【０００１】
【発明の属する技術分野】
本発明は、レプトスペルムム・ペテルソニ（Ｌｅｐｔｏｓｐｅｒｍｕｍ ｐｅｔｅｒｓｏｎｉｉ）の抽出物を有効成分として含有することを特徴とする抗ウイルス組成物、並びに該抗ウイルス組成物が、医薬組成物、飲食品組成物又は飼料組成物であることに関するものである。さらに詳しくは、広域スペクトルの病原性ウイルスに対して抗ウイルス作用を有し、感染したヒトおよび動物の感染症による症状を改善させる作用を有する抗ウイルス組成物に関するものである。
【０００２】
【従来の技術】
自然界には、ヒトや動物に感染症を引き起こす種々の微生物が存在する。それらの微生物は、細菌、マイコプラズマ、リケッチア、クラミジア、真菌、原虫、ウイルスに分類される。ウイルスの遺伝物質はデオキシリボ核酸（ＤＮＡ）あるいはリボ核酸（ＲＮＡ）であるが、細菌やその他の微生物がエネルギー代謝系を持ち、従属栄養で増殖するのに対し、ウイルスは、宿主細胞に寄生することによってのみ増殖が可能である〔医科ウイルス学、改訂第２版、大里外誉郎編、南江堂発行、第１５〜２４ページ、２０００年〕。
【０００３】
インフルエンザウイルスによる感染症は、冬期に流行するが、悪性腫瘍、心疾患、脳血管疾患等を基礎疾患に持つ患者、老人、乳幼児はインフルエンザ感染のハイリスク群であり、命にかかわる重篤な感染につながることも多い。また、ＲＳ（Ｒｅｓｐｉｒａｔｏｒｙ ｓｙｎｃｙｔｉａｌ）ウイルスは、通常、健康な成人には感染しないが、小児では上部呼吸器感染の主要な原因となっている。
【０００４】
ポリオウイルスは、ピコナルウイルス科のエンテロウイルス属に属するＲＮＡウイルスであり、ポリオ（急性灰白髄炎、小児麻痺ともいう。）を起こすウイルスとして知られている。近年、我が国では、効果的な生ワクチン投与で、野生型ウイルスによるポリオ患者の発生は無くなったが、地球レベルでは依然としてその脅威に曝されている国は多く、我が国においても輸入感染の危険が未だ懸念されている。ポリオウイルスワクチンは、ポリオ流行の阻止に劇的な効果があるものの、一方で経口投与が可能な弱毒生ワクチンでは、稀に毒力復帰により、非投与者、家族内接触者にワクチン関連ポリオ麻痺が発生している。
【０００５】
ヘルペスウイルスによる感染症は、皮膚や粘膜に病変を起こす。新生児、小児、妊婦、副腎皮質ホルモン使用者などでは、ヘルペスウイルス感染によって体内の臓器が侵され、重症になる場合がある。
【０００６】
微生物による感染症のなかでも、特に細菌感染症に対しては抗生物質が開発されており、効果的な治療が行なわれているが、ウイルス感染症には抗生物質が作用しない。抗生物質による化学療法の急速な進歩に比べると、ウイルス感染症の治療薬としての抗ウイルス組成物の開発は、現在でもそれほど進んでいないのが現状である。いままでに開発された抗ウイルス組成物には、ウイルス核酸の複製をターゲットとする核酸類似体のアシクロビル、アジドチミジンやリバビリン、ノイラミニダーゼ阻害剤のザナミビル（４−グアニジノノイラミン酸）、プロテアーゼ阻害剤のインジナビルなどがある。これらの医薬品としての抗ウイルス組成物は、薬効が強いものの、投与による副作用は臨床上の大きな問題点を有していた。このような状況から、安全で副作用が少なく、日常の食生活から長期間にわたって摂取することが可能な抗ウイルス作用を含有する有効成分の探究が続けられてきた。
【０００７】
レプトスペルムム・ペテルソニは、一般的にはレモンセントティーツリーと呼ばれ、オーストラリア産のティーツリーの一種であり、低木で、やや幅広の線形葉が特徴で、明るい緑葉は表面に光沢があり美しく、強いレモンの香りを有する。ティーツリーの木から採れる精油分はティーツリーオイルと呼ばれており、従来、天然保存剤や化粧品などに使用され、抗菌作用があることが知られている。レプトスペルムム・ペテルソニの水蒸気蒸留物である精油分に関しては、現在に至るまで、その生理作用は十分に研究されていないが、黄色ブドウ球菌や大腸菌に対して高い抗菌活性が知られている。しかしながら、ティーツリーオイル、中でもレプトスペルムム・ペテルソニ抽出物に抗ウイルス作用を有することに関しては、現在に至るまで全く知られていない。
【０００８】
【発明が解決しようとする課題】
本発明者等は、前記の事情に鑑み、抗ウイルス作用を有し、主に食品として経口的に摂取することが可能な有効成分について鋭意探索を行っていたところ、フトモモ科の常緑低木であるレプトスペルムム・ペテルソニの水蒸気蒸留物である精油分にヒトや動物の感染症の原因となるウイルスに対する抗ウイルス作用を見出し、本発明を完成させた。
【０００９】
本発明の目的は、安全性に優れ、ヒトや動物の感染症の原因となる病原性ウイルスに対して抗ウイルス作用を有する抗ウイルス組成物を提供することである。
【００１０】
本発明の他の目的は、前記抗ウイルス組成物を有効成分として含有する医薬品組成物、飲食品組成物および飼料組成物を提供することである。
【００１１】
【課題を解決するための手段】
前記課題を解決する本発明は、レプトスペルムム・ペテルソニ（Ｌｅｐｔｏｓｐｅｒｍｕｍｐｅｔｅｒｓｏｎｉｉ）抽出物を有効成分として含有することを特徴とする抗ウイルス組成物であって、以下の１）〜３）の記載を望ましい態様とする。
【００１２】
１）レプトスペルムム・ペテルソニ抽出物が、抽出溶媒として水、有機溶媒又はこれらの混合物を用いて抽出し、次いで水蒸気蒸留して得られた抽出物であること。
２）抗ウイルス組成物が、インフルエンザウイルス、ＲＳウイルス、ヘルペスウイルス、又はポリオウイルスに対する抗ウイルス作用を有すること。
３）抗ウイルス組成物が、医薬組成物、飲食品組成物又は飼料組成物であること。
【００１３】
【発明の実施の形態】
次に、本発明の好ましい実施態様について詳細に説明する。ただし、本発明は以下の好ましい実施態様に限定されず、本発明の範囲内で自由に変更することができるものである。尚、本明細書において百分率は特に断りのない限り質量による表示である。
【００１４】
本発明において、抗ウイルス作用とは、ヒトや動物の感染症の原因となる病原性ウイルスの感染性を不活性化する作用、あるいは既にヒトおよび動物細胞に感染したウイルスの細胞内における増殖を抑制する作用を意味する。
【００１５】
本発明において、抗ウイルス組成物とは、ヒトや動物に感染症を引き起こす病原性ウイルスの感染性を不活性化させる作用を持つ成分、あるいは既に病原性ウイルスに感染したヒトおよび動物の感染症による症状を改善させる作用を持つ成分を含有していることをいい、ヒトに対する安全性が高く、日常的に摂取することによってウイルスに対する感染防御効果が発揮される特徴を併せ持つ。
【００１６】
本発明の組成物は、レプトスペルムム・ペテルソニ抽出物それ自体であってもよいし、レプトスペルムム・ペテルソニ抽出物以外の成分を含有してもよい。レプトスペルムム・ペテルソニ抽出物以外の成分は、組成物の形態に応じて適宜選択できる。
【００１７】
本発明の抗ウイルス組成物は、レプトスペルムム・ペテルソニ（学名：Ｌｅｐｔｏｓｐｅｒｍｕｍ ｐｅｔｅｒｓｏｎｉｉ。以下、レモンセントティーツリーと記載することがある。）の新鮮な葉や小枝の先端部分等を抽出溶媒として水、有機溶媒又はこれらの混合物を用いて抽出し、次いで抽出物を水蒸気蒸留し、得られた抽出物である精油分（以下、レモンセントティーツリーオイルと記載することがある。）を利用することによって調製することができる。尚、本発明において水蒸気蒸留とは、レプトスペルムム・ペテルソニを水、有機溶媒又はこれらの混合物を用いて抽出した抽出物に水蒸気を吹き込んで、水蒸気と共に物質を留出させる操作を意味する。
【００１８】
また、食品成分、食品原料、健康食品等として入手可能な市販のレモンセントティーツリーオイルを、本発明の抗ウイルス組成物の有効成分として使用することも可能である。
【００１９】
本発明の抗ウイルス組成物の抗ウイルス活性は常法により、例えば動物培養細胞を用いたプラーク抑制法により測定することができる。例えば、ウイルスを加えない培養系、及びウイルスを加えるが抗ウイルス組成物を加えない培養系をコントロールとし、プラーク形成数を測定して、コントロールに対する割合（％）が５０％以下に抑制された場合に、抗ウイルス活性ありと判定することが可能である〔［アンチバイラル・リサーチ（Ａｎｔｉｖｉｒａｌ Ｒｅｓｅａｒｃｈ）、第２２巻、第１７５〜１８８ページ、１９９３年］、［ジャーナル・オブ・ゼネラル・バイロロジー（Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｇｅｎｅｒａｌ Ｖｉｒｏｌｏｇｙ）、第７１巻、第２１４９〜２１５５ページ、１９９０年］〕。
【００２０】
本発明の抗ウイルス組成物の有効成分であるレプトスペルムム・ペテルソニ抽出物による、病原性ウイルス感染細胞における、ウイルス増殖に対する抑制効果は、少なくとも０．００８ｍｇ／ｍｌ以上の濃度で有効であり、特に０．０１〜０．１ｍｇ／ｍｌが好適である。また、本発明の抗ウイルス組成物は、インフルエンザウイルス、ＲＳウイルス、ヘルペスウイルス、ポリオウイルス等のウイルスに特に好適に抗ウイルス作用を示し、これらウイルスが原因の感染症による症状を改善させる作用を有する。
【００２１】
本発明の組成物の形態は特に限定されるものではなく、本発明の組成物の形態としては、例えば、医薬組成物、飲食品組成物、飼料組成物等が挙げられる。
【００２２】
本発明の医薬組成物は、例えば、レプトスペルムム・ペテルソニ抽出物を、薬学的に許容され得る賦形剤その他任意の添加剤を用いて製剤化することにより製造でき、製剤化したレプトスペルムム・ペテルソニ抽出物は抗ウイルス剤等として使用することができる。製剤化する場合、製剤中のレプトスペルムム・ペテルソニ抽出物の含有量は、通常０．００１〜１．０質量％、好ましくは０．０１〜０．１質量％である。本医薬組成物は、経口、経腸等の投与方法により適宜使用することが可能であり、投与形態としては、特に限定が無く必要に応じて適宜選択して使用され、錠剤、カプセル剤、顆粒剤、細粒剤、散剤等の経口剤、注射剤、坐剤等の非経口剤が挙げられる。
【００２３】
経口剤は、例えばデンプン、乳糖、白糖、マンニット、カルボキシメチルセルロース、コーンスターチ、無機塩類等を用いて常法に従って製造される。この種の製剤には、適宜前記賦形剤の他に、結合剤、崩壊剤、界面活性剤、滑沢剤、流動性促進剤、矯味剤、着色剤、香料等を使用することができる。それぞれの具体例は以下に示す如くである。
【００２４】
［結合剤］デンプン、デキストリン、アラビアゴム末、ゼラチン、ヒドロキシプロピルスターチ、メチルセルロース、カルボキシメチルセルロースナトリウム、ヒドロキシプロピルセルロース、結晶セルロース、エチルセルロース、ポリビニルピロリドン、マクロゴール。
【００２５】
［崩壊剤］デンプン、ヒドロキシプロピルスターチ、カルボキシメチルセルロースナトリウム、カルボキシメチルセルロースカルシウム、カルボキシメチルセルロース、低置換ヒドロキシプロピルセルロース。
【００２６】
［界面活性剤］ラウリル硫酸ナトリウム、大豆レシチン、ショ糖脂肪酸エステル、ポリソルベート８０。
【００２７】
［滑沢剤］タルク、ロウ類、水素添加植物油、ショ糖脂肪酸エステル、ステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸カルシウム、ステアリン酸アルミニウム、ポリエチレングリコール。
【００２８】
［流動性促進剤］軽質無水ケイ酸、乾燥水酸化アルミニウムゲル、合成ケイ酸アルミニウム、ケイ酸マグネシウム。
【００２９】
また、本発明の有効成分は、懸濁液、エマルジョン剤、シロップ剤、エリキシル剤としても投与することができ、これらの各種剤形には、矯味矯臭剤、着色剤を含有してもよい。
【００３０】
経口剤として所望の抗ウイルス効果を発揮するためには、摂取する人の年齢、体重、疾患の程度にもよるが、通常の成人で本発明の有効成分の重量として一日当たり、５〜１００ｍｇを摂取することが好ましい。
【００３１】
本発明の飲食品組成物は、例えば、レプトスペルムム・ペテルソニ抽出物にデキストリン、澱粉等の糖類；乳蛋白質、大豆蛋白質、ゼラチン等の蛋白質；アラニン、グルタミン、イソロイシン等のアミノ酸類；セルロース、ローカストビーンガム、キサンタンガム等の多糖類；大豆油、中鎖脂肪酸トリグリセリド等の油脂類等を配合することにより製造することができる。
【００３２】
飲食品組成物の形態としては、粉乳、加工乳、発酵乳、チーズ、バター、クリーム等の乳製品；乳酸飲料、清涼飲料、炭酸飲料、栄養飲料、果汁飲料等の飲料；アイスクリーム、シャーベット、氷菓等の冷菓類；そば、うどん等の麺類；飴、チューインガム、キャンディー、チョコレート、錠菓、ビスケット、ゼリー、ジャム、焼き菓子類等の菓子類；マーガリン、バター、ショートニング、ドレッシング等の油脂及び油脂加工食品；スープ、サラダ、パン、；経腸栄養剤：機能性食品等が例示される。
【００３３】
本発明の飼料組成物は、例えば、レプトスペルムム・ペテルソニ抽出物に、トウモロコシ、小麦、大麦、ライ麦等の穀類；大豆油粕、菜種油粕等の植物性油粕；フスマ、麦糠、米糠等の糠類；脱脂粉乳、ホエー、魚粉等の動物性飼料類；ビール酵母等の酵母類；第三リン酸カルシウム、炭酸カルシウム等の鉱物質飼料；油脂類；アミノ酸類；糖類等を配合することにより製造することが可能である。飼料組成物の形態としては、ペットフード、家畜飼料、養魚飼料等が挙げられる。
【００３４】
これによって、慢性ウイルス感染症患者、体調不良によってウイルス感染症の回帰発症の危険性が高いヒトを含む動物、特定のウイルス感染症が流行する時期のヒトを含む動物、乳幼児や高齢者等のウイルス感染症の予防および抗ウイルス治療薬服用時の補助的な食品等として抗ウイルス効果を享受することができる。
【００３５】
尚、レプトスペルムム・ペテルソニ抽出物は、医薬品や飲食品、飼料中の他の抗ウイルス成分と組み合わせて使用することも可能である。即ち、レプトスペルムム・ペテルソニ抽出物は、他の抗ウイルス成分を使用する際に併用して、その抗ウイルス効果を一層高めるという使用形態も可能であり、この場合は、実際の商品としては、医薬品及び飲食品、飼料中の他の抗ウイルス成分とレプトスペルムム・ペテルソニ抽出物を組み合わせて一つの抗ウイルス組成物とすることも可能であり、また、該抗ウイルス組成物を有効成分として含有する医薬品、及び飲食品、飼料を製造することも可能である。
【００３６】
次に試験例を示して本発明を詳細に説明する。
［試験例１］
本試験は、本発明の抗ウイルス組成物の有効成分であるレプトスペルムム・ペテルソニ抽出物の病原性ウイルス感染細胞におけるプラーク形成抑制作用を調べるために行った。
【００３７】
（１）試料の調製
レプトスペルムム・ペテルソニ抽出物として使用した市販のレモンセントティーツリーオイル（エアーグリーン社製）は、ジメチルスルホキシドに対し１０ｍｇ／ｍｌの濃度となるように溶解して試験試料を調製した。
【００３８】
供試ウイルスとしては、オルソミクソウイルス科（エンベロープを有する一本鎖ＲＮＡウイルス）に属するインフルエンザウイルスＡ／ＰＲ／８／３４（Ｈ１Ｎ１）株、パラミクソウイルス科（エンベロープを有する一本鎖ＲＮＡウイルス）に属するＲＳウイルスＡ２株、ヘルペスウイルス科（エンベロープを有する二本鎖ＤＮＡウイルス）に属する１型単純ヘルペスウイルス７４０１Ｈ株、ピルコナウイルス科（エンベロープを持たない一本鎖ＲＮＡウイルス）に属するポリオウイルス・タイプ１ Ｓａｂｉｎ株〔アンチバイラル・リサーチ（Ａｎｔｉｖｉｒａｌ Ｒｅｓｅａｒｃｈ）、第２２巻、第１７５〜１８８ページ、１９９３年〕の異なる性質を持つ４種類のウイルスを使用した。
【００３９】
培養動物細胞として、インフルエンザウイルスにはＭＤＣＫ細胞、ＲＳウイルスにはＨｅｐ２細胞、１型単純ヘルペスウイルスおよびポリオウイルスにはＶｅｒｏ細胞を組み合わせて使用した。これらの培養動物細胞は、血清添加イーグルＭＥＭ培地（日水製薬社製）を用いて直径６０ｍｍのディッシュ中で単層になるまで培養して調製した。
【００４０】
（２）試験方法
インフルエンザウイルスは、１％ウシ血清アルブミン添加リン酸緩衝生理食塩水０．２ｍｌ中に１００ＰＦＵ（プラーク形成単位：ｐｌａｑｕｅ−ｆｏｒｍｉｎｇ ｕｎｉｔ）となるように添加した。その他の供試ウイルスは、血清添加イーグルＭＥＭ培地０．２ｍｌ中に同じく１００ＰＦＵとなるように添加した。このウイルス液全量を直径６０ｍｍのディッシュで単層に培養した動物細胞に添加し、３７℃で１時間インキュベートした。この方法でインフルエンザウイルスを感染させた培養細胞には、レプトスペルムム・ペテルソニ抽出物のジメチルスルホキシド溶液５０μｌを添加した０．８％メチルセルロース添加培地５ｍｌを重層して３日間培養した。その他のウイルスを感染させた培養細胞には、レプトスペルムム・ペテルソニ抽出物のジメチルスルホキシド溶液５０μｌを添加した０．８％メチルセルロース添加イーグルＭＥＭ培地５ｍｌを重層して３日間培養した。コントロールには、ジメチルスルホキシド５０μｌだけを添加した培地を用いた。培養終了後の単層培養動物細胞を５％ホルマリン溶液で固定し、０．０３％メチレンブルー溶液で染色した。それぞれの試験試料を添加した単層培養動物細胞に検出されたプラーク形成数を測定し、コントロールに対する割合（％）を求めた。なお、これらの実験操作は、２回実施して平均値を算出した。
【００４１】
（３）試験結果
本試験の結果は表１に示すとおりである。レプトスペルムム・ペテルソニ抽出物のコントロールに対するプラーク形成の割合は、インフルエンザウイルスに対して０．０％、ＲＳウイルスに対して３．７％、１型単純ヘルペスウイルスに対して９．９％、ポリオウイルスに対して０．０％を示した。したがって、インフルエンザウイルス、ＲＳウイルス、１型単純ヘルペスウイルス、およびポリオウイルスが感染した動物細胞に対して、レプトスペルムム・ペテルソニ抽出物はプラーク形成を５０％以下に有意に抑制することが確認され、これらウイルスに対する抗ウイルス作用を有することが判明した。
【００４２】
【表１】
【００４３】
次に実施例を示して本発明を更に詳細に説明するが、本発明は以下の実施例に限定されるものではない。
【００４４】
【実施例】
［実施例１］
ホエー蛋白質酵素分解物（森永乳業社製）１０．８ｋｇ、デキストリン（昭和産業社製）３６ｋｇ、及び少量の水溶性ビタミンとミネラルを水２００ｋｇに溶解し、水相をタンク内に調製した。これとは別に、大豆サラダ油（太陽油脂社製）３ｋｇ、パーム油（太陽油脂社製）８．５ｋｇ、サフラワー油（太陽油脂社製）２．５ｋｇ、レシチン（味の素社製）０．２ｋｇ、脂肪酸モノグリセリド（花王社製）０．２ｋｇ、及び少量の脂溶性ビタミンを混合溶解し、油相を調製した。タンク内の水相に油相を添加し、攪拌して混合した後、７０℃で加温し、更に、ホモゲナイザーにより１４．７ＭＰａの圧力で均質化した。次いで、９０℃で１０分間殺菌した後、濃縮し、噴霧乾燥して、中間製品粉末約５９ｋｇを調製した。この中間製品粉末５０ｋｇに蔗糖（ホクレン社製）６．８ｋｇ、アミノ酸混合粉末（味の素社製）１６７ｇ、及びレプトスペルムム・ペテルソニ抽出物としてレモンセントティーツリーオイル（エアーグリーン社製）６０ｇを添加し、均一に混合して、レプトスペルムム・ペテルソニ抽出物を含有する抗ウイルス効果を有する経腸栄養食粉末約５６ｋｇを製造した。
【００４５】
［実施例２］
レプトスペルムム・ペテルソニ抽出物としてレモンセントティーツリーオイル（エアーグリーン社製）１ｇ、ラクチュロース粉末（森永乳業社製）１００ｇ、マルツデキストリン（松谷化学工業社製）６３５ｇ、脱脂粉乳（森永乳業社製）８５ｇ、ステビア甘味料（三栄源エフ・エフ・アイ社製）１ｇ、ヨーグルトフレーバー（三栄源エフ・エフ・アイ社製）５ｇ、グリセリン脂肪酸エステル製剤（理研ビタミン社製）２４ｇの各粉末を添加して均一に混合し、打錠機（木村製作所社製、ＫＴ−２型）により、直径８ｍｍのＲ杵を使用して打錠数を１０、錠剤重量１．０ｇ、及びモンサント硬度３．５〜５．０ｋｇの条件で圧縮圧力を設定して、連続的に打錠し、レプトスペルムム・ペテルソニ抽出物含有タブレット約８００錠を製造した。
【００４６】
【発明の効果】
以上詳記したとおり、本発明は、日常的に摂取可能な安全性の高いレプトスペルムム・ペテルソニ抽出物を有効成分として含有することを特徴とする抗ウイルス組成物、及びこれを含有する医薬組成物、飲食品組成物又は飼料組成物に関するものであり、本発明により奏される効果は次の通りである。
（１）既に病原性ウイルスに感染したヒトおよび動物の感染症による症状を改善させることが可能である。
（２）ヒトに対する安全性が高く、日常的に摂取することによってウイルスに対する感染防御効果を高めることができる。
（３）抗ウイルス作用を有する医薬品、及び飲食品、飼料を製造することができる。[0001]
TECHNICAL FIELD OF THE INVENTION
The present invention provides an antiviral composition comprising an extract of Leptospermum petersonii as an active ingredient, and a pharmaceutical composition, a food and drink composition, or a feed containing the antiviral composition. It relates to being a composition. More specifically, the present invention relates to an antiviral composition having an antiviral action against a broad spectrum of pathogenic viruses and having an action of ameliorating symptoms caused by infectious diseases of infected humans and animals.
[0002]
[Prior art]
There are various microorganisms in nature that cause infections in humans and animals. These microorganisms are classified into bacteria, mycoplasma, rickettsia, chlamydia, fungi, protozoa, and viruses. The virus's genetic material is deoxyribonucleic acid (DNA) or ribonucleic acid (RNA). Bacteria and other microorganisms have energy metabolism and multiply by heterotrophs, whereas viruses can infect host cells. [Medical Virology, Revised 2nd Edition, edited by Yoshio Osato, edited by Nankodo, pp. 15-24, 2000].
[0003]
Influenza virus infection is widespread in winter, but patients, elderly people and infants with underlying diseases such as malignant tumors, heart disease, cerebrovascular disease, etc. are at high risk of influenza infection and serious and life-threatening infections Often leads to. In addition, RS (Respiratory syncytial) virus does not usually infect healthy adults, but is a major cause of upper respiratory infection in children.
[0004]
Poliovirus is an RNA virus belonging to the genus Enterovirus of the family Piconalviridae, and is known as a virus that causes polio (also called acute poliomyelitis, pediatric paralysis). In recent years, effective live vaccine administration has eliminated polio cases due to wild-type virus in Japan in recent years.However, many countries are still at the global level, and there is still a danger of imported infection in Japan. There is concern. Poliovirus vaccines have a dramatic effect on stopping the polio epidemic, while oral attenuated live vaccines rarely revert to virulence, causing vaccine-related polio paralysis in non-administered and family contacts Has occurred.
[0005]
Herpesvirus infections cause skin and mucous membrane lesions. In newborns, children, pregnant women, and corticosteroid users, herpes virus infections can cause internal organs to become severe and severe.
[0006]
Among microbial infections, antibiotics have been developed especially for bacterial infections, and effective treatments have been performed. However, antibiotics do not work for viral infections. Compared with the rapid progress of chemotherapy with antibiotics, the development of antiviral compositions as therapeutics for viral infections has not progressed much today. The antiviral compositions that have been developed include the nucleic acid analogs acyclovir, azidothymidine and ribavirin, which target viral nucleic acid replication, zanamivir (4-guanidino neuraminic acid), a neuraminidase inhibitor, and indinavir, a protease inhibitor. and so on. Although these antiviral compositions as pharmaceuticals have strong medicinal effects, side effects due to administration have had a serious clinical problem. Under such circumstances, the search for an active ingredient containing an antiviral effect that is safe, has few side effects, and can be taken from a daily diet for a long period of time has been continued.
[0007]
Leptospermum Petersoni, commonly referred to as Lemon Saint Tea Tree, is a type of Australian tea tree that is shrubs, characterized by slightly wider linear leaves, with bright green leaves having a glossy and beautiful surface. Has a strong lemon scent. The essential oil extracted from the tea tree tree is called tea tree oil, which is conventionally used in natural preservatives and cosmetics, and is known to have an antibacterial effect. Although the physiological effects of essential oils, which are steam distillates of Leptospermum petersonii, have not been sufficiently studied to date, high antibacterial activities against Staphylococcus aureus and Escherichia coli are known. However, it is not known until now that tea tree oil, especially Leptospermum petersonii extract, has an antiviral effect.
[0008]
[Problems to be solved by the invention]
In view of the above circumstances, the present inventors have conducted an eager search for an active ingredient which has an antiviral effect and can be orally ingested mainly as a food, and is an evergreen shrub of the family Myrtaceae. The present inventors have found an antiviral action against viruses that cause infectious diseases in humans and animals in the essential oil, which is a steam distillate of Leptospermum petersonii, and completed the present invention.
[0009]
An object of the present invention is to provide an antiviral composition which is excellent in safety and has an antiviral action against a pathogenic virus which causes human or animal infectious diseases.
[0010]
Another object of the present invention is to provide a pharmaceutical composition, a food and drink composition, and a feed composition containing the antiviral composition as an active ingredient.
[0011]
[Means for Solving the Problems]
The present invention for solving the above-mentioned problems is an antiviral composition containing an extract of Leptospermum petersoni as an active ingredient, and the following aspects 1) to 3) are desirable. And
[0012]
1) The extract of Leptospermum petersonii is an extract obtained by extracting with water, an organic solvent or a mixture thereof as an extraction solvent and then performing steam distillation.
2) The antiviral composition has an antiviral action against influenza virus, respiratory syncytial virus, herpes virus, or poliovirus.
3) The antiviral composition is a pharmaceutical composition, a food and drink composition, or a feed composition.
[0013]
BEST MODE FOR CARRYING OUT THE INVENTION
Next, preferred embodiments of the present invention will be described in detail. However, the present invention is not limited to the following preferred embodiments, and can be freely modified within the scope of the present invention. In addition, in this specification, the percentage is represented by mass unless otherwise specified.
[0014]
In the present invention, the antiviral action refers to an action of inactivating the infectivity of a pathogenic virus that causes an infectious disease of humans or animals, or suppressing the intracellular growth of a virus already infected to human and animal cells. Action.
[0015]
In the present invention, an antiviral composition is a component having an action of inactivating the infectivity of a pathogenic virus causing an infectious disease in humans or animals, or an infectious disease of humans and animals already infected with a pathogenic virus. Contains ingredients that have the effect of improving symptoms, is highly safe for humans, and has the characteristic of exhibiting a protective effect against viruses when taken daily.
[0016]
The composition of the present invention may be the extract of Leptospermum petersonii itself or may contain components other than the extract of Leptospermum petersonii. Components other than Leptospermum petersoni extract can be appropriately selected depending on the form of the composition.
[0017]
The antiviral composition of the present invention is obtained by extracting fresh leaves and twigs of Leptospermum petersonii (scientific name: Leptospermum petersonii; hereinafter sometimes referred to as lemon cent tea tree) as an extraction solvent with water, Extraction is carried out using an organic solvent or a mixture thereof, and then the extract is subjected to steam distillation, and the obtained extract is used as an essential oil (hereinafter sometimes referred to as lemon cent tea tree oil). Can be prepared. In the present invention, steam distillation refers to an operation of blowing steam into an extract obtained by extracting Leptospermum petersoni using water, an organic solvent, or a mixture thereof to distill a substance together with the steam.
[0018]
In addition, commercially available lemon cent tea tree oil available as food ingredients, food raw materials, health foods, and the like can be used as the active ingredient of the antiviral composition of the present invention.
[0019]
The antiviral activity of the antiviral composition of the present invention can be measured by a conventional method, for example, by a plaque suppression method using cultured animal cells. For example, when the number of plaques formed was measured using a culture system without virus and a culture system with virus but without antiviral composition as a control, and the ratio (%) to the control was suppressed to 50% or less. In addition, it is possible to determine that there is antiviral activity [[Antiviral Research, Vol. 22, pp. 175-188, 1993]], [Journal of General Virology (Journal of General Virology), Vol. 71, pp. 2149-2155, 1990]].
[0020]
The inhibitory effect on virus growth in pathogenic virus-infected cells by the extract of Leptospermum petersonii, which is the active ingredient of the antiviral composition of the present invention, is effective at a concentration of at least 0.008 mg / ml or more. 0.01-0.1 mg / ml is preferred. In addition, the antiviral composition of the present invention exhibits an antiviral effect particularly preferably against viruses such as influenza virus, respiratory syncytial virus, herpes virus, and polio virus, and has an effect of improving symptoms caused by infectious diseases caused by these viruses. .
[0021]
The form of the composition of the present invention is not particularly limited, and examples of the form of the composition of the present invention include a pharmaceutical composition, a food and drink composition, a feed composition and the like.
[0022]
The pharmaceutical composition of the present invention can be produced, for example, by formulating Leptospermum ptersoni extract using a pharmaceutically acceptable excipient or any other additive, and the formulated leptospermum -The Petersoni extract can be used as an antiviral agent and the like. When formulated, the content of the extract of Leptospermum ptersoni in the formulation is usually 0.001 to 1.0% by mass, preferably 0.01 to 0.1% by mass. The present pharmaceutical composition can be appropriately used depending on the administration method such as oral and enteral administration. The administration form is not particularly limited and may be appropriately selected and used as needed, and may be used as tablets, capsules, and granules. Preparations, oral preparations such as fine granules and powders, and parenteral preparations such as injections and suppositories.
[0023]
Oral preparations are produced by a conventional method using, for example, starch, lactose, sucrose, mannitol, carboxymethylcellulose, corn starch, inorganic salts and the like. In this type of preparation, a binder, a disintegrant, a surfactant, a lubricant, a fluidity promoter, a flavoring agent, a coloring agent, a flavor, and the like can be appropriately used in addition to the excipient. Specific examples are as follows.
[0024]
[Binder] Starch, dextrin, gum arabic powder, gelatin, hydroxypropyl starch, methylcellulose, sodium carboxymethylcellulose, hydroxypropylcellulose, crystalline cellulose, ethylcellulose, polyvinylpyrrolidone, macrogol.
[0025]
[Disintegrant] Starch, hydroxypropyl starch, sodium carboxymethylcellulose, calcium carboxymethylcellulose, carboxymethylcellulose, low-substituted hydroxypropylcellulose.
[0026]
[Surfactant] Sodium lauryl sulfate, soybean lecithin, sucrose fatty acid ester, polysorbate 80.
[0027]
[Lubricant] Talc, wax, hydrogenated vegetable oil, sucrose fatty acid ester, magnesium stearate, calcium stearate, aluminum stearate, polyethylene glycol.
[0028]
[Fluidity accelerator] Light anhydrous silicic acid, dried aluminum hydroxide gel, synthetic aluminum silicate, magnesium silicate.
[0029]
The active ingredient of the present invention can also be administered as a suspension, emulsion, syrup, and elixir, and these various dosage forms may contain a flavoring agent and a coloring agent.
[0030]
In order to exhibit the desired antiviral effect as an oral preparation, it depends on the age, weight, and degree of disease of the person who takes it, but 5 to 100 mg per day as the weight of the active ingredient of the present invention in a normal adult. Ingestion is preferred.
[0031]
The food or drink composition of the present invention may be, for example, a sugar such as dextrin, starch, etc .; a protein, such as milk protein, soybean protein, gelatin, etc .; an amino acid, such as alanine, glutamine, isoleucine; cellulose, locust. It can be produced by blending polysaccharides such as bean gum and xanthan gum; oils and fats such as soybean oil and medium-chain fatty acid triglyceride.
[0032]
The form of the food and drink composition includes dairy products such as powdered milk, processed milk, fermented milk, cheese, butter, and cream; beverages such as lactic acid drinks, soft drinks, carbonated drinks, nutritional drinks, and fruit juice drinks; ice cream, sherbet, Cold desserts such as frozen desserts; noodles such as buckwheat and udon; sweets such as candy, chewing gum, candy, chocolate, tablet confectionery, biscuits, jelly, jam, baked confectioneries; fats and oils and fats such as margarine, butter, shortening and dressing Processed foods; soups, salads, breads; enteral nutrition: functional foods and the like.
[0033]
The feed composition of the present invention is obtained by adding, for example, cereals such as corn, wheat, barley and rye; vegetable oil lees such as soybean oil lees and rapeseed lees; bran such as bran, wheat bran and rice bran to Leptospermum petersonii extract Animal feeds such as skim milk powder, whey and fish meal; yeasts such as beer yeast; mineral feeds such as tricalcium phosphate and calcium carbonate; oils and fats; amino acids; Is possible. Examples of the form of the feed composition include pet food, livestock feed, fish feed, and the like.
[0034]
As a result, patients with chronic viral infections, animals including humans who are at high risk of recurring viral infections due to poor health, animals including humans at the time when a specific viral infection is prevalent, and viruses in infants and the elderly The antiviral effect can be enjoyed as a supplementary food or the like when preventing infectious diseases and taking antiviral therapeutics.
[0035]
It should be noted that the Leptospermum petersonii extract can be used in combination with other antiviral components in pharmaceuticals, foods and drinks, and feeds. That is, Leptosprum petersoni extract can be used in combination with other antiviral components to further enhance the antiviral effect.In this case, as an actual product, Pharmaceuticals and foods and beverages, it is also possible to combine Leptospermum petersonii extract with other antiviral components in feed to form one antiviral composition, and also contain the antiviral composition as an active ingredient It is also possible to manufacture pharmaceuticals, foods and drinks, and feeds.
[0036]
Next, the present invention will be described in detail with reference to test examples.
[Test Example 1]
This test was carried out to examine the effect of Leptospermum petersonii extract, an active ingredient of the antiviral composition of the present invention, on plaque formation in pathogenic virus-infected cells.
[0037]
(1) Preparation of sample Commercially available lemon cent tea tree oil (manufactured by Air Green) used as an extract of Leptospermum petersonii was dissolved in dimethyl sulfoxide to a concentration of 10 mg / ml to prepare a test sample. Prepared.
[0038]
The test viruses include influenza virus A / PR / 8/34 (H1N1) strain belonging to the family Orthomyxoviridae (envelope-containing single-stranded RNA virus) and paramyxoviridae (single-stranded RNA virus having an envelope). , A herpes simplex virus strain 7401H belonging to the herpesviridae family (double-stranded DNA virus having an envelope), and a poliovirus belonging to the family Pirconaviridae (single-stranded RNA virus having no envelope). Four types of viruses having different properties of the type 1 Sabin strain (Antiviral Research, Vol. 22, pp. 175-188, 1993) were used.
[0039]
As cultured animal cells, MDCK cells were used for influenza virus, Hep2 cells for RS virus, and Vero cells for type 1 herpes simplex virus and poliovirus. These cultured animal cells were prepared by culturing to a monolayer in a dish having a diameter of 60 mm using a serum-added Eagle MEM medium (manufactured by Nissui Pharmaceutical Co., Ltd.).
[0040]
(2) Test method Influenza virus was added to 0.2 ml of phosphate buffered saline supplemented with 1% bovine serum albumin so as to have a concentration of 100 PFU (plaque-forming unit). Other test viruses were added to 0.2 ml of Eagle's MEM medium supplemented with serum to give 100 PFU. The whole amount of the virus solution was added to animal cells cultured in a monolayer in a dish having a diameter of 60 mm, and incubated at 37 ° C. for 1 hour. Cultured cells infected with the influenza virus by this method were overlaid with 5 ml of a 0.8% methylcellulose-supplemented medium supplemented with 50 μl of a dimethylsulfoxide solution of Leptospermum petersonii extract and cultured for 3 days. Cultured cells infected with other viruses were overlaid with 5 ml of 0.8% methylcellulose-added Eagle's MEM medium supplemented with 50 μl of a dimethylsulfoxide solution of Leptospermum petersonii extract and cultured for 3 days. As a control, a medium containing only 50 μl of dimethyl sulfoxide was used. After completion of the culture, the monolayer cultured animal cells were fixed with a 5% formalin solution and stained with a 0.03% methylene blue solution. The number of plaques detected in the monolayer cultured animal cells to which each test sample was added was measured, and the ratio (%) to the control was determined. In addition, these experimental operation was performed twice and the average value was calculated.
[0041]
(3) Test results The results of this test are as shown in Table 1. The percentage of plaque formation relative to the control of Leptosprum petersonii extract was 0.0% for influenza virus, 3.7% for respiratory syncytial virus, 9.9% for herpes simplex virus 1 and polio. 0.0% against the virus. Therefore, it was confirmed that Leptosprum petersoni extract significantly suppressed plaque formation to 50% or less in animal cells infected with influenza virus, RS virus, herpes simplex virus 1, and poliovirus, It was found to have antiviral activity against these viruses.
[0042]
[Table 1]
Next, the present invention will be described in more detail with reference to examples, but the present invention is not limited to the following examples.
[0044]
【Example】
[Example 1]
10.8 kg of whey protein enzyme digest (manufactured by Morinaga Milk Industry Co., Ltd.), 36 kg of dextrin (manufactured by Showa Sangyo Co., Ltd.), and small amounts of water-soluble vitamins and minerals were dissolved in 200 kg of water, and an aqueous phase was prepared in the tank. Separately, 3 kg of soybean salad oil (manufactured by Taiyo Yushi), 8.5 kg of palm oil (manufactured by Taiyo Yushi), 2.5 kg of safflower oil (manufactured by Taiyo Yushi), 0.2 kg of lecithin (manufactured by Ajinomoto), An oil phase was prepared by mixing and dissolving 0.2 kg of fatty acid monoglyceride (manufactured by Kao Corporation) and a small amount of fat-soluble vitamin. The oil phase was added to the water phase in the tank, mixed with stirring, heated at 70 ° C., and homogenized with a homogenizer at a pressure of 14.7 MPa. Next, the mixture was sterilized at 90 ° C. for 10 minutes, concentrated, and spray-dried to prepare about 59 kg of an intermediate product powder. To 50 kg of this intermediate product powder, 6.8 kg of sucrose (manufactured by Hokuren), 167 g of mixed powder of amino acid (manufactured by Ajinomoto Co.), and 60 g of lemon cent tea tree oil (manufactured by Air Green) as an extract of Leptospermum petersonii are added. About 56 kg of an enteral nutritional powder having an antiviral effect and containing the extract of Leptospermum petersonii was mixed uniformly.
[0045]
[Example 2]
1 g of lemon cent tea tree oil (manufactured by Air Green), 100 g of lactulose powder (manufactured by Morinaga Dairy), 635 g of malt dextrin (manufactured by Matsutani Chemical Industry), skim milk powder (manufactured by Morinaga Milk) 85 g, Stevia sweetener (manufactured by Saneigen FFI), 1 g, yogurt flavor (manufactured by Saneigen FFI), 5 g, and glycerin fatty acid ester preparation (manufactured by Riken Vitamin) (24 g) were added to each powder. Using a tableting machine (KT-2, manufactured by Kimura Seisakusho), the number of tablets was 10, the tablet weight was 1.0 g, and the Monsanto hardness was 3.5 to 5 using an R punch having a diameter of 8 mm. Tableting was performed continuously at a compression pressure of 5.0 kg under a condition of 5.0 kg to produce about 800 tablets containing the extract of Leptosperm petersonii.
[0046]
【The invention's effect】
INDUSTRIAL APPLICABILITY As described above in detail, the present invention provides an antiviral composition comprising, as an active ingredient, a highly safe leptospermum petersoni extract which can be taken on a daily basis, and a pharmaceutical composition containing the same. The present invention relates to a product, a food or drink composition or a feed composition, and the effects produced by the present invention are as follows.
(1) It is possible to improve the symptoms of infectious diseases of humans and animals already infected with a pathogenic virus.
(2) It is highly safe for humans, and can enhance the protective effect against viruses by taking it daily.
(3) Drugs, foods and drinks, and feeds having an antiviral action can be manufactured.