JP2007217384A - Anti-helicobacter pylori composition, and method for producing the same - Google Patents

Anti-helicobacter pylori composition, and method for producing the same Download PDF

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哲朗 杉浦
Keiko Takeuchi
啓晃 竹内
Hiroyuki Uketa
浩之 受田
Hiroyuki Takenaka
裕行 竹中
Yuji Yamaguchi
裕司 山口
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Abstract

<P>PROBLEM TO BE SOLVED: To obtain a composition having anti-Helicobacter pylori activity by the use of a naturally-occurring substance, slight in resistant bacteria growth and side effects of a curative agent. <P>SOLUTION: The composition contains a carotenoid having a faded color as an active ingredient. This composition has diminished side effects while having anti-Helicobacter pylori activity. <P>COPYRIGHT: (C)2007,JPO&INPIT

Description

本発明は、例えば、胃潰瘍や、胃がん等の原因の一つとなるピロリ菌(ヘリコバクター・ピロリ)の増殖を抑制すると共に減菌・除菌することができる、ピロリ菌感染に対する治療・症状改善を目的とする抗ピロリ菌組成物と、その製造方法とに関するものである。   The present invention aims at treating and improving symptoms of Helicobacter pylori infection, which can suppress the growth of Helicobacter pylori, which is one of the causes of gastric ulcer, gastric cancer, etc. The anti-H. Pylori composition and its production method.

現在の臨床におけるピロリ菌治療としては、抗生物質2剤と、胃酸分泌抑制剤1剤との合計3剤を併用する療法が主流である。   The current mainstream treatment for Helicobacter pylori is the combination of two antibiotics and one gastric acid secretion inhibitor, for a total of three drugs.

しかし、前記抗生物質を用いる療法では、その抗生物質に対して薬剤耐性能を持つピロリ菌が増加してしまうことがあり、この耐性菌の増加と、治療薬剤の副作用とにより、ピロリ菌の除菌が不成功になる例が増加しており、問題となっているのが現状である。   However, the therapy using antibiotics may increase the number of Helicobacter pylori that has drug resistance against the antibiotic. The number of cases where fungi are unsuccessful is increasing, and the current situation is the problem.

そこで、抗生物質を用いないでピロリ菌感染の治療・症状改善を行う方法として、植物等の天然物を用いる方法が注目され、研究・開発されている。   Therefore, as a method for treating and improving symptoms of H. pylori infection without using antibiotics, a method using natural products such as plants has attracted attention and has been researched and developed.

このような天然物を用いる方法としては、例えば、天然物由来の抗菌活性剤等を用いる方法があるが、この天然由来の抗菌活性剤を用いる方法においては、これまで耐性菌を作り出したという報告はほとんどなく、また、天然物由来のため副作用も少ないという利点がある。   As a method using such a natural product, for example, there is a method using an antibacterial active agent derived from a natural product, but in the method using an antibacterial active agent derived from a natural product, a report that a resistant bacterium has been created so far. There are almost no side effects and there are few side effects because it is derived from natural products.

そのため、天然物由来の抗ピロリ菌活性剤を求める傾向は増加の一途をたどり、耐性菌を作らず、副作用が少なく、かつ効果の優れた抗ピロリ菌剤が求められている。   For this reason, there is an ever-increasing tendency to seek anti-H. Pylori activators derived from natural products, and there is a need for anti-H. Pylori agents that do not produce resistant bacteria, have few side effects, and are highly effective.

このような天然物由来の抗ピロリ菌剤としては、例えば、月見草の溶媒抽出物を含有する抗ピロリ菌組成物がある(特許文献1参照)。   As such a natural product-derived anti-pylori agent, for example, there is an anti-pylori composition containing a solvent extract of evening primrose (see Patent Document 1).

この特許文献1の公知技術においては、水またはアルコール等の溶媒を用いて月見草からその抽出物を抽出するものであり、月見草の溶媒抽出物に含まれる成分であるポリフェノールにより、ピロリ菌に対する抗菌作用を見出したものである。   In the known technique of Patent Document 1, the extract is extracted from evening primrose using a solvent such as water or alcohol, and the antibacterial action against H. pylori is caused by polyphenol, which is a component contained in the solvent extract of evening primrose. Is found.

特開2004−352644号公報JP 2004-352644 A

ところで、抗ピロリ菌作用を有する成分は、前記特許文献1の公知技術に開示されたポリフェノールに限定されるものではないと考えられるが、他の成分により抗ピロリ菌作用が示される事例は少ないものである。   By the way, although it is thought that the component which has an anti-pylori action is not limited to the polyphenol disclosed by the well-known technique of the said patent document 1, there are few cases where an anti-pylori action is shown by another component. It is.

従って、耐性菌の増加と、治療薬剤の副作用とが少ない天然物を用い、抗ピロリ菌作用を有するポリフェノールとは異なる成分を有効成分として含む組成物を得るということに解決しなければならない課題を有している。   Therefore, the problem that must be solved is to obtain a composition containing, as an active ingredient, a component different from polyphenol having anti-pylori activity, using a natural product with little increase in resistant bacteria and side effects of therapeutic agents. Have.

本発明者等は、上記の課題を解決し、所期の目的を達成するために種々の成分について鋭意検討を行なった結果、退色したカロテノイドを有効成分として含有する組成物、特に、緑藻網(Chlorophyceae)オオヒゲマワリ目(Volvocales)のデュナリエラ属(Dunaliella)に属する微細藻のうち黄橙色の藻体から抽出された抽出物から得られるカロテノイドが優れた抗ピロリ菌活性を有している事を見出して本発明を完成するに至った。 As a result of intensive studies on various components in order to solve the above-mentioned problems and achieve the intended purpose, the present inventors have determined that a composition containing a discolored carotenoid as an active ingredient, particularly a green alga net ( Chlorophyceae ) Finding that carotenoids obtained from extracts extracted from yellow-orange alga among microalga belonging to the genus Dunaliella of Volvocales ( Volvocales ) have excellent anti-pylori activity The present invention has been completed.

そこで、本発明の第1の発明に係る抗ピロリ菌組成物においては、上記した従来例の課題を解決する具体的手段として、退色したカロテノイドを有効成分として含有していることを最も主要な特徴とするものであり、更に、前記カロテノイドは、緑藻網オオヒゲマワリ目のデュナリエラ属に属する微細藻のうち黄橙色の藻体の抽出物から得られることを付加的な要件として含むものである。   Therefore, in the anti-H. Pylori composition according to the first invention of the present invention, as a specific means for solving the problems of the conventional examples described above, the main feature is that it contains a bleached carotenoid as an active ingredient. Further, the carotenoid includes, as an additional requirement, that it is obtained from an extract of a yellow-orange alga body among the microalga belonging to the genus Dunaliella belonging to the order of the green alga net of the bearded sunflower.

また、本発明の第2の発明に係る抗ピロリ菌組成物の製造方法は、緑藻網オオヒゲマワリ目のデュナリエラ属に属する微細藻のうち黄橙色の藻体を低酸素乃至無酸素状態の環境下にて保存して前記藻体内に含まれるカロテノイドの黄橙色を退色させ、該退色した藻体に抽出用の溶液を添加してその抽出物を得ることを最も主要な特徴とするものである。   In addition, the method for producing an anti-pylori composition according to the second invention of the present invention provides a yellow-orange algal body among the microalga belonging to the genus Dunaliella belonging to the green alga reticulae, in a hypoxic to anoxic environment. The main feature is that the carotenoid contained in the alga body is faded and faded yellow-orange and an extract solution is added to the decolored alga body.

本発明の第1の発明に係る抗ピロリ菌組成物においては、退色したカロテノイドを有効成分として含有していることにより、抗生物質を用いることなく、耐性菌の増加と、治療薬剤の副作用とが少ない天然物を用いて抗ピロリ菌作用が得られ、ピロリ菌を減菌・除菌させる事によりピロリ菌感染の治療・症状改善を行うことができ、更に、ピロリ菌が関与する生活習慣病を含む種々の疾患(胃・十二指腸潰瘍や、胃がん、自己免疫疾患等)についても、治療・症状改善の作用を期待することができるという優れた効果を奏する。   In the anti-H. Pylori composition according to the first invention of the present invention, an increase in resistant bacteria and side effects of the therapeutic agent can be achieved without using antibiotics by containing a discolored carotenoid as an active ingredient. Anti-H. Pylori action can be obtained with a small amount of natural products. By sterilizing and sterilizing H. pylori, treatment and symptom improvement of H. pylori infection can be achieved. Various diseases (such as stomach and duodenal ulcers, stomach cancer, autoimmune diseases, etc.) can be expected to be effective for treatment and symptom improvement.

更に、緑藻網オオヒゲマワリ目のデュナリエラ属に属する微細藻のうち黄橙色の藻体の抽出物を抗ピロリ菌組成物に用いる前記退色したカロテノイドとして使用した場合には、前記退色したカロテノイドによる抗ピロリ菌作用ばかりでなく、デュナリエラの藻体の抽出物に含まれる他の成分も関与してこれらの相乗効果を期待でき、より優れた抗ピロリ菌作用を得ることができる。   Furthermore, among the microalgae belonging to the genus Dunaliella belonging to the genus Dunaliella of the green alga net, when using as the discolored carotenoid used in the anti-pylori composition, the anti-pylori caused by the decolored carotenoid In addition to the action, other components contained in the extract of algal bodies of Dunaliella can also be involved, so that these synergistic effects can be expected, and a more excellent anti-pylori action can be obtained.

また、本発明の第2の発明に係る抗ピロリ菌組成物の製造方法においては、緑藻網オオヒゲマワリ目のデュナリエラ属に属する微細藻のうち黄橙色の藻体を低酸素乃至無酸素状態の環境下にて保存して前記藻体内に含まれるカロテノイドの黄橙色を退色させ、該退色した藻体に抽出用の溶液を添加してその抽出物を得ることができるため、培養により容易に増殖させることができる微細藻を用いて抗ピロリ菌組成物を製造することができるため、安定的に供給できると共に、その品質を保持することも容易にできるようになるという優れた効果を奏する。   In the method for producing an anti-H. Pylori composition according to the second invention of the present invention, yellow-orange alga bodies of microalga belonging to the genus Dunaliella belonging to the order of the green alga net of the bearded sunflower are placed in a hypoxic to anoxic environment. Can be stored in the above-mentioned alga body, and the carotenoids contained in the alga body are faded yellow-orange, and the extract can be obtained by adding an extraction solution to the decolored alga body. Since the anti-H. Pylori composition can be produced using the microalgae that can be produced, there is an excellent effect that it can be stably supplied and its quality can be easily maintained.

次に、本発明を具体的な実施の形態に基づいて詳しく説明する。
本発明に係る抗ピロリ菌組成物は、退色したカロテノイド(主にβ−カロテン)を有効成分として含有する組成物であり、該カロテノイドとしては、例えば、植物等の天然物であれば、いずれのものから得られたものであっても良いが、特に、緑藻網(Chlorophyceae)オオヒゲマワリ目(Volvocales)のデュナリエラ属(Dunaliella)に属する微細藻のうち黄橙色の藻体から抽出された抽出物から得られるカロテノイドを用いることが好ましく、更には、退色したカロテノイドを含んだデュナリエラの藻体の抽出物自体を含有した組成物を抗ピロリ菌組成物として用いることが好ましいものである。
Next, the present invention will be described in detail based on specific embodiments.
The anti-pylori composition according to the present invention is a composition containing a bleached carotenoid (mainly β-carotene) as an active ingredient. As the carotenoid, for example, any natural product such as a plant can be used. In particular, it is obtained from an extract extracted from a yellow-orange alga of the microalga belonging to the genus Dunaliella belonging to the order of Chlorophyceae Volvocales ( Volvocales ). It is preferable to use a composition containing the extract of Dunaliella alga body itself containing a bleached carotenoid as the anti-H. Pylori composition.

このデュナリエラ属に属する微細藻としては、例えば、Dunaliella salinaD.salina)またはD.bardawil等を例示することができる。なお、この明細書において、デュナリエラの微細藻または藻体と記載した場合には、特に言及をしない限りは、緑藻網オオヒゲマワリ目のデュナリエラ属に属する微細藻のうち黄橙色の藻体(微細藻)を示すものである。 Examples of the microalga belonging to the genus Dunaliella include Dunaliella salina ( D. salina ) or D. saliva . Bardawil etc. can be illustrated. In addition, in this specification, when it is described as a microalga or alga body of Dunaliella, unless otherwise stated, among the microalga belonging to the genus Dunaliella of the green alga net, the yellow alga body (microalgae) Is shown.

また、本発明において、退色したカロテノイドとは、本来黄橙色の表面色であるカロテノイドが、例えば、低酸素乃至無酸素状態の環境下等に保存されることによって、稍薄い黄橙色乃至白色に変化(退色)したカロテノイドのことをいう。このようにカロテノイドを低酸素乃至無酸素状態の環境下等に保存することでその表面色が退色する原理としては、その詳細は未だ不明であり確認中であるが、カロテノイドが極めて低濃度乃至無酸素の環境下で保存された際、カロテノイド(特にβ−カロテン)の組織が開裂等により化学修飾されてその誘導体が生成される、または、カロテノイド中のβ−カロテンが水溶性のカロテノイド(キサントフィル等)に変化するためであると推察される。   Further, in the present invention, the discolored carotenoid means that the carotenoid, which is originally a yellow-orange surface color, changes to a pale yellow-orange to white color, for example, by being stored in a hypoxic or anoxic environment. It refers to carotenoids that have faded. The principle that the surface color fades when carotenoids are stored in a low-oxygen or non-oxygen environment as described above is still unknown and has been confirmed. When stored in an oxygen environment, the carotenoid (especially β-carotene) tissue is chemically modified by cleavage or the like to produce a derivative thereof, or β-carotene in the carotenoid is water-soluble carotenoid (xanthophyll, etc.) ) Is assumed to change.

前記カロテノイドを前記デュナリエラの微細藻から得る場合、このデュナリエラの微細藻としては、天然由来のものまたは培養によるもののいずれを用いても良いが、安定供給と品質保持の観点から、培養により増殖させて使用することが望ましい。また、前記微細藻は、生の藻体、乾燥した藻体または乾燥した粉体等のいずれであっても良い。   When the carotenoid is obtained from the Dunaliella microalgae, the Dunaliella microalgae may be either naturally derived or cultured, and from the viewpoint of stable supply and quality maintenance, It is desirable to use it. The microalgae may be any of raw alga bodies, dried alga bodies, dried powders, and the like.

微細藻は光合成を行なって自らのエネルギーとしているため、培養は光照射下に藻類培養用の培地を用い、通常の培養方法により行なうことができる。具体的な培養条件を述べれば下記のとおりである。   Since microalgae carry out photosynthesis and generate their own energy, culturing can be performed by a normal culture method using a culture medium for algae under light irradiation. Specific culture conditions are described as follows.

D.salinaを培養する方法としては、培地は一般的な好塩性緑藻類を培養する際に用いられるものであれば格別な制限はなく、例えば、Dunaliella salina growth medium等の培地を用いることができる。 D. As a method for cultivating salina , there is no particular limitation as long as the medium can be used for culturing general halophilic green algae. For example, a medium such as Dunaliella salina growth medium can be used.

即ち、新鮮なろ過海水999mlに対してNaCl 87g、KNO 76mg、KHPO 8.7mg及びNaHCO 4.2gを添加した溶液に、CuCl・2HO 200mg/l、Zn Cl 100mg/l、CoCl・6HO 200mg/l、MnCl・4HO 600mg/l、FeCl・6HO 400mg/l、(NH)6Mo24・4HO 1.2g/l及びEDTA2Na・2HO 2.2g/lからなる微量元素混合溶液1mlを添加することにより培地を調製した。 That is, to a solution in which 87 g of NaCl, 76 mg of KNO 3 , 8.7 mg of K 2 HPO 4 and 4.2 g of NaHCO 3 were added to 999 ml of fresh filtered seawater, CuCl 2 .2H 2 O 200 mg / l, Zn Cl 2 100 mg / L, CoCl 2 · 6H 2 O 200 mg / l, MnCl 2 · 4H 2 O 600 mg / l, FeCl 3 · 6H 2 O 400 mg / l, (NH 4 ) 6Mo 7 O 24 · 4H 2 O 1.2 g / l The medium was prepared by adding 1 ml of a trace element mixed solution consisting of 2.2 g / l of EDTA 2 Na · 2H 2 O.

培養は、D.salinaの細胞数が1−2×10 cells/mlとなるように培地に接種し、2リットル容のガラス扁平フラスコを用いて行なった。培養期間は7−14日間が適当であり、培養は空気を適当な通気手段により導入する好気的条件下(炭酸ガス供給は0%−10%)にかつ蛍光灯や太陽光を光源として照度を3000lux−150000luxに設定し、連続光照射(24時間明)から8時間明/16時間暗にて行なうのが望ましい。培養温度は15−40℃であり、30℃付近が望ましい。その他、カロテノイド(主なカロテノイドはβ−カロテン)を効率よく生合成させることが知られている一般的な培養条件を選択することが望ましい。 The culture is performed as follows . The medium was inoculated so that the number of salina cells was 1-2 × 10 3 cells / ml, and this was carried out using a 2-liter glass flat flask. The culture period is suitably 7-14 days, and the culture is carried out under aerobic conditions in which air is introduced by an appropriate ventilation means (carbon dioxide supply is 0% to 10%), and illuminance using fluorescent light or sunlight as a light source. Is set to 3000 lux-150,000 lux, and it is desirable to perform from 8 hours light / 16 hours dark after continuous light irradiation (24 hours light). The culture temperature is 15-40 ° C, preferably around 30 ° C. In addition, it is desirable to select general culture conditions known to efficiently biosynthesize carotenoids (the main carotenoid is β-carotene).

培養した微細藻(藻体)を常法により収集した後、乾燥し、得られた微細藻を、機密・密封性のある容器に入れ、該容器内の気体を、例えば、窒素置換等の方法によって極めて少量で低濃度の酸素−酸素フリーの状態、即ち低酸素乃至無酸素状態にし、この低酸素乃至無酸素状態の環境下等にて保存することで、前記藻体の外観上の色が退色される、即ち、該藻体内に含まれるカロテノイドの黄橙色を退色させることができる。保存中は光が当たっていても良いが、遮光することが好ましい。また、保存温度は、約0℃−40℃程度の範囲であるが、25℃付近が好ましい。なお、退色したカロテノイドとしては、前記低酸素乃至無酸素状態の環境下にて保存する方法によって得られたものに限定するものではなく、他の方法によって得られたものであっても良く、また、前記微細藻以外の天然物から得られたものであっても良い。   The cultured microalgae (algae) are collected by a conventional method and then dried. The obtained microalgae is placed in a confidential / sealing container, and the gas in the container is replaced with a method such as nitrogen substitution, for example. The oxygen-oxygen-free state in a very small amount, ie, in a low oxygen or oxygen-free state, and stored in this low oxygen or oxygen-free environment, etc., the color on the appearance of the algal bodies The carotenoid contained in the algal body is faded, and the yellowish orange color can be faded. While it may be exposed to light during storage, it is preferably shielded from light. The storage temperature is in the range of about 0 ° C. to 40 ° C., preferably around 25 ° C. The carotenoid that has faded is not limited to the one obtained by the method of storing in the low oxygen or oxygen-free environment, and may be obtained by other methods, It may be obtained from natural products other than the microalgae.

前記退色させた微細藻から抽出物(カロテノイドを含む)を抽出する方法としては、例えば、下記の手法により抽出できる。即ち、藻体濃度が1重量%−70重量%となるように水またはアルコールなど極性の高い溶剤(抽出用の溶液)を添加し、氷冷−95℃の範囲の溶液温度で約10分−2時間程度、抽出処理して抽出液(抽出物を含む)を得る。その際、必要に応じて、攪拌や超音波にて抽出処理を行っても良い。   As a method for extracting an extract (including carotenoid) from the bleached microalgae, for example, the following method can be used. That is, a highly polar solvent (extraction solution) such as water or alcohol is added so that the algal body concentration becomes 1% by weight to 70% by weight, and ice-cooled at a solution temperature in the range of 95 ° C. for about 10 minutes. Extraction is performed for about 2 hours to obtain an extract (including an extract). At that time, if necessary, extraction processing may be performed by stirring or ultrasonic waves.

次いで、前記抽出液から微細藻の抽出物を得る方法としては、常法に従って水溶性の抽出物を得ることができるが、例えば、前記抽出液を遠心分離後、その上澄み液をとり、該上澄み液をフィルターを用いて濾過することによりデュナリエラの藻体と抽出液とを分離した後、これを凍結乾燥して前記抽出液からデュナリエラの水溶性の抽出物を得るものである。   Next, as a method for obtaining an extract of microalgae from the extract, a water-soluble extract can be obtained according to a conventional method. For example, after the extract is centrifuged, the supernatant is taken and the supernatant is obtained. The liquid is filtered using a filter to separate Dunaliella alga bodies and the extract, and then freeze-dried to obtain a water-soluble extract of Dunaliella from the extract.

このようにして得られた抽出物には、退色したカロテノイドが含まれているため、抗ピロリ菌活性を示したが、ろ過後の残渣にはその活性が認められなかった。このことから、抗ピロリ菌活性を示す物質、即ち、抗ピロリ菌組成物が水に溶解し易い(水溶性物質)物質であるものと理解できる。   The extract thus obtained contained anti-pylori activity because it contained a discolored carotenoid, but no activity was observed in the residue after filtration. From this, it can be understood that the substance exhibiting anti-H. Pylori activity, that is, the anti-H. Pylori composition is easily dissolved in water (water-soluble substance).

次に、具体的な実施例を用いて説明するが、本発明は以下の実施例になんら限定されるものではない。   Next, although it demonstrates using a specific Example, this invention is not limited to a following example at all.

D.salinaの培養]
この実施例1において、D.salinaの培養としては、上記 Dunaliella salina growth mediumを用いて、D.salinaの細胞数が約1×10 cells/mlとなるように培地に接種し、2リットル容のガラス扁平フラスコを用いて行なった。23℃で、炭酸ガス5%を含有する空気を通気し、蛍光灯(3500lux)にて連続照射し、10日間培養した。培養した藻体を遠心分離機(3000回転10分間)にて分離し、得られたペーストを凍結乾燥して、デュナリエラ藻体乾燥粉末を得た。
[ D. Salina culture]
In this Example 1, D.I. As the culture of salina , the above Dunaliella salina growth medium is used . The medium was inoculated so that the number of salina cells was about 1 × 10 3 cells / ml, and this was carried out using a 2-liter glass flat flask. At 23 ° C., air containing 5% carbon dioxide gas was aerated, continuously irradiated with a fluorescent lamp (3500 lux), and cultured for 10 days. The cultured algal bodies were separated with a centrifuge (3000 rpm for 10 minutes), and the obtained paste was freeze-dried to obtain Dunaliella algal body dry powder.

[実施例1の抗ピロリ菌組成物の生成]
この実施例1においては、前記デュナリエラ藻体乾燥粉末(D.salina乾燥藻体)15gをガラス瓶に入れ、該ガラス瓶内の気体を窒素置換して低酸素乃至無酸素状態の環境にした後、25℃で保存した。この保存は、2,4,6週間の一定期間行い、前記デュナリエラ藻体を退色させる、即ち、該藻体に含まれているカロテノイドを退色させた。
[Production of Anti-H. Pylori Composition of Example 1]
In this Example 1, 15 g of the above-mentioned dried Dalariella alga body powder ( D. salina dry alga body) was put in a glass bottle, and the atmosphere in the glass bottle was replaced with nitrogen to make a low oxygen or oxygen-free environment. Stored at ° C. This preservation was performed for a fixed period of 2, 4, and 6 weeks, and the Dunaliella alga body was discolored, that is, the carotenoid contained in the alga body was discolored.

[抽出処理]
前記退色させたデュナリエラ藻体15gに蒸留水135mlを加え、氷冷下にて20分間攪拌し、さらに27分間超音波処理して前記退色させたデュナリエラ藻体からその抽出物を抽出した。この抽出物を、4700回転、1時間遠心分離した後、その上清をさらに15000回転、1時間遠心分離し、その上清を0.05mmフィルター、ついでガラス繊維ろ紙と0.8mmメンブランフィルターにてろ過し、ろ液(デュナリエラの抽出物;抗ピロリ菌組成物を含む)を得た。このろ液について抗ピロリ菌活性を調べるために、常法により0.45μmメンブランフィルターにて滅菌し、以下の試験に供した。
[Extraction process]
Distilled water (135 ml) was added to 15 g of the decolored Dunaliella alga, stirred for 20 minutes under ice-cooling, and further subjected to ultrasonic treatment for 27 minutes to extract the extract from the decolorized Dunaliella alga. After the extract was centrifuged at 4700 rpm for 1 hour, the supernatant was further centrifuged at 15000 rpm for 1 hour, and the supernatant was filtered with a 0.05 mm filter, then with a glass fiber filter and a 0.8 mm membrane filter. Filtration was performed to obtain a filtrate (Extract of Dunaliella; containing anti-H. Pylori composition). In order to examine the anti-pylori activity of this filtrate, it was sterilized with a 0.45 μm membrane filter by a conventional method and subjected to the following test.

[抗ピロリ菌試験]
このようにして得られた各抽出物の抗ピロリ菌活性を常法に準じて測定した。具体的には、ブルセラ培地(ウマ血清10%含有、日本ベクトン・ディッキンソン株式会社製 BBLTM Brucella Broth(Cat No.211088))にて十分に増殖させたピロリ菌を、同じくブルセラ培地に混和し、600nmにおいて0.5−0.7の吸光度を示す浮遊液を調製した。
[Anti-pylori test]
The anti-pylori activity of each extract thus obtained was measured according to a conventional method. Specifically, Helicobacter pylori sufficiently grown in Brucella medium (containing 10% horse serum, BBL TM Brucella Broth (Cat No. 211088) manufactured by Nippon Becton Dickinson Co., Ltd.) was mixed with Brucella medium. A suspension having an absorbance of 0.5-0.7 at 600 nm was prepared.

前記デュナリエラの抽出物を5%含むブルセラ寒天培地(ウマ血清10%、寒天1.5%含有)にピロリ菌希釈液10μlを塗布し、3日間微好気(CO濃度10%)培養後、生菌数測定を行い増殖抑制率を算出した。コントロール試験では、前記デュナリエラの抽出液(抗ピロリ菌組成物を含む)のかわりに1% NaCl溶液を用いた。表1に、デュナリエラの抽出液(抗ピロリ菌組成物を含む)における抗ピロリ菌活性を測定した結果を示す。 10 μl of a Helicobacter pylori dilution was applied to Brucella agar medium (containing 10% horse serum and 1.5% agar) containing 5% of the extract of Dunaliella, and cultured for 3 days under microaerobic (CO 2 concentration 10%). The viable count was measured to calculate the growth inhibition rate. In the control test, a 1% NaCl solution was used in place of the Dunaliella extract (including the anti-H. Pylori composition). Table 1 shows the results of measuring anti-H. Pylori activity in the extract of Dunaliella (including anti-H. Pylori composition).

Figure 2007217384
Figure 2007217384

この表1から明らかなように、本発明に係る抗ピロリ菌組成物を含んだデュナリエラの抽出液は、通常のピロリ菌は勿論であるが、クラリスロマイシン(ピロリ菌除菌用抗生物質)耐性ピロリ菌(NY1とNY13)に対しても抗ピロリ菌活性を示した。このことから、本発明に係る抗ピロリ菌組成物は、ピロリ菌の増殖を抑制すると共に減菌・除菌することができて、ピロリ菌感染に対する治療・症状改善が可能であり、更に、抗生物質に対する薬剤耐性能を持つピロリ菌であっても、その効果を期待できることが理解できる。   As is apparent from Table 1, the extract of Dunaliella containing the anti-pylori composition according to the present invention is resistant to clarithromycin (antibiotic for eradication of H. pylori) as well as normal H. pylori. Anti-H. Pylori activity was also demonstrated against H. pylori (NY1 and NY13). Therefore, the anti-H. Pylori composition according to the present invention can suppress the growth of H. pylori and can be sterilized and sterilized to treat and improve symptoms against H. pylori infection. It can be understood that even the Helicobacter pylori having chemical resistance to the substance can be expected to be effective.

また、抗ピロリ菌組成物は、その有効成分が天然物であるデュナリエラの藻体等から得られた退色したカロテノイドであるため、副作用が少ないと考えられる。更に、抗ピロリ菌組成物を服用することで、ピロリ菌を減菌・除菌して、ピロリ菌が関与する生活習慣病を含む種々の疾患(胃・十二指腸潰瘍や、胃がん、自己免疫疾患等)の治療効果も期待できるのである。   Moreover, since the anti-pylori composition is a discolored carotenoid obtained from an alga body of Dunaliella, which is a natural product, the anti-pylori composition is considered to have few side effects. Furthermore, by taking anti-H. Pylori compositions, it is possible to sterilize and sterilize H. pylori and various diseases including life-style related diseases that involve H. pylori (such as stomach and duodenal ulcers, stomach cancer, autoimmune diseases, etc.) ) Can also be expected to have a therapeutic effect.

更に、デュナリエラの黄橙色の藻体から抽出された抽出物を本発明に係る抗ピロリ菌組成物に用いる退色したカロテノイドとして使用した場合には、前記退色したカロテノイドによる抗ピロリ菌作用は勿論であるが、この退色したカロテノイドによる作用ばかりでなく、デュナリエラの藻体の抽出物に含まれる他の成分も関与してこれらの相乗効果を期待でき、より優れた抗ピロリ菌作用を得ることができるようになるのである。   Furthermore, when an extract extracted from the yellow-orange alga body of Dunaliella is used as a bleached carotenoid used in the anti-pylori composition according to the present invention, the anti-pylori action of the bleached carotenoid is of course. However, in addition to the action of this discolored carotenoid, other components contained in the extract of algal bodies of Dunaliella can also be involved, so that these synergistic effects can be expected, and a more excellent anti-pylori action can be obtained. It becomes.

Claims (3)

退色したカロテノイドを有効成分として含有していること
を特徴とする抗ピロリ菌組成物。
An anti-H. Pylori composition characterized by containing a discolored carotenoid as an active ingredient.
前記カロテノイドは、
緑藻網オオヒゲマワリ目のデュナリエラ属に属する微細藻のうち黄橙色の藻体の抽出物から得られること
を特徴とする請求項1に記載の抗ピロリ菌組成物。
The carotenoid is
The anti-pylori composition according to claim 1, which is obtained from an extract of a yellow-orange alga body among microalgaes belonging to the genus Dunaliella of the green alga net of the bearded sunflower.
緑藻網オオヒゲマワリ目のデュナリエラ属に属する微細藻のうち黄橙色の藻体を低酸素乃至無酸素状態の環境下にて保存して前記藻体内に含まれるカロテノイドの黄橙色を退色させ、
該退色した藻体に抽出用の溶液を添加してその抽出物を得ること
を特徴とする抗ピロリ菌組成物の製造方法。
Among the microalgae belonging to the genus Dunaliella belonging to the green alga net, the yellow-orange alga body is preserved in a hypoxic or anoxic environment to discolor the yellow-orange color of the carotenoid contained in the algal body,
A method for producing an anti-pylori composition comprising adding an extraction solution to the bleached algal cells to obtain the extract.
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* Cited by examiner, † Cited by third party
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JP2016150933A (en) * 2015-02-19 2016-08-22 マイクロアルジェコーポレーション株式会社 Method for manufacturing evodiamine

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