JP2005513506A - プロテオミクスにおける分子−分子間相互作用決定法 - Google Patents
プロテオミクスにおける分子−分子間相互作用決定法 Download PDFInfo
- Publication number
- JP2005513506A JP2005513506A JP2003556814A JP2003556814A JP2005513506A JP 2005513506 A JP2005513506 A JP 2005513506A JP 2003556814 A JP2003556814 A JP 2003556814A JP 2003556814 A JP2003556814 A JP 2003556814A JP 2005513506 A JP2005513506 A JP 2005513506A
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- biomolecule
- moiety
- target
- linker molecule
- specific
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
Images
Classifications
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/68—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving proteins, peptides or amino acids
- G01N33/6803—General methods of protein analysis not limited to specific proteins or families of proteins
- G01N33/6845—Methods of identifying protein-protein interactions in protein mixtures
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/68—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving proteins, peptides or amino acids
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/68—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving proteins, peptides or amino acids
- G01N33/6803—General methods of protein analysis not limited to specific proteins or families of proteins
- G01N33/6848—Methods of protein analysis involving mass spectrometry
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
- Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10S436/00—Chemistry: analytical and immunological testing
- Y10S436/824—Immunological separation techniques
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
- Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10S436/00—Chemistry: analytical and immunological testing
- Y10S436/905—Photochemical activation of reactions
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
- Y10T—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER US CLASSIFICATION
- Y10T436/00—Chemistry: analytical and immunological testing
- Y10T436/14—Heterocyclic carbon compound [i.e., O, S, N, Se, Te, as only ring hetero atom]
- Y10T436/142222—Hetero-O [e.g., ascorbic acid, etc.]
- Y10T436/143333—Saccharide [e.g., DNA, etc.]
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
- Y10T—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER US CLASSIFICATION
- Y10T436/00—Chemistry: analytical and immunological testing
- Y10T436/24—Nuclear magnetic resonance, electron spin resonance or other spin effects or mass spectrometry
Landscapes
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Hematology (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Urology & Nephrology (AREA)
- Immunology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Pathology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Bioinformatics & Computational Biology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- General Physics & Mathematics (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Spectroscopy & Molecular Physics (AREA)
- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Other Investigation Or Analysis Of Materials By Electrical Means (AREA)
- Analysing Materials By The Use Of Radiation (AREA)
- Investigating Or Analysing Materials By The Use Of Chemical Reactions (AREA)
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
- Saccharide Compounds (AREA)
Abstract
Description
本発明は、分子−分子間相互作用をラベリングし、好ましくは質量分析によって分析する方法に関する。さらに、本発明は、本方法に使用するためのキットに関する。
ゲノム・プロジェクトの成功は、タンパク質をコードしている可能性がある、膨大な数のオープン・リーディング・フレーム(ORF)の同定をもたらした。今残された主な問題は、ゲノム中の機能が解明できていない40〜60%のORFに、機能を割り付けることである。これに対して2つの分析の化学的アプローチが示されている:トランスクリプトミクスとプロテオミクスである。トランスクリプトミクスは、“遺伝子チップ”またはSAGEアプローチを用いて、転写された様々なmRNA種の発現レベルを分析する。これは、特定のタンパク質が発現する条件を見出すのに有用であるが、機能に関する直接の情報がほとんど得られない。プロテオミクス、すなわち発現されたタンパク質の直接定量と分析は、機能の決定への より直接的な手段を提供する。プロテオミクスは、2つの領域に分けられる、すなわち、発現プロテオミクスは細胞中で発現された全てのタンパク質、およびその翻訳後修飾、およびこれらが様々な条件下でどのように変化するかを解明しようとする。細胞マップ・プロテオミクスは、タンパク質の細胞以下の存在、およびどのような他のタンパク質と相互作用するかを解明しようとする。それが、発明者がこの明細書において扱おうとする分野である。
本発明の1つの目的は、この点に対する要請にあった方法を提供することである。この目的および他の目的は、本明細書中の請求項1で開示された通りに、標的生体分子をラベルし、特定生体分子(biomolecule of interest)(ベイト(bait)とも表記される)と相互作用させる方法によって達成される。これによって、標的生体分子(target biomolecule)は、好ましくは、親イオン・スキャニング・モードを用いて 質量分析によって検出される、特異な質量マーカーでラベルされる。本方法は広い応用可能性を有しており、幾つかのタイプの生体分子間の相互作用の研究を可能とする。本発明の特定の目的は、タンパク質と小分子、またはタンパク質とリガンドの間の相互作用を試験する方法を提供する。本発明のさらなる目的は、本発明の方法で使用するためのキットを提供することである。
本発明の別の目的およびさらなる利点は、下記の詳細な開示から明らかである。
図1は、本発明のリンカー分子の一般的な形態を示している。
図2は、本発明の特定のリンカーの化学構造を示している。
図3は、本発明の質量マーカー移動方法の原理の概略図である。
図4は、親イオン・スキャニングの原理を示す。
図5は、娘イオンのスペクトルおよびHPLC UV vs. RICトレースを示す。
図6は、2次元ゲル電気泳動の写真である。
“標的生体分子”は、本明細書中で、解明し分析することが望まれる分子を意味する。
“相互作用する生体分子”という用語は、化学結合、イオン相互作用、水素結合、親和性吸着、または生体分子と生体分子とを結合させる 他の何れかの原理によって、標的に結合し得る生体分子を意味する。
本発明の第1の態様は、特定生体分子と相互作用している標的生体分子を同定する方法であって、
(a)標的に特異性を有する特定生体分子を提供する;
(b)特定生体分子を、少なくとも1つのタイプのリンカー分子と結合させ、該リンカー分子は、特定生体分子に結合するための少なくとも1つの結合部分、少なくとも1つの切断可能な部分、少なくとも1つの質量マーカー部分、および標的に結合するための少なくとも1つの光活性化可能な部分を含む;
(c)特定生体分子を細胞もしくは細胞抽出物に接触させる;
(d)細胞を光分解に付し、それによって光活性化可能な部分を標的に結合させる;
(e)リンカー分子を切断し、それによって、光活性化可能な部分および質量マーカー部分を標的に結合したままに残す;
(f)段階(e)の生成物を分析し、それによって質量マーカー部分を検出し、その結果特定生体分子と相互作用する標的生体分子を同定する;
各段階を含む方法である。
あるいは、実験は、細胞抽出物で行われ得る。
1つの具体的態様において、アミノ酸配列同定段階は、イオン・トラップ・スペクトルメーターまたは四重極飛行時間(TOF)型装置を用いた質量スペクトル分析による。しかしながら、当業者に理解されるように、ペプチド・フラグメント化スペクトルを実施し、測定し得る如何なるMS装置も、この目的に用いられ得る。
本発明のさらに別の態様は、本発明の方法において、標的生体分子をラベルするための、上記のリンカー分子の使用である。
図1は、化学結合基、切断可能なリンカー、質量マーカー、および光活性化可能な基を含む、本発明の架橋リンカー分子の一般的な形態を示す。
図2は、本発明の特定のリンカー、すなわち2−ベンゾフェノン−4−イル−カルボニルアミノ−4,5−ジヒドロキシ−6−(N−スクシンイミジル)−1−(4−ピリジルエチルチオ)−3−n−ヘキサノンの化学構造を示す。
図4は、親イオン・スキャニングの原理を示す。キャピラリーHPLC、エレクトロスプレー源、衝撃ガスのチューブ、および検出器が示されている。
図6は、慣用の方法に従って行った二次元ゲル電気泳動の写真である。
実施例1:本発明の方法の原理
本発明を説明するために、本方法の原理を図3に示す。リンカーを、ベイト・タンパク質のリジン残基に結合させる。次にタンパク質を穿孔した細胞または細胞抽出物に導入し、平衡化した後 光分解する。架橋結合したタンパク質を酸化によって切断した後、混合物を始めに臭化シアンで、次にトリプシンによって消化した。
本方法を汎用性とするために、特にタンパク質が1以上の標的タンパク質と相互作用するならば、ベイト・タンパク質上の架橋リンカーを特定の場所に位置させることが可能でなければならない。発明者は、Roche rapid translation system (RTS) という名で市販されているセル・フリー翻訳システムを用いる。図2のN−マレイミド誘導体を合成してシステインと結合させる。次にこれを、Josef Brunner のグループによって記載され、より最近では Peter Schultz のグループによる、定義されたコドン特異性で、tRNAに結合させ得る。部位特異的な架橋リンカーの組み込みは、迅速に達成され、一般的に100μgの量を一晩で製造し得る。タンパク質は2つの親和性タグを有し、迅速に精製され得る。タンパク質は、活性化取り込みまたはジギトニンにより一時的な細胞を透過性にすることによって、特定細胞に導入される。あるいは、実験は、細胞抽出物中で行われ得る。タンパク質をコードするcDNAがキャリアー・プラスミドに正しく組み込まれたなら、修飾されたtRNAに対するコドンでのPCRによって、迅速に変異体を生成し得る。従って、一旦システムが設定されると、本発明によって、数十個の異なる位置で修飾されたタンパク質が1週間以内に合成され得る。
複合体が非常に大きいならば、ベイト・タンパク質への架橋リンカーの導入は、別のアプローチによらなければならない。本発明に従って、架橋リンカーは、化学的な方法によって無作為に導入される。架橋修飾の非常に穏やかな方法は、リボソーム中のタンパク質−タンパク質間相互作用をマッピングするために、Traut のグループによって紹介された。リジン残基にそれぞれの場所でフリーのスルフィドリル基を提供するために、リジン残基と反応する試薬であるイミノチオランを、穏やかな条件下で、無処置複合体を修飾するのに用いた。次に酸素を該溶液に通気し、隣接のスルフィドリル基を架橋させてジスルフィド架橋を形成した。次に複合体を二次元ゲル電気泳動によって分離した。ここで、第1の次元は非還元的SDS PAGEであり、第2の次元は還元的条件下で行う。非架橋タンパク質が対角軸に沿って、その質量に比例する位置で見られ、一方、架橋されたタンパク質は、図6で示すように、対角軸から離れて垂直方向に分離されたペアとして見られる。この方法は、第1の次元と第2の次元の間で質量マーカー導入を組み込むために、わずかに修飾され得る。こうして、対角軸から離れて観察される全ての相互作用ペアは、迅速にタンパク質フラグメント・フィンガープリント法によって同定され得(James, P., Quadroni, M, Carafoli, E., and Gonnet, G. (1993) Biochem.Biophys.Res.Comm. 195(1), 58-64. Protein identification by mass profile fingerprinting.)、そしてそれらの相互作用部位は、図4と図5に概略示した親イオンスキャニング法によって同時に分析され得る。
エピトープ・マッピングのための方法と同様の、タンパク質間のドメイン相互作用のマッピング方法を実施し得る (Houghten, R. A. (1985). "General method for the rapid solid-phase synthesis of large numbers of peptides: specificity of antigen-antibody interaction at the level of individual amino acids." Proc Natl Acad Sci U S A 82(15): 5131-5.)。発明者らは、10個のアミノ酸が重複しているタンパク質の配列全体を含む一連の20量体のペプチドを合成する(すなわち100kDaのタンパク質には100個のペプチドが必要である)。それぞれのペプチドがそのN末端に架橋リンカーを、そしてC末端に支持体樹脂からそれを隔てる長い切断可能なスペーサーを有する。合成は、標準的な多平行ロボット系によって、96ウェル・プレート形式で行われる (例えば 他の多くの中の Advanced ChemTech)。既知の標的タンパク質は、それを蛍光基でラベルしておき、次に適切な緩衝液中でウェルに加え、平衡化させる。ウェルは、次に、段階的にストリンジェントにした条件で洗浄し、それぞれのウェル中の蛍光をそれぞれのラウンドの後に測定した。最後に、よりよく結合ペプチドを、標的タンパク質と共に再度平衡化し、光分解した。標的上のそれぞれのペプチドの結合位置を測定し、ドメイン相互作用マップを構築する。次に手順を逆にして、ベイトタンパク質を蛍光でラベルし、標的由来のペプチドをスクリーニングし、結合結果を最初のマップと相関させ、非特異的な相互作用を除外する。
Claims (27)
- 特定生体分子と相互作用する標的生体分子を同定する方法であって、
(a)標的に特異性を有する特定生体分子を提供する;
(b)特定生体分子を、少なくとも1つのタイプのリンカー分子と結合させ、該リンカー分子は、特定生体分子に結合するための少なくとも1つの結合部分、少なくとも1つの切断可能な部分、少なくとも1つの質量マーカー部分、および標的に結合するための少なくとも1つの光活性化可能な部分を含む;
(c)特定生体分子を細胞もしくは細胞抽出物に接触させる;
(d)細胞を光分解に付し、それによって光活性化可能な部分を標的に結合させる;
(e)リンカー分子を切断し、それによって、光活性化可能な部分および質量マーカー部分を標的に結合したままに残す;
(f)段階(e)の生成物を分析し、それによって質量マーカー部分を検出し、その結果特定生体分子と相互作用する標的生体分子を同定する;
各段階を含む方法。 - 特定生体分子がタンパク質もしくはペプチドである、請求項1に記載の方法。
- 標的生体分子がタンパク質もしくはペプチドである、請求項1に記載の方法。
- 特定生体分子の、標的生体分子に対する親和性が、10mMから0.1pMの間である、請求項1から3の何れか1項に記載の方法。
- リンカー分子の結合部分が、特定生体分子の特定のアミノ酸残基に結合するよう設計されている、請求項1から4の何れか1項に記載の方法。
- リンカー分子の結合部分が、N−ヒドロキシスクシンイミド部分またはN−マレイミドである、請求項1から5の何れか1項に記載の方法。
- リンカー分子の切断可能な部分が化学的方法によって切断される、請求項1から6の何れか1項に記載の方法。
- 切断可能な部分が酸化剤または塩基剤によって切断される、請求項6に記載の方法。
- 切断可能な部分がジェミナル・ジオールまたはエステル結合である、請求項1から8の何れか1項に記載の方法。
- 質量マーカー部分が分析段階でフラグメント化し得る、請求項1から9の何れか1項に記載の方法。
- 質量マーカー部分が チオエチルピリジンである、請求項1から10の何れか1項に記載の方法。
- 少なくとも2つの異なるリンカー分子が用いられる、請求項1から11の何れか1項に記載の方法。
- 光活性化可能な部分がアジドまたはベンゾフェノンである、請求項1から12の何れか1項に記載の方法。
- リンカー分子が2−ベンゾフェノン−4−イル−カルボニルアミノ−4,5−ジヒドロキシ−6−(N−スクシンイミジル)−1−(4−ピリジルエチルチオ)−3−n−ヘキサノンである、請求項1から13の何れか1項に記載の方法。
- リンカー分子がさらに蛍光タンパク質タグを含む、請求項1から14の何れか1項に記載の方法。
- リンカー分子が、それを細胞内の位置へ誘導するタグを含む、請求項1から15の何れか1項に記載の方法。
- 段階(c)の細胞が、細胞抽出物の形態またはセル・フリー翻訳システム中で、穿孔処理される、請求項1から16の何れか1項に記載の方法。
- 段階(d)の光分解が、細胞をUV光に曝露することによって行われる、請求項1から17の何れか1項に記載の方法。
- 光分解が少なくとも1回繰り返される、請求項18に記載の方法。
- 段階(d)の生成物が、化学的に および/または 酵素で消化される、請求項1から19の何れか1項に記載の方法。
- 消化が、臭化シアン および/または トリプシンによって行われる、請求項20に記載の方法。
- 段階(f)が質量分析器(MS)と組み合わせた多次元HPLCである、請求項1から21の何れか1項に記載の方法。
- MSが親イオン・スキャニング・モードにされている、請求項22に記載の方法。
- マーカーを含む分子が、m/z 106で検出される、請求項23に記載の方法。
- データ依存モードでMSを作動させ、それによってマーカーを含むペプチドを検出した場合に、親イオンから娘イオン・スキャニング・モードにスイッチする、請求項24に記載の方法。
- MS親イオン・スキャニングのために特定標的生体分子をラベルするリンカー分子、2−ベンゾフェノン−4−イル−カルボニルアミノ−4,5−ジヒドロキシ−6−(N−スクシンイミジル)−1−(4−ピリジルエチルチオ)−3−n−ヘキサノンの使用。
- 別個のコンパートメント中に、少なくとも1個のリンカー分子を、所望により特定生体分子と共に含む、請求項1〜26に記載の方法に使用するためのキット。
Applications Claiming Priority (2)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
GBGB0131014.3A GB0131014D0 (en) | 2001-12-28 | 2001-12-28 | Method for molecule-mlecule analysis |
PCT/EP2002/014315 WO2003056342A2 (en) | 2001-12-28 | 2002-12-16 | Method for determining molecule-molecule interaction in proteomics |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
JP2005513506A true JP2005513506A (ja) | 2005-05-12 |
JP2005513506A5 JP2005513506A5 (ja) | 2006-02-09 |
Family
ID=9928438
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2003556814A Pending JP2005513506A (ja) | 2001-12-28 | 2002-12-16 | プロテオミクスにおける分子−分子間相互作用決定法 |
Country Status (9)
Country | Link |
---|---|
US (1) | US7022491B2 (ja) |
EP (1) | EP1459073B1 (ja) |
JP (1) | JP2005513506A (ja) |
AT (1) | ATE386270T1 (ja) |
AU (1) | AU2002358143A1 (ja) |
CA (1) | CA2465300A1 (ja) |
DE (1) | DE60225059D1 (ja) |
GB (1) | GB0131014D0 (ja) |
WO (1) | WO2003056342A2 (ja) |
Cited By (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP2014137307A (ja) * | 2013-01-17 | 2014-07-28 | Toyama Univ | 蛍光性質量標識プローブ |
JP2021512300A (ja) * | 2018-02-02 | 2021-05-13 | リジェネロン・ファーマシューティカルズ・インコーポレイテッド | タンパク質二量体化を特徴解析するためのシステムおよび方法 |
Families Citing this family (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP2005140755A (ja) * | 2003-11-10 | 2005-06-02 | Japan Science & Technology Agency | 質量分析用プローブ及びそれを用いた質量分析方法 |
GB0515323D0 (en) | 2005-07-26 | 2005-08-31 | Electrophoretics Ltd | Mass labels |
CN110853712B (zh) * | 2018-08-01 | 2022-06-07 | 清华大学 | 鉴定多对生物分子间相互作用调控因子的方法 |
Family Cites Families (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US4487838A (en) | 1982-01-12 | 1984-12-11 | Massachusetts Institute Of Technology | Radio-labelled cross-linking reagents |
GB9315847D0 (en) | 1993-07-30 | 1993-09-15 | Isis Innovation | Tag reagent and assay method |
GB9815166D0 (en) | 1998-07-13 | 1998-09-09 | Brax Genomics Ltd | Compounds for mass spectrometry |
-
2001
- 2001-12-28 GB GBGB0131014.3A patent/GB0131014D0/en not_active Ceased
-
2002
- 2002-12-16 JP JP2003556814A patent/JP2005513506A/ja active Pending
- 2002-12-16 EP EP02791831A patent/EP1459073B1/en not_active Expired - Lifetime
- 2002-12-16 US US10/500,431 patent/US7022491B2/en not_active Expired - Fee Related
- 2002-12-16 DE DE60225059T patent/DE60225059D1/de not_active Expired - Lifetime
- 2002-12-16 CA CA002465300A patent/CA2465300A1/en not_active Abandoned
- 2002-12-16 WO PCT/EP2002/014315 patent/WO2003056342A2/en active IP Right Grant
- 2002-12-16 AU AU2002358143A patent/AU2002358143A1/en not_active Abandoned
- 2002-12-16 AT AT02791831T patent/ATE386270T1/de not_active IP Right Cessation
Cited By (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP2014137307A (ja) * | 2013-01-17 | 2014-07-28 | Toyama Univ | 蛍光性質量標識プローブ |
JP2021512300A (ja) * | 2018-02-02 | 2021-05-13 | リジェネロン・ファーマシューティカルズ・インコーポレイテッド | タンパク質二量体化を特徴解析するためのシステムおよび方法 |
JP7171746B2 (ja) | 2018-02-02 | 2022-11-15 | リジェネロン・ファーマシューティカルズ・インコーポレイテッド | タンパク質二量体化を特徴解析するためのシステムおよび方法 |
JP7449351B2 (ja) | 2018-02-02 | 2024-03-13 | リジェネロン・ファーマシューティカルズ・インコーポレイテッド | タンパク質二量体化を特徴解析するためのシステムおよび方法 |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
EP1459073B1 (en) | 2008-02-13 |
WO2003056342A2 (en) | 2003-07-10 |
AU2002358143A1 (en) | 2003-07-15 |
CA2465300A1 (en) | 2003-07-10 |
DE60225059D1 (de) | 2008-03-27 |
GB0131014D0 (en) | 2002-02-13 |
EP1459073A2 (en) | 2004-09-22 |
US20050095654A1 (en) | 2005-05-05 |
US7022491B2 (en) | 2006-04-04 |
ATE386270T1 (de) | 2008-03-15 |
AU2002358143A8 (en) | 2003-07-15 |
WO2003056342A3 (en) | 2003-11-06 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
JP5374363B2 (ja) | ペプチド混合物を評価する方法 | |
Hamdan et al. | Modern strategies for protein quantification in proteome analysis: advantages and limitations | |
AU2008213716B2 (en) | Affinity selected signature peptides for protein identification and quantification | |
JP4290003B2 (ja) | 質量標識体 | |
Leitner | A review of the role of chemical modification methods in contemporary mass spectrometry-based proteomics research | |
EP1918714A1 (en) | Compounds and methods for double labelling of polypeptides to allow multiplexing in mass spectrometric analysis | |
US7163803B2 (en) | Method for characterizing polypeptides | |
JP2004505248A (ja) | ポリペプチドの配列決定のための新しい方法及びキット | |
Soderblom et al. | Tandem mass spectrometry acquisition approaches to enhance identification of protein‐protein interactions using low‐energy collision‐induced dissociative chemical crosslinking reagents | |
EP1617223A2 (en) | Serial derivatization of peptides for "de Novo" sequencing using tandem mass spectrometry | |
CA2432052A1 (en) | Inverse labeling method for the rapid identification of marker/target proteins | |
US7244411B2 (en) | Method of selective peptide isolation for the identification and quantitative analysis of proteins in complex mixtures | |
JP2005513507A (ja) | タンパク質発現分析方法 | |
EP1459073B1 (en) | Method for determining molecule-molecule interaction in proteomics | |
EP1916526A1 (en) | Method for diagnostic and therapeutic target discovery by combining isotopic and isobaric labels | |
Hansen et al. | Mass spectrometric analysis of protein mixtures at low levels using cleavable 13C-ICAT and multi-dimensional chromatography | |
Nokihara et al. | High throughput sequencing of cyclic peptide immobilized on a gel-type single bead | |
Delahunty et al. | Protein–Protein Interactions | |
WO2003031982A1 (en) | Method for analysing protein/peptide expression | |
Jin et al. | 13 Principles of Proteomics | |
Borchers et al. | CH 12 Application of Proteomics in Basic Biological Sciences and Cancer |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20051209 |
|
A621 | Written request for application examination |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A621 Effective date: 20051209 |
|
A977 | Report on retrieval |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A971007 Effective date: 20081224 |
|
A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20090210 |
|
A02 | Decision of refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A02 Effective date: 20090630 |