JP2008247779A - Antiallergic food and antiallergic external preparation - Google Patents
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Abstract
Description
本発明は、抗アレルギー作用、特にＩ型及びIV型のアレルギーに対する抗アレルギー作用を有するスベリヒユ抽出物を含有する食品及び外用剤に関する。 The present invention relates to a food and an external preparation containing an extract of purslane which has an antiallergic action, particularly an antiallergic action against type I and type IV allergies.
近年、花粉症、アレルギー性鼻炎、食物アレルギー、接触性皮膚炎、アトピー性皮膚炎、気管支喘息等、何らかのアレルギー症状を示す人が増えており、社会的にも問題になっている。
これらのアレルギーは、GellとCoombsによってＩ型〜IV型の４タイプに分類される。
Ｉ型は、ＩｇＥ抗体によって短時間で反応が現れる即時型アレルギーであり、アナフィラキシー型とも言われ、花粉症、アレルギー性鼻炎、食物アレルギー、アトピー性皮膚炎、気管支喘息等である。
II型は、ＩｇＧ抗体やＩｇＭ抗体によって細胞に障害を引き起こす細胞障害性アレルギーであり、血液型不適合輸血による溶血、インスリン抵抗性糖尿病等である。
In recent years, there are an increasing number of people showing allergic symptoms such as hay fever, allergic rhinitis, food allergy, contact dermatitis, atopic dermatitis, bronchial asthma, and so on, which has become a social problem.
These allergies are classified into four types, type I to type IV, by Gell and Coombs.
Type I is an immediate allergy that reacts in a short time with IgE antibody, and is also called anaphylaxis, and includes hay fever, allergic rhinitis, food allergy, atopic dermatitis, bronchial asthma and the like.
Type II is a cytotoxic allergy that causes damage to cells by IgG antibody or IgM antibody, such as hemolysis due to blood type incompatible blood transfusion, insulin resistant diabetes, and the like.
III型は、抗原抗体反応によってできた免疫複合体が身体組織に障害を引き起こす免疫複合体性アレルギーであり、血清病、糸球体腎炎等である。
IV型は、Ｔ細胞によるため、反応が現れるまでに時間がかかる遅延型アレルギーであり、接触性皮膚炎、ツベルクリン反応、移植拒絶反応等である。
ただし、食物アレルギーやアトピー性皮膚炎等は、Ｉ型だけでなくIV型アレルギーも関与する複合型アレルギーと言われている。近年増加して特に問題となっているのは、Ｉ型アレルギーの花粉症等や、Ｉ型及びIV型の複合型アレルギーの食物アレルギーやアトピー性皮膚炎等である。
Type III is an immune complex allergy in which an immune complex formed by an antigen-antibody reaction causes damage to body tissues, such as serum sickness and glomerulonephritis.
Type IV is a delayed type allergy that takes time for the reaction to appear because it depends on T cells, such as contact dermatitis, tuberculin reaction, transplant rejection, and the like.
However, food allergies, atopic dermatitis, etc. are said to be complex allergies involving not only type I but also type IV allergies. In recent years, there has been a particular problem, such as hay fever of type I allergies, food allergies of type I and type IV allergies, and atopic dermatitis.
このＩ型アレルギーは、抗原が体内に侵入すると、Ｂ細胞によってＩｇＥが産生され、これが肥満細胞（マスト細胞）や好塩基球の細胞膜上に存在する高親和性ＩｇＥ受容体（ＦｃεＲＩ）に結合し、そこに再び抗原が浸入して細胞膜上のＩｇＥを架橋すると、ヒスタミン等の媒介物質が放出され、これが結合することによって発症する。
またIV型アレルギーは、Ｔ細胞が関与するが、Ｔ細胞は抗原と反応すると、リンホカインを産生放出し、反応部にマクロファージ、リンパ球、好中球、好塩基球、好酸球等の細胞を集積させ、それらを活性化する。活性化されたマクロファージは、プロスタグランジン、インターロイキン１、活性酸素等を産生、放出する。また、プロスタグランジンや好塩基球からのヒスタミンは、血管透過性を亢進させ、細胞の遊出や血漿成分の滲出がさらに増強され、インターロイキン１は線維芽細胞や血管内皮細胞を増殖させ、好中球から活性酸素を放出させる。さらに、リンホカインには、血管新生因子があって毛細血管を増やす。このようにして反応部に細胞浸潤、血漿タンパクの滲出、間質組織の増殖、毛細血管増殖といった炎症反応がもたらされ、その部分の組織が障害を受ける
In this type I allergy, when an antigen enters the body, B cells produce IgE, which binds to a high affinity IgE receptor (FcεRI) present on the cell membrane of mast cells (mast cells) or basophils. When the antigen enters again and IgE on the cell membrane is cross-linked, mediators such as histamine are released, and this is caused by binding.
Type IV allergy involves T cells. When T cells react with antigens, they produce and release lymphokines, and cells such as macrophages, lymphocytes, neutrophils, basophils, and eosinophils are present in the reaction area. Accumulate and activate them. Activated macrophages produce and release prostaglandins, interleukin 1, active oxygen and the like. In addition, histamine from prostaglandins and basophils enhances vascular permeability, further enhances cell migration and exudation of plasma components, interleukin 1 proliferates fibroblasts and vascular endothelial cells, Release active oxygen from neutrophils. In addition, lymphokines have angiogenic factors that increase capillaries. In this way, inflammatory reactions such as cell infiltration, plasma protein exudation, interstitial tissue proliferation, and capillary growth occur in the reaction area, and the tissue in that area is damaged.
このようなＩ型アレルギーに対しては、抗ヒスタミン剤や、ヒスタミン以外の媒介物質の遊走抑制作用を有する薬剤が多用され、IV型アレルギーに対しては、炎症反応を惹起するサイトカインの産生を抑制するステロイド剤等が使用されている。
これらの薬剤は、効果が高い反面、副作用が問題である。アレルギー症状を改善するためには長期間を要するので、これらの薬剤ではなく、長期服用においても副作用がなく又は少なく、抗アレルギー作用を有する生薬等の植物抽出物が望まれる。また、長期間を要するため、重篤でない場合には、薬剤による治療ではなく、抗アレルギー作用を有する成分を、食品として摂取したり、医薬部外品等の日常的に使用可能な外用剤として使用したりすることが望まれる。
For such type I allergies, antihistamines and drugs having a migration inhibitory action of mediators other than histamine are frequently used, and for type IV allergies, steroids that suppress the production of cytokines that cause inflammatory reactions Agents are used.
These drugs are highly effective, but have side effects. Since it takes a long period of time to improve allergic symptoms, plant extracts such as herbal medicines that have anti-allergic effects and have no or little side effects even when taken for a long time are desired. In addition, since it takes a long time, if it is not serious, it is not a treatment with drugs, but an ingredient having an antiallergic action is taken as a food, or as an externally available externally used product such as a quasi-drug. It is desirable to use it.
抗アレルギー作用を有する生薬としては、キキョウ、コガネバナ、コブシ、コンフリー、サンシュユ、シソ、シャクヤク、ジャノヒゲ、ドクダミ、ナツメ、ヒナタイノコズチ、ボタン、ローズマリー等が報告されているが、I型やIV型アレルギーに有効であるとの報告はない。
なお、抗炎症作用を有する生薬として、アオツヅラフジ、アケビ、エンジュ、オウバク、オウレン、オトギリソウ、キキョウ、クマザサ、コガネバナ、コンフリー、シャクヤク、ジャノヒゲ、セイヨウノコリギソウ、トチバニンジン、パセリ、ボタン、ミシマサイコ、ヤエムグラ、ヤマウコギ、ヨクイニン等が報告されているが、抗アレルギー作用とは別の作用である。
Ｉ型アレルギーに対しては、ジュズダマ属植物抽出物、ドクダミ科植物抽出物、シナノキ属植物抽出物等を有効成分として含有する化粧料及び食品（特許文献１）や、モモタマナ又は月桃のエキスを含有する食品（特許文献２）が報告されている。
しかしながら、上述のように、食物アレルギーやアトピー性皮膚炎等には、Ｉ型のみでなくIV型アレルギーに対しても有効であることが必要である。
As herbal medicines with anti-allergic action, Kyoko, Scaraba, Kobushi, Comfrey, Sanshuyu, Perilla, Peonies, Janohige, Dokudami, Jujube, Hinata Kozuchi, Button, Rosemary, etc. have been reported, but types I and IV There is no report that it is effective for allergies.
In addition, as a crude drug having an anti-inflammatory effect, Aotsuki Rafuji, Akebet, Enju, Oubak, Auren, Hypericum, Oyster, Kumazasa, Koganebana, Comfrey, Peonies, Janohige, Pseudococcidae, Tochibaninjin, Parsley, Button, Mishimasaico, Yam Yamakogi, Yokuinin, etc. have been reported, but they are different from antiallergic effects.
For type I allergies, cosmetics and foods (Patent Document 1) containing an extract of the genus Juzudama, a plant extract, a linden genus plant, etc. as an active ingredient, and an extract of momotamana or moon peach Food containing (Patent Document 2) has been reported.
However, as described above, food allergy, atopic dermatitis, etc. need to be effective not only for type I but also for type IV allergy.
本発明の目的は、食物アレルギーやアトピー性皮膚炎等に有効なＩ型及びIV型アレルギーに対する抗アレルギー作用を有する植物抽出物を含有し、長期的に摂取又は塗布することが可能な食品及び外用剤を提供することにある。 The object of the present invention is to contain a plant extract having an antiallergic action against type I and type IV allergies effective for food allergies, atopic dermatitis, etc. It is to provide an agent.
本発明者らは、スベリヒユ（Portulaca oleracea）の抽出物に、抗Ｉ型アレルギー作用及び抗IV型アレルギー作用を有することを見出し、本発明を完成するに至った。 The present inventors have found that the extract of Portulaca oleracea has an anti-type I allergic action and an anti-type IV allergic action, and has completed the present invention.
即ち、請求項１に係る発明は、スベリヒユ（Portulaca oleracea）の有効成分を含有することを特徴とする抗アレルギー食品に関する。
請求項２に係る発明は、前記有効成分は、スベリヒユ（Portulaca oleracea）からの水単独、水溶性溶媒単独、又は、水及び水溶性溶媒の混合物による抽出物であることを特徴とする請求項１記載の抗アレルギー食品に関する。
請求項３に係る発明は、スベリヒユ（Portulaca oleracea）以外の生薬の有効成分をさらに含有することを特徴とする請求項１又は２記載の抗アレルギー食品に関する。
請求項４に係る発明は、ペプチド及びタンパク質のうち少なくともいずれか一方を有効成分として含有することを特徴とする請求項１乃至３いずれか記載の抗アレルギー食品に関する。
請求項５に係る発明は、糖類を有効成分として含有することを特徴とする請求項１乃至４いずれか記載の抗アレルギー食品に関する。
請求項６に係る発明は、スベリヒユ（Portulaca oleracea）の有効成分を含有することを特徴とする抗アレルギー外用剤に関する。
請求項７に係る発明は、前記有効成分は、スベリヒユ（Portulaca oleracea）からの水単独、水溶性溶媒単独、又は、水及び水溶性溶媒の混合物による抽出物であることを特徴とする請求項６記載の抗アレルギー外用剤に関する。
請求項８に係る発明は、スベリヒユ（Portulaca oleracea）以外の生薬の有効成分をさらに含有することを特徴とする請求項６又は７記載の抗アレルギー外用剤に関する。
請求項９に係る発明は、ペプチド及びタンパク質のうち少なくともいずれか一方を有効成分として含有することを特徴とする請求項６乃至８いずれか記載の抗アレルギー外用剤に関する。
請求項１０に係る発明は、糖類を有効成分として含有することを特徴とする請求項６乃至９いずれか記載の抗アレルギー外用剤に関する。
That is, the invention according to claim 1 relates to an antiallergic food comprising an active ingredient of Portulaca oleracea.
The invention according to claim 2 is characterized in that the active ingredient is an extract of water from Portulaca oleracea alone, water-soluble solvent alone, or a mixture of water and water-soluble solvent. It relates to the described antiallergic food.
The invention according to claim 3 relates to the antiallergic food according to claim 1 or 2, further comprising an active ingredient of a herbal medicine other than purslane (Portulaca oleracea).
The invention according to claim 4 relates to the antiallergic food according to any one of claims 1 to 3, comprising at least one of a peptide and a protein as an active ingredient.
The invention according to claim 5 relates to the antiallergic food according to any one of claims 1 to 4, characterized in that it contains sugar as an active ingredient.
The invention according to claim 6 relates to an antiallergic external preparation characterized by containing an active ingredient of Portulaca oleracea.
The invention according to claim 7 is characterized in that the active ingredient is an extract of water alone, water-soluble solvent alone, or a mixture of water and water-soluble solvent from Portulaca oleracea. It relates to the antiallergic external preparation described.
The invention according to claim 8 relates to the antiallergic external preparation according to claim 6 or 7, further comprising an active ingredient of a herbal medicine other than purslane (Portulaca oleracea).
The invention according to claim 9 relates to the antiallergic external preparation according to any one of claims 6 to 8, which contains at least one of a peptide and a protein as an active ingredient.
The invention according to claim 10 relates to the antiallergic external preparation according to any one of claims 6 to 9, which comprises a saccharide as an active ingredient.
発明に係る食品及び外用剤は、抗Ｉ型アレルギー作用のみでなく抗IV型アレルギー作用をも有する植物由来成分である、スベリヒユ又はスベリヒユ抽出物を含有し、長期的に摂取又は塗布することが可能で、特にＩ型及びIV型アレルギーの複合型アレルギーである食物アレルギーやアトピー性皮膚炎等の症状を長期的に改善することができる。 The food and the external preparation according to the invention contain a plant-derived component, or a purslane extract, which has not only an anti-type I allergic effect but also an anti-type IV allergic effect, and can be ingested or applied over a long period of time. In particular, symptoms such as food allergy and atopic dermatitis, which are combined allergies of type I and type IV allergies, can be improved in the long term.
本発明に係る食品である「スベリヒユ（Portulaca oleracea）の有効成分を含有することを特徴とする抗アレルギー食品」及び、本発明に係る外用剤である「スベリヒユ（Portulaca oleracea）の有効成分を含有することを特徴とする抗アレルギー外用剤」について説明する。 Contains an active ingredient of “Anti-allergic food characterized by containing active ingredient of Portulaca oleracea” which is food according to the present invention and “Portulaca oleracea” which is an external preparation according to the present invention. The antiallergic external preparation characterized by this will be described.
スベリヒユは、別名をイハイズル、トンボグサ、馬歯見又は五行草といい、スベリヒユ科（Portulacaceae）スベリヒユ属（Portulaca）スベリヒユ種（P. oleracea）、学名Portulaca oleracea L.を意味する。スベリヒユは、多肉質で茎が赤褐色を呈する１年生の草花植物であり、畑地や路傍の日当たりの良いところに広く分布していて入手が容易である。
スベリヒユは、成分として、抗酸化性ビタミンＡ，Ｃ及びＥ、グルタチオン、ノルアドレナリン及びドーパミン等のアミン類、カリウム塩、マグネシウム塩、Ｃａ、葉酸塩、Ｌｉを含む。
The name “Sugahiyu” is also known as Iheizuru, dragonfly, horse toothpick or quincegrass, and it means “Portulacaceae”, “Portulaca”, “P. oleracea”, scientific name “Portulaca oleracea L.”. Surihiyu is an annual plant that is fleshy and has a reddish brown stem, and is widely distributed in sunny areas along the field and on roadsides, and is easily available.
As a component, purslane includes antioxidant vitamins A, C and E, amines such as glutathione, noradrenaline and dopamine, potassium salt, magnesium salt, Ca, folate and Li.
これらの成分による効用として、抗酸化性ビタミンＡ，Ｃ及びＥによる抗酸化作用、グルタチオンによる強力な抗酸化性と免疫システム増強性、ＭｇとＣａは１：１の割合で含み、心臓病に高い予防効果があることが知られ、これらは抗老化作用につながる。また、Ｃａ，葉酸塩及びＬｉによる抗うつ病に対する有効性があることも知られている。
さらに、スベリヒユ抽出物は、痢疾桿菌、大腸菌、赤痢菌、黄色ブドウ球菌等に強い抗菌作用があり、子宮に興奮及び収縮作用、子宮平滑筋に麦角塩基に匹敵する作用があり、副作用は少なく、解熱及び解毒薬として吹き出物、悪瘡、ニキビ、ソバカス、急慢性の細菌性下痢及び腸炎に対する治療効果は、スルファグアニジン及びクロラムフェニコール等の抗生物質に匹敵することが知られている。
As an effect of these ingredients, antioxidant action by antioxidant vitamins A, C and E, strong antioxidant effect by glutathione and immune system enhancement, Mg and Ca are contained at a ratio of 1: 1, and are high in heart disease Known to have preventive effects, these lead to anti-aging effects. It is also known that Ca, folate, and Li are effective against antidepressive depression.
Furthermore, the purslane extract has a strong antibacterial action against diarrhea bacterium, Escherichia coli, Shigella, Staphylococcus aureus, etc., excitement and contraction action in the uterus, action comparable to ergot base in uterine smooth muscle, with few side effects, It is known that the therapeutic effect on pimples, acne, acne, buckwheat, acute chronic bacterial diarrhea and enteritis as an antipyretic and antidote is comparable to antibiotics such as sulfaguanidine and chloramphenicol.
本発明においては、これらの作用の他、スベリヒユに、抗Ｉ型アレルギー作用及び抗IV型アレルギー作用があることを見出した。
スベリヒユは、食品においては、全草を使用することが好ましく、例えば全草を乾燥させた後に粉砕等して使用することができ、外用剤においては、抽出物として使用することができる。抽出物は食品においても使用することができる。
In the present invention, in addition to these effects, it has been found that subtilis has an anti-type I allergic action and an anti-type IV allergic action.
In the food, it is preferable to use whole grass for food, for example, it can be used by pulverizing after drying the whole grass, and can be used as an extract in external preparations. The extract can also be used in food.
本発明の食品及び外用剤に含有するスベリヒユ抽出物の調製は、含有する食品の形態又は外用剤の剤型等に応じ、臨機応変に調製することができる。
即ち、水単独、アルコールやグリコール等の水溶性溶媒単独、又は、水及び水溶性溶媒の混合物で抽出することができる。
The purslane extract contained in the food and external preparation of the present invention can be prepared flexibly according to the form of the food to be contained or the dosage form of the external preparation.
That is, it can be extracted with water alone, a water-soluble solvent such as alcohol or glycol alone, or a mixture of water and a water-soluble solvent.
本発明において使用するスベリヒユ抽出物の調製方法としては、例えば次のようにして行うことができる。
例えば、スベリヒユの全草を乾燥後、粉砕し、その粉砕物からスベリヒユ抽出物を得る。
熱水抽出方法としては、スベリヒユ乾燥物２０ｇに精製水３００ｍLを加え、１時間煮沸した後４０℃まで冷却し、濾過剤としてセライトを用いて吸引濾過して抽出液２００ｇを得る。さらにこの抽出液を乾固することにより不揮発成分６．６ｇを得る。
一方、５０質量％エタノールでの抽出方法としては、スベリヒユ乾燥物２０ｇに５０質量％エタノール３００ｍLを加え、１時間煮沸した後４０℃まで、冷却し、濾過剤としてセライトを用いて吸引濾過して抽出液２２０ｇを得る。さらにこの抽出液を乾固することにより不揮発成分５ｇを得る。
As a method for preparing the purslane extract used in the present invention, for example, it can be carried out as follows.
For example, the whole plant of purslane is dried and pulverized, and the purslane extract is obtained from the pulverized product.
As a hot water extraction method, 300 mL of purified water is added to 20 g of dried purslane, boiled for 1 hour, cooled to 40 ° C., and suction filtered using Celite as a filtering agent to obtain 200 g of an extract. Further, 6.6 g of a non-volatile component is obtained by drying the extract.
On the other hand, as an extraction method with 50% by mass ethanol, 300 mL of 50% by mass ethanol is added to 20 g of dried purslane, boiled for 1 hour, cooled to 40 ° C., extracted by suction filtration using Celite as a filtering agent. 220 g of liquid is obtained. Furthermore, 5 g of non-volatile components are obtained by drying this extract.
このようにして抽出したスベリヒユ抽出物において、抗Ｉ型アレルギー作用及び抗IV型アレルギー作用を示す有効成分については、特定されていないが、このスベリヒユ抽出物がヒスタミン遊離抑制作用を示すことは明らかである。
例えば、上述のようにしてスベリヒユから５０％ＥｔＯＨ（水：エタノール＝１：１）にて抽出した５０％ＥｔＯＨ抽出物は、ラットのマスト細胞からのヒスタミン遊離を有意に抑制する。具体的には、５０％ＥｔＯＨ抽出物の不揮発成分を５０％ＥｔＯＨで５０μｇ／ｍＬ及び５００μｇ／ｍＬの濃度に調整したものは、医薬品であるクロモグリク酸ナトリウム５００μｇ／ｍＬと比較し、夫々７０％程度及び９０％程度のヒスタミン遊離抑制効果を示す。
The active ingredient showing anti-type I allergic action and anti-type IV allergic action is not specified in the extracted purslane extract in this way, but it is clear that this purslane extract shows histamine release inhibitory action. is there.
For example, a 50% EtOH extract extracted from purslane with 50% EtOH (water: ethanol = 1: 1) as described above significantly suppresses histamine release from rat mast cells. Specifically, the non-volatile component of 50% EtOH extract adjusted to 50 μg / mL and 500 μg / mL with 50% EtOH is about 70% each compared with 500 μg / mL sodium cromoglycate, which is a pharmaceutical product. And about 90% of histamine release inhibitory effect.
また、スベリヒユ抽出物は、Ｉ型アレルギーモデルとしてのＤＮＦＢ誘発３相性皮膚反応試験、及びIV型アレルギーモデルとしての接触皮膚炎誘発試験において、共に有意な抗アレルギー作用を示す。 In addition, the purslane extract exhibits a significant antiallergic action both in the DNFB-induced three-phase skin reaction test as a type I allergy model and the contact dermatitis induction test as a type IV allergy model.
本発明の食品及び外用剤においては、スベリヒユに加え、他の生薬を含有することができる。
食品及び外用剤のいずれにおいても、抗アレルギー作用、抗炎症作用、抗酸化作用、抗老化作用、抗菌作用等を有することが知られている生薬等を含有することができる。
抗アレルギー作用を有する生薬としては、キキョウ、コガネバナ、コブシ、コンフリー、サンシュユ、シソ、シャクヤク、ジャノヒゲ、ドクダミ、ナツメ、ヒナタイノコズチ、ボタン、ローズマリーを例示することができる。
The food and external preparation of the present invention can contain other herbal medicines in addition to the purslane.
Both foods and external preparations can contain herbal medicines known to have antiallergic action, anti-inflammatory action, antioxidant action, anti-aging action, antibacterial action and the like.
Examples of herbal medicines having an antiallergic action include kyokyo, koganebana, kobushi, comfrey, sanshuyu, perilla, peonies, janohige, dokudami, jujube, hinata kozuchi, buttons, and rosemary.
抗炎症作用を有する生薬としては、アオツヅラフジ、アケビ、エンジュ、オウバク、オウレン、オトギリソウ、キキョウ、クマザサ、コガネバナ、コンフリー、シャクヤク、ジャノヒゲ、セイヨウノコリギソウ、トチバニンジン、パセリ、ボタン、ミシマサイコ、ヤエムグラ、ヤマウコギ、ヨクイニンを例示することができる。
抗酸化作用を有する生薬としては、アーティチョーク、アカワイン、アマチャ、オウゴン、オニク、オレガノ、カッコン、カルドン、ガマズミ、クガイソウ、クズ、クワ、コーヒー、コガネバナ、コメ、ゴバイシ、ゴマ、サンザシ、サンシチニンジン、シャクヤク、スイカズラ、セージ、ダリヤ、ノアザミ、ヒマワリ、ビンロウジュ、フランキンセンス、ボタンピ、ローズマリーを例示することができる。
抗老化作用を有する生薬としては、アメリカニンジン、イチョウ、エキナケア、ビンロウジュ、ヤナギを例示することができる。
Herbal medicines that have anti-inflammatory effects include Aotsuki Rafuji, Akebet, Enju, Oubak, Auren, Hypericum, Oyster, Kumazasa, Scarlet, Comfrey, Peonies, Janohige, Pseudococcidae, Tochibaninjin, Parsley, Button, Mishima Saikouyae, Yam Yokuinin can be exemplified.
Herbal medicines that have antioxidant effects include artichoke, red wine, amateurs, horns, onions, oregano, cuckoo, cardon, viburnum, squirrels, kudzu, mulberry, coffee, koganebana, rice, gobaishi, sesame, hawthorn, sanchinin ginseng, peony Honeysuckle, sage, dahlia, black thistle, sunflower, areca, frankincense, button pi, rosemary.
Examples of herbal medicines having an anti-aging action include American carrot, ginkgo, echina care, areca and willow.
抗菌作用を有する生薬としては、アカネ、アカヤジオウ、アキノキリンソウ、アザミ、アロエ、イタドリ、ウツボグサ、ウド、ウメ、エゴマ、オウバク、オウレン、オケラ、オトギリソウ、カナムグラ、カミツレ、カワラヨモギ、ガジュツ、キク、キハダ、キランソウ、キンミズヒキ、ギシギシ、クチナシ、クマザサ、クララ、ゲンノショウコ、コガネバナ、コブシ、ゴボウ、サンザシ、サンシュユ、サンショウ、シソ、シャクヤク、ショウガ、スイカズラ、スイバ、セージ、セロリ、タマネギ、タンポポ、ダイコン、ツルドクダミ、ツルナ、ツワブキ、トウガラシ、トウキ、ドクダミ、ナツメ、ナンテン、ニンニク、ネズ、ネズミモチ、ハマスゲ、ヒキオコシ、ヒマワリ、フサザクラ、ボタン、ミカン、ミソハギ、ミチヤナギ、メギ、ヤブコウジ、ユーカリノキ、ヨモギ、リンドウ、レンギョウ、ローズマリー、ワレモコウを例示することができる。
なお、上記作用に限定されるものではなく、他の作用を有する生薬であってもよく、一般に食品用として添加される生薬を含有することができる。
スベリヒユ以外の生薬についても、その生薬に応じ、従来公知の方法等によって臨機応変に調整することができる。
Herbal medicines that have antibacterial activity include Akane, Akajioji, Akinoki Ginsou, Thistle, Aloe, Knotweed, Nepenthes, Udo, Ume, Egoma, Owaku, Ouren, Okera, Hypericum, Kanamura, Chamomile, Kawarayomogi, Gajuda, Kikuran, Kakuda, Kiku, Goldfish, scallop, gardenia, kumazasa, clara, genus shoko, koganebana, kobushi, burdock, hawthorn, sanshuyu, salamander, perilla, peony, ginger, honeysuckle, sorrel, sage, celery, onion, dandelion, radish, radish , Capsicum, touki, dokudami, jujube, nanten, garlic, mouse, mouse mochi, hamasuge, toukishiki, sunflower, fusazakura, button, mandarin orange, misohagi, mikanagi, barberry, yab Maggots, eucalyptus, mugwort, gentian, forsythia, rosemary, can be exemplified Burnet.
In addition, it is not limited to the said effect | action, The crude drug which has another effect | action may be sufficient, and the crude drug generally added for foodstuffs can be contained.
The herbal medicines other than purslane can also be adjusted flexibly by a conventionally known method or the like according to the herbal medicine.
また、本発明の食品及び外用剤においては、スベリヒユに加え、ペプチド及びタンパク質を含有することができる。
ペプチドとは、決まった順でアミノ酸が繋がってできた分子の系統群、即ち、タンパク質を構成しているアミノ酸が２〜１０個位に結合している状態をいい、ポリグルタミン酸（ＰＧＡ）を例示することができる。
ポリペプチドとは、アミノ酸の一つの線形の鎖をいう。
タンパク質とは、５０以上のアミノ酸からなる一つ以上のポリペプチドをいい、例えば、コラーゲン、シルクタンパクを例示することができる。
Moreover, in the foodstuff and external preparation of this invention, in addition to purslane, a peptide and protein can be contained.
Peptide refers to a group of molecules formed by connecting amino acids in a specific order, that is, a state in which amino acids constituting a protein are bound to about 2 to 10 positions, and examples include polyglutamic acid (PGA). can do.
Polypeptide refers to one linear chain of amino acids.
The protein refers to one or more polypeptides composed of 50 or more amino acids, and examples thereof include collagen and silk protein.
また、本発明の食品及び外用剤においては、スベリヒユに加え、糖類を含有することができる。
糖類とは、単糖、オリゴ糖及び多糖だけでなく、アミノ糖及び糖アルコール等も含み、トレハロース、ヒアルロン酸、キチン、キトサン（グルコサミン）、ムチン、コンドロイチン硫酸、アルギン酸を例示することができる。
さらに、クロレラ、イースト菌、ヨーグルトエキス等、種々の有効成分を含有することも可能である。
Moreover, in the foodstuff and external preparation of this invention, in addition to purslane, it can contain saccharides.
Sugars include not only monosaccharides, oligosaccharides and polysaccharides but also amino sugars and sugar alcohols, and examples include trehalose, hyaluronic acid, chitin, chitosan (glucosamine), mucin, chondroitin sulfate, and alginic acid.
Furthermore, it is possible to contain various active ingredients such as chlorella, yeast, and yogurt extract.
本発明に係る食品には、スベリヒユは、スベリヒユ抽出物とした場合、不揮発成分として一日の摂取量を１０〜６０００ｍｇとなるように配合するのが好ましく、より好ましくは５０〜３０００ｍｇになるように配合する。従って、スベリヒユを全草で配合する場合には、スベリヒユ抽出物の不揮発性成分に換算して配合することになる。
１０ｍｇ未満では、本発明の効果（抗Ｉ型及びIV型アレルギー作用）を充分に発揮することができず、６０００ｍｇを超えて配合しても好ましい範囲の効果に比較して期待されるほどの効果は得られず、いずれの場合も好ましくないからである。
In the food according to the present invention, when purslane is used as the purslane extract, it is preferably blended so that the daily intake is 10 to 6000 mg as a non-volatile component, more preferably 50 to 3000 mg. Blend. Therefore, when compounding purslane, it is converted into the non-volatile component of the purslane extract and blended.
If the amount is less than 10 mg, the effects of the present invention (anti-type I and type IV allergic action) cannot be fully exerted, and even if blended in excess of 6000 mg, the effect is expected as compared with the effect within the preferred range. Is not obtained in any case.
スベリヒユに追加して、本発明に係る食品に添加する他の成分、即ち、スベリヒユ以外の生薬、ペプチド、タンパク質及び糖類についても、スベリヒユ抽出物と同様の理由で、夫々１０〜６０００ｍｇ配合するのが好ましく、より好ましくは１０〜３０００ｍｇ配合する。 In addition to the purslane, other ingredients added to the food according to the present invention, that is, herbal medicines, peptides, proteins and saccharides other than purslane, are blended in an amount of 10 to 6000 mg for the same reason as the purslane extract. More preferably, 10 to 3000 mg is blended.
本発明に係る食品は、スベリヒユ又はスベリヒユ抽出物に、適宜上記他の成分を追加して、薬学的に許容される製剤担体を用いて、食品として従来公知の形態とすることができる。
これらの食品の製造方法は、スベリヒユ又はスベリヒユ抽出物を含有するものであれば特に限定されず、各用途で当業者によって使用されている方法に従えばよい。
本発明に係る食品としては、例えば、健康食品、栄養補助食品（バランス栄養食、サプリメント等）、栄養機能食品、特定保健用食品、病者用食品、口腔ケア用食品等が挙げられる。また、本発明におけるスベリヒユ又はスベリヒユ抽出物は、通常の手段を用いてジュース、飴、ガム、アイスクリーム等の通常の食品に含有させればよく、食品の味覚等を損なわない範囲で含有させることができる。
The food according to the present invention can be made into a conventionally known form as a food using a pharmaceutically acceptable pharmaceutical carrier by appropriately adding the above-mentioned other components to the purslane or the purslane extract.
The method for producing these foods is not particularly limited as long as it contains a purslane or a purslane extract, and may be a method used by those skilled in the art for each application.
Examples of the food according to the present invention include health foods, nutritional supplements (balanced nutritional foods, supplements, etc.), functional nutritional foods, foods for specified health use, foods for the sick, foods for oral care, and the like. Further, the purslane or purslane extract in the present invention may be contained in ordinary foods such as juice, strawberries, gums, ice creams, etc. using ordinary means, and contained in a range that does not impair the taste of the foods. Can do.
本発明に係る外用剤は、スベリヒユ抽出物に、適宜上記他の成分を追加して、薬学的に許容される製剤担体を用いて、外用剤として従来公知の形態とすることができる。
外用剤としては、主に皮膚外用剤や毛髪処理剤として使用することができ、化粧品、浴用剤、医薬部外品等に適用することが可能である。
例えば医薬部外品において、美白用であれば、紫外線防御、抗炎症、突然変異抑制、抗酸化、チロシナーゼ阻害、メラニン抑制及び細胞賦活等の効果を有する成分を含有することができる。
老化防止用であって生理的老化防止用であれば、保湿、創傷治癒、免疫賦活、細胞賦活、コラーゲン産生促進、ヒアルロン酸産生促進、皮膚弾力改善及びメイラード反応阻害等の効果を有する成分を含有することができる。また、光老化防止用であれば、紫外線防止、抗酸化、突然変異抑制、表皮肥厚抑制、皮膚弾力改善、抗炎症、エラスチン保護、コラーゲン保護、免疫賦活及び細胞賦活等の効果を有する成分を含有することができる。
The external preparation according to the present invention can be made into a conventionally known form as an external preparation using a pharmaceutically acceptable pharmaceutical carrier by appropriately adding the above-mentioned other components to the purslane extract.
As an external preparation, it can be used mainly as a skin external preparation or a hair treatment agent, and can be applied to cosmetics, bath preparations, quasi drugs and the like.
For example, in a quasi-drug, if it is used for whitening, it can contain components having effects such as UV protection, anti-inflammatory, mutation suppression, antioxidant, tyrosinase inhibition, melanin suppression and cell activation.
If it is for aging prevention and for physiological aging prevention, it contains ingredients that have effects such as moisturizing, wound healing, immune activation, cell activation, collagen production promotion, hyaluronic acid production promotion, skin elasticity improvement and Maillard reaction inhibition can do. In addition, if it is for photoaging prevention, it contains ingredients that have effects such as UV protection, antioxidant, mutation suppression, epidermal thickening suppression, skin elasticity improvement, anti-inflammatory, elastin protection, collagen protection, immunostimulation and cell activation can do.
シワ防止用であれば、紫外線防止、シワ改善、保湿、表皮肥厚抑制、抗炎症、皮膚弾力改善、抗酸化、細胞賦活、エラスチン保護、コラーゲン保護、コラーゲン産生促進、ヒアルロン酸保護及びヒアルロン酸産生促進等の効果を有する成分を含有することができる。
抗炎症用であれば、脱感作、ＩｇＥ抗体産生抑制、補体活性抑制、ＰＣＡ反応抑制、接触皮膚炎抑制、カラゲニン浮腫抑制、ヒスタミン遊離抑制、アラキドン酸浮腫抑制及びヒアルロニダーゼ阻害等の効果を有する成分を含有することができる。
ニキビ防止用であれば、抗男性ホルモン、収斂、皮脂腺抑制、ニキビ発生抑制、抗酸化、抗炎症、抗菌及びリパーゼ活性阻害等の効果を有する成分を含有することができる。
For wrinkle prevention, UV protection, wrinkle improvement, moisturization, epidermis thickening suppression, anti-inflammatory, skin elasticity improvement, antioxidant, cell activation, elastin protection, collagen protection, collagen production promotion, hyaluronic acid protection and hyaluronic acid production promotion The component which has effects, such as these, can be contained.
For anti-inflammatory use, it has effects such as desensitization, IgE antibody production suppression, complement activity suppression, PCA reaction suppression, contact dermatitis suppression, carrageenan edema suppression, histamine release suppression, arachidonic acid edema suppression and hyaluronidase inhibition Ingredients can be included.
If it is for acne prevention, it can contain components having effects such as anti-androgen, astringency, sebaceous gland suppression, acne generation suppression, antioxidant, anti-inflammatory, antibacterial and lipase activity inhibition.
保湿用であれば、肌荒れ改善、経表皮水分損失抑制、皮膜形成、ＮＭＦ産生促進、角質水分量増加、細胞保護、ヒアルロン酸産生促進及びコラーゲン産生促進等の効果を有する成分を含有することができる。
スリミング用であれば、前駆脂肪細胞分化抑制及び脂肪分解促進等の効果を有する成分を含有することができる。
スカルプケア用であれば、抗男性ホルモン、収斂、抗酸化、抗菌、保湿及び抗炎症等の効果を有する成分を含有することができる。
育毛用であれば、抗男性ホルモン、育毛及び細胞賦活等の効果を有する成分を含有することができる。
For moisturizing, it can contain components having effects such as improvement of rough skin, suppression of transepidermal water loss, film formation, NMF production promotion, keratin water content increase, cell protection, hyaluronic acid production promotion and collagen production promotion. .
If it is for slimming, it can contain components having effects such as suppression of preadipocyte differentiation and promotion of lipolysis.
In the case of scalp care, it can contain components having effects such as anti-androgen, astringency, antioxidant, antibacterial, moisturizing and anti-inflammatory.
If it is for hair growth, it can contain components having effects such as anti-androgen hormone, hair growth and cell activation.
ダメージヘア用であれば、紫外線防御、キューティクル保護、保湿、帯電防止、皮膜形成及び毛髪改善等の効果を有する成分を含有することができる。
上記紫外線防止効果を有する成分としては、オウゴン、カミツレ、シルクタンパク、クララ、スイカズラ、ソウハクヒ及びヨクイニンを例示することができる。
抗炎症効果を有する成分としては、オウレン、オトギリソウ、カワラヨモギ、シソ、セイヨウサンザシ、セージ、ドクダミ及びホオノキ、突然変異抑制効果を有する成分としては、アマチャ、ウイキョウ及びユキノシタを例示することができる。
抗酸化効果を有する成分としては、オウゴン、オウバク、オウレン、オトギリソウ、カッコン、グレープフルーツ、サイシン、シソ、セイヨウサンザシ、セージ、ソウハクヒ、ユーカリ、レモングラス及びローズマリーを例示することができる。
For damaged hair, it can contain components having effects such as UV protection, cuticle protection, moisture retention, antistatic, film formation and hair improvement.
Examples of the component having an ultraviolet ray-preventing effect include hornon, chamomile, silk protein, Clara, honeysuckle, Sakuhakuhi and Yokuinin.
Examples of components having an anti-inflammatory effect include auren, hypericum, sagebrush, perilla, hawthorn, sage, dokudami and honoki, and examples of components having a mutation-inhibiting effect include amacha, fennel and yukinoshita.
Examples of the component having an antioxidative effect include urgonum, acorn, auren, hypericum, cuckoo, grapefruit, saicin, perilla, hawthorn, sage, perennial, eucalyptus, lemongrass and rosemary.
チロシナーゼ阻害効果を有する成分としては、オウゴン、クララ、シソ、ソウハクヒ及びヨクイニン、メラニン抑制効果を有する成分としては、シャクヤク、カッコン、セイヨウサンザシ及びソウハクヒ、細胞賦活効果を有する成分としてはアロエベラを例示することができる。
保湿効果を有する成分としては、アルギン酸、アロエベラ、イースト菌、キチン、キトサン、コラーゲン、シルクタンパク、トレハロース、ヒアルロン酸、ＰＧＡ、オトギリソウ、カワラヨモギ、グレープフルーツ、ノバラ、ヨーグルトエキス、ヨクイニンを例示することができる。
創傷治癒効果を有する成分としてはムチン、免疫賦活効果を有する成分としてはオウゴン、細胞賦活効果を有する成分としては、イースト菌、アロエベラ、クロレラ、ムチンを例示することができる。
Examples of ingredients having an inhibitory effect on tyrosinase include Ogon, Clara, Perilla, Sakuhakuhi and Yokuinin, ingredients having an inhibitory effect on melanin, peonies, cuckoo, hawthorn and Sakuhachi, and examples of aloe vera as an ingredient having a cell activation effect Can do.
Examples of the component having a moisturizing effect include alginic acid, aloe vera, yeast, chitin, chitosan, collagen, silk protein, trehalose, hyaluronic acid, PGA, hypericum, Chinese mugwort, grapefruit, wild rose, yogurt extract, and yokoinin.
Examples of the component having a wound healing effect include mucin, examples of the component having an immunostimulatory effect include ougon, and examples of the component having a cell activating effect include yeast, aloe vera, chlorella and mucin.
コラーゲン産生促進効果を有する成分としてはアロエベラ、ヒアルロン酸産生促進効果を有する成分としてはヒアルロン酸、皮膚弾力改善効果を有する成分としてはキチン、ホオノキ、メイラード反応阻害効果を有する成分としてはマロニエを例示することができる。
表皮肥厚抑制効果を有する成分としてはオウゴン、ホオノキ、エラスチン保護効果を有する成分としてはオトギリソウ、ボダイジュ、コラーゲン保護効果を有する成分としてはオウゴン、ビワの葉、ホオノキ、ユーカリ、シワ改善効果を有する成分としてはアルギン酸、キチン、アロエベラ、ヨーグルトエキスを例示することができる。
脱感作効果を有する成分としてはボダイジュ、ＩｇＥ抗体産生抑制効果を有する成分としてはラクトフェリン、補体活性抑制効果を有する成分としてはオトギリソウ、シソ、セイヨウサンザシ、ドクダミ、ビワの葉、ローズマリー、ＰＣＡ反応抑制効果を有する成分としてはシソ、ドクダミ、ビワの葉を例示することができる。
Aloe vera as an ingredient having collagen production promoting effect, hyaluronic acid as an ingredient having hyaluronic acid production promoting effect, chitin, honoki as an ingredient having skin elasticity improving effect, and maronier as an ingredient having an inhibitory effect on Maillard reaction be able to.
Ingredients for suppressing epidermis thickening: Ogon, honoki, elastin for protective effect, hypericum, bodaiju, for ingredients having protective effect for collagen, Japanese oak, loquat leaves, honoki, eucalyptus, for improving wrinkles Can be exemplified by alginic acid, chitin, aloe vera and yogurt extract.
As a component having a desensitizing effect, Bodaiju, as a component having an IgE antibody production inhibitory effect, lactoferrin, and as a component having a complement activity inhibitory effect, hypericum, perilla, hawthorn, dokudami, loquat leaves, rosemary, PCA Examples of the component having a reaction inhibitory effect include perilla, dokudami and loquat leaves.
接触皮膚炎抑制効果を有する成分としては、シソ、ボタンピ、カラゲニン浮腫抑制効果を有する成分としてはイースト菌、オウゴン、シソ、ビワの葉、ボタンピ、ヒスタミン遊離抑制効果を有する成分としてはオウレン、オトギリソウ、カワラヨモギ、シソ、セイヨウサンザシ、セージ、ドクダミ、ビワの葉、ホオノキ、ボタンピ、レモングラスを例示することができる。
アラキドン酸浮腫抑制効果を有する成分としてはボタンピ、ヒアルロニダーゼ阻害効果を有する成分としてはオウゴン、オトギリソウ、カワラヨモギ、シソ、ドクダミを例示することができる。
抗男性ホルモン効果を有する成分としてはオウゴン、ジオウ、収斂効果を有する成分としてはオトギリソウ、セージ、ドクダミ、ニキビ発生抑制効果を有する成分としてはヨーグルトエキスを例示することができる。
Ingredients having inhibitory effect on contact dermatitis include perilla, buttonpi, carrageenin edema inhibitory ingredient, yeast, urgonum, perilla, loquat leaf, buttonpi, histamine release inhibitory ingredient, oren, hypericum, kawara mugi , Perilla, hawthorn, sage, dokudami, loquat leaves, honoki, buttonpi, lemongrass.
Examples of the component having an arachidonic acid edema-inhibiting effect include botpi, and examples of the component having a hyaluronidase inhibitory effect include urgonum, hypericum, Chinese mugwort, perilla and dokudami.
Examples of the component having an anti-androgenic effect include urgonum, dianthus, the component having an astringent effect, hypericum, sage, dodami, and the component having an acne generation suppressing effect include yogurt extract.
抗菌効果を有する成分としてはオウバク、レモングラス、ラクトフェリン、リパーゼ活性阻害効果を有する成分としてはキトサン、オトギリソウを例示することができる。
肌荒れ改善効果を有する成分としてはアロエベラ、ムチン、ヨーグルトエキス、経表皮水分損失抑制効果を有する成分としてはアルギン酸、アロエベラ、キチン、シルクタンパク、ＰＧＡ、ヒアルロン酸、皮膜形成効果を有する成分としてはキトサン、シルクタンパク、ＰＧＡ、ヒアルロン酸、ヨクイニンを例示することができる。
ＮＭＦ産生促進効果を有する成分としては、ＰＧＡ、コラーゲン、角質水分量増加効果を有する成分としてはアルギン酸、アロエベラ、イースト菌、キチン、コラーゲン、トレハロース、ＰＧＡ、クロレラ、オトギリソウ、カワラヨモギ、グレープフルーツ、ノバラ、細胞保護効果を有する成分としてはトレハロースを例示することができる。
Examples of the component having an antibacterial effect include buckwheat, lemongrass, lactoferrin, and the component having a lipase activity inhibitory effect such as chitosan and hypericum.
Aloe vera, mucin, yogurt extract as an ingredient having a rough skin improving effect, alginic acid, aloe vera, chitin, silk protein, PGA, hyaluronic acid as an ingredient having a transepidermal water loss inhibiting effect, chitosan as an ingredient having a film forming effect, Examples thereof include silk protein, PGA, hyaluronic acid, and yokuinin.
As components having NMF production promoting effect, PGA, collagen, as components having an effect of increasing keratin water content, alginic acid, aloe vera, yeast, chitin, collagen, trehalose, PGA, chlorella, hypericum, Chinese mugwort, grapefruit, wild rose, cell protection An example of a component having an effect is trehalose.
前駆脂肪細胞分化抑制効果を有する成分としてはアマチャ、脂肪分解促進効果を有する成分としてはクロレラ、レモングラス、クララ、ソウハクヒを例示することができる。
育毛効果を有する成分としてはジオウ、セージ、ボタンピ、キューティクル保護効果を有する成分としてはキトサン、ＰＧＡ、毛髪改善効果を有する成分としてはキトサン、シルクタンパク、ＰＧＡを例示することができる。
これらの外用剤の製造方法は、スベリヒユ抽出物を含有するものであれば特に限定されず、各用途で当業者によって使用されている方法に従えばよい。
Examples of the component having an effect of inhibiting differentiation of preadipocytes include amacha, and examples of the component having an effect of promoting lipolysis include chlorella, lemongrass, Clara, and sohaakuhi.
Examples of ingredients having a hair-growth effect include chitosan, PGA, and chitosan and PGA as ingredients having a cuticle-protecting effect, and chitosan, silk protein, and PGA as ingredients having a hair-improving effect.
The method for producing these external preparations is not particularly limited as long as it contains a purslane extract, and may be a method used by those skilled in the art for each application.
本発明に係る食品及び外用剤は、抗Ｉ型アレルギー作用のみでなく抗IV型アレルギー作用をも有するスベリヒユ又はスベリヒユ抽出物を必須の有効成分として含有し、適宜スベリヒユ以外の生薬、ペプチド、タンパク質及び糖類のうちのいずれか一種以上を含有することによって、長期的に摂取又は塗布することが可能で、特にＩ型及びIV型アレルギーの複合型アレルギーである食物アレルギーやアトピー性皮膚炎等の症状を長期的に改善することができる。 The food and the external preparation according to the present invention contain, as an essential active ingredient, a purslane or a purslane extract that has not only an anti-type I allergic action but also an anti-type IV allergic action, and appropriate herbal medicines, peptides, proteins, and By containing any one or more of saccharides, it can be ingested or applied for a long period of time, especially for symptoms such as food allergies and atopic dermatitis that are complex allergies of type I and type IV allergies. Can improve in the long term.
以下に、本発明におけるスベリヒユ抽出物についての試験例を示す。 Below, the test example about the purslane extract in this invention is shown.
（試験例１）
マスト細胞からのヒスタミン遊離に及ぼすスベリヒユエキスの影響を検討した。
スベリヒユ（Portulaca oleracea）の抗アレルギー作用をcompound４８／８０誘発マスト細胞からのヒスタミン遊離抑制を指標に検討した。
スベリヒユ５０質量％エタノール抽出エキス（以下、ＰＯ−ｅｘｔと略記）を検体とした。
(Test Example 1)
The effect of purslane extract on histamine release from mast cells was investigated.
The antiallergic action of purslane (Portulaca oleracea) was examined using suppression of histamine release from compound 48 / 80-induced mast cells as an index.
The sample was a 50 mass% ethanol extract (hereinafter abbreviated as PO-ext).
（ラット腹腔マスト細胞の調整）
Wistar系雄性ラット（１６０−１８０ｇ）からの腹腔マスト細胞の分離はUvnasらの方法に準じて行った。ラットを断頭しゃ血後、直ちにHank's液（１０U/ｍLのヘパリン含有）１０ｍLを腹腔内に注入した。約９０秒間腹部を静かにマッサージした後、腹腔内液を採取し、４０質量％ficoll溶液に静かに重層し、室温で３０分間放置後、５℃、１，２００ｒｐｍ、１０分間遠心分離を行い、ficoll層状のマスト細胞を集めた。このマスト細胞はリン酸緩衝液（ＰＢＳ、ｐH７．０）に懸濁させ、遠心分離による洗浄を４回繰返し、再びＰＢＳに浮遊（２．９×１０６ｃｅｌｌｓ／ｍＬ）させた。この浮遊液中のマスト細胞含有率は８５−９０質量％で、生存率はトルイジンブルー（０．１質量％、５０質量％エタノール溶液）染色法で９０質量％以上を確認した。
(Adjustment of rat peritoneal mast cells)
Separation of peritoneal mast cells from Wistar male rats (160-180 g) was performed according to the method of Uvnas et al. Immediately after decapitation of the rats, 10 mL of Hank's solution (containing 10 U / mL heparin) was injected intraperitoneally. After gently massaging the abdomen for about 90 seconds, the intraperitoneal fluid was collected, layered gently on a 40% by mass ficoll solution, allowed to stand at room temperature for 30 minutes, then centrifuged at 5 ° C., 1,200 rpm for 10 minutes, Ficoll layered mast cells were collected. The mast cells were suspended in a phosphate buffer (PBS, pH 7.0), washed by centrifugation four times, and resuspended in PBS (2.9 × 10 6 cells / mL). The mast cell content in the suspension was 85-90% by mass, and the survival rate was confirmed to be 90% by mass or more by the toluidine blue (0.1% by mass, 50% by mass ethanol solution) staining method.
（マスト細胞からのヒスタミン遊離量の測定）
マスト細胞遊離液１．８ｍLを３７℃、予め１０分間のインキュベーション後、被検液（１０質量％DMSO・PBS溶液に溶解）０．１ｍLを加え、５分間インキュベートし、さらにcompound４８／８０（最終濃度１０μｇ／ｍL）０．１ｍLを加えて１５分間インキュベートした。氷冷により反応を停止し、５℃、１，２００ｒｐｍ、５分間遠心分離後、上清中のヒスタミン量をShoreの方法に準じて測定した。即ち、上清０．７ｍLに水１．４ｍＬ、１Ｎ NaOH溶液０．４ｍＬ、１質量％ｏ−フタルジアルデヒド−メタノール溶液０．１ｍＬを加えて４分間放置後、３Ｎ ＨＣｌ溶液０．２ｍＬで反応を停止させた。反応終了１０分後に５℃、３，０００ｒｐｍ、５分間遠心分離を行い、上清及び沈渣を得た。上清の蛍光は励起波長３６０ｎｍ、蛍光波長４５０ｎｍで測定した。また、マスト細胞に残存するヒスタミン量は沈渣にＰＢＳ２ｍＬを加え、超音波処理、さらに凍結融解法でマスト細胞からヒスタミンを遊離させ、上記と同様の方法で測定した。
(Measurement of histamine release from mast cells)
After incubating 1.8 ml of mast cell free solution at 37 ° C. for 10 minutes in advance, add 0.1 ml of test solution (dissolved in 10% by mass DMSO / PBS solution), incubate for 5 minutes, and further compound 48/80 (final concentration) 10 μg / mL) 0.1 mL was added and incubated for 15 minutes. The reaction was stopped by cooling with ice, and after centrifugation at 5 ° C., 1,200 rpm for 5 minutes, the amount of histamine in the supernatant was measured according to the method of Shore. That is, 1.4 mL of water, 0.4 mL of 1N NaOH solution, 0.1 mL of 1 mass% o-phthaldialdehyde-methanol solution was added to 0.7 mL of the supernatant, and the mixture was allowed to stand for 4 minutes, and then reacted with 0.2 mL of 3N HCl solution. Was stopped. Ten minutes after the completion of the reaction, centrifugation was performed at 5 ° C., 3,000 rpm, and 5 minutes to obtain a supernatant and a sediment. The fluorescence of the supernatant was measured at an excitation wavelength of 360 nm and a fluorescence wavelength of 450 nm. The amount of histamine remaining in the mast cells was measured by the same method as described above by adding 2 mL of PBS to the sediment, sonicating and then freeing histamine from the mast cells by freeze-thawing.
（結果）
結果は下記の表に示した。表中、各値は３回実施したものの平均±Ｓ．Ｅ．で表し、ヒスタミン遊離率において、♯♯は、自然遊離群との有意差ｐが０．０１未満であったことを示し、＊＊は、対照群との有意差ｐが０．０１未満であったことを示す。
マスト細胞からのヒスタミン自然遊離率は１３．７±０．５質量％であった。compound４８／８０をマスト細胞に処置すると、７９．９±０．４質量％ヒスタミンが遊離した。陽性対照薬のクロモグリク酸ナトリウムは５００μｇ/ｍＬ濃度でヒスタミン遊離率は２５．４±６．８質量％であった。スベリヒユ５０質量％エタノールエキスは５０及び５００μｇ／ｍＬの濃度でヒスタミン遊離を有意に抑制し、夫々の抑制率は４５．７±１２．７、６１．５±１０．３質量％であった。
(result)
The results are shown in the table below. In the table, each value is the mean ± S. E. In the histamine release rate, ## indicates that the significant difference p from the natural release group was less than 0.01, and ** indicates that the significant difference p from the control group was less than 0.01. It shows that.
The natural release rate of histamine from mast cells was 13.7 ± 0.5% by mass. When compound 48/80 was treated to mast cells, 79.9 ± 0.4 mass% histamine was released. The positive control sodium cromoglycate had a concentration of 500 μg / mL and a histamine release rate of 25.4 ± 6.8% by mass. Purslane 50% by mass ethanol extract significantly inhibited histamine release at concentrations of 50 and 500 μg / mL, and the respective inhibition rates were 45.7 ± 12.7 and 61.5 ± 10.3% by mass.
（試験例２）
２，４−ジニトロフルオロベンゼン（ＤＮＦＢ）誘発３相性皮膚反応試験に及ぼす影響を検討した。
スベリヒユ（Portulaca oleracea）の抗アレルギー作用をcompound４８／８０誘発マスト細胞からのヒスタミン遊離抑制を指標に検討し、その有効性が確認され、スベリヒユの機能性食品として開発する価値があるか否かを見極めることを目的に、in vivoにおける実験系で経口投与による抗アレルギー作用を検討した。
まず、Ｉ型アレルギーモデルのＤＮＦＢ誘発３相性皮膚反応試験を実験モデルとして用い、検討した。
また、被検体には、今後の製剤化の指標を得るために、スベリヒユの熱水抽出エキス（以下、ＰＯＨ−ｅｘｔ）と５０質量％エタノール抽出エキス（以下、ＰＯＥ−ｅｘｔ）を用いて行った。
(Test Example 2)
The effect of 2,4-dinitrofluorobenzene (DNFB) -induced triphasic skin reaction test was examined.
The anti-allergic effect of purslane (Portulaca oleracea) was examined using suppression of histamine release from compound 48 / 80-induced mast cells as an index, and its effectiveness was confirmed to determine whether it is worth developing as a functional food for purslane. For this purpose, we investigated the antiallergic effect of oral administration in an in vivo experimental system.
First, a DNFB-induced triphasic skin reaction test of a type I allergy model was used as an experimental model.
In addition, in order to obtain an index for formulation in the future, a hot water extract of purslane (hereinafter referred to as POH-ext) and a 50% by mass ethanol extract (hereinafter referred to as POE-ext) were used. .
ＤＮＦＢ誘発３相性皮膚反応試験は、Taharaらの方法に準じて行った。まず、Yamaguchiらの方法に準じて、BALB/c系雌性マウスに、マウスで産生したモノクローナル抗ＤＮＰ抗体（PCAによる抗体価 １：1,000,000）１０μｇ／ｍＬ含む生理食塩液０．５ｍＬを尾静脈内投与し、受動的に感作した。その２４時間後に、０．１５質量％ＤＮＦＢ／アセトン：オリーブオイル（３：１）２５μＬを両耳朶に塗布し、ＤＮＦＢ誘発３相性皮膚反応を惹起させた。両耳朶の厚さは反応惹起前、反応惹起１時間後［即時相；immediate phase response (ＩＰＲ)］、２４時間後［遅発相；late phase response（ＬＰＲ）］及び８日後［超遅発相；very late phase response (ｖＬＰＲ)］にdial thickness gauge（商品名：DIAL THICKNESS GAGE メーカー：Mitutoyo）を用いて測定し、耳朶浮腫率を算定した。
なお、各被検体は０．２質量％ＣＭＣ・Ｎａに懸濁し、反応惹起1時間前、ＬＰＲ測定１時間前及びｖＬＰＲ測定１時間前まで１日１回連日経口投与した。対照群には０．２質量％ＣＭＣ・Ｎａを、陽性対照群には０．２質量％ＣＭＣ・Ｎａに懸濁したプレドニソロン（prednisolone）を投与した。いずれの投与群もマウス体重１０ｇあたり０．２ｍＬの用量で経口投与した。
The DNFB-induced triphasic skin reaction test was performed according to the method of Tahara et al. First, in accordance with the method of Yamaguchi et al., BALB / c female mice were intravenously administered with 0.5 mL of physiological saline containing 10 μg / mL of monoclonal anti-DNP antibody (antibody titer 1: 1,000,000 by PCA) produced in mice. And sensitized passively. Twenty-four hours later, 25 μL of 0.15 mass% DNFB / acetone: olive oil (3: 1) was applied to both earlows to induce a DNFB-induced triphasic skin reaction. The thickness of the binaural ears was measured before the reaction was initiated, 1 hour after the reaction was initiated [immediate phase; immediate phase response (IPR)], 24 hours after [late phase; late phase response (LPR)], and 8 days after [very late phase] ; Very late phase response (vLPR)] using a dial thickness gauge (trade name: DIAL THICKNESS GAGE manufacturer: Mitutoyo) to calculate the earlobe edema rate.
Each subject was suspended in 0.2% by mass CMC · Na and orally administered once a day until 1 hour before the reaction was initiated, 1 hour before the LPR measurement and 1 hour before the vLPR measurement. The control group was administered with 0.2% by mass CMC · Na, and the positive control group was administered with prednisolone suspended in 0.2% by mass CMC · Na. All administration groups were orally administered at a dose of 0.2 mL per 10 g of mouse body weight.
（結果）
結果は表２に示した。表中、各値はマウス１０匹の耳の膨張率の平均±Ｓ．Ｅ．で表し、対照群との有意差ｐが、＊は０．０５未満、＊＊は０．０１未満であったことを示す。
マウス抗ＤＮＰモノクローナルＩｇＥ抗体で感作したマウスにＤＮＦＢを塗布すると、その１時間後（ＩＰＲ）には２０．３±１．２質量％、２４時間後（ＬＰＲ）には２１．１±１．４質量％、さらに誘発８日後（ｖＬＰＲ）には２６．９±０．８質量％の耳浮腫が認められた。ＰＯＥ−ｅｘｔ及びＰＯＨ−ｅｘｔ ２００、５００ｍｇ／ｋｇはＩＰＲ，ＬＰＲ及びｖＬＰＲの耳浮腫を有意に抑制した。陽性対照薬として用いたプレドニソロンは１０ｍｇ／ｋｇの用量でＩＰＲ、ＬＰＲ及びｖＬＰＲの耳浮腫を有意に抑制した。
(result)
The results are shown in Table 2. In the table, each value is the mean ± S. E. The significant difference p from the control group indicates that * is less than 0.05 and ** is less than 0.01.
When DNFB is applied to a mouse sensitized with a mouse anti-DNP monoclonal IgE antibody, 20.3 ± 1.2% by mass after 1 hour (IPR) and 21.1 ± 1. 24% after (LPR). Ear edema of 46.9% 0.8% by mass was observed at 4% by mass and 8 days after induction (vLPR). POE-ext and POH-ext 200, 500 mg / kg significantly suppressed IPR, LPR and vLPR ear edema. Prednisolone used as a positive control significantly suppressed IPR, LPR and vLPR ear edema at a dose of 10 mg / kg.
また、スベリヒユには副腎髄質で産生されるノルアドレナリンが含まれていることが指摘されていることから、８日後（ｖＬＰＲ）の耳浮腫測定後、副腎、胸腺及び脾臓を摘出し、対照群との湿重量／体重の変動を指標に、被検体の反復投与による各臓器に及ぼす影響について検討した。
その結果は表３に示した。表中、各値はマウス１０匹の湿重量／体重（％）±Ｓ．Ｅ．で表し、対照群との有意差ｐが、＊は０．０５未満、＊＊は０．０１未満であったことを示す。
被検体の反復投与による副腎、胸腺及び脾臓の湿重量への影響は認められなかった。陽性対照薬として用いたプレドニソロンの反復投与により胸腺及び脾臓の湿重量は、対照群のそれと比して有意に低下した。
In addition, since it has been pointed out that suburex contains norepinephrine produced in the adrenal medulla, 8 days later (vLPR) after ear edema measurement, the adrenal gland, thymus and spleen were removed and compared with the control group. Using the wet weight / body weight as an index, the effect of repeated administration of the subject on each organ was examined.
The results are shown in Table 3. In the table, each value is the wet weight / body weight (%) ± S. E. The significant difference p from the control group indicates that * is less than 0.05 and ** is less than 0.01.
There was no effect on the wet weight of the adrenal gland, thymus and spleen by repeated administration of the subject. Repeated administration of prednisolone used as a positive control drug significantly reduced the wet weight of thymus and spleen compared to that of the control group.
以上の結果より、ＰＯＥ−ｅｘｔ及びＰＯＨ−ｅｘｔはいずれもＩ型アレルギーであるＤＮＦＢ誘発３相性皮膚反応モデルにおいて有効性が認められ、被検体の反復投与による各臓器に及ぼす影響は認められなかった。ＰＯＥ−ｅｘｔは、試験例１においてcompound４８／８０誘発マスト細胞からのヒスタミン遊離抑制試験を行った結果、５０及び５００μｇ／ｍＬの濃度で有意にヒスタミン遊離を抑制したことから、その作用機序のひとつとしてマスト細胞からのヒスタミン遊離を抑制することにより抗Ｉ型アレルギー作用を有することが示唆された。 From the above results, POE-ext and POH-ext were both effective in the DNFB-induced triphasic skin reaction model, which is type I allergy, and no effect on each organ by repeated administration of the subject was observed. . Since POE-ext significantly inhibited histamine release at concentrations of 50 and 500 μg / mL as a result of a histamine release inhibition test from compound 48 / 80-induced mast cells in Test Example 1, POE-ext was one of its action mechanisms. As a result, it was suggested that anti-type I allergic action was obtained by suppressing histamine release from mast cells.
（試験例３）
塩化ピクリル誘発接触性皮膚炎（ＰＣ−ＣＤ）に及ぼす影響を検討した。
抗Ｉ型アレルギー作用が見出されたスベリヒユのin vivoにおける塩化ピクリル誘発接触性皮膚炎（ＰＣ−ＣＤ）試験を実験モデルとして用い、IV型アレルギー作用について検討した。
また、被検体には、スベリヒユの熱水抽出エキス（ＰＯＨ−ｅｘｔ）と５０質量％ＥｔＯＨ抽出エキス（ＰＯＥ−ｅｘｔ）を用いて行った。
(Test Example 3)
The effect on picric chloride-induced contact dermatitis (PC-CD) was examined.
An in vivo picricyl chloride-induced contact dermatitis (PC-CD) test of subtilis found to have an anti-type I allergic effect was used as an experimental model to examine the type IV allergic effect.
Moreover, the hot water extract (POH-ext) of purslane and 50 mass% EtOH extract (POE-ext) were used for the test object.
AshersonとPtakの方法に準じて行った。即ち、ＩＣＲ系雌性マウスの腹部を剪毛し、７質量％ＰＣ−エタノール溶液０．１ｍLを塗布して感作した。７日後に１質量％ＰＣ−オリーブオイル溶液０．０２ｍLを両耳介に塗布して接触性皮膚炎を誘発した。誘発前の耳介の厚さ、２４時間後の耳介の厚さから耳介浮腫率を算定した。ＰＣ−ＣＤの誘導期（induction phase）に及ぼす被検体の影響を検定するときは、誘発前及び誘発２４時間後にdial thickness gage（商品名：DIAL THICKNESS GAGE メーカー：Mitutoyo）を用いて、耳介の一定部位を３回測定し、その平均値と誘発直前の値から浮腫率を算出した。なお、被検体（０．２質量％ＣＭＣ・Naに懸濁）は感作１日前から１日１回７日間連日経口投与した。陽性対照薬のプレドニソロン（０．２質量％CMC・Naに懸濁）は感作当日から１日１回６日間連日経口投与して検定した。 This was performed according to the method of Asherson and Ptak. That is, the abdomen of an ICR female mouse was shaved and sensitized by applying 0.1 mL of a 7% by mass PC-ethanol solution. Seven days later, 0.02 mL of 1% by weight PC-olive oil solution was applied to both ears to induce contact dermatitis. The pinna edema rate was calculated from the pinna thickness before induction and the pinna thickness 24 hours later. When examining the influence of the subject on the induction phase of PC-CD, use the dial thickness gage (trade name: DIAL THICKNESS GAGE manufacturer: Mitutoyo) before and 24 hours after induction. A certain site was measured three times, and the edema rate was calculated from the average value and the value immediately before induction. The subject (suspended in 0.2% by mass CMC · Na) was orally administered once a day for 7 days once a day from 1 day before the sensitization. The positive control drug prednisolone (suspended in 0.2% by mass CMC · Na) was orally administered once daily for 6 days from the day of sensitization and assayed.
（結果）
ＰＣ−ＣＤの誘導期に及ぼすＰＯＥ−ｅｘｔ及びＰＯＨ−ｅｘｔの影響を検討した。その結果を表４に示した。表中、各値はマウス１０匹の耳の膨張率の平均±Ｓ．Ｅ．で表し、対照群との有意差ｐが、＊は０．０５未満、＊＊は０．０１未満であったことを示す。
ＰＣ−ＣＤを惹起させると６５．４±０．６質量％の耳浮腫が認められた。ＰＯＥ−ｅｘｔ及びＰＯＨ−ｅｘｔは２００、５００ｍｇ／ｋｇの用量でＰＣ−ＣＤによる耳浮腫を有意に抑制した。陽性対照薬のプレドニソロンは１０ｍｇ／ｋｇの用量でＰＣ−ＣＤによる耳浮腫を有意に抑制した。
(result)
The influence of POE-ext and POH-ext on the induction period of PC-CD was examined. The results are shown in Table 4. In the table, each value is the mean ± S. E. The significant difference p from the control group indicates that * is less than 0.05 and ** is less than 0.01.
When PC-CD was induced, 65.4 ± 0.6% by mass of ear edema was observed. POE-ext and POH-ext significantly suppressed ear edema due to PC-CD at doses of 200 and 500 mg / kg. The positive control drug prednisolone significantly suppressed PC-CD ear edema at a dose of 10 mg / kg.
また、スベリヒユには副腎髄質で産生されるノルアドレナリンが含まれていることが指摘されたことから、耳浮腫測定後、副腎、胸腺及び脾臓を摘出し、対照群との湿重量／体重の変動を指標に、被検体の反復投与による各臓器に及ぼす影響について検討した。
その結果は表５に示した。表中、各値はマウス１０匹の湿重量／体重（％）±Ｓ．Ｅ．で表し、＊＊は、対照群との有意差ｐが０．０１未満であったことを示す。
被検体の反復投与による副腎、胸腺及び脾臓の湿重量への影響は認められなかった。陽性対照薬として用いたプレドニソロンは、反復投与により胸腺及び脾臓の湿重量は対照群のそれと比して有意に低下した。
In addition, since it was pointed out that the purslane contained noradrenaline produced in the adrenal medulla, after measuring ear edema, the adrenal gland, thymus and spleen were removed and the change in wet weight / body weight with the control group was observed. As an index, the effect of repeated administration of the subject on each organ was examined.
The results are shown in Table 5. In the table, each value is the wet weight / body weight (%) ± S. E. ** indicates that the significant difference p from the control group was less than 0.01.
There was no effect on the wet weight of the adrenal gland, thymus and spleen by repeated administration of the subject. Prednisolone used as a positive control drug significantly reduced the wet weight of thymus and spleen compared to that of the control group by repeated administration.
以上の結果より、ＰＯＥ−ｅｘｔ及びＰＯＨ−ｅｘｔはいずれもIV型アレルギーであるＰＣ誘発接触性皮膚炎（ＰＣ−ＣＤ）試験において抗IV型アレルギー作用が認められた。また、本試験において、ＰＯＥ−ｅｘｔがＰＯＨ−ｅｘｔよりも、より抗IV型アレルギー作用活性が高いことが示唆された。 From the above results, POE-ext and POH-ext were all found to have an anti-IV type allergic effect in the PC-induced contact dermatitis (PC-CD) test, which is a type IV allergy. In this test, it was suggested that POE-ext has higher anti-IV type allergic activity than POH-ext.
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