JP2006094822A - Method for separating microorganism - Google Patents

Method for separating microorganism Download PDF

Info

Publication number
JP2006094822A
JP2006094822A JP2004287040A JP2004287040A JP2006094822A JP 2006094822 A JP2006094822 A JP 2006094822A JP 2004287040 A JP2004287040 A JP 2004287040A JP 2004287040 A JP2004287040 A JP 2004287040A JP 2006094822 A JP2006094822 A JP 2006094822A
Authority
JP
Japan
Prior art keywords
microorganisms
filter
microorganism
separating
particles
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Pending
Application number
JP2004287040A
Other languages
Japanese (ja)
Inventor
Kazuo Nashimoto
一男 梨本
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Panasonic Holdings Corp
Original Assignee
Matsushita Electric Industrial Co Ltd
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Matsushita Electric Industrial Co Ltd filed Critical Matsushita Electric Industrial Co Ltd
Priority to JP2004287040A priority Critical patent/JP2006094822A/en
Publication of JP2006094822A publication Critical patent/JP2006094822A/en
Pending legal-status Critical Current

Links

Images

Abstract

<P>PROBLEM TO BE SOLVED: To precisely separate and recover only microorganisms from a liquid containing the microorganisms, and to measure the microorganisms. <P>SOLUTION: This method for separating microorganisms comprises inserting a mesh filter 2 for recovering the microorganisms into a recovery cell 1 for recovering the microorganisms, disposing an anode side electrode 3 for moving the microorganisms and a cathode side electrode 4 in the upper and bottom portions of the recovery cell 1, respectively, flowing a liquid containing the microorganisms in the recovery cell, applying a direct electric current between the anodic and cathodic electrodes to electrophoretically adhere the microorganisms to the mesh filter 2 disposed in the recovery cell 1, and then separating and recovering only the microorganisms from the liquid containing the microorganisms. The concentration of the microorganisms can be measured. <P>COPYRIGHT: (C)2006,JPO&NCIPI

Description

本発明は、電気泳動を用いて微生物を分離する方法を用い微生物の計測に関するもので、特に微生物が混在する飲料水や食品、食材中から微生物のみを効率良く分離する方法と計測に関するものである。   The present invention relates to the measurement of microorganisms using a method for separating microorganisms using electrophoresis, and more particularly to a method and measurement for efficiently separating only microorganisms from drinking water, foods, and foodstuffs in which microorganisms are mixed. .

従来、この種の微生物分離法は、特開2000−262865に明記されたものが知られていた。(特許文献1参照)。以下、その特許文献1について図Aを参照しながら説明する。図5に示すように、水溶液を保持できる2つの水槽があり、一方には、細菌が予め存在する水溶液を入れるためのもの容器101、他方には、細菌が濃縮されるための濃縮容器102およびその間に電場で水溶液中に分散した細菌を泳動させ得る領域103が設けられ、および細菌を泳動させるに必要な強さの電位勾配を印加するための印加手段を包含する。
特開2000−262865号公報
Conventionally, this type of microorganism separation method is known as disclosed in JP-A-2000-262865. (See Patent Document 1). Hereinafter, Patent Document 1 will be described with reference to FIG. As shown in FIG. 5, there are two water tanks capable of holding an aqueous solution, one for containing an aqueous solution containing bacteria in advance, and the other for a concentration vessel 102 for concentrating the bacteria and In the meantime, a region 103 capable of migrating bacteria dispersed in an aqueous solution with an electric field is provided, and includes an application means for applying a potential gradient having a strength necessary for migrating the bacteria.
JP 2000-262865 A

しかしながら、このような従来の方法では、容器内での微生物濃度である指数で捉え、計測することは可能であるが、飲料水や清酒等の液体中から微生物の個数は、1ミリリットルあたり数個を分離することができないという課題があり、多量な液体中からの微生物の精度よく分離回収することが要求されている。   However, with such a conventional method, it is possible to capture and measure the index, which is the concentration of microorganisms in the container, but the number of microorganisms in a liquid such as drinking water or sake is several per milliliter. Therefore, it is required to accurately separate and collect microorganisms from a large amount of liquid.

本発明は、このような従来の課題を解決するものであり、容器内で電荷を利用して微生物を分離する際に、微生物が回収される手段を加えることで精度良く分離できる微生物分離法を提供することを目的とする。   The present invention solves such a conventional problem, and when separating microorganisms using charges in a container, a microorganism separation method that can be separated with high accuracy by adding means for collecting microorganisms is provided. The purpose is to provide.

また、セル内に微生物と粒子が混在すると、粒子の形状に隠れて、微生物が拘束することができないという課題があり、予め、形状の大きな粒子と微生物を分離することが要求されている。   Moreover, when microorganisms and particles coexist in the cell, there is a problem that the microorganisms cannot be constrained by the shape of the particles, and it is required to separate large-sized particles and microorganisms in advance.

本発明は、このような従来の課題を解決するものであり、液体を流入する際に形状の大きな粒子を捕集する捕集手段を設け、微生物を分離する微生物分離法を提供することを目的とする。   The present invention solves such a conventional problem, and an object of the present invention is to provide a microorganism separation method for separating microorganisms by providing a collection means for collecting large particles when flowing a liquid. And

また、大きな粒子を捕集する捕集手段として、重量、比重、電荷等を利用して分離することができるが、手段によっては微生物細胞膜破損や活性停止により微生物が死滅してしまい、生きた微生物の検出することができないという課題があり、微生物の生死の状態そのままでセルに送る方法が要求されている。   In addition, as a collecting means for collecting large particles, it can be separated using weight, specific gravity, electric charge, etc., but depending on the means, microorganisms may be killed due to microbial cell membrane breakage or cessation of activity, and living microorganisms Therefore, there is a need for a method of sending the cells to the cell as they are in the life or death state of the microorganisms.

本発明は、このような従来の課題を解決するものであり、微生物の大きさを利用し、微生物が通過する孔のフィルタを用いた微生物分離法を提供することを目的とする。   The present invention solves such a conventional problem, and an object of the present invention is to provide a microorganism separation method using a filter for pores through which microorganisms pass, utilizing the size of microorganisms.

また、微生物のサイズは、0.2〜2μmと小さいが、微生物が細胞分離しているサイズや微生物が凝集していると微生物自体のサイズより大きくなるため、微生物を捕集しない最適な孔のフィルタが要求されている。   In addition, although the size of the microorganism is as small as 0.2 to 2 μm, it is larger than the size of the microorganism itself when the size of the microorganism is separated or when the microorganism is aggregated. A filter is requested.

本発明は、このような従来の課題を解決するものであり、微生物のフィルタ通過率を高めるため、7μm以上の孔のフィルタを用いた微生物分離法を提供することを目的とする。   The present invention solves such a conventional problem, and an object of the present invention is to provide a microorganism separation method using a filter having a pore of 7 μm or more in order to increase the passage rate of microorganisms through the filter.

また、電気泳動での分離では液体中のイオンやナノ粒子なども分極し分離し、回収時、残存するイオンやナノ粒子により微生物の活性を低下させるという課題があり、微生物以外の液体中の物質の特性を変化させないことが要求されている。   In addition, separation by electrophoresis polarizes and separates ions and nanoparticles in the liquid, and at the time of recovery, there is a problem that the activity of microorganisms is reduced by the remaining ions and nanoparticles. It is required not to change the characteristics.

本発明は、このような従来の課題を解決するものであり、液体中のイオンやナノ粒子を通過させて微生物のみを回収し、液体中の物質の特性を変化させない微生物分離法を提供することを目的とする。   The present invention solves such a conventional problem, and provides a microorganism separation method in which only microorganisms are collected by passing ions and nanoparticles in a liquid, and the characteristics of substances in the liquid are not changed. With the goal.

また、微生物の電荷で分解をすることは同じ質量、電荷量の持った微粒子も、回収されるという課題があり、微生物のみを回収することが要求されている。   In addition, decomposition with the charge of microorganisms has a problem that fine particles having the same mass and charge amount are also collected, and it is required to collect only microorganisms.

本発明は、このような従来の課題を解決するものであり、液体中のイオンやナノ粒子を通過させ微生物のみを回収する微生物分離法を提供することを目的とする。   The present invention solves such a conventional problem, and an object of the present invention is to provide a microorganism separation method that allows ions and nanoparticles in a liquid to pass through and collects only microorganisms.

また、一度分離した微生物が通電を停止すると、回収時に脱離するという課題があり、微生物の脱離を防止することが要求されている。   Further, there is a problem that once the microorganisms once separated are deenergized, they are detached at the time of recovery, and it is required to prevent the microorganisms from being detached.

本発明は、このような従来の課題を解決するものであり、回収時に微生物の脱離を防止する微生物分離法を提供することを目的とする。   The present invention solves such a conventional problem, and an object of the present invention is to provide a microorganism separation method that prevents detachment of microorganisms during recovery.

また、電極面を平行に設けると電極面に局部的に電流が流れ、液体を対流させるという課題があり、液体の対流を抑制する方法が要求されている。   In addition, when the electrode surfaces are provided in parallel, there is a problem in that a current flows locally on the electrode surface to cause convection of the liquid, and a method for suppressing the convection of the liquid is required.

本発明は、このような従来の課題を解決するものであり、不均一な電流の流れを防止し、双極の電極の一方の電極面積を他方の電極面積より小さくし、局部的に電流が流れことを防止する微生物分離法を提供することを目的とする。   The present invention solves such conventional problems, prevents uneven current flow, makes one electrode area of a bipolar electrode smaller than the other electrode area, and current flows locally. An object of the present invention is to provide a microorganism separation method that prevents this.

また、微生物の電荷量が弱いため、液中のイオン濃度が高い時に回収するのに時間がかかるという課題があり、短時間で回収できるということが要求されている。   In addition, since the charge amount of microorganisms is weak, there is a problem that it takes time to recover when the ion concentration in the liquid is high, and it is required that it can be recovered in a short time.

本発明は、このような従来の課題を解決するものであり、微生物の電荷を高める染色を行い、短時間で回収することができる微生物分離を提供することを目的とする。   An object of the present invention is to solve such a conventional problem, and an object of the present invention is to provide a microorganism separation that can be collected in a short time by performing staining to increase the charge of microorganisms.

また、液体中では回収した微生物を効率的に計測することができないという課題があり、液体中で回収された微生物を効率的に計測することが要求されている。   Further, there is a problem that the collected microorganisms cannot be efficiently measured in the liquid, and it is required to efficiently measure the microorganisms collected in the liquid.

本発明は、このような従来の課題を解決するものであり、染色した微生物をフィルタに捕集し、光の照射により微生物を精度良く計測する微生物計測装置を提供することを目的とする。   The present invention solves such a conventional problem, and an object of the present invention is to provide a microorganism measuring apparatus that collects stained microorganisms in a filter and accurately measures the microorganisms by irradiation with light.

また、染色試薬には自家蛍光及び発光を及び発色が発生し、バックグラウンドと微生物の識別の差をなくすという課題があり、染色試薬には自家蛍光及び発光を及び発色が発生を防止することが要求されている。   In addition, there is a problem that the staining reagent generates autofluorescence and luminescence and color development, eliminating the difference between the background and the microorganism, and the staining reagent can prevent autofluorescence and luminescence and color development. It is requested.

本発明は、このような従来の課題を解決するものであり、微生物を回収後に染色することで試薬の自家蛍光及び発光及び発色を防止し、バックグランドと識別させる微生物計測装置を提供することを目的とする。   The present invention solves such a conventional problem, and provides a microorganism measuring apparatus that prevents autofluorescence, luminescence, and coloration of reagents by staining microorganisms after collection and distinguishes them from the background. Objective.

また、回収された微生物の輝度がバックグラウンドの輝度によって差がなくなるという課題があり、バックグラウンドの輝度による影響を防止することが要求されている。   Further, there is a problem that the brightness of the collected microorganisms is not different depending on the background brightness, and it is required to prevent the influence of the background brightness.

本発明は、このような従来の課題を解決するものであり、バックグランドの輝度を低下させる微生物計測装置を提供することを目的とする。   The present invention solves such a conventional problem, and an object of the present invention is to provide a microorganism measuring apparatus that reduces the luminance of the background.

また、検体により散乱光が発生し、バックグラウンドの輝度を高め、微生物との輝度の差をなくすという課題があり、さらにバックグラウンドの輝度による影響を防止することが要求されている。   In addition, there is a problem that scattered light is generated by the specimen, increasing the luminance of the background and eliminating the difference in luminance from the microorganism, and further, it is required to prevent the influence of the luminance of the background.

本発明は、このような従来の課題を解決するものであり、検体による散乱光の発生を防止し、さらにバックグランドの輝度を低下させる微生物計測装置を提供することを目的とする。   The present invention solves such a conventional problem, and an object thereof is to provide a microorganism measuring apparatus that prevents generation of scattered light by a specimen and further reduces background luminance.

上記の目的を達成するために本発明は、液体を流入する流路と液体を排出する流路の間に微生物を回収する回収手段を設けたものである。   In order to achieve the above object, according to the present invention, a collecting means for collecting microorganisms is provided between a flow path for flowing in liquid and a flow path for discharging liquid.

これによって、流路内で電荷を持つ微生物と一方向に移動させ、回収手段により微生物を回収することで、高い回収性能を得ることができる。   Thereby, it is possible to obtain high recovery performance by moving in one direction with the microorganism having electric charge in the flow path and recovering the microorganism by the recovery means.

また、本発明の微生物分離法は上記目的を達成するために微生物と微生物以外の粒子が含まれる液体を流入する際に大きな粒子と分離したものである。   Further, the microorganism separation method of the present invention is separated from large particles when flowing a liquid containing microorganisms and particles other than microorganisms in order to achieve the above object.

これによって濁度の高い食材や飲料等の液体中からも微生物を拘束し分離され、様々な液体から微生物を分離し液体を置換することができる。   As a result, microorganisms are restrained and separated from liquids such as foods and beverages with high turbidity, and microorganisms can be separated from various liquids and replaced.

また、本発明の微生物分離法は上記目的を達成するために、孔を形成したフィルタとしたものである。   Further, the microorganism separation method of the present invention is a filter in which pores are formed in order to achieve the above object.

これによって液体中の微生物の状態を維持したままに拘束し分離され、液体中の生育した微生物を正確に分離することができる。   As a result, the microorganisms in the liquid are restrained and separated while maintaining the state of the microorganisms, and the grown microorganisms in the liquid can be accurately separated.

また、本発明の微生物分離法は上記目的を達成するために、孔を形成したフィルタの径を7μm以上としたものである。   In order to achieve the above object, the microorganism separation method of the present invention is such that the diameter of the filter in which the pores are formed is 7 μm or more.

これによって液体中の微生物が拘束され、液中の様々な微生物を分離することができる。   As a result, microorganisms in the liquid are restrained, and various microorganisms in the liquid can be separated.

また、本発明の微生物分離法は上記目的を達成するために、回収する手段として微細孔を形成したフィルタを用いたものである。   In order to achieve the above object, the microorganism separation method of the present invention uses a filter having micropores as a means for collecting.

これによって、イオンや粒子が通過でき、微生物のみを回収することができる。   As a result, ions and particles can pass through and only microorganisms can be recovered.

また、本発明の微生物分離法は上記目的を達成するために、微細孔を形成したフィルタを限定したものである。   Further, the microorganism separation method of the present invention is limited to filters having fine pores in order to achieve the above-mentioned object.

これによって、粒子を通過することができ、短時間で微生物のみを回収することができる。   As a result, the particles can pass through and only the microorganisms can be recovered in a short time.

また、本発明の微生物分離法は上記目的を達成するために、微細孔を形成したフィルタを疎水処理したものである。   Further, the microorganism separation method of the present invention is obtained by subjecting a filter having fine pores to a hydrophobic treatment in order to achieve the above object.

これによって、微生物の表面のたんぱく質が吸着され、確実に微生物のみを回収することができる。   As a result, the protein on the surface of the microorganism is adsorbed, and only the microorganism can be reliably recovered.

また、本発明の微生物分離法は上記目的を達成するために、セルの流路内に面積が異なる電極を設けたものである。   Moreover, in order to achieve the said objective, the microorganism separation method of this invention provides the electrode from which an area differs in the flow path of a cell.

これによって、電気分解により液体が分極され、均一な電流の流れが形成されて移動し、回収手段により容易に回収することができる。   As a result, the liquid is polarized by electrolysis, a uniform current flow is formed and moved, and can be easily recovered by the recovery means.

また、本発明の微生物分離法は上記目的を達成するために、流入する液体を事前に染色したものである。   Moreover, in order to achieve the above-mentioned object, the microorganism separation method of the present invention is obtained by staining an inflowing liquid in advance.

これによって、微生物のみが染色され、さらに回収した微生物の識別を容易にすることができる。   As a result, only the microorganisms are stained, and the collected microorganisms can be easily identified.

また、本発明の微生物識別装置は上記目的を達成するために、微細孔を形成したフィルタに電荷の移動を利用して分解した微生物を直接計測したものである。   In order to achieve the above object, the microorganism identification apparatus of the present invention directly measures microorganisms decomposed by using charge transfer on a filter in which micropores are formed.

これによって、直接微細孔を形成したフィルタから微生物を計測することができ、効率的に計測することができる。   Thereby, microorganisms can be measured directly from the filter in which the micropores are formed, and can be measured efficiently.

また、本発明の微生物分離法は上記目的を達成するために、液体中の微生物を微細孔のフィルタに回収した後に染色し、計測したものである。   Further, in order to achieve the above object, the microorganism separation method of the present invention is obtained by staining and measuring microorganisms in a liquid after collecting them in a microporous filter.

これによって、液体中の染色試薬や微細孔のフィルタ上に残る染色試薬の自家蛍光及び発色を低減させ、確実に染色した微生物を計測することができる。   Thereby, the self-fluorescence and color development of the staining reagent in the liquid and the staining reagent remaining on the microporous filter can be reduced, and the stained microorganism can be reliably measured.

また、本発明の微生物分離法は上記目的を達成するために、微細孔を形成したフィルタ表面に微生物を染色した後に作られる反応物を検出する光や色を吸収する処理をしたものである。   In order to achieve the above object, the microorganism separation method of the present invention is a treatment for absorbing light and color to detect a reaction product produced after staining a microorganism on the filter surface in which micropores are formed.

これによって、微細孔を形成したフィルタ上の微生物のみが染色した反応を確認することができ、微生物を精度良く計測することができる。   As a result, it is possible to confirm a reaction in which only the microorganisms on the filter in which the micropores are formed are stained, and it is possible to accurately measure the microorganisms.

また、本発明の微生物分離法は上記目的を達成するために、微細孔を形成したフィルタ上の微生物のみが染色した後に作られる反応物を検出するため、様々な波長を吸収する金属成分をフィルタ上に形成したものである。   In order to achieve the above object, the method for separating microorganisms of the present invention filters metal components that absorb various wavelengths in order to detect reactants that are produced after staining only the microorganisms on the filter in which micropores are formed. It is formed above.

これによって、様々な検体の自家蛍光、発光、色彩をフィルタが吸収し、検体中の粒子と液体による散乱光を防止し、微生物をさらに精度良く計測することができる。   This allows the filter to absorb the autofluorescence, light emission, and color of various specimens, prevents scattered light from the particles and liquid in the specimen, and allows microorganisms to be measured more accurately.

本発明によれば、微生物と微生物以外の粒子が含まれる液体が微生物のみを分離できるという効果のある微生物分離法を提供できる。   ADVANTAGE OF THE INVENTION According to this invention, the microorganisms separation method with the effect that the liquid in which particles other than microorganisms and particles other than microorganisms can isolate | separate only a microorganism can be provided.

本発明によれば、濁度のある液体中から微生物と同等な粒子だけを流入し、流入量の低下もしくは微粒子の詰まりを防止でき、セルの交換など消耗品の寿命をのばすという効果のある微生物分離法を提供できる。   According to the present invention, only microparticles equivalent to microorganisms can flow from a turbid liquid, prevent a decrease in flow rate or clogging of microparticles, and have an effect of extending the life of consumables such as cell replacement. Separation methods can be provided.

本発明によれば、液体中から微生物性能を維持したまま回収することができ、安定して分離することができるという効果のある微生物分離法を提供できる。   ADVANTAGE OF THE INVENTION According to this invention, it can collect | recover while maintaining microbial performance from the liquid, and can provide the microorganisms separation method with the effect that it can isolate | separate stably.

本発明によれば、液体中から微生物を効率的に分離でき、微生物をさらに安定して分離することができるという効果のある微生物分離法を提供できる。   ADVANTAGE OF THE INVENTION According to this invention, microorganisms can be efficiently isolate | separated from the liquid and the microorganisms separation method with the effect that a microorganisms can be isolate | separated more stably can be provided.

本発明によれば、微細孔を形成したフィルタにより、液中のイオン物質の凝集による粒子や計測に影響する粒子を分解することができ、微生物のみを回収し、工業的な微生物の利用することができるという効果のある微生物分離法を提供できる。   According to the present invention, the filter formed with micropores can decompose particles caused by aggregation of ionic substances in the liquid and particles affecting measurement, collect only microorganisms, and use industrial microorganisms. Therefore, it is possible to provide a method for separating microorganisms, which is effective.

本発明によれば、より微細孔を限定したフィルタにより確実に微生物と分離し、液中に含まれる微生物のみを高回収し、さらに工業的な微生物の利用することができるという効果のある微生物分離法を提供できる。   According to the present invention, microorganism separation is effective in that it can be reliably separated from microorganisms by a filter with a more limited pore, only microorganisms contained in the liquid can be highly recovered, and industrial microorganisms can be used. Can provide law.

本発明によれば、分離後に回収した微細孔を形成したフィルタを取り外すことができ、実際の微生物評価で培養液や必要な微生物を回収、増殖させ利用することができるという効果のある微生物分離法を提供できる。   According to the present invention, a microbe separation method having an effect that a filter formed with micropores collected after separation can be removed, and a culture solution and necessary microorganisms can be collected, propagated and used in an actual microbe evaluation. Can provide.

本発明によれば、面積が異なる電極により不平等電流の流れを防止でき、ジュール熱による対流を防止し微生物が均一に分布することができ、回収量を増加させ、微生物の少ない液体から効率的に微生物を回収、微生物の少ない液体の微生物を容易に利用することができるという効果のある微生物分離法を提供できる。   According to the present invention, an unequal current flow can be prevented by electrodes having different areas, convection due to Joule heat can be prevented, microorganisms can be distributed uniformly, and the recovery amount can be increased, so that the liquid can be efficiently recovered from a liquid with less microorganisms. In addition, it is possible to provide a method for separating microorganisms, which is effective in recovering microorganisms and easily using liquid microorganisms with few microorganisms.

本発明によれば、染色手段を設けることで微生物のみを精度良く計測でき、さらには特定の微生物を染色することで病原菌を回収することができるという効果のある微生物分離法を提供できる。   According to the present invention, it is possible to provide a microorganism separation method that is effective in that only microorganisms can be accurately measured by providing a staining means, and that pathogenic bacteria can be recovered by staining specific microorganisms.

本発明によれば、フィルタ上の微生物を検出することで、流入した液体中の微生物濃度を迅速に精度良く計測できるという効果のある微生物分離法を提供できる。   ADVANTAGE OF THE INVENTION According to this invention, the microorganisms separation method with the effect that the microorganisms density | concentration in the inflowed liquid can be measured rapidly and accurately by detecting the microorganisms on a filter can be provided.

本発明によれば、微細孔を形成したフィルタに捕集した後に染色することで、微生物の特性を後で調査し、培養、増殖など容易に作業ができるという効果のある微生物分離法を提供できる。   According to the present invention, it is possible to provide an effective microorganism separation method in which the characteristics of microorganisms can be investigated later by performing dyeing after being collected on a filter having micropores, and the work can be easily performed such as culture and growth. .

本発明によれば、容易に染色し、高感度に微生物を認識することができ、誰でも迅速に高精度で簡易に微生物の計量ができるという効果のある微生物分離法を提供できる。   ADVANTAGE OF THE INVENTION According to this invention, the microorganism separation method which can be dye | stained easily and can recognize microorganisms with high sensitivity, and anyone can measure microorganisms rapidly with high precision easily can be provided.

本発明によれば、容易に染色し、さらに、高感度に微生物を認識することができ、誰でも迅速に高精度で簡易に微生物の計量ができるというという効果のある微生物分離法を提供できる。   ADVANTAGE OF THE INVENTION According to this invention, the microorganisms separation method which has the effect that it can dye | stain easily, can also recognize microorganisms with high sensitivity, and anyone can measure microorganisms quickly with high precision can be provided.

本発明の請求項1記載の発明は、微生物と微生物以外の粒子が含まれる液体から微生物を分離する方法において、微生物と微生物以外の粒子が含まれる液体を微生物の分離するセルに流入する手段と、セル内に微生物の電荷を利用して分離させる分離する分離手段と分離された微生物のみを回収する回収手段を備えたことを特徴とする微生物分離法としたものであり、負電荷を持った微生物が正の電荷帯びた電極側に移動する間で微生物のみを回収手段で捕集する。回収手段としては、例えばフィルタや疎水性の穴の空いたガラスである。また、微生物以外の正の電荷を帯びた粒子は負の電荷帯びた電極側に移動、排出される。さらに負の電荷を帯びた粒子は、回収手段にて微生物と分離され、正の電荷を帯びた電極側へ到達し、排出される。これにより微生物のいない液体に分離するという作用を有する。   The invention described in claim 1 of the present invention is a method for separating microorganisms from a liquid containing microorganisms and particles other than microorganisms, and means for flowing a liquid containing microorganisms and particles other than microorganisms into a cell for separating microorganisms. The microorganism separation method is characterized by having a separation means for separating using the charge of microorganisms in the cell and a recovery means for collecting only the separated microorganisms, and has a negative charge. Only the microorganisms are collected by the collecting means while the microorganisms move to the side of the positively charged electrode. As the collecting means, for example, a filter or glass having a hydrophobic hole is used. In addition, positively charged particles other than microorganisms are moved and discharged to the negatively charged electrode side. Further, the negatively charged particles are separated from the microorganisms by the collecting means, reach the positively charged electrode side, and are discharged. Thereby, it has the effect | action of isolate | separating into the liquid without a microorganism.

また、微生物と微生物以外の粒子が含まれる液体をセル内に流入する手段において、大きな粒子を捕集する捕集手段を備えたことを特徴とする微生物分離法としたものであり、流入する流路及びセルの形状を小さくすることができ小型化形状で効果的に分離することができるという作用を有する。   Further, in the means for flowing a liquid containing microorganisms and particles other than microorganisms into the cell, the microorganism separation method is characterized by comprising a collecting means for collecting large particles. The shape of the path and the cell can be reduced, and it can be effectively separated in a miniaturized shape.

また、前記過大な粒子を捕集する捕集手段として、孔を形成したフィルタとしたことを特徴とする微生物分離法としたものであり、回収した微生物の液体の微生物を利用することができるという作用を有する。   Further, as a collecting means for collecting the excessive particles, it is a microorganism separation method characterized in that a filter having a hole is formed, and it is possible to use a microorganism of the recovered microorganism. Has an effect.

また、前記孔を形成したフィルタの細孔径を微生物が通過する7μm以上の径のものとしたことを特徴とする微生物分離法としたものであり、回収する微生物量を増加させ液体中の微生物を効率的に利用することができるという作用を有する。   Further, the present invention is a microorganism separation method characterized in that the pore diameter of the filter in which the pores are formed is a diameter of 7 μm or more through which microorganisms pass, and the amount of microorganisms to be recovered is increased to reduce microorganisms in the liquid. It has the effect | action that it can utilize efficiently.

また、前記分離された微生物のみを回収する回収手段として、微細孔を形成したフィルタとしたことを特徴とする微生物分離法としたものであり、さらに微生物の回収性能を高め、微生物のない液体に分離することができるという作用を有する。   In addition, as a recovery means for recovering only the separated microorganisms, the microorganism separation method is characterized in that a filter having micropores is formed. It has the effect | action that it can isolate | separate.

また、前記微細孔を形成したフィルタの細孔径を微生物が通過する0.2μm以上の径のものとしたこと特徴とした微生物分離法としたものであり、微生物が微生物を回収した液体内に戻るのを防止し、精度良く分離できるという作用を有する。   Further, the microbe separation method is characterized in that the pore diameter of the filter having the micropores is 0.2 μm or more through which microorganisms pass, and the microorganisms return to the liquid in which the microorganisms are collected. It has the effect | action that it can prevent and can isolate | separate accurately.

また、前記微細孔を形成したフィルタの表面を疎水処理したことを特徴とする微生物分離法としたものであり、微生物とフィルタの表面が電気的な結合よりも強い結合が生じ、フィルタをセル外に持ち出すことができるという作用を有する。   In addition, the microbe separation method is characterized in that the surface of the filter in which the micropores are formed is subjected to a hydrophobic treatment, and the surface of the microbe and the filter has a stronger bond than the electrical bond, and the filter is removed from the cell. It has the effect that it can be taken out.

また、前記セル内に微生物の電荷を利用して分離させる分離する手段として、セル流路内に双極を設けてなるが、均一な電流の流れを形成するため一方の電極の面積を他方の電極の面積よりも小さくすることを特徴とする微生物分離法としたものであり、局部的な電流の発生を低減し、熱による対流を防止し、回収されるフィルタの表面に均一に回収し、検出しやすくできるという作用を有する。   In addition, as a means for separating the cells using the charge of microorganisms in the cell, a bipolar electrode is provided in the cell flow path, but the area of one electrode is set to the other electrode in order to form a uniform current flow. This is a microbe separation method characterized by making the area smaller than the area of the filter, reducing local current generation, preventing convection due to heat, and evenly collecting and detecting on the surface of the collected filter It has an effect that it can be easily performed.

また、微生物と微生物以外の粒子が含まれる液体を染色する染色手段を備えることを特徴とする微生物分離法としたものであり、微生物のみを染色することで検出感度を高めることができるという作用を有する。   Further, it is a microorganism separation method characterized by having a staining means for staining a liquid containing microorganisms and particles other than microorganisms, and has the effect that detection sensitivity can be enhanced by staining only microorganisms. Have.

また、前記微細孔を形成したフィルタに捕獲した微生物を検出する手段を備えることを特徴する微生物計測装置としたものであり、フィルタに捕獲することで簡素な構成で計測することができるという作用を有する。   Further, the present invention is a microorganism measuring apparatus characterized by comprising means for detecting microorganisms captured in the filter in which the micropores are formed, and has an effect that measurement can be performed with a simple configuration by capturing in the filter. Have.

また、前記微生物を検出する手段として前記微細孔を形成したフィルタに捕獲した微生物を染色することを特徴とした微生物計測装置としたものであり、微生物のみを染色することで染色試薬の容量を削減でき、また、精度の高い計測をするという作用を有する。   In addition, as a means for detecting the microorganism, the microorganism measuring apparatus is characterized in that the microorganism captured in the filter having the micropores is stained, and the capacity of the staining reagent is reduced by staining only the microorganism. And has the effect of measuring with high accuracy.

また、前記微細孔を形成したフィルタの表面に光を吸収する処理をしたことを特徴とした微生物分離法としたものであり、微生物の検出に対して、表面反射を防ぐことができ、正確に微生物を検出するという作用を有する。   The microbe separation method is characterized by absorbing light on the surface of the filter in which the micropores are formed, and can prevent surface reflection with respect to the detection of microorganisms. It has the effect of detecting microorganisms.

また、前記光を吸収する処理として、金、銅、クロム、白金、パラジウムから選ばれる少なくとも1種類の金属成分を含む薄膜が形成されることを特徴とした微生物分離法としたものであり、微生物検出時に励起光を照射した際の光の反射を防止することができ、さらに正確に微生物の検出をするという作用を有する。   Further, as the treatment for absorbing light, a microorganism separation method characterized in that a thin film containing at least one metal component selected from gold, copper, chromium, platinum, and palladium is formed. It is possible to prevent reflection of light when irradiating excitation light at the time of detection, and to detect microorganisms more accurately.

以下本発明の実施例を図面を参照して説明する。   Embodiments of the present invention will be described below with reference to the drawings.

(実施例1)
図1に示すように、微生物を回収するための回収セル1は、微生物を回収するメッシュフィルタ2を挟み込むように、上部に微生物集まる正極側電極3と、下部には負極側電極4が設けてある。正極側電極3と負極側電極4には直流の電気が電源5より供給されるように配線がなされている。微生物と微生物以外の粒子が含まれる液体は、給入流路から給入ポンプにより供給され、回収セル1に流される。流れた微生物と微生物以外の粒子が含まれる液体は、回収セル1を満たす。そして、満たした後に電源5から直流の電気が正極側電極3と負極側電極4が通電し、微生物と微生物以外の粒子が含まれる液体は、電気泳動が開始される。電気泳動が開始されると、負の電荷を持った微生物と負の電荷を持った粒子は正極側電極3側に移動し、途中にあるメッシュフィルタ2により微生物だけは捕獲され、その他の負の電荷を持った粒子は回収セル1の正極側電極3に移動する。
Example 1
As shown in FIG. 1, a collection cell 1 for collecting microorganisms is provided with a positive electrode 3 for collecting microorganisms at the top and a negative electrode 4 at the bottom so as to sandwich a mesh filter 2 for collecting microorganisms. is there. The positive electrode 3 and the negative electrode 4 are wired so that direct current electricity is supplied from the power source 5. The liquid containing the microorganisms and particles other than the microorganisms is supplied from the supply flow path by the supply pump and flows into the collection cell 1. The liquid containing the flowed microorganisms and particles other than the microorganisms fills the recovery cell 1. After filling, direct current electricity is supplied from the power source 5 to the positive electrode 3 and the negative electrode 4, and electrophoresis starts for a liquid containing microorganisms and particles other than microorganisms. When electrophoresis starts, negatively charged microorganisms and negatively charged particles move to the positive electrode 3 side, and only the microorganisms are captured by the mesh filter 2 on the way, and other negative The charged particles move to the positive electrode 3 of the recovery cell 1.

さらに、給入ポンプ7により、微生物と微生物以外の粒子が含まれる液体を連続的に供給することで、排出流路8より微生物を含まない液体が排出され、さらに、微粒子排出流路よりメッシュフィルタ2を通過した微粒子の含まれる液体が排出される。   Furthermore, by continuously supplying a liquid containing microorganisms and particles other than microorganisms by the supply pump 7, a liquid not containing microorganisms is discharged from the discharge flow path 8, and further, a mesh filter is discharged from the fine particle discharge flow path. The liquid containing the fine particles having passed through 2 is discharged.

これにより、微生物と微生物以外の粒子が含まれる液体から微生物を回収することができる。   Thereby, microorganisms can be recovered from a liquid containing microorganisms and particles other than microorganisms.

(実施例2)
微生物と微生物以外の粒子が含まれる液体を流入する際に、微生物が粒子に隠れる現象がある。図2に示すように、微生物と微生物以外の粒子が含まれる液体を流入した後に、液中と含まれる微生物よりも大きな粒子を捕集するためのフィルタユニット10を設けたものである。流路の目詰まりを防止し、微生物との分離効率を高めることができる。
(Example 2)
When a liquid containing microorganisms and particles other than microorganisms is introduced, there is a phenomenon in which microorganisms are hidden in the particles. As shown in FIG. 2, a filter unit 10 is provided for collecting particles larger than the microorganisms contained in the liquid after the liquid containing the microorganisms and particles other than the microorganisms is introduced. It is possible to prevent clogging of the flow path and increase the separation efficiency from microorganisms.

さらに、流路の交換や給入ポンプ7のメンテなどの時期を延ばすことができる。   Furthermore, it is possible to extend the time for replacing the flow path and maintaining the feed pump 7.

なお、大きな粒子と捕集するフィルタユニット10として流路内に設けたが、事前に処理することも含まれることは言うまでもない。   In addition, although it provided in the flow path as the filter unit 10 which collects a big particle, it cannot be overemphasized that processing in advance is also included.

また、粒子捕集手段としては遠心処理や電気永動や誘電永動など、粒子の特徴を用いて分離する手段を用いても良い。   Further, as the particle collecting means, a means for separating using the characteristics of particles such as centrifugal treatment, electric perturbation or dielectric perturbation may be used.

(実施例3)
図2が示すように、フィルタユニット10と孔を形成したフィルタとした。フィルタを使用することで微生物の活性低下を防止し、実際の液体中の微生物を分離できる。
(Example 3)
As shown in FIG. 2, a filter having a filter unit 10 and a hole was formed. By using a filter, it is possible to prevent a decrease in the activity of microorganisms and to separate microorganisms in an actual liquid.

フィルタの種類はPP(Polypropylene)、PVC(Polyvinyl chloride)、PC(Polycarbonate)、PTFE(Polytetrafluoroethylene)、PVDF(Polyvinylidienefluoride)、MCE(Mixed cellulose esters)、PES(Polyether sulfone)、NYL(Nylon)などがありこれらのフィルタによっては微生物の付着しない表面処理を行ったものや、使用前にろ過状態を良くするためにある種の界面活性剤を付着して使用しても問題はない。   Filter types are PP (Polypropylene), PVC (Polyvinyl Chloride), PC (Polycarbonate), PTFE (Polytetrafluorethylene), PVDF (Polyvinylefluoride), MCE (Mixed PE). Depending on these filters, there is no problem even if a surface treatment that does not adhere to microorganisms or a certain surfactant is used to improve the filtration state before use.

また、ろ過性能が向上するようにイオン系界面活性剤を加えてよい。イオン系界面活性剤としては、5つに系別され、1)脂肪酸系(陰イオン)として、脂肪酸ナトリウム、脂肪酸カリウム、アルファスルホ脂肪酸エステルナトリウム、2)直鎖アルキベンゼン系として、直鎖アルキルベンゼンスルホン酸ナトリウム、3)高級アルコール系(陰イオン)として、アルキル硫酸エステルナトリウム、アルキルエーテル硫酸エステルナトリウム、4)アルファオレフィン系として、アルファオレフィンスルホン酸ナトリウム、5)ノルマルパラフィン系としてアルキルスルホン酸ナトリウムなどが挙げられるが、アミド系非イオン性界面活性剤として化学反応などを起こさず、微生物を溶かし溶菌しない試薬であれば良い。   Moreover, you may add an ionic surfactant so that filtration performance may improve. There are five types of ionic surfactants: 1) fatty acid (anion) fatty acid sodium, fatty acid potassium, alpha sulfo fatty acid ester sodium, 2) linear alkylbenzene sulfone, linear alkylbenzene sulfone Sodium sulfate, alkyl alcohol sulfate sodium, alkyl ether sulfate sodium, 4) alpha olefin, sodium alpha olefin sulfonate, 5) sodium alkyl sulfonate, etc. As the amide-based nonionic surfactant, any reagent that does not cause a chemical reaction, dissolves microorganisms, and does not lyse may be used.

(実施例4)
図3のように、フィルタを用いた時の微生物の通過性能を示す。
Example 4
As shown in FIG. 3, the passage performance of microorganisms when using a filter is shown.

供試菌として、B.sabtilis(NBRC3134)を使用し、フィルタはスルフォン酸を原料としたフィルタを用いて、フィルタの孔における通過性能を把握した。フィルタ孔が7μm以下であると捕集されてしまい、微生物の通過性能を低下するため、7μm以上とした。   As a test bacterium, B. Sabtilis (NBRC3134) was used, and the filter used the filter which made the sulfonic acid as the raw material, and grasped | ascertained the passage performance in the hole of a filter. If the filter pores are 7 μm or less, they are trapped, and the microorganisms passage performance is reduced.

(実施例5)
微生物の大きさは0.2〜2μmであるため、図2に示す回収セル1内のメッシュフィルタ2の孔径を小さくすることで、より回収性能を高めることができる。
(Example 5)
Since the size of the microorganism is 0.2 to 2 μm, the recovery performance can be further improved by reducing the pore diameter of the mesh filter 2 in the recovery cell 1 shown in FIG.

(実施例6)
微生物の回収を完全に行うために、図2に示すメッシュフィルタ2の孔径を0.2μm以上のものとする。微生物を完全に捕獲することができる。
(Example 6)
In order to completely collect microorganisms, the mesh filter 2 shown in FIG. 2 has a pore diameter of 0.2 μm or more. Microbes can be captured completely.

(実施例7)
メッシュフィルタ2の表面を疎水処理として、金をメッシュフィルタ2に蒸着したものを用いた。金を蒸着したメッシュフィルタ2表面に微生物が電気泳動により付着すると、微生物表面のタンパク質の硫黄成分が共有結合を生じ、電源5より供給する電気を停止しても、メッシュフィルタ2表面に付着している。
(Example 7)
The surface of the mesh filter 2 was subjected to hydrophobic treatment, and gold was deposited on the mesh filter 2. When microorganisms adhere to the surface of the mesh filter 2 deposited with gold by electrophoresis, the sulfur component of the protein on the surface of the microorganisms forms a covalent bond, and even if electricity supplied from the power source 5 is stopped, it adheres to the surface of the mesh filter 2. Yes.

もちろん、回収セル1外に取り外しても、メッシュフィルタ2に付着しているため、回収された微生物の同定の作業に使用できるようになる。   Of course, even if it is removed from the collection cell 1, it is attached to the mesh filter 2, so that it can be used for identifying the collected microorganisms.

(実施例8)
図1の負極側電極4の面積を正極側電極3に比べ極端に小さくし、針先程度のような形状にした。このような形状によることで正極側電極3との間に均一な電流の流れが形成され、液体中の熱の発生を防ぎ、対流を防止した。対流を防止することで、回収セル1内の電極間で移動する物質が均一に流れ、メッシュフィルタ2に均一に微生物を捕獲することができる。
(Example 8)
The area of the negative electrode 4 in FIG. 1 was made extremely smaller than that of the positive electrode 3 and was shaped like a needle tip. Due to such a shape, a uniform current flow was formed between the positive electrode 3 and the generation of heat in the liquid, thereby preventing convection. By preventing convection, the substance that moves between the electrodes in the collection cell 1 flows uniformly, and microorganisms can be captured uniformly in the mesh filter 2.

なお、極端に小さくした正極側電極3を複数備えることで、同様な効果が生ずる。   In addition, the same effect will be produced by providing a plurality of extremely small positive electrode 3.

(実施例9)
図には示していないが、回収セル1に流入する前に、微生物染色する手段を設けた。微生物を染色する試薬としては一般的に、4’,6−ジアミジノ−2−フェニルインドール二塩酸塩、プロピデュームイオダイド、6−カルボキシフルオレセインジアセテート、4−メチルウンベリフェリル−β−D−ガラクトシド等があり、さらに、反応する蛍光ラベルを有した抗体やマイクロファージで特定の微生物のみを染色するものなどがある。染色することで、微生物のみを容易に判別することができる。
Example 9
Although not shown in the figure, a means for staining microorganisms was provided before flowing into the collection cell 1. As a reagent for staining microorganisms, 4 ′, 6-diamidino-2-phenylindole dihydrochloride, propidium iodide, 6-carboxyfluorescein diacetate, 4-methylumbelliferyl-β-D- There are galactosides and the like, and there are antibodies that have a fluorescent label that reacts, and those that stain only specific microorganisms with microphages. By staining, only microorganisms can be easily identified.

(実施例10)
図4のように、微生物計量装置を示す構成図である。
(Example 10)
It is a block diagram which shows a microorganisms weighing device like FIG.

この微生物計量装置は、微生物を検出する手段として回収セル1の下方に集光レンズ11を設けている。光源13から発せられた励起光から目的の波長を取り出すために励起光分光フィルタ14で分光し、分光された励起光はプリズム15を経て、光路を変化させられ、光路を変化させられた励起光は集光レンズ11を経て回収セル1のメッシュフィルタ2に回収された微生物の表面に集光される。そこで励起光によって励起された微生物が有する蛍光は、再びプリズム15を透過し、受光部12に到達する。受光部12に到達した蛍光は、目的の蛍光のみを取り出すために蛍光分光フィルタ16を経て、受光部に内蔵された光源変換素子17に到達し、信号化され、微生物判断手段18で認識される。   This microorganism weighing device is provided with a condensing lens 11 below the collection cell 1 as means for detecting microorganisms. In order to extract the target wavelength from the excitation light emitted from the light source 13, the excitation light spectrally separated by the excitation light spectral filter 14 passes through the prism 15, the optical path is changed, and the excitation light whose optical path has been changed. Is condensed on the surface of the microorganisms collected by the mesh filter 2 of the collection cell 1 through the condenser lens 11. Therefore, the fluorescence of the microorganisms excited by the excitation light passes through the prism 15 again and reaches the light receiving unit 12. The fluorescence that has reached the light receiving unit 12 passes through the fluorescence spectroscopic filter 16 in order to extract only the target fluorescence, reaches the light source conversion element 17 built in the light receiving unit, is converted into a signal, and is recognized by the microorganism judging means 18. .

(実施例11)
図には示していないが、回収セル1よりメッシュフィルタ2を取り外した後に、上記染色方法にて微生物を染色した後に、光源13から発せられた励起光から目的の波長を取り出すために励起光分光フィルタ14で分光し、分光された励起光はプリズム15を経て、光路を変化させられ、光路を変化させられた励起光は集光レンズ11を経て回収セル1のメッシュフィルタ2に回収された微生物の表面に集光される。そこで励起光によって励起された微生物が有する蛍光は、再びプリズム15を透過し、受光部12に到達する。受光部12に到達した蛍光は、目的の蛍光のみを取り出すために蛍光分光フィルタ16を経て、受光部に内蔵された光源変換素子17に到達し、信号化され、微生物判断手段18で認識されることにより、微生物を計測することができる。メッシュフィルタ2に直接、染色試薬を反応させるため、反応性が高く、染色試薬量を減少させることができる。
(Example 11)
Although not shown in the drawing, after removing the mesh filter 2 from the collection cell 1 and staining the microorganisms by the staining method, excitation light spectroscopy is used to extract the target wavelength from the excitation light emitted from the light source 13. The excitation light split by the filter 14 passes through the prism 15 to change the optical path, and the excitation light whose optical path has been changed passes through the condenser lens 11 and is collected in the mesh filter 2 of the recovery cell 1. Focused on the surface. Therefore, the fluorescence of the microorganisms excited by the excitation light passes through the prism 15 again and reaches the light receiving unit 12. The fluorescence that reaches the light receiving unit 12 passes through the fluorescence spectroscopic filter 16 in order to extract only the target fluorescence, reaches the light source conversion element 17 incorporated in the light receiving unit, is converted into a signal, and is recognized by the microorganism judging means 18. Thus, microorganisms can be measured. Since the staining reagent is reacted directly with the mesh filter 2, the reactivity is high and the amount of the staining reagent can be reduced.

(実施例12)
メッシュフィルタ2の表面に光を吸収するため、暗色のフィルタを用いた。蛍光及び発光及び色による検出において、バックグランドとの輝度、色彩の差がないと検出することができないため、蛍光及び発光の時に対応するため、暗色のフィルタとした。
(Example 12)
In order to absorb light on the surface of the mesh filter 2, a dark filter was used. In the detection by fluorescence, light emission, and color, since it cannot be detected unless there is a difference in luminance and color from the background, a dark color filter is used in order to cope with fluorescence and light emission.

これにより、バックグラウンドの輝度が明確になり、微生物を検出できる。   Thereby, the brightness | luminance of background becomes clear and a microorganism can be detected.

(実施例13)
メッシュフィルタ2の材料部分が露出することで、捕獲された微生物を計測することができなくなる。金、銀、銅、クロム、白金、パラジウムなどから選ばれた金属の薄膜をフィルタ表面に蒸着などで被覆することで、反射を防止することができる。特に金は紫外線の反射率が低い。
(Example 13)
When the material portion of the mesh filter 2 is exposed, the captured microorganisms cannot be measured. By coating a thin film of a metal selected from gold, silver, copper, chromium, platinum, palladium and the like on the filter surface by vapor deposition, reflection can be prevented. Gold, in particular, has a low ultraviolet reflectance.

食品、化粧品や飲料水中の微生物のみを分離回収することにより、微生物以外の夾雑物を除くことで、蛍光発光試薬や発光試薬染色や抗体試薬での検出が、従来に比べ精度良く検出することができ、食品分野、医薬品分野、化成品分野における微生物の検査において適用することができる。   By separating and recovering only microorganisms in food, cosmetics and drinking water, it is possible to detect with fluorescent reagents, luminescent reagent stains and antibody reagents more accurately than before by removing contaminants other than microorganisms. It can be applied to the inspection of microorganisms in the food field, pharmaceutical field, and chemical product field.

本発明の実施例1の微生物分離装置構成を示す図The figure which shows the microorganisms separation apparatus structure of Example 1 of this invention. 本発明の実施例2の微生物分離装置構成を示す図The figure which shows the microorganisms separation apparatus structure of Example 2 of this invention. フィルタ孔径の通過性能を示すグラフGraph showing filter pore diameter passage performance 本発明の実施例10の微生物分離装置構成を示す図The figure which shows the microorganisms separation apparatus structure of Example 10 of this invention. 従来例の微生物分離法の構成を示す図The figure which shows the structure of the microorganisms separation method of a prior art example

符号の説明Explanation of symbols

1 回収セル
2 メッシュフィルタ
3 正極側電極
4 負極側電極
5 電源
6 給入流路
7 給入ポンプ
8 排出流路
9 微粒子排出流路
10 フィルタユニット
11 集光レンズ
12 受光部
13 光源
14 励起光分光フィルタ
15 プリズム
16 蛍光分光フィルタ
17 光源変換素子
18 微生物判断手段
DESCRIPTION OF SYMBOLS 1 Recovery cell 2 Mesh filter 3 Positive electrode 4 Negative electrode 5 Power supply 6 Supply flow path 7 Supply pump 8 Discharge flow path 9 Fine particle discharge flow path 10 Filter unit 11 Condensing lens 12 Light receiving part 13 Light source 14 Excitation light spectral filter DESCRIPTION OF SYMBOLS 15 Prism 16 Fluorescence spectral filter 17 Light source conversion element 18 Microorganism judgment means

Claims (13)

微生物と微生物以外の粒子が含まれる液体から微生物を分離する方法において、微生物と微生物以外の粒子を含まれる液体を微生物の分離するセルに流入する手段と、セル内に微生物が持つ電荷を利用して分離する分離手段と分離された微生物のみを回収する回収手段を備えたことを特徴とする微生物分離法。 In a method for separating microorganisms from a liquid containing microorganisms and particles other than microorganisms, a means for flowing the liquid containing microorganisms and particles other than microorganisms into a cell for separating microorganisms, and the charge of the microorganisms in the cells are used. A separation method for separating microorganisms and a collection means for collecting only the separated microorganisms. 微生物と微生物以外の粒子が含まれる液体をセル内に流入する手段において、大きな粒子を捕集する捕集手段を備えたことを特徴とする請求項1の微生物分離法。 2. The method for separating microorganisms according to claim 1, further comprising collecting means for collecting large particles in the means for flowing a liquid containing microorganisms and particles other than microorganisms into the cell. 前記大きな粒子を捕集する捕集手段として、孔を形成したフィルタとしたことを特徴とする請求項1または2記載の微生物分離法。 The microorganism separation method according to claim 1, wherein a filter having a hole is used as a collecting means for collecting the large particles. 前記孔を形成したフィルタの細孔径を微生物が通過する7μm以上の径のものとしたことを特徴とする請求項1、2または3記載の微生物分離法。 4. The method for separating microorganisms according to claim 1, wherein the pores having the pores have a pore diameter of 7 μm or more through which microorganisms pass. 前記分離された微生物のみを回収する回収手段として、微細孔を形成したフィルタとしたことを特徴とする請求項1、2、3または4記載の微生物分離法。 The microorganism separation method according to claim 1, 2, 3, or 4, wherein the collecting means for collecting only the separated microorganisms is a filter having micropores. 前記微細孔を形成したフィルタの細孔径を微生物が通過する0.2μm以上の径のものとしたことを特徴とする請求項1または5記載の微生物分離法。 6. The method for separating microorganisms according to claim 1 or 5, wherein the filter having the fine pores has a pore diameter of 0.2 μm or more through which microorganisms pass. 前記微細孔を形成したフィルタの表面を疎水処理したことを特徴とする請求項1、5または6記載の微生物分離法。 The microorganism separation method according to claim 1, 5 or 6, wherein the surface of the filter in which the micropores are formed is subjected to a hydrophobic treatment. 前記セル内に微生物の電荷を利用して分離させる分離する手段として、セル流路内に双極を設けてなるが、均一な電流の流れを形成するため一方の電極の面積を他方の電極よりも小さくすることを特徴とする請求項1、2、3、4、5、6または7記載の微生物分離法。 As a means for separating by utilizing the charge of microorganisms in the cell, a bipolar is provided in the cell flow path, but in order to form a uniform current flow, the area of one electrode is larger than that of the other electrode. The method for separating microorganisms according to claim 1, 2, 3, 4, 5, 6 or 7. 微生物と微生物以外の粒子が含まれる液体を染色する染色手段を備えることを特徴とする請求項1、2、3、4、5、6、7、または8記載の微生物分離法。 9. The method for separating microorganisms according to claim 1, further comprising staining means for staining a liquid containing microorganisms and particles other than microorganisms. 前記微細孔を形成したフィルタに捕獲した微生物を検出する手段を備えることを特徴とする請求項1、2、3、4、5、6、7、8、または9記載の微生物の分離法。 10. The method for separating microorganisms according to claim 1, further comprising means for detecting microorganisms captured by the filter in which the micropores are formed. 前記微生物を検出する手段として前記微細孔を形成したフィルタに捕獲した微生物を染色することを特徴とする請求項1、2、3、4、5、6、7、8または9記載の微生物の分離法。 The microorganism separation according to claim 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8 or 9, wherein the microorganism captured as a means for detecting the microorganism is stained on the filter in which the micropores are formed. Law. 前記微細孔を形成したフィルタの表面に光を吸収する処理をしたことを特徴とする請求項1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、または11記載の微生物分離法。 The microorganism separation according to claim 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, or 11, wherein the surface of the filter in which the micropores are formed is treated to absorb light. Law. 前記光を吸収する処理として、金、銅、クロム、白金、パラジウムから選ばれる少なくとも1種類の金属成分を含む薄膜が形成されることを特徴とした請求項1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11または12記載の微生物分離法。 A thin film containing at least one metal component selected from gold, copper, chromium, platinum, and palladium is formed as the light absorbing treatment. The method for separating microorganisms according to 6, 7, 8, 9, 10, 11 or 12.
JP2004287040A 2004-09-30 2004-09-30 Method for separating microorganism Pending JP2006094822A (en)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
JP2004287040A JP2006094822A (en) 2004-09-30 2004-09-30 Method for separating microorganism

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
JP2004287040A JP2006094822A (en) 2004-09-30 2004-09-30 Method for separating microorganism

Publications (1)

Publication Number Publication Date
JP2006094822A true JP2006094822A (en) 2006-04-13

Family

ID=36235220

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
JP2004287040A Pending JP2006094822A (en) 2004-09-30 2004-09-30 Method for separating microorganism

Country Status (1)

Country Link
JP (1) JP2006094822A (en)

Cited By (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP2012198169A (en) * 2011-03-23 2012-10-18 Mitsui Eng & Shipbuild Co Ltd Fluorescence detection device and fluorescence detection method
KR101243631B1 (en) * 2012-07-06 2013-03-15 주식회사 퀀타매트릭스 Microstructure for capturing and releasing microorganism
JP2015522166A (en) * 2012-07-06 2015-08-03 アビバ バイオサイエンシーズ コーポレイション Methods and compositions for isolating or enriching cells
JP2019184275A (en) * 2018-04-03 2019-10-24 浜松ホトニクス株式会社 Sample retain container and light sheet microscope
JP2019533151A (en) * 2016-09-28 2019-11-14 クァンウン ユニバーシティー インダストリーアカデミック コラボレーション ファウンデーションKwangwoon University Industry−Academic Collaboration Foundation Origami-based sample separator
CN113621483A (en) * 2021-09-10 2021-11-09 谢爱军 Microorganism evenly distributed processing apparatus for microorganism culture

Cited By (10)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP2012198169A (en) * 2011-03-23 2012-10-18 Mitsui Eng & Shipbuild Co Ltd Fluorescence detection device and fluorescence detection method
KR101243631B1 (en) * 2012-07-06 2013-03-15 주식회사 퀀타매트릭스 Microstructure for capturing and releasing microorganism
WO2014007560A1 (en) * 2012-07-06 2014-01-09 주식회사 퀀타매트릭스 Microstructure for microorganism trapping and release
JP2015522166A (en) * 2012-07-06 2015-08-03 アビバ バイオサイエンシーズ コーポレイション Methods and compositions for isolating or enriching cells
US10253348B2 (en) 2012-07-06 2019-04-09 Quantamatrix Inc. Microstructure for capturing and releasing microorganism
JP2019533151A (en) * 2016-09-28 2019-11-14 クァンウン ユニバーシティー インダストリーアカデミック コラボレーション ファウンデーションKwangwoon University Industry−Academic Collaboration Foundation Origami-based sample separator
US11506580B2 (en) 2016-09-28 2022-11-22 Calth. Inc. Sample separation device based on paper folding
JP2019184275A (en) * 2018-04-03 2019-10-24 浜松ホトニクス株式会社 Sample retain container and light sheet microscope
JP7113645B2 (en) 2018-04-03 2022-08-05 浜松ホトニクス株式会社 Sample holder and light sheet microscope
CN113621483A (en) * 2021-09-10 2021-11-09 谢爱军 Microorganism evenly distributed processing apparatus for microorganism culture

Similar Documents

Publication Publication Date Title
JP5712396B2 (en) Imaging cell sorter
CA2627347C (en) Method and apparatus for characterizing and counting particles, in particular biological particles
Lin et al. Recyclable fluorescent gold nanocluster membrane for visual sensing of copper (II) ion in aqueous solution
JP4572001B2 (en) Method for measuring particle size distribution of fine particles in metal materials
JP5943521B2 (en) A method for detecting low-concentration specific cells from high-concentration cell groups and a method for collecting and analyzing the detected cells
US8693762B2 (en) Inertial particle focusing flow cytometer
CN109253907B (en) Method for rapidly and auxiliarily detecting micro-plastic in water environment sample by using Nile red dyeing
JP6639906B2 (en) Biological sample detection method
CN114556084A (en) Cell analysis device system and cell analysis method
CN105849559B (en) Method for detecting circulating tumor cell (CTCS)
Zhang et al. Electrokinetic gated injection-based microfluidic system for quantitative analysis of hydrogen peroxide in individual HepG2 cells
JP4548742B2 (en) Dielectric fine particle concentrator
CN106525699A (en) Peripheral blood lymphocyte micronucleus detection kit and detection method thereof
JP2006094822A (en) Method for separating microorganism
JP2007033353A (en) Microorganism detecting system
US20110123979A1 (en) Detection of microorganisms
WO2010007350A1 (en) Detections of microorganisms by dielectrophoresis.
US11609163B2 (en) Devices and methods for processing fluid samples
JP2007014239A (en) Method and device for detecting microorganism
Zhu et al. Microfluidic Impedance Cytometry Enabled One‐Step Sample Preparation for Efficient Single‐Cell Mass Spectrometry
KR102244778B1 (en) Measurement of cell cross-over frequency using the change of position of cells responding to dielectrophoretic force
CN211402075U (en) Micro-fluidic automatic separation and intelligent component identification system
EP3607312A1 (en) Microfluidic devices and methods using the same
JP2009247331A (en) Method for detecting microorganism and apparatus for measuring the same
JP2001242080A (en) Photophoresis method based on absorption spectrum