JP2006194788A - Particle image processing method and device, and its program - Google Patents

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圭一 山口
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Abstract

<P>PROBLEM TO BE SOLVED: To accurately acquire feature information of a particle from a particle image. <P>SOLUTION: This particle image processing method comprises a process of imaging the particle, a process of performing interpolation processing of increasing the number of constituted pixels of a multi-gradation image formed of a plurality of pixels obtained by imaging, and a process of acquiring information showing the feature of the particle based on the interpolation image having been subjected to the interpolation processing. <P>COPYRIGHT: (C)2006,JPO&NCIPI

Description

この発明は粒子を撮像し、その粒子像を画像解析することによって、粒子に関する情報を求める粒子画像処理方法と装置に関する。   The present invention relates to a particle image processing method and apparatus for obtaining information on particles by imaging particles and analyzing the image of the particles.

近年、ファインセラミックス粒子やトナー、顔料、化粧品用パウダー、食品添加物、化学薬品のような種々の粒子状物質の製造過程や品質管理工程において、粒子物質の各粒子に関する様々な情報を測定し、粒子の解析を行うことが重要になってきている。
例えば、粒子の解析を行う装置として、粒子懸濁液の流れをシース液で取り囲んだ流れに変換するフローセルと、変換された懸濁液流に対して光を照射する光照射手段と、照射された粒子を撮像する撮像手段と、撮像された粒子像を解析する画像解析手段と、表示手段とを備え、画像解析手段は、撮像された各粒子像の面積および周囲長についての粒子データを測定し、その粒子データから粒子と円形度を算出する算出手段と、粒径による粒度頻度データに基づいてヒストグラムを作成すると共に粒径と円形度とに対応する2つのパラメータによる2次元スキャッタグラムを作成して表示手段にそれぞれ表示する図表作成手段と、撮像された各粒子像を格納する記憶手段と、記憶手段に格納された各粒子像を表示手段に一括表示する粒子像呼出手段からなることを特徴とする粒子画像分析装置が知られている(例えば、特許文献1参照)。
特開平8−136439号公報
In recent years, in the manufacturing process and quality control process of various particulate materials such as fine ceramic particles and toner, pigments, cosmetic powders, food additives, chemicals, various information about each particle of the particulate material has been measured, It is becoming important to analyze particles.
For example, as an apparatus for analyzing particles, a flow cell for converting a flow of a particle suspension into a flow surrounded by a sheath liquid, light irradiation means for irradiating light to the converted suspension flow, and irradiation The image analysis means measures the particle data about the area and the perimeter of each imaged particle image, the image analysis means for analyzing the captured particle image, and the display means. Then, a calculation means for calculating the particle and circularity from the particle data, a histogram based on the particle size frequency data based on the particle size, and a two-dimensional scattergram based on two parameters corresponding to the particle size and the circularity are created. A chart creation means for displaying each on the display means, a storage means for storing each captured particle image, and a particle image call for collectively displaying each particle image stored in the storage means on the display means Particle image analyzer which comprises a means is known (e.g., see Patent Document 1).
JP-A-8-136439

しかしながら、従来の方法や装置では、微小径の粒子画像に対して、粒子画像の解像度(分解能)が十分に得られない場合に、粒子の2値化画像によって得られる円相当径や、円形度の算出精度が低下してしまう場合があった。
この発明は、このような事情を考慮してなされたもので、粒子を撮像して得られた画像データの画素を補間して粒子画像を高解像度化することにより、その画像を2値化した画像から求められる円相当径や円形度の算出精度を向上させることを特徴とする粒子画像処理技術を提供するものである。
However, in the conventional method or apparatus, when the resolution (resolution) of the particle image cannot be sufficiently obtained for the particle image having a small diameter, the equivalent circle diameter or the circularity obtained from the binarized image of the particle is obtained. In some cases, the calculation accuracy of the value is lowered.
The present invention has been made in view of such circumstances, and binarizes the image by interpolating the pixels of the image data obtained by imaging the particles to increase the resolution of the particle image. It is an object of the present invention to provide a particle image processing technique characterized by improving the calculation accuracy of the equivalent circle diameter and circularity obtained from an image.

この発明は、粒子を撮像する工程と、撮像して得られた複数の画素からなる多階調画像に対して構成画素数を増やす補間処理を行う工程と、補間処理された補間画像に基づいて粒子の特徴を表す情報を求める工程とを有する粒子画像処理方法を提供するものである。   The present invention is based on a step of imaging particles, a step of performing interpolation processing to increase the number of constituent pixels for a multi-gradation image composed of a plurality of pixels obtained by imaging, and an interpolation image subjected to interpolation processing There is provided a particle image processing method including a step of obtaining information representing the characteristics of particles.

また、この発明は、粒子を撮像して得られた複数の画素からなる多階調画像に対して画素を補間して構成画素数を増やす補間処理を行う画素補間手段と、補間処理された補間画像に基づいて粒子の特徴を表す特徴情報を求める解析手段とを備える粒子画像処理装置を提供するものである。   The present invention also provides pixel interpolation means for performing interpolation processing to increase the number of constituent pixels by interpolating pixels with respect to a multi-tone image composed of a plurality of pixels obtained by imaging particles, and interpolation performed by interpolation processing. The present invention provides a particle image processing apparatus comprising analysis means for obtaining feature information that represents the feature of a particle based on an image.

この発明によれば、多階調画像に対して画素が補間され、補間された画像に基づいて粒子の特徴情報が求められるので、精度の高い特徴情報を得ることができる。   According to the present invention, pixels are interpolated from the multi-tone image, and the feature information of the particles is obtained based on the interpolated image. Therefore, highly accurate feature information can be obtained.

以下、図面に基づいてこの発明の実施形態を説明する。
この発明の実施形態としての粒子画像分析装置の外観図を図1に示す。図1に示されるように、粒子画像分析装置は、粒子画像撮像装置21とデータ分析装置22とから構成される。粒子撮像装置21とデータ分析装置22とは通信ケーブルによって接続され、粒子撮像装置21で撮像された撮像画像は通信ケーブルを介してデータ分析装置22に送信される。
Embodiments of the present invention will be described below with reference to the drawings.
FIG. 1 shows an external view of a particle image analyzer as an embodiment of the present invention. As shown in FIG. 1, the particle image analysis apparatus includes a particle image imaging apparatus 21 and a data analysis apparatus 22. The particle imaging device 21 and the data analysis device 22 are connected by a communication cable, and a captured image captured by the particle imaging device 21 is transmitted to the data analysis device 22 via the communication cable.

データ分析装置22は、粒子撮像装置21から送信されてきた撮像画像を画像処理する粒子画像処理装置11と、粒子画像処理装置11から出力された粒子画像や分析データなどを表示するためのモニターテレビ12と、粒子画像処理装置11に対するデータの入力や操作を行うためのキーボード13と、粒子画像処理装置11で動作するプログラムを読み取るためのプログラム読み取り部15(図4参照)から主として構成される。   The data analysis device 22 is a particle image processing device 11 that performs image processing on the captured image transmitted from the particle imaging device 21, and a monitor television for displaying the particle image, analysis data, and the like output from the particle image processing device 11. 12, a keyboard 13 for inputting and operating data on the particle image processing apparatus 11, and a program reading unit 15 (see FIG. 4) for reading a program operating on the particle image processing apparatus 11.

次に、粒子撮像装置21の撮像部の構成について、図2を用いて説明する。吸引ピペット1は、サンプルフィルター2、バルブ16、バルブ17を介してポンプ18に接続されている。また、バルブ16とバルブ17の間に試料をチャージングするための試料チャージングライン3が接続され、試料チャージングライン3には、試料チャージングライン3にチャージングされた粒子懸濁液を押し出すためのシリンジ4が接続されている。また、試料チャージングライン3はフローセル5に接続されている。フローセル5は、粒子懸濁液の流れをシース液で包んで流すことにより、流体力学的効果によって、扁平な流れを形成することができるセルである。また、試料液ボトル6は、シース液チャンバー7、フローセル5を介して廃液チャンバー14に接続されている。   Next, the configuration of the imaging unit of the particle imaging device 21 will be described with reference to FIG. The suction pipette 1 is connected to a pump 18 via a sample filter 2, a valve 16 and a valve 17. A sample charging line 3 for charging the sample is connected between the valve 16 and the valve 17, and the particle suspension charged in the sample charging line 3 is pushed out to the sample charging line 3. A syringe 4 is connected. The sample charging line 3 is connected to the flow cell 5. The flow cell 5 is a cell that can form a flat flow by a hydrodynamic effect by wrapping and flowing the flow of the particle suspension in a sheath liquid. The sample liquid bottle 6 is connected to the waste liquid chamber 14 via the sheath liquid chamber 7 and the flow cell 5.

ストロボ8とビデオカメラ10とはフローセル5を挟んで配置され、フローセル5とビデオカメラ10の間には対物レンズ9が配置されている。なお、この実施形態では、撮像倍率は20倍、解像度は512×512画素である。   The strobe 8 and the video camera 10 are disposed with the flow cell 5 interposed therebetween, and an objective lens 9 is disposed between the flow cell 5 and the video camera 10. In this embodiment, the imaging magnification is 20 times, and the resolution is 512 × 512 pixels.

次に、粒子撮像装置21の動作について説明する。
図2において、バルブ16、17が開くと、粒子懸濁液はポンプ18によって吸引ピペット1から吸引され、サンプルフィルター2を通りフローセル5の上部の試料チャージングライン3へ引き込まれる。サンプルフィルター2によって、懸濁液中の粗大な粒子ごみが取り除かれ、流路の細い(狭い)フローセル5が詰まらないようにしている。またこのサンプルフィルタ2は、粗大な凝集塊をほぐす効果も持っている。
Next, the operation of the particle imaging device 21 will be described.
In FIG. 2, when the valves 16 and 17 are opened, the particle suspension is sucked from the suction pipette 1 by the pump 18, passes through the sample filter 2, and is drawn into the sample charging line 3 at the top of the flow cell 5. The sample filter 2 removes coarse particle dust in the suspension so that the flow cell 5 having a narrow (narrow) flow path is not clogged. The sample filter 2 also has an effect of loosening coarse agglomerates.

チャージングライン3に引きこまれた粒子懸濁液は、バルブ16、17を閉じてシリンジ4を動作させることによってフローセル5に導かれ、内部のサンプルノズル(図示しない)の先端から懸濁液が押し出される。それと同時にシース液もシース液ボトル6からシース液チャンバー7を介してフローセル5に送り込まれ、粒子懸濁液はそのシース液で取り囲まれ、液体力学的に懸濁液は偏平に絞られてフローセル5の内を流れ、廃液チャンバー14を介して排出される。このように偏平に絞られた懸濁液流に対して、ストロボ8からパルス光を周期的に照射することによって、粒子の静止画像が対物レンズ9を介してビデオカメラ10で撮像される。   The particle suspension drawn into the charging line 3 is guided to the flow cell 5 by closing the valves 16 and 17 and operating the syringe 4, and the suspension is discharged from the tip of an internal sample nozzle (not shown). Extruded. At the same time, the sheath liquid is also sent from the sheath liquid bottle 6 to the flow cell 5 through the sheath liquid chamber 7, the particle suspension is surrounded by the sheath liquid, and the suspension is squeezed flatly in terms of fluid dynamics. And is discharged through the waste liquid chamber 14. By periodically irradiating pulse light from the strobe 8 to the suspension flow narrowed in this manner, a still image of particles is captured by the video camera 10 via the objective lens 9.

粒子を懸濁するための溶媒は粒子特性(粒径や比重)に応じて最適なものを選べばよい。
また、懸濁液の流れを確実に偏平にあるいは細かく絞り込むために懸濁液の特性に応じて、例えば溶媒の粘度や比重に応じて、シース液の粘度や比重を変更するのが好ましい。図2には図示していないが、複数種類のシース液ボトルを設け、測定する試料に応じて使用するシース液の種類を容易に切り換えられるような機構を付加してもよい。
The optimum solvent for suspending the particles may be selected according to the particle characteristics (particle size and specific gravity).
Further, in order to reliably narrow the flow of the suspension flatly or finely, it is preferable to change the viscosity or specific gravity of the sheath liquid according to the characteristics of the suspension, for example, according to the viscosity or specific gravity of the solvent. Although not shown in FIG. 2, a plurality of types of sheath liquid bottles may be provided, and a mechanism that can easily switch the type of sheath liquid to be used according to the sample to be measured may be added.

懸濁液流の偏平な面をビデオカメラ10で撮像すれば、ビデオカメラ10の撮像エリア全体にわたって粒子像を捉えることができ、図3に示すように1回の撮像で多数の粒子を撮像できる。また、撮像される粒子の重心とビデオカメラ10の撮像面との距離をほぼ一定にすることができるので、粒子の大きさに関わらず常にピントの合った粒子像が得られる。   If the flat surface of the suspension flow is imaged by the video camera 10, a particle image can be captured over the entire imaging area of the video camera 10, and a large number of particles can be imaged by one imaging as shown in FIG. . In addition, since the distance between the center of gravity of the imaged particle and the imaging surface of the video camera 10 can be made almost constant, a focused particle image can always be obtained regardless of the size of the particle.

図4はデータ分析装置22の構成を示すブロック図である。同図で示すように、データ分析装置22は、ビデオカメラ10から送信されてきた撮像画像を画像処理する粒子画像処理装置11と、粒子画像処理装置11から出力された粒子画像や分析データなどを表示するためのモニターテレビ12と、粒子画像処理装置11に対するデータの入力や操作を行うためのキーボード13と、画像処理装置11で動作するプログラムを読み取るためのプログラム読み取り部15から主として構成される。   FIG. 4 is a block diagram showing the configuration of the data analysis device 22. As shown in the figure, the data analysis device 22 performs image processing on the captured image transmitted from the video camera 10, and the particle image and analysis data output from the particle image processing device 11. It is mainly composed of a monitor TV 12 for displaying, a keyboard 13 for inputting and operating data on the particle image processing apparatus 11, and a program reading unit 15 for reading a program operating on the image processing apparatus 11.

粒子画像処理装置11は、ビデオカメラ10の撮像により得られる複数の画素からなる濃淡画像に対して画素を補間して補間画像を生成する画像補間手段、つまり高解像度化部11fと、高解像度化部11fから得られる補間画像の画像信号を2値化データに変換する2値化部11aと、2値化された粒子画像データをエッジトレースするエッジトレース部11bと、エッジトレースして得られたデータを解析処理する解析部11cと、画像データや処理データなどを格納するデータ記憶部11dと、プログラム読み取り部15によってプログラム記録媒体から読み取られた粒子画像解析用プログラムを格納するプログラム記憶部11eを備える。   The particle image processing apparatus 11 includes an image interpolating unit that interpolates pixels with respect to a grayscale image composed of a plurality of pixels obtained by imaging by the video camera 10, that is, a high resolution unit 11 f and a high resolution unit. Obtained by edge tracing, a binarization unit 11a that converts the image signal of the interpolation image obtained from the unit 11f into binarized data, an edge trace unit 11b that performs edge tracing of the binarized particle image data An analysis unit 11c for analyzing data, a data storage unit 11d for storing image data and processing data, and a program storage unit 11e for storing a particle image analysis program read from a program recording medium by the program reading unit 15 Prepare.

ここで、プログラム読み取り部15はCD−ROMドライブ、プログラム記録媒体はCD−ROMから構成される。
そして、画像処理部11は、ビデオカメラ10からの画像信号をキーボード13から入力される処理条件に応じて処理し、処理結果をモニターテレビ12に表示する。
ここで、粒子画像処理装置11は、CPU、ROM、RAMからなるパーソナルコンピュータにより構成される。
Here, the program reading unit 15 includes a CD-ROM drive, and the program recording medium includes a CD-ROM.
Then, the image processing unit 11 processes the image signal from the video camera 10 according to the processing condition input from the keyboard 13 and displays the processing result on the monitor television 12.
Here, the particle image processing apparatus 11 is configured by a personal computer including a CPU, a ROM, and a RAM.

データ分析装置22における画像処理の手順を図5のフローチャートに示す。
まず、ビデオカメラ10からの画像信号は、画像処理部11に取り込まれてA/D変換され、濃淡画像である画像データとして取り込まれる(ステップS1)。次に、懸濁液流に対する照射光の強度むら(シューディング)を補正するためのバックグラウンド補正が行われる(ステップS2)。
The procedure of image processing in the data analyzer 22 is shown in the flowchart of FIG.
First, an image signal from the video camera 10 is captured by the image processing unit 11, A / D converted, and captured as image data that is a grayscale image (step S1). Next, background correction for correcting the intensity unevenness (sudding) of the irradiation light with respect to the suspension flow is performed (step S2).

このバックグラウンド補正は、具体的には、粒子フローセル5を通過していない時に光照射して得られる画像データを、測定前にあらかじめ取り込んでおき、その画像データと実際の粒子撮像画面の画像データとを比較演算することであり、画像処理として一般的によく知られた処理である。   Specifically, this background correction is performed by capturing in advance image data obtained by light irradiation when not passing through the particle flow cell 5 before measurement, and the image data and image data of the actual particle imaging screen. Is a process generally known as image processing.

次に、高解度化処理、つまり画素補間処理が行われる(ステップS3)。具体的には、粒子画像の全画素につき、隣接する2つの画素間に補間用画素が挿入される。補間用画素としては、隣接する画素における階調、ここでは輝度の平均値を有するように形成され、ここでは、いわゆる線形補間が行われる。   Next, high resolution processing, that is, pixel interpolation processing is performed (step S3). Specifically, for every pixel of the particle image, an interpolation pixel is inserted between two adjacent pixels. The interpolation pixels are formed so as to have gradations in adjacent pixels, here, average luminance values, and here, so-called linear interpolation is performed.

まず、隣接する画素に1つの画素を補間する場合について説明する。図6の(a)に示すように互いに接する4つの画素Pa,Pb,Pc,Pdに着目すると、これらは図6の(b)に示すように補間用画素Pab,Pac,Pcd,Pbd,Pmによって補間される。この場合、画素Pa,Pb,Pc,Pdの各輝度が、
Pa=A
Pb=B
Pc=C
Pd=D
であると、補間画素Pab,Pac,Pcd,Pbd,Pmの各輝度は、
Pab=(1/2)A+(1/2)B
Pac=(1/2)A+(1/2)C
Pcd=(1/2)C+(1/2)D
Pbd=(1/2)B+(1/2)D
Pm=(1/4)A+(1/4)B+(1/4)C+(1/4)D
となる。
First, a case where one pixel is interpolated between adjacent pixels will be described. Focusing on the four pixels Pa, Pb, Pc, and Pd that are in contact with each other as shown in FIG. 6A, these are interpolated pixels Pab, Pac, Pcd, Pbd, and Pm as shown in FIG. 6B. Is interpolated by In this case, each brightness of the pixels Pa, Pb, Pc, Pd is
Pa = A
Pb = B
Pc = C
Pd = D
When each of the interpolated pixels Pab, Pac, Pcd, Pbd, Pm is
Pab = (1/2) A + (1/2) B
Pac = (1/2) A + (1/2) C
Pcd = (1/2) C + (1/2) D
Pbd = (1/2) B + (1/2) D
Pm = (1/4) A + (1/4) B + (1/4) C + (1/4) D
It becomes.

次に、隣接する画素に2つの画素を補間する場合について説明する。図6の(a)に示すように互いに接する4つの画素Pa,Pb,Pc,Pdに着目すると、これらは図6の(c)に示すように補間用画素Pab1,Pab2,Pac1,Pac2,Pcd1,Pcd2,Pbd1,Pbd2,Pm1,Pm2,Pm3,Pm4によって補間される。この場合、画素Pa,Pb,Pc,Pdの各輝度が、
Pa=A
Pb=B
Pc=C
Pd=D
であると、補間画素Pab1,Pab2,Pac1,Pac2,Pcd1,Pcd2,Pbd1,Pbd2,Pm1,Pm2,Pm3,Pm4の各輝度は、
Pab1=(2/3)A+(1/3)B
Pab2=(1/3)A+(2/3)B
Pac1=(2/3)A+(1/3)C
Pac2=(1/3)A+(2/3)C
Pcd1=(2/3)C+(1/3)D
Pcd2=(1/3)C+(2/3)D
Pbd1=(2/3)B+(1/3)D
Pbd2=(1/3)B+(2/3)D
Pm1=(2/3)(2/3)A+(2/3)(1/3)B+(1/3)(2/3)C+(1/3)(1/3)D
Pm2=(2/3)(1/3)A+(2/3)(2/3)B+(1/3)(1/3)C+(1/3)(2/3)D
Pm3=(1/3)(2/3)A+(1/3)(1/3)B+(2/3)(2/3)C+(2/3)(1/3)D
Pm4=(1/3)(1/3)A+(1/3)(2/3)B+(2/3)(1/3)C+(2/3)(2/3)D
となる。
Next, a case where two pixels are interpolated between adjacent pixels will be described. Focusing on the four pixels Pa, Pb, Pc, and Pd that are in contact with each other as shown in FIG. 6A, these are interpolated pixels Pab1, Pab2, Pac1, Pac2, and Pcd1 as shown in FIG. 6C. , Pcd2, Pbd1, Pbd2, Pm1, Pm2, Pm3, Pm4. In this case, each brightness of the pixels Pa, Pb, Pc, Pd is
Pa = A
Pb = B
Pc = C
Pd = D
The luminances of the interpolated pixels Pab1, Pab2, Pac1, Pac2, Pcd1, Pcd2, Pbd1, Pbd2, Pm1, Pm2, Pm3, and Pm4 are
Pab1 = (2/3) A + (1/3) B
Pab2 = (1/3) A + (2/3) B
Pac1 = (2/3) A + (1/3) C
Pac2 = (1/3) A + (2/3) C
Pcd1 = (2/3) C + (1/3) D
Pcd2 = (1/3) C + (2/3) D
Pbd1 = (2/3) B + (1/3) D
Pbd2 = (1/3) B + (2/3) D
Pm1 = (2/3) (2/3) A + (2/3) (1/3) B + (1/3) (2/3) C + (1/3) (1/3) D
Pm2 = (2/3) (1/3) A + (2/3) (2/3) B + (1/3) (1/3) C + (1/3) (2/3) D
Pm3 = (1/3) (2/3) A + (1/3) (1/3) B + (2/3) (2/3) C + (2/3) (1/3) D
Pm4 = (1/3) (1/3) A + (1/3) (2/3) B + (2/3) (1/3) C + (2/3) (2/3) D
It becomes.

このように、線形補間は、周囲4画素からの距離による加重平均で補間画素の画素濃度(本実施形態では輝度)を求めている。画素間の距離は画素中心間の距離であり、周囲4画素(補間前の画素)の隣接する画素中心間の距離を1としている。図6の(a)において、画素Paの画素中心から補間用画素中心までのY方向の距離をP、画素Paの画素中心から補間用画素中心までのX方向の距離をQとし、画素Pa,Pb,Pc,Pdの画素濃度が、
Pa=K
Pb=L
Pc=M
Pd=N
であると、補間用画素の画素濃度は、
(1−P)(1−Q)K+(1−P)QL+P(1−Q)M+PQN
と表わされる。
従って、加重平均を用いた線形補間によって、補間用画素の画素濃度(本実施形態では輝度)を容易に求めることが可能である。
As described above, in the linear interpolation, the pixel density (luminance in this embodiment) of the interpolation pixel is obtained by a weighted average based on the distance from the surrounding four pixels. The distance between the pixels is the distance between the pixel centers, and the distance between adjacent pixel centers of the surrounding four pixels (pixels before interpolation) is 1. In FIG. 6A, the distance in the Y direction from the pixel center of the pixel Pa to the interpolation pixel center is P, the distance in the X direction from the pixel center of the pixel Pa to the interpolation pixel center is Q, and the pixels Pa, The pixel density of Pb, Pc, Pd is
Pa = K
Pb = L
Pc = M
Pd = N
The pixel density of the interpolation pixel is
(1-P) (1-Q) K + (1-P) QL + P (1-Q) M + PQN
It is expressed as
Therefore, the pixel density (luminance in this embodiment) of the interpolation pixel can be easily obtained by linear interpolation using a weighted average.

次に、粒子画像の輪郭を的確に抽出するための前処理として輪郭強調処理を行う(ステップS3a)。具体的には、一般的によく知られたラプラシアン強調処理を行う。   Next, contour enhancement processing is performed as preprocessing for accurately extracting the contour of the particle image (step S3a). Specifically, generally well-known Laplacian enhancement processing is performed.

次に、画像データをある適当なスレシホールドレベルで2値化すると、各粒子画像は図7に示すような2値化画像となる(ステップS4)。次に、2値化された各粒子画像に対してエッジ点が(輪郭を表す輪郭画素)かどうかを判定するとともに、着目しているエッジ点に対して隣合うエッジ点がどの方向にあるかの情報、すなわちチェインコードを生成する(ステップS5)。次に、このチェインコードを参照しながら粒子画像のエッジトレースを行い、粒子画像の解析パラメータとして、各粒子画像の面積(総画素数)St、直行カウント数Et、斜行カウント数Esおよびコーナーカウント数Cnを求める(ステップS6)。   Next, when the image data is binarized at a certain appropriate threshold level, each particle image becomes a binarized image as shown in FIG. 7 (step S4). Next, for each binarized particle image, it is determined whether the edge point is a (contour pixel representing the contour), and in which direction is the edge point adjacent to the edge point of interest Information, that is, a chain code is generated (step S5). Next, edge tracing of the particle image is performed with reference to this chain code, and the area (total number of pixels) St, the orthogonal count number Et, the skew count number Es, and the corner count of each particle image are analyzed as the particle image analysis parameters. The number Cn is obtained (step S6).

ここで、ステップS5、S6における処理を図7を用いて具体的に説明すると、粒子画像(図7のハッチング部分)の輪郭を形成する輪郭画素(エッジ点)の中心点a〜nを直線で結び、全輪郭画素を点aから反時計方向方向(又は時計方向)に順次着目し、現在の着目輪郭画素と次の着目輪郭画素とを結ぶ直線が縦又は横方向を向くとき現在の着目輪郭画素を第1画素とみなし、現在の着目輪郭画素と次の着目輪郭画素とを結ぶ直線が斜め方向を向くとき現在の着目輪郭画素を第2画素とみなし、第1および第2画素の数を計数する。   Here, the processing in steps S5 and S6 will be described in detail with reference to FIG. 7. The center points a to n of the contour pixels (edge points) forming the contour of the particle image (hatched portion in FIG. 7) are linear. When all the contour pixels are sequentially focused in the counterclockwise direction (or clockwise direction) from the point a, and the straight line connecting the current target contour pixel and the next target contour pixel is directed in the vertical or horizontal direction, the current target contour The pixel is regarded as the first pixel, and when the straight line connecting the current target contour pixel and the next target contour pixel is directed in the oblique direction, the current target contour pixel is regarded as the second pixel, and the number of the first and second pixels is determined. Count.

ここで、第1画素の合計数が直行カウント数Etであり、第2画素の合計数が斜行カウント数Esである。
また、図7において、着目する1つの輪郭画素とその両側に隣接する2つの輪郭画素とを結ぶ直線が、着目した輪郭画素において角度をもって交差する場合にその輪郭画素を屈曲点とみなし、全輪郭画素の各々に着目して屈曲点の数を計数する。屈曲点の合計数がコーナーカウント数Cnである。
なお、図7に図示される粒子画像では、
面積St=総画素数=25であり、
第1画素は、点c、e、g、h、j、k、l、mを含む画素であるので、Et=8となり、
第2画素は、点a、b、d、f、i、nを含む画素であるので、Es=6となり、
屈曲点は、点a、c、d、e、f、g、i、j、nであるので、Cn=9となる。
Here, the total number of first pixels is the orthogonal count number Et, and the total number of second pixels is the skew count number Es.
In FIG. 7, when a straight line connecting one contour pixel of interest and two contour pixels adjacent to both sides thereof intersects with the angle of interest of the contour pixel, the contour pixel is regarded as a bending point, and the entire contour Focusing on each of the pixels, the number of inflection points is counted. The total number of bending points is the corner count number Cn.
In the particle image shown in FIG.
Area St = total number of pixels = 25,
Since the first pixel is a pixel including points c, e, g, h, j, k, l, m, Et = 8,
Since the second pixel is a pixel including points a, b, d, f, i, and n, Es = 6.
Since the bending points are points a, c, d, e, f, g, i, j, and n, Cn = 9.

必要な撮像処理が終了すると(ステップS7)、各粒子画像に対して求められた解析パラメータに基づいて、まず、周囲長Lが次式で算出される(ステップS8)。
L=0.980×Et+1.406×Es−0.091×Cn・・・(1)
(但し、2画素間の距離を1とする。)
式(1)はVossepoelの式として知られている。
次に、面積Sが次式で算出される(ステップS9)。
S=St−0.5L・・・(2)
(但し、2画素間の距離を1とする)
次に、円相当径Rsが次式で算出される(ステップS10)。
Rs=a×S1/2×k+b・・・(3)
ここで、kは1画素の寸法、a、bは補正係数である。
When the necessary imaging process is completed (step S7), the perimeter length L is first calculated by the following equation based on the analysis parameters obtained for each particle image (step S8).
L = 0.980 * Et + 1.406 * Es-0.091 * Cn ... (1)
(However, the distance between two pixels is 1.)
Equation (1) is known as Vossepoel's equation.
Next, the area S is calculated by the following equation (step S9).
S = St−0.5L (2)
(However, the distance between two pixels is 1.)
Next, the equivalent circle diameter Rs is calculated by the following equation (step S10).
Rs = a × S 1/2 × k + b (3)
Here, k is the size of one pixel, and a and b are correction coefficients.

次に、円形度Xが次式で算出される(ステップS11)。
X=(粒子画像と同じ面積をもつ円の周囲長)/(粒子画像の周囲長)
=πRs/L・・・(4)
となる。
以上のようにして、多数の粒子画像の各々について周囲長、面積、円相当径および円形度などの粒子の形状を表す形状情報を得ることができるので、これらを用いて粒子画像を統計的に解析することができる。
Next, the circularity X is calculated by the following equation (step S11).
X = (perimeter of circle having the same area as particle image) / (perimeter of particle image)
= ΠRs / L (4)
It becomes.
As described above, it is possible to obtain the shape information representing the shape of the particle such as the perimeter, area, equivalent circle diameter, and circularity for each of a large number of particle images. Can be analyzed.

図8は、直径2μmのラテックス粒子を撮像して求めた円形度分布のヒストグラムである。図8(a)は前述のように画素補間を行った場合、(b)は画素補間を行わない場合(比較例)を示す。これらのヒストグラムは、1000フレームの撮像画素から3469個の粒子を抽出して作成された。
図8(b)では円形度の裾がほぼ0.9まで伸び、円形度1.0で表される粒子が極端に多く、分布が不自然である。これに対し、図8(a)では、円形度の裾が0.9を完全に上回る一方、円形度1.0の粒子が大きく減り、ピークはほぼ0.98であり、分布幅は狭く、シャープになっている。
従って、図8(a)は、図8(b)に比べて、円形度の測定が精度よく行われることを示している。
FIG. 8 is a histogram of circularity distribution obtained by imaging latex particles having a diameter of 2 μm. FIG. 8A shows a case where pixel interpolation is performed as described above, and FIG. 8B shows a case where pixel interpolation is not performed (comparative example). These histograms were created by extracting 3469 particles from 1000 frames of imaging pixels.
In FIG. 8B, the tail of the circularity extends to approximately 0.9, the number of particles represented by a circularity of 1.0 is extremely large, and the distribution is unnatural. On the other hand, in FIG. 8A, the skirt of the circularity completely exceeds 0.9, while the particles having a circularity of 1.0 are greatly reduced, the peak is approximately 0.98, the distribution width is narrow, It is sharp.
Therefore, FIG. 8A shows that the measurement of the circularity is performed more accurately than in FIG. 8B.

このように、粒子を撮像して得られた粒子の濃淡画像に画素を線形補間して拡大画像を形成することにより、画素を線形補間する前の濃淡画像の2値化画像に比べ、画素を線形補間した拡大画像の2値化画像は、輪郭を形成する輪郭画素が増える。そのため、その輪郭画素に基づいて求められる周囲長、面積、円相当径および円形度などの粒子の形状を表す形状情報はより粒子の形状を反映したものとなる。   In this way, the pixel is linearly interpolated into the grayscale image of the particle obtained by imaging the particle to form an enlarged image, so that the pixel is compared with the binary image of the grayscale image before the pixel is linearly interpolated. The binarized image of the enlarged image obtained by linear interpolation increases the number of contour pixels forming the contour. Therefore, the shape information representing the shape of the particle such as the perimeter, area, equivalent circle diameter, and circularity obtained based on the contour pixel more reflects the shape of the particle.

上記実施形態の画像解析対象は、ファインセラミックス、顔料、化粧品用パウダーのような無機物の粉体および食品添加物のような有機物の粉体を含むものであり、多結晶からなる粒子であってもよい。   The image analysis target of the above embodiment includes fine ceramics, pigments, inorganic powders such as cosmetic powders, and organic powders such as food additives, and even particles made of polycrystals. Good.

上記実施形態では、粒子を撮像して得られた濃淡画像を用いて、高解像度化としての線形補間を行ったが、粒子を撮像して得られたカラー画像などの多諧調画像を用いて、線形補間を行ってもよい。   In the above embodiment, the grayscale image obtained by imaging particles is used to perform linear interpolation as a high resolution, but using a multi-tone image such as a color image obtained by imaging particles, Linear interpolation may be performed.

また、上記実施形態において、パルス光源としてストロボを使用したが、パルスレーザ光源を用いても良い。   In the above embodiment, the strobe is used as the pulse light source, but a pulse laser light source may be used.

また、上記実施形態において、スロボとビデオカメラはフローセルを挟んで配置されたが、フローセルにおいて粒子懸濁液が偏平な流れに変換される場合、ストロボは、粒子懸濁液流の偏平な一面に直交して光を照射し、撮像部はその光軸上に配置されることが好ましい。   Further, in the above embodiment, the slob and the video camera are arranged with the flow cell interposed therebetween, but when the particle suspension is converted into a flat flow in the flow cell, the strobe is placed on the flat surface of the particle suspension flow. It is preferable to irradiate light orthogonally and to arrange the imaging unit on the optical axis.

上記実施形態において、記録媒体はCD−ROMを使用したが、磁気テープやカセットテープ、フロッピー(登録商標)ディスクやハードディスクなどの磁気ディスクやCD−MO/MD/DVDなどの光ディスク、ICカード(メモリカードを含む)/光カード、あるいはマスクROM、EPROM、EEPROM、フラッシュROMなどによる半導体メモリであってもよい。
また、粒子画像分析装置をインターネットを含む通信ネットワークと接続可能なシステム構成とし、記録媒体を通信ネットワークからプログラムをダウンロードするように流動的にプログラムを担持する媒体としてもよい。尚、そのダウンロード用プログラムは予め粒子画像処理装置に格納しておく。
In the above embodiment, a CD-ROM is used as a recording medium. However, a magnetic tape, a cassette tape, a magnetic disk such as a floppy (registered trademark) disk or a hard disk, an optical disk such as a CD-MO / MD / DVD, an IC card (memory). (Including a card) / optical card, or a semiconductor memory such as a mask ROM, EPROM, EEPROM, or flash ROM.
In addition, the particle image analysis apparatus may have a system configuration that can be connected to a communication network including the Internet, and the recording medium may be a medium that fluidly carries the program so as to download the program from the communication network. The download program is stored in advance in the particle image processing apparatus.

この発明による実施例の粒子画像分析装置の外観図である。1 is an external view of a particle image analyzer according to an embodiment of the present invention. この発明による実施例の粒子画像装置の要部構成説明図である。It is principal part structure explanatory drawing of the particle image apparatus of the Example by this invention. この発明の実施例による画像の説明図である。It is explanatory drawing of the image by the Example of this invention. この発明による実施例のデータ分析装置の構成を示すブロック図である。It is a block diagram which shows the structure of the data analyzer of the Example by this invention. この発明の実施例のデータ分析装置の動作を示すフローチャートである。It is a flowchart which shows operation | movement of the data analyzer of the Example of this invention. この発明の実施例における粒子画像の画素と補間用画素の説明図である。It is explanatory drawing of the pixel of the particle image and the pixel for interpolation in the Example of this invention. この発明の実施例における2値化画像の説明図である。It is explanatory drawing of the binarized image in the Example of this invention. 実施例と比較例の円形度分布のヒストグラムである。It is a histogram of circularity distribution of an Example and a comparative example.

符号の説明Explanation of symbols

1 吸引ピペット
2 サンプルフィルター
3 試料チャージングライン
4 シースシリンジ
5 フローセル
6 シース液ボトル
7 シース液チャンバー
8 ストロボ
9 対物レンズ
10 ビデオカメラ
11 粒子画像処理装置
12 モニターテレビ
13 キーボード
14 廃液チャンバー
21 粒子撮像装置
22 データ分析装置
DESCRIPTION OF SYMBOLS 1 Suction pipette 2 Sample filter 3 Sample charging line 4 Sheath syringe 5 Flow cell 6 Sheath liquid bottle 7 Sheath liquid chamber 8 Strobe 9 Objective lens 10 Video camera 11 Particle image processing device 12 Monitor television 13 Keyboard 14 Waste liquid chamber 21 Particle imaging device 22 Data analyzer

Claims (10)

粒子を撮像する工程と、撮像して得られた複数の画素からなる多階調画像に対して構成画素数を増やす補間処理を行う工程と、補間処理された補間画像に基づいて粒子の特徴を表す情報を求める工程とを有する粒子画像処理方法。   A step of imaging particles, a step of performing interpolation processing to increase the number of constituent pixels for a multi-tone image composed of a plurality of pixels obtained by imaging, and a feature of particles based on the interpolated interpolation image A particle image processing method. 粒子を撮像して得られた複数の画素からなる多階調画像に対して構成画素数を増やす補間処理を行う画素補間手段と、補間処理された補間画像に基づいて粒子の特徴を表す特徴情報を求める解析手段とを備える粒子画像処理装置。   Pixel interpolation means for performing interpolation processing to increase the number of constituent pixels for a multi-tone image made up of a plurality of pixels obtained by imaging particles, and feature information representing the characteristics of the particles based on the interpolated interpolation image A particle image processing apparatus comprising: 前記画素補間手段は、隣接する画素間に補間用画素を少なくとも1個挿入することによって補間を行う請求項2記載の粒子画像処理装置。   The particle image processing apparatus according to claim 2, wherein the pixel interpolation unit performs interpolation by inserting at least one interpolation pixel between adjacent pixels. 補間用画素は、前記隣接する画素における階調と画素間の距離に応じて重み付けを行う加重平均とに基づいて求めた階調値を備える請求項3記載の粒子画像処理装置。   The particle image processing apparatus according to claim 3, wherein the interpolation pixel includes a gradation value obtained based on a gradation in the adjacent pixel and a weighted average that performs weighting according to a distance between the pixels. 前記階調値が輝度である請求項4記載の粒子画像処理装置。   The particle image processing apparatus according to claim 4, wherein the gradation value is luminance. 前記解析手段が、補間画像を2値化画像に変換する2値化手段と、2値化画像における粒子像の輪郭を形成する輪郭画素を追跡するチェインコードを生成し、生成されたチェインコードに基づいて粒子の特徴を表す特徴情報を算出する算出手段とを備える請求項2〜5の何れか1項に記載の粒子画像処理装置。   The analysis unit generates a binarization unit that converts the interpolation image into a binarized image, and a chain code that tracks contour pixels that form the contour of the particle image in the binarized image. 6. The particle image processing apparatus according to claim 2, further comprising a calculation unit configured to calculate feature information representing a feature of the particle based on the particle information. 前記特徴情報は、円相当径および円形度の少なくとも一方である請求項2〜6の何れか1項に記載の粒子画像処理装置。   The particle image processing apparatus according to claim 2, wherein the characteristic information is at least one of a circle-equivalent diameter and a circularity. 前記多階調画像が、濃淡画像である請求項2〜7の何れか1項に記載の粒子画像処理装置。   The particle image processing apparatus according to claim 2, wherein the multi-tone image is a grayscale image. 粒子を含む懸濁液の流れを形成するフローセルと、懸濁液の流れに対して光を照射する光源と、光が照射された粒子を撮像する撮像部と、撮像部によって得られた複数の画素からなる多階調画像に対して構成画素数を増やす補間処理を行う画素補間手段および補間処理された補間画像に基づいて粒子の特徴を表す特徴情報を求める解析手段を有する画像処理部とを備える粒子画像分析装置。   A flow cell that forms a flow of a suspension containing particles, a light source that irradiates light to the flow of the suspension, an imaging unit that images particles irradiated with light, and a plurality of images obtained by the imaging unit An image processing unit having pixel interpolation means for performing interpolation processing for increasing the number of constituent pixels for a multi-tone image composed of pixels, and analysis means for obtaining feature information representing the characteristics of particles based on the interpolated interpolation image. A particle image analyzer provided. 粒子撮像装置によって粒子を撮像して得られた多階調画像に対して構成画素数を増やす補間処理を行う工程と、補間処理された補間画像に基づいて粒子の特徴を表す特徴情報を求める工程とをコンピュータに実行させる画像処理プログラム。   A step of performing interpolation processing for increasing the number of constituent pixels on a multi-tone image obtained by imaging particles with a particle imaging device, and a step of obtaining feature information representing particle characteristics based on the interpolated interpolation image An image processing program for causing a computer to execute.
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