JP2006518344A - リボヌクレオチド還元酵素r2を指向するアンチセンスオリゴヌクレオチドおよび癌の治療におけるこれらの使用 - Google Patents
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Abstract
Description
特に定義しない限り、本明細書で使用する全ての技術的および科学的用語は、本発明が属する分野の当業者によって一般に理解されるのと同じ意味を有する。
特徴を、一時的および長期の両方において、抑え、予防し、低下させ、または改善することを含む。
本発明で使用する、用語「約」は、名目上の値から±10%の変動を意味する。このような変動は、それを特に言及しているかどうかにかかわらず、本明細書中で示されている任意の値に通常含まれると理解されるべきである。
選択および特徴
本発明のアンチセンスオリゴヌクレオチドは、哺乳動物リボヌクレオチド還元酵素R2タンパク質をコードする遺伝子に対して標的化されている。種々の哺乳動物リボヌクレオチド還元酵素遺伝子の配列が当分野で知られており、例えば、ヒトリボヌクレオチド還元酵素R2遺伝子の配列は、Pavloff et al.[J DNA sequencing and Mapping, 2; 227-234 (1992)(非特許文献15)]に提供されている。このおよび他の哺乳動物R2配列も、NCBIによって維持されているジーンバンク(GenBank)データベースから利用可能である。
CH2CH2NH2)および2’−フルオロ(2’−F)が含まれる。本発明の一実施形態では、アンチセンスオリゴヌクレオチドは、置換された糖部分を含む少なくとも1つのヌクレオチドを含む。他の実施形態では、アンチセンスオリゴヌクレオチドは、少なくとも1つの2’−O−(2−メトキシエチル)、即ち2’−MOEで修飾されたヌクレオチドを含む。
本発明のアンチセンスオリゴヌクレオチドは、当業者によく知られた従来の技術により調製することができる。例えば、オリゴヌクレオチドは、アプライド・バイオシステムズ・カナダ社、ミシソーガ、カナダ(Applied Biosystems Canada Inc., Mississauga, Canada)から入手できる装置のような、市販の装置を用いて固相合成を用いて調製することができる。当分野でよく知られているように、ホスホロチオエートおよびアルキル化誘導体のような修飾されたオリゴヌクレオチドも、同様の方法によって容易に調製することができる。
本発明のアンチセンスオリゴヌクレオチドは、1以上の化学療法剤と併用して使用される場合、この化学療法剤は、当分野で公知の広範囲の癌の化学療法剤から選択することができる。公知の化学療法剤には、特定のタイプの癌の治療に特異的なもの、並びに、複数の癌の範囲に適用可能なもの、例えばドキソルビシン、カペシタビン、ミトキサントロン、イリノテカン(CPT−11)、およびゲムシタビンが含まれる。エトポシドは、白血病(急性リンパ球性白血病および急性骨髄性白血病を含む)、生殖細胞腫瘍、ホジキン病および種々の肉腫の治療に、一般的に適用可能である。シタラビン(Ara−C)も、急性骨髄性白血病、髄膜白血病、急性リンパ球性白血病、慢性骨髄性白血病、赤白血病を含めた種々の白血病、並びに、非ホジキンリンパ腫の治療に適用できる。
−乳癌、腎臓癌、結腸癌、結腸直腸癌および膵臓癌(これらに限定されない)を含めた固形腫瘍の治療に対しては、カペシタビン単独、または他の化学療法剤との組み合わせ、例えば結腸直腸癌、結腸癌および膵臓癌の治療に対してはカペシタビンとオキサリプラチンの組み合わせ、または結腸癌の治療に対してはカペシタビンとゲムシタビンの組み合わせ、
−転移性の癌の治療に対しては、カルボプラチンおよびパクリタキセルの組み合わせ、
−頭部および頸部の癌、食道癌、肺癌、卵巣癌、および子宮頸癌(cervical cancer)の治療に対しては、シスプラチン単独、または他の化学療法剤との組み合わせ、例えば小細胞肺癌(SCLC)の治療に対してはシスプラチンとイリノテカンの組み合わせ、
−急性骨髄性白血病(AML)および慢性骨髄性白血病(CML)の治療に対しては、シタラビン単独、または他の化学療法剤との組み合わせ、例えばCMLの治療に対してはシタラビン、フルダラビンおよびフィルグラスチムの組み合わせ、またはAMLの治療に対してはシタラビン、ミトキサントロンおよびエトポシドの組み合わせ、
−メラノーマの治療に対しては、ダカルバジン、
−非小細胞肺癌(NSCLC)、乳癌、前立腺癌および泌尿生殖路の癌(これらに限定されない)を含めた固形腫瘍の治療に対しては、ドセタキセル単独または他の化学療法剤との組み合わせ、
−腎臓癌、膵臓癌、および胆嚢若しくは輸胆管の癌の治療に対しては、5−FU単独または他の化学療法剤との組み合わせ、
−NSCLC、乳癌、および腎臓癌(これらに限定されない)を含めた固形癌の治療に対しては、ベムシタビン単独、または他の化学療法剤との組み合わせ、例えば乳癌の治療に対してはゲムシタビンとオキサリプラチンの組み合わせ、
−子宮頸癌の治療に対しては、ヒドロキシ尿素単独、または他の化学療法剤との組み合わせ、
−AMLの治療に対しては、イダルビシン単独、または他の化学療法剤との組み合わせ、
−膵臓癌および結腸癌の治療に対しては、イリノテカン単独、または他の化学療法剤との組み合わせ、
−前立腺癌および結腸癌の治療に対しては、ミトキサントロン単独、または他の化学療法剤との組み合わせ、例えば前立腺癌の治療に対してはミトキサントロンとプレドニゾンの組み合わせ、
−卵巣癌および乳癌の治療に対しては、タキソール単独、または他の化学療法剤との組み合わせ、並びに
−腎臓癌の治療に対しては、ビンブラスチン単独、または他の化学療法剤との組み合わせ、
である。
単独または他の化学療法剤と併用して、in vitroおよび/またはin vivoで、癌細胞の成長および/または転移を弱める能力について、まず、本発明のアンチセンスオリゴヌクレオチドを試験した。潜在的な抗癌化合物を試験する方法は当分野で公知である。代表的な限定を意図しない試験は、以下におよび本明細書に含まれる実施例に示されている。
アンチセンスオリゴヌクレオチド単独、または1以上の化学療法剤との併用(「併用剤」)の有効性の初期の測定は、必要な場合には、in vitro手法を用いて行うことができる。
in vivoでの腫瘍の成長または増殖を阻害するアンチセンスオリゴヌクレオチドおよび併用薬の能力を、当分野で公知の標準的手法を用いて適切な動物モデルで測定することができる(例えば、Enna, et al., Current Protocols in Pharmacology, J. Wiley & Sons, Inc., New York, NY(非特許文献46)を参照)。
哺乳動物の癌の治療に対して、アンチセンスオリゴヌクレオチドを、適切な薬学的薬理学的に許容できる担体、希釈剤、賦形剤またはビヒクルと混合してアンチセンスオリゴヌクレオチド含む医薬組成物として投与することができる。医薬組成物はまた、アンチセンスオリゴヌクレオチドと、適切な場合に患者に同時投与するための1以上の他の化学療法剤を含有するように処方してもよい。
本発明のアンチセンスオリゴヌクレオチド、およびアンチセンスオリゴヌクレオチドおよび1以上の化学療法剤を含む併用剤は、種々の癌の治療に使用することができる。本発明の一実施形態では、併用は、癌細胞の成長および/または転移を弱めるのに、化学療法剤(1種または複数種)単独よりも効果的である。アンチセンスオリゴヌクレオチドおよび併用剤は、薬物耐性の腫瘍を効果的に治療するのにも使用される。
患者に投与される本発明のアンチセンスオリゴヌクがたチドの用量は、所定期間にわたって患者に有益な治療応答をもたらすのに充分な量、即ち「有効量」であるべきである。このような有益な治療応答は、例えば、疾患の安定化、腫瘍の縮小、進行の時間の減少または長期生存でありうる。用量は、使用される個々のオリゴヌクレオチドの効力、治療される癌のタイプ、および治療される患者の状態、並びに、患者の体重または表面積によって決定されるであろう。適切な用量は、熟練した医師によって容易に決定することができる。
当業者は、in vitroおよび動物モデルでの本発明のアンチセンスオリゴヌクレオチド単独または併用剤の例示した有効性に続いて、これらは、癌の治療におけるこれらの有効性をさらに評価し、治療用途のための法的な証人を得るために、臨床試験において試験されるべきであることを認識するであろう。当分野で知られているように、臨床試験は、試験のフェーズを通して進行し、これは、フェーズI、II、IIIおよびIVとして識別されている。
参加者の適格性の規準は、全般的なもの(例えば、年齢、性別、癌のタイプ)から特定のもの(例えば、事前治療のタイプと回数、腫瘍の特性、血液細胞の計数、器官の機能)までの範囲である。適格性の規準は試験のフェーズでも変化する。例えば、フェーズIおよびIIの試験では、規準は、しばしば、異常な器官の機能または他の因子により、危険に曝される患者を治験的な治療から除外する。フェーズIIおよびIII試験では、しばしば、疾患のタイプおよびステージ、並びに事前治療の回数およびタイプに関する追加の規準が含まれる。
試験の開始に先立って、当分野で知られた幾つかの基準を用いて、最初に患者を分類することができる。患者は、まず、例えばイースタン・コオペラティブ・オンコロジー・グループ(ECOG)・パフォーマンス・ステータス(PS)(Eastern Cooperative Oncology Group Performance Status)の尺度またはカルノフスキー・パフォーマンス・ステータス(KPS)(Karnofsky Performance Status)の尺度(これらは両方とも、患者の機能障害によって測定される患者の疾患の進行を評価するための、広く受け入れられている基準である。)を用いて評価される。
アンチセンスオリゴヌクレオチドおよび1以上の化学療法剤(1種または複数種)は、典型的には、試験参加者に非経口的に投与される。一実施形態では、アンチセンスオリゴヌクレオチドまたは併用剤は静脈内注入によって投与される。静脈内注入によって医薬を投与する方法は、当分野で公知である。通常、静脈内注入は、特定の時間帯にわたって、例えば60分の間行われる。
臨床試験の終点は、評価の下での試験の有効性を示す測定可能な結果である。終点は、試験の開始前に確立され、臨床試験のタイプおよびフェーズに依存して変化する。終点の例には、腫瘍応答速度−腫瘍が特定の量まで大きさを減少させた試験参加者の比率(通常パーセンテージで表される);疾患のない生存−癌が発生しないかまたは再発しないで患者が生き延びる時間の総計(通常、月で測定される);全生存−参加者の生きている時間の総計(典型的には、臨床試験の開始から死ぬときまで測定される)が含まれる。進行および/または転移性癌に対しては、疾患の安定化−疾患が安定化した試験参加者、例えば腫瘍(1または複数)が、成長および/または転移を停止した試験参加者、の比率を終点として使用することができる。他の終点には、毒性および生活の質が含まれる。
本発明はさらに、アンチセンスオリゴヌクレオチドおよび任意に1以上の化学療法剤を医薬組成物中に含有する、癌の治療に使用するための治療用キットを提供する。キットの個々の成分は、別々の容器に包装され、そのような容器に付属して、成分には、薬剤または生物学的製品の製造、使用または販売を規制する政府機関によって指示された形の警告を含むことができ、この警告は人への投与のための製造、使用または販売の政府機関による承認を反映したものである。
マウス異種移植モデルにおける、種々の化学療法剤と併用した配列番号1のin vivo試験
1.1 HT−29ヒト結腸癌細胞(100μlのPBS中3×106個の細胞)を、6〜7週齢の雌CD−1ヌードマウスの右脇腹に皮下注射した。腫瘍の大きさが約50mm3の容積に達した後、即ち腫瘍細胞の注射の後4日に、マイトマイシンCをボーラス注入によって、3.5mg/kg/週の用量で4、11および18日目に尾静脈に投与した。マイトマイシンCの抗腫瘍効果を、マイトマイシンCと併用した配列番号1の抗腫瘍効果と比較した。配列番号1を、6mg/kgでボーラス注入により毎日尾静脈に投与し、マイトマイシンCを、配列番号1で処理した1時間後に、3.5mg/kg/週の用量で4、11および18日目に静脈内投与した。対照動物には、配列番号1と同じ期間生理食塩水を単独で与えた。全ての治療を22日目に停止した。最後の治療の翌日に腫瘍を動物から切除し、これらの重量を測定した。標準的な棒グラフを用いて腫瘍重量の差を示した。それぞれの棒は5匹の動物から計算した平均腫瘍重量を表す。図示されているように、マイトマイシンCでの治療は、生理食塩水対照と比較して腫瘍の成長の有意な遅れをもたらした。配列番号1とマイトマイシンCの併用によって導き出される抗腫瘍効果は、マイトマイシンCを単独で使用して得られるものよりも強力であった(図1参照)。
1. 生理食塩水で処理したグループ:生理食塩水0.1ml/マウス/48時間、i.v. n=10
2. 配列番号1で処理したグループ:0.1mlの生理食塩水中10mg/kg/48時間、i.v. n=10
3. IL2治療周期:8日(4日間の治療、2日間の非治療、次いで別の4日間の治療)
I−高用量 1日の治療について(20000単位)/2回 i.p. n=10
II−低容量 1日の治療について(5000単位)/2回 i.p. n=10
4. 配列番号1+IL2治療グループ−I (2+3) n=10
5. 配列番号1+IL2治療グループ−II (2+4) n=10
薬物耐性腫瘍における配列番号1単独または種々の化学療法剤との併用でのin vivo試験
2.1 BxPC−3ヒト膵臓癌細胞(100μlのPBS中3×106個の細胞)を、6〜7週齢の雌CD−1ヌードマウスの右脇腹に皮下注射した。BxPC−3はゲムシタビン耐性細胞系である。腫瘍の大きさが約100mm3の容積に達した後、即ち腫瘍細胞の注射の後21日に、配列番号1をボーラス注入によって、10mg/kgで17回一日おきに尾静脈に投与した。対照動物には、同じ期間生理食塩水を単独で与えた。配列番号1の抗腫瘍効果を、さらに、ゲムシタビンの抗腫瘍効果と比較した。ゲムシタビンを、100mg/kgの用量で、3日ごとに静脈内により投与した。抗腫瘍活性は、カリパスで測定した腫瘍容積の阻害によって評価した。各点は、実験グループあたり10匹の動物から計算した平均腫瘍容積を表す。図示されているように、配列番号1での治療は、生理食塩水対照と比較して腫瘍の成長の有意な遅れをもたらした。予想されるように、同じ期間中のゲムシタビンでの治療は、ゲムシタビン耐性腫瘍に対しては効果がなかった。(図9AおよびB)。
マウス異種移植モデルにおける配列番号1単独のin vivo試験
3.1 HT−29ヒト結腸癌細胞(100μlのPBS中3×106個の細胞)を、6〜7週齢の雌CD−1ヌードマウスの右脇腹に皮下注射した。腫瘍の大きさが約100mm3の容積に達した後、即ち腫瘍細胞の注射の後4日に、配列番号1をボーラス注入によって、10mg/kgで一日おきに尾静脈に投与した。対照動物には、同じ期間生理食塩水を単独で与えた。治療をその後14日間継続した。抗腫瘍活性は、治療期間内の異なる4回の機会にカリパスで測定した腫瘍容積の阻害によって評価した。各点は、実験グループあたり5匹の動物から計算した平均腫瘍容積を表す。図示されているように、配列番号1での治療は、ヒト結腸腺癌の成長について、統計学的に有意な阻害効果(P=0.0001)を示した。(図17A)。
転移のマウス実験モデルにおける配列番号1のin vivo試験
4.1 有性生殖モデルにおける、異なるアンチセンスオリゴヌクレオチドで処理されたマウス線維肉腫(R3)細胞の実験的転移を以下のように評価した。R3細胞懸濁物のアリコートを、2×106の密度で100mmの組織培養皿に接種し、10%FBSを補充したα−MEM培地中、37℃で一夜インキュベートした。細胞を10mlのPBSで1回洗浄し、カチオン性脂質(リポフェクチン試薬、最終濃度10μg/ml、ギブコBRL(Gibco BRL))の存在下で4時間、0.2μMの配列番号1で処理した。細胞を、対照としての生理食塩水単独(C)またはリポフェクチン単独(RE)で処理した。PBSで1回細胞を洗浄することによりオリゴヌクレオチドを除去し、細胞をトリプシン化した。次に細胞を遠心分離により集め、0.2mlのPBSに懸濁された約1×105個の細胞を、10週齢の雌C3Hマウスの尾静脈に注射した。個々のマウスから切除した肺をピクリン酸色素溶液(75%ピクリン酸、20%ホルムアルデヒド、5%氷酢酸)で染色した後、肺腫瘍の数の評価を20日後に行った。結果を図24aに示した。棒は、実験グループあたり4から5匹の動物から得られた肺中の腫瘍小節の平均数を表す。配列番号1(AS−A)でのR3細胞の処理は、肺コロニーの生成を有意に減少した(P=0.0006)。
ヒトバーキットリンパ腫を持つSCIDマウスの長期生存
リンパ腫の治療における配列番号1の治療可能性を評価するために、in vivo試験を行った。半集密的(subconfluent)対数成長培養物から集めた、生育可能なヒトバーキットリンパ腫(Raji)細胞(5×106)を各動物の尾静脈を介してi.v.注射し、疾患を2日間確立させた。規定食塩液中の配列番号1を、10mg/kgの用量で、1日おきに尾静脈注射によって投与した。対照動物には、オリゴヌクレオチドを用いずに、生理食塩水を単独で与えた。配列番号1での治療を42日目に停止した。両グループのマウス(n=10)を73日目に殺した。配列番号1の抗腫瘍効果をマウスの生存試験によって評価した。
マウス赤白血病を持つSCIDマウスの長期生存
マウス赤白血病の治療における配列番号1の治療可能性を評価するために、in vivo試験を行った。半集密的(subconfluent)対数成長培養物から集めた、CB7フレンドレトロウイルスで誘導したマウス赤白血球細胞(5×106)を各動物の尾静脈を介してi.v.注射し、疾患を2日間確立させた。規定食塩液中の配列番号1を、10mg/kgの用量で、1日おきに尾静脈注射によって投与した。対照動物には、オリゴヌクレオチドを用いずに、生理食塩水を単独で与えた。配列番号1での治療を71日目に停止した。配列番号1の抗腫瘍効果をマウスの生存試験によって評価した。
配列番号1のin vivo抗腫瘍活性
細胞系および細胞培養物
この実施例において、特に記載しない限り、ヒト腫瘍細胞系は、アメリカン・タイプ・カルチャー・コレクション(The American Type Calture Collection)(ATCC)(ロックビル、MD)から購入した。ヒト結腸腺癌(HT−29)、非小細胞肺癌(NCI−H460)、メラノーマ(A2058)、乳房腺癌(MDA−MB−231)、膵臓癌(AsPC−1およびSU.86.86)、膠芽腫−星状細胞腫(U−87MG)、腎臓癌(A498およびCaki−1)、卵巣癌(SK−OV−3)、子宮頸癌(HeLa)、前立腺癌(PC−3)、膀胱癌(T24)、バーキットリンパ腫(Raji)および肝細胞癌(HepG2)を、10〜20%ウシ胎仔血清(FCS)を補充した、α−MEM、RPMI1640、またはマッコイの5a培地中(インビトロゲンカナダ社、バーリントン、オンタリオ)中で、5%CO2を含有する加湿した大気中、37℃において、ATCCの推奨に従って維持した。正常ヒト細胞系、WI−38(ヒト肺線維芽細胞)およびHUVEC(ヒト臍帯静脈内皮細胞(human umbilical vein endothelial cell))およびネズミR3(線維肉腫)およびL(Ltk-繊維芽細胞)細胞を、上記のように維持した。C8161転移性メラノーマ細胞を、D.R.Welch博士、ペンシルバニア大学、ハーシー、PA(Dr. D. R. Welch, University of Penncsylvania, Hershey, PA)から取得し、上記のように維持した(Welch, et al., Int J Cancer 47:227-37 (1991)(非特許文献50))。これらの実験で使用した全ての培地には、ペニシリン100ユニット/mlおよびストレプトマイシン100μg/ml(インビトロゲンカナダ社、バーリントン、オンタリオ)の最終濃度で、抗生物質性−抗真菌性溶液が含まれる。
CD−1無胸腺症雌ヌードマウス、BALB/c nu/nuヌードマウス、SCID、およびSCIDベージュマウスを、チャールズ・リバー・ラボラトリーズ(モントリオール、カナダ)(Charles River Laboratories (Montreal, Canada))から購入し、実験は、典型的には、マウスが6〜7週齢になったときに開始した。ヒト腫瘍細胞を適切な成長培地中で成長させ、100μlのPBSに懸濁した3×106〜1×107個の細胞を、23ゲージ針で動物の右脇腹に皮下注射した(細胞数は括弧内の数値の説明文(figure legend)に示されている)。各実験グループは、典型的には、10匹のマウスを含んでいた。腫瘍の大きさが50〜100mm3の平均腫瘍容積に達した後、治療を開始した。アンチセンスオリゴヌクレオチド(生理食塩水に溶解したもの)を、ボーラス注入により、示された用量で一日おきに動物の尾静脈に投与した。5−フルオロウラシル(ファルマシア(Pharmacia))、ビンブラスチン(フォールディング(Faulding))、ゲムシタビン(イーライ・リリー(Eli Lilly))での治療は、括弧内の数値の説明文に示した通りであった。抗腫瘍活性は、2〜3日おきにカリパスで腫瘍容積を測定することによって評価した。腫瘍容積は、式L×W×H/2によって計算した。ここで、Lは長さを表し、Wは幅を表し、Hは高さを表す。最後の治療の後、24時間以内に、動物を殺し、腫瘍重量および体重を測定した。データの統計的分析の結果を括弧内の数値の説明文にP値として示した。
半集密的対数成長培養物から集めた、生育可能なヒトバーキットリンパ腫(Raji)細胞(5×106)を各動物の尾静脈を介してSCIDマウスに静脈内注射し、疾患を2日間確立させた。規定食塩液中のアンチセンスオリゴヌクレオチドを、10mg/kgの用量で、1日おきに尾静脈注射によって投与した。対照動物には、生理食塩水を、オリゴヌクレオチドを用いずに単独で、またはミスマッチおよびスクランブル対照アンチセンスオリゴヌクレオチドとともに、与えた。各治療グループは、典型的には、10匹のマウスを含んでいた。治療の抗腫瘍効果をマウスの生存試験によって評価した。生存率は治療グループ内のマウスの開始数のパーセンテージとして報告した。
C8161ヒトメラノーマ細胞を、2×106の密度で100mmの組織培養皿に接種し、10%FBSを補充したα−MEM培地中、37℃で一夜インキュベートした。細胞をトリプシン化し、遠心分離により集め、アリコートを懸濁液から取り出し、トリパンブルー排除試験を用いて細胞の生育度を決定した。0.1mlのPBSに懸濁された約1×105個の細胞を、6〜8週齢の無胸腺症の雌CD−1ヌードマウスの尾静脈に注射した。2日後に治療を開始した。個々のマウスから切除した肺をピクリン酸色素溶液(75%ピクリン酸、20%ホルムアルデヒド、5%氷酢酸)で染色した後、肺小節の数の評価を5〜7週間後に行った。
配列番号1はin vivoで配列特異的および用量依存的抗腫瘍活性を示す
R3マウス繊維肉種細胞(100μlのPBS中1.5×106個の細胞)を6〜8週齢の雌C3Hマウスの右脇腹に皮下注射した。腫瘍の大きさが約100mm3の容積に達した後、即ち腫瘍細胞の注射の後3日に、配列番号1、配列番号2および配列番号3をボーラス注入によって、5mg/kgで一日おきに尾静脈に投与した。対照動物には、同じ期間生理食塩水を単独で与えた。この後、治療を14日間継続した。抗腫瘍活性は、9日目から開始して2日間隔でカリパスで測定した腫瘍容積の阻害によって評価した。図27Aにおける各点は、実験グループあたり6〜7匹の動物から計算した平均腫瘍容積を表す。配列番号1での治療グループは、生理食塩水、スクランブルおよびミスマッチ対照と比較して有意な抗腫瘍効果を有していた(P=0.0001)。図27Bは、治療の終点で上記動物から切除した腫瘍の平均重量を表す。配列番号1は、生理食塩水(P=0.0006)対照、スクランブル対照(P=0.0001)およびミスマッチ対照(0.0002)と比較して有意な抗腫瘍活性を有していた。
配列番号1の臨床の可能性を評価するために、マウス内でのヒト腫瘍細胞異種移植片に対するその効果を、5−FU、ゲムシタビンおよびビンブラスチンの効果と比較した(図28)。これらの化合物は、現在臨床で使用されており、RNR活性を少なくとも部分的に減少することによって作用すると考えられている。例外なく、配列番号1はヒト腎臓腫瘍、即ちCaki−1およびA498腫瘍に対してこれらの化合物のどれよりも優れていた(図28)。加えて、配列番号1は、腫瘍増殖からの長期間の保護を示した唯一の化合物であった。A498腫瘍異種移植片では、5−FU、ゲムシタビンおよびビンブラスチンでの治療は、腫瘍の安定化について、全て効果がなかった。54日目まで、5−FUで治療したマウスは、生理食塩水で治療した動物の腫瘍に対する容積および重量と等しい腫瘍を有していた。ビンブラスチンおよびゲムシタビンは5−FUよりもよい効果を示したが、せいぜい腫瘍成長速度の遅れが関の山であった(図28C)。これらの結果は、配列番号1が、その標的に対して非常に特異的であり、これによって毒性の可能性を減少させている、今日までに開発された唯一のRNRベースの化合物であるという点で重要である。
有効性の追加の試験として、配列番号1を活性なバーキットリンパ腫を持つSCIDマウスに投与した(図30)。半集密的対数成長培養物から集めた、生育可能なヒトバーキットリンパ腫(Raji)細胞(5×106)を各動物内にi.v.注射し、疾患を2日間確立させた。規定食塩液中の配列番号1、配列番号2および配列番号3を、10mg/kgの用量で、1日おきに尾静脈注射によって投与した。40日目から、治療スケジュールを3日ごとに10mg/kgに減少した。対照動物には、生理食塩水を、オリゴヌクレオチドを用いずに単独で与えた。生存率はマウスの開始数のパーセンテージとして経時的に示した。配列番号1で治療したマウスは、全て試験の最後まで生存し、動物の収容容器の制限により72日目に殺した。
マウスの尾静脈内に注射されたネズミR3繊維肉腫およびヒトC8161メラノーマ細胞は、注射後2週間で観測可能な肺小節を形成する。マウスに注射する前に、培養物中で0.2μMの配列番号1によりこれらの腫瘍細胞を事前処理すると、肺小節形成の広がりは有意に減少する。臨床状態をより正確に反映するために、マウスを腫瘍細胞の注射後に配列番号1で治療した。C8161ヒトメラノーマ細胞を、2×106の密度で100mmの組織培養皿に接種し、10%FBSを補充したα−MEM培地中、37℃で一夜インキュベートした。細胞をトリプシン化し、遠心分離により集め、アリコートを懸濁液から取り出し、トリパンブルー排除試験を用いて細胞の生育度を決定した。0.1mlのPBSに懸濁された約1×105個の細胞を、6〜8週齢の雌SCIDマウスの尾静脈に注射した。2日後に治療を開始した。個々のマウスから切除した肺をピクリン酸色素溶液(75%ピクリン酸、20%ホルムアルデヒド、5%氷酢酸)で染色した後、肺小節の数の評価を5〜7週間後に行った。結果を図31に示し、棒は、マウスあたりの小節の平均数を標準誤差と共に表す。配列番号1の治療グループでは、9匹のマウスのうち1匹のみが肺小節を有していた。
免疫刺激
配列番号1が標的配列相互作用での結果ではない、非特異的免疫刺激をもたらすかどうかを決定するために、以下の実験を行った。免疫刺激は、メチル化されていないCpGジヌクレオチドの結果であり得、このジヌクレオチドは、脊椎動物に本来備わっている免疫応答を刺激し、病原体および腫瘍細胞の両方に対して獲得した免疫応答をさらに増大する。オリゴヌクレオチド中のメチル化されていないCpGsの存在は、最適な配列コンテクスト内にあっても、同じ効果を有することができる。
CpGジヌクレオチドモチーフは、脊椎動物で免疫応答を刺激するためには、メチル化されていてはならない。従って、CpGによって媒介される免疫刺激の問題を扱うための1つのアプローチは、CpGモチーフ中のC残基をメチル化し、これによってCpGで媒介される免疫応答を妨げることである(Krieg, A. M. Annu. Rev. Immunol. 20: 709-760 (2002)(非特許文献51))。
サルおよびラットでの薬物動態学
このオリゴヌクレオチドの安全性の側面を理解するために、毒性試験を、配列番号1を用いて行った。R2 mRNA中の配列番号1の標的配列は、ラットおよびサルの細胞から抽出したmRNAのRT−PCR増幅によって調製されたR2 cDNAの直接の配列決定によって、その配列が決定されており、ヒト、ラットおよびサルの間で完全に保存されている。
ラットにおける薬物動態学
薬物動態学の試験において、雄のラットのグループに、50mg/kg(295mg/m2)の容量で、配列番号1のボーラスi.v.注射(尾静脈)を1または2回投与し、50mg/kg/日(295mg/m2/日)の容量で、48時間まで静脈内(腹部大静脈)注入した。血液サンプルを、注入およびボーラス注射の開始後56時間まで種々のサンプリング時間で、各グループ内の動物のサブセットからEDTAを含有する管に集めた。もとの配列番号1の濃度を、確認用CE法(validated CE method)によって血漿中で測定した。
配列番号1を21日とこれに続く21日の回復期間、連続静脈内注入によってサルに投与した。28匹のサルに以下の用量レベルの1つを投与した:ビヒクル対照、2、10または50mg/kg/日(24.6、123、および615mg/kg/日)。トキシコキネティクス試料を、注入の開始前、注入開始後、約8、24、48および96時間、および用量シリンジに変える前20日目に集めた。
以下のラットおよびサルの組織中での配列番号1(および関連するn+1、n−1からn−15のオリゴヌクレオチド代謝物)の濃度は、確認用CE法(サウスウエスト・バイオラボ社(southwest Bio-Labs, Inc)によって測定した:腎臓、肝臓、脾臓、心臓、肺、骨髄(ラット)、リンパ節(サル)および脳組織。組織サンプルを、21日の毒性試験において記載したように、指定した動物から集めた:ラットは、2、10または50mg/kgで一日おきに配列番号1をボーラス静脈内注射で投与し、サルは、2、10または50mg/kg/日で連続静脈内注入によって配列番号1を投与した。
サルおよびラットにおける毒性
10.1 1回用量の毒性
サルの急性静脈内毒性試験
80mg/kg/日(984mg/m2/日)までの用量で24時間の配列番号1の静脈内注入は、アカゲザルについて十分に許容された。試験中の死亡は全くなかった。治療に関連する臨床の徴候、または体重、血圧、心拍数、血清生化学または血液学的パラメータの変化は、いずれの用量でも全く観測されなかった。APTTにおける治療に関連する穏和な変化が40mg/kg/日(492mg/m2/日)および80mg/kg/日(984mg/m2/日)での注入の最後に観測され、相補的スプリット生成物Bbの、治療に関連するわずかな増加が20、40、および80mg/kg/日(246、492、および984mg/m2/日)での注入の最後に観測された。これらの影響は、固有の凝固経路の明らかな阻害、および代替の相補的経路の控えめな活性化をそれぞれ示す。これらの治療に関連する変化は、ホスホロチオエートオリゴヌクレオチドの投与の典型的な部類の影響である。
21日の回復を用いたラットでの21日の静脈内毒性試験
配列番号1を、21日の回復期間を用いて、21日まで一日おきに静脈内ボーラス注射によりSprague−Dawleyラットに投与した。この試験設計は、ビヒクル対照、2mg/kg、10mg/kg、および50mg/kgの4つの試験グループを含む。10匹の動物/性別と追加の5匹の動物/性別よりなる主要試験グループは、回復フェーズに対する対照および高用量グループに含まれた。サテライト動物(6/性別/グループ)もトキシコキネティクスの分析に含まれた。
第2の繰り返し用量試験をサルで行い、21日間の連続静脈内注入と、これに続く21日の回復期間による試験物質の投与に伴う毒性を評価した。28匹のサルに以下の用量レベルの1つを投与した:ビヒクル対照、2mg/kg/日、10mg/kg/日、または50mg/kg/日。トキシコキネティクスサンプルを、注入の開始前、注入の開始後約8、24、48および96時間、並びに用量シリンジの変化の前20日に採集した。予想外の死亡は、試験中に全く起こらなかった。10および50mg/kg/日の用量レベルで見られた影響には、脾臓の組織球増殖症、抗凝固効果、相補的活性化、並びに、血栓および血管損傷の形成、肺の炎症および注入部位での漏れのような連続注入の影響が含まれる。標的器官は、腎臓、肝臓、およびリンパ節の組織病理学的変化を通して明確に同定された。一般に、配列番号1に関連する変化は、重篤さおよび/または発生率について用量依存的であり、3週間の投薬後の治療のない期間の間に、完全にまたは一部(最終的に完全な回復の示唆を含む)可逆的であった。先のラットでの試験のように、2mg/kg/日の用量レベルは、副作用のないレベル(NOAEL)と確認された。
配列番号1の注射を、ヒト全血中での細胞溶解およびヘモグロビン放出に基づく溶血活性を引き起こす可能性について試験し、静的および動的条件下で溶血を起こさなかった。
種々の化学療法剤と併用して配列番号1を用いる臨床試験
配列番号1を公知の種々の化学療法剤と併用して試験する臨床試験のための可能な設計の例は、表8に示されている。
試験の説明:
進行したかまたは転移性の腎臓細胞癌(フェーズI/II)を持つ患者における配列番号1およびカペシタビン併用療法
母集団:標準的な治療に失敗した進行したおよび転移性の腎臓細胞癌
試験投薬計画:配列番号1(CIV注入)+カペシタビン
周期:14日+7日の休止
フェーズI/II
状況:フェーズIIの進行中
投薬:配列番号1を148.0mg/m2/日の開始用量で、1660mg/m2/日(一日2回の用量に分割され、21日間)の固定用量で経口投与されるカペシタビンと併用して、21日間連続的に静脈内注入で投与し、次いで7日間休止した。
試験の説明
転移性乳癌の治療における配列番号1およびカペシタビンのフェーズI試験
母集団:乳癌、転移性および2回以上の事前の投薬計画で失敗したもの
試験投薬計画:配列番号1+カペシタビン
21日周期で14日
対象:40(2ステージ:20ea)
フェーズII
状況:再考中の計画
試験の説明:
転移性または進行した非小細胞肺癌における配列番号1およびドセタキセルのフェーズI/II試験
母集団:転移性または切除不可能な局所的に進行したNSCLC
試験投薬計画:配列番号1+ドセタキセル
対象:42(12 フェーズI、30 フェーズII)
試験の説明
固形癌を持つ患者における配列番号1およびゲムシタビンのフェーズI試験
母集団:転移性または切除不可能な固形癌、および、治療上の方策または一時的緩和の方策が存在しないかまたはもはやこれらが効果的でないもの
試験投薬計画:配列番号1+ゲムシタビン
対象:34
試験の説明
難治性または再発した急性骨髄性白血病(AML)における、高用量のシタラビンと併用した配列番号1のフェーズI試験
母集団:難治または再発急性骨髄性白血病
試験投薬計画:配列番号1+シタラビン
対象:30
試験の説明
難治性または再発性の結腸直腸癌における、配列番号1、オキサリプラチンおよびカペシタビンのフェーズI試験
母集団:局所的に進行したかまたは転移性の結腸直腸癌(難治性、再発性)。患者はオキサリプラチン含有の事前投薬計画以外の、少なくとも1回の標準的な事前の化学療法を受けていなければならない。
試験投薬計画:配列番号1+オキサリプラチン&カペシタビン
対象:15〜20
フェーズI
状況:再考中の計画
試験の説明
ホルモン難治性の前立腺癌を持つ患者における、配列番号1およびドセタキセルのフェーズII試験
母集団:ホルモン難治性前立腺癌およびPSAレベルの上昇(PSA≧20)した患者。ECOG 0〜2、妥当な器官機能を持つ
試験投薬計画:配列番号1+ドセタキセル
対象:40
フェーズII
状況:進行中の試験からフェーズIIの用量を待っている
進行した癌を持つ患者における連続的静脈内注入によって与えられる配列番号1のフェーズI試験
適格性の規準
・効果的な治療が利用可能でない固形癌またはリンパ腫の組織学的に確認される診断である
・計測可能であるかまたは評価可能な疾患である
・年齢=18歳;KPS=70%;インフォームドコンセント
・試験前28日(ニトロソ尿素またはミトマイシンに対しては42日)以内に他の癌治療をしていない
・妥当な臓器機能;INRおよびaPTT WNL
・アスピリン、NSAIDsまたは抗凝固剤の必要がない
・妊娠、授乳または出血しやすい体質でない
・オープンラベル、シングルセンター、用量の漸増
・第1相の漸増:1〜3人の患者群;グレード2の毒性まで用量の倍加または148mg/m2の用量で完了する。
・グレード2に等しいいずれかの毒性に3人の患者が登録される必要があり、この毒性で第2相の漸増に切り替える。
・第2相の漸増:少なくとも3人の患者/群;DLTまで20〜30%の漸増
・CADDポンプにより250mLの生理食塩水中で配列番号1を21日CVIで投与し、続いて1週間休止。
・開始用量:18.5mg/m2(サルで最小且つ可逆的な毒性をもたらした用量の1/6)
・DLTまたは急速な腫瘍の進行がなければ、毎2周期後に腫瘍を再評価。
・グレード4のANCの長期継続=3日または熱の付随
・グレード4の血小板、またはグレード1または高度の出血を伴うグレード3の血小板
・グレード3、またはグレード1若しくは高度の出血を伴う高度の凝固障害
・最大の支持ケアにもかかわらず、吐き気、嘔吐または下痢=グレード3
・他の任意の非ヘム毒性=グレード3
・周期1の項目(events)に基づくDLT
・少なくとも3分の1の患者がDLTになる用量レベル
・推奨されるフェーズIIの用量は、MTDよりも低い用量である。
1日目に、ヘパリン化した血液サンプルを、ベースラインで、次に注入の開始後1、2、3、4および6時間に採集した。8日および15日目に、単一のヘパリン化したサンプルをとった。22日目に、ヘパリン化した血液サンプルを、注入の終了の前に、および注入の終了後0.25、0.5、1、2、4および6時間に採集した。血漿をデカンテーションし、−70℃で保存した。
特性 患者数
患者の登録数 36
男性 25
女性 11
平均年齢、歳(範囲) 60(29〜78)
カルノフスキー・パフォーマンス・ステータス(KPS)
100 7
90 12
80 13
70 4
事前治療
化学療法/免疫療法 36
化学療法および放射線 10
診断
腎臓 15
結腸直腸 9
中皮腫 3
前立腺 2
未知の一次性 2
肝臓癌 2
その他 3
進行したかまたは転移性の腎臓細胞癌を持つ患者における配列番号1およびカペシタビン併用療法のフェーズI/II試験
状況
・現在までの試験に参加した31人の患者のうち、29人の患者が試験薬剤(配列番号1)を与えられ、2人の患者は、試験薬剤を与える前に除外した。
・1人の患者は試験治療を継続している
・進行したかまたは転移性の腎臓細胞癌
・フェーズIの用量漸増(N=9)
・フェーズII:(N=20)
・オープンラベル、非無作為化
・フェーズII部分で推奨される用量を見出すためにカペシタビンの用量を固定して併用し、配列番号1の用量をフェーズI部分で漸増した。
・シモンの2段階計画を、25%の標的活性レベルおよび10%の低活性レベルを有するフェーズII部分に対して用い、18人の患者がフェーズII部分での有効性について評価可能となった後に、最初の評価を予定した。
一次的目的:
・この患者集団においてカペシタビンと併用して与えられたときに、配列番号1の推奨されるフェーズIIの用量を決定すること。
・この患者集団において、配列番号1・プラス・カペシタビンの応答速度を決定すること。
二次的目的:
・この患者集団において、配列番号1・プラス・カペシタビンの毒性を評価すること。
薬物動態学的目的:
・この患者集団において、配列番号1およびカペシタビンの薬物動態学的側面を特徴づけること。
・配列番号1 − 148mg/m2/日(N=5 投薬された患者数)を、1,660または1,250または850mg/m2/日のカペシタビンと併用した(必要であれば、1,250または850mg/m2/日にカペシタビンの用量を減少)。
・配列番号1 − 185mg/m2/日(N=28)を、1,660mg/m2/日のカペシタビンと併用した(必要であれば、1,250または850mg/m2/日にカペシタビンの用量を減少)。
・注:2人の患者は配列番号1の容量を増加し、4人の患者はカペシタビンの用量を減少した。
・配列番号1 − 28日の各周期で最初の21日について連続静脈内注入
・カペシタビン − 28日の各周期で最初の21日について毎日2回に分けた用量を経口で与えた。
・1,660mg/m2/日のカペシタビンと併用される配列番号1のmg/m2/日を、この推奨されたフェーズIIの用量での6人を含む9人の患者でのフェーズIの安定性データに基づいたフェーズIIに対する安全な併用用量と定義する。
プロトコールごとに要求される、予定した有効性の評価に対して十分なデータが利用可能であるかどうかを決定するために、予備評価の判定を行った。フェーズIおよびフェーズIIをひとまとめにして考えると、薬剤の安全性/毒性の評価が可能な29人の内、今日までに、配列番号1およびカペシタビンの併用に関する腫瘍評価が可能な21人の患者について、データを集めた。1人の患者は、8ヶ月を超える治療の後、まだ治療を継続中である。
有害事象
この試験についての全ての有害事象は、MedDRA辞典を用いる翻訳手順にかけた。治療された患者の全てが、少なくとも1回の有害事象を経験した。有害事象は、以下の種類、即ち、胃腸障害;一般的な障害および投与部位の症状;代謝および栄養障害;血液およびリンパ系の障害;神経系の障害;皮膚および皮下組織の障害;筋骨格および結合組織の障害;呼吸、胸部および隔膜の障害;感染および体内侵入;検査;並びに精神障害、で最も頻繁に発生した。他の種類の有害事象は患者の25%未満までが経験している。
今日まで、重篤な有害事象は、この試験に登録されている13人の患者で報告されている。これらの事象は、6人の患者についてはプロトコールの治療に無関係であるか、または関連していないように思われ、7人の患者に対しては、もしかすると、おそらくまたは明らかに関連していると思われる。
フェーズI部門に登録されている9人の患者が試験から除かれた。8人の患者は疾患が進行した結果として除かれ、1人の患者は7周期後のさらなる治療を拒絶した。疾患が進行したことにより試験から除かれる前に、1人の患者がわずか1周期のプロトコール療法を受けた。3人の患者が2周期のプロトコール療法を受けた。5人の患者は次に進んで、2周期を超える治療を受けた。即ち、1人の患者は3周期の治療を受け、2人の患者は4周期の治療を受け、3人の患者は7周期の治療を受けた。2人の患者は試験療法中に用量の減少が必要であった。他のフェーズIの患者は試験療法中に用量の減少を必要としなかった。
フェーズII部門に登録されている19人の患者が、今日まで試験から除かれた。10人の患者は疾患が進行した結果として除かれ、6人の患者が要望による患者の拒絶で除かれ、2人の患者が重篤な有害事象により除かれ、1人の患者が試験中に死亡した。1人の患者が試験を継続している。
Claims (56)
- 長さが7から100個のヌクレオチドのアンチセンスオリゴヌクレオチドであって、癌の治療が必要な哺乳動物内の癌の治療に使用するための配列番号1からの少なくとも7個の連続したヌクレオチドを含むアンチセンスオリゴヌクレオチド。
- 前記癌が固形腫瘍である請求項1に記載のアンチセンスオリゴヌクレオチド。
- 前記癌が白血病である請求項1に記載のアンチセンスオリゴヌクレオチド。
- 前記固形腫瘍が薬物耐性である請求項2に記載のアンチセンスオリゴヌクレオチド。
- 前記固形腫瘍が転移性である請求項2に記載のアンチセンスオリゴヌクレオチド。
- 前記固形腫瘍が癌腫である請求項2、4または5のいずれか1項に記載のアンチセンスオリゴヌクレオチド。
- 前記固形腫瘍が肉腫である請求項2、4または5のいずれか1項に記載のアンチセンスオリゴヌクレオチド。
- 前記固形腫瘍がリンパ腫である請求項2、4または5のいずれか1項に記載のアンチセンスオリゴヌクレオチド。
- 前記固形腫瘍が卵巣腫瘍、腎臓腫瘍または脳腫瘍である請求項2、4または5のいずれか1項に記載のアンチセンスオリゴヌクレオチド。
- 前記肉腫が線維肉腫である請求項7に記載のアンチセンスオリゴヌクレオチド。
- 前記リンパ腫が非ホジキンリンパ腫である請求項7に記載のアンチセンスオリゴヌクレオチド。
- 前記白血病が急性骨髄性白血病または慢性骨髄性白血病である請求項3に記載のアンチセンスオリゴヌクレオチド。
- 長さが7から100個のヌクレオチドのアンチセンスオリゴヌクレオチドであって、癌の治療が必要な哺乳動物内の癌の治療において、1以上の化学療法剤と併用して使用するための配列番号1からの少なくとも7個の連続したヌクレオチドを含むアンチセンスオリゴヌクレオチド。
- 前記癌が固形腫瘍である請求項13に記載のアンチセンスオリゴヌクレオチド。
- 前記癌が白血病である請求項13に記載のアンチセンスオリゴヌクレオチド。
- 前記固形腫瘍が薬物耐性である請求項14に記載のアンチセンスオリゴヌクレオチド。
- 前記固形腫瘍が転移性である請求項14に記載のアンチセンスオリゴヌクレオチド。
- 前記固形腫瘍が癌腫である請求項14、16または17のいずれか1項に記載のアンチセンスオリゴヌクレオチド。
- 前記固形腫瘍が肉腫である請求項14、16または17のいずれか1項に記載のアンチセンスオリゴヌクレオチド。
- 前記固形腫瘍がリンパ腫である請求項14、16または17のいずれか1項に記載のアンチセンスオリゴヌクレオチド。
- 前記固形腫瘍が、腎臓腫瘍、乳房腫瘍、肺腫瘍、前立腺腫瘍、結腸腫瘍、メラノーマ、卵巣腫瘍、子宮頸部腫瘍、脳腫瘍、肝臓腫瘍、結腸直腸腫瘍、膵臓腫瘍、尿生殖器腫瘍、胆嚢腫瘍、頭部および頸部腫瘍、食道腫瘍、並びに胆管腫瘍の群から選択される請求項14、16、17または18のいずれか1項に記載のアンチセンスオリゴヌクレオチド。
- 前記固形腫瘍が、腎臓腫瘍、乳房腫瘍、肺腫瘍、前立腺腫瘍、結腸腫瘍、メラノーマ、卵巣腫瘍、子宮頸部腫瘍、脳腫瘍および肝臓腫瘍の群から選択される請求項14、16、17または18のいずれか1項に記載のアンチセンスオリゴヌクレオチド。
- 前記固形腫瘍が、固形腫瘍、腎臓腫瘍、乳房腫瘍、肺腫瘍、前立腺腫瘍および結腸腫瘍の群から選択される請求項14、16、17または18のいずれか1項に記載のアンチセンスオリゴヌクレオチド。
- 前記白血病が急性骨髄性白血病または慢性骨髄性白血病である請求項15に記載のアンチセンスオリゴヌクレオチド。
- 前記白血病が急性骨髄性白血病である請求項15の記載のアンチセンスオリゴヌクレオチド。
- 前記の1以上の化学療法剤が、カペシタビン、5−フルオロウラシル、ビンブラスチン、シタラビン、タキソール、ドセタキセル、ミトキサントロン、オキサリプラチン、マイトマイシン、イリノテカン、ダカルバジン、シスプラチン、ヒドロキシ尿素、ゲムシタビン、プレドニゾン、イダルビシン、エトポシド、フルダラビン、フィルグラスチン、カルボプラチン、パクリタキセルおよびインターロイキン−2、またはこれらの組み合わせの群から選択される請求項13から25のいずれか1項に記載のアンチセンスオリゴヌクレオチド。
- 前記の1以上の化学療法剤が、カペシタビン、5−フルオロウラシル、シタラビン、タキソール、ドセタキセル、ミトキサントロン、オキサリプラチン、マイトマイシン、イリノテカン、ダカルバジン、シスプラチンおよびゲムシタビン、またはこれらの組み合わせの群から選択される請求項13から25のいずれか1項に記載のアンチセンスオリゴヌクレオチド。
- 前記の1以上の化学療法剤が、カペシタビン、シタラビン、タキソール、ドセタキセル、オキサリプラチンおよびゲムシタビン、またはこれらの組み合わせの群から選択される請求項13から25のいずれか1項に記載のアンチセンスオリゴヌクレオチド。
- 前記アンチセンスオリゴヌクレオチドが、配列番号1で示される配列を含む請求項1から28のいずれか1項に記載のアンチセンスオリゴヌクレオチド。
- 前記アンチセンスオリゴヌクレオチドが、配列番号1で示される配列よりなる請求項1から28のいずれか1項に記載のアンチセンスオリゴヌクレオチド。
- 前記アンチセンスオリゴヌクレオチドが、1以上のホスホロチオエートヌクレオチド間結合を含む請求項1から30のいずれか1項に記載のアンチセンスオリゴヌクレオチド。
- 前記動物がヒトである請求項1から31のいずれか1項に記載のアンチセンスオリゴヌクレオチド。
- 長さが20から100個のヌクレオチドのアンチセンスオリゴヌクレオチドであって、固形腫瘍、腎臓癌、乳癌、肺癌、前立腺癌、結腸癌および白血病の群から選択される癌を有するヒトの治療において、1以上の化学療法剤と併用して使用するための配列番号1で示される配列を含むアンチセンスオリゴヌクレオチド。
- 前記アンチセンスオリゴヌクレオチドが配列番号1で示される配列よりなる請求項33に記載のアンチセンスオリゴヌクレオチド。
- 前記アンチセンスオリゴヌクレオチドが1以上のホスホロチオエートヌクレオチド間結合を含む請求項33または34に記載のアンチセンスオリゴヌクレオチド。
- 前記の1以上の化学療法剤がゲムシタビンであり、前記癌が固形腫瘍である請求項33から35のいずれか1項に記載のアンチセンスオリゴヌクレオチド。
- 前記の1以上の化学療法剤がカペシタビンであり、前記癌が腎臓癌である請求項33から35のいずれか1項に記載のアンチセンスオリゴヌクレオチド。
- 前記の1以上の化学療法剤がカペシタビンであり、前記癌が乳癌である請求項33から35のいずれか1項に記載のアンチセンスオリゴヌクレオチド。
- 前記の1以上の化学療法剤がドセタキセルであり、前記癌が前立腺癌である請求項33から35のいずれか1項に記載のアンチセンスオリゴヌクレオチド。
- 前記の1以上の化学療法剤がオキサリプラチンおよびカペシタビンの組み合わせであり、前記癌が結腸癌である請求項33から35のいずれか1項に記載のアンチセンスオリゴヌクレオチド。
- 前記の1以上の化学療法剤がシタラビンであり、前記癌が急性骨髄性白血病である請求項33から35のいずれか1項に記載のアンチセンスオリゴヌクレオチド。
- 前記腎臓癌が進行した腎臓癌である請求項37に記載のアンチセンスオリゴヌクレオチド。
- 前記腎臓癌が転移性の腎臓癌である請求項37に記載のアンチセンスオリゴヌクレオチド。
- 前記アンチセンスオリゴヌクレオチドが、約148mg/m2/日から約185mg/m2/日の用量で前記動物に投与するために処方される請求項37、42または43のいずれか1項に記載のアンチセンスオリゴヌクレオチド。
- 癌の治療のための医薬の製造における、配列番号1からの少なくとも7個の連続したヌクレオチドを含む長さが7から100個のヌクレオチドのアンチセンスオリゴヌクレオチドの使用。
- 前記癌が固形腫瘍である請求項45に記載の使用。
- 前記癌が白血病である請求項45に記載の使用。
- 前記固形腫瘍が薬物耐性である請求項46に記載の使用。
- 前記固形腫瘍が転移性である請求項46に記載の使用。
- 前記固形腫瘍が癌腫である請求項46、48または49のいずれか1項に記載の使用。
- 前記固形腫瘍が肉腫である請求項46、48または49のいずれか1項に記載の使用。
- 前記固形腫瘍がリンパ腫である請求項46、48または49のいずれか1項に記載の使用。
- 前記固形腫瘍が、卵巣腫瘍、腎臓腫瘍または脳腫瘍である請求項46、48または49のいずれか1項に記載の使用。
- 前記肉腫が線維肉腫である請求項51に記載の使用。
- 前記リンパ腫が非ホジキンリンパ腫である請求項52に記載の使用。
- 前記白血病が急性骨髄性白血病または慢性骨髄性白血病である請求項47に記載の使用。
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---|---|---|---|---|
US6593305B1 (en) * | 1996-08-02 | 2003-07-15 | Genesense Technologies Inc. | Antitumor antisense sequences directed against R1 and R2 components of ribonucleotide reductase |
WO2004106518A1 (en) * | 2003-05-31 | 2004-12-09 | Genesense Technologies Inc. | Antisense oligonucleotides directed to ribonucleotide reductase r2 and uses thereof in the treatment of cancer |
CA2553211A1 (en) * | 2004-01-12 | 2005-07-21 | Genesense Technologies Inc. | Antisense oligonucleotides directed to ribonucleotide reductase r2 and uses thereof in combination therapies for the treatment of cancer |
ATE518954T1 (de) * | 2004-08-18 | 2011-08-15 | Lorus Therapeutics Inc | Kleine interferierende rna-moleküle gegen ribonukleotidreduktase und ihre verwendungen |
US20070270371A1 (en) * | 2006-03-31 | 2007-11-22 | Brown Bob D | Dosing and scheduling of oligomers |
US20100204305A1 (en) * | 2007-12-11 | 2010-08-12 | Lorus Therapeutics Inc. | Small interfering rna molecules against ribonucleotide reductase and uses thereof |
CA2744031A1 (en) * | 2008-11-21 | 2010-05-27 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Anticancer combination comprising docetaxel and an antisense oligonucleotide |
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Citations (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO2000047733A1 (en) * | 1999-02-11 | 2000-08-17 | Genesense Technologies Inc. | Antitumor antisense sequences directed against r1 and r2 components of ribonucleotide reductase |
JP2000517167A (ja) * | 1996-08-02 | 2000-12-26 | ジェネセンス テクノロジーズ,インコーポレイテッド | リボヌクレオチドレダクターゼのr1およびr2成分に対して指向される抗腫瘍アンチセンス配列 |
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US6593305B1 (en) * | 1996-08-02 | 2003-07-15 | Genesense Technologies Inc. | Antitumor antisense sequences directed against R1 and R2 components of ribonucleotide reductase |
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---|---|---|---|---|
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WO2000047733A1 (en) * | 1999-02-11 | 2000-08-17 | Genesense Technologies Inc. | Antitumor antisense sequences directed against r1 and r2 components of ribonucleotide reductase |
WO2002085308A2 (en) * | 2001-04-24 | 2002-10-31 | Epigenesis Pharmaceuticals, Inc. | Antisense and anti-inflammatory based compositions to treat respiratory disorders |
Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO2010086964A1 (ja) * | 2009-01-28 | 2010-08-05 | 株式会社 静岡カフェイン工業所 | がん治療のための併用療法 |
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