JP2007252349A - 化粧料の選択のためのｍｃ１ｒプロモーター領域のｓｎｐパターンの利用 - Google Patents
化粧料の選択のためのｍｃ１ｒプロモーター領域のｓｎｐパターンの利用 Download PDFInfo
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Abstract
【課題】 ＭＣ１ＲのＳＮＰを利用した、客観的に皮膚の色の発現形態を分類方法を提供し、以て、個々人に適した化粧料を選択する手段をも提供するべく、化粧料選択のための、ヒトメラノサイト刺激ホルモン１受容体をコードした核酸のプロモーター領域の一塩基置換のパターンの決定法を提供する。
【解決手段】 化粧料選択のための、ヒトメラノサイト刺激ホルモン１受容体をコードした核酸のプロモーター領域を含むＤＮＡをＰＣＲ反応により増幅し、この塩基配列を求めることを特徴とする、ヒトメラノサイト刺激ホルモン１受容体をコードした核酸のプロモーター領域のＤＮＡの一塩基置換のパターンを決定する。一塩基置換の位置は、ヒトメラノサイト刺激ホルモン１受容体をコードした核酸のプロモーター領域の塩基配列４９０位、４４５位及び２２６位であることを特徴とする。
【解決手段】 化粧料選択のための、ヒトメラノサイト刺激ホルモン１受容体をコードした核酸のプロモーター領域を含むＤＮＡをＰＣＲ反応により増幅し、この塩基配列を求めることを特徴とする、ヒトメラノサイト刺激ホルモン１受容体をコードした核酸のプロモーター領域のＤＮＡの一塩基置換のパターンを決定する。一塩基置換の位置は、ヒトメラノサイト刺激ホルモン１受容体をコードした核酸のプロモーター領域の塩基配列４９０位、４４５位及び２２６位であることを特徴とする。
Description
本発明は、化粧料の選択に好適なヒトメラノサイト刺激ホルモン１受容体をコードした核酸のプロモーター領域のＤＮＡの一塩基置換のパターンの決定法及びそれに使用するオリゴヌクレオチドに関する。
メラノサイト刺激ホルモンは、メラニンの産生や炎症に関わるホルモンであり、そのうちメラノサイト刺激ホルモン１は主としてメラニンの産生に関わっていると言われている。メラノサイト刺激ホルモン１受容体（以後、単にＭＣ１Ｒと称する場合がある。）はこの意味で、生体のメラニン産生と深く関わっていると言える。又、かかるＭＣ１ＲをコードしたＤＮＡについても、その塩基配列は明らかにされている。かかるＭＣ１Ｒの１３６塩基対からなるコーディング領域については、９２位のバリン、１６３位のアルギニン等に一塩基置換（以後、単にＳＮＰと称することもある。）が存在することが知られている（例えば、非特許文献１、非特許文献２、非特許文献３、非特許文献４）し、この様なＳＮＰの中には、肌色や、毛髪の色などに影響を及ぼすものも存することが知られている。しかしながら、ヒトメラノサイト刺激ホルモン１受容体をコードした核酸のプロモーター部分の塩基配列の一塩基置換の存在の有無、又、その利用については全く知られていないのが現状であった。
一方、皮膚についての個人差の大きさは、化粧品技術者の誰もが認識するところであり、この個人差を克服して、個人個人に適した化粧料を提供することは、化粧品技術者の誰もが見る夢であるが、どのように個人個人に適しているか否かを判別することについては、確固たる技術は存しておらず、経験によるところが少なくなかった。この意味で、客観的な化粧料の選択方法の開発が望まれていると言える。この様な化粧料の選択にヒトメラノサイト刺激ホルモン１受容体をコードした核酸のプロモーター領域を含むＤＮＡの一塩基置換のパターンが有用なツールになることは全く知られていなかったし、ヒトメラノサイト刺激ホルモン１受容体をコードした核酸のプロモーター領域のＤＮＡの一塩基置換の位置については全く知られていなかった。従って、どのような一塩基置換の組み合わせが存するかも全く知られていなかった。なお、本発明においては、コーディング部位の直前の部位をプロモーター１位と定義する。
Am.J.Hum.Genet.,2000,vol.66,1351-1361
Human Molecular Genetics,2000.vol.9(17),2531-2537
Journal of Cell Science,2002,vol.115,2349-2355
Human Molecular Genetics,2001,vol.10(16),1701-1708
本発明は、この様な状況下為されたものであり、ＭＣ１ＲのＳＮＰを利用した、客観的に皮膚の色の発現形態を分類方法を提供し、以て、個々人に適した化粧料を選択する手段をも提供するべく、化粧料選択のための、ヒトメラノサイト刺激ホルモン１受容体をコードした核酸のプロモーター領域の一塩基置換のパターンの決定法を提供することを課題とする。
この様な状況に鑑みて、本発明者らは、ＭＣ１ＲのＳＮＰを利用した、客観的に皮膚の色の発現形態を分類方法を提供し、以て、個々人に適した化粧料を選択する手段をも提供するべく、鋭意研究努力を重ねた結果、コーディング部位の直前の部位をプロモーター１位と定義した場合に於いて、該プロモーター領域の塩基配列４９０位、４４５位及び２２６位に一塩基置換が存在し、この一塩基置換の組み合わせパターンが化粧料の選択に大変有用であることを見いだし、発明を完成させるに至った。即ち、本発明は以下に示すとおりである。
（１）化粧料選択のための、ヒトメラノサイト刺激ホルモン１受容体をコードした核酸のプロモーター領域を含むＤＮＡをＰＣＲ反応により増幅し、この塩基配列を求めることを特徴とする、ヒトメラノサイト刺激ホルモン１受容体をコードした核酸のプロモーター領域のＤＮＡの一塩基置換のパターンの決定法。
（２）一塩基置換の位置が、ヒトメラノサイト刺激ホルモン１受容体をコードした核酸のプロモーター領域の塩基配列４９０位、４４５位及び２２６位であることを特徴とする、（１）に記載のヒトメラノサイト刺激ホルモン１受容体をコードした核酸のプロモーター領域のＤＮＡの一塩基置換のパターンの決定法。
（３）前記ＰＣＲ反応のために使用されるプライマーが、acccctgtcctccctgag（配列式１）、caggaaggcaggagacagag（配列式２）、tcagagatggacacctccag（配列式３）、gacacctcctggcatctacc（配列式４）のオリゴヌクレオチドであることを特徴とする、（１）又は（２）に記載のヒトメラノサイト刺激ホルモン１受容体をコードした核酸のプロモーター領域のＤＮＡの一塩基置換のパターンの決定法。
（４）前記ヒトメラノサイト刺激ホルモン１受容体をコードした核酸のプロモーター領域を含むＤＮＡをＰＣＲ反応により増幅に先立ち、予めコーディング領域とプロモーター領域とを含むＤＮＡをＰＣＲで増幅し、得られたＤＮＡを型にプロモーター領域を増幅することを特徴とする、（１）〜（３）何れか１項に記載のヒトメラノサイト刺激ホルモン１受容体をコードした核酸のプロモーター領域のＤＮＡの一塩基置換のパターンの決定法。
（５）ttgacagctgagttgctgct（配列式５）のオリゴヌクレオチドとaggaagagcccgtcagagat（配列式６）のオリゴヌクレオチドをプライマーとして、ヒトメラノサイト刺激ホルモン１受容体をコードした核酸のコーディング領域とプロモーター領域とを含むＤＮＡをＰＣＲで増幅することを特徴とする、（４）に記載のヒトメラノサイト刺激ホルモン１受容体をコードした核酸のプロモーター領域のＤＮＡの一塩基置換のパターンの決定法。
（６）（１）〜（５）何れか１項に記載のヒトメラノサイト刺激ホルモン１受容体をコードした核酸のプロモーター領域のＤＮＡの一塩基置換のパターンの決定法のためのプライマーとしての、acccctgtcctccctgag（配列式１）、caggaaggcaggagacagag（配列式２）、tcagagatggacacctccag（配列式３）又はgacacctcctggcatctacc（配列式４）の塩基配列のオリゴヌクレオチド。
（７）（４）又は（５）に記載の、ヒトメラノサイト刺激ホルモン１受容体をコードした核酸のコーディング領域とプロモーター領域とを含むＤＮＡをＰＣＲで増幅する為のプライマーとしての、ttgacagctgagttgctgct（配列式５）のオリゴヌクレオチドとaggaagagcccgtcagagat（配列式６）のオリゴヌクレオチド。
（１）化粧料選択のための、ヒトメラノサイト刺激ホルモン１受容体をコードした核酸のプロモーター領域を含むＤＮＡをＰＣＲ反応により増幅し、この塩基配列を求めることを特徴とする、ヒトメラノサイト刺激ホルモン１受容体をコードした核酸のプロモーター領域のＤＮＡの一塩基置換のパターンの決定法。
（２）一塩基置換の位置が、ヒトメラノサイト刺激ホルモン１受容体をコードした核酸のプロモーター領域の塩基配列４９０位、４４５位及び２２６位であることを特徴とする、（１）に記載のヒトメラノサイト刺激ホルモン１受容体をコードした核酸のプロモーター領域のＤＮＡの一塩基置換のパターンの決定法。
（３）前記ＰＣＲ反応のために使用されるプライマーが、acccctgtcctccctgag（配列式１）、caggaaggcaggagacagag（配列式２）、tcagagatggacacctccag（配列式３）、gacacctcctggcatctacc（配列式４）のオリゴヌクレオチドであることを特徴とする、（１）又は（２）に記載のヒトメラノサイト刺激ホルモン１受容体をコードした核酸のプロモーター領域のＤＮＡの一塩基置換のパターンの決定法。
（４）前記ヒトメラノサイト刺激ホルモン１受容体をコードした核酸のプロモーター領域を含むＤＮＡをＰＣＲ反応により増幅に先立ち、予めコーディング領域とプロモーター領域とを含むＤＮＡをＰＣＲで増幅し、得られたＤＮＡを型にプロモーター領域を増幅することを特徴とする、（１）〜（３）何れか１項に記載のヒトメラノサイト刺激ホルモン１受容体をコードした核酸のプロモーター領域のＤＮＡの一塩基置換のパターンの決定法。
（５）ttgacagctgagttgctgct（配列式５）のオリゴヌクレオチドとaggaagagcccgtcagagat（配列式６）のオリゴヌクレオチドをプライマーとして、ヒトメラノサイト刺激ホルモン１受容体をコードした核酸のコーディング領域とプロモーター領域とを含むＤＮＡをＰＣＲで増幅することを特徴とする、（４）に記載のヒトメラノサイト刺激ホルモン１受容体をコードした核酸のプロモーター領域のＤＮＡの一塩基置換のパターンの決定法。
（６）（１）〜（５）何れか１項に記載のヒトメラノサイト刺激ホルモン１受容体をコードした核酸のプロモーター領域のＤＮＡの一塩基置換のパターンの決定法のためのプライマーとしての、acccctgtcctccctgag（配列式１）、caggaaggcaggagacagag（配列式２）、tcagagatggacacctccag（配列式３）又はgacacctcctggcatctacc（配列式４）の塩基配列のオリゴヌクレオチド。
（７）（４）又は（５）に記載の、ヒトメラノサイト刺激ホルモン１受容体をコードした核酸のコーディング領域とプロモーター領域とを含むＤＮＡをＰＣＲで増幅する為のプライマーとしての、ttgacagctgagttgctgct（配列式５）のオリゴヌクレオチドとaggaagagcccgtcagagat（配列式６）のオリゴヌクレオチド。
本発明によれば、ＭＣ１ＲのＳＮＰを利用した、客観的に皮膚の色の発現形態を分類方法を提供し、以て、個々人に適した化粧料を選択する手段をも提供するべく、化粧料選択のための、ヒトメラノサイト刺激ホルモン１受容体をコードした核酸のプロモーター領域の一塩基置換のパターンの決定法を提供することができる。
本発明の中心部分は、ＭＣ１Ｒをコードする核酸のプロモーター部分にＳＮＰが存在し、該ＳＮＰの種類により、発現系である皮膚の色が影響を受けていること見いだしたこと、該ＳＮＰより、１）４９０位Ｃ、４４５位Ｇ、２２６位Ａ（以後、単にＣＧＡと記す場合もある）／４９０位Ｃ、４４５位Ｇ、２２６位Ａと２）４９０位Ｃ、４４５位Ｇ、２２６位Ａ／４９０位Ｔ、４４５位Ａ、２２６位Ｔ（以後、単にＴＡＴと記す場合もある）と３）４９０位Ｔ、４４５位Ａ、２２６位Ｔ／４９０位Ｔ、４４５位Ａ、２２６位Ｔの３分類とすることができ、この３分類の何れかに分類することができ、ＣＧＡの個数が多いほど定常的なメラニン産生能が高まり、ＴＡＴの個数が多いほど刺激に反応して産生されることを見いだしたことである。
前記ＳＮＰを検出するに当たり、人よりＤＮＡを抽出し、ＭＣ１Ｒコード部分を増幅することが好ましいが、ヒトＭＣ１Ｒの塩基配列に関しては、既に公知であり（例えば、GenBank Accession No.NM_002386参照）、この配列を元にプライマーを常法に従って設計し、ＰＣＲにかけて増幅することができる。この様なプライマーとしては、ttgacagctgagttgctgct（配列式５）のオリゴヌクレオチドとaggaagagcccgtcagagat（配列式６）のオリゴヌクレオチドとプライマーとして用いることが好適に例示できる。かかるオリゴヌクレオチドは、ＤＮＡシンセサイザーなどを用いて製造することもできるし、オリゴヌクレオチドの合成を受託する受託業者に合成を依頼して入手することもできる。又、ＤＮＡを抽出するためのサンプルとしては、口腔内粘膜細胞、毛髪、眉毛などが例示でき、眉毛をサンプルとして、市販のＤＮＡ抽出キットを用いて抽出することが好ましく例示できる。この様な抽出キットとしては、例えば、ISO HAIR kit（ニッポンジーン社製）等が好適に例示できる。斯くして、増幅されたＭＣ１ＲのＤＮＡより、ＳＮＰを検出するわけであるが、かかる検出には、通常用いられている方法が例示でき、例えば、ＭＣ１Ｒ遺伝子の全塩基配列を決定しても良いし、１塩基のみを指標にして解析しても良い。１塩基だけを指標として解析する方法としては、例えば、ＲＰＡ（Rnase Protection assay）法、ＤＧＧＥ（denaturing gradient gel electrophoresis）法、ＳＳＣＰ（single strand conformation polymorphism）法、ＭＡＳＡ（mutant-allele-specific amplification）法、ＡＳＯ（allele-specific-oligonucleotide）ハイブリダイゼーション法、オリゴヌクレオチドアレイ法などが好ましく例示できる。この一例を以下に示す。
増幅したＭＣ１ＲのＤＮＡはシークエンス反応に付す。即ち、ABI BigDye Terminator Cycle Sequencing kit(Ver.3.1 アプライドバイオ社製)を用い、プライマーはacccctgtcctccctgag（配列式１）、caggaaggcaggagacagag（配列式２）、tcagagatggacacctccag（配列式３）及びgacacctcctggcatctacc（配列式４）の４種を使用した。これらのオリゴヌクレオチドも配列式５乃至は配列式６のオリゴヌクレオチドと同様に入手することができる。これらはオリゴヌクレオチドは文献未記載の配列である。反応条件は９８℃５分、９８℃１０秒―５０℃５分―６０℃４分を２５サイクルで行った。シークエンス反応物をＤｙｅＥＸＴＭ Ｓｐｉｎ Ｋｉｔ（キアゲン社製）を用いてカラムによる未反応物の除去による精製を行った。シークエンス反応物をＡＢＩ ＰＲＩＳＭ ３１００ Ｇｅｎｅｔｉｃ Ａｎａｌｙｚｅｒ（アプライドバイオ社製）を用いて配列の解読をし、精度よく解読されたプロモーター領域７１８ｂｐについて、ＳｅｑＳｃａｐｅ Ｖｅｒ．２．（アプライドバイオ社製）を用いてＳＮＰ判定を行った。
以下に実施例を挙げて、本発明について更に詳細に説明を加えるが、本発明がかかる実施例にのみ限定されないことは言うまでもない。
前記の手技を用いてボランティアのパネラー２４５名を対象に、ＭＣ１Ｒのコーディング領域の塩基配列を求めた。この結果、前記のＣＧＡ／ＣＧＡ、ＣＧＡ／ＴＡＴ及びＴＡＴ／ＴＡＴの３種のＳＮＰの組み合わせが存することがわかった。２４５名の男女（年齢２０〜５５歳）のパネラーより採取した眉毛より求めた、ＳＮＰの組み合わせは表１に示すとおりであった。
又、既に知られているＭＣ１Ｒ遺伝子のコーディング領域１６３位のＳＮＰの組み合わせとの相関性を見てみると以下の表２に示すようになる。即ち、コーディング領域アミノ酸Gln/Glnとプロモーター部TAT/TATが、アミノ酸Gln/ArgとCGA/TATが、アミノ酸Arg/ArgとCGA/CGAとが非常に相関していることがわかる。コーディング領域のＳＮＰの発現への影響を除去するために、ＣＧＡ／ＴＡＴについては、Ｇｌｎ／Ａｒｇの人だけを、ＣＧＡ／ＣＧＡについては、Ａｒｇ／Ａｒｇの人だけを解析対象とした。
この様な前提のもとに、ＣＧＡ／ＣＧＡのタイプの人と、ＣＧＡ／ＴＡＴタイプの人の肌の特性の比較を行った。
（１） 顔色 (ITA 値）をコニカミノルタ社製の色彩色差計を用いて計測した。結果を表３に示す。TAT／OGAタイプの人の方がＣＧＡ／OGAタイプの人よりＩＴＡ値が低く、顔の色が定常的に黒いことがわかる。TATパターンのＳＮＰ組み合わせを持つことにより、定常的な紫外線刺激に対するメラニン産生能が高いことが示唆される。
（１） 顔色 (ITA 値）をコニカミノルタ社製の色彩色差計を用いて計測した。結果を表３に示す。TAT／OGAタイプの人の方がＣＧＡ／OGAタイプの人よりＩＴＡ値が低く、顔の色が定常的に黒いことがわかる。TATパターンのＳＮＰ組み合わせを持つことにより、定常的な紫外線刺激に対するメラニン産生能が高いことが示唆される。
（２）スキンタイプの鑑別を行った。スキンタイプは照射ドーズを振って、紫外線を照射し、最少紅斑量を求めることにより、最少紅斑量の多少と、照射後２４時間、４８時間、９６時間の皮膚反応より、下記の基準に従って、スキンタイプを決定した。ＳＮＰの組み合わせとスキンタイプの関係を表４に示す。これよりＴＡＴ／ＣＧＡの人はＣＧＡ／ＣＧＡタイプの人より、スキンタイプ３の性質を有する蓋然性が高いことがわかる。
スキンタイプ１：照射後２４時間以内に紅斑が出現し、９６時間では黒化を経ずに紅斑が消衰する。最少紅斑量は少ない。
スキンタイプ２：照射後２４時間以内に紅斑が出現し、４８時間で黒化に転じ、９６時間では赤みがなく、黒くなる。最少紅斑量は多くも少なくもない。
スキンタイプ３：紅斑が出現せずに、そのまま黒化する。最少紅斑量は多い。
スキンタイプ１：照射後２４時間以内に紅斑が出現し、９６時間では黒化を経ずに紅斑が消衰する。最少紅斑量は少ない。
スキンタイプ２：照射後２４時間以内に紅斑が出現し、４８時間で黒化に転じ、９６時間では赤みがなく、黒くなる。最少紅斑量は多くも少なくもない。
スキンタイプ３：紅斑が出現せずに、そのまま黒化する。最少紅斑量は多い。
（３）これらのパネラーについて、黒子の存在状況を第三者によって観察した。観察の基準は、距離１００ｃｍで顔を観察して、目立つ黒子の数を計数し、１０個未満の場合には「黒子が少ない」に、１０以上２０未満の場合に「黒子が中程度」に、２０個以上の場合には「黒子が多い」に分類した。客観性を維持するために、観察者は３名とし、観察結果が割れた場合には多数の方に分類した。結果を表５に示す。これより、黒子のたくさん存在する蓋然性は、ＴＡＴ／ＣＧＡの人の方がＣＧＡ／ＣＧＡタイプの人より高いことがわかる。
これらのデータより、ＴＡＴのＳＮＰの組み合わせを有することにより、ＵＶ刺激を受けて、メラニン産生を亢進させやすい基質を有するようになることが推察された。このこと検証する為に、更に、コーディング１６３位アミノ酸Gln/Argの人について、ＣＧＡ／ＣＧＡ、ＣＧＡ／ＴＡＴ及びＴＡＴ／ＴＡＴについての解析を同様に行った。
（４）腕の色についての解析
紫外線が当たりにくく、光の刺激のないところでの肌の色に代替する、上腕内側部の色を顔の色と同様に測定し、比較した。結果を表６に示す。ＣＧＡ／ＣＧＡとＴＡＴ／ＴＡＴの間では、Ｐ＝０．０３６８で有意差が認められた。これより、ＣＧＡのＳＮＰの組み合わせを有することにより、刺激を受けない基底状態でのメラニン産生が亢進する基質を有しやすいことがわかる。
紫外線が当たりにくく、光の刺激のないところでの肌の色に代替する、上腕内側部の色を顔の色と同様に測定し、比較した。結果を表６に示す。ＣＧＡ／ＣＧＡとＴＡＴ／ＴＡＴの間では、Ｐ＝０．０３６８で有意差が認められた。これより、ＣＧＡのＳＮＰの組み合わせを有することにより、刺激を受けない基底状態でのメラニン産生が亢進する基質を有しやすいことがわかる。
（５）スキンタイプの解析
（２）と同様にスキンタイプの解析を行った。結果を表７に示す。これより、（２）と同様にＴＡＴのＳＮＰの組み合わせが紫外線に反応してメラニンを作りやすい形質を受け継ぐことがわかる。
（２）と同様にスキンタイプの解析を行った。結果を表７に示す。これより、（２）と同様にＴＡＴのＳＮＰの組み合わせが紫外線に反応してメラニンを作りやすい形質を受け継ぐことがわかる。
（６）シミの解析
（３）黒子の黒子の解析の手技と同様の手技で観察対象をシミにして、同様にシミの判定を行った。判定基準は次に示すものを用いた。即ち、観察の基準は、距離１００ｃｍで顔を観察して、目立つシミの数を計数し、シミが見あたらない場合は「シミスコア１」に、１個以上１０個未満の場合には「シミスコア２」に、１０以上１５未満の場合に「シミスコア３」に、１５個以上２０個未満の場合には「シミスコア４」に、２０個以上の場合には「シミスコア５」に分類した。結果を表８に示す。これより、ＣＧＡ／ＣＧＡ＞ＣＧＡ／ＴＡＴ＞ＴＡＴ／ＴＡＴの順でシミが重篤になることがわかる。ＣＧＡのＳＮＰ組み合わせを有することは、シミを重篤化させやすい形質を引き継ぐ傾向にあることがわかる。
（３）黒子の黒子の解析の手技と同様の手技で観察対象をシミにして、同様にシミの判定を行った。判定基準は次に示すものを用いた。即ち、観察の基準は、距離１００ｃｍで顔を観察して、目立つシミの数を計数し、シミが見あたらない場合は「シミスコア１」に、１個以上１０個未満の場合には「シミスコア２」に、１０以上１５未満の場合に「シミスコア３」に、１５個以上２０個未満の場合には「シミスコア４」に、２０個以上の場合には「シミスコア５」に分類した。結果を表８に示す。これより、ＣＧＡ／ＣＧＡ＞ＣＧＡ／ＴＡＴ＞ＴＡＴ／ＴＡＴの順でシミが重篤になることがわかる。ＣＧＡのＳＮＰ組み合わせを有することは、シミを重篤化させやすい形質を引き継ぐ傾向にあることがわかる。
以上の解析結果より、ＭＣ１Ｒのプロモーター領域にＣＧＡのＳＮＰ組み合わせによって発現される形質は、定常的にメラニンの産生が亢進している形質で光などの刺激の非存在下でもメラニン産生が亢進され、肌の色が黒くなりやすい形質となる。この様な形質に対しては普段の肌の手入れにおいて、常に美白作用を有する化粧料を使用することが好ましい。取り分け、美白作用に於いては、メラニン産生抑制作用のみならず、例えば、メラノサイトのデンドライトの伸長を抑制する成分や、メラニン顆粒を分解する成分を併せて含有させ、メラニンの産生を多面的に抑制することが好ましい。メラニン産生抑制成分としては、アルブチン、トラネキサム酸、アスコルビン酸リン酸エステル、アスコルビン酸グルコシド或いはこれらの塩等が好ましく例示でき、デンドライトの伸長を抑制する成分としては、センタウレイジンやメチルオフィオポゴナノンＢ等が好ましく例示でき、メラニン産生抑制成分としてはイソフラバノン類が好ましく例示できる。これらの成分の含有量は、それぞれ０．１〜５質量％が好ましい。ＴＡＴのＳＮＰ組み合わせによって発現される形質は光に敏感に反応して、メラニンの産生を亢進させる形質であり、この様な形質に於いては、光の刺激を生体が受けないことが肝要であり、二酸化チタンや酸化亜鉛を配合した紫外線防護化粧料で紫外線からの防護に注力するとともに、光刺激によってメラニンの生じるのを速やかに抑制するための美白化粧料を使用することが好ましい。この場合、メラニンの生成抑制については、定常的にはメラニンの産生は高いわけではないので、多面的な抑制は要しない。この様な基準で化粧料を選択し、勧めることで、個々人に適合して、白く美しい肌を実現し、これを維持することができる。総括すれば、ＣＧＡ／ＣＧＡに分類される人には定常的にメラニンの生成を抑制する化粧料を勧め、ＣＧＡ／ＴＡＴに分類される人には、定常的にメラニンの生成を抑制する化粧料と、紫外線防護化粧料とを併用することを勧め、ＴＡＴ／ＴＡＴに分類される人には紫外線防護化粧料の定常的に使用することを勧めることが好ましいと言える。
＜試験例１＞
前記の結果を基に、本発明のＳＮＰパターンを用いた使用試験を行った。パネラーを用いて使用テストを行った。パネラーは１群２０名とし、本発明の皮膚の色の発現形態の分類法と、それを利用した化粧料の選択方法群（本発明群）と、対照としての自由選択群（対照群）の２群の計４０名（男性、２５〜５５歳）を用意した。各パネラーは試験開始前に眉毛を採取され、この眉毛より、前述の方法でＭＣ１Ｒのプロモーター領域のＳＮＰの組み合わせを判定しておいた。４０人のパネラーはパネラー属性に差が生じないように又、化粧料としては、各人２種を選択してもらう試験設計とし、１種として紫外線防護化粧料を「紫外線防護化粧料１」と「紫外線防護化粧料２」（プラシーボ）の何れかを、残る１種として、美白化粧料を「美白化粧料１」（多面的メラニン産生抑制効果を有する）と「美白化粧料２」（メラニン産生抑制剤としてアルブチンのみを含有）の何れかを選択してもらった。選択に際しては、本発明群は、ＣＧＡ／ＣＧＡの人は紫外線防護化粧料２と美白化粧料１を、ＣＧＡ／ＴＡＴの人は、紫外線防護化粧料１と美白化粧料１を、ＴＡＴ／ＴＡＴの人は紫外線防護化粧料１と美白化粧料２を渡した。対照群は、個人の選択に任せて紫外線防護化粧料と美白化粧料とを選択してもらった。提供した化粧品以外の化粧品の使用は控えてもらった。選択した化粧料は２８日間連日使用してもらった。試験開始前と２８日間の連用試験の終了後に肌の色を前述の方法と同じ方法で測定した。試験前のＩＴＡ値から試験後のＩＴＡ値を減じたΔＩＴＡを算出し、各群ごとに平均と偏差を求めた。結果を表１３に示す。これより、本発明のＳＮＰパターン決定法に基づいた、皮膚の色の発現形態の分類法を利用した化粧料の選択方法によって、化粧料を選択した群の方がΔＩＴＡの値が大きく、肌色改善効果に優れることがわかる。
前記の結果を基に、本発明のＳＮＰパターンを用いた使用試験を行った。パネラーを用いて使用テストを行った。パネラーは１群２０名とし、本発明の皮膚の色の発現形態の分類法と、それを利用した化粧料の選択方法群（本発明群）と、対照としての自由選択群（対照群）の２群の計４０名（男性、２５〜５５歳）を用意した。各パネラーは試験開始前に眉毛を採取され、この眉毛より、前述の方法でＭＣ１Ｒのプロモーター領域のＳＮＰの組み合わせを判定しておいた。４０人のパネラーはパネラー属性に差が生じないように又、化粧料としては、各人２種を選択してもらう試験設計とし、１種として紫外線防護化粧料を「紫外線防護化粧料１」と「紫外線防護化粧料２」（プラシーボ）の何れかを、残る１種として、美白化粧料を「美白化粧料１」（多面的メラニン産生抑制効果を有する）と「美白化粧料２」（メラニン産生抑制剤としてアルブチンのみを含有）の何れかを選択してもらった。選択に際しては、本発明群は、ＣＧＡ／ＣＧＡの人は紫外線防護化粧料２と美白化粧料１を、ＣＧＡ／ＴＡＴの人は、紫外線防護化粧料１と美白化粧料１を、ＴＡＴ／ＴＡＴの人は紫外線防護化粧料１と美白化粧料２を渡した。対照群は、個人の選択に任せて紫外線防護化粧料と美白化粧料とを選択してもらった。提供した化粧品以外の化粧品の使用は控えてもらった。選択した化粧料は２８日間連日使用してもらった。試験開始前と２８日間の連用試験の終了後に肌の色を前述の方法と同じ方法で測定した。試験前のＩＴＡ値から試験後のＩＴＡ値を減じたΔＩＴＡを算出し、各群ごとに平均と偏差を求めた。結果を表１３に示す。これより、本発明のＳＮＰパターン決定法に基づいた、皮膚の色の発現形態の分類法を利用した化粧料の選択方法によって、化粧料を選択した群の方がΔＩＴＡの値が大きく、肌色改善効果に優れることがわかる。
本発明は、個人個人に適した化粧料を選択するカウンセリング販売に応用できる。
Claims (7)
- 化粧料選択のための、ヒトメラノサイト刺激ホルモン１受容体をコードした核酸のプロモーター領域を含むＤＮＡをＰＣＲ反応により増幅し、この塩基配列を求めることを特徴とする、ヒトメラノサイト刺激ホルモン１受容体をコードした核酸のプロモーター領域のＤＮＡの一塩基置換のパターンの決定法。
- 一塩基置換の位置が、ヒトメラノサイト刺激ホルモン１受容体をコードした核酸のプロモーター領域の塩基配列４９０位、４４５位及び２２６位であることを特徴とする、請求項１に記載のヒトメラノサイト刺激ホルモン１受容体をコードした核酸のプロモーター領域のＤＮＡの一塩基置換のパターンの決定法。
- 前記ＰＣＲ反応のために使用されるプライマーが、acccctgtcctccctgag（配列式１）、caggaaggcaggagacagag（配列式２）、tcagagatggacacctccag（配列式３）、gacacctcctggcatctacc（配列式４）のオリゴヌクレオチドであることを特徴とする、請求項１又は２に記載のヒトメラノサイト刺激ホルモン１受容体をコードした核酸のプロモーター領域のＤＮＡの一塩基置換のパターンの決定法。
- 前記ヒトメラノサイト刺激ホルモン１受容体をコードした核酸のプロモーター領域を含むＤＮＡをＰＣＲ反応により増幅に先立ち、予めコーディング領域とプロモーター領域とを含むＤＮＡをＰＣＲで増幅し、得られたＤＮＡを型にプロモーター領域を増幅することを特徴とする、請求項１〜３何れか１項に記載のヒトメラノサイト刺激ホルモン１受容体をコードした核酸のプロモーター領域のＤＮＡの一塩基置換のパターンの決定法。
- ttgacagctgagttgctgct（配列式５）のオリゴヌクレオチドとaggaagagcccgtcagagat（配列式６）のオリゴヌクレオチドをプライマーとして、ヒトメラノサイト刺激ホルモン１受容体をコードした核酸のコーディング領域とプロモーター領域とを含むＤＮＡをＰＣＲで増幅することを特徴とする、請求項４に記載のヒトメラノサイト刺激ホルモン１受容体をコードした核酸のプロモーター領域のＤＮＡの一塩基置換のパターンの決定法。
- 請求項１〜５何れか１項に記載のヒトメラノサイト刺激ホルモン１受容体をコードした核酸のプロモーター領域のＤＮＡの一塩基置換のパターンの決定法のためのプライマーとしての、acccctgtcctccctgag（配列式１）、caggaaggcaggagacagag（配列式２）、tcagagatggacacctccag（配列式３）又はgacacctcctggcatctacc（配列式４）の塩基配列のオリゴヌクレオチド。
- 請求項４又は５に記載の、ヒトメラノサイト刺激ホルモン１受容体をコードした核酸のコーディング領域とプロモーター領域とを含むＤＮＡをＰＣＲで増幅する為のプライマーとしての、ttgacagctgagttgctgct（配列式５）のオリゴヌクレオチドとaggaagagcccgtcagagat（配列式６）のオリゴヌクレオチド。
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Cited By (2)
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|---|---|---|---|---|
| GB2499364A (en) * | 2011-12-20 | 2013-08-21 | Gene Onyx Ltd | Genetic analysis to determine cosmetic ingredient efficacy |
| JP2019022483A (ja) * | 2017-07-21 | 2019-02-14 | ポーラ化成工業株式会社 | 肌トラブルリスクの検出方法、その方法に使用するための検出試薬、肌状態鑑別用試薬、及び化粧品又は医薬部外品の選択方法 |
-
2006
- 2006-03-27 JP JP2006084711A patent/JP2007252349A/ja active Pending
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
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| JP2019022483A (ja) * | 2017-07-21 | 2019-02-14 | ポーラ化成工業株式会社 | 肌トラブルリスクの検出方法、その方法に使用するための検出試薬、肌状態鑑別用試薬、及び化粧品又は医薬部外品の選択方法 |
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