JP2008127376A - 癒着防止剤 - Google Patents

Abstract

【課題】生体組織を縫合した術後における縫合部の癒着を低下させることができる、癒着防止剤を提供する。
【解決手段】癒着防止剤は、生体組織を接着させる生体組織接着剤とアルブミン溶液と、からなり、生体組織接着剤にアルブミン溶液を滴下等して適用することにより生体組織非接着面が生体組織に対し接着しないようにする。生体組織接着剤としては、Ｎ−ヒドロキシスクシンイミドにより活性エステル化されたクエン酸誘導体、リンゴ酸誘導体、酒石酸誘導体の１種または２種以上の組み合わせとアルブミン溶液とから構成する。術後の縫合部における生体組織の癒着を、例えば８．８３Ｎから３．０３Ｎへ低下させることができる。
【選択図】図２

Description

本発明は、生体組織に接着した生体組織接着剤にアルブミン溶液を滴下することにより生体組織非接着面が生体組織に対して接着しないようにした、癒着防止剤に関する。

外科手術における皮膚、臓器、血管などの創部の閉鎖や接合等において、従来、フィブリン系接着剤、シアノアクリレート系接着剤、ゼラチンをホルムアルデヒド又はレゾルシノールで架橋させたゼラチン系接着剤、ポリウレタン系接着剤などが知られており（特許文献１〜６参照）、生体組織用接着剤として臨床的に使用されている。しかしながら、これら従来の生体組織用接着剤は生体に対する毒性や接着強度の面において、その何れかに欠点をもっている。

特許文献７には、本発明者らによりクエン酸回路内に存在するトリカルボン酸であるクエン酸のカルボキシル基を電子吸引性基によって少なくとも１つ以上修飾した生体低分子誘導体が開示されている。また、特許文献８及び９には、上記生体低分子誘導体を硬化成分とすると共に、有機溶媒溶液若しくは水溶液又は水−有機溶媒混合溶液に溶解したコラーゲンやゼラチンからなる生分解性高分子を接着成分とした、生体内分解吸収性粘着性の医用材料が開示されている。これらの生体低分子誘導体や生体高分子を選択して溶媒中の濃度を制御することにより、高い接着強度及び高い生体適合性をもつ生体用の接着剤が得られるようになってきた。

特開平６−２１８０３５号公報 特開平７−１６３８６０号公報 特開平９−１０３４７９号公報 ＷＯ９８／５４２２４ 特開２０００−２９０６３３号公報 特表２０００−５０３８８３号公報 特開２００４−９９５６２号公報 特開２００４−２６１２２号公報 特開２００６−５１１２１号公報

特許文献９に開示されたアルブミンと生体由来の低分子誘導体とからなる二成分系の生体内分解吸収性粘着性医用材料によれば、適切な溶媒の選択と溶媒中のアルブミン濃度の制御により高い接着強度及び高い生体適合性をもつので、従来の接着剤の欠点を解消した毒性の無い接着強度の優れた接着剤が得られるようになった。
しかしながら、例えば、指などの屈筋腱断裂の治療においては、縫合部の癒着が治療成績を低下させる大きな要因の一つであり、縫合部の癒着が生じるのを防止することが重要な解決課題となっている。

本発明は、上記課題に鑑み、生体組織を縫合した術後における縫合部の癒着を低下させることができる癒着防止剤を提供することを目的としている。

本発明者等は、酒石酸誘導体（ＴＡＤ）とアルブミン(ＡＬＢ)からなる生体組織接着剤を開発し、その有用性と安全性について確認し、先に、平成１７年６月１４日付特許願２００５−１７４４１４において提案しているが、さらに生体組織に接着した生体組織接着剤に対して、アルブミン溶液を滴下することにより生体組織非接着面が生体組織に対し接着するのを回避できることを見出し、本発明に至った。

上記目的を達成するため、本発明の癒着防止剤は、生体組織を接着させる生体組織接着剤とアルブミン溶液と、からなり、生体組織接着剤にアルブミン溶液を適用することにより生体組織非接着面が生体組織に対し接着しないことを特徴とする
上記構成において、生体組織接着剤は、好ましくは、Ｎ−ヒドロキシスクシンイミドにより活性エステル化されたクエン酸誘導体、リンゴ酸誘導体、酒石酸誘導体の１種または２種以上の組み合わせとアルブミン溶液とから構成される
上記構成によれば、生体組織接着剤で生体組織を接着させ、アルブミン溶液を滴下又は塗布することにより生体組織非接着面が生体組織に対して接着しないようにすることができる。アルブミン溶液を生体組織接着剤に塗布することで、生体組織に接着していない接着剤の接着能を飽和、つまりゲル化させ、生体組織との接着能を失わせる。このため、本発明の癒着防止剤によれば、生体組織接着剤の余分な接着能を無くすことができ、効果的に癒着防止が可能である。

本発明の癒着防止剤によれば、術後の縫合部における生体組織の癒着を低下させることができ、肺、肝臓、血管縫合部などあらゆる生体組織に適用できる。

以下、本発明に係る癒着防止剤の好ましい実施の形態について説明する。
本発明の癒着防止剤は、生体組織接着剤とアルブミン溶液とから構成されている。この癒着防止剤は生体組織接着剤と共に用いることができる。
ここで、生体組織接着剤には、Ｎ-ヒドロキシスクシンイミドにより活性エステル化されたクエン酸誘導体、リンゴ酸誘導体、酒石酸誘導体の１種または２種以上の組み合わせと上記アルブミン溶液とからなるものが望ましい。アルブミンとしては、天然に存在するアルブミンタンパク質、ヒト血液由来アルブミン、ヒト遺伝子組み換えアルブミン、組み換えアルブミンタンパク質、アルブミンタンパク質の主要なフラグメント、化学的に改変されたアルブミンからなる群より選択されるタンパク質の何れかを用いることができる。

アルブミンの溶媒は、蒸留水、生理食塩水、無機塩の溶液、リン酸緩衝溶液等を用いることができる。これらの溶媒を使用することにより、癒着防止剤を付着させた周囲の生体組織を浸透圧、ｐＨの変化により壊死させないようにすることができる。

溶媒としては有機溶媒も使用することができる。有機溶媒としては、ジメチルスホキシド（ＤＭＳＯ）、Ｎ−Ｎ−ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）、乳酸、乳酸オリゴマー、ポリエチレングリコール、ポリプロピレングリコールの何れか、又はこれの２種以上の組み合わせを用いることができる。また、適宜比率の蒸留水と有機溶媒との混合溶媒を用いてもよい。

上記溶媒中のアルブミンの濃度は、ゲル化するように適宜に決めればよい。例えば、リン酸緩衝溶液のような酸の緩衝液を用いる場合には、その濃度又はｐＨを調整することによってゲル化を制御することができる。

上記生体組織接着剤としては、例えば、酒石酸誘導体とアルブミン溶液とからなる生体組織接着剤を用いることができる。クエン酸誘導体、リンゴ酸誘導体又は酒石酸誘導体（ＴＡＤ）は、カルポジイミドの存在下、クエン酸誘導体、リンゴ酸又は酒石酸（Ｃ_４Ｈ_６Ｏ_６）とＮ−ヒドロキシスクシンイミドを反応させることにより合成される。この酒石酸誘導体は、酒石酸の二つのカルボキシル基が、それぞれＮ−ヒドロキシスクシンイミドに修飾されている。アルブミン溶液は、上記の癒着防止剤と同様にして調製することができる。この場合、溶媒中のアルブミンの濃度は、生体組織接着剤の硬化時間に応じて適宜に決めればよい。例えば、リン酸緩衝溶液のような酸の緩衝液を用いる場合には、その濃度又はｐＨを調整することによって硬化時間を制御することができる。

酒石酸誘導体とアルブミン溶液との組成は、例えば、酒石酸誘導体１ｍｍｏｌと４４重量％のアルブミン溶液８００μリットルである。

次に、本発明の癒着防止剤の使用方法について説明する。
生体組織接着剤で生体組織を接着させ、その後でアルブミン溶液を生体組織に滴下又は塗布するなどして適用することで、生体組織に接着していない接着剤の接着能を飽和、つまりゲル化させ、生体組織との接着能を失わせることができる。このため、本発明の癒着防止剤によれば、生体組織接着剤の余分な接着能を無くすことができ、効果的に癒着を防止することができ、肺、肝臓、血管縫合部などのあらゆる生体組織に適用可能である。

具体的には、本発明の癒着防止剤は、例えば手指などの屈筋腱断裂の治療において、酒石酸誘導体とアルブミン溶液とからなる生体組織接着剤を屈筋腱の縫合部に塗布し、この縫合部における表面の酒石酸誘導体の未反応基を、アルブミン溶液で飽和させ、余分なアルブミンは洗浄する。術後、例えば３週間後においては、縫合部周囲に十分な量のゲルが残存しており、屈筋腱の癒着を効果的に予防することができる。このゲルの主成分はアルブミンである。

酒石酸誘導体とアルブミン溶液とからなる生体組織接着剤において、酒石酸誘導体の粉末はアルブミン溶液中に分散し、少しずつ溶けるという性質を有している。このため、生体組織に接着後も生体組織に接していない反対側の部分は、接着能を有している。アルブミン溶液をこの接着能を有している接着剤上に滴下することで、生体組織が接着しないという癒着防止効果が発現する。つまり、本発明の癒着防止剤は、生体吸収性ハイドロゲル製の隔壁として作用することにより癒着予防効果を発現する。この癒着防止剤は、屈筋腱の縫合部におけるコラーゲンの産生が増大する術後３〜４週間で徐々に吸収されながら残存するのが好ましく、癒着防止剤の各成分の濃度と塗布量を最適化して調整することができる。

以下、実施例によって本発明をさらに詳細に説明する。
実施例の癒着防止剤は、ヒト由来血清のアルブミン（シグマアルドリッチジャパン（株）製、Ａ１６５３）を、０．１ｍｏｌのリン酸ナトリウム緩衝液（ｐＨ６）を溶媒とし、４４重量％のアルブミン溶液となるように調製した。

生体組織接着剤は酒石酸誘導体とアルブミン溶液とからなり、このアルブミン溶液は癒着防止剤と同じ組成のアルブミン溶液を用いた。酒石酸誘導体（ＴＡＤ）の合成は以下のようにして行った。
酒石酸のＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）溶液（５重量％）中に氷冷下において２．１当量分のＮ−ヒドロキシスクシンイミドと縮合剤として２．２当量分の１−エチル−３−（３−ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド塩酸塩（Ｃ_８Ｈ_１７Ｎ_３・ＨＣｌ）とを加え、１時間撹拌し、その後、室温にて２時間撹拌を行った。
続いて、反応系の溶媒であるＤＭＦを減圧留去した。得られた残渣をアセトン−ｎ−ヘキサンの混合溶液を用いて、再結晶により精製を行い、酒石酸の二つのカルボキシル基が、それぞれＮ−ヒドロキシスクシンイミドに修飾された酒石酸誘導体（ＴＡＤ）を得た。合成した酒石酸誘導体は、粒度分布が１０〜１００μｍの粒状の白色結晶であった。

７羽の日本白色家兎の各左後肢に、上記癒着防止剤を用いた。具体的には、全身麻酔下に第ＩＩ、ＩＩＩ趾の基節部を展開してメスで深趾屈筋腱を切断し、５−０津下ループ針を用いて縫合した。癒着が起こりやすいように縫合部の滑走床を損傷し、更に足関節部分で屈筋腱を切断した。実施例では、７羽の各第ＩＩＩ趾の縫合部に接着剤として酒石酸誘導体ｌｍｍｏｌ（１０^−３ｍｏｌ）と４４重量％のアルブミン液８００μリットルとを混ぜて生体組織接着剤としたものを約１０ｍｇ塗布した後、該接着剤成分の一つである４４重量％のアルブミン溶液を別途用いて縫合部表面に滴下して、このアルブミン溶液で接着剤のゲル表面にある酒石酸誘導体の未反応基を飽和させ、余分なアルブミン溶液は洗浄した。

術後は足関節以下をギプスで固定し、３週後に中足骨部より採取し、縫合部の遠位で腱を切断してから力学試験を行った。
図１は、実施例における腱の力学試験を示す光学像である。図１に示すように、力学試験は、近位指節関節が動かないように固定部材３で固定して、腱が引き抜けるように縫合部１の遠位の腱（図１の遠位切断部）を切断し、縫合部１の近位にある腱を上部にある引張部４により牽引した。牽引速度は０．１ｍｍ／ｓとし、腱２が引き抜ける際の最大張力を測定することで、この最大張力を癒着剥離に要した張力とした。さらに、腱の治癒を確認する目的で、引き抜いた腱の両端を把持して０．１ｍｍ／ｓで牽引し、腱の破断張力を測定した。張力試験の測定結果はＭａｎｎ−Ｗｈｉｔｎｅｙ’ｓ Ｕ ｔｅｓｔを用いて統計学的に解析し、危険率1％未満を有意とした。

次に、実施例に対する比較例について説明する。
７羽の日本白色家兎の第ＩＩ趾を用い、縫合後に、実施例で用いた癒着防止剤を塗布しないこと以外は同様の処置を行い、実施例と同じ力学試験を行った。

図２は、実施例及び比較例において癒着剥離に要した張力の測定結果を示す図である。図１の縦軸は癒着剥離に要した張力（Ｎ）を示している。図２において、Ｐ＜０．０１は危険率が１％未満で統計学的に有意差があることを示している。図２から明らかなように、実施例及び比較例の癒着剥離に要した張力の平均値は、それぞれ、３．０３Ｎ、８．８３Ｎであり、統計学的に有意差があり、実施例においては、縫合部の癒着が小さいことが判明した。

図３は、実施例及び比較例における腱の破断張力の測定結果を示す図である。図３の縦軸は破断張力（Ｎ）を示している。図３において、Ｎ．Ｓ．は危険率が１％未満で統計学的に統計学的に有意差がないことを示している。図３から明らかなように、実施例及び比較例における腱の破断張力の平均値は、それぞれ、６．３２Ｎ、４．４４Ｎであり、統計学的に有意差がなく、腱の破断張力は実施例及び比較例において変化しないことが判明した。

本発明は、上記実施例に限定されることなく、特許請求の範囲に記載した発明の範囲内で種々の変形が可能であり、それらも本発明の範囲内に含まれることはいうまでもない。例えば、アルブミン溶液の溶媒やその濃度は適宜に調整できることはいうまでもない。

実施例における腱の力学試験を示す光学像である。 実施例及び比較例において癒着剥離に要した張力の測定結果を示す図である。 実施例及び比較例における腱の破断張力の測定結果を示す図である。

符号の説明

１：縫合部
２：腱
３：固定部材
４：引張部

Claims (2)

1. 生体組織を接着させる生体組織接着剤とアルブミン溶液とからなり、上記生体組織接着剤に上記アルブミン溶液を滴下することにより生体組織非接着面が生体組織に対して接着しないようにしたことを特徴とする、癒着防止剤。
2. 前記生体組織接着剤が、Ｎ−ヒドロキシスクシンイミドにより活性エステル化されたクエン酸誘導体、リンゴ酸誘導体、酒石酸誘導体の１種または２種以上の組み合わせと、アルブミン溶液とから構成されることを特徴とする、請求項１に記載の癒着防止剤。