JP2007505157A - CNS髄鞘再形成を促進する組換えヒトmAbを含む組成物および方法 - Google Patents
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Abstract
Description
本発明は、一般に神経生物学の分野、特に中枢神経系の機能および治療において役割を果たす、組換え生産される抗体の特定に関する。本発明はまた、例として、薬学的組成物、神経障害に関連する疾患の治療の方法、神経機能損傷における再生および修復の方法、スクリーニングアッセイおよびワクチンを含む、治療物質および方法に関する。
多発性硬化症(MS)は、通常は初期軸索損傷を伴わない、原発性脱髄によって病理学的に特徴付けられる慢性の、しばしば進行性の、炎症性中枢神経系(CNS)疾患である。多発性硬化症の病因および病原は不明である。多発性硬化症のいくつかの免疫学的特徴、およびある種の主要組織適合遺伝子複合体対立遺伝子との中程度の結びつきは、多発性硬化症が免疫介在性疾患であるという推測を喚起した。
本発明によれば、中枢神経系におけるニューロンの促進、刺激、再生および/または髄鞘再形成、および/または中枢神経系における脱髄の阻止または低減において活性を示すヒト抗体がクローン化され、単離された。特に、本発明は、特に乏突起膠細胞を含む、中枢神経系の構造および細胞に結合するそれらの能力によって特徴付けられる、IgMサブタイプの抗体およびそれらの単量体、またはそれらの混合物および/または活性フラグメントを含む、組換え自己抗体、特に組換えヒト自己抗体を使用して、中枢神経系(CNS)の軸索の髄鞘再形成を刺激する方法に関する。
本発明の方法および治療方法を述べる前に、本発明は特定の方法および記述する試験条件に限定されず、方法および条件はそれら自体が変化しうることが了解されるべきである。また、本発明の範囲は付属の特許請求の範囲によってのみ限定されるので、ここで使用する用語は特定実施形態を説明することだけを目的とするものであり、限定を意図しないことも了解されるべきである。
同じくここで使用するとき、本発明の抗体に関係する「rHIgM」および「rsHIgM」、「sHIgM22」および「LYM22」という用語は、ここでは等価とみなされるものとする。
対応表
記号 アミノ酸
1文字 3文字
Y Tyr チロシン
G Gly グリシン
F Phe フェニルアラニン
M Met メチオニン
A Ala アラニン
S Ser セリン
I Ile イソロイシン
L Leu ロイシン
T Thr トレオニン
V Val バリン
P Pro プロリン
K Lys リシン
H His ヒスチジン
Q Gln グルタミン
E Gln グルタミン酸
W Trp トリプトファン
R Arg アルギニン
D Asp アスパラギン酸
N Asn アスパラギン
C Cys システイン
すべてのアミノ酸残基配列は、ここでは、その左および右方向がアミノ末端からカルボキシ末端への従来の方向である式によって表わされていることに留意すべきである。さらに、アミノ酸残基配列の起始部または末端のダッシュは、1つまたはそれ以上のアミノ酸残基のさらなる配列へのペプチド結合を示すことに留意すべきである。上記の表は、ここで交互に出現しうる3文字表記と1文字表記を相関させて示している。
フェニルアラニン(PheまたはF) UUUまたはUUC
ロイシン(LeuまたはL) UUAまたはUUGまたはCUUまたはCUCまたはCUAまたはCUG
イソロイシン(IleまたはI) AUUまたはAUCまたはAUA
メチオニン(MetまたはM) AUG
バリン(ValまたはV) GUUまたはGUCまたはGUAまたはGUG
セリン(SerまたはS) UCUまたはUCCまたはUCAまたはUCGまたはAGUまたはAGC
プロリン(ProまたはP) CCUまたはCCCまたはCCAまたはCCG
トレオニン(ThrまたはT) ACUまたはACCまたはACAまたはACG
アラニン(AlaまたはA) GCUまたはGCGまたはGCAまたはGCG
チロシン(TyrまたはY) UAUまたはUAC
ヒスチジン(HisまたはH) CAUまたはCAC
グルタミン(GlnまたはQ) CAAまたはCAG
アスパラギン(AsnまたはN) AAUまたはAAC
リシン(LysまたはK) AAAまたはAAG
アスパラギン酸(AspまたはD) GAUまたはGAC
グルタミン酸(GluまたはE) GAAまたはGAG
システイン(CysまたはC) UGUまたはUGC
アルギニン(ArgまたはR) CGUまたはCGCまたはCGAまたはCGGまたはAGAまたはAGG
グリシン(GlyまたはG) GGUまたはGGCまたはGGAまたはGGG
トリプトファン(TrpまたはW) UGG
終結コドン UAA(オーカー)またはUAG(アンバー)またはUGA(オパール)
上記に明記するコドンはRNA配列に関するものであることが了解されるべきである。DNAについての対応コドンはUの代わりにTを有する。
非極性R基を有するアミノ酸
アラニン
バリン
ロイシン
イソロイシン
プロリン
フェニルアラニン
トリプトファン
メチオニン。
グリシン
セリン
トレオニン
システイン
チロシン
アスパラギン
グルタミン。
アスパラギン酸
グルタミン酸。
リシン
アルギニン
ヒスチジン(pH6.0で)
もう1つのグループは、フェニル基を有するアミノ酸でありうる:
フェニルアラニン
トリプトファン
チロシン。
グリシン 75
アラニン 89
セリン 105
プロリン 115
バリン 117
トレオニン 119
システイン 121
ロイシン 131
イソロイシン 131
アスパラギン 132
アスパラギン酸 133
グルタミン 146
リシン 146
グルタミン酸 147
メチオニン 149
ヒスチジン(pH6.0で) 155
フェニルアラニン 165
アルギニン 174
チロシン 181
トリプトファン 204。
−正電荷が維持されうるArgの代わりのLysおよびその逆;
−負電荷が維持されうるAspの代わりのGluおよびその逆:
−遊離−OHが維持できるThrの代わりのSer;および
−遊離NH2が維持できるAsnの代わりのGln
である。
本発明によれば、従来の分子生物学、微生物学および当技術分野の技術的範囲内の組換えDNA手法が使用できる。そのような手法は文献において詳細に説明されている。例えばSambrookら、「Molecular Cloning:A Laboratory Manual」(1989);「Current Protocols in Molecular Biology」Volumes I−III[Ausubel,R.M.編集(1994)];「Cell Biology:A Laboratory Handbook」Volumes I−III[J.E.Celis編集(1994)];「Current Protocols in Immunology」 Volumes I−III[Coligan,J.E.編集(1994)];「Oligonucleotide Synthesis」(M.J.Gait編集、1984);「Nucleic Acid Hybridization」[B.D.Hames & S.J.Higgins編集(1985)];「Transcription And Translation」[B.D.Hames & S.J.Higgins編集(1984)];「Animal Cell Culture」[R.I.Freshney編集(1986)];「Immobilized Cells And Enzymes」[IRL Press,(1986)];B.Perbal,「A Practical Guide to Molecular Cloning」(1984)参照。
A)前記神経調節物質の存在または活性が疑われる哺乳動物からの生物学的試料を、神経調節物質がその結合パートナーに結合することを可能にする条件下で、前記神経調節物質の結合パートナーと接触させること;および
B)前記試料からの前記神経調節物質と結合パートナーとの間で結合が起こったかどうかを検出すること
によって測定され、結合の検出は、試料中の神経調節物質の存在または活性を示す。
A.標識した神経調節物質試料を、前記神経調節物質に対する結合部位が疑われる哺乳動物からの生物学的試料と接触させること;
B.結合試験において、前記生物学的試料を前記標識神経調節物質の存在に関して検査すること;
を含み、前記標識神経調節物質の存在は、神経調節物質に対する結合部位を示している。
A.神経調節物質に対する受容体を有する試験細胞のコロニーを、神経調節物質を含む増殖培地で培養すること;
B.試験下の薬剤を添加すること;および
C.前記神経調節物質と前記試験細胞のコロニー上の受容体との反応性を測定すること
を含み、前記神経調節物質は、以下の特徴:
a) 髄鞘再形成を誘導すること;
b)神経組織、特に乏突起膠細胞に結合すること;
c)乏突起膠細胞によるCa++シグナル伝達を促進すること;および
d)グリア細胞の細胞増殖を促進すること
の1つまたはそれ以上を有する。
A.薬剤または作用物質を接種した観察可能な細胞試験コロニーを培養すること;
B.前記試験細胞コロニーから上清を採集すること;および
C.前記上清を前記神経調節物質の存在に関して検査し、前記神経調節物質のレベルの上昇または低下が、前記神経調節物質の活性を調節する薬剤の能力を示すこと
を含み、前記神経調節物質は、以下の特徴:
i) 髄鞘再形成を誘導すること;
ii)神経組織、特に乏突起膠細胞に結合すること;
iii)乏突起膠細胞によるCa++シグナル伝達を促進すること;および
iv)グリア細胞の細胞増殖を促進すること
の1つまたはそれ以上を有する。
A.以下の特徴:髄鞘再形成を誘導すること;神経組織に結合すること;乏突起膠細胞によるCa++シグナル伝達を促進すること;およびグリア細胞の細胞増殖を促進するもののうちの1つまたはそれ以上を有する神経調節物質の、検出可能に標識された特異的結合パートナーの所定の量;
B.他の試薬;および
C.前記キットの使用のための指示
を含む。
A.以下の特徴:髄鞘再形成を誘導すること;神経組織に結合すること;乏突起膠細胞によるCa++シグナル伝達を促進すること;およびグリア細胞の細胞増殖を促進すること、の1つまたはそれ以上を有する神経調節物質の所定の量;
B.前記神経調節物質の特異的結合パートナーの所定の量;
C.他の試薬;および
D.前記キットの使用のための指示
を含み、前記神経調節物質または前記特異的結合パートナーのいずれかは検出可能に標識されている。上記キットはどちらも、神経調節物質に対するポリクローナル抗体、神経調節物質に対するモノクローナル抗体、それらのフラグメントおよびそれらの混合物からなる群より選択される、標識した免疫化学的反応性成分を利用しうる。
ここで述べる試験の結果は、多発性硬化症(MS)、EAEおよび他の関連中枢神経系脱髄疾患への実際的な適用を有する。自発的中枢神経系型髄鞘再形成(「陰影斑」)のまれな例が多発性硬化症において認められ、時として末梢神経系(PNS)型髄鞘再形成が根入口帯近くの脱髄脊髄斑において認められる。乏突起膠細胞は、多発性硬化症における慢性斑の中心部ではまれであるが、それらが不全型髄鞘再形成に結びつく、斑の末梢部で増殖すると思われる。髄鞘再形成の過程は、多発性硬化症において臨床的に認められる自発的寛解および改善と相関しうる。これらの臨床所見は、多発性硬化症において新しいミエリン形成が可能であることを示している。TMEV誘導性脱髄を有するマウスにおいてmAbを使用することによって刺激された髄鞘再形成は、多発性硬化症における治療適用を有望視させる。
脱髄症状、例えば多発性硬化症の治療のために、本発明の活性成分を、(1)ステロイドなどの抗炎症薬;(2)ベタセロン;(3)コパキソン;または(4)ポリクローナルIgM;または(5)メチルプレドニゾロン、を含むがこれらに限定されない、多発性硬化症を治療するために使用される1つまたはそれ以上の薬学的組成物と共に投与しうる。投与は、同時(例えば本発明の活性成分と抗生物質の混合物の投与)、或いは順次行うことが可能である。
(マウス)
Jackson Laboratoriesから得た4−6週齢の雌性SJL/Jマウスに、10μl中2×105プラーク形成単位のダニエル株TMEVを大脳内注射した。感染動物に、TMEV感染後6ヶ月目に種々の濃度のrHIgM22またはPBSの単回500μl腹腔内(IP)注射を実施した。1つの群には、5週間後に追加の500μg用量のrHIgM22を投与した。2つの群のマウスには、毎週1回メチルプレドニゾロン2mgを投与した。各々の群について10匹のマウスを使用した。治療の5または10週間後に、脊髄における髄鞘再形成の定量的分析のために動物を供犠した。
(材料および方法)
(マウス)
Jackson Laboratoriesから得た4−6週齢の雌性SJL/Jマウスに、10μl中2×105プラーク形成単位のダニエル株TMEVを大脳内注射した。感染動物に、TMEV感染後6ヶ月目に種々の濃度でのrHIgM22またはPBSを単回500μlで腹腔内(IP)注射を実施した。1つの群には、5週間後に追加の500μg用量のrHIgM22を投与した。2つの群のマウスには、毎週2回メチルプレドニゾロン1mgを投与した。各々の群において10匹のマウスを使用した。治療の5または10週間後に、脊髄における髄鞘再形成の定量的分析のために動物を供犠した。
ヴァルデンストレームマクログロブリン血症を有する患者の血清からIgM抗体を単離し(sHIgM22と称する)、記述されているように配列決定した(Ciric,B.ら(2000)、Blood 97:321−323)。
(ベクターの構築)
(1)軽鎖フラグメント)
軽鎖の可変領域(VL)を、sHIgM22のソースである患者の末梢血白血球から単離した抗体mRNAに由来するTAクローン化VLフラグメントから増幅した。ヒトゲノムデータベース中のヒトIgM配列からの5’(−Nhe I部位、5’−UTRおよび人工リーダー配列(Tsujimoto,Y.ら(1984),Nucleic Acids Res.12:8407−8414)をこの配列に付加した。λ鎖(Cλ)の定常領域を、ヒトCλにおいて認められる付加的な3’−Avr II部位を有するヒト血液cDNAから増幅した。すべてのポリメラーゼ連鎖反応(PCR)は、sHIgM22において認められる1つの特定された形態の主要IgM種(軽鎖:IIと称する)(Ciric,B.ら(2000)、Blood 97:321−323)のために設計された以下のプライマーを使用することにより、標準的な方法によって実施した:
dhfrフラグメントを、ベクターpFR2000(Simonsen,C.ら(1983)、PNAS USA 80:2495−2499)から標準的なPCR反応によって増幅し、pCICλに連結した。pCICλのEagI消化によってdhfrと結合したHIgM22II 軽鎖を作製し、このフラグメントをsHIgM22 VHベクター(pDM 22BII)内のEag I部位に連結した。このpDM 22BIIベクターの遺伝子順序は、1)重鎖(ゲノム)、2)軽鎖(cDNA)および3)dhfrであった。重鎖および軽鎖遺伝子は同じ方向であったが、dhfrの方向は反対向きであった。
pDM 22BIIを電気穿孔法によって2×107のF3B6細胞にトランスフェクトした;Bgl IIによって線状化したpDM 22BII 10gを2×107のF3B6細胞と混合し、氷上で10分間、氷冷無血清RPMI 800lに再懸濁して、Bio−Rad Gene Pulser(Bio−Rad,Hercules,CA)を用いて960F/200Vで1回パルスし、30分間氷上にもどして、25cm2フラスコに移し、10%ウシ胎児血清を添加したRPMI 5mlを供給して、5%CO2中37℃でインキュベートした。48時間のインキュベーション後、培地を、MTX 0.2μMを含む新鮮培地に交換し、生存コロニーが出現するまでインキュベーションを続けた。これらのコロニーを24穴プレートに移し、1M MTX中で培養した。以下で述べるような集密増殖後、これらのクローンに関してELISAを実施し、さらなる操作のために陽性クローンを選択した。NUNC Maxisorp TMプレートを20μg/mlのヤギ抗ヒトIgA+IgM+IgG(H+L)(ICN Pharmaceuticals,Inc.,Colta Mesa,CA)で被覆した。1%ウシ血清アルブミン(BSA;Sigma−Aldrich Co.,St.Louis,MO)によるブロッキング工程後、sHIgM22BIIを発現するF3B6細胞からの上清を1:500、1:1000および1:2000希釈で3回プレートした。精製ヒトIgM(Organon Teknika Corp.,West Chester,PA)を標準対照として使用した。インキュベーションおよびリン酸緩衝食塩水(PBS)/1%ツイーン20による洗浄の後、アルカリホスファターゼ(Sigma−Aldrich Co.)に複合したモノクローナル抗ヒトIgMを1%BSA中1:5000希釈で適用した。p−ニトロフェニルホスフェート(Sigma−Aldrich Co.)を使用して陽性反応を検出し、Bio−Radマイクロプレートリーダーを用いて405nmで吸光度を読み取った。MTX濃度を、0.2μMから出発して2ヶ月間にわたって幾何学的に上昇させ、200iMで終了した。最大抗体産生クローンをELISAによって判定し、このクローンの培地を収集した。組換えsHIgM22BIIのIgM抗体を、PEG6000(Fluka,Buchs,Switzerland)沈殿およびH2Oに対する透析、それに続くSuperose 6カラムでのサイズ分画の方法によってこの培地から単離した。
脊髄の脱髄および髄鞘再形成の領域を、4%パラ−フェニレンジアミン染色プラスチック包埋横断切片を使用して視覚化した。脊髄全体の代表的試料を得るために、3連続1mmブロックごとに1μmの薄い切片を切り出した。これにより、頸部、胸郭、腰部および仙椎脊髄からの試料を代表する10−12の横断切片を生成した。等級付けるために、各々の脊髄切片を視覚的に4つの四分円に分け、その後各々の四分円を脱髄または髄鞘再形成病変の存在または不在に関して採点した。すべてのスライドガラスをコード化し、ブラインドで読み取った。すべてのスライドガラスを等級付けた後、データを投与群にまとめた。病変全体が基本的に修復されているとき、その病変は髄鞘再形成されていると判定した。部分的に髄鞘再形成された病変は陰性と採点した。髄鞘再形成のレベルを以下のように算定した:(髄鞘再形成を有する四分円の数/脱髄四分円の総数)×100。分類したデータを、カイ二乗統計分析を用いて評価した。
成体SJLマウス小脳の切片を先述のように調製した(Warrington,A.ら(1992)、J.Neurosci Res.33:338−353)。簡単に述べると、新鮮小脳を3%低融解温度アガロースに包埋し、No.2 Whatmanフィルターにのせて、300μmの矢状断切片に切断した。次に切片を48穴組織培養プレートに移した。N−(2−ヒドロキシエチル)ピペラジン−N−エタンスルホン酸(HEPES)緩衝Earle(登録商標)平衡塩類溶液(E/H、pH7.4)中で5%BSAと共に2−3時間インキュベートした後、E/H中で、静かに揺り動かしながら4℃で少なくとも3時間、1%BSA中10μg/mlの一次抗体で標識した。E/Hで洗浄した後、切片を適切な二次抗体で染色し、洗浄して、その後手早くPBS中4%パラホルムアルデヒドで固定した。スライドガラスを、2.5%1,4−ジアゾビシクロ−[2.2.2]−オクタン(DABCO,Sigma,St.Louis,MO)を含むMOWIOL(Aldrich Chemical,Milwaukee,WI)に封入し、エピ蛍光顕微鏡で観察した。混合一次グリア細胞および精製乏突起膠細胞を、Sprague−Dawleyラット新生児から先に記述されているように(Asakura,K.ら(1997)、J.Neurochem 68:2281−2290)調製した。細胞をポリ−D−リシン被覆またはポリ−L−オルニチンカバーガラスにプレートした。3%正常ヤギ血清を含むE/Hでブロッキングした後、非固定細胞に対して生細胞表面染色を4℃で15分間実施した。結合一次抗体(Ab)を蛍光複合二次Abで検出した。スライドガラスを封入し、上述したように観察した。
rHIgM22でトランスフェクトしたF3B6細胞を、ローラーボトルにおいて10μMメトトレキサート(MTX)を添加したRPMI/10%熱不活性化FBS/ペニシリン/ストレプトマイシン/グルタミン中で増殖させた。十字流ろ過(TFF)によって順化培地を0.2mg/mlタンパク質に濃縮した。濃縮順化培地をdH2Oに対して一晩透析し、IgM抗体を沈殿させた。ペレットを50mMトリス(トリズマ塩基)、pH8.0、150mM NaCl、0.5%w/vベタイン中に再懸濁した。再懸濁したペレットをSephacryl S−300(26/60)カラムに負荷し、20mMトリス、pH8.0、200mM NaCl、0.5%ベタインで溶出した。溶出プロフィールは、およそ2つの主要ピーク:HMW(約80%)およびLMW(約20%)から成った。HMWピークにおいて五量体IgMを認めた。プールGF分画を〜0.5mg/mlに濃縮し(A280)、20mMリン酸ナトリウム、200mM NaCl、pH8.0(最終製剤緩衝液)に対して透析した。
この試験では、単一有効成分またはメチルプレドニゾロンなどのステロイドとの組み合せとして抗体濃度のより大きな低下で有効用量が達成できるかどうかを判定するためにさらなる試験を実施した。その結果は、用量のさらに大きな低下および結果として生じる利益が可能であることを確認する(図3および4)。rHIgM22は、メチルプレドニゾロンと組み合わせたとき600μgの用量で脱髄を予防するのに有効である(図3)。さらにrHIgM22は、単独で使用したとき500ngという低用量で髄鞘再形成において有意に有効であり(図4)、またメチルプレドニゾロンと組み合わせて600μgの用量で投与したときさらに一層大きな髄鞘再形成能力を示した。
Claims (18)
- mAb sHIgM22(LYM22)、sHIgM46(LYM46)、ebvHIgM MSI19D10、Cb2BG8、MSI10E10、これらの混合物,これらの単量体、これらの活性フラグメント、これらに対する結合パートナーおよびこれらに由来する組換え抗体からなる群より選択されるヒトモノクローナル抗体、ならびに、薬学的に受容可能なキャリア、ビヒクルまたは希釈剤を含有する薬学的組成物であって、約500ng〜約600μgに相当するか、またはそれに等しい用量範囲での送達のために調製される、薬学的組成物。
- 前記用量が、約500ngである、請求項1に記載の薬学的組成物。
- 前記用量が、約600μgである、請求項1に記載の薬学的組成物。
- 前記用量が、約1.25μg/kg〜約2.5μg/kgの範囲に相当する、請求項1に記載の薬学的組成物。
- 前記用量が、約2.5μg/kgに相当する、請求項2に記載の薬学的組成物。
- 前記用量が、約1.25μg/kgの範囲に相当する、請求項3に記載の薬学的組成物。
- 前記ヒト組換え抗体が、mAb SHIgM22(LYM22)に相当するか、またはそれから誘導される、請求項1〜6のいずれかに記載の薬学的組成物。
- 前記ヒト組換え抗体が、mAb SHIgM46(LYM46)に相当するか、またはそれから誘導される、請求項1〜6のいずれかに記載の薬学的組成物。
- 前記組成物が、約2mgまでのステロイドをさらに含有し、該ステロイドが、メチルプレドニゾロンを含むか、またはそれに相当する、請求項1〜8のいずれかに記載の薬学的組成物。
- 前記組成物が、約1〜約2mgの前記ステロイドを含有する、請求項9に記載の薬学的組成物。
- 前記ステロイドが、メチルプレドニゾロンを含む、請求項9または10のいずれかに記載の薬学的組成物。
- 哺乳動物において中枢神経系軸索の髄鞘再形成を刺激する方法であって、該方法は、乏突起膠細胞を含む、中枢神経系内の構造および細胞に結合する能力によって特徴付けられる、モノクローナル抗体、またはこれらの混合物、単量体、活性フラグメント、またはこれらに由来する組換え抗体の有効量を該哺乳動物に投与する工程を包含し、請求項1〜11のいずれかに記載の組成物を投与する工程を包含する、方法。
- 哺乳動物において中枢神経系軸索の髄鞘再形成を刺激する方法であって、該方法は、中枢神経系内の構造および細胞に結合する能力によって特徴付けられる、ヒトモノクローナル抗体、またはこれらの混合物、単量体、活性フラグメント、またはこれらに由来する組換え抗体の有効量を該哺乳動物に投与する工程を包含し、請求項1〜11のいずれかに記載の組成物を投与する工程を包含する、方法。
- 請求項12または13のいずれかに記載の方法であって、該方法は、mAb sHIgM22(LYM22)、ebvHIgM MSI19D10、sHIgM46(LYM46)、ebvHIgM CB2b−G8、MSI10E10、これらの混合物,これらの単量体、これらの活性フラグメント、これらに対する結合パートナーおよびこれらに由来する組換え抗体からなる群より選択されるヒトモノクローナル抗体の投与を包含する、方法。
- 哺乳動物において中枢神経系の脱髄疾患を処置するか、または予防する方法であって、該方法は、乏突起膠細胞を含む、中枢神経系内の構造および細胞に結合して、中枢神経系軸索の髄鞘再形成を刺激する能力によって特徴付けられる、モノクローナル抗体、またはこれらの混合物、単量体、活性フラグメント、またはこれらに由来する組換え抗体の有効量を該哺乳動物に投与する工程を包含し、請求項1〜11のいずれかに記載の組成物を投与する工程を包含する、方法。
- 請求項15に記載の方法であって、該方法は、mAb sHIgM22(LYM22)、ebvHIgM MSI19D10、sHIgM46(LYM46)、ebvHIgM CB2b−G8、MSI10E10、これらの混合物,これらの単量体、これらの活性フラグメント、これらに対する結合パートナーおよびこれらに由来する組換え抗体からなる群より選択されるヒトモノクローナル抗体の投与を包含する、方法。
- 前記哺乳動物が、多発性硬化症を有するヒト、あるいは脱髄疾患または中枢神経系の疾患もしくは他の損傷もしくは機能障害を有するヒトまたは家畜である、請求項12〜16のいずれかに記載の方法。
- 投与の方法が、静脈内投与、腹腔内投与、鞘内投与、皮下投与、舌下投与、筋肉内投与、直腸投与、呼吸器投与および鼻咽頭投与から選択される、請求項12〜17のいずれかに記載の方法。
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