JP2010512774A - バクテリオファージのスクリーニング蛋白質へのランダム配列挿入により改変されたバクテリオファージの作製方法 - Google Patents
バクテリオファージのスクリーニング蛋白質へのランダム配列挿入により改変されたバクテリオファージの作製方法 Download PDFInfo
- Publication number
- JP2010512774A JP2010512774A JP2009542133A JP2009542133A JP2010512774A JP 2010512774 A JP2010512774 A JP 2010512774A JP 2009542133 A JP2009542133 A JP 2009542133A JP 2009542133 A JP2009542133 A JP 2009542133A JP 2010512774 A JP2010512774 A JP 2010512774A
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- bacteriophage
- bank
- sequence
- protein
- target protein
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
Images
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
- C12N15/09—Recombinant DNA-technology
- C12N15/10—Processes for the isolation, preparation or purification of DNA or RNA
- C12N15/1034—Isolating an individual clone by screening libraries
- C12N15/1037—Screening libraries presented on the surface of microorganisms, e.g. phage display, E. coli display
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
- A61P31/02—Local antiseptics
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
- A61P31/04—Antibacterial agents
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2795/00—Bacteriophages
- C12N2795/00011—Details
- C12N2795/10011—Details dsDNA Bacteriophages
- C12N2795/10111—Myoviridae
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Zoology (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Oncology (AREA)
- Public Health (AREA)
- Communicable Diseases (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Crystallography & Structural Chemistry (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Plant Pathology (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Virology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
- Investigating Or Analysing Materials By The Use Of Chemical Reactions (AREA)
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
Abstract
Description
i)バクテリオファージの標的蛋白質をコードする少なくとも1個の遺伝子に配列をランダムに作製したオリゴヌクレオチドを挿入することが可能な少なくとも1個のDNA構築物により宿主細菌を形質転換する段階と;
ii)段階i)で形質転換した細菌に前記バクテリオファージを感染させる段階と;
iii)段階ii)で感染させた細菌を以下の条件下、即ちバクテリオファージが複製することができ、前記バクテリオファージの標的蛋白質をコードする少なくとも1個の遺伝子にランダムに作製されたオリゴヌクレオチドの少なくとも一部を挿入できるような条件下に置く段階と;
iv)段階ii)で感染させた細菌で複製したバクテリオファージを回収する段階を含む。
本発明によると、バクテリオファージの標的蛋白質をコードする遺伝子に、ランダムに作製されたオリゴヌクレオチドを挿入する。この挿入の目的は、前記遺伝子によりコードされる標的蛋白質の所定のセグメントのレベルに遺伝子変動を導入することである。こうして翻訳された蛋白質はバクテリオファージの初期蛋白質と異なる認識性又は接着性を示す可能性がある。
i)セグメントF1及びF2に対応するプライマーを使用して配列Sの全長にエラープローンPCRを実施し、配列Sをその全長にわたってランダムに突然変異させる段階と;
ii)得られた増幅産物を溶出させる段階と;
iii)段階i)で突然変異させたSのうちで内部セグメントDがその一致度を保存している少なくともF1−D及びD−F2領域を増幅するように、少なくともF1とD及びF2とDにそれぞれ対応するプライマー対を使用することにより、段階ii)で溶出させた増幅産物から出発して高忠実度PCRを実施する段階と;
iv)F1及びF2に対応するプライマーを使用することにより、段階iii)で得られた増幅産物から出発して高忠実度PCRを実施する段階と;
v)ヌクレオチド配列Sに対応する寸法をもつ得られたPCR産物を精製する段階を含む。
i)セグメントF1及びF2のそれぞれセンス及びアンチセンスプライマーである少なくとも2個のプライマーを使用して配列Sの全長にエラープローンPCRを実施し、ランダムに突然変異を導入しながら配列Sを増幅する段階と;
ii)ランダムに突然変異させたSのコピーに対応する得られた増幅産物を精製する段階と;
iii)少なくとも
−突然変異させたSのコピーの少なくともF1−DN領域を増幅するために、F1に対応するセンスプライマーと、DNのアンチセンスプライマーと、
−突然変異させたSのコピーの少なくともDN−F2配列を増幅するために、DNに対応するセンスプライマーと、F2のアンチセンスプライマー
をそれぞれセンスプライマーとアンチセンスプライマーの対として使用することにより、段階ii)で精製した増幅産物から出発して高忠実度PCRを実施する段階と;
iv)段階i)で突然変異させた配列SのうちでセグメントDの配列がその一致度を保存しているセグメントF1−DN及びDN−F2のコピーから構成される段階iii)で得られた増幅産物を精製する段階と;
v)F1及びF2の少なくとも1対のセンスプライマーとアンチセンスプライマーを使用することにより、段階iv)で得られた増幅産物から出発して高忠実度PCRを実施する段階と;
vi)前記インサートのランダムに突然変異させたヌクレオチド配列のうちで少なくともセグメントDNの配列がその一致度を保存しているものに対応する段階v)で得られたPCR産物を精製する段階を含む。
−ランダムに作製された1個以上のオリゴヌクレオチドの挿入と、
−その一致度を保存した前記遺伝子の配列セグメントを含む。
−宿主細菌における前記構築物の倍加を可能にする領域と;
−標的蛋白質をコードする遺伝子のレベルでバクテリオファージのゲノムにおける相同組換えを可能にする領域を含み、後者領域は標的蛋白質をコードする前記遺伝子の配列に相同な2個のDNA配列を含み、前記配列は好ましくは上記PCR法により配列をランダムに作製したオリゴヌクレオチドを含む挿入セグメントを規定する。
本発明のバクテリオファージは好ましくは天然又は改変型の溶菌性バクテリオファージである。
選択されたバクテリオファージによる宿主細菌の感染段階はバクテリオファージをこの段階で改変させない限り、特に問題ない。感染は宿主細菌の指数増殖期中に約30℃で開始することが好ましい。
本発明の方法によると、非常に多様な組換えバクテリオファージの集合を得ることが可能である。
−少なくとも12ヌクレオチドのランダム配列から構成される少なくとも3個のオリゴヌクレオチドの挿入により標的蛋白質をコードする3個の遺伝子が改変され;
−ヌクレオチド配列の1/3が標的蛋白質のレベルでポリペプチド修飾を受け;
−4個の塩基(A,T,C,G)うちの3個のみが元の蛋白質に対して突然変異を生じることができると仮定するならば、
ポリペプチドレベルで最低324通りの突然変異の可能性が得られ、約2.8×1011個の潜在的に異なるバクテリオファージ数に相当する。
i)上記のように、バクテリオファージの標的蛋白質をコードする少なくとも1個の遺伝子にランダムに配列を作製されたオリゴヌクレオチドを導入する段階と;
ii)段階i)により得られた遺伝子改変型バクテリオファージを既知又は未知一致度の細胞と接触させる段階と;
iii)段階ii)で接触させたバクテリオファージのうちで前記既知又は未知一致度の細胞に感染することが可能な少なくとも1個のバクテリオファージを選択する段階に従って処理することにより取得することができる。
本発明のバクテリオファージバンクは既知又は未知の細菌を防除するために使用することができる。実際に、バンクに存在する各種標的蛋白質をもつ組換えバクテリオファージの多様性は高く、これらのバクテリオファージの1個が既知又は未知の細菌に感染する確率は有意に非ゼロである。
以下、gp12に使用する手順を記載するが、当業者はgp37やgp38等の本発明の標的蛋白質をコードする他の遺伝子の改変にも容易に適用することができる。
gp12遺伝子は、
gp12F 5’−TGAGTAATAATACATATCAACACG(配列番号2)、及び
gp12R 5’−TGATTCTTTTACCTTAATTATGTAC(配列番号3)
をプライマーとして使用することにより、バクテリオファージ溶解液の濃縮培養液(上記参照)から得られた野生型T4のゲノムDNAからPCRにより増幅する。
ランダムポリメラーゼエラーを誘導するようにMn2の存在下で4回1組のネステッドPCR(各40サイクル)を実施する。
p12NF1F 5’−TCAAGGTAACCGCATCGTAAC(配列番号4)
p12NF2R 5’−AAAGACCACGCATGTCAG(配列番号5)
を使用する。
p12NF2F 5’−TGCCATGGTGGAACTGTTCA(配列番号6)
p12NF3R 5’−CACCTAATCTAGGTTTAC(配列番号7)
を使用する。
p12NF3F 5’−CTGACATGCGTGGTCTTT(配列番号8)
P12NF4R 5’−ATGTTTATGATAAGACAT(配列番号9)
を使用する。
P12NF4F 5’−GTAAACCTAGATTAGGTG(配列番号10)
P12NF5R 5’−TCATTCTTTTACCTTAATTAT(配列番号11)
を使用する。
これは各々25サイクルからなる2組の高忠実度PCR反応により実施する。
反応混合物中の産物P1−2及びP2−2と、P3−2及びP4−2のみで10サイクル。
精製後、上記各種突然変異を導入したユニークなフラグメントにおいてgp12の全長受容体結合ドメインを再構成する目的で30サイクルからなる高忠実度PCR反応で産物PA−1及びPB−1の等量アリコートを併用する。
1)受容体結合ドメインの上流のgp12のセグメントの増幅
上記のようにPCRにより作製したgp12遺伝子(gp12A)を鋳型とし、プライマー
gp12F 5’−TGAGTAATAATACATATCAACACG(配列番号12)、及び
gp12AR 5’−GTTACGATGCGGTTACCTTGT(配列番号13)
と共に使用する。
PCR産物(gp12B)のアリコート(約500ng)を等量の再構成したgp12の受容体結合ドメイン(gp12BD−Fu)と共に高忠実度PCR反応で使用する。なお、これらの2種類の産物は20pbしかオーバーラップしない。従って、PCR反応条件はこの点を考慮して改変する必要がある。
ドメインD1及びD2を無傷に保存しながら、確かに突然変異がランダムにgp12に導入されていることを検証するために、アガロースゲルで精製したPCR産物を自動シーケンシンサーによりシーケンシングする。シーケンシングはgp12(配列番号1)のヌクレオチド1089から1110(図6A)と1195から1212(図6B)にそれぞれ対応する2部分で実施する。典型的に得られたシーケンシングプロファイルを図6に示す。そのプロファイルをgp12の初期配列のプロファイルと比較すると、gp12の予想プロファイルには多数の付加ピークが加わっていることが認められる。これらの付加ピークはPCR法により配列gp12に導入された突然変異が高頻度であることを反映している。これらのピークはドメインD1のレベルには認められず、このドメインがgp12に対してその配列一致度を保存していることが確認される。
上記手順により、gp12と同様にT4の突然変異遺伝子gp37及びgp38も作製することができた。
DK8−p12Cの新鮮な一晩培養液を使用してエレクトロコンピテント細胞を作製する。
recA+又はrecA−バックグラウンドでドナーDNAの有効な組換えを得るために、λの温度感受性リプレッサーclの制御下の組換え遺伝子exo、bet及びgamをもつプロファージλを含む大腸菌宿主を作製する。遺伝子exo、bet及びgamは42℃で容易に活性化し、32℃で阻害することができる。λの機能を活性化させる時間を5分間に短縮すると、細胞は組換え能が高まり、線状DNAを破壊せずに吸収する。λ Gamは大腸菌のヌクレアーゼRecBCDによる線状DNA攻撃を抑制し、ExoとBetaはこの線状DNAの組換え活性を生じる。更に重要な点として、この組換えは線状DNAから構成される基質の末端の30から50pbに限定されたDNA相同度で有効である。
DK8−T4Mut−λ細胞の新鮮な一晩培養液をLB培地+Chl+Kan+Ampで30℃にて調製する。
5000rpmで5分間遠心することにより細胞を採取し、上清を回収し、クロロホルム数滴を加え、混合物を再び10分間6000rpmで遠心する。5倍濃縮緩衝液を使用することにより、クロロホルムを除く上清を1×SM緩衝液の濃度(10mM MgSO4,100mM NaCl,0.01%ゼラチン及び50mM Tris−HCl[pH7,5])に調整し、分析時まで4℃で保存する。
病原性細菌株(エルシニア種、サルモネラ種、大腸菌O157 H7、エンテロバクター・サカザキ(Enterobacter sakazakii)等)の培養液を調製する。
Claims (30)
- 遺伝子改変型バクテリオファージバンクの作製方法であって、
i)バクテリオファージの標的蛋白質をコードする少なくとも1個の遺伝子に、配列がランダムに作製されているオリゴヌクレオチドを挿入することが可能な少なくとも1個のDNA構築物により宿主細菌を形質転換する段階;
ii)段階i)で形質転換した細菌に前記バクテリオファージを感染させる段階;
iii)段階ii)で感染させた細菌を、バクテリオファージが複製することができ、並びに前記バクテリオファージの標的蛋白質をコードする少なくとも1個の遺伝子にランダムに作製されたオリゴヌクレオチドの少なくとも一部を挿入できるような条件下に置く段階;
iv)前記感染宿主細菌で複製した組換えバクテリオファージを回収する段階
を含むことを特徴とする方法。 - オリゴヌクレオチドの挿入が相同組換えにより実施されることを特徴とする請求項1に記載の方法。
- 宿主細菌が大腸菌DK8株であることを特徴とする請求項2に記載の方法。
- 段階iv)において、平均して形質転換宿主細菌におけるバクテリオファージの1複製サイクル後で2回目の複製サイクルが生じる前にバクテリオファージが回収されることを特徴とする請求項1から3のいずれか一項に記載の方法。
- 形質転換宿主細菌に感染させるために使用されるバクテリオファージがTファミリーのバクテリオファージ、好ましくはT4型バクテリオファージであることを特徴とする請求項1から4のいずれか一項に記載の方法。
- 形質転換宿主細菌に感染させるために使用されるバクテリオファージが発光又は蛍光蛋白質をコードする遺伝子の導入により蛍光性に改変されたバクテリオファージ自体であることを特徴とする請求項1から5のいずれか一項に記載の方法。
- 形質転換宿主細菌に感染させるために使用されるバクテリオファージが発光又は蛍光蛋白質と融合したキャプシド蛋白質をもつバクテリオファージであることを特徴とする請求項6に記載の方法。
- 発光又は蛍光蛋白質がバクテリオファージのキャプシドのHoc蛋白質又はその一部と融合されることを特徴とする請求項7に記載の方法。
- ランダムな配列をもつオリゴヌクレオチドの挿入により遺伝子を改変するバクテリオファージの標的蛋白質がGP12、GP36、GP37及びGP38蛋白質又はその相同蛋白質から選択されることを特徴とする請求項1から8のいずれか一項に記載の方法。
- ランダムな配列をもつオリゴヌクレオチドの挿入により遺伝子を改変するバクテリオファージの標的蛋白質がGP12蛋白質であることを特徴とする請求項1から8のいずれか一項に記載の方法。
- 段階i)において、前記バクテリオファージの遺伝子に挿入するために所定配列をランダムに突然変異させた前記バクテリオファージの前記標的蛋白質をコードする遺伝子の全部又は一部のコピーに対応するインサートを含むDNA構築物により宿主細菌を形質転換することを特徴とする請求項1から10のいずれか一項に記載の方法。
- 請求項1から11のいずれか一項の方法に従って取得可能なバクテリオファージバンク。
- 組換えバクテリオファージバンクであって、前記バンクを構成するバクテリオファージが標的蛋白質をコードする少なくとも1個の遺伝子の各種コピーを含み、前記遺伝子がランダムに作製されたオリゴヌクレオチド配列の挿入を含むことを特徴とする組換えバクテリオファージバンク。
- 各種コピーをバクテリオファージに含む前記遺伝子が標的蛋白質GP12をコードすることを特徴とする請求項13に記載のバクテリオファージバンク。
- 組換えバクテリオファージバンクであって、前記バンクを構成するバクテリオファージが標的蛋白質をコードする種々の遺伝子の各種コピーを含み、前記遺伝子がランダムに作製されたオリゴヌクレオチド配列の挿入を含むことを特徴とする組換えバクテリオファージバンク。
- 前記標的蛋白質がGP12、GP36、GP37、GP38又はその相同物である蛋白質から選択されることを特徴とする請求項12又は15に記載の組換えバクテリオファージバンク。
- 標的蛋白質をコードする前記遺伝子が同時に改変されていることを特徴とする請求項12、15又は16のいずれか一項に記載の組換えバクテリオファージバンク。
- 同一バクテリオファージの少なくとも103個、好ましくは少なくとも105個、より好ましくは少なくとも108個の変異体を含み、前記変異体はその標的蛋白質の少なくとも1個の配列が相違することを特徴とする請求項12から16のいずれか一項に記載のバクテリオファージバンク。
- バクテリオファージの標的蛋白質をコードする遺伝子を改変するためのDNA構築物であって、標的蛋白質をコードする前記遺伝子の全部又は一部のランダムに突然変異させたコピーに対応するインサートを含むことを特徴とする前記DNA構築物。
- 5’及び3’末端を2個のセグメントF1及びF2により規定され、一致度を保存した少なくともN個の内部セグメントD1からDN(ここで、Nは1以上の整数である。)を含む前記インサートが、
i)ランダムに突然変異を導入しながら前記インサートの配列を増幅するように、それぞれセグメントF1及びF2のセンス及びアンチセンスプライマーである少なくとも2個のプライマーを使用して前記インサートの配列の全長にエラープローンPCRを実施する段階;
ii)前記インサートのランダムに突然変異させたコピーに対応する得られた増幅産物を精製する段階;
iii)それぞれセンスプライマーとアンチセンスプライマーの対として少なくとも
−前記インサートの突然変異コピーの少なくともF1−DN領域を増幅するために、F1に対応するセンスプライマーと、DNのアンチセンスプライマーと、
−Sの突然変異コピーの少なくともDN−F2配列を増幅するために、DNに対応するセンスプライマーと、F2のアンチセンスプライマー
を使用することにより、段階ii)で精製した増幅産物から出発して高忠実度PCRを実施する段階;
iv)段階i)で突然変異させた前記インサートのうちでセグメントDの配列がその一致度を保存しているセグメントF1−DN及びDN−F2のコピーから構成される段階iii)で得られた増幅産物を精製する段階;
v)F1及びF2の少なくとも1対のセンスプライマーとアンチセンスプライマーを使用することにより、段階iv)で得られた増幅産物から出発して高忠実度PCRを実施する段階;
vi)前記インサートのランダムに突然変異させたヌクレオチド配列のうちで少なくともセグメントDNの配列がその一致度を保存しているものに対応する段階v)で得られたPCR産物を精製する段階
を含む方法を使用してPCRにより得られることを特徴とする請求項19に記載のDNA構築物。 - 請求項19又は20に記載のDNA構築物であって、
−宿主細菌における前記構築物の複製を可能にする領域
を更に含むことを特徴とするDNA構築物。 - 請求項19から21のいずれか一項に記載の複数のDNA構築物により形質転換された細菌から構成される宿主細菌バンク。
- 既知又は未知一致度の細胞を標的とすることが可能な遺伝子改変型バクテリオファージの選択方法であって、
i)請求項1から11のいずれか一項の方法に従って得られた遺伝子改変型バクテリオファージを既知又は未知一致度の細胞と接触させる段階と;
ii)前記既知又は未知一致度の細胞と接触させた組換えバクテリオファージのうちで前記細胞に感染することが可能な少なくとも1種の組換えバクテリオファージを選択する段階を含むことを特徴とする前記方法。 - 請求項12から18のいずれか一項に記載のバクテリオファージバンクを利用することを特徴とする非治療的殺菌方法。
- 治療剤としての請求項11から16のいずれか一項に記載のバクテリオファージバンク。
- 細菌感染症の防除又は予防用医薬の製造のための、請求項12から18のいずれか一項に記載の組換えバクテリオファージバンク又は請求項23の方法に従って選択された少なくとも1種のバクテリオファージの使用。
- 既知又は未知細菌の参照用バクテリオファージを取得するための、請求項12から18のいずれか一項に記載の組換えバクテリオファージバンク又は請求項23の方法に従って選択された少なくとも1種のバクテリオファージの使用。
- 細菌のインビトロ検出及び/又は同定用としての請求項12から18のいずれか一項に記載のバクテリオファージバンクの使用。
- 感染のインビトロ診断用としての請求項11から16のいずれか一項に記載のバクテリオファージバンクの使用。
- 請求項23の方法に従って選択された少なくとも1種のバクテリオファージを含有する医薬組成物。
Applications Claiming Priority (2)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
FR0655721A FR2910492B1 (fr) | 2006-12-20 | 2006-12-20 | Procede de preparation de bacteriophages modifies par insertion de sequences aleatoires dans les proteines de ciblage desdits bacteriophages |
PCT/FR2007/002101 WO2008093009A2 (fr) | 2006-12-20 | 2007-12-18 | Procédé de préparation de bactériophages modifiés par insertion de séquences aléatoires dans les protéines de ciblage desdits bactériophages |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
JP2010512774A true JP2010512774A (ja) | 2010-04-30 |
JP2010512774A5 JP2010512774A5 (ja) | 2013-08-29 |
Family
ID=38293109
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2009542133A Pending JP2010512774A (ja) | 2006-12-20 | 2007-12-18 | バクテリオファージのスクリーニング蛋白質へのランダム配列挿入により改変されたバクテリオファージの作製方法 |
Country Status (7)
Country | Link |
---|---|
US (1) | US9315803B2 (ja) |
EP (2) | EP2097516B1 (ja) |
JP (1) | JP2010512774A (ja) |
AU (1) | AU2007346006B2 (ja) |
CA (1) | CA2673579C (ja) |
FR (1) | FR2910492B1 (ja) |
WO (1) | WO2008093009A2 (ja) |
Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP2019510518A (ja) * | 2016-04-08 | 2019-04-18 | フィコ セラピューティクス リミテッド | 改変バクテリオファージ |
Families Citing this family (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
FR2945049B1 (fr) | 2009-04-30 | 2013-10-04 | Pherecydes Pharma | Modification du genome d'un bacteriophage lytique par immobilisation dudit bacteriophage dans sa bacterie hote |
WO2020077559A1 (zh) * | 2018-10-17 | 2020-04-23 | 深圳华大生命科学研究院 | 从细菌全基因组序列中挖掘温和型噬菌体的方法、装置和存储介质 |
US11724057B2 (en) | 2019-12-16 | 2023-08-15 | Melissa H. Egts | Protective, sanitary, securable nasal cannula cover |
USD942002S1 (en) | 2019-12-16 | 2022-01-25 | Melissa H. Egts | Nasal cannula cover |
Citations (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JPH08506493A (ja) * | 1993-05-11 | 1996-07-16 | イスチチュート デイ リセルシュ デイ バイオロジア モレコラレ ピー.アンジェレッティ ソシエタ ペル アチオニ | 免疫原または診断試薬の製造法、およびその方法によって得られる免疫原または診断試薬 |
WO2006066224A2 (en) * | 2004-12-14 | 2006-06-22 | Yale University | Virulence targeted antibiotics |
Family Cites Families (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US6203986B1 (en) * | 1998-10-22 | 2001-03-20 | Robert H. Singer | Visualization of RNA in living cells |
AU2001230889A1 (en) | 2000-01-11 | 2001-07-24 | Intralytix, Inc. | Method and device for sanitation using bacteriophages |
WO2002007742A2 (en) * | 2000-07-25 | 2002-01-31 | The Government Of The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services | Bacteriophage having multiple host range |
GB0028130D0 (en) * | 2000-11-17 | 2001-01-03 | Phico Therapeutics Ltd | Polypeptide and uses thereof |
-
2006
- 2006-12-20 FR FR0655721A patent/FR2910492B1/fr active Active
-
2007
- 2007-12-18 EP EP07872388A patent/EP2097516B1/fr active Active
- 2007-12-18 WO PCT/FR2007/002101 patent/WO2008093009A2/fr active Search and Examination
- 2007-12-18 CA CA2673579A patent/CA2673579C/fr active Active
- 2007-12-18 AU AU2007346006A patent/AU2007346006B2/en not_active Ceased
- 2007-12-18 JP JP2009542133A patent/JP2010512774A/ja active Pending
- 2007-12-18 US US12/520,789 patent/US9315803B2/en not_active Expired - Fee Related
- 2007-12-18 EP EP12192306.4A patent/EP2653536A1/fr not_active Withdrawn
Patent Citations (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JPH08506493A (ja) * | 1993-05-11 | 1996-07-16 | イスチチュート デイ リセルシュ デイ バイオロジア モレコラレ ピー.アンジェレッティ ソシエタ ペル アチオニ | 免疫原または診断試薬の製造法、およびその方法によって得られる免疫原または診断試薬 |
WO2006066224A2 (en) * | 2004-12-14 | 2006-06-22 | Yale University | Virulence targeted antibiotics |
Non-Patent Citations (2)
Title |
---|
JPN6013000877; J. Biotechnol. (Nov-2006) vol.126, no.3, p.286-290 * |
JPN6013000878; Acta Virol. (2002) vol.46, no.2, p.57-62 * |
Cited By (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP2019510518A (ja) * | 2016-04-08 | 2019-04-18 | フィコ セラピューティクス リミテッド | 改変バクテリオファージ |
JP7166244B2 (ja) | 2016-04-08 | 2022-11-07 | フィコ セラピューティクス リミテッド | 改変バクテリオファージ |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
EP2097516B1 (fr) | 2012-11-14 |
WO2008093009A2 (fr) | 2008-08-07 |
US9315803B2 (en) | 2016-04-19 |
AU2007346006A1 (en) | 2008-08-07 |
EP2653536A1 (fr) | 2013-10-23 |
AU2007346006B2 (en) | 2013-08-29 |
WO2008093009A3 (fr) | 2009-02-12 |
EP2097516A2 (fr) | 2009-09-09 |
FR2910492B1 (fr) | 2013-02-15 |
US20110027231A1 (en) | 2011-02-03 |
CA2673579A1 (fr) | 2008-08-07 |
FR2910492A1 (fr) | 2008-06-27 |
WO2008093009A8 (fr) | 2009-07-16 |
CA2673579C (fr) | 2019-04-09 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
US11530405B2 (en) | Anti-CRISPR genes and proteins and methods of use | |
Schneider | Bacteriophage-mediated horizontal gene transfer: transduction | |
US10626394B2 (en) | Synthetic bacteriophages and bacteriophage compositions | |
Schuch et al. | Detailed genomic analysis of the Wβ and γ phages infecting Bacillus anthracis: implications for evolution of environmental fitness and antibiotic resistance | |
Pouillot et al. | Genetically engineered virulent phage banks in the detection and control of emergent pathogenic bacteria | |
CN108135949A (zh) | 递送媒介物 | |
Chamakura et al. | Single-gene lysis in the metagenomic era | |
JP2010512774A (ja) | バクテリオファージのスクリーニング蛋白質へのランダム配列挿入により改変されたバクテリオファージの作製方法 | |
JP2010512774A5 (ja) | ||
Salmi et al. | Genetic determinants of immunity and integration of temperate Myxococcus xanthus phage Mx8 | |
JP7323178B2 (ja) | L型細菌における合成バクテリオファージゲノムの再起動 | |
Ceyssens | Isolation and characterization of lytic bacteriophages infecting Pseudomonas aeruginosa | |
JP5622394B2 (ja) | 遺伝子配列を前記遺伝子配列の所定の内部セグメントの一致度を維持しながらランダムに多様化する方法 | |
Brüssow et al. | Genomics and evolution of tailed phages | |
McShan | The bacteriophages of group A streptococci | |
Martínez et al. | Bacteriophages of lactic acid bacteria and biotechnological tools | |
Aljarbou et al. | Genotyping, morphology and molecular characteristics of a lytic phage of Neisseria strain obtained from infected human dental plaque | |
Parcey | The Role of CRISPR-Mediated Phage Resistance in the Development of Phage-Based Biocontrol for Erwinia amylovora | |
Yeh et al. | The packaging signal of Xanthomonas integrative filamentous phages | |
Knezevic et al. | Phages from Genus Bruynoghevirus and Phage Therapy: Pseudomonas Phage Delta Case. Viruses 2021, 13, 1965 | |
McKitterick | Phage Wars: the molecular interactions underlying the arms race between a lytic bacteriophage and epidemic Vibrio cholerae | |
Lucchini | Genetic diversity of Streptococcus thermophilus phages and development of phage-resistant starters for the dairy industry | |
Seaton | Defining the Requirements for Early Gene Expression in Bacteriophage HK639 | |
Magrini | Characterizing the mechanism of site-specific recombination of temperate bacteriophage Mx8 of Myxococcus xanthus | |
II | DIVERSITY OF LACTIC ACID BACTERIA BACTERIOPHAGES FROM DAIRY ENVIRONMEMENT |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
A621 | Written request for application examination |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A621 Effective date: 20100922 |
|
A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20130115 |
|
RD04 | Notification of resignation of power of attorney |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A7424 Effective date: 20130313 |
|
A601 | Written request for extension of time |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A601 Effective date: 20130409 |
|
A602 | Written permission of extension of time |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A602 Effective date: 20130416 |
|
A524 | Written submission of copy of amendment under section 19 (pct) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A524 Effective date: 20130712 |
|
A02 | Decision of refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A02 Effective date: 20140401 |