JP2005126349A - Leptin production inhibitor - Google Patents
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Abstract
Description
本発明は、白色脂肪細胞由来レプチンの産生を抑制するレプチン産生抑制剤に関する。 The present invention relates to a leptin production inhibitor that suppresses the production of white adipocyte-derived leptin.
近年の分子遺伝学の進歩により、レプチンをメディエーターとした新しいエネルギー代謝調節系の分子機構が解明されてきた。
レプチンはマウスやヒトなどの哺乳動物に見いだされた蛋白質で白色脂肪細胞で発現する。レプチンの生理的な作用としては、食欲の抑制、体重減少、体温や活動性の増加、血糖値やインスリン分泌の低下、脂肪組織重量の減少、不妊症の改善などの種々な作用が見いだされている。
Recent advances in molecular genetics have elucidated the molecular mechanism of a new energy metabolism regulatory system using leptin as a mediator.
Leptin is a protein found in mammals such as mice and humans and is expressed in white adipocytes. Leptin has various physiological effects such as suppression of appetite, weight loss, increased body temperature and activity, decreased blood sugar and insulin secretion, decreased adipose tissue weight, and improved infertility. Yes.
また、肥満などの脂質代謝異常が続くと血清レプチンレベルが高くなりレプチン本来の作用を示さなくなる（レプチン抵抗性）。この結果としてインスリン耐性をもたらしていると示唆される報告もある。このような状態においては血清レプチンレベルを速やかに低下させる、すなわちレプチン産生を抑制することが非常に重要である（例えば非特許文献１、２、３、４参照）。 In addition, when lipid metabolism abnormalities such as obesity continue, serum leptin level becomes high and leptin's original action is not exhibited (leptin resistance). Some reports suggest that this results in insulin resistance. In such a state, it is very important to rapidly decrease the serum leptin level, that is, to suppress leptin production (for example, see Non-Patent Documents 1, 2, 3, and 4).
レプチンの機能が解明されつつある中、レプチンの働きを促進する研究が様々な観点から盛んになされている。しかし、レプチンを抑制する研究は、アンタゴニストに関するものが見受けられるのみである。
近年の研究から、レプチン産生抑制剤やレプチンアンタゴニストを用いることで自己免疫疾患、拒食症、インスリン分泌不足に起因する疾患やインスリン耐性などの様々な症状を改善あるいは予防できることが知られている。
While the function of leptin is being elucidated, research that promotes the function of leptin has been actively conducted from various viewpoints. However, studies that suppress leptin are only related to antagonists.
From recent studies, it is known that leptin production inhibitors and leptin antagonists can be used to improve or prevent various symptoms such as autoimmune diseases, anorexia nervosa, diseases caused by insufficient insulin secretion and insulin resistance.
特許文献１には、第II種糖尿病におけるインスリン耐性を治療するためレプチンアンタゴニストを使用すること、ならびにかかる耐性を治療するための医薬が示されており、また、特許文献２には、レプチン受容体リガンドであるレプチン受容体アゴニストを、治療を必要とする哺乳動物に投与することからなる視床下部−下垂体−副腎−脂肪軸の調節方法が示されている。
また、特許文献３には、血清レプチン濃度を低下させてレプチン抵抗性を改善し、しかも日常の食品として摂取しやすいジアシルグリセロールからなるレプチン抵抗性改善剤が示されており、また、特許文献４には、レプチン受容体を介したレプチンの作用を阻害したり、レプチンの発現又は分泌あるいはレプチン受容体の発現を阻害するレプチン阻害剤を有効成分として含有する自己免疫疾患の治療および／又は予防剤が示されている。
Patent Document 3 discloses a leptin resistance improving agent composed of diacylglycerol that improves the leptin resistance by reducing the serum leptin concentration and is easy to ingest as a daily food. A therapeutic and / or prophylactic agent for autoimmune diseases comprising, as an active ingredient, a leptin inhibitor that inhibits the action of leptin through a leptin receptor, or inhibits leptin expression or secretion or leptin receptor expression It is shown.
近年明らかになりつつあるレプチンの生理機能は生体の生命維持機構において重要な役割を担っている。血清レプチンレベルを適正な範囲に制御することでさまざまな生活習慣病や疾病を予防、改善することが期待されている。
しかし、レプチンの産生そのものを制御する手法は未だ見出されていない。
本発明は、レプチンに起因する各種疾患、疾病、症状などの予防、緩和、改善を目的とするレプチン産生抑制剤に関するものである。
The physiological function of leptin, which has been revealed in recent years, plays an important role in the life support mechanism of living organisms. It is expected to prevent and improve various lifestyle-related diseases and diseases by controlling the serum leptin level within an appropriate range.
However, no method has yet been found to control leptin production itself.
The present invention relates to a leptin production inhibitor for the purpose of prevention, alleviation, and improvement of various diseases, diseases and symptoms caused by leptin.
レプチンは脂肪細胞で産生されるホルモンであって、レプチンレセプターの多くは視床下部に存在する。脂肪細胞で産生されたレプチンは血中を移動し視床下部のレセプターに結合することでその効果を発現させている。
しかし、なんらかの病態、疾患などに起因して、視床下部への移行、レセプターとの結合、結合以降のシグナル伝達などにおけるレプチンシグナルの伝達異常が起きることが知られている。たとえば、肥満状態では血清レプチンレベルが高くなりレプチン本来の作用を示さなくなる（レプチン抵抗性）。
本発明者らは、上記課題を解決するためには、レプチンの生体内レベルを適正な範囲に維持することが重要であると考え、レプチンの産生そのものに対して作用を及ぼすレプチン産生抑制剤に着目した。
本発明者等は、レプチン産生抑制剤の開発を目指し、白色脂肪細胞におけるレプチン産生に関して鋭意研究を重ねた。その結果特定の生薬がレプチン産生抑制作用を有することを初めて見出し、この知見により本発明を完成させた。
Leptin is a hormone produced in adipocytes, and many of the leptin receptors are present in the hypothalamus. Leptin produced in adipocytes moves through the blood and binds to the receptor in the hypothalamus to exert its effect.
However, it is known that abnormal transmission of leptin signals occurs in the hypothalamus, binding to the receptor, signal transmission after the binding, etc. due to some pathological condition or disease. For example, in an obese state, the serum leptin level becomes high and the original action of leptin is not exhibited (leptin resistance).
In order to solve the above-mentioned problems, the present inventors consider that it is important to maintain the in vivo level of leptin within an appropriate range, and a leptin production inhibitor that acts on leptin production itself. Pay attention.
The present inventors have conducted extensive research on leptin production in white adipocytes with the aim of developing leptin production inhibitors. As a result, it was found for the first time that a specific herbal medicine has a leptin production-inhibiting action, and the present invention was completed based on this finding.
カシュウ、ビンロウジ、クジン、シャクヤク、ハブソウの生薬は脂肪細胞からのレプチン産生を抑制する作用があり、レプチン産生抑制剤として様々な用途において有用であることが見出された。
これらは化粧品をはじめとする各種の皮膚外用剤や浴用剤さらには飲食物に配合することができ、レプチンに起因する各種疾患、疾病、症状などの予防、緩和、改善を目的とするものへの応用を可能とする。
It has been found that herbal medicines such as kashuu, betel nut, kujin, peony, and japonicum have an action of suppressing leptin production from adipocytes, and are useful in various applications as leptin production inhibitors.
These can be incorporated into various skin external preparations such as cosmetics, bath preparations, and foods and drinks, and are intended to prevent, alleviate and improve various diseases, diseases and symptoms caused by leptin. Enable application.
本発明のレプチン産生抑制剤は、カシュウ、ビンロウジ、クジン、シャクヤク、ハブソウから選ばれる１種又は２種以上の混合物を含有するものである。
本発明で使用するカシュウとは、タデ科植物のツルドクダミの根を用いるが、地上部のみならず、さらには同属植物を用いることもできる。
本発明で使用するビンロウジとは、ヤシ科植物のビンロウの種子を用いるが、地上部のみならず、さらには同属植物を用いることもできる。
本発明に用いられるクジンとは、マメ科植物のクララの根を用いるが、地上部のみならず、さらには同属植物を用いることもできる。
本発明に用いられるシャクヤクとは、ボタン科植物のシャクヤクの根を用いるが、地上部のみならず、さらには同属植物を用いることもできる。
ハブソウとは、マメ科植物のハブソウの根を除いた全草を用いるが、同属植物を用いることもできる。
The leptin production inhibitor of the present invention contains one or a mixture of two or more selected from cashew, betel loin, kujin, peonies, and japonicus.
As the cashew used in the present invention, the roots of the plant family Tuldokudami are used, but not only the above-ground part but also the genus plant can be used.
As the betel wax used in the present invention, beeswax seeds of the palm family plant are used, but not only the above-ground part but also a genus plant can be used.
As the kudin used in the present invention, the roots of the leguminous plant Clara are used, but not only the above-ground part but also a genus plant can be used.
The peonies used in the present invention use the roots of peonies of button family plants, but not only the above-ground parts but also the plants belonging to the same genus can be used.
As for "Hubusou", the whole plant excluding the root of the leguminous plant "Huboso" is used, but a plant belonging to the same genus can also be used.
以下、本発明を具体的に説明するために実施例を挙げるが、本発明はこれらの実施例に限定されるものではない。 EXAMPLES Hereinafter, examples will be given to specifically describe the present invention, but the present invention is not limited to these examples.
レプチン産生抑制剤の製造
本発明において用いる、カシュウ、ビンロウジ、クジン、シャクヤク、ハブソウは、上記の各種部位を未乾燥のまま又は乾燥させた後、そのままで、あるいは、破砕又は粉砕後に搾取して使用することができる。さらに、これらを溶媒で抽出して得られるエキスや、該エキスから抽出溶媒を蒸発、又は凍結乾燥して得られる不揮発分を使用することができる。
抽出溶媒としては、水、アルコール類（例えば、メタノール、エタノール、エチレングリコール、プロピレングリコール、１,３−ブチレングリコール等）、アセトンなどのケトン類、ジエチルエーテルなどのエーテル類、トルエンなどの芳香族類等の各種の溶剤が挙げられ、単独あるいは２種以上の混液を任意に組み合わせて使用することができる。
Manufacture of Leptin Production Inhibitors Kashu, betel loin, kujin, peonies, and hawthorn used in the present invention are used as they are or after being crushed or crushed after being dried or dried. can do. Furthermore, the extract obtained by extracting these with a solvent, and the non-volatile content obtained by evaporating or lyophilizing the extraction solvent from the extract can be used.
Examples of the extraction solvent include water, alcohols (eg, methanol, ethanol, ethylene glycol, propylene glycol, 1,3-butylene glycol), ketones such as acetone, ethers such as diethyl ether, and aromatics such as toluene. The various solvents, such as these, are mentioned, and can be used individually or in combination of 2 or more types.
本発明で使用される生薬は、医薬または民間薬、食品、化粧品の成分として一般的に用いられているものであり、その安全性が確認されているものである。本発明のレプチン産生抑制剤は、医薬品、化粧品をはじめとする各種の皮膚外用剤や内用剤、浴用剤、飲食物などに配合することができる。 The herbal medicine used in the present invention is generally used as a component of medicine or folk medicine, food, and cosmetics, and its safety has been confirmed. The leptin production inhibitor of the present invention can be incorporated into various skin external preparations and internal preparations such as pharmaceuticals and cosmetics, bath preparations, foods and drinks, and the like.
本発明のレプチン産生抑制剤は、前記生薬単独あるいは混合物を含有する。生薬の総配合量は、剤型によっても異なるが、蒸発残分をそのまま使用してもかまわないし、目的の用途によって適宜、配合量を調整すれば良い。本発明のレプチン産生抑制剤の使用量は、特に制限はなく、用途や適用により適宜調整することができる。
また、本発明のレプチン産生抑制剤は、外用、内用、素材への処理など様々な形態に適用できる。さらに、通常の外用、内用、素材への処理などで使用されている薬剤などとも組み合わせて使用することができるし、これにより本発明の効果がより発現しやすくなる。
The leptin production inhibitor of the present invention contains the herbal medicine alone or a mixture thereof. The total blending amount of the crude drug differs depending on the dosage form, but the evaporation residue may be used as it is, and the blending amount may be appropriately adjusted depending on the intended use. There is no restriction | limiting in particular in the usage-amount of the leptin production inhibitor of this invention, It can adjust suitably with a use or application.
Moreover, the leptin production inhibitor of this invention is applicable to various forms, such as external use, internal use, and the process to a raw material. Furthermore, it can be used in combination with chemicals used in normal external use, internal use, treatment of raw materials, and the like, and thereby the effects of the present invention are more easily expressed.
本発明の皮膚外用剤は、前記生薬を単独で、あるいは混合物として含有する。生薬の総配合量は、剤型により適宜異なる。また、本発明の皮膚外用剤の使用量は特に制限はなく、使用者の好みに合わせて適宜調整することができる。
また、本発明の浴用剤は、前記生薬を単独あるいは混合物として使用することができ、その総配合量は剤型によって適宜異なる。
また、本発明の飲食物並びに飼料は、前記生薬を単独あるいは混合物として使用することができ、その総配合量は形態によって適宜異なる。
本発明の皮膚外用剤及び浴用剤には、上記各種生薬の他に、通常の外用剤あるいは入浴剤において使用される公知の機能性成分、例えば保湿剤、エモリエント剤、血行促進剤、細胞賦活剤、抗酸化剤、抗炎症剤、抗菌剤、美白剤、過酸化物抑制剤などを配合すること
ができる。
The external preparation for skin of the present invention contains the herbal medicine alone or as a mixture. The total compounding amount of the crude drug varies depending on the dosage form. Moreover, the usage-amount of the skin external preparation of this invention does not have a restriction | limiting in particular, It can adjust suitably according to a user's liking.
In the bath preparation of the present invention, the herbal medicines can be used alone or as a mixture, and the total blending amount thereof varies depending on the dosage form.
In addition, the food and drink and the feed of the present invention can use the herbal medicines alone or as a mixture, and the total blending amount thereof varies depending on the form.
The skin external preparation and bath preparation of the present invention include, in addition to the above-mentioned various crude drugs, known functional ingredients used in ordinary external preparations or bath preparations, such as humectants, emollients, blood circulation promoters, cell activators. Antioxidants, anti-inflammatory agents, antibacterial agents, whitening agents, peroxide inhibitors and the like can be blended.
例えば、グリセリン、ブチレングリコール、尿素、アミノ酸類などの保湿剤；スクワラン、マカデミアナッツ油、ホホバ油などのエモリエント剤；ビタミンＥ類、トウガラシチンキなどの血行促進剤；核酸などの細胞賦活剤；ジブチルヒドロキシトルエン（ＢＨＴ）、ジブチルヒドロキシアニソール（ＢＨＡ）、酢酸トコフェロール、アスコルビン酸などの抗酸化剤；グリチルリチン、アラントインなどの抗炎症剤；ヒノキチオール、塩化ベンザルコニウム、クロルヘキシジン塩、パラヒドロキシ安息香酸エステルなどの抗菌剤；アスコルビン酸、アルブチンなどの美白剤；スーパーオキシドジスムターゼ（ＳＯＤ）等の過酸化物抑制剤などの種々の公知物質等を配合することができる。
また、オウゴンエキス、イチョウエキス、シャクヤクエキス、胎盤抽出物、乳酸菌培養抽出物などの植物・動物・微生物由来の各種抽出物などを自由に添加して使用することが出来る。
For example, humectants such as glycerin, butylene glycol, urea and amino acids; emollients such as squalane, macadamia nut oil and jojoba oil; blood circulation promoters such as vitamin Es and pepper tincture; cell activators such as nucleic acids; dibutylhydroxytoluene Antioxidants such as (BHT), dibutylhydroxyanisole (BHA), tocopherol acetate and ascorbic acid; anti-inflammatory agents such as glycyrrhizin and allantoin; Various known substances such as whitening agents such as ascorbic acid and arbutin; peroxide inhibitors such as superoxide dismutase (SOD) can be blended.
In addition, various extracts derived from plants, animals, and microorganisms such as dragon extract, ginkgo biloba extract, peony extract, placenta extract and lactic acid bacteria culture extract can be freely added and used.
本発明の皮膚外用剤とは、外用可能な剤であって、その剤型には特に制限はなく、例えば、ペースト剤、クリーム、ジェル、軟膏、ローション、乳液、パック、パウダー、パップ剤などが例示できる。
本発明の浴用剤の剤型としては、適用可能なあらゆる剤型を意味し、例えば、粉末、顆粒状などの固形製剤、乳液、ペースト状などの液体製剤などが挙げられる。
本発明の飲食物並びに飼料の剤型としては、適用可能なあらゆる形態を意味し、例えば、ビスケット、クッキー、錠剤、カプセル剤、キャンディー、粉末などの固形剤や飲料などの液体製剤、ゼリーなどの半固形製剤などが挙げられる。
また、本発明の皮膚外用剤、浴用剤ならびに飲食物並びに飼料には、その剤型化のために界面活性剤、油脂類などの基剤成分や、必要に応じて増粘剤、防腐剤、等張化剤、酸化防止剤、紫外線吸収剤、キレート剤、香料、着色料など種々の添加剤を併用できる。
The external preparation for skin of the present invention is an agent that can be applied externally, and its dosage form is not particularly limited, and examples thereof include pastes, creams, gels, ointments, lotions, emulsions, packs, powders, and poultices. It can be illustrated.
The dosage form of the bath preparation of the present invention means all applicable dosage forms, and examples thereof include solid preparations such as powders and granules, and liquid preparations such as emulsions and pastes.
The food and drink and feed dosage forms of the present invention mean all applicable forms, such as biscuits, cookies, tablets, capsules, candy, liquid preparations such as powders, liquid preparations such as beverages, jelly, etc. Examples include semi-solid preparations.
In addition, the external preparation for skin, bath preparation, food and drink of the present invention, base ingredients such as surfactants, fats and oils for formulation, and thickeners, preservatives as necessary, Various additives such as tonicity agents, antioxidants, ultraviolet absorbers, chelating agents, fragrances, and coloring agents can be used in combination.
上記の界面活性剤として、限定されるものではないが、一般的な非イオン系界面活性剤、陰イオン系界面活性剤、陽イオン系界面活性剤、両イオン性界面活性剤を用いることができる。例えば、高級アルキルアミンのアルキレンオキサイド付加物、高級脂肪酸アミドのアルキレンオキサイド付加物、多価アルコールの脂肪酸エステル、硬化ひまし油のアルキレンオキサイド付加物、ポリエチレングリコールソルビタンアルキルエステル、ステロール等のアルキレンオキサイド付加物等の非イオン系界面活性剤；アルキル硫酸ナトリウム、アルキロイルメチルタウリンナトリウム、α−オレフィンスルホン酸ナトリウム、ポリオキシアルキレンアルキルエーテル硫酸ナトリウム等の陰イオン系界面活性剤；塩化アルキルピリジニウム、塩化ジステアリルジメチルアンモニウム等の陽イオン性界面活性剤；アルキルアミノプロピオン酸ナトリウム、アルキルポリアミノエチルグリシン等の両イオン性界面活性剤が挙げられる。そして、これらのうち１種又は２種以上を選択して使用することができる。 The surfactant is not limited, and general nonionic surfactants, anionic surfactants, cationic surfactants, and amphoteric surfactants can be used. . For example, alkylene oxide adducts of higher alkylamines, alkylene oxide adducts of higher fatty acid amides, fatty acid esters of polyhydric alcohols, alkylene oxide adducts of hardened castor oil, polyethylene oxide sorbitan alkyl esters, alkylene oxide adducts such as sterols, etc. Nonionic surfactants; Anionic surfactants such as sodium alkyl sulfate, sodium alkylylmethyl taurate, sodium α-olefin sulfonate, sodium polyoxyalkylene alkyl ether sulfate; alkyl pyridinium chloride, distearyl dimethyl ammonium chloride, etc. And cationic surfactants such as sodium alkylaminopropionate and alkylpolyaminoethylglycine. And 1 type or 2 or more types can be selected and used among these.
本発明において使用可能な基剤成分として、限定されるものではないが、例えば、オリーブ油、ツバキ油、ホホバ油、アボガド油、マカデミアナッツ油、杏仁油、スクワラン、スクワレン、馬油など、一般的に知られている油脂類が挙げられる。 Base ingredients that can be used in the present invention are not limited, but are generally known, for example, olive oil, camellia oil, jojoba oil, avocado oil, macadamia nut oil, apricot oil, squalane, squalene, horse oil and the like. And the oils and fats that are used.
増粘剤の例として、限定されるものではないが、例えば、ポリビニルアルコール、ポリアクリルアミド、ポリエチレングリコール、及びこれらの各種誘導体；ヒドロキシアルキルセルロースなどのセルロース類及びその誘導体；デキストラン、ゼラチン、アラビアガ
ム、トラガントガムなどのガム類；カルボキシビニルポリマーなどの水溶性高分子などが挙げられる。
防腐剤の例として、限定されるものではないが、例えば、パラヒドロキシ安息香酸エステル、塩化アルキルピリジニウム、塩化ベンザルコニウム、クロルヘキシジン塩、ヒノキチオールなどが挙げられる。
等張化剤の例として、限定されるものではないが、例えば、塩化ナトリウム、塩化カリウム、塩化カルシウム、などの無機塩類が挙げられる。
紫外線吸収剤の例として、限定されるものではないが、例えば、パラアミノ安息香酸、ベンゾフフェノン系紫外線吸収剤、ベンゾトリアゾール系紫外線吸収剤などが挙げられる。
キレート剤の例として、限定されるものではないが、例えば、エチレンジアミン四酢酸、フィチン酸、クエン酸及びこれらの水溶性塩などが挙げられる。
本発明の飲食物には、通常の食品に使用されている様々な材料を使用することができる。
Examples of thickeners include, but are not limited to, for example, polyvinyl alcohol, polyacrylamide, polyethylene glycol, and various derivatives thereof; celluloses such as hydroxyalkyl cellulose and derivatives thereof; dextran, gelatin, gum arabic, Examples include gums such as tragacanth gum; and water-soluble polymers such as carboxyvinyl polymer.
Examples of preservatives include, but are not limited to, parahydroxybenzoic acid esters, alkylpyridinium chloride, benzalkonium chloride, chlorhexidine salts, hinokitiol, and the like.
Examples of isotonic agents include, but are not limited to, inorganic salts such as sodium chloride, potassium chloride, calcium chloride, and the like.
Examples of ultraviolet absorbers include, but are not limited to, paraaminobenzoic acid, benzofuphenone ultraviolet absorbers, benzotriazole ultraviolet absorbers, and the like.
Examples of chelating agents include, but are not limited to, ethylenediaminetetraacetic acid, phytic acid, citric acid, and water-soluble salts thereof.
In the food and drink of the present invention, various materials used in ordinary foods can be used.
脂肪細胞を用いた試験
Zen-Bio社から購入したヒト白色脂肪前駆細胞を用いて、規定の調整法に基づき、分化、培養した。
白色脂肪が増殖した培地を１００μl吸引後、２５mg/ml及び８.５mg/mlの濃度に水−エタノール(１:１)に溶解した生薬抽出物（乾燥品）を、各Well当たり６μl加えた。その後wellに、１９４μlの脂肪細胞用培地を加え全量３００μlとした。このwellを５％ＣＯ2、３７℃で７２時間培養した。なお、生薬抽出物の最終濃度は、０.５mg/ml及び０.１７mg/mlである。
７２時間後、上清の培地を３０００rpm、１５min遠心し、上清をレプチンの定量に供した。
レプチン量はLeptin(human)ELISAKit(BIOMOL社)を使用して測定した。
Test using fat cells
Human white adipose precursor cells purchased from Zen-Bio were differentiated and cultured according to a specified adjustment method.
After aspirating 100 μl of the medium on which white fat had grown, 6 μl of herbal extract (dry product) dissolved in water-ethanol (1: 1) at a concentration of 25 mg / ml and 8.5 mg / ml was added to each well. Thereafter, 194 μl of adipocyte culture medium was added to the well to make a total volume of 300 μl. The wells were cultured for 72 hours at 37 ° C. with 5% CO 2 . The final concentration of the herbal extract is 0.5 mg / ml and 0.17 mg / ml.
After 72 hours, the supernatant medium was centrifuged at 3000 rpm for 15 min, and the supernatant was subjected to leptin quantification.
The amount of leptin was measured using Leptin (human) ELISA Kit (BIOMOL).
表１に示すように、実施例１〜１３のとおり調整した生薬エキスは、良好なレプチン産生抑制作用を示している。
As shown in Table 1, the crude drug extracts prepared as in Examples 1 to 13 show a good leptin production inhibitory action.
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