JP2006333827A - UTILIZATION OF CHROMOSOME SNPs ALLELE FOR IDENTIFYING BREWING YEAST - Google Patents

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Abstract

<P>PROBLEM TO BE SOLVED: To provide a method for discriminating the strains of yeast from each other, a method for classifying the strains of the yeast and a method for selecting the strains of the yeast having characteristic brewing properties. <P>SOLUTION: It is possible to identify and classify the strains of the yeast, and select the strains having the characteristic brewing properties by preparing primer sets for gene polymorphisms and detecting the genome DNA of the yeast by using ≥1 polymorphism as indices. <P>COPYRIGHT: (C)2007,JPO&INPIT

Description

本発明は、酵母の菌株の識別方法、分類方法、及び、求める醸造特性を持つ株の選抜方法に関する。   The present invention relates to a yeast strain identification method, a classification method, and a strain selection method having desired brewing characteristics.

従来酵母の同定には、培養による糖の資化性検査などの生化学的検査に主に依存してきた。これらの検査は時間がかかり、培養条件の影響などにより、検査結果は必ずしも信頼に値するものではない。   Conventionally, the identification of yeast has mainly relied on biochemical tests such as a sugar assimilation test by culture. These tests take time, and the test results are not always reliable due to the influence of culture conditions.

ビールの醸造に使用されている酵母は、大きく分けて、2種に分類される。上面発酵に用いられる上面発酵酵母と、下面発酵に用いられる下面発酵酵母である。   Yeasts used for beer brewing are roughly classified into two types. They are a top fermentation yeast used for top fermentation and a bottom fermentation yeast used for bottom fermentation.

上面発酵酵母はサッカロマイセス・セレビシエ(Saccharomyces cerevisiae)に分類され、一方、下面発酵酵母は、サッカロマイセス・パストリアヌス(Saccharomyces pastorianus)に分類されている。サッカロマイセス・パストリアヌスは、サッカロマイセス・セレビシエと、その近縁種であるサッカロマイセス・バヤヌス(Saccharomyces bayanus)の2種のゲノムを合わせ持つ異質倍数体であることが知られている。サッカロマイセス・パストリアヌスのゲノムを構成する2種のサブゲノムは、サッカロマイセス・セレビシエに由来するものをSc型ゲノム、サッカロマイセス・バヤヌスに由来するものをLg型ゲノムと呼ぶ。このように、上面発酵酵母と下面発酵酵母の2種の菌種は、非常に近縁であり、ともにビール醸造に使用されるため、通常の菌学的性質は共通しており、生化学的方法による菌株の区別は困難である。まして、同一菌種内の菌株の識別は、さらに困難を極める。   The top fermenting yeast is classified as Saccharomyces cerevisiae, while the bottom fermenting yeast is classified as Saccharomyces pastorianus. Saccharomyces pastorianus is known to be a heteroploid having both two types of genomes: Saccharomyces cerevisiae and its related species, Saccharomyces bayanus. As the two subgenomes constituting the genome of Saccharomyces pastorianus, those derived from Saccharomyces cerevisiae are referred to as Sc-type genomes, and those derived from Saccharomyces bayanus are referred to as Lg-type genomes. In this way, the two types of strains, top fermented yeast and bottom fermented yeast, are very closely related and both are used for brewing beer. It is difficult to distinguish strains by methods. Furthermore, identification of strains within the same species is even more difficult.

生化学的検査に代わる菌株同定法としては、DNAレベルの差異を検出する方法が挙げられる。特開平9−299090「S. diastaticusの検出に用いるプライマー」に、ビール醸造上の有害野生酵母であるSaccharomyces diastaticusの検出の方法が記載され、特開平11−56366「酵母を同定する方法」に、醸造用酵母と非醸造用酵母を区別し同定する方法が記載され、特開2002−233382「ビール酵母の識別方法」に、醸造用下面発酵酵母と野生酵母を識別する方法が記載されている。これらの方法は全て、醸造用酵母とその他の酵母を識別するための方法であって、醸造用酵母菌株同士の識別に関する方法ではない。すなわち、これらの方法では、遺伝的に非常に近い同一用途の酵母菌株を識別できなかった。   Examples of strain identification methods that replace biochemical tests include methods for detecting differences in DNA levels. JP-A-9-299090 “Primer used for detection of S. diastaticus” describes a method for detecting Saccharomyces diastaticus, a harmful wild yeast on beer brewing, and JP-A-11-56366 “Method for identifying yeast” A method for distinguishing and identifying brewing yeast and non-brewing yeast is described, and Japanese Patent Application Laid-Open No. 2002-233382 “Determination of beer yeast” describes a method for discriminating bottom fermentation yeast for brewing from wild yeast. These methods are all methods for discriminating brewing yeasts from other yeasts, and are not methods for discriminating between brewing yeast strains. That is, these methods could not identify yeast strains of the same use that are genetically very close.

DNAレベルの差異の検出による酵母菌株の識別法としては、特開2005−27527「清酒酵母の菌株同定法」に、清酒酵母に属する菌株を識別する方法が記載されている。しかしながら、清酒酵母以外の醸造用酵母について、菌株を識別する方法は、未だかつてなかったのである。   As a method for identifying a yeast strain by detecting a difference in DNA level, JP 2005-27527 “Strain yeast strain identification method” describes a method for identifying a strain belonging to sake yeast. However, there has never been a method for discriminating strains for brewing yeast other than sake yeast.

SNP(Single Nucleotide Polymorphism、一塩基多型)は、DNAレベルのわずかな違いを識別できるため、遺伝的に非常に近い品種の識別にも利用可能と考えられている。特開2002−209581「牛の品種鑑別方法」に、SNPを利用した牛の品種識別方法が記載されている。しかしながら、SNPを利用した酵母の菌株識別の方法は、まだない。   Since SNP (Single Nucleotide Polymorphism, single nucleotide polymorphism) can discriminate slight differences in DNA level, it is considered that it can be used to identify genetically very close varieties. JP 2002-209581 “Cow breed identification method” describes a cow breed identification method using SNP. However, there is still no method for yeast strain identification using SNP.

酵母の分類も、酵母の識別の場合と同様、培養による糖の資化性検査などの生化学的検査に主に依存してきた。これらの検査は時間がかかり、培養条件の影響などにより、検査結果は必ずしも信頼に値するものではない。   As in the case of yeast identification, the classification of yeast has mainly depended on biochemical tests such as a sugar assimilation test by culture. These tests take time, and the test results are not always reliable due to the influence of culture conditions.

生化学的検査に代わる菌株同定法としては、DNAレベルの差異を検出する方法が挙げられる。AFLP(Amplified Fragment Length Polymorphism)法による分類を試みた文献があるが(例えば、非特許文献1参照)、遺伝的に非常に近い同一用途の酵母菌株の分類には不十分であった。   Examples of strain identification methods that replace biochemical tests include methods for detecting differences in DNA levels. Although there is a literature that attempted classification by the AFLP (Amplified Fragment Length Polymorphism) method (see, for example, Non-Patent Document 1), it was insufficient for classification of yeast strains of genetically very similar uses.

亜硫酸、エステル、高級アルコールはいずれも、酒類の香味に大きな影響を与える、重要な香気成分である。   Sulfurous acid, esters, and higher alcohols are all important aroma components that greatly affect the flavor of alcoholic beverages.

亜硫酸は、高い抗酸化効果を有する物質であり、食品や飲料、医薬品などの分野では、酸化防止剤として広く利用されている。ビール醸造においても、製品に含まれる亜硫酸濃度の上昇に依存して品質保持期間が長期化することが知られており、製品中の亜硫酸濃度を高めれば、香味安定性に優れ、長期の品質保持期間を有する製品を製造することができる。   Sulfurous acid is a substance having a high antioxidant effect, and is widely used as an antioxidant in the fields of food, beverages, pharmaceuticals and the like. Also in beer brewing, it is known that the quality retention period will be prolonged depending on the increase in the concentration of sulfite contained in the product, and if the concentration of sulfite in the product is increased, the flavor stability is excellent and the quality is maintained for a long time. A product with a period can be manufactured.

遺伝子組換えの技術を用いて、酵母の亜硫酸生成能を高める数々の試みがなされているが(例えば、特許文献6、非特許文献2、非特許文献3参照)、遺伝子組換え食品に対する消費者のイメージ等を考慮すれば、遺伝子組換え技術を用いて酵母の亜硫酸生成能を高めることは好適ではない。   Numerous attempts have been made to increase the ability of yeast to produce sulfite using genetic recombination techniques (see, for example, Patent Document 6, Non-patent Document 2, and Non-patent Document 3). In view of the above image and the like, it is not preferable to increase the ability of yeast to produce sulfite using genetic recombination technology.

硫化水素は、「腐った卵」様の臭いを有する物質であり、ビール醸造においては、製品のオフフレーバーの原因となるだけでなく、他のオフフレーバー原因物質の前駆体となる。そのため、酵母の硫化水素生成能は低いほうが望ましいとされる。   Hydrogen sulfide is a substance having a “rotted egg” -like odor, and in beer brewing, it not only causes off-flavor of the product but also a precursor of other off-flavor causing substances. Therefore, it is desirable that the ability of yeast to produce hydrogen sulfide is low.

遺伝子組換えの技術を用いて、酵母の硫化水素生成能を下げる試みもなされている。特許第2005398号「酵母硫化水素生成抑制遺伝子及び当該遺伝子を導入した醸造用酵母」に、NHS5遺伝子の導入によって酵母の硫化水素生成能を低下させる方法が記載され、特許第3514507号「硫化水素生成能が低減された酵母とこの酵母を用いたビール製造法」に、MET25遺伝子を構成的に発現させることによって酵母の硫化水素生成能を低下させる方法が記載されている。しかしながら、遺伝子組換え食品に対する消費者のイメージ等を考慮すれば、遺伝子組換え技術を用いて酵母の硫化水素生成能を低減させることは好適ではない。   Attempts have also been made to reduce the ability of yeast to produce hydrogen sulfide using genetic recombination techniques. Japanese Patent No. 2005398 “Yeast Hydrogen Sulfide Production Suppressing Gene and Brewing Yeast Introduced with the Gene” describes a method for reducing the hydrogen sulfide production ability of yeast by introducing NHS5 gene. Japanese Patent No. 3514507 “Hydrogen Sulfide Production” "Yeast with reduced ability and beer production method using this yeast" describes a method for reducing the hydrogen sulfide producing ability of yeast by constitutively expressing the MET25 gene. However, considering the consumer image of genetically modified foods, it is not preferable to reduce the ability of yeast to produce hydrogen sulfide using genetic modification techniques.

数多くの酵母菌株の中から、亜硫酸生成能の高い菌株や、硫化水素生成能の低い菌株を選抜することは、一般的である。しかしながら、これらの菌株を選抜するためには、発酵試験を行なう必要があった。発酵試験は時間がかかり、培養条件の影響などにより、検査結果は必ずしも信頼に値するものではなかった。   It is common to select a strain having a high sulfite-producing ability or a strain having a low hydrogen sulfide-producing ability from many yeast strains. However, in order to select these strains, it was necessary to conduct a fermentation test. The fermentation test takes time, and the test results are not always reliable due to the influence of culture conditions.

エステルは、酒類の香味の特徴を決定する特に重要な香気成分であり、酵母によって発酵中に生成される物質である。高級アルコールも酵母によって生成される物質であるが、高級アルコールは酒類の香味に影響を与えるだけでなく、重要な香気成分であるエステル生成の前駆体となり、酒類の製品中の含有量は、製品の特性に直結する重要な要因である。従来、エステルや高級アルコール生成能の高い、若しくは、低い酵母菌株を選抜するためには、発酵試験を行なう必要があった。発酵試験は時間がかかり、培養条件の影響などにより、検査結果は必ずしも信頼に値するものではなかった。   Esters are particularly important aroma components that determine the flavor characteristics of liquors and are substances produced during fermentation by yeast. Higher alcohols are also substances produced by yeasts, but higher alcohols not only affect the flavor of alcoholic beverages, but also become precursors of ester production, which is an important aroma component, and the content of alcoholic beverages in the product This is an important factor directly related to the characteristics of Conventionally, it was necessary to conduct a fermentation test in order to select yeast strains with high or low ester or higher alcohol production ability. The fermentation test takes time, and the test results are not always reliable due to the influence of culture conditions.

特開平9−299090号公報JP-A-9-299090 特開平11−56366号公報JP-A-11-56366 特開2002−233382号公報JP 2002-233382 A 特開2005−27527号公報Japanese Patent Laying-Open No. 2005-27527 特開2002−209581号公報JP 2002-209581 A 特開2004−283169号公報JP 2004-283169 A 特許第2005398号公報Japanese Patent No. 2005398 特許第3514507号公報Japanese Patent No. 3514507 M. Azumi et al., 「Yeast」、Vol.18、p.1145〜1154、2001M.M. Azumi et al. “Yeast”, Vol. 18, p. 1145 to 1154, 2001 C. Korch et al., 「Proc. Eur. Brew. Conv. Congress., Lisbon」、 p.201〜208、1991C. Korch et al. "Proc. Eur. Brew. Conv. Congress., Lisbon", p. 201-208, 1991 J. Hansen et al., 「Nature Biotech.」、Vol.14、p.1587〜1591、1996J. et al. Hansen et al. "Nature Biotech.", Vol. 14, p. 1587-1591, 1996

ビールや発泡酒、その他の雑酒の醸造において酵母は、アルコール発酵を行なうのみならず、様々な香気成分を生成する。酵母の菌株と麦汁成分、発酵制御法の組み合わせによって、ビールや発泡酒、その他の雑酒の香味に特徴を持たせるので、酵母の菌株を分類・同定することは、適切な醸造管理を行なう上で欠かせない技術である。このように、実際の酒類製造の現場において、また試験研究機関において、短時間で正確に多数の酵母菌株を識別・分類する技術の確立は、従来より、重大な課題である。また、亜硫酸はビールや発泡酒、その他の雑酒の品質保持期間に影響を与える重要な物質であり、さらにエステルや高級アルコールは、ビールや発泡酒、その他の雑酒において、製品の香味上の特徴を決定する重要な香気成分である。本発明は、醸造用途の酵母の菌株を相互に識別する方法と、醸造用途の酵母の菌株を分類する方法、また、亜硫酸や硫化水素、エステル、高級アルコールといった物質の生成能の高い若しくは低い酵母を選抜する方法を提供することを目的としてなされたものである。   In brewing beer, happoshu and other miscellaneous sake, yeast not only performs alcoholic fermentation but also produces various aroma components. Depending on the combination of yeast strains, wort components and fermentation control methods, the flavor of beer, happoshu and other miscellaneous sakes will be characterized, so classification and identification of yeast strains will ensure proper brewing management. This is an essential technology. As described above, establishment of a technique for accurately identifying and classifying a large number of yeast strains in a short time in an actual liquor production site and in a test research institution has been a serious problem. Sulfurous acid is an important substance that affects the quality retention period of beer, happoshu, and other miscellaneous sake, and esters and higher alcohols are used in beer, happoshu, and other miscellaneous sakes in terms of product flavor. It is an important aroma component that determines its characteristics. The present invention relates to a method for distinguishing yeast strains for brewing from each other, a method for classifying yeast strains for brewing, and yeast having high or low ability to produce substances such as sulfite, hydrogen sulfide, esters, and higher alcohols. It was made for the purpose of providing a method for selecting the.

本発明者らは、上記課題を解決するため鋭意研究を行った結果、酵母のゲノムDNAについて、ゲノムワイドに探索した33遺伝子座の遺伝子多型についてのアレルを検出し、検出されたアレルの組み合わせに基づいて前記ゲノムDNAの属する酵母菌株を特定する方法により、酵母の菌株を相互に識別することに、また、酵母を分類することに成功した。さらには、特定のアレルを調べることにより、亜硫酸や硫化水素、エステル、高級アルコールといった物質の生成能の高い若しくは低い酵母を選抜することに成功した。本発明はこの成果に基づいて完成された。   As a result of intensive studies to solve the above problems, the present inventors have detected alleles for gene polymorphisms at 33 loci searched genome-wide for genomic DNA of yeast, and combinations of the detected alleles Based on the above, the yeast strains to which the genomic DNA belongs were identified, and the yeast strains were distinguished from each other and the yeasts were classified. Furthermore, by examining specific alleles, we succeeded in selecting yeasts with high or low ability to produce substances such as sulfurous acid, hydrogen sulfide, esters, and higher alcohols. The present invention has been completed based on this result.

すなわち、本発明は以下の通りである。
ビール酵母のゲノムDNAについて下記(1)から(33)のいずれか、又は(1)から(33)から複数個を選んだ組み合わせからなるアレルの検出を行い、その結果に基づいて酵母の菌株を特定することを特徴とする、酵母の菌株の識別方法及び分類方法:
(1)配列番号1の、(ア)から(キ)の、少なくとも1つ:
(ア)塩基番号53の位置に存在する塩基C若しくはTであるアレル、
(イ)塩基番号140の位置に存在する塩基A若しくはGであるアレル、
(ウ)塩基番号170の位置に存在する塩基C若しくTはであるアレル、
(エ)塩基番号185の位置に存在する塩基A若しくはGであるアレル、
(オ)塩基番号225の位置に存在する塩基A若しくはGであるアレル、
(カ)塩基番号239の位置に存在する塩基G若しくはTであるアレル、及び
(キ)塩基番号298の位置に存在する塩基A若しくはGであるアレル;
That is, the present invention is as follows.
For the genomic DNA of brewer's yeast, alleles consisting of a combination selected from the following (1) to (33) or a plurality selected from (1) to (33) are detected, and the yeast strain is determined based on the result. Yeast strain identification method and classification method characterized by:
(1) At least one of (a) to (ki) of SEQ ID NO: 1:
(A) an allele which is a base C or T present at the position of base number 53,
(A) an allele that is base A or G present at the position of base number 140;
(C) an allele whose base C or T is at the position of base number 170,
(D) an allele that is base A or G present at the position of base number 185,
(E) an allele that is base A or G present at the position of base number 225,
(F) an allele which is the base G or T present at the position of the base number 239, and (g) an allele which is the base A or G present at the position of the base number 298;

(2)配列番号2の、(ア)から(オ)の、少なくとも1つ:
(ア)塩基番号104の位置に存在する塩基C若しくはTであるアレル、
(イ)塩基番号149の位置に存在する塩基A若しくはGであるアレル、
(ウ)塩基番号304の位置に存在する塩基C若しくはTであるアレル、
(エ)塩基番号321の位置に存在する塩基C若しくはTであるアレル、及び
(オ)塩基番号322の位置に存在する塩基A若しくはGであるアレル;
(2) at least one of (a) to (e) of SEQ ID NO: 2:
(A) an allele which is the base C or T present at the position of the base number 104;
(A) an allele that is base A or G present at the position of base number 149;
(C) an allele that is base C or T present at the position of base number 304,
(D) an allele which is the base C or T present at the position of the base number 321 and (e) an allele which is the base A or G present at the position of the base number 322;

(3)配列番号3の、(ア)から(ウ)の、少なくとも1つ:
(ア)塩基番号125の位置に存在する塩基C若しくはTであるアレル、
(イ)塩基番号145の位置に存在する塩基A若しくはGであるアレル、
(ウ)塩基番号351から354の位置に存在する3塩基の挿入若しくは非挿入であるアレル;
(3) at least one of (a) to (c) of SEQ ID NO: 3:
(A) an allele which is a base C or T present at the position of base number 125,
(A) an allele that is base A or G present at the position of base number 145;
(C) an allele with insertion or non-insertion of 3 bases present at positions of base numbers 351 to 354;

(4)配列番号4の、(ア)から(コ)の、少なくとも1つ:
(ア)塩基番号67の位置に存在する塩基C若しくはTであるアレル、
(イ)塩基番号74の位置に存在する塩基C若しくはTであるアレル、
(ウ)塩基番号104の位置に存在する塩基A若しくはGであるアレル、
(エ)塩基番号160の位置に存在する塩基C若しくはTであるアレル、
(オ)塩基番号268の位置に存在する塩基A若しくはCであるアレル、
(カ)塩基番号269の位置に存在する塩基C若しくはTであるアレル、
(キ)塩基番号324の位置に存在する塩基A若しくはGであるアレル、
(ク)塩基番号446の位置に存在する塩基C若しくはTであるアレル、
(ケ)塩基番号453の位置に存在する塩基G若しくはTであるアレル、及び
(コ)塩基番号466の位置に存在する塩基A若しくはGであるアレル;
(4) at least one of (a) to (co) of SEQ ID NO: 4:
(A) an allele which is a base C or T present at the position of base number 67,
(A) an allele which is a base C or T present at the position of base number 74;
(C) an allele that is base A or G present at the position of base number 104;
(D) an allele which is a base C or T present at the position of base number 160;
(E) an allele that is base A or C present at the position of base number 268,
(F) an allele that is base C or T present at the position of base number 269;
(G) an allele that is base A or G present at the position of base number 324;
(H) an allele that is base C or T present at the position of base number 446;
(G) an allele which is the base G or T present at the position of the base number 453, and (co) an allele which is the base A or G present at the position of the base number 466;

(5)配列番号5の、(ア)及び(イ)の、少なくとも1つ:
(ア)塩基番号431の位置に存在する塩基A若しくはGであるアレル、及び
(イ)塩基番号464の位置に存在する塩基C若しくはTであるアレル;
(5) At least one of (a) and (b) of SEQ ID NO: 5:
(A) an allele which is the base A or G present at the position of the base number 431, and (b) an allele which is the base C or T present at the position of the base number 464;

(6)配列番号6の、(ア)から(シ)の、少なくとも1つ:
(ア)塩基番号75の位置に存在する塩基A若しくはCであるアレル、
(イ)塩基番号185の位置に存在する塩基C若しくはTであるアレル、
(ウ)塩基番号216の位置に存在する塩基C若しくはTであるアレル、
(エ)塩基番号217の位置に存在する塩基A若しくはCであるアレル、
(オ)塩基番号253の位置に存在する塩基A若しくはCであるアレル、
(カ)塩基番号269の位置に存在する塩基C若しくはTであるアレル、
(キ)塩基番号318の位置に存在する塩基C若しくはTであるアレル、
(ク)塩基番号441の位置に存在する塩基A若しくはTであるアレル、
(ケ)塩基番号444の位置に存在する塩基A若しくはGであるアレル、
(コ)塩基番号445の位置に存在する塩基A若しくはTであるアレル、
(サ)塩基番号463の位置に存在する塩基C若しくはTであるアレル、及び
(シ)塩基番号493の位置に存在する塩基C若しくはTであるアレル;
(6) At least one of (A) to (B) of SEQ ID NO: 6:
(A) an allele that is base A or C present at the position of base number 75;
(A) an allele which is the base C or T present at the position of the base number 185,
(C) an allele which is the base C or T present at the position of the base number 216,
(D) an allele that is base A or C present at the position of base number 217,
(E) an allele that is base A or C present at the position of base number 253,
(F) an allele that is base C or T present at the position of base number 269;
(G) an allele that is base C or T present at the position of base number 318,
(H) an allele that is base A or T present at the position of base number 441;
(G) an allele that is base A or G present at the position of base number 444;
(E) an allele that is base A or T present at the position of base number 445;
(Sa) an allele that is a base C or T present at the position of base number 463, and (f) an allele that is a base C or T present at the position of base number 493;

(7)配列番号7の、(ア)から(カ)の、少なくとも1つ:
(ア)塩基番号213の位置に存在する塩基A若しくはGであるアレル、
(イ)塩基番号243の位置に存在する塩基A若しくはGであるアレル、
(ウ)塩基番号290の位置に存在する塩基C若しくはTであるアレル、
(エ)塩基番号348の位置に存在する塩基A若しくはTであるアレル、
(オ)塩基番号350の位置に存在する塩基A若しくはGであるアレル、及び
(カ)塩基番号378の位置に存在する塩基C若しくはTであるアレル;
(7) At least one of (a) to (f) of SEQ ID NO: 7:
(A) an allele that is base A or G present at the position of base number 213,
(A) an allele that is base A or G present at the position of base number 243;
(C) an allele that is base C or T present at the position of base number 290,
(D) an allele that is base A or T present at the position of base number 348;
(E) an allele which is the base A or G present at the position of the base number 350, and (f) an allele which is the base C or T present at the position of the base number 378;

(8)配列番号8の、(ア)から(オ)の、少なくとも1つ:
(ア)塩基番号88の位置に存在する塩基A若しくはGであるアレル、
(イ)塩基番号152の位置に存在する塩基C若しくはTであるアレル、
(ウ)塩基番号161の位置に存在する塩基C若しくはTであるアレル、
(エ)塩基番号309の位置に存在する塩基A若しくはGであるアレル、及び
(オ)塩基番号381の位置に存在する塩基C若しくはTであるアレル;
(8) at least one of (A) to (E) of SEQ ID NO: 8:
(A) an allele that is base A or G present at the position of base number 88;
(A) an allele which is a base C or T present at the position of base number 152;
(C) an allele that is base C or T present at the position of base number 161;
(D) an allele which is the base A or G present at the position of the base number 309, and (e) an allele which is the base C or T present at the position of the base number 381;

(9)配列番号9の、(ア)から(ウ)の、少なくとも1つ:
(ア)塩基番号66の位置に存在する塩基C若しくはTであるアレル、
(イ)塩基番号229の位置に存在する塩基C若しくはTであるアレル、及び
(ウ)塩基番号262の位置に存在する塩基A若しくはTであるアレル;
(9) At least one of (A) to (U) of SEQ ID NO: 9:
(A) an allele which is a base C or T present at the position of base number 66;
(A) an allele that is the base C or T present at the position of the base number 229, and (c) an allele that is the base A or T at the position of the base number 262;

(10)配列番号10の、(ア)から(ウ)の、少なくとも1つ:
(ア)塩基番号163から170の位置に存在する1塩基Tの欠失若しくは非欠失であるアレル、
(イ)塩基番号309から317の位置に存在する1塩基Aの欠失若しくは非欠失であるアレル、及び
(ウ)塩基番号356の位置に存在する塩基A若しくはCであるアレル;
(10) At least one of (a) to (c) of SEQ ID NO: 10:
(A) an allele that is a deletion or non-deletion of 1 base T present at positions from base numbers 163 to 170;
(A) an allele that is deleted or non-deletion of 1 base A present at the position of base numbers 309 to 317, and (c) an allele that is base A or C at the position of base number 356;

(11)配列番号11の、(ア)から(キ)の、少なくとも1つ:
(ア)塩基番号69の位置に存在する塩基A若しくはTであるアレル、
(イ)塩基番号93の位置に存在する塩基C若しくはTであるアレル、
(ウ)塩基番号111の位置に存在する塩基A若しくはGであるアレル、
(エ)塩基番号208の位置に存在する塩基C若しくはTであるアレル、
(オ)塩基番号210の位置に存在する塩基A若しくはGであるアレル、
(カ)塩基番号408の位置に存在する塩基C若しくはTであるアレル、及び
(キ)塩基番号429の位置に存在する塩基A若しくはGであるアレル;
(11) At least one of (a) to (ki) of SEQ ID NO: 11:
(A) an allele that is base A or T present at the position of base number 69;
(A) an allele which is a base C or T present at the position of base number 93;
(C) an allele that is base A or G present at the position of base number 111;
(D) an allele which is the base C or T present at the position of the base number 208;
(E) an allele that is base A or G present at the position of base number 210;
(F) an allele which is the base C or T present at the position of the base number 408, and (g) an allele which is the base A or G present at the position of the base number 429;

(12)配列番号12の、(ア)から(ウ)の、少なくとも1つ:
(ア)塩基番号104の位置に存在する塩基A若しくはGであるアレル、
(イ)塩基番号151の位置に存在する塩基C若しくはGであるアレル、及び
(ウ)塩基番号343の位置に存在する塩基C若しくはTであるアレル;
(12) At least one of (a) to (c) of SEQ ID NO: 12:
(A) an allele that is base A or G present at the position of base number 104;
(A) an allele that is the base C or G present at the position of the base number 151, and (c) an allele that is the base C or T present at the position of the base number 343;

(13)配列番号13の、(ア)から(ウ)の、少なくとも1つ:
(ア)塩基番号126の位置に存在する塩基A若しくはGであるアレル、
(イ)塩基番号201の位置に存在する塩基C若しくはGであるアレル、及び
(ウ)塩基番号264の位置に存在する塩基A若しくはGであるアレル;
(13) at least one of (a) to (c) of SEQ ID NO: 13:
(A) an allele that is base A or G present at the position of base number 126;
(A) an allele that is the base C or G present at the position of the base number 201, and (c) an allele that is the base A or G present at the position of the base number 264;

(14)配列番号14の、(ア)から(ウ)の、少なくとも1つ:
(ア)塩基番号132の位置に存在する塩基A若しくはCであるアレル、
(イ)塩基番号185の位置に存在する塩基A若しくはCであるアレル、及び
(ウ)塩基番号189の位置に存在する塩基C若しくはTであるアレル;
(14) At least one of (A) to (U) of SEQ ID NO: 14:
(A) an allele that is base A or C present at the position of base number 132;
(A) an allele that is base A or C present at the position of base number 185, and (c) an allele that is base C or T present at the position of base number 189;

(15)配列番号15の、(ア)から(オ)の、少なくとも1つ:
(ア)塩基番号101の位置に存在する塩基C若しくはTであるアレル、
(イ)塩基番号183の位置に存在する塩基C若しくはTであるアレル、
(ウ)塩基番号188から192の位置に存在する1塩基Aの挿入若しくは非挿入であるアレル、
(エ)塩基番号280の位置に存在する塩基C若しくはTであるアレル、及び
(オ)塩基番号338の位置に存在する塩基若GしくはTであるアレル;
(15) at least one of (A) to (E) of SEQ ID NO: 15:
(A) an allele that is base C or T present at the position of base number 101,
(A) an allele that is base C or T present at the position of base number 183,
(C) an allele that is inserted or non-inserted into 1 base A existing at positions of base numbers 188 to 192,
(D) an allele which is the base C or T present at the position of the base number 280, and (e) an allele which is the base G or T present at the position of the base number 338;

(16)配列番号16の、(ア)から(サ)の、少なくとも1つ:
(ア)塩基番号134の位置に存在する塩基A若しくはTであるアレル、
(イ)塩基番号135の位置に存在する塩基A若しくはTであるアレル、
(ウ)塩基番号137の位置に存在する塩基C若しくはTであるアレル、
(エ)塩基番号138の位置に存在する塩基A若しくはTであるアレル、
(オ)塩基番号142の位置に存在する塩基A若しくはGであるアレル、
(カ)塩基番号165の位置に存在する塩基A若しくはGであるアレル、
(キ)塩基番号183の位置に存在する塩基C若しくはTであるアレル、
(ク)塩基番号219の位置に存在する塩基A若しくはCであるアレル、
(ケ)塩基番号232の位置に存在する塩基C若しくはGであるアレル、
(コ)塩基番号293の位置に存在する塩基A若しくはでGあるアレル、及び
(サ)塩基番号332の位置に存在する塩基C若しくはTであるアレル;
(16) At least one of (a) to (sa) of SEQ ID NO: 16:
(A) an allele that is base A or T present at the position of base number 134;
(A) an allele that is base A or T present at the position of base number 135;
(C) an allele that is base C or T present at the position of base number 137,
(D) an allele that is base A or T present at the position of base number 138;
(E) an allele that is base A or G present at the position of base number 142;
(F) an allele that is base A or G present at the position of base number 165,
(G) an allele that is base C or T present at the position of base number 183,
(H) an allele that is base A or C present at the position of base number 219,
(G) an allele that is base C or G present at the position of base number 232;
(Co) an allele that is base A or G at the position of base number 293, and (sa) an allele that is base C or T at the position of base number 332;

(17)配列番号17の、(ア)から(オ)の、少なくとも1つ:
(ア)塩基番号65の位置に存在する塩基A若しくはTであるアレル、
(イ)塩基番号158の位置に存在する塩基A若しくはGであるアレル、
(ウ)塩基番号236の位置に存在する塩基G若しくはTであるアレル、
(エ)塩基番号256の位置に存在する塩基A若しくはGであるアレル、及び
(オ)塩基番号474の位置に存在する塩基C若しくはTであるアレル;
(17) at least one of (a) to (e) of SEQ ID NO: 17:
(A) an allele that is base A or T present at the position of base number 65,
(A) an allele that is base A or G present at the position of base number 158,
(C) an allele that is the base G or T at the position of base number 236,
(D) an allele that is base A or G present at the position of base number 256, and (e) an allele that is base C or T at the position of base number 474;

(18)配列番号18の、(ア)及び(イ)の、少なくとも1つ:
(ア)塩基番号96の位置に存在する塩基C若しくはTであるアレル、及び
(イ)塩基番号133の位置に存在する塩基C若しくはTであるアレル;
(18) at least one of (a) and (b) of SEQ ID NO: 18:
(A) an allele which is the base C or T present at the position of the base number 96, and (a) an allele which is the base C or T present at the position of the base number 133;

(19)配列番号19の、(ア)から(エ)の、少なくとも1つ:
(ア)塩基番号261の位置に存在する塩基A若しくはGであるアレル、
(イ)塩基番号282の位置に存在する塩基C若しくはTであるアレル、
(ウ)塩基番号371の位置に存在する塩基C若しくはTであるアレル、及び
(エ)塩基番号440の位置に存在する塩基C若しくはTであるアレル;
(19) At least one of (a) to (e) of SEQ ID NO: 19:
(A) an allele that is base A or G present at the position of base number 261,
(A) an allele that is base C or T present at the position of base number 282,
(C) an allele that is base C or T present at the position of base number 371, and (d) an allele that is base C or T at the position of base number 440;

(20)配列番号20の、(ア)及び(イ)の、少なくとも1つ:
(ア)塩基番号247の位置に存在する塩基A若しくはGであるアレル、及び
(イ)塩基番号362の位置に存在する塩基C若しくはTであるアレル;
(20) At least one of (a) and (b) of SEQ ID NO: 20:
(A) an allele which is the base A or G present at the position of the base number 247, and (b) an allele which is the base C or T present at the position of the base number 362;

(21)配列番号21の、(ア)から(エ)の、少なくとも1つ:
(ア)塩基番号82の位置に存在する塩基A若しくはGであるアレル、
(イ)塩基番号91の位置に存在する塩基A若しくはGであるアレル、
(ウ)塩基番号139の位置に存在する塩基G若しくはTであるアレル、及び
(エ)塩基番号140の位置に存在する塩基C若しくはTであるアレル;
(21) at least one of (a) to (e) of SEQ ID NO: 21:
(A) an allele that is base A or G present at the position of base number 82;
(A) an allele that is base A or G present at the position of base number 91;
(C) an allele that is the base G or T present at the position of the base number 139, and (d) an allele that is the base C or T at the position of the base number 140;

(22)(ア)配列番号22の、塩基番号359から364の位置に存在する塩基Aの欠失若しくは非欠失であるアレル;
(23)配列番号23の、(ア)及び(イ)の、少なくとも1つ:
(ア)塩基番号420の位置に存在する塩基A若しくはTであるアレル、及び
(イ)塩基番号485の位置に存在する塩基C若しくはGであるアレル;
(22) (a) an allele that is a deletion or non-deletion of base A present at positions of base numbers 359 to 364 of SEQ ID NO: 22;
(23) at least one of (a) and (b) of SEQ ID NO: 23:
(A) an allele which is the base A or T present at the position of the base number 420, and (b) an allele which is the base C or G present at the position of the base number 485;

(24)配列番号24の、(ア)から(コ)の、少なくとも1つ:
(ア)塩基番号189の位置に存在する塩基C若しくはTであるアレル、
(イ)塩基番号209の位置に存在する塩基A若しくはGであるアレル、
(ウ)塩基番号218の位置に存在する塩基C若しくはTであるアレル、
(エ)塩基番号260の位置に存在する塩基C若しくはTであるアレル、
(オ)塩基番号283の位置に存在する塩基C若しくはTであるアレル、
(カ)塩基番号315の位置に存在する塩基C若しくはGであるアレル、
(キ)塩基番号379の位置に存在する塩基A若しくはGであるアレル、
(ク)塩基番号385の位置に存在する塩基C若しくはTであるアレル、
(ケ)塩基番号551の位置に存在する塩基A若しくはCであるアレル、及び
(コ)塩基番号597の位置に存在する塩基C若しくはTであるアレル;
(24) at least one of (a) to (co) of SEQ ID NO: 24:
(A) an allele which is the base C or T present at the position of base number 189,
(A) an allele that is base A or G present at the position of base number 209;
(C) an allele that is base C or T present at the position of base number 218,
(D) an allele that is base C or T present at the position of base number 260;
(E) an allele that is base C or T present at the position of base number 283,
(F) an allele that is base C or G present at the position of base number 315,
(G) an allele that is base A or G present at the position of base number 379;
(H) an allele which is the base C or T present at the position of the base number 385,
(G) an allele which is the base A or C present at the position of the base number 551, and (co) an allele which is the base C or T present at the position of the base number 597;

(25)配列番号25の、(ア)から(キ)の、少なくとも1つ:
(ア)塩基番号62の位置に存在する塩基C若しくはTであるアレル、
(イ)塩基番号96の位置に存在する塩基A若しくはGであるアレル、
(ウ)塩基番号171の位置に存在する塩基A若しくはGであるアレル、
(エ)塩基番号176の位置に存在する塩基C若しくはTであるアレル、
(オ)塩基番号222の位置に存在する塩基C若しくはTであるアレル、
(カ)塩基番号228の位置に存在する塩基C若しくはTであるアレル、及び
(キ)塩基番号273の位置に存在する塩基A若しくはGであるアレル;
(25) at least one of (a) to (ki) of SEQ ID NO: 25:
(A) an allele which is a base C or T present at the position of base number 62;
(A) an allele that is base A or G present at the position of base number 96;
(C) an allele that is base A or G present at the position of base number 171;
(D) an allele that is base C or T present at the position of base number 176,
(E) an allele that is base C or T present at the position of base number 222;
(F) an allele which is the base C or T present at the position of the base number 228, and (g) an allele which is the base A or G present at the position of the base number 273;

(26)配列番号26の、(ア)から(キ)の、少なくとも1つ:
(ア)塩基番号57の位置に存在する塩基A若しくはGであるアレル、
(イ)塩基番号149の位置に存在する塩基A若しくはGであるアレル、
(ウ)塩基番号221の位置に存在する塩基A若しくはTであるアレル、
(エ)塩基番号303の位置に存在する塩基A若しくはGであるアレル、
(オ)塩基番号350の位置に存在する塩基A若しくはTであるアレル、
(カ)塩基番号400の位置に存在する塩基A若しくはTであるアレル、及び
(キ)塩基番号434の位置に存在する塩基A若しくはGであるアレル;
(26) At least one of (a) to (ki) of SEQ ID NO: 26:
(A) an allele that is base A or G present at the position of base number 57;
(A) an allele that is base A or G present at the position of base number 149;
(C) an allele that is base A or T present at the position of base number 221;
(D) an allele that is base A or G present at the position of base number 303;
(E) an allele that is base A or T present at the position of base number 350;
(F) an allele that is base A or T present at the position of base number 400, and (g) an allele that is base A or G that is present at the position of base number 434;

(27)配列番号27の、(ア)から(オ)の、少なくとも1つ:
(ア)塩基番号80の位置に存在する塩基A若しくはGであるアレル、
(イ)塩基番号116から122の位置に存在する塩基Aの欠失若しくは非欠失であるアレル、
(ウ)塩基番号204の位置に存在する塩基A若しくはGであるアレル、
(エ)塩基番号249の位置に存在する塩基C若しくはTであるアレル、及び
(オ)塩基番号389の位置に存在する塩基G若しくはTであるアレル;
(27) At least one of (a) to (e) in SEQ ID NO: 27:
(A) an allele that is base A or G present at the position of base number 80;
(A) an allele that is a deletion or non-deletion of base A present at positions from base numbers 116 to 122;
(C) an allele that is base A or G present at the position of base number 204;
(D) an allele that is base C or T present at the position of base number 249, and (e) an allele that is base G or T at the position of base number 389;

(28)配列番号28の、(ア)から(オ)の、少なくとも1つ:
(ア)塩基番号83の位置に存在する塩基A若しくはCであるアレル、
(イ)塩基番号169の位置に存在する塩基C若しくはGであるアレル、
(ウ)塩基番号193の位置に存在する塩基C若しくはTであるアレル、
(エ)塩基番号215の位置に存在する塩基A若しくはCであるアレル、及び
(オ)塩基番号232の位置に存在する塩基A若しくはGであるアレル;
(28) At least one of (a) to (e) of SEQ ID NO: 28:
(A) an allele that is base A or C present at the position of base number 83;
(A) an allele which is a base C or G present at the position of base number 169,
(C) an allele that is base C or T present at the position of base number 193,
(D) an allele that is the base A or C existing at the position of the base number 215, and (e) an allele that is the base A or G that exists at the position of the base number 232;

(29)(ア)配列番号29の、塩基番号309の位置に存在する塩基A若しくはGであるアレル;
(30)(ア)配列番号30の、塩基番号216の位置に存在する塩基C若しくはTであるアレル;
(31)(ア)配列番号31の、塩基番号162の位置に存在する塩基C若しくはTであるアレル;
(32)配列番号32の、(ア)及び(イ)の、少なくとも1つ:
(ア)塩基番号34の位置に存在する塩基C若しくはTであるアレル、及び
(イ)塩基番号336の位置に存在する塩基A若しくはGであるアレル;
(29) (a) an allele that is base A or G present at the position of base number 309 in SEQ ID NO: 29;
(30) (a) an allele which is the base C or T present at the position of base number 216 of SEQ ID NO: 30;
(31) (a) An allele of base C or T present in the position of base number 162 of SEQ ID NO: 31;
(32) At least one of (a) and (b) of SEQ ID NO: 32:
(A) an allele that is the base C or T present at the position of the base number 34, and (a) an allele that is the base A or G that is present at the position of the base number 336;

(33)(ア)配列番号33の、塩基番号361の位置に存在する塩基A若しくはGであるアレル;
酵母のゲノムDNAについて下記(1)、かつ、(2)及び(3)のいずれかの組み合わせからなるアレルの検出を行い、その結果に基づいて、亜硫酸生成能の高い酵母、硫化水素生成能の低い酵母、エステル生成能の高い酵母、エステル生成能の低い酵母、高級アルコール生成能の高い酵母、高級アルコール生成能の低い酵母の少なくとも1つを選抜する方法:
(1)配列番号17の、(ア)から(オ)の、少なくとも1つ:
(ア)塩基番号65の位置に存在する塩基A若しくはTであるアレル、
(イ)塩基番号158の位置に存在する塩基A若しくはGであるアレル、
(ウ)塩基番号236の位置に存在する塩基G若しくはTであるアレル、
(エ)塩基番号256の位置に存在する塩基A若しくはGであるアレル、及び
(オ)塩基番号474の位置に存在する塩基C若しくはTであるアレル;
(2)配列番号1の、(ア)から(オ)の、少なくとも1つ:
(ア)配列番号53の位置に存在する塩基C若しくはTであるアレル、
(イ)配列番号170の位置に存在する塩基C若しくTはであるアレル、
(ウ)配列番号185の位置に存在する塩基A若しくはGであるアレル、
(エ)配列番号239の位置に存在する塩基G若しくはTであるアレル、及び
(オ)配列番号298の位置に存在する塩基A若しくはGであるアレル;
(3)配列番号2の、(ア)及び(イ)の、少なくとも1つ:
(ア)塩基番号104の位置に存在する塩基C若しくはTであるアレル、及び
(イ)塩基番号321の位置に存在する塩基C若しくはTであるアレル;
上記の方法においては、酵母の菌株が、上面発酵酵母若しくは下面発酵酵母であることが望ましい。
(33) (a) An allele of base A or G present in the position of base number 361 of SEQ ID NO: 33;
The allele consisting of any combination of (1) and (2) and (3) below is detected for the genomic DNA of yeast, and based on the results, yeast having a high ability to produce sulfite and hydrogen sulfide producing ability A method for selecting at least one of low yeast, yeast having high ester-producing ability, yeast having low ester-producing ability, yeast having high ability to produce higher alcohol, and yeast having low ability to produce higher alcohol:
(1) at least one of SEQ ID NO: 17 from (a) to (e):
(A) an allele that is base A or T present at the position of base number 65,
(A) an allele that is base A or G present at the position of base number 158,
(C) an allele that is the base G or T at the position of base number 236,
(D) an allele that is base A or G present at the position of base number 256, and (e) an allele that is base C or T at the position of base number 474;
(2) at least one of (A) to (E) of SEQ ID NO: 1
(A) an allele which is a base C or T present at the position of SEQ ID NO: 53,
(A) an allele having a base C or T at the position of SEQ ID NO: 170,
(C) an allele which is the base A or G present at the position of SEQ ID NO: 185,
(D) an allele that is the base G or T at the position of SEQ ID NO: 239, and (e) an allele that is the base A or G at the position of SEQ ID NO: 298;
(3) at least one of (a) and (b) of SEQ ID NO: 2
(A) an allele which is the base C or T present at the position of the base number 104, and (a) an allele which is the base C or T present at the position of the base number 321;
In the above method, it is desirable that the yeast strain is a top fermentation yeast or a bottom fermentation yeast.

また、上記の方法においては、ダイレクト・シーケンシング法、DHPLC(Denaturing High Performance Liquid Chromatography)法、Surveyor Nucleaseを用いる方法、TaqMan PCR法、Invader法、プライマー伸長法、SSCP(Single Strand Conformation Porymorphism)法、及びDNAチップを用いる方法からなる群より選ばれる一つまたは二つ以上の方法を用いて検出を行うことができる。   In the above method, the direct sequencing method, the DHPLC (Determining High Performance Liquid Chromatography) method, the method using Surveyor Nuclease, the TaqMan PCR method, the Invader method, the primer extension method, the SSCP (Simple Mon Stroke Method). The detection can be performed using one or two or more methods selected from the group consisting of a method using a DNA chip.

さらに本発明は上記のアレルの検出に用いるプライマー、オリゴヌクレオチド、プライマーもしくはオリゴヌクレオチドを含むキットである。   Furthermore, the present invention is a kit containing a primer, oligonucleotide, primer or oligonucleotide used for the detection of the allele.

本発明は、酵母の分類・同定・識別を、迅速、簡便かつ高精度に行なうことを可能にする。本発明によれば、菌株の識別を迅速かつ高精度に行なうことができ、ビールや発泡酒、その他の雑酒の生産において、香味上の特徴を安定して発揮した製品を生産できるという著効が奏される。   The present invention makes it possible to perform classification, identification and identification of yeast quickly, simply and with high accuracy. According to the present invention, it is possible to identify strains quickly and with high accuracy, and in producing beer, happoshu, and other miscellaneous sakes, it is possible to produce products that stably exhibit flavor characteristics. Is played.

また本発明によれば、上面発酵酵母と下面発酵酵母といった異なった醸造用酵母間の識別はもとより、非常に困難でデリケートな同一の醸造用酵母間の識別、例えば同じ下面発酵酵母間の菌株の識別も可能であって、本発明は、酒類製造業、試験研究機関等において、迅速、簡便かつ高精度な酵母の分類・同定・識別を可能にするものであり、野生酵母と醸造用酵母の明確な判別も可能である。   In addition, according to the present invention, not only distinction between different brewing yeasts such as top fermentation yeast and bottom fermentation yeast, but also discrimination between identical brewing yeasts that are very difficult and delicate, for example, strains between the same bottom fermentation yeasts, In the liquor manufacturing industry, test research institutes, etc., the present invention enables quick, simple and highly accurate classification, identification and identification of yeast. Clear discrimination is also possible.

さらに本発明によれば、煩雑で不正確な発酵試験を行なわずにして、亜硫酸や硫化水素、エステル、高級アルコール生成能の高い若しくは低い酵母菌株の効率的な選抜が可能である。   Furthermore, according to the present invention, it is possible to efficiently select yeast strains with high or low ability to produce sulfurous acid, hydrogen sulfide, esters, and higher alcohols without conducting complicated and inaccurate fermentation tests.

以下、本発明の実施の形態を説明する。本識別・分類・選抜方法は、酵母の遺伝子試料におけるアレルタイプを判別し、そのアレルタイプから酵母の菌株を識別・分類・選抜する方法である。   Embodiments of the present invention will be described below. This identification / classification / selection method is a method for discriminating an allele type in a yeast gene sample and identifying / classifying / selecting a yeast strain from the allele type.

本発明において、アレルの検出もしくは判定またはアレルタイプの検出もしくは判定とは、識別、分類、選別を行う酵母菌株のゲノムDNAについて、一塩基多型を有するアレルを検出し、判定することをいう。この際、1対の染色体上の一方の染色体について検出する場合も両方の染色体について検出する場合も包含され、両方の染色体について検出する場合、一塩基多型部位においてホモ接合性かヘテロ接合性かの検出を含む。また、アレルの検出またはアレルタイプの検出とは、酵母菌株において、一塩基多型部位の塩基を検出、判定することでもある。   In the present invention, allele detection or determination or allele type detection or determination refers to detection and determination of an allele having a single nucleotide polymorphism in the genomic DNA of a yeast strain to be identified, classified and selected. In this case, detection is performed for one chromosome on a pair of chromosomes as well as detection for both chromosomes. When detecting for both chromosomes, homozygosity or heterozygosity at a single nucleotide polymorphism site is included. Including detection. In addition, allele detection or allele type detection also means detection and determination of a base at a single nucleotide polymorphism site in a yeast strain.

遺伝子試料とは、好適には、上面発酵酵母または下面発酵酵母の細胞の遺伝子(具体的には、DNA)、またはこれを主成分として含む試料をいう。酵母細胞からの遺伝子試料の調製は、通常公知のDNAの抽出・精製方法に従って行なうことが可能である。また、市販のDNAの抽出・精製キットを用いて、遺伝子試料の調製を行なうことも可能である。   The gene sample preferably means a gene (specifically, DNA) of a cell of top fermentation yeast or bottom fermentation yeast, or a sample containing this as a main component. Preparation of a gene sample from yeast cells can be performed according to a generally known DNA extraction / purification method. It is also possible to prepare a gene sample using a commercially available DNA extraction / purification kit.

本識別方法において、酵母のアレルタイプは、配列番号1から33までに示した配列を含む領域のSNPを指標にして判別することが可能である。かかるアレルタイプの判別は、具体的には、下記の(1)から(33)のいずれかで表される情報に基づき行なわれ得る。   In this identification method, the allele type of yeast can be determined using the SNP of the region containing the sequences shown in SEQ ID NOS: 1 to 33 as an index. Specifically, the discrimination of the allele type can be performed based on information represented by any of the following (1) to (33).

(1)遺伝子試料に含まれる核酸が、配列番号1で示される塩基配列のうち、53番目、140番目、170番目、185番目、225番目、239番目、298番目のいずれかまたは複数の塩基を含む塩基配列が、表2に示されるいずれのアレルタイプの塩基配列を保有する核酸であるかについての情報(配列番号1に示した配列を含む領域に関するアレルタイプの判別情報)。 (1) The nucleic acid contained in the gene sample contains any one or a plurality of bases of the 53rd, 140th, 170th, 185th, 225th, 239th, 298th or more of the base sequence represented by SEQ ID NO: 1. Information about which allele type of the nucleotide sequence shown in Table 2 is the nucleic acid having the nucleotide sequence to be included (allele type discrimination information regarding the region containing the sequence shown in SEQ ID NO: 1).

(2)遺伝子試料に含まれる核酸が、配列番号2で示される塩基配列のうち、104番目、149番目、304番目、321番目、322番目のいずれかまたは複数の塩基を含む塩基配列が、表3に示されるいずれのアレルタイプの塩基配列を保有する核酸であるかについての情報(配列番号2に示した配列を含む領域に関するアレルタイプの判別情報)。 (2) The nucleic acid contained in the gene sample is a nucleotide sequence containing any one or a plurality of bases of the 104th, 149th, 304th, 321st, 322th of the base sequence represented by SEQ ID NO: 2. Information on which nucleic acid possesses the base sequence of which allele type shown in 3 (allele type discrimination information regarding the region containing the sequence shown in SEQ ID NO: 2).

(3)遺伝子試料に含まれる核酸が、配列番号3で示される塩基配列のうち、125番目、145番目、351番目から354番目のいずれかまたは複数の塩基を含む塩基配列が、表4に示されるいずれのアレルタイプの塩基配列を保有する核酸であるかについての情報(配列番号3に示した配列を含む領域に関するアレルタイプの判別情報)。 (3) The nucleic acid contained in the gene sample is shown in Table 4 that includes one or more of the 125th, 145th, 351st to 354th bases of the base sequence represented by SEQ ID NO: 3. Information about which nucleic acid possesses the base sequence of which allele type (allele type discrimination information regarding the region containing the sequence shown in SEQ ID NO: 3).

(4)遺伝子試料に含まれる核酸が、配列番号4で示される塩基配列のうち、67番目、74番目、104番目、160番目、268番目、269番目、324番目、446番目、453番目、466番目のいずれかまたは複数の塩基を含む塩基配列が、表5に示されるいずれのアレルタイプの塩基配列を保有する核酸であるかについての情報(配列番号4に示した配列を含む領域に関するアレルタイプの判別情報)。 (4) The nucleic acid contained in the gene sample is the 67 th, 74 th, 104 th, 160 th, 268 th, 269 th, 324 th, 446 th, 453 th, 466 among the base sequence represented by SEQ ID NO: 4 Information about which nucleotide sequence of any of the allele types shown in Table 5 is included in the base sequence containing any or a plurality of bases (allele type relating to the region containing the sequence shown in SEQ ID NO: 4) Discriminating information).

(5)遺伝子試料に含まれる核酸が、配列番号5で示される塩基配列のうち、431番目、464番目のいずれかまたは複数の塩基を含む塩基配列が、表6に示されるいずれのアレルタイプの塩基配列を保有する核酸であるかについての情報(配列番号5に示した配列を含む領域に関するアレルタイプの判別情報)。 (5) The nucleic acid contained in the gene sample is any of the allele types shown in Table 6 in which the base sequence including any one of the 431rd and 464th bases or a plurality of bases among the base sequence shown in SEQ ID NO: 5 Information about whether the nucleic acid has a base sequence (allele type discrimination information regarding the region containing the sequence shown in SEQ ID NO: 5).

(6)遺伝子試料に含まれる核酸が、配列番号6で示される塩基配列のうち、75番目、185番目、216番目、217番目、253番目、269番目、318番目、441番目、444番目、445番目、463番目、493番目のいずれかまたは複数の塩基を含む塩基配列が、表7に示されるいずれのアレルタイプの塩基配列を保有する核酸であるかについての情報(配列番号6に示した配列を含む領域に関するアレルタイプの判別情報)。 (6) The nucleic acid contained in the gene sample is the 75th, 185th, 216th, 217th, 253rd, 269th, 318th, 441th, 444th, 444th, 445 of the nucleotide sequence represented by SEQ ID NO: 6 Information about which nucleotide sequence of any of the allele types shown in Table 7 is included in the base sequence containing any of the 1st, 463rd, 493th or multiple bases (sequence shown in SEQ ID NO: 6) Allele type discrimination information for the area that contains).

(7)遺伝子試料に含まれる核酸が、配列番号7で示される塩基配列のうち、213番目、243番目、290番目、348番目、350番目、378番目のいずれかまたは複数の塩基を含む塩基配列が、表8に示されるいずれのアレルタイプの塩基配列を保有する核酸であるかについての情報(配列番号7に示した配列を含む領域に関するアレルタイプの判別情報)。 (7) A nucleotide sequence in which the nucleic acid contained in the gene sample contains any one or a plurality of bases of the 213rd, 243rd, 290th, 348th, 350th, 378th of the base sequence represented by SEQ ID NO: 7 Is information about which of the allele types shown in Table 8 is a nucleic acid (allele type discrimination information relating to the region containing the sequence shown in SEQ ID NO: 7).

(8)遺伝子試料に含まれる核酸が、配列番号8で示される塩基配列のうち、88番目、152番目、161番目、309番目、381番目のいずれかまたは複数の塩基を含む塩基配列が、表9に示されるいずれのアレルタイプの塩基配列を保有する核酸であるかについての情報(配列番号8に示した配列を含む領域に関するアレルタイプの判別情報)。 (8) The nucleic acid contained in the gene sample is a base sequence containing any one or a plurality of bases of 88th, 152th, 161st, 309th, 381 among the base sequences represented by SEQ ID NO: 8 Information about which nucleic acid possesses the base sequence of which allele type shown in 9 (allele type discrimination information relating to the region containing the sequence shown in SEQ ID NO: 8).

(9)遺伝子試料に含まれる核酸が、配列番号9で示される塩基配列のうち、66番目、229番目、262番目のいずれかまたは複数の塩基を含む塩基配列が、表10に示されるいずれのアレルタイプの塩基配列を保有する核酸であるかについての情報(配列番号9に示した配列を含む領域に関するアレルタイプの判別情報)。 (9) Among the nucleotide sequences represented by SEQ ID NO: 9, the nucleic acid contained in the gene sample is any of the nucleotide sequences including any of the 66th, 229th, 262th or a plurality of bases shown in Table 10. Information about whether the nucleic acid has an allele-type base sequence (allele-type discrimination information regarding the region containing the sequence shown in SEQ ID NO: 9).

(10)遺伝子試料に含まれる核酸が、配列番号10で示される塩基配列のうち、163番目から170番目、309番目から317番目、356番目のいずれかまたは複数の塩基を含む塩基配列が、表11に示されるいずれのアレルタイプの塩基配列を保有する核酸であるかについての情報(配列番号10に示した配列を含む領域に関するアレルタイプの判別情報)。 (10) The nucleic acid contained in the gene sample is a nucleotide sequence containing any one or a plurality of bases from the 163rd to the 170th, the 309th to the 317th, the 356th, among the base sequences represented by SEQ ID NO: 10. Information on which allele type of nucleotide sequence shown in No. 11 is a nucleic acid (allele type discrimination information on the region containing the sequence shown in SEQ ID NO: 10).

(11)遺伝子試料に含まれる核酸が、配列番号11で示される塩基配列のうち、69番目、93番目、111番目、208番目、210番目、408番目、429番目のいずれかまたは複数の塩基を含む塩基配列が、表12に示されるいずれのアレルタイプの塩基配列を保有する核酸であるかについての情報(配列番号11に示した配列を含む領域に関するアレルタイプの判別情報)。 (11) The nucleic acid contained in the gene sample contains any one or a plurality of bases of the 69th, 93rd, 111th, 208th, 210th, 408th, 429th of the base sequence represented by SEQ ID NO: 11 Information about which allele type of the nucleotide sequence shown in Table 12 is the nucleic acid having the nucleotide sequence to be included (allele type discrimination information regarding the region containing the sequence shown in SEQ ID NO: 11).

(12)遺伝子試料に含まれる核酸が、配列番号12で示される塩基配列のうち、104番目、151番目、343番目のいずれかまたは複数の塩基を含む塩基配列が、表13に示されるいずれのアレルタイプの塩基配列を保有する核酸であるかについての情報(配列番号12に示した配列を含む領域に関するアレルタイプの判別情報)。 (12) The nucleic acid contained in the gene sample is any one of the nucleotide sequences represented by SEQ ID NO: 12 and any one of the nucleotide sequences including any of the 104th, 151st, 343rd or multiple bases shown in Table 13 Information about whether or not the nucleic acid has an allele-type base sequence (allele-type discrimination information relating to the region containing the sequence shown in SEQ ID NO: 12).

(13)遺伝子試料に含まれる核酸が、配列番号13で示される塩基配列のうち、126番目、201番目、264番目のいずれかまたは複数の塩基を含む塩基配列が、表14に示されるいずれのアレルタイプの塩基配列を保有する核酸であるかについての情報(配列番号13に示した配列を含む領域に関するアレルタイプの判別情報)。 (13) The nucleic acid contained in the gene sample is any one of the nucleotide sequences represented by SEQ ID NO: 13 that includes any of the 126th, 201st, 264th or multiple nucleotide sequences shown in Table 14. Information about whether or not the nucleic acid has an allele-type base sequence (allele-type discrimination information relating to the region containing the sequence shown in SEQ ID NO: 13).

(14)遺伝子試料に含まれる核酸が、配列番号14で示される塩基配列のうち、132番目、185番目、189番目のいずれかまたは複数の塩基を含む塩基配列が、表15に示されるいずれのアレルタイプの塩基配列を保有する核酸であるかについての情報(配列番号14に示した配列を含む領域に関するアレルタイプの判別情報)。 (14) The nucleic acid contained in the gene sample is any one of the base sequences represented by SEQ ID NO: 14, including any of the 132rd, 185th, and 189th base sequences or a plurality of base sequences shown in Table 15. Information about whether the nucleic acid has an allele-type base sequence (allele-type discrimination information regarding the region containing the sequence shown in SEQ ID NO: 14).

(15)遺伝子試料に含まれる核酸が、配列番号15で示される塩基配列のうち、101番目、183番目、188〜192番目、280番目、338番目のいずれかまたは複数の塩基を含む塩基配列が、表16に示されるいずれのアレルタイプの塩基配列を保有する核酸であるかについての情報(配列番号15に示した配列を含む領域に関するアレルタイプの判別情報)。 (15) The nucleic acid contained in the gene sample is a nucleotide sequence comprising any one of the 101st, 183rd, 188 to 192nd, 280th, 338th or a plurality of bases in the nucleotide sequence represented by SEQ ID NO: 15 Information on which allele type of the nucleic acid sequence shown in Table 16 is a nucleic acid (allele type discriminating information on the region containing the sequence shown in SEQ ID NO: 15).

(16)遺伝子試料に含まれる核酸が、配列番号16で示される塩基配列のうち、134番目、135番目、137番目、138番目、142番目、165番目、183番目、219番目、232番目、293番目、332番目のいずれかまたは複数の塩基を含む塩基配列が、表17に示されるいずれのアレルタイプの塩基配列を保有する核酸であるかについての情報(配列番号16に示した配列を含む領域に関するアレルタイプの判別情報)。 (16) The nucleic acid contained in the gene sample is the 134 th, 135 th, 137 th, 138 th, 142 th, 165 th, 183 th, 219 th, 232 th, 293 among the base sequence represented by SEQ ID NO: 16 Information about which nucleotide sequence of any of the allelic types shown in Table 17 is the nucleic acid containing the nucleotide sequence of any of the first and 332th nucleotides or the 332th nucleotide (region containing the sequence shown in SEQ ID NO: 16) Allele type discrimination information).

(17)遺伝子試料に含まれる核酸が、配列番号17で示される塩基配列のうち、65番目、158番目、236番目、256番目、474番目のいずれかまたは複数の塩基を含む塩基配列が、表18に示されるいずれのアレルタイプの塩基配列を保有する核酸であるかについての情報(配列番号17に示した配列を含む領域に関するアレルタイプの判別情報)。 (17) The nucleic acid contained in the gene sample is a base sequence containing any one or a plurality of bases of the 65th, 158th, 236th, 256th, 474th, among the base sequences represented by SEQ ID NO: 17. 18. Information on which allele type of nucleotide sequence shown in 18 is a nucleic acid (allele type discrimination information relating to the region containing the sequence shown in SEQ ID NO: 17).

(18)遺伝子試料に含まれる核酸が、配列番号18で示される塩基配列のうち、96番目、133番目のいずれかまたは複数の塩基を含む塩基配列が、表19に示されるいずれのアレルタイプの塩基配列を保有する核酸であるかについての情報(配列番号18に示した配列を含む領域に関するアレルタイプの判別情報)。 (18) The nucleic acid contained in the gene sample is any one of the allele types shown in Table 19, wherein the base sequence containing any one or a plurality of bases of the 96th, 133th of the base sequence shown in SEQ ID NO: 18 Information about whether the nucleic acid has a base sequence (allele type discrimination information regarding the region containing the sequence shown in SEQ ID NO: 18).

(19)遺伝子試料に含まれる核酸が、配列番号19で示される塩基配列のうち、261番目、282番目、371番目、440番目のいずれかまたは複数の塩基を含む塩基配列が、表20に示されるいずれのアレルタイプの塩基配列を保有する核酸であるかについての情報(配列番号19に示した配列を含む領域に関するアレルタイプの判別情報)。 (19) Table 20 shows the nucleotide sequences of nucleic acids contained in the gene sample, including any of the 261st, 282nd, 371st, 440th or multiple nucleotides of the nucleotide sequence represented by SEQ ID NO: 19. Information on which nucleic acid possesses the base sequence of which allele type (allele type discrimination information relating to the region containing the sequence shown in SEQ ID NO: 19).

(20)遺伝子試料に含まれる核酸が、配列番号20で示される塩基配列のうち、247番目、362番目のいずれかまたは複数の塩基を含む塩基配列が、表21に示されるいずれのアレルタイプの塩基配列を保有する核酸であるかについての情報(配列番号20に示した配列を含む領域に関するアレルタイプの判別情報)。 (20) The nucleic acid contained in the gene sample is any of the allele types shown in Table 21, wherein the nucleotide sequence containing any one or a plurality of bases of the 247th and 362th positions in the base sequence represented by SEQ ID NO: 20 Information about whether the nucleic acid has a base sequence (allele type discrimination information regarding the region containing the sequence shown in SEQ ID NO: 20).

(21)遺伝子試料に含まれる核酸が、配列番号21で示される塩基配列のうち、82番目、91番目、139番目、140番目のいずれかまたは複数の塩基を含む塩基配列が、表22に示されるいずれのアレルタイプの塩基配列を保有する核酸であるかについての情報(配列番号21に示した配列を含む領域に関するアレルタイプの判別情報)。 (21) Table 22 shows the nucleotide sequences in which the nucleic acid contained in the gene sample includes any or more of the 82nd, 91st, 139th, 140th bases of the base sequence represented by SEQ ID NO: 21 Information about which nucleic acid possesses the base sequence of which allele type (allele type discrimination information relating to the region containing the sequence shown in SEQ ID NO: 21).

(22)遺伝子試料に含まれる核酸が、配列番号22で示される塩基配列のうち、359番目から364番目の塩基を含む塩基配列が、表23に示されるいずれのアレルタイプの塩基配列を保有する核酸であるかについての情報(配列番号22に示した配列を含む領域に関するアレルタイプの判別情報)。 (22) The nucleic acid contained in the gene sample has the base sequence of any allele type shown in Table 23, wherein the base sequence containing the 359th to 364th bases of the base sequence shown in SEQ ID NO: 22 Information about whether it is a nucleic acid (allele type discrimination information regarding the region containing the sequence shown in SEQ ID NO: 22).

(23)遺伝子試料に含まれる核酸が、配列番号23で示される塩基配列のうち、420番目、485番目のいずれかまたは複数の塩基を含む塩基配列が、表24に示されるいずれのアレルタイプの塩基配列を保有する核酸であるかについての情報(配列番号23に示した配列を含む領域に関するアレルタイプの判別情報)。 (23) The nucleic acid contained in the gene sample is any of the allele types shown in Table 24, wherein the base sequence containing any one or more of the 420th and 485th bases of the base sequence shown in SEQ ID NO: 23 Information about whether the nucleic acid has a base sequence (allele type discrimination information regarding the region containing the sequence shown in SEQ ID NO: 23).

(24)遺伝子試料に含まれる核酸が、配列番号24で示される塩基配列のうち、189番目、209番目、218番目、260番目、283番目、315番目、379番目、385番目、551番目、597番目のいずれかまたは複数の塩基を含む塩基配列が、表25に示されるいずれのアレルタイプの塩基配列を保有する核酸であるかについての情報(配列番号24に示した配列を含む領域に関するアレルタイプの判別情報)。 (24) The nucleic acid contained in the gene sample is 189th, 209th, 218th, 260th, 283rd, 315th, 379th, 385th, 551th, 551th, 597 out of the base sequence represented by SEQ ID NO: 24 Information about which nucleotide sequence of any of the allele types shown in Table 25 is included in the base sequence containing any one or a plurality of bases (allele type relating to the region containing the sequence shown in SEQ ID NO: 24) Discriminating information).

(25)遺伝子試料に含まれる核酸が、配列番号25で示される塩基配列のうち、62番目、96番目、171番目、176番目、222番目、228番目、273番目のいずれかまたは複数の塩基を含む塩基配列が、表26に示されるいずれのアレルタイプの塩基配列を保有する核酸であるかについての情報(配列番号25に示した配列を含む領域に関するアレルタイプの判別情報)。 (25) The nucleic acid contained in the gene sample contains any one or a plurality of bases of the 62nd, 96th, 171st, 176th, 222th, 228th, 273th of the base sequence represented by SEQ ID NO: 25 Information about which allele type of the nucleotide sequence shown in Table 26 is the nucleic acid having the nucleotide sequence to be contained (allele type discrimination information relating to the region containing the sequence shown in SEQ ID NO: 25).

(26)遺伝子試料に含まれる核酸が、配列番号26で示される塩基配列のうち、57番目、149番目、221番目、303番目、350番目、400番目、434番目のいずれかまたは複数の塩基を含む塩基配列が、表27に示されるいずれのアレルタイプの塩基配列を保有する核酸であるかについての情報(配列番号26に示した配列を含む領域に関するアレルタイプの判別情報)。 (26) The nucleic acid contained in the gene sample contains any one or a plurality of bases of the 57th, 149th, 221nd, 303th, 350th, 400th, 434th of the base sequence represented by SEQ ID NO: 26 Information about which allele type of the nucleotide sequence shown in Table 27 is the nucleic acid having the nucleotide sequence to be contained (allele type discrimination information regarding the region containing the sequence shown in SEQ ID NO: 26).

(27)遺伝子試料に含まれる核酸が、配列番号27で示される塩基配列のうち、80番目、116から122番目、204番目、249番目、389番目のいずれかまたは複数の塩基を含む塩基配列が、表28に示されるいずれのアレルタイプの塩基配列を保有する核酸であるかについての情報(配列番号27に示した配列を含む領域に関するアレルタイプの判別情報)。 (27) The nucleic acid contained in the gene sample has a base sequence containing any one or a plurality of bases of the 80th, 116th to 122nd, 204th, 249th, 389th of the base sequence represented by SEQ ID NO: 27 Information about which of the allele types shown in Table 28 is a nucleic acid (allele type discrimination information relating to the region containing the sequence shown in SEQ ID NO: 27).

(28)遺伝子試料に含まれる核酸が、配列番号28で示される塩基配列のうち、83番目、169番目、193番目、215番目、232番目のいずれかまたは複数の塩基を含む塩基配列が、表29に示されるいずれのアレルタイプの塩基配列を保有する核酸であるかについての情報(配列番号28に示した配列を含む領域に関するアレルタイプの判別情報)。 (28) The nucleic acid contained in the gene sample is represented by a nucleotide sequence comprising any of the 83rd, 169th, 193rd, 215th, 232nd or a plurality of bases in the nucleotide sequence represented by SEQ ID NO: 28. Information on which nucleic acid possesses the base sequence of which allele type shown in 29 (allele type discrimination information relating to the region containing the sequence shown in SEQ ID NO: 28).

(29)遺伝子試料に含まれる核酸が、配列番号29で示される塩基配列のうち、309番目の塩基を含む塩基配列が、表30に示されるいずれのアレルタイプの塩基配列を保有する核酸であるかについての情報(配列番号29に示した配列を含む領域に関するアレルタイプの判別情報)。 (29) The nucleic acid contained in the gene sample is a nucleic acid having a base sequence of any allele type shown in Table 30, wherein the base sequence containing the 309th base is the base sequence shown in SEQ ID NO: 29 Information about the (allele type discrimination information regarding the region including the sequence shown in SEQ ID NO: 29).

(30)遺伝子試料に含まれる核酸が、配列番号30で示される塩基配列のうち、216番目の塩基を含む塩基配列が、表31に示されるいずれのアレルタイプの塩基配列を保有する核酸であるかについての情報(配列番号30に示した配列を含む領域に関するアレルタイプの判別情報)。 (30) The nucleic acid contained in the gene sample is a nucleic acid having a base sequence of any allele type shown in Table 31, wherein the base sequence containing the 216th base in the base sequence shown in SEQ ID NO: 30 Information about the information (allele type discrimination information regarding the region including the sequence shown in SEQ ID NO: 30).

(31)遺伝子試料に含まれる核酸が、配列番号31で示される塩基配列のうち、162番目の塩基を含む塩基配列が、表32に示されるいずれのアレルタイプの塩基配列を保有する核酸であるかについての情報(配列番号31に示した配列を含む領域に関するアレルタイプの判別情報)。 (31) The nucleic acid contained in the gene sample is a nucleic acid having a base sequence of any allele type shown in Table 32, wherein the base sequence containing the 162nd base is the base sequence shown in SEQ ID NO: 31 Information about allele type (allele type discrimination information related to the region including the sequence shown in SEQ ID NO: 31).

(32)遺伝子試料に含まれる核酸が、配列番号32で示される塩基配列のうち、34番目、336番目のいずれかまたは複数の塩基を含む塩基配列が、表33に示されるいずれのアレルタイプの塩基配列を保有する核酸であるかについての情報(配列番号32に示した配列を含む領域に関するアレルタイプの判別情報)。 (32) The nucleic acid contained in the gene sample is any of the allele types shown in Table 33, wherein the base sequence containing any or more of the 34th and 336th base sequences of the base sequence shown in SEQ ID NO: 32 Information about whether the nucleic acid has a base sequence (allele type discrimination information regarding the region containing the sequence shown in SEQ ID NO: 32).

(33)遺伝子試料に含まれる核酸が、配列番号33で示される塩基配列のうち、361番目の塩基を含む塩基配列が、表34に示されるいずれのアレルタイプの塩基配列を保有する核酸であるかについての情報(配列番号33に示した配列を含む領域に関するアレルタイプの判別情報)。 (33) The nucleic acid contained in the gene sample is a nucleic acid having a base sequence of any allele type shown in Table 34, wherein the base sequence containing the 361st base among the base sequence shown in SEQ ID NO: 33 Information about the (allele type discrimination information regarding the region including the sequence shown in SEQ ID NO: 33).

上記(1)から(33)の方法は、SNPの存在に感受性が認められる手段を駆使することにより得ることができる。具体的には、ダイレクト・シーケンシング法、DHPLC(Denaturing High Performance Liquid Chromatography)法、Surveyor Nucleaseを用いる方法、TaqMan PCR法、Invader法、プライマー伸長法、SSCP(Single Strand Conformation Porymorphism)法、DNAチップを用いる方法等を例示することができる。DHPLC法及びSurveyor Nucleaseを用いる方法については、Transgenomic社(USA)の製品を用い、そのプロトコールに従って行なうことができる。TaqMan PCR法及びInvader法に関しては、例えば「SNP 遺伝子多型の戦略」(編集:中村祐輔、中山書店)p.94〜105の記載に従って、またプライマー伸長法に関しては、例えば「SNP 遺伝子多型の戦略」(編集:中村祐輔、中山書店)p.106〜117の記載に従って、それぞれ行なうことができる。SSCP法に関しては、例えばBio Rad社(USA)のDCodeシステムを用いて、そのプロトコールに従って行なうことができる。DNAチップを用いる方法に関しては、例えば「SNP 遺伝子多型の戦略」(編集:中村祐輔、中山書店)p.128〜135の記載に従って行なうことができる。その際、DNAチップに貼り付けるオリゴヌクレオチドプローブとしては、後述のSNPの存在する塩基を含む5〜50ヌクレオチドを用いることができる。最も典型的、かつ、好適な手段として、配列番号(1)から(33)のいずれかを含む領域を後述の増幅可能な遺伝子増幅用プライマーを用いて増幅し、BigDye Terminator v3.1 Cycle Sequencing Kit(アプライドバイオシステムズ)及びGeneAmp PCRシステム9700(アプライドバイオシステムズ)を用いて、定法に従って遺伝子増幅産物のDNA塩基配列をダイレクト・シーケンシング法により決定し、所望するアレルタイプの判別方法として用いる方法が挙げられる。   The above methods (1) to (33) can be obtained by making full use of means that are sensitive to the presence of SNPs. Specifically, a direct sequencing method, a DHPLC (Denaturing High Performance Liquid Chromatography) method, a method using a Surveyor Nuclease, a TaqMan PCR method, an Invader method, a primer extension method, an SSCP (Single Strand Condrum method). Examples of the method used can be given. About the method using DHPLC method and Surveyor Nuclease, it can carry out according to the protocol using the product of Transgenomic (USA). Regarding the TaqMan PCR method and the Invader method, for example, “Strategy of SNP gene polymorphism” (edited by Yusuke Nakamura, Nakayama Shoten) p. 94-105 and the primer extension method, for example, “Strategy of SNP gene polymorphism” (edited by Yusuke Nakamura, Nakayama Shoten) p. Each of them can be carried out according to the description of 106-117. The SSCP method can be carried out according to the protocol using, for example, a BioRad (USA) DCode system. Regarding the method using a DNA chip, for example, “SNP gene polymorphism strategy” (edited by Yusuke Nakamura, Nakayama Shoten) p. It can carry out according to description of 128-135. In this case, as an oligonucleotide probe to be attached to the DNA chip, 5 to 50 nucleotides including a base in which a SNP described later is present can be used. As the most typical and preferred means, a region containing any one of SEQ ID NOS: (1) to (33) is amplified using a gene amplification primer described below, and BigDye Terminator v3.1 Cycle Sequencing Kit (Applied Biosystems) and GeneAmp PCR System 9700 (Applied Biosystems), the DNA base sequence of the gene amplification product is determined by a direct sequencing method according to a conventional method, and used as a method for discriminating a desired allele type. It is done.

アレルタイプの判別定法を用いた酵母の分類には、一般的な多変量解析の手法を用いることができる。具体的には、クラスター解析、主成分解析、判別分析等を挙げることができる。クラスター解析の方法について、さらに詳細を具体的に述べれば、最近隣法、最遠隣法、UPGMA(群平均法)、WPGMA(重み付き平均法)、WARD法等のいずれも用いることができる。これらの多変量解析は、STATISTICA、SPSS、SAS等の市販の統計ソフトウエアを用いて、容易に行なうことができる。最も典型的、かつ、好適な手段として、(1)から(33)の中の複数のアレル情報を、ホモ接合のアレルタイプは1及び−1、ヘテロ接合のアレルタイプは0と置き換え、STATISTICAを用いてUPGMA法を選択して、クラスター解析を行なう方法を挙げることができる。   A general multivariate analysis method can be used for classification of yeasts using the allele type discrimination method. Specific examples include cluster analysis, principal component analysis, and discriminant analysis. If the details of the cluster analysis method are specifically described, any of the nearest neighbor method, the farthest neighbor method, UPGMA (group average method), WPGMA (weighted average method), WARD method and the like can be used. These multivariate analyzes can be easily performed using commercially available statistical software such as STATISTICA, SPSS, and SAS. As the most typical and preferred means, replace allele information in (1) to (33) with homozygous allele type 1 and -1, heterozygous allele type 0, and replace STATISTICA with A method of performing a cluster analysis by using the UPGMA method can be listed.

酵母菌株の識別は、アレルタイプを判定し、該アレルタイプの違いにより、予めアレルタイプがわかっている酵母との異同を決定することをいい、酵母菌株の分類は、予めアレルタイプにより酵母を何種類課の型に分類しておき、新たにアレルタイプを判定した酵母のアレルタイプにより前記型のいずれかに分類することをいう。酵母の分類としては、例えば表1から表34に記載のType1からType14の分類が挙げられる。   The identification of yeast strains refers to determining the allele type and determining the difference between the allele type and the yeast with the known allele type. It is classified into one of the above types according to the allele type of yeast that has been newly classified into the type of type section and newly determined for the allele type. As classification of yeast, for example, classifications of Type 1 to Type 14 described in Table 1 to Table 34 can be mentioned.

亜硫酸生成能、硫化水素生成能、エステル生成能、高級アルコール生成能に関する酵母の選抜には、配列番号17に示した配列を含む領域のSNPを指標にして、かつ、配列番号1及び2に示したいずれかの配列を含む領域のSNPを指標にして、判別することが可能である。かかるアレルタイプの判別は、具体的には、下記の(1)、かつ、(2)及び(3)のいずれかの組み合わせで表される情報に基づき行なわれ得る。以下のアレルタイプについての判定を行うことにより、酵母菌株の亜硫酸生成能、硫化水素生成能、エステル生成能、高級アルコール生成能に関する特性を予測することができ、所望の特性を有する酵母菌株を選抜することができる。所望の特性としては、亜硫酸生成能、硫化水素生成能、エステル生成能、高級アルコール生成能の1つまたは複数の特性が高いという特性または低いという特性が挙げられる。   For the selection of yeast for sulfite-producing ability, hydrogen sulfide-producing ability, ester-forming ability, and higher alcohol-producing ability, the SNP of the region containing the sequence shown in SEQ ID NO: 17 is used as an index, and shown in SEQ ID NOS: 1 and 2 It is possible to discriminate using the SNP of the region including any of the sequences as an index. Specifically, the discrimination of the allele type can be performed based on information represented by any combination of the following (1) and (2) and (3). By determining the following allele types, it is possible to predict the characteristics of yeast strains related to sulfite production, hydrogen sulfide production, ester production, higher alcohol production, and select yeast strains with the desired characteristics. can do. Desirable properties include the property that one or more properties of sulfite generating ability, hydrogen sulfide generating ability, ester generating ability, higher alcohol generating ability are high or low.

(1)遺伝子試料に含まれる核酸が、配列番号17で示される塩基配列のうち、65番目、158番目、236番目、256番目、474番目の塩基を含む塩基配列が、表18に示されるいずれのアレルタイプの塩基配列を保有する核酸であるかについての情報(配列番号17に示した配列を含む領域に関するアレルタイプの判別情報)。 (1) The nucleic acid contained in the gene sample is any one of the nucleotide sequences shown in Table 18 including the 65th, 158th, 236th, 256th, and 474th bases of the nucleotide sequence shown in SEQ ID NO: 17. Information on whether the nucleic acid has a base sequence of the allele type (allele type discrimination information relating to the region containing the sequence shown in SEQ ID NO: 17).

(2)遺伝子試料に含まれる核酸が、配列番号1で示される塩基配列のうち、53番目、170番目、185番目、239番目、298番目の塩基を含む塩基配列が、表2に示されるいずれのアレルタイプの塩基配列を保有する核酸であるかについての情報(配列番号1に示した配列を含む領域に関するアレルタイプの判別情報)。 (2) The nucleic acid contained in the gene sample is any one of the nucleotide sequences shown in Table 2 including the 53rd, 170th, 185th, 239th, and 298th bases of the nucleotide sequence represented by SEQ ID NO: 1. Information on whether the nucleic acid possesses the base sequence of the allele type (allele type discrimination information relating to the region containing the sequence shown in SEQ ID NO: 1).

(3)遺伝子試料に含まれる核酸が、配列番号2で示される塩基配列のうち、104番目、321番目の塩基を含む塩基配列が、表3に示されるいずれのアレルタイプの塩基配列を保有する核酸であるかについての情報(配列番号2に示した配列を含む領域に関するアレルタイプの判別情報)。 (3) The nucleic acid contained in the gene sample has the base sequence of any allele type shown in Table 3 in which the base sequence containing the 104th and 321st bases among the base sequence shown in SEQ ID NO: 2 Information about whether it is a nucleic acid (allele type discrimination information regarding the region containing the sequence shown in SEQ ID NO: 2).

以上、サッカロマイセス・セレビシエに属する上面発酵酵母、サッカロマイセス・パストリアヌスに属する下面発酵酵母を例にとって、その菌株識別法を説明したが、本発明においては、酵母は、サッカロマイセス・セレビシエ、またはサッカロマイセス・パストリアヌスに属する酵母であれば、すべての酵母が使用可能である。例えば本発明は、上面発酵酵母や下面発酵酵母の実用酵母に使用できるほか、清酒酵母、ワイン酵母、焼酎酵母、ウイスキー酵母にも適用できる。   As described above, the method for identifying the strain has been described taking the example of the top fermenting yeast belonging to Saccharomyces cerevisiae and the bottom fermenting yeast belonging to Saccharomyces pastorianus. In the present invention, the yeast belongs to Saccharomyces cerevisiae or Saccharomyces pastorianus. Any yeast can be used as long as it is yeast. For example, the present invention can be applied to sake yeast, wine yeast, shochu yeast, and whiskey yeast as well as practical yeasts such as top fermentation yeast and bottom fermentation yeast.

本発明は上記のアレルを判別し、酵母菌株を識別し、酵母菌株を分類しまたは酵母を選別するのに用いるプライマーを包含する。   The present invention includes primers used to discriminate the above alleles, identify yeast strains, classify yeast strains, or select yeasts.

プライマーは、特定の一塩基多型を含むDNAを増幅するのに用いられ、該一塩基多型部位の5’側の塩基配列からなるプライマーおよび3’側の塩基配列からなるプライマーの一対のプライマーセットとして設計することができる。プライマーを構成する塩基の数は5〜50、好ましくは10〜30、さらに好ましくは15〜25である。増幅させる塩基配列の長さは限定されない。本発明の一塩基多型部位は、酵母ゲノムDNAの33の領域中に存在しその総計は148部位である。プライマーは、148の一塩基多型部位の少なくとも1つの部位を含む塩基配列を増幅することができればよい。また、近傍に存在する一塩基多型部位の場合は、1対のプライマーで複数の一塩基多型部位を含む塩基配列を増幅してもよい。プライマーを用いたDNAの増幅は、公知の手法で行うことができる。   A primer is used to amplify DNA containing a specific single nucleotide polymorphism, and is a pair of primers consisting of a primer consisting of the 5 'base sequence of the single nucleotide polymorphism site and a primer consisting of the 3' base sequence Can be designed as a set. The number of bases constituting the primer is 5 to 50, preferably 10 to 30, and more preferably 15 to 25. The length of the base sequence to be amplified is not limited. The single nucleotide polymorphism sites of the present invention are present in 33 regions of yeast genomic DNA, and the total is 148 sites. The primer only needs to be able to amplify a base sequence including at least one site of 148 single nucleotide polymorphism sites. In the case of a single nucleotide polymorphic site present in the vicinity, a base sequence including a plurality of single nucleotide polymorphic sites may be amplified with a pair of primers. Amplification of DNA using a primer can be performed by a known method.

本発明のプライマーセットとして、例えば以下のプライマーセットが挙げられる。
酵母ゲノムDNA上の一塩基多型部位を含むDNA断片の増幅に用いる少なくとも一対のプライマーセットであって、一塩基多型部位が以下の(1)(ア)から(33)(ア)の148個の一塩基多型部位の少なくとも1つであって、プライマーが配列番号1から33の塩基配列のうちの以下の(1)(ア)から(33)(ア)の一塩基多型部位のうちの少なくとも1つの多型部位の3’側および5’側に存在する10から30塩基からなる部分配列からなる、DNA断片の増幅に用い得る一対のプライマーセット:
Examples of the primer set of the present invention include the following primer sets.
It is at least a pair of primer sets used for amplification of a DNA fragment containing a single nucleotide polymorphic site on yeast genomic DNA, wherein the single nucleotide polymorphic site is 148 of (1) (a) to (33) (a) below. At least one of the single nucleotide polymorphic sites, wherein the primer is a single nucleotide polymorphic site of the following (1) (a) to (33) (a) of the nucleotide sequences of SEQ ID NOs: 1 to 33 A pair of primer sets that can be used to amplify a DNA fragment, consisting of a partial sequence consisting of 10 to 30 bases present on the 3 ′ side and 5 ′ side of at least one polymorphic site among them:

(1)配列番号1の、(ア)から(キ):
(ア)塩基番号53の位置に存在する塩基C若しくはTである一塩基多型部位、
(イ)塩基番号140の位置に存在する塩基A若しくはGである一塩基多型部位、
(ウ)塩基番号170の位置に存在する塩基C若しくTはである一塩基多型部位、
(エ)塩基番号185の位置に存在する塩基A若しくはGである一塩基多型部位、
(オ)塩基番号225の位置に存在する塩基A若しくはGである一塩基多型部位、
(カ)塩基番号239の位置に存在する塩基G若しくはTである一塩基多型部位、及び
(キ)塩基番号298の位置に存在する塩基A若しくはGである一塩基多型部位;
(1) From SEQ ID NO: 1 (A) to (G):
(A) a single nucleotide polymorphic site which is base C or T present at the position of base number 53;
(A) a single nucleotide polymorphic site which is base A or G present at the position of base number 140;
(C) a single nucleotide polymorphic site where base C or T is at the position of base number 170,
(D) a single nucleotide polymorphic site which is base A or G present at the position of base number 185,
(E) a single nucleotide polymorphic site that is base A or G present at the position of base number 225;
(F) a single nucleotide polymorphic site that is base G or T present at the position of base number 239, and (g) a single nucleotide polymorphic site that is base A or G present at the position of base number 298;

(2)配列番号2の、(ア)から(オ):
(ア)塩基番号104の位置に存在する塩基C若しくはTである一塩基多型部位、
(イ)塩基番号149の位置に存在する塩基A若しくはGである一塩基多型部位、
(ウ)塩基番号304の位置に存在する塩基C若しくはTである一塩基多型部位、
(エ)塩基番号321の位置に存在する塩基C若しくはTである一塩基多型部位、及び
(オ)塩基番号322の位置に存在する塩基A若しくはGである一塩基多型部位;
(2) SEQ ID NO: 2, (A) to (E):
(A) a single nucleotide polymorphic site which is base C or T present at the position of base number 104;
(A) a single nucleotide polymorphic site which is base A or G present at the position of base number 149;
(C) a single nucleotide polymorphic site which is base C or T present at the position of base number 304,
(D) a single nucleotide polymorphism site that is base C or T present at the position of base number 321; and (e) a single nucleotide polymorphism site that is base A or G at the position of base number 322;

(3)配列番号3の、(ア)から(ウ):
(ア)塩基番号125の位置に存在する塩基C若しくはTである一塩基多型部位、
(イ)塩基番号145の位置に存在する塩基A若しくはGである一塩基多型部位、
(ウ)塩基番号351から354の位置に存在する3塩基の挿入若しくは非挿入である一塩基多型部位;
(3) (A) to (C) of SEQ ID NO: 3:
(A) a single nucleotide polymorphic site which is base C or T present at the position of base number 125;
(A) a single nucleotide polymorphic site which is base A or G present at the position of base number 145;
(C) a single nucleotide polymorphism site in which insertion or non-insertion of 3 bases exists at positions of base numbers 351 to 354;

(4)配列番号4の、(ア)から(コ):
(ア)塩基番号67の位置に存在する塩基C若しくはTである一塩基多型部位、
(イ)塩基番号74の位置に存在する塩基C若しくはTである一塩基多型部位、
(ウ)塩基番号104の位置に存在する塩基A若しくはGである一塩基多型部位、
(エ)塩基番号160の位置に存在する塩基C若しくはTである一塩基多型部位、
(オ)塩基番号268の位置に存在する塩基A若しくはCである一塩基多型部位、
(カ)塩基番号269の位置に存在する塩基C若しくはTである一塩基多型部位、
(キ)塩基番号324の位置に存在する塩基A若しくはGである一塩基多型部位、
(ク)塩基番号446の位置に存在する塩基C若しくはTである一塩基多型部位、
(ケ)塩基番号453の位置に存在する塩基G若しくはTである一塩基多型部位、及び
(コ)塩基番号466の位置に存在する塩基A若しくはGである一塩基多型部位;
(4) SEQ ID NO: 4, (A) to (C):
(A) a single nucleotide polymorphic site which is base C or T present at the position of base number 67;
(A) a single nucleotide polymorphic site which is base C or T present at the position of base number 74;
(C) a single nucleotide polymorphic site which is base A or G present at the position of base number 104;
(D) a single nucleotide polymorphic site which is base C or T present at the position of base number 160;
(E) a single nucleotide polymorphic site which is base A or C present at the position of base number 268,
(F) a single nucleotide polymorphic site which is base C or T present at the position of base number 269;
(G) a single nucleotide polymorphic site which is base A or G present at the position of base number 324;
(H) a single nucleotide polymorphic site which is base C or T present at the position of base number 446;
(G) a single nucleotide polymorphism site that is base G or T present at the position of base number 453, and (co) a single nucleotide polymorphism site that is base A or G present at the position of base number 466;

(5)配列番号5の、(ア)及び(イ):
(ア)塩基番号431の位置に存在する塩基A若しくはGである一塩基多型部位、及び
(イ)塩基番号464の位置に存在する塩基C若しくはTである一塩基多型部位;
(5) (A) and (I) of SEQ ID NO: 5:
(A) a single nucleotide polymorphic site that is base A or G present at the position of base number 431, and (a) a single nucleotide polymorphic site that is base C or T present at the position of base number 464;

(6)配列番号6の、(ア)から(シ):
(ア)塩基番号75の位置に存在する塩基A若しくはCである一塩基多型部位、
(イ)塩基番号185の位置に存在する塩基C若しくはTである一塩基多型部位、
(ウ)塩基番号216の位置に存在する塩基C若しくはTである一塩基多型部位、
(エ)塩基番号217の位置に存在する塩基A若しくはCである一塩基多型部位、
(オ)塩基番号253の位置に存在する塩基A若しくはCである一塩基多型部位、
(カ)塩基番号269の位置に存在する塩基C若しくはTである一塩基多型部位、
(キ)塩基番号318の位置に存在する塩基C若しくはTである一塩基多型部位、
(ク)塩基番号441の位置に存在する塩基A若しくはTである一塩基多型部位、
(ケ)塩基番号444の位置に存在する塩基A若しくはGである一塩基多型部位、
(コ)塩基番号445の位置に存在する塩基A若しくはTである一塩基多型部位、
(サ)塩基番号463の位置に存在する塩基C若しくはTである一塩基多型部位、及び
(シ)塩基番号493の位置に存在する塩基C若しくはTである一塩基多型部位;
(6) SEQ ID NO: 6, (A) to (S):
(A) a single nucleotide polymorphic site which is base A or C present at the position of base number 75;
(A) a single nucleotide polymorphic site which is base C or T present at the position of base number 185,
(C) a single nucleotide polymorphic site which is base C or T present at the position of base number 216,
(D) a single nucleotide polymorphic site which is base A or C present at the position of base number 217;
(E) a single nucleotide polymorphic site which is base A or C present at the position of base number 253,
(F) a single nucleotide polymorphic site which is base C or T present at the position of base number 269;
(G) a single nucleotide polymorphic site which is base C or T present at the position of base number 318,
(H) a single nucleotide polymorphic site that is base A or T present at the position of base number 441;
(G) a single nucleotide polymorphic site which is base A or G present at the position of base number 444;
(E) a single nucleotide polymorphic site which is base A or T present at the position of base number 445;
(Sa) a single nucleotide polymorphic site that is base C or T present at the position of base number 463, and (f) a single nucleotide polymorphic site that is base C or T present at the position of base number 493;

(7)配列番号7の、(ア)から(カ):
(ア)塩基番号213の位置に存在する塩基A若しくはGである一塩基多型部位、
(イ)塩基番号243の位置に存在する塩基A若しくはGである一塩基多型部位、
(ウ)塩基番号290の位置に存在する塩基C若しくはTである一塩基多型部位、
(エ)塩基番号348の位置に存在する塩基A若しくはTである一塩基多型部位、
(オ)塩基番号350の位置に存在する塩基A若しくはGである一塩基多型部位、及び
(カ)塩基番号378の位置に存在する塩基C若しくはTである一塩基多型部位;
(7) From SEQ ID NO: 7, (a) to (f):
(A) a single nucleotide polymorphic site that is base A or G present at the position of base number 213,
(A) a single nucleotide polymorphic site which is base A or G present at the position of base number 243;
(C) a single nucleotide polymorphic site which is base C or T present at the position of base number 290,
(D) a single nucleotide polymorphic site which is base A or T present at the position of base number 348;
(E) a single nucleotide polymorphic site which is base A or G present at the position of base number 350, and (f) a single nucleotide polymorphic site which is base C or T present at the position of base number 378;

(8)配列番号8の、(ア)から(オ):
(ア)塩基番号88の位置に存在する塩基A若しくはGである一塩基多型部位、
(イ)塩基番号152の位置に存在する塩基C若しくはTである一塩基多型部位、
(ウ)塩基番号161の位置に存在する塩基C若しくはTである一塩基多型部位、
(エ)塩基番号309の位置に存在する塩基A若しくはGである一塩基多型部位、及び
(オ)塩基番号381の位置に存在する塩基C若しくはTである一塩基多型部位;
(8) (A) to (E) of SEQ ID NO: 8:
(A) a single nucleotide polymorphic site which is base A or G present at the position of base number 88;
(A) a single nucleotide polymorphic site which is base C or T present at the position of base number 152;
(C) a single nucleotide polymorphic site which is base C or T present at the position of base number 161;
(D) a single nucleotide polymorphism site that is base A or G present at the position of base number 309, and (e) a single nucleotide polymorphism site that is base C or T at the position of base number 381;

(9)配列番号9の、(ア)から(ウ):
(ア)塩基番号66の位置に存在する塩基C若しくはTである一塩基多型部位、
(イ)塩基番号229の位置に存在する塩基C若しくはTである一塩基多型部位、及び
(ウ)塩基番号262の位置に存在する塩基A若しくはTである一塩基多型部位;
(9) From SEQ ID NO: 9, (a) to (c):
(A) a single nucleotide polymorphic site which is base C or T present at the position of base number 66;
(A) a single nucleotide polymorphic site which is the base C or T present at the position of the base number 229, and (c) a single nucleotide polymorphic site which is the base A or T present at the position of the base number 262;

(10)配列番号10の、(ア)から(ウ):
(ア)塩基番号163から170の位置に存在する1塩基Tの欠失若しくは非欠失である一塩基多型部位、
(イ)塩基番号309から317の位置に存在する1塩基Aの欠失若しくは非欠失である一塩基多型部位、及び
(ウ)塩基番号356の位置に存在する塩基A若しくはCである一塩基多型部位;
(10) (A) to (C) of SEQ ID NO: 10:
(A) a single nucleotide polymorphic site which is a deletion or non-deletion of 1 base T existing at positions of base numbers 163 to 170;
(A) a single nucleotide polymorphic site that is a deletion or non-deletion of one base A present at positions of base numbers 309 to 317, and (c) one of bases A or C present at the position of base number 356 Nucleotide polymorphism site;

(11)配列番号11の、(ア)から(キ):
(ア)塩基番号69の位置に存在する塩基A若しくはTである一塩基多型部位、
(イ)塩基番号93の位置に存在する塩基C若しくはTである一塩基多型部位、
(ウ)塩基番号111の位置に存在する塩基A若しくはGである一塩基多型部位、
(エ)塩基番号208の位置に存在する塩基C若しくはTである一塩基多型部位、
(オ)塩基番号210の位置に存在する塩基A若しくはGである一塩基多型部位、
(カ)塩基番号408の位置に存在する塩基C若しくはTである一塩基多型部位、及び
(キ)塩基番号429の位置に存在する塩基A若しくはGである一塩基多型部位;
(11) From SEQ ID NO: 11, (A) to (G):
(A) a single nucleotide polymorphic site which is base A or T present at the position of base number 69;
(A) a single nucleotide polymorphic site which is base C or T present at the position of base number 93;
(C) a single nucleotide polymorphic site which is base A or G present at the position of base number 111;
(D) a single nucleotide polymorphic site which is base C or T present at the position of base number 208;
(E) a single nucleotide polymorphic site which is base A or G present at the position of base number 210;
(F) a single nucleotide polymorphic site which is base C or T present at the position of base number 408, and (g) a single nucleotide polymorphic site which is base A or G present at the position of base number 429;

(12)配列番号12の、(ア)から(ウ):
(ア)塩基番号104の位置に存在する塩基A若しくはGである一塩基多型部位、
(イ)塩基番号151の位置に存在する塩基C若しくはGである一塩基多型部位、及び
(ウ)塩基番号343の位置に存在する塩基C若しくはTである一塩基多型部位;
(12) From SEQ ID NO: 12, (a) to (c):
(A) a single nucleotide polymorphic site which is base A or G present at the position of base number 104;
(A) a single nucleotide polymorphic site that is base C or G present at the position of base number 151, and (c) a single nucleotide polymorphic site that is base C or T present at the position of base number 343;

(13)配列番号13の、(ア)から(ウ):
(ア)塩基番号126の位置に存在する塩基A若しくはGである一塩基多型部位、
(イ)塩基番号201の位置に存在する塩基C若しくはGである一塩基多型部位、及び
(ウ)塩基番号264の位置に存在する塩基A若しくはGである一塩基多型部位;
(13) (A) to (C) of SEQ ID NO: 13:
(A) a single nucleotide polymorphic site which is base A or G present at the position of base number 126;
(A) a single nucleotide polymorphic site which is the base C or G present at the position of the base number 201, and (c) a single nucleotide polymorphic site which is the base A or G present at the position of the base number 264;

(14)配列番号14の、(ア)から(ウ):
(ア)塩基番号132の位置に存在する塩基A若しくはCである一塩基多型部位、
(イ)塩基番号185の位置に存在する塩基A若しくはCである一塩基多型部位、及び
(ウ)塩基番号189の位置に存在する塩基C若しくはTである一塩基多型部位;
(14) (A) to (C) of SEQ ID NO: 14:
(A) a single nucleotide polymorphic site which is base A or C present at the position of base number 132;
(A) a single nucleotide polymorphic site which is base A or C present at the position of base number 185, and (c) a single nucleotide polymorphic site which is base C or T present at the position of base number 189;

(15)配列番号15の、(ア)から(オ):
(ア)塩基番号101の位置に存在する塩基C若しくはTである一塩基多型部位、
(イ)塩基番号183の位置に存在する塩基C若しくはTである一塩基多型部位、
(ウ)塩基番号188から192の位置に存在する1塩基Aの挿入若しくは非挿入である一塩基多型部位、
(エ)塩基番号280の位置に存在する塩基C若しくはTである一塩基多型部位、及び
(オ)塩基番号338の位置に存在する塩基若GしくはTである一塩基多型部位;
(15) From SEQ ID NO: 15, (a) to (e):
(A) a single nucleotide polymorphic site which is base C or T present at the position of base number 101;
(A) a single nucleotide polymorphic site which is base C or T present at the position of base number 183,
(C) a single nucleotide polymorphism site in which insertion or non-insertion of 1 base A exists at positions of base numbers 188 to 192,
(D) a single nucleotide polymorphic site which is the base C or T present at the position of the base number 280, and (e) a single nucleotide polymorphic site which is the base G or T present at the position of the base number 338;

(16)配列番号16の、(ア)から(サ):
(ア)塩基番号134の位置に存在する塩基A若しくはTである一塩基多型部位、
(イ)塩基番号135の位置に存在する塩基A若しくはTである一塩基多型部位、
(ウ)塩基番号137の位置に存在する塩基C若しくはTである一塩基多型部位、
(エ)塩基番号138の位置に存在する塩基A若しくはTである一塩基多型部位、
(オ)塩基番号142の位置に存在する塩基A若しくはGである一塩基多型部位、
(カ)塩基番号165の位置に存在する塩基A若しくはGである一塩基多型部位、
(キ)塩基番号183の位置に存在する塩基C若しくはTである一塩基多型部位、
(ク)塩基番号219の位置に存在する塩基A若しくはCである一塩基多型部位、
(ケ)塩基番号232の位置に存在する塩基C若しくはGである一塩基多型部位、
(コ)塩基番号293の位置に存在する塩基A若しくはでGある一塩基多型部位、及び
(サ)塩基番号332の位置に存在する塩基C若しくはTである一塩基多型部位;
(16) (A) to (SA) of SEQ ID NO: 16:
(A) a single nucleotide polymorphic site which is base A or T present at the position of base number 134;
(A) a single nucleotide polymorphic site which is base A or T present at the position of base number 135;
(C) a single nucleotide polymorphic site which is base C or T present at the position of base number 137,
(D) a single nucleotide polymorphic site which is base A or T present at the position of base number 138;
(E) a single nucleotide polymorphic site which is base A or G present at the position of base number 142;
(F) a single nucleotide polymorphic site which is base A or G present at the position of base number 165,
(G) a single nucleotide polymorphic site which is base C or T present at the position of base number 183,
(H) a single nucleotide polymorphic site which is base A or C present at the position of base number 219;
(G) a single nucleotide polymorphic site which is base C or G present at the position of base number 232;
(Co) a single nucleotide polymorphic site which is base A or G present at the position of base number 293, and (sa) a single nucleotide polymorphic site which is base C or T present at the position of base number 332;

(17)配列番号17の、(ア)から(オ):
(ア)塩基番号65の位置に存在する塩基A若しくはTである一塩基多型部位、
(イ)塩基番号158の位置に存在する塩基A若しくはGである一塩基多型部位、
(ウ)塩基番号236の位置に存在する塩基G若しくはTである一塩基多型部位、
(エ)塩基番号256の位置に存在する塩基A若しくはGである一塩基多型部位、及び
(オ)塩基番号474の位置に存在する塩基C若しくはTである一塩基多型部位;
(17) From SEQ ID NO: 17, (a) to (e):
(A) a single nucleotide polymorphic site which is base A or T present at the position of base number 65;
(A) a single nucleotide polymorphic site which is base A or G present at the position of base number 158,
(C) a single nucleotide polymorphic site which is base G or T present at the position of base number 236,
(D) a single nucleotide polymorphic site which is base A or G present at the position of base number 256, and (e) a single nucleotide polymorphic site which is base C or T present at the position of base number 474;

(18)配列番号18の、(ア)及び(イ):
(ア)塩基番号96の位置に存在する塩基C若しくはTである一塩基多型部位、及び
(イ)塩基番号133の位置に存在する塩基C若しくはTである一塩基多型部位;
(18) (A) and (I) of SEQ ID NO: 18:
(A) a single nucleotide polymorphism site which is the base C or T present at the position of the base number 96, and (a) a single nucleotide polymorphism site which is the base C or T which is present at the position of the base number 133;

(19)配列番号19の、(ア)から(エ):
(ア)塩基番号261の位置に存在する塩基A若しくはGである一塩基多型部位、
(イ)塩基番号282の位置に存在する塩基C若しくはTである一塩基多型部位、
(ウ)塩基番号371の位置に存在する塩基C若しくはTである一塩基多型部位、及び
(エ)塩基番号440の位置に存在する塩基C若しくはTである一塩基多型部位;
(19) (A) to (D) of SEQ ID NO: 19:
(A) a single nucleotide polymorphic site which is base A or G present at the position of base number 261,
(A) a single nucleotide polymorphic site which is base C or T present at the position of base number 282;
(C) a single nucleotide polymorphic site that is base C or T present at the position of base number 371, and (d) a single nucleotide polymorphic site that is base C or T present at the position of base number 440;

(20)配列番号20の、(ア)及び(イ):
(ア)塩基番号247の位置に存在する塩基A若しくはGである一塩基多型部位、及び
(イ)塩基番号362の位置に存在する塩基C若しくはTである一塩基多型部位;
(20) (A) and (A) of SEQ ID NO: 20:
(A) a single nucleotide polymorphism site that is base A or G present at the position of base number 247, and (b) a single nucleotide polymorphism site that is base C or T present at the position of base number 362;

(21)配列番号21の、(ア)から(エ):
(ア)塩基番号82の位置に存在する塩基A若しくはGである一塩基多型部位、
(イ)塩基番号91の位置に存在する塩基A若しくはGである一塩基多型部位、
(ウ)塩基番号139の位置に存在する塩基G若しくはTである一塩基多型部位、及び
(エ)塩基番号140の位置に存在する塩基C若しくはTである一塩基多型部位;
(22)(ア)配列番号22の、塩基番号359から364の位置に存在する塩基Aの欠失若しくは非欠失である一塩基多型部位;
(21) From SEQ ID NO: 21, (a) to (d):
(A) a single nucleotide polymorphic site which is base A or G present at the position of base number 82;
(A) a single nucleotide polymorphic site which is base A or G present at the position of base number 91;
(C) a single nucleotide polymorphic site which is the base G or T present at the position of the base number 139, and (d) a single nucleotide polymorphic site which is the base C or T present at the position of the base number 140;
(22) (a) a single nucleotide polymorphism site which is a deletion or non-deletion of base A present at positions of base numbers 359 to 364 of SEQ ID NO: 22;

(23)配列番号23の、(ア)及び(イ):
(ア)塩基番号420の位置に存在する塩基A若しくはTである一塩基多型部位、及び
(イ)塩基番号485の位置に存在する塩基C若しくはGである一塩基多型部位;
(23) (A) and (I) of SEQ ID NO: 23:
(A) a single nucleotide polymorphic site which is the base A or T present at the position of the base number 420, and (a) a single nucleotide polymorphic site which is the base C or G present at the position of the base number 485;

(24)配列番号24の、(ア)から(コ):
(ア)塩基番号189の位置に存在する塩基C若しくはTである一塩基多型部位、
(イ)塩基番号209の位置に存在する塩基A若しくはGである一塩基多型部位、
(ウ)塩基番号218の位置に存在する塩基C若しくはTである一塩基多型部位、
(エ)塩基番号260の位置に存在する塩基C若しくはTである一塩基多型部位、
(オ)塩基番号283の位置に存在する塩基C若しくはTである一塩基多型部位、
(カ)塩基番号315の位置に存在する塩基C若しくはGである一塩基多型部位、
(キ)塩基番号379の位置に存在する塩基A若しくはGである一塩基多型部位、
(ク)塩基番号385の位置に存在する塩基C若しくはTである一塩基多型部位、
(ケ)塩基番号551の位置に存在する塩基A若しくはCである一塩基多型部位、及び
(コ)塩基番号597の位置に存在する塩基C若しくはTである一塩基多型部位;
(24) (A) to (C) of SEQ ID NO: 24:
(A) a single nucleotide polymorphic site which is base C or T present at the position of base number 189;
(A) a single nucleotide polymorphic site which is base A or G present at the position of base number 209,
(C) a single nucleotide polymorphic site which is base C or T present at the position of base number 218,
(D) a single nucleotide polymorphic site which is base C or T present at the position of base number 260;
(E) a single nucleotide polymorphic site which is base C or T present at the position of base number 283,
(F) a single nucleotide polymorphic site which is base C or G present at the position of base number 315,
(G) a single nucleotide polymorphic site which is base A or G present at the position of base number 379;
(H) a single nucleotide polymorphic site which is base C or T present at the position of base number 385,
(G) a single nucleotide polymorphic site which is base A or C present at the position of base number 551, and (co) a single nucleotide polymorphic site which is base C or T present at the position of base number 597;

(25)配列番号25の、(ア)から(キ):
(ア)塩基番号62の位置に存在する塩基C若しくはTである一塩基多型部位、
(イ)塩基番号96の位置に存在する塩基A若しくはGである一塩基多型部位、
(ウ)塩基番号171の位置に存在する塩基A若しくはGである一塩基多型部位、
(エ)塩基番号176の位置に存在する塩基C若しくはTである一塩基多型部位、
(オ)塩基番号222の位置に存在する塩基C若しくはTである一塩基多型部位、
(カ)塩基番号228の位置に存在する塩基C若しくはTである一塩基多型部位、及び
(キ)塩基番号273の位置に存在する塩基A若しくはGである一塩基多型部位;
(25) (A) to (G) of SEQ ID NO: 25:
(A) a single nucleotide polymorphic site which is base C or T present at the position of base number 62;
(A) a single nucleotide polymorphic site which is base A or G present at the position of base number 96;
(C) a single nucleotide polymorphic site which is base A or G present at the position of base number 171;
(D) a single nucleotide polymorphic site which is base C or T present at the position of base number 176,
(E) a single nucleotide polymorphic site which is base C or T present at the position of base number 222;
(F) a single nucleotide polymorphic site which is base C or T present at the position of base number 228, and (g) a single nucleotide polymorphic site which is base A or G present at the position of base number 273;

(26)配列番号26の、(ア)から(キ):
(ア)塩基番号57の位置に存在する塩基A若しくはGである一塩基多型部位、
(イ)塩基番号149の位置に存在する塩基A若しくはGである一塩基多型部位、
(ウ)塩基番号221の位置に存在する塩基A若しくはTである一塩基多型部位、
(エ)塩基番号303の位置に存在する塩基A若しくはGである一塩基多型部位、
(オ)塩基番号350の位置に存在する塩基A若しくはTである一塩基多型部位、
(カ)塩基番号400の位置に存在する塩基A若しくはTである一塩基多型部位、及び
(キ)塩基番号434の位置に存在する塩基A若しくはGである一塩基多型部位;
(26) From SEQ ID NO: 26, (a) to (g):
(A) a single nucleotide polymorphic site which is base A or G present at the position of base number 57;
(A) a single nucleotide polymorphic site which is base A or G present at the position of base number 149;
(C) a single nucleotide polymorphic site which is base A or T present at the position of base number 221;
(D) a single nucleotide polymorphic site which is base A or G present at the position of base number 303;
(E) a single nucleotide polymorphic site which is base A or T present at the position of base number 350;
(F) a single nucleotide polymorphic site which is base A or T present at the position of base number 400, and (g) a single nucleotide polymorphic site which is base A or G present at the position of base number 434;

(27)配列番号27の、(ア)から(オ):
(ア)塩基番号80の位置に存在する塩基A若しくはGである一塩基多型部位、
(イ)塩基番号116から122の位置に存在する塩基Aの欠失若しくは非欠失である一塩基多型部位、
(ウ)塩基番号204の位置に存在する塩基A若しくはGである一塩基多型部位、
(エ)塩基番号249の位置に存在する塩基C若しくはTである一塩基多型部位、及び
(オ)塩基番号389の位置に存在する塩基G若しくはTである一塩基多型部位;
(27) (A) to (E) of SEQ ID NO: 27:
(A) a single nucleotide polymorphic site which is base A or G present at the position of base number 80;
(A) a single nucleotide polymorphism site which is a deletion or non-deletion of base A existing at positions from base numbers 116 to 122;
(C) a single nucleotide polymorphic site which is base A or G present at the position of base number 204;
(D) a single nucleotide polymorphism site that is base C or T present at the position of base number 249, and (e) a single nucleotide polymorphism site that is base G or T at the position of base number 389;

(28)配列番号28の、(ア)から(オ):
(ア)塩基番号83の位置に存在する塩基A若しくはCである一塩基多型部位、
(イ)塩基番号169の位置に存在する塩基C若しくはGである一塩基多型部位、
(ウ)塩基番号193の位置に存在する塩基C若しくはTである一塩基多型部位、
(エ)塩基番号215の位置に存在する塩基A若しくはCである一塩基多型部位、及び
(オ)塩基番号232の位置に存在する塩基A若しくはGである一塩基多型部位;
(28) From SEQ ID NO: 28, (a) to (e):
(A) a single nucleotide polymorphic site which is base A or C present at the position of base number 83;
(A) a single nucleotide polymorphic site which is base C or G present at the position of base number 169,
(C) a single nucleotide polymorphic site which is base C or T present at the position of base number 193,
(D) a single nucleotide polymorphic site which is base A or C present at the position of base number 215, and (e) a single nucleotide polymorphic site which is base A or G present at the position of base number 232;

(29)(ア)配列番号29の、塩基番号309の位置に存在する塩基A若しくはGである一塩基多型部位;
(30)(ア)配列番号30の、塩基番号216の位置に存在する塩基C若しくはTである一塩基多型部位;
(29) (a) a single nucleotide polymorphic site which is base A or G present at the position of base number 309 in SEQ ID NO: 29;
(30) (a) a single nucleotide polymorphic site which is base C or T present at the position of base number 216 of SEQ ID NO: 30;

(31)(ア)配列番号31の、塩基番号162の位置に存在する塩基C若しくはTである一塩基多型部位;
(32)配列番号32の、(ア)及び(イ):
(ア)塩基番号34の位置に存在する塩基C若しくはTである一塩基多型部位、及び
(イ)塩基番号336の位置に存在する塩基A若しくはGである一塩基多型部位;
(33)(ア)配列番号33の、塩基番号361の位置に存在する塩基A若しくはGである一塩基多型部位。
(31) (a) a single nucleotide polymorphic site which is base C or T present at the position of base number 162 of SEQ ID NO: 31;
(32) (A) and (I) of SEQ ID NO: 32:
(A) a single nucleotide polymorphic site that is base C or T present at the position of base number 34, and (a) a single nucleotide polymorphic site that is base A or G present at the position of base number 336;
(33) (a) A single nucleotide polymorphic site which is base A or G present at the position of base number 361 in SEQ ID NO: 33.

さらに、一度に配列番号1から33に示す塩基配列に含まれる一塩基多型部位の全部を含む配列を増幅し得るプライマーセットも含まれ、そのようなプライマーセットとして、例えば以下のプライマーセットが挙げられる。   Furthermore, a primer set capable of amplifying a sequence containing all of the single nucleotide polymorphism sites contained in the nucleotide sequences shown in SEQ ID NOs: 1 to 33 at a time is also included. Examples of such primer sets include the following primer sets: It is done.

一対のプライマーセットが以下の(1)から(33)の組合せのうちの少なくとも1つの組み合わせからなるプライマーセット:
(1)配列番号1の塩基番号53の5’側のプライマーおよび配列番号1の塩基番号298の3’側のプライマー;
(2)配列番号2の塩基番号104の5’側のプライマーおよび配列番号2の塩基番号322の3’側のプライマー;
(3)配列番号3の塩基番号125の5’側のプライマーおよび配列番号3の塩基番号354の3’側のプライマー;
(4)配列番号4の塩基番号67の5’側のプライマーおよび配列番号4の塩基番号466の3’側のプライマー;
(5)配列番号5の塩基番号431の5’側のプライマーおよび配列番号5の塩基番号464の3’側のプライマー;
(6)配列番号6の塩基番号75の5’側のプライマーおよび配列番号6の塩基番号493の3’側のプライマー;
(7)配列番号7の塩基番号213の5’側のプライマーおよび配列番号7の塩基番号378の3’側のプライマー;
(8)配列番号8の塩基番号88の5’側のプライマーおよび配列番号8の塩基番号381の3’側のプライマー;
(9)配列番号9の塩基番号66の5’側のプライマーおよび配列番号9の塩基番号262の3’側のプライマー;
(10)配列番号10の塩基番163の5’側のプライマーおよび配列番号10の塩基番号356の3’側のプライマー;
(11)配列番号11の塩基番号69の5’側のプライマーおよび配列番号11の塩基番号429の3’側のプライマー;
(12)配列番号12の塩基番号104の5’側のプライマーおよび配列番号12の塩基番号343の3’側のプライマー;
(13)配列番号13の塩基番号126の5’側のプライマーおよび配列番号13の塩基番号264の3’側のプライマー;
(14)配列番号14の塩基番号132の5’側のプライマーおよび配列番号14の塩基番号189の3’側のプライマー;
(15)配列番号15の塩基番号101の5’側のプライマーおよび配列番号15の塩基番号338の3’側のプライマー;
(16)配列番号16の塩基番号134の5’側のプライマーおよび配列番号16の塩基番号332の3’側のプライマー;
(17)配列番号17の塩基番号65の5’側のプライマーおよび配列番号17の塩基番号474の3’側のプライマー;
(18)配列番号18の塩基番号96の5’側のプライマーおよび配列番号18の塩基番号133の3’側のプライマー;
(19)配列番号19の塩基番号261の5’側のプライマーおよび配列番号19の塩基番号440の3’側のプライマー;
(20)配列番号20の塩基番号247の5’側のプライマーおよび配列番号20の塩基番号362の3’側のプライマー;
(21)配列番号21の塩基番号82の5’側のプライマーおよび配列番号21の塩基番号140の3’側のプライマー;
(22)配列番号22の塩基番号359の5’側のプライマーおよび配列番号22の塩基番号364の3’側のプライマー;
(23)配列番号23の塩基番号420の5’側のプライマーおよび配列番号23の塩基番号485の3’側のプライマー;
(24)配列番号24の塩基番号189の5’側のプライマーおよび配列番号24の塩基番号597の3’側のプライマー;
(25)配列番号25の塩基番号62の5’側のプライマーおよび配列番号25の塩基番号273の3’側のプライマー;
(26)配列番号26の塩基番号57の5’側のプライマーおよび配列番号26の塩基番号434の3’側のプライマー;
(27)配列番号27の塩基番号80の5’側のプライマーおよび配列番号27の塩基番号389の3’側のプライマー;
(28)配列番号28の塩基番号83の5’側のプライマーおよび配列番号28の塩基番号232の3’側のプライマー;
(29)配列番号29の塩基番号309の5’側のプライマーおよび配列番号29の塩基番号309の3’側のプライマー;
(30)配列番号30の塩基番号216の5’側のプライマーおよび配列番号30の塩基番号216の3’側のプライマー;
(31)配列番号31の塩基番号162の5’側のプライマーおよび配列番号31の塩基番号162の3’側のプライマー;
(32)配列番号32の塩基番号34の5’側のプライマーおよび配列番号32の塩基番号336の3’側のプライマー;
(33)配列番号33の塩基番号361の5’側のプライマーおよび配列番号33の塩基番号361の3’側のプライマー。
A primer set comprising a pair of primer sets consisting of at least one of the following combinations (1) to (33):
(1) a primer on the 5 ′ side of base number 53 of SEQ ID NO: 1 and a primer on the 3 ′ side of base number 298 of SEQ ID NO: 1;
(2) a primer on the 5 ′ side of base number 104 of SEQ ID NO: 2 and a primer on the 3 ′ side of base number 322 of SEQ ID NO: 2;
(3) a primer on the 5 ′ side of base number 125 of SEQ ID NO: 3 and a primer on the 3 ′ side of base number 354 of SEQ ID NO: 3;
(4) a primer on the 5 ′ side of base number 67 of SEQ ID NO: 4 and a primer on the 3 ′ side of base number 466 of SEQ ID NO: 4;
(5) a primer on the 5 ′ side of base number 431 of SEQ ID NO: 5 and a primer on the 3 ′ side of base number 464 of SEQ ID NO: 5;
(6) a primer on the 5 ′ side of base number 75 of SEQ ID NO: 6 and a primer on the 3 ′ side of base number 493 of SEQ ID NO: 6;
(7) a primer on the 5 ′ side of base number 213 of SEQ ID NO: 7 and a primer on the 3 ′ side of base number 378 of SEQ ID NO: 7;
(8) a primer on the 5 ′ side of base number 88 of SEQ ID NO: 8 and a primer on the 3 ′ side of base number 381 of SEQ ID NO: 8;
(9) a primer on the 5 ′ side of base number 66 of SEQ ID NO: 9 and a primer on the 3 ′ side of base number 262 of SEQ ID NO: 9;
(10) a primer on the 5 ′ side of base number 163 of SEQ ID NO: 10 and a primer on the 3 ′ side of base number 356 of SEQ ID NO: 10;
(11) a primer on the 5 ′ side of base number 69 of SEQ ID NO: 11 and a primer on the 3 ′ side of base number 429 of SEQ ID NO: 11;
(12) a primer on the 5 ′ side of base number 104 of SEQ ID NO: 12 and a primer on the 3 ′ side of base number 343 of SEQ ID NO: 12;
(13) a primer on the 5 ′ side of base number 126 of SEQ ID NO: 13 and a primer on the 3 ′ side of base number 264 of SEQ ID NO: 13;
(14) a primer on the 5 ′ side of base number 132 of SEQ ID NO: 14 and a primer on the 3 ′ side of base number 189 of SEQ ID NO: 14;
(15) a primer on the 5 ′ side of base number 101 of SEQ ID NO: 15 and a primer on the 3 ′ side of base number 338 of SEQ ID NO: 15;
(16) a primer on the 5 ′ side of base number 134 of SEQ ID NO: 16 and a primer on the 3 ′ side of base number 332 of SEQ ID NO: 16;
(17) a primer on the 5 ′ side of base number 65 of SEQ ID NO: 17 and a primer on the 3 ′ side of base number 474 of SEQ ID NO: 17;
(18) a primer on the 5 ′ side of base number 96 of SEQ ID NO: 18 and a primer on the 3 ′ side of base number 133 of SEQ ID NO: 18;
(19) a primer on the 5 ′ side of base number 261 of SEQ ID NO: 19 and a primer on the 3 ′ side of base number 440 of SEQ ID NO: 19;
(20) a primer on the 5 ′ side of base number 247 of SEQ ID NO: 20 and a primer on the 3 ′ side of base number 362 of SEQ ID NO: 20;
(21) a primer on the 5 ′ side of base number 82 in SEQ ID NO: 21 and a primer on the 3 ′ side of base number 140 in SEQ ID NO: 21;
(22) a primer on the 5 ′ side of base number 359 of SEQ ID NO: 22 and a primer on the 3 ′ side of base number 364 of SEQ ID NO: 22;
(23) a primer on the 5 ′ side of base number 420 of SEQ ID NO: 23 and a primer on the 3 ′ side of base number 485 of SEQ ID NO: 23;
(24) a primer on the 5 ′ side of base number 189 of SEQ ID NO: 24 and a primer on the 3 ′ side of base number 597 of SEQ ID NO: 24;
(25) a primer on the 5 ′ side of base number 62 of SEQ ID NO: 25 and a primer on the 3 ′ side of base number 273 of SEQ ID NO: 25;
(26) a primer on the 5 ′ side of base number 57 of SEQ ID NO: 26 and a primer on the 3 ′ side of base number 434 of SEQ ID NO: 26;
(27) a primer on the 5 ′ side of base number 80 of SEQ ID NO: 27 and a primer on the 3 ′ side of base number 389 of SEQ ID NO: 27;
(28) a primer on the 5 ′ side of base number 83 of SEQ ID NO: 28 and a primer on the 3 ′ side of base number 232 of SEQ ID NO: 28;
(29) a primer on the 5 ′ side of base number 309 of SEQ ID NO: 29 and a primer on the 3 ′ side of base number 309 of SEQ ID NO: 29;
(30) a primer on the 5 ′ side of base number 216 of SEQ ID NO: 30 and a primer on the 3 ′ side of base number 216 of SEQ ID NO: 30;
(31) a primer on the 5 ′ side of base number 162 of SEQ ID NO: 31 and a primer on the 3 ′ side of base number 162 of SEQ ID NO: 31;
(32) a primer on the 5 ′ side of base number 34 of SEQ ID NO: 32 and a primer on the 3 ′ side of base number 336 of SEQ ID NO: 32;
(33) A primer on the 5 ′ side of base number 361 of SEQ ID NO: 33 and a primer on the 3 ′ side of base number 361 of SEQ ID NO: 33

上記プライマーセットの一例として配列番号1から33のそれぞれの配列全てを増幅し得える配列が挙げられ、以下に示す配列の組合せである。   An example of the primer set is a sequence that can amplify all the sequences of SEQ ID NOs: 1 to 33, and is a combination of the sequences shown below.

一対のプライマーセットが、以下の(1)から(33)の組合せのうちの少なくとも1つの組み合わせからなるプライマーセット:
(1)配列番号34及び配列番号35の組み合わせ;
(2)配列番号36及び配列番号37の組み合わせ;
(3)配列番号38及び配列番号39の組み合わせ;
(4)配列番号40及び配列番号41の組み合わせ;
(5)配列番号42及び配列番号43の組み合わせ;
(6)配列番号44及び配列番号45の組み合わせ;
(7)配列番号46及び配列番号47の組み合わせ;
(8)配列番号48及び配列番号49の組み合わせ;
(9)配列番号50及び配列番号51の組み合わせ;
(10)配列番号52及び配列番号53の組み合わせ;
(11)配列番号54及び配列番号55の組み合わせ;
(12)配列番号56及び配列番号57の組み合わせ;
(13)配列番号58及び配列番号59の組み合わせ;
(14)配列番号60及び配列番号61の組み合わせ;
(15)配列番号62及び配列番号63の組み合わせ;
(16)配列番号64及び配列番号65の組み合わせ;
(17)配列番号66及び配列番号67の組み合わせ;
(18)配列番号68及び配列番号69の組み合わせ;
(19)配列番号70及び配列番号71の組み合わせ;
(20)配列番号72及び配列番号73の組み合わせ;
(21)配列番号74及び配列番号75の組み合わせ;
(22)配列番号76及び配列番号77の組み合わせ;
(23)配列番号78及び配列番号79の組み合わせ;
(24)配列番号80及び配列番号81の組み合わせ;
(25)配列番号82及び配列番号83の組み合わせ;
(26)配列番号84及び配列番号85の組み合わせ;
(27)配列番号86及び配列番号87の組み合わせ;
(28)配列番号88及び配列番号89の組み合わせ;
(29)配列番号90及び配列番号91の組み合わせ;
(30)配列番号92及び配列番号93の組み合わせ;
(31)配列番号94及び配列番号95の組み合わせ;
(32)配列番号96及び配列番号97の組み合わせ;
(33)配列番号98及び配列番号99の組み合わせ。
A primer set consisting of at least one combination of the following combinations (1) to (33):
(1) A combination of SEQ ID NO: 34 and SEQ ID NO: 35;
(2) a combination of SEQ ID NO: 36 and SEQ ID NO: 37;
(3) a combination of SEQ ID NO: 38 and SEQ ID NO: 39;
(4) a combination of SEQ ID NO: 40 and SEQ ID NO: 41;
(5) a combination of SEQ ID NO: 42 and SEQ ID NO: 43;
(6) a combination of SEQ ID NO: 44 and SEQ ID NO: 45;
(7) a combination of SEQ ID NO: 46 and SEQ ID NO: 47;
(8) A combination of SEQ ID NO: 48 and SEQ ID NO: 49;
(9) Combination of SEQ ID NO: 50 and SEQ ID NO: 51;
(10) A combination of SEQ ID NO: 52 and SEQ ID NO: 53;
(11) A combination of SEQ ID NO: 54 and SEQ ID NO: 55;
(12) A combination of SEQ ID NO: 56 and SEQ ID NO: 57;
(13) A combination of SEQ ID NO: 58 and SEQ ID NO: 59;
(14) a combination of SEQ ID NO: 60 and SEQ ID NO: 61;
(15) a combination of SEQ ID NO: 62 and SEQ ID NO: 63;
(16) A combination of SEQ ID NO: 64 and SEQ ID NO: 65;
(17) A combination of SEQ ID NO: 66 and SEQ ID NO: 67;
(18) A combination of SEQ ID NO: 68 and SEQ ID NO: 69;
(19) A combination of SEQ ID NO: 70 and SEQ ID NO: 71;
(20) a combination of SEQ ID NO: 72 and SEQ ID NO: 73;
(21) A combination of SEQ ID NO: 74 and SEQ ID NO: 75;
(22) a combination of SEQ ID NO: 76 and SEQ ID NO: 77;
(23) A combination of SEQ ID NO: 78 and SEQ ID NO: 79;
(24) A combination of SEQ ID NO: 80 and SEQ ID NO: 81;
(25) a combination of SEQ ID NO: 82 and SEQ ID NO: 83;
(26) a combination of SEQ ID NO: 84 and SEQ ID NO: 85;
(27) A combination of SEQ ID NO: 86 and SEQ ID NO: 87;
(28) A combination of SEQ ID NO: 88 and SEQ ID NO: 89;
(29) a combination of SEQ ID NO: 90 and SEQ ID NO: 91;
(30) a combination of SEQ ID NO: 92 and SEQ ID NO: 93;
(31) A combination of SEQ ID NO: 94 and SEQ ID NO: 95;
(32) a combination of SEQ ID NO: 96 and SEQ ID NO: 97;
(33) A combination of SEQ ID NO: 98 and SEQ ID NO: 99.

さらに、本発明は上記のアレルを検出、判別し、酵母菌株を識別し、酵母菌株を分類しまたは酵母を選別するのに用いるオリゴヌクレオチドまたはその標識物を包含する。オリゴヌクレオチドは、酵母の一塩基多型部位を含む塩基配列または該塩基配列に相補的な塩基配列からなるDNA断片からなる。該オリゴヌクレオチドは一塩基多型を検出するためのプローブとして利用できる。アレルの検出、判別に用いるオリゴヌクレオチドを構成する塩基の数は5〜50、好ましくは10〜30、さらに好ましくは15〜25である。アレルの判別は該プローブを用いたハイブリダイゼーションアッセイにより行うことができる。本発明のオリゴヌクレオチドは化学合成により作製することもできるし、上記プライマーを用いてPCRにより遺伝子を増幅させた増幅産物として作製することもできる。本発明のプローブは、検出のために蛍光物質、酵素、放射性同位体、化学発光物質等で標識されていてもよい。標識に用いる標識物質は、公知のものを用い、公知の方法で標識することができる。蛍光物質としては、例えば、Cy3、Cy5、ローダミン、フルオレセイン等が挙げられる。   Furthermore, the present invention includes an oligonucleotide or a label thereof used for detecting and discriminating the above alleles, identifying yeast strains, classifying yeast strains, or selecting yeasts. The oligonucleotide consists of a DNA fragment comprising a base sequence containing a single nucleotide polymorphic site of yeast or a base sequence complementary to the base sequence. The oligonucleotide can be used as a probe for detecting a single nucleotide polymorphism. The number of bases constituting the oligonucleotide used for detection and discrimination of alleles is 5 to 50, preferably 10 to 30, and more preferably 15 to 25. Allele discrimination can be performed by a hybridization assay using the probe. The oligonucleotide of the present invention can be prepared by chemical synthesis or can be prepared as an amplification product obtained by amplifying a gene by PCR using the above primers. The probe of the present invention may be labeled with a fluorescent substance, an enzyme, a radioisotope, a chemiluminescent substance or the like for detection. As a labeling substance used for labeling, a known substance can be used and labeled by a known method. Examples of the fluorescent substance include Cy3, Cy5, rhodamine, fluorescein and the like.

本発明のオリゴヌクレオチドとして例えば以下のオリゴヌクレオチドが挙げられる。
酵母ゲノムDNA上の一塩基多型部位を含むDNA断片からなるオリゴヌクレオチドまたはその標識物であって、一塩基多型部位が以下の(1)(ア)から(33)(ア)の148個の一塩基多型部位の少なくとも1つであって、配列番号1から33の塩基配列のうちの以下の(1)(ア)から(33)(ア)の一塩基多型部位のうちの少なくとも1つの多型部位を含む10から30塩基からなる部分配列またはその部分配列に相補的な配列からなるオリゴヌクレオチドまたはその標識物:
Examples of the oligonucleotide of the present invention include the following oligonucleotides.
An oligonucleotide consisting of a DNA fragment containing a single nucleotide polymorphic site on yeast genomic DNA or a label thereof, and 148 single nucleotide polymorphic sites from the following (1) (a) to (33) (a) At least one of the following single nucleotide polymorphism sites (1) (a) to (33) (a) of the nucleotide sequences of SEQ ID NOs: 1 to 33: An oligonucleotide consisting of a partial sequence consisting of 10 to 30 bases containing one polymorphic site or a sequence complementary to the partial sequence, or a label thereof:

(1)配列番号1の、(ア)から(キ):
(ア)塩基番号53の位置に存在する塩基C若しくはTである一塩基多型部位、
(イ)塩基番号140の位置に存在する塩基A若しくはGである一塩基多型部位、
(ウ)塩基番号170の位置に存在する塩基C若しくTはである一塩基多型部位、
(エ)塩基番号185の位置に存在する塩基A若しくはGである一塩基多型部位、
(オ)塩基番号225の位置に存在する塩基A若しくはGである一塩基多型部位、
(カ)塩基番号239の位置に存在する塩基G若しくはTである一塩基多型部位、及び
(キ)塩基番号298の位置に存在する塩基A若しくはGである一塩基多型部位;
(1) From SEQ ID NO: 1 (A) to (G):
(A) a single nucleotide polymorphic site which is base C or T present at the position of base number 53;
(A) a single nucleotide polymorphic site which is base A or G present at the position of base number 140;
(C) a single nucleotide polymorphic site where base C or T is at the position of base number 170,
(D) a single nucleotide polymorphic site which is base A or G present at the position of base number 185,
(E) a single nucleotide polymorphic site that is base A or G present at the position of base number 225;
(F) a single nucleotide polymorphic site that is base G or T present at the position of base number 239, and (g) a single nucleotide polymorphic site that is base A or G present at the position of base number 298;

(2)配列番号2の、(ア)から(オ):
(ア)塩基番号104の位置に存在する塩基C若しくはTである一塩基多型部位、
(イ)塩基番号149の位置に存在する塩基A若しくはGである一塩基多型部位、
(ウ)塩基番号304の位置に存在する塩基C若しくはTである一塩基多型部位、
(エ)塩基番号321の位置に存在する塩基C若しくはTである一塩基多型部位、及び
(オ)塩基番号322の位置に存在する塩基A若しくはGである一塩基多型部位;
(2) SEQ ID NO: 2, (A) to (E):
(A) a single nucleotide polymorphic site which is base C or T present at the position of base number 104;
(A) a single nucleotide polymorphic site which is base A or G present at the position of base number 149;
(C) a single nucleotide polymorphic site which is base C or T present at the position of base number 304,
(D) a single nucleotide polymorphism site that is base C or T present at the position of base number 321; and (e) a single nucleotide polymorphism site that is base A or G at the position of base number 322;

(3)配列番号3の、(ア)から(ウ):
(ア)塩基番号125の位置に存在する塩基C若しくはTである一塩基多型部位、
(イ)塩基番号145の位置に存在する塩基A若しくはGである一塩基多型部位、
(ウ)塩基番号351から354の位置に存在する3塩基の挿入若しくは非挿入である一塩基多型部位;
(3) (A) to (C) of SEQ ID NO: 3:
(A) a single nucleotide polymorphic site which is base C or T present at the position of base number 125;
(A) a single nucleotide polymorphic site which is base A or G present at the position of base number 145;
(C) a single nucleotide polymorphism site in which insertion or non-insertion of 3 bases exists at positions of base numbers 351 to 354;

(4)配列番号4の、(ア)から(コ):
(ア)塩基番号67の位置に存在する塩基C若しくはTである一塩基多型部位、
(イ)塩基番号74の位置に存在する塩基C若しくはTである一塩基多型部位、
(ウ)塩基番号104の位置に存在する塩基A若しくはGである一塩基多型部位、
(エ)塩基番号160の位置に存在する塩基C若しくはTである一塩基多型部位、
(オ)塩基番号268の位置に存在する塩基A若しくはCである一塩基多型部位、
(カ)塩基番号269の位置に存在する塩基C若しくはTである一塩基多型部位、
(キ)塩基番号324の位置に存在する塩基A若しくはGである一塩基多型部位、
(ク)塩基番号446の位置に存在する塩基C若しくはTである一塩基多型部位、
(ケ)塩基番号453の位置に存在する塩基G若しくはTである一塩基多型部位、及び
(コ)塩基番号466の位置に存在する塩基A若しくはGである一塩基多型部位;
(4) SEQ ID NO: 4, (A) to (C):
(A) a single nucleotide polymorphic site which is base C or T present at the position of base number 67;
(A) a single nucleotide polymorphic site which is base C or T present at the position of base number 74;
(C) a single nucleotide polymorphic site which is base A or G present at the position of base number 104;
(D) a single nucleotide polymorphic site which is base C or T present at the position of base number 160;
(E) a single nucleotide polymorphic site which is base A or C present at the position of base number 268,
(F) a single nucleotide polymorphic site which is base C or T present at the position of base number 269;
(G) a single nucleotide polymorphic site which is base A or G present at the position of base number 324;
(H) a single nucleotide polymorphic site which is base C or T present at the position of base number 446;
(G) a single nucleotide polymorphism site that is base G or T present at the position of base number 453, and (co) a single nucleotide polymorphism site that is base A or G present at the position of base number 466;

(5)配列番号5の、(ア)及び(イ):
(ア)塩基番号431の位置に存在する塩基A若しくはGである一塩基多型部位、及び
(イ)塩基番号464の位置に存在する塩基C若しくはTである一塩基多型部位;
(5) (A) and (I) of SEQ ID NO: 5:
(A) a single nucleotide polymorphic site that is base A or G present at the position of base number 431, and (a) a single nucleotide polymorphic site that is base C or T present at the position of base number 464;

(6)配列番号6の、(ア)から(シ):
(ア)塩基番号75の位置に存在する塩基A若しくはCである一塩基多型部位、
(イ)塩基番号185の位置に存在する塩基C若しくはTである一塩基多型部位、
(ウ)塩基番号216の位置に存在する塩基C若しくはTである一塩基多型部位、
(エ)塩基番号217の位置に存在する塩基A若しくはCである一塩基多型部位、
(オ)塩基番号253の位置に存在する塩基A若しくはCである一塩基多型部位、
(カ)塩基番号269の位置に存在する塩基C若しくはTである一塩基多型部位、
(キ)塩基番号318の位置に存在する塩基C若しくはTである一塩基多型部位、
(ク)塩基番号441の位置に存在する塩基A若しくはTである一塩基多型部位、
(ケ)塩基番号444の位置に存在する塩基A若しくはGである一塩基多型部位、
(コ)塩基番号445の位置に存在する塩基A若しくはTである一塩基多型部位、
(サ)塩基番号463の位置に存在する塩基C若しくはTである一塩基多型部位、及び
(シ)塩基番号493の位置に存在する塩基C若しくはTである一塩基多型部位;
(6) SEQ ID NO: 6, (A) to (S):
(A) a single nucleotide polymorphic site which is base A or C present at the position of base number 75;
(A) a single nucleotide polymorphic site which is base C or T present at the position of base number 185,
(C) a single nucleotide polymorphic site which is base C or T present at the position of base number 216,
(D) a single nucleotide polymorphic site which is base A or C present at the position of base number 217;
(E) a single nucleotide polymorphic site which is base A or C present at the position of base number 253,
(F) a single nucleotide polymorphic site which is base C or T present at the position of base number 269;
(G) a single nucleotide polymorphic site which is base C or T present at the position of base number 318,
(H) a single nucleotide polymorphic site that is base A or T present at the position of base number 441;
(G) a single nucleotide polymorphic site which is base A or G present at the position of base number 444;
(E) a single nucleotide polymorphic site which is base A or T present at the position of base number 445;
(Sa) a single nucleotide polymorphic site that is base C or T present at the position of base number 463, and (f) a single nucleotide polymorphic site that is base C or T present at the position of base number 493;

(7)配列番号7の、(ア)から(カ):
(ア)塩基番号213の位置に存在する塩基A若しくはGである一塩基多型部位、
(イ)塩基番号243の位置に存在する塩基A若しくはGである一塩基多型部位、
(ウ)塩基番号290の位置に存在する塩基C若しくはTである一塩基多型部位、
(エ)塩基番号348の位置に存在する塩基A若しくはTである一塩基多型部位、
(オ)塩基番号350の位置に存在する塩基A若しくはGである一塩基多型部位、及び
(カ)塩基番号378の位置に存在する塩基C若しくはTである一塩基多型部位;
(7) From SEQ ID NO: 7, (a) to (f):
(A) a single nucleotide polymorphic site that is base A or G present at the position of base number 213,
(A) a single nucleotide polymorphic site which is base A or G present at the position of base number 243;
(C) a single nucleotide polymorphic site which is base C or T present at the position of base number 290,
(D) a single nucleotide polymorphic site which is base A or T present at the position of base number 348;
(E) a single nucleotide polymorphic site which is base A or G present at the position of base number 350, and (f) a single nucleotide polymorphic site which is base C or T present at the position of base number 378;

(8)配列番号8の、(ア)から(オ):
(ア)塩基番号88の位置に存在する塩基A若しくはGである一塩基多型部位、
(イ)塩基番号152の位置に存在する塩基C若しくはTである一塩基多型部位、
(ウ)塩基番号161の位置に存在する塩基C若しくはTである一塩基多型部位、
(エ)塩基番号309の位置に存在する塩基A若しくはGである一塩基多型部位、及び
(オ)塩基番号381の位置に存在する塩基C若しくはTである一塩基多型部位;
(8) (A) to (E) of SEQ ID NO: 8:
(A) a single nucleotide polymorphic site which is base A or G present at the position of base number 88;
(A) a single nucleotide polymorphic site which is base C or T present at the position of base number 152;
(C) a single nucleotide polymorphic site which is base C or T present at the position of base number 161;
(D) a single nucleotide polymorphism site that is base A or G present at the position of base number 309, and (e) a single nucleotide polymorphism site that is base C or T at the position of base number 381;

(9)配列番号9の、(ア)から(ウ):
(ア)塩基番号66の位置に存在する塩基C若しくはTである一塩基多型部位、
(イ)塩基番号229の位置に存在する塩基C若しくはTである一塩基多型部位、及び
(ウ)塩基番号262の位置に存在する塩基A若しくはTである一塩基多型部位;
(9) From SEQ ID NO: 9, (a) to (c):
(A) a single nucleotide polymorphic site which is base C or T present at the position of base number 66;
(A) a single nucleotide polymorphic site which is the base C or T present at the position of the base number 229, and (c) a single nucleotide polymorphic site which is the base A or T present at the position of the base number 262;

(10)配列番号10の、(ア)から(ウ):
(ア)塩基番号163から170の位置に存在する1塩基Tの欠失若しくは非欠失である一塩基多型部位、
(イ)塩基番号309から317の位置に存在する1塩基Aの欠失若しくは非欠失である一塩基多型部位、及び
(ウ)塩基番号356の位置に存在する塩基A若しくはCである一塩基多型部位;
(10) (A) to (C) of SEQ ID NO: 10:
(A) a single nucleotide polymorphic site which is a deletion or non-deletion of 1 base T existing at positions of base numbers 163 to 170;
(A) a single nucleotide polymorphic site that is a deletion or non-deletion of one base A present at positions of base numbers 309 to 317, and (c) one of bases A or C present at the position of base number 356 Nucleotide polymorphism site;

(11)配列番号11の、(ア)から(キ):
(ア)塩基番号69の位置に存在する塩基A若しくはTである一塩基多型部位、
(イ)塩基番号93の位置に存在する塩基C若しくはTである一塩基多型部位、
(ウ)塩基番号111の位置に存在する塩基A若しくはGである一塩基多型部位、
(エ)塩基番号208の位置に存在する塩基C若しくはTである一塩基多型部位、
(オ)塩基番号210の位置に存在する塩基A若しくはGである一塩基多型部位、
(カ)塩基番号408の位置に存在する塩基C若しくはTである一塩基多型部位、及び
(キ)塩基番号429の位置に存在する塩基A若しくはGである一塩基多型部位;
(11) From SEQ ID NO: 11, (A) to (G):
(A) a single nucleotide polymorphic site which is base A or T present at the position of base number 69;
(A) a single nucleotide polymorphic site which is base C or T present at the position of base number 93;
(C) a single nucleotide polymorphic site which is base A or G present at the position of base number 111;
(D) a single nucleotide polymorphic site which is base C or T present at the position of base number 208;
(E) a single nucleotide polymorphic site which is base A or G present at the position of base number 210;
(F) a single nucleotide polymorphic site which is base C or T present at the position of base number 408, and (g) a single nucleotide polymorphic site which is base A or G present at the position of base number 429;

(12)配列番号12の、(ア)から(ウ):
(ア)塩基番号104の位置に存在する塩基A若しくはGである一塩基多型部位、
(イ)塩基番号151の位置に存在する塩基C若しくはGである一塩基多型部位、及び
(ウ)塩基番号343の位置に存在する塩基C若しくはTである一塩基多型部位;
(12) From SEQ ID NO: 12, (a) to (c):
(A) a single nucleotide polymorphic site which is base A or G present at the position of base number 104;
(A) a single nucleotide polymorphic site that is base C or G present at the position of base number 151, and (c) a single nucleotide polymorphic site that is base C or T present at the position of base number 343;

(13)配列番号13の、(ア)から(ウ):
(ア)塩基番号126の位置に存在する塩基A若しくはGである一塩基多型部位、
(イ)塩基番号201の位置に存在する塩基C若しくはGである一塩基多型部位、及び
(ウ)塩基番号264の位置に存在する塩基A若しくはGである一塩基多型部位;
(13) (A) to (C) of SEQ ID NO: 13:
(A) a single nucleotide polymorphic site which is base A or G present at the position of base number 126;
(A) a single nucleotide polymorphic site which is the base C or G present at the position of the base number 201, and (c) a single nucleotide polymorphic site which is the base A or G present at the position of the base number 264;

(14)配列番号14の、(ア)から(ウ):
(ア)塩基番号132の位置に存在する塩基A若しくはCである一塩基多型部位、
(イ)塩基番号185の位置に存在する塩基A若しくはCである一塩基多型部位、及び
(ウ)塩基番号189の位置に存在する塩基C若しくはTである一塩基多型部位;
(14) (A) to (C) of SEQ ID NO: 14:
(A) a single nucleotide polymorphic site which is base A or C present at the position of base number 132;
(A) a single nucleotide polymorphic site which is base A or C present at the position of base number 185, and (c) a single nucleotide polymorphic site which is base C or T present at the position of base number 189;

(15)配列番号15の、(ア)から(オ):
(ア)塩基番号101の位置に存在する塩基C若しくはTである一塩基多型部位、
(イ)塩基番号183の位置に存在する塩基C若しくはTである一塩基多型部位、
(ウ)塩基番号188から192の位置に存在する1塩基Aの挿入若しくは非挿入である一塩基多型部位、
(エ)塩基番号280の位置に存在する塩基C若しくはTである一塩基多型部位、及び
(オ)塩基番号338の位置に存在する塩基若GしくはTである一塩基多型部位;
(15) From SEQ ID NO: 15, (a) to (e):
(A) a single nucleotide polymorphic site which is base C or T present at the position of base number 101;
(A) a single nucleotide polymorphic site which is base C or T present at the position of base number 183,
(C) a single nucleotide polymorphism site in which insertion or non-insertion of 1 base A exists at positions of base numbers 188 to 192,
(D) a single nucleotide polymorphic site which is the base C or T present at the position of the base number 280, and (e) a single nucleotide polymorphic site which is the base G or T present at the position of the base number 338;

(16)配列番号16の、(ア)から(サ):
(ア)塩基番号134の位置に存在する塩基A若しくはTである一塩基多型部位、
(イ)塩基番号135の位置に存在する塩基A若しくはTである一塩基多型部位、
(ウ)塩基番号137の位置に存在する塩基C若しくはTである一塩基多型部位、
(エ)塩基番号138の位置に存在する塩基A若しくはTである一塩基多型部位、
(オ)塩基番号142の位置に存在する塩基A若しくはGである一塩基多型部位、
(カ)塩基番号165の位置に存在する塩基A若しくはGである一塩基多型部位、
(キ)塩基番号183の位置に存在する塩基C若しくはTである一塩基多型部位、
(ク)塩基番号219の位置に存在する塩基A若しくはCである一塩基多型部位、
(ケ)塩基番号232の位置に存在する塩基C若しくはGである一塩基多型部位、
(コ)塩基番号293の位置に存在する塩基A若しくはでGある一塩基多型部位、及び
(サ)塩基番号332の位置に存在する塩基C若しくはTである一塩基多型部位;
(16) (A) to (SA) of SEQ ID NO: 16:
(A) a single nucleotide polymorphic site which is base A or T present at the position of base number 134;
(A) a single nucleotide polymorphic site which is base A or T present at the position of base number 135;
(C) a single nucleotide polymorphic site which is base C or T present at the position of base number 137,
(D) a single nucleotide polymorphic site which is base A or T present at the position of base number 138;
(E) a single nucleotide polymorphic site which is base A or G present at the position of base number 142;
(F) a single nucleotide polymorphic site which is base A or G present at the position of base number 165,
(G) a single nucleotide polymorphic site which is base C or T present at the position of base number 183,
(H) a single nucleotide polymorphic site which is base A or C present at the position of base number 219;
(G) a single nucleotide polymorphic site which is base C or G present at the position of base number 232;
(Co) a single nucleotide polymorphic site which is base A or G present at the position of base number 293, and (sa) a single nucleotide polymorphic site which is base C or T present at the position of base number 332;

(17)配列番号17の、(ア)から(オ):
(ア)塩基番号65の位置に存在する塩基A若しくはTである一塩基多型部位、
(イ)塩基番号158の位置に存在する塩基A若しくはGである一塩基多型部位、
(ウ)塩基番号236の位置に存在する塩基G若しくはTである一塩基多型部位、
(エ)塩基番号256の位置に存在する塩基A若しくはGである一塩基多型部位、及び
(オ)塩基番号474の位置に存在する塩基C若しくはTである一塩基多型部位;
(17) From SEQ ID NO: 17, (a) to (e):
(A) a single nucleotide polymorphic site which is base A or T present at the position of base number 65;
(A) a single nucleotide polymorphic site which is base A or G present at the position of base number 158,
(C) a single nucleotide polymorphic site which is base G or T present at the position of base number 236,
(D) a single nucleotide polymorphic site which is base A or G present at the position of base number 256, and (e) a single nucleotide polymorphic site which is base C or T present at the position of base number 474;

(18)配列番号18の、(ア)及び(イ):
(ア)塩基番号96の位置に存在する塩基C若しくはTである一塩基多型部位、及び
(イ)塩基番号133の位置に存在する塩基C若しくはTである一塩基多型部位;
(18) (A) and (I) of SEQ ID NO: 18:
(A) a single nucleotide polymorphism site which is the base C or T present at the position of the base number 96, and (a) a single nucleotide polymorphism site which is the base C or T which is present at the position of the base number 133;

(19)配列番号19の、(ア)から(エ):
(ア)塩基番号261の位置に存在する塩基A若しくはGである一塩基多型部位、
(イ)塩基番号282の位置に存在する塩基C若しくはTである一塩基多型部位、
(ウ)塩基番号371の位置に存在する塩基C若しくはTである一塩基多型部位、及び
(エ)塩基番号440の位置に存在する塩基C若しくはTである一塩基多型部位;
(19) (A) to (D) of SEQ ID NO: 19:
(A) a single nucleotide polymorphic site which is base A or G present at the position of base number 261,
(A) a single nucleotide polymorphic site which is base C or T present at the position of base number 282;
(C) a single nucleotide polymorphic site that is base C or T present at the position of base number 371, and (d) a single nucleotide polymorphic site that is base C or T present at the position of base number 440;

(20)配列番号20の、(ア)及び(イ):
(ア)塩基番号247の位置に存在する塩基A若しくはGである一塩基多型部位、及び
(イ)塩基番号362の位置に存在する塩基C若しくはTである一塩基多型部位;
(20) (A) and (A) of SEQ ID NO: 20:
(A) a single nucleotide polymorphism site that is base A or G present at the position of base number 247, and (b) a single nucleotide polymorphism site that is base C or T present at the position of base number 362;

(21)配列番号21の、(ア)から(エ):
(ア)塩基番号82の位置に存在する塩基A若しくはGである一塩基多型部位、
(イ)塩基番号91の位置に存在する塩基A若しくはGである一塩基多型部位、
(ウ)塩基番号139の位置に存在する塩基G若しくはTである一塩基多型部位、及び
(エ)塩基番号140の位置に存在する塩基C若しくはTである一塩基多型部位;
(21) From SEQ ID NO: 21, (a) to (d):
(A) a single nucleotide polymorphic site which is base A or G present at the position of base number 82;
(A) a single nucleotide polymorphic site which is base A or G present at the position of base number 91;
(C) a single nucleotide polymorphic site which is the base G or T present at the position of the base number 139, and (d) a single nucleotide polymorphic site which is the base C or T present at the position of the base number 140;

(22)(ア)配列番号22の、塩基番号359から364の位置に存在する塩基Aの欠失若しくは非欠失である一塩基多型部位;
(23)配列番号23の、(ア)及び(イ):
(ア)塩基番号420の位置に存在する塩基A若しくはTである一塩基多型部位、及び
(イ)塩基番号485の位置に存在する塩基C若しくはGである一塩基多型部位;
(22) (a) a single nucleotide polymorphism site which is a deletion or non-deletion of base A present at positions of base numbers 359 to 364 of SEQ ID NO: 22;
(23) (A) and (I) of SEQ ID NO: 23:
(A) a single nucleotide polymorphic site which is the base A or T present at the position of the base number 420, and (a) a single nucleotide polymorphic site which is the base C or G present at the position of the base number 485;

(24)配列番号24の、(ア)から(コ):
(ア)塩基番号189の位置に存在する塩基C若しくはTである一塩基多型部位、
(イ)塩基番号209の位置に存在する塩基A若しくはGである一塩基多型部位、
(ウ)塩基番号218の位置に存在する塩基C若しくはTである一塩基多型部位、
(エ)塩基番号260の位置に存在する塩基C若しくはTである一塩基多型部位、
(オ)塩基番号283の位置に存在する塩基C若しくはTである一塩基多型部位、
(カ)塩基番号315の位置に存在する塩基C若しくはGである一塩基多型部位、
(キ)塩基番号379の位置に存在する塩基A若しくはGである一塩基多型部位、
(ク)塩基番号385の位置に存在する塩基C若しくはTである一塩基多型部位、
(ケ)塩基番号551の位置に存在する塩基A若しくはCである一塩基多型部位、及び
(コ)塩基番号597の位置に存在する塩基C若しくはTである一塩基多型部位;
(24) (A) to (C) of SEQ ID NO: 24:
(A) a single nucleotide polymorphic site which is base C or T present at the position of base number 189;
(A) a single nucleotide polymorphic site which is base A or G present at the position of base number 209,
(C) a single nucleotide polymorphic site which is base C or T present at the position of base number 218,
(D) a single nucleotide polymorphic site which is base C or T present at the position of base number 260;
(E) a single nucleotide polymorphic site which is base C or T present at the position of base number 283,
(F) a single nucleotide polymorphic site which is base C or G present at the position of base number 315,
(G) a single nucleotide polymorphic site which is base A or G present at the position of base number 379;
(H) a single nucleotide polymorphic site which is base C or T present at the position of base number 385,
(G) a single nucleotide polymorphic site which is base A or C present at the position of base number 551, and (co) a single nucleotide polymorphic site which is base C or T present at the position of base number 597;

(25)配列番号25の、(ア)から(キ):
(ア)塩基番号62の位置に存在する塩基C若しくはTである一塩基多型部位、
(イ)塩基番号96の位置に存在する塩基A若しくはGである一塩基多型部位、
(ウ)塩基番号171の位置に存在する塩基A若しくはGである一塩基多型部位、
(エ)塩基番号176の位置に存在する塩基C若しくはTである一塩基多型部位、
(オ)塩基番号222の位置に存在する塩基C若しくはTである一塩基多型部位、
(カ)塩基番号228の位置に存在する塩基C若しくはTである一塩基多型部位、及び
(キ)塩基番号273の位置に存在する塩基A若しくはGである一塩基多型部位;
(25) (A) to (G) of SEQ ID NO: 25:
(A) a single nucleotide polymorphic site which is base C or T present at the position of base number 62;
(A) a single nucleotide polymorphic site which is base A or G present at the position of base number 96;
(C) a single nucleotide polymorphic site which is base A or G present at the position of base number 171;
(D) a single nucleotide polymorphic site which is base C or T present at the position of base number 176,
(E) a single nucleotide polymorphic site which is base C or T present at the position of base number 222;
(F) a single nucleotide polymorphic site which is base C or T present at the position of base number 228, and (g) a single nucleotide polymorphic site which is base A or G present at the position of base number 273;

(26)配列番号26の、(ア)から(キ):
(ア)塩基番号57の位置に存在する塩基A若しくはGである一塩基多型部位、
(イ)塩基番号149の位置に存在する塩基A若しくはGである一塩基多型部位、
(ウ)塩基番号221の位置に存在する塩基A若しくはTである一塩基多型部位、
(エ)塩基番号303の位置に存在する塩基A若しくはGである一塩基多型部位、
(オ)塩基番号350の位置に存在する塩基A若しくはTである一塩基多型部位、
(カ)塩基番号400の位置に存在する塩基A若しくはTである一塩基多型部位、及び
(キ)塩基番号434の位置に存在する塩基A若しくはGである一塩基多型部位;
(26) From SEQ ID NO: 26, (a) to (g):
(A) a single nucleotide polymorphic site which is base A or G present at the position of base number 57;
(A) a single nucleotide polymorphic site which is base A or G present at the position of base number 149;
(C) a single nucleotide polymorphic site which is base A or T present at the position of base number 221;
(D) a single nucleotide polymorphic site which is base A or G present at the position of base number 303;
(E) a single nucleotide polymorphic site which is base A or T present at the position of base number 350;
(F) a single nucleotide polymorphic site which is base A or T present at the position of base number 400, and (g) a single nucleotide polymorphic site which is base A or G present at the position of base number 434;

(27)配列番号27の、(ア)から(オ):
(ア)塩基番号80の位置に存在する塩基A若しくはGである一塩基多型部位、
(イ)塩基番号116から122の位置に存在する塩基Aの欠失若しくは非欠失である一塩基多型部位、
(ウ)塩基番号204の位置に存在する塩基A若しくはGである一塩基多型部位、
(エ)塩基番号249の位置に存在する塩基C若しくはTである一塩基多型部位、及び
(オ)塩基番号389の位置に存在する塩基G若しくはTである一塩基多型部位;
(27) (A) to (E) of SEQ ID NO: 27:
(A) a single nucleotide polymorphic site which is base A or G present at the position of base number 80;
(A) a single nucleotide polymorphism site which is a deletion or non-deletion of base A existing at positions from base numbers 116 to 122;
(C) a single nucleotide polymorphic site which is base A or G present at the position of base number 204;
(D) a single nucleotide polymorphism site that is base C or T present at the position of base number 249, and (e) a single nucleotide polymorphism site that is base G or T at the position of base number 389;

(28)配列番号28の、(ア)から(オ):
(ア)塩基番号83の位置に存在する塩基A若しくはCである一塩基多型部位、
(イ)塩基番号169の位置に存在する塩基C若しくはGである一塩基多型部位、
(ウ)塩基番号193の位置に存在する塩基C若しくはTである一塩基多型部位、
(エ)塩基番号215の位置に存在する塩基A若しくはCである一塩基多型部位、及び
(オ)塩基番号232の位置に存在する塩基A若しくはGである一塩基多型部位;
(28) From SEQ ID NO: 28, (a) to (e):
(A) a single nucleotide polymorphic site which is base A or C present at the position of base number 83;
(A) a single nucleotide polymorphic site which is base C or G present at the position of base number 169,
(C) a single nucleotide polymorphic site which is base C or T present at the position of base number 193,
(D) a single nucleotide polymorphic site which is base A or C present at the position of base number 215, and (e) a single nucleotide polymorphic site which is base A or G present at the position of base number 232;

(29)(ア)配列番号29の、塩基番号309の位置に存在する塩基A若しくはGである一塩基多型部位;
(30)(ア)配列番号30の、塩基番号216の位置に存在する塩基C若しくはTである一塩基多型部位;
(31)(ア)配列番号31の、塩基番号162の位置に存在する塩基C若しくはTである一塩基多型部位;
(32)配列番号32の、(ア)及び(イ):
(ア)塩基番号34の位置に存在する塩基C若しくはTである一塩基多型部位、及び
(イ)塩基番号336の位置に存在する塩基A若しくはGである一塩基多型部位;
(33)(ア)配列番号33の、塩基番号361の位置に存在する塩基A若しくはGである一塩基多型部位。
(29) (a) a single nucleotide polymorphic site which is base A or G present at the position of base number 309 in SEQ ID NO: 29;
(30) (a) a single nucleotide polymorphic site which is base C or T present at the position of base number 216 of SEQ ID NO: 30;
(31) (a) a single nucleotide polymorphic site which is base C or T present at the position of base number 162 of SEQ ID NO: 31;
(32) (A) and (I) of SEQ ID NO: 32:
(A) a single nucleotide polymorphic site that is base C or T present at the position of base number 34, and (a) a single nucleotide polymorphic site that is base A or G present at the position of base number 336;
(33) (a) A single nucleotide polymorphic site which is base A or G present at the position of base number 361 in SEQ ID NO: 33.

上記のオリゴヌクレオチドまたはその標識物は、上記一塩基多型部位の複数を含んでいてもよい。この場合、該オリゴヌクレオチドまたはその標識物は配列番号1から33の塩基配列の部分配列であって、その配列に含まれる複数の一塩基多型部位を含む配列である。   The oligonucleotide or the labeled product thereof may contain a plurality of the single nucleotide polymorphism sites. In this case, the oligonucleotide or label thereof is a partial sequence of the nucleotide sequence of SEQ ID NOs: 1 to 33, and a sequence containing a plurality of single nucleotide polymorphism sites contained in the sequence.

さらに、本発明は上記オリゴヌクレオチドを固定化した固定化基板を含む。オリゴヌクレオチドを固定化する基板としては、スライドガラス、ニトロセルロース膜、マイクロビーズ等種々のものを用いることができる。固定化基板上に複数のオリゴヌクレオチドを整列固定化した場合、該固定化基板は、DNAマイクロアレイまたはDNAチップとして用いることができる。また、オリゴヌクレオチドは基板上で合成してもよいし、また合成したオリゴヌクレオチドを基板上に固定化してもよい。基板上への固定化は、例えば市販のスポッターやアレイヤーを用いて行うことができ、オリゴヌクレオチドの固定化は吸着や共有結合を介した結合により行うことができ、共有結合を介した結合により固定化する場合は、基板表面およびオリゴヌクレオチドに共有結合用のアミノ基、SH基等の官能基を導入すればよい。   Furthermore, the present invention includes an immobilized substrate on which the oligonucleotide is immobilized. Various substrates such as a slide glass, a nitrocellulose membrane, and microbeads can be used as the substrate on which the oligonucleotide is immobilized. When a plurality of oligonucleotides are aligned and immobilized on an immobilized substrate, the immobilized substrate can be used as a DNA microarray or a DNA chip. Further, the oligonucleotide may be synthesized on a substrate, or the synthesized oligonucleotide may be immobilized on the substrate. Immobilization on a substrate can be performed using, for example, a commercially available spotter or arrayer, and oligonucleotides can be immobilized by adsorption or binding via covalent bond, and by covalent bond binding. For immobilization, functional groups such as amino groups and SH groups for covalent bonding may be introduced into the substrate surface and the oligonucleotide.

オリゴヌクレオチドを固定化した固定化基板を用いるアレルの検出は公知の方法で行うことができる。   Allele detection using an immobilized substrate on which an oligonucleotide is immobilized can be performed by a known method.

本発明を以下の実施例によって具体的に説明するが、本発明はこれらの実施例によって限定されるものではない。   The present invention will be specifically described by the following examples, but the present invention is not limited to these examples.

プライマーの設計
プライマーの設計は以下に述べるように行なった。
まず、下面発酵酵母KBY011株より、大嶋らの記載した方法(蛋白質核酸酵素、1990、Vol.35、No.14、p2523〜p2541)に従ってゲノムDNAを抽出し、制限酵素Sau3AI(ロシュ・ダイアグノスティクス)で部分的に分解し、Molecular Cloning 第3版(SambrookとRussell著、Cold Spring Harbor Laboratory Press)の2.80〜2.83に記された方法に従ってショ糖密度勾配遠心分離を行ない、約1000塩基対の大きさのDNA断片を回収した。回収されたDNAは、制限酵素BamHIで完全分解し、脱リン酸化処理を行なったpUC118(タカラバイオ)のBamHI部位に、DNA Ligation Kit Ver2.1(タカラバイオ)を用いて連結した。得られた反応生成物で、大腸菌Competent High DH5α(東洋紡績)の形質転換を、添付されたプロトコールに従って行なった。得られた形質転換体について、定法に従って培養後、マルチスクリーン−FBプレート(ミリポア)を用いてプラスミドの回収を行ない、BigDye Terminator v3.1 Cycle Sequencing Kit(アプライドバイオシステムズ)を用い、GeneAmp PCRシステム9700(アプライドバイオシステムズ)を用いてDNAシーケンシング反応を行なった。その際のプライマーには、M13 Primer M1及びM13 Primer RV(ともにタカラバイオ)を用いた。シーケンシング反応は、キットのプロトコールに従った。得られた反応性生物は、Sephadex G−50 Superfine(アマシャム)を充填したマルチスクリーン−HVプレート(ミリポア)を用いて未反応蛍光色素を除去し、ABI PRISM 3700 DNA Analyzer(アプライドバイオシステムズ)を用いて、DNA塩基配列決定を行なった。このようにして、約6000個の形質転換体のDNA塩基配列を得た。得られたDNA塩基配列の結果は、既知のサッカロマイセス・セレビシエの配列との相同性比較を行ない、染色体上の遺伝子座の位置確認を行なった。
Primer design Primers were designed as described below.
First, genomic DNA was extracted from the bottom fermented yeast KBY011 strain according to the method described by Oshima et al. (Protein Nucleic Acid Enzyme, 1990, Vol. 35, No. 14, p2523-p2541), and the restriction enzyme Sau3AI (Roche Diagnostics) Sucrose density gradient centrifugation according to the method described in 2.80-2.83 of Molecular Cloning 3rd Edition (Sambrook and Russell, Cold Spring Harbor Laboratory Press), about 1000 A DNA fragment having a base pair size was recovered. The recovered DNA was completely digested with the restriction enzyme BamHI and ligated to the BamHI site of pUC118 (Takara Bio) that had been dephosphorylated using DNA Ligation Kit Ver2.1 (Takara Bio). The resulting reaction product was used to transform Escherichia coli Competent High DH5α (Toyobo) according to the attached protocol. The obtained transformant was cultured according to a conventional method, and then the plasmid was collected using a multiscreen-FB plate (Millipore). Using BigDye Terminator v3.1 Cycle Sequencing Kit (Applied Biosystems), GeneAmp PCR system 9700 DNA sequencing reaction was performed using (Applied Biosystems). M13 Primer M1 and M13 Primer RV (both Takara Bio) were used as primers. The sequencing reaction followed the kit protocol. Unreacted fluorescent dye was removed using a multiscreen-HV plate (Millipore) packed with Sephadex G-50 Superfine (Amersham), and the resulting reactive organism was used using ABI PRISM 3700 DNA Analyzer (Applied Biosystems). DNA base sequencing was performed. Thus, the DNA base sequence of about 6000 transformants was obtained. The result of the obtained DNA base sequence was compared with a known Saccharomyces cerevisiae sequence to confirm the position of the locus on the chromosome.

得られた塩基配列から、染色体地図上の適当な間隔ごとに、異質倍数体である下面発酵酵母のゲノムを構成する2種のサブゲノム、すなわち、Sc型ゲノム及びLg型ゲノムからそれぞれ114ヶ所及び123ヶ所、全ゲノムから合計で237ヶ所の染色体上の位置(以降、遺伝子座)を設定し、それぞれの遺伝子座について、約500塩基対の、主として非コード領域が増幅されるようなプライマー設計を行なった。   From the obtained base sequence, at appropriate intervals on the chromosome map, 114 sites and 123 from the two subgenomes constituting the genome of the bottom-fermenting yeast that is an allopolyploid, namely, Sc type genome and Lg type genome, respectively. A total of 237 chromosomal positions (hereinafter referred to as gene loci) from the entire genome and the entire genome are set, and primer design is performed so that a non-coding region of about 500 base pairs is amplified for each gene locus. It was.

また、Sc型ゲノムに関してはサッカロマイセス・セレビシエの配列とほぼ一致していることから、既知のサッカロマイセス・セレビシエの配列から、染色体地図上の適当な間隔ごとに65ヶ所の遺伝子座を設定し、それぞれの遺伝子座について、約500塩基対のSc型ゲノムの、主として非コード領域が増幅されるようなプライマー設計を行なった。このようにして、全部でSc型ゲノムから179ヶ所、Lg型ゲノムから123ヶ所、合計で302ヶ所の遺伝子座について、主として非コード領域を増幅するためのプライマー設計を行なった。プライマーとなるオリゴヌクレオチドは、シグマアルドリッチジャパンに、合成を依頼して入手した。   Since the Sc-type genome is almost identical to the Saccharomyces cerevisiae sequence, 65 loci are set at appropriate intervals on the chromosome map from the known Saccharomyces cerevisiae sequence. Primers were designed for the locus to amplify mainly the non-coding region of the approximately 500 base pair Sc-type genome. In this way, primer design was performed mainly for amplifying non-coding regions at a total of 302 loci, 179 from the Sc-type genome and 123 from the Lg-type genome. Oligonucleotides used as primers were obtained by requesting synthesis from Sigma-Aldrich Japan.

SNPが存在する遺伝子座の探索
SNPが存在する遺伝子座の探索は、以下に述べるとおりに実施した。
#2、#5、#8、#11、#15、#19、#27、#28の8株の下面発酵酵母から、大嶋らの記載した方法(蛋白質核酸酵素、1990、Vol.35、No.14、p2523〜p2541)に従ってゲノムDNAを抽出した。得られたゲノムDNAは、10ng/μlの濃度に調整した。得られたゲノムDNAを鋳型として、上述の302組み合わせのプライマー対、及び、Ex−Taq(タカラバイオ)を用いて、GeneAmp PCRシステム9700(アプライドバイオシステムズ)によって遺伝子増幅を行なった。反応は、各プライマーの濃度2μM、鋳型DNAの濃度3ng/μl、1チューブあたり10μlのスケールで行なった。PCR条件は、94℃5分間の後、94℃30秒間、58℃30秒間、72℃30秒間を45サイクル繰り返し、最後に72℃7分間保温した。反応を終えた試料に、30μlの滅菌水を加えて希釈し、その一部を取り出し、1%アガロースゲルを用いた電気泳動によって、反応の確認を行なった。
Search for the locus where the SNP exists The search for the locus where the SNP exists was performed as described below.
From the bottom fermentation yeast of 8 strains of # 2, # 5, # 8, # 11, # 15, # 19, # 27, and # 28, the method described by Oshima et al. (Protein Nucleic Acid Enzyme, 1990, Vol. 35, No. 14. p2523 to p2541), genomic DNA was extracted. The obtained genomic DNA was adjusted to a concentration of 10 ng / μl. Gene amplification was performed by GeneAmp PCR system 9700 (Applied Biosystems) using the obtained genomic DNA as a template and the above-described 302 primer pairs and Ex-Taq (Takara Bio). The reaction was performed on a scale of 2 μM for each primer, 3 ng / μl for template DNA, and 10 μl per tube. PCR conditions were 94 ° C. for 5 minutes, followed by 45 cycles of 94 ° C. for 30 seconds, 58 ° C. for 30 seconds, and 72 ° C. for 30 seconds, and finally kept at 72 ° C. for 7 minutes. The sample after the reaction was diluted by adding 30 μl of sterilized water, a part thereof was taken out, and the reaction was confirmed by electrophoresis using a 1% agarose gel.

上述のPCR生成物を鋳型として、BigDye Terminator v3.1 Cycle Sequencing Kit(アプライドバイオシステムズ)を用い、GeneAmp PCRシステム9700(アプライドバイオシステムズ)を用いてDNAシーケンシング反応を行なった。プライマーは、鋳型を得るためのPCRで用いたプライマーのいずれか片方を、2.44μMの濃度で用いた。シーケンシング反応は、キットのプロトコールに従った。反応を終えた試料は、Sephadex G−50 Superfine(アマシャム)を充填したマルチスクリーン−HVプレート(ミリポア)を用いて未反応の蛍光色素を除去し、ABI PRISM 3700 DNA Analyzer(アプライドバイオシステムズ)を用いて、DNA塩基配列決定を行なった。各遺伝子座について、8株の酵母のDNAより得た塩基配列データを、ATGC Ver.4(ゼネティックス)によって、コンピューター上でアセンブルし、SNPの有無を確認した。その際、得られたDNA塩基配列の波形データにも注目し、ホモ接合とヘテロ接合の区別を行なった(図1)。   DNA sequencing reaction was performed using GeneDamp PCR system 9700 (Applied Biosystems) using BigDye Terminator v3.1 Cycle Sequencing Kit (Applied Biosystems) with the above PCR product as a template. As a primer, one of the primers used in PCR for obtaining a template was used at a concentration of 2.44 μM. The sequencing reaction followed the kit protocol. After the reaction, the unreacted fluorescent dye was removed using a multiscreen-HV plate (Millipore) packed with Sephadex G-50 Superfine (Amersham), and ABI PRISM 3700 DNA Analyzer (Applied Biosystems) was used. DNA base sequencing was performed. For each locus, nucleotide sequence data obtained from DNA of 8 strains of yeast was obtained from ATGC Ver. 4 (Genetics) was assembled on a computer to confirm the presence of SNPs. At that time, attention was also paid to the waveform data of the obtained DNA base sequence, and homozygous and heterozygous were distinguished (FIG. 1).

このようにして8株の下面発酵酵母の302ヶ所の遺伝子座のDNA塩基配列を比較することによって、33ヶ所の、いずれかの酵母でSNPの見られる遺伝子座を選定した。33ヶ所の遺伝子座の領域をPCRで増幅するために必要なプライマーの組み合わせ、及びそのプライマーの組み合わせで得られる代表的な配列を、以下の1から33に示す:
1.プライマー組み合わせ:配列番号34及び35、増幅される配列:配列番号1;
2.プライマー組み合わせ:配列番号36及び37、増幅される配列:配列番号2;
3.プライマー組み合わせ:配列番号38及び39、増幅される配列:配列番号3;
4.プライマー組み合わせ:配列番号40及び41、増幅される配列:配列番号4;
5.プライマー組み合わせ:配列番号42及び43、増幅される配列:配列番号5;
6.プライマー組み合わせ:配列番号44及び45、増幅される配列:配列番号6;
7.プライマー組み合わせ:配列番号47及び48、増幅される配列:配列番号7;
8.プライマー組み合わせ:配列番号48及び49、増幅される配列:配列番号8;
9.プライマー組み合わせ:配列番号50及び51、増幅される配列:配列番号9;
10.プライマー組み合わせ:配列番号52及び53、増幅される配列:配列番号10;
11.プライマー組み合わせ:配列番号54及び55、増幅される配列:配列番号11;
12.プライマー組み合わせ:配列番号56及び57、増幅される配列:配列番号12;
13.プライマー組み合わせ:配列番号58及び59、増幅される配列:配列番号13;
14.プライマー組み合わせ:配列番号60及び61、増幅される配列:配列番号14;
15.プライマー組み合わせ:配列番号62及び63、増幅される配列:配列番号15;
16.プライマー組み合わせ:配列番号64及び65、増幅される配列:配列番号16;
17.プライマー組み合わせ:配列番号66及び67、増幅される配列:配列番号17;
18.プライマー組み合わせ:配列番号68及び69、増幅される配列:配列番号18;
19.プライマー組み合わせ:配列番号70及び71、増幅される配列:配列番号19;
20.プライマー組み合わせ:配列番号72及び73、増幅される配列:配列番号20;
21.プライマー組み合わせ:配列番号74及び75、増幅される配列:配列番号21;
22.プライマー組み合わせ:配列番号76及び77、増幅される配列:配列番号22;
23.プライマー組み合わせ:配列番号78及び79、増幅される配列:配列番号23;
24.プライマー組み合わせ:配列番号80及び81、増幅される配列:配列番号24;
25.プライマー組み合わせ:配列番号82及び83、増幅される配列:配列番号25;
26.プライマー組み合わせ:配列番号84及び85、増幅される配列:配列番号26;
27.プライマー組み合わせ:配列番号86及び87、増幅される配列:配列番号27;
28.プライマー組み合わせ:配列番号88及び89、増幅される配列:配列番号28;
29.プライマー組み合わせ:配列番号90及び91、増幅される配列:配列番号29;
30.プライマー組み合わせ:配列番号92及び93、増幅される配列:配列番号30;
31.プライマー組み合わせ:配列番号94及び95、増幅される配列:配列番号31;
32.プライマー組み合わせ:配列番号96及び97、増幅される配列:配列番号32;
33.プライマー組み合わせ:配列番号98及び99、増幅される配列:配列番号33;
Thus, by comparing the DNA base sequences of 302 loci of 8 strains of bottom fermenting yeast, 33 loci where SNPs were found in any yeast were selected. The primer combinations necessary for amplifying the region of 33 loci by PCR and the typical sequences obtained by the primer combinations are shown in the following 1 to 33:
1. Primer combination: SEQ ID NO: 34 and 35, amplified sequence: SEQ ID NO: 1;
2. Primer combination: SEQ ID NO: 36 and 37, amplified sequence: SEQ ID NO: 2;
3. Primer combination: SEQ ID NO: 38 and 39, amplified sequence: SEQ ID NO: 3;
4). Primer combination: SEQ ID NO: 40 and 41, amplified sequence: SEQ ID NO: 4;
5. Primer combination: SEQ ID NOs: 42 and 43, amplified sequence: SEQ ID NO: 5;
6). Primer combination: SEQ ID NO: 44 and 45, amplified sequence: SEQ ID NO: 6;
7). Primer combination: SEQ ID NO: 47 and 48, amplified sequence: SEQ ID NO: 7;
8). Primer combination: SEQ ID NO: 48 and 49, amplified sequence: SEQ ID NO: 8;
9. Primer combination: SEQ ID NO: 50 and 51, amplified sequence: SEQ ID NO: 9;
10. Primer combination: SEQ ID NO: 52 and 53, amplified sequence: SEQ ID NO: 10;
11. Primer combination: SEQ ID NO: 54 and 55, amplified sequence: SEQ ID NO: 11;
12 Primer combination: SEQ ID NO: 56 and 57, amplified sequence: SEQ ID NO: 12;
13. Primer combination: SEQ ID NO: 58 and 59, amplified sequence: SEQ ID NO: 13;
14 Primer combination: SEQ ID NO: 60 and 61, amplified sequence: SEQ ID NO: 14;
15. Primer combination: SEQ ID NO: 62 and 63, amplified sequence: SEQ ID NO: 15;
16. Primer combination: SEQ ID NOs: 64 and 65, amplified sequence: SEQ ID NO: 16;
17. Primer combination: SEQ ID NO: 66 and 67, amplified sequence: SEQ ID NO: 17;
18. Primer combination: SEQ ID NO: 68 and 69, amplified sequence: SEQ ID NO: 18;
19. Primer combination: SEQ ID NO: 70 and 71, amplified sequence: SEQ ID NO: 19;
20. Primer combination: SEQ ID NO: 72 and 73, amplified sequence: SEQ ID NO: 20;
21. Primer combination: SEQ ID NO: 74 and 75, amplified sequence: SEQ ID NO: 21;
22. Primer combination: SEQ ID NO: 76 and 77, amplified sequence: SEQ ID NO: 22;
23. Primer combination: SEQ ID NO: 78 and 79, amplified sequence: SEQ ID NO: 23;
24. Primer combination: SEQ ID NO: 80 and 81, Amplified sequence: SEQ ID NO: 24;
25. Primer combination: SEQ ID NO: 82 and 83, amplified sequence: SEQ ID NO: 25;
26. Primer combination: SEQ ID NO: 84 and 85, amplified sequence: SEQ ID NO: 26;
27. Primer combination: SEQ ID NO: 86 and 87, amplified sequence: SEQ ID NO: 27;
28. Primer combination: SEQ ID NO: 88 and 89, amplified sequence: SEQ ID NO: 28;
29. Primer combination: SEQ ID NO: 90 and 91, amplified sequence: SEQ ID NO: 29;
30. Primer combination: SEQ ID NO: 92 and 93, amplified sequence: SEQ ID NO: 30;
31. Primer combination: SEQ ID NO: 94 and 95, amplified sequence: SEQ ID NO: 31;
32. Primer combination: SEQ ID NO: 96 and 97, amplified sequence: SEQ ID NO: 32;
33. Primer combination: SEQ ID NO: 98 and 99, amplified sequence: SEQ ID NO: 33;

酵母菌株のSNPの解析とアレルタイプによる菌株の識別
選定された33ヶ所のSNPの見られた遺伝子座に関して、上記の方法と同様にして、表1に示す53株の下面発酵酵母及び、上面発酵酵母のDNA塩基配列を決定した。各遺伝子座について、53株の酵母のDNAより得た塩基配列データを、ATGC Ver.4(ゼネティックス)によって、コンピューター上でアセンブルし、波形データを用いてホモ接合とヘテロ接合を区別しつつ、SNPの有無を調査した。その結果、表2〜表34に示すとおりのアレルタイプを得ることができた。
Analysis of SNPs of yeast strains and identification of strains by allele type For the loci where 33 selected SNPs were found, 53 bottom fermented yeasts and top side fermented yeasts shown in Table 1 were used in the same manner as described above. The DNA base sequence of yeast was determined. For each gene locus, nucleotide sequence data obtained from the DNA of 53 strains of yeast was obtained from ATGC Ver. 4 (Genetics) was assembled on a computer, and the presence or absence of SNP was investigated while distinguishing homozygous and heterozygous using waveform data. As a result, allele types as shown in Tables 2 to 34 could be obtained.

Figure 2006333827
Figure 2006333827

Figure 2006333827
配列番号1における多型の位置と、各菌株のアレルパターン
Figure 2006333827
Position of polymorphism in SEQ ID NO: 1 and allele pattern of each strain

Figure 2006333827
配列番号2における多型の位置と、各菌株のアレルパターン
Figure 2006333827
Position of polymorphism in SEQ ID NO: 2 and allele pattern of each strain

Figure 2006333827
配列番号3における多型の位置と、各菌株のアレルパターン
Figure 2006333827
Position of polymorphism in SEQ ID NO: 3 and allele pattern of each strain

Figure 2006333827
配列番号4における多型の位置と、各菌株のアレルパターン
Figure 2006333827
Position of polymorphism in SEQ ID NO: 4 and allele pattern of each strain

Figure 2006333827
配列番号5における多型の位置と、各菌株のアレルパターン
Figure 2006333827
Position of polymorphism in SEQ ID NO: 5 and allele pattern of each strain

Figure 2006333827
配列番号6における多型の位置と、各菌株のアレルパターン
Figure 2006333827
Position of polymorphism in SEQ ID NO: 6 and allele pattern of each strain

Figure 2006333827
配列番号7における多型の位置と、各菌株のアレルパターン
Figure 2006333827
Position of polymorphism in SEQ ID NO: 7 and allele pattern of each strain

Figure 2006333827
配列番号8における多型の位置と、各菌株のアレルパターン
Figure 2006333827
Position of polymorphism in SEQ ID NO: 8 and allele pattern of each strain

Figure 2006333827
配列番号9における多型の位置と、各菌株のアレルパターン
Figure 2006333827
Position of polymorphism in SEQ ID NO: 9 and allele pattern of each strain

Figure 2006333827
配列番号10における多型の位置と、各菌株のアレルパターン
Figure 2006333827
Position of polymorphism in SEQ ID NO: 10 and allele pattern of each strain

Figure 2006333827
配列番号11における多型の位置と、各菌株のアレルパターン
Figure 2006333827
Position of polymorphism in SEQ ID NO: 11 and allele pattern of each strain

Figure 2006333827
配列番号12における多型の位置と、各菌株のアレルパターン
Figure 2006333827
Position of polymorphism in SEQ ID NO: 12 and allele pattern of each strain

Figure 2006333827
配列番号13における多型の位置と、各菌株のアレルパターン
Figure 2006333827
Position of polymorphism in SEQ ID NO: 13 and allele pattern of each strain

Figure 2006333827
配列番号14における多型の位置と、各菌株のアレルパターン
Figure 2006333827
Position of polymorphism in SEQ ID NO: 14 and allele pattern of each strain

Figure 2006333827
配列番号15における多型の位置と、各菌株のアレルパターン
Figure 2006333827
Position of polymorphism in SEQ ID NO: 15 and allele pattern of each strain

Figure 2006333827
配列番号16における多型の位置と、各菌株のアレルパターン
Figure 2006333827
Position of polymorphism in SEQ ID NO: 16 and allele pattern of each strain

Figure 2006333827
配列番号17における多型の位置と、各菌株のアレルパターン
Figure 2006333827
Position of polymorphism in SEQ ID NO: 17 and allele pattern of each strain

Figure 2006333827
配列番号18における多型の位置と、各菌株のアレルパターン
Figure 2006333827
Position of polymorphism in SEQ ID NO: 18 and allele pattern of each strain

Figure 2006333827
配列番号19における多型の位置と、各菌株のアレルパターン
Figure 2006333827
Position of polymorphism in SEQ ID NO: 19 and allele pattern of each strain

Figure 2006333827
配列番号20における多型の位置と、各菌株のアレルパターン
Figure 2006333827
Position of polymorphism in SEQ ID NO: 20 and allele pattern of each strain

Figure 2006333827
配列番号21における多型の位置と、各菌株のアレルパターン
Figure 2006333827
Position of polymorphism in SEQ ID NO: 21 and allele pattern of each strain

Figure 2006333827
配列番号22における多型の位置と、各菌株のアレルパターン
Figure 2006333827
Position of polymorphism in SEQ ID NO: 22 and allele pattern of each strain

Figure 2006333827
配列番号23における多型の位置と、各菌株のアレルパターン
Figure 2006333827
Position of polymorphism in SEQ ID NO: 23 and allele pattern of each strain

Figure 2006333827
配列番号24における多型の位置と、各菌株のアレルパターン
Figure 2006333827
Position of polymorphism in SEQ ID NO: 24 and allele pattern of each strain

Figure 2006333827
配列番号25における多型の位置と、各菌株のアレルパターン
Figure 2006333827
Position of polymorphism in SEQ ID NO: 25 and allele pattern of each strain

Figure 2006333827
配列番号26における多型の位置と、各菌株のアレルパターン
Figure 2006333827
Position of polymorphism in SEQ ID NO: 26 and allele pattern of each strain

Figure 2006333827
配列番号27における多型の位置と、各菌株のアレルパターン
Figure 2006333827
Position of polymorphism in SEQ ID NO: 27 and allele pattern of each strain

Figure 2006333827
配列番号28における多型の位置と、各菌株のアレルパターン
Figure 2006333827
Position of polymorphism in SEQ ID NO: 28 and allele pattern of each strain

Figure 2006333827
配列番号29における多型の位置と、各菌株のアレルパターン
Figure 2006333827
Position of polymorphism in SEQ ID NO: 29 and allele pattern of each strain

Figure 2006333827
配列番号30における多型の位置と、各菌株のアレルパターン
Figure 2006333827
Position of polymorphism in SEQ ID NO: 30 and allele pattern of each strain

Figure 2006333827
配列番号31における多型の位置と、各菌株のアレルパターン
Figure 2006333827
Position of polymorphism in SEQ ID NO: 31 and allele pattern of each strain

Figure 2006333827
配列番号32における多型の位置と、各菌株のアレルパターン
Figure 2006333827
Position of polymorphism in SEQ ID NO: 32 and allele pattern of each strain

Figure 2006333827
配列番号33における多型の位置と、各菌株のアレルパターン
Figure 2006333827
Position of polymorphism in SEQ ID NO: 33 and allele pattern of each strain

これらのアレルタイプの違いを組み合わせることによって、53株の酵母をほぼ識別することが可能であった。これらのアレルタイプの違いの組み合わせで識別ができなかったのは、以下の3組の下面発酵酵母であった:
1.#05株と#27株;
2.#08株と#18株;
3.#21株と#25株;
これらの3組は、同一の株である可能性も否定できない。
By combining these allele type differences, it was possible to almost distinguish 53 strains of yeast. It was the following three sets of bottom fermenting yeast that could not be distinguished by the combination of differences in these allele types:
1. # 05 and # 27 shares;
2. # 08 and # 18 shares;
3. # 21 and # 25 shares;
The possibility that these three sets are the same stock cannot be denied.

アレルタイプの利用による酵母菌株の分類
表1に示した53株の下面発酵酵母及び上面発酵酵母に関して、表3、表7、表14〜表25、表29、表32〜表34に示す18領域の各多型のデータを用いてクラスター解析を行なった。多型データは、ホモ接合を−1及び1、ヘテロ接合を0と置き換えた。クラスター解析は、統計解析ソフトウエアSTATISTICAを用い、UPGMA法を選択して、取扱説明書に沿って解析を実施した。下面発酵酵母及び上面発酵酵母のデータを合わせて解析を行なった結果を、図2に示す。太字で示された下面発酵酵母と細字で示された上面発酵酵母は、それぞれ別のクラスターに分類された。
Classification of yeast strains by utilization of allele types With regard to the 53 bottom fermented yeasts and top fermented yeasts shown in Table 1, 18 regions shown in Table 3, Table 7, Table 14 to Table 25, Table 29, Table 32 to Table 34 Cluster analysis was performed using the data of each polymorphism. The polymorphism data replaced homozygotes with -1 and 1 and heterozygotes with 0. For the cluster analysis, statistical analysis software STATISTICA was used, the UPGMA method was selected, and the analysis was performed according to the instruction manual. FIG. 2 shows the result of analyzing the data of the bottom fermentation yeast and the top fermentation yeast. The bottom fermenting yeast indicated in bold and the top fermenting yeast indicated in fine are classified into different clusters.

下面発酵酵母菌株のみのデータに対してクラスター解析を行なった結果を図3に示す。
下面発酵酵母のみのデータを用いた場合でも、下面発酵酵母の菌種内での類縁関係を樹状図に示すことができた。
FIG. 3 shows the result of cluster analysis performed on the data of only the bottom fermenting yeast strain.
Even when only the data for the bottom fermenting yeast was used, the affinity within the bacterial species of the bottom fermenting yeast could be shown in the dendrogram.

亜硫酸、硫化水素、エステル、高級アルコール生成能と関係のあるアレルタイプの発見
表1に示す酵母菌株のうち、#03株、#04株、#05株、#06株、#07株、#08株、#10株、#12株、#14株、#15株、#16株、#17株、#18株、#19株、#20株、#21株、#22株、#23株、#24株、#25株、#26株、#27株、#30株、#31株を選び、発酵試験を行なった。発酵試験は、培地としては一般的なビール醸造用培地を用い、液量500ml、液深100cmのガラス試験管を用いて、静置培養によって行なった。1週間の培養後、培養液の各種成分を測定した。成分の測定は、亜硫酸は滴定法によって、また硫化水素、エステル及び高級アルコールはガスクロマトグラフィーによって、それぞれ実施した。供試した酵母の、発酵中の各種成分の生成能と、表2〜表34に示す33領域の各多型データの関係を調べた。その結果、表18に示す配列番号17に含まれるアレルの多型のうち、Type1に含まれる株、すなわち、配列番号17の、塩基番号65の位置に存在する塩基がA/Gのヘテロ接合であり、塩基番号158の位置に存在する塩基がA/Gのヘテロ接合であり、塩基番号236の位置に存在する塩基がG/Tのヘテロ接合であり、塩基番号256の位置に存在する塩基がA/Gのヘテロ接合であり、塩基番号474の位置に存在する塩基がC/Tのヘテロ接合である酵母に関しては、配列番号1及び配列番号2に含まれるアレルの多型と、発酵中に生成する各種成分の値に、関係が存在することが見出された。供試菌株の中で、配列番号17に含まれるアレルの多型タイプがType1である株は、以下のとおりである:#04株、#05株、#08株、#14株、#16株、#17株、#18株、#21株、#25株、#27株、#30株、#31株。これらの株に関して、配列番号1及び配列番号2に含まれるアレルの多型と、発酵中に生成する各種成分の値の関係を調べると、表2に示す配列番号1に含まれるアレルの多型のうち、Type1に含まれる株、すなわち、配列番号1の、塩基番号53の位置に存在する塩基がCであり、塩基番号170の位置に存在する塩基がCであり、塩基番号185の位置に存在する塩基がAであり、塩基番号239の位置に存在する塩基がGであり、塩基番号298の位置に存在する塩基がAである酵母菌株は、Type4に含まれる株、すなわち、配列番号1の、塩基番号53の位置に存在する塩基がC/Tのヘテロ接合であり、塩基番号170の位置に存在する塩基がC/Tのヘテロ接合であり、塩基番号185の位置に存在する塩基がA/Gのヘテロ接合であり、塩基番号239の位置に存在する塩基がG/Tのヘテロ接合であり、塩基番号298の位置に存在する塩基がA/Gのヘテロ接合であり酵母菌株よりも、亜硫酸、硫化水素、エステル及び高級アルコールの生成能が、すべて高いことが見出された。これらの結果を、図4及び図5に示す。同様に、表3に示す配列番号2に含まれるアレルの多型のうち、Type1に含まれる株はType5に含まれる株よりも、亜硫酸、硫化水素、エステル及び高級アルコールの生成能が、すべて高いことが見出された。これらの結果から、亜硫酸、硫化水素、エステル及び高級アルコールの生成能が高い株を選抜するためには、表18に示す配列番号17に含まれるアレルの多型のうち、Type1に含まれる株を選抜し、さらにその中から表2に示す配列番号1に含まれるアレルの多型のうち、Type1に含まれる株、及び、表3に示す配列番号2に含まれるアレルの多型のうち、Type1に含まれる株の、少なくともいずれか1つを選抜すればよいことが示された。また、亜硫酸、硫化水素、エステル及び高級アルコールの生成能が低い株を選抜するためには、表18に示す配列番号17に含まれるアレルの多型のうち、Type1に含まれる株を選抜し、さらにその中から表2に示す配列番号1に含まれるアレルの多型のうち、Type4に含まれる株、及び、表3に示す配列番号2に含まれるアレルの多型のうち、Type5に含まれる株の、少なくともいずれか1つを選抜すればよいことが示された。
Discovery of allele types related to sulfurous acid, hydrogen sulfide, ester, higher alcohol production ability Among the yeast strains shown in Table 1, # 03, # 04, # 05, # 06, # 07, # 08 # 10, # 12, # 14, # 15, # 16, # 17, # 18, # 19, # 20, # 21, # 22, # 23, A fermentation test was conducted by selecting # 24 strain, # 25 strain, # 26 strain, # 27 strain, # 30 strain, and # 31 strain. The fermentation test was carried out by static culture using a general beer brewing medium as a medium and a glass test tube having a liquid volume of 500 ml and a liquid depth of 100 cm. After culturing for 1 week, various components of the culture solution were measured. The components were measured by titration for sulfurous acid and gas chromatography for hydrogen sulfide, ester and higher alcohol. The relationship between the ability to produce various components during fermentation of the tested yeast and each polymorphism data in the 33 regions shown in Tables 2 to 34 was examined. As a result, among the allele polymorphisms included in SEQ ID NO: 17 shown in Table 18, the strain included in Type 1, that is, the base present at the position of base number 65 in SEQ ID NO: 17 is an A / G heterozygote. The base present at the position of base number 158 is an A / G heterojunction, the base present at the position of base number 236 is a heterojunction of G / T, and the base present at the position of base number 256 is For yeast that is A / G heterozygous and the base at position 474 is C / T heterozygous, allele polymorphisms contained in SEQ ID NO: 1 and SEQ ID NO: 2 and during fermentation It has been found that there is a relationship between the values of the various components produced. Among the test strains, strains whose polymorphic type of the allele included in SEQ ID NO: 17 is Type 1 are as follows: # 04 strain, # 05 strain, # 08 strain, # 14 strain, # 16 strain # 17, # 18, # 21, # 25, # 27, # 30, # 31. Regarding these strains, when the relationship between the allele polymorphisms contained in SEQ ID NO: 1 and SEQ ID NO: 2 and the values of various components generated during fermentation was examined, the allele polymorphisms contained in SEQ ID NO: 1 shown in Table 2 Among them, the strain included in Type 1, that is, the base present at the position of base number 53 of SEQ ID NO: 1 is C, the base present at the position of base number 170 is C, and the base is located at the position of base number 185. The yeast strain in which the base present is A, the base present at the position of base number 239 is G, and the base present at the position of base number 298 is A is a strain included in Type 4, ie, SEQ ID NO: 1 The base present at the position of base number 53 is a C / T heterojunction, the base present at the position of base number 170 is a C / T heterojunction, and the base present at the position of base number 185 is A / G It is a telozygous, the base present at the position of base number 239 is a G / T heterojunction, the base present at the position of base number 298 is an A / G heterozygote and is more sulfite, sulfide than yeast strains It was found that the ability to produce hydrogen, esters and higher alcohols was all high. These results are shown in FIGS. Similarly, among allele polymorphisms contained in SEQ ID NO: 2 shown in Table 3, the strains contained in Type 1 are all more capable of producing sulfite, hydrogen sulfide, esters and higher alcohols than the strains contained in Type 5. It was found. From these results, in order to select a strain having a high ability to produce sulfurous acid, hydrogen sulfide, ester, and higher alcohol, among allele polymorphisms included in SEQ ID NO: 17 shown in Table 18, strains included in Type 1 were selected. Among them, among the allele polymorphisms contained in SEQ ID NO: 1 shown in Table 2, among them, the strain contained in Type 1, and among allele polymorphisms contained in SEQ ID NO: 2 shown in Table 3, Type 1 It was shown that at least any one of the strains contained in the above should be selected. In addition, in order to select a strain having low ability to produce sulfurous acid, hydrogen sulfide, ester and higher alcohol, a strain included in Type 1 is selected from polymorphs of alleles included in SEQ ID NO: 17 shown in Table 18. Among them, among the allele polymorphisms included in SEQ ID NO: 1 shown in Table 2, among strains included in Type 4, and among allele polymorphisms included in SEQ ID NO: 2 shown in Table 3, are included in Type 5 It was shown that at least one of the strains should be selected.

酵母株のDNA塩基配列波形データを示す図である。It is a figure which shows the DNA base sequence waveform data of a yeast strain | stump | stock. 下面醗酵酵母および上面醗酵酵母のクラスター解析の結果を示す図である。It is a figure which shows the result of the cluster analysis of a bottom fermentation yeast and a top fermentation yeast. 下面醗酵酵母のクラスター解析の結果を示す図である。It is a figure which shows the result of the cluster analysis of bottom fermentation yeast. Type1およびType2のアレルタイプの酵母菌株の亜硫酸および硫化水素の生成量を示す図である。It is a figure which shows the production amount of sulfurous acid and hydrogen sulfide of the yeast strains of Type 1 and Type 2 allele types. Type1およびType2のアレルタイプの酵母菌株の酢酸イソアミルおよびn-プロパノールの生成量を示す図である。It is a figure which shows the production amount of isoamyl acetate and n-propanol of the yeast strains of Type 1 and Type 2 allele types.

配列番号34から99:プライマー SEQ ID NOs: 34 to 99: primers

Claims (31)

酵母ゲノムDNA上の一塩基多型部位を含むDNA断片の増幅に用いる少なくとも一対のプライマーセットであって、一塩基多型部位が以下の(1)(ア)から(33)(ア)の148個の一塩基多型部位の少なくとも1つであって、プライマーが配列番号1から33の塩基配列のうちの以下の(1)(ア)から(33)(ア)の一塩基多型部位のうちの少なくとも1つの多型部位の3’側および5’側に存在する10から30塩基からなる部分配列からなる、DNA断片の増幅に用い得る一対のプライマーセット:
(1)配列番号1の、(ア)から(キ):
(ア)塩基番号53の位置に存在する塩基C若しくはTである一塩基多型部位、
(イ)塩基番号140の位置に存在する塩基A若しくはGである一塩基多型部位、
(ウ)塩基番号170の位置に存在する塩基C若しくTはである一塩基多型部位、
(エ)塩基番号185の位置に存在する塩基A若しくはGである一塩基多型部位、
(オ)塩基番号225の位置に存在する塩基A若しくはGである一塩基多型部位、
(カ)塩基番号239の位置に存在する塩基G若しくはTである一塩基多型部位、及び
(キ)塩基番号298の位置に存在する塩基A若しくはGである一塩基多型部位;
(2)配列番号2の、(ア)から(オ):
(ア)塩基番号104の位置に存在する塩基C若しくはTである一塩基多型部位、
(イ)塩基番号149の位置に存在する塩基A若しくはGである一塩基多型部位、
(ウ)塩基番号304の位置に存在する塩基C若しくはTである一塩基多型部位、
(エ)塩基番号321の位置に存在する塩基C若しくはTである一塩基多型部位、及び
(オ)塩基番号322の位置に存在する塩基A若しくはGである一塩基多型部位;
(3)配列番号3の、(ア)から(ウ):
(ア)塩基番号125の位置に存在する塩基C若しくはTである一塩基多型部位、
(イ)塩基番号145の位置に存在する塩基A若しくはGである一塩基多型部位、
(ウ)塩基番号351から354の位置に存在する3塩基の挿入若しくは非挿入である一塩基多型部位;
(4)配列番号4の、(ア)から(コ):
(ア)塩基番号67の位置に存在する塩基C若しくはTである一塩基多型部位、
(イ)塩基番号74の位置に存在する塩基C若しくはTである一塩基多型部位、
(ウ)塩基番号104の位置に存在する塩基A若しくはGである一塩基多型部位、
(エ)塩基番号160の位置に存在する塩基C若しくはTである一塩基多型部位、
(オ)塩基番号268の位置に存在する塩基A若しくはCである一塩基多型部位、
(カ)塩基番号269の位置に存在する塩基C若しくはTである一塩基多型部位、
(キ)塩基番号324の位置に存在する塩基A若しくはGである一塩基多型部位、
(ク)塩基番号446の位置に存在する塩基C若しくはTである一塩基多型部位、
(ケ)塩基番号453の位置に存在する塩基G若しくはTである一塩基多型部位、及び
(コ)塩基番号466の位置に存在する塩基A若しくはGである一塩基多型部位;
(5)配列番号5の、(ア)及び(イ):
(ア)塩基番号431の位置に存在する塩基A若しくはGである一塩基多型部位、及び
(イ)塩基番号464の位置に存在する塩基C若しくはTである一塩基多型部位;
(6)配列番号6の、(ア)から(シ):
(ア)塩基番号75の位置に存在する塩基A若しくはCである一塩基多型部位、
(イ)塩基番号185の位置に存在する塩基C若しくはTである一塩基多型部位、
(ウ)塩基番号216の位置に存在する塩基C若しくはTである一塩基多型部位、
(エ)塩基番号217の位置に存在する塩基A若しくはCである一塩基多型部位、
(オ)塩基番号253の位置に存在する塩基A若しくはCである一塩基多型部位、
(カ)塩基番号269の位置に存在する塩基C若しくはTである一塩基多型部位、
(キ)塩基番号318の位置に存在する塩基C若しくはTである一塩基多型部位、
(ク)塩基番号441の位置に存在する塩基A若しくはTである一塩基多型部位、
(ケ)塩基番号444の位置に存在する塩基A若しくはGである一塩基多型部位、
(コ)塩基番号445の位置に存在する塩基A若しくはTである一塩基多型部位、
(サ)塩基番号463の位置に存在する塩基C若しくはTである一塩基多型部位、及び
(シ)塩基番号493の位置に存在する塩基C若しくはTである一塩基多型部位;
(7)配列番号7の、(ア)から(カ):
(ア)塩基番号213の位置に存在する塩基A若しくはGである一塩基多型部位、
(イ)塩基番号243の位置に存在する塩基A若しくはGである一塩基多型部位、
(ウ)塩基番号290の位置に存在する塩基C若しくはTである一塩基多型部位、
(エ)塩基番号348の位置に存在する塩基A若しくはTである一塩基多型部位、
(オ)塩基番号350の位置に存在する塩基A若しくはGである一塩基多型部位、及び
(カ)塩基番号378の位置に存在する塩基C若しくはTである一塩基多型部位;
(8)配列番号8の、(ア)から(オ):
(ア)塩基番号88の位置に存在する塩基A若しくはGである一塩基多型部位、
(イ)塩基番号152の位置に存在する塩基C若しくはTである一塩基多型部位、
(ウ)塩基番号161の位置に存在する塩基C若しくはTである一塩基多型部位、
(エ)塩基番号309の位置に存在する塩基A若しくはGである一塩基多型部位、及び
(オ)塩基番号381の位置に存在する塩基C若しくはTである一塩基多型部位;
(9)配列番号9の、(ア)から(ウ):
(ア)塩基番号66の位置に存在する塩基C若しくはTである一塩基多型部位、
(イ)塩基番号229の位置に存在する塩基C若しくはTである一塩基多型部位、及び
(ウ)塩基番号262の位置に存在する塩基A若しくはTである一塩基多型部位;
(10)配列番号10の、(ア)から(ウ):
(ア)塩基番号163から170の位置に存在する1塩基Tの欠失若しくは非欠失である一塩基多型部位、
(イ)塩基番号309から317の位置に存在する1塩基Aの欠失若しくは非欠失である一塩基多型部位、及び
(ウ)塩基番号356の位置に存在する塩基A若しくはCである一塩基多型部位;
(11)配列番号11の、(ア)から(キ):
(ア)塩基番号69の位置に存在する塩基A若しくはTである一塩基多型部位、
(イ)塩基番号93の位置に存在する塩基C若しくはTである一塩基多型部位、
(ウ)塩基番号111の位置に存在する塩基A若しくはGである一塩基多型部位、
(エ)塩基番号208の位置に存在する塩基C若しくはTである一塩基多型部位、
(オ)塩基番号210の位置に存在する塩基A若しくはGである一塩基多型部位、
(カ)塩基番号408の位置に存在する塩基C若しくはTである一塩基多型部位、及び
(キ)塩基番号429の位置に存在する塩基A若しくはGである一塩基多型部位;
(12)配列番号12の、(ア)から(ウ):
(ア)塩基番号104の位置に存在する塩基A若しくはGである一塩基多型部位、
(イ)塩基番号151の位置に存在する塩基C若しくはGである一塩基多型部位、及び
(ウ)塩基番号343の位置に存在する塩基C若しくはTである一塩基多型部位;
(13)配列番号13の、(ア)から(ウ):
(ア)塩基番号126の位置に存在する塩基A若しくはGである一塩基多型部位、
(イ)塩基番号201の位置に存在する塩基C若しくはGである一塩基多型部位、及び
(ウ)塩基番号264の位置に存在する塩基A若しくはGである一塩基多型部位;
(14)配列番号14の、(ア)から(ウ):
(ア)塩基番号132の位置に存在する塩基A若しくはCである一塩基多型部位、
(イ)塩基番号185の位置に存在する塩基A若しくはCである一塩基多型部位、及び
(ウ)塩基番号189の位置に存在する塩基C若しくはTである一塩基多型部位;
(15)配列番号15の、(ア)から(オ):
(ア)塩基番号101の位置に存在する塩基C若しくはTである一塩基多型部位、
(イ)塩基番号183の位置に存在する塩基C若しくはTである一塩基多型部位、
(ウ)塩基番号188から192の位置に存在する1塩基Aの挿入若しくは非挿入である一塩基多型部位、
(エ)塩基番号280の位置に存在する塩基C若しくはTである一塩基多型部位、及び
(オ)塩基番号338の位置に存在する塩基若GしくはTである一塩基多型部位;
(16)配列番号16の、(ア)から(サ):
(ア)塩基番号134の位置に存在する塩基A若しくはTである一塩基多型部位、
(イ)塩基番号135の位置に存在する塩基A若しくはTである一塩基多型部位、
(ウ)塩基番号137の位置に存在する塩基C若しくはTである一塩基多型部位、
(エ)塩基番号138の位置に存在する塩基A若しくはTである一塩基多型部位、
(オ)塩基番号142の位置に存在する塩基A若しくはGである一塩基多型部位、
(カ)塩基番号165の位置に存在する塩基A若しくはGである一塩基多型部位、
(キ)塩基番号183の位置に存在する塩基C若しくはTである一塩基多型部位、
(ク)塩基番号219の位置に存在する塩基A若しくはCである一塩基多型部位、
(ケ)塩基番号232の位置に存在する塩基C若しくはGである一塩基多型部位、
(コ)塩基番号293の位置に存在する塩基A若しくはでGある一塩基多型部位、及び
(サ)塩基番号332の位置に存在する塩基C若しくはTである一塩基多型部位;
(17)配列番号17の、(ア)から(オ):
(ア)塩基番号65の位置に存在する塩基A若しくはTである一塩基多型部位、
(イ)塩基番号158の位置に存在する塩基A若しくはGである一塩基多型部位、
(ウ)塩基番号236の位置に存在する塩基G若しくはTである一塩基多型部位、
(エ)塩基番号256の位置に存在する塩基A若しくはGである一塩基多型部位、及び
(オ)塩基番号474の位置に存在する塩基C若しくはTである一塩基多型部位;
(18)配列番号18の、(ア)及び(イ):
(ア)塩基番号96の位置に存在する塩基C若しくはTである一塩基多型部位、及び
(イ)塩基番号133の位置に存在する塩基C若しくはTである一塩基多型部位;
(19)配列番号19の、(ア)から(エ):
(ア)塩基番号261の位置に存在する塩基A若しくはGである一塩基多型部位、
(イ)塩基番号282の位置に存在する塩基C若しくはTである一塩基多型部位、
(ウ)塩基番号371の位置に存在する塩基C若しくはTである一塩基多型部位、及び
(エ)塩基番号440の位置に存在する塩基C若しくはTである一塩基多型部位;
(20)配列番号20の、(ア)及び(イ):
(ア)塩基番号247の位置に存在する塩基A若しくはGである一塩基多型部位、及び
(イ)塩基番号362の位置に存在する塩基C若しくはTである一塩基多型部位;
(21)配列番号21の、(ア)から(エ):
(ア)塩基番号82の位置に存在する塩基A若しくはGである一塩基多型部位、
(イ)塩基番号91の位置に存在する塩基A若しくはGである一塩基多型部位、
(ウ)塩基番号139の位置に存在する塩基G若しくはTである一塩基多型部位、及び
(エ)塩基番号140の位置に存在する塩基C若しくはTである一塩基多型部位;
(22)(ア)配列番号22の、塩基番号359から364の位置に存在する塩基Aの欠失若しくは非欠失である一塩基多型部位;
(23)配列番号23の、(ア)及び(イ):
(ア)塩基番号420の位置に存在する塩基A若しくはTである一塩基多型部位、及び
(イ)塩基番号485の位置に存在する塩基C若しくはGである一塩基多型部位;
(24)配列番号24の、(ア)から(コ):
(ア)塩基番号189の位置に存在する塩基C若しくはTである一塩基多型部位、
(イ)塩基番号209の位置に存在する塩基A若しくはGである一塩基多型部位、
(ウ)塩基番号218の位置に存在する塩基C若しくはTである一塩基多型部位、
(エ)塩基番号260の位置に存在する塩基C若しくはTである一塩基多型部位、
(オ)塩基番号283の位置に存在する塩基C若しくはTである一塩基多型部位、
(カ)塩基番号315の位置に存在する塩基C若しくはGである一塩基多型部位、
(キ)塩基番号379の位置に存在する塩基A若しくはGである一塩基多型部位、
(ク)塩基番号385の位置に存在する塩基C若しくはTである一塩基多型部位、
(ケ)塩基番号551の位置に存在する塩基A若しくはCである一塩基多型部位、及び
(コ)塩基番号597の位置に存在する塩基C若しくはTである一塩基多型部位;
(25)配列番号25の、(ア)から(キ):
(ア)塩基番号62の位置に存在する塩基C若しくはTである一塩基多型部位、
(イ)塩基番号96の位置に存在する塩基A若しくはGである一塩基多型部位、
(ウ)塩基番号171の位置に存在する塩基A若しくはGである一塩基多型部位、
(エ)塩基番号176の位置に存在する塩基C若しくはTである一塩基多型部位、
(オ)塩基番号222の位置に存在する塩基C若しくはTである一塩基多型部位、
(カ)塩基番号228の位置に存在する塩基C若しくはTである一塩基多型部位、及び
(キ)塩基番号273の位置に存在する塩基A若しくはGである一塩基多型部位;
(26)配列番号26の、(ア)から(キ):
(ア)塩基番号57の位置に存在する塩基A若しくはGである一塩基多型部位、
(イ)塩基番号149の位置に存在する塩基A若しくはGである一塩基多型部位、
(ウ)塩基番号221の位置に存在する塩基A若しくはTである一塩基多型部位、
(エ)塩基番号303の位置に存在する塩基A若しくはGである一塩基多型部位、
(オ)塩基番号350の位置に存在する塩基A若しくはTである一塩基多型部位、
(カ)塩基番号400の位置に存在する塩基A若しくはTである一塩基多型部位、及び
(キ)塩基番号434の位置に存在する塩基A若しくはGである一塩基多型部位;
(27)配列番号27の、(ア)から(オ):
(ア)塩基番号80の位置に存在する塩基A若しくはGである一塩基多型部位、
(イ)塩基番号116から122の位置に存在する塩基Aの欠失若しくは非欠失である一塩基多型部位、
(ウ)塩基番号204の位置に存在する塩基A若しくはGである一塩基多型部位、
(エ)塩基番号249の位置に存在する塩基C若しくはTである一塩基多型部位、及び
(オ)塩基番号389の位置に存在する塩基G若しくはTである一塩基多型部位;
(28)配列番号28の、(ア)から(オ):
(ア)塩基番号83の位置に存在する塩基A若しくはCである一塩基多型部位、
(イ)塩基番号169の位置に存在する塩基C若しくはGである一塩基多型部位、
(ウ)塩基番号193の位置に存在する塩基C若しくはTである一塩基多型部位、
(エ)塩基番号215の位置に存在する塩基A若しくはCである一塩基多型部位、及び
(オ)塩基番号232の位置に存在する塩基A若しくはGである一塩基多型部位;
(29)(ア)配列番号29の、塩基番号309の位置に存在する塩基A若しくはGである一塩基多型部位;
(30)(ア)配列番号30の、塩基番号216の位置に存在する塩基C若しくはTである一塩基多型部位;
(31)(ア)配列番号31の、塩基番号162の位置に存在する塩基C若しくはTである一塩基多型部位;
(32)配列番号32の、(ア)及び(イ):
(ア)塩基番号34の位置に存在する塩基C若しくはTである一塩基多型部位、及び
(イ)塩基番号336の位置に存在する塩基A若しくはGである一塩基多型部位;
(33)(ア)配列番号33の、塩基番号361の位置に存在する塩基A若しくはGである一塩基多型部位。
It is at least a pair of primer sets used for amplification of a DNA fragment containing a single nucleotide polymorphic site on yeast genomic DNA, wherein the single nucleotide polymorphic site is 148 of (1) (a) to (33) (a) below. At least one of the single nucleotide polymorphic sites, wherein the primer is a single nucleotide polymorphic site of the following (1) (a) to (33) (a) of the nucleotide sequences of SEQ ID NOs: 1 to 33 A pair of primer sets that can be used to amplify a DNA fragment, consisting of a partial sequence consisting of 10 to 30 bases present on the 3 ′ side and 5 ′ side of at least one polymorphic site among them:
(1) From SEQ ID NO: 1 (A) to (G):
(A) a single nucleotide polymorphic site which is base C or T present at the position of base number 53;
(A) a single nucleotide polymorphic site which is base A or G present at the position of base number 140;
(C) a single nucleotide polymorphic site where base C or T is at the position of base number 170,
(D) a single nucleotide polymorphic site which is base A or G present at the position of base number 185,
(E) a single nucleotide polymorphic site that is base A or G present at the position of base number 225;
(F) a single nucleotide polymorphic site that is base G or T present at the position of base number 239, and (g) a single nucleotide polymorphic site that is base A or G present at the position of base number 298;
(2) SEQ ID NO: 2, (A) to (E):
(A) a single nucleotide polymorphic site which is base C or T present at the position of base number 104;
(A) a single nucleotide polymorphic site which is base A or G present at the position of base number 149;
(C) a single nucleotide polymorphic site which is base C or T present at the position of base number 304,
(D) a single nucleotide polymorphism site that is base C or T present at the position of base number 321; and (e) a single nucleotide polymorphism site that is base A or G at the position of base number 322;
(3) (A) to (C) of SEQ ID NO: 3:
(A) a single nucleotide polymorphic site which is base C or T present at the position of base number 125;
(A) a single nucleotide polymorphic site which is base A or G present at the position of base number 145;
(C) a single nucleotide polymorphism site in which insertion or non-insertion of 3 bases exists at positions of base numbers 351 to 354;
(4) SEQ ID NO: 4, (A) to (C):
(A) a single nucleotide polymorphic site which is base C or T present at the position of base number 67;
(A) a single nucleotide polymorphic site which is base C or T present at the position of base number 74;
(C) a single nucleotide polymorphic site which is base A or G present at the position of base number 104;
(D) a single nucleotide polymorphic site which is base C or T present at the position of base number 160;
(E) a single nucleotide polymorphic site which is base A or C present at the position of base number 268,
(F) a single nucleotide polymorphic site which is base C or T present at the position of base number 269;
(G) a single nucleotide polymorphic site which is base A or G present at the position of base number 324;
(H) a single nucleotide polymorphic site which is base C or T present at the position of base number 446;
(G) a single nucleotide polymorphism site that is base G or T present at the position of base number 453, and (co) a single nucleotide polymorphism site that is base A or G present at the position of base number 466;
(5) (A) and (I) of SEQ ID NO: 5:
(A) a single nucleotide polymorphic site that is base A or G present at the position of base number 431, and (a) a single nucleotide polymorphic site that is base C or T present at the position of base number 464;
(6) SEQ ID NO: 6, (A) to (S):
(A) a single nucleotide polymorphic site which is base A or C present at the position of base number 75;
(A) a single nucleotide polymorphic site which is base C or T present at the position of base number 185,
(C) a single nucleotide polymorphic site which is base C or T present at the position of base number 216,
(D) a single nucleotide polymorphic site which is base A or C present at the position of base number 217;
(E) a single nucleotide polymorphic site which is base A or C present at the position of base number 253,
(F) a single nucleotide polymorphic site which is base C or T present at the position of base number 269;
(G) a single nucleotide polymorphic site which is base C or T present at the position of base number 318,
(H) a single nucleotide polymorphic site that is base A or T present at the position of base number 441;
(G) a single nucleotide polymorphic site which is base A or G present at the position of base number 444;
(E) a single nucleotide polymorphic site which is base A or T present at the position of base number 445;
(Sa) a single nucleotide polymorphic site that is base C or T present at the position of base number 463, and (f) a single nucleotide polymorphic site that is base C or T present at the position of base number 493;
(7) From SEQ ID NO: 7, (a) to (f):
(A) a single nucleotide polymorphic site that is base A or G present at the position of base number 213,
(A) a single nucleotide polymorphic site which is base A or G present at the position of base number 243;
(C) a single nucleotide polymorphic site which is base C or T present at the position of base number 290,
(D) a single nucleotide polymorphic site which is base A or T present at the position of base number 348;
(E) a single nucleotide polymorphic site which is base A or G present at the position of base number 350, and (f) a single nucleotide polymorphic site which is base C or T present at the position of base number 378;
(8) (A) to (E) of SEQ ID NO: 8:
(A) a single nucleotide polymorphic site which is base A or G present at the position of base number 88;
(A) a single nucleotide polymorphic site which is base C or T present at the position of base number 152;
(C) a single nucleotide polymorphic site which is base C or T present at the position of base number 161;
(D) a single nucleotide polymorphism site that is base A or G present at the position of base number 309, and (e) a single nucleotide polymorphism site that is base C or T at the position of base number 381;
(9) From SEQ ID NO: 9, (a) to (c):
(A) a single nucleotide polymorphic site which is base C or T present at the position of base number 66;
(A) a single nucleotide polymorphic site which is the base C or T present at the position of the base number 229, and (c) a single nucleotide polymorphic site which is the base A or T present at the position of the base number 262;
(10) (A) to (C) of SEQ ID NO: 10:
(A) a single nucleotide polymorphic site which is a deletion or non-deletion of 1 base T existing at positions of base numbers 163 to 170;
(A) a single nucleotide polymorphic site that is a deletion or non-deletion of one base A present at positions of base numbers 309 to 317, and (c) one of bases A or C present at the position of base number 356 Nucleotide polymorphism site;
(11) From SEQ ID NO: 11, (A) to (G):
(A) a single nucleotide polymorphic site which is base A or T present at the position of base number 69;
(A) a single nucleotide polymorphic site which is base C or T present at the position of base number 93;
(C) a single nucleotide polymorphic site which is base A or G present at the position of base number 111;
(D) a single nucleotide polymorphic site which is base C or T present at the position of base number 208;
(E) a single nucleotide polymorphic site which is base A or G present at the position of base number 210;
(F) a single nucleotide polymorphic site which is base C or T present at the position of base number 408, and (g) a single nucleotide polymorphic site which is base A or G present at the position of base number 429;
(12) From SEQ ID NO: 12, (a) to (c):
(A) a single nucleotide polymorphic site which is base A or G present at the position of base number 104;
(A) a single nucleotide polymorphic site that is base C or G present at the position of base number 151, and (c) a single nucleotide polymorphic site that is base C or T present at the position of base number 343;
(13) (A) to (C) of SEQ ID NO: 13:
(A) a single nucleotide polymorphic site which is base A or G present at the position of base number 126;
(A) a single nucleotide polymorphic site which is the base C or G present at the position of the base number 201, and (c) a single nucleotide polymorphic site which is the base A or G present at the position of the base number 264;
(14) (A) to (C) of SEQ ID NO: 14:
(A) a single nucleotide polymorphic site which is base A or C present at the position of base number 132;
(A) a single nucleotide polymorphic site which is base A or C present at the position of base number 185, and (c) a single nucleotide polymorphic site which is base C or T present at the position of base number 189;
(15) From SEQ ID NO: 15, (a) to (e):
(A) a single nucleotide polymorphic site which is base C or T present at the position of base number 101;
(A) a single nucleotide polymorphic site which is base C or T present at the position of base number 183,
(C) a single nucleotide polymorphism site in which insertion or non-insertion of 1 base A exists at positions of base numbers 188 to 192,
(D) a single nucleotide polymorphic site which is the base C or T present at the position of the base number 280, and (e) a single nucleotide polymorphic site which is the base G or T present at the position of the base number 338;
(16) (A) to (SA) of SEQ ID NO: 16:
(A) a single nucleotide polymorphic site which is base A or T present at the position of base number 134;
(A) a single nucleotide polymorphic site which is base A or T present at the position of base number 135;
(C) a single nucleotide polymorphic site which is base C or T present at the position of base number 137,
(D) a single nucleotide polymorphic site which is base A or T present at the position of base number 138;
(E) a single nucleotide polymorphic site which is base A or G present at the position of base number 142;
(F) a single nucleotide polymorphic site which is base A or G present at the position of base number 165,
(G) a single nucleotide polymorphic site which is base C or T present at the position of base number 183,
(H) a single nucleotide polymorphic site which is base A or C present at the position of base number 219;
(G) a single nucleotide polymorphic site which is base C or G present at the position of base number 232;
(Co) a single nucleotide polymorphic site which is base A or G present at the position of base number 293, and (sa) a single nucleotide polymorphic site which is base C or T present at the position of base number 332;
(17) From SEQ ID NO: 17, (a) to (e):
(A) a single nucleotide polymorphic site which is base A or T present at the position of base number 65;
(A) a single nucleotide polymorphic site which is base A or G present at the position of base number 158,
(C) a single nucleotide polymorphic site which is base G or T present at the position of base number 236,
(D) a single nucleotide polymorphic site which is base A or G present at the position of base number 256, and (e) a single nucleotide polymorphic site which is base C or T present at the position of base number 474;
(18) (A) and (I) of SEQ ID NO: 18:
(A) a single nucleotide polymorphism site which is the base C or T present at the position of the base number 96, and (a) a single nucleotide polymorphism site which is the base C or T which is present at the position of the base number 133;
(19) (A) to (D) of SEQ ID NO: 19:
(A) a single nucleotide polymorphic site which is base A or G present at the position of base number 261,
(A) a single nucleotide polymorphic site which is base C or T present at the position of base number 282;
(C) a single nucleotide polymorphic site that is base C or T present at the position of base number 371, and (d) a single nucleotide polymorphic site that is base C or T present at the position of base number 440;
(20) (A) and (A) of SEQ ID NO: 20:
(A) a single nucleotide polymorphism site that is base A or G present at the position of base number 247, and (b) a single nucleotide polymorphism site that is base C or T present at the position of base number 362;
(21) From SEQ ID NO: 21, (a) to (d):
(A) a single nucleotide polymorphic site which is base A or G present at the position of base number 82;
(A) a single nucleotide polymorphic site which is base A or G present at the position of base number 91;
(C) a single nucleotide polymorphic site which is the base G or T present at the position of the base number 139, and (d) a single nucleotide polymorphic site which is the base C or T present at the position of the base number 140;
(22) (a) a single nucleotide polymorphism site which is a deletion or non-deletion of base A present at positions of base numbers 359 to 364 of SEQ ID NO: 22;
(23) (A) and (I) of SEQ ID NO: 23:
(A) a single nucleotide polymorphic site which is the base A or T present at the position of the base number 420, and (a) a single nucleotide polymorphic site which is the base C or G present at the position of the base number 485;
(24) (A) to (C) of SEQ ID NO: 24:
(A) a single nucleotide polymorphic site which is base C or T present at the position of base number 189;
(A) a single nucleotide polymorphic site which is base A or G present at the position of base number 209,
(C) a single nucleotide polymorphic site which is base C or T present at the position of base number 218,
(D) a single nucleotide polymorphic site which is base C or T present at the position of base number 260;
(E) a single nucleotide polymorphic site which is base C or T present at the position of base number 283,
(F) a single nucleotide polymorphic site which is base C or G present at the position of base number 315,
(G) a single nucleotide polymorphic site which is base A or G present at the position of base number 379;
(H) a single nucleotide polymorphic site which is base C or T present at the position of base number 385,
(G) a single nucleotide polymorphic site which is base A or C present at the position of base number 551, and (co) a single nucleotide polymorphic site which is base C or T present at the position of base number 597;
(25) (A) to (G) of SEQ ID NO: 25:
(A) a single nucleotide polymorphic site which is base C or T present at the position of base number 62;
(A) a single nucleotide polymorphic site which is base A or G present at the position of base number 96;
(C) a single nucleotide polymorphic site which is base A or G present at the position of base number 171;
(D) a single nucleotide polymorphic site which is base C or T present at the position of base number 176,
(E) a single nucleotide polymorphic site which is base C or T present at the position of base number 222;
(F) a single nucleotide polymorphic site which is base C or T present at the position of base number 228, and (g) a single nucleotide polymorphic site which is base A or G present at the position of base number 273;
(26) From SEQ ID NO: 26, (a) to (g):
(A) a single nucleotide polymorphic site which is base A or G present at the position of base number 57;
(A) a single nucleotide polymorphic site which is base A or G present at the position of base number 149;
(C) a single nucleotide polymorphic site which is base A or T present at the position of base number 221;
(D) a single nucleotide polymorphic site which is base A or G present at the position of base number 303;
(E) a single nucleotide polymorphic site which is base A or T present at the position of base number 350;
(F) a single nucleotide polymorphic site which is base A or T present at the position of base number 400, and (g) a single nucleotide polymorphic site which is base A or G present at the position of base number 434;
(27) (A) to (E) of SEQ ID NO: 27:
(A) a single nucleotide polymorphic site which is base A or G present at the position of base number 80;
(A) a single nucleotide polymorphism site which is a deletion or non-deletion of base A existing at positions from base numbers 116 to 122;
(C) a single nucleotide polymorphic site which is base A or G present at the position of base number 204;
(D) a single nucleotide polymorphism site that is base C or T present at the position of base number 249, and (e) a single nucleotide polymorphism site that is base G or T at the position of base number 389;
(28) From SEQ ID NO: 28, (a) to (e):
(A) a single nucleotide polymorphic site which is base A or C present at the position of base number 83;
(A) a single nucleotide polymorphic site which is base C or G present at the position of base number 169,
(C) a single nucleotide polymorphic site which is base C or T present at the position of base number 193,
(D) a single nucleotide polymorphic site which is base A or C present at the position of base number 215, and (e) a single nucleotide polymorphic site which is base A or G present at the position of base number 232;
(29) (a) a single nucleotide polymorphic site which is base A or G present at the position of base number 309 in SEQ ID NO: 29;
(30) (a) a single nucleotide polymorphic site which is base C or T present at the position of base number 216 of SEQ ID NO: 30;
(31) (a) a single nucleotide polymorphic site which is base C or T present at the position of base number 162 of SEQ ID NO: 31;
(32) (A) and (I) of SEQ ID NO: 32:
(A) a single nucleotide polymorphic site that is base C or T present at the position of base number 34, and (a) a single nucleotide polymorphic site that is base A or G present at the position of base number 336;
(33) (a) A single nucleotide polymorphic site which is base A or G present at the position of base number 361 in SEQ ID NO: 33.
一対のプライマーセットが以下の(1)から(33)の組合せのうちの少なくとも1つの組み合わせからなる請求項1記載のプライマーセット:
(1)配列番号1の塩基番号53の5’側のプライマーおよび配列番号1の塩基番号298の3’側のプライマー;
(2)配列番号2の塩基番号104の5’側のプライマーおよび配列番号2の塩基番号322の3’側のプライマー;
(3)配列番号3の塩基番号125の5’側のプライマーおよび配列番号3の塩基番号354の3’側のプライマー;
(4)配列番号4の塩基番号67の5’側のプライマーおよび配列番号4の塩基番号466の3’側のプライマー;
(5)配列番号5の塩基番号431の5’側のプライマーおよび配列番号5の塩基番号464の3’側のプライマー;
(6)配列番号6の塩基番号75の5’側のプライマーおよび配列番号6の塩基番号493の3’側のプライマー;
(7)配列番号7の塩基番号213の5’側のプライマーおよび配列番号7の塩基番号378の3’側のプライマー;
(8)配列番号8の塩基番号88の5’側のプライマーおよび配列番号8の塩基番号381の3’側のプライマー;
(9)配列番号9の塩基番号66の5’側のプライマーおよび配列番号9の塩基番号262の3’側のプライマー;
(10)配列番号10の塩基番163の5’側のプライマーおよび配列番号10の塩基番号356の3’側のプライマー;
(11)配列番号11の塩基番号69の5’側のプライマーおよび配列番号11の塩基番号429の3’側のプライマー;
(12)配列番号12の塩基番号104の5’側のプライマーおよび配列番号12の塩基番号343の3’側のプライマー;
(13)配列番号13の塩基番号126の5’側のプライマーおよび配列番号13の塩基番号264の3’側のプライマー;
(14)配列番号14の塩基番号132の5’側のプライマーおよび配列番号14の塩基番号189の3’側のプライマー;
(15)配列番号15の塩基番号101の5’側のプライマーおよび配列番号15の塩基番号338の3’側のプライマー;
(16)配列番号16の塩基番号134の5’側のプライマーおよび配列番号16の塩基番号332の3’側のプライマー;
(17)配列番号17の塩基番号65の5’側のプライマーおよび配列番号17の塩基番号474の3’側のプライマー;
(18)配列番号18の塩基番号96の5’側のプライマーおよび配列番号18の塩基番号133の3’側のプライマー;
(19)配列番号19の塩基番号261の5’側のプライマーおよび配列番号19の塩基番号440の3’側のプライマー;
(20)配列番号20の塩基番号247の5’側のプライマーおよび配列番号20の塩基番号362の3’側のプライマー;
(21)配列番号21の塩基番号82の5’側のプライマーおよび配列番号21の塩基番号140の3’側のプライマー;
(22)配列番号22の塩基番号359の5’側のプライマーおよび配列番号22の塩基番号364の3’側のプライマー;
(23)配列番号23の塩基番号420の5’側のプライマーおよび配列番号23の塩基番号485の3’側のプライマー;
(24)配列番号24の塩基番号189の5’側のプライマーおよび配列番号24の塩基番号597の3’側のプライマー;
(25)配列番号25の塩基番号62の5’側のプライマーおよび配列番号25の塩基番号273の3’側のプライマー;
(26)配列番号26の塩基番号57の5’側のプライマーおよび配列番号26の塩基番号434の3’側のプライマー;
(27)配列番号27の塩基番号80の5’側のプライマーおよび配列番号27の塩基番号389の3’側のプライマー;
(28)配列番号28の塩基番号83の5’側のプライマーおよび配列番号28の塩基番号232の3’側のプライマー;
(29)配列番号29の塩基番号309の5’側のプライマーおよび配列番号29の塩基番号309の3’側のプライマー;
(30)配列番号30の塩基番号216の5’側のプライマーおよび配列番号30の塩基番号216の3’側のプライマー;
(31)配列番号31の塩基番号162の5’側のプライマーおよび配列番号31の塩基番号162の3’側のプライマー;
(32)配列番号32の塩基番号34の5’側のプライマーおよび配列番号32の塩基番号336の3’側のプライマー;
(33)配列番号33の塩基番号361の5’側のプライマーおよび配列番号33の塩基番号361の3’側のプライマー。
The primer set according to claim 1, wherein the pair of primer sets comprises at least one combination of the following combinations (1) to (33):
(1) a primer on the 5 ′ side of base number 53 of SEQ ID NO: 1 and a primer on the 3 ′ side of base number 298 of SEQ ID NO: 1;
(2) a primer on the 5 ′ side of base number 104 of SEQ ID NO: 2 and a primer on the 3 ′ side of base number 322 of SEQ ID NO: 2;
(3) a primer on the 5 ′ side of base number 125 of SEQ ID NO: 3 and a primer on the 3 ′ side of base number 354 of SEQ ID NO: 3;
(4) a primer on the 5 ′ side of base number 67 of SEQ ID NO: 4 and a primer on the 3 ′ side of base number 466 of SEQ ID NO: 4;
(5) a primer on the 5 ′ side of base number 431 of SEQ ID NO: 5 and a primer on the 3 ′ side of base number 464 of SEQ ID NO: 5;
(6) a primer on the 5 ′ side of base number 75 of SEQ ID NO: 6 and a primer on the 3 ′ side of base number 493 of SEQ ID NO: 6;
(7) a primer on the 5 ′ side of base number 213 of SEQ ID NO: 7 and a primer on the 3 ′ side of base number 378 of SEQ ID NO: 7;
(8) a primer on the 5 ′ side of base number 88 of SEQ ID NO: 8 and a primer on the 3 ′ side of base number 381 of SEQ ID NO: 8;
(9) a primer on the 5 ′ side of base number 66 of SEQ ID NO: 9 and a primer on the 3 ′ side of base number 262 of SEQ ID NO: 9;
(10) a primer on the 5 ′ side of base number 163 of SEQ ID NO: 10 and a primer on the 3 ′ side of base number 356 of SEQ ID NO: 10;
(11) a primer on the 5 ′ side of base number 69 of SEQ ID NO: 11 and a primer on the 3 ′ side of base number 429 of SEQ ID NO: 11;
(12) a primer on the 5 ′ side of base number 104 of SEQ ID NO: 12 and a primer on the 3 ′ side of base number 343 of SEQ ID NO: 12;
(13) a primer on the 5 ′ side of base number 126 of SEQ ID NO: 13 and a primer on the 3 ′ side of base number 264 of SEQ ID NO: 13;
(14) a primer on the 5 ′ side of base number 132 of SEQ ID NO: 14 and a primer on the 3 ′ side of base number 189 of SEQ ID NO: 14;
(15) a primer on the 5 ′ side of base number 101 of SEQ ID NO: 15 and a primer on the 3 ′ side of base number 338 of SEQ ID NO: 15;
(16) a primer on the 5 ′ side of base number 134 of SEQ ID NO: 16 and a primer on the 3 ′ side of base number 332 of SEQ ID NO: 16;
(17) a primer on the 5 ′ side of base number 65 of SEQ ID NO: 17 and a primer on the 3 ′ side of base number 474 of SEQ ID NO: 17;
(18) a primer on the 5 ′ side of base number 96 of SEQ ID NO: 18 and a primer on the 3 ′ side of base number 133 of SEQ ID NO: 18;
(19) a primer on the 5 ′ side of base number 261 of SEQ ID NO: 19 and a primer on the 3 ′ side of base number 440 of SEQ ID NO: 19;
(20) a primer on the 5 ′ side of base number 247 of SEQ ID NO: 20 and a primer on the 3 ′ side of base number 362 of SEQ ID NO: 20;
(21) a primer on the 5 ′ side of base number 82 in SEQ ID NO: 21 and a primer on the 3 ′ side of base number 140 in SEQ ID NO: 21;
(22) a primer on the 5 ′ side of base number 359 of SEQ ID NO: 22 and a primer on the 3 ′ side of base number 364 of SEQ ID NO: 22;
(23) a primer on the 5 ′ side of base number 420 of SEQ ID NO: 23 and a primer on the 3 ′ side of base number 485 of SEQ ID NO: 23;
(24) a primer on the 5 ′ side of base number 189 of SEQ ID NO: 24 and a primer on the 3 ′ side of base number 597 of SEQ ID NO: 24;
(25) a primer on the 5 ′ side of base number 62 of SEQ ID NO: 25 and a primer on the 3 ′ side of base number 273 of SEQ ID NO: 25;
(26) a primer on the 5 ′ side of base number 57 of SEQ ID NO: 26 and a primer on the 3 ′ side of base number 434 of SEQ ID NO: 26;
(27) a primer on the 5 ′ side of base number 80 of SEQ ID NO: 27 and a primer on the 3 ′ side of base number 389 of SEQ ID NO: 27;
(28) a primer on the 5 ′ side of base number 83 of SEQ ID NO: 28 and a primer on the 3 ′ side of base number 232 of SEQ ID NO: 28;
(29) a primer on the 5 ′ side of base number 309 of SEQ ID NO: 29 and a primer on the 3 ′ side of base number 309 of SEQ ID NO: 29;
(30) a primer on the 5 ′ side of base number 216 of SEQ ID NO: 30 and a primer on the 3 ′ side of base number 216 of SEQ ID NO: 30;
(31) a primer on the 5 ′ side of base number 162 of SEQ ID NO: 31 and a primer on the 3 ′ side of base number 162 of SEQ ID NO: 31;
(32) a primer on the 5 ′ side of base number 34 of SEQ ID NO: 32 and a primer on the 3 ′ side of base number 336 of SEQ ID NO: 32;
(33) A primer on the 5 ′ side of base number 361 of SEQ ID NO: 33 and a primer on the 3 ′ side of base number 361 of SEQ ID NO: 33
一対のプライマーセットが、以下の(1)から(33)の組合せのうちの少なくとも1つの組み合わせからなる請求項2記載のプライマーセット:
(1)配列番号34及び配列番号35の組み合わせ;
(2)配列番号36及び配列番号37の組み合わせ;
(3)配列番号38及び配列番号39の組み合わせ;
(4)配列番号40及び配列番号41の組み合わせ;
(5)配列番号42及び配列番号43の組み合わせ;
(6)配列番号44及び配列番号45の組み合わせ;
(7)配列番号46及び配列番号47の組み合わせ;
(8)配列番号48及び配列番号49の組み合わせ;
(9)配列番号50及び配列番号51の組み合わせ;
(10)配列番号52及び配列番号53の組み合わせ;
(11)配列番号54及び配列番号55の組み合わせ;
(12)配列番号56及び配列番号57の組み合わせ;
(13)配列番号58及び配列番号59の組み合わせ;
(14)配列番号60及び配列番号61の組み合わせ;
(15)配列番号62及び配列番号63の組み合わせ;
(16)配列番号64及び配列番号65の組み合わせ;
(17)配列番号66及び配列番号67の組み合わせ;
(18)配列番号68及び配列番号69の組み合わせ;
(19)配列番号70及び配列番号71の組み合わせ;
(20)配列番号72及び配列番号73の組み合わせ;
(21)配列番号74及び配列番号75の組み合わせ;
(22)配列番号76及び配列番号77の組み合わせ;
(23)配列番号78及び配列番号79の組み合わせ;
(24)配列番号80及び配列番号81の組み合わせ;
(25)配列番号82及び配列番号83の組み合わせ;
(26)配列番号84及び配列番号85の組み合わせ;
(27)配列番号86及び配列番号87の組み合わせ;
(28)配列番号88及び配列番号89の組み合わせ;
(29)配列番号90及び配列番号91の組み合わせ;
(30)配列番号92及び配列番号93の組み合わせ;
(31)配列番号94及び配列番号95の組み合わせ;
(32)配列番号96及び配列番号97の組み合わせ;
(33)配列番号98及び配列番号99の組み合わせ。
The primer set according to claim 2, wherein the pair of primer sets comprises at least one combination of the following combinations (1) to (33):
(1) A combination of SEQ ID NO: 34 and SEQ ID NO: 35;
(2) a combination of SEQ ID NO: 36 and SEQ ID NO: 37;
(3) a combination of SEQ ID NO: 38 and SEQ ID NO: 39;
(4) a combination of SEQ ID NO: 40 and SEQ ID NO: 41;
(5) a combination of SEQ ID NO: 42 and SEQ ID NO: 43;
(6) a combination of SEQ ID NO: 44 and SEQ ID NO: 45;
(7) a combination of SEQ ID NO: 46 and SEQ ID NO: 47;
(8) A combination of SEQ ID NO: 48 and SEQ ID NO: 49;
(9) Combination of SEQ ID NO: 50 and SEQ ID NO: 51;
(10) A combination of SEQ ID NO: 52 and SEQ ID NO: 53;
(11) A combination of SEQ ID NO: 54 and SEQ ID NO: 55;
(12) A combination of SEQ ID NO: 56 and SEQ ID NO: 57;
(13) A combination of SEQ ID NO: 58 and SEQ ID NO: 59;
(14) a combination of SEQ ID NO: 60 and SEQ ID NO: 61;
(15) a combination of SEQ ID NO: 62 and SEQ ID NO: 63;
(16) A combination of SEQ ID NO: 64 and SEQ ID NO: 65;
(17) A combination of SEQ ID NO: 66 and SEQ ID NO: 67;
(18) A combination of SEQ ID NO: 68 and SEQ ID NO: 69;
(19) A combination of SEQ ID NO: 70 and SEQ ID NO: 71;
(20) a combination of SEQ ID NO: 72 and SEQ ID NO: 73;
(21) A combination of SEQ ID NO: 74 and SEQ ID NO: 75;
(22) a combination of SEQ ID NO: 76 and SEQ ID NO: 77;
(23) A combination of SEQ ID NO: 78 and SEQ ID NO: 79;
(24) A combination of SEQ ID NO: 80 and SEQ ID NO: 81;
(25) a combination of SEQ ID NO: 82 and SEQ ID NO: 83;
(26) a combination of SEQ ID NO: 84 and SEQ ID NO: 85;
(27) A combination of SEQ ID NO: 86 and SEQ ID NO: 87;
(28) A combination of SEQ ID NO: 88 and SEQ ID NO: 89;
(29) a combination of SEQ ID NO: 90 and SEQ ID NO: 91;
(30) a combination of SEQ ID NO: 92 and SEQ ID NO: 93;
(31) A combination of SEQ ID NO: 94 and SEQ ID NO: 95;
(32) a combination of SEQ ID NO: 96 and SEQ ID NO: 97;
(33) A combination of SEQ ID NO: 98 and SEQ ID NO: 99.
一塩基多型部位が下の(1)(ア)から(3)(イ)の12個の一塩基多型部位の少なくとも1つである請求項1記載のプライマーセット:
(1)配列番号17の、(ア)から(オ):
(ア)塩基番号65の位置に存在する塩基A若しくはTである一塩基多型、
(イ)塩基番号158の位置に存在する塩基A若しくはGである一塩基多型、
(ウ)塩基番号236の位置に存在する塩基G若しくはTである一塩基多型、
(エ)塩基番号256の位置に存在する塩基A若しくはGである一塩基多型、及び
(オ)塩基番号474の位置に存在する塩基C若しくはTである一塩基多型;
(2)配列番号1の、(ア)から(オ):
(ア)塩基番号53の位置に存在する塩基C若しくはTである一塩基多型、
(イ)塩基番号170の位置に存在する塩基C若しくTはである一塩基多型、
(ウ)塩基番号185の位置に存在する塩基A若しくはGである一塩基多型、
(エ)塩基番号239の位置に存在する塩基G若しくはTである一塩基多型、及び
(オ)塩基番号298の位置に存在する塩基A若しくはGである一塩基多型;
(3)配列番号2の、(ア)及び(イ):
(ア)塩基番号104の位置に存在する塩基C若しくはTである一塩基多型、及び
(イ)塩基番号321の位置に存在する塩基C若しくはTである一塩基多型。
The primer set according to claim 1, wherein the single nucleotide polymorphism site is at least one of the following 12 single nucleotide polymorphism sites (1) (a) to (3) (a):
(1) From SEQ ID NO: 17, (A) to (E):
(A) a single nucleotide polymorphism which is base A or T present at the position of base number 65,
(A) a single nucleotide polymorphism which is base A or G present at the position of base number 158,
(C) a single nucleotide polymorphism which is the base G or T present at the position of the base number 236,
(D) a single nucleotide polymorphism that is the base A or G existing at the position of the base number 256, and (e) a single nucleotide polymorphism that is the base C or T that exists at the position of the base number 474;
(2) SEQ ID NO: 1, (A) to (E):
(A) a single nucleotide polymorphism which is the base C or T present at the position of base number 53;
(A) a single nucleotide polymorphism in which the base C or T present at the position of base number 170 is
(C) a single nucleotide polymorphism which is base A or G present at the position of base number 185,
(D) a single nucleotide polymorphism that is the base G or T existing at the position of the base number 239, and (e) a single nucleotide polymorphism that is the base A or G that exists at the position of the base number 298;
(3) (A) and (A) of SEQ ID NO: 2:
(A) A single nucleotide polymorphism that is the base C or T existing at the position of the base number 104, and (b) a single nucleotide polymorphism that is the base C or T that exists at the position of the base number 321.
一対のプライマーセットが以下の(1)から(3)の組合せのうちの少なくとも1つの組み合わせからなる請求項4記載のプライマーセット:
(1)配列番号17の塩基番号65の5’側のプライマーおよび配列番号17の塩基番号474の3’側のプライマー;
(2)配列番号1の塩基番号53の5’側のプライマーおよび配列番号1の塩基番号298の3’側のプライマー;
(3)配列番号2の塩基番号104の5’側のプライマーおよび配列番号2の塩基番号321の3’側のプライマー。
The primer set according to claim 4, wherein the pair of primer sets comprises at least one combination of the following combinations (1) to (3):
(1) a primer on the 5 ′ side of base number 65 of SEQ ID NO: 17 and a primer on the 3 ′ side of base number 474 of SEQ ID NO: 17;
(2) a primer on the 5 ′ side of base number 53 of SEQ ID NO: 1 and a primer on the 3 ′ side of base number 298 of SEQ ID NO: 1;
(3) A primer on the 5 ′ side of base number 104 of SEQ ID NO: 2 and a primer on the 3 ′ side of base number 321 of SEQ ID NO: 2.
一対のプライマーセットが以下の(1)から(3)の組合せのうちの少なくとも1つの組み合わせからなる請求項5記載のプライマーセット:
(1)配列番号66及び配列番号67の組み合わせ;
(2)配列番号34及び配列番号35の組み合わせ;
(3)配列番号36及び配列番号37の組み合わせ。
The primer set according to claim 5, wherein the pair of primer sets comprises at least one combination of the following combinations (1) to (3):
(1) A combination of SEQ ID NO: 66 and SEQ ID NO: 67;
(2) a combination of SEQ ID NO: 34 and SEQ ID NO: 35;
(3) A combination of SEQ ID NO: 36 and SEQ ID NO: 37.
酵母ゲノムDNA上の一塩基多型部位を含むDNA断片からなるオリゴヌクレオチドまたはその標識物であって、一塩基多型部位が以下の(1)(ア)から(33)(ア)の148個の一塩基多型部位の少なくとも1つであって、配列番号1から33の塩基配列のうちの以下の(1)(ア)から(33)(ア)の一塩基多型部位のうちの少なくとも1つの多型部位を含む10から30塩基からなる部分配列またはその部分配列に相補的な配列からなるオリゴヌクレオチドまたはその標識物:
(1)配列番号1の、(ア)から(キ):
(ア)塩基番号53の位置に存在する塩基C若しくはTである一塩基多型部位、
(イ)塩基番号140の位置に存在する塩基A若しくはGである一塩基多型部位、
(ウ)塩基番号170の位置に存在する塩基C若しくTはである一塩基多型部位、
(エ)塩基番号185の位置に存在する塩基A若しくはGである一塩基多型部位、
(オ)塩基番号225の位置に存在する塩基A若しくはGである一塩基多型部位、
(カ)塩基番号239の位置に存在する塩基G若しくはTである一塩基多型部位、及び
(キ)塩基番号298の位置に存在する塩基A若しくはGである一塩基多型部位;
(2)配列番号2の、(ア)から(オ):
(ア)塩基番号104の位置に存在する塩基C若しくはTである一塩基多型部位、
(イ)塩基番号149の位置に存在する塩基A若しくはGである一塩基多型部位、
(ウ)塩基番号304の位置に存在する塩基C若しくはTである一塩基多型部位、
(エ)塩基番号321の位置に存在する塩基C若しくはTである一塩基多型部位、及び
(オ)塩基番号322の位置に存在する塩基A若しくはGである一塩基多型部位;
(3)配列番号3の、(ア)から(ウ):
(ア)塩基番号125の位置に存在する塩基C若しくはTである一塩基多型部位、
(イ)塩基番号145の位置に存在する塩基A若しくはGである一塩基多型部位、
(ウ)塩基番号351から354の位置に存在する3塩基の挿入若しくは非挿入である一塩基多型部位;
(4)配列番号4の、(ア)から(コ):
(ア)塩基番号67の位置に存在する塩基C若しくはTである一塩基多型部位、
(イ)塩基番号74の位置に存在する塩基C若しくはTである一塩基多型部位、
(ウ)塩基番号104の位置に存在する塩基A若しくはGである一塩基多型部位、
(エ)塩基番号160の位置に存在する塩基C若しくはTである一塩基多型部位、
(オ)塩基番号268の位置に存在する塩基A若しくはCである一塩基多型部位、
(カ)塩基番号269の位置に存在する塩基C若しくはTである一塩基多型部位、
(キ)塩基番号324の位置に存在する塩基A若しくはGである一塩基多型部位、
(ク)塩基番号446の位置に存在する塩基C若しくはTである一塩基多型部位、
(ケ)塩基番号453の位置に存在する塩基G若しくはTである一塩基多型部位、及び
(コ)塩基番号466の位置に存在する塩基A若しくはGである一塩基多型部位;
(5)配列番号5の、(ア)及び(イ):
(ア)塩基番号431の位置に存在する塩基A若しくはGである一塩基多型部位、及び
(イ)塩基番号464の位置に存在する塩基C若しくはTである一塩基多型部位;
(6)配列番号6の、(ア)から(シ):
(ア)塩基番号75の位置に存在する塩基A若しくはCである一塩基多型部位、
(イ)塩基番号185の位置に存在する塩基C若しくはTである一塩基多型部位、
(ウ)塩基番号216の位置に存在する塩基C若しくはTである一塩基多型部位、
(エ)塩基番号217の位置に存在する塩基A若しくはCである一塩基多型部位、
(オ)塩基番号253の位置に存在する塩基A若しくはCである一塩基多型部位、
(カ)塩基番号269の位置に存在する塩基C若しくはTである一塩基多型部位、
(キ)塩基番号318の位置に存在する塩基C若しくはTである一塩基多型部位、
(ク)塩基番号441の位置に存在する塩基A若しくはTである一塩基多型部位、
(ケ)塩基番号444の位置に存在する塩基A若しくはGである一塩基多型部位、
(コ)塩基番号445の位置に存在する塩基A若しくはTである一塩基多型部位、
(サ)塩基番号463の位置に存在する塩基C若しくはTである一塩基多型部位、及び
(シ)塩基番号493の位置に存在する塩基C若しくはTである一塩基多型部位;
(7)配列番号7の、(ア)から(カ):
(ア)塩基番号213の位置に存在する塩基A若しくはGである一塩基多型部位、
(イ)塩基番号243の位置に存在する塩基A若しくはGである一塩基多型部位、
(ウ)塩基番号290の位置に存在する塩基C若しくはTである一塩基多型部位、
(エ)塩基番号348の位置に存在する塩基A若しくはTである一塩基多型部位、
(オ)塩基番号350の位置に存在する塩基A若しくはGである一塩基多型部位、及び
(カ)塩基番号378の位置に存在する塩基C若しくはTである一塩基多型部位;
(8)配列番号8の、(ア)から(オ):
(ア)塩基番号88の位置に存在する塩基A若しくはGである一塩基多型部位、
(イ)塩基番号152の位置に存在する塩基C若しくはTである一塩基多型部位、
(ウ)塩基番号161の位置に存在する塩基C若しくはTである一塩基多型部位、
(エ)塩基番号309の位置に存在する塩基A若しくはGである一塩基多型部位、及び
(オ)塩基番号381の位置に存在する塩基C若しくはTである一塩基多型部位;
(9)配列番号9の、(ア)から(ウ):
(ア)塩基番号66の位置に存在する塩基C若しくはTである一塩基多型部位、
(イ)塩基番号229の位置に存在する塩基C若しくはTである一塩基多型部位、及び
(ウ)塩基番号262の位置に存在する塩基A若しくはTである一塩基多型部位;
(10)配列番号10の、(ア)から(ウ):
(ア)塩基番号163から170の位置に存在する1塩基Tの欠失若しくは非欠失である一塩基多型部位、
(イ)塩基番号309から317の位置に存在する1塩基Aの欠失若しくは非欠失である一塩基多型部位、及び
(ウ)塩基番号356の位置に存在する塩基A若しくはCである一塩基多型部位;
(11)配列番号11の、(ア)から(キ):
(ア)塩基番号69の位置に存在する塩基A若しくはTである一塩基多型部位、
(イ)塩基番号93の位置に存在する塩基C若しくはTである一塩基多型部位、
(ウ)塩基番号111の位置に存在する塩基A若しくはGである一塩基多型部位、
(エ)塩基番号208の位置に存在する塩基C若しくはTである一塩基多型部位、
(オ)塩基番号210の位置に存在する塩基A若しくはGである一塩基多型部位、
(カ)塩基番号408の位置に存在する塩基C若しくはTである一塩基多型部位、及び
(キ)塩基番号429の位置に存在する塩基A若しくはGである一塩基多型部位;
(12)配列番号12の、(ア)から(ウ):
(ア)塩基番号104の位置に存在する塩基A若しくはGである一塩基多型部位、
(イ)塩基番号151の位置に存在する塩基C若しくはGである一塩基多型部位、及び
(ウ)塩基番号343の位置に存在する塩基C若しくはTである一塩基多型部位;
(13)配列番号13の、(ア)から(ウ):
(ア)塩基番号126の位置に存在する塩基A若しくはGである一塩基多型部位、
(イ)塩基番号201の位置に存在する塩基C若しくはGである一塩基多型部位、及び
(ウ)塩基番号264の位置に存在する塩基A若しくはGである一塩基多型部位;
(14)配列番号14の、(ア)から(ウ):
(ア)塩基番号132の位置に存在する塩基A若しくはCである一塩基多型部位、
(イ)塩基番号185の位置に存在する塩基A若しくはCである一塩基多型部位、及び
(ウ)塩基番号189の位置に存在する塩基C若しくはTである一塩基多型部位;
(15)配列番号15の、(ア)から(オ):
(ア)塩基番号101の位置に存在する塩基C若しくはTである一塩基多型部位、
(イ)塩基番号183の位置に存在する塩基C若しくはTである一塩基多型部位、
(ウ)塩基番号188から192の位置に存在する1塩基Aの挿入若しくは非挿入である一塩基多型部位、
(エ)塩基番号280の位置に存在する塩基C若しくはTである一塩基多型部位、及び
(オ)塩基番号338の位置に存在する塩基若GしくはTである一塩基多型部位;
(16)配列番号16の、(ア)から(サ):
(ア)塩基番号134の位置に存在する塩基A若しくはTである一塩基多型部位、
(イ)塩基番号135の位置に存在する塩基A若しくはTである一塩基多型部位、
(ウ)塩基番号137の位置に存在する塩基C若しくはTである一塩基多型部位、
(エ)塩基番号138の位置に存在する塩基A若しくはTである一塩基多型部位、
(オ)塩基番号142の位置に存在する塩基A若しくはGである一塩基多型部位、
(カ)塩基番号165の位置に存在する塩基A若しくはGである一塩基多型部位、
(キ)塩基番号183の位置に存在する塩基C若しくはTである一塩基多型部位、
(ク)塩基番号219の位置に存在する塩基A若しくはCである一塩基多型部位、
(ケ)塩基番号232の位置に存在する塩基C若しくはGである一塩基多型部位、
(コ)塩基番号293の位置に存在する塩基A若しくはでGある一塩基多型部位、及び
(サ)塩基番号332の位置に存在する塩基C若しくはTである一塩基多型部位;
(17)配列番号17の、(ア)から(オ):
(ア)塩基番号65の位置に存在する塩基A若しくはTである一塩基多型部位、
(イ)塩基番号158の位置に存在する塩基A若しくはGである一塩基多型部位、
(ウ)塩基番号236の位置に存在する塩基G若しくはTである一塩基多型部位、
(エ)塩基番号256の位置に存在する塩基A若しくはGである一塩基多型部位、及び
(オ)塩基番号474の位置に存在する塩基C若しくはTである一塩基多型部位;
(18)配列番号18の、(ア)及び(イ):
(ア)塩基番号96の位置に存在する塩基C若しくはTである一塩基多型部位、及び
(イ)塩基番号133の位置に存在する塩基C若しくはTである一塩基多型部位;
(19)配列番号19の、(ア)から(エ):
(ア)塩基番号261の位置に存在する塩基A若しくはGである一塩基多型部位、
(イ)塩基番号282の位置に存在する塩基C若しくはTである一塩基多型部位、
(ウ)塩基番号371の位置に存在する塩基C若しくはTである一塩基多型部位、及び
(エ)塩基番号440の位置に存在する塩基C若しくはTである一塩基多型部位;
(20)配列番号20の、(ア)及び(イ):
(ア)塩基番号247の位置に存在する塩基A若しくはGである一塩基多型部位、及び
(イ)塩基番号362の位置に存在する塩基C若しくはTである一塩基多型部位;
(21)配列番号21の、(ア)から(エ):
(ア)塩基番号82の位置に存在する塩基A若しくはGである一塩基多型部位、
(イ)塩基番号91の位置に存在する塩基A若しくはGである一塩基多型部位、
(ウ)塩基番号139の位置に存在する塩基G若しくはTである一塩基多型部位、及び
(エ)塩基番号140の位置に存在する塩基C若しくはTである一塩基多型部位;
(22)(ア)配列番号22の、塩基番号359から364の位置に存在する塩基Aの欠失若しくは非欠失である一塩基多型部位;
(23)配列番号23の、(ア)及び(イ):
(ア)塩基番号420の位置に存在する塩基A若しくはTである一塩基多型部位、及び
(イ)塩基番号485の位置に存在する塩基C若しくはGである一塩基多型部位;
(24)配列番号24の、(ア)から(コ):
(ア)塩基番号189の位置に存在する塩基C若しくはTである一塩基多型部位、
(イ)塩基番号209の位置に存在する塩基A若しくはGである一塩基多型部位、
(ウ)塩基番号218の位置に存在する塩基C若しくはTである一塩基多型部位、
(エ)塩基番号260の位置に存在する塩基C若しくはTである一塩基多型部位、
(オ)塩基番号283の位置に存在する塩基C若しくはTである一塩基多型部位、
(カ)塩基番号315の位置に存在する塩基C若しくはGである一塩基多型部位、
(キ)塩基番号379の位置に存在する塩基A若しくはGである一塩基多型部位、
(ク)塩基番号385の位置に存在する塩基C若しくはTである一塩基多型部位、
(ケ)塩基番号551の位置に存在する塩基A若しくはCである一塩基多型部位、及び
(コ)塩基番号597の位置に存在する塩基C若しくはTである一塩基多型部位;
(25)配列番号25の、(ア)から(キ):
(ア)塩基番号62の位置に存在する塩基C若しくはTである一塩基多型部位、
(イ)塩基番号96の位置に存在する塩基A若しくはGである一塩基多型部位、
(ウ)塩基番号171の位置に存在する塩基A若しくはGである一塩基多型部位、
(エ)塩基番号176の位置に存在する塩基C若しくはTである一塩基多型部位、
(オ)塩基番号222の位置に存在する塩基C若しくはTである一塩基多型部位、
(カ)塩基番号228の位置に存在する塩基C若しくはTである一塩基多型部位、及び
(キ)塩基番号273の位置に存在する塩基A若しくはGである一塩基多型部位;
(26)配列番号26の、(ア)から(キ):
(ア)塩基番号57の位置に存在する塩基A若しくはGである一塩基多型部位、
(イ)塩基番号149の位置に存在する塩基A若しくはGである一塩基多型部位、
(ウ)塩基番号221の位置に存在する塩基A若しくはTである一塩基多型部位、
(エ)塩基番号303の位置に存在する塩基A若しくはGである一塩基多型部位、
(オ)塩基番号350の位置に存在する塩基A若しくはTである一塩基多型部位、
(カ)塩基番号400の位置に存在する塩基A若しくはTである一塩基多型部位、及び
(キ)塩基番号434の位置に存在する塩基A若しくはGである一塩基多型部位;
(27)配列番号27の、(ア)から(オ):
(ア)塩基番号80の位置に存在する塩基A若しくはGである一塩基多型部位、
(イ)塩基番号116から122の位置に存在する塩基Aの欠失若しくは非欠失である一塩基多型部位、
(ウ)塩基番号204の位置に存在する塩基A若しくはGである一塩基多型部位、
(エ)塩基番号249の位置に存在する塩基C若しくはTである一塩基多型部位、及び
(オ)塩基番号389の位置に存在する塩基G若しくはTである一塩基多型部位;
(28)配列番号28の、(ア)から(オ):
(ア)塩基番号83の位置に存在する塩基A若しくはCである一塩基多型部位、
(イ)塩基番号169の位置に存在する塩基C若しくはGである一塩基多型部位、
(ウ)塩基番号193の位置に存在する塩基C若しくはTである一塩基多型部位、
(エ)塩基番号215の位置に存在する塩基A若しくはCである一塩基多型部位、及び
(オ)塩基番号232の位置に存在する塩基A若しくはGである一塩基多型部位;
(29)(ア)配列番号29の、塩基番号309の位置に存在する塩基A若しくはGである一塩基多型部位;
(30)(ア)配列番号30の、塩基番号216の位置に存在する塩基C若しくはTである一塩基多型部位;
(31)(ア)配列番号31の、塩基番号162の位置に存在する塩基C若しくはTである一塩基多型部位;
(32)配列番号32の、(ア)及び(イ):
(ア)塩基番号34の位置に存在する塩基C若しくはTである一塩基多型部位、及び
(イ)塩基番号336の位置に存在する塩基A若しくはGである一塩基多型部位;
(33)(ア)配列番号33の、塩基番号361の位置に存在する塩基A若しくはGである一塩基多型部位。
An oligonucleotide consisting of a DNA fragment containing a single nucleotide polymorphic site on yeast genomic DNA or a label thereof, and 148 single nucleotide polymorphic sites from the following (1) (a) to (33) (a) At least one of the following single nucleotide polymorphism sites (1) (a) to (33) (a) of the nucleotide sequences of SEQ ID NOs: 1 to 33: An oligonucleotide consisting of a partial sequence consisting of 10 to 30 bases containing one polymorphic site or a sequence complementary to the partial sequence, or a label thereof:
(1) From SEQ ID NO: 1 (A) to (G):
(A) a single nucleotide polymorphic site which is base C or T present at the position of base number 53;
(A) a single nucleotide polymorphic site which is base A or G present at the position of base number 140;
(C) a single nucleotide polymorphic site where base C or T is at the position of base number 170,
(D) a single nucleotide polymorphic site which is base A or G present at the position of base number 185,
(E) a single nucleotide polymorphic site that is base A or G present at the position of base number 225;
(F) a single nucleotide polymorphic site that is base G or T present at the position of base number 239, and (g) a single nucleotide polymorphic site that is base A or G present at the position of base number 298;
(2) SEQ ID NO: 2, (A) to (E):
(A) a single nucleotide polymorphic site which is base C or T present at the position of base number 104;
(A) a single nucleotide polymorphic site which is base A or G present at the position of base number 149;
(C) a single nucleotide polymorphic site which is base C or T present at the position of base number 304,
(D) a single nucleotide polymorphism site that is base C or T present at the position of base number 321; and (e) a single nucleotide polymorphism site that is base A or G at the position of base number 322;
(3) (A) to (C) of SEQ ID NO: 3:
(A) a single nucleotide polymorphic site which is base C or T present at the position of base number 125;
(A) a single nucleotide polymorphic site which is base A or G present at the position of base number 145;
(C) a single nucleotide polymorphism site in which insertion or non-insertion of 3 bases exists at positions of base numbers 351 to 354;
(4) SEQ ID NO: 4, (A) to (C):
(A) a single nucleotide polymorphic site which is base C or T present at the position of base number 67;
(A) a single nucleotide polymorphic site which is base C or T present at the position of base number 74;
(C) a single nucleotide polymorphic site which is base A or G present at the position of base number 104;
(D) a single nucleotide polymorphic site which is base C or T present at the position of base number 160;
(E) a single nucleotide polymorphic site which is base A or C present at the position of base number 268,
(F) a single nucleotide polymorphic site which is base C or T present at the position of base number 269;
(G) a single nucleotide polymorphic site which is base A or G present at the position of base number 324;
(H) a single nucleotide polymorphic site which is base C or T present at the position of base number 446;
(G) a single nucleotide polymorphism site that is base G or T present at the position of base number 453, and (co) a single nucleotide polymorphism site that is base A or G present at the position of base number 466;
(5) (A) and (I) of SEQ ID NO: 5:
(A) a single nucleotide polymorphic site that is base A or G present at the position of base number 431, and (a) a single nucleotide polymorphic site that is base C or T present at the position of base number 464;
(6) SEQ ID NO: 6, (A) to (S):
(A) a single nucleotide polymorphic site which is base A or C present at the position of base number 75;
(A) a single nucleotide polymorphic site which is base C or T present at the position of base number 185,
(C) a single nucleotide polymorphic site which is base C or T present at the position of base number 216,
(D) a single nucleotide polymorphic site which is base A or C present at the position of base number 217;
(E) a single nucleotide polymorphic site which is base A or C present at the position of base number 253,
(F) a single nucleotide polymorphic site which is base C or T present at the position of base number 269;
(G) a single nucleotide polymorphic site which is base C or T present at the position of base number 318,
(H) a single nucleotide polymorphic site that is base A or T present at the position of base number 441;
(G) a single nucleotide polymorphic site which is base A or G present at the position of base number 444;
(E) a single nucleotide polymorphic site which is base A or T present at the position of base number 445;
(Sa) a single nucleotide polymorphic site that is base C or T present at the position of base number 463, and (f) a single nucleotide polymorphic site that is base C or T present at the position of base number 493;
(7) From SEQ ID NO: 7, (a) to (f):
(A) a single nucleotide polymorphic site that is base A or G present at the position of base number 213,
(A) a single nucleotide polymorphic site which is base A or G present at the position of base number 243;
(C) a single nucleotide polymorphic site which is base C or T present at the position of base number 290,
(D) a single nucleotide polymorphic site which is base A or T present at the position of base number 348;
(E) a single nucleotide polymorphic site which is base A or G present at the position of base number 350, and (f) a single nucleotide polymorphic site which is base C or T present at the position of base number 378;
(8) (A) to (E) of SEQ ID NO: 8:
(A) a single nucleotide polymorphic site which is base A or G present at the position of base number 88;
(A) a single nucleotide polymorphic site which is base C or T present at the position of base number 152;
(C) a single nucleotide polymorphic site which is base C or T present at the position of base number 161;
(D) a single nucleotide polymorphism site that is base A or G present at the position of base number 309, and (e) a single nucleotide polymorphism site that is base C or T at the position of base number 381;
(9) From SEQ ID NO: 9, (a) to (c):
(A) a single nucleotide polymorphic site which is base C or T present at the position of base number 66;
(A) a single nucleotide polymorphic site which is the base C or T present at the position of the base number 229, and (c) a single nucleotide polymorphic site which is the base A or T present at the position of the base number 262;
(10) (A) to (C) of SEQ ID NO: 10:
(A) a single nucleotide polymorphic site which is a deletion or non-deletion of 1 base T existing at positions of base numbers 163 to 170;
(A) a single nucleotide polymorphic site that is a deletion or non-deletion of one base A present at positions of base numbers 309 to 317, and (c) one of bases A or C present at the position of base number 356 Nucleotide polymorphism site;
(11) From SEQ ID NO: 11, (A) to (G):
(A) a single nucleotide polymorphic site which is base A or T present at the position of base number 69;
(A) a single nucleotide polymorphic site which is base C or T present at the position of base number 93;
(C) a single nucleotide polymorphic site which is base A or G present at the position of base number 111;
(D) a single nucleotide polymorphic site which is base C or T present at the position of base number 208;
(E) a single nucleotide polymorphic site which is base A or G present at the position of base number 210;
(F) a single nucleotide polymorphic site which is base C or T present at the position of base number 408, and (g) a single nucleotide polymorphic site which is base A or G present at the position of base number 429;
(12) From SEQ ID NO: 12, (a) to (c):
(A) a single nucleotide polymorphic site which is base A or G present at the position of base number 104;
(A) a single nucleotide polymorphic site that is base C or G present at the position of base number 151, and (c) a single nucleotide polymorphic site that is base C or T present at the position of base number 343;
(13) (A) to (C) of SEQ ID NO: 13:
(A) a single nucleotide polymorphic site which is base A or G present at the position of base number 126;
(A) a single nucleotide polymorphic site which is the base C or G present at the position of the base number 201, and (c) a single nucleotide polymorphic site which is the base A or G present at the position of the base number 264;
(14) (A) to (C) of SEQ ID NO: 14:
(A) a single nucleotide polymorphic site which is base A or C present at the position of base number 132;
(A) a single nucleotide polymorphic site which is base A or C present at the position of base number 185, and (c) a single nucleotide polymorphic site which is base C or T present at the position of base number 189;
(15) From SEQ ID NO: 15, (a) to (e):
(A) a single nucleotide polymorphic site which is base C or T present at the position of base number 101;
(A) a single nucleotide polymorphic site which is base C or T present at the position of base number 183,
(C) a single nucleotide polymorphism site in which insertion or non-insertion of 1 base A exists at positions of base numbers 188 to 192,
(D) a single nucleotide polymorphic site which is the base C or T present at the position of the base number 280, and (e) a single nucleotide polymorphic site which is the base G or T present at the position of the base number 338;
(16) (A) to (SA) of SEQ ID NO: 16:
(A) a single nucleotide polymorphic site which is base A or T present at the position of base number 134;
(A) a single nucleotide polymorphic site which is base A or T present at the position of base number 135;
(C) a single nucleotide polymorphic site which is base C or T present at the position of base number 137,
(D) a single nucleotide polymorphic site which is base A or T present at the position of base number 138;
(E) a single nucleotide polymorphic site which is base A or G present at the position of base number 142;
(F) a single nucleotide polymorphic site which is base A or G present at the position of base number 165,
(G) a single nucleotide polymorphic site which is base C or T present at the position of base number 183,
(H) a single nucleotide polymorphic site which is base A or C present at the position of base number 219;
(G) a single nucleotide polymorphic site which is base C or G present at the position of base number 232;
(Co) a single nucleotide polymorphic site which is base A or G present at the position of base number 293, and (sa) a single nucleotide polymorphic site which is base C or T present at the position of base number 332;
(17) From SEQ ID NO: 17, (a) to (e):
(A) a single nucleotide polymorphic site which is base A or T present at the position of base number 65;
(A) a single nucleotide polymorphic site which is base A or G present at the position of base number 158,
(C) a single nucleotide polymorphic site which is base G or T present at the position of base number 236,
(D) a single nucleotide polymorphic site which is base A or G present at the position of base number 256, and (e) a single nucleotide polymorphic site which is base C or T present at the position of base number 474;
(18) (A) and (I) of SEQ ID NO: 18:
(A) a single nucleotide polymorphism site which is the base C or T present at the position of the base number 96, and (a) a single nucleotide polymorphism site which is the base C or T which is present at the position of the base number 133;
(19) (A) to (D) of SEQ ID NO: 19:
(A) a single nucleotide polymorphic site which is base A or G present at the position of base number 261,
(A) a single nucleotide polymorphic site which is base C or T present at the position of base number 282;
(C) a single nucleotide polymorphic site that is base C or T present at the position of base number 371, and (d) a single nucleotide polymorphic site that is base C or T present at the position of base number 440;
(20) (A) and (A) of SEQ ID NO: 20:
(A) a single nucleotide polymorphism site that is base A or G present at the position of base number 247, and (b) a single nucleotide polymorphism site that is base C or T present at the position of base number 362;
(21) From SEQ ID NO: 21, (a) to (d):
(A) a single nucleotide polymorphic site which is base A or G present at the position of base number 82;
(A) a single nucleotide polymorphic site which is base A or G present at the position of base number 91;
(C) a single nucleotide polymorphic site which is the base G or T present at the position of the base number 139, and (d) a single nucleotide polymorphic site which is the base C or T present at the position of the base number 140;
(22) (a) a single nucleotide polymorphism site which is a deletion or non-deletion of base A present at positions of base numbers 359 to 364 of SEQ ID NO: 22;
(23) (A) and (I) of SEQ ID NO: 23:
(A) a single nucleotide polymorphic site which is the base A or T present at the position of the base number 420, and (a) a single nucleotide polymorphic site which is the base C or G present at the position of the base number 485;
(24) (A) to (C) of SEQ ID NO: 24:
(A) a single nucleotide polymorphic site which is base C or T present at the position of base number 189;
(A) a single nucleotide polymorphic site which is base A or G present at the position of base number 209,
(C) a single nucleotide polymorphic site which is base C or T present at the position of base number 218,
(D) a single nucleotide polymorphic site which is base C or T present at the position of base number 260;
(E) a single nucleotide polymorphic site which is base C or T present at the position of base number 283,
(F) a single nucleotide polymorphic site which is base C or G present at the position of base number 315,
(G) a single nucleotide polymorphic site which is base A or G present at the position of base number 379;
(H) a single nucleotide polymorphic site which is base C or T present at the position of base number 385,
(G) a single nucleotide polymorphic site which is base A or C present at the position of base number 551, and (co) a single nucleotide polymorphic site which is base C or T present at the position of base number 597;
(25) (A) to (G) of SEQ ID NO: 25:
(A) a single nucleotide polymorphic site which is base C or T present at the position of base number 62;
(A) a single nucleotide polymorphic site which is base A or G present at the position of base number 96;
(C) a single nucleotide polymorphic site which is base A or G present at the position of base number 171;
(D) a single nucleotide polymorphic site which is base C or T present at the position of base number 176,
(E) a single nucleotide polymorphic site which is base C or T present at the position of base number 222;
(F) a single nucleotide polymorphic site which is base C or T present at the position of base number 228, and (g) a single nucleotide polymorphic site which is base A or G present at the position of base number 273;
(26) From SEQ ID NO: 26, (a) to (g):
(A) a single nucleotide polymorphic site which is base A or G present at the position of base number 57;
(A) a single nucleotide polymorphic site which is base A or G present at the position of base number 149;
(C) a single nucleotide polymorphic site which is base A or T present at the position of base number 221;
(D) a single nucleotide polymorphic site which is base A or G present at the position of base number 303;
(E) a single nucleotide polymorphic site which is base A or T present at the position of base number 350;
(F) a single nucleotide polymorphic site which is base A or T present at the position of base number 400, and (g) a single nucleotide polymorphic site which is base A or G present at the position of base number 434;
(27) (A) to (E) of SEQ ID NO: 27:
(A) a single nucleotide polymorphic site which is base A or G present at the position of base number 80;
(A) a single nucleotide polymorphism site which is a deletion or non-deletion of base A existing at positions from base numbers 116 to 122;
(C) a single nucleotide polymorphic site which is base A or G present at the position of base number 204;
(D) a single nucleotide polymorphism site that is base C or T present at the position of base number 249, and (e) a single nucleotide polymorphism site that is base G or T at the position of base number 389;
(28) From SEQ ID NO: 28, (a) to (e):
(A) a single nucleotide polymorphic site which is base A or C present at the position of base number 83;
(A) a single nucleotide polymorphic site which is base C or G present at the position of base number 169,
(C) a single nucleotide polymorphic site which is base C or T present at the position of base number 193,
(D) a single nucleotide polymorphic site which is base A or C present at the position of base number 215, and (e) a single nucleotide polymorphic site which is base A or G present at the position of base number 232;
(29) (a) a single nucleotide polymorphic site which is base A or G present at the position of base number 309 in SEQ ID NO: 29;
(30) (a) a single nucleotide polymorphic site which is base C or T present at the position of base number 216 of SEQ ID NO: 30;
(31) (a) a single nucleotide polymorphic site which is base C or T present at the position of base number 162 of SEQ ID NO: 31;
(32) (A) and (I) of SEQ ID NO: 32:
(A) a single nucleotide polymorphic site that is base C or T present at the position of base number 34, and (a) a single nucleotide polymorphic site that is base A or G present at the position of base number 336;
(33) (a) A single nucleotide polymorphic site which is base A or G present at the position of base number 361 in SEQ ID NO: 33.
一塩基多型部位が下の(1)(ア)から(3)(イ)の12個の一塩基多型部位の少なくとも1つである請求項7記載のオリゴヌクレオチドまたはその標識物:
(1)配列番号17の、(ア)から(オ):
(ア)塩基番号65の位置に存在する塩基A若しくはTである一塩基多型、
(イ)塩基番号158の位置に存在する塩基A若しくはGである一塩基多型、
(ウ)塩基番号236の位置に存在する塩基G若しくはTである一塩基多型、
(エ)塩基番号256の位置に存在する塩基A若しくはGである一塩基多型、及び
(オ)塩基番号474の位置に存在する塩基C若しくはTである一塩基多型;
(2)配列番号1の、(ア)から(オ):
(ア)塩基番号53の位置に存在する塩基C若しくはTである一塩基多型、
(イ)塩基番号170の位置に存在する塩基C若しくTはである一塩基多型、
(ウ)塩基番号185の位置に存在する塩基A若しくはGである一塩基多型、
(エ)塩基番号239の位置に存在する塩基G若しくはTである一塩基多型、及び
(オ)塩基番号298の位置に存在する塩基A若しくはGである一塩基多型;
(3)配列番号2の、(ア)及び(イ):
(ア)塩基番号104の位置に存在する塩基C若しくはTである一塩基多型、及び
(イ)塩基番号321の位置に存在する塩基C若しくはTである一塩基多型。
The oligonucleotide or label thereof according to claim 7, wherein the single nucleotide polymorphism site is at least one of the following 12 single nucleotide polymorphism sites (1) (a) to (3) (a):
(1) From SEQ ID NO: 17, (A) to (E):
(A) a single nucleotide polymorphism which is base A or T present at the position of base number 65,
(A) a single nucleotide polymorphism which is base A or G present at the position of base number 158,
(C) a single nucleotide polymorphism which is the base G or T present at the position of the base number 236,
(D) a single nucleotide polymorphism that is the base A or G existing at the position of the base number 256, and (e) a single nucleotide polymorphism that is the base C or T that exists at the position of the base number 474;
(2) SEQ ID NO: 1, (A) to (E):
(A) a single nucleotide polymorphism which is the base C or T present at the position of base number 53;
(A) a single nucleotide polymorphism in which the base C or T present at the position of base number 170 is
(C) a single nucleotide polymorphism which is base A or G present at the position of base number 185,
(D) a single nucleotide polymorphism that is the base G or T existing at the position of the base number 239, and (e) a single nucleotide polymorphism that is the base A or G that exists at the position of the base number 298;
(3) (A) and (A) of SEQ ID NO: 2:
(A) A single nucleotide polymorphism that is the base C or T existing at the position of the base number 104, and (b) a single nucleotide polymorphism that is the base C or T that exists at the position of the base number 321.
プローブとして用いられる請求項7または8に記載のオリゴヌクレオチドまたはその標識物。   The oligonucleotide or label thereof according to claim 7 or 8, which is used as a probe. 請求項7または8に記載のオリゴヌクレオチドまたはその標識物を固定化した固定化基板。   An immobilized substrate on which the oligonucleotide according to claim 7 or 8 or a label thereof is immobilized. 請求項1〜3のいずれか1項に記載のプライマーセット、請求項7記載のオリゴヌクレオチドもしくはその標識物または請求項10記載の固定化基板を含む酵母菌株識別キット。   A yeast strain identification kit comprising the primer set according to any one of claims 1 to 3, the oligonucleotide according to claim 7 or a label thereof, or the immobilized substrate according to claim 10. 請求項1〜3のいずれか1項に記載のプライマーセット、請求項7記載のオリゴヌクレオチドもしくはその標識物または請求項10記載の固定化基板を含む酵母菌株分類キット。   A yeast strain classification kit comprising the primer set according to any one of claims 1 to 3, the oligonucleotide according to claim 7 or a label thereof, or the immobilized substrate according to claim 10. 請求項4〜6のいずれか1項に記載のプライマーセット、請求項8記載のオリゴヌクレオチドもしくはその標識物または請求項10記載の固定化基板を含む酵母選抜キット。   A yeast selection kit comprising the primer set according to any one of claims 4 to 6, the oligonucleotide according to claim 8 or a label thereof, or the immobilized substrate according to claim 10. 酵母のゲノムDNAについて下記(1)から(33)のいずれか、又は(1)から(33)から複数個を選んだ組み合わせからなるアレルの検出を行い、その結果に基づいて酵母の菌株を特定することを特徴とする、酵母の菌株の識別方法:
(1)配列番号1の、(ア)から(キ)の、少なくとも1つ:
(ア)塩基番号53の位置に存在する塩基C若しくはTであるアレル、
(イ)塩基番号140の位置に存在する塩基A若しくはGであるアレル、
(ウ)塩基番号170の位置に存在する塩基C若しくTはであるアレル、
(エ)塩基番号185の位置に存在する塩基A若しくはGであるアレル、
(オ)塩基番号225の位置に存在する塩基A若しくはGであるアレル、
(カ)塩基番号239の位置に存在する塩基G若しくはTであるアレル、及び
(キ)塩基番号298の位置に存在する塩基A若しくはGであるアレル;
(2)配列番号2の、(ア)から(オ)の、少なくとも1つ:
(ア)塩基番号104の位置に存在する塩基C若しくはTであるアレル、
(イ)塩基番号149の位置に存在する塩基A若しくはGであるアレル、
(ウ)塩基番号304の位置に存在する塩基C若しくはTであるアレル、
(エ)塩基番号321の位置に存在する塩基C若しくはTであるアレル、及び
(オ)塩基番号322の位置に存在する塩基A若しくはGであるアレル;
(3)配列番号3の、(ア)から(ウ)の、少なくとも1つ:
(ア)塩基番号125の位置に存在する塩基C若しくはTであるアレル、
(イ)塩基番号145の位置に存在する塩基A若しくはGであるアレル、
(ウ)塩基番号351から354の位置に存在する3塩基の挿入若しくは非挿入であるアレル;
(4)配列番号4の、(ア)から(コ)の、少なくとも1つ:
(ア)塩基番号67の位置に存在する塩基C若しくはTであるアレル、
(イ)塩基番号74の位置に存在する塩基C若しくはTであるアレル、
(ウ)塩基番号104の位置に存在する塩基A若しくはGであるアレル、
(エ)塩基番号160の位置に存在する塩基C若しくはTであるアレル、
(オ)塩基番号268の位置に存在する塩基A若しくはCであるアレル、
(カ)塩基番号269の位置に存在する塩基C若しくはTであるアレル、
(キ)塩基番号324の位置に存在する塩基A若しくはGであるアレル、
(ク)塩基番号446の位置に存在する塩基C若しくはTであるアレル、
(ケ)塩基番号453の位置に存在する塩基G若しくはTであるアレル、及び
(コ)塩基番号466の位置に存在する塩基A若しくはGであるアレル;
(5)配列番号5の、(ア)及び(イ)の、少なくとも1つ:
(ア)塩基番号431の位置に存在する塩基A若しくはGであるアレル、及び
(イ)塩基番号464の位置に存在する塩基C若しくはTであるアレル;
(6)配列番号6の、(ア)から(シ)の、少なくとも1つ:
(ア)塩基番号75の位置に存在する塩基A若しくはCであるアレル、
(イ)塩基番号185の位置に存在する塩基C若しくはTであるアレル、
(ウ)塩基番号216の位置に存在する塩基C若しくはTであるアレル、
(エ)塩基番号217の位置に存在する塩基A若しくはCであるアレル、
(オ)塩基番号253の位置に存在する塩基A若しくはCであるアレル、
(カ)塩基番号269の位置に存在する塩基C若しくはTであるアレル、
(キ)塩基番号318の位置に存在する塩基C若しくはTであるアレル、
(ク)塩基番号441の位置に存在する塩基A若しくはTであるアレル、
(ケ)塩基番号444の位置に存在する塩基A若しくはGであるアレル、
(コ)塩基番号445の位置に存在する塩基A若しくはTであるアレル、
(サ)塩基番号463の位置に存在する塩基C若しくはTであるアレル、及び
(シ)塩基番号493の位置に存在する塩基C若しくはTであるアレル;
(7)配列番号7の、(ア)から(カ)の、少なくとも1つ:
(ア)塩基番号213の位置に存在する塩基A若しくはGであるアレル、
(イ)塩基番号243の位置に存在する塩基A若しくはGであるアレル、
(ウ)塩基番号290の位置に存在する塩基C若しくはTであるアレル、
(エ)塩基番号348の位置に存在する塩基A若しくはTであるアレル、
(オ)塩基番号350の位置に存在する塩基A若しくはGであるアレル、及び
(カ)塩基番号378の位置に存在する塩基C若しくはTであるアレル;
(8)配列番号8の、(ア)から(オ)の、少なくとも1つ:
(ア)塩基番号88の位置に存在する塩基A若しくはGであるアレル、
(イ)塩基番号152の位置に存在する塩基C若しくはTであるアレル、
(ウ)塩基番号161の位置に存在する塩基C若しくはTであるアレル、
(エ)塩基番号309の位置に存在する塩基A若しくはGであるアレル、及び
(オ)塩基番号381の位置に存在する塩基C若しくはTであるアレル;
(9)配列番号9の、(ア)から(ウ)の、少なくとも1つ:
(ア)塩基番号66の位置に存在する塩基C若しくはTであるアレル、
(イ)塩基番号229の位置に存在する塩基C若しくはTであるアレル、及び
(ウ)塩基番号262の位置に存在する塩基A若しくはTであるアレル;
(10)配列番号10の、(ア)から(ウ)の、少なくとも1つ:
(ア)塩基番号163から170の位置に存在する1塩基Tの欠失若しくは非欠失であるアレル、
(イ)塩基番号309から317の位置に存在する1塩基Aの欠失若しくは非欠失であるアレル、及び
(ウ)塩基番号356の位置に存在する塩基A若しくはCであるアレル;
(11)配列番号11の、(ア)から(キ)の、少なくとも1つ:
(ア)塩基番号69の位置に存在する塩基A若しくはTであるアレル、
(イ)塩基番号93の位置に存在する塩基C若しくはTであるアレル、
(ウ)塩基番号111の位置に存在する塩基A若しくはGであるアレル、
(エ)塩基番号208の位置に存在する塩基C若しくはTであるアレル、
(オ)塩基番号210の位置に存在する塩基A若しくはGであるアレル、
(カ)塩基番号408の位置に存在する塩基C若しくはTであるアレル、及び
(キ)塩基番号429の位置に存在する塩基A若しくはGであるアレル;
(12)配列番号12の、(ア)から(ウ)の、少なくとも1つ:
(ア)塩基番号104の位置に存在する塩基A若しくはGであるアレル、
(イ)塩基番号151の位置に存在する塩基C若しくはGであるアレル、及び
(ウ)塩基番号343の位置に存在する塩基C若しくはTであるアレル;
(13)配列番号13の、(ア)から(ウ)の、少なくとも1つ:
(ア)塩基番号126の位置に存在する塩基A若しくはGであるアレル、
(イ)塩基番号201の位置に存在する塩基C若しくはGであるアレル、及び
(ウ)塩基番号264の位置に存在する塩基A若しくはGであるアレル;
(14)配列番号14の、(ア)から(ウ)の、少なくとも1つ:
(ア)塩基番号132の位置に存在する塩基A若しくはCであるアレル、
(イ)塩基番号185の位置に存在する塩基A若しくはCであるアレル、及び
(ウ)塩基番号189の位置に存在する塩基C若しくはTであるアレル;
(15)配列番号15の、(ア)から(オ)の、少なくとも1つ:
(ア)塩基番号101の位置に存在する塩基C若しくはTであるアレル、
(イ)塩基番号183の位置に存在する塩基C若しくはTであるアレル、
(ウ)塩基番号188から192の位置に存在する1塩基Aの挿入若しくは非挿入であるアレル、
(エ)塩基番号280の位置に存在する塩基C若しくはTであるアレル、及び
(オ)塩基番号338の位置に存在する塩基若GしくはTであるアレル;
(16)配列番号16の、(ア)から(サ)の、少なくとも1つ:
(ア)塩基番号134の位置に存在する塩基A若しくはTであるアレル、
(イ)塩基番号135の位置に存在する塩基A若しくはTであるアレル、
(ウ)塩基番号137の位置に存在する塩基C若しくはTであるアレル、
(エ)塩基番号138の位置に存在する塩基A若しくはTであるアレル、
(オ)塩基番号142の位置に存在する塩基A若しくはGであるアレル、
(カ)塩基番号165の位置に存在する塩基A若しくはGであるアレル、
(キ)塩基番号183の位置に存在する塩基C若しくはTであるアレル、
(ク)塩基番号219の位置に存在する塩基A若しくはCであるアレル、
(ケ)塩基番号232の位置に存在する塩基C若しくはGであるアレル、
(コ)塩基番号293の位置に存在する塩基A若しくはでGあるアレル、及び
(サ)塩基番号332の位置に存在する塩基C若しくはTであるアレル;
(17)配列番号17の、(ア)から(オ)の、少なくとも1つ:
(ア)塩基番号65の位置に存在する塩基A若しくはTであるアレル、
(イ)塩基番号158の位置に存在する塩基A若しくはGであるアレル、
(ウ)塩基番号236の位置に存在する塩基G若しくはTであるアレル、
(エ)塩基番号256の位置に存在する塩基A若しくはGであるアレル、及び
(オ)塩基番号474の位置に存在する塩基C若しくはTであるアレル;
(18)配列番号18の、(ア)及び(イ)の、少なくとも1つ:
(ア)塩基番号96の位置に存在する塩基C若しくはTであるアレル、及び
(イ)塩基番号133の位置に存在する塩基C若しくはTであるアレル;
(19)配列番号19の、(ア)から(エ)の、少なくとも1つ:
(ア)塩基番号261の位置に存在する塩基A若しくはGであるアレル、
(イ)塩基番号282の位置に存在する塩基C若しくはTであるアレル、
(ウ)塩基番号371の位置に存在する塩基C若しくはTであるアレル、及び
(エ)塩基番号440の位置に存在する塩基C若しくはTであるアレル;
(20)配列番号20の、(ア)及び(イ)の、少なくとも1つ:
(ア)塩基番号247の位置に存在する塩基A若しくはGであるアレル、及び
(イ)塩基番号362の位置に存在する塩基C若しくはTであるアレル;
(21)配列番号21の、(ア)から(エ)の、少なくとも1つ:
(ア)塩基番号82の位置に存在する塩基A若しくはGであるアレル、
(イ)塩基番号91の位置に存在する塩基A若しくはGであるアレル、
(ウ)塩基番号139の位置に存在する塩基G若しくはTであるアレル、及び
(エ)塩基番号140の位置に存在する塩基C若しくはTであるアレル;
(22)(ア)配列番号22の、塩基番号359から364の位置に存在する塩基Aの欠失若しくは非欠失であるアレル;
(23)配列番号23の、(ア)及び(イ)の、少なくとも1つ:
(ア)塩基番号420の位置に存在する塩基A若しくはTであるアレル、及び
(イ)塩基番号485の位置に存在する塩基C若しくはGであるアレル;
(24)配列番号24の、(ア)から(コ)の、少なくとも1つ:
(ア)塩基番号189の位置に存在する塩基C若しくはTであるアレル、
(イ)塩基番号209の位置に存在する塩基A若しくはGであるアレル、
(ウ)塩基番号218の位置に存在する塩基C若しくはTであるアレル、
(エ)塩基番号260の位置に存在する塩基C若しくはTであるアレル、
(オ)塩基番号283の位置に存在する塩基C若しくはTであるアレル、
(カ)塩基番号315の位置に存在する塩基C若しくはGであるアレル、
(キ)塩基番号379の位置に存在する塩基A若しくはGであるアレル、
(ク)塩基番号385の位置に存在する塩基C若しくはTであるアレル、
(ケ)塩基番号551の位置に存在する塩基A若しくはCであるアレル、及び
(コ)塩基番号597の位置に存在する塩基C若しくはTであるアレル;
(25)配列番号25の、(ア)から(キ)の、少なくとも1つ:
(ア)塩基番号62の位置に存在する塩基C若しくはTであるアレル、
(イ)塩基番号96の位置に存在する塩基A若しくはGであるアレル、
(ウ)塩基番号171の位置に存在する塩基A若しくはGであるアレル、
(エ)塩基番号176の位置に存在する塩基C若しくはTであるアレル、
(オ)塩基番号222の位置に存在する塩基C若しくはTであるアレル、
(カ)塩基番号228の位置に存在する塩基C若しくはTであるアレル、及び
(キ)塩基番号273の位置に存在する塩基A若しくはGであるアレル;
(26)配列番号26の、(ア)から(キ)の、少なくとも1つ:
(ア)塩基番号57の位置に存在する塩基A若しくはGであるアレル、
(イ)塩基番号149の位置に存在する塩基A若しくはGであるアレル、
(ウ)塩基番号221の位置に存在する塩基A若しくはTであるアレル、
(エ)塩基番号303の位置に存在する塩基A若しくはGであるアレル、
(オ)塩基番号350の位置に存在する塩基A若しくはTであるアレル、
(カ)塩基番号400の位置に存在する塩基A若しくはTであるアレル、及び
(キ)塩基番号434の位置に存在する塩基A若しくはGであるアレル;
(27)配列番号27の、(ア)から(オ)の、少なくとも1つ:
(ア)塩基番号80の位置に存在する塩基A若しくはGであるアレル、
(イ)塩基番号116から122の位置に存在する塩基Aの欠失若しくは非欠失であるアレル、
(ウ)塩基番号204の位置に存在する塩基A若しくはGであるアレル、
(エ)塩基番号249の位置に存在する塩基C若しくはTであるアレル、及び
(オ)塩基番号389の位置に存在する塩基G若しくはTであるアレル;
(28)配列番号28の、(ア)から(オ)の、少なくとも1つ:
(ア)塩基番号83の位置に存在する塩基A若しくはCであるアレル、
(イ)塩基番号169の位置に存在する塩基C若しくはGであるアレル、
(ウ)塩基番号193の位置に存在する塩基C若しくはTであるアレル、
(エ)塩基番号215の位置に存在する塩基A若しくはCであるアレル、及び
(オ)塩基番号232の位置に存在する塩基A若しくはGであるアレル;
(29)(ア)配列番号29の、塩基番号309の位置に存在する塩基A若しくはGであるアレル;
(30)(ア)配列番号30の、塩基番号216の位置に存在する塩基C若しくはTであるアレル;
(31)(ア)配列番号31の、塩基番号162の位置に存在する塩基C若しくはTであるアレル;
(32)配列番号32の、(ア)及び(イ)の、少なくとも1つ:
(ア)塩基番号34の位置に存在する塩基C若しくはTであるアレル、及び
(イ)塩基番号336の位置に存在する塩基A若しくはGであるアレル;
(33)(ア)配列番号33の、塩基番号361の位置に存在する塩基A若しくはGであるアレル。
For yeast genomic DNA, alleles consisting of a combination selected from (1) to (33) below or a plurality selected from (1) to (33) are detected, and yeast strains are identified based on the results. A method for identifying a strain of yeast characterized by:
(1) At least one of (a) to (ki) of SEQ ID NO: 1:
(A) an allele which is a base C or T present at the position of base number 53,
(A) an allele that is base A or G present at the position of base number 140;
(C) an allele whose base C or T is at the position of base number 170,
(D) an allele that is base A or G present at the position of base number 185,
(E) an allele that is base A or G present at the position of base number 225,
(F) an allele which is the base G or T present at the position of the base number 239, and (g) an allele which is the base A or G present at the position of the base number 298;
(2) at least one of (a) to (e) of SEQ ID NO: 2:
(A) an allele which is the base C or T present at the position of the base number 104;
(A) an allele that is base A or G present at the position of base number 149;
(C) an allele that is base C or T present at the position of base number 304,
(D) an allele which is the base C or T present at the position of the base number 321 and (e) an allele which is the base A or G present at the position of the base number 322;
(3) at least one of (a) to (c) of SEQ ID NO: 3:
(A) an allele which is a base C or T present at the position of base number 125,
(A) an allele that is base A or G present at the position of base number 145;
(C) an allele with insertion or non-insertion of 3 bases present at positions of base numbers 351 to 354;
(4) at least one of (a) to (co) of SEQ ID NO: 4:
(A) an allele which is a base C or T present at the position of base number 67,
(A) an allele which is a base C or T present at the position of base number 74;
(C) an allele that is base A or G present at the position of base number 104;
(D) an allele which is a base C or T present at the position of base number 160;
(E) an allele that is base A or C present at the position of base number 268,
(F) an allele that is base C or T present at the position of base number 269;
(G) an allele that is base A or G present at the position of base number 324;
(H) an allele that is base C or T present at the position of base number 446;
(G) an allele which is the base G or T present at the position of the base number 453, and (co) an allele which is the base A or G present at the position of the base number 466;
(5) At least one of (a) and (b) of SEQ ID NO: 5:
(A) an allele which is the base A or G present at the position of the base number 431, and (b) an allele which is the base C or T present at the position of the base number 464;
(6) At least one of (A) to (B) of SEQ ID NO: 6:
(A) an allele that is base A or C present at the position of base number 75;
(A) an allele which is the base C or T present at the position of the base number 185,
(C) an allele which is the base C or T present at the position of the base number 216,
(D) an allele that is base A or C present at the position of base number 217,
(E) an allele that is base A or C present at the position of base number 253,
(F) an allele that is base C or T present at the position of base number 269;
(G) an allele that is base C or T present at the position of base number 318,
(H) an allele that is base A or T present at the position of base number 441;
(G) an allele that is base A or G present at the position of base number 444;
(E) an allele that is base A or T present at the position of base number 445;
(Sa) an allele that is a base C or T present at the position of base number 463, and (f) an allele that is a base C or T present at the position of base number 493;
(7) At least one of (a) to (f) of SEQ ID NO: 7:
(A) an allele that is base A or G present at the position of base number 213,
(A) an allele that is base A or G present at the position of base number 243;
(C) an allele that is base C or T present at the position of base number 290,
(D) an allele that is base A or T present at the position of base number 348;
(E) an allele which is the base A or G present at the position of the base number 350, and (f) an allele which is the base C or T present at the position of the base number 378;
(8) at least one of (A) to (E) of SEQ ID NO: 8:
(A) an allele that is base A or G present at the position of base number 88;
(A) an allele which is a base C or T present at the position of base number 152;
(C) an allele that is base C or T present at the position of base number 161;
(D) an allele which is the base A or G present at the position of the base number 309, and (e) an allele which is the base C or T present at the position of the base number 381;
(9) At least one of (A) to (U) of SEQ ID NO: 9:
(A) an allele which is a base C or T present at the position of base number 66;
(A) an allele that is the base C or T present at the position of the base number 229, and (c) an allele that is the base A or T at the position of the base number 262;
(10) At least one of (a) to (c) of SEQ ID NO: 10:
(A) an allele that is a deletion or non-deletion of 1 base T present at positions from base numbers 163 to 170;
(A) an allele that is deleted or non-deletion of 1 base A present at the position of base numbers 309 to 317, and (c) an allele that is base A or C at the position of base number 356;
(11) At least one of (a) to (ki) of SEQ ID NO: 11:
(A) an allele that is base A or T present at the position of base number 69;
(A) an allele which is a base C or T present at the position of base number 93;
(C) an allele that is base A or G present at the position of base number 111;
(D) an allele which is the base C or T present at the position of the base number 208;
(E) an allele that is base A or G present at the position of base number 210;
(F) an allele which is the base C or T present at the position of the base number 408, and (g) an allele which is the base A or G present at the position of the base number 429;
(12) At least one of (a) to (c) of SEQ ID NO: 12:
(A) an allele that is base A or G present at the position of base number 104;
(A) an allele that is the base C or G present at the position of the base number 151, and (c) an allele that is the base C or T present at the position of the base number 343;
(13) at least one of (a) to (c) of SEQ ID NO: 13:
(A) an allele that is base A or G present at the position of base number 126;
(A) an allele that is the base C or G present at the position of the base number 201, and (c) an allele that is the base A or G present at the position of the base number 264;
(14) At least one of (A) to (U) of SEQ ID NO: 14:
(A) an allele that is base A or C present at the position of base number 132;
(A) an allele that is base A or C present at the position of base number 185, and (c) an allele that is base C or T present at the position of base number 189;
(15) at least one of (A) to (E) of SEQ ID NO: 15:
(A) an allele that is base C or T present at the position of base number 101,
(A) an allele that is base C or T present at the position of base number 183,
(C) an allele that is inserted or non-inserted into 1 base A existing at positions of base numbers 188 to 192,
(D) an allele which is the base C or T present at the position of the base number 280, and (e) an allele which is the base G or T present at the position of the base number 338;
(16) At least one of (a) to (sa) of SEQ ID NO: 16:
(A) an allele that is base A or T present at the position of base number 134;
(A) an allele that is base A or T present at the position of base number 135;
(C) an allele that is base C or T present at the position of base number 137,
(D) an allele that is base A or T present at the position of base number 138;
(E) an allele that is base A or G present at the position of base number 142;
(F) an allele that is base A or G present at the position of base number 165,
(G) an allele that is base C or T present at the position of base number 183,
(H) an allele that is base A or C present at the position of base number 219,
(G) an allele that is base C or G present at the position of base number 232;
(Co) an allele that is base A or G at the position of base number 293, and (sa) an allele that is base C or T at the position of base number 332;
(17) at least one of (a) to (e) of SEQ ID NO: 17:
(A) an allele that is base A or T present at the position of base number 65,
(A) an allele that is base A or G present at the position of base number 158,
(C) an allele that is the base G or T at the position of base number 236,
(D) an allele that is base A or G present at the position of base number 256, and (e) an allele that is base C or T at the position of base number 474;
(18) at least one of (a) and (b) of SEQ ID NO: 18:
(A) an allele which is the base C or T present at the position of the base number 96, and (a) an allele which is the base C or T present at the position of the base number 133;
(19) At least one of (a) to (e) of SEQ ID NO: 19:
(A) an allele that is base A or G present at the position of base number 261,
(A) an allele that is base C or T present at the position of base number 282,
(C) an allele that is base C or T present at the position of base number 371, and (d) an allele that is base C or T at the position of base number 440;
(20) At least one of (a) and (b) of SEQ ID NO: 20:
(A) an allele which is the base A or G present at the position of the base number 247, and (b) an allele which is the base C or T present at the position of the base number 362;
(21) at least one of (a) to (e) of SEQ ID NO: 21:
(A) an allele that is base A or G present at the position of base number 82;
(A) an allele that is base A or G present at the position of base number 91;
(C) an allele that is the base G or T present at the position of the base number 139, and (d) an allele that is the base C or T at the position of the base number 140;
(22) (a) an allele that is a deletion or non-deletion of base A present at positions of base numbers 359 to 364 of SEQ ID NO: 22;
(23) at least one of (a) and (b) of SEQ ID NO: 23:
(A) an allele which is the base A or T present at the position of the base number 420, and (b) an allele which is the base C or G present at the position of the base number 485;
(24) at least one of (a) to (co) of SEQ ID NO: 24:
(A) an allele which is the base C or T present at the position of base number 189,
(A) an allele that is base A or G present at the position of base number 209;
(C) an allele that is base C or T present at the position of base number 218,
(D) an allele that is base C or T present at the position of base number 260;
(E) an allele that is base C or T present at the position of base number 283,
(F) an allele that is base C or G present at the position of base number 315,
(G) an allele that is base A or G present at the position of base number 379;
(H) an allele which is the base C or T present at the position of the base number 385,
(G) an allele which is the base A or C present at the position of the base number 551, and (co) an allele which is the base C or T present at the position of the base number 597;
(25) at least one of (a) to (ki) of SEQ ID NO: 25:
(A) an allele which is a base C or T present at the position of base number 62;
(A) an allele that is base A or G present at the position of base number 96;
(C) an allele that is base A or G present at the position of base number 171;
(D) an allele that is base C or T present at the position of base number 176,
(E) an allele that is base C or T present at the position of base number 222;
(F) an allele which is the base C or T present at the position of the base number 228, and (g) an allele which is the base A or G present at the position of the base number 273;
(26) At least one of (a) to (ki) of SEQ ID NO: 26:
(A) an allele that is base A or G present at the position of base number 57;
(A) an allele that is base A or G present at the position of base number 149;
(C) an allele that is base A or T present at the position of base number 221;
(D) an allele that is base A or G present at the position of base number 303;
(E) an allele that is base A or T present at the position of base number 350;
(F) an allele that is base A or T present at the position of base number 400, and (g) an allele that is base A or G that is present at the position of base number 434;
(27) At least one of (a) to (e) in SEQ ID NO: 27:
(A) an allele that is base A or G present at the position of base number 80;
(A) an allele that is a deletion or non-deletion of base A present at positions from base numbers 116 to 122;
(C) an allele that is base A or G present at the position of base number 204;
(D) an allele that is base C or T present at the position of base number 249, and (e) an allele that is base G or T at the position of base number 389;
(28) At least one of (a) to (e) of SEQ ID NO: 28:
(A) an allele that is base A or C present at the position of base number 83;
(A) an allele which is a base C or G present at the position of base number 169,
(C) an allele that is base C or T present at the position of base number 193,
(D) an allele that is the base A or C existing at the position of the base number 215, and (e) an allele that is the base A or G that exists at the position of the base number 232;
(29) (a) an allele that is base A or G present at the position of base number 309 in SEQ ID NO: 29;
(30) (a) an allele which is the base C or T present at the position of base number 216 of SEQ ID NO: 30;
(31) (a) An allele of base C or T present in the position of base number 162 of SEQ ID NO: 31;
(32) At least one of (a) and (b) of SEQ ID NO: 32:
(A) an allele that is the base C or T present at the position of the base number 34, and (a) an allele that is the base A or G that is present at the position of the base number 336;
(33) (a) An allele of base A or G present at the position of base number 361 of SEQ ID NO: 33.
アレルの検出を請求項1から3のいずれか1項に記載のプライマーセット、請求項7記載のプローブまたは請求項10記載の固定化基板を用いて行う請求項14記載の方法。   The method according to claim 14, wherein the allele is detected using the primer set according to any one of claims 1 to 3, the probe according to claim 7, or the immobilized substrate according to claim 10. 酵母のゲノムDNAについて下記(1)から(33)のいずれか、又は(1)から(33)から複数個を選んだ組み合わせからなるアレルの検出を行い、その結果に基づいて複数の酵母菌株の類縁関係を決定することを特徴とする、酵母の菌株の分類方法:
(1)配列番号1の、(ア)から(キ)の、少なくとも1つ:
(ア)塩基番号53の位置に存在する塩基C若しくはTであるアレル、
(イ)塩基番号140の位置に存在する塩基A若しくはGであるアレル、
(ウ)塩基番号170の位置に存在する塩基C若しくTはであるアレル、
(エ)塩基番号185の位置に存在する塩基A若しくはGであるアレル、
(オ)塩基番号225の位置に存在する塩基A若しくはGであるアレル、
(カ)塩基番号239の位置に存在する塩基G若しくはTであるアレル、及び
(キ)塩基番号298の位置に存在する塩基A若しくはGであるアレル;
(2)配列番号2の、(ア)から(オ)の、少なくとも1つ:
(ア)塩基番号104の位置に存在する塩基C若しくはTであるアレル、
(イ)塩基番号149の位置に存在する塩基A若しくはGであるアレル、
(ウ)塩基番号304の位置に存在する塩基C若しくはTであるアレル、
(エ)塩基番号321の位置に存在する塩基C若しくはTであるアレル、及び
(オ)塩基番号322の位置に存在する塩基A若しくはGであるアレル;
(3)配列番号3の、(ア)から(ウ)の、少なくとも1つ:
(ア)塩基番号125の位置に存在する塩基C若しくはTであるアレル、
(イ)塩基番号145の位置に存在する塩基A若しくはGであるアレル、
(ウ)塩基番号351から354の位置に存在する3塩基の挿入若しくは非挿入であるアレル;
(4)配列番号4の、(ア)から(コ)の、少なくとも1つ:
(ア)塩基番号67の位置に存在する塩基C若しくはTであるアレル、
(イ)塩基番号74の位置に存在する塩基C若しくはTであるアレル、
(ウ)塩基番号104の位置に存在する塩基A若しくはGであるアレル、
(エ)塩基番号160の位置に存在する塩基C若しくはTであるアレル、
(オ)塩基番号268の位置に存在する塩基A若しくはCであるアレル、
(カ)塩基番号269の位置に存在する塩基C若しくはTであるアレル、
(キ)塩基番号324の位置に存在する塩基A若しくはGであるアレル、
(ク)塩基番号446の位置に存在する塩基C若しくはTであるアレル、
(ケ)塩基番号453の位置に存在する塩基G若しくはTであるアレル、及び
(コ)塩基番号466の位置に存在する塩基A若しくはGであるアレル;
(5)配列番号5の、(ア)及び(イ)の、少なくとも1つ:
(ア)塩基番号431の位置に存在する塩基A若しくはGであるアレル、及び
(イ)塩基番号464の位置に存在する塩基C若しくはTであるアレル;
(6)配列番号6の、(ア)から(シ)の、少なくとも1つ:
(ア)塩基番号75の位置に存在する塩基A若しくはCであるアレル、
(イ)塩基番号185の位置に存在する塩基C若しくはTであるアレル、
(ウ)塩基番号216の位置に存在する塩基C若しくはTであるアレル、
(エ)塩基番号217の位置に存在する塩基A若しくはCであるアレル、
(オ)塩基番号253の位置に存在する塩基A若しくはCであるアレル、
(カ)塩基番号269の位置に存在する塩基C若しくはTであるアレル、
(キ)塩基番号318の位置に存在する塩基C若しくはTであるアレル、
(ク)塩基番号441の位置に存在する塩基A若しくはTであるアレル、
(ケ)塩基番号444の位置に存在する塩基A若しくはGであるアレル、
(コ)塩基番号445の位置に存在する塩基A若しくはTであるアレル、
(サ)塩基番号463の位置に存在する塩基C若しくはTであるアレル、及び
(シ)塩基番号493の位置に存在する塩基C若しくはTであるアレル;
(7)配列番号7の、(ア)から(カ)の、少なくとも1つ:
(ア)塩基番号213の位置に存在する塩基A若しくはGであるアレル、
(イ)塩基番号243の位置に存在する塩基A若しくはGであるアレル、
(ウ)塩基番号290の位置に存在する塩基C若しくはTであるアレル、
(エ)塩基番号348の位置に存在する塩基A若しくはTであるアレル、
(オ)塩基番号350の位置に存在する塩基A若しくはGであるアレル、及び
(カ)塩基番号378の位置に存在する塩基C若しくはTであるアレル;
(8)配列番号8の、(ア)から(オ)の、少なくとも1つ:
(ア)塩基番号88の位置に存在する塩基A若しくはGであるアレル、
(イ)塩基番号152の位置に存在する塩基C若しくはTであるアレル、
(ウ)塩基番号161の位置に存在する塩基C若しくはTであるアレル、
(エ)塩基番号309の位置に存在する塩基A若しくはGであるアレル、及び
(オ)塩基番号381の位置に存在する塩基C若しくはTであるアレル;
(9)配列番号9の、(ア)から(ウ)の、少なくとも1つ:
(ア)塩基番号66の位置に存在する塩基C若しくはTであるアレル、
(イ)塩基番号229の位置に存在する塩基C若しくはTであるアレル、及び
(ウ)塩基番号262の位置に存在する塩基A若しくはTであるアレル;
(10)配列番号10の、(ア)から(ウ)の、少なくとも1つ:
(ア)塩基番号163から170の位置に存在する1塩基Tの欠失若しくは非欠失であるアレル、
(イ)塩基番号309から317の位置に存在する1塩基Aの欠失若しくは非欠失であるアレル、及び
(ウ)塩基番号356の位置に存在する塩基A若しくはCであるアレル;
(11)配列番号11の、(ア)から(キ)の、少なくとも1つ:
(ア)塩基番号69の位置に存在する塩基A若しくはTであるアレル、
(イ)塩基番号93の位置に存在する塩基C若しくはTであるアレル、
(ウ)塩基番号111の位置に存在する塩基A若しくはGであるアレル、
(エ)塩基番号208の位置に存在する塩基C若しくはTであるアレル、
(オ)塩基番号210の位置に存在する塩基A若しくはGであるアレル、
(カ)塩基番号408の位置に存在する塩基C若しくはTであるアレル、及び
(キ)塩基番号429の位置に存在する塩基A若しくはGであるアレル;
(12)配列番号12の、(ア)から(ウ)の、少なくとも1つ:
(ア)塩基番号104の位置に存在する塩基A若しくはGであるアレル、
(イ)塩基番号151の位置に存在する塩基C若しくはGであるアレル、及び
(ウ)塩基番号343の位置に存在する塩基C若しくはTであるアレル;
(13)配列番号13の、(ア)から(ウ)の、少なくとも1つ:
(ア)塩基番号126の位置に存在する塩基A若しくはGであるアレル、
(イ)塩基番号201の位置に存在する塩基C若しくはGであるアレル、及び
(ウ)塩基番号264の位置に存在する塩基A若しくはGであるアレル;
(14)配列番号14の、(ア)から(ウ)の、少なくとも1つ:
(ア)塩基番号132の位置に存在する塩基A若しくはCであるアレル、
(イ)塩基番号185の位置に存在する塩基A若しくはCであるアレル、及び
(ウ)塩基番号189の位置に存在する塩基C若しくはTであるアレル;
(15)配列番号15の、(ア)から(オ)の、少なくとも1つ:
(ア)塩基番号101の位置に存在する塩基C若しくはTであるアレル、
(イ)塩基番号183の位置に存在する塩基C若しくはTであるアレル、
(ウ)塩基番号188から192の位置に存在する1塩基Aの挿入若しくは非挿入であるアレル、
(エ)塩基番号280の位置に存在する塩基C若しくはTであるアレル、及び
(オ)塩基番号338の位置に存在する塩基若GしくはTであるアレル;
(16)配列番号16の、(ア)から(サ)の、少なくとも1つ:
(ア)塩基番号134の位置に存在する塩基A若しくはTであるアレル、
(イ)塩基番号135の位置に存在する塩基A若しくはTであるアレル、
(ウ)塩基番号137の位置に存在する塩基C若しくはTであるアレル、
(エ)塩基番号138の位置に存在する塩基A若しくはTであるアレル、
(オ)塩基番号142の位置に存在する塩基A若しくはGであるアレル、
(カ)塩基番号165の位置に存在する塩基A若しくはGであるアレル、
(キ)塩基番号183の位置に存在する塩基C若しくはTであるアレル、
(ク)塩基番号219の位置に存在する塩基A若しくはCであるアレル、
(ケ)塩基番号232の位置に存在する塩基C若しくはGであるアレル、
(コ)塩基番号293の位置に存在する塩基A若しくはでGあるアレル、及び
(サ)塩基番号332の位置に存在する塩基C若しくはTであるアレル;
(17)配列番号17の、(ア)から(オ)の、少なくとも1つ:
(ア)塩基番号65の位置に存在する塩基A若しくはTであるアレル、
(イ)塩基番号158の位置に存在する塩基A若しくはGであるアレル、
(ウ)塩基番号236の位置に存在する塩基G若しくはTであるアレル、
(エ)塩基番号256の位置に存在する塩基A若しくはGであるアレル、及び
(オ)塩基番号474の位置に存在する塩基C若しくはTであるアレル;
(18)配列番号18の、(ア)及び(イ)の、少なくとも1つ:
(ア)塩基番号96の位置に存在する塩基C若しくはTであるアレル、及び
(イ)塩基番号133の位置に存在する塩基C若しくはTであるアレル;
(19)配列番号19の、(ア)から(エ)の、少なくとも1つ:
(ア)塩基番号261の位置に存在する塩基A若しくはGであるアレル、
(イ)塩基番号282の位置に存在する塩基C若しくはTであるアレル、
(ウ)塩基番号371の位置に存在する塩基C若しくはTであるアレル、及び
(エ)塩基番号440の位置に存在する塩基C若しくはTであるアレル;
(20)配列番号20の、(ア)及び(イ)の、少なくとも1つ:
(ア)塩基番号247の位置に存在する塩基A若しくはGであるアレル、及び
(イ)塩基番号362の位置に存在する塩基C若しくはTであるアレル;
(21)配列番号21の、(ア)から(エ)の、少なくとも1つ:
(ア)塩基番号82の位置に存在する塩基A若しくはGであるアレル、
(イ)塩基番号91の位置に存在する塩基A若しくはGであるアレル、
(ウ)塩基番号139の位置に存在する塩基G若しくはTであるアレル、及び
(エ)塩基番号140の位置に存在する塩基C若しくはTであるアレル;
(22)(ア)配列番号22の、塩基番号359から364の位置に存在する塩基Aの欠失若しくは非欠失であるアレル;
(23)配列番号23の、(ア)及び(イ)の、少なくとも1つ:
(ア)塩基番号420の位置に存在する塩基A若しくはTであるアレル、及び
(イ)塩基番号485の位置に存在する塩基C若しくはGであるアレル;
(24)配列番号24の、(ア)から(コ)の、少なくとも1つ:
(ア)塩基番号189の位置に存在する塩基C若しくはTであるアレル、
(イ)塩基番号209の位置に存在する塩基A若しくはGであるアレル、
(ウ)塩基番号218の位置に存在する塩基C若しくはTであるアレル、
(エ)塩基番号260の位置に存在する塩基C若しくはTであるアレル、
(オ)塩基番号283の位置に存在する塩基C若しくはTであるアレル、
(カ)塩基番号315の位置に存在する塩基C若しくはGであるアレル、
(キ)塩基番号379の位置に存在する塩基A若しくはGであるアレル、
(ク)塩基番号385の位置に存在する塩基C若しくはTであるアレル、
(ケ)塩基番号551の位置に存在する塩基A若しくはCであるアレル、及び
(コ)塩基番号597の位置に存在する塩基C若しくはTであるアレル;
(25)配列番号25の、(ア)から(キ)の、少なくとも1つ:
(ア)塩基番号62の位置に存在する塩基C若しくはTであるアレル、
(イ)塩基番号96の位置に存在する塩基A若しくはGであるアレル、
(ウ)塩基番号171の位置に存在する塩基A若しくはGであるアレル、
(エ)塩基番号176の位置に存在する塩基C若しくはTであるアレル、
(オ)塩基番号222の位置に存在する塩基C若しくはTであるアレル、
(カ)塩基番号228の位置に存在する塩基C若しくはTであるアレル、及び
(キ)塩基番号273の位置に存在する塩基A若しくはGであるアレル;
(26)配列番号26の、(ア)から(キ)の、少なくとも1つ:
(ア)塩基番号57の位置に存在する塩基A若しくはGであるアレル、
(イ)塩基番号149の位置に存在する塩基A若しくはGであるアレル、
(ウ)塩基番号221の位置に存在する塩基A若しくはTであるアレル、
(エ)塩基番号303の位置に存在する塩基A若しくはGであるアレル、
(オ)塩基番号350の位置に存在する塩基A若しくはTであるアレル、
(カ)塩基番号400の位置に存在する塩基A若しくはTであるアレル、及び
(キ)塩基番号434の位置に存在する塩基A若しくはGであるアレル;
(27)配列番号27の、(ア)から(オ)の、少なくとも1つ:
(ア)塩基番号80の位置に存在する塩基A若しくはGであるアレル、
(イ)塩基番号116から122の位置に存在する塩基Aの欠失若しくは非欠失であるアレル、
(ウ)塩基番号204の位置に存在する塩基A若しくはGであるアレル、
(エ)塩基番号249の位置に存在する塩基C若しくはTであるアレル、及び
(オ)塩基番号389の位置に存在する塩基G若しくはTであるアレル;
(28)配列番号28の、(ア)から(オ)の、少なくとも1つ:
(ア)塩基番号83の位置に存在する塩基A若しくはCであるアレル、
(イ)塩基番号169の位置に存在する塩基C若しくはGであるアレル、
(ウ)塩基番号193の位置に存在する塩基C若しくはTであるアレル、
(エ)塩基番号215の位置に存在する塩基A若しくはCであるアレル、及び
(オ)塩基番号232の位置に存在する塩基A若しくはGであるアレル;
(29)(ア)配列番号29の、塩基番号309の位置に存在する塩基A若しくはGであるアレル;
(30)(ア)配列番号30の、塩基番号216の位置に存在する塩基C若しくはTであるアレル;
(31)(ア)配列番号31の、塩基番号162の位置に存在する塩基C若しくはTであるアレル;
(32)配列番号32の、(ア)及び(イ)の、少なくとも1つ:
(ア)塩基番号34の位置に存在する塩基C若しくはTであるアレル、及び
(イ)塩基番号336の位置に存在する塩基A若しくはGであるアレル;
(33)(ア)配列番号33の、塩基番号361の位置に存在する塩基A若しくはGであるアレル。
For the genomic DNA of yeast, an allele comprising any combination selected from (1) to (33) below or a plurality selected from (1) to (33) is detected, and based on the results, a plurality of yeast strains are detected. A method for classifying yeast strains, characterized by determining an affinity relationship:
(1) At least one of (a) to (ki) of SEQ ID NO: 1:
(A) an allele which is a base C or T present at the position of base number 53,
(A) an allele that is base A or G present at the position of base number 140;
(C) an allele whose base C or T is at the position of base number 170,
(D) an allele that is base A or G present at the position of base number 185,
(E) an allele that is base A or G present at the position of base number 225,
(F) an allele which is the base G or T present at the position of the base number 239, and (g) an allele which is the base A or G present at the position of the base number 298;
(2) at least one of (a) to (e) of SEQ ID NO: 2:
(A) an allele which is the base C or T present at the position of the base number 104;
(A) an allele that is base A or G present at the position of base number 149;
(C) an allele that is base C or T present at the position of base number 304,
(D) an allele which is the base C or T present at the position of the base number 321 and (e) an allele which is the base A or G present at the position of the base number 322;
(3) at least one of (a) to (c) of SEQ ID NO: 3:
(A) an allele which is a base C or T present at the position of base number 125,
(A) an allele that is base A or G present at the position of base number 145;
(C) an allele with insertion or non-insertion of 3 bases present at positions of base numbers 351 to 354;
(4) at least one of (a) to (co) of SEQ ID NO: 4:
(A) an allele which is a base C or T present at the position of base number 67,
(A) an allele which is a base C or T present at the position of base number 74;
(C) an allele that is base A or G present at the position of base number 104;
(D) an allele which is a base C or T present at the position of base number 160;
(E) an allele that is base A or C present at the position of base number 268,
(F) an allele that is base C or T present at the position of base number 269;
(G) an allele that is base A or G present at the position of base number 324;
(H) an allele that is base C or T present at the position of base number 446;
(G) an allele which is the base G or T present at the position of the base number 453, and (co) an allele which is the base A or G present at the position of the base number 466;
(5) At least one of (a) and (b) of SEQ ID NO: 5:
(A) an allele which is the base A or G present at the position of the base number 431, and (b) an allele which is the base C or T present at the position of the base number 464;
(6) At least one of (A) to (B) of SEQ ID NO: 6:
(A) an allele that is base A or C present at the position of base number 75;
(A) an allele which is the base C or T present at the position of the base number 185,
(C) an allele which is the base C or T present at the position of the base number 216,
(D) an allele that is base A or C present at the position of base number 217,
(E) an allele that is base A or C present at the position of base number 253,
(F) an allele that is base C or T present at the position of base number 269;
(G) an allele that is base C or T present at the position of base number 318,
(H) an allele that is base A or T present at the position of base number 441;
(G) an allele that is base A or G present at the position of base number 444;
(E) an allele that is base A or T present at the position of base number 445;
(Sa) an allele that is a base C or T present at the position of base number 463, and (f) an allele that is a base C or T present at the position of base number 493;
(7) At least one of (a) to (f) of SEQ ID NO: 7:
(A) an allele that is base A or G present at the position of base number 213,
(A) an allele that is base A or G present at the position of base number 243;
(C) an allele that is base C or T present at the position of base number 290,
(D) an allele that is base A or T present at the position of base number 348;
(E) an allele which is the base A or G present at the position of the base number 350, and (f) an allele which is the base C or T present at the position of the base number 378;
(8) at least one of (A) to (E) of SEQ ID NO: 8:
(A) an allele that is base A or G present at the position of base number 88;
(A) an allele which is a base C or T present at the position of base number 152;
(C) an allele that is base C or T present at the position of base number 161;
(D) an allele which is the base A or G present at the position of the base number 309, and (e) an allele which is the base C or T present at the position of the base number 381;
(9) At least one of (A) to (U) of SEQ ID NO: 9:
(A) an allele which is a base C or T present at the position of base number 66;
(A) an allele that is the base C or T present at the position of the base number 229, and (c) an allele that is the base A or T at the position of the base number 262;
(10) At least one of (a) to (c) of SEQ ID NO: 10:
(A) an allele that is a deletion or non-deletion of 1 base T present at positions from base numbers 163 to 170;
(A) an allele that is deleted or non-deletion of 1 base A present at the position of base numbers 309 to 317, and (c) an allele that is base A or C at the position of base number 356;
(11) At least one of (a) to (ki) of SEQ ID NO: 11:
(A) an allele that is base A or T present at the position of base number 69;
(A) an allele which is a base C or T present at the position of base number 93;
(C) an allele that is base A or G present at the position of base number 111;
(D) an allele which is the base C or T present at the position of the base number 208;
(E) an allele that is base A or G present at the position of base number 210;
(F) an allele which is the base C or T present at the position of the base number 408, and (g) an allele which is the base A or G present at the position of the base number 429;
(12) At least one of (a) to (c) of SEQ ID NO: 12:
(A) an allele that is base A or G present at the position of base number 104;
(A) an allele that is the base C or G present at the position of the base number 151, and (c) an allele that is the base C or T present at the position of the base number 343;
(13) at least one of (a) to (c) of SEQ ID NO: 13:
(A) an allele that is base A or G present at the position of base number 126;
(A) an allele that is the base C or G present at the position of the base number 201, and (c) an allele that is the base A or G present at the position of the base number 264;
(14) At least one of (A) to (U) of SEQ ID NO: 14:
(A) an allele that is base A or C present at the position of base number 132;
(A) an allele that is base A or C present at the position of base number 185, and (c) an allele that is base C or T present at the position of base number 189;
(15) at least one of (A) to (E) of SEQ ID NO: 15:
(A) an allele that is base C or T present at the position of base number 101,
(A) an allele that is base C or T present at the position of base number 183,
(C) an allele that is inserted or non-inserted into 1 base A existing at positions of base numbers 188 to 192,
(D) an allele which is the base C or T present at the position of the base number 280, and (e) an allele which is the base G or T present at the position of the base number 338;
(16) At least one of (a) to (sa) of SEQ ID NO: 16:
(A) an allele that is base A or T present at the position of base number 134;
(A) an allele that is base A or T present at the position of base number 135;
(C) an allele that is base C or T present at the position of base number 137,
(D) an allele that is base A or T present at the position of base number 138;
(E) an allele that is base A or G present at the position of base number 142;
(F) an allele that is base A or G present at the position of base number 165,
(G) an allele that is base C or T present at the position of base number 183,
(H) an allele that is base A or C present at the position of base number 219,
(G) an allele that is base C or G present at the position of base number 232;
(Co) an allele that is base A or G at the position of base number 293, and (sa) an allele that is base C or T at the position of base number 332;
(17) at least one of (a) to (e) of SEQ ID NO: 17:
(A) an allele that is base A or T present at the position of base number 65,
(A) an allele that is base A or G present at the position of base number 158,
(C) an allele that is the base G or T at the position of base number 236,
(D) an allele that is base A or G present at the position of base number 256, and (e) an allele that is base C or T at the position of base number 474;
(18) at least one of (a) and (b) of SEQ ID NO: 18:
(A) an allele which is the base C or T present at the position of the base number 96, and (a) an allele which is the base C or T present at the position of the base number 133;
(19) At least one of (a) to (e) of SEQ ID NO: 19:
(A) an allele that is base A or G present at the position of base number 261,
(A) an allele that is base C or T present at the position of base number 282,
(C) an allele that is base C or T present at the position of base number 371, and (d) an allele that is base C or T at the position of base number 440;
(20) At least one of (a) and (b) of SEQ ID NO: 20:
(A) an allele which is the base A or G present at the position of the base number 247, and (b) an allele which is the base C or T present at the position of the base number 362;
(21) at least one of (a) to (e) of SEQ ID NO: 21:
(A) an allele that is base A or G present at the position of base number 82;
(A) an allele that is base A or G present at the position of base number 91;
(C) an allele that is the base G or T present at the position of the base number 139, and (d) an allele that is the base C or T at the position of the base number 140;
(22) (a) an allele that is a deletion or non-deletion of base A present at positions of base numbers 359 to 364 of SEQ ID NO: 22;
(23) at least one of (a) and (b) of SEQ ID NO: 23:
(A) an allele which is the base A or T present at the position of the base number 420, and (b) an allele which is the base C or G present at the position of the base number 485;
(24) at least one of (a) to (co) of SEQ ID NO: 24:
(A) an allele which is the base C or T present at the position of base number 189,
(A) an allele that is base A or G present at the position of base number 209;
(C) an allele that is base C or T present at the position of base number 218,
(D) an allele that is base C or T present at the position of base number 260;
(E) an allele that is base C or T present at the position of base number 283,
(F) an allele that is base C or G present at the position of base number 315,
(G) an allele that is base A or G present at the position of base number 379;
(H) an allele which is the base C or T present at the position of the base number 385,
(G) an allele which is the base A or C present at the position of the base number 551, and (co) an allele which is the base C or T present at the position of the base number 597;
(25) at least one of (a) to (ki) of SEQ ID NO: 25:
(A) an allele which is a base C or T present at the position of base number 62;
(A) an allele that is base A or G present at the position of base number 96;
(C) an allele that is base A or G present at the position of base number 171;
(D) an allele that is base C or T present at the position of base number 176,
(E) an allele that is base C or T present at the position of base number 222;
(F) an allele which is the base C or T present at the position of the base number 228, and (g) an allele which is the base A or G present at the position of the base number 273;
(26) At least one of (a) to (ki) of SEQ ID NO: 26:
(A) an allele that is base A or G present at the position of base number 57;
(A) an allele that is base A or G present at the position of base number 149;
(C) an allele that is base A or T present at the position of base number 221;
(D) an allele that is base A or G present at the position of base number 303;
(E) an allele that is base A or T present at the position of base number 350;
(F) an allele that is base A or T present at the position of base number 400, and (g) an allele that is base A or G that is present at the position of base number 434;
(27) At least one of (a) to (e) in SEQ ID NO: 27:
(A) an allele that is base A or G present at the position of base number 80;
(A) an allele that is a deletion or non-deletion of base A present at positions from base numbers 116 to 122;
(C) an allele that is base A or G present at the position of base number 204;
(D) an allele that is base C or T present at the position of base number 249, and (e) an allele that is base G or T at the position of base number 389;
(28) At least one of (a) to (e) of SEQ ID NO: 28:
(A) an allele that is base A or C present at the position of base number 83;
(A) an allele which is a base C or G present at the position of base number 169,
(C) an allele that is base C or T present at the position of base number 193,
(D) an allele that is the base A or C existing at the position of the base number 215, and (e) an allele that is the base A or G that exists at the position of the base number 232;
(29) (a) an allele that is base A or G present at the position of base number 309 in SEQ ID NO: 29;
(30) (a) an allele which is the base C or T present at the position of base number 216 of SEQ ID NO: 30;
(31) (a) An allele of base C or T present in the position of base number 162 of SEQ ID NO: 31;
(32) At least one of (a) and (b) of SEQ ID NO: 32:
(A) an allele that is the base C or T present at the position of the base number 34, and (a) an allele that is the base A or G that is present at the position of the base number 336;
(33) (a) An allele of base A or G present at the position of base number 361 of SEQ ID NO: 33.
アレルの検出を請求項1から3のいずれか1項に記載のプライマーセット、請求項7記載のプローブまたは請求項10記載の固定化基板を用いて行う請求項16記載の方法。   The method according to claim 16, wherein the allele is detected using the primer set according to any one of claims 1 to 3, the probe according to claim 7, or the immobilized substrate according to claim 10. 類縁関係の決定が、クラスター解析を用いることを特徴とする、請求項16または17に記載の方法。   The method according to claim 16 or 17, characterized in that the determination of the affinity uses cluster analysis. クラスター解析のアルゴリズムが、UPGMA法であることを特徴とする、請求項18記載の方法。   The method according to claim 18, wherein the algorithm of cluster analysis is UPGMA method. 酵母のゲノムDNAについて下記(1)、かつ、(2)及び(3)のいずれかの組み合わせからなるアレルの検出を行い、その結果に基づいて酵母を選抜する方法:
(1)配列番号17の、(ア)から(オ)の、少なくとも1つ:
(ア)塩基番号65の位置に存在する塩基A若しくはTであるアレル、
(イ)塩基番号158の位置に存在する塩基A若しくはGであるアレル、
(ウ)塩基番号236の位置に存在する塩基G若しくはTであるアレル、
(エ)塩基番号256の位置に存在する塩基A若しくはGであるアレル、及び
(オ)塩基番号474の位置に存在する塩基C若しくはTであるアレル;
(2)配列番号1の、(ア)から(オ)の、少なくとも1つ:
(ア)塩基番号53の位置に存在する塩基C若しくはTであるアレル、
(イ)塩基番号170の位置に存在する塩基C若しくTはであるアレル、
(ウ)塩基番号185の位置に存在する塩基A若しくはGであるアレル、
(エ)塩基番号239の位置に存在する塩基G若しくはTであるアレル、及び
(オ)塩基番号298の位置に存在する塩基A若しくはGであるアレル;
(3)配列番号2の、(ア)及び(イ)の、少なくとも1つ:
(ア)塩基番号104の位置に存在する塩基C若しくはTであるアレル、及び
(イ)塩基番号321の位置に存在する塩基C若しくはTであるアレル;
A method for detecting an allele comprising the combination of any of the following (1) and (2) and (3) with respect to genomic DNA of yeast and selecting the yeast based on the result:
(1) at least one of SEQ ID NO: 17 from (a) to (e):
(A) an allele that is base A or T present at the position of base number 65,
(A) an allele that is base A or G present at the position of base number 158,
(C) an allele that is the base G or T at the position of base number 236,
(D) an allele that is base A or G present at the position of base number 256, and (e) an allele that is base C or T at the position of base number 474;
(2) at least one of (A) to (E) of SEQ ID NO: 1
(A) an allele which is a base C or T present at the position of base number 53,
(A) an allele of the base C or T existing at the position of base number 170;
(C) an allele that is base A or G present at the position of base number 185,
(D) an allele which is the base G or T present at the position of the base number 239, and (e) an allele which is the base A or G present at the position of the base number 298;
(3) at least one of (a) and (b) of SEQ ID NO: 2
(A) an allele which is the base C or T present at the position of the base number 104, and (a) an allele which is the base C or T present at the position of the base number 321;
アレルの検出を請求項4から6のいずれか1項に記載のプライマーセット、請求項8記載のプローブまたは請求項10記載の固定化基板を用いて行う請求項20記載の方法。   The method according to claim 20, wherein the allele is detected using the primer set according to any one of claims 4 to 6, the probe according to claim 8, or the immobilized substrate according to claim 10. 選抜される酵母が、醸造特性として高い亜硫酸生成能を有することを特徴とする、請求項20または21に記載の方法。   The method according to claim 20 or 21, wherein the yeast to be selected has a high sulfite producing ability as a brewing characteristic. 選抜される酵母が、醸造特性として低い亜硫酸生成能を有することを特徴とする、請求項20または21に記載の方法。   The method according to claim 20 or 21, wherein the selected yeast has a low sulfite producing ability as a brewing characteristic. 選抜される酵母が、醸造特性として高い硫化水素生成能を有することを特徴とする、請求項20または21に記載の方法。   The method according to claim 20 or 21, wherein the selected yeast has a high hydrogen sulfide producing ability as a brewing characteristic. 選抜される酵母が、醸造特性として低い硫化水素生成能を有することを特徴とする、請求項20または21に記載の方法。   The method according to claim 20 or 21, characterized in that the yeast to be selected has a low ability to produce hydrogen sulfide as a brewing characteristic. 選抜される酵母が、醸造特性として高いエステル生成能を有することを特徴とする、請求項20または21に記載の方法。   The method according to claim 20 or 21, wherein the yeast to be selected has a high ester-producing ability as a brewing characteristic. 選抜される酵母が、醸造特性として低いエステル生成能を有することを特徴とする、請求項20または21に記載の方法。   The method according to claim 20 or 21, characterized in that the yeast to be selected has a low ester-producing ability as a brewing characteristic. 選抜される酵母が、醸造特性として高い高級アルコール生成能を有することを特徴とする、請求項20または21に記載の方法。   The method according to claim 20 or 21, wherein the selected yeast has a higher alcohol-producing ability as a brewing characteristic. 選抜される酵母が、醸造特性として低い高級アルコール生成能を有することを特徴とする、請求項20または21に記載の方法。   The method according to claim 20 or 21, wherein the yeast to be selected has a lower higher alcohol-producing ability as a brewing characteristic. 酵母の菌種が、上面発酵酵母若しくは下面発酵酵母である、請求項14〜29のいずれか1項記載の方法。   30. The method according to any one of claims 14 to 29, wherein the yeast species is upper surface fermentation yeast or lower surface fermentation yeast. 検出が、ダイレクト・シーケンシング法、DHPLC(Denaturing High Performance Liquid Chromatography)法、Surveyor Nucleaseを用いる方法、TaqMan PCR法、Invader法、プライマー伸長法、SSCP(Single Strand Conformation Porymorphism)法、及びDNAチップを用いる方法からなる群より選ばれる一つまたは二つ以上の方法を用いて行われることを特徴とする、請求項14〜30のいずれか1項記載の方法。   Detection is performed by direct sequencing method, DHPLC (Denaturing High Performance Liquid Chromatography) method, method using Surveyor Nuclease, TaqMan PCR method, Invader method, primer extension method, SSCP (Single Strand Condrum method) 31. A method according to any one of claims 14 to 30, characterized in that it is carried out using one or more methods selected from the group consisting of methods.
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