JP2007252368A5 - - Google Patents

Claims (15)

1. イムノグロブリン分子の相補性決定領域（ＣＤＲ）以外の領域に結合することができるイムノグロブリン結合タンパク質であって、配列番号１で規定されるスタフィロコッカス（Staphylococcus）プロテインＡのＣドメインの改変体または配列番号２で規定されるＺドメインの、（Ａ）１−３８位のリジン数に対する３９位以降のリジン数の割合が改変前の分子よりも増加していることにより、該タンパク質を自らのアミノ基を介して不溶性担体に固定化する際に、イムノグロブリンに対する親和性を保持するための配向性が改変前の分子に比べて向上している、および/または、（Ｂ）アスパラギン酸−プロリンの配列を排除することにより、酸性ｐＨ条件における化学的安定性が改変前の分子に比べて向上している、ことを特徴とする改変タンパク質。
2. 上記（Ａ）が、３９位以降におけるリジンへの置換、および／または、リジンを付加する改変、および／または、４，７，３５位に元からあるリジンを他のアミノ酸へ置換する改変による、請求項１に記載の改変タンパク質。
3. ３９位以降におけるリジンへの置換が、４０位、４３位、４６位、５３位、５４位および５６位のアミノ酸のうちの１個ないし６個がリジンに置換されていることである、請求項２に記載の改変タンパク質。
4. ４，７，３５位に元からあるリジンを他のアミノ酸へ置換する改変が、４位、７位および３５位のアミノ酸がアラニン、グルタミン、アスパラギン、バリン、セリン、スレオニン、ヒスチジン、チロシン、またはアルギニンに置換されていることである、請求項２に記載の改変タンパク質。
5. 上記（Ｂ）が、３７位のアスパラギン酸をアスパラギン酸以外のアミノ酸に置換する改変、または、３８位のプロリンをプロリン以外のアミノ酸に置換する改変による請求項１に記載の改変タンパク質。
6. ３７位のアスパラギン酸をアスパラギン酸以外のアミノ酸に置換する改変が、３７位のアミノ酸がアラニン、グルタミン酸、セリン、スレオニン、ロイシン、またはイソロイシンに置換されていることである、請求項５に記載の改変タンパク質。
7. ３８位のプロリンをプロリン以外のアミノ酸に置換する改変が、３８位のアミノ酸がアラニン、セリン、またはスレオニンに置換されていることである、請求項５に記載の改変タンパク質。
8. 配列番号３で規定されるアミノ酸配列を含むことを特徴とする請求項１に記載の改変タンパク質。
9. イムノグロブリン結合タンパク質の単位が２個ないし５個連結されており、その中に請求項１ないし８のいずれかに記載の改変タンパク質を含むことを特徴とする多量体。
10. 請求項１ないし９いずれかに記載の改変タンパク質、またはそれらを含む多量体をコードする核酸。
11. 請求項１０に記載の核酸を含む遺伝子発現系。
12. 親和性リガンドとして請求項１ないし９のいずれかに記載の改変タンパク質、またはそれらを含む多量体を含んで成るアフィニティクロマトグラフィ用担体。
13. 請求項１２に記載のアフィニティクロマトグラフィ用担体を含んで成るアフィニティカラム。
14. 請求項１３に記載のアフィニティカラムを用いることを特徴とするＩｇＧ、ＩｇＡおよび／またはＩｇＭのアフィニティ分離方法。
15. 請求項１ないし９のいずれかに記載の改変タンパク質、またはそれらを含む多量体を含んで成るプロテインチップ。