JP2009296983A - エタノール製造方法 - Google Patents
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Abstract
リグノセルロース系バイオマスの加水分解された糖化液に含まれる6炭糖、5炭糖を効率よくエタノールに変換するエタノール製造方法の提供
【解決手段】
リグノセルロース系バイオマスから発酵によってエタノールを製造する方法において、糖化液を酵母または細菌を使用して6炭糖からの発酵を行わせながら、同時に不活性ガスを供給しながらエタノールを除去し、1次発酵後の発酵液に、発酵液からの菌体分離を行うことなく5炭糖発酵微生物を使用して、5炭糖からの発酵を行わせることを特徴とするエタノール製造方法
【選択図】なし
Description
間伐材などの木質系バイオマスや稲わらなどの草本系バイオマスは、低価格で大量に入手できる再生可能な原料であるため低コストでのバイオエタノール生産の原料として期待される。これらバイオマスの成分はセルロースとヘミセルロースとリグニンである。これらバイオマスから酵素を用いて糖を得るためには、糖変換を行うときの阻害因子であるリグニンを除去するための前処理が不可欠である。そのため現状では、酵素を用いる変換方法でなく濃硫酸または希硫酸を用いたセルロース・ヘミセルロース分解糖化法が多く用いられている。しかし、硫酸法は、セルロース、ヘミセルロースの過分解が発生するため回収できる糖量が減少する。また,分解後にエタノール発酵を行うための硫酸除去処理すなわち硫酸の回収と糖液の中和工程を必要とし、水酸化カルシウムを用いた中和により石膏が副産物として生成し、その処理コストも掛かってしまう。また,回収した硫酸を再使用するための熱エネルギーを大量消費する濃縮工程が必要である。さらに硫酸法で処理された糖化液から完全に硫黄成分を除去できずに硫黄成分を含んだエタノールを製造してしまうことになる危険性もある。また、硫酸を用いるため機械の腐食などにより耐久性が短くなってしまう。(特許文献1)
以下、本発明を実施例により詳しく説明するが、本発明はこれらに限定されるものではない。
グルコース40(g/L)、キシロース(16g/L)を含む混合培地及びグルコース70(g/L)、キシロース35(g/L)を含む混合培地におけるP. stipitis とS. cerviseae の同時混合発酵法によるバイオエタノール生産を行った。図1にグルコース40(g/L)、キシロース(16g/L)を含む混合培地を用いた時の経時変化を示した。混合発酵では、発酵速度は、S.cereviseae単独発酵と同じであるが、エタノール生産量は、混合発酵のほうが多くなった。これは、S.cereviseaeによるグルコースからのバイオエタノール生産の後にP. stipitisによるキシロースからのバイオエタノール生産が行われたことによる。また、P. stipitis単独での発酵では、発酵速度が混合発酵よりも遅く、発酵時間も長くなった。従って、グルコース40(g/L)、キシロース(16g/L)の糖濃度では、混合発酵を用いたほうが発酵速度とバイオエタノール収率を高くすることができるため低コスト生産に有利である。次に、図2にグルコース70(g/L)、キシロース35(g/L)を含む混合培地を用いた時の経時変化を示した。発酵速度は、混合発酵とS.cereviseae単独発酵で同じであったが、最終バイオエタノール生産量は、どちらも同じであった。この時の濃度はP. stipitis単独による発酵の時で同じであった。すなわち、混合発酵では、P. stipitisによるキシロースからのバイオエタノール生産が行われなかったことに起因するものである。以上のことより、P. stipitisはアルコール濃度3%で発酵阻害を起こすことが推察された。
グルコース、キシロース混合培地でのS.cereviseae発酵液にP.stipitisを植菌した時のエタノール生産に及ぼすエタノール濃度の影響を検討した。発酵液中に産生エタノールが含有された発酵液では、P.stipitisは、3.6%(w/v)のエタノール濃度では、エタノール収率が理論値の18%と発酵が阻害された。合成培地での試験より阻害率が高いことより、エタノール以外の発酵代謝産物による相乗効果が推察された。一方、S.cereviseae発酵液からエタノールを除去したのち、P. stipitis SS39-1で発酵を行わせたところ、発酵阻害を受けることなくエタノールを生産することができた(図3)。この結果より、2種類の酵母を用いてグルコース、キシロースの混合した培地から高濃度のバイオエタノールを生産するには、はじめにS.cereviseaeを用いてグルコースから高濃度のバイオエタノール生産を行わせ、得られた発酵液からエタノールを取り除き、引き続き、P. stipitisを用いてキシロースからバイオエタノールを生産されることにより効率よくバイオエタノールを得ることができると推察された。
培地は、前培養用培地(酵母エキス 1%, ポリペプトン 2%、グルコース2%、キシロース 2%)、キシロース発酵用培地(酵母エキス 1%, ポリペプトン 2%、キシロース 2〜15%、グルコース2〜15%)を用いた。発酵は以下の方法で行った。すなわち、前培養で得られたS. cerviseaeを、無菌的に集菌・洗浄し、100mlの発酵用培地の入った500mlガス洗浄ビンで28℃,80rpmで発酵を行った。この時に同時に二酸化炭素ガスを0.04vvmで下部より供給した。グルコース濃度が検出されなくなった時点で、1段階目の発酵が終了した時点で、500ml三角フラスコに移し替え、前培養で得られたP. stipitisを植菌し28℃,80rpmの振盪発酵を行った。比較試験として、ガスを供給せずにエタノールを除去しない試験も行った。
Claims (5)
- リグノセルロース系バイオマスから発酵によってエタノールを製造する方法において、バイオマスを加水分解して得られる糖化液を酵母または細菌を使用して発酵させるエタノール製造方法
- 糖化液を酵母または細菌を使用して6炭糖からの発酵を行わせながら、同時に不活性ガスを供給しながらエタノールを除去する1次発酵工程を特徴とするエタノール製造方法
- 前記供給ガスが窒素ガスや二酸化炭素などの不活性ガスであることを特徴とする請求項1記載のエタノール製造方法
- 前記不活性ガスの供給量は、0.01vvm〜0.5vvmの範囲である請求項1記載のエタノール製造方法
- 1次発酵後の発酵液に、発酵液からの菌体分離を行うことなく5炭糖発酵微生物を使用して、5炭糖からの2次発酵を行わせることを特徴とするエタノール製造方法
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