5
- 238000011160 research Methods 0.000 description 5
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 230000003442 weekly effect Effects 0.000 description 5
- 206010008342 Cervix carcinoma Diseases 0.000 description 4
- 208000001333 Colorectal Neoplasms Diseases 0.000 description 4
- 108020004414 DNA Proteins 0.000 description 4
- 108060003951 Immunoglobulin Proteins 0.000 description 4
- 208000015634 Rectal Neoplasms Diseases 0.000 description 4
- 208000006105 Uterine Cervical Neoplasms Diseases 0.000 description 4
- 210000000577 adipose tissue Anatomy 0.000 description 4
- 239000006285 cell suspension Substances 0.000 description 4
- 201000010881 cervical cancer Diseases 0.000 description 4
- 230000008878 coupling Effects 0.000 description 4
- 238000010168 coupling process Methods 0.000 description 4
- 238000005859 coupling reaction Methods 0.000 description 4
- 239000000975 dye Substances 0.000 description 4
- 230000014509 gene expression Effects 0.000 description 4
- 102000018358 immunoglobulin Human genes 0.000 description 4
- MOFVSTNWEDAEEK-UHFFFAOYSA-M indocyanine green Chemical compound [Na+].[O-]S(=O)(=O)CCCCN1C2=CC=C3C=CC=CC3=C2C(C)(C)C1=CC=CC=CC=CC1=[N+](CCCCS([O-])(=O)=O)C2=CC=C(C=CC=C3)C3=C2C1(C)C MOFVSTNWEDAEEK-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 4
- 229960004657 indocyanine green Drugs 0.000 description 4
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 4
- 238000012544 monitoring process Methods 0.000 description 4
- 230000003287 optical effect Effects 0.000 description 4
- 229960002087 pertuzumab Drugs 0.000 description 4
- -1 preferably BEGFR Proteins 0.000 description 4
- 206010038038 rectal cancer Diseases 0.000 description 4
- 201000001275 rectum cancer Diseases 0.000 description 4
- 206010058467 Lung neoplasm malignant Diseases 0.000 description 3
- 108091007491 NSP3 Papain-like protease domains Proteins 0.000 description 3
- 206010033128 Ovarian cancer Diseases 0.000 description 3
- 206010061535 Ovarian neoplasm Diseases 0.000 description 3
- 206010061902 Pancreatic neoplasm Diseases 0.000 description 3
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 3
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 3
- 229960005395 cetuximab Drugs 0.000 description 3
- 238000001839 endoscopy Methods 0.000 description 3
- 238000000799 fluorescence microscopy Methods 0.000 description 3
- 230000036541 health Effects 0.000 description 3
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 3
- 208000032839 leukemia Diseases 0.000 description 3
- 201000005202 lung cancer Diseases 0.000 description 3
- 208000020816 lung neoplasm Diseases 0.000 description 3
- 208000015486 malignant pancreatic neoplasm Diseases 0.000 description 3
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 3
- 201000002528 pancreatic cancer Diseases 0.000 description 3
- 208000008443 pancreatic carcinoma Diseases 0.000 description 3
- 238000002626 targeted therapy Methods 0.000 description 3
- 206010002091 Anaesthesia Diseases 0.000 description 2
- 206010061424 Anal cancer Diseases 0.000 description 2
- 208000007860 Anus Neoplasms Diseases 0.000 description 2
- 206010004593 Bile duct cancer Diseases 0.000 description 2
- 206010005003 Bladder cancer Diseases 0.000 description 2
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 description 2
- 201000009030 Carcinoma Diseases 0.000 description 2
- 239000006144 Dulbecco’s modified Eagle's medium Substances 0.000 description 2
- KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N EDTA Chemical compound OC(=O)CN(CC(O)=O)CCN(CC(O)=O)CC(O)=O KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 102000001301 EGF receptor Human genes 0.000 description 2
- 108060006698 EGF receptor Proteins 0.000 description 2
- 206010014733 Endometrial cancer Diseases 0.000 description 2
- 206010014759 Endometrial neoplasm Diseases 0.000 description 2
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 2
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 2
- 108010066687 Epithelial Cell Adhesion Molecule Proteins 0.000 description 2
- 102000018651 Epithelial Cell Adhesion Molecule Human genes 0.000 description 2
- 208000000461 Esophageal Neoplasms Diseases 0.000 description 2
- 206010017993 Gastrointestinal neoplasms Diseases 0.000 description 2
- 101000599951 Homo sapiens Insulin-like growth factor I Proteins 0.000 description 2
- 108700005091 Immunoglobulin Genes Proteins 0.000 description 2
- 206010061218 Inflammation Diseases 0.000 description 2
- 102100037852 Insulin-like growth factor I Human genes 0.000 description 2
- PIWKPBJCKXDKJR-UHFFFAOYSA-N Isoflurane Chemical compound FC(F)OC(Cl)C(F)(F)F PIWKPBJCKXDKJR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 208000008839 Kidney Neoplasms Diseases 0.000 description 2
- ZDXPYRJPNDTMRX-VKHMYHEASA-N L-glutamine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(N)=O ZDXPYRJPNDTMRX-VKHMYHEASA-N 0.000 description 2
- 229930182816 L-glutamine Natural products 0.000 description 2
- 206010025323 Lymphomas Diseases 0.000 description 2
- 206010026673 Malignant Pleural Effusion Diseases 0.000 description 2
- 208000032271 Malignant tumor of penis Diseases 0.000 description 2
- 102100030351 Membrane-associated phosphatidylinositol transfer protein 3 Human genes 0.000 description 2
- 101710104263 Membrane-associated phosphatidylinositol transfer protein 3 Proteins 0.000 description 2
- 206010027465 Metastases to skin Diseases 0.000 description 2
- 206010030155 Oesophageal carcinoma Diseases 0.000 description 2
- 208000002471 Penile Neoplasms Diseases 0.000 description 2
- 206010034299 Penile cancer Diseases 0.000 description 2
- 229920005372 Plexiglas® Polymers 0.000 description 2
- 206010060862 Prostate cancer Diseases 0.000 description 2
- 208000000236 Prostatic Neoplasms Diseases 0.000 description 2
- 108020004511 Recombinant DNA Proteins 0.000 description 2
- 206010038389 Renal cancer Diseases 0.000 description 2
- 208000004337 Salivary Gland Neoplasms Diseases 0.000 description 2
- 206010061934 Salivary gland cancer Diseases 0.000 description 2
- 208000024313 Testicular Neoplasms Diseases 0.000 description 2
- 206010057644 Testis cancer Diseases 0.000 description 2
- 208000024770 Thyroid neoplasm Diseases 0.000 description 2
- 108700019146 Transgenes Proteins 0.000 description 2
- 102000004142 Trypsin Human genes 0.000 description 2
- 108090000631 Trypsin Proteins 0.000 description 2
- 102100022156 Tumor necrosis factor receptor superfamily member 3 Human genes 0.000 description 2
- 208000007097 Urinary Bladder Neoplasms Diseases 0.000 description 2
- 208000002495 Uterine Neoplasms Diseases 0.000 description 2
- FSUOQVGBXADQGH-UHFFFAOYSA-M [9-cyano-6-(diethylamino)xanthen-3-ylidene]-[6-(2,5-dioxopyrrolidin-1-yl)oxy-6-oxohexyl]-ethylazanium;chloride Chemical compound [Cl-].C1=C2OC3=CC(N(CC)CC)=CC=C3C(C#N)=C2C=CC1=[N+](CC)CCCCCC(=O)ON1C(=O)CCC1=O FSUOQVGBXADQGH-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 230000002776 aggregation Effects 0.000 description 2
- 238000004220 aggregation Methods 0.000 description 2
- 125000000539 amino acid group Chemical group 0.000 description 2
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 2
- 230000037005 anaesthesia Effects 0.000 description 2
- 239000002246 antineoplastic agent Substances 0.000 description 2
- 201000011165 anus cancer Diseases 0.000 description 2
- 208000026900 bile duct neoplasm Diseases 0.000 description 2
- 229910002091 carbon monoxide Inorganic materials 0.000 description 2
- 208000006990 cholangiocarcinoma Diseases 0.000 description 2
- 208000029742 colonic neoplasm Diseases 0.000 description 2
- 239000002872 contrast media Substances 0.000 description 2
- 230000002596 correlated effect Effects 0.000 description 2
- 230000000875 corresponding effect Effects 0.000 description 2
- 238000002059 diagnostic imaging Methods 0.000 description 2
- 238000011846 endoscopic investigation Methods 0.000 description 2
- 201000004101 esophageal cancer Diseases 0.000 description 2
- 239000012091 fetal bovine serum Substances 0.000 description 2
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 2
- 208000005017 glioblastoma Diseases 0.000 description 2
- 238000003018 immunoassay Methods 0.000 description 2
- 230000002757 inflammatory effect Effects 0.000 description 2
- 230000004054 inflammatory process Effects 0.000 description 2
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 description 2
- 230000000977 initiatory effect Effects 0.000 description 2
- 229960002725 isoflurane Drugs 0.000 description 2
- 210000003734 kidney Anatomy 0.000 description 2
- 201000010982 kidney cancer Diseases 0.000 description 2
- 229910052747 lanthanoid Inorganic materials 0.000 description 2
- 229920002521 macromolecule Polymers 0.000 description 2
- 229950008001 matuzumab Drugs 0.000 description 2
- 235000012054 meals Nutrition 0.000 description 2
- 230000004060 metabolic process Effects 0.000 description 2
- MYWUZJCMWCOHBA-VIFPVBQESA-N methamphetamine Chemical compound CN[C@@H](C)CC1=CC=CC=C1 MYWUZJCMWCOHBA-VIFPVBQESA-N 0.000 description 2
- 238000003333 near-infrared imaging Methods 0.000 description 2
- 229950010203 nimotuzumab Drugs 0.000 description 2
- 108020004707 nucleic acids Proteins 0.000 description 2
- 102000039446 nucleic acids Human genes 0.000 description 2
- 150000007523 nucleic acids Chemical class 0.000 description 2
- 230000035515 penetration Effects 0.000 description 2
- 239000004926 polymethyl methacrylate Substances 0.000 description 2
- 229920001296 polysiloxane Polymers 0.000 description 2
- 238000011533 pre-incubation Methods 0.000 description 2
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 2
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 2
- 229920006395 saturated elastomer Polymers 0.000 description 2
- 125000006850 spacer group Chemical group 0.000 description 2
- 241000894007 species Species 0.000 description 2
- 206010041823 squamous cell carcinoma Diseases 0.000 description 2
- 238000007920 subcutaneous administration Methods 0.000 description 2
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 2
- 238000001356 surgical procedure Methods 0.000 description 2
- 201000003120 testicular cancer Diseases 0.000 description 2
- 238000011287 therapeutic dose Methods 0.000 description 2
- 230000004797 therapeutic response Effects 0.000 description 2
- 201000002510 thyroid cancer Diseases 0.000 description 2
- 238000012546 transfer Methods 0.000 description 2
- 230000009261 transgenic effect Effects 0.000 description 2
- 238000002054 transplantation Methods 0.000 description 2
- 239000012588 trypsin Substances 0.000 description 2
- 230000004614 tumor growth Effects 0.000 description 2
- 201000005112 urinary bladder cancer Diseases 0.000 description 2
- 206010046766 uterine cancer Diseases 0.000 description 2
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 2
- QZNNVYOVQUKYSC-JEDNCBNOSA-N (2s)-2-amino-3-(1h-imidazol-5-yl)propanoic acid;hydron;chloride Chemical compound Cl.OC(=O)[C@@H](N)CC1=CN=CN1 QZNNVYOVQUKYSC-JEDNCBNOSA-N 0.000 description 1
- 102000004506 Blood Proteins Human genes 0.000 description 1
- 108010017384 Blood Proteins Proteins 0.000 description 1
- 241000283690 Bos taurus Species 0.000 description 1
- 241000282472 Canis lupus familiaris Species 0.000 description 1
- 102000053602 DNA Human genes 0.000 description 1
- 101150029707 ERBB2 gene Proteins 0.000 description 1
- 241000283086 Equidae Species 0.000 description 1
- 229910052693 Europium Inorganic materials 0.000 description 1
- 102000009109 Fc receptors Human genes 0.000 description 1
- 108010087819 Fc receptors Proteins 0.000 description 1
- 241000282326 Felis catus Species 0.000 description 1
- 206010019280 Heart failures Diseases 0.000 description 1
- 102000001554 Hemoglobins Human genes 0.000 description 1
- 108010054147 Hemoglobins Proteins 0.000 description 1
- 102000009786 Immunoglobulin Constant Regions Human genes 0.000 description 1
- 108010009817 Immunoglobulin Constant Regions Proteins 0.000 description 1
- 108010067060 Immunoglobulin Variable Region Proteins 0.000 description 1
- 102000017727 Immunoglobulin Variable Region Human genes 0.000 description 1
- 239000005517 L01XE01 - Imatinib Substances 0.000 description 1
- 239000005411 L01XE02 - Gefitinib Substances 0.000 description 1
- 239000005551 L01XE03 - Erlotinib Substances 0.000 description 1
- 239000000232 Lipid Bilayer Substances 0.000 description 1
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 description 1
- 208000000172 Medulloblastoma Diseases 0.000 description 1
- 102000018697 Membrane Proteins Human genes 0.000 description 1
- 108010052285 Membrane Proteins Proteins 0.000 description 1
- 206010027406 Mesothelioma Diseases 0.000 description 1
- 206010052399 Neuroendocrine tumour Diseases 0.000 description 1
- 241001494479 Pecora Species 0.000 description 1
- 208000006994 Precancerous Conditions Diseases 0.000 description 1
- 229940079156 Proteasome inhibitor Drugs 0.000 description 1
- 102000004022 Protein-Tyrosine Kinases Human genes 0.000 description 1
- 108090000412 Protein-Tyrosine Kinases Proteins 0.000 description 1
- 102000004278 Receptor Protein-Tyrosine Kinases Human genes 0.000 description 1
- 108090000873 Receptor Protein-Tyrosine Kinases Proteins 0.000 description 1
- 201000000582 Retinoblastoma Diseases 0.000 description 1
- 206010039491 Sarcoma Diseases 0.000 description 1
- 206010041067 Small cell lung cancer Diseases 0.000 description 1
- 208000005718 Stomach Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- 241000282887 Suidae Species 0.000 description 1
- 229910052771 Terbium Inorganic materials 0.000 description 1
- 208000014070 Vestibular schwannoma Diseases 0.000 description 1
- 206010047741 Vulval cancer Diseases 0.000 description 1
- 208000004354 Vulvar Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- 230000002159 abnormal effect Effects 0.000 description 1
- 239000002250 absorbent Substances 0.000 description 1
- 230000002745 absorbent Effects 0.000 description 1
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 1
- 238000000862 absorption spectrum Methods 0.000 description 1
- 208000004064 acoustic neuroma Diseases 0.000 description 1
- 230000003213 activating effect Effects 0.000 description 1
- 208000009956 adenocarcinoma Diseases 0.000 description 1
- 229960000548 alemtuzumab Drugs 0.000 description 1
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 1
- 230000000259 anti-tumor effect Effects 0.000 description 1
- 230000010056 antibody-dependent cellular cytotoxicity Effects 0.000 description 1
- 229940041181 antineoplastic drug Drugs 0.000 description 1
- 229950003145 apolizumab Drugs 0.000 description 1
- 238000013459 approach Methods 0.000 description 1
- 206010003246 arthritis Diseases 0.000 description 1
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 1
- 230000001588 bifunctional effect Effects 0.000 description 1
- 210000000013 bile duct Anatomy 0.000 description 1
- 230000005540 biological transmission Effects 0.000 description 1
- 229960000074 biopharmaceutical Drugs 0.000 description 1
- 201000000053 blastoma Diseases 0.000 description 1
- 229960001467 bortezomib Drugs 0.000 description 1
- GXJABQQUPOEUTA-RDJZCZTQSA-N bortezomib Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(C)C)B(O)O)NC(=O)C=1N=CC=NC=1)C1=CC=CC=C1 GXJABQQUPOEUTA-RDJZCZTQSA-N 0.000 description 1
- 210000004556 brain Anatomy 0.000 description 1
- 239000000298 carbocyanine Substances 0.000 description 1
- 208000002458 carcinoid tumor Diseases 0.000 description 1
- 210000004413 cardiac myocyte Anatomy 0.000 description 1
- 230000005779 cell damage Effects 0.000 description 1
- 230000010261 cell growth Effects 0.000 description 1
- 238000012412 chemical coupling Methods 0.000 description 1
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 1
- 238000002512 chemotherapy Methods 0.000 description 1
- 210000004978 chinese hamster ovary cell Anatomy 0.000 description 1
- 238000011260 co-administration Methods 0.000 description 1
- 210000001072 colon Anatomy 0.000 description 1
- 230000000295 complement effect Effects 0.000 description 1
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 1
- 238000010226 confocal imaging Methods 0.000 description 1
- 230000001268 conjugating effect Effects 0.000 description 1
- 230000021615 conjugation Effects 0.000 description 1
- 229940127089 cytotoxic agent Drugs 0.000 description 1
- 230000002498 deadly effect Effects 0.000 description 1
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 1
- 229960002923 denileukin diftitox Drugs 0.000 description 1
- 108010017271 denileukin diftitox Proteins 0.000 description 1
- 238000011161 development Methods 0.000 description 1
- 238000009543 diffuse optical tomography Methods 0.000 description 1
- 238000009509 drug development Methods 0.000 description 1
- 238000007876 drug discovery Methods 0.000 description 1
- 230000036267 drug metabolism Effects 0.000 description 1
- 239000012636 effector Substances 0.000 description 1
- 201000008184 embryoma Diseases 0.000 description 1
- 230000002357 endometrial effect Effects 0.000 description 1
- 229950009760 epratuzumab Drugs 0.000 description 1
- 229960001433 erlotinib Drugs 0.000 description 1
- AAKJLRGGTJKAMG-UHFFFAOYSA-N erlotinib Chemical compound C=12C=C(OCCOC)C(OCCOC)=CC2=NC=NC=1NC1=CC=CC(C#C)=C1 AAKJLRGGTJKAMG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OGPBJKLSAFTDLK-UHFFFAOYSA-N europium atom Chemical compound [Eu] OGPBJKLSAFTDLK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 1
- 238000000695 excitation spectrum Methods 0.000 description 1
- 230000001747 exhibiting effect Effects 0.000 description 1
- 238000010195 expression analysis Methods 0.000 description 1
- 239000013604 expression vector Substances 0.000 description 1
- 239000000835 fiber Substances 0.000 description 1
- 102000034287 fluorescent proteins Human genes 0.000 description 1
- 108091006047 fluorescent proteins Proteins 0.000 description 1
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 1
- 206010017758 gastric cancer Diseases 0.000 description 1
- 208000015419 gastrin-producing neuroendocrine tumor Diseases 0.000 description 1
- 201000000052 gastrinoma Diseases 0.000 description 1
- 229960002584 gefitinib Drugs 0.000 description 1
- XGALLCVXEZPNRQ-UHFFFAOYSA-N gefitinib Chemical compound C=12C=C(OCCCN3CCOCC3)C(OC)=CC2=NC=NC=1NC1=CC=C(F)C(Cl)=C1 XGALLCVXEZPNRQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960000578 gemtuzumab Drugs 0.000 description 1
- 238000012637 gene transfection Methods 0.000 description 1
- 210000004392 genitalia Anatomy 0.000 description 1
- 210000004907 gland Anatomy 0.000 description 1
- 229910052736 halogen Inorganic materials 0.000 description 1
- 150000002367 halogens Chemical class 0.000 description 1
- 206010073071 hepatocellular carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 231100000844 hepatocellular carcinoma Toxicity 0.000 description 1
- 239000005556 hormone Substances 0.000 description 1
- 229940088597 hormone Drugs 0.000 description 1
- 210000004408 hybridoma Anatomy 0.000 description 1
- KTUFNOKKBVMGRW-UHFFFAOYSA-N imatinib Chemical compound C1CN(C)CCN1CC1=CC=C(C(=O)NC=2C=C(NC=3N=C(C=CN=3)C=3C=NC=CC=3)C(C)=CC=2)C=C1 KTUFNOKKBVMGRW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960002411 imatinib Drugs 0.000 description 1
- 230000001900 immune effect Effects 0.000 description 1
- 239000012642 immune effector Substances 0.000 description 1
- 230000028993 immune response Effects 0.000 description 1
- 239000000367 immunologic factor Substances 0.000 description 1
- 229940121354 immunomodulator Drugs 0.000 description 1
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 1
- 238000002329 infrared spectrum Methods 0.000 description 1
- 230000003834 intracellular effect Effects 0.000 description 1
- 238000010253 intravenous injection Methods 0.000 description 1
- 230000005865 ionizing radiation Effects 0.000 description 1
- 229960005386 ipilimumab Drugs 0.000 description 1
- 238000002372 labelling Methods 0.000 description 1
- 150000002601 lanthanoid compounds Chemical class 0.000 description 1
- 150000002602 lanthanoids Chemical class 0.000 description 1
- 230000003902 lesion Effects 0.000 description 1
- 206010024627 liposarcoma Diseases 0.000 description 1
- 201000005249 lung adenocarcinoma Diseases 0.000 description 1
- 201000005243 lung squamous cell carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 230000036210 malignancy Effects 0.000 description 1
- 230000010534 mechanism of action Effects 0.000 description 1
- 230000001404 mediated effect Effects 0.000 description 1
- 201000001441 melanoma Diseases 0.000 description 1
- 206010027191 meningioma Diseases 0.000 description 1
- 229910052751 metal Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000002184 metal Substances 0.000 description 1
- 238000000386 microscopy Methods 0.000 description 1
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 1
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 1
- 208000016065 neuroendocrine neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 201000011519 neuroendocrine tumor Diseases 0.000 description 1
- 208000002154 non-small cell lung carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 238000009206 nuclear medicine Methods 0.000 description 1
- 230000000771 oncological effect Effects 0.000 description 1
- 201000002530 pancreatic endocrine carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 229960001972 panitumumab Drugs 0.000 description 1
- 230000037361 pathway Effects 0.000 description 1
- 210000004303 peritoneum Anatomy 0.000 description 1
- 201000002628 peritoneum cancer Diseases 0.000 description 1
- 230000002688 persistence Effects 0.000 description 1
- 230000004962 physiological condition Effects 0.000 description 1
- 230000035790 physiological processes and functions Effects 0.000 description 1
- 230000036470 plasma concentration Effects 0.000 description 1
- 238000002600 positron emission tomography Methods 0.000 description 1
- 230000003389 potentiating effect Effects 0.000 description 1
- 230000002265 prevention Effects 0.000 description 1
- 230000002035 prolonged effect Effects 0.000 description 1
- 239000003207 proteasome inhibitor Substances 0.000 description 1
- 230000005180 public health Effects 0.000 description 1
- 238000011002 quantification Methods 0.000 description 1
- 230000005855 radiation Effects 0.000 description 1
- 238000001959 radiotherapy Methods 0.000 description 1
- 238000003259 recombinant expression Methods 0.000 description 1
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 1
- 125000006853 reporter group Chemical group 0.000 description 1
- 230000004044 response Effects 0.000 description 1
- 238000012552 review Methods 0.000 description 1
- 229960004641 rituximab Drugs 0.000 description 1
- 210000004116 schwann cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 description 1
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 1
- 231100000004 severe toxicity Toxicity 0.000 description 1
- 230000011664 signaling Effects 0.000 description 1
- 238000002603 single-photon emission computed tomography Methods 0.000 description 1
- 208000000587 small cell lung carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 150000003384 small molecules Chemical class 0.000 description 1
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 1
- 230000000392 somatic effect Effects 0.000 description 1
- 230000003595 spectral effect Effects 0.000 description 1
- 238000001228 spectrum Methods 0.000 description 1
- 238000012289 standard assay Methods 0.000 description 1
- 239000011550 stock solution Substances 0.000 description 1
- 210000002784 stomach Anatomy 0.000 description 1
- 201000011549 stomach cancer Diseases 0.000 description 1
- 206010042863 synovial sarcoma Diseases 0.000 description 1
- 230000002123 temporal effect Effects 0.000 description 1
- GZCRRIHWUXGPOV-UHFFFAOYSA-N terbium atom Chemical compound [Tb] GZCRRIHWUXGPOV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940124597 therapeutic agent Drugs 0.000 description 1
- ANRHNWWPFJCPAZ-UHFFFAOYSA-M thionine Chemical compound [Cl-].C1=CC(N)=CC2=[S+]C3=CC(N)=CC=C3N=C21 ANRHNWWPFJCPAZ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 230000036962 time dependent Effects 0.000 description 1
- 238000011830 transgenic mouse model Methods 0.000 description 1
- 102000035160 transmembrane proteins Human genes 0.000 description 1
- 108091005703 transmembrane proteins Proteins 0.000 description 1
- 208000029729 tumor suppressor gene on chromosome 11 Diseases 0.000 description 1
- 125000001493 tyrosinyl group Chemical group [H]OC1=C([H])C([H])=C(C([H])=C1[H])C([H])([H])C([H])(N([H])[H])C(*)=O 0.000 description 1
- 201000005102 vulva cancer Diseases 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K49/00—Preparations for testing in vivo
- A61K49/001—Preparation for luminescence or biological staining
- A61K49/0013—Luminescence
- A61K49/0017—Fluorescence in vivo
- A61K49/005—Fluorescence in vivo characterised by the carrier molecule carrying the fluorescent agent
- A61K49/0058—Antibodies
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K49/00—Preparations for testing in vivo
- A61K49/001—Preparation for luminescence or biological staining
- A61K49/0013—Luminescence
- A61K49/0017—Fluorescence in vivo
- A61K49/0019—Fluorescence in vivo characterised by the fluorescent group, e.g. oligomeric, polymeric or dendritic molecules
- A61K49/0021—Fluorescence in vivo characterised by the fluorescent group, e.g. oligomeric, polymeric or dendritic molecules the fluorescent group being a small organic molecule
- A61K49/0032—Methine dyes, e.g. cyanine dyes
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P35/00—Antineoplastic agents
Abstract
本発明は、ヒト膜貫通タンパク質の過剰発現に関連した疾患の同時治療及び診断のためのヒト膜貫通タンパク質に向けられた標識及び未標識モノクローナル抗体の組成物に関する。本発明は更に、前記組成物を投与し、標識された抗体濃度の変化を測定し、そしてその後好ましい治療効果に必要な未標識抗体の最小必要濃度が達成され且つ低い全身抗体濃度のために望ましくない副作用が最小限に抑えられるように、未標識モノクローナル抗体のみを投与することを含んで成る方法にも関する。
【選択図】図３
【選択図】図３
Description
ヒト膜貫通タンパク質の過剰発現に関連する疾患、特に癌の同時治療及び診断のためのそのようなタンパク質に向けられた標識された又は未標識のモノクローナル抗体の組成物に関する。本発明は更に、前記組成物を最初に投与し、標識された抗体濃度の変化を測定し、その後で好ましい治療効果のための未標識のモノクローナル抗体の最小必要濃度が達成されそして該治療中維持されるような未標識のモノクローナル抗体を投与することを含んで成り、その間より低い全身抗体濃度のために望ましくない副作用が最小になる方法に関する。
療法におけるモノクローナル抗体
癌に対する治療的武器を改善する現在進行中の探求において、手術、化学療法及び放射線療法以外の第四の武器、即ちターゲット療法が現れた。ターゲット療法としては、チロシンキナーゼ受容体阻害剤（イマチニブ、ゲフィチニブ、エルロチニブのような小分子阻害剤）、プロテアソーム阻害剤（ボルテゾミブ）、生物学的応答変更剤（デニロイキンジフチトクス）及びモノクローナル抗体（MAb）が挙げられる。ターゲット療法としてのMAbの顕著な特異性は、それらをヒト療法のための有力な剤にする。MAbは疾患に対して保護するのに治療的に使用できるだけでなく、それらは様々な病気を診断し、血清タンパク質及び薬剤レベルを測定し、組織と血液をタイピングし、そして免疫応答に関与する感染物質と特定細胞を同定するためにも使用することができる。開発中の全バイオ医薬の約１／４がMAbであり、約30種の製品が使用されているか又は研究中である。MAbの大部分は癌に使用されている。（Gupta, N.他、Indian Journal of Pharmacology, 38 (2006) 390-396 ; Funaro, A.他、Biotechnology Advances 18 (2000) 385-401 ; Suemitsu, N.他、Immunology Froutier 9 (1999) 231-236）。
癌に対する治療的武器を改善する現在進行中の探求において、手術、化学療法及び放射線療法以外の第四の武器、即ちターゲット療法が現れた。ターゲット療法としては、チロシンキナーゼ受容体阻害剤（イマチニブ、ゲフィチニブ、エルロチニブのような小分子阻害剤）、プロテアソーム阻害剤（ボルテゾミブ）、生物学的応答変更剤（デニロイキンジフチトクス）及びモノクローナル抗体（MAb）が挙げられる。ターゲット療法としてのMAbの顕著な特異性は、それらをヒト療法のための有力な剤にする。MAbは疾患に対して保護するのに治療的に使用できるだけでなく、それらは様々な病気を診断し、血清タンパク質及び薬剤レベルを測定し、組織と血液をタイピングし、そして免疫応答に関与する感染物質と特定細胞を同定するためにも使用することができる。開発中の全バイオ医薬の約１／４がMAbであり、約30種の製品が使用されているか又は研究中である。MAbの大部分は癌に使用されている。（Gupta, N.他、Indian Journal of Pharmacology, 38 (2006) 390-396 ; Funaro, A.他、Biotechnology Advances 18 (2000) 385-401 ; Suemitsu, N.他、Immunology Froutier 9 (1999) 231-236）。
標識モノクローナル抗体及び生体内画像診断
生体内画像診断法の幾つかは、通常抗体の標識誘導体に基づいた腫瘍組織中の治療抗体の定量に利用できる。前記標識抗体としては一般に、放射能、例えばポジトロン放出断層撮影法（ＰＥＴ）に使用される、124Ｉ，111Ｉｎ，64Ｃｕ等（例えばRobinson, M.K.他、Cancer Res. 65 (2005) 1471-1478 ; Lawrentschuk, N.他、BJU International 97 (2006) 916-922 ; Olafsen, T.他、Cancer Research 65 (2005) 5907-5916 ; Trotter, D.E.他、Journal of Nuclear Medicine 45 (2004) 1237-1244を参照のこと）、単光子放出コンピューター断層撮影法（SPECT）に使用される123Ｉ，125Ｉ及び99mＴｃ等（例えばOrlova, A.他、Journal of Nulear Medicine 47 (2006) 512-519 ; Dietlein, M.他、European Journal of Haematology 74 (2005) 348-352を参照のこと）で標識された抗体が挙げられる。
生体内画像診断法の幾つかは、通常抗体の標識誘導体に基づいた腫瘍組織中の治療抗体の定量に利用できる。前記標識抗体としては一般に、放射能、例えばポジトロン放出断層撮影法（ＰＥＴ）に使用される、124Ｉ，111Ｉｎ，64Ｃｕ等（例えばRobinson, M.K.他、Cancer Res. 65 (2005) 1471-1478 ; Lawrentschuk, N.他、BJU International 97 (2006) 916-922 ; Olafsen, T.他、Cancer Research 65 (2005) 5907-5916 ; Trotter, D.E.他、Journal of Nuclear Medicine 45 (2004) 1237-1244を参照のこと）、単光子放出コンピューター断層撮影法（SPECT）に使用される123Ｉ，125Ｉ及び99mＴｃ等（例えばOrlova, A.他、Journal of Nulear Medicine 47 (2006) 512-519 ; Dietlein, M.他、European Journal of Haematology 74 (2005) 348-352を参照のこと）で標識された抗体が挙げられる。
生体内画像診断技術用に非放射性標識、例えば近赤外（NIR）蛍光標識、活性化可能な色素、及び内因性レポーター基（GFP様タンパク質のような蛍光タンパク質、及び生物発光画像診断）も知られている（Licha, K.他、Adv. Drug Rev., 57 (2005) 1087-1108）。特にNIR蛍光画像診断は、腫瘍組織中の治療抗体の定量に使用することができる。他の現行臨床画像診断法を上回る近赤外画像診断法の利点としては次のものが挙げられる：複数の区別できないプローブの同時使用が可能（分子画像診断に重要）；高い一時的分解（機能的画像診断に重要）；高い空間的分離（生体内顕微鏡検査に重要）：及び安全性（イオン化照射なし）。
NIR蛍光画像診断では、濾過された光又は限定された波長を有するレーザーが励起光の源として使用される。励起光は体組織を通って移動する。それが近赤外蛍光分子（「造影剤」）と出会うと、励起光が吸収される。
蛍光分子は次いでその励起光から分光的に区別可能である（わずかに長い波長）光（蛍光）を発生する。近赤外光による生物組織の良好な透過にも関わらず、従来の近赤外蛍光プローブは、別の造影剤が遭遇する多くの同じ制限、例えば低い標識／バックグラウンド比を受ける。
近赤外放射腺は６〜８センチメートルまでの組織浸透を示すので、近赤外波長（約640〜1300 nm）は内部組織の光学画像診断に使用されている。例えばWyatt, J.S., Phil. Trans. R. Soc. B 352 (1997) 697-700 ; Tromberg, B.J.他、Phil. Trans. R. Soc. London B 352 (1997) 661-667を参照のこと。
生体内画像診断に使用される抗体標識接合体の正確な量は、使用する標識の様々な性質や観点に依存し、例えばNIR蛍光標識の場合、標識の量子収率が使用する標識又は標識抗体の量の必要条件の１つである（例えばWO 2006/072580を参照のこと）。
療法における非標識モノクローナル抗体の投与及びモニタリング
療法における非標識モノクローナル抗体の投与及びモニタリング
悪性疾患の好結果治療法に影響を及ぼす要因としては、使用する抗体の量、投与スケジュール、抗体の半減期及び迅速な血液クリアランス、循環抗原の存在、高／モル重量モノクローナル抗体（mAB）の低腫瘍浸透性、並びにそれらの分子が代謝される経路が挙げられる。現在、抗体の生理学的機能と代謝の多くの面についての知識が欠けている（Iznaga-Escobar, N.他、Meth. Find. Exp. Clin. Pharm. (2004) 26(2) 123-127）。
悪性疾患の治療における抗体の用量と投与パターンは、一般に、血清半減期、種々の用量でのAUC、血液クリアランス等といった、そのような抗体の血清薬物動態特性に基づいている（Iznaga-Escobar, N.他、Meth. Find. Exp. Clin. Pharm. (2004) 26(2) 123-127 ; Lobo, E.D.他、J. Pharm. Sci. 93 (2004) 2645-2668 ; Tabrizi, M.A.他、Drug Discovery Today 11 (2006) 81-88）。
例えば、腫瘍治療において、固形腫瘍を標的指向する抗体の高血清レベルは、実際にその後の治療評価の基本的必要条件であると考えられる。この評価は、血清レベルがしばしば患者間で非常に異なるので困難である。しかしながら、最も最適な経路でそれの関連標的に結合する治療モノクローナル抗体は、関連標的に対してより低い親和性を有する抗体に比較して、迅速な血清クリアランス（関連する標的／媒介クリアランス）を有するだろう。これは、治療抗体の血漿レベルが腫瘍組織中の抗体の濃度と常に相関関係があるわけではないという１つの理由であるかもしれない（Clarke, K.他、Cancer Res. 60 (2000) 4804-4811 ; Charastina, A.他、Int. J. Cancer 105 (2003) 873-881 ; Lub-de Hooge, M.N.他、Brit. J. Pharmacol. 143 (2004) 99-106 ; Robinson, M.K.他、Cancer Res. 65 (2005) 1471-1478 ; Kenanova, V.他、Cancer Res. 65 (2005) 622-631 ; Batra, S.K.他、Curr. Opin. Biotechnol. 6 (2002) 603-608中に概説）。結果として、治療抗体の高血清レベル（特に腫瘍関連抗原に対する抗体）が、標的への減少した結合を示すことになる。更に、治療抗体が過剰投与（腫瘍飽和量以上に）される場合、遊離抗体がより低い親和性エピトーブに（又は免疫エフェクター細胞上のFcレセプターに）結合し、これが心筋細胞上のHER2阻害による抗HER2抗体治療での心不全といった、望ましくない副作用をもたらし得る（Grazette, L.P.他、J. Am. Coll. Card. (2004) 44(11), 2231-8 ; Negro, A., Recent Progres in Hormone Researh 59 (2004) 1-12 ; Negro, A.他、PNAS 103 (2006) 15889-15893）。従って、関連する血清半減期と一緒に単独の血清レベルの測定は、最も適した投与パターンを限定しなければならない時に誤解を招くかもしれない。
標識抗体の副作用
放射性標識で標識されたモノクローナル抗体は、そのような標識が健康な細胞でも引き起こし得る細胞障害のために１つの大きな欠点を有する。特に、それらの放射性標識抗体が診断目的で使用される場合、それらの副作用は望ましくない。実際、非放射性標識に共有結合された異なるモノクローナル抗体が存在する（Ballou, B.他、Proceeding of SPIE-The International Society for Optical Engineering 2680 (1996) 124-131 ; Ballou, B.他、Cancer detection and prevention (1998) 22 251-257 ; Becker, A.他、Nature Biotechnology 19 (2001) 327-331 ; Montet, X.他、Cancer Research 65 (2005) 6330-6336 ; Rosenthal, E.L.他、The Laryngoscope 116 (2006) 1636-1641 ; Hilger, I.他、European Radiology 14 (2004) 1124-1129 ; EP 1 619 501, WO 2006/072580, WO 2004/065491及びWO 2001/023005）。
放射性標識で標識されたモノクローナル抗体は、そのような標識が健康な細胞でも引き起こし得る細胞障害のために１つの大きな欠点を有する。特に、それらの放射性標識抗体が診断目的で使用される場合、それらの副作用は望ましくない。実際、非放射性標識に共有結合された異なるモノクローナル抗体が存在する（Ballou, B.他、Proceeding of SPIE-The International Society for Optical Engineering 2680 (1996) 124-131 ; Ballou, B.他、Cancer detection and prevention (1998) 22 251-257 ; Becker, A.他、Nature Biotechnology 19 (2001) 327-331 ; Montet, X.他、Cancer Research 65 (2005) 6330-6336 ; Rosenthal, E.L.他、The Laryngoscope 116 (2006) 1636-1641 ; Hilger, I.他、European Radiology 14 (2004) 1124-1129 ; EP 1 619 501, WO 2006/072580, WO 2004/065491及びWO 2001/023005）。
それらの結合体は罹患部位とサイズ（例えば腫瘍の又は炎症の）を検出するための生体内画像診断技術において使用された。この診断用途はいずれも、手術かモノクローナル抗体を含む化学療法剤のいずれかによる治療の前又は後での診断を意図している。一般にそれらの標識モノクローナル抗体は、使用する非放射性標識の副作用が重要でない役割を果たすような（放射性標識の使用に比較して）診断用量で使用された。
しかしながら、それらの標識モノクローナル抗体が治療に使用されるならば、それらの標識のしばしば深刻な毒性のために非放射性標識の量が重要である（特にシアニン及びカルボシアニン色素の量；例えばKues, H.A., Lutty, G.A. “Dyes can be deadly”; Laser Focus (1975) 11(5) 59-61参照）。従って、それらの標識モノクローナル抗体は、望ましくない副作用を引き起こすことなく、治療剤として又は治療用量で直接使用することができるというのは疑わしい（例えばHilger, I.他、European Radiology 14 (2004) 1124-1129参照）。
治療抗体の副作用
モノクローナル抗体治療の望ましくない副作用がその治療の過程で及びそのような治療の最大持続期間で重要な役割を果たすので、前記抗体による最初の治療中の罹患領域（着目の領域、例えば腫瘍又は炎症部位の）での抗体濃度の時間依存性についての十分な情報を得ることは重要な課題である。これは、望ましくない過剰投与が最小限に抑えられ且つ最小の必要な抗体濃度が使用されるような方法で連続処置／投与のための投与スケジュールの採択を可能にするだろう。
モノクローナル抗体治療の望ましくない副作用がその治療の過程で及びそのような治療の最大持続期間で重要な役割を果たすので、前記抗体による最初の治療中の罹患領域（着目の領域、例えば腫瘍又は炎症部位の）での抗体濃度の時間依存性についての十分な情報を得ることは重要な課題である。これは、望ましくない過剰投与が最小限に抑えられ且つ最小の必要な抗体濃度が使用されるような方法で連続処置／投与のための投与スケジュールの採択を可能にするだろう。
副作用の最小化に関する個々の投与スケジュールを最適化するために、患者間での抗体濃度の時間依存性の差異を考慮に入れることができる。
本発明は、少なくとも１：９の未標識抗体対標識抗体の予め決められた量で
a) ヒト膜貫通タンパク質の細胞外ドメインに結合するモノクローナル抗体；及び
b) NIR蛍光標識に共有結合で結合された前記抗体
を含んで成る医薬組成物に関する。
a) ヒト膜貫通タンパク質の細胞外ドメインに結合するモノクローナル抗体；及び
b) NIR蛍光標識に共有結合で結合された前記抗体
を含んで成る医薬組成物に関する。
好ましくは前記モノクローナル抗体が治療モノクローナル抗体である。
未標識抗体対標識抗体の典型的比は少なくとも１：９である。１つの好ましい態様では、その比は少なくとも２：１であり、別の好ましい態様ではその比は少なくとも９：１であり、更に別の好ましい態様ではその比は少なくとも19：１である。
最大比は典型的には標識の検出限界により制限される。よって、理想の比は、まだ十分なNIR蛍光シグナル又は検出中の画像を与える標識抗体の最低部分を有するものであろう。こうして未標識の治療モノクローナル抗体は、その作用機序で少なくとも治療効果を及ぼし、それと同時に、例えば固形腫瘍の領域での標識抗体の速度論についての重要な情報を得ることができ、この情報は最適な用量間隔又はスキームのための基本として使用することができる。未標識抗体対標識抗体の比は、当業者により日常的実験において評価することができる。これに関して、組成物は典型的には少なくとも0.001 mg/kg体重、好ましくは0.01 mg/kg体重、より好ましくは0.1 mg/kg体重の量で標識抗体を含んで成る。正確な量は、異なることができ、そして例えば標識及びそれの量収率に依存することができる。その量は当業者により単純な日常的実験で限定することができる。よって、その比の上限は典型的な治療用量と標識の検出限界に依存して異なる。治療的処置のためのモノクローナル抗体の典型的用量に基づいて（例えばトラスツズマブの用量は２〜８ mg/kg体重の当たりにある）、好ましい最大比は例えば500：１であり、別の好ましい比は100：１であり、他の比は50：１であり、更に別の比は20：１である。
好ましくは、ヒトタンパク質は過剰発現されたヒトタンパク質、より好ましくは過剰発現された腫瘍関連タンパク質である。
よって本発明は、少なくとも９：１で且つ最大100：１の未標識抗体対標識抗体の予め決められた比での
a) 過剰発現された腫瘍関連タンパク質の細胞外ドメインに結合する治療モノクローナル抗体であって、過剰発現が腫瘍疾患に関連がある抗体；及び
b) NIR蛍光標識に共有結合で結合された前記治療モノクローナル抗体
を含んで成る医薬組成物に関する。
a) 過剰発現された腫瘍関連タンパク質の細胞外ドメインに結合する治療モノクローナル抗体であって、過剰発現が腫瘍疾患に関連がある抗体；及び
b) NIR蛍光標識に共有結合で結合された前記治療モノクローナル抗体
を含んで成る医薬組成物に関する。
この組成物は、そのようなヒトタンパク質の過剰発現に関連付けられる疾患（例えば関連タンパク質過剰発現を有する癌、例えばHER陽性乳癌）を有する患者を治療するために使用でき、そして同時に最適化された投与間隔（薬剤代謝に依存して個々の患者について）を決定するのに役立つことができる。
投与間隔の長さは、主に２つの面に基づいて決定される。一方では、疾患の部位でのモノクローナル抗体の量が治療効果を発揮するのに十分な位十分に短くなければならず、他方で、過剰発現及び薬剤に関連する副作用を最小化するのに十分な位長くなければならない。
普通、投与間隔は1) 例えばモノクローナル抗体の血清レベル及び2) 後で関連付けられる治療の効果の別々の測定により決定される。しかしながら、このアプローチを使って、異なる患者の異なる代謝は無視されるか、又は患者の多数のグループの平均をとることにより取り除かれる。よって、新規組成物は未標識抗体と標識治療モノクローナル抗体を含んで成る。
本発明の別の態様は、前記医薬組成物の製造のための、過剰発現された腫瘍関連タンパク質の細胞外ドメインに結合する未標識の治療モノクローナル抗体の使用であって、前記過剰発現が腫瘍疾患に関連付けられ、第一の腫瘍治療のための該組成物は、少なくとも９：１で且つ最大100：１の未標識抗体対標識抗体の予め決められた比で、
a) 過剰発現された腫瘍関連タンパク質の細胞外ドメインに結合する治療モノクローナル抗体、及び
b) NIR蛍光標識に共有結合で結合された前記治療モノクローナル抗体
を含んで成り、そして
前記第一の治療の後で、
腫瘍部位のNIR蛍光標識に共有結合で結合された抗体のシグナル強度が腫瘍部位での最大シグナル強度の80％である時に、未標識モノクローナル抗体を含んで成るが標識モノクローナル抗体を含まない第二の医薬組成物での第二の治療を実施することを特徴とする。
a) 過剰発現された腫瘍関連タンパク質の細胞外ドメインに結合する治療モノクローナル抗体、及び
b) NIR蛍光標識に共有結合で結合された前記治療モノクローナル抗体
を含んで成り、そして
前記第一の治療の後で、
腫瘍部位のNIR蛍光標識に共有結合で結合された抗体のシグナル強度が腫瘍部位での最大シグナル強度の80％である時に、未標識モノクローナル抗体を含んで成るが標識モノクローナル抗体を含まない第二の医薬組成物での第二の治療を実施することを特徴とする。
別の態様では、第二の治療はシグナル強度が70％である時に与えられ、更に別の態様ではシグナル強度が60％である。
本発明の別の態様は、第一の腫瘍治療のための、少なくとも９：１で且つ最大100：１の未標識抗体対標識抗体の予め決められた比で、
a) 過剰発現された腫瘍関連タンパク質の細胞外ドメインに結合する治療モノクローナル抗体であって、前記過剰発現が腫瘍疾患に関連がある抗体、及び
b) NIR蛍光標識に共有結合で結合された前記治療モノクローナル抗体
を含んで成る医薬組成物の製造のための、過剰発現された腫瘍関連タンパク質の細胞外ドメインに結合する未標識の治療モノクローナル抗体の使用であって、
未標識モノクローナル抗体を含んで成るが標識モノクローナル抗体を含まない第二の医薬組成物を、腫瘍部位のNIR蛍光標識に共有結合で結合された抗体のシグナル強度が、第一の治療後に測定された固形腫瘍の領域中の最大シグナル強度の80％である時に、投与することを特徴とする使用である。
a) 過剰発現された腫瘍関連タンパク質の細胞外ドメインに結合する治療モノクローナル抗体であって、前記過剰発現が腫瘍疾患に関連がある抗体、及び
b) NIR蛍光標識に共有結合で結合された前記治療モノクローナル抗体
を含んで成る医薬組成物の製造のための、過剰発現された腫瘍関連タンパク質の細胞外ドメインに結合する未標識の治療モノクローナル抗体の使用であって、
未標識モノクローナル抗体を含んで成るが標識モノクローナル抗体を含まない第二の医薬組成物を、腫瘍部位のNIR蛍光標識に共有結合で結合された抗体のシグナル強度が、第一の治療後に測定された固形腫瘍の領域中の最大シグナル強度の80％である時に、投与することを特徴とする使用である。
別の態様では、第二の治療はシグナル強度が70％である時に与えられ、更に別の態様ではシグナル強度が60％である。
本発明の別の態様は、第一の腫瘍治療のための、少なくとも９：１で且つ最大100：１の未標識抗体対標識抗体の予め決められた比で、
a) 過剰発現された腫瘍関連タンパク質の細胞外ドメインに結合する治療モノクローナル抗体であって、前記過剰発現が腫瘍疾患に関連がある抗体、及び
b) NIR蛍光標識に共有結合で結合された前記治療モノクローナル抗体
を含んで成る医薬組成物、及び第二の腫瘍治療のための、未標識モノクローナル抗体を含んで成るが標識モノクローナル抗体を含まない医薬組成物である。
a) 過剰発現された腫瘍関連タンパク質の細胞外ドメインに結合する治療モノクローナル抗体であって、前記過剰発現が腫瘍疾患に関連がある抗体、及び
b) NIR蛍光標識に共有結合で結合された前記治療モノクローナル抗体
を含んで成る医薬組成物、及び第二の腫瘍治療のための、未標識モノクローナル抗体を含んで成るが標識モノクローナル抗体を含まない医薬組成物である。
本発明の別の態様は、第一の腫瘍治療のための、少なくとも９：１で且つ最大100：１の未標識抗体対標識抗体の予め決められた比で、
b) 過剰発現された腫瘍関連タンパク質の細胞外ドメインに結合する治療モノクローナル抗体であって、該過剰発現が腫瘍疾患に関連がある抗体、及び
c) NIR蛍光標識に共有結合で結合された前記治療モノクローナル抗体
a) を含んで成る容器；及び
第二の腫瘍治療のための、
a) 過剰発現された腫瘍関連タンパク質の細胞外ドメインに結合する未標識の治療モノクローナル抗体を含んで成るが標識された治療モノクローナル抗体を含まない医薬組成物
を含んで成る容器である。
b) 過剰発現された腫瘍関連タンパク質の細胞外ドメインに結合する治療モノクローナル抗体であって、該過剰発現が腫瘍疾患に関連がある抗体、及び
c) NIR蛍光標識に共有結合で結合された前記治療モノクローナル抗体
a) を含んで成る容器；及び
第二の腫瘍治療のための、
a) 過剰発現された腫瘍関連タンパク質の細胞外ドメインに結合する未標識の治療モノクローナル抗体を含んで成るが標識された治療モノクローナル抗体を含まない医薬組成物
を含んで成る容器である。
本発明の一態様は、癌、好ましくは固形腫瘍の治療用の前記医薬組成物の製造のための前記モノクローナル抗体の使用である。
本発明の別の態様は、癌、好ましくは固形腫瘍の治療用の医薬組成物の製造のための過剰発現された腫瘍関連タンパク質の細胞外ドメインに結合する未標識の治療モノクローナル抗体の使用であって、前記未標識のモノクローナル抗体が、少なくとも９：１で且つ最大100：１の未標識抗体対標識抗体の予め決められた比で、NIR蛍光標識に共有結合で結合された前記抗体と共に同時投与されることを特徴とする使用である。
本発明の別の態様は、腫瘍関連タンパク質を過剰発現している固形腫瘍を患っている患者の治療用の医薬の製造のための過剰発現された腫瘍関連タンパク質の細胞外ドメインに結合する未標識の治療モノクローナル抗体の使用であって、前記未標識の抗体はNIR蛍光標識に共有結合で結合された前記抗体と共に同時投与される。
本発明の一態様では、前記腫瘍関連タンパク質を過剰発現している固形腫瘍を患っている患者のNIR蛍光画像が獲得される。
本発明の別の態様では、固形腫瘍の領域中のNIR蛍光標識に共有結合で結合された前記抗体のNIR蛍光シグナルが測定される。
本発明の別の態様は、腫瘍関連タンパク質を過剰発現している固形腫瘍を患っている患者の治療のための、過剰発現された腫瘍関連タンパク質の細胞外ドメインに結合する未標識の治療モノクローナル抗体であり、ここで前記未標識の抗体はNIR蛍光標識に共有結合で結合された前記抗体と共に同時投与される。
本発明の別の態様は、一定量の医薬組成物を投与した腫瘍関連タンパク質を過剰発現している固形腫瘍を患っている患者のNIR蛍光画像を獲得する方法であって、前記組成物は、少なくとも９：１で且つ最大100：１の未標識抗体対標識抗体の予め決められた比で、
a) 過剰発現された腫瘍関連タンパク質の細胞外ドメインに結合する治療モノクローナル抗体であって、前記過剰発現が腫瘍疾患と関連がある抗体、及び
b) NIR蛍光標識に共有結合で結合された前記治療モノクローナル抗体
を含んで成り、
ここで固形腫瘍の一領域中の過剰発現された腫瘍関連タンパク質の細胞外ドメインに結合する前記標識治療モノクローナル抗体のNIR蛍光シグナルが測定される
ことを特徴とする方法である。
a) 過剰発現された腫瘍関連タンパク質の細胞外ドメインに結合する治療モノクローナル抗体であって、前記過剰発現が腫瘍疾患と関連がある抗体、及び
b) NIR蛍光標識に共有結合で結合された前記治療モノクローナル抗体
を含んで成り、
ここで固形腫瘍の一領域中の過剰発現された腫瘍関連タンパク質の細胞外ドメインに結合する前記標識治療モノクローナル抗体のNIR蛍光シグナルが測定される
ことを特徴とする方法である。
本発明の別の態様は、医薬組成物による治療を受けた患者の固形腫瘍の一領域中のNIR蛍光標識に共有結合で結合された治療モノクローナル抗体のNIR蛍光シグナルを測定する方法であって、前記医薬組成物が
少なくとも９：１で且つ最大100：１の未標識抗体対標識抗体の予め決められた比で、
a) 過剰発現された腫瘍関連タンパク質の細胞外ドメインに結合する治療モノクローナル抗体であって、前記過剰発現が腫瘍疾患と関連がある抗体、及び
b) NIR蛍光標識に共有結合で結合された前記治療モノクローナル抗体
を含んで成ることを特徴とする方法である。
少なくとも９：１で且つ最大100：１の未標識抗体対標識抗体の予め決められた比で、
a) 過剰発現された腫瘍関連タンパク質の細胞外ドメインに結合する治療モノクローナル抗体であって、前記過剰発現が腫瘍疾患と関連がある抗体、及び
b) NIR蛍光標識に共有結合で結合された前記治療モノクローナル抗体
を含んで成ることを特徴とする方法である。
本発明の別の態様は、癌の治療用の医薬組成物の製造のためのヒト膜貫通タンパク質の細胞外ドメインに結合するモノクローナル抗体の使用であって、前記モノクローナル抗体が少なくとも１：９の未標識抗体対標識抗体の予め決められた比でNIR蛍光標識に共有結合で結合された抗体と共に同時投与されることを特徴とする使用である。
本発明の別の態様は、医薬組成物での治療の最中のNIR蛍光標識に共有結合で結合されたモノクローナル抗体の量の変化を測定する方法であって、前記医薬組成物が、少なくとも１：９の未標識抗体対標識抗体の予め決められた比で、
a) ヒト膜貫通タンパク質の細胞外ドメインに結合するモノクローナル抗体、及び
b) NIR蛍光標識に共有結合で結合された前記抗体
を含んで成ることを特徴とする方法である。
本発明の別の態様は、医薬組成物での治療の最中のNIR蛍光標識に共有結合で結合されたモノクローナル抗体の量の変化を測定する方法であって、前記医薬組成物が、少なくとも１：９の未標識抗体対標識抗体の予め決められた比で、
a) ヒト膜貫通タンパク質の細胞外ドメインに結合するモノクローナル抗体、及び
b) NIR蛍光標識に共有結合で結合された前記抗体
を含んで成ることを特徴とする方法である。
本発明の別の態様は、前記未標識モノクローナル抗体と同時投与の再中のNIR蛍光標識に共有結合で結合されたモノクローナル抗体の量の変化を測定する方法である。
発明の詳細な説明
１．定義
用語「抗体」は、非限定的に完全な抗体、ヒト抗体、ヒト化抗体及び遺伝子操作された抗体、例えばモノクローナル抗体、キメラ抗体又は組み換え抗体、並びに本発明に係る特徴的性質が維持される限りでのそのような抗体の断片、をはじめとする抗体の様々な形態を包含する。
１．定義
用語「抗体」は、非限定的に完全な抗体、ヒト抗体、ヒト化抗体及び遺伝子操作された抗体、例えばモノクローナル抗体、キメラ抗体又は組み換え抗体、並びに本発明に係る特徴的性質が維持される限りでのそのような抗体の断片、をはじめとする抗体の様々な形態を包含する。
本明細書中で称する用語「モノクローナル抗体」又は「モノクローナル抗体組成物」とは、単一アミノ酸組成の抗体分子の調製物を言う。従って、「ヒトモノクローナル抗体」という用語は、ヒト生殖細胞系列の免疫グロブリン配列から誘導された可変領域と定常領域を有する単一の結合特異性を示す抗体を言う。一態様では、ヒトモノクローナル抗体は、ヒト重鎖トランス遺伝子と不死化細胞に融合された軽鎖ヒトトランス遺伝子を含んで成るゲノムを有する、トランスジェニック非ヒト動物、例えばトランスジェニックマウスから得られたＢ細胞を含むハイブリドーマにより生産される。
本明細書中で使用する用語「治療モノクローナル抗体」は、ヒト膜貫通タンパク質の細胞外ドメインに特異的に結合し、且つ患者に投与した時に前記ヒト膜貫通タンパク質の発現と関連がある疾患に対して治療効果を有する、上記に定義したモノクローナル抗体を言う。好ましくは、治療モノクローナル抗体は、前記腫瘍又は癌疾患の発現、好ましくは過剰発現と関連がある、腫瘍又は癌疾患の治療効果を有する。典型的には、そのような抗腫瘍治療モノクローナル抗体は、例えば、アレムツズマブ、アポリズマブ、セツキシマブ、エプラツズマブ、ガリキシマブ、ゲムツズマブ、イピリムマブ、ラベツズマブ、パニツムマブ、リツキシマブ、トラスツズマブ、ニモツズマブ、マパツムマブ、マツズマブ及びペルツズマブ、好ましくはトラスツズマブ、セツキシマブ及びペルツズマブから成る非限定的群より選択することができる。
用語「キメラ抗体」とは、通常は組換えＤＮＡ技術により調製された、１つの源又は種からの可変領域、即ち結合領域と、別の源又は種から誘導された定常領域の少なくとも一部分とを含んで成るモノクローナル抗体を言う。マウス可変領域とヒト定常領域とを含んで成るキメラ抗体が特に好ましい。そのようなマウス／ヒトキメラ抗体は、マウス免疫グロブリン可変領域をコードするＤＮＡセグメントと、ヒト免疫グロブリン定常領域をコードするＤＮＡセグメントとを含んで成る、発現された免疫グロブリン遺伝子の産物である。「キメラ抗体」の別の形は、クラス又はサブクラスが元の抗体のものから修飾又は変更されているものである。そのような「キメラ抗体」は、「クラススイッチ抗体」とも呼ばれる。キメラ抗体を作製する方法は、当業界で現在周知である常用の組換えＤＮＡ及び遺伝子トランスフェクション技術を含む。例えばMorrison, S.L.他、Proc. Natl. Acad. Sci. USA 81 (1984) 6851-6855 ; US 5,202,238及びUS 5,204,244を参照のこと。
用語「ヒト化抗体」とは、フレームワーク又は「相補性決定領域（ＣＤＲ）」が親の免疫グロブリンのものと比較して異なる特異性の免疫グロブリンのＣＤＲを含んで成るように変更されている抗体を言う。好ましい態様では、マウスＣＤＲがヒト抗体のフレームワーク領域にグラフトされて「ヒト化抗体」を調製する。例えばRiechmann, L.他、Nature 332 (1988) 323-327 ; Neuberger, M.S.他、Nature 314 (1985) 268-270を参照のこと。特に好ましいＣＤＲは、キメラ及び二機能性抗体について上述した抗原を認識する配列に相当する。
本明細書中で使用する用語「ヒト抗体」は、ヒト生殖細胞系列免疫グロブリン配列から誘導された可変及び定常領域を有する抗体を包含するものである。ヒト抗体は技術の現状で周知である（van Dijk, M.A.及びvan de Winkel, J.G., Curr. Opin. in Chemical Biology 5 (2001) 368-374）。そのような技術に基づいて、多様な標的に対するヒト抗体を作製することができる。ヒト抗体の例は例えばKellermann, S.A.他、Curr. Opin. Biotechnol. 13 (2002) 593-597中に記載されている。
本明細書中で使用する用語「組み換えヒト抗体」は、組み換え手段により調製、発現、作製又は単離された全てのヒト抗体を包含するものであり、例えばNS0もしくはCHO細胞のような宿主細胞から又は宿主細胞中にトランスフェクトされた組み換え発現ベクターを使って発現されたヒト免疫グロブリン遺伝子もしくは抗体に対してトランスジェニックである動物（例えばマウス）から単離された抗体である。そのような組み換えヒト抗体は再配列された形でヒト免疫グロブリンの生殖細胞系列配列から誘導された可変及び定常領域を有する。本発明に係る組み換えヒト抗体は、生体内体細胞超変異にかけられている。よって、ヒト生殖細胞系列ＶＨ及びＶＬ配列から誘導されそしてそれに関連する配列である組換え抗体のＶＨ及びＶＬ領域のアミノ酸配列は、生体内のヒト抗体生殖細胞系列レパートリーの中には天然に存在しないであろう。
本明細書中で使用する「結合する」又は「特異的に結合する」とは、抗体が特異的であるヒト膜貫通タンパク質の細胞外ドメインへの抗体結合を言う。好ましくは、結合親和力は約10-11〜10-8Ｍ（KD）であり、好ましくは約10-11〜10-9Ｍである。
本明細書中で使用する用語「核酸分子」とは、ＤＮＡ分子とＲＮＡ分子を包含するものである。核酸分子は一本鎖であっても二本鎖であってもよいが、好ましくは二本鎖ＤＮＡである。
「定常領域」は、抗原への抗体の結合に直接関連しないがエフェクター機能に関係する（ADCC，補体結合及びCDC）。
本明細書中で使用する「可変領域」（軽鎖（ＶＬ）の可変領域、重鎖（ＶＨ）の可変領域）は、抗原への抗体の結合に直接関連する軽鎖と重鎖の対の各々を表す。可変ヒト軽鎖及び重鎖のドメインは同じ一般構造を有し、各ドメインは、３つの「超可変領域」により連結された、配列が広く保存されている４つのフレームワーク（ＦＲ）領域を含んで成る（又は相補性決定領域（ＣＤＲ））。フレームワーク領域はβ−シート構造を採用し、そしてＣＤＲはβ−シート構造を連結するループを形成することができる。各鎖中のＣＤＲは、フレームワーク領域により三次元構造中に維持され、そして別の鎖からのＣＤＲと一緒になって抗原結合部位を形成する。抗体重鎖及び軽鎖ＣＤＲ３領域は、本発明に係る抗体の結合特異性／親和性において特に重要な役割を果たし、従って本発明の更なる目的を提供する。
本明細書中で使用する時の用語「超可変領域」又は「抗体の抗原結合部分」は、抗原結合の原因である抗体のアミノ酸残基を指して言う。超可変領域は、「相補性決定領域」又は「ＣＤＲ」からのアミノ酸残基を含んで成る。「フレームワーク」又は「ＦＲ」領域は、ここで定義されるような超可変領域残基以外の可変領域である。従って、抗体の軽鎖と重鎖は、Ｎ末端からＣ末端に向かって、ドメインＦＲ１，ＣＤＲ１，ＦＲ２，ＣＤＲ２，ＦＲ３，ＣＤＲ３及びＦＲ４を含んで成る。特に、重鎖のＣＤＲ３は、抗原結合に最も寄与する領域である。ＣＤＲとＦＲ領域は、Kabat, E.A.他、Sequence of Proteins of Immunological Interest, 第５版, Public Health Service, National Institutes of Health, Bethesda, MD (1991)の標準定義に従って決定されそして／又は「超可変ループ」からの残基である。
本明細書中で使用する時の用語「ヒト膜貫通タンパク質」は、細胞の脂質二重膜中に固定された細胞膜タンパク質を言う。ヒト膜貫通タンパク質は、リガンドを結合することができる、一般に本明細書中で使用する「細胞外ドメイン」；親油性膜貫通ドメイン；保存された細胞内ドメインチロシンキナーゼドメイン；およびリン酸化され得る幾つかのチロシン残基を持っているカルボキシル末端シグナル形成ドメインを含んで成るだろう。
ヒト膜貫通タンパク質としては、EGFR, HER2/neu, HER3, HER4, Ep-CAM, CEA, TRAIL, TRAILレセプター１, TRAILレセプター２，リンホトキシンβレセプター，CCR4, CD19, CD20, CD22, CD28, CD33, CD40, CD80, CSF-1R, CTLA-4, 繊維芽活性化タンパク質（FAP），ヘプシン，黒色腫関連コンドロイチン硫酸プロテオグリカン（MCSP），前立腺特異的膜抗原（PSMA），VEGFレセプター１, VEGFレセプター２, IGF1-R, TSLP-R, TIE-1, TIE-2, TNF-α, TNF様のアポトーシス弱力誘導因子（TWEAK），IL-1R，好ましくはBEGFR, HER2/neu, CEA, CD20又はIGF1-Rが挙げられる。
本明細書中で使用する用語「癌」及び「腫瘍」は、典型的には無秩序の細胞増殖により特徴づけられる哺乳類の生理学的状態を言うか又は説明する。癌又は腫瘍の例としては、非限定的に、癌腫、リンパ腫、芽細胞腫（髄芽細胞腫及び網膜芽細胞腫を含む）、肉腫（脂肪肉腫及び滑膜肉腫を含む）、神経内分泌腫瘍（カルチノイド腫瘍、ガストリノーマ及び島細胞癌を含む）、中皮腫、シュワン細胞癌（聴神経腫を含む）、髄膜腫、腺癌、黒色腫、及び白血病又はリンパ悪性が挙げられる。そのような癌の更なる特定例としては、扁平細胞癌（例えば上皮扁平細胞癌）、肺癌、例えば小細胞肺癌、非小細胞肺癌、肺の腺癌、及び肺の扁平上皮癌、腹膜の癌、肝細胞癌、胃腸癌を含む胃癌、膵臓癌、膠芽細胞腫、子宮頚癌、卵巣癌、肝臓癌、膀胱癌、肝癌、乳癌、結腸癌、直腸癌、結直腸癌、子宮内膜癌又は子宮癌、唾液腺癌、腎臓又は直腸癌、前立腺癌、外陰癌、甲状腺癌、肝癌、肛門癌、陰茎癌、精巣癌、食道癌、胆汁管の癌及び頸部癌が挙げられる。好ましくは癌は固形腫瘍である。
本明細書中で使用する時の用語「固形腫瘍」は、胃腸癌、膵臓癌、膠芽細胞腫、子宮頚癌、卵巣癌、肝臓癌、膀胱癌、肝癌、乳癌、結腸癌、直腸癌、結直腸癌、子宮内膜又は子宮癌、唾液腺癌、腎臓又は直腸癌、前立腺癌、陰門癌、甲状腺癌、膵臓癌、肛門癌、陰茎癌、精巣癌、食道癌、胆汁管癌、並びに頭部及び頸部の癌の群より選択された腫瘍を言う。
用語「過剰発現された」ヒト膜貫通タンパク質又はヒト膜貫通タンパク質の「過剰発現」は、組織もしくは器官からの正常細胞中での発現のレベルに比較して親の特定組織もしくは器官内の腫瘍又は関節炎のような罹患部位からの細胞中のヒト膜貫通タンパク質の発現の異常レベルを指摘するために用いられる。例えばヒト膜貫通タンパク質の過剰発現により特徴づけられる患者は、当業界で既知の標準アッセイにより決定することができる。
用語「同時投与」又は「同時投与する」は、未標識抗体と同時に標識抗体が投与されることを意味する。
抗体は、研究者、獣医、医師又は他の臨床医により捜し求められている組織、系、動物又はヒトの生物学的又は医学的応答を惹起するであろう目的化合物又は組成物の量である、治療上有効な量で患者に投与されることは自明である。
本明細書中に記載するように、「患者」は好ましくは、癌、又は前癌状態もしくは病変を治療する治療を必要とするヒトを言う。しかしながら、「患者」という用語は、非ヒト動物、好ましくはイヌ、ネコ、ウマ、ウシ、ブタ、ヒツジ、及び治療を必要とする特に非ヒト霊長類も言及することができる。
本明細書中で使用する用語「標識に共有結合で結合された抗体」又は「標識抗体」は、標識に結合されている抗体を言う。結合技術は、過去数年間の間に十分に熟成されており、そして優れた概説がAslam, M.及びDent, A., Bioconjugation, London (1998) 216-363中及びTijssen, P., “Practice and theory of enzyme immunoassay”中の章“Macromolecule conjucation”中に与えられている。
本明細書中で使用する用語「未標識抗体」は、標識されていない抗体を言う。
本明細書中で使用する用語「NIR」は、近赤外を意味する。
本明細書中で使用する時の用語「固形腫瘍の領域」は、固形腫瘍を含んで成る区画を言う。固形腫瘍の領域は完全な固形腫瘍又はそれの局所部分のみのいずれかを含んで成ることができる。前記固形腫瘍の領域中のNIR蛍光シグナルが測定され、そして二次元又は三次元系のいずれかで、例えば周囲の非腫瘍組織との比較において、又は比較対照として異なる時点でのNIR蛍光シグナル又は画像との比較において、対応するNIR蛍光画像が獲得される。
用語「予め決められた比で」とは、そのような組成物の調製前に決定された、未標識抗体と標識抗体の比を言う。その比は、例えば固形腫瘍又は悪性血液細胞の画像診断のためのそのような組成物の意図する使用、画像診断装置（例えば外視又は内視鏡等）と関連して選択され、そして特に使用する標識及び抗体上の量子収率に依存する。
未標識抗体対標識抗体の典型的比は、少なくとも１：９であり、好ましくは少なくとも２：１であり、より好ましくは少なくとも９：１である。最大比は典型的には標識の検出限界により限定される。これに関連して、組成物は典型的には少なくとも0.001 mg/kg体重、好ましくは0.01 mg/kg体重、より好ましくは0.1 mg/kg体重の量で標識抗体を含んで成る。正確な量は異なることができ、そして例えば標識及びそれの量子収率に依存することができる。その量は単純な日常的実験により当業者により限定することができる。
２．具体的説明
本発明は、少なくとも１：９の未標識抗体対標識抗体の予め決められた比で、
a) ヒト膜貫通タンパク質の細胞外ドメインに結合するモノクローナル抗体、及び
b) NIR蛍光標識に共有結合で結合された前記抗体
を含んで成る医薬組成物に関する。
本発明は、少なくとも１：９の未標識抗体対標識抗体の予め決められた比で、
a) ヒト膜貫通タンパク質の細胞外ドメインに結合するモノクローナル抗体、及び
b) NIR蛍光標識に共有結合で結合された前記抗体
を含んで成る医薬組成物に関する。
好ましくは、ヒトタンパク質は過剰発現されたヒトタンパク質であり、そして更に過剰発現は疾患に関連付けられる。
好ましい態様では、前記抗体は腫瘍学的標的、例えば固形腫瘍中の循環悪性細胞又は膜貫通タンパク質に対して向けられる。好ましい態様では、前記抗体はEGFR，HER2/neu, HER3, HER4, Ep-CAM, CEA, TRAIL, TRAILレセプター１，TRAILレセプター２, リンホトキシンβレセプター, CCR4, CD19, CD20, CD22, CD28, CD33, CD40, CD80, CSF-1R, CTLA-4, 繊維芽活性化タンパク質（FAP）、ヘプシン、黒色腫関連コンドロイチン硫酸プロテオグリカン（MCSP）、前立腺特異的膜抗原（PSMA）、VEGFレセプター１、VEGFレセプター２、IGF1-R，TSLP-R，TIE-1, TIE-2, TNF-α, THF様アポトーシス弱力誘導因子(TWEAK), IL-1R, 好ましくはEGFR, HER2/neu, CEA, CD20又はIGF1-Rに向けられる。
好ましくは前記抗体が抗HER2抗体であり、好ましくはトラスツズマブ又はペルツズマブである。
好ましくは前記抗体が抗EGFR2抗体であり、好ましくはセツキシマブ、ニモツズマブ又はマツズマブである。好ましくは前記抗体が抗IGF1R抗体である。
本発明の一態様では、医薬組成物は抗体が次の群から選択されることを特徴とする：
アレムツズマブ、アポリズマブ、セツキシマブ、エプラツズマブ、ガリキシマブ、ゲムツズマブ、イピリムマブ、ラベツズマブ、パニツムマブ、リツキシマブ、トラスツズマブ、ニモツズマブ、マパツムマブ、マツズマブ及びペルツズマブ、好ましくはトラスツズマブ、セツキシマブ及びペルツズマブ。
アレムツズマブ、アポリズマブ、セツキシマブ、エプラツズマブ、ガリキシマブ、ゲムツズマブ、イピリムマブ、ラベツズマブ、パニツムマブ、リツキシマブ、トラスツズマブ、ニモツズマブ、マパツムマブ、マツズマブ及びペルツズマブ、好ましくはトラスツズマブ、セツキシマブ及びペルツズマブ。
該組成物は、典型的には少なくとも0.001 mg/kg体重、好ましくは0.01 mg/kg体重、より好ましくは0.1 mg/kg体重の量の標識に共有結合で結合された抗体を含んで成る。正確な量は変化し、そして例えば標識及びそれの量子収率に依存し得る。該量は単純な日常的実験により当業者により決定することができる。
前記抗体は、NIR蛍光画像診断を使った腫瘍濃度の測定に適当な近赤外（NIR）蛍光標識で標識される。
固形腫瘍の領域中のNIR蛍光シグナルの「測定」又は「決定」は、患者への標識抗体の投与後に実施される。又は、本発明に係る組成物を使用する場合、患者への未標識抗体と標識抗体の組成物の投与後に実施される。測定は、投与後の限定された時点で、即ち１日、２日もしくは３日目又は更に数日目に、又は固形腫瘍の領域中の比較可能なNIR蛍光シグナル又は画像を獲得するのに適したいずれかの時点で、実施することができる。測定の期間又は投与後の時点は、適当なNIR蛍光シグナル又は画像が得られるようなやり方で当業者により調節することができる。
NIR蛍光測定には、様々な装置又は技術を使用することができ、例えば乳癌のような外部固形腫瘍には、ART Advanced Research Technologies Inc.からのSoftScan（登録商標）（http://www.art.ca/en/products/softscan.html）が適当である（Intes X, Acad. Radiol. 12 (2005) 934-947）。結直腸癌又は肺癌のような内部罹患領域の場合、内視鏡技術又はマイクロ手術−内視鏡の組み合わせを使用することができる。
近赤外スペクトル中に励起及び発光波長を有するNIR蛍光標識、即ち、640〜1300 nm、好ましくは640〜1200 nm、より好ましくは640〜900 nmが使用される。電磁気スペクトルのこの部分は、組織透過を最大にし且つヘモグロビン（＜650 nm）及び水（＞1200 nm）のような生理学的に豊富な吸収剤による吸収を最小にする。生体内使用のための理想的近赤外蛍光団は次の特徴を示す：
(1) 狭域のスペクトル性質、
(2) 高い感度（量子収率）、
(3) 生体適合性、及び
(4) 分断された吸収及び励起スペクトル。
(1) 狭域のスペクトル性質、
(2) 高い感度（量子収率）、
(3) 生体適合性、及び
(4) 分断された吸収及び励起スペクトル。
様々な近赤外（NIR）蛍光標識が市販されており、そして本発明に従ってプローブを調製するのに使用することができる。典型的なNIRF標識としては次のものが挙げられる：Cy5.5, Cy5及びCy7（Amersham, Arlington Hts., IL）；IRD41及びIRD700（LI-COR, Lincoln, NE）；NIR-1（Dejindo, Kumamoto, Japan）；LaJolla Blue（Diatron, Miami, FL）；インドシアニン緑（ICG）及びその類似体（Licha, K.他、SIPE-The International Society for Optical Engineering 2927 (1996) 192-198 ; Ito, S.他、US 5,968,479）；インドトリカルボシアニン（ITC; WO 98/47538）；及びキレート化ランタニド化合物。蛍光ランタニド金属としてはユーロピウム及びテルビウムが挙げられる。ランタニドの蛍光性質は、Lackowicz, J.R., Principle of Fluorescence Spectoroscopy, 第2版, Kluwa Academic, New York (1999)中に記載されている。
従って、前記抗体は好ましくはCy5.5, Cy5, Cy7, IRD41, IRD700, NIR-1, Lajolla Blue, インドシアニン緑（ICG）、インドトリカルボシアニン（ITC）並びにSF64, 5-29, 5-36及び5-41（WO 2006/072580から）の群から選択されたNIR蛍光標識により標識され、より好ましくは前記抗体はCy5.5, Cy5及びCy7の群から選択されたNIRF標識で標識される。
NIR蛍光標識のカップリングに使用される方法は当業界で周知である。抗体へのNIR蛍光標識の結合技術は、過去数年間の間に十分に成熟し、そして優れた解説がAslam, M.及びDent, A., Bioconjugation (1998) 216-363, London及びTijssen, P.他、“Practice and theory of enzyme immunoassays”, Elsevier, Amsterdam中の章“Macromolecule conjugation”中に与えられている。
適当なカップリング化学は上述した文献（Aslam, 前掲）から既知である。NIR蛍光標識は、どんなカップリング成分が存在するかに依存して、水性又は有機媒質中で抗体と直接反応させることができる。カップリング成分は、抗体への蛍光標識の化学的カップリングに使用される反応性基又は活性化基である。蛍光団標識は抗体に直接結合させることができ、又はスペーサーを介して抗体に連結させて、抗体とNIR蛍光標識を含んで成るNIR蛍光標識接合体を形成させることができる。使用されるスペーサーは、本質的に長い生体内持続性（半減期）を有するように選択又はデザインすることができる。
固形腫瘍の領域中のNIR蛍光標識の「測定」又は「決定」は、患者への標識抗体の投与後に実施される。或いは、本発明に係る組成物を使用する場合、患者への未標識抗体と標識抗体の組成物の投与後に実施される。測定は投与後の限定された時点で、例えば１日、２日もしくは３日目又はそれ以上の日数目に、又は固形腫瘍の一領域中で比較可能なNIR蛍光シグナル又は画像を獲得するのに適当な別の時点で実施することができる。測定の期間又は投与後の時点は、適当なNIR蛍光シグナル又は画像を得るようなやり方で当業者により調整することができる。例えば、投与後第一週に、腫瘍濃度の増加に依存して毎日又は２〜３日毎に測定を実施することができる。第二週及びその後の週に、抗体の腫瘍濃度の増加及び減少に依存して、２〜５日毎に測定を実施することができる。腫瘍濃度の増加及び減少は抗体の種類に依存するので、更に別の測定期間が適当であり、例えば一週間又はそれより長い期間が適当であるかもしれない。測定は標識抗体の量の変化を検出するようなやり方で調整されるだろう。
NIR蛍光測定には、様々な装置及び技術が使用でき、例えば乳癌のような外部固形腫瘍には、ART Advanced Research Technologies Inc.からのSoftScan（登録商標）（http://www.art.ca/en/products/softscan.html）が適当である（Intes, X., Acad。Radiol. 12 (2005) 934-947）。結直腸癌又は肺癌のような内部罹患領域には、内視鏡技術又はマイクロ手術−内視鏡の組み合わせを使用することができる。
例えば悪性血液細胞（白血病での）中の標識抗体の量を検出するために、血球計数装置と組み合わせたシャントを使用して、血球当たりのシグナル量を検出することができる。
本発明の実施に有用なNIR蛍光測定のための画像診断系は、典型的には３つの基本的成分を含んで成る：(1) 近赤外光源、(2) 蛍光団の励起に使用した光からの蛍光発光を分離又は識別するための手段、及び(3) 検出系。
光源は単色性（又は実質的に単色性）近赤外光を提供する。光源は適当に濾過された白色光、即ち広域源からの帯域通過光であることができる。例えば、150ワットのハロゲンランプからの光を、Omega Optical（Brattleboro, VT）から市販されている適当な帯域通過フィルターを通して濾過することができる。或る態様では、光源がレーザーである。例えば、Boas, D.A.他、1994, Proc. Natl. Acad. Sci. USA 91, 4887-4891 ; Ntziachristos, V.他、2000, Proc. Natl. Acad. Sci. USA 97, 2767-2772 ; Alexander, W., 1991, J. Clin. Laser Med. Surg. 9, 416-418を参照のこと。
高通過フィルター（700 nm）を使って励起光から蛍光発光を分離することができる。適当な高通過フィルターはOmega Opticalから市販されている。
一般に、光検出系は、光収集／画像形成成分と光検出／画像記録成分とを含んで成ると見なすことができる。光検出系は両成分を含む単一の一体化装置であってもよいが、光収集／画像形成成分と光検出／画像記録成分が別々に議論されるだろう。
特に有用な光収集／画像形成成分は内視鏡である。多数の組織と器官、例えば腹膜（Gahlen, J.他、J. Photochem. Photobiol. B52 (1999) 131-135）、卵巣癌（Major, A.L.他、Gynecol. Oncol. 66 (1997) 122-132）、結腸（Mycek, M.A.他、Gastrointest. Endoscopy. 48 (1998) 390-394 ; Stepp, H.他、Endoscopy 30 (1998) 379-386）、胆汁管（Izuishi, K.他、Hepatogastroenterology 46 (1999) 804-807）、胃（Abe, S.他、Endoscopy 32 (2000) 281-286）、膀胱（Kriegmair, M.他、Urol. Int. 63 (1999) 27-31 ; Riedl, C.R.他、J. Endourol. 13, 755-759）及び脳（Ward, J.他、Laser Appl. 10 (1998) 224-228）の生体内光学画像診断に使用されている内視鏡装置及び技術は、本発明の実施に使用することができる。
本発明に有用な光収集成分の別の型は、カテーテルベースの装置、例えばファイバー光学装置である。そのような装置は特に血管内画像診断に有用である。例えばTearney, G.J.他、Science 276 (1997) 2037-2039 ; Boppart, S.A.他、Proc. Natl. Acad. Sci. USA 94, 4256-4261を参照のこと。
更に別の画像診断技術、例えば位相配列技術（Boas, D.A.他、Proc. Natl. Acad. Sci. USA 91 (1994) 4887-4891 ; Chance, B., Journal Ann. NY Acad. Sci. 838 (1998) 29-45）、拡散光トモグラフィー（Cheng, X.他、Optics Express 3 (1998) 118-123 ; Siegel, A.他、Optics Express 4 (1999) 287-298）、生体顕微鏡検査（Dellian, M.他、Journal Br. J. Cancer 82 (2000) 1513-1518 ; Monsky, W.L.他、Cancer Res. 59 (1999) 4129-4135 ; Fukumura他、Cell 94 (1998) 715-725）及び共焦点画像診断（Korlach, J.他、Proc. Natl. Acad. Sci. USA 96 (1999) 8461-8466 ; Rajadhyaksha, M.他、J. Invest. Dermatol. 104 (1995) 946-952 ; Gonzalez, S.他、Journal Med. 30 (1999) 337-356）を本発明の実施に使用することができる。
任意の適当な光検出／画像記録成分、例えば電荷結合素子（CCD）系又は写真用フィルムを本発明において使用できる。光検出／画像記録の選択は、使用する光収集／画像形成成分のタイプをはじめとする因子に依存するだろう。適当な成分の選択、それらを近赤外画像診断系への会合、及び系の操作は、当業者の通常の技術の範囲内である。
本発明の一態様は、固形腫瘍又は循環悪性細胞（例えば白血病での）のような癌の治療用の前記医薬組成物の製造のための前記モノクローナル抗体の使用であって、該医薬組成物が少なくとも１：９の未標識抗体対標識抗体の予め決められた比でNIR蛍光標識に共有結合で結合された前記抗体を含んで成ることを特徴とする使用である。
本発明の別の態様は、固形腫瘍の治療用の前記医薬組成物の製造のための前記モノクローナル抗体の使用であって、該医薬組成物が少なくとも１：９の未標識抗体対標識抗体の予め決められた比でNIR蛍光標識に共有結合で結合された前記抗体を含んで成ることを特徴とする使用である。
本発明の別の態様は、癌の治療用の医薬組成物の製造のためのヒト膜貫通タンパク質の細胞外ドメインに結合するモノクローナル抗体の使用であって、前記モノクローナル抗体が少なくとも１：９の未標識抗体対標識抗体の予め決められた比でNIR蛍光標識に共有結合で結合された抗体と一緒に同時投与されることを特徴とする使用である。
本発明の別の態様は、第一の治療のための、少なくとも１：９の未標識抗体対標識抗体の予め決められた比で
a) ヒト膜貫通タンパク質の細胞外ドメインに結合するモノクローナル抗体、及び
b) NIR蛍光標識に共有結合で結合された前記抗体
を含んで成る医薬組成物の使用、及び第二の治療のための標識抗体のみの使用である。
a) ヒト膜貫通タンパク質の細胞外ドメインに結合するモノクローナル抗体、及び
b) NIR蛍光標識に共有結合で結合された前記抗体
を含んで成る医薬組成物の使用、及び第二の治療のための標識抗体のみの使用である。
本発明の別の態様は、癌の治療、好ましくは固形腫瘍の治療のための前記医薬組成物の使用である。
本発明の別の態様は、癌、好ましくは固形腫瘍の治療のためのヒト膜貫通タンパク質の細胞外ドメインに結合するモノクローナル抗体の使用であり、前記モノクローナル抗体が少なくとも１：９の未標識抗体対標識抗体の予め決められた比でNIR蛍光標識に共有結合で結合された前記抗体と一緒に同時投与されることを特徴とする。
本発明の別の態様は、第一の治療のための、少なくとも１：９の未標識抗体対標識抗体の予め決められた比で、
a) ヒト膜貫通タンパク質の細胞外ドメインに結合するモノクローナル抗体、及び
b) NIR蛍光標識に共有結合で結合された前記抗体
を含んで成る医薬組成物の使用、及び第二の治療のための未標識モノクローナル抗体のみの使用である。
a) ヒト膜貫通タンパク質の細胞外ドメインに結合するモノクローナル抗体、及び
b) NIR蛍光標識に共有結合で結合された前記抗体
を含んで成る医薬組成物の使用、及び第二の治療のための未標識モノクローナル抗体のみの使用である。
本発明の別の態様は、少なくとも１：９の未標識抗体対標識抗体の予め決められた比で
a) ヒト膜貫通タンパク質の細胞外ドメインに結合するモノクローナル抗体、及び
b) NIR蛍光標識に共有結合で結合された前記抗体
を含んで成る医薬組成物での治療の間に、NIR蛍光標識に共有結合で結合されたモノクローナル抗体の量の変化を測定する方法である。
a) ヒト膜貫通タンパク質の細胞外ドメインに結合するモノクローナル抗体、及び
b) NIR蛍光標識に共有結合で結合された前記抗体
を含んで成る医薬組成物での治療の間に、NIR蛍光標識に共有結合で結合されたモノクローナル抗体の量の変化を測定する方法である。
そのような方法は例えば、
a) 未標識の組成物での治療後に始まる様々な時点で、着目の領域（ROI）、例えば固形腫瘍、例えば固形腫瘍又は血液細胞の一領域中のNIR蛍光強度を測定し、
b) 一定期間に渡りそれらのNIR蛍光強度の変化を測定し、そして
c) その強度をROI、例えば固形腫瘍中の標識抗体の量に関連付ける
という段階を含んで成る。
a) 未標識の組成物での治療後に始まる様々な時点で、着目の領域（ROI）、例えば固形腫瘍、例えば固形腫瘍又は血液細胞の一領域中のNIR蛍光強度を測定し、
b) 一定期間に渡りそれらのNIR蛍光強度の変化を測定し、そして
c) その強度をROI、例えば固形腫瘍中の標識抗体の量に関連付ける
という段階を含んで成る。
本発明の別の段階は、前記医薬組成物での治療の間の着目の領域中のNIR蛍光標識に共有結合で結合されたモノクローナル抗体の量の変化を測定する方法である。
本発明の別の態様は、前記医薬組成物での医療の間、固形腫瘍中のNIR蛍光標識に共有結合されたモノクローナル抗体の量の変化を測定する方法である。
本発明の別の態様は、前記未標識モノクローナル抗体と一緒の同時投与の間の固形腫瘍中のNIR蛍光標識に共有結合で結合されたモノクローナル抗体の量の変化を測定する方法である。
本発明の別の態様は、癌、好ましくは固形腫瘍の第一の治療のための、少なくとも１：９の未標識抗体対標識抗体の予め決められた比で
a) ヒト膜貫通タンパク質の細胞外ドメインに結合するモノクローナル抗体、及び
b) NIR蛍光標識に共有結合で結合された前記抗体
を含んで成る医薬組成物、及び第二の治療のための未標識モノクローナル抗体のみを含んで成る組成物、を含んで成る容器である。
a) ヒト膜貫通タンパク質の細胞外ドメインに結合するモノクローナル抗体、及び
b) NIR蛍光標識に共有結合で結合された前記抗体
を含んで成る医薬組成物、及び第二の治療のための未標識モノクローナル抗体のみを含んで成る組成物、を含んで成る容器である。
次の実施例は、本発明の理解を助けるために与えられ、それの本当の範囲は添付の請求の範囲に与えられる。本発明の精神から逸脱することなく記載の手順に変更を行うことができると理解される。
序論
この研究は、ヒト異種移植片モデルにおいてNIR蛍光標識に共有結合で結合された抗体及びNIRF標識に共有結合で結合された抗体と標識無しの前記抗体との混合物の生体内画像診断を実験した。更に該実験の目的は生体内でのNIR蛍光標識に共有結合で結合された前記抗体の量の変化の測定及び対応する血清レベルの変化への比較であった。
この研究は、ヒト異種移植片モデルにおいてNIR蛍光標識に共有結合で結合された抗体及びNIRF標識に共有結合で結合された抗体と標識無しの前記抗体との混合物の生体内画像診断を実験した。更に該実験の目的は生体内でのNIR蛍光標識に共有結合で結合された前記抗体の量の変化の測定及び対応する血清レベルの変化への比較であった。
細胞系及び培養条件
ヒト乳癌細胞系KPL-4は、炎症皮膚転移を有しErbBファミリーレセプターを過剰発現する乳癌患者の悪性胸水から確立されている（Kurebayashi, J.他、Br. J. Cancer 79 (1999) 707-17）。腫瘍細胞を10％ウシ胎児血清（PAA）と2 mM Ｌ−グルタミン（Gibco）が捕捉されたDMEM培地（PAA Laboratories, Austria）中で37℃にて５％CO2の水飽和雰囲気下で日常的に培養した。培養継代は、トリプシン／EDTA １×（PAA）を使って二回／週分割することで実施した。細胞継代Ｐ６を生体内研究に使用した。
ヒト乳癌細胞系KPL-4は、炎症皮膚転移を有しErbBファミリーレセプターを過剰発現する乳癌患者の悪性胸水から確立されている（Kurebayashi, J.他、Br. J. Cancer 79 (1999) 707-17）。腫瘍細胞を10％ウシ胎児血清（PAA）と2 mM Ｌ−グルタミン（Gibco）が捕捉されたDMEM培地（PAA Laboratories, Austria）中で37℃にて５％CO2の水飽和雰囲気下で日常的に培養した。培養継代は、トリプシン／EDTA １×（PAA）を使って二回／週分割することで実施した。細胞継代Ｐ６を生体内研究に使用した。
動物
SCIDベージュ（C.B.-17）マウス；10〜12週齢；体重18〜20ｇ（Charles River, Sulzfeld, Germany）を、特定の病原体フリー条件下で、国際ガイドライン（GV-Solas, Felasa; TierschG）に従って12時間光／12時間暗の毎日のサイクルで維持した。開始後、動物は１週間動物の検疫所の中で飼育して、新しい環境に慣れさせ観察した。連続した健康観察を実施した。食事（Alltromin）と水（pH 2.5-3に酸性化したもの）を随意提供した。
SCIDベージュ（C.B.-17）マウス；10〜12週齢；体重18〜20ｇ（Charles River, Sulzfeld, Germany）を、特定の病原体フリー条件下で、国際ガイドライン（GV-Solas, Felasa; TierschG）に従って12時間光／12時間暗の毎日のサイクルで維持した。開始後、動物は１週間動物の検疫所の中で飼育して、新しい環境に慣れさせ観察した。連続した健康観察を実施した。食事（Alltromin）と水（pH 2.5-3に酸性化したもの）を随意提供した。
生体内での腫瘍増殖阻害研究
腫瘍細胞を培養フラスコ（Greiner TriFlask）から収穫し（トリプシン−EDTA）、50 mlの培地中に移し、ＰＢＳで１回洗浄しそしてＰＢＳ中に再懸濁した。ＰＢＳでの追加の洗浄段階と濾過（細胞濾過器; Falcon 100μm）の後、最終細胞力価を0.75×108／mlに調整した。腫瘍細胞懸濁液を移行ピペットで注意深く混合して細胞凝集を防いだ。小動物用のStephens吸入装置を使って予備インキュベーション室（プレキシグラス）で、密閉循環系において個々のマウスの鼻マスク（シリコーン）とIsoflurane (Pharmacia-Upjohn, Germany)により麻酔を行った。注射の２日前に、動物の体毛を剃った。乳房内脂肪体（i.m.f.p.）注射のため、各麻酔マウスの最後から二番目の右鼠径部脂肪体に20μlの容量で細胞を同所的に注射した。移植のため、皮膚を通して乳頭の下に細胞懸濁液注射した。腫瘍細胞注射は実験の１日目に相当する。
腫瘍細胞を培養フラスコ（Greiner TriFlask）から収穫し（トリプシン−EDTA）、50 mlの培地中に移し、ＰＢＳで１回洗浄しそしてＰＢＳ中に再懸濁した。ＰＢＳでの追加の洗浄段階と濾過（細胞濾過器; Falcon 100μm）の後、最終細胞力価を0.75×108／mlに調整した。腫瘍細胞懸濁液を移行ピペットで注意深く混合して細胞凝集を防いだ。小動物用のStephens吸入装置を使って予備インキュベーション室（プレキシグラス）で、密閉循環系において個々のマウスの鼻マスク（シリコーン）とIsoflurane (Pharmacia-Upjohn, Germany)により麻酔を行った。注射の２日前に、動物の体毛を剃った。乳房内脂肪体（i.m.f.p.）注射のため、各麻酔マウスの最後から二番目の右鼠径部脂肪体に20μlの容量で細胞を同所的に注射した。移植のため、皮膚を通して乳頭の下に細胞懸濁液注射した。腫瘍細胞注射は実験の１日目に相当する。
監視
動物を副作用の臨床状態の検査のため毎日観察した。実験を通しての監視のため、動物の体重を毎週２回測定した。
動物を副作用の臨床状態の検査のため毎日観察した。実験を通しての監視のため、動物の体重を毎週２回測定した。
腫瘍組織中の標識抗体の量の測定及び腫瘍組織中のその量の半減期の測定
近赤外シグナルの非侵略性測定は、適当な色素でタンパク質を標識することにより達成することができる。例えば、異なるモノクローナル抗体をCy5又はCy5.5又はCy7色素で標識し、腫瘍担持マウスへのi.v.注射後にそれらの抗体の腫瘍組織飽和をモニタリングすることができる。NIR蛍光測定は、抗体の適用直後にそしてその後の様々な時点で、Siemens Medizintechnik, GermanyからのBonSAI Imaging Systemを使って実施することができる。収集時間は全観察期間に渡って一定に維持した。着目の領域中の画素の平均強度を合計することにより、曲線下の面積（AUC）を求めた。
近赤外シグナルの非侵略性測定は、適当な色素でタンパク質を標識することにより達成することができる。例えば、異なるモノクローナル抗体をCy5又はCy5.5又はCy7色素で標識し、腫瘍担持マウスへのi.v.注射後にそれらの抗体の腫瘍組織飽和をモニタリングすることができる。NIR蛍光測定は、抗体の適用直後にそしてその後の様々な時点で、Siemens Medizintechnik, GermanyからのBonSAI Imaging Systemを使って実施することができる。収集時間は全観察期間に渡って一定に維持した。着目の領域中の画素の平均強度を合計することにより、曲線下の面積（AUC）を求めた。
血清中の標識抗体の量の測定及び血清中のその量の半減期の測定
確立されたELISAによる抗体血清レベルの定量を行い、それらの結果をNIR蛍光シグナル強度と関連付けた。
確立されたELISAによる抗体血清レベルの定量を行い、それらの結果をNIR蛍光シグナル強度と関連付けた。
結果
実施例１：
生体内での標的発現の分析のための光学画像診断
H322M s.c.（皮下）モデルにおいて、Cy5.5で標識されたIGF1Rに対するmabをマウス当たり100μｇの１回量で静脈内（i.v.）注射し、そしてその後２日目（図１ａ）と５日目（図１ｂ）にNIR蛍光シグナルを測定した。収集時間は３秒であった。それらの写真はi) 腫瘍細胞が関連表面分子を発現すること、ii) mabが腫瘍組織に局在すること、そしてiii) mabが時間と共に標的組織に蓄積することを示す。
実施例１：
生体内での標的発現の分析のための光学画像診断
H322M s.c.（皮下）モデルにおいて、Cy5.5で標識されたIGF1Rに対するmabをマウス当たり100μｇの１回量で静脈内（i.v.）注射し、そしてその後２日目（図１ａ）と５日目（図１ｂ）にNIR蛍光シグナルを測定した。収集時間は３秒であった。それらの写真はi) 腫瘍細胞が関連表面分子を発現すること、ii) mabが腫瘍組織に局在すること、そしてiii) mabが時間と共に標的組織に蓄積することを示す。
実施例２：
生体内での抗体のＰＫ研究のための光学画像診断
s.c. H322M腫瘍を担持するマウスに、マウス当たり50μｇ（単一量）のIGF1Rに対する抗体を注射した。抗体の適用後４日目に４秒の収集時間でNIR蛍光を測定した。図２ａは、腫瘍担持マウスにおいてCy5.5標識mabが腫瘍組織をターゲッティングし、一方で腫瘍無しのマウスでは、mabは全マウスを「元気づけ」、このことはmabが血漿区画に限定されることを示す（図２ｂ）。従って、腫瘍無しのマウスのmab血清レベル（ELISAにより測定）は、腫瘍担持マウスに比較して高い（図２ｃ）。
生体内での抗体のＰＫ研究のための光学画像診断
s.c. H322M腫瘍を担持するマウスに、マウス当たり50μｇ（単一量）のIGF1Rに対する抗体を注射した。抗体の適用後４日目に４秒の収集時間でNIR蛍光を測定した。図２ａは、腫瘍担持マウスにおいてCy5.5標識mabが腫瘍組織をターゲッティングし、一方で腫瘍無しのマウスでは、mabは全マウスを「元気づけ」、このことはmabが血漿区画に限定されることを示す（図２ｂ）。従って、腫瘍無しのマウスのmab血清レベル（ELISAにより測定）は、腫瘍担持マウスに比較して高い（図２ｃ）。
実施例３：
NIRFシグナル強度と血清レベルとの関係
H460M2腫瘍s.c.を有するマウスに、Cy5.5で標識されたIGF1Rに対する抗体の１回量をi.v.注射した。その後の様々な時点で４秒の収集時間でNIR蛍光を測定した。着目の領域（ROI）中の画素数及びシグナル強度を合計することにより、NIR蛍光強度を定量した。抗体の血清レベル（ng/ml）をELISAにより測定した。データは、NIR蛍光対血清レベルの比（負荷因子）が時間と共に31から79に増加することを示し、このことは腫瘍組織中にmabが蓄積すること（図３）及び腫瘍組織中の抗体濃度が血清中よりも有意に長いことを示す。
NIRFシグナル強度と血清レベルとの関係
H460M2腫瘍s.c.を有するマウスに、Cy5.5で標識されたIGF1Rに対する抗体の１回量をi.v.注射した。その後の様々な時点で４秒の収集時間でNIR蛍光を測定した。着目の領域（ROI）中の画素数及びシグナル強度を合計することにより、NIR蛍光強度を定量した。抗体の血清レベル（ng/ml）をELISAにより測定した。データは、NIR蛍光対血清レベルの比（負荷因子）が時間と共に31から79に増加することを示し、このことは腫瘍組織中にmabが蓄積すること（図３）及び腫瘍組織中の抗体濃度が血清中よりも有意に長いことを示す。
実施例４：
標識抗体と未標識抗体の組成物を使った関連の腫瘍関連抗原の検出
KPL-4腫瘍s.c.を担持しているSCIDベージュマウスに、50μg/マウスの用量でCy5標識抗HER2抗体の１回量をi.v.注射した。加えて、別のグループのマウスには、i) 標識対未標識の比が１：２、ii) 標識対未標識の比が１：９のように異なる比で標識抗HER2抗体と未標識抗体の混合物 50μg/マウスを注射した。その２日後、着目の領域中の蛍光強度を５秒の収集時間で測定した。
標識抗体と未標識抗体の組成物を使った関連の腫瘍関連抗原の検出
KPL-4腫瘍s.c.を担持しているSCIDベージュマウスに、50μg/マウスの用量でCy5標識抗HER2抗体の１回量をi.v.注射した。加えて、別のグループのマウスには、i) 標識対未標識の比が１：２、ii) 標識対未標識の比が１：９のように異なる比で標識抗HER2抗体と未標識抗体の混合物 50μg/マウスを注射した。その２日後、着目の領域中の蛍光強度を５秒の収集時間で測定した。
結果は、マウス当たり50μgのCy5標識抗HER2抗体の１回注射後に最強のNIR蛍光シグナルが生成したことを示す（図４ａ）。１：２の比（17μgと33μg）でのCy5標識抗HER2抗体と未標識の抗HER2抗体の混合物の１回i.v.注射後には、Her発現腫瘍は明らかに検出可能である（図４ｂ）。図４ｃは、１：９の比（5μgと45μg）でのCy5標識抗HER2抗体と未標識の抗HER2抗体の混合物の注射が、有意なNIR蛍光シグナルを生成することを証明する。このことは、１：９の比での標識治療抗体と未標識治療抗体の組み合わせが臨床状態での適用に実行可能であることを示す。
実施例５：
NIRFシグナル強度と血清レベルとの関係
KPL4腫瘍を担持しているSCIDベージュマウスに、50μg／マウスの用量でHer2に対するCy5標識抗体の１回量をi.v.注射した。加えて、別のグループのマウスには、i) 標識対未標識の比１：２、ii) 標識対未標識の比１：９の異なる比でCy5標識抗HER2抗体と未標識の抗HER2抗体の混合物の50μg／マウスを注射した。その後様々な時点で、NIR蛍光シグナルを５秒の収集時間で測定した。着目の領域（ROI）中の画素数とシグナル強度を合計することによりNIR蛍光強度を定量した。抗体の血清レベル（ng/ml）をELISAにより測定した。
NIRFシグナル強度と血清レベルとの関係
KPL4腫瘍を担持しているSCIDベージュマウスに、50μg／マウスの用量でHer2に対するCy5標識抗体の１回量をi.v.注射した。加えて、別のグループのマウスには、i) 標識対未標識の比１：２、ii) 標識対未標識の比１：９の異なる比でCy5標識抗HER2抗体と未標識の抗HER2抗体の混合物の50μg／マウスを注射した。その後様々な時点で、NIR蛍光シグナルを５秒の収集時間で測定した。着目の領域（ROI）中の画素数とシグナル強度を合計することによりNIR蛍光強度を定量した。抗体の血清レベル（ng/ml）をELISAにより測定した。
実施例６：
固形腫瘍の領域中の標識抗体の抗体濃度又はNIRF強度に基づいて投薬間隔を延長することによる用量（及び薬剤関連副作用）の低減
試験薬
純粋なトラスツズマブとCy5で標識したトラスツズマブを、ヒスチジンHCl、α−αトレハロース（60 mM）、0.01％Polysorb, pH 6.0中の25 mg/ml原液として提供する。２つの溶液とも注射用にＰＢＳで適当に希釈した。
固形腫瘍の領域中の標識抗体の抗体濃度又はNIRF強度に基づいて投薬間隔を延長することによる用量（及び薬剤関連副作用）の低減
試験薬
純粋なトラスツズマブとCy5で標識したトラスツズマブを、ヒスチジンHCl、α−αトレハロース（60 mM）、0.01％Polysorb, pH 6.0中の25 mg/ml原液として提供する。２つの溶液とも注射用にＰＢＳで適当に希釈した。
細胞系及び培養条件
ヒト乳癌細胞系KPL-4は、炎症性皮膚転移を有しErbBファミリーのレセプターを過剰発現している乳癌患者の悪性胸水から確立されている（Kurebayashi他、Br. J. Cancer 79 (1999) 707-17）。腫瘍細胞を10％ウシ胎児血清（PAA）と2 mM Ｌ−グルタミン（Gibco）が捕捉されたDMEM培地（PAA Laboratories, Austria）中で、５％CO2の水飽和雰囲気下で37℃にて日常的に培養した。培養継代はトリプシン／EDTA １×（PAA）を使って２回／週分割して行った。細胞継代Ｐ６を生体内研究に使用した。
ヒト乳癌細胞系KPL-4は、炎症性皮膚転移を有しErbBファミリーのレセプターを過剰発現している乳癌患者の悪性胸水から確立されている（Kurebayashi他、Br. J. Cancer 79 (1999) 707-17）。腫瘍細胞を10％ウシ胎児血清（PAA）と2 mM Ｌ−グルタミン（Gibco）が捕捉されたDMEM培地（PAA Laboratories, Austria）中で、５％CO2の水飽和雰囲気下で37℃にて日常的に培養した。培養継代はトリプシン／EDTA １×（PAA）を使って２回／週分割して行った。細胞継代Ｐ６を生体内研究に使用した。
動物
SCIDベージュ（C.B.-17）マウス；10〜12週齢；体重18〜20ｇ（Charles River, Sulzfeld, Germany）を、特定の病原体フリー条件下で、国際ガイドライン（GV-Solas, Felasa; TierschG）に従って12時間光／12時間暗の毎日のサイクルで維持した。開始後、動物は１週間動物の検疫所の中で飼育して、新しい環境に慣れさせ観察した。通常の基礎に基づいて連続した健康観察を実施した。食事（Alltromin）と水（pH 2.5-3に酸性化したもの）を随意提供した。
SCIDベージュ（C.B.-17）マウス；10〜12週齢；体重18〜20ｇ（Charles River, Sulzfeld, Germany）を、特定の病原体フリー条件下で、国際ガイドライン（GV-Solas, Felasa; TierschG）に従って12時間光／12時間暗の毎日のサイクルで維持した。開始後、動物は１週間動物の検疫所の中で飼育して、新しい環境に慣れさせ観察した。通常の基礎に基づいて連続した健康観察を実施した。食事（Alltromin）と水（pH 2.5-3に酸性化したもの）を随意提供した。
生体内での腫瘍増殖阻害研究
腫瘍細胞を培養フラスコ（Greiner TriFlask）から収穫し（トリプシン−EDTA）、50 mlの培地中に移し、ＰＢＳで１回洗浄しそしてＰＢＳ中に再懸濁した。ＰＢＳでの追加の洗浄段階と濾過（細胞濾過器; Falcon 100μm）の後、最終細胞力価を0.75×108／mlに調整した。腫瘍細胞懸濁液を移行ピペットで注意深く混合して細胞凝集を防いだ。小動物用のStephens吸入装置を使って予備インキュベーション室（プレキシグラス）で、密閉循環系において個々のマウスの鼻マスク（シリコーン）とIsoflurane (Pharmacia-Upjohn, Germany)により麻酔を行った。注射の２日前に、動物の体毛を剃った。乳房内脂肪体（i.m.f.p.）注射のため、各麻酔マウスの最後から二番目の右鼠径部脂肪体に20μlの容量で細胞を同所的に注射した。移植のため、皮膚を通して乳頭の下に細胞懸濁液注射した。腫瘍細胞注射は実験の１日目に相当する。
腫瘍細胞を培養フラスコ（Greiner TriFlask）から収穫し（トリプシン−EDTA）、50 mlの培地中に移し、ＰＢＳで１回洗浄しそしてＰＢＳ中に再懸濁した。ＰＢＳでの追加の洗浄段階と濾過（細胞濾過器; Falcon 100μm）の後、最終細胞力価を0.75×108／mlに調整した。腫瘍細胞懸濁液を移行ピペットで注意深く混合して細胞凝集を防いだ。小動物用のStephens吸入装置を使って予備インキュベーション室（プレキシグラス）で、密閉循環系において個々のマウスの鼻マスク（シリコーン）とIsoflurane (Pharmacia-Upjohn, Germany)により麻酔を行った。注射の２日前に、動物の体毛を剃った。乳房内脂肪体（i.m.f.p.）注射のため、各麻酔マウスの最後から二番目の右鼠径部脂肪体に20μlの容量で細胞を同所的に注射した。移植のため、皮膚を通して乳頭の下に細胞懸濁液注射した。腫瘍細胞注射は実験の１日目に相当する。
監視
動物を副作用の臨床状態の検査のため毎日観察した。実験を通しての監視のため、動物の体重を毎週２回測定し、そして腫瘍体積をキャリパーにより毎週２回測定した。最初の腫瘍体積はＮＣＩプロトコール（ＴＶ＝1/2ab2、ここでａとｂはmm単位での腫瘍サイズの長方向の寸法と短方向の寸法である、Teicher B. Anticancer drug development guide, Human Press, 1997, 第５章, 92頁）に従って算出した。計算値は平均と標準偏差として報告した。
動物を副作用の臨床状態の検査のため毎日観察した。実験を通しての監視のため、動物の体重を毎週２回測定し、そして腫瘍体積をキャリパーにより毎週２回測定した。最初の腫瘍体積はＮＣＩプロトコール（ＴＶ＝1/2ab2、ここでａとｂはmm単位での腫瘍サイズの長方向の寸法と短方向の寸法である、Teicher B. Anticancer drug development guide, Human Press, 1997, 第５章, 92頁）に従って算出した。計算値は平均と標準偏差として報告した。
動物の処置
腫瘍体積がほぼ100 mm3（各グループについてｎ＝10）になった時、腫瘍担持マウスを無作為抽出した。各グループは処置前に密接に一致し、腫瘍細胞注射後20日目に開始した。
腫瘍体積がほぼ100 mm3（各グループについてｎ＝10）になった時、腫瘍担持マウスを無作為抽出した。各グループは処置前に密接に一致し、腫瘍細胞注射後20日目に開始した。
グループＡ：対照グループ−10 ml/kgのＰＢＳ緩衝液を腹腔内（i.p.）に毎週１回投与した。
グループＢ：トラスツズマブを30 mg/kgの負荷用量でi.p.投与し、その後15 mg/kgの用量（維持用量）を毎週１回投与した。
グループＣ：９：１の予め決められた比のトラスツズマブとCy5標識トラスツズマブの組成物を、30 mg/kgの負荷用量でi.p.投与した。
グループＢ：トラスツズマブを30 mg/kgの負荷用量でi.p.投与し、その後15 mg/kgの用量（維持用量）を毎週１回投与した。
グループＣ：９：１の予め決められた比のトラスツズマブとCy5標識トラスツズマブの組成物を、30 mg/kgの負荷用量でi.p.投与した。
その後様々な時点で（通常１日１回）NIR蛍光シグナルを10秒の収集時間で測定した。固形腫瘍の領域中の画素数とシグナル強度を合計することによりNIR蛍光強度を定量した。
最初はNIR蛍光強度の最大値を時間に依存して測定した。次いで15 mg/kgの未標識トラスツズマブのみの第一維持用量の時点を、NIR蛍光強度が前記最大値に比較して10％減少した時の時点として決定した。負荷用量と第一維持用量の間の時間間隔は、連続的な維持用量間の一般的投与間隔として使用した。15 mg/kgの未標識トラスツズマブのみの連続的な維持用量を次いでこの一般用量で投与した。
グループＤ：９：１の予め決められた比のトラスツズマブとCy5標識トラスツズマブの組成物を、30 mg/kgの負荷用量でi.p.投与した。
その後様々な時点で（通常１日１回）NIR蛍光シグナルを10秒の収集時間で測定した。固形腫瘍の領域中の画素数とシグナル強度を合計することによりNIR蛍光強度を定量した。
最初にNIR蛍光強度の最大値を時間に依存して測定した。次いで15 mg/kgの未標識トラスツズマブのみの第一維持用量の時点を、NIR蛍光強度が前記最大値に比較して20％減少した時の時点として決定した。負荷用量と第一維持用量の間の時間間隔は、連続的な維持用量間の一般的投与間隔として使用した。15 mg/kgの未標識トラスツズマブのみの連続的な維持用量を次いでこの一般用量で投与した。
グループＥ：９：１の予め決められた量のトラスツズマブとCy5標識トラスツズマブの組成物を30 mg/kgの負荷用量でi.p.投与した。
その後様々な時点で（通常１日1回）NIR蛍光シグナルを10秒の収集時間で測定した。固形腫瘍の領域中の画素数とシグナル強度を合計することによりNIR蛍光強度を定量した。
最初にNIR蛍光強度の最大値を時間に依存して測定した。次いで15 mg/kgの未標識トラスツズマブのみの第一維持用量の時点を、NIR蛍光強度が前記最大値に比較して30％減少した時の時点として決定した。負荷用量と第一維持用量の間の時間間隔は、連続的な維持用量間の一般的投与間隔として使用した。15 mg/kgの未標識トラスツズマブのみの連続的な維持用量を次いでこの一般用量で投与した。
次いで、グループＢとグループＣの治療応答を比較し、治療応答がグループＢのものに匹敵する（より低い用量にも関わらず、恐らく薬剤に関連する副作用をほとんど引き起こさない）最適化され延長された投与間隔を選択する。
Claims (16)
- 少なくとも１：９の未標識抗体対標識抗体の予め決められた比で
a) ヒト膜貫通タンパク質の細胞外ドメインに結合する未標識のモノクローナル抗体、及び
b) NIR蛍光標識に共有結合で結合された前記抗体
を含んで成る医薬組成物。 - 前記未標識抗体と標識抗体が、過剰発現された腫瘍関連タンパク質の細胞外ドメインに結合する治療モノクローナル抗体であり、そして前記過剰発現が腫瘍疾患に関連し；そして
前記予め決められた比が少なくとも９：１で且つ最大100：１の未標識抗体対標識抗体である、請求項１に記載の医薬組成物。 - 前記腫瘍関連タンパク質が、EGFR, HER2/neu, HER3, HER4, Ep-CMA, CEA, TRAIL, TRAILレセプター１，TRAILレセプター２，リンホトキシンβレセプター，CCR4, CD19, CD20, CD22, CD28, CD33, CD40, CD80, CSF-1R, CTLA-4, 線維芽活性化タンパク質（FAP）、ヘプシン、黒色腫関連コンドロイチン硫酸プロテオグリカン（MCSP）、前立腺特異的膜抗原（PSMA）、VEGFレセプター１、VEGFレセプター２、IGF1-R, TSLP-R, TIE-1, TIE-2, TNF-α, TNF様アポトーシス弱力誘導因子(TWEAK), IL-1R, 好ましくはEGFR, HER2/neu, CEA, CD20又はIGF1-Rから成る群より選択されることを特徴とする、請求項２に記載の医薬組成物。
- 癌の治療のための請求項２の医薬組成物の製造のための請求項２の未標識モノクローナル抗体の使用。
- 前記癌が固形腫瘍であることを特徴とする、請求項４に記載の使用。
- 第一の腫瘍治療のための請求項２の医薬組成物の製造のための請求項２の未標識モノクローナル抗体の使用であって、未標識モノクローナル抗体を含むが標識モノクローナル抗体を含まない第二の医薬組成物での第二の腫瘍治療が、固形腫瘍の領域中のNIR蛍光標識に共有結合で結合された抗体のシグナル強度が、第一の治療後に測定された固形腫瘍の領域中の最大シグナル強度の80％である時に実施されることを特徴とする使用。
- 未標識モノクローナル抗体を含むが標識モノクローナル抗体を含まない第二の医薬組成物での第二の腫瘍治療が、固形腫瘍の領域中のNIR蛍光標識に共有結合で結合された抗体のシグナル強度が、第一の治療後に測定された固形腫瘍の領域中の最大シグナル強度の80％である時に実施されることを特徴とする、第一の腫瘍治療のための請求項２に記載の医薬組成物。
- 第一の腫瘍治療のための請求項２に記載の医薬組成物及び第二の腫瘍治療のための未標識モノクローナル抗体を含むが標識モノクローナル抗体を含まない医薬組成物。
- a) 第一の腫瘍治療のための請求項２に記載の医薬組成物；及び
b) 過剰発現された腫瘍関連タンパク質の細胞外ドメインに結合する未標識の治療モノクローナル抗体を含んで成るが、前記標識治療モノクローナル抗体を含まない、第二の腫瘍治療のための医薬組成物
を含んで成る容器。 - 癌、好ましくは固形腫瘍の治療用の医薬組成物の製造のための過剰発現された腫瘍関連タンパク質の細胞外ドメインに結合する未標識の治療モノクローナル抗体の使用であって、前記未標識モノクローナル抗体が少なくとも９：１で且つ最大で100：１の未標識抗体対標識抗体の予め決められた比でNIR蛍光標識に共有結合で結合された前記抗体と一緒に同時投与されることを特徴とする使用。
- 腫瘍関連タンパク質を過剰発現している固形腫瘍を患っている患者の治療用の医薬の製造のための過剰発現された腫瘍関連タンパク質の細胞外ドメインに結合する未標識治療モノクローナル抗体の使用であって、前記未標識抗体がNIR蛍光標識に共有結合で結合された前記抗体と一緒に同時投与されることを特徴とする使用。
- 前記患者のNIR蛍光画像が獲得されることを特徴とする、請求項７に記載の使用。
- 前記抗体のNIR蛍光シグナルが、固形腫瘍の一領域中のNIR蛍光標識に共有結合で結合された前記抗体を測定することにより定量されることを特徴とする、請求項７に記載の使用。
- 腫瘍関連タンパク質を過剰発現する固形腫瘍を患っている患者の治療のための過剰発現された腫瘍関連タンパク質の細胞外ドメインに結合する未標識の治療モノクローナル抗体であって、前記未標識抗体がNIR蛍光標識に共有結合で結合された前記抗体と一緒に同時投与されることを特徴とする未標識のモノクローナル抗体。
- 請求項２に記載の医薬組成物の一定容量を投与された腫瘍関連タンパク質を過剰発現する固形腫瘍を患っている患者のNIR蛍光画像を獲得する方法であって、固形腫瘍の一領域中の過剰発現された腫瘍関連タンパク質の細胞外ドメインに結合する標識治療モノクローナル抗体のNIR蛍光シグナルを測定することを含んで成る方法。
- 請求項２に記載の医薬組成物での治療を受けた患者の固形腫瘍の一領域中のNIR蛍光標識に共有結合で結合された治療モノクローナル抗体のNIR蛍光シグナルを測定する方法。
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| EP07006617 | 2007-03-30 | ||
| PCT/EP2008/002395 WO2008119493A1 (en) | 2007-03-30 | 2008-03-27 | Composition of labeled and non-labeled monoclonal antibodies |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JP2010526767A true JP2010526767A (ja) | 2010-08-05 |
Family
ID=38277481
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP2009553981A Pending JP2010526767A (ja) | 2007-03-30 | 2008-03-27 | 標識された又は未標識のモノクローナル抗体の組成物 |
Country Status (6)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US20100119457A1 (ja) |
| EP (1) | EP2132227A1 (ja) |
| JP (1) | JP2010526767A (ja) |
| CN (1) | CN101636412A (ja) |
| CA (1) | CA2681790A1 (ja) |
| WO (1) | WO2008119493A1 (ja) |
Families Citing this family (17)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| KR101043407B1 (ko) * | 2009-02-19 | 2011-06-22 | 한국과학기술연구원 | 암 표적성이 우수한 단백질 복합체 및 이의 제조방법 |
| WO2011012646A2 (en) | 2009-07-28 | 2011-02-03 | F. Hoffmann-La Roche Ag | Non-invasive in vivo optical imaging method |
| GB0921525D0 (en) | 2009-12-08 | 2010-01-27 | Isis Innovation | Product and method |
| HUE044179T2 (hu) | 2009-12-10 | 2019-10-28 | Hoffmann La Roche | Elsõsorban humán CSF1R extracelluláris domén 4-et megkötõ antitestek és ezek alkalmazása |
| CA2789076C (en) * | 2010-03-05 | 2017-11-21 | F. Hoffmann-La Roche Ag | Antibodies against human colony stimulating factor-1 receptor and uses thereof |
| EP3539988A3 (en) | 2010-05-27 | 2019-12-04 | Genmab A/S | Monoclonal antibodies against her2 |
| US9714294B2 (en) | 2010-05-27 | 2017-07-25 | Genmab A/S | Monoclonal antibodies against HER2 epitope |
| TW201302793A (zh) | 2010-09-03 | 2013-01-16 | Glaxo Group Ltd | 新穎之抗原結合蛋白 |
| CN102033056B (zh) * | 2010-10-14 | 2012-05-30 | 中国科学院化学研究所 | 抑制膜蛋白受体聚集的抗癌药物鉴定方法 |
| WO2012120004A1 (en) * | 2011-03-07 | 2012-09-13 | F. Hoffmann-La Roche Ag | In vivo selection of therapeutically active antibodies |
| WO2012143524A2 (en) | 2011-04-20 | 2012-10-26 | Genmab A/S | Bispecific antibodies against her2 and cd3 |
| CA2853889A1 (en) | 2011-12-15 | 2013-06-20 | F. Hoffmann-La Roche Ag | Antibodies against human csf-1r and uses thereof |
| AR097584A1 (es) | 2013-09-12 | 2016-03-23 | Hoffmann La Roche | Terapia de combinación de anticuerpos contra el csf-1r humano y anticuerpos contra el pd-l1 humano |
| WO2015042529A2 (en) | 2013-09-20 | 2015-03-26 | The Regents Of The University Of California | Methods, systems, and devices for imaging microscopic tumors |
| EP3504239A1 (en) | 2016-08-25 | 2019-07-03 | H. Hoffnabb-La Roche Ag | Intermittent dosing of an anti-csf-1r antibody in combination with macrophage activating agent |
| EP3558360A1 (en) | 2016-12-22 | 2019-10-30 | F. Hoffmann-La Roche AG | Treatment of tumors with an anti-csf-1r antibody in combination with an anti-pd-l1 antibody after failure of anti-pd-l1/pd1 treatment |
| WO2019000327A1 (zh) * | 2017-06-29 | 2019-01-03 | 成都华创生物技术有限公司 | 一种trail类蛋白持续抑制肿瘤细胞生长的给药方法 |
Citations (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US4921690A (en) * | 1986-12-29 | 1990-05-01 | City Of Hope | Method of enhancing the biodistribution of antibody for localization in lesions |
| JPH06207940A (ja) * | 1983-04-04 | 1994-07-26 | Us Government | 診断用キット |
| WO2006073586A2 (en) * | 2004-11-17 | 2006-07-13 | Duke University | Radiation dosimetry and blocking antibodies and methods and uses threfor in the treatment of cancer |
| WO2006126069A2 (en) * | 2005-05-24 | 2006-11-30 | Avestha Gengraine Technologies Pvt Ltd. | A method for the production of a monoclonal antibody to cd20 for the treatment of b-cell lymphoma |
Family Cites Families (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| EP1679082A1 (en) * | 2005-01-07 | 2006-07-12 | Schering AG | Use of cyanine dyes for the diagnosis of proliferative diseases |
-
2008
- 2008-03-27 EP EP08734792A patent/EP2132227A1/en not_active Withdrawn
- 2008-03-27 JP JP2009553981A patent/JP2010526767A/ja active Pending
- 2008-03-27 WO PCT/EP2008/002395 patent/WO2008119493A1/en active Application Filing
- 2008-03-27 CA CA002681790A patent/CA2681790A1/en not_active Abandoned
- 2008-03-27 US US12/593,621 patent/US20100119457A1/en not_active Abandoned
- 2008-03-27 CN CN200880008973A patent/CN101636412A/zh active Pending
Patent Citations (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPH06207940A (ja) * | 1983-04-04 | 1994-07-26 | Us Government | 診断用キット |
| US4921690A (en) * | 1986-12-29 | 1990-05-01 | City Of Hope | Method of enhancing the biodistribution of antibody for localization in lesions |
| WO2006073586A2 (en) * | 2004-11-17 | 2006-07-13 | Duke University | Radiation dosimetry and blocking antibodies and methods and uses threfor in the treatment of cancer |
| WO2006126069A2 (en) * | 2005-05-24 | 2006-11-30 | Avestha Gengraine Technologies Pvt Ltd. | A method for the production of a monoclonal antibody to cd20 for the treatment of b-cell lymphoma |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CA2681790A1 (en) | 2008-10-09 |
| EP2132227A1 (en) | 2009-12-16 |
| WO2008119493A1 (en) | 2008-10-09 |
| US20100119457A1 (en) | 2010-05-13 |
| CN101636412A (zh) | 2010-01-27 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| US9687568B2 (en) | Composition of a first non-labeled monoclonal antibody binding to a tumor antigen and a non-cross reactive second monoclonal antibody labeled with a NIR fluorescence label | |
| JP2010526767A (ja) | 標識された又は未標識のモノクローナル抗体の組成物 | |
| AU2010210547B2 (en) | Charge-balanced imaging agents | |
| Kampmeier et al. | Rapid optical imaging of EGF receptor expression with a single-chain antibody SNAP-tag fusion protein | |
| US20040022731A1 (en) | In vivo imaging of apoptosis | |
| TWI780082B (zh) | 新穎抗人類ＭＵＣ１抗體Ｆａｂ片段 | |
| US11547300B2 (en) | Methods of treating and imaging tumor micrometastases using photoactive immunoconjugates | |
| US20120226119A1 (en) | Vivo tumor vasculature imaging | |
| US20190298861A1 (en) | In vivo selection of therapeutically active antibodies | |
| JP6100704B2 (ja) | 治療用抗体についてのインビボ試験の手段および方法 | |
| WO2023057508A1 (en) | Fluorescently labeled immunoglobulin single variable domai ns | |
| Kujala et al. | A new near-infrared absorption and fluorescent probe based on bombesin for molecular imaging | |
| Chopra | Cy5. 5-Conjugated anti-epidermal growth factor receptor monoclonal antibody C225 C225-Cy5. 5 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20120814 |
|
| A02 | Decision of refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A02 Effective date: 20130205 |