JP2005257604A - Simple method and tool for determining caries risk - Google Patents
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Abstract
Description
本発明は、齲蝕リスクの判定方法および齲蝕リスクの判定用具に関する。 The present invention relates to a caries risk determination method and a caries risk determination tool.
近年、ヒトの口腔内の齲蝕リスクを判定し、齲蝕を予防しようとする試みがなされている。齲蝕リスクの判定は、唾液中のミュータンスレンサ球菌数、ラクトバチラス菌数、唾液分泌量や唾液粘性や唾液緩衝能といった唾液の性状、歯垢の付着量、食事回数やフッ化物の使用状況といった生活習慣等の各検査項目をそれぞれ調べることで行われている(例えば非特許文献1参照)。上記の各項目の中で、特にミュータンスレンサ球菌数は齲蝕リスクと密接に関係していると言われており、齲蝕リスクの判定にはミュータンスレンサ球菌数の測定が重視されている。 In recent years, attempts have been made to determine caries risk in the oral cavity of humans and prevent caries. The risk of caries is determined by measuring the number of mutans streptococci in the saliva, the number of Lactobacillus bacteria, saliva properties such as saliva secretion, saliva viscosity and saliva buffering capacity, the amount of plaque adhering, the number of meals and the use of fluoride. This is performed by examining each inspection item such as a custom (see Non-Patent Document 1, for example). Among the above items, the number of mutans streptococci is said to be closely related to the caries risk, and measurement of the number of mutans streptococci is important for the determination of caries risk.
上記の各項目を調べる方法として、以下のような方法が開発されている。ミュータンスレンサ球菌数やラクトバチラス菌数の測定は、選択培地を使用した培養法により実施されており、例えばミュータンスレンサ球菌数の測定では、選択培地としてミチス・サリバリウス・バシトラシン固体培地等が使用されている。唾液分泌量の測定は、一定時間に分泌される唾液を計量カップ等に採取することで実施されている。唾液緩衝能の測定は、一定量の酸と一定量の唾液を混合後のpHを、pH指示薬の色調変化を調べる方法で実施されている。唾液粘性、歯垢の付着量、食事回数やフッ化物の使用状況といった生活習慣等は、歯科医の視診や患者への問診等で実施されている。なお、唾液の分泌量が少ない場合、その唾液の粘性は高く、また緩衝能が低い傾向があると言われている。 The following methods have been developed as methods for examining the above items. The number of mutans streptococci and the number of Lactobacillus are measured by a culture method using a selective medium. For example, in the measurement of the number of mutans streptococci, a solid medium such as S. salivarius or bacitracin is used as a selective medium. ing. The saliva secretion amount is measured by collecting saliva secreted in a certain time in a measuring cup or the like. The saliva buffering capacity is measured by a method in which the pH after mixing a certain amount of acid and a certain amount of saliva is examined, and the color change of the pH indicator is examined. Lifestyles such as saliva viscosity, amount of plaque adhesion, number of meals and use of fluoride are carried out by visual inspection of dentists and patient interviews. In addition, when the amount of saliva secretion is small, it is said that the viscosity of the saliva tends to be high and the buffer capacity tends to be low.
一部の歯科医院では、上記の各検査項目を全て検査し、患者の口腔内の齲蝕リスクの総和を一定レベル以下に押さえ込む方法により齲蝕を予防する試みがなされており、一定の成果を挙げている(例えば非特許文献1参照)。 At some dental clinics, all of the above examination items have been examined, and attempts have been made to prevent dental caries by reducing the total caries risk in the patient's oral cavity to a certain level or less. (For example, refer nonpatent literature 1).
唾液の複数の物性を簡便且つ安価に検査する方法が提示されている。該方法では、支持体に対する唾液の浸透度を測定することで、唾液の量、粘性、口腔粘膜の乾燥度及び湿潤度を測定できる(例えば特許文献1参照)。 A method for simply and inexpensively examining a plurality of physical properties of saliva has been proposed. In this method, the amount of saliva, viscosity, dryness and wetness of the oral mucosa can be measured by measuring the degree of saliva penetration into the support (see, for example, Patent Document 1).
しかしながら、上記の各検査項目の全てに渡って検査する方法は、検査に長時間を要し、また種々の検査キットや装置を併用し実施するため、歯科医や患者の時間的、費用的負担が大きい問題を有していた。例えば、ミュータンスレンサ球菌数の測定に用いる培養法では、培養に長時間(2日間程度)を要し、また高額な培養器を必要とした。また、唾液粘性を粘度計で測定する、或いは唾液沈殿(歯垢)量を遠心分離した沈殿の湿重量で測定する方法では、装置が高額であり、また測定操作が煩雑なため、繁忙な歯科医院の臨床現場にて実施することが困難であった。そのため、簡便且つ安価に齲蝕リスクを判定できる方法が望まれている。 However, the method of inspecting all of the above-mentioned inspection items requires a long time for the inspection, and is performed in combination with various inspection kits and devices, so that the dentist and patient are burdened with time and cost. Had a big problem. For example, in the culture method used for measuring the number of mutans streptococci, the culture requires a long time (about 2 days) and an expensive incubator. In addition, in the method of measuring saliva viscosity with a viscometer or measuring the amount of saliva precipitation (plaque) with the wet weight of the centrifuged precipitate, the apparatus is expensive and the measurement operation is complicated, so it is a busy dental practice. It was difficult to carry out at the clinic in the clinic. Therefore, a method that can easily and inexpensively determine the caries risk is desired.
上記の唾液の複数の物性を簡便且つ安価に検査する方法では、支持体に対する唾液の浸透度を測定することで、唾液の量、粘性、口腔粘膜の乾燥度及び湿潤度を測定できる。しかしながら、該方法では唾液中のミュータンスレンサ球菌数や沈殿物(主に歯垢)の多寡が考慮されておらず、より確度の高い齲蝕リスク判定手法の開発が求められていた。 In the method for inspecting a plurality of physical properties of saliva in a simple and inexpensive manner, the amount of saliva, the viscosity, the dryness of the oral mucosa, and the wetness can be measured by measuring the saliva penetration to the support. However, this method does not take into account the number of mutans streptococci in saliva and the number of precipitates (mainly plaque), and there has been a demand for the development of a more accurate method for determining caries risk.
以上のことから、齲蝕リスクを簡便且つ安価に判定できる齲蝕リスクの判定方法が望まれていた。特に、唾液中のミュータンスレンサ球菌数、唾液中の沈殿(主として歯垢)量、並びに唾液の粘性といった唾液の性状は、齲蝕の発生や進行に密接に関係していると考えられ、これらの唾液の性状を簡便且つ安価に判定できる方法が望まれていた。 From the above, a caries risk determination method that can easily and inexpensively determine caries risk has been desired. In particular, saliva properties such as the number of mutans streptococci in saliva, the amount of sediment (mainly plaque) in saliva, and the viscosity of saliva are considered to be closely related to the occurrence and progression of caries. A method that can easily and inexpensively determine the properties of saliva has been desired.
本発明者らは、上記課題に鑑み鋭意研究を続けてきた。その結果、唾液を濾過した際の濾過性が、唾液中のミュータンスレンサ球菌数、唾液中の沈殿(主として歯垢)量、並びに唾液の粘性と相関することを見出した。すなわち、唾液を濾過した際の濾過性を調べるという至極簡便な方法により、齲蝕リスクを判定できることを見出し、本発明を完成させるに至った。 The present inventors have continued intensive studies in view of the above problems. As a result, it was found that the filterability when saliva was filtered correlates with the number of mutans streptococci in saliva, the amount of sediment (mainly plaque) in saliva, and the viscosity of saliva. That is, the present inventors have found that the caries risk can be determined by an extremely simple method of examining the filterability when saliva is filtered, and have completed the present invention.
すなわち、本発明は、唾液の濾過性を評価することによる齲蝕リスクの簡易判定方法である。また、他の発明は、唾液供給室と唾液排出口とが濾材を介して連通しており、唾液供給室の上流に加圧手段を備えた濾過装置からなる、齲蝕リスク判定用具である。 That is, the present invention is a simple determination method for caries risk by evaluating the filterability of saliva. Another aspect of the invention is a caries risk determination tool comprising a filtering device in which a saliva supply chamber and a saliva discharge port communicate with each other via a filter medium and provided with a pressurizing means upstream of the saliva supply chamber.
本発明の齲蝕リスクの判定方法により、唾液中のミュータンスレンサ球菌数、並びに唾液中の沈殿量や唾液の粘性を迅速、簡便、且つ安価に評価することができる。これにより、被験者の齲蝕リスクを迅速、簡便、且つ安価に判定することができる。 According to the caries risk determination method of the present invention, the number of mutans streptococci in saliva, the amount of sediment in saliva and the viscosity of saliva can be evaluated quickly, simply and inexpensively. Thereby, a subject's caries risk can be determined quickly, simply, and inexpensively.
本発明の齲蝕リスクの判定方法は、唾液の濾過性を評価することにより実施する。 The caries risk determination method of the present invention is carried out by evaluating the filterability of saliva.
本発明で用いる唾液は、その採取方法は特に限定されず、従来公知の刺激唾液や無刺激唾液を採取する方法を使用できる。一定時間パラフィンやガムを噛み、分泌した刺激唾液を容器に吐出し採取する方法では、パラフィンやガムを噛むことで歯面の歯垢が剥がれ唾液中に回収されるので、該方法で得られた唾液の濾過性を調べる場合は、歯面の歯垢量を加味した齲蝕リスク判定ができる。また、該方法では、一定時間パラフィンやガムを噛むため唾液がよく攪拌され、均質な唾液の採取が可能となる。これらのことから、一定時間パラフィンやガムを噛み分泌した刺激唾液を容器に吐出し採取する方法は、齲蝕リスクをより正確に判定できるので好適である。 The method for collecting the saliva used in the present invention is not particularly limited, and conventionally known methods for collecting stimulated saliva and unstimulated saliva can be used. In the method of chewing paraffin and gum for a certain period of time and discharging and collecting the secreted stimulated saliva into the container, the plaque on the tooth surface is peeled off and collected in the saliva by chewing the paraffin and gum. When examining the filterability of saliva, it is possible to determine caries risk considering the amount of plaque on the tooth surface. Further, in this method, since saliva is chewed for a certain period of time, the saliva is well agitated, and uniform saliva can be collected. For these reasons, a method of discharging and collecting stimulated saliva that has been chewed and secreted with paraffin or gum for a certain period of time is preferable because the risk of caries can be determined more accurately.
本発明では、採取した唾液を濾材で濾過し、その際の濾過性を調べる。本発明において、濾過性とは、唾液の濾過の容易さを表す指標のことである。このような濾過性としては、所定量の唾液の濾過に要す時間(濾過時間)、単位濾材当りの唾液の濾過可能量、或いは唾液を濾過した際の濾過圧を例示できる。濾過性が高いとは濾過が容易であることを意味し、この時、濾過時間は短く、濾過可能量は多く、濾過圧は低くなる。濾過性が低いとは濾過が困難なことを意味し、この時、濾過時間は長く、濾過可能量は少なく、濾過圧は高くなる。 In the present invention, the collected saliva is filtered with a filter medium, and the filterability at that time is examined. In the present invention, the filterability is an index representing the ease of saliva filtration. Examples of such filterability include time required for filtering a predetermined amount of saliva (filtering time), the amount of saliva that can be filtered per unit filter medium, or the filtration pressure when saliva is filtered. High filterability means that filtration is easy. At this time, the filtration time is short, the filterable amount is large, and the filtration pressure is low. Low filterability means that filtration is difficult. At this time, the filtration time is long, the filterable amount is small, and the filtration pressure is high.
唾液の濾過時間は、例えば所定量(面積または体積)の濾材を使用し、所定量の唾液を所定の濾過圧下で濾過した場合に要した時間を測定することで調べることができる。濾過可能量は、例えば所定量の濾材を使用し唾液を濾過した場合に、濾過圧が所定値になる、或いは濾材が目詰まりするまでに濾過した唾液の量を測定することで調べることができる。濾過圧は、例えば所定量の濾材を使用し唾液を濾過した際に、加圧手段に加えた荷重や力を測定する、或いは加圧時の圧力を測定することで調べることができる。 The saliva filtration time can be examined, for example, by measuring a time required when a predetermined amount (area or volume) of a filter medium is used and a predetermined amount of saliva is filtered under a predetermined filtration pressure. For example, when saliva is filtered using a predetermined amount of filter medium, the filterable amount can be checked by measuring the amount of saliva filtered until the filtration pressure reaches a predetermined value or the filter medium is clogged. . The filtration pressure can be examined, for example, by measuring the load or force applied to the pressurizing means when the saliva is filtered using a predetermined amount of filter medium, or by measuring the pressure during pressurization.
本発明においては、上記濾過性を評価することにより、齲蝕リスクを判定するものである。即ち、ミュータンスレンサ球菌数が多いほど、沈殿物が多いほど、唾液の粘性が高いほど(同時に緩衝能も低くなる傾向がある)、唾液の濾過性が劣るものとなり、よって齲蝕リスクも高いものとなるから、該濾過性を評価するのみで一度に総合的な齲蝕リスクを判定することができる。 In the present invention, the caries risk is determined by evaluating the filterability. That is, the greater the number of mutans streptococci, the greater the amount of sediment, and the higher the viscosity of saliva (at the same time, the buffering capacity tends to be lower), the lower the saliva filterability and thus the higher the risk of caries Therefore, the overall caries risk can be determined at a time only by evaluating the filterability.
例えば、ミュータンスレンサ球菌数のみを測定する方法では、例え、沈殿物が多く、また唾液の粘性が高くてもミュータンスレンサ球菌数が少ない場合には齲蝕リスクが小さいと判定されてしまうが、本発明によればこのような問題がほとんどなく、優れた判定方法である。 For example, in the method of measuring only the number of mutans streptococci, for example, there are many precipitates, and even if the viscosity of saliva is high, if the number of mutans streptococci is small, it is determined that the caries risk is small, According to the present invention, there are almost no such problems, and the determination method is excellent.
本発明において評価する濾過性に影響を与える第一の因子はミュータンスレンサ球菌数である。齲蝕の発生や進行には、齲蝕の攻撃因子である口腔内のミュータンスレンサ球菌が密接に関与していると考えられており、該ミュータンスレンサ球菌数が多いほど、齲蝕リスクが高い。 The first factor that affects the filterability evaluated in the present invention is the number of mutans streptococci. The occurrence and progression of dental caries is considered to be closely related to oral mutans streptococci, which are caries attack factors, and the greater the number of mutans streptococci, the higher the caries risk.
ここで、ミュータンスレンサ球菌は、ストレプトコッカス・ミュータンス(Streptococcus mutans、血清型c、e、f)、ストレプトコッカス・ソブリヌス(Streptococcus sobrinus、血清型d、g)、ストレプトコッカス・クリセタス(Streptococcus cricetus、血清型a)、ストレプトコッカス・ラッタス(Streptococcus rattus、血清型b)、ストレプトコッカス・フェルス(Streptococcus ferus、血清型c)、ストレプトコッカス・マカカ(Streptococcus macacae、血清型c)、ストレプトコッカス・ドウネイ(Streptococcus downey、血清型h)として、血清学、遺伝学的に異なる7種の型に分類されている。ヒトの口腔には主としてストレプトコッカス・ミュータンスとストレプトコッカス・ソブリヌスが存在する。これらの菌は、Pacタンパク質等の菌体表層タンパク質を介し歯面に付着し、粘着性・不溶性グルカンを産生し齲蝕原性プラーク(歯垢)を形成する。齲蝕原性プラーク中のミュータンスレンサ球菌を始めとする種々の菌が産生する酸により歯の脱灰が進み、齲蝕が発生・進行する。すなわち、ミュータンスレンサ球菌は、齲蝕の攻撃因子として作用する。また、口腔内のミュータンスレンサ球菌数が高い場合は、齲蝕原性プラーク(歯垢)が形成されやすい。 Here, mutans streptococci are Streptococcus mutans (Streptococcus mutans, serotype c, e, f), Streptococcus sobrinus (Streptococcus sobrinus, serotype d, g), Streptococcus crisetus (Streptococcus critus cc serotype). ), Streptococcus rattus (Serotype b), Streptococcus ferus (Streptococcus ferus, serotype c), Streptococcus macacae, serotype c h, Streptococcus serotype c , Serology, genetics It has been classified into seven different kinds of mold. Streptococcus mutans and Streptococcus sobrinus are mainly present in the human oral cavity. These bacteria adhere to the tooth surface via cell surface proteins such as Pac protein and produce sticky / insoluble glucan to form cariogenic plaque (plaque). The decalcification of teeth progresses due to the acid produced by various bacteria such as mutans streptococci in cariogenic plaques, and caries occurs and progresses. That is, mutans streptococci act as a caries attack factor. Further, when the number of mutans streptococci in the oral cavity is high, cariogenic plaque (plaque) is likely to be formed.
本発明において評価する濾過性に影響を与える第二及び第三の因子は唾液中の沈殿物と、唾液の粘性である。 The second and third factors that affect the filterability evaluated in the present invention are the deposits in saliva and the viscosity of saliva.
齲蝕の防御因子である唾液の作用としては、歯面に付着したミュータンスレンサ球菌を洗い流す作用(洗浄作用)と、齲蝕原性プラーク(歯垢)中の種々の菌が産生する酸を中和する作用(緩衝作用)が挙げられる。 The action of saliva, a protective factor against caries, is to neutralize mutans streptococci adhering to the tooth surface (washing action) and acids produced by various bacteria in cariogenic plaque (plaque) Action (buffer action).
唾液の粘性が高い場合は、口腔内の唾液の流動性が低くなり、上記の洗浄作用や緩衝作用が歯面に及び難くなる。歯面に齲蝕原性プラーク(歯垢)量が多くミュータンスレンサ球菌数が高い場合は、該プラークに阻まれ緩衝作用が歯面に及び難くなり、また、該菌が粘着性・不溶性グルカンを産生するので唾液の粘性が益々高くなるという悪循環に陥る。即ち、歯垢などの唾液中の沈殿物の量が多いほど、また唾液の粘性が高いほど齲蝕リスクは高いものとなる。なお、唾液の粘性が高いことによる洗浄作用や緩衝作用の低下は、唾液分泌量や唾液緩衝能の低さをも反映していると考えられる。 When saliva has a high viscosity, the fluidity of saliva in the oral cavity is low, and the cleaning and buffering actions described above are difficult to reach the tooth surface. When the amount of cariogenic plaque (plaque) on the tooth surface is large and the number of mutans streptococci is high, the plaque is blocked and the buffering action is difficult to reach the tooth surface. Since it is produced, it falls into a vicious circle in which the viscosity of saliva becomes higher and higher. That is, the greater the amount of precipitates in saliva such as dental plaque, and the higher the saliva viscosity, the higher the caries risk. In addition, it is thought that the reduction | decrease of the washing | cleaning effect | action and buffering effect by the viscosity of saliva reflecting the low saliva secretion amount and the low saliva buffering ability.
以上のように、ミュータンスレンサ球菌数が多いほど、不溶性の沈殿物が多いほど、また唾液の粘性が高いほど齲蝕リスクが高いものであり、さらにこれら因子はいずれも濾過性を低下させる方向に作用する。即ち、唾液中のミュータンスレンサ球菌数、沈殿物(主として歯垢)の量、及び唾液の粘性が高値の場合は、口腔内の齲蝕リスクが高い状態と言え、このような場合は唾液の濾過性が低くなり、逆に、唾液中のミュータンスレンサ球菌数、沈殿物(主として歯垢)の量、及び唾液の粘性が低値の場合は、口腔内の齲蝕リスクが低い状態と言え、このような場合は唾液の濾過性が高くなるから、唾液の濾過性を評価することにより、齲蝕リスクを判定できる。 As mentioned above, the greater the number of mutans streptococci, the greater the number of insoluble precipitates, and the higher the viscosity of saliva, the higher the risk of caries.Furthermore, these factors tend to decrease the filterability. Works. That is, if the number of mutans streptococci in saliva, the amount of precipitate (mainly plaque), and the viscosity of saliva are high, it can be said that the risk of dental caries in the oral cavity is high. On the contrary, if the number of mutans streptococci in saliva, the amount of precipitate (mainly plaque), and the viscosity of saliva are low, it can be said that the risk of dental caries in the oral cavity is low. In such a case, the filterability of saliva increases, and therefore the caries risk can be determined by evaluating the filterability of saliva.
本発明において、使用する濾材の形状や量(面積や体積)等は特に限定されず、使用する唾液の量に応じて、濾過性の測定が容易なように適宜選択すればよい。使用する唾液の量は、再現性良く濾過性を測定する観点から0.05ml以上が好ましく、また、必要最小限の濾材を使用し短時間に濾過性を測定する観点から10ml以下が好ましい。刺激唾液の分泌速度は通常0.04〜6ml/分であり、幼児を含め唾液の採取が困難な被験者も存在するので、同一の測定方法を多くの被験者に適用できるよう、使用する唾液量は0.25〜2mlであることが特に好ましい。 In the present invention, the shape and amount (area and volume) of the filter medium to be used are not particularly limited, and may be appropriately selected according to the amount of saliva to be used so that the filterability can be easily measured. The amount of saliva to be used is preferably 0.05 ml or more from the viewpoint of measuring the filterability with good reproducibility, and preferably 10 ml or less from the viewpoint of measuring the filterability in a short time using the minimum necessary filter medium. Since the secretion rate of stimulated saliva is usually 0.04 to 6 ml / min and there are some subjects who are difficult to collect saliva including infants, the amount of saliva used is so that the same measurement method can be applied to many subjects. 0.25 to 2 ml is particularly preferred.
本発明において使用する濾材の孔径は、使用する唾液や濾材の材質や濾材の量に応じて濾過性の測定が容易なように適宜選択すればよい。濾材の孔径が小さすぎる場合は、唾液や濾材の使用量にもよるが、濾過時間が長くなりすぎる、濾過可能量が少なくなりすぎる、濾過圧が高くなりすぎる、或いは目詰まりを生じ測定自体が困難になる場合がある。一方、濾材の孔径が大きすぎる場合は、濾過時間が短くなりすぎる、濾過可能量が多くなりすぎる、或いは濾過圧が低くなりすぎる為、濾過性の測定が困難になる場合がある。適度な濾過時間、濾過可能量、或いは濾過圧の下で濾過性を測定できることから、濾材の孔径は0.6〜4μm、特に0.8〜2μmであることが好ましい。 The pore diameter of the filter medium used in the present invention may be appropriately selected so that the filterability can be easily measured according to the saliva used, the material of the filter medium, and the amount of the filter medium. If the pore size of the filter medium is too small, depending on the amount of saliva and filter medium used, the filtration time will be too long, the filterable amount will be too small, the filtration pressure will be too high, or the measurement itself will be clogged. It can be difficult. On the other hand, when the pore diameter of the filter medium is too large, the filtration time may be too short, the filterable amount may be too large, or the filtration pressure may be too low, making it difficult to measure filterability. Since the filterability can be measured under an appropriate filtration time, filterable amount, or filtration pressure, the pore diameter of the filter medium is preferably 0.6 to 4 μm, particularly preferably 0.8 to 2 μm.
なお、上記濾材の孔径は、粒径が既知の粒子を含む検液を濾材で自然濾過した場合に、該濾材が保持できる最小の粒子の径で規定する値である。このような粒径が既知の粒子としては、金属水酸化物や沈殿シリカ等のゼラチン状沈殿物、燐モリブデン酸アンモニウムやシュウ酸カルシウムや硫酸鉛や硫酸バリウム等の結晶状沈殿物、赤血球や血小板等の血液細胞、大腸菌等のバクテリアや酵母等の微生物、各種コロイド類、花粉、胞子、タバコの煙等を例示できる。該濾材が保持できるとは、検液に含まれる粒径が既知の粒子の98%以上を該濾材が保持することを指す。 The pore diameter of the filter medium is a value defined by the minimum particle diameter that can be retained by the filter medium when a test solution containing particles having a known particle diameter is naturally filtered with the filter medium. Such particles with known particle sizes include gelatinous precipitates such as metal hydroxides and precipitated silica, crystalline precipitates such as ammonium phosphomolybdate, calcium oxalate, lead sulfate and barium sulfate, red blood cells and platelets. Examples include blood cells such as Escherichia coli, bacteria such as E. coli, microorganisms such as yeast, various colloids, pollen, spores, tobacco smoke, and the like. The ability to hold the filter medium means that the filter medium holds 98% or more of particles having a known particle size contained in the test solution.
本発明において、濾材の材質としては、唾液を濾過可能な材質のものであれば、従来公知の材質からなる濾材が制限なく使用できる。このような濾材の材質としては、ガラス繊維;ポリビニリデンフルオライド(PVDF)、ポリテトラフルオロエチレン(PTFE)、ポリサルフォン、ポリカーボネート、ポリエチレン、ポリプロピレン、ポリアミド等のプラスチック類;セルロース、ニトロセルロース、アセチルセルロース等のセルロース類等を例示できる。 In the present invention, as the material of the filter medium, any filter medium made of a conventionally known material can be used without limitation as long as it is a material capable of filtering saliva. Examples of the material of the filter medium include glass fibers; plastics such as polyvinylidene fluoride (PVDF), polytetrafluoroethylene (PTFE), polysulfone, polycarbonate, polyethylene, polypropylene, and polyamide; cellulose, nitrocellulose, acetylcellulose, and the like. The celluloses etc. of this can be illustrated.
本発明で使用する濾材としては、上記のような材質からなる従来公知のメンブレンフィルターやデプスフィルターを使用することができる。このようなメンブレンフィルターとしては、上記のセルロース類やプラスチック類からなる多孔質のフィルム状フィルターが使用できる。また、デプスフィルターとしてはセルロース繊維濾紙、シリカ繊維濾紙、ガラス繊維濾紙等を例示できる。また、ガラス繊維濾紙や濾紙の細片、または活性炭等の粒子をカートリッジ等に詰めて作製した、或いは複数の濾材を積層して作製した集合体も本発明の濾材として使用することができる。 As the filter medium used in the present invention, a conventionally known membrane filter or depth filter made of the above materials can be used. As such a membrane filter, a porous film filter made of the above celluloses or plastics can be used. Examples of the depth filter include cellulose fiber filter paper, silica fiber filter paper, and glass fiber filter paper. Further, an aggregate produced by packing glass fiber filter paper, fine pieces of filter paper, particles of activated carbon or the like into a cartridge or by laminating a plurality of filter media can also be used as the filter media of the present invention.
メンブレンフィルターを使用した場合は、該濾材の表層が目詰まりした時点で濾過が困難となるのに対し、デプスフィルターや上記の集合体を使用した場合は、該濾材の全体積を使用し濾過を行うことから、同一の孔径の濾材を使用した場合は、デプスフィルターや上記の集合体を使用した方が単位面積当りに濾過できる唾液の量が多くなる傾向がある。使用する濾材の面積を必要以上に大きくしない為に、デプスフィルターや上記の集合体を使用することが好ましい。濾過装置の作製が容易であることから、デプスフィルターを使用することが好ましく、特にガラス繊維濾紙を使用した場合は、同一の孔径の場合に単位面積当りの唾液の濾過可能量が高い傾向にあるので特に好適である。 When a membrane filter is used, filtration becomes difficult when the surface layer of the filter medium becomes clogged, whereas when a depth filter or the above aggregate is used, filtration is performed using the entire volume of the filter medium. Therefore, when a filter medium having the same pore diameter is used, the amount of saliva that can be filtered per unit area tends to increase when a depth filter or the above-described aggregate is used. In order not to increase the area of the filter medium to be used more than necessary, it is preferable to use a depth filter or the above-mentioned aggregate. It is preferable to use a depth filter because it is easy to make a filtration device. Especially when glass fiber filter paper is used, the amount of saliva that can be filtered per unit area tends to be high for the same pore size. Therefore, it is particularly suitable.
本発明の齲蝕リスク判定方法における濾過性の評価方法は特に限定されるものではないが、極めて簡潔かつ迅速に行え、大型の装置などを必要としない点で、唾液供給室と唾液排出口とが濾材を介して連通しており、唾液供給室の上流に加圧手段を備えた濾過装置からなる齲蝕リスク判定用具を使用し実施することが好適である。 The filterability evaluation method in the caries risk determination method of the present invention is not particularly limited. However, the saliva supply chamber and the saliva outlet are provided in that they are extremely simple and quick and do not require a large device. It is preferable to use a caries risk determination tool that is communicated via a filter medium and includes a filtration device provided with a pressurizing means upstream of the saliva supply chamber.
該濾過装置に関して、以下で図面を使用し説明する。図1は、本発明で使用する濾過装置の一実施態様を示した斜視図である。 The filtration device will be described below with reference to the drawings. FIG. 1 is a perspective view showing an embodiment of a filtration device used in the present invention.
この濾過装置は、唾液供給主室1と唾液排出口2とを備えている。また、濾材3は、濾材収納部4内に収納されており、前記唾液供給主室1は、接続部5により該濾材収納部4に接続されている。したがって、唾液供給主室1と唾液排出口2とは、該濾材3を介して互いに接続された構造をしている。この装置は、上記唾液排出口2と後述する唾液供給室1の上流に設けられる加圧手段への接続口以外には他に開口部はなく半密閉系である。
The filtration device includes a saliva supply main chamber 1 and a
本発明において、唾液供給室は、濾材より上流に設けられた、唾液の一定量が貯留される空隙の全てをいう。したがって、濾材収納部4内において、濾材3の上部には、該濾材収納部に流入した唾液を一時的に貯留する小空間6が設けられているが、この小空間6も、本発明における唾液供給室の一部をなす。必要に応じて、該小空間6を供給する唾液全てが収納可能な容積とし、唾液供給主室1に相当する部材を設けなくても構わない。
In the present invention, the saliva supply chamber refers to all of the voids provided upstream from the filter medium in which a certain amount of saliva is stored. Therefore, a
唾液供給室1の上流には、シリンジ外筒7とプランジャー8で構成されたシリンジ9からなる加圧手段が設けられている。加圧手段は、装置内を加圧にする機能を有するものであれば従来公知の加圧手段が制限なく使用できる。このような加圧手段としては、シリンジ、スポイト、ゴム球等の各種手動器具や、加圧用ポンプ、ボンベ等の各種装置を使用することができる。上記の各種手動器具を加圧手段として使用する方法は、操作が簡便であり好適である。
Upstream of the saliva supply chamber 1 is provided with a pressurizing means comprising a syringe 9 composed of a syringe
唾液排出口2に濾過装置内部を装置外部に対して陰圧状態とすることができるような陰圧手段を設置することもできる。このような陰圧手段としては、シリンジ、スポイト、ゴム球等の各種手動器具や、真空ポンプ、アスピレーター等の各種装置を使用することができる。陰圧手段を使用する方法と比較して、加圧濾過の方がより効率的な濾過を可能にできるため好ましい。
A negative pressure means can be installed in the
濾材収納部4の形状や材質は特に限定されず、該形状は濾材3の形状に応じて適宜選択すればよい。加圧時の濾材3の変形や破損を防止する目的で、濾材3の上面又は下面には、放射状、格子状、点状等の各種パターン構造を有す板状構造体;ナイロンネット等の網目状材料;多孔性材料;ガラス繊維やポリプロピレン不織布等の繊維材料等を介在させても良い。また、濾材3の上面には、適当な測定レンジにて測定できるよう濾過性をコントロールする目的で、活性炭や濾紙粉末等の濾過助剤を添加することもできるし、或いはガラスフィルター、ポリプロピレン不織布等のプレフィルターを設置することもできる。 The shape and material of the filter medium storage portion 4 are not particularly limited, and the shape may be appropriately selected according to the shape of the filter medium 3. For the purpose of preventing deformation and breakage of the filter medium 3 during pressurization, a plate-like structure having various pattern structures such as radial, grid, and dot on the upper or lower surface of the filter medium 3; Porous material; Fiber material such as glass fiber or polypropylene nonwoven fabric may be interposed. Further, a filter aid such as activated carbon or filter paper powder can be added to the upper surface of the filter medium 3 for the purpose of controlling filterability so that it can be measured in an appropriate measurement range, or a glass filter, polypropylene nonwoven fabric, etc. It is also possible to install a prefilter.
図2は、本発明で使用する濾過装置の別の態様を示した側面図である。この濾過装置は、濾材収納部4内において、濾材3の上下に空間がほとんど形成されておらず、この濾材収納部4の上面に直接、加圧手段であるシリンジ9の先端部が脱着可能に接続されたものであり、唾液供給室はシリンジ外筒7の内空部に形成される。このような装置は、構造が簡単であるので好適である。
FIG. 2 is a side view showing another embodiment of the filtration device used in the present invention. In this filter device, almost no space is formed above and below the filter medium 3 in the filter medium storage section 4, and the tip of the syringe 9 as a pressurizing means can be directly attached to and detached from the upper surface of the filter medium storage section 4. The saliva supply chamber is formed in the inner space of the syringe
勿論、濾過装置の形状は図1、図2に限定されない。 Of course, the shape of the filtration device is not limited to FIGS.
上記図1に示した構造の用具を用いた場合の本発明の齲蝕リスク判定方法は以下の通りである。即ち、まず、その唾液供給室1に唾液を供給する。この供給操作は、シリンジ9との接続部を唾液供給主室1から外した後、ピペット等の器具を使用して、唾液供給主室1に所定量の唾液を供給すること等により適宜行えばよい。次いで、この唾液を、濾過膜3まで下方に流し、自然濾過、又はシリンジ9において、プランジャー8を押して装置内を加圧すること等により、加圧手段を使用し加圧濾過する。この濾過時の唾液の濾過性を測定することで、齲蝕リスクの判定を簡便に実施できる。また図2に示した用具においては、シリンジ9におけるプランジャー8を外筒7からはずして行う以外は上記と同様である。
The caries risk determination method of the present invention when the tool having the structure shown in FIG. 1 is used is as follows. That is, first, saliva is supplied to the saliva supply chamber 1. This supply operation is appropriately performed by removing a connection portion with the syringe 9 from the saliva supply main chamber 1 and then supplying a predetermined amount of saliva to the saliva supply main chamber 1 using an instrument such as a pipette. Good. Next, the saliva is flowed down to the filtration membrane 3 and subjected to pressure filtration using a pressurizing means such as natural filtration or pressurizing the inside of the apparatus by pressing the plunger 8 in the syringe 9. The caries risk can be easily determined by measuring the filterability of saliva during filtration. 2 is the same as the above except that the plunger 8 in the syringe 9 is removed from the
以下、実施例により本発明を具体的に説明するが、本発明は以下の実施例により限定されるものではない。 EXAMPLES Hereinafter, although an Example demonstrates this invention concretely, this invention is not limited by a following example.
実施例1〔唾液の濾過性の測定と齲蝕リスクの判定〕
(1)〔唾液の採取と培養法による唾液中のミュータンスレンサ球菌数の測定〕
異なる8人の被験者にガムを5分間噛ませ、分泌された唾液を滅菌容器に吐き出させることで回収した。
Example 1 [Measurement of salivary filterability and determination of caries risk]
(1) [Measurement of the number of mutans streptococci in saliva by collecting saliva and culturing]
Eight different subjects were chewed with the gum for 5 minutes, and the secreted saliva was discharged into a sterile container.
得られた唾液の0.5mlを分取し、40W、10秒間超音波処理した後、適宜希釈して、50μlをミチス・サリバリウス・バシトラシン(以下、「MSB」と表記することもある。)固体培地上に添加し、37℃、嫌気条件下、48時間培養した。MSB固体培地上に生じるコロニー数を計数し、唾液の希釈率から、ミュータンスレンサ球菌数を個/mlとして算出した。 0.5 ml of the obtained saliva is collected, subjected to ultrasonic treatment at 40 W for 10 seconds, and then appropriately diluted, and 50 μl is solid as Mits Salivarius bacitracin (hereinafter sometimes referred to as “MSB”). It added on the culture medium and it culture | cultivated for 48 hours under 37 degreeC and anaerobic conditions. The number of colonies generated on the MSB solid medium was counted, and the number of mutans streptococci was calculated as number / ml from the dilution rate of saliva.
また、得られた唾液の0.5mlを分取し、10000r.p.m、2分間遠心し、上清を除去し、唾液由来の沈殿(主として歯垢成分)を回収し、その湿重量を測定した。 In addition, 0.5 ml of the obtained saliva was collected to obtain 10,000 r. p. m, centrifuged for 2 minutes, the supernatant was removed, the saliva-derived precipitate (mainly plaque component) was collected, and its wet weight was measured.
また、唾液を回収した滅菌容器を揺すり、唾液の粘性を、サラサラ、普通、ネバネバの3段階に目視で判定した。 Moreover, the sterilization container which collect | recovered saliva was shaken, and the viscosity of saliva was visually determined in three steps, smooth, normal, and sticky.
(2)〔濾過装置を使用した濾過性の測定〕
濾材としてガラス繊維濾紙GA−100(東洋濾紙株式会社、保留粒子径1.0μm)を使用し、有効濾過面積が1.1cm2(濾材の有効濾過面の径1.2cm)のシリンジフィルター10を試作し、シリンジ9(テルモ社、2.5ml)をセットし、図2の構造の濾過装置を作製した。
(2) [Measurement of filterability using a filtration device]
A glass fiber filter paper GA-100 (Toyo Filter Paper Co., Ltd., retained particle diameter: 1.0 μm) is used as a filter medium, and a syringe filter 10 having an effective filtration area of 1.1 cm 2 (the diameter of an effective filtration surface of the filter medium is 1.2 cm) is used. A prototype was prepared and a syringe 9 (Terumo, 2.5 ml) was set to produce a filtration device having the structure of FIG.
プランジャー8を濾過装置より引き抜き、実施例1(1)で採取した唾液0.5mlをシリンジ外筒7内に添加し、プランジャー8を装着後、該プランジャー8を所定の指圧下で押し下げ、シリンジ9内を加圧(約2気圧)することで唾液を濾過した。0.5mlの唾液の全量を濾過するのに要した濾過時間を測定した。
Pull out the plunger 8 from the filtration device, add 0.5 ml of saliva collected in Example 1 (1) into the syringe
(3)〔齲蝕リスクの判定〕
実施例1(1)の8人の被験者を、唾液中のミュータンスレンサ球菌濃度が1×105個/ml未満、1×105個/ml以上で5×105個/ml未満、5×105個/ml以上で1×106個/ml未満、1×106個/ml以上のように4段階に分類し、それぞれ0、1、2、3とスコア付けした(SMスコア)。
(3) [Determination of caries risk]
The eight subjects of Example 1 (1), mutans streptococci concentration is less than 1 × 10 5 cells / ml in saliva, 1 × 10 5 cells / ml or more in less than 5 × 10 5 cells / ml, 5 * 10 5 / ml or more, less than 1 * 10 6 / ml, 1 × 10 6 / ml or more, classified into 4 levels, scored 0, 1, 2, 3 respectively (SM score) .
実施例1(1)の8人の被験者を、唾液由来の沈殿の湿重量が20mg/0.5ml未満、30mg/0.5ml未満、30mg/0.5ml以上のように3段階に分類し、それぞれ0、1、2とスコア付けした(沈殿スコア)。 The eight subjects of Example 1 (1) are classified into three stages such that the wet weight of the precipitate derived from saliva is less than 20 mg / 0.5 ml, less than 30 mg / 0.5 ml, and 30 mg / 0.5 ml or more, Each was scored 0, 1, 2 (precipitation score).
実施例1(1)の8人の被験者を、唾液の粘性がサラサラ、普通、ネバネバの各々を、それぞれ0、1、2とスコア付けした(粘性スコア)。 The eight subjects of Example 1 (1) were scored as 0, 1 and 2 respectively for the viscosity of saliva, smooth, normal and sticky (viscosity score).
各被験者の齲蝕リスクスコアを、ミュータンスレンサ球菌スコアと唾液沈殿スコアと唾液粘性スコアの総和として算出した。 The caries risk score for each subject was calculated as the sum of the mutans streptococcal score, saliva precipitation score, and saliva viscosity score.
実施例1(2)で得られた濾過時間の測定結果と、実施例1(1)で得られた唾液中のミュータンスレンサ球菌数、唾液中の沈殿の湿重量、及び唾液の粘性とを比較した。結果を表1に示す。 The measurement result of the filtration time obtained in Example 1 (2), the number of mutans streptococci in saliva obtained in Example 1 (1), the wet weight of the precipitate in saliva, and the viscosity of saliva. Compared. The results are shown in Table 1.
実施例1(2)で得られた濾過時間の測定結果と、実施例1(3)で得られた齲蝕リスクスコアとを比較した。結果を表2に示す。 The measurement result of the filtration time obtained in Example 1 (2) was compared with the caries risk score obtained in Example 1 (3). The results are shown in Table 2.
表2に示したように、齲蝕リスクスコアと良く相関する唾液濾過時間の測定結果が得られた。本発明の齲蝕リスクの判定方法を使用することで、唾液中のミュータンスレンサ球菌数、唾液中の沈殿の量、及び唾液の粘性を反映した齲蝕リスクを、迅速(唾液の濾過に要する時間は30秒以内)、簡便、且つ安価に判定できた。 As shown in Table 2, the saliva filtration time measurement result correlated well with the caries risk score. By using the caries risk determination method of the present invention, the number of mutans streptococci in saliva, the amount of precipitate in saliva, and the caries risk reflecting saliva viscosity can be quickly determined (the time required for saliva filtration is (Within 30 seconds), it was easy and inexpensive.
1・・・唾液供給主室
2・・・唾液排出口
3・・・濾材
4・・・濾材収納部
5・・・接続部
6・・・小空間
7・・・シリンジ外筒
8・・・プランジャー
9・・・シリンジ
10・・・シリンジフィルター
DESCRIPTION OF SYMBOLS 1 ... Saliva supply
Claims (4)
The simple determination method for caries risk according to claim 1, wherein the saliva supply chamber and the saliva discharge port are in communication with each other through a filter medium, and the saliva supply chamber and the saliva discharge port include a filtering device including a pressurizing means upstream of the saliva supply chamber. Used caries risk assessment tool.
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