JP2008520365A - 透析装置 - Google Patents
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Abstract
【選択図】図1
Description
前記透析膜は、少なくとも100,500,1000,2000,5000,10000,25000,50000,100000,または300000ダルトンの分子量カットオフ値を有してよい。別の態様において、本発明はさらに複数のユニット、たとえばユニットの配列を含む透析システムを提供する。各ユニットは上述の透析装置を含む。各ユニットはさらに透析装置を保持するようになっている固定具を含む固定部を有してもよい。一例をあげれば、前記透析システムは4つの長方形ユニットを包含する。前記システムは、8ウェル、12ウェル、96ウェル、384ウェル、1536ウェル、またはその他のマルチウェル構成に適合するように設計されたホルダーを含むことができる。透析システムは平衡透析および非平衡透析に使用できる。
ホルダーを自動液体ハンドラーとともに使用する場合は、従来型のディープウェル型マイクロタイタプレートの寸法が好ましい。長方形ディープウェルは、透析装置の寸法に合った平底を有し、長方形ディープウェル一体が透析装置を一ユニット保持するように設計される。透析装置の寸法は必要に応じて変更可能である。透析装置の各ユニットは従来の96ウェルプレートの正方形ディープウェル2体分を占めることがあるため、上記プレートは48体の長方形ディープウェルを含むように設計される。各長方形ディープウェルは透析装置の一ユニットを保持するために用いられる。他の一般的な寸法(たとえば、8ウェル、12ウェル、384ウェル、または1536ウェルを含む)のプレートも使用可能であり、透析装置の寸法はそれらのホルダーを保持できるように変更できる。しかしながら、ホルダーは、自動液体処理装置の構成を収容可能な寸法に設計してもよい。図3に、代表的な96ウェル構成における8台1組の透析装置インサートを示す。かかるインサート6組が図5に示すベースホルダー内に収容できる。マルチウェル平衡透析システムは、たとえば図4または図5のホルダーに収めた図1、図2、または図3の透析装置の複数ユニットを含むことができる。マルチウェル平衡透析システムは、スループットの高いスクリーニング、結合分析、生体分子相互作用(たとえばタンパク質間相互作用)を含むが、これに限定されない様々な用途に、複数の試料を同時に調合できる。透析システムは、8ウェル、12ウェル、96ウェル、384ウェル、1536ウェル、およびその他のマルチウェル構成と適合可能である。たとえば、8ウェル構成に適合する透析システムは4台の長方形ウェルを含み、12ウェル構成に適合する透析システムは6台の長方形ウェルを含み、96ウェル構成に適合する透析システムは48台の長方形ウェルを含み、384ウェル構成に適合する透析システムは192台の長方形ウェルを含み、1536ウェル構成に適合する透析システムは768台の長方形ウェルを含むようにする。上記透析装置の長軸は上記ホルダーの長軸、短軸の何れの方向に沿って配列してもよい。上記透析装置のハウジングは当業界で知られている任意の材料で製造できる。代表的な材料として、フッ化炭素、ポリテトラフルオロエチレン(たとえばデュポン社製のテフロン(登録商標))、ポリオレフィン(たとえばポリプロピレン、ポリエチレン、およびそれらの混合体)、ポリスルホン、ポリエーテルスルホン、ポリエーテルエーテルケトン、ポリメタクリル酸メチル、ポリスチレン、ポリスチレン/アクチロニトリルの共重合体、ポリフッ化ビニリデン(PVDF)、ガラス等が含まれる。
代表的な材料にはコルク、プラスチック、ゴム、シリコーン等が含まれる。
1台の透析装置をワルファリンの血漿タンパク結合を測定する平衡透析研究に使用した。
0.154gのワルファリンを5mlのリン酸緩衝塩(PBS)に溶解させ、ワルファリンの0.1モル濃度溶液を調合した。6モル濃度のNaOH400μlによってpHを調節し、最終体積を5.761ml、最終濃度を86.8ミリモルとした。次に、ワルファリン溶液を希釈し、血漿溶液に加える前に1ミリモル濃度とした。1ミリモル濃度のワルファリン2.2μlを2.2mlの血漿に加え、血漿中のワルファリンの最終濃度を1マイクロモルとした。ワルファリンを含有したイヌの血漿1mlを各透析装置の円筒状膜の内側に加え、PBS1mlを膜の外側に加えた。液を満たした透析装置は37℃のインキュベータにセットしてゆっくり振盪させた。100μlの試料を、血漿チャンバーおよび緩衝液チャンバーそれぞれから0.5,1,2,3,および4時間間隔で抜き取った。
血漿試料には100μlのブランク緩衝液を加えた。緩衝液試料には100μlのブランク血漿を加えた。混合後、50μlの血漿試料を抜き取った。血漿試料(50μl)に血漿:緩衝液の比が1:1の溶液450μlを加え、10倍に希釈した。緩衝液試料は希釈しなかった。血漿試料および緩衝液試料各200μlにアセトニトリル200μlを加えた。混合液はそれぞれボルテックス混合した後、13,000rpm、3分間の遠心分離を行った。結果として得られた抽出物をAPI−4000(登録商標)LC/MS/MSシステム(アプライドバイオサイエンス/MDS SCIEX)を用いて分析した。その結果から、1時間以内の平衡曲線の一貫性が示された。実験は2回行った。図6および図7の図表に示すようにタンパク結合比は99%に近かった。試験結果により、30分以内に透析が平衡状態に達したことがわかる。
この明細書において開示したすべての特徴は、任意の組み合わせで組み合わせることができる。この明細書で開示したそれぞれの特徴は、同一、同等、または類似の目的を果たすその他の特徴によって置き換えることができる。そのため、特段の記載がない限り、開示したそれぞれの特徴は等価または類似の一連の特徴の一般的体系の例に過ぎない。
Claims (34)
- チャンバーを画成する管状透析膜であって、該管状透析膜が第1の末端および第2の末端を有し、該第1の末端が前記チャンバーの開口部を画成し、該開口部が第1の方向に面し、前記透析膜が内表面および外表面を有し、該外表面が前記チャンバーから外側を向くとともに前記内表面が前記チャンバー側に向いた管状透析膜と、
前記透析膜の前記外表面の少なくとも中間部分を露出させる一方、前記第1の末端および前記第2の末端を保持するハウジングであって、該ハウジングが第1の開口部および第2の開口部を有する流路を画成し、前記流路の前記第1の開口部も前記第1の方向に向き、前記流路の前記第2の開口部が前記透析膜の前記外表面の前記露出した中間部分に向くとともに前記透析膜を保持する区画と連通しているハウジングとを含むことを特徴とする透析装置。 - 前記透析膜の1つの末端が、1つのポートまで運ばれた流体が前記膜によって形成されたチャンバーに流入するように前記ポートで固定されている、請求項1記載の装置。
- 前記ポートが開放されている、請求項2記載の装置。
- 前記ポートがさらに取り外し可能なプラグを含む請求項2記載の装置。
- 両方の末端が2つのプラグによって固定されている、請求項1記載の装置。
- 前記膜によって形成される前記チャンバーが5,000μl未満の容積を有する、請求項1記載の装置。
- 透析膜を保持するハウジングであって、前記膜がチャンバーおよび該チャンバーの開口部を画成し、
前記ハウジングが第1の開口部および第2の開口部を有する流路を画成し、該流路の前記第2の開口部が前記透析膜の外表面に向いており、
前記流路により溶液が前記第1の開口部と前記透析膜の前記外表面との間を前記第2の開口部を介して流れることができ、前記第2の開口部が前記透析膜を保持するための区画と連通することを特徴とするハウジング。 - 前記透析膜を保持する前記区画が開放されている、請求項7記載のハウジング。
- 前記透析膜を保持する前記区画が閉鎖されている請求項7記載のハウジング。
- 前記ハウジングがフッ化炭素、ポリテトラフルオロエチレン、ポリスルホン、ポリエーテルスルホン、ポリオレフィン、ポリエーテルエーテルケトン、ポリメタクリル酸メチル、ポリスチレン、ポリスチレン/アクリロニトリルの共重合体、ポリフッ化ビニリデン、ガラス、またはそれらの混合体からなる、請求項1記載のハウジング。
- 各端が固定された、透析装置用管状透析膜。
- 前記膜がセルロース、酢酸セルロース、ポリテトラフルオロエチレン、ポリスルホン、ニトロセルロース、ポリカーボネート、ポリフッ化ビニリデン、ポリオレフィン、ポリアミド、またはそれらの混合体からなる、請求項11記載の透析膜。
- 前記膜が少なくとも100ダルトンの分子量カットオフ値を有する請求項2記載の透析膜。
- 複数のユニットを含む透析システムであって、各ユニットが請求項1記載の透析装置を含む透析システム。
- 各ユニットがさらに、前記透析装置を保持するようになっている固定具を含む固定部を有する、請求項14記載の透析システム。
- 前記透析システムが、少なくとも4台の長方形ユニットを含む、請求項15記載の透析システム。
- 透析膜用のハウジングであって、該ハウジングが流体を保有する第1の区画と、
該第1の区画へ流体を送り込むための第1ポートと、
透析膜によって画成される少なくとも1つの外周を有するチャンバーへ流体を送り込む第2ポートとを含むことを特徴とするハウジング。 - 前記透析膜が前記第1の区画内にあり、また前記透析膜が管状であって各末端で固定され、該末端の1つが前記第2ポートで固定される、請求項17記載のハウジング。
- さらに別の末端が固定される第3ポートを含む、請求項18記載のハウジング。
- さらに前記第1の区画と流体連通する第2の区画を含み、前記透析膜が前記第2の区画内に存在する、請求項17記載のハウジング。
- 前記ハウジングが前記ポートの少なくとも1つを包含する上面を有する、請求項17記載のハウジング。
- 前記第1ポートおよび第2ポートが同一平面内にある、請求項17記載のハウジング。
- 前記第1ポートおよび第2ポートが前記上面内にある、請求項21記載のハウジング。
- 各ポートの直径が50mm未満である、請求項17記載のハウジング。
- 透析膜用のハウジングであって、該ハウジングが流体を保有する第1の区画と、
該第1の区画へ流体を送り込む第1ポートと、
非平面状透析膜を含むチャンバーへ流体を送り込む第2ポートを含むことを特徴とするハウジング。 - 請求項1記載の平衡透析装置の1以上のユニットを含むキット。
- (a)請求項17記載のハウジングを複数用意するステップと、
(b)並行して前記第1のポートに第1緩衝液を分配するステップと、
(c)第2ポートに試料を分配するステップとを含むことを特徴とする方法。 - ステップ(b)がステップ(c)の前に実行される、請求項27記載の方法。
- ステップ(b)がステップ(c)の後に実行される、請求項27記載の方法。
- ステップ(b)およびステップ(c)が同時に実行される、請求項27記載の方法。
- 前記第1ポートと前記第2ポートとが異なる列にある、請求項27記載の方法。
- 前記第1ポートと前記第2ポートとが交互の列にある、請求項27記載の方法。
- 液体処理装置を用いて流体を1つまたは複数のポートに送出する、請求項27記載の方法。
- (a)請求項25記載の複数のハウジングを用意するステップと、
(b)並行して前記第1ポートに第1緩衝液を分配するステップと、
(c)第2ポートに試料を分配するステップとを含むことを特徴とする方法。
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