JP2006256968A - Bone metabolism ameliorant and method for producing the same - Google Patents
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Abstract
Description
本発明は、骨粗鬆症の予防又は処置に有用である骨代謝改善剤に関する。 The present invention relates to a bone metabolism improving agent useful for the prevention or treatment of osteoporosis.
哺乳動物の骨は骨吸収と骨形成を繰り返しており、骨形成に関与する細胞が骨芽細胞であり、骨吸収に関与する細胞が破骨細胞である。骨の成長、維持および修復は、これらの細胞の形成と吸収の速度バランスに依存しており、そのバランスが崩れることにより、骨吸収が骨形成を上回り、骨粗鬆症などの骨量が減少する骨代謝関連疾患がもたらされる。よって骨形成が骨吸収を下回らないことが骨量の維持や増強に重要である（非特許文献１）。 Mammalian bone repeats bone resorption and bone formation, and cells involved in bone formation are osteoblasts, and cells involved in bone resorption are osteoclasts. Bone growth, maintenance, and repair depend on the balance between the rate of formation and resorption of these cells, and the loss of bone balance increases bone resorption and reduces bone mass such as osteoporosis. Related diseases are brought about. Therefore, it is important for bone mass maintenance and enhancement that bone formation does not fall below bone resorption (Non-patent Document 1).
骨芽細胞は、生体内の様々な刺激により段階的に分化が進み、骨基質タンパクを分泌し、カルシウムを沈着して最終的に石灰化して骨を形成する細胞である。即ち骨芽細胞の分化段階が進み、石灰化することは骨形成につながる現象である（非特許文献２）。 Osteoblasts are cells that differentiate in stages by various stimuli in the body, secrete bone matrix proteins, deposit calcium, and finally calcify to form bone. That is, the differentiation stage of osteoblasts advances and calcification is a phenomenon that leads to bone formation (Non-patent Document 2).
骨粗鬆症は、骨を形成するカルシウムやコラーゲンの減少による骨量低下と骨組織の退行を引き起こす全身性の骨疾患である。骨粗鬆症は、高齢者の特に閉経後の女性に多く見られ、近年の高齢化に伴い増加し続けている。骨粗鬆症による骨の脆弱化は、疼痛や、骨折のリスク上昇を招くことから、寝たきりの原因となり、高齢者の生活の質に大きく影響を及ぼす問題となっている（非特許文献３）。 Osteoporosis is a systemic bone disease that causes bone loss and bone tissue regression due to a decrease in calcium and collagen that form bone. Osteoporosis is common in elderly women, particularly postmenopausal women, and continues to increase with the recent aging of the population. Bone weakening due to osteoporosis causes pain and increased risk of fractures, causing bedriddenness and a significant impact on the quality of life of the elderly (Non-patent Document 3).
骨粗鬆症の原因は、性ホルモンの低下、カルシウムの摂取不足、ビタミンＤ不足、運動不足、カルシウム代謝調節ホルモンのアンバランスなどが挙げられる。その治療には、性ホルモンであるエストロジェン、カルシウム代謝ホルモン、ビタミンＫ2、活性型ビタミンＤ3、ビスフォスフェート化合物などの医薬品が使用されているが、投与量によっては安全性に問題がある場合があり、使用量や使用期間に注意を払う必要がある（非特許文献４）。 The causes of osteoporosis include decreased sex hormones, insufficient intake of calcium, insufficient vitamin D, insufficient exercise, and imbalance of calcium metabolism regulating hormones. The treatment uses sex hormones such as estrogen, calcium-metabolizing hormone, vitamin K2, active vitamin D3, bisphosphate compounds, etc., but depending on the dose, there may be safety problems. It is necessary to pay attention to the amount used and the period of use (Non-Patent Document 4).
そのような状況から近年、食品を原料とした骨粗鬆症改善素材が開発され、食経験があることから、医薬品と比較して安全性が高いと考えられている。代表的な食品の骨粗鬆症などの骨量が減少する骨代謝関連疾患の改善素材に大豆イソフラボン、乳由来塩基性ペプチドなどがあり、近年、安全に日常的に摂取できる骨代謝改善素材として注目されている。また、カゼインフォスフォペプチドをはじめとして、骨の材料として必要なカルシウムの腸管吸収促進作用を持つ物質が知られている。しかし、これらのカルシウム吸収促進作用を有する物質は、消化管から体内へのカルシウム吸収を促進するものであり、骨へのカルシウム沈着を促進するものではない。そのため、骨代謝の改善や骨強化に十分な効果を得られない場合がある。 Under such circumstances, in recent years, osteoporosis-improving materials using food as a raw material have been developed, and since they have dietary experience, they are considered to be safer than pharmaceuticals. Typical foods for improving bone metabolism-related diseases such as osteoporosis are bone isoforms, soy isoflavones, and basic peptides derived from milk. In recent years, they have been attracting attention as bone metabolism improving materials that can be safely and routinely consumed. Yes. In addition, a caseinfophosphopeptide and other substances having an action of promoting intestinal absorption of calcium necessary as a bone material are known. However, these substances having a calcium absorption promoting action promote calcium absorption from the digestive tract into the body, and do not promote calcium deposition on the bone. Therefore, there are cases where sufficient effects cannot be obtained for improving bone metabolism and strengthening bone.
トウモロコシ（学名Zea mays）の種子は、世界的に古くから食されている。またコーンスターチの原料としても利用されている。トウモロコシからコーンスターチを採る際に副産物としてグルテンフィードが得られる。一般的にグルテンフィードはトウモロコシ種子を０.１%〜０.３％程度の亜硫酸水に浸漬して、胚乳の澱粉粒を包んでいる蛋白質の膜を崩壊させる工程で溶出する可溶成分を濃縮したコーンスティープリカーを、胚芽分離工程の後で研磨により除去された繊維に添加して乾燥させたものであり、コーンスターチの製造の際に得られる副産物である。コーンスティープリカーには糖分、無機成分、アミノ酸などが含まれることが知られている。ただしグルテンフィードは飼料以外の用途が少なく、十分に利用されていないのが現状である。又、トウモロコシ由来のミネラル組成物（特許文献３）は骨粗鬆症など骨量が減少する疾患の予防に有用な用途が見出されているが、ミネラル以外のトウモロコシ由来の親水性成分が骨代謝を改善することは知られていない。 The seeds of maize (scientific name Zea mays ) have been eaten worldwide since ancient times. It is also used as a raw material for corn starch. Gluten feed is obtained as a by-product when corn starch is extracted from corn. In general, in gluten feed, corn seeds are immersed in about 0.1% to 0.3% sulfite water to concentrate soluble components that are eluted in the process of disrupting the protein membrane that wraps the starch granules of endosperm. The corn steep liquor is added to the fibers removed by polishing after the germ separation step and dried, and is a by-product obtained during the production of corn starch. Corn steep liquor is known to contain sugar, inorganic components, amino acids and the like. However, gluten feed has few uses other than feed and is currently not fully utilized. In addition, the corn-derived mineral composition (Patent Document 3) has been found to be useful in the prevention of diseases such as osteoporosis where bone mass is reduced, but corn-derived hydrophilic components other than minerals improve bone metabolism. It is not known to do.
ワイルドライス（学名Zizania latifolia Turcz.）（日本名 真菰（マコモ））の種子は北アメリカで古くから穀物として食とされており、現在もサラダやスープなどで利用されている。ワイルドライスは皮膚外用剤としての効能が知見されているが（特許文献１）、その親水性成分に骨代謝改善効果があることは全く知られていない。
このような状況下、食習慣があり豊富で有効利用されていない材料を由来とした、安全かつ安価な骨代謝改善剤を提供することを目的とする。 Under such circumstances, an object is to provide a safe and inexpensive bone metabolism improving agent derived from a material that has a dietary habit and is abundant and not effectively used.
本発明者らは、トウモロコシ、ワイルドライスの種子またはそれを由来とする材料の親水性成分に、骨形成を促進して骨強度を高め得る骨代謝改善作用があることを見出し、それを基に本発明を完成するに至った。 The present inventors have found that the hydrophilic component of corn, wild rice seed or a material derived therefrom has a bone metabolism improving action that can promote bone formation and increase bone strength, and based on that, The present invention has been completed.
上記のような大量に生産されており、有効利用が十分になされていない穀物素材の親水性成分に骨代謝改善効果があることはこれまで全く知られていなかった。 Until now, it has not been known at all that the hydrophilic component of a grain material that has been produced in large quantities as described above and has not been effectively utilized has an effect of improving bone metabolism.
即ち本発明が提供するのは以下の通りである。
[１]
トウモロコシ（Zea mays）、およびワイルドライス（Zizania latifolia Turcz.）材料からなる群より選択される材料の１種類以上の親水性成分を有効成分とする骨代謝改善剤。
[２]
トウモロコシ（Zea mays）、およびワイルドライス（Zizania latifolia Turcz.）材料からなる群より選択される材料の１種類以上の親水性成分を有効成分として含有する骨代謝改善用組成物。
[３]
該トウモロコシ（Zea mays）材料がグルテンフィードを含む骨代謝改善用組成物。
[４]
飲食用である、[２]または[３]の組成物。
[５]
医薬用である、[２]または[３]の組成物。
[６]
該親水性成分を、組成物中で少なくとも１．０重量％以上含む、[２]〜[５]いずれかの組成物。
[７]
[２]〜[６]いずれかの組成物をカプセル内に含む製剤。
[８]
トウモロコシ（Zea mays）、およびワイルドライス（Zizania latifolia Turcz.）材料からなる群より選択される材料の１種類以上の親水性成分を含む濃縮エキス。
[９]
有効量の、[２]〜[６]の組成物、および[７]の製剤から選ばれる少なくとも１種を、必要とする哺乳動物対象に投与することを含む、哺乳動物の骨代謝の改善方法。
[１０]
有効量の、[２]〜[６]の組成物および[７]の製剤から選ばれる少なくとも１種を、必要のあるまたはない哺乳動物対象に投与することを含む、骨損傷の処置又は予防方法。
[１１]
トウモロコシ（Zea mays）、ワイルドライス（Zizania latifolia Turcz.）材料およびその加工物から選ばれる１種類以上を親水性溶媒に接触させ、その親水性成分を抽出すること、および該抽出物を、許容される担体と混合すること、を含む、骨代謝改善用組成物の製造方法。
That is, the present invention provides the following.
[1]
An agent for improving bone metabolism comprising as an active ingredient at least one hydrophilic component of a material selected from the group consisting of corn ( Zea mays ) and wild rice ( Zizania latifolia Turcz. ) Materials.
[2]
A composition for improving bone metabolism comprising, as an active ingredient, one or more hydrophilic components of a material selected from the group consisting of corn ( Zea mays ) and wild rice ( Zizania latifolia Turcz. ) Materials.
[3]
A composition for improving bone metabolism, wherein the corn ( Zea mays ) material comprises a gluten feed.
[4]
The composition according to [2] or [3], which is for eating and drinking.
[5]
The composition of [2] or [3], which is for use in medicine.
[6]
The composition according to any one of [2] to [5], which contains at least 1.0% by weight or more of the hydrophilic component in the composition.
[7]
[2] to [6] A preparation comprising any one of the compositions in a capsule.
[8]
A concentrated extract comprising one or more hydrophilic components of a material selected from the group consisting of corn ( Zea mays ) and wild rice ( Zizania latifolia Turcz. ) Materials.
[9]
A method for improving bone metabolism in mammals, comprising administering an effective amount of at least one selected from the composition of [2] to [6] and the preparation of [7] to a mammalian subject in need thereof. .
[10]
A method for treating or preventing bone damage comprising administering an effective amount of at least one selected from the composition of [2] to [6] and the preparation of [7] to a mammalian subject in need or not .
[11]
One or more selected from corn ( Zea mays ), wild rice ( Zizania latifolia Turcz. ) Materials and processed products thereof are contacted with a hydrophilic solvent to extract the hydrophilic component, and the extract is allowed. A method for producing a composition for improving bone metabolism, comprising mixing with a carrier.
本発明品は、骨代謝関連疾患、例えば骨粗鬆症を始めとする骨量が減少する疾患の処置または予防に有効である。また、食経験のある材料を原料とするため、長期間飲食しても安全である。さらに、豊富にある安価な材料を利用できるため、安価で大量に本発明品を製造することが可能である。 The product of the present invention is effective for treating or preventing bone metabolism-related diseases, for example, diseases in which bone mass is reduced including osteoporosis. In addition, it is safe to eat and drink for a long time because it uses ingredients with food experience. Furthermore, since a wide variety of inexpensive materials can be used, the product of the present invention can be manufactured in large quantities at a low cost.
本明細書の骨代謝改善剤および組成物は、トウモロコシ、およびワイルドライス材料からなる群より選択される材料またはその加工物の１種類以上の親水性成分を骨代謝改善活性が発揮できる範囲の有効量を含んでいればよい。 The bone metabolism improving agent and composition of the present specification are effective within a range in which bone metabolism improving activity can be exerted on one or more hydrophilic components of a material selected from the group consisting of corn and wild rice materials or processed products thereof. It only has to contain the amount.
トウモロコシの使用部位は全草でもよいが、好ましくは種子、さらに好ましくは種子由来の加工物とするほうが良い。本明細書におけるトウモロコシの種子由来物の加工物とは、コーンスティープリカー、グルテンフィードを含む。好ましくは活性成分を多く含有し安価であるグルテンフィードとする方がよい。一般的にグルテンフィードはトウモロコシ種子を０.１%〜０.３％程度の亜硫酸水に浸漬して、胚乳の澱粉粒を包んでいる蛋白質の膜を崩壊させる工程で溶出する可溶成分を濃縮したコーンスティープリカーを、胚芽分離工程の後で研磨により除去された繊維に添加して、乾燥させたものであり、コーンスターチの製造の際に得られる副産物である。一般的にグルテンフィードには様々な成分が含まれているが、特に糖分、無機成分、アミノ酸、食物繊維などが豊富である。 Corn may be used in whole plants, but preferably seeds, more preferably seed-derived processed products. The processed product of corn seed-derived material in the present specification includes corn steep liquor and gluten feed. It is preferable to use a gluten feed that contains a large amount of active ingredients and is inexpensive. In general, in gluten feed, corn seeds are immersed in about 0.1% to 0.3% sulfite water to concentrate soluble components that are eluted in the process of disrupting the protein membrane that wraps the starch granules of endosperm. The corn steep liquor is added to the fibers removed by polishing after the germ separation step and dried, and is a by-product obtained during the production of corn starch. In general, gluten feed contains various components, but is particularly rich in sugar, inorganic components, amino acids, dietary fiber and the like.
ワイルドライスの使用部位は、全草でもよいが、好ましくは種子を用いた方がよい。一般的にワイルドライスには、様々な成分が含まれているが、特にタンパク質、葉酸、ビタミンＢ２、Ｂ６、ナイアシン、繊維などが豊富に含まれている。 The wild rice may be used in whole plants, but it is preferable to use seeds. Wild rice generally contains various components, but is particularly rich in protein, folic acid, vitamins B2, B6, niacin, fiber and the like.
本明細書でいう骨代謝改善とは、骨へのカルシウム沈着促進、とりわけ骨芽細胞に直接作用してその分化を促進し、石灰化させること、即ち骨芽細胞石灰化促進をいう。本明細書の骨代謝改善剤は、骨芽細胞の石灰化を介して、骨組織において骨形成を促進することで、骨代謝関連疾患を予防又は処置することができる。ここにいう骨代謝関連疾患は、骨量が減少する限り任意の疾患を意味する。骨代謝関連疾患の例は、限定されないが骨粗鬆症を含む。 As used herein, the improvement of bone metabolism refers to the promotion of calcium deposition on bone, in particular, the direct action on osteoblasts to promote their differentiation and calcification, that is, the promotion of osteoblast calcification. The bone metabolism improving agent of the present specification can prevent or treat a bone metabolism-related disease by promoting bone formation in bone tissue through calcification of osteoblasts. As used herein, a bone metabolism-related disease means any disease as long as bone mass is reduced. Examples of bone metabolism related diseases include, but are not limited to, osteoporosis.
骨代謝改善活性は、骨芽細胞を用いて測定することができる。具体的には、細胞に蓄積されたカルシウムを抽出して測定する方法（特開２００２−１７９５８５）Von Kossa染色（Journal of bone mineral research，１９９５年，１２巻，７７８〜７８５）などが挙げられる。また、骨芽細胞にはリン酸カルシウムの形態でカルシウムが沈着するため、骨代謝改善活性を評価する場合、一般にリン酸の供給源としてグリセロリン酸塩を添加した培地が使用される。さらに、一般的に骨芽細胞の分化促進は、その石灰化の促進につながると考えられている。よって例えばアルカリフォスファターゼ、オステオポンチン、オステオカルシンなどの骨芽細胞が分化する際に産生が亢進するマーカー物質（Endocrine reviews，１９９３年，１４巻，４２４〜４４２）の測定や、その遺伝子発現の測定によって確認してもよい。これらのうち少なくとも１種の測定において、サンプルの活性は一般に溶媒対照と比較し、溶媒対照よりも統計学的に有意に高い値を示すサンプルを「骨代謝改善活性あり」と評価する。さらに、上述の評価方法が妥当であるかを判断する目的で、骨芽細胞の石灰化を促進する既知の物質を用いて、溶媒対照より統計学的に有意に高い値を示すことを確認するほうが好ましい。骨芽細胞の石灰化を促進する既知の物質は限定しないが、ＢＭＰ−２（日本臨床，２００２年，６０巻増刊号３，４０〜４６）などが挙げられる。 Bone metabolism improving activity can be measured using osteoblasts. Specifically, a method of extracting and measuring calcium accumulated in cells (JP 2002-179585) Von Kossa staining (Journal of bone mineral research, 1995, Vol. 12, 778-785) and the like can be mentioned. Further, since calcium is deposited in the form of calcium phosphate in osteoblasts, a medium supplemented with glycerophosphate is generally used as a phosphate source when evaluating bone metabolism improving activity. Furthermore, it is generally considered that the promotion of osteoblast differentiation leads to the promotion of calcification. Therefore, for example, it is confirmed by measuring a marker substance (Endocrine reviews, 1993, 14, 424-442) that is increased in production when osteoblasts differentiate such as alkaline phosphatase, osteopontin, and osteocalcin, and by measuring gene expression thereof. May be. In at least one of these measurements, the activity of the sample is generally compared to the solvent control, and a sample showing a statistically significantly higher value than the solvent control is evaluated as “having bone metabolism improving activity”. In addition, for the purpose of judging whether the above-mentioned evaluation method is valid, using a known substance that promotes calcification of osteoblasts, it is confirmed that the value is statistically significantly higher than that of the solvent control. Is preferred. Although the known substance which accelerates | stimulates the calcification of an osteoblast is not limited, BMP-2 (Nippon Clinical, 2002, Volume 60, No. 3, 40-46) etc. are mentioned.
本明細書における親水性成分とは、上記材料の親水性溶媒による抽出物を指す。また、本明細書での親水性溶媒とは、水、水に可溶性である溶媒、および両者の混合物を含む。具体的には、親水性溶媒は水、メタール、アセトン、エタノール、およびプロパノールを含む溶媒の１つ以上から選ばれる溶媒を含む。その混合の割合は限定しないが、抽出物が骨代謝改善活性を失わない範囲であればよい。好ましくは５割以上の水の割合がよい。好ましい実施態様では、本発明における骨代謝改善剤は、水のみを抽出溶媒としても好適に得ることができる。ある種の実施態様では、溶媒除去の容易さを考慮すると混合溶媒を用いても良い。その場合は、残留溶媒の安全性の点から水とエタノールの混合溶媒が好ましい。 The hydrophilic component in this specification refers to the extract of the said material by the hydrophilic solvent. Moreover, the hydrophilic solvent in this specification includes water, a solvent that is soluble in water, and a mixture of both. Specifically, the hydrophilic solvent includes a solvent selected from one or more of solvents including water, methanol, acetone, ethanol, and propanol. The mixing ratio is not limited as long as the extract does not lose the bone metabolism improving activity. The proportion of water is preferably 50% or more. In a preferred embodiment, the bone metabolism improving agent in the present invention can be suitably obtained using only water as an extraction solvent. In certain embodiments, a mixed solvent may be used in view of ease of solvent removal. In that case, a mixed solvent of water and ethanol is preferable from the viewpoint of the safety of the residual solvent.
本明細書における親水性成分の形態は、抽出液の形態でも良いし、溶媒を除去した形態や、溶媒を除去して適切な溶媒に再び溶解、懸濁した形態であっても良い。また、該親水性成分は、所望により飲食用または製薬用に許容される置換基で置換されてもよい。またさらに、該親水性成分は、所望により飲食用または製薬用に許容されるその塩、エステル、または配糖体の形態であってもよい。また、これらの親水性成分の形態は、骨代謝改善活性があり、骨代謝改善活性を失わない範囲であれば、飲食品や医薬品として不適当な物質を含有しない限り、抽出物のまま、精製又は半精製抽出物として使用できる。精製は、各種クロマトグラグラフィー法、例えばアフィニティークロマトグラフィー精製法、ろ過法、沈殿法、および遠心分離法、を使用しても良い。 The form of the hydrophilic component in the present specification may be in the form of an extract, a form in which the solvent is removed, or a form in which the solvent is removed and dissolved and suspended again in an appropriate solvent. In addition, the hydrophilic component may be optionally substituted with a substituent that is acceptable for food and drink or for pharmaceutical use. Still further, the hydrophilic component may be in the form of a salt, ester, or glycoside that is acceptable for food or drink if desired. In addition, these hydrophilic components are in the form of extracts as long as they have bone metabolism-improving activity and do not lose bone metabolism-improving activity as long as they do not contain substances unsuitable as foods and beverages or pharmaceuticals. Or it can be used as a semi-purified extract. For the purification, various chromatographic methods such as affinity chromatography purification method, filtration method, precipitation method, and centrifugation method may be used.
本明細書における材料から親水性成分を得る方法は、例えば溶媒抽出法が挙げられる。溶媒抽出する場合、例えば、本明細書における材料を、約１〜２０倍量好ましくは約１〜１０倍量の上記溶媒にさらし、攪拌又は放置し、濾過又は遠心分離などにより抽出液を得ることができる。次いで、必要に応じて得られた抽出液を減圧下での濃縮、凍結乾燥法、スプレードライなどの方法により乾燥させても良い。溶媒にさらす際の材料は、生のまま、または乾燥させたものでもよいが、保存の点から乾燥させたものが好ましい。また、上記材料の形態は、原型、粉砕したもの、切断したもの又は粉末のいずれを用いてもよい。溶媒にさらす温度は、一般に約０〜１３０℃、好ましくは約１〜８０℃で行うが、室温つまり約１０〜４０℃で十分に本明細書における親水性成分を得ることができる。溶媒に接触させる時間は、普通約０．１時間〜１ヶ月、好ましくは約０．５時間〜７日間で好適に実施できる。 Examples of the method for obtaining the hydrophilic component from the material in the present specification include a solvent extraction method. In the case of solvent extraction, for example, the material in the present specification is exposed to about 1 to 20 times, preferably about 1 to 10 times the amount of the above solvent, stirred or allowed to stand, and an extract is obtained by filtration or centrifugation. Can do. Subsequently, the extract obtained as necessary may be dried by a method such as concentration under reduced pressure, freeze-drying, or spray drying. The material when exposed to the solvent may be raw or dried, but is preferably dried from the viewpoint of storage. Moreover, the form of the material may be any of a prototype, a pulverized one, a cut one, or a powder. The temperature exposed to the solvent is generally about 0 to 130 ° C., preferably about 1 to 80 ° C., but the hydrophilic component herein can be sufficiently obtained at room temperature, ie about 10 to 40 ° C. The time of contact with the solvent is usually about 0.1 hour to 1 month, preferably about 0.5 hour to 7 days.
本発明の組成物は、濃度は限定されないが、上記親水性成分を含有する。好ましくは、該組成物は、上記親水性成分を、組成物基準で１．０重量％以上、１００重量％未満含有し得る。上記濃度の下限値の例は、２．０、３．０、４．０、５．０、１０．０、２０．０、３０．０、４０．０、５０．０重量％である。上記濃度の上限値の例は、９９．９９、９９．９、９９．０、９５．０、９０．０、８０．０重量％である。 Although the density | concentration is not limited, the composition of this invention contains the said hydrophilic component. Preferably, the composition may contain 1.0% by weight or more and less than 100% by weight of the hydrophilic component based on the composition. Examples of the lower limit of the concentration are 2.0, 3.0, 4.0, 5.0, 10.0, 20.0, 30.0, 40.0, 50.0% by weight. Examples of the upper limit of the concentration are 99.99, 99.9, 99.0, 95.0, 90.0, and 80.0% by weight.
本明細書でいう濃縮エキスとは、本明細書で挙げた植物材料、又はその加工物を親水性溶媒に接触させ、濃縮する工程により、単位重量あたりの、骨代謝改善活性のための有効成分含量を増加させているものをいう。濃縮エキスは、材料に含まれる有効成分の含有率が、該材料に含まれる濃度と比較して高いものをいう。具体的には、前記含有率は少なくとも約２、３、４、５、６、７、８、９、１０または１５倍以上、好ましくは約２０倍以上、より好ましくは２５倍以上、およびもっとも好ましくは約３０倍以上である。濃縮は自然蒸発、蒸煮、減圧濃縮、凍結乾燥などの方法を使用できる。該濃縮エキスは材料中の低濃度の有効成分を濃縮している。よって該濃縮エキスを用いることにより、哺乳動物対象が少量の摂取量で容易に多量の有効成分を摂取することが可能となる。また、飲食物または、医薬組成物担体と混合して用いる場合、必要とする量の有効成分を低い配合比で添加することができるため、担体の持つ味や物性などの性状の変化を最小限にとどめることができる。 The concentrated extract as used herein refers to an active ingredient for bone metabolism improving activity per unit weight by the step of bringing the plant material mentioned in this specification or a processed product thereof into contact with a hydrophilic solvent and concentrating. The content is increased. Concentrated extract refers to an extract having a higher content of the active ingredient contained in the material than the concentration contained in the material. Specifically, the content is at least about 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10 or 15 times or more, preferably about 20 times or more, more preferably 25 times or more, and most preferably. Is about 30 times or more. Concentration can be achieved by methods such as natural evaporation, steaming, vacuum concentration, and lyophilization. The concentrated extract concentrates a low concentration active ingredient in the material. Therefore, by using the concentrated extract, a mammalian subject can easily ingest a large amount of active ingredient with a small amount of intake. In addition, when used in a mixture with food and drink or a pharmaceutical composition carrier, the required amount of active ingredient can be added at a low blending ratio, so that changes in properties such as taste and physical properties of the carrier are minimized. It can be kept in.
本明細書における飲食用組成物とは、本明細書における骨代謝改善剤又は親水性成分を一般的な食品に混合したものである。その用途は限定されず、例えば、一般食品、保健機能食品（特定保健用食品、栄養機能食品）、健康食品、栄養補助食品などとして使用することができる。飲食用に許容される担体として具体的には、飲料、乳製品、発酵乳、乳酸菌飲料、加工乳、コーヒー飲料、ジュース、アイスクリーム、飴、ビスケット、ウェハース、ゼリー、スープ、麺類、を含むがそれに限定されるものではない。好ましくは飲料、乳製品、加工乳、発酵乳、乳酸菌飲料、ウェハース、ゼリーを含む。 The composition for eating and drinking in the present specification is obtained by mixing the bone metabolism improving agent or the hydrophilic component in the present specification with a general food. The use is not limited, and can be used as, for example, general foods, health functional foods (specific health foods, nutritional functional foods), health foods, nutritional supplements, and the like. Specific examples of carriers acceptable for eating and drinking include beverages, dairy products, fermented milk, lactic acid bacteria beverages, processed milk, coffee beverages, juices, ice creams, strawberries, biscuits, wafers, jelly, soups, and noodles. It is not limited to that. Preferably, beverages, dairy products, processed milk, fermented milk, lactic acid bacteria beverages, wafers, and jelly are included.
本明細書における医薬組成物とは、本明細書における骨代謝改善剤および／又は親水性成分、および所望により医薬的に許容される担体を含有する組成物である。１実施態様では、医薬組成物はＯＴＣなど容易に入手可能な医薬品又は医薬部外品であり得る。その形態は限定されず、例えば、丸薬剤、液剤、粉末剤、顆粒剤、錠剤、カプセル錠剤、トローチ剤、シロップ剤、ドライシロップ剤を含む。好ましくはカプセル剤、液剤、エリクシル、錠剤、カシェ、座薬を含む。医薬組成物は、許容される製薬的手法に従って、例えば経腸投与のための組成物とすることができる。そのような本明細書の医薬組成物は、当業界に周知であるように、所望により医薬用に許容される担体と組み合わせた前記親水性成分の有効量を含む。医薬的に許容される担体は、経口、経腸、経皮、皮下、または非経腸投与のため好適な任意の不活性、有機または無機材料であり得、例えば水、ゼラチン、アラビアガム、ラクトース、微結晶性セルロース、スターチ、ナトリウムスターチグリコレート、燐酸水素カルシウム、ステアリン酸マグネシウム、タルク、コロイド性二酸化ケイ素、などであることができる。そのような組成物はまた、発明の目的にあった他の薬理学的活性な作用物質、および慣行の添加物、例えば安定剤、湿潤剤、乳化剤、香味剤、緩衝剤、などを含みうる。発明の組成物は、前記のような経腸投与のためのほか、非経腸投与、例えば注射用溶液剤、スプレー剤、例えば経鼻スプレー剤、伝達可能調製品、例えば塗布剤、パッチなどのための組成物であることもある。 The pharmaceutical composition in the present specification is a composition containing the bone metabolism improving agent and / or hydrophilic component in the present specification and, optionally, a pharmaceutically acceptable carrier. In one embodiment, the pharmaceutical composition can be a readily available pharmaceutical or quasi drug such as OTC. The form is not limited and includes, for example, pills, solutions, powders, granules, tablets, capsule tablets, troches, syrups, and dry syrups. Preferably, capsules, liquids, elixirs, tablets, cachets and suppositories are included. The pharmaceutical composition may be a composition for enteral administration, for example, according to accepted pharmaceutical practice. Such pharmaceutical compositions herein include an effective amount of the hydrophilic component, optionally in combination with a pharmaceutically acceptable carrier, as is well known in the art. The pharmaceutically acceptable carrier can be any inert, organic or inorganic material suitable for oral, enteral, transdermal, subcutaneous, or parenteral administration, eg, water, gelatin, gum arabic, lactose , Microcrystalline cellulose, starch, sodium starch glycolate, calcium hydrogen phosphate, magnesium stearate, talc, colloidal silicon dioxide, and the like. Such compositions may also contain other pharmacologically active agents that are for the purposes of the invention, and conventional additives such as stabilizers, wetting agents, emulsifying agents, flavoring agents, buffering agents, and the like. The composition of the invention is not only for enteral administration as described above, but also for parenteral administration, such as injection solutions, sprays, such as nasal sprays, transmissible preparations such as coating agents, patches, etc. It may be a composition for.
本明細書でいう組成物を含むカプセル製剤とは、上記の組成物を経口摂取に適したカプセルにより抱合したものである。カプセル中には飲食品および医薬品として許容される担体を含んでもよい。ソフトカプセル製剤は、哺乳動物対象にとって服用しやすいため好まれるため、本明細書の目的のために好ましい。 The capsule formulation containing the composition referred to in the present specification is obtained by conjugating the above composition with a capsule suitable for oral intake. The capsule may contain food and drink and a pharmaceutically acceptable carrier. Soft capsule formulations are preferred for purposes herein because they are preferred because they are easy to take for mammalian subjects.
ソフトカプセル製剤は、従来用いられているソフトカプセルの製法により製造できる。例えばロータリー式全自動ソフトカプセル成型機を用いた打ち抜き法、二枚のゼラチンシート間に内容物を入れ金型で両面から圧縮して打ち抜く平板法或いは二重ノズルを用いた滴下法（シームレスカプセル等）等を用いて、カプセル皮膜に充填し、成型および乾燥することにより、ソフトカプセル製剤を製造できる。前記ソフトカプセルの原料は、例えばゼラチン、カラギーナンを含む。前記ソフトカプセルの形状は、各種の形状、例えばフットボール(ｏｖａｌ)型、長楕円型、チューブ型、球形、フィッシュ型、セルフカット型、等が挙げられる。好ましくは形状は、フットボールであり得る。また、前記ソフトカプセルの大きさは、目的に応じて適宜選定することができる。 The soft capsule preparation can be produced by a conventionally used method for producing soft capsules. For example, a punching method using a rotary fully automatic soft capsule molding machine, a flat plate method in which the contents are placed between two gelatin sheets, compressed from both sides with a mold and punched, or a dropping method using a double nozzle (seamless capsules, etc.) A soft capsule preparation can be produced by filling a capsule film using, etc., molding and drying. The raw material of the soft capsule includes, for example, gelatin and carrageenan. Examples of the shape of the soft capsule include various shapes such as a football (oval) type, an elliptical type, a tube type, a spherical shape, a fish type, and a self-cut type. Preferably the shape can be football. Further, the size of the soft capsule can be appropriately selected according to the purpose.
本明細書における組成物、および製剤は、骨代謝関連疾患、例えば骨粗鬆症をはじめとする骨形成を必要とする症状の予防、処置効果があるとされる食品や食品添加物、例えば大豆、ザクロ等の抽出物、カルシウム、マグネシウム、ビタミンＤ、ビタミンＫ、コラーゲン等と同時に用いても良い。またその形態は限定されず、飲食物、医薬組成物、製剤、およびカプセル製剤を含む。好ましくは飲食物、カプセル製剤を含む。 The composition and preparation in the present specification are used to prevent or treat bone metabolism-related diseases such as osteoporosis and other symptoms requiring osteogenesis, and foods and food additives that are considered to have a therapeutic effect, such as soybeans and pomegranates. Extract, calcium, magnesium, vitamin D, vitamin K, collagen, etc. may be used simultaneously. The form is not limited and includes foods and drinks, pharmaceutical compositions, preparations, and capsule preparations. Preferably, foods and drinks and capsule preparations are included.
本明細書における組成物および製剤は、有効量を、必要のある対象に投与することより骨代謝関連疾患、例えば骨粗鬆症の処置又は予防に有用である。本明細書における骨粗鬆症とは、骨量が低下し、骨微細構造が劣化して、骨折の起こりやすくなった全身性疾患のことである。必要とする対象とは、具体的には、上記の骨粗鬆症の症状に当てはまる対象、その予防を必要とするもの、およびその予防を心がけるものを含む。骨粗鬆症の予防を必要とするものとは、高年齢、女性、喫煙、過度のアルコール摂取、カルシウム摂取不足、ビタミンＤ不足、ビタミンＫ不足、卵巣機能不全、副腎皮質ステロイドの服用、および運動不足を含む骨粗鬆症となるリスクが高いとされている事象にあてはまるものである。本発明の骨代謝改善用組成物および製剤は、他の骨代謝関連疾患の処置または予防にも使用しうる。 The compositions and formulations herein are useful for the treatment or prevention of diseases related to bone metabolism, such as osteoporosis, by administering an effective amount to a subject in need. As used herein, osteoporosis refers to a systemic disease in which bone mass is reduced, bone microstructure is deteriorated, and fractures are likely to occur. Specifically, the subject in need includes subjects that apply to the above-mentioned symptoms of osteoporosis, those that require prevention thereof, and those that attempt to prevent it. Those requiring prevention of osteoporosis include older age, women, smoking, excessive alcohol intake, calcium intake deficiency, vitamin D deficiency, vitamin K deficiency, ovarian dysfunction, corticosteroid use, and lack of exercise This applies to events that are considered to be at high risk for osteoporosis. The composition and preparation for improving bone metabolism of the present invention can also be used for treatment or prevention of other bone metabolism-related diseases.
本明細書における組成物、および製剤は、有効量を、必要のあるまたはない対象に投与することにより、骨損傷の処置又は予防に有用である。本明細書における骨損傷とは、骨量が減少するもしくは、骨の破壊を指す。具体的には、骨折、骨のひび、歯槽膿漏による歯槽骨の減少、運動不足による骨量減少を含む。好ましくは骨折、骨のひびを含む。必要のあるまたはない対象とは、骨損傷患者、その予防を必要とするもの、その予防を心がけるもの、および寝たきり、入院、ギプス固定などによる運動不足により骨量が減少して骨折のリスクの高いものを含む。 The compositions and formulations herein are useful for treating or preventing bone damage by administering an effective amount to a subject in need or not. As used herein, bone damage refers to bone loss or bone destruction. Specifically, it includes fractures, bone cracks, alveolar bone loss due to alveolar pus leakage, and bone loss due to lack of exercise. Preferably, it includes fractures and bone cracks. Subjects who need or do not have bone damage, those who need to be prevented, those who want to prevent it, and those who are bedridden, hospitalized, or lack of exercise due to gypsum fixation, and have a high risk of fracture Including things.
本明細書における有効量とは、本発明の剤を対象に投与した場合に、対象の骨代謝が改善される、骨損傷が予防または処置される、または骨粗鬆症が予防または処置される量である。該量は、対象の性別、健康状態、体重、年齢、栄養状態などにより異なるが、当業者は実験的または経験的に決定することができる。 As used herein, an effective amount is an amount that, when administered to a subject, improves the bone metabolism of the subject, prevents or treats bone damage, or prevents or treats osteoporosis. . The amount varies depending on the subject's sex, health status, weight, age, nutritional status, etc., but can be determined experimentally or empirically by those skilled in the art.
本明細書でいう、トウモロコシ、ワイルドライスまたはその加工物の１種類以上を親水性溶媒に接触させることを含む骨代謝改善用組成物の製造方法とは、上述の材料を上述の親水性溶媒に接触させて、親水性成分、すなわち有効成分を抽出し、許容される担体と混合することを含む製造法である。許容される担体としては、上記飲食用に許容される担体および／又は医薬用に許容される担体があげられる。本発明の骨代謝改善改善用組成物、医薬組成物、飲食用組成物、濃縮エキスまたは製剤は、例えば以下のように製造する。前記植物材料を、所望により粉砕などの加工をし、これを前記の親水性溶媒と接触させ有効成分を抽出する。所望により、濃縮、精製、混合、および製剤化工程を実施する。もっとも、これらの工程は適宜順序を変更して実施できる。 As used herein, the method for producing a composition for improving bone metabolism comprising bringing one or more types of corn, wild rice or processed product thereof into contact with a hydrophilic solvent means that the above-mentioned material is used as the above-mentioned hydrophilic solvent. It is a manufacturing method including contacting to extract a hydrophilic component, that is, an active component, and mixing with an acceptable carrier. Examples of the acceptable carrier include the carrier acceptable for food and drink and / or the carrier acceptable for pharmaceutical use. The composition for improving bone metabolism, the pharmaceutical composition, the composition for eating and drinking, the concentrated extract or the preparation of the present invention is produced, for example, as follows. If necessary, the plant material is processed such as pulverization, and the plant material is contacted with the hydrophilic solvent to extract an active ingredient. If desired, concentration, purification, mixing, and formulation steps are performed. However, these steps can be performed by appropriately changing the order.
以下、実施例を挙げて本発明をさらに具体的に説明するが、本発明はこれらの実施例に限定されるものではない。 EXAMPLES Hereinafter, although an Example is given and this invention is demonstrated further more concretely, this invention is not limited to these Examples.
（実施例１）ワイルドライスの親水性成分の調製
ワイルドライス１重量部に対して水５重量部に浸し常温で２日間、抽出した後、濾過により抽出液を得た。その抽出液を凍結乾燥して溶媒を除去し、粉末抽出物０．０２３５重量部を得た。
(Example 1) Preparation of hydrophilic component of wild rice 1 part by weight of wild rice was immersed in 5 parts by weight of water and extracted at room temperature for 2 days, and then an extract was obtained by filtration. The extract was lyophilized to remove the solvent to obtain 0.0235 parts by weight of a powder extract.
（実施例２）グルテンフィードの親水性成分の調製
グルテンフィード１重量部に対して水５重量部に浸し常温で２日間、抽出した後、濾過により抽出液を得た。その抽出液を凍結乾燥して溶媒を除去し、粉末抽出物０．１８重量部を得た。
(Example 2) Preparation of hydrophilic component of gluten feed After 1 part by weight of gluten feed was immersed in 5 parts by weight of water and extracted at room temperature for 2 days, an extract was obtained by filtration. The extract was freeze-dried to remove the solvent, and 0.18 parts by weight of a powder extract was obtained.
（実施例３）骨芽細胞石灰化活性測定による骨代謝改善活性の測定
実施例１〜２で得られた各種抽出物について骨芽細胞石灰化活性を評価した。マウス骨芽様細胞（ＭＣ３Ｔ３−Ｅ１細胞）を９６穴プレートに ５×１０4 ｃｅｌｌｓ／穴播種し、１０％ ＦＢＳを含むα−ＭＥＭ培地で３７℃、５％ＣＯ2−９５％空気で３日間培養した。
(Example 3) Measurement of bone metabolism improving activity by measuring osteoblast calcification activity Osteoblast calcification activity was evaluated for the various extracts obtained in Examples 1-2. Mouse osteoblast-like cells (MC3T3-E1 cells) were seeded in a 96-well plate at 5 × 10 4 cells / well and α-MEM medium containing 10% FBS at 37 ° C., 5% CO 2 -95% air for 3 days. Cultured.
３日後、各抽出物を１００μｇ/ｍｌ、又はＢＭＰ−２を０．２μｇ/ｍｌの濃度で添加した１０％のＦＢＳと、２ｍＭのグリセロリン酸２ナトリウムを含むα−ＭＥＭ培地に交換した。抽出物およびＢＭＰ−２は、水に溶解して溶液が培地の０．１％となるように加えた。培地は２〜３日おきに交換し、３７℃、５％ＣＯ2−９５％空気で１４日間培養後、骨芽細胞石灰化促進率（％）を測定した。 Three days later, each extract was replaced with α-MEM medium containing 10% FBS supplemented with 100 μg / ml or BMP-2 at a concentration of 0.2 μg / ml and 2 mM disodium glycerophosphate. The extract and BMP-2 were added to dissolve in water so that the solution was 0.1% of the medium. The medium was changed every 2 to 3 days, and after 14 days of culturing at 37 ° C. and 5% CO 2 -95% air, the osteoblast calcification promotion rate (%) was measured.
骨芽細胞の石灰化は細胞中に蓄積されたカルシウムを計測することにより評価した。培養後の細胞をリン酸生理食塩水（７．４）で１穴につき１００μｌで３回洗浄を行い、２Ｎ塩酸を５０μｌ/穴 添加し、室温で一晩さらしカルシウムを抽出した。この抽出したカルシウムをメチルキシレノールブルー（ＭＸＢ法）に基づくキット（カルシウムE-テストワコー；和光純薬株式会社製）を用いて定量した。骨芽細胞石灰化促進率は、抽出物と平行して石灰化活性を測定した溶媒（水）対照の値を１００％として計算した。 Osteoblast calcification was evaluated by measuring calcium accumulated in the cells. The cultured cells were washed with phosphoric saline (7.4) three times at 100 μl per well, 2N hydrochloric acid was added at 50 μl / well, and calcium was extracted by exposure at room temperature overnight. The extracted calcium was quantified using a kit (Calcium E-Test Wako; manufactured by Wako Pure Chemical Industries, Ltd.) based on methylxylenol blue (MXB method). The osteoblast calcification promotion rate was calculated by setting the value of the solvent (water) control in which the mineralization activity was measured in parallel with the extract as 100%.
（実施例４）ワイルドライス親水性抽出物のタブレットの製造
実施例１のワイルドライス親水性抽出物４５重量部、乳糖３５重量部、結晶セルロース１５重量部、ショ糖脂肪酸エステル５重量部を用い、ロータリー式打錠機により飲食用タブレットを製造した。
(Example 4) Manufacture of tablet of wild rice hydrophilic extract 45 parts by weight of wild rice hydrophilic extract of Example 1, 35 parts by weight of lactose, 15 parts by weight of crystalline cellulose, 5 parts by weight of sucrose fatty acid ester, A tablet for eating and drinking was produced by a rotary tableting machine.
（実施例５）グルテンフィード親水性抽出物のタブレットの製造
実施例２のグルテンフィード親水性抽出物４５重量部、乳糖３５重量部、結晶セルロース １５重量部、ショ糖脂肪酸エステル５重量部を用い、ロータリー式打錠機により飲食用タブレットを製造した。
(Example 5) Manufacture of tablets of gluten feed hydrophilic extract 45 parts by weight of gluten feed hydrophilic extract of Example 2, 35 parts by weight of lactose, 15 parts by weight of crystalline cellulose, 5 parts by weight of sucrose fatty acid ester, A tablet for eating and drinking was produced by a rotary tableting machine.
（実施例６）ワイルドライス親水性抽出物のソフトカプセルの製造
実施例1のワイルドライス親水性抽出物を、４０重量部、オリーブ油５５重量部、グリセリン脂肪酸エステル５重量部の組成で混合、粉砕し、ゼラチン製カプセルに充填して、クコ抽出物を含有する飲食用カプセル剤を製造した。
(Example 6) Production of soft capsule of wild rice hydrophilic extract The wild rice hydrophilic extract of Example 1 was mixed and pulverized in a composition of 40 parts by weight, olive oil 55 parts by weight, glycerin fatty acid ester 5 parts by weight, The capsule made from gelatin was filled, and the capsule for food and drink containing a wolfberry extract was manufactured.
（実施例７）グルテンフィード親水性抽出物のソフトカプセルの製造
実施例２のグルテンフィード親水性抽出物４０重量部、オリーブ油５５重量部、グリセリン脂肪酸エステル５重量部の組成で混合、粉砕し、ゼラチン製カプセルに充填して、クコ抽出物を含有する飲食用カプセル剤を製造した。
Example 7 Production of Soft Capsules of Gluten Feed Hydrophilic Extract Mixed and ground with a composition of 40 parts by weight of the gluten feed hydrophilic extract of Example 2, 55 parts by weight of olive oil and 5 parts by weight of glycerin fatty acid ester, and made of gelatin A capsule for food and drink containing a wolfberry extract was prepared by filling the capsule.
（実施例８）ワイルドライス親水性抽出物含有清涼飲料水の製造
実施例１のワイルドライス親水性抽出物１重量部、液糖３０重量部、クエン酸０．１重量部、香料０．５重量部、水１５０重量部を用い混合して、ワイルドライス親水性抽出物を含有する清涼飲料水を製造した。
(Example 8) Manufacture of soft drink containing wild rice hydrophilic extract 1 part by weight of wild rice hydrophilic extract of Example 1, 30 parts by weight of liquid sugar, 0.1 part by weight of citric acid, 0.5 part by weight of fragrance Parts and 150 parts by weight of water were mixed to produce a soft drink containing a wild rice hydrophilic extract.
（実施例９）グルテンフィード親水性抽出物含有清涼飲料水の製造
実施例２のグルテンフィード親水性抽出物１重量部、液糖３０重量部、クエン酸０．１重量部、香料０．５重量部、水１５０重量部を用い混合して、グルテンフィード親水性抽出物を含有する清涼飲料水を製造した。
(Example 9) Production of soft drink containing gluten-feed hydrophilic extract 1 part by weight of gluten-feed hydrophilic extract of Example 2, 30 parts by weight of liquid sugar, 0.1 part by weight of citric acid, 0.5% by weight of fragrance Parts and 150 parts by weight of water were mixed to produce a soft drink containing a gluten-feed hydrophilic extract.
（実施例１０）ワイルドライス親水性抽出物含有クラッカーの調製
実施例１のワイルドライス親水性抽出物１重量部、薄力粉１２０重量部、食塩１重量部、ベーキングパウダー２重量部、バター３０重量部の組成で常法によりワイルドライス親水性抽出物含有クラッカーを調製した。
(Example 10) Preparation of wild rice hydrophilic extract-containing cracker 1 part by weight of wild rice hydrophilic extract of Example 1, 120 parts by weight of flour, 1 part by weight of salt, 2 parts by weight of baking powder, 30 parts by weight of butter A wild rice hydrophilic extract-containing cracker was prepared by a conventional method with a composition.
（実施例１１）グルテンフィード親水性抽出物含有クラッカーの調製
実施例２のグルテンフィード親水性抽出物１重量部、薄力粉１２０重量部、食塩１重量部、ベーキングパウダー２重量部、バター３０重量部の組成で常法によりグルテンフィード親水性抽出物含有クラッカーを調製した。
(Example 11) Preparation of cracker containing gluten-feed hydrophilic extract 1 part by weight of gluten-feed hydrophilic extract of Example 2, 120 parts by weight of flour, 1 part by weight of salt, 2 parts by weight of baking powder, 30 parts by weight of butter A cracker containing a gluten feed hydrophilic extract was prepared by a conventional method with a composition.
Claims (11)
A composition for improving bone metabolism comprising, as an active ingredient, one or more hydrophilic components of a material selected from the group consisting of corn ( Zea mays ) and wild rice ( Zizania latifolia Turcz. ) Materials.
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