JP2010142137A - Cell-treating device - Google Patents
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Abstract
Description
本発明は、細胞処理装置に関するものである。 The present invention relates to a cell processing apparatus.
従来、脂肪組織を分解して脂肪由来細胞を単離させた細胞懸濁液を収容した遠心分離容器を、該遠心分離容器から離れた軸線回りに回転させることにより、細胞懸濁液内に含有されている成分を比重により分離する遠心分離装置が知られている(特許文献1参照。)。
遠心分離容器は、一端を閉塞された略円筒状に形成され、その閉塞端を半径方向外方に向けるように回転させられることにより、閉塞端に向けて比重の大きい成分が移動し、閉塞端側から比重の大きい順に並んで分離されるようになっている。
Conventionally, a centrifuge container containing a cell suspension obtained by decomposing adipose tissue and isolating adipose-derived cells is contained in the cell suspension by rotating it around an axis away from the centrifuge container. There is known a centrifugal separation device that separates components that are separated by specific gravity (see Patent Document 1).
The centrifuge container is formed in a substantially cylindrical shape with one end closed, and a component having a large specific gravity moves toward the closed end by rotating the closed end so that the closed end is directed radially outward. They are separated side by side in descending order of specific gravity.
しかしながら、細胞懸濁液を遠心分離することにより遠心分離容器の底部に分離された細胞群は遠心力によって押し固められた固形のペレット状に形成されてしまうという不都合がある。すなわち、細胞群がペレット状に形成されてしまうと、遠心分離後の細胞群を吸引により遠心分離容器内から取り出すことが困難になる。また、遠心分離時に細胞群の中にタンパク質分解酵素や脂肪分のような不要成分が取り込まれたままペレット状に形成されてしまうことがあり、不要成分を除去することが困難となる。 However, there is an inconvenience that the cell group separated at the bottom of the centrifuge container by centrifuging the cell suspension is formed into a solid pellet that is compressed by centrifugal force. That is, if the cell group is formed in a pellet shape, it becomes difficult to take out the cell group after centrifugation from the centrifuge container by suction. In addition, unnecessary components such as proteolytic enzymes and fats may be formed in the cell group during centrifugation, and may be formed into pellets, which makes it difficult to remove the unnecessary components.
本発明は、上述した事情に鑑みてなされたものであって、細胞を効率的に洗浄して不要成分が除去された細胞群を回収することができる細胞処理装置を提供することを目的としている。 This invention is made | formed in view of the situation mentioned above, Comprising: It aims at providing the cell processing apparatus which can collect | recover the cell group from which the unnecessary component was removed by wash | cleaning a cell efficiently. .
上記目的を達成するために、本発明は以下の手段を提供する。
本発明は、先端に向かって漸次先細になる底部を有し、細胞懸濁液を収容して前記底部を半径方向外方に向けて所定の軸回りに回転可能な容器本体と、該容器本体内を深さ方向に区画する位置に配置され、細胞懸濁液内に含まれる細胞が通過可能な口径を有する複数の透孔を備えたフィルタ部材と、該フィルタ部材よりも前記底部側に吐出口を配置する洗浄液供給管と、前記フィルタ部材を挟んで前記底部とは反対側の位置に吸引口を配置する吸引管とを備える細胞処理装置を提供する。
In order to achieve the above object, the present invention provides the following means.
The present invention has a container body that has a bottom portion that gradually tapers toward the tip, accommodates a cell suspension, and is rotatable about a predetermined axis with the bottom portion directed radially outward, and the container body A filter member provided with a plurality of through holes having a diameter through which cells contained in the cell suspension can pass, and discharged toward the bottom side of the filter member. There is provided a cell treatment apparatus comprising a cleaning liquid supply pipe for disposing an outlet and a suction pipe for disposing a suction port at a position opposite to the bottom with the filter member interposed therebetween.
本発明によれば、容器本体内に細胞懸濁液を収容して、容器本体をその底部を半径方向外方に向けて所定の軸回りに回転させることにより、細胞懸濁液内に含有されている成分が比重により分離され、容器本体の底部近傍には、比重の大きな細胞群が集められ、その上層には血漿等の上清が集められる。細胞群は遠心力によって押し固められてペレット状に構成される。 According to the present invention, the cell suspension is contained in the container body, and the container body is contained in the cell suspension by rotating the container body about a predetermined axis with its bottom portion radially outward. The components are separated by specific gravity, a group of cells having a large specific gravity is collected near the bottom of the container body, and a supernatant such as plasma is collected in the upper layer. The cell group is pressed into a pellet by centrifugal force.
この状態で、吸引管の吸引口から吸引すると、吸引口から上清が吸引され、底部近傍にペレット状の細胞群を残すことができる。そして、洗浄液吐出管の吐出口から洗浄液を吐出すると、洗浄液の勢いによってペレット状の細胞群が崩壊させられ、内部に取り込まれていた不要成分を放出させることができる。
この場合において、崩壊させられた細胞群は、フィルタ部材を通過する洗浄液の勢いによって、透孔を通過させられる際に細かく分離させられる。その結果、細胞群が大きな塊のままで残る不都合を防止することができる。
In this state, when suction is performed from the suction port of the suction tube, the supernatant is sucked from the suction port, and a pellet-like cell group can be left in the vicinity of the bottom. Then, when the cleaning liquid is discharged from the discharge port of the cleaning liquid discharge pipe, the pellet-like cell group is collapsed by the momentum of the cleaning liquid, and unnecessary components taken into the inside can be released.
In this case, the collapsed cell group is finely separated when it is allowed to pass through the through holes by the momentum of the cleaning liquid passing through the filter member. As a result, it is possible to prevent inconvenience that the cell group remains as a large lump.
上記発明においては、前記フィルタ部材が、遠心力によって弾性変形可能な弾性材料によって平板状に形成され、前記透孔が前記フィルタ部材を板厚方向に貫通形成されていてもよい。
このようにすることで、容器本体を回転させてフィルタ部材に遠心力を作用させることにより、フィルタ部材が弾性変形させられるので、フィルタ部材に設けられている透孔の口径を変化させることができる。すなわち、フィルタ部材の透孔の口径が拡大させられた状態で、吐出口から洗浄液を吐出することにより、フィルタ部材を通過する洗浄液の勢いによって透孔を通過させられる際に細かく分離させられる。一方、フィルタ部材の透孔の口径を縮小させるようにフィルタ部材を弾性変形させて吸引口から上清を吸引することで、細胞群から細胞を巻き上がらせることなく上清を除去することができる。その結果細胞の収率を向上することができる。
In the said invention, the said filter member may be formed in flat form with the elastic material which can be elastically deformed with a centrifugal force, and the said through-hole may be penetrated and formed in the plate | board thickness direction.
By doing in this way, since the filter member is elastically deformed by rotating the container body and applying a centrifugal force to the filter member, the aperture of the through hole provided in the filter member can be changed. . That is, when the cleaning liquid is discharged from the discharge port in a state where the diameter of the through hole of the filter member is enlarged, the filter member is finely separated when being passed through the through hole by the force of the cleaning liquid passing through the filter member. On the other hand, the supernatant can be removed from the cell group without rolling up the cells by elastically deforming the filter member so as to reduce the diameter of the through hole of the filter member and sucking the supernatant from the suction port. . As a result, the cell yield can be improved.
また、上記発明においては、前記透孔は、前記フィルタ部材が所定値以上の遠心力を受けているときに、前記細胞が通過可能な口径まで拡大され、遠心力が所定値より小さくなったときには、前記細胞より小さい口径に縮小されてもよい。 Moreover, in the said invention, when the said filter member is receiving the centrifugal force more than predetermined value, when the said filter member is expanded to the aperture which the said cell can pass and centrifugal force becomes smaller than predetermined value, The diameter may be reduced to be smaller than the cell.
本発明によれば、細胞を効率的に洗浄して不要成分が除去された細胞群を回収することができるという効果を奏する。 According to the present invention, the cell group from which unnecessary components are removed by efficiently washing the cells can be collected.
本発明の一実施形態に係る細胞処理装置1について、図面を参照して以下に説明する。
本実施形態に係る細胞処理装置1は、図1に示されるように、モータ2によって鉛直軸線3回りに水平回転させられる容器本体4と、該容器本体4に固定され、該容器本体4内において分離された上清を吸引して容器本体4外に排出させる上清吸引管5と、容器本体4に固定され、該容器本体4内に洗浄液を供給する洗浄液供給管6と、固定配管7と上清吸引管5および洗浄液供給管6とを接続するロータリジョイント8と、固定配管内の液体を送給・排出する、例えば、ペリスタルティックポンプ9とを備えている。
A cell treatment apparatus 1 according to an embodiment of the present invention will be described below with reference to the drawings.
As shown in FIG. 1, the cell treatment apparatus 1 according to the present embodiment includes a
容器本体4は、図2(a)に示されるように、円筒状の側壁4aと、該側壁4aの一端を閉塞する位置に配置された底面(底部)4bとを有している。底面4bは、先端に向かって漸次先細になるテーパ内面状に形成されている。
容器本体4内には、該容器本体4内の空間を深さ方向に2つに区画するように配置された平板状のフィルタ部材10が備えられている。
As shown in FIG. 2A, the
In the container
フィルタ部材10は、例えば、ゴムのような弾性材料により構成されている。フィルタ部材10には、板厚方向に貫通する多数の透孔11が設けられている。この透孔11は、フィルタ部材10が平板状に形成されている状態では、図2(b)に示されるように、十分に小さな、あるいはほぼ閉塞された口径を有している。
The
一方、図3(a)に示されるように、フィルタ部材10が周縁部に対して中央部が隆起するように板厚方向に弾性変形させられた状態では、フィルタ部材10を構成している弾性材料が伸びる結果、透孔11も図3(b)に示されるように、口径を拡大するようになっている。フィルタ部材10は、その外周縁が容器本体4の内面に固定されている。容器本体4に対して遠心力が作用すると、フィルタ部材10の中央部近傍が、遠心力によって容器本体4の底面4bに向かう方向に移動して、周縁部に対して中央部が隆起するように弾性変形させられるようになっている。
本実施形態においては、フィルタ部材10の透孔11は、拡大された状態で細胞を通過させることができる程度の口径、例えば、100μm以上の口径まで拡大されるようになっている。
On the other hand, as shown in FIG. 3A, in the state in which the
In the present embodiment, the
上清吸引管5は、フィルタ部材10を挟んで容器本体4の底面4bとは反対側にその吸引口5aを配置している。
一方、洗浄液供給管6は、フィルタ部材10と容器本体4の底面4bとの間の底面近傍にその吐出口6aを配置している。
The
On the other hand, the
このように構成された本実施形態に係る細胞処理装置1の作用について以下に説明する。
本実施形態に係る細胞処理装置1を用いて細胞懸濁液Aから細胞群Cを取り出すには、細胞懸濁液Aを容器本体4内に収容して、モータ2を作動させることにより容器本体4を水平回転させる。容器本体4は回転数が高まって遠心力が高くなると、そのテーパ状の底面4bを半径方向外方に向けるように揺動させられて、その状態で水平回転させられる。
The operation of the cell processing apparatus 1 according to the present embodiment configured as described above will be described below.
In order to take out the cell group C from the cell suspension A using the cell processing apparatus 1 according to the present embodiment, the cell suspension A is accommodated in the
細胞懸濁液Aは、図2に示されるように、比重に従って上清Bと細胞群Cとに遠心分離される。細胞群Cは容器本体4の遠心力が最も大きな部位、すなわち、半径方向の最外方に配置される底面4bに向かって移動する。このとき、遠心力によってフィルタ部材10を構成している弾性材料が弾性変形させられて、透孔11が拡大させられるので、細胞懸濁液A内に含まれている細胞は、フィルタ部材10によって遮られることなく、その透孔11を通過して底面4b近傍に集められ、テーパ内面状の底面4bを転がって先端にペレット状に堆積される。このとき、細胞懸濁液Aに含まれている消化酵素液や塵埃等の不要成分が細胞間に取り込まれた状態でペレット状に形成される。
As shown in FIG. 2, the cell suspension A is centrifuged into a supernatant B and a cell group C according to the specific gravity. The cell group C moves toward the portion of the
この状態で、モータ2の回転数を低下させると、遠心力によって弾性変形していたフィルタ部材10の弾性変形が復元して略平板状に戻るので、フィルタ部材10に設けられている透孔11の口径が縮小し、透孔11が閉塞される。これにより、容器本体4内部が長手方向に2つに区画されるので、この状態でペルスタルティックポンプ9を作動させて上清吸引管5の吸引口5aから上清Bを吸引すると、上清Bが、吸引口5a、ロータリジョイント8および固定配管7を介して容器本体4の外部に排出される。
In this state, when the rotational speed of the
この場合において、本実施形態によれば、上清Bを吸引する際に遠心力を低下させてフィルタ部材10の透孔11を閉塞することで、上清Bの吸引による上清Bの流れがペレット状の細胞群Cに伝わり難くなる。これにより、上清Bの流れによって細胞群Cから細胞が舞い上がって吸引口5aから排出されてしまう不都合を防止して、細胞の収率を向上することができるという利点がある。
In this case, according to the present embodiment, when the supernatant B is sucked, the centrifugal force is reduced to close the through
また、洗浄液供給管6から洗浄液Dを供給する際には、モータ2の回転数を増大させて遠心力を増大させた状態で、吐出口6aから洗浄液Dを吐出する。これにより、遠心力によってフィルタ部材10が弾性変形させられて、透孔11が拡大し、細胞懸濁液A′がフィルタ部材を通過できるようになる。
Further, when supplying the cleaning liquid D from the cleaning
すなわち、吐出口6aから吐出された洗浄液Dの流れによって、ペレット状の細胞群Cが解されて再懸濁される際に、細胞群Cがフィルタ部材10の拡大された透孔11を通過するように強制される。フィルタ部材10の透孔11は、細胞が通過できる程度の大きさに拡大されているので、複数の細胞がまとまった細胞塊はこれを通過することができずに、透孔11によって引き離される。そして、バラバラになった状態の細胞が透孔を通過させられる。その結果、細胞がより細かく分離された状態で再懸濁された細胞懸濁液A′を得ることができる。
That is, when the pellet-like cell group C is unwound and resuspended by the flow of the cleaning liquid D discharged from the
これにより、不要成分を巻き込んで固められたペレット状の細胞群Cが洗浄液Dによって再懸濁されることで、細胞群Cの中から不要成分が放出される。
そして、再度容器本体4を水平回転させて、再懸濁された細胞懸濁液A′を遠心分離することにより、底面4bの先端に不要成分が除去された細胞群Cをペレット状に形成することができる。
As a result, the pellet-shaped cell group C that is wound with the unnecessary component and consolidated is resuspended by the washing liquid D, so that the unnecessary component is released from the cell group C.
Then, by rotating the
そして、再度、遠心力を低下させた状態で、上清吸引管5の作動により、容器本体4内の上清Bを排出することにより、ペレット状に固められた細胞群Cを収容することができ、その後、洗浄液供給管6と兼用した細胞吸引管を作動させることで、容器本体4の先端に溜まった細胞群Cを取り出すことができる。
Then, the cell group C consolidated into a pellet can be accommodated by discharging the supernatant B in the
このように、本実施形態に係る細胞処理装置1によれば、フィルタ部材10を通過させることでペレット状の細胞群Cをより細かく分解して不純物を放出させ、健全な状態の細胞群Cを回収することができるという利点がある。
また、遠心力を低下させた状態で上清Bを吸引することにより、上清Bの流れの影響を細胞群Cに及ぼすことが防止され、細胞群Cの舞い上がりにより上清Bとともに細胞が誤って吸引されてしまう不都合の発生を未然に防止することができる。これにより、最終的に得られる細胞群Cの回収率を向上することができる。
Thus, according to the cell processing apparatus 1 which concerns on this embodiment, by letting the
In addition, by aspirating the supernatant B in a state where the centrifugal force is reduced, the influence of the flow of the supernatant B is prevented from being exerted on the cell group C. Therefore, it is possible to prevent the occurrence of inconvenience that is sucked. Thereby, the collection rate of the cell group C finally obtained can be improved.
なお、本実施形態において、フィルタ部材10の材料であるゴムのような弾性材料としては、例えば、シリコーン樹脂、ブタジエンゴム、スチレン−ブタジエンゴム、イソプレンゴム、エチレンープロピレンゴム、ブチルゴム、アクリロニトリルーブタジエンゴム、カルボキシニトリルゴム、アクリルゴム、水素添加ニトリルゴム、ウレタンゴム、フッ素ゴム、多硫化ゴムなどの合成ゴムおよび熱可塑性ゴムなどのエラストマーならびに天然ゴム等が挙げられる。これらは1種単独で用いてもよく、2種以上が併用されていてもよい。これらの中でも、生体適合性が良好な点で、シリコーン樹脂等が好ましい。
In this embodiment, examples of the elastic material such as rubber that is the material of the
また、フィルタ部材10は、あまり弾性変形しない平板状の部材によって構成してもよい。この場合には、フィルタ部材10の透孔としては、細胞を通過させることができる程度の口径を有していればよい。
このようにすると、細胞群Cが上清B吸引時の影響を受けないようにすることはできないが、フィルタ部材10の透孔11を通過する際に細胞群Cが細かく解されるので、細胞間に挟まれた異物を十分に放出させて、健全な状態の細胞群Cを得ることができる。
Further, the
In this way, it is impossible to prevent the cell group C from being affected by the suction of the supernatant B. However, since the cell group C is dissociated finely when passing through the through
また、本実施形態において、容器本体4に収容する細胞懸濁液Aとしては、生体の細胞を含む懸濁液であれば特に制限はないが、例えば、脂肪に由来する細胞を含む、脂肪由来細胞懸濁液などが好適である。ここで、脂肪由来細胞としては、血管内皮細胞、線維芽細胞、造血幹細胞、血球系の細胞、脂肪由来の幹細胞などが挙げられる。この幹細胞は、細胞治療などの目的で脂肪組織から採取される細胞であり、多分化能、自己再生能を有する細胞を指す。
Further, in this embodiment, the cell suspension A accommodated in the
A 細胞懸濁液
C 細胞群
1 細胞処理装置
4 容器本体
4b 底面(底部)
5 吸引管
5a 吸引口
6 洗浄液供給管
6a 吐出口
10 フィルタ部材
11 透孔
A Cell suspension C Cell group 1
DESCRIPTION OF
Claims (3)
該容器本体内を深さ方向に区画する位置に配置され、細胞懸濁液内に含まれる細胞が通過可能な口径を有する複数の透孔を備えたフィルタ部材と、
該フィルタ部材よりも前記底部側に吐出口を配置する洗浄液供給管と、
前記フィルタ部材を挟んで前記底部とは反対側の位置に吸引口を配置する吸引管とを備える細胞処理装置。 A container body that has a bottom that gradually tapers toward the tip, accommodates a cell suspension, and is rotatable about a predetermined axis with the bottom facing radially outward;
A filter member provided with a plurality of through-holes having a diameter that allows cells contained in the cell suspension to pass through, which are arranged at positions that divide the container body in the depth direction;
A cleaning liquid supply pipe that disposes a discharge port on the bottom side of the filter member;
A cell treatment apparatus comprising: a suction tube having a suction port disposed at a position opposite to the bottom with the filter member interposed therebetween.
前記透孔が前記フィルタ部材を板厚方向に貫通形成されている請求項1に記載の細胞処理装置。 The filter member is formed in a flat plate shape by an elastic material that can be elastically deformed by centrifugal force,
The cell treatment device according to claim 1, wherein the through-hole is formed so as to penetrate the filter member in a plate thickness direction.
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
JP2008320652A JP2010142137A (en) | 2008-12-17 | 2008-12-17 | Cell-treating device |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
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JP2008320652A JP2010142137A (en) | 2008-12-17 | 2008-12-17 | Cell-treating device |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
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JP2010142137A true JP2010142137A (en) | 2010-07-01 |
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Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP2017083265A (en) * | 2015-10-27 | 2017-05-18 | 国立大学法人 熊本大学 | Target cell capturing device |
-
2008
- 2008-12-17 JP JP2008320652A patent/JP2010142137A/en not_active Withdrawn
Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
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JP2017083265A (en) * | 2015-10-27 | 2017-05-18 | 国立大学法人 熊本大学 | Target cell capturing device |
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