【特許請求の範囲】
【請求項１】 内耳感覚有毛細胞を損傷させ、損傷された内耳感覚有毛細胞と接触している支持細胞からの一以上の新規な内耳感覚有毛細胞の形成を促進するために使用される第一の医薬の調製における、抗生物質、化学療法剤、ポリ−Ｌ−リジンおよび塩化マグネシウムからなる群から選択される化学的薬剤の使用、および
新規な内耳感覚有毛細胞の形成を更に刺激するために前記内耳支持細胞に導入される第二の医薬の調製における、内耳支持細胞で活性な細胞周期阻害剤の阻害剤の使用。
【請求項２】
前記支持細胞が、ヘンゼン細胞、ダイテルス細胞、内柱細胞、境界細胞、外柱細胞からなる群から選択される、請求項１に記載の使用。
【請求項３】
前記化学的薬剤が抗生物質である、請求項１または２に記載の使用。
【請求項４】
前記抗生物質がアミノグリコシドである、請求項３に記載の使用。
【請求項５】
前記第一の医薬をインビトロにおいて使用する場合、前記抗生物質の濃度が０．０１ｍＭ乃至１０ｍＭである、請求項３に記載の使用。
【請求項６】
前記第一の医薬をインビボにおいて使用する場合、前記抗生物質の濃度が１００ｍｇ／ｋｇ／ｄ乃至１０００ｍｇ／ｋｇ／ｄである、請求項３に記載の使用。
【請求項７】
前記化学的薬剤が、シスプラチン、カルボプラチン、およびメトトレキサートからなる群から選択される化学療法剤であり、前記第一の医薬をインビトロにおいて使用する場合、前記化学的薬剤の濃度が０．０１ｍＭ乃至０．１ｍＭであり、または前記第一の医薬をインビボにおいて使用する場合、前記化学的薬剤の濃度が５ｍｇ／ｋｇ／ｄ乃至１０ｍｇ／ｋｇ／ｄである、請求項１に記載の使用。
【請求項８】
前記化学的薬剤が、ポリ−Ｌ−リジンおよび塩化マグネシウムからなる群から選択され、前記第一の医薬をインビトロにおいて使用する場合、ポリ−Ｌ−リジンの濃度が０．１ｍＭ乃至１．０ｍＭであり、塩化マグネシウムの濃度が５ｍＭ乃至１００ｍＭの範囲である、請求項１に記載の使用。
【請求項９】
前記第一の医薬が注射によって内耳に送達されるのに適している、請求項１に記載の使用。
【請求項１０】
前記第一の医薬がカニューレを通じて内耳に送達されるのに適している、請求項１に記載の使用。
【請求項１１】
前記細胞周期阻害剤の阻害剤がアンチセンス核酸分子である、請求項１に記載の使用。
【請求項１２】
前記アンチセンス核酸分子が、ストリンジェントな条件下で、ｐ５７Ｋｉｐ２、ｐ２７Ｋｉｐ１、ｐ２１Ｃｉｐ１、ｐ１９Ｉｎｋ４ｄ、ｐ１８Ｉｎｋ４ｃ、ｐ１５Ｉｎｋ４ｂ、及びｐ１６Ｉｎｋ４ａからなる群から選択される細胞周期阻害剤をコードする核酸分子にハイブリダイズする、請求項１１に記載の使用。
【請求項１３】
前記アンチセンス核酸分子が、５５℃での２×ＳＳＣを超えるハイブリダイゼーションストリンジェンシー下で、配列番号６、８、１０、１２、１４、１６、及び１８からなる群から選択される核酸配列を含む核酸分子にハイブリダイズする、請求項１２に記載の使用。
【請求項１４】
内耳の聴覚機能を改善するための医薬の調製における、抗生物質、化学療法剤、ポリ−Ｌ−リジンおよび塩化マグネシウムからなる群から選択される化学的薬剤を含み、かつ内耳支持細胞で活性な細胞周期阻害剤の阻害剤を含む組成物の使用。
【請求項１５】
前記第一の医薬が前記第二の医薬と合体している、請求項１に記載の使用。
【請求項１６】
支持細胞からの一以上の新規な内耳感覚有毛細胞の形成を促進するための医薬の調製における、内耳支持細胞で活性な細胞周期阻害剤の阻害剤を含む組成物の使用。
【請求項１７】
抗生物質、化学療法剤、ポリ−Ｌ−リジンおよび塩化マグネシウムからなる群から選択される化学的薬剤により損傷された支持細胞からの一以上の新規な内耳感覚有毛細胞の形成を促進するための医薬の調製において前記組成物を使用する、請求項１６に記載の使用。
【請求項１８】
前記細胞周期阻害剤の阻害剤が核酸分子である、請求項１６に記載の使用。
【請求項１９】
前記核酸分子が、ストリンジェントな条件下で、ｐ５７Ｋｉｐ２、ｐ２７Ｋｉｐ１、ｐ２１Ｃｉｐ１、ｐ１９Ｉｎｋ４ｄ、ｐ１８Ｉｎｋ４ｃ、ｐ１５Ｉｎｋ４ｂ、及びｐ１６Ｉｎｋ４ａからなる群から選択される細胞周期阻害剤をコードする核酸分子にハイブリダイズする、請求項１８に記載の使用。
【請求項２０】
前記核酸分子が、５５℃での２×ＳＳＣを超えるハイブリダイゼーションストリンジェンシー下で、配列番号６、８、１０、１２、１４、１６、及び１８からなる群から選択される核酸配列を含む核酸分子にハイブリダイズする、請求項１９に記載の使用。
【請求項２１】
内耳の聴覚機能を改善させるための医薬であって、一以上の新規な内耳支持細胞の形成を促進する条件下で、第一の内耳支持細胞を損傷させるために使用される医薬の調製における、抗生物質、化学療法剤、ポリ−Ｌ−リジンおよび塩化マグネシウムからなる群から選択される化学的薬剤の使用。
【請求項２２】
新規な内耳感覚有毛細胞の形成を更に刺激するために内耳支持細胞に導入される第二の医薬の調製における、内耳支持細胞で活性な細胞周期阻害剤の阻害剤の使用を更に含む、請求項２１に記載の使用。
[Claims]
1. The method of claim 1 wherein the inner ear sensory hair cells are damaged to promote the formation of one or more new inner ear sensory hair cells from supporting cells in contact with the damaged inner ear sensory hair cells. The use of a chemical agent selected from the group consisting of antibiotics, chemotherapeutic agents, poly-L-lysine and magnesium chloride in the preparation of a first medicament, and further stimulates the formation of new inner ear sensory hair cells The use of an inhibitor of a cell cycle inhibitor active in inner ear support cells in the preparation of a second medicament to be introduced into said inner ear support cells to perform the same.
(2)
The use according to claim 1, wherein the supporting cells are selected from the group consisting of Hensen cells, Ditellus cells, inner column cells, border cells, and outer column cells.
(3)
3. Use according to claim 1 or 2, wherein the chemical agent is an antibiotic.
(4)
4. Use according to claim 3, wherein the antibiotic is an aminoglycoside.
(5)
The use according to claim 3, wherein when the first medicament is used in vitro, the concentration of the antibiotic is 0.01 mM to 10 mM.
6.
4. The use according to claim 3, wherein when the first medicament is used in vivo, the concentration of the antibiotic is between 100 mg / kg / d and 1000 mg / kg / d.
7.
The chemical agent is a chemotherapeutic agent selected from the group consisting of cisplatin, carboplatin, and methotrexate, and when the first medicament is used in vitro, the concentration of the chemical agent is 0.01 mM to 0.1 mM. The use according to claim 1, wherein at 1 mM or when the first medicament is used in vivo, the concentration of the chemical agent is between 5 mg / kg / d and 10 mg / kg / d.
Claim 8.
When the chemical agent is selected from the group consisting of poly-L-lysine and magnesium chloride, and the first medicament is used in vitro, the concentration of poly-L-lysine is 0.1 mM to 1.0 mM. The use according to claim 1, wherein the concentration of magnesium chloride ranges from 5 mM to 100 mM.
9.
The use according to claim 1, wherein the first medicament is adapted to be delivered to the inner ear by injection.
10.
The use according to claim 1, wherein the first medicament is adapted to be delivered to the inner ear via a cannula.
11.
The use according to claim 1, wherein the inhibitor of the cell cycle inhibitor is an antisense nucleic acid molecule.
12.
The antisense nucleic acid molecule hybridizes under stringent conditions to a nucleic acid molecule encoding a cell cycle inhibitor selected from the group consisting of p57Kip2, p27Kip1, p21Cip1, p19Ink4d, p18Ink4c, p15Ink4b, and p16Ink4a. Use according to item 11.
Claim 13
The antisense nucleic acid molecule comprises a nucleic acid sequence selected from the group consisting of SEQ ID NOs: 6, 8, 10, 12, 14, 16, and 18 under hybridization stringency of greater than 2 × SSC at 55 ° C. 13. Use according to claim 12, which hybridizes to a nucleic acid molecule.
14.
A cell comprising a chemical agent selected from the group consisting of antibiotics, chemotherapeutic agents, poly-L-lysine and magnesium chloride in the preparation of a medicament for improving the auditory function of the inner ear and being active in inner ear support cells Use of a composition comprising an inhibitor of a cycle inhibitor.
15.
The use according to claim 1, wherein the first medicament is combined with the second medicament.
16.
Use of a composition comprising an inhibitor of a cell cycle inhibitor active in inner ear support cells in the preparation of a medicament for promoting the formation of one or more new inner ear sensory hair cells from the support cells.
17.
For promoting the formation of one or more novel inner ear sensory hair cells from supporting cells damaged by a chemical agent selected from the group consisting of antibiotics, chemotherapeutic agents, poly-L-lysine and magnesium chloride 17. Use according to claim 16, wherein said composition is used in the preparation of a medicament.
18.
17. Use according to claim 16, wherein the inhibitor of the cell cycle inhibitor is a nucleic acid molecule.
(19)
19. The nucleic acid molecule hybridizes under stringent conditions to a nucleic acid molecule encoding a cell cycle inhibitor selected from the group consisting of p57Kip2, p27Kip1, p21Cip1, p19Ink4d, p18Ink4c, p15Ink4b, and p16Ink4a. Use as described in.
20.
The nucleic acid molecule comprises a nucleic acid sequence selected from the group consisting of SEQ ID NOs: 6, 8, 10, 12, 14, 16, and 18 under hybridization stringency of greater than 2 × SSC at 55 ° C. The use according to claim 19, which hybridizes to
21.
In the preparation of a medicament for improving the hearing function of the inner ear, wherein the medicament used to damage the first inner ear support cells under conditions that promote the formation of one or more new inner ear support cells, Use of a chemical agent selected from the group consisting of antibiotics, chemotherapeutic agents, poly-L-lysine and magnesium chloride.
22.
The method further comprising using an inhibitor of a cell cycle inhibitor active in inner ear support cells in the preparation of a second medicament to be introduced into inner ear support cells to further stimulate the formation of new inner ear sensory hair cells. Item 22. The use according to Item 21.