JP2008524189A - 新規ベンズアミド化合物 - Google Patents

Abstract

本発明は式（Ｉ）［式中、Ｒはエチル又はイソプロピル］の新規ベンズアミド化合物又はその製薬学的に許容しうる塩もしくはプロドラッグに関する。本発明はまた、そのような化合物の製造法、それらを含有する医薬組成物、及びヒストンデアセチラーゼ（ＨＤＡＣ）の阻害に感受性のある腫瘍又はその他の増殖状態の予防又は治療において抗増殖薬として使用するための医薬の製造におけるそれらの使用にも関する。

Description

発明の詳細な説明

本発明はある種の新規ベンズアミド化合物、又はその製薬学的に許容しうる塩もしくはプロドラッグ形に関する。該化合物は酵素ヒストンデアセチラーゼ（ＨＤＡＣ）の強力な阻害薬であり、従ってヒトなどの温血動物におけるＨＤＡＣ活性が関与するいくつかの疾患状態の治療に有益である。そのような疾患状態の例は、がん（Ｍａｒｋｓら，Ｎａｔｕｒｅ Ｒｅｖｉｅｗｓ，１，１９４−２０２，（２００１））、嚢胞性線維症（Ｌｉ，Ｓ．ら，Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．，２７４，７８０３−７８１５，（１９９９））、ハンチントン舞踏病（Ｓｔｅｆｆａｎ，Ｊ．Ｓ．ら，Ｎａｔｕｒｅ，４１３，７３９−７４３，（２００１））及び鎌状赤血球貧血（Ｇａｂｂｉａｎｅｌｌｉ，Ｍ．ら，Ｂｌｏｏｄ，９５，３５５５−３５６１，（２０００））などであるので、本発明のベンズアミド化合物はこれらの特定疾患状態のいずれかの治療法に有用である。本発明はまた、これらの新規ベンズアミド化合物の製造法、それらを含有する医薬組成物、及び治療法におけるそれらの使用、例えばヒトなどの温血動物においてＨＤＡＣを阻害する医薬品の製造におけるそれらの使用にも関する。

真核細胞ではＤＮＡは通常コンパクトに折り畳まれて転写因子の接近を防止している。細胞が活性化されると、このコンパクト化ＤＮＡはＤＮＡ結合タンパク質に利用されるようになるので遺伝子転写が誘導される（Ｂｅａｔｏ，Ｍ．，Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．，７４，７１１−７２４（１９９６）；Ｗｏｌｆｆｅ，Ａ．Ｐ．，Ｎａｔｕｒｅ，３８７，１６−１７（１９９７））。核のＤＮＡはヒストンとして知られる核タンパク質と会合し、クロマチンと呼ばれる複合体を形成している。Ｈ２Ａ、Ｈ２Ｂ、Ｈ３及びＨ４という名称のコアヒストンは、１４６塩基対のＤＮＡを巻き付けてクロマチンの基本単位（ヌクレオソームとして知られる）を形成している。コアヒストンのＮ末端テールは、転写後アセチル化の部位となるリジン残基を含有している。リジン側鎖上の末端アミノ基のアセチル化は、側鎖の正電荷形成電位を中和するので、クロマチン構造に影響を及ぼすと考えられる。

ヒストンデアセチラーゼ（ＨＤＡＣ）は亜鉛含有酵素で、ヌクレオソームヒストンのアミノ末端付近でクラスター化しているリジン残基のε−アミノ末端からのアセチル基除去を触媒する。ＨＤＡＣは二つのクラスに分類できる。酵母Ｒｐｄ３様タンパク質によって表される第一のクラス（ＨＤＡＣ１、２、３及び８）と、酵母Ｈｄａ１様タンパク質によって表される第二のクラス（ＨＤＡＣ４、５、６、７、９及び１０）である。可逆的なアセチル化プロセスは転写調節及び細胞周期進行に重要であることが知られている。さらに、ＨＤＡＣの異常はいくつかのがんに関連し、トリコスタチンＡ（ストレプトマイセス・ハイグロスコピカス(Streptomyces hygroscopicus)から単離された天然産物）のようなＨＤＡＣ阻害薬は著しい細胞成長阻害と抗腫瘍効果を示すことが示されている（Ｍｅｉｎｋｅ，Ｐ．Ｔ．，Ｃｕｒｒｅｎｔ Ｍｅｄｉｃｉｎａｌ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，８，２１１−２３５（２００１））。Ｙｏｓｈｉｄａら（Ｅｘｐｅｒ．Ｃｅｌｌ Ｒｅｓ．，１７７，１２２−１３１（１９８８））は、トリコスタチンＡは、ラットの線維芽細胞を細胞周期のＧ１及びＧ２期で停止させるので、ＨＤＡＣの細胞周期調節における役割が示唆されると教示している。さらに、トリコスタチンＡは、マウスにおいて最終分化を誘導し、細胞成長を阻害し、腫瘍の形成を防止することが示されている（Ｆｉｎｎｉｎら，Ｎａｔｕｒｅ，４０１，１８８−１９３（１９９９））。

公開国際特許出願番号ＷＯ０３／０８７０５７及びＷＯ０３／０９２６８６から、ある種のベンズアミド誘導体はＨＤＡＣの阻害薬であることが分かっている。ＷＯ０３／０８７０５７に開示されている一つの特定化合物は、Ｎ−（２−アミノフェニル）−４−［５−（ピペリジン−１−イルメチル）−１，３−チアゾール−２−イル］ベンズアミドで、その構造を以下に示す。

我々は今回、驚くべきことに、１，３−チアゾール−２−イル部分の５位にある種の置換アミノメチル置換基を含むある種のベンズアミド誘導体はＨＤＡＣの強力な阻害薬であることを見出した。我々はまた、これらの誘導体はさらにいくつかのその他の好ましい薬学的性質を有することも見出した。例えば、細胞及びインビボにおける有益な効力、及び／又は有益なＤＭＰＫ性（例えば好ましいバイオアベイラビリティ像及び／又は好ましい遊離血漿中濃度及び／又は好ましい半減期及び／又は好ましい分布容積）、並びにｈＥＲＧアッセイにおける中〜低活性などである。

本発明に従って、式（Ｉ）：

［式中、Ｒはエチル又はイソプロピルである］の化合物；
又はその製薬学的に許容しうる塩もしくはプロドラッグ形を提供する。

好ましくはＲはエチルである。

本発明の特別の化合物は、
Ｎ−（２−アミノフェニル）−４−｛５−［（エチルアミノ）メチル］−１，３−チアゾール−２−イル｝ベンズアミド；及び
Ｎ−（２−アミノフェニル）−４−｛５−［（イソプロピルアミノ）メチル］−１，３−チアゾール−２−イル｝ベンズアミドである。

式Ｉのある種の化合物は非溶媒和形だけでなく、例えば水和形のような溶媒和形でも存在しうることは理解されるであろう。本発明は、抗増殖活性を有するすべてのそのような溶媒和形も包含することは理解されるであろう。

また、式Ｉのある種の化合物は多形性を示すこともあり、本発明は抗増殖活性を有するすべてのそのような形態も包含することは理解されるであろう。

式Ｉの化合物の製薬学的に許容しうる適切な塩は、例えば式Ｉの化合物の酸付加塩、例えば、塩酸、臭化水素酸、硫酸、トリフルオロ酢酸、クエン酸又はマレイン酸のような無機又は有機酸との酸付加塩；又は、例えば、十分に酸性である式Ｉの化合物の塩、例えばカルシウムもしくはマグネシウム塩のようなアルカリもしくはアルカリ土類金属塩、又はアンモニウム塩、又はメチルアミン、ジメチルアミン、トリメチルアミン、ピペリジン、モルホリンもしくはトリス−（２−ヒドロキシエチル）アミンのような有機塩基との塩である。式Ｉの化合物の製薬学的に許容しうる更なる適切な塩は、例えば、式Ｉの化合物の投与後にヒト又は動物体内で形成される塩である。

本発明の化合物はプロドラッグの形態で投与してもよい。プロドラッグとは、ヒト又は動物体内で分解して本発明の化合物を放出する化合物のことである。プロドラッグは、本発明の化合物の物理的性質及び／又は薬物動態学的性質を変更するために使用できる。プロドラッグは、本発明の化合物が、改質基を結合できる適切な基又は置換基を含有している場合に形成できる。プロドラッグの例は、インビボで切断可能なアミド誘導体などで、これは式Ｉの化合物中のアミノ基のところで形成できる。

従って、本発明は、有機合成によって利用できる場合及びプロドラッグ自体の切断によってヒト又は動物体内で利用できる場合の前記定義の式Ｉの化合物も含む。従って、本発明は、有機合成手段によって製造される式Ｉの化合物、そしてまた前駆体化合物の代謝によってヒト又は動物体内で製造されるそのような化合物を含む。すなわち、式Ｉの化合物は合成的に製造された化合物でも代謝的に製造された化合物でもよい。

式Ｉの化合物の適切な製薬学的に許容しうるプロドラッグは、望まざる薬理活性や過度の毒性なくヒト又は動物体内への投与に適切であるという合理的な医学的判断に基づいたものである。

様々なプロドラッグの形態は、例えば下記文献に記載されている。
ａ）Ｍｅｔｈｏｄｓ ｉｎ Ｅｎｚｙｍｏｌｏｇｙ，Ｖｏｌ．４２，ｐ．３０９−３９６，Ｋ．Ｗｉｄｄｅｒら編（Ａｃａｄｅｍｉｃ Ｐｒｅｓｓ，１９８５）；
ｂ）Ｄｅｓｉｇｎ ｏｆ Ｐｒｏ−ｄｒｕｇｓ，Ｈ．Ｂｕｎｄｇａａｒｄ編（Ｅｌｓｅｖｉｅｒ，１９８５）；
ｃ）Ａ Ｔｅｘｔｂｏｏｋ ｏｆ Ｄｒｕｇ Ｄｅｓｉｇｎ ａｎｄ Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ，Ｋｒｏｇｓｇａａｒｄ−Ｌａｒｓｅｎ及びＨ．Ｂｕｎｄｇａａｒｄ編，第５章“Ｄｅｓｉｇｎ ａｎｄ Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎ ｏｆ Ｐｒｏ−ｄｒｕｇｓ”，Ｈ．Ｂｕｎｄｇａａｒｄ ｐ．１１３−１９１（１９９１）；
ｄ）Ｈ．Ｂｕｎｄｇａａｒｄ，Ａｄｖａｎｃｅｄ Ｄｒｕｇ Ｄｅｌｉｖｅｒｙ Ｒｅｖｉｅｗｓ，８，１−３８（１９９２）；
ｅ）Ｈ．Ｂｕｎｄｇａａｒｄら，Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，７７，２８５（１９８８）；
ｆ）Ｎ．Ｋａｋｅｙａら，Ｃｈｅｍ．Ｐｈａｒｍ．Ｂｕｌｌ．，３２，６９２（１９８４）；
ｇ）Ｔ．Ｈｉｇｕｃｈｉ及びＶ．Ｓｔｅｌｌａ，“Ｐｒｏ−Ｄｒｕｇｓ ａｓ Ｎｏｖｅｌ Ｄｅｌｉｖｅｒｙ Ｓｙｓｔｅｍｓ”，Ａ．Ｃ．Ｓ．Ｓｙｍｐｏｓｉｕｍ Ｓｅｒｉｅｓ，Ｖｏｌｕｍｅ １４；及び
ｈ）Ｅ．Ｒｏｃｈｅ（編集者），“Ｂｉｏｒｅｖｅｒｓｉｂｌｅ Ｃａｒｒｉｅｒｓ ｉｎ Ｄｒｕｇ Ｄｅｓｉｇｎ”，Ｐｅｒｇａｍｏｎ Ｐｒｅｓｓ，１９８７。

式Ｉの化合物の適切な製薬学的に許容しうるプロドラッグは、例えば、インビボで切断可能なそのアミド誘導体である。アミノ基から形成される適切な製薬学的に許容しうるアミドは、例えば、アセチル、ベンゾイル、フェニルアセチル並びに置換ベンゾイル及びフェニルアセチル基のような（１−１０Ｃ）アルカノイル基とで形成されるアミドなどである。フェニルアセチル及びベンゾイル基上の環置換基の例は、アミノメチル、Ｎ−アルキルアミノメチル、Ｎ，Ｎ−ジアルキルアミノメチル、モルホリノメチル、ピペラジン−１−イルメチル及び４−（１−４Ｃ）アルキルピペラジン−１−イルメチルなどである。

式Ｉの化合物のインビボ効果は、一部は、式Ｉの化合物の投与後ヒト又は動物体内で形成される一つ以上の代謝産物によって発揮されうる。前述のように、式Ｉの化合物のインビボ効果は、前駆体化合物（プロドラッグ）の代謝によっても発揮されうる。

本発明の別の側面において、式（Ｉ）の化合物又はその製薬学的に許容しうる塩もしくはプロドラッグ形の製造法を提供する（式中、Ｒは別途記載のない限り前述の定義の通りである）。前記方法は、
（ａ）適切な塩基の存在下における式（II）：

［式中、Ｘは反応基である］の化合物と、式（III）：

［式中、Ｍは金属、Ｌはリガンド、ｎは０〜３である］の有機金属化合物との反応のステップ；
（ｂ）適切な塩基の存在下における式（IV）：

［式中、Ｌ^１及びＬ^２はリガンドである］の化合物と、式（Ｖ）：

［式中、Ｘは反応基である］の化合物との反応のステップ；又は
（ｃ）４−（４，６−ジメトキシ−１，３，５−トリアジニル−２−イル）−４−メチルモルホリニウムクロリドと適切な塩基の存在下における式（VI）：

の化合物と、式（VII）：

の化合物との反応のステップ；又は
（ｄ）適切な塩基の存在下における式（VIII）：

［式中、Ｘは反応基である］の化合物と、式（IX）：
Ｒ−ＮＨ_２ （IX）
の化合物との反応のステップ；又は
（ｅ）適切な還元剤と酸の存在下における式（Ｘ）：

の化合物と、式（IX）：
Ｒ−ＮＨ_２ （IX）
の化合物との反応のステップ
及びその後必要であれば何らかの保護基を除去するステップを含む。

プロセス（ａ）、（ｂ）、（ｃ）又は（ｄ）のための適切な塩基は、例えば、有機アミン塩基、例えばピリジン、２，６−ルチジン、コリジン、４−ジメチルアミノピリジン、トリエチルアミン、モルホリン、Ｎ−メチルモルホリン又はジアザビシクロ［５．４．０］ウンデカ−７−エン、又は例えば、アルカリ又はアルカリ土類金属の炭酸塩又は水酸化物、例えば炭酸ナトリウム、炭酸カリウム、炭酸カルシウム、水酸化ナトリウム又は水酸化カリウム、又は例えば、アルカリ金属の水素化物、例えば水素化ナトリウム、又はアルカリ土類金属の重炭酸塩、例えば重炭酸ナトリウム、又はアルカリ土類金属の炭酸水素塩、例えば炭酸水素ナトリウム、又は金属アルコキシド、例えばナトリウムエトキシドである。

適切な反応基Ｘは、例えば、ハロ、アルコキシ、アリールオキシ又はスルホニルオキシ基、例えばクロロ、ブロモ、メトキシ、フェノキシ、メタンスルホニルオキシ、トリフルオロメタンスルホニルオキシ又はトルエン−４−スルホニルオキシ基である。反応は、適切な不活性溶媒又は希釈剤、例えば、アルカノール又はエステル、例えばメタノール、エタノール、イソプロパノール又は酢酸エチル、ハロゲン化溶媒、例えば塩化メチレン、クロロホルム又は四塩化炭素、エーテル、例えばテトラヒドロフラン、１，２−ジメトキシエタン又は１，４−ジオキサン、芳香族溶媒、例えばトルエン、又は双極性非プロトン性溶媒、例えばＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド、Ｎ，Ｎ−ジメチルアセトアミド、Ｎ−メチルピロリジン−２−オン又はジメチルスルホキシドの存在下で都合よく実施される。反応は、例えば１０〜２５０℃の範囲、好ましくは４０〜８０℃の範囲の温度で都合よく実施される。

金属Ｍは、接触クロスカップリング反応を受ける有機金属化合物を形成する、文献で公知の任意の金属でよい。適切な金属の例は、ホウ素、スズ、亜鉛、マグネシウムなどである。

整数ｎの値は金属Ｍによって異なる。

リガンドＬの適切な値は、存在する場合、例えば、ヒドロキシ、ハロ、（１−４Ｃ）アルコキシ又は（１−６Ｃ）アルキルリガンド、例えばヒドロキシ、ブロモ、クロロ、フルオロ、ヨード、メトキシ、エトキシ、プロポキシ、イソプロポキシ、ブトキシ、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル又はブチルリガンドなどである。

ホウ素原子上に存在するリガンドＬ^１及びＬ^２の適切な値は、例えば、ヒドロキシ、（１−４Ｃ）アルコキシ又は（１−６Ｃ）アルキルリガンド、例えばヒドロキシ、メトキシ、エトキシ、プロポキシ、イソプロポキシ、ブトキシ、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル又はブチルリガンドなどである。あるいは、リガンドＬ^１及びＬ^２は、それらが結合しているホウ素原子と一緒になって環を形成するように連結することもできる。例えば、Ｌ^１及びＬ^２は、それらが結合しているホウ素原子と一緒になって環状ボロン酸エステル基を形成するように、一緒になってオキシ−（２−４Ｃ）アルキレン−オキシ基、例えばオキシエチレンオキシ又はオキシトリメチレンオキシ基を定義することができる。

上記プロセス（ａ）又は（ｂ）のための適切な触媒は、例えば金属触媒、例えばパラジウム（０）、パラジウム（II）、ニッケル（０）又はニッケル（II）触媒、例えばテトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（０）、塩化パラジウム（II）、臭化パラジウム（II）、ビス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（II）クロリド、テトラキス（トリフェニルホスフィン）ニッケル（０）、塩化ニッケル（II）、臭化ニッケル（II）、ビス（トリフェニルホスフィン）ニッケル（II）クロリド又はジクロロ［１，１’−ビス（ジフェニルホスフィノ）フェロセン］パラジウム（II）などである。さらに、フリーラジカル開始剤、例えばアゾ（ビスイソブチロニトリル）のようなアゾ化合物を便宜上加えることもできる。

プロセス（ｅ）のための適切な還元剤は、例えば無機水素化ホウ素塩、例えば水素化ホウ素ナトリウム、トリアセトキシ水素化ホウ素ナトリウム又はシアノ水素化ホウ素ナトリウムなどである。

プロセス（ｅ）のための適切な酸は、ブレンステッド酸、例えばギ酸、酢酸、トリフルオロ酢酸、塩酸、硫酸、パラトルエンスルホン酸又はカンファースルホン酸；あるいは式ＭＸ_ｚのルイス酸（式中、Ｍは金属、Ｘは本明細書中で定義の反応基、そしてｚの値は１〜６で金属Ｍによる）などである。適切なルイス酸の典型例は、三フッ化ホウ素、トリフルオロメタンスルホン酸スカンジウム（III）、塩化スズ（VI）、チタン（IV）イソプロポキシド又は塩化亜鉛（II）などである。

適切には、中間体化合物（VII）：

は、
（ｉ）式（XII）：

の化合物を適切なチオネート化剤と反応させて、式（XIII）：

の化合物を製造するステップと、
（ii）式（IX）：
Ｒ−ＮＨ_２ （IX）
の化合物を上記ステップ（ｉ）で製造した式（XIII）の化合物とカップリングさせ、その後必要であれば何らかの保護基を除去するステップとを含むプロセス（プロセス（ｆ））によって製造される。

式（XIII）の化合物は、当該技術分野で公知の任意の適切な手段によって式（IX）の化合物にカップリングさせられる。例えば、式（XIII）の化合物を塩基の存在下でメタンスルホニルクロリドと反応させ、次いで得られた生成物を式（IX）の化合物とさらに反応させる；又は式（XIII）の化合物をデス・マーチン・ペルヨージナンのような酸化剤と反応させて、式（XIV）：

の化合物を製造し、次いで前記化合物を適切な還元剤と酸の存在下で式（IX）の化合物と反応させ、式（VII）の化合物を製造する。

適切には、式（VIII）：

［式中、Ｘは本明細書中で前に定義した脱離基］の中間体化合物は、
（ｉ）式（XII）：

の化合物を適切なチオネート化剤と反応させて、式（XIII）：

の化合物を製造するステップと、
（ii）上記ステップ（ｉ）で製造した式（XIII）の化合物を、式（VI）：

の化合物と、４−（４，６−ジメトキシ−１，３，５−トリアジニル−２−イル）−４−メチルモルホリニウムクロリドの存在下で反応させ、その後（任意の適切な順で）、
（ａ）１，３−チアゾール−２−イル部分の５位に結合しているヒドロキシメチル置換基のヒドロキシル基を本明細書中で前に定義した脱離基Ｘに変換し；そして
（ｂ）何らかの保護基を除去する
ステップとを含むプロセス（プロセス（ｇ））によって製造される。

１，３−チアゾール−２−イル部分の５位に結合しているヒドロキシメチル置換基のヒドロキシル基を脱離基Ｘに変換するには当該技術分野で公知の任意の適切な方法が使用できる。そのような方法は当業者には分かるであろう。

適切には、式（Ｘ）：

の中間体化合物は、
（ｉ）式（XII）：

の化合物を適切なチオネート化剤と反応させて、式（XIII）：

の化合物を製造するステップと、
（ii）上記ステップ（ｉ）で製造した式（XIII）の化合物を、式（VI）：

の化合物と、４−（４，６−ジメトキシ−１，３，５−トリアジニル−２−イル）−４−メチルモルホリニウムクロリドの存在下で反応させ、その後（任意の適切な順で）、
（ａ）１，３−チアゾール−２−イル部分の５位に結合しているヒドロキシメチル置換基のヒドロキシ基をカルバルデヒド基に酸化し；そして
（ｂ）何らかの保護基を除去する
ステップとを含むプロセス（プロセス（ｈ））によって製造される。

１，３−チアゾール−２−イル部分の５位に結合しているヒドロキシメチル置換基のヒドロキシ基をカルバルデヒド基に酸化するには当該技術分野で公知の任意の適切な方法が使用できる。そのような方法は当業者には分かるであろう。

上記（ｆ）、（ｇ）及び（ｈ）のいずれかのプロセスで使用するための適切なチオネート化剤は、例えばリン及び硫黄の有機化合物、例えば三硫化リン、五硫化リン又は２，４−ビス（４−メトキシフェニル）−１，３−ジチア−２，４−ジホスフェタン−２，４−ジスルフィド（ローソン試薬(Lawesson's reagent)）などである。

ここで述べた反応の中には、化合物中の何らかの感受性基を保護するのが必要又は望ましい場合もあることは理解されるであろう。保護が必要又は望ましいケース及び保護のための適切な方法は当業者には公知である。標準的実践に従って従来の保護基が使用できる（解説についてはＴ．Ｗ．Ｇｒｅｅｎ ＆ Ｐ．Ｇ．Ｍ．Ｗｕｔｓ，Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ Ｇｒｏｕｐｓ ｉｎ Ｏｒｇａｎｉｃ Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ，第３版，Ｊｏｈｎ Ｗｉｌｅｙ ａｎｄ Ｓｏｎｓ，１９９９参照）。従って、反応物がアミノ、カルボキシ又はヒドロキシのような基を含む場合、本明細書中に記載の一部の反応においては該基の保護が望ましいこともある。

アミノ又はアルキルアミノ基のための適切な保護基は、例えば、アシル基、例えばアセチルのようなアルカノイル基、アルコキシカルボニル基、例えばメトキシカルボニル、エトキシカルボニル又はｔ−ブトキシカルボニル基、アリールメトキシカルボニル基、例えばベンジルオキシカルボニル、又はアロイル基、例えばベンゾイルである。上記保護基の脱保護条件は、保護基の選択によって必然的に変わってくる。従って、例えば、アルカノイルのようなアシル基又はアルコキシカルボニル基又はアロイル基は、例えば、アルカリ金属の水酸化物、例えば水酸化リチウム又はナトリウムのような適切な塩基による加水分解によって除去できる。あるいは、ｔ−ブトキシカルボニル基のようなアシル基は、例えば、塩酸、硫酸もしくはリン酸又はトリフルオロ酢酸のような適切な酸による処理によって除去でき、ベンジルオキシカルボニル基のようなアリールメトキシカルボニル基は、例えば、パラジウム担持炭素のような触媒上での水素化、又はルイス酸、例えばトリス（トリフルオロ酢酸）ホウ素による処理によって除去できる。第一級アミノ基の適切な代替保護基は、例えばフタロイル基で、これはアルキルアミン、例えばジメチルアミノプロピルアミン、又はヒドラジンによる処理によって除去できる。

ヒドロキシ基のための適切な保護基は、例えば、アシル基、例えばアセチルのようなアルカノイル基、アロイル基、例えばベンゾイル、又はアリールメチル基、例えばベンジルである。上記保護基の脱保護条件は、保護基の選択によって必然的に変わってくる。従って、例えば、アルカノイルのようなアシル基又はアロイル基は、例えば、アルカリ金属の水酸化物、例えば水酸化リチウム又はナトリウムのような適切な塩基による加水分解によって除去できる。あるいは、ベンジル基のようなアリールメチル基は、例えば、パラジウム担持炭素のような触媒上での水素化によって除去できる。

カルボキシ基のための適切な保護基は、例えばエステル化基、例えばメチル又はエチル基（例えば、水酸化ナトリウムのような塩基による加水分解によって除去できる）、又は例えばｔ−ブチル基（例えば、酸、例えばトリフルオロ酢酸のような有機酸による処理によって除去できる）、又は例えばベンジル基（例えば、パラジウム担持炭素のような触媒上での水素化によって除去できる）である。

保護基は、合成中の任意の都合のよい段階で化学の分野で周知の従来技術を用いて除去できる。

生物学的アッセイ
以下のアッセイを用いれば、本発明の化合物の、ＨＤＡＣ阻害薬としての効果、Ｈｉ５昆虫細胞に製造した組換えヒトＨＤＡＣ１のインビトロ阻害薬としての効果、そして全細胞（ホールセル(whole cell)）及び腫瘍におけるヒストンＨ３アセチル化のインビトロ＆インビボインデューサーとしての効果が測定できる。また、そのような化合物がヒトの腫瘍細胞の増殖を阻害する能力についても評価する。

（ａ）組換えＨＤＡＣ１のインビトロ酵素アッセイ
ＨＤＡＣ阻害薬を、Ｈｉ５昆虫細胞に製造した組換えヒトＨＤＡＣ１に対してスクリーニングした。酵素は、遺伝子のＣ末端にＦＬＡＧタグを付けてクローニングし、ＳＩＧＭＡの抗ＦＬＡＧ Ｍ２アガロース（Ａ２２２０）を用いてアフィニティー精製した。

デアセチラーゼアッセイは、５０μｌの反応で実施した。１５μｌの反応緩衝液（２５ｍＭのトリスＨＣｌ（ｐＨ８）、１３７ｍＭのＮａＣｌ、２．７ｍＭのＫＣｌ、１ｍＭのＭｇＣｌ_２）中に希釈したＨＤＡＣ１（酵素７５ｎｇ）を、緩衝液のみ（１０μｌ）又は化合物含有緩衝液（１０μｌ）のいずれかと周囲温度で３０分間混合した。次に、２５μｌの緩衝液中に希釈した２５μＭのアセチル化ヒストンＨ４ペプチド（ＫＩ １７４ Ｂｉｏｍｏｌ）を反応に加え、周囲温度で１時間インキュベートした。反応は、２μＭのトリコスタチンＡを含有するＦｌｕｏｒ ｄｅ Ｌｙｓ顕色剤（Ｂｉｏｍｏｌ）を等量（５０μｌ）加えて停止させた。反応を周囲温度で３０分間展色し、次いで蛍光を励起波長３６０ｎｍ及び発光波長４６５ｎｍで測定した。ＨＤＡＣ酵素阻害薬のＩＣ_５０値を、各化合物について用量反応曲線を実施し、最大信号（希釈剤対照）の５０％減少を生じる阻害薬の濃度を決定することによって求めた。

（ｂ）全細胞（ホールセル）における増殖阻害のインビトロアッセイ
全細胞（ホールセル）における増殖の阻害は、Ｐｒｏｍｅｇａ細胞タイター９６水性増殖アッセイ（Ｐｒｏｍｅｇａ ＃Ｇ５４２１）を用いて検定した。ＨＣＴ１１６細胞を９６ウェルプレートに１×１０^３細胞／ウェルで播種し、一晩接着させた。それらを阻害薬で７２時間処理した。２０μｌのテトラゾリウム色素ＭＴＳを各ウェルに加え、プレートを３時間再インキュベートした。次に、吸光度を９６ウェルプレートリーダーで４９０ｎｍで測定した。ＨＤＡＣ阻害薬のＩＣ_５０値を、各化合物について用量反応曲線を実施し、最大信号（希釈剤対照）の５０％減少を生じる阻害薬の濃度を決定することによって求めた。

（ｃ）全細胞（ホールセル）におけるヒストンデアセチラーゼ活性のインビトロ酵素アッセイ
全細胞（ホールセル）におけるヒストンＨ３アセチル化を免疫組織化学及びＣｅｌｌｏｍｉｃｓアレイスキャンを用いる分析を用いて測定した。Ａ５４９又はＨＣＴ１１６細胞を９６ウェルプレートに１×１０^４細胞／ウェルで播種し、一晩接着させた。それらを阻害薬で２４時間処理し、次いでトリス緩衝化生理食塩水（ＴＢＳ）中１．８％ホルムアルデヒド中に１時間固定した。細胞を氷冷メタノールで５分間透過化し、ＴＢＳ中で濯ぎ、次いでＴＢＳ３％低脂肪ドライミルク中で９０分間ブロックした。次に細胞を、ＴＢＳ３％ミルク５００に対して１の割合で希釈したアセチル化ヒストンＨ３に特異的なポリクローナル抗体（Ｕｐｓｔａｔｅ ＃０６−５９９）と１時間インキュベートした。細胞をＴＢＳ中で３回濯ぎ、次いでフルオレセイン結合二次抗体（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｐｒｏｂｅｓ ＃Ａ１１００８）＆Ｈｏｅｃｈｓｔ ３３３５４２（１μｇ／ｍｌ）（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｐｒｏｂｅｓ ＃Ｈ３５７０）と、ＴＢＳ＋１％ウシ血清アルブミン（Ｓｉｇｍａ ＃Ｂ６９１７）中で１時間インキュベートした。非結合抗体をＴＢＳで３回濯いで除去し、１００μｌのＴＢＳでの最終濯ぎ後、細胞に加え、プレートをシールしてＣｅｌｌｏｍｉｃｓアレイスキャンを用いて分析した。

ＨＤＡＣ阻害薬のＥＣ_５０値を、各化合物について用量反応曲線を実施し、最大信号（リファレンス化合物対照−トリコスタチンＡ（Ｓｉｇｍａ））の５０％を生じる阻害薬の濃度を決定することによって求めた。

（ｄ）腫瘍及び正常組織におけるヒストンデアセチラーゼ活性のインビボアッセイ
ＨＤＡＣ阻害薬をインビボにおける血中濃度及び効能についてスクリーニングした。

雄のＨａｎｓ Ｗｉｓｔａｒラットに２５ｍｇ／ｋｇのＨＤＡＣ阻害薬を、０．５％ｗ／ｖのＭｅｔｈｏｃｅｌ＋０．１％ｗ／ｖのＰｏｌｙ（ＨＰＭＣ／Ｔｗｅｅｎ）の製剤にして経口胃管投与した。投与の６、１２及び２０時間後、ラットを殺して脾臓を取り出した。脾臓は液体窒素中で急速凍結し、分析まで−８０℃で保管した。

切除組織（−８０℃で保管）を手でばらし、グラスホモジナイザを用いて緩衝液（２５ｍＭのヘペス（ｐＨ７．６）、１２０ｍＭのＮａＣｌ、５ｍＭのβ−グリセロホスフェート、１ｍＭのＭｇＣｌ、０．２ｍＭのＥＤＴＡ、１ｍＭのＥＧＴＡ）中でホモジナイズした。細胞をさらに超音波処理によって分断し、３００ｕ／ｍｌのベンゾナーゼ（Ｓｉｇｍａ ＃Ｅ１０１４）を用いてＤＮＡを消化した。細胞ライセートをＰｉｅｒｃｅ ＢＣＡ Ｐｒｏｔｅｉｎキット（＃２３２２７）を用いてタンパク質濃度について検定し、５μｇのタンパク質サンプルをＳＤＳ ＰＡＧＥゲルを用いて分離した。次にタンパク質をニトロセルロース膜上に移した。膜をＵｐｓｔａｔｅ ０６−５９９抗アセチルＨ３ヒストン抗体（１／４０００）でプローブし、二次的にＤＡＫＯ ｐ０４４８抗ウサギＨＲＰ結合抗体（１／２０００）によってプローブした。信号は、Ｐｉｅｒｃｅ ３４０７５ Ｓｕｐｅｒ Ｓｉｇｎａｌ Ｗｅｓｔ Ｄｕｒａ化学発光によって検出し、Ｓｙｎｇｅｎｅ Ｃｈｅｍｉｇｅｎｉｕｓシステムで定量化した。結果は比較化合物、Ｎ−（２−アミノフェニル）−４−［５−（ピペリジン−１−イルメチル）−１，３−チアゾール−２−イル］ベンズアミド（国際特許公開番号ＷＯ０３／０８７０５７に開示）（これに１００％の値を割り当てる）に対して標準化する。

（ｅ）ｈＥＲＧでコードされたカリウムチャネルの阻害アッセイ
本アッセイで、試験化合物が、ヒトｅｔｈｅｒ−ａ−ｇｏ−ｇｏ−ｒｅｌａｔｅｄ−ｇｅｎｅ（ｈＥＲＧ）でコードされたカリウムチャネルを流れるテール電流を阻害する能力を測定する。

ｈＥＲＧでコードされたチャネルを発現しているヒト胎児腎（ＨＥＫ）細胞を、１０％ウシ胎仔血清（Ｌａｂｔｅｃｈ Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ；製品番号４−１０１−５００）、１０％ Ｍ１無血清サプリメント（Ｅｇｇ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ；製品番号７０９１６）及び０．４ｍｇ／ｍｌのＧｅｎｅｔｉｃｉｎ Ｇ４１８（Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ；カタログ番号Ｇ７０３４）を補給した最小必須培地イーグル（ＥＭＥＭ；Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈカタログ番号Ｍ２２７９）中で成長させた。各実験の１，２日前に標準的組織培養法を用い、Ａｃｃｕｔａｓｅ（ＴＣＳ Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌｓ）を使って細胞を組織培養フラスコから剥離した。次いで１２ウェルプレートのウェル中に置かれたガラス製カバースリップ上に該細胞を置き、２ｍｌの成長培地で覆った。

記録される各細胞について、細胞を含有するガラス製カバースリップを室温（〜２０℃）で浴液(bath solution)（下記参照）を入れたＰｅｒｓｐｅｘチャンバの底に置いた。このチャンバを倒立位相差顕微鏡のステージに固定した。カバースリップをチャンバに置いた直後、浴液を重力供給式タンク(gravity-fed reservoir)からチャンバに２分間、〜２ｍｌ／分の速度で潅流した。この後潅流を停止した。

Ｐ−９７マイクロピペット・プラー(micropipette puller)（Ｓｕｔｔｅｒ Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔ Ｃｏ．）を用いてホウケイ酸ガラス管（ＧＣ１２０Ｆ，Ｈａｒｖａｒｄ Ａｐｐａｒａｔｕｓ）から作製したパッチピペットにピペット溶液（下記参照）を満たした。該ピペットをパッチクランプ増幅器（Ａｘｏｐａｔｃｈ ２００Ｂ，Ａｘｏｎ Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ）のヘッドステージに銀／塩化銀ワイヤを介して接続した。ヘッドステージの接地はアース電極に接続した。これは、０．８５％の塩化ナトリウムを補充した３％の寒天中に包埋された銀／塩化銀ワイヤから成るものであった。

細胞はパッチクランプ技術の全細胞（ホールセル）方式で記録された。保持電位−８０ｍＶ（増幅器でセット）で行われた“ブレイク・イン(break-in)”と直列抵抗及び電気容量制御の適当な調整の後、電気生理学的ソフトウェア（Ｃｌａｍｐｅｘ，Ａｘｏｎ Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ）を用いて保持電位（−８０ｍＶ）の設定と電圧プロトコルの供給を行った。このプロトコルは１５秒ごとに適用され、＋４０ｍＶへの１秒間のステップとそれに続く−５０ｍＶへの１秒間のステップで構成されていた。インポーズされた各電圧プロトコルに対する電流応答は、増幅器により１ｋＨｚでローパスフィルタリングされた。次にフィルタリングされた信号を、増幅器からのこのアナログ信号をアナログ・デジタル・コンバータでデジタル化することによりオンラインで獲得した。次にこのデジタル信号をＣｌａｍｐｅｘソフトウェア（Ａｘｏｎ Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ）を実行中のコンピュータに取り込んだ。保持電位と＋４０ｍＶへのステップ中、電流は１ｋＨｚでサンプリングされた。その後残りの電圧プロトコル用にサンプリングレートを５ｋＨｚにセットした。

浴液及びピペット溶液の組成、ｐＨ及び浸透圧モル濃度を以下の表に示す。

ｈＥＲＧでコードされたカリウムチャネルのテール電流の、＋４０ｍＶから−５０ｍＶへのステップ後の振幅をオンラインでＣｌａｍｐｅｘソフトウェア（Ａｘｏｎ Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ）によって記録した。テール電流振幅の安定化後、試験物質用のビヒクルを含有する浴液を細胞に適用した。ビヒクルの適用がテール電流振幅に有意な影響を与えなくなったら、化合物に対する累積濃度効果曲線を構築した。

各濃度の試験化合物の効果は、所定濃度の試験化合物の存在下におけるテール電流振幅を、ビヒクル存在下でのそれのパーセンテージとして表すことによって定量した。

試験化合物の効力（ＩＣ_５０）は、濃度−効果を構成する阻害パーセントの値を標準データ・フィッティング・パッケージを用いて４パラメータのヒルの式に当てはめることによって決定した。最高試験濃度で観察される阻害のレベルが５０％を超えない場合、効力値は発生せず、その濃度の阻害パーセントの値が引用された。

式Ｉの化合物の薬理学的性質は予想通り構造の変化に応じて変動するが、一般的に式Ｉの化合物が保有する活性は、上記試験（ａ）、（ｂ）、（ｃ）及び（ｄ）の一つ以上において下記濃度又は用量で示すことができる。

試験（ａ）：例えば１００ｎＭ以下の範囲のＩＣ_５０；
試験（ｂ）：例えば０．５μＭ以下の範囲のＩＣ_５０；
試験（ｃ）：例えば０．５μＭ以下の範囲のＩＣ_５０；
試験（ｄ）：投与後１２時間の時点で比較化合物、Ｎ−（２−アミノフェニル）−４−［５−（ピペリジン−１−イルメチル）−１，３−チアゾール−２−イル］ベンズアミド（これに１００％の値を割り当てる）の活性の１２０％を超える；
本発明の試験された化合物の場合、有効量で生理学的に許容できない毒性は試験（ｄ）では観察されなかった。従って、本明細書中で上に定義した式（Ｉ）の化合物、又はその製薬学的に許容しうる塩を以下に定義の用量範囲で投与した場合、有害な毒作用は予想されない。

例として、ＨＤＡＣ１の阻害に関する試験（ａ）及び全細胞（ホールセル）での増殖の阻害に関する試験（ｂ）を用いたところ、本明細書中の実施例２に記載の化合物は以下の表Ａに示すＩＣ_５０の結果を示した。

本発明の更なる側面に従って、本明細書中で先に定義した式（Ｉ）の化合物、又はその製薬学的に許容しうる塩もしくはプロドラッグを製薬学的に許容しうる希釈剤又は担体と共に含む医薬組成物を提供する。

該組成物は、例えば錠剤又はカプセルとして経口投与用、無菌水溶液、懸濁液又はエマルジョンとして非経口注射用（静脈内、皮下、筋肉内、血管内又は注入を含む）、軟膏又はクリームとして局所投与用、又は坐剤として直腸投与用に適切な形態であり得る。

一般に、上記組成物は従来の賦形剤を用い、従来様式で製造できる。

式（Ｉ）の化合物は通常、温血動物に５〜５０００ｍｇ／ｍ^２動物の体表面積の範囲内の単位用量で投与される。すなわちおよそ０．１〜１００ｍｇ／ｋｇで、これが一般的に治療的有効量を提供する。錠剤又はカプセルのような単位剤形は、通常例えば１〜２５０ｍｇの活性成分を含有する。好ましくは１〜５０ｍｇ／ｋｇの日用量を使用する。しかしながら、日用量は、治療される宿主、特定の投与経路、及び治療される疾患の重症度によって必然的に変動する。従って、最適用量は任意の特定患者を治療する医師によって決定されうる。

我々は、本発明で定義した化合物、又はその製薬学的に許容しうる塩は、有効な細胞周期阻害薬（抗細胞増殖薬）であることを見出した。この性質はそれらのＨＤＡＣ阻害活性に由来すると考えられる。我々はまた、本発明の化合物は、血管新生の阻害、アポトーシス及び分化の活性化にも関与できると考えている。従って、本発明の化合物は、ＨＤＡＣ酵素によって単独又は部分媒介される疾患又は医学的状態の治療に有用であることが期待される。すなわち、該化合物は、そのような治療を必要とする温血動物にＨＤＡＣ阻害効果をもたらすために使用できる。そこで、本発明の化合物は、ＨＤＡＣ酵素の阻害によって特徴づけられる、悪性細胞の増殖を治療するための方法を提供する。すなわち、本発明の化合物は、ＨＤＡＣの阻害によって単独又は部分媒介される抗増殖効果を生み出すのに使用できる。

本発明の別の側面に従って、療法によるヒト又は動物体の治療法に使用するための、本明細書中で先に定義した式（Ｉ）の化合物、又はその製薬学的に許容しうる塩もしくはプロドラッグを提供する。

従って、本発明の更なる側面に従って、医薬として使用するための、本明細書中で先に定義した式（Ｉ）の化合物、又はその製薬学的に許容しうる塩もしくはプロドラッグを提供する。

本発明の更なる側面に従って、ヒトのような温血動物にＨＤＡＣ阻害効果をもたらすのに使用するための医薬の製造における、本明細書中で先に定義した式（Ｉ）の化合物、又はその製薬学的に許容しうる塩もしくはプロドラッグの使用を提供する。

本発明のこの側面の更なる特徴に従って、ＨＤＡＣ阻害効果をそのような治療を必要とするヒトのような温血動物にもたらすための方法を提供し、該方法は、前記動物に有効量の本明細書中で先に定義した式（Ｉ）の化合物、又はその製薬学的に許容しうる塩もしくはプロドラッグを投与することを含む。

本発明の更なる側面に従って、ヒトのような温血動物に細胞周期阻害（抗細胞増殖）効果をもたらすのに使用するための医薬の製造における、本明細書中で先に定義した式（Ｉ）の化合物、又はその製薬学的に許容しうる塩もしくはプロドラッグの使用を提供する。

本発明のこの側面の更なる特徴に従って、細胞周期阻害（抗細胞増殖）効果をそのような治療を必要とするヒトのような温血動物にもたらすための方法を提供し、該方法は、前記動物に有効量の本明細書中で先に定義した式（Ｉ）の化合物、又はその製薬学的に許容しうる塩もしくはプロドラッグを投与することを含む。

本発明のこの側面の追加の特徴に従って、ヒトのような温血動物におけるがんを、そのような治療を必要とする動物において治療する方法を提供し、該方法は、前記動物に有効量の本明細書中で先に定義した式（Ｉ）の化合物、又はその製薬学的に許容しうる塩もしくはプロドラッグを投与することを含む。

本発明の更なる特徴に従って、がんの治療に使用するための医薬の製造に、本明細書中で先に定義した式（Ｉ）の化合物、又はその製薬学的に許容しうる塩もしくはプロドラッグを提供する。

本発明のこの側面の追加の特徴に従って、がんの治療に使用するための、本明細書中で先に定義した式（Ｉ）の化合物、又はその製薬学的に許容しうる塩もしくはプロドラッグを提供する。

本発明の更なる側面において、肺がん、結腸直腸がん、乳がん、前立腺がん、リンパ腫及び／又は白血病に使用するための医薬の製造における、本明細書中で先に定義した式（Ｉ）の化合物、又はその製薬学的に許容しうる塩もしくはプロドラッグの使用を提供する。

本発明の更なる側面において、肺がん、結腸直腸がん、乳がん、前立腺がん、リンパ腫又は白血病を、そのような治療を必要とするヒトのような温血動物において治療する方法を提供し、該方法は、前記動物に有効量の本明細書中で先に定義した式（Ｉ）の化合物、又はその製薬学的に許容しうる塩もしくはプロドラッグを投与することを含む。

本発明により治療の可能性のあるがんは、食道がん、骨髄腫、肝細胞、膵及び子宮頸がん、ユーイング腫瘍、神経芽細胞腫、カポジ肉腫、卵巣がん、乳がん、結腸直腸がん、前立腺がん、膀胱がん、黒色腫、肺がん［非小細胞肺がん（ＮＳＣＬＣ）及び小細胞肺がん（ＳＣＬＣ）を含む］、胃がん、頭部及び頚部のがん、脳腫瘍、腎がん、リンパ腫及び白血病などである。

本明細書中で先に定義したＨＤＡＣ阻害活性は、単独療法として適用してもよいし、本発明の化合物のほかに一つ以上のその他の物質及び／又は治療を含んでもよい。そのような併用治療は、治療の個別成分を同時、順次又は別個に投与することによって達成できる。医学的腫瘍学の分野では、それぞれのがん患者を治療するのに、異なる形態の治療を併用使用することは通常の慣行である。医学的腫瘍学において、本明細書中で先に定義した細胞周期阻害治療に加えるそのような併用治療の他の成分は、手術、放射線療法又は化学療法であろう。そのような化学療法は、下記カテゴリーの抗腫瘍薬の一つ以上を含みうる。

（ｉ）医学腫瘍学で使用される抗増殖／抗新生物薬及びそれらの組合せ、例えばアルキル化薬（例えば、シスプラチン、カルボプラチン、シクロホスファミド、ナイトロジェンマスタード、メルファラン、クロラムブシル、ブスルファン及びニトロソウレア）；代謝拮抗薬（例えば、５−フルオロウラシル及びテガフールなどのフルオロピリミジンのような葉酸拮抗薬、ラルチトレキセド、メトトレキサート、シトシンアラビノシド及びヒドロキシウレア）；抗腫瘍性抗生物質（例えば、アントラサイクリン系、例えばアドリアマイシン、ブレオマイシン、ドキソルビシン、ダウノマイシン、エピルビシン、イダルビシン、マイトマイシン−Ｃ、ダクチノマイシン及びミトラマイシン）；抗有糸分裂薬（例えば、ビンカアルカロイド系、例えばビンクリスチン、ビンブラスチン、ビンデシン及びビノレルビン、並びにタキソイド系、例えばタキソール及びタキソテール）；及びトポイソメラーゼ阻害薬（例えば、エトポシド及びテニポシドのようなエピポドフィロトキシン、アムサクリン、トポテカン及びカンプトテシン）；
（ii）細胞増殖抑制薬、例えば抗エストロゲン（例えば、タモキシフェン、トレミフェン、ラロキシフェン、ドロロキシフェン及びヨードキシフェン(iodoxyfene)）、エストロゲン受容体ダウンレギュレーター（例えばフルベストラント）、抗アンドロゲン（例えば、ビカルタミド、フルタミド、ニルタミド及び酢酸シプロテロン）、ＬＨＲＨアンタゴニスト又はＬＨＲＨアゴニスト（例えば、ゴセレリン、リュープロレリン及びブセレリン）、プロゲストゲン（例えば酢酸メゲストロール）、アロマターゼ阻害薬（例えば、アナストロゾール、レトロゾール、ボラゾール(vorazole)及びエクセメスタン）及び５α−レダクターゼの阻害薬、例えばフィナステリド；
（iii）がん細胞浸潤を阻害する薬剤（例えばマリマスタットのようなメタロプロテイナーゼ阻害薬及びウロキナーゼプラスミノゲンアクチベータ受容体機能の阻害薬）；
（iv）増殖因子機能の阻害薬、例えばそのような阻害薬は、増殖因子抗体、増殖因子受容体抗体（例えば、抗ｅｒｂｂ２抗体トラスツズマブ［Ｈｅｒｃｅｐｔｉｎ（登録商標）］及び抗ｅｒｂｂ１抗体セツキシマブ［Ｃ２２５］）、ファルネシルトランスフェラーゼ阻害薬、ＭＥＫ阻害薬、チロシンキナーゼ阻害薬及びセリン／トレオニンキナーゼ阻害薬、例えば上皮増殖因子ファミリーの阻害薬（例えばＥＧＦＲファミリーチロシンキナーゼ阻害薬、例えばＮ−（３−クロロ−４−フルオロフェニル）−７−メトキシ−６−（３−モルホリノプロポキシ）キナゾリン−４−アミン（ゲフィチニブ、ＡＺＤ１８３９）、Ｎ−（３−エチニルフェニル）−６，７−ビス（２−メトキシエトキシ）キナゾリン−４−アミン（エルロチニブ、ＯＳＩ−７７４）及び６−アクリルアミド−Ｎ−（３−クロロ−４−フルオロフェニル）−７−（３−モルホリノプロポキシ）キナゾリン−４−アミン（ＣＩ １０３３））、例えば血小板由来増殖因子ファミリーの阻害薬及び例えば肝細胞増殖因子ファミリーの阻害薬；
（ｖ）血管内皮細胞増殖因子の作用を阻害するような抗血管新生薬、（例えば抗血管内皮細胞増殖因子抗体ベバシズマブ［Ａｖａｓｔｉｎ（登録商標）］、国際特許出願ＷＯ９７／２２５９６、ＷＯ９７／３００３５、ＷＯ９７／３２８５６及びＷＯ９８／１３３５４に開示されているような化合物）及びその他の機序によって作用する化合物（例えばリノミド(linomide)、インテグリンαｖβ３機能の阻害薬及びアンギオスタチン）；
（vi）血管損傷薬、例えばコンブレタスタチンＡ４及び国際特許出願ＷＯ９９／０２１６６、ＷＯ００／４０５２９、ＷＯ ００／４１６６９、ＷＯ０１／９２２２４、ＷＯ０２／０４４３４及びＷＯ０２／０８２１３に開示されている化合物；
（vii）アンチセンス療法、例えば上記標的に向けたもの、例えば抗ｒａｓアンチセンス薬であるＩＳＩＳ ２５０３；
（viii）遺伝子療法アプローチ、例えば異常ｐ５３又は異常ＢＲＣＡ１もしくはＢＲＣＡ２のような異常遺伝子を置換するアプローチ、ＧＤＥＰＴ（遺伝子指向性酵素プロドラッグ療法、gene-directed enzyme pro-drug therapy）アプローチ、例えばシトシンデアミナーゼ、チミジンキナーゼ又は細菌ニトロレダクターゼ酵素を使用するようなもの、及び化学療法又は放射線療法に対する患者の耐容性を増大させるアプローチ、例えば多剤耐性遺伝子療法；
（ix）免疫療法アプローチ、例えば患者の腫瘍細胞の免疫原性を増大させるエクスビボ及びインビボアプローチ、例えばインターロイキン２、インターロイキン４又は顆粒球マクロファージコロニー刺激因子のようなサイトカインのトランスフェクション、Ｔ細胞アネルギーを低減するアプローチ、サイトカインをトランスフェクトされた樹状細胞のようなトランスフェクト免疫細胞を使用するアプローチ、サイトカインをトランスフェクトされた腫瘍細胞株を使用するアプローチ及び抗イディオタイプ抗体を使用するアプローチ；
（ｘ）細胞周期阻害薬、例えばＣＤＫ阻害薬（例えばフラボピリドール）及びその他の細胞周期チェックポイント（例えばチェックポイントキナーゼ）の阻害薬；オーロラキナーゼ及び有糸分裂や細胞質分裂の調節（例えば有糸分裂キネシン）に関与するその他のキナーゼの阻害薬；及びその他のヒストンデアセチラーゼ阻害薬；そして
（xi）分化薬（例えばレチノイン酸及びビタミンＤ）。

本発明のこの側面に従って、本明細書中で先に定義した式（Ｉ）の化合物及び本明細書中で先に定義した追加の抗腫瘍物質を含む、がんの併用治療のための医薬組成物を提供する。

さらに提供されるのは、炎症性疾患、自己免疫疾患及びアレルギー性／アトピー性疾患の治療法に使用するための本明細書中で先に定義した式（Ｉ）の化合物、又はその製薬学的に許容しうる塩もしくはプロドラッグである。

特に、本明細書中で先に定義した式（Ｉ）の化合物、又はその製薬学的に許容しうる塩は、関節の炎症（特に関節リウマチ、骨関節炎及び痛風）、消化管の炎症（特に炎症性腸疾患、潰瘍性大腸炎及び胃炎）、皮膚の炎症（特に乾癬、湿疹、皮膚炎）、多発性硬化症、アテローム性動脈硬化症、脊椎関節症（強直性脊椎炎、乾癬性関節炎、潰瘍性大腸炎に関連する関節炎）、ＡＩＤＳ関連神経障害、全身性エリテマトーデス、喘息、慢性閉塞性肺疾患、気管支炎、胸膜炎、成人呼吸窮迫症候群、敗血症、並びに急性及び慢性肝炎（ウィルス性、細菌性又は毒性）の治療法に使用するために提供される。

さらに提供されるのは、ヒトのような温血動物における炎症性疾患、自己免疫疾患及びアレルギー性／アトピー性疾患の治療において医薬として使用するための本明細書中で先に定義した式（Ｉ）の化合物、又はその製薬学的に許容しうる塩もしくはプロドラッグである。

特に、本明細書中で先に定義した式（Ｉ）の化合物、又はその製薬学的に許容しうる塩は、関節の炎症（特に関節リウマチ、骨関節炎及び痛風）、消化管の炎症（特に炎症性腸疾患、潰瘍性大腸炎及び胃炎）、皮膚の炎症（特に乾癬、湿疹、皮膚炎）、多発性硬化症、アテローム性動脈硬化症、脊椎関節症（強直性脊椎炎、乾癬性関節炎、潰瘍性大腸炎に関連する関節炎）、ＡＩＤＳ関連神経障害、全身性エリテマトーデス、喘息、慢性閉塞性肺疾患、気管支炎、胸膜炎、成人呼吸窮迫症候群、敗血症、並びに急性及び慢性肝炎（ウィルス性、細菌性又は毒性）の治療における医薬として使用するために提供される。

さらに提供されるのは、ヒトのような温血動物における炎症性疾患、自己免疫疾患及びアレルギー性／アトピー性疾患の治療に使用する医薬の製造における本明細書中で先に定義した式（Ｉ）の化合物、又はその製薬学的に許容しうる塩もしくはプロドラッグの使用である。

前述のように、特定の細胞増殖疾患の治療的又は予防的処置に必要な用量の大きさは、処置される宿主、投与経路及び処置される疾患の重症度に応じて必然的に変わってくる。例えば、１〜１００ｍｇ／ｋｇ、好ましくは１〜５０ｍｇ／ｋｇの範囲の単位用量を想定している。

式（Ｉ）の化合物及びそれらの製薬学的に許容しうる塩は、治療薬としての使用のほかに、新規治療薬の探求の一部として、ネコ、イヌ、ウサギ、サル、ラット及びマウスのような実験動物における細胞周期活性の阻害薬の効果を評価するためのインビトロ及びインビボ試験系の開発及び標準化における薬理学的ツールとしても有用である。

本発明を以下の実施例で例示するが、実施例においては一般的に、
（ｉ）操作は、別途記載のない限り、周囲温度すなわち１７〜２５℃の範囲及びアルゴンのような不活性ガスの雰囲気下で実施した；
（ii）蒸発は真空下での回転蒸発によって実施し、後処理操作はろ過による残留固体の除去後に実施した；
（iii）カラムクロマトグラフィー（フラッシュ法）及び中圧液体クロマトグラフィー（ＭＰＬＣ）は、ドイツ・ダルムシュタットのＥ．Ｍｅｒｃｋから入手したＭｅｒｃｋ Ｋｉｅｓｅｌｇｅｌシリカ（Ａｒｔ．９３８５）又はＭｅｒｃｋ Ｌｉｃｈｒｏｐｒｅｐ ＲＰ−１８（Ａｒｔ．９３０３）逆相シリカ上で実施し、高圧液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）はＣ１８逆相シリカ、例えばＤｙｎａｍａｘ Ｃ−１８ ６０Åの分取逆相カラム上で実施した；
（iv）収率（ある場合）は必ずしも達成可能な最大値ではない；
（ｖ）一般的に式（Ｉ）の最終生成物の構造は核磁気共鳴（ＮＭＲ）及び／又は質量スペクトル技術によって確認した；高速原子衝撃（ＦＡＢ）質量スペクトルデータはＰｌａｔｆｏｒｍスペクトロメータを用いて得、必要に応じて陽イオンデータ又は陰イオンデータのいずれかを収集した；ＮＭＲ化学シフト値はデルタスケールで測定した［プロトン磁気共鳴スペクトルは、４００ＭＨｚの磁場強度で操作するＪｅｏｌ ＪＮＭ ＥＸ ４００スペクトロメータ、３００ＭＨｚの磁場強度で操作するＶａｒｉａｎ Ｇｅｍｉｎｉ ２０００スペクトロメータ又は３００ＭＨｚの磁場強度で操作するＢｒｕｋｅｒ ＡＭ３００スペクトロメータを用いて測定した；
（vi）中間体は一般に十分特性分析したわけではなく、純度は薄層クロマトグラフィー、ＨＰＬＣ、赤外線（ＩＲ）及び／又はＮＭＲ分析によって評価した；
（vii）融点は未補正であり、Ｍｅｔｔｌｅｒ ＳＰ６２自動融点装置又は油浴装置を用いて測定した；式（Ｉ）の最終生成物の融点は、エタノール、メタノール、アセトン、エーテル又はヘキサンのような通常の有機溶媒（単独又は混合物）からの結晶化後に測定した；
（viii）以下の略語を使用した；
ＤＭＦ Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド
ＤＣＭ ジクロロメタン
ＤＭＳＯ ジメチルスルホキシド
ＴＨＦ テトラヒドロフラン
ＤＭＴＭＭ ４−（４，６−ジメトキシ−１，３，５−トリアジニル−２−イル）−４−メチルモルホリニウムクロリド（Ｋｕｎｉｓｈｉｍａ，Ｍ．，Ｋａｗａｃｈｉ，Ｃ．，Ｍｏｒｉｔａ，Ｊ．，Ｔｅｒａｏ，Ｋ．，Ｉｗａｓａｋｉ，Ｆ．，Ｔａｎｉ，Ｓ．，Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ，１９９９，５５，１３１５９−１３１７０参照）。

実施例１
Ｎ−（２−アミノフェニル）−４−｛５−［（イソプロピルアミノ）メチル］−１，３−チアゾール−２−イル｝ベンズアミドの製造

ｔｅｒｔ−ブチル［２−（｛４−［５−（ヒドロキシメチル）−１，３−チアゾール−２−イル］ベンゾイル｝アミノ）フェニル］カルバメート（以下の方法１に記載のようにして製造；２．５０ｇ、５．８８ｍｍｏｌ）をクロロホルム（１１０ｍｌ）中に触媒量のピリジン（３滴）と共に懸濁させた。クロロホルム（２０ｍｌ）中の塩化チオニル（７３０μｌ、１０．００ｍｍｏｌ）を滴下添加し、得られた溶液を周囲温度で撹拌した。２時間後、クロロホルム（１０ｍｌ）中の２−メチル−２−プロパノール（２．５０ｇ、２９．４ｍｍｏｌ）を加え、溶液を周囲温度で１時間撹拌した。混合物を減圧下で蒸発させ真空下で乾燥させた。得られた固体をＤＭＦ（３０ｍｌ）中に溶解し、イソプロピルアミン（１５ｍｌ、１７６．４ｍｍｏｌ）を加えた。該溶液を４０℃に２時間加熱した。冷却した溶液を減圧下で蒸発させ、残渣を水及び飽和重炭酸ナトリウム水溶液で希釈した。得られた沈殿物をろ過し、水洗し、真空下で乾燥させた。固体をＤＣＭ（３０ｍｌ）中に懸濁させ、トリフルオロ酢酸（１５ｍｌ）を加え、周囲温度で５時間撹拌した後、ＳＣＸ−２カラムに吸収させた。該カラムをメタノールで洗浄し（２カラム分の容量）、次いで生成物をメタノール中２Ｍアンモニア溶液で溶離した（２カラム分の容量）。減圧下でのアンモニア／メタノール溶液の濃縮により粗生成物を得た。これを逆相ＨＰＬＣで、酸調節剤入りの水中２０〜２５％メタノールで溶離して精製し、標記化合物を得た（１．０６ｇ、４９％）；ＮＭＲスペクトル: (DMSO-d₆) 1.03 (d, 6H), 2.26 (br s, 1H), 2.79 (m, 1H), 3.97 (s, 2H), 4.92 (br s, 2H), 6.61 (m, 1H), 6.80 (d, 1H), 6.99 (m, 1H), 7.19 (d, 1H), 7.80 (s, 1H), 8.03 (d, 2H), 8.09 (d, 2H), 9.74 (s, 1H);質量スペクトル: M+H⁺ 367。

実施例２
Ｎ−（２−アミノフェニル）−４−｛５−［（エチルアミノ）メチル］−１，３−チアゾール−２−イル｝ベンズアミドの製造

１．塩素化ルート
ｔｅｒｔ−ブチル［２−（｛４−［５−（ヒドロキシメチル）−１，３−チアゾール−２−イル］ベンゾイル｝アミノ）フェニル］カルバメート（以下の方法１に記載のようにして製造；１．９３ｇ、４．５４ｍｍｏｌ）をクロロホルム（１００ｍｌ）中に触媒量のピリジン（３滴）と共に懸濁させた。クロロホルム（５ｍｌ）中の塩化チオニル（５６３μｌ、７．７２ｍｍｏｌ）を滴下添加し、得られた溶液を周囲温度で撹拌した。２時間後、クロロホルム（５ｍｌ）中の２−メチル−２−プロパノール（１．９１ｇ、２２．７ｍｍｏｌ）を加え、溶液を周囲温度で１時間撹拌した。混合物を減圧下で蒸発させ真空下で乾燥させた。得られた固体をＤＭＦ（３０ｍｌ）中に溶解し、ＴＨＦ中２Ｍエチルアミン溶液（７０ｍｌ、１３６．２ｍｍｏｌ）を加え、溶液を５０℃に２時間加熱した。冷却した溶液を減圧下で蒸発させ、残渣をＤＣＭ／メタノール（３０ｍｌ）中に溶解し、ＳＣＸ−２カラムに吸収させた。これをメタノールで洗浄し（２カラム分の容量）、生成物をメタノール中２Ｍアンモニア溶液で溶離した（２カラム分の容量）。アンモニア／メタノール溶液を蒸発乾固し、残渣をＤＣＭ（３０ｍｌ）中に再溶解した。次いでトリフルオロ酢酸（１５ｍｌ）を加え、周囲温度で２時間撹拌した後、ＳＣＸ−２カラムに吸収させた。次に該カラムをメタノールで洗浄し（２カラム分の容量）、メタノール中２Ｍアンモニア溶液で溶離し（２カラム分の容量）、アンモニア／メタノール溶液を減圧下で濃縮した。残渣をフラッシュカラムクロマトグラフィーによりＤＣＭ中５〜１０％メタノールで溶離して精製し、標記化合物を得た（１．１２ｇ、７０％）；ＮＭＲスペクトル: (DMSO-d₆) 1.05 (t, 3H), 2.39 (br s, 1H), 2.59 (q, 2H), 3.96 (d, 2H), 4.92 (br s, 2H), 6.61 (m, 1H), 6.80 (d, 1H), 6.99 (m, 1H), 7.19 (d, 1H), 7.79 (s, 1H), 8.03 (d, 2H), 8.09 (d, 2H), 9.74 (s, 1H); 質量スペクトル: M+H⁺ 353。
２．メシル化ルート
１，４−ジオキサン中４Ｍ塩化水素溶液（４５ｍｌ、１８０ｍｍｏｌ）を、氷浴で冷却したｔｅｒｔ−ブチル｛２−［（４−｛５−［（エチルアミノ）メチル］−１，３−チアゾール−２−イル｝ベンゾイル）アミノ］フェニル｝カルバメート（以下の方法７に記載のようにして製造；３．９ｇ、８．６２ｍｍｏｌ）のメタノール（２０ｍｌ）中懸濁液に加えた。反応混合物を３０℃未満で５時間撹拌後、蒸発させた。得られた固体残渣を水（２５０ｍｌ）に溶解し、酢酸エチルで洗浄後、１Ｍ水酸化ナトリウム水溶液を１滴ずつ添加してｐＨ９に塩基性化した。得られた沈殿物を吸引ろ過によって回収し、真空オーブン中で１６時間乾燥させて標記化合物を得た（２．６０ｇ、８６％）；ＮＭＲスペクトル: (DMSO-d₆) 1.10 (t, 3H), 2.72 (q, 2H), 4.12 (s, 2H), 4.92 (br s, 2H), 6.62 (m, 1H), 6.80 (d, 1H), 6.99 (m, 1H), 7.19 (d, 1H), 7.88 (s, 1H), 8.04 (d, 2H), 811 (d, 2H), 9.76 (s, 1H); 質量スペクトル: M+H⁺ 353。

方法１
ｔｅｒｔ−ブチル［２−（｛４−［５−（ヒドロキシメチル）−１，３−チアゾール−２−イル］ベンゾイル｝アミノ）フェニル］カルバメートの製造

２−クロロ−４，６−ジメトキシ−１，３，５−トリアジン（４．０８ｇ、２３．２４ｍｍｏｌ）を窒素雰囲気下でＤＭＦ（７０ｍｌ）中に懸濁させ、５℃に冷却した。次に４−メチルモルホリン（２．５６ｍｌ、２３．２４ｍｍｏｌ）を滴下添加し、溶液を５℃で１０分間撹拌してＤＭＴＭＭ（４−（４，６−ジメトキシ−１，３，５−トリアジニル−２−イル）−４−メチルモルホリニウムクロリド−Ｋｕｎｉｓｈｉｍａ，Ｍ．，Ｋａｗａｃｈｉ，Ｃ．，Ｍｏｒｉｔａ，Ｊ．，Ｔｅｒａｏ，Ｋ．，Ｉｗａｓａｋｉ，Ｆ．，Ｔａｎｉ，Ｓ．，Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ，１９９９，５５，１３１５９−１３１７０参照）の懸濁液を得た。この懸濁液に４−［５−（ヒドロキシメチル）−１，３−チアゾール−２−イル］安息香酸（ＡＺ１２３７９７０１）（方法２に記載のようにして製造、４．５５ｇ、１９．３７ｍｍｏｌ）及び１−（Ｎ−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）−２−アミノベンゼン（Ｓｅｔｏ，Ｃ，Ｔ．；Ｍａｔｈｉａｓ，Ｊ．Ｐ．；Ｗｈｉｔｅｓｉｄｅｓ，Ｇ．Ｍ．；Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．，１９９３，１１５，１３２１−１３２９に記載の文献法に従って製造；４．８４ｇ、２３．２４ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（７０ｍｌ）中溶液を加え、該溶液を周囲温度で１８時間撹拌した。ＤＭＴＭＭの更なるバッチを上記のように２−クロロ−４，６−ジメトキシ−１，３，５−トリアジン（４．０８ｇ、２３．２４ｍｍｏｌ）、ＤＭＦ（７０ｍｌ）及び４−メチルモルホリン（２．５６ｍｌ、２３．２４ｍｍｏｌ）から製造し、これを反応混合物に加えて周囲温度でさらに２時間撹拌した。反応混合物を減圧下で蒸発させ、残渣をＤＣＭ（２００ｍｌ）と水（２００ｍｌ）の間で分配させた。ＤＣＭ層を重炭酸ナトリウム飽和水溶液、２Ｍ塩酸水溶液及び食塩水で洗浄し、硫酸マグネシウム上で乾燥させ、ろ過し減圧下で蒸発させた。得られた油状残渣をＤＣＭ（１００ｍｌ）で粉砕し、固体をろ過して標記化合物を得た（４．８６ｇ、５９％）；ＮＭＲスペクトル: (DMSO-D₆) 1.46 (S, 9H), 4.75 (D, 2H), 5.66 (T, 1H), 7.19 (M, 2H), 7.57 (M, 2H), 7.82 (S, 1H), 8.08 (S, 4H), 8.67 (BR S, 1H), 9.92 (BR S, 1H); 質量スペクトル: M+H⁺ 426。

方法２
４−［５−（ヒドロキシメチル）−１，３−チアゾール−２−イル］安息香酸（ＡＺ１２３７９７０１）の製造

メチル４−｛５−［（ベンジルオキシ）メチル］−１，３−チアゾール−２−イル｝ベンゾエート（以下の方法３に記載のようにして製造；２２．１５ｇ、６５．３４ｍｍｏｌ）を水（２００ｍｌ）中に懸濁させ、水中３７％塩酸溶液（２００ｍｌ）を加えた。反応混合物を９０℃に１８時間加熱した。溶液を周囲温度に冷却し、沈殿物をろ過により回収した。ろ液を１０Ｍ水酸化ナトリウム水溶液でｐＨ４に中和し、沈殿物を回収した。次に、合わせた沈殿物を水洗し、真空下で乾燥させて標記化合物を得た（１５．９９ｇ、定量的）。これを次のステップに回した；質量スペクトル: M+H⁺ 236。

方法３
メチル４−｛５−［（ベンジルオキシ）メチル］−１，３−チアゾール−２−イル｝ベンゾエートの製造

メチル４−（｛［３−（ベンジルオキシ）−２−オキソプロピル］アミノ｝カルボニル）ベンゾエート（以下の方法４に記載のようにして製造；１２ｇ、３５．１９ｍｍｏｌ）及びローソン試薬（１４．２３ｇ、３５．２ｍｍｏｌ）を１，４−ジオキサン（２４０ｍｌ）中に懸濁させ、１００℃に３０分間加熱した。次に反応混合物を減圧下で濃縮し、フラッシュカラムクロマトグラフィーによりイソヘキサン中１０％酢酸エチルで溶離して精製し、標記化合物を得た（７．０４ｇ、５９％）；ＮＭＲスペクトル: (DMSO-d₆) 3.89 (s, 3H), 4.59 (s, 2H), 4.83 (s, 2H), 7.32 (m, 1H), 7.37 (m, 4H), 7.95 (s, 1H), 8.08 (m, 4H); 質量スペクトル: M+H⁺ 340。

方法４
メチル４−（｛［３−（ベンジルオキシ）−２−オキソプロピル］アミノ｝カルボニル）ベンゾエートの製造

メチル４−（｛［３−（ベンジルオキシ）−２−ヒドロキシプロピル］アミノ｝カルボニル）ベンゾエート（以下の方法５に記載のようにして製造；２５ｇ、７２．８８ｍｍｏｌ）をＤＣＭ（２００ｍｌ）中に溶解し、デス・マーチン・ペルヨージナン（３７ｇ、８７．５ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（３００ｍｌ）中溶液を２０分間かけて加えた。反応混合物を周囲温度で１８時間放置撹拌した。次に該溶液をＤＣＭ（５００ｍｌ）で希釈し、１Ｍ水酸化ナトリウム水溶液（×３）、水及び食塩水で洗浄し、硫酸マグネシウム上で乾燥させ、ろ過及び減圧下で蒸発させて標記化合物を得た（２１．６７ｇ、８７％）；ＮＭＲスペクトル: (DMSO-d₆) 3.90 (s, 3H), 4.21 (d, 2H), 4.32 (s, 2H), 4.57 (s, 2H), 7.32 (m, 1H), 7.38 (m, 4H), 7.99 (d, 2H), 8.07 (d, 2H), 8.95 (t, 1H); 質量スペクトル: M+H⁺ 342。

方法５
メチル４−（｛［３−（ベンジルオキシ）−２−ヒドロキシプロピル］アミノ｝カルボニル）ベンゾエートの製造

１−（ベンジルオキシ）−３−｛［（１Ｅ）−フェニルメチレン］アミノ｝プロパン−２−オール（以下の方法６に記載のようにして製造；２５ｇ、９２．８２ｍｍｏｌ）をクロロホルム（７５ｍｌ）中に溶解し、ピリジン（７．５７ｍｌ、９２．８ｍｍｏｌ）を加えた。溶液を窒素雰囲気下で−４０℃に冷却し、ＤＣＭ（７５ｍｌ）中メチル４−クロロカルボニルベンゾエート（１８．４３ｇ、９２．８ｍｍｏｌ）を３０分かけて１滴ずつ加えた。該溶液を−４０℃でさらに３０分間撹拌し、次いで周囲温度で１８時間撹拌した。ＤＣＭを減圧下で蒸発させ、水中３７％塩酸溶液（９３ｍｌ）を加えた後、１０分間撹拌した。混合物を水（２２５ｍｌ）及びイソヘキサン（２２５ｍｌ）で希釈し、蓋をして冷蔵庫に入れた。３時間後、沈殿物をろ過し、水洗して飽和炭酸ナトリウム水溶液に加えた。懸濁液を１０分間超音波処理した後、ろ過し、水、次いでイソヘキサンで洗浄し、乾燥させて標記化合物を得た（２８．３０ｇ、８９％）；ＮＭＲスペクトル: (DMSO-d₆) 3.25 (m, 1H), 3.43 (m, 3H), 3.87 (br m, 4H), 4.51 (s, 2H), 5.00 (br s, 1H), 7.29 (m, 1H), 7.34 (m, 4H), 7.96 (d, 2H), 8.03 (d, 2H), 8.57 (t, 1H); 質量スペクトル: M+H⁺ 344。

方法６
１−（ベンジルオキシ）−３−｛［（１Ｅ）−フェニルメチレン］アミノ｝プロパン−２−オールの製造

ベンズアルデヒド（４４．８ｇ、４２２ｍｍｏｌ）と２８％水酸化アンモニウム溶液（４２．２ｍｌ）をエタノール（１５０ｍｌ）中、周囲温度で１０分間撹拌した。エタノール（７０ｍｌ）中のベンジルグリシジルエーテル（６９．３ｇ、４２２ｍｍｏｌ）を１時間かけて添加し、溶液を周囲温度で１８時間、次いで還流温度で３０分間撹拌した。冷却した溶液を減圧下で蒸発させ、残渣を氷／水（４５ｍｌ）に加え、氷浴中で２時間冷却した。得られた固体をろ過し、真空下で乾燥させ、次いでイソヘキサンから再結晶化して標記化合物を得た（６９．８０ｇ、６１％）；ＮＭＲスペクトル: (DMSO-d₆) 3.49 (br m, 3H), 3.74 (m, 1H), 3.93 (m, 1H), 4.53 (s, 2H), 4.81 (d, 1H), 7.29 (m, 1H), 7.35 (m, 4H), 7.45 (m, 3H), 7.73 (m, 2H), 8.31 (s, 1H)。

方法７
ｔｅｒｔ−ブチル｛２−［（４−｛５−［（エチルアミノ）メチル］−１，３−チアゾール−２−イル｝ベンゾイル）アミノ］フェニル｝カルバメートの製造

ｔｅｒｔ−ブチル［２−（｛４−［５−（ヒドロキシメチル）−１，３−チアゾール−２−イル］ベンゾイル｝アミノ）フェニル］カルバメート（以下の方法８に記載のようにして製造；７．６ｇ、１７．８６ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（２００ｍｌ）中懸濁液にメタンスルホニルクロリド（３．０ｍｌ、３８．８ｍｍｏｌ）を加えた。次にトリエチルアミン（５．３ｍｌ、３９．１ｍｍｏｌ）を、内部温度を３０℃未満に維持するために１０分間かけて滴下添加した。得られた溶液を周囲温度で３０分間撹拌した後、１０℃に冷却し、テトラヒドロフラン中２．０Ｍエチルアミン溶液（９０ｍｌ、１８０ｍｍｏｌ）を１滴ずつ加えて処理した。反応混合物を撹拌し、室温に温まらせて２２時間置いた後蒸発乾固させた。残渣をＤＣＭと水の間で分配させ、有機層を分離した。水性層を別のＤＣＭで再抽出し（×２）、合わせた有機抽出物を食塩水で洗浄し、硫酸マグネシウム上で乾燥させ、蒸発乾固して褐色のゴムを得た。これをシリカ上フラッシュクロマトグラフィーにより上昇勾配濃度のＤＣＭ中０〜１０％メタノールで溶離して精製し、標記化合物を得た（４．０ｇ、４９％）；ＮＭＲスペクトル: (DMSO-d₆) 1.05 (t, 3H), 1.46 (s, 9H), 2.39 (br m, 1H), 2.59 (q, 2H), 3.96 (s, 2H), 7.19 (m, 2H), 7.56 (m, 2H), 7.80 (s, 1H), 8.07 (s, 4H), 8.67 ( s, 1H), 9.91 (s, 1H); 質量スペクトル: M+H⁺453。

方法８
ｔｅｒｔ−ブチル［２−（｛４−［５−（ヒドロキシメチル）−１，３−チアゾール−２−イル］ベンゾイル｝アミノ）フェニル］カルバメートの製造

水素化ホウ素ナトリウム（２．３０ｇ、６０．９ｍｍｏｌ）の水（５０ｍｌ）中溶液を、ｔｅｒｔ−ブチル（２−｛［４−（５−ホルミル−１，３−チアゾール−２−イル）ベンゾイル］アミノ｝フェニル）カルバメート（以下の方法９に記載のようにして製造；７．８５ｇ、１８．５ｍｍｏｌ）のメタノール（５００ｍｌ）中懸濁液（氷浴中で冷却されている、内部温度１０℃）に滴下添加した。次に反応混合物を室温に温まらせ、１８時間撹拌した後、さらに水素化ホウ素ナトリウム（２５０ｍｇ、６．６１ｍｍｏｌ）を加えた。撹拌をさらに３時間続け、次いで反応混合物をろ過し、ろ液を蒸発乾固した。残渣をＤＣＭと飽和重炭酸ナトリウム水溶液の間で分配させた。相の界面に析出した不溶性物質を吸引ろ過によって回収した。ろ液を分離し、有機層を水及び食塩水で洗浄し、硫酸マグネシウム上で乾燥させ、蒸発乾固してベージュ色の固体を得た。得られた二つの固体を合わせ、メタノールに溶解し、再蒸発させて標記化合物を得た（７．６ｇ、９７％）；ＮＭＲスペクトル：(DMSO-d₆) 1.46 (s, 9H), 4.75 (s, 2H), 7.15 (m, 2H), 7.58 (m, 2H), 7.82 (s, 1H), 8.07 (m, 4H);質量スペクトル: MH⁺426。

方法９
ｔｅｒｔ−ブチル（２−｛［４−（５−ホルミル−１，３−チアゾール−２−イル）ベンゾイル］アミノ｝フェニル）カルバメートの製造

オーバーヘッド撹拌機を備えた三つ口１リットル丸底フラスコに、Ｎ−（２−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノフェニル）−４−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）ベンズアミド（国際特許公開番号ＷＯ０３／０８７０５７，方法１３，６０ページに記載のようにして製造；１０．２ｇ、２３．３ｍｍｏｌ）及び１，２−ジメトキシエタン（３００ｍｌ）を加えた。この溶液に２−クロロ−１，３−チアゾール−５−カルバルデヒド（４．５ｇ、３０．５ｍｍｏｌ）の１，２−ジメトキシエタン（１００ｍｌ）中溶液を加えた。次にジクロロジフェニルホスフィノフェロセニルパラジウム（II）（１．２ｇ、１．５ｍｍｏｌ）を加えた後、飽和重炭酸ナトリウム水溶液（２００ｍｌ）を１０分間かけて滴下添加した。反応混合物を１６時間撹拌した後、周囲温度に冷却した。次いで固体沈殿物を吸引ろ過によって回収し、ＭｅＯＨ及び水で洗浄し、真空下で１８時間乾燥させて標記化合物を得た（６．７ｇ、６８％）；ＮＭＲスペクトル: (DMSO-d₆) 1.46 (s, 9H), 7.19 (m, 2H), 7.57 (m, 2H), 8.13 (d, 2H), 8.25 (d, 2H), 8.68 (br s, 1H), 8.84 (s, 1H), 9.97 (br s, 1H), 10.13 (s, 1H); 質量スペクトル: MH⁺-Boc 324。

Claims (3)

1. 式（Ｉ）：
   

   

   ［式中、Ｒはエチル又はイソプロピルである］の化合物；
   又はその製薬学的に許容しうる塩もしくはプロドラッグ形。
2. Ｎ−（２−アミノフェニル）−４−｛５−［（エチルアミノ）メチル］−１，３−チアゾール−２−イル｝ベンズアミド。
3. Ｎ−（２−アミノフェニル）−４−｛５−［（イソプロピルアミノ）メチル］−１，３−チアゾール−２−イル｝ベンズアミド。