JP2005316162A - Illuminator for microscope, microscope with illuminator, and illuminating method - Google Patents

Illuminator for microscope, microscope with illuminator, and illuminating method Download PDF

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Abstract

<P>PROBLEM TO BE SOLVED: To provide a simply structured illuminator capable of adjusting at high speed the light quantity of illumination light to a microscope. <P>SOLUTION: The microscope 100 includes an illuminator for lighting a specimen 111. The illuminator includes an objective lens 112 used commonly with a viewing optical system, a light source 123 for generating illumination light (excitation light), a collective lens 122, a reflection mirror 121, an illumination section 120 for lighting the specimen 111 with the illumination light from the light source 123, a field stop projection lens 119, an excitation filter 118, and a dichroic mirror 113. The illuminator is further equipped with a detector for detecting light quantity and a controller 127 for controlling the illumination section 120 based on the light quantity detected by the detector. The light quantity detector is provided with a system for detecting the light quantity of the illumination light radiating from the illumination section to the specimen 111. This light quantity detecting system is equipped with a beam splitter 124, a converging lens 125, and a photoelectric conversion device 126. <P>COPYRIGHT: (C)2006,JPO&NCIPI

Description

本発明は、顕微鏡用の照明装置に関する。   The present invention relates to an illumination device for a microscope.

顕微鏡の照明装置では、ハロゲンランプや水銀ランプやレーザーなどの光源が一般に用いられている。光源から射出される照明光を標本に照射し、通常の顕微鏡であれば標本からの反射光によって、また蛍光顕微鏡であれば標本から発生する蛍光によって観察を行なう。観察の際に光源から射出される照明光の光量が変化すると、観察像に影響を与える。照明光の光量変化の要因としては、光源の電源投入時のドリフト、温度変化、電圧変化、経年変化、レンズ交換による光学系変化などが考えられる。   In an illumination device for a microscope, a light source such as a halogen lamp, a mercury lamp, or a laser is generally used. Illumination light emitted from the light source is irradiated on the specimen, and observation is performed by reflected light from the specimen if it is a normal microscope, or by fluorescence generated from the specimen if it is a fluorescence microscope. When the amount of illumination light emitted from the light source changes during observation, the observation image is affected. Possible causes of the change in the amount of illumination light include drift when the light source is turned on, temperature change, voltage change, aging change, optical system change due to lens replacement, and the like.

光量変化の影響を除去する手法のひとつとして、光学フィルターを光路上に挿入する方法がある。例えば、特開2001−42457号公報は、複数の光学フィルターを備えた照明装置を開示している。この照明装置では、経年変化による光量の変化を光量検出器で取得し、複数の光学フィルターの組み合わせを制御することによって所望の光量に減光させている。この照明装置を用いれば、経年変化によって照明系が減光した場合でも、光学フィルターを変更することによって光量変化の影響を除去することが可能である。   One method for removing the influence of a change in the amount of light is to insert an optical filter in the optical path. For example, Japanese Patent Laid-Open No. 2001-42457 discloses an illumination device including a plurality of optical filters. In this illuminating device, a change in light quantity due to secular change is acquired by a light quantity detector, and the light quantity is reduced to a desired light quantity by controlling a combination of a plurality of optical filters. If this illumination device is used, even when the illumination system is dimmed due to secular change, it is possible to remove the influence of the light quantity change by changing the optical filter.

また、特開2003−107361号公報は、微小ミラーを用いて照明のオン・オフを切り換える顕微鏡の照明装置を開示している。
特開2001−42457号公報 特開2003−107361号公報
Japanese Patent Laid-Open No. 2003-107361 discloses a microscope illumination device that switches on / off illumination using a micromirror.
JP 2001-42457 A JP 2003-107361 A

特開2001−42457号公報の照明装置では、複数の光学フィルターの組み合わせによって減光させているため、減光できる光量の組み合わせが限られる。このため、光量の変化による顕微鏡の観察像の変化の影響を除去しきることができない。光量の組み合わせを増やすには光学フィルターの枚数を増やせばよいが、光学フィルターの枚数の増加は装置の巨大化やコストの上昇をまねく。また、光学フィルターの交換制御の速度に限界があるため、光量の急激な変化に追従することが難しい。   In the illumination device disclosed in Japanese Patent Application Laid-Open No. 2001-42457, the amount of light that can be reduced is limited because the light is reduced by a combination of a plurality of optical filters. For this reason, the influence of the change in the observation image of the microscope due to the change in the amount of light cannot be completely removed. To increase the number of light combinations, the number of optical filters can be increased. However, the increase in the number of optical filters leads to an increase in the size and cost of the apparatus. Further, since there is a limit to the speed of the optical filter replacement control, it is difficult to follow a sudden change in the amount of light.

特開2003−107361号公報の照明装置では、照明のオン・オフの切り換えはできるが、照明光の光量を変化させることはできない。   In the illumination device disclosed in Japanese Patent Laid-Open No. 2003-107361, illumination can be switched on / off, but the amount of illumination light cannot be changed.

本発明は、このような実状を考慮して成されたものであり、その主な目的は、顕微鏡の照明光の光量を高速で調整し得る技術を提供することである。   The present invention has been made in consideration of such a situation, and its main object is to provide a technique capable of adjusting the light quantity of illumination light of a microscope at high speed.

本発明は、ひとつには、顕微鏡用の照明装置であり、照明光を発するための光源と、光源からの照明光で標本を照明するための照明部と、光量を検出するための光量検出部と、光量検出部で検出された光量に基づいて照明部を制御する制御部とを備えている。   One aspect of the present invention is an illumination device for a microscope, a light source for emitting illumination light, an illumination unit for illuminating a specimen with illumination light from the light source, and a light amount detection unit for detecting the amount of light And a control unit that controls the illumination unit based on the amount of light detected by the light amount detection unit.

本発明は、ひとつには、照明装置を備えた顕微鏡であり、照明装置が、照明光を発するための光源と、光源からの照明光で標本を照明するための照明部と、光量を検出するための光量検出部と、光量検出部で検出された光量に基づいて照明部を制御する制御部とを備えている。   One aspect of the present invention is a microscope including an illumination device. The illumination device detects a light amount, a light source for emitting illumination light, an illumination unit for illuminating a specimen with illumination light from the light source, and a light amount. A light amount detection unit for controlling the illumination unit based on the light amount detected by the light amount detection unit.

本発明は、ひとつには、顕微鏡によって観察される標本の照明方法であり、標本を照明光で間欠的に照明するとともに、照明光と観察光の少なくとも一方の光量を検出し、検出した光量に基づいて照明時間を変更する。   One aspect of the present invention is a method for illuminating a specimen observed with a microscope. The specimen is intermittently illuminated with illumination light, and the light quantity of at least one of the illumination light and the observation light is detected. Change the lighting time based on.

本発明によれば、顕微鏡の照明光の光量を高速で調整し得る技術が提供される。   ADVANTAGE OF THE INVENTION According to this invention, the technique which can adjust the light quantity of the illumination light of a microscope at high speed is provided.

以下、図面を参照しながら本発明の実施形態について説明する。   Hereinafter, embodiments of the present invention will be described with reference to the drawings.

第一実施形態
[構成]
本実施形態は、照明装置を備えた顕微鏡、特に蛍光観察のための顕微鏡に向けられている。図1は、本発明の第一実施形態の顕微鏡の構成を概略的に示している。
First Embodiment [Configuration]
This embodiment is directed to a microscope provided with an illumination device, particularly a microscope for fluorescence observation. FIG. 1 schematically shows the configuration of the microscope according to the first embodiment of the present invention.

図1に示されるように、本実施形態の顕微鏡100は、標本111を光学的に観察するための観察光学系を有している。観察光学系は、ステージ110と対物レンズ112と吸収フィルター114と結像レンズ115と接眼レンズ117とプリズム116とを含んでいる。ステージ110は標本111を載せるためのものである。対物レンズ112はステージ110の上方に配置されている。結像レンズ115は対物レンズ112と共働して結像光学系を構成する。接眼レンズ117は結像光学系によって結像された像の目視観察を可能にする。プリズム116は結像レンズ115からの光を接眼レンズ117に導く。吸収フィルター114は対物レンズ112と結像レンズ115の間に配置されている。吸収フィルター114は、蛍光観察のためのもので、標本111から発生する蛍光を選択的に透過し、不所望な光を遮断する。   As shown in FIG. 1, the microscope 100 of the present embodiment has an observation optical system for optically observing a specimen 111. The observation optical system includes a stage 110, an objective lens 112, an absorption filter 114, an imaging lens 115, an eyepiece lens 117, and a prism 116. The stage 110 is for placing the specimen 111. The objective lens 112 is disposed above the stage 110. The imaging lens 115 cooperates with the objective lens 112 to constitute an imaging optical system. The eyepiece 117 enables visual observation of an image formed by the imaging optical system. The prism 116 guides the light from the imaging lens 115 to the eyepiece lens 117. The absorption filter 114 is disposed between the objective lens 112 and the imaging lens 115. The absorption filter 114 is for fluorescence observation, and selectively transmits fluorescence generated from the specimen 111 and blocks unwanted light.

顕微鏡100は、標本111を照明するための照明装置を含んでいる。照明装置は、標本111を照明するための照明光学系を有している。照明光学系は、対物レンズ112を含んでいる。つまり照明光学系は、対物レンズ112を観察光学系と共有している。照明光学系はさらに、光源123とコレクターレンズ122と反射ミラー121と照明部120と視野絞り投影レンズ119と励起フィルター118とダイクロイックミラー113とを含んでいる。光源123は照明光(励起光)を発するためのものである。光源123は、これに限らないが、例えば水銀ランプで構成される。光源123は、水銀ランプのほかに、ハロゲンランプやLEDやレーザーや赤外光源や紫外光源などで構成されてもよい。コレクターレンズ122は、光源123からの照明光を集めて反射ミラー121へ向かう照明光ビームを作り出す。反射ミラー121は、コレクターレンズ122からの照明光ビームを照明部120に向けて偏向する。照明部120は、光源123からの照明光で標本111を照明するためのものであり、標本111への照明光の伝搬を制御する。本実施形態の照明部120は反射型であり、照明光ビームの反射方向を変更することによって標本111への照明光の伝搬を許可または禁止する。照明部120は、好ましくは、二次元光量分布をもつ照明光で標本を照明する二次元照明素子で構成されている。本実施形態では、二次元照明素子はデジタル微小ミラー装置で構成されている。励起フィルター118は、標本111に適した励起光を選択的に透過し、不所望な光を遮断する。ダイクロイックミラー113は、対物レンズ112と吸収フィルター114の間に配置されている。ダイクロイックミラー113は、励起フィルター118からの励起光ビームを対物レンズ112に向けて反射する。ダイクロイックミラー113はまた、標本111から発生した蛍光を選択的に透過し、そのほかの不所望な光(標本111で反射された励起光など)を選択的に反射する。   The microscope 100 includes an illuminating device for illuminating the specimen 111. The illumination device has an illumination optical system for illuminating the specimen 111. The illumination optical system includes an objective lens 112. That is, the illumination optical system shares the objective lens 112 with the observation optical system. The illumination optical system further includes a light source 123, a collector lens 122, a reflection mirror 121, an illumination unit 120, a field stop projection lens 119, an excitation filter 118, and a dichroic mirror 113. The light source 123 is for emitting illumination light (excitation light). Although not limited to this, the light source 123 is configured by, for example, a mercury lamp. The light source 123 may be composed of a halogen lamp, LED, laser, infrared light source, ultraviolet light source, or the like in addition to the mercury lamp. The collector lens 122 collects the illumination light from the light source 123 and creates an illumination light beam directed toward the reflection mirror 121. The reflection mirror 121 deflects the illumination light beam from the collector lens 122 toward the illumination unit 120. The illumination unit 120 is for illuminating the specimen 111 with illumination light from the light source 123, and controls the propagation of the illumination light to the specimen 111. The illumination unit 120 of this embodiment is a reflection type, and permits or prohibits the propagation of illumination light to the specimen 111 by changing the reflection direction of the illumination light beam. The illumination unit 120 is preferably composed of a two-dimensional illumination element that illuminates the specimen with illumination light having a two-dimensional light quantity distribution. In this embodiment, the two-dimensional illumination element is composed of a digital micromirror device. The excitation filter 118 selectively transmits excitation light suitable for the specimen 111 and blocks unwanted light. The dichroic mirror 113 is disposed between the objective lens 112 and the absorption filter 114. The dichroic mirror 113 reflects the excitation light beam from the excitation filter 118 toward the objective lens 112. The dichroic mirror 113 also selectively transmits fluorescence generated from the specimen 111 and selectively reflects other undesired light (such as excitation light reflected by the specimen 111).

照明装置はさらに、光量を検出するための光量検出部を備えている。本実施形態の光量検出部は、照明部120から標本111に向かう照明光の光量を検出する照明光検出系を備えている。照明光検出系は、ビームスプリッター124と収束レンズ125と光電変換デバイス126とを備えている。ビームスプリッター124は、照明部120と視野絞り投影レンズ119の間に配置されており、照明部120からダイクロイックミラー113へ向かう照明光ビームの一部を分岐させる。ビームスプリッター124は、これに限らないが、例えばハーフミラーで構成される。収束レンズ125は、ビームスプリッター124で分岐された照明光ビームを収束させて光電変換デバイス126に照射する。光電変換デバイス126は、入射した照明光の強度を反映した電気信号を出力する。光電変換デバイス126は、これに限らないが、例えば光電子増倍管やフォトダイオードで構成される。しかし、照明部120が二次元照明素子で構成されている場合には、光電変換デバイス126は、より好ましくは、二次元光量分布を検出するための二次元光量分布検出器で構成されるとよい。二次元光量検出素子は、これに限らないが、例えばCCDやCMOSで構成される。   The illumination device further includes a light amount detection unit for detecting the light amount. The light amount detection unit of the present embodiment includes an illumination light detection system that detects the amount of illumination light directed from the illumination unit 120 toward the sample 111. The illumination light detection system includes a beam splitter 124, a converging lens 125, and a photoelectric conversion device 126. The beam splitter 124 is disposed between the illumination unit 120 and the field stop projection lens 119, and branches a part of the illumination light beam directed from the illumination unit 120 to the dichroic mirror 113. Although not limited to this, the beam splitter 124 is configured by a half mirror, for example. The converging lens 125 converges the illumination light beam branched by the beam splitter 124 and irradiates the photoelectric conversion device 126. The photoelectric conversion device 126 outputs an electrical signal that reflects the intensity of incident illumination light. Although not limited to this, the photoelectric conversion device 126 is configured by, for example, a photomultiplier tube or a photodiode. However, when the illumination unit 120 is configured with a two-dimensional illumination element, the photoelectric conversion device 126 is more preferably configured with a two-dimensional light amount distribution detector for detecting a two-dimensional light amount distribution. . The two-dimensional light quantity detection element is not limited to this, but is constituted by, for example, a CCD or a CMOS.

照明装置はさらに、光量検出部で検出された光量に基づいて照明部120を制御する制御部127を備えている。制御部127は、標本111を間欠的に照明するように照明部120を制御する。より詳しくは、制御部127は、光量検出部で検出された光量に基づいて照明時間を変更する。さらに、制御部127は、一定の周期で照明を開始するように照明部120を制御する。   The illumination device further includes a control unit 127 that controls the illumination unit 120 based on the light amount detected by the light amount detection unit. The control unit 127 controls the illumination unit 120 to illuminate the sample 111 intermittently. More specifically, the control unit 127 changes the illumination time based on the light amount detected by the light amount detection unit. Furthermore, the control unit 127 controls the illumination unit 120 to start illumination at a constant cycle.

図2は、照明部120であるデジタル微小ミラー装置120Aを模式的に示している。図2に示されるように、デジタル微小ミラー装置120Aは、複数の微小ミラー120aを備えている。複数の微小ミラー120aは、これに限らないが、例えばマトリックス状に配列されている。微小ミラー120aは、これに限らないが、例えば矩形形状をしている。また微小ミラー120aは、これに限らないが、例えば20平方μm以下の面積を有している。微小ミラー120aは、所定の角度α(例えば10°)の範囲内で紙面に直交する軸の周りに揺動可能であり、オン位置とオフ位置の間で切り換え可能である。微小ミラー120aは、オン位置では、照明光ビーム131を照明光学系の光軸Aに沿って反射し、オフ位置では、照明光ビーム131を退避光軸132に沿って反射する。微小ミラー120aは、オン位置とオフ位置の間を10マイクロ秒台の応答速度で切り換え可能である。また、複数の微小ミラー120aのオン位置とオフ位置の間の切り換え(すなわち微小ミラー120aのオン・オフ)は独立に制御可能である。デジタル微小ミラー装置120Aは、巨視的に見て、照明光学系の光軸Aに対して垂直に配置されている。さらにデジタル微小ミラー装置120Aは、標本111の反射光が投影される位置に配置されている。その結果、微小ミラー120aによって照明光学系の光軸Aに平行に反射された光ビームは対物レンズ112の軸(すなわち観察光学系の光軸)に平行に標本111に向けて照射される。   FIG. 2 schematically shows a digital micromirror device 120 </ b> A that is the illumination unit 120. As shown in FIG. 2, the digital micromirror device 120A includes a plurality of micromirrors 120a. Although not limited to this, the plurality of micromirrors 120a are arranged in a matrix, for example. Although not limited to this, the micromirror 120a has a rectangular shape, for example. Further, the micromirror 120a has an area of, for example, 20 square μm or less, although not limited thereto. The minute mirror 120a can swing around an axis orthogonal to the paper surface within a range of a predetermined angle α (for example, 10 °), and can be switched between an on position and an off position. The micro mirror 120a reflects the illumination light beam 131 along the optical axis A of the illumination optical system at the on position, and reflects the illumination light beam 131 along the retracting optical axis 132 at the off position. The micromirror 120a can be switched between an on position and an off position at a response speed of the order of 10 microseconds. In addition, switching between the on position and the off position of the plurality of micromirrors 120a (that is, on / off of the micromirrors 120a) can be controlled independently. The digital micromirror device 120A is arranged perpendicular to the optical axis A of the illumination optical system when viewed macroscopically. Further, the digital micromirror device 120A is arranged at a position where the reflected light of the specimen 111 is projected. As a result, the light beam reflected by the micromirror 120a in parallel with the optical axis A of the illumination optical system is irradiated toward the specimen 111 in parallel with the axis of the objective lens 112 (that is, the optical axis of the observation optical system).

[作用]
図1において、光源123から発せられた照明光すなわち励起光の一部はコレクターレンズ122に入射して照明光ビームになる。照明光ビームは、反射ミラー121によって反射されて照明部120すなわちデジタル微小ミラー装置120A(図2参照)に入射する。図2に示されるように、デジタル微小ミラー装置120Aは、微小ミラー120aのオン位置・オフ位置に従って照明光学系の光軸Aまたは退避光軸132に沿って照明光ビームを反射する。つまり、オン位置の微小ミラー120aは、これに入射した照明光ビームを照明光学系の光軸Aに沿って反射して視野絞り投影レンズ119に方向付ける。また、オフ位置の微小ミラー120aは、これに入射した照明光ビームを退避光軸132に沿って反射する。退避光軸132に沿って反射された照明光ビームは、装置外部に射出され、照明には使用されない。
[Action]
In FIG. 1, a part of the illumination light emitted from the light source 123, that is, the excitation light, enters the collector lens 122 and becomes an illumination light beam. The illumination light beam is reflected by the reflection mirror 121 and enters the illumination unit 120, that is, the digital micromirror device 120A (see FIG. 2). As shown in FIG. 2, the digital micromirror device 120A reflects the illumination light beam along the optical axis A or retracting optical axis 132 of the illumination optical system according to the on / off positions of the micromirror 120a. That is, the micro mirror 120a at the ON position reflects the illumination light beam incident thereon along the optical axis A of the illumination optical system and directs it to the field stop projection lens 119. Further, the micro mirror 120 a at the off position reflects the illumination light beam incident thereon along the retracting optical axis 132. The illumination light beam reflected along the retracting optical axis 132 is emitted outside the apparatus and is not used for illumination.

図1において、デジタル微小ミラー装置120Aから視野絞り投影レンズ119に向かう照明光ビームの一部は、ビームスプリッター124によって反射されて収束レンズ125に向かい、残りはビームスプリッター124を透過して視野絞り投影レンズ119に入射する。収束レンズ125に向かう照明光ビームは収束レンズ125によって収束されて光電変換デバイス126に入射する。光電変換デバイス126は入射した照明光を光電変換して、光量を反映した電気信号を制御部127に出力する。   In FIG. 1, a part of the illumination light beam directed from the digital micromirror device 120A toward the field stop projection lens 119 is reflected by the beam splitter 124 toward the converging lens 125, and the rest is transmitted through the beam splitter 124 and projected through the field stop. The light enters the lens 119. The illumination light beam traveling toward the converging lens 125 is converged by the converging lens 125 and enters the photoelectric conversion device 126. The photoelectric conversion device 126 photoelectrically converts incident illumination light and outputs an electrical signal reflecting the light amount to the control unit 127.

ビームスプリッター124を透過した照明光ビームは、視野絞り投影レンズ119と励起フィルター118を透過し、ダイクロイックミラー113によって反射され、対物レンズ112を通って標本111に照射される。   The illumination light beam that has passed through the beam splitter 124 passes through the field stop projection lens 119 and the excitation filter 118, is reflected by the dichroic mirror 113, and irradiates the specimen 111 through the objective lens 112.

標本111は、照明光すなわち励起光の照射に対応して観察光すなわち蛍光を発する。標本111から発生した観察光すなわち蛍光の一部は対物レンズ112に入射して観察光ビームになる。観察光ビームは、ダイクロイックミラー113と吸収フィルター114を透過し、結像レンズ115によって結像される。結像レンズ115によって結像された像は、プリズム116を介して接眼レンズ117によって観察され得る。   The specimen 111 emits observation light, that is, fluorescence in response to irradiation of illumination light, that is, excitation light. A portion of the observation light generated from the specimen 111, that is, fluorescence, enters the objective lens 112 and becomes an observation light beam. The observation light beam passes through the dichroic mirror 113 and the absorption filter 114 and is imaged by the imaging lens 115. An image formed by the imaging lens 115 can be observed by the eyepiece lens 117 through the prism 116.

制御部127は、光量検出部で検出された光量すなわち光電変換デバイス126から出力される電気信号に基づいて照明部120を制御する。より詳しくは、制御部127は、デジタル微小ミラー装置120Aのすべての微小ミラー120aのオン・オフを同時に周期的に切り換える。   The control unit 127 controls the illumination unit 120 based on the light amount detected by the light amount detection unit, that is, the electric signal output from the photoelectric conversion device 126. More specifically, the control unit 127 periodically switches on / off all the micromirrors 120a of the digital micromirror device 120A simultaneously.

図3は、デジタル微小ミラー装置の微小ミラーのオン・オフを切り換えるタイミングを示している。図3から分かるように、制御部127は、一定の周期Tで繰り返し、デジタル微小ミラー装置120Aのすべての微小ミラー120aをオン位置に切り換えて照明を開始させる(照明オンにする)。さらに、照明の開始から時間t1経過後に、デジタル微小ミラー装置120Aのすべての微小ミラー120aをオフ位置に切り換えて照明を停止させる(照明オフにする)。照明の停止から時間t2(=T−t1)経過後すなわち先の照明の開始から時間T経過後に、再び照明を開始させる。これによって、標本111は間欠的に照明される。   FIG. 3 shows the timing for switching on and off the micromirror of the digital micromirror device. As can be seen from FIG. 3, the control unit 127 repeats at a constant period T, and switches all the micromirrors 120a of the digital micromirror device 120A to the on position to start illumination (turns on illumination). Further, after the elapse of time t1 from the start of illumination, all the micromirrors 120a of the digital micromirror device 120A are switched to the off position to stop the illumination (turn off the illumination). After the time t2 (= T−t1) has elapsed since the stop of the illumination, that is, after the time T has elapsed since the start of the previous illumination, the illumination is started again. Thereby, the sample 111 is intermittently illuminated.

さらに制御部127は、光電変換デバイス126から出力される電気信号に基づいて、照明している時間(照明オンの時間)t1と照明を停止している時間(照明オフの時間)t2の比率を変更する。つまり、制御部127は、検出された照明光の光量に基づいて、照明時間を変更する。例えば、照明が暗い場合には、より明るくするために、照明オンの時間を長くして照明オフの時間を短くする。反対に、照明が明るい場合には、より暗くするために、照明オンの時間を短くして照明オフの時間を長くする。   Further, based on the electrical signal output from the photoelectric conversion device 126, the control unit 127 sets the ratio between the illumination time (illumination on time) t1 and the illumination stop time (illumination off time) t2. change. That is, the control unit 127 changes the illumination time based on the detected amount of illumination light. For example, when the illumination is dark, in order to make it brighter, the illumination on time is lengthened and the illumination off time is shortened. On the other hand, when the illumination is bright, in order to make it darker, the illumination on time is shortened and the illumination off time is lengthened.

図4は、デジタル微小ミラー装置の制御のフローチャートである。以下、図4を参照しながらデジタル微小ミラー装置の制御について説明する。   FIG. 4 is a flowchart of control of the digital micromirror device. Hereinafter, control of the digital micromirror device will be described with reference to FIG.

あらかじめ制御部127に目標光量値を設定しておく(S1)。   A target light amount value is set in advance in the control unit 127 (S1).

まず、光電変換デバイス126によって光量値を取得する(S2)。   First, a light amount value is acquired by the photoelectric conversion device 126 (S2).

次に、取得した光量値と目標光量値の差分を計算する(S3)。つまり、取得した光量値と目標光量値とを比較する。   Next, the difference between the acquired light quantity value and the target light quantity value is calculated (S3). That is, the acquired light amount value is compared with the target light amount value.

続いて、光量値の差分を用いて微分積分の計算を行なって制御信号を生成する(S4)。具体的には、光電変換デバイス126によって取得される光量値を目標光量値に等しくする制御信号を生成する。   Subsequently, a differential signal is calculated using the difference between the light amount values to generate a control signal (S4). Specifically, a control signal for making the light amount value acquired by the photoelectric conversion device 126 equal to the target light amount value is generated.

制御信号に従ってデジタル微小ミラー装置120Aを制御する(S5)。   The digital micromirror device 120A is controlled according to the control signal (S5).

具体的には、S3において取得した光量値と目標光量値の差分を計算した結果、検出した光量値が目標光量値より小さい場合(つまり照明が暗い場合)には、S4とS5において、照明オンの時間t1を増加させて照明オフの時間t2を減少させるフィードバック制御を行なう。また、検出した光量値が目標光量値より大きい場合(つまり照明が明るい場合)には、S4とS5において、照明オンの時間t1を減少させて照明オフの時間t2を増加させるフィードバック制御を行なう。これによって、デジタル微小ミラー装置120Aの微小ミラー120aによって光軸Aに沿って反射された照明光ビームが標本111を照明する時間が適切に制御される。その結果、標本111が目標光量値で照明される。   Specifically, as a result of calculating the difference between the light amount value acquired in S3 and the target light amount value, when the detected light amount value is smaller than the target light amount value (that is, when the illumination is dark), the illumination on is performed in S4 and S5. The feedback control is performed to increase the time t1 and decrease the illumination off time t2. When the detected light amount value is larger than the target light amount value (that is, when the illumination is bright), feedback control is performed in S4 and S5 to decrease the illumination on time t1 and increase the illumination off time t2. As a result, the time during which the illumination light beam reflected along the optical axis A by the micromirror 120a of the digital micromirror device 120A illuminates the specimen 111 is appropriately controlled. As a result, the specimen 111 is illuminated with the target light amount value.

取得した光量値と目標光量値の差分が非常に大きい場合には、照明時間の調整だけでは対応しきれないことが予想される。そのような事態の発生を避けるため、制御部127は、取得した光量値と目標光量値の差分が比較的大きい場合には、取得した光量値と目標光量値の差分が所定値以下になるように光源123の出力を制御する。   When the difference between the acquired light quantity value and the target light quantity value is very large, it is expected that it cannot be handled by adjusting the illumination time alone. In order to avoid such a situation, the control unit 127 causes the difference between the acquired light amount value and the target light amount value to be a predetermined value or less when the difference between the acquired light amount value and the target light amount value is relatively large. The output of the light source 123 is controlled.

[効果]
本実施形態によれば、温度変化や電圧変化や光軸のズレなどの外的要因による光源123からの照明光の光量変化を照明部120(例えばデジタル微小ミラー装置120A)によって補正できる。この結果、標本111に照射する照明光(励起光)の光量を一定に保つことができる。つまり、水銀ランプなどのリップル光量変化を補正して光量を一定に制御することが可能になる。また、光源点灯時のドリフトによる光量変化の影響を除去することができるため、光量が安定するまで長時間待つことなく像の観察を安定に行なうことが可能になる。
[effect]
According to the present embodiment, the illumination unit 120 (for example, the digital micromirror device 120A) can correct a change in the amount of illumination light from the light source 123 due to external factors such as a temperature change, a voltage change, and an optical axis shift. As a result, the amount of illumination light (excitation light) applied to the specimen 111 can be kept constant. That is, it becomes possible to control the light amount to be constant by correcting the change in the amount of ripple light of a mercury lamp or the like. In addition, since it is possible to eliminate the influence of the light amount change caused by drift when the light source is turned on, it is possible to stably observe an image without waiting for a long time until the light amount is stabilized.

変形例
本変形例は、デジタル微小ミラー装置120Aの微小ミラー120aのオン・オフを独立に切り換える制御に向けられている。上述した実施形態では、デジタル微小ミラー装置120Aのすべての微小ミラー120aのオン・オフを同時に切り換えているが、本変形例では、デジタル微小ミラー装置120Aの複数の微小ミラー120aのオン・オフを独立に切り換える。このため、光電変換デバイス126がCCDセンサーなどの二次元光量分布検出器で構成されている。
Modification This modification is directed to control for independently switching on and off the micromirror 120a of the digital micromirror device 120A. In the embodiment described above, all the micromirrors 120a of the digital micromirror device 120A are switched on / off simultaneously. However, in this modification, the micromirrors 120a of the digital micromirror device 120A are independently turned on / off. Switch to. For this reason, the photoelectric conversion device 126 includes a two-dimensional light quantity distribution detector such as a CCD sensor.

図5は、本変形例によるデジタル微小ミラー装置120Aの制御を模式的に示している。図5に示されるように、デジタル微小ミラー装置120Aは、縦横に配置された複数の微小ミラー153を備えている。また、二次元光量分布検出器126Aは、縦横に配置された複数の微小光量検出部126aを備えている。微小ミラー153と微小光量検出部126aはそれぞれ同様に配列されており、互いに一対一で対応している。デジタル微小ミラー装置120Aのある微小ミラー153によって照明光学系の光軸Aに沿って反射された照明光ビームは、その微小ミラー153に対応した二次元光量分布検出器126Aの微小光量検出部126aに入射する。微小光量検出部126aは、入射した照明光ビームの光量を反映した電気信号151を制御部127に出力する。   FIG. 5 schematically shows control of the digital micromirror device 120A according to this modification. As shown in FIG. 5, the digital micromirror device 120 </ b> A includes a plurality of micromirrors 153 arranged vertically and horizontally. The two-dimensional light amount distribution detector 126A includes a plurality of minute light amount detectors 126a arranged vertically and horizontally. The minute mirror 153 and the minute light amount detection unit 126a are arranged in the same manner, and correspond to each other one to one. The illumination light beam reflected along the optical axis A of the illumination optical system by the micro mirror 153 in the digital micro mirror device 120A is applied to the micro light quantity detection unit 126a of the two-dimensional light quantity distribution detector 126A corresponding to the micro mirror 153. Incident. The minute light amount detection unit 126a outputs an electrical signal 151 reflecting the light amount of the incident illumination light beam to the control unit 127.

デジタル微小ミラー装置120Aによって照明光学系の光軸Aに沿って反射された照明光ビームは、デジタル微小ミラー装置120Aの複数の微小ミラー153によって反射された照明光ビームの集合である。従って、標本111は、微小ミラー153を単位とする二次元光量分布をもつ照明光で照明される。照明光ビームの二次元光量分布は微小ミラー153の単位で調整可能である。二次元光量分布検出器126Aは照明光ビームの二次元光量分布を検出する。   The illumination light beam reflected along the optical axis A of the illumination optical system by the digital micromirror device 120A is a set of illumination light beams reflected by the plurality of micromirrors 153 of the digital micromirror device 120A. Accordingly, the specimen 111 is illuminated with illumination light having a two-dimensional light quantity distribution with the micromirror 153 as a unit. The two-dimensional light amount distribution of the illumination light beam can be adjusted in units of the minute mirror 153. The two-dimensional light amount distribution detector 126A detects the two-dimensional light amount distribution of the illumination light beam.

本変形例では、デジタル微小ミラー装置120Aの微小ミラー153ごとに、言い換えれば二次元光量分布検出器126Aの微小光量検出部126aごとに、あらかじめ目標光量値を設定する。制御部127は、すべての微小光量検出部126aのそれぞれについて、微小光量検出部126aに入射する照明光ビームの光量を目標光量値に等しくする微小ミラー制御信号152をデジタル微小ミラー装置120Aに送って、微小ミラー153をオン位置にしている時間(すなわち照明オンの時間)を適切な時間に調整する。つまり、制御部127は、微小ミラー153ごとに、照明のオンの時間を調整する。言い換えれば、制御部127は、照明光の照明時間を二次元光量分布の単位で調整する。これによって、デジタル微小ミラー装置120Aによって照明光学系の光軸Aに沿って反射された照明光ビームの光量分布にばらつきがある場合であっても、均一の光量分布の照明光ビームで標本111が照明される。   In this modification, a target light amount value is set in advance for each micro mirror 153 of the digital micro mirror device 120A, in other words, for each micro light amount detection unit 126a of the two-dimensional light amount distribution detector 126A. The control unit 127 sends a micro mirror control signal 152 that makes the light amount of the illumination light beam incident on the micro light amount detection unit 126a equal to the target light amount value to the digital micro mirror device 120A for each of the micro light amount detection units 126a. The time during which the micromirror 153 is in the on position (that is, the illumination on time) is adjusted to an appropriate time. That is, the control unit 127 adjusts the illumination ON time for each micromirror 153. In other words, the control unit 127 adjusts the illumination time of the illumination light in units of the two-dimensional light amount distribution. As a result, even if there is a variation in the light amount distribution of the illumination light beam reflected along the optical axis A of the illumination optical system by the digital micromirror device 120A, the sample 111 is formed with the illumination light beam having a uniform light amount distribution. Illuminated.

第二実施形態
[構成]
本実施形態は、照明装置を備えた別の顕微鏡に向けられている。図6は、本発明の第二実施形態の顕微鏡の構成を概略的に示している。図6において、図1に示された部材と同一の参照符号で指示された部材は同様の部材であり、その詳しい説明は省略する。
Second Embodiment [Configuration]
The present embodiment is directed to another microscope provided with an illumination device. FIG. 6 schematically shows the configuration of the microscope according to the second embodiment of the present invention. In FIG. 6, the members indicated by the same reference numerals as those shown in FIG. 1 are the same members, and detailed description thereof will be omitted.

図6に示されるように、本実施形態の顕微鏡200では、光量検出部が、第一実施形態の照明光検出系に代えて、観察光の光量を検出する観察光検出系を備えている。それ以外の構成は第一実施形態と同様である。   As shown in FIG. 6, in the microscope 200 of the present embodiment, the light amount detection unit includes an observation light detection system that detects the amount of observation light instead of the illumination light detection system of the first embodiment. Other configurations are the same as those in the first embodiment.

観察光検出系は、ビームスプリッター224と収束レンズ225と光電変換デバイス226とを備えている。   The observation light detection system includes a beam splitter 224, a converging lens 225, and a photoelectric conversion device 226.

ビームスプリッター224は、吸収フィルター114と結像レンズ115の間に配置されており、吸収フィルター114から結像レンズ115へ向かう観察光ビームの一部を分岐させる。ビームスプリッター224は、これに限らないが、例えばハーフミラーで構成される。   The beam splitter 224 is disposed between the absorption filter 114 and the imaging lens 115 and branches a part of the observation light beam from the absorption filter 114 toward the imaging lens 115. The beam splitter 224 is configured by, for example, a half mirror, although not limited thereto.

収束レンズ225は、ビームスプリッター224で分岐された観察光ビームを収束させて光電変換デバイス226に照射する。   The converging lens 225 converges the observation light beam branched by the beam splitter 224 and irradiates the photoelectric conversion device 226.

光電変換デバイス126は、入射した照明光の強度を反映した電気信号を出力する。光電変換デバイス126は、これに限らないが、例えば光電子増倍管やフォトダイオードで構成される。照明部120が二次元照明素子で構成されている場合には、光電変換デバイス126は、より好ましくは、二次元光量分布を検出するための二次元光量分布検出器で構成されるとよい。二次元光量検出素子は、これに限らないが、例えばCCDやCMOSで構成される。   The photoelectric conversion device 126 outputs an electrical signal that reflects the intensity of incident illumination light. Although not limited to this, the photoelectric conversion device 126 is configured by, for example, a photomultiplier tube or a photodiode. When the illumination unit 120 is configured with a two-dimensional illumination element, the photoelectric conversion device 126 is more preferably configured with a two-dimensional light amount distribution detector for detecting a two-dimensional light amount distribution. The two-dimensional light quantity detection element is not limited to this, but is constituted by, for example, a CCD or a CMOS.

[作用]
標本111から発生した観察光すなわち蛍光の一部は、対物レンズ112に入射して観察光ビームになる。観察光ビームは、ダイクロイックミラー113と吸収フィルター114を透過する。吸収フィルター114を透過した観察光ビームの一部は、ビームスプリッター224によって反射されて収束レンズ225に向かい、残りはビームスプリッター224を透過して結像レンズ115に入射する。収束レンズ225に向かう観察光ビームは収束レンズ225によって収束されて光電変換デバイス226に入射する。光電変換デバイス226は入射した照明光を光電変換して、光量を反映した電気信号を制御部127に出力する。制御部127は、光量検出部で検出された光量すなわち光電変換デバイス226から出力される電気信号に基づいて照明部120を制御する。つまり、制御部127は、検出された観察光の光量に基づいて照明時間を変更する。さらに制御部127は、必要であれば、検出された観察光の光量に基づいて光源123を制御する。照明部120と光源123の制御の手法は第一実施形態と同様である。
[Action]
Part of the observation light generated from the specimen 111, that is, fluorescence, is incident on the objective lens 112 and becomes an observation light beam. The observation light beam passes through the dichroic mirror 113 and the absorption filter 114. Part of the observation light beam that has passed through the absorption filter 114 is reflected by the beam splitter 224 toward the converging lens 225, and the rest passes through the beam splitter 224 and enters the imaging lens 115. The observation light beam traveling toward the converging lens 225 is converged by the converging lens 225 and enters the photoelectric conversion device 226. The photoelectric conversion device 226 performs photoelectric conversion on the incident illumination light and outputs an electric signal reflecting the light amount to the control unit 127. The control unit 127 controls the illumination unit 120 based on the light amount detected by the light amount detection unit, that is, the electric signal output from the photoelectric conversion device 226. That is, the control unit 127 changes the illumination time based on the detected amount of observation light. Furthermore, if necessary, the control unit 127 controls the light source 123 based on the detected amount of observation light. The method of controlling the illumination unit 120 and the light source 123 is the same as that in the first embodiment.

[効果]
本実施形態によれば、標本111からの観察光(蛍光)の光量変化を照明部120(例えばデジタル微小ミラー装置120A)によって補正できる。この結果、標本111からの観察光(蛍光)の光量を一定に保つことができる。これによって、対物レンズ112を変換可能な顕微鏡において、対物レンズの交換に起因するビームスプリッター224に入射する観察光の光量の変化を補正できる。つまり、対物レンズ112の変換に起因する光量変化の影響を補正することが可能になり、対物レンズ変換時の光源調整が不必要になる。
[effect]
According to the present embodiment, a change in the amount of observation light (fluorescence) from the specimen 111 can be corrected by the illumination unit 120 (for example, the digital micromirror device 120A). As a result, the amount of observation light (fluorescence) from the specimen 111 can be kept constant. Thereby, in a microscope capable of converting the objective lens 112, it is possible to correct a change in the amount of observation light incident on the beam splitter 224 due to replacement of the objective lens. That is, it becomes possible to correct the influence of the change in the amount of light caused by the conversion of the objective lens 112, and light source adjustment at the time of objective lens conversion becomes unnecessary.

変形例
本変形例は、観察光ビームの光量分布の検出に向けられている。本変形例では、光量検出部の光電変換デバイス226が二次元光量分布検出器で構成されている。二次元光量分布検出器は複数の微小光量検出部を備えており、複数の微小光量検出部はそれぞれデジタル微小ミラー装置120Aの複数の微小ミラー120aに一対一で対応している。これによって、観察光の強度分布を検出することができる。さらに、検出した強度分布に基づいて、デジタル微小ミラー装置120Aの複数の微小ミラー120aを独立に制御してもよい。これによって、標本111の変化などによる観察像の変化に対し、標本111の特定部のみ光量を任意の量に変化させることができる。特に多重励起観察においては、領域に応じて照射する励起光の光量を変化させることによって、特定の領域からの蛍光の光量を所望の光量に例えば一定の光量にすることが可能になる。
Modified Example This modified example is directed to detection of a light amount distribution of an observation light beam. In this modification, the photoelectric conversion device 226 of the light amount detection unit is configured by a two-dimensional light amount distribution detector. The two-dimensional light amount distribution detector includes a plurality of minute light amount detection units, and the plurality of minute light amount detection units correspond one-to-one to the plurality of minute mirrors 120a of the digital minute mirror device 120A. Thereby, the intensity distribution of the observation light can be detected. Furthermore, the plurality of micromirrors 120a of the digital micromirror device 120A may be independently controlled based on the detected intensity distribution. As a result, the amount of light can be changed to an arbitrary amount only in a specific portion of the sample 111 with respect to a change in the observation image due to a change in the sample 111 or the like. In particular, in the multiple excitation observation, it is possible to change the light amount of the fluorescent light from a specific region to a desired light amount, for example, by changing the light amount of the excitation light irradiated according to the region.

第三実施形態
本実施形態は、照明装置を備えた別の顕微鏡に向けられている。図7は、本発明の第三実施形態の顕微鏡の構成を概略的に示している。図7において、図1と図6に示された部材と同一の参照符号で指示された部材は同様の部材であり、その詳しい説明は省略する。
Third Embodiment The present embodiment is directed to another microscope provided with an illumination device. FIG. 7 schematically shows the configuration of a microscope according to the third embodiment of the present invention. In FIG. 7, members indicated by the same reference numerals as those shown in FIGS. 1 and 6 are the same members, and detailed description thereof is omitted.

図6に示されるように、本実施形態の顕微鏡300では、光量検出部が、照明部120から標本111に向かう照明光の光量を検出する照明光検出系と、観察光の光量を検出する観察光検出系を備えている。照明光検出系は第一実施形態と同じ構成であり、ビームスプリッター124と収束レンズ125と光電変換デバイス126とを備えている。観察光検出系は第二実施形態と同じ構成であり、ビームスプリッター224と収束レンズ225と光電変換デバイス226とを備えている。制御部127は、光量検出部で検出された光量すなわち光電変換デバイス126から出力される電気信号と光電変換デバイス226から出力される電気信号とに基づいて照明部120を制御する。つまり、制御部127は、検出された照明光の光量と検出された観察光の光量とに基づいて照明時間を変更する。さらに制御部127は、必要であれば、検出された照明光の光量と検出された観察光の光量とに基づいて光源123を制御する。照明部120と光源123の制御の手法は第一実施形態と同様である。   As shown in FIG. 6, in the microscope 300 according to the present embodiment, the light amount detection unit detects an amount of illumination light from the illumination unit 120 toward the specimen 111 and an observation that detects the amount of observation light. It has a light detection system. The illumination light detection system has the same configuration as that of the first embodiment, and includes a beam splitter 124, a converging lens 125, and a photoelectric conversion device 126. The observation light detection system has the same configuration as that of the second embodiment, and includes a beam splitter 224, a converging lens 225, and a photoelectric conversion device 226. The control unit 127 controls the illumination unit 120 based on the light amount detected by the light amount detection unit, that is, the electric signal output from the photoelectric conversion device 126 and the electric signal output from the photoelectric conversion device 226. That is, the control unit 127 changes the illumination time based on the detected light amount of the illumination light and the detected light amount of the observation light. Further, if necessary, the control unit 127 controls the light source 123 based on the detected light amount of the illumination light and the detected light amount of the observation light. The method of controlling the illumination unit 120 and the light source 123 is the same as that in the first embodiment.

本実施形態によれば、第一実施形態と同様に、温度変化や電圧変化や光軸のズレなどの外的要因による光源123からの照明光の光量変化を照明部120(例えばデジタル微小ミラー装置120A)によって補正できる。これに加えて、第二実施形態と同様に、標本111からの観察光(蛍光)の光量変化を照明部120(例えばデジタル微小ミラー装置120A)によって補正できる。さらには、照明光の光量変化と観察光(蛍光)の光量変化とを同時に補正することも可能である。   According to the present embodiment, as in the first embodiment, a change in the amount of illumination light from the light source 123 due to an external factor such as a temperature change, a voltage change, or an optical axis shift is detected by the illumination unit 120 (e.g. 120A). In addition, similarly to the second embodiment, a change in the amount of observation light (fluorescence) from the specimen 111 can be corrected by the illumination unit 120 (for example, the digital micromirror device 120A). Furthermore, it is possible to simultaneously correct the change in the amount of illumination light and the change in the amount of observation light (fluorescence).

第四実施形態
本実施形態は、照明装置を備えた別の顕微鏡に向けられている。図8は、本発明の第四実施形態の顕微鏡の構成を概略的に示している。図8において、図7に示された部材と同一の参照符号で指示された部材は同様の部材であり、その詳しい説明は省略する。
Fourth Embodiment This embodiment is directed to another microscope equipped with an illumination device. FIG. 8 schematically shows a configuration of a microscope according to the fourth embodiment of the present invention. In FIG. 8, members indicated by the same reference numerals as those shown in FIG. 7 are similar members, and detailed description thereof is omitted.

図8に示されるように、本実施形態の顕微鏡400は、第三実施形態の顕微鏡300の観察光学系を共焦点光学系に変更した構成となっている。このため、本実施形態の顕微鏡400では、観察光学系は、第三実施形態の顕微鏡300の構成に加えて、ピンホール428とリレーレンズ429とを備えている。ピンホール428は、観察光学系の中間結像面に位置しており、標本111内の観察点に対して共焦点の位置関係に配置されている。リレーレンズ429は、結像レンズ115によって結像された像を後方の別の位置に伝達する。これ以外の構成は第三実施形態と同様であり、従って制御部127の制御の手法も第三実施形態とまったく同じである。   As shown in FIG. 8, the microscope 400 of the present embodiment has a configuration in which the observation optical system of the microscope 300 of the third embodiment is changed to a confocal optical system. For this reason, in the microscope 400 of this embodiment, the observation optical system includes a pinhole 428 and a relay lens 429 in addition to the configuration of the microscope 300 of the third embodiment. The pinhole 428 is located on the intermediate image plane of the observation optical system, and is arranged in a confocal positional relationship with respect to the observation point in the sample 111. The relay lens 429 transmits the image formed by the imaging lens 115 to another position on the rear side. The other configuration is the same as that of the third embodiment, and therefore the control method of the control unit 127 is exactly the same as that of the third embodiment.

本実施形態は第三実施形態と同じ利点を有している。さらに本実施形態では、光源123がレーザーで構成されている場合に、標本111に照射されるレーザー光の光量を補正することができる。これによって、レーザーの発振が安定するまで長時間待つ必要がなくなり、リップルなどの影響も除去できる。   This embodiment has the same advantages as the third embodiment. Furthermore, in this embodiment, when the light source 123 is configured by a laser, the amount of laser light irradiated on the specimen 111 can be corrected. As a result, it is not necessary to wait for a long time until the laser oscillation stabilizes, and the influence of ripples and the like can be eliminated.

これまで、図面を参照しながら本発明の実施形態を述べたが、本発明は、これらの実施形態に限定されるものではなく、その要旨を逸脱しない範囲において様々な変形や変更が施されてもよい。   The embodiments of the present invention have been described above with reference to the drawings. However, the present invention is not limited to these embodiments, and various modifications and changes can be made without departing from the scope of the present invention. Also good.

例えば、上述した実施形態では、照明部120である二次元照明素子がデジタル微小ミラー装置で構成されているが、二次元照明素子は液晶素子で構成されてもよい。液晶素子は、例えばマトリックス状に配列された複数のセルを備えている。複数のセルは、それぞれ、入射する照明光の透過・遮断を独立に制御し得る。液晶素子で構成された照明部120は透過型であり、照明光ビームの透過・遮断をセルの単位で切り換えることによって標本111への照明光の伝搬を許可または禁止する。液晶素子の制御は、デジタル微小ミラー装置120Aの制御と同様に行なえる。これによって、デジタル微小ミラー装置120Aと同様に、標本111を一定の光量で照明することができる。さらに、第一変形例と同様に、光電変換デバイス126を二次元光量分布検出器で構成することによって、液晶素子を透過した照明光ビームの二次元光量分布をセルの単位で調整することもできる。言い換えれば、照明光の照明時間を二次元光量分布の単位で調整するができる
また、上述した実施形態では、蛍光観察用の顕微鏡について述べているが、顕微鏡の種類はこれに限定されない。顕微鏡は他の種類の顕微鏡であってもよい。例えば、顕微鏡は通常の反射型の顕微鏡や通常の透過型の顕微鏡であってもよい。その場合、観察光がそれぞれ反射光と透過光に変わるだけで、本発明の技術思想はそのまま適用できる。
For example, in the above-described embodiment, the two-dimensional illumination element that is the illumination unit 120 is configured by a digital micromirror device, but the two-dimensional illumination element may be configured by a liquid crystal element. The liquid crystal element includes a plurality of cells arranged in a matrix, for example. Each of the plurality of cells can independently control transmission / blocking of incident illumination light. The illuminating unit 120 formed of a liquid crystal element is a transmission type, and permits or prohibits the propagation of illumination light to the specimen 111 by switching between transmission and blocking of the illumination light beam in units of cells. The liquid crystal element can be controlled in the same way as the control of the digital micromirror device 120A. As a result, similar to the digital micromirror device 120A, the specimen 111 can be illuminated with a constant amount of light. Furthermore, as in the first modification, the photoelectric conversion device 126 is configured with a two-dimensional light amount distribution detector, so that the two-dimensional light amount distribution of the illumination light beam transmitted through the liquid crystal element can be adjusted in units of cells. . In other words, the illumination time of the illumination light can be adjusted in units of the two-dimensional light amount distribution. In the above-described embodiment, the microscope for fluorescence observation is described, but the type of microscope is not limited to this. The microscope may be another type of microscope. For example, the microscope may be a normal reflection microscope or a normal transmission microscope. In that case, the technical idea of the present invention can be applied as it is simply by changing the observation light into reflected light and transmitted light, respectively.

結び
本発明は、ひとつには、顕微鏡用の照明装置に向けられており、以下の各項に列記する照明装置を含んでいる。
Conclusion The present invention is directed, in part, to an illumination device for a microscope, and includes the illumination devices listed in the following sections.

1. 本発明の照明装置は、照明光を発するための光源と、光源からの照明光で標本を照明するための照明部と、光量を検出するための光量検出部と、光量検出部で検出された光量に基づいて照明部を制御する制御部とを備えている。   1. The illumination device of the present invention is detected by a light source for emitting illumination light, an illumination unit for illuminating a specimen with illumination light from the light source, a light amount detection unit for detecting the amount of light, and a light amount detection unit And a controller that controls the illumination unit based on the amount of light.

2. 本発明の別の照明装置は、第1項において、制御部は、標本を間欠的に照明するように照明部を制御する。   2. In another illumination device of the present invention, in the first item, the control unit controls the illumination unit so as to illuminate the sample intermittently.

3. 本発明の別の照明装置は、第2項において、制御部は、光量検出部で検出された光量に基づいて照明時間を変更する。   3. In another illumination device of the present invention, in the second item, the control unit changes the illumination time based on the light amount detected by the light amount detection unit.

4. 本発明の別の照明装置は、第3項において、制御部は、一定の周期で照明を開始するように照明部を制御する。   4). In another lighting device according to the third aspect of the present invention, in the third aspect, the control unit controls the lighting unit to start lighting at a constant cycle.

5. 本発明の別の照明装置は、第1項において、光源が水銀ランプで構成されている。   5). In another illumination device of the present invention, the light source is configured by a mercury lamp in the first item.

6. 本発明の別の照明装置は、第1項において、光源がハロゲンランプで構成されている。   6). In another illumination device of the present invention, the light source is configured by a halogen lamp in the first item.

7. 本発明の別の照明装置は、第1項において、光源がLEDで構成されている。   7). In another illumination device of the present invention, the light source is configured by an LED in the first item.

8. 本発明の別の照明装置は、第1項において、光源がレーザーで構成されている。   8). In another illumination device of the present invention, the light source is configured by a laser in the first item.

9. 本発明の別の照明装置は、第1項において、光源が赤外光を発する赤外光源で構成されている。   9. Another illuminating device of the present invention is an infrared light source that emits infrared light in the first item.

10. 本発明の別の照明装置は、第1項において、光源が紫外光を発する紫外光源で構成されている。   10. Another illuminating device of the present invention is an ultraviolet light source that emits ultraviolet light in the first item.

11. 本発明の別の照明装置は、第1項において、光量検出部が、照明部から標本に向かう照明光の光量を検出する照明光検出系を備えている。   11. Another illumination device of the present invention includes the illumination light detection system according to the first item, wherein the light amount detection unit detects the amount of illumination light directed from the illumination unit toward the sample.

12. 本発明の別の照明装置は、第1項において、光量検出部が、観察光の光量を検出する観察光検出系を備えている。   12 Another illumination device according to the present invention includes the observation light detection system according to the first item, wherein the light amount detection unit detects the light amount of the observation light.

13. 本発明の別の照明装置は、第1項において、光量検出部が、照明部から標本に向かう照明光の光量を検出する照明光検出系と、観察光の光量を検出する観察光検出系とを備えている。   13. Another illumination device of the present invention is the illumination device according to the first item, wherein the light amount detection unit detects the amount of illumination light directed from the illumination unit toward the sample, and the observation light detection system detects the amount of observation light. It has.

14. 本発明の別の照明装置は、第1項において、光量検出部が光電子増倍管で構成されている。   14 In another illumination device according to the present invention, in the first item, the light amount detection unit is configured by a photomultiplier tube.

15. 本発明の別の照明装置は、第1項において、光量検出部がフォトダイオードで構成されている。   15. In another illumination device of the present invention, in the first item, the light amount detection unit is configured by a photodiode.

16. 本発明の別の照明装置は、第1項において、照明部が、二次元光量分布をもつ照明光で標本を照明する二次元照明素子を備えている。   16. Another illumination device of the present invention is the illumination device according to the first item, wherein the illumination unit includes a two-dimensional illumination element that illuminates the sample with illumination light having a two-dimensional light amount distribution.

17. 本発明の別の照明装置は、第16項において、二次元照明素子がデジタル微小ミラー装置で構成されている。   17. In another illuminating device of the present invention, the two-dimensional illuminating element is constituted by a digital micromirror device in the sixteenth item.

18. 本発明の別の照明装置は、第16項において、二次元照明素子が液晶素子で構成されている。   18. In another illumination device according to the sixteenth aspect of the present invention, the two-dimensional illumination element is configured by a liquid crystal element.

19. 本発明の別の照明装置は、第16項において、光量検出部が、二次元光量分布を検出するための二次元光量分布検出器で構成されている。   19. Another illuminating device of the present invention is the illumination device according to the sixteenth aspect, wherein the light amount detection unit includes a two-dimensional light amount distribution detector for detecting a two-dimensional light amount distribution.

20. 本発明の別の照明装置は、第19項において、二次元光量検出素子がCCDで構成されている。   20. In another illuminating device of the present invention, the two-dimensional light quantity detecting element is constituted by a CCD in item 19.

21. 本発明の別の照明装置は、第19項において、二次元光量検出素子がCMOSで構成されている。   21. In another illuminating device of the present invention, the two-dimensional light quantity detecting element according to the nineteenth aspect is composed of a CMOS.

22. 本発明の別の照明装置は、第1項において、制御部は、照明光の光量を一定に保つように照明部を制御する。   22. In another illumination device of the present invention, in the first item, the control unit controls the illumination unit so as to keep the amount of illumination light constant.

23. 本発明の別の照明装置は、第19項において、制御部は、照明光の光量を一定に保つように照明部を制御する。   23. In another illuminating device of the present invention, in the nineteenth aspect, the control unit controls the illuminating unit so as to keep the amount of illumination light constant.

24. 本発明の別の照明装置は、第1項において、制御部は、照明光の光量を任意に変化させるように照明部を制御する。   24. In another illumination device of the present invention, in the first item, the control unit controls the illumination unit so as to arbitrarily change the amount of illumination light.

25. 本発明の別の照明装置は、第19項において、制御部は、照明光の光量を任意に変化させるように照明部を制御する。   25. In another illumination device according to the nineteenth aspect of the present invention, the control unit controls the illumination unit so as to arbitrarily change the amount of illumination light.

26. 本発明の別の照明装置は、第1項において、制御部は、標本から発生する蛍光の光量が一定に保たれるように照明部を制御する 。   26. In another illuminating device of the present invention, in the first item, the control unit controls the illuminating unit so that the amount of fluorescent light generated from the specimen is kept constant.

27. 本発明の別の照明装置は、第19項において、制御部は、標本から発生する蛍光の光量が一定に保たれるように照明部を制御する。   27. In another illuminating device of the present invention, in the nineteenth aspect, the control unit controls the illuminating unit so that the amount of fluorescence generated from the specimen is kept constant.

28. 本発明の別の照明装置は、第1項において、顕微鏡の観察光学系が共焦点光学系で構成されており、光源がレーザーで構成され、制御部は、レーザー光の光量を一定に保つように照明部を制御する。   28. In another illumination device of the present invention, in the first item, the observation optical system of the microscope is configured by a confocal optical system, the light source is configured by a laser, and the control unit keeps the amount of laser light constant. Control the lighting unit.

29. 本発明の別の照明装置は、第16項において、顕微鏡の観察光学系が共焦点光学系で構成されており、光源がレーザーで構成され、制御部は、レーザー光の光量を一定に保つように照明部を制御する。   29. In another illuminating device of the present invention, the observation optical system of the microscope is configured with a confocal optical system, the light source is configured with a laser, and the control unit keeps the amount of laser light constant. Control the lighting unit.

本発明は、ひとつには、照明装置を備えた顕微鏡に向けられており、以下の各項に列記する顕微鏡を含んでいる。   One aspect of the present invention is directed to a microscope provided with an illumination device, and includes a microscope listed in the following sections.

30. 本発明の顕微鏡は、照明装置を備えており、照明装置は、照明光を発するための光源と、光源からの照明光で標本を照明するための照明部と、光量を検出するための光量検出部と、光量検出部で検出された光量に基づいて照明部を制御する制御部とを備えている。   30. The microscope of the present invention includes an illumination device, and the illumination device includes a light source for emitting illumination light, an illumination unit for illuminating the sample with illumination light from the light source, and a light amount detection for detecting the amount of light. And a control unit that controls the illumination unit based on the light amount detected by the light amount detection unit.

31. 本発明の別の顕微鏡は、第30項において、制御部は、標本を間欠的に照明するように照明部を制御するとともに、光量検出部で検出された光量に基づいて照明時間を変更する。   31. In another embodiment of the microscope according to the present invention, in the item 30, the control unit controls the illumination unit to illuminate the sample intermittently, and changes the illumination time based on the light amount detected by the light amount detection unit.

32. 本発明の別の顕微鏡は、第30項において、光量検出部が、照明部から標本に向かう照明光の光量を検出する照明光検出系を備えている。   32. Another microscope according to the present invention is the microscope according to item 30, wherein the light amount detection unit includes an illumination light detection system that detects the amount of illumination light directed from the illumination unit toward the sample.

33. 本発明の別の顕微鏡は、第30項において、光量検出部が、観察光の光量を検出する観察光検出系を備えている。   33. Another microscope of the present invention is the microscope according to item 30, wherein the light amount detection unit includes an observation light detection system for detecting the light amount of the observation light.

34. 本発明の別の顕微鏡は、第30項において、光量検出部が、照明部から標本に向かう照明光の光量を検出する照明光検出系と、観察光の光量を検出する観察光検出系とを備えている。   34. Another microscope of the present invention is the microscope according to item 30, wherein the light amount detection unit includes an illumination light detection system that detects the amount of illumination light directed from the illumination unit toward the sample, and an observation light detection system that detects the light amount of the observation light. I have.

35. 本発明の別の顕微鏡は、第30項において、照明部が、二次元光量分布をもつ照明光で標本を照明する二次元照明素子を備えている。   35. Another microscope of the present invention is the microscope according to item 30, wherein the illumination unit includes a two-dimensional illumination element that illuminates the sample with illumination light having a two-dimensional light amount distribution.

36. 本発明の別の顕微鏡は、第35項において、光量検出部が、二次元光量分布を検出するための二次元光量分布検出器で構成されている。   36. Another microscope according to the present invention is the microscope according to item 35, wherein the light amount detection unit includes a two-dimensional light amount distribution detector for detecting a two-dimensional light amount distribution.

37. 本発明の別の顕微鏡は、第30項において、制御部は、照明光の光量を一定に保つように照明部を制御する。   37. In another 30th aspect of the present invention, in the thirty-third aspect, the control unit controls the illumination unit so that the amount of illumination light is kept constant.

38. 本発明の別の顕微鏡は、第30項において、制御部は、照明光の光量を任意に変化させるように照明部を制御する。   38. In another 30th aspect of the present invention, in the thirtieth aspect, the control unit controls the illumination unit so as to arbitrarily change the amount of illumination light.

39. 本発明の別の顕微鏡は、第30項において、制御部は、標本から発生する蛍光の光量が一定に保たれるように照明部を制御する。   39. In another embodiment of the microscope according to the present invention, in the item 30, the control unit controls the illumination unit so that the amount of fluorescent light generated from the specimen is kept constant.

本発明は、ひとつには、顕微鏡によって観察される標本の照明方法に向けられており、以下の各項に列記する照明方法を含んでいる。   The present invention is directed, in part, to a method for illuminating a specimen observed with a microscope, and includes the illumination methods listed in the following sections.

40. 本発明の照明方法は、標本を照明光で間欠的に照明するとともに、照明光と観察光の少なくとも一方の光量を検出し、検出した光量に基づいて照明時間を変更する。   40. The illumination method of the present invention intermittently illuminates a specimen with illumination light, detects the light amount of at least one of the illumination light and the observation light, and changes the illumination time based on the detected light amount.

41. 本発明の別の照明方法は、第40項において、照明光の光量を検出し、検出した照明光の光量に基づいて照明時間を変更する。   41. In another 40th aspect of this invention, the illumination method detects the light quantity of illumination light in 40th term, and changes illumination time based on the detected light quantity of illumination light.

42. 本発明の別の照明方法は、第40項において、観察光の光量を検出し、検出した観察光の光量に基づいて照明時間を変更する。   42. In another illuminating method of the present invention, in item 40, the amount of observation light is detected, and the illumination time is changed based on the detected amount of observation light.

43. 本発明の別の照明方法は、第40項において、照明光の光量と観察光の光量とを検出し、検出した照明光の光量と観察光の光量とに基づいて照明時間を変更する。   43. In another 40th aspect of the present invention, in the forty-second aspect, the amount of illumination light and the amount of observation light are detected, and the illumination time is changed based on the detected amount of illumination light and amount of observation light.

44. 本発明の別の照明方法は、第40項において、二次元光量分布をもつ照明光で標本を照明する。   44. In another illuminating method of the present invention, the specimen is illuminated with illumination light having a two-dimensional light amount distribution in the item 40.

45. 本発明の別の照明方法は、第44項において、照明光と観察光の少なくとも一方の二次元光量分布を検出し、検出した二次元光量分布に基づいて照明光の照明時間を二次元光量分布の単位で変更する。   45. Another illumination method of the present invention is the illumination method according to item 44, wherein the two-dimensional light amount distribution of at least one of the illumination light and the observation light is detected, and the illumination time of the illumination light is determined based on the detected two-dimensional light amount distribution. Change in units.

46. 本発明の別の照明方法は、第40項において、照明光の光量を一定に保つように照明時間を変更する。   46. Another illumination method of the present invention changes the illumination time in Section 40 so as to keep the amount of illumination light constant.

47. 本発明の別の照明方法は、第40項において、照明光の光量を任意に変化させるように照明時間を変更する。   47. In another illuminating method of the present invention, in the forty-second aspect, the illumination time is changed so as to arbitrarily change the amount of illumination light.

48. 本発明の別の照明方法は、第40項において、標本から発生する蛍光の光量が一定に保たれるように制御する。   48. In another 40th aspect of the present invention, in the forty-second aspect, the amount of fluorescence generated from the specimen is controlled so as to be kept constant.

本発明の第一実施形態の顕微鏡の構成を概略的に示している。1 schematically shows a configuration of a microscope according to a first embodiment of the present invention. 図1に示された照明部であるデジタル微小ミラー装置を模式的に示している。The digital micromirror device which is an illumination part shown by FIG. 1 is shown typically. デジタル微小ミラー装置の微小ミラーのオン・オフを切り換えるタイミングを示している。The timing for switching on and off the micromirror of the digital micromirror device is shown. デジタル微小ミラー装置の制御のフローチャートである。It is a flowchart of control of a digital micromirror device. 本変形例によるデジタル微小ミラー装置120Aの制御を模式的に示している。The control of digital micromirror device 120A by this modification is typically shown. 本発明の第二実施形態の顕微鏡の構成を概略的に示している。The structure of the microscope of 2nd embodiment of this invention is shown roughly. 本発明の第三実施形態の顕微鏡の構成を概略的に示している。The structure of the microscope of 3rd embodiment of this invention is shown roughly. 本発明の第四実施形態の顕微鏡の構成を概略的に示している。The structure of the microscope of 4th embodiment of this invention is shown roughly.

符号の説明Explanation of symbols

100…顕微鏡、110…ステージ、111…標本、112…対物レンズ、113…ダイクロイックミラー、114…吸収フィルター、115…結像レンズ、116…プリズム、117…接眼レンズ、118…励起フィルター、119…視野絞り投影レンズ、120…照明部、120A…デジタル微小ミラー装置、120a…微小ミラー、121…反射ミラー、122…コレクターレンズ、123…光源、124…ビームスプリッター、125…収束レンズ、126…光電変換デバイス、126A…二次元光量分布検出器、126a…微小光量検出部、127…制御部、131…照明光ビーム、132…退避光軸、151…電気信号、152…微小ミラー制御信号、153…微小ミラー、200…顕微鏡、224…ビームスプリッター、225…収束レンズ、226…光電変換デバイス、300…顕微鏡、400…顕微鏡、428…ピンホール、429…リレーレンズ。 DESCRIPTION OF SYMBOLS 100 ... Microscope, 110 ... Stage, 111 ... Sample, 112 ... Objective lens, 113 ... Dichroic mirror, 114 ... Absorption filter, 115 ... Imaging lens, 116 ... Prism, 117 ... Eyepiece, 118 ... Excitation filter, 119 ... Field of view Aperture projection lens, 120 ... illumination unit, 120A ... digital micromirror device, 120a ... micromirror, 121 ... reflecting mirror, 122 ... collector lens, 123 ... light source, 124 ... beam splitter, 125 ... converging lens, 126 ... photoelectric conversion device , 126A, a two-dimensional light amount distribution detector, 126a, a minute light amount detection unit, 127, a control unit, 131, an illumination light beam, 132, a retracting optical axis, 151, an electric signal, 152, a minute mirror control signal, 153, a minute mirror 200, microscope, 224, beam splitter, 22 ... converging lens, 226 ... photoelectric conversion device, 300 ... microscope, 400 ... microscope, 428 ... pin hole, 429 ... relay lens.

Claims (5)

顕微鏡用の照明装置であり、
照明光を発するための光源と、
光源からの照明光で標本を照明するための照明部と、
光量を検出するための光量検出部と、
光量検出部で検出された光量に基づいて照明部を制御する制御部とを備えている、照明装置。
An illumination device for a microscope,
A light source for emitting illumination light;
An illumination unit for illuminating the specimen with illumination light from a light source;
A light amount detection unit for detecting the light amount;
A lighting device comprising: a control unit that controls the lighting unit based on the light amount detected by the light amount detection unit.
請求項1において、制御部は、標本を間欠的に照明するように照明部を制御する、照明装置。   The illumination device according to claim 1, wherein the control unit controls the illumination unit to illuminate the sample intermittently. 請求項1において、照明部が、二次元光量分布をもつ照明光で標本を照明する二次元照明素子を備えている、照明装置。   The illumination device according to claim 1, wherein the illumination unit includes a two-dimensional illumination element that illuminates the sample with illumination light having a two-dimensional light amount distribution. 照明装置を備えた顕微鏡であり、照明装置が
照明光を発するための光源と、
光源からの照明光で標本を照明するための照明部と、
光量を検出するための光量検出部と、
光量検出部で検出された光量に基づいて照明部を制御する制御部とを備えている、顕微鏡。
A microscope equipped with an illumination device, the illumination device emits illumination light, and a light source,
An illumination unit for illuminating the specimen with illumination light from a light source;
A light amount detection unit for detecting the light amount;
A microscope comprising: a control unit that controls the illumination unit based on the light amount detected by the light amount detection unit.
顕微鏡によって観察される標本の照明方法であり、標本を照明光で間欠的に照明するとともに、照明光と観察光の少なくとも一方の光量を検出し、検出した光量に基づいて照明時間を変更する、照明方法。   A method for illuminating a specimen observed by a microscope, illuminating the specimen intermittently with illumination light, detecting the light quantity of at least one of the illumination light and the observation light, and changing the illumination time based on the detected light quantity, Lighting method.
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