【書類名】 明細書
【発明の名称】 キレート化合物、その常磁性金属との錯体
【特許請求の範囲】
【請求項１】 ラセミ体及び光学活性体両方の、式（Ｉ）：
【化２７】
〔式中、
Ｙは、ＣＯＯＨ基又はＰＯ（ＯＨ）2基であり（ただし、少なくとも１つのＹ基は、ＰＯ（ＯＨ）2である）、
Ｒは、水素原子、又は−（ＣＨ2）m−Ｏ−Ｒ2、（Ｃ1−Ｃ5）−アルキル−（Ｃ6−Ｃ10）−アリール若しくは（Ｃ1−Ｃ5）−アルキル−ヘテロアリールであり、このアリール若しくはヘテロアリール残基は、場合により１個以上のハロゲン原子、ＯＨ基、アルキル（Ｃ1−Ｃ5）基及び／若しくはＯＲ3基で置換されている、１個若しくは２個の縮合環を含み、
（ここで、Ｒ2は、（Ｃ1−Ｃ5）−アルキル−（Ｃ6−Ｃ10）−アリール（場合により１個以上のハロゲン原子、ＯＨ及び（Ｃ1−Ｃ5）−アルキル基で置換されている）であり；
Ｒ3は、（Ｃ6−Ｃ10）アリール（場合により１個以上のハロゲン原子、ＯＨ及び／又は（Ｃ1−Ｃ5）−アルキル基で置換されている）であり；
ｍは、１〜５の範囲である）
Ｒ1は、Ｒと同じ意味であってよい（ただし、Ｙが、ＰＯ（ＯＨ）2であるとき、Ｒ1は、Ｈ、（ＣＨ2）mＮＨ2、又は（ＣＨ2）mＣＯＯＨ若しくはそのアミノ誘導体から選択され、そして３個のＹ基がすべてＰＯ（ＯＨ）2のとき、２個のＲ基及びＲ1 は同時にＨではない）〕
で示される化合物。
【請求項２】 前記式（Ｉ）の化合物
【化１】
〔式中、
Ｙは、ＣＯＯＨ基又はＰＯ（ＯＨ）2基であり（ただし、少なくとも１つのＹ基は、ＰＯ（ＯＨ）2である）、
Ｒは、水素原子、又は−（ＣＨ2）m−Ｏ−Ｒ2、（Ｃ1−Ｃ5）−アルキル−（Ｃ6−Ｃ10）−アリール若しくは（Ｃ1−Ｃ5）−アルキル−ヘテロアリールであり、このアリール若しくはヘテロアリール残基は、場合により１個以上のハロゲン原子、ＯＨ基、アルキル（Ｃ1−Ｃ5）基及び／若しくはＯＲ3基で置換されている、１個若しくは２個の縮合環を含み、
（ここで、Ｒ2は、（Ｃ1−Ｃ5）−アルキル−（Ｃ6−Ｃ10）−アリール（場合により１個以上のハロゲン原子、ＯＨ及び（Ｃ1−Ｃ5）−アルキル基で置換されている）であり；
Ｒ3は、（Ｃ6−Ｃ10）アリール（場合により１個以上のハロゲン原子、ＯＨ及び／又は（Ｃ1−Ｃ5）−アルキル基で置換されている）であり；
ｍは、１〜５の範囲である）
Ｒ1は、Ｒと同じ意味であってよい（ただし、Ｙが、ＰＯ（ＯＨ）2であるとき、Ｒ1は、Ｈ、（ＣＨ2）mＮＨ2、又は（ＣＨ2）mＣＯＯＨ若しくはそのアミノ誘導体から選択される）〕と、
２０〜３１の間、３９、４２、４３、４４、４９、及び５７〜８３の間の範囲の原子番号を有する金属元素のイオンとのキレート化された錯体、
並びにそれらの
第１級、第２級、第３級アミン若しくは塩基性アミノ酸から選択される生理学的に許容しうる有機塩基との、又はカチオンが、ナトリウム、カリウム、マグネシウム、カルシウム若しくはその混合物から選択される無機塩基との塩。
【請求項３】 式（II）：
【化２】
〔式中、Ｒ及びＲ1は、上記と同義である〕で示される、請求項１または２記載の化合物。
【請求項４】 式（III）：
【化３】
〔式中、Ｒ1は、上記と同義である〕で示される、請求項１または２記載の化合物。
【請求項５】 式（IV）：
【化４】
〔式中、Ｒは、上記と同義である〕で示される、請求項１または２記載の化合物。
【請求項６】 Ｒ又はＲ2が、ベンジル、フェネチル、又はナフチルメチルから選択される（Ｃ1−Ｃ5）−アルキル−（Ｃ6−Ｃ10）−アリール〔ここで、アリール残基は、場合により１個以上のハロゲン原子又はＯＲ3基（ここで、Ｒ3は、上記と同義である）で置換されている〕である、請求項１〜５のいずれか１項記載の化合物。
【請求項７】 Ｒが、ピリジルメチル又はインドリルメチルから選択される（Ｃ1−Ｃ5）−アルキル−ヘテロアリールである、請求項１〜６のいずれか１項記載の化合物。
【請求項８】 Ｎ，Ｎ′−〔（ホスホノメチルイミノ）ジ−２，１−エタンジイル〕ビス〔Ｎ−カルボキシメチル−Ｌ−フェニルアラニン〕；
〔４Ｓ−（４Ｒ*，１２Ｒ*）〕−４−カルボキシ−５，１１−ビス（カルボキシメチル）−１−フェニル−１２−〔（フェニル−メトキシ）メチル〕−８−（ホスホノメチル）−２−オキサ−５，８，１１−トリアザトリデカン−１３−酸；
Ｎ，Ｎ′−〔（ホスホノメチルイミノ）ジ−２，１−エタンジイル〕ビス〔Ｎ−カルボキシメチル−Ｌ−トリプトファン〕；
Ｎ，Ｎ−ビス〔２−〔（カルボキシメチル）（ホスホノメチル）アミノ〕エチル〕−Ｏ−（４−ヒドロキシ−フェニル）−３，５−ジヨード−Ｌ−チロシン；
Ｎ，Ｎ′−〔（ホスホノメチルイミノ）ジ−２，１−エタンジイル〕ビス〔Ｎ−（カルボキシメチル）−グリシン〕；
Ｎ，Ｎ′−〔（ホスホノメチルイミノ）ジ−２，１−エタンジイル〕ビス〔Ｎ−（ホスホノメチル）−グリシン〕ガドリニウム錯体；
Ｎ，Ｎ′−〔〔〔３−カルボキシ−１−ホスホノプロピル〕イミノ〕ジ−２，１−エタンジイル〕ビス〔Ｎ−（カルボキシメチル）グリシン〕；
４−フェニル−Ｎ−〔trans−４−〔〔〔４−〔ビス〔２−〔ビス（カルボキシメチル）アミノ〕エチル〕アミノ〕−１−オキソ−４−ホスホノブチル〕アミノ〕メチル〕シクロヘキシルカルボニル〕−Ｌ−フェニルアラニン；
（３β，５β，７α，１２α）−３−〔〔４−〔ビス〔２−〔ビス（カルボキシメチル）アミノ〕エチル〕アミノ〕−１−オキソ−４−ホスホノブチル〕アミノ〕−７，１２−ジヒドロキシコラン−２４−酸；
Ｎ，Ｎ′−〔〔〔３−アミノ−１−ホスホノプロピル〕イミノ〕ジ−２，１−エタンジイル〕ビス〔Ｎ−（カルボキシメチル）グリシン〕
から選択される、請求項１〜７のいずれか１項記載の化合物。
【請求項９】 Ｇｄ（3+）、Ｄｙ（3+）、Ｆｅ（3+）、Ｆｅ（2+）及びＭｎ（2+）から選択される金属イオンとのキレート錯体の形態である、請求項２〜８のいずれか１項記載の化合物。
【請求項１０】 生理学的に許容しうる塩形成有機塩基が、エタノールアミン、ジエタノールアミン、モルホリン、グルカミン、Ｎ，Ｎ−ジメチルグルカミン、Ｎ−メチルグルカミン、リシン、アルギニン、オルニチンから選択される、請求項２〜９記載の化合物。
【請求項１１】 １００ns以下のτM値を有する、請求項９記載の化合物。
【請求項１２】 １０〜１００nsの範囲のτM値を有する、請求項１１記載の化合物。
【請求項１３】 ２０〜５０nsの範囲のτM値を有する、請求項１２記載の化合物。
【請求項１４】 式（II）（ここで、Ｒ1は、Ｈであり、そしてＲは、請求項１と同義である）を有する、請求項３記載の化合物の製造方法であって、
ａ）適切なアミノ酸のエステル化；
ｂ）適切なブロモ酢酸エステルと反応させることによる、工程ａ）からのエステルのＮ−アルキル化；
ｃ）ブロモエタノール、トリフルオロメタンスルホン酸無水物及び２，６−ルチジンから調製されるトリフルオロメタンスルホン酸２−ブロモエチルエステルと反応させることによる、工程ｂ）からの中間体のブロモアルキル化；
ｄ）トリベンジルヘキサヒドロトリアジンと適切な亜リン酸ジアルキルとの直接縮合、及びこれに続く縮合生成物の接触水素化による脱ベンジル化による、アミノメチルホスホン酸ジエチルエステルの調製；
ｅ）工程ｃ）からの中間体と反応させることによる、アミノメチルホスホン酸ジエチルエステルのビスアルキル化、及びヘキサエステルの単離；
ｆ）ヘキサエステルの酸性官能基の脱保護、及び酸キレート化剤の単離
を含むことを特徴とする方法。
【請求項１５】 工程ｃ）からのブロモアルキル誘導体が、あるいは対応するヒドロキシ誘導体から出発して、適切な臭素化剤と反応させることにより調製される、請求項１４記載の方法。
【請求項１６】 式（II）（ここで、Ｒは、Ｈであり、そしてＲ1は、請求項１と同義である）を有する、請求項３記載の化合物の製造方法であって、
ａ）無水フタル酸とジエチレントリアミンとを酢酸中で反応させることによる、２，２′−（イミノジ−２，１−エタンジイル）ビス−１Ｈ−イソインドール−１，３（２Ｈ）−ジオン）の調製；
ｂ）３−ベンジルオキシカルボニルプロピオンアルデヒドと適切な有機媒体中で反応させ、次に亜リン酸トリス（tert−ブチル）と反応させることによる、工程ａ）からのビス−フタルイミド誘導体のＮ−アルキル化；
ｃ）フタル酸基の脱離；
ｄ）適切なハロ酢酸エステルと反応させることによる、工程ｃ）からのジアミンのＮ−アルキル化；
ｅ）ｄ）からの中間体の接触水素化による脱ベンジル化、及びヘキサエステルモノカルボン酸誘導体の単離；
ｆ）ｅ）からのヘキサエステルモノカルボン酸中間体と適切なアミノ化合物との反応、及び対応するアミドの単離；
ｇ）ヘキサエステルの酸性官能基の脱保護、及び酸キレート化剤の回収
を含むことを特徴とする方法。
【請求項１７】 式（III）を有する、請求項４記載の化合物の製造方法であって、
ａ）適切に活性化された亜リン酸ビスtert−ブチルとアミナールとを反応させ、適切な酸水溶液での処理によって、生じるトリメチルシリル誘導体を対応するヒドロキシ誘導体に直接変換することによる、アミノメチルホスホン酸ビスtert−ブチルエステル（ビス−Ｎ−アルキル）誘導体の調製；
ｂ）工程ａ）からの中間体の接触水素化；
ｃ）適切なハロ酢酸エステルと反応させることによる、工程ｂ）から生じる化合物のＮ−アルキル化；
ｄ）メタンスルホニルクロリド及び適切な臭素化剤と反応させることによる、対応するブロモ誘導体への工程ｃ）からのアミノアルコールの変換；
ｅ）工程ｄ）からのブロモ誘導体と適切にエステル化された便利なアミノ酸との縮合、及びポリエステルの回収；
ｆ）ポリエステルの酸性官能基の脱保護、及びキレート化剤の回収
を含むことを特徴とする方法。
【請求項１８】 合成工程ａ）において、ホスホン酸tert−ブチルエステルが、Ｍｅ3ＳｉＣｌで活性化される、請求項１７記載の方法。
【請求項１９】 工程ａ）におけるアミノメチルホスホン酸ビスtert−ブチルエステル（ビス−Ｎ−アルキル）誘導体の合成が、触媒量のランタニドトリフラートにより触媒化される、請求項１７記載の方法。
【請求項２０】 使用されるランタニドトリフラートが、イッテルビウムトリフラートである、請求項１９記載の方法。
【請求項２１】 診断的用途のための、請求項２〜１３のいずれか１項記載の錯体化合物。
【請求項２２】 適切な担体との混合物として、請求項２〜１３のいずれか１項記載のキレート錯体化合物を含むことを特徴とする、造影画像診断用薬剤組成物。
【請求項２３】 ＭＲＩによる、人体又は動物体の臓器及び／又は組織のイメージング用診断処方の調製のための、請求項２〜１３記載のキレート錯体化合物の使用。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
本発明は、常磁性の２価及び３価の金属イオンをキレート化できる新しい化合物、該金属イオンとのそのキレート、並びに磁気共鳴画像法（magnetic resonance imaging）（ＭＲＩ）における造影剤（contrast agent）としてのその使用に関する。
【０００２】
放射線科医の観点から、健常組織と罹患組織の間のより良好なコントラスト増強を意味する放射線画像の改善は、適切な外来物質の事前投与により得ることができる診断の助けになると考えられる。
【０００３】
これらの物質は、検査下の組織に属する水のプロトンの、緩和性（このようなプロトンが外部磁場に曝されるとき）として知られている、特定の性状の有意な変性を引き起こす。
【０００４】
これらの物質は、ＭＲＩ用の造影剤として知られている。線状及び環状ポリアミノポリカルボン酸リガンドと常磁性金属との多数のキレート錯体が、ＭＲＩ造影剤として有用であることが知られている。
【０００５】
該化合物は、一般に２つの基本的なポリアミノポリカルボン酸構造、即ち、ジエチレントリアミン五酢酸（ＤＴＰＡ）及び１，４，７，１０−テトラアザシクロドデカン−１，４，７，１０−四酢酸（ＤＯＴＡ）に由来する。
【０００６】
本発明の化合物は、キレート化剤構造における結合部位の１つとして、少なくとも１つのホスホン酸残基を含むことを特徴とする、新規なポリアミノ誘導体である。
【０００７】
緩和性（ｒ1p）は、ビシナルプロトンの核磁気緩和速度を増大させる能力を特徴とする、常磁性錯体の固有特性である。ｑ≧１（ここで、ｑは、配位水分子の数である）であるＧｄ（III）キレートの場合に、溶媒の水プロトンに関して観測される緩和の増大への顕著な寄与は、結合水の分子と残りの溶媒の分子との間の交換に由来する（S. Aimeら, Chem. Soc. Rev., 1998, 27, 19）。
【０００８】
この寄与（ｒis 1p）は、以下の方程式：
【０００９】
【数１】
【００１０】
により、配位球面内部に配位している水分子のプロトンの緩和時間（Ｔ1M）及び滞留時間（τM）に関係づけられる。
【００１１】
Ｔ1Mは、配位水のプロトンの滞留時間τM及び金属イオンの電子緩和時間τSを通じて、常磁性種の再配向からの寄与τRを受ける。更にｒis 1pは、Ｔ1M＞τM（高速交換条件）であり、かつＴ1Mが可能な限り短いときに、最大である。
【００１２】
臨床実務において従来使用される磁場の値でのｒ1pの顕著な増大は、種々の方法で、主として分子タンブリングを減少させ、その結果のτRの増大により、今日までに達成されている。しかし、水分子の滞留時間τMにより引き起こされる限定作用のため、期待されるｒ1pの増大は未だ観測されていない。約３０nsのτM値だけが、τRの増大により誘導されるＴ1Mの減少を完全に活用することを可能にするため、このパラメーターの微調整は、ＭＲＩ分野における現在の研究の主要な対象になっている。こういう理由で、ランタニド（III）錯体における水分子の交換速度値は、新規なＭＲＩ造影剤の開発において最も重要である。実際、Ｇｄ（III）錯体に配位している水分子の滞留時間は、これが、核−電子双極性相互作用に直接寄与し、かつ溶媒の水分子への常磁性作用の転移効率を制御するため、特に重要な役割を演じる。
【００１３】
一般にポリアミノポリカルボン酸誘導体を含む、上記引用先行技術の造影剤は、一般に２００〜２５００nsの間に含まれるτM値を示しているが、このような値は、３０nsという最適値よりも有意に高い。
【００１４】
上記パラメーターの最適化及び協調化は、新規なＭＲＩ造影剤の開発に従事する誰にとっても、未だ非常に重要な目標である。
【００１５】
本発明は、キレート化剤の構造における結合部位として少なくとも１つのホスホン酸残基を含むことを特徴とする、プロトン交換速度の増大を引き起こすことができ、よって有利にはτM値が低い、ポリアミノ誘導体に関する。
【００１６】
更に詳細には、本発明の目的は、ラセミ体及び光学活性体両方の、式（Ｉ）：
【００１７】
【化５】
【００１８】
〔式中、
Ｙは、ＣＯＯＨ基又はＰＯ（ＯＨ）2基であり（ただし、少なくとも１つのＹ基は、ＰＯ（ＯＨ）2である）、
Ｒは、水素原子、又は−（ＣＨ2）m−Ｏ−Ｒ2、（Ｃ1−Ｃ5）−アルキル−（Ｃ6−Ｃ10）−アリール若しくは（Ｃ1−Ｃ5）−アルキル−ヘテロアリールであり、このアリール若しくはヘテロアリール残基は、場合により１個以上のハロゲン原子、ＯＨ基、アルキル（Ｃ1−Ｃ5）基及び／若しくはＯＲ3基で置換されている、１個若しくは２個の縮合環を含むことを特徴とするが、ここで、
Ｒ2は、（Ｃ1−Ｃ5）−アルキル−（Ｃ6−Ｃ10）−アリール（場合により１個以上のハロゲン原子、ＯＨ及び（Ｃ1−Ｃ5）−アルキル基で置換されている）であり；
Ｒ3は、（Ｃ6−Ｃ10）アリール（場合により１個以上のハロゲン原子、ＯＨ及び／又は（Ｃ1−Ｃ5）−アルキル基で置換されている）であり；
ｍは、１〜５の範囲であり；
Ｒ1は、Ｒと同じ意味であってよい（ただし、Ｙが、ＰＯ（ＯＨ）2であるとき、Ｒ1は、Ｈ、（ＣＨ2）mＮＨ2、（ＣＨ2）mＣＯＯＨ又はそのアミノ誘導体から選択される）〕で示される非環式ポリアミノ誘導体キレート化剤である。
【００１９】
本発明の更なる目的は、該式（Ｉ）の化合物と、２０〜３１の間、３９、４２、４３、４４、４９、又は５７〜８３の間の範囲の原子番号を有する金属元素の２価及び３価イオンとのキレート、並びに第１級、第２級、第３級アミン若しくは塩基性アミノ酸から選択される生理学的に適合性の有機塩基との、又はカチオンが、ナトリウム、カリウム、マグネシウム、カルシウム若しくはその混合物から選択される無機塩基とのその塩である。
【００２０】
本発明の更なる目的は、ＭＲＩの使用による、人体又は動物体の臓器及び／又は組織のイメージング用製剤の調製のための、式（Ｉ）の化合物、常磁性金属とのその錯体及び生理学的に適合性のその塩の使用である。
【００２１】
（Ｃ1−Ｃ5）−アルキル−（Ｃ6−Ｃ10）−アリール基の例は、ベンジル、フェネチル、ナフチルメチルを含むことを特徴とし、ここでアリール残基は、場合により１個以上のハロゲン原子又はＯＲ3基（ここで、Ｒ3は、上記と同義である）で置換されている。
【００２２】
（Ｃ1−Ｃ5）−アルキル−ヘテロアリール基の例は、ピリジルメチル又はインドリルメチルを含むことを特徴とする。
【００２３】
（Ｃ6−Ｃ10）アリール基の例は、場合により１個以上のハロゲン原子、ＯＨ及び／又は（Ｃ1−Ｃ5）−アルキル基で置換されている、フェニル又はナフチルを含むことを特徴とする。
【００２４】
（Ｃ1−Ｃ5）−アルキル基の例は、好ましくはメチル、エチル、イソプロピルを含むことを特徴とする。
【００２５】
好ましいものは、式（II）：
【００２６】
【化６】
【００２７】
〔ここでは、４個の脇のカルボン酸基及び中央のホスホン酸基が存在し、そして式中、Ｒ及びＲ1は、上記と同義である〕で示される化合物である。式（II）の化合物の中で、特に好ましいものは、Ｒ1が、水素原子であり、そしてＲが、全ての前述の意味を想定できるものである。
【００２８】
また好ましいものは、式（III）：
【００２９】
【化７】
【００３０】
〔ここでは、２個の脇のホスホン酸基及び３個のカルボン酸基が存在し、そして式中、Ｒ1は、上述の全ての値をとる〕で示される化合物、並びに一般式（IV）：
【００３１】
【化８】
【００３２】
〔ここでは、３個のホスホン酸基及び２個のカルボン酸基が存在し、そして式中、Ｒは、上述の値をとる〕で示される化合物である。
【００３３】
特に好ましいものは、以下の化合物：
Ｎ，Ｎ′−〔（ホスホノメチルイミノ）ジ−２，１−エタンジイル〕ビス〔Ｎ−カルボキシメチル−Ｌ−フェニルアラニン〕；
〔〔４Ｓ−（４Ｒ*，１２Ｒ*）〕−４−カルボキシ−５，１１−ビス（カルボキシメチル）−１−フェニル−１２−〔（フェニル−メトキシ）メチル〕−８−（ホスホノメチル）−２−オキサ−５，８，１１−トリアザトリデカン−１３〕酸；
Ｎ，Ｎ′−〔（ホスホノメチルイミノ）ジ−２，１−エタンジイル〕ビス〔Ｎ−カルボキシメチル−Ｌ−トリプトファン〕；
Ｎ，Ｎ−ビス〔２−〔（カルボキシメチル）（ホスホノメチル）アミノ〕エチル〕−Ｏ−（４−ヒドロキシフェニル）−３，５−ジヨード−Ｌ−チロシン；
Ｎ，Ｎ′−〔（ホスホノメチルイミノ）ジ−２，１−エタンジイル〕ビス〔Ｎ−（カルボキシメチル）−グリシン〕；
Ｎ，Ｎ′−〔（ホスホノメチルイミノ）ジ−２，１−エタンジイル〕ビス〔Ｎ−（ホスホノメチル）グリシン〕ガドリニウム錯体；
Ｎ，Ｎ′−〔〔〔３−カルボキシ−１−ホスホノプロピル〕イミノ〕ジ−２，１−エタンジイル〕ビス〔Ｎ−（カルボキシメチル）グリシン〕；
４−フェニル−Ｎ−〔trans−４−〔〔〔４−〔ビス〔２−〔ビス（カルボキシメチル）アミノ〕エチル〕アミノ〕−１−オキソ−４−ホスホノブチル〕アミノ〕メチル〕シクロヘキシルカルボニル〕−Ｌ−フェニルアラニン；
（３β，５β，７α，１２α）−３−〔〔４−〔ビス〔２−〔ビス（カルボキシメチル）アミノ〕エチル〕アミノ〕−１−オキソ−４−ホスホノブチル〕アミノ〕−７，１２−ジヒドロキシコラン−２４−酸；
Ｎ，Ｎ′−〔〔〔３−アミノ−１−ホスホノプロピル〕イミノ〕ジ−２，１−エタンジイル〕ビス〔Ｎ−（カルボキシメチル）グリシン〕；
並びにその常磁性キレート錯体及び生理学的に適合性のその塩である。
【００３４】
好ましいキレートは、２価又は３価の金属イオンが、Ｇｄ（3+）、Ｄｙ（3+）、Ｆｅ（3+）、Ｆｅ（2+）及びＭｎ（2+）から選択されるものである。特に好ましいものは、Ｇｄ（3+）キレートである。
【００３５】
本発明のキレート錯体を塩形成させるのに場合により適切な無機塩基の好ましいカチオンは、特に、カリウム、ナトリウム、カルシウム、マグネシウム及びその混合物のような、アルカリ金属又はアルカリ土類金属のイオンを含むことを特徴とする。
【００３６】
この目的に適切な有機塩基の好ましいカチオンは、とりわけ、エタノールアミン、ジエタノールアミン、モルホリン、グルカミン、Ｎ−メチルグルカミン、Ｎ，Ｎ−ジメチルグルカミンのような、第１級、第２級及び第３級アミンのプロトン付加により得られるものである。
【００３７】
アミノ酸の好ましいカチオンは、例えば、リシン、アルギニン又はオルニチンのカチオンを含むことを特徴とする。
【００３８】
キレート化剤の構造における結合部位としての、少なくとも１個のホスホン酸基の導入によって、予期しないことに、プロトン交換速度が有利に増大しており、よって特に低いτM値を有する造影剤が提供された。
【００３９】
特に、本発明のキレート錯体は、τM＜１００nsの値、好ましくは１０〜１００nsの間の値、最も好ましくは２０〜５０nsの間の値を特徴とする。
【００４０】
本発明の化合物への種々の合成アプローチの中で、式（II）の化合物、特にＲ1が、Ｈであり、そしてＲが、請求項１と同義である化合物の調製に好ましいものは、下記スキーム１に報告される：
【００４１】
【化９】
【００４２】
式中、Ｒは、化合物（Ｉ）に関して上に定義される値をとる。
【００４３】
簡単に述べると、スキーム１の合成プロセスは、以下の工程を含むことを特徴とする：
ａ）適切なアミノ酸のエステル化。該エステル化は、有利には、アミノ酸と酢酸アルキル及びＨＣｌＯ4のような酸とを反応させることにより行うことができる。変法においては、前もってＣＢＺＣｌとの反応によりＮ−保護されたアミノ酸を、Ｋ2ＣＯ3のような塩基の存在下で、ハロゲン化アルキルとの反応によりエステル化することができる；
【００４４】
ｂ）ブロモ酢酸tert−ブチルのような適切なブロモ酢酸エステルと反応させることによる、生じるエステル（中間体１）のＮ−アルキル化。該反応は、好ましくはアセトニトリル、ＴＨＦ、ＥｔＯＡｃの中から選択される有機溶媒中で、かつpH８の緩衝液の存在下で行われる；
【００４５】
ｃ）ブロモエタノール、トリフルオロメタンスルホン酸無水物及び２，６−ルチジンから前もって調製されるトリフルオロメタンスルホン酸２−ブロモエチルエステル（中間体３）と反応させることによる、中間体２のブロモアルキル化。このブロモアルキル化は、適切には、例えば、トルエン、アセトニトリル、ジクロロエタンの中から選択される有機溶媒中で、かつエチレンジアミン、ジイソプロピルエチルアミン、トリエチルアミンの中から選択されるアミンの存在下で行われて、中間体４が得られる。本発明の変法では、あるいは化合物４は、WO 98/05625（参照することによりその全体を本明細書の一部とする）に記載されるように得られる、対応するＮ−（２−ヒドロキシエチル）誘導体から出発して、トリフェニルホスフィンの存在下で、ＮＢＳのような臭素化剤と反応させることにより調製することができる；
【００４６】
ｄ）トリベンジルヘキサヒドロトリアジンと適切な亜リン酸ジアルキルとの直接縮合、及びこれに続く縮合生成物の接触水素化による脱ベンジル化による、アミノメチルホスホン酸ジエチルエステル（中間体５）の調製；
【００４７】
ｅ）中間体４との反応による中間体５のビスアルキル化、及びヘキサエステル６の単離。本発明のプロセスでは、ビスアルキル化反応は、好ましくはアセトニトリル、酢酸エチルのような有機溶媒中で、かつpH８の緩衝液の存在下で行われる；
【００４８】
ｆ）中間体６の酸性官能基の脱保護、及び酸キレート化剤７の単離。該脱保護は、ヘキサエステルとヨードトリメチルシランとを、ＣＨ3ＣＮのような有機溶媒中で反応させることにより達成できる。
【００４９】
一方、Ｒが、Ｈであり、そしてＲ1が、請求項１と同義である、式（II）の化合物の調製のための異なる合成アプローチは、下記スキーム１（２）に報告される：
【００５０】
【化１０】
【００５１】
【化１１】
【００５２】
〔ここでは、一例として、本発明の幾つかの好ましい錯体化合物の１つの調製法が詳述されている〕。
【００５３】
スキーム１（２）の合成プロセスは、本質的に以下の工程を含むことを特徴とする：
ａ）無水フタル酸とジエチレントリアミンとを酢酸中で反応させることによる、２，２′−（イミノジ−２，１−エタンジイル）ビス−１Ｈ−イソインドール−１，３（２Ｈ）−ジオン）（中間体１）の調製；
【００５４】
ｂ）３−ベンジルオキシカルボニルプロピオンアルデヒド（中間体２）と適切な有機媒体中で反応させ、次に亜リン酸トリス（tert−ブチル）と反応させることにより、中間体３が得られる、ビス−フタルイミド誘導体１のＮ−アルキル化；
【００５５】
ｃ）例えば、ヒドラジンとの反応により、対応するジアミン（中間体４）が得られる、フタル酸基の脱離；
【００５６】
ｄ）例えば、ブロモ酢酸tert−ブチルのような適切なハロ酢酸エステルとの反応により、中間体５が得られる、ジアミン４のＮ−アルキル化。この反応は、好ましくはアセトニトリル、酢酸エチルから選択される有機溶媒中で、かつ例えば、ジイソプロピルエチルアミンのような適切な第３級アミンの存在下で行われる；
【００５７】
ｅ）中間体５の接触水素化による脱ベンジル化、及びヘキサエステルモノカルボン酸６の単離。好ましいプロセスでは、この水素化は、例えば、ＴＨＦのような有機溶媒中で行われ、そして１０％ Ｐｄ−Ｃにより触媒される；
【００５８】
ｆ）ヘキサエステルモノカルボン酸６と適切なアミノ化合物（化合物７）との反応、及び対応するアミド（誘導体８）の単離。好ましいプロセスでは、該反応は、ＨＡＴＵ（ヘキサフルオロ−リン酸Ｏ−（７−アザベンゾトリアゾール−１−イル）−Ｎ，Ｎ，Ｎ′，Ｎ′−テトラメチルウロニウム）の存在下で実施される；
【００５９】
ｇ）ヘキサエステルの酸性官能基の脱保護、及び酸キレート化剤（化合物１０）の回収。本発明の１つの好ましいプロセスでは、酸性官能基の脱保護は、工程ｅ）で調製されるヘキサエステル誘導体（中間体６）に実施されて、例えば、本発明の実験の部において後に開示される、実施例７の酸キレート化剤が得られる。スキーム１（２）のプロセスでは、そうでなければ、脱保護は、アミド誘導体８に含まれるベンジルエステルの接触水素化による第１の脱ベンジル化工程、及びキレート化剤１０が得られる、ヘキサエステル９の残留酸性官能基の脱保護を含む第２の工程を含む。水素化は、好ましくは、例えば、ＴＨＦのような有機溶媒中で行われ、そして１０％ Ｐｄ−Ｃにより触媒される。これに続く脱保護は、例えば、ヘキサエステル９とトリフルオロ酢酸とを反応させることにより実施することができる。
【００６０】
他方では、一般式（III）の化合物は、好ましくは下記スキーム２により調製される。
【００６１】
【化１２】
【００６２】
〔式中、Ｒ1は、化合物（Ｉ）に関して上に定義される値をとる〕。
【００６３】
スキーム２の合成プロセスは、以下の工程を含むことを特徴とする：
ａ）適切に活性化された亜リン酸ビスtert−ブチル（中間体１）とアミナール（中間体２）とを反応させることによる、アミノメチルホスホン酸ビスtert−ブチルエステル（ビス−Ｎ−アルキル）誘導体（中間体３）の調製。特に、本発明のプロセスでは、ホスホン酸tert−ブチルエステルは、有利には、有機溶媒中で、かつトリエチルアミンのようなアミンの存在下で行われる反応において、例えば、Ｍｅ3ＳｉＣｌで活性化される。生じるトリメチルシリル誘導体は、２−ベンジルアミノエタノールと水性ホルムアルデヒドから得られる中間体２と反応させる。この反応は、触媒量のランタニドトリフラートの存在により活性化される。特に好ましいのは、イッテルビウムトリフラートである。本発明のプロセスでは、生じるトリメチルシリル誘導体は、単離されないが、酢酸水溶液のような適切な酸水溶液での処理により、対応するヒドロキシ誘導体に直接変換される。
【００６４】
ｂ）中間体３の接触水素化。好ましいプロセスでは、この反応は、アルコール性媒体中で行われ、そしてＰｄ（ＯＨ）2／Ｃにより触媒される。
【００６５】
ｃ）ブロモ酢酸tert−ブチルのような、適切なハロ酢酸エステルと反応させることによる、工程ｂ）から生じる化合物（中間体４）のＮ−アルキル化。この反応は、好ましくはアセトニトリル、酢酸エチルから選択される有機溶媒中で、かつ緩衝液pH８の存在下で行われる。
【００６６】
ｄ）メタンスルホニルクロリド及び臭化リチウムのような臭素化剤と反応させることによる、対応するブロモ誘導体への単離アミノアルコール（中間体５）の変換。この反応は、ＴＨＦ、アセトニトリル、酢酸エチルから選択される有機溶媒中で、窒素雰囲気下で、かつトリエチルアミン、ジイソプロピルエチルアミンから選択されるアミンの存在下で、２０〜−５℃の範囲の温度で行われる。
【００６７】
ｅ）ブロモ誘導体（中間体６）と適切にエステル化された便利なアミノ酸（中間体７）との縮合、及びポリエステル（中間体８）の単離。該反応は、有利には、好ましくはアセトニトリル、ＴＨＦ、酢酸エチルから選択される有機溶媒中で、かつ緩衝液pH８の存在下で行われる。
【００６８】
ｆ）ポリエステルの酸性官能基の脱保護、及びキレート化剤（化合物９）の単離。脱保護は、例えば、ポリエステルと、ＨＣｌ、Ｈ2ＳＯ4から選択される酸とを、ジオキサンのような有機溶媒の水性混合物中で反応させることにより達成される。
【００６９】
本発明の化合物は、血管内（例えば、動脈内、冠動脈内、心室内投与など）、髄腔内、腹腔内、リンパ内及び腔内投与に使用することができるため、広範な応用性を有する。更には、本化合物は、経口又は経腸投与に適しており、よって、特に胃腸管のイメージングに適している。
【００７０】
非経口投与には、好ましくはこれらは、pHが６．０〜８．５の範囲であってよい、無菌水性液剤又は懸濁剤として処方することができる。
【００７１】
これらの水性液剤又は懸濁剤は、０．００２〜１．０Mの範囲の濃度で投与することができる。これらの処方は、使用前に再構成されるように、凍結乾燥して供給してもよい。
【００７２】
胃腸への使用又は腔内の注射のために、これらの物質は、例えば、粘度を制御するために、場合により適切な賦形剤を含む液剤又は懸濁剤として処方することができる。
【００７３】
経口投与には、これらは、製剤技術において日常的に使用される調製法により、又は胃内の酸性pHに対する追加的防御を得るために（こうして、胃液に典型的なpH値で特に発生する、キレート金属イオンの放出を防ぐ）コーティング処方として処方することができる。
【００７４】
甘味料及び／又は香味料のような他の賦形剤も、製剤処方の既知の方法により加えることができる。
【００７５】
本発明の化合物の液剤又は懸濁剤はまた、エーロゾル−気管支造影法及び点滴注入において使用されるエーロゾルとして処方することができる。
【００７６】
本発明の化合物は、場合により適切な高分子、ターゲティングベクターに化学的に複合させるか、又は適切な担体中に包むことができる。
【００７７】
例えば、これらはまた、リポソームにカプセル封入することができるか、又はこれらは、その化学構造の構成成分であってもよく、単一若しくは多重ラメラ小胞として使用することができる。
【００７８】
より良好に本発明の広い応用ポテンシャルを例証するために、本発明の好ましい化合物の非限定的リストが下記に報告される。
【００７９】
【化１３】
【００８０】
【化１４】
【００８１】
【化１５】
【００８２】
【化１６】
【００８３】
【化１７】
【００８４】
実験の部
実施例１
Ｎａと塩形成（１：３）した〔Ｎ，Ｎ′−〔（ホスホノメチルイミノ）ジ−２，１−エタンジイル〕ビス〔Ｎ−カルボキシメチル−Ｌ−フェニルアラニン〕のガドリニウム錯体
【００８５】
【００８６】
Ａ）Ｌ−フェニルアラニン １，１−ジメチルエチルエステル
氷浴で冷却し、激しく撹拌した、酢酸tert−ブチル（３２０mL）中のＬ−フェニルアラニン（６２．６ｇ；３７９mmol）の溶液に、７０％ ＨＣｌＯ4水溶液（３５mL、４０７mmol）をゆっくり加えた。室温で１１日間撹拌後、混合物を水１００mLで希釈して、氷浴で冷却した。この混合物を５N ＮａＯＨで塩基性にすると、白色の固体（未反応フェニルアラニン）が沈殿し、これを濾過した。次に混合物をＥｔＯＡｃ（４×２００mL）で抽出し、有機相を合わせて、水（２×２００mL）及び５％ Ｎａ2ＣＯ3（３００mL）で洗浄した。Ｎａ2ＳＯ4で乾燥し、真空下で溶媒を注意深く除去した後、所望の化合物を無色の油状物（５３．５３ｇ；２４２mmol）として得たが、これは更に精製する必要がなく、−１８℃で貯蔵した。
【００８７】
収率：６４％
ＴＬＣ：担体：シリカゲルプレート ６０Ｆ ２５４ メルク
溶離液：ＣＨＣｌ3／ＣＨ3ＯＨ／２５％ ＮＨ4ＯＨ ９０：９：１．
検出：エタノール中０．２％（w/v）ニンヒドリン Ｒｆ＝０．６
1Ｈ−ＮＭＲ、13Ｃ−ＮＭＲ、ＩＲ及びＭＳスペクトルは、表示構造に一致した。
【００８８】
Ｂ）Ｎ−〔２−（１，１−ジメチルエトキシ）−２−オキソエチル〕−Ｌ−フェニルアラニン １，１−ジメチルエチルエステル
アセトニトリル（４００mL）及び２Mリン酸緩衝液pH８（２００mL）中のＬ−フェニルアラニン １，１−ジメチルエチルエステル（ポイントＡで調製された化合物）（５３．５３ｇ；２４２mmol）、ブロモ酢酸tert−ブチル（３７．３mL；２５４mmol）の乳濁液を室温で１６時間激しく撹拌した。分液後、有機相から溶媒を留去し、残渣をＥｔＯＡｃにとった；水相は、ＥｔＯＡｃ（３×２００mL）で抽出した。合わせた有機相を水（２×３００mL）、食塩水（２００mL）で洗浄し、そして最後にＮａ2ＳＯ4で乾燥した。粗生成物をフラッシュクロマトグラフィー（ｎ−ヘキサン／ＥｔＯＡｃ、９：１〜７５：２５）により精製した。真空下で溶媒の除去後、所望の化合物は、無色の油状物（６６．０４ｇ；１９６．９０mmol）として得た。
【００８９】
収率：８１％
ＴＬＣ：担体：シリカゲルプレート ６０Ｆ ２５４ メルク
溶離液：ＣＨＣｌ3／ＣＨ3ＯＨ ９５：５．
検出：エタノール中０．２％（w/v）ニンヒドリン Ｒｆ＝０．５
1Ｈ−ＮＭＲ、13Ｃ−ＮＭＲ、ＩＲ及びＭＳスペクトルは、表示構造に一致した。
【００９０】
Ｃ）トリフルオロメタンスルホン酸２−ブロモエチルエステル
トリフルオロメタンスルホン酸無水物２４０ｇ（８５０mmol）を１．５時間で、不活性雰囲気下、−５℃に冷却したＣＨ2Ｃｌ2中のブロモエタノール（５７mL；０．８０mol）及び２，６−ルチジン（１０４mL；８９０mmol）の溶液に加えた。１０分後、混合物を容量１／４まで濃縮し、次にシリカゲルの小層（溶離液：ｎ−ヘキサン／ＥｔＯＡｃ＝９：１）を通して溶出した。溶媒の留去及び乾燥により、所望の生成物を得た（１４７．２ｇ；５７０mmol）。
【００９１】
収率：７２％
ＴＬＣ：担体：シリカゲルプレート ６０Ｆ ２５４ メルク
溶離液：ｎ−ヘキサン／ｉＰｒ2Ｏ＝８：２
検出：１M ＮａＯＨ中０．５％ ＫＭｎＯ4 Ｒｆ＝０．６
1Ｈ−ＮＭＲ、13Ｃ−ＮＭＲ、ＩＲ及びＭＳスペクトルは、表示構造に一致した。
【００９２】
Ｄ）Ｎ−（２−ブロモエチル）−Ｎ−〔２−（１，１−ジメチルエトキシ）−２−オキソエチル〕−Ｌ−フェニルアラニン １，１−ジメチルエステル
ポイントＣ）で調製された中間体（１４７．２ｇ；５７３mmol）を、窒素下、無水トルエン６００mL中のＮ−〔２−（１，１−ジメチルエトキシ）−２−オキソエチル〕−Ｌ−フェニルアラニン １，１−ジメチルエチルエステル（６５．９３ｇ；１９７mmol）及び２，６−ルチジン（７２mL；６２０mmol）の溶液に−１５℃で加えた。室温で１６時間後、ＥｔＯＡｃ ２００mL、Ｈ2Ｏ ２００mL及びエチレンジアミン５０mLをこの混合物に加えた。有機相をＨ2Ｏ ３００mL、酢酸緩衝液pH＝５．８ １００mL、ＣｕＳＯ4飽和水溶液（以降ａｑＣｕＳＯ4）１００mL、飽和ａｑＮＨ4Ｃｌ ２００mLで洗浄し、Ｎａ2ＳＯ4で乾燥して溶媒を留去した。この残渣をｉＰｒ2Ｏにとり、迅速にシリカゲルの小層を通して濾過した。濾液から溶媒を留去することにより、所望の生成物を得た（８３．０８ｇ；１８８mmol）。
【００９３】
収率：９５．４％
ＧＣ測定：９７％（面積％）
ＴＬＣ：担体：シリカゲルプレート ６０Ｆ ２５４ メルク
溶離液：ｎ−ヘキサン／ＥｔＯＡｃ＝９：１
検出：１M ＮａＯＨ中０．５％ ＫＭｎＯ4 Ｒｆ＝０．５
1Ｈ−ＮＭＲ、13Ｃ−ＮＭＲ、ＩＲ及びＭＳスペクトルは、表示構造に一致した。
【００９４】
Ｅ）〔（フェニルメチル）アミノ〕メチルホスホン酸ジエチルエステル
１，３，５−トリベンジルヘキサヒドロ−１，３，５−トリアジン（９８％；１２．４８ｇ；３４．２１mmol）を、窒素雰囲気下１００℃で６時間、亜リン酸ジエチル（９４％；１５．５mL；１１３mmol）と反応させた。次にこの混合物を室温まで冷却し、エチルエーテル（１５０mL）にとり、６N ＨＣｌ（２０mL）で酸性にした。有機相を１N ＨＣｌ（１０mL）で抽出し、水相を５N ＫＯＨで塩基性にし、次にＥｔ2Ｏ（３００＋１５０mL）で抽出し、食塩水（１００mL）で洗浄して、最後にＮａ2ＳＯ4で乾燥した。真空下で溶媒の留去後、生成物を無色の油状物（２５．０５ｇ；９７．３７mmol）として回収し、これを−１８℃の温度で貯蔵した。
【００９５】
収率：９５％
ＴＬＣ：担体：シリカゲルプレート ６０Ｆ ２５４ メルク
溶離液：トルエン／ＥｔＯＡｃ／ｉＰｒＯＨ ７：２：１
検出：１M ＮａＯＨ中０．５％ ＫＭｎＯ4 Ｒｆ＝０．３８
1Ｈ−ＮＭＲ、13Ｃ−ＮＭＲ、ＩＲ及びＭＳスペクトルは、表示構造に一致した。
【００９６】
Ｆ）アミノメチルホスホン酸ジエチルエステル
メタノール（６００mL）中のポイントＥで調製された化合物（２８．３ｇ；１１０mmol）の溶液を、Ｐｄ（ＯＨ）2／Ｃ（３２ｇ）及びＨＣＯＯＮＨ4（１２０ｇ）の存在下で６時間激しく撹拌した。次に混合物をセライト（Celite）（登録商標）の層を通して濾過し、濾過溶液から溶媒を留去することにより、残渣が得られ、これをエタノール（２００mL）にとり、ＯＨ-型のアンバーライト（Amberlite）（登録商標）ＩＲＡ４００樹脂（１５０mL、前もって無水エタノールで調整）で３時間処理した。次にこの懸濁液を濾過して、溶液を蒸発乾固することにより油状物（２０．４７ｇ）を得たが、これをフラッシュクロマトグラフィー（ＣＨ2Ｃｌ2／ＣＨ3ＯＨ／２５％ ＮＨ4ＯＨ、５４：４０：６〜８９：１０：１）により精製して、生成物１５．０９ｇ（９０．３mmol）を無色の油状物として得た。
【００９７】
収率：８２％
ＴＬＣ：担体：シリカゲルプレート ６０Ｆ ２５４ メルク
溶離液：ＣＨ2Ｃｌ2／ＣＨ3ＯＨ／ＮＨ4ＯＨ ２５％ ８９：１０：１
検出：２５４nm；１M ＮａＯＨ中０．５％ ＫＭｎＯ4；エタノール中０．２％（w/v）ニンヒドリン Ｒｆ＝０．５
1Ｈ−ＮＭＲ、13Ｃ−ＮＭＲ、ＩＲ及びＭＳスペクトルは、表示構造に一致した。
【００９８】
Ｇ）Ｎ，Ｎ′−〔〔〔（ジエトキシホスフィニル）メチル〕イミノ〕ジ−２，１−エタンジイル〕ビス〔Ｎ−〔２−（１，１−ジメチルエトキシ）−２−オキソエチル〕−Ｌ−フェニルアラニン〕１，１−ジメチルエチルエステル
ＣＨ3ＣＮ（３００mL）及び２Mリン酸緩衝液pH＝８（２００mL）中のポイントＦ）で調製されたアミノメチルホスホン酸エステル（８．２９ｇ；４９６mmol）、臭化物（ポイントＤで調製）（６２．９２ｇ；１０３．８mmol）の乳濁液を、室温で１６時間激しく撹拌した。水相を新鮮緩衝液（２００mL）で置換後、混合物を更に３２時間撹拌した。有機相から減圧下で溶媒を留去し、ＥｔＯＡｃにとり、そして水相をＥｔＯＡｃ（３×１５０mL）で繰り返し抽出した。合わせた有機相をＨ2Ｏ、食塩水で洗浄し、Ｎａ2ＳＯ4で乾燥して、減圧下で溶媒を留去した。粗生成物をフラッシュクロマトグラフィー（溶離液：ｎ−ヘキサン／ＥｔＯＡｃ／ｉＰｒＯＨ＝７：３：０．１〜６：４：０．２）により精製して、所望の生成物（３１．３８ｇ；３５．２５mmol）を得た。
【００９９】
収率：７１％
ＨＰＬＣ測定：９７％（面積％）
ＴＬＣ：担体：シリカゲルプレート ６０Ｆ ２５４ メルク
溶離液：ｎ−ヘキサン／ｉＰｒ2Ｏ＝６５：３５
検出：１M ＮａＯＨ中０．５％ ＫＭｎＯ4 Ｒｆ＝０．６
1Ｈ−ＮＭＲ、13Ｃ−ＮＭＲ、ＩＲ及びＭＳスペクトルは、表示構造に一致した。
【０１００】
Ｈ）Ｎ，Ｎ′−〔（ホスホノメチルイミノ）ジ−２，１−エタンジイル〕ビス〔Ｎ−カルボキシメチル−Ｌ−フェニルアラニン〕
ＣＨ3ＣＮ ５００mL中のポイントＧ）で調製されたヘキサエステル（３１．２１ｇ；３５．０６mmol）の溶液に、−１５℃で不活性雰囲気下、ヨードトリメチルシラン（８０mL；５８８mmol）をゆっくり加えた。次に混合物を室温で３日間撹拌した。氷上での冷却及びＨ2Ｏ（３００mL）の添加後、揮発性物質を減圧下で除去し、６N ＮａＯＨで残留混合物のpHを８に調整した。次に粗生成物をアンバーライト（登録商標）ＸＡＤ１６００樹脂を通すクロマトグラフィー（水、７％ ａｑＮａ2ＳＯ3及び最後にＨ2Ｏ／ＣＨ3ＣＮ勾配（９５：５〜３０：７０）で溶出）により精製して、所望の生成物（１９．６６ｇ；３２．２５mmol）を得た。
【０１０１】
収率：９２％
ＨＰＬＣ測定：１００％（面積％）
元素分析
Ｃ Ｈ Ｎ Ｐ
計算値（％） 53.20 5.95 6.89 5.08
実測値（％） 52.93 6.18 6.83 4.21 Ｈ2Ｏ １．５１％
ＴＬＣ：担体：シリカゲルプレート ６０Ｆ ２５４ メルク
溶離液：ｎ−ヘキサン／ＥｔＯＡｃ＝９：１
検出：１M ＮａＯＨ中０．５％ ＫＭｎＯ4 Ｒｆ＝０．５
比施光度：〔α〕20 589 = +8.4; 〔α〕20 578 = +8.7; 〔α〕20 546 = +10.6; 〔α〕20 436 = +24.9; 〔α〕20 405 = +34.1; 〔α〕20 365 = +55.1（ｃ １．１７；０．５ Ｎ ＮａＯＨ）
1Ｈ−ＮＭＲ、13Ｃ−ＮＭＲ、31Ｐ−ＮＭＲ、ＩＲ及びＭＳスペクトルは、表示構造に一致した。
【０１０２】
Ｉ）Ｎ，Ｎ′−〔（ホスホノメチルイミノ）ジ−２，１−エタンジイル〕ビス〔Ｎ−カルボキシメチル−Ｌ−フェニルアラニン〕のガドリニウム錯体三ナトリウム塩
ポイントＨで調製された化合物（１９．６６ｇ；３２．２５mmol）の水溶液に、pHを６〜７の範囲に保持しながら、ＧｄＣｌ3・６Ｈ2Ｏ（３２．２５mmol）及び２N ＮａＯＨを加えた。反応の進行は、ＨＰＬＣによりチェックした。１８時間後、溶液をミリポア（Millipore）（登録商標）フィルターを通して濾過し、ナノ濾過して濃縮した（２５０mL）。この脱塩溶液を、ダウエックス（Dowex）（登録商標）ＣＣＲ３ＬＢカラム（Ｎａ+型；３５mL）を通してゆっくり浸出して、所望の生成物（２５．４８ｇ；３０．７１mmol）を得た。
【０１０３】
収率：９５％
融点：＞２１０℃（分解）
ＨＰＬＣ測定：１００％（面積％）
元素分析
C H N Gd Na P
計算値（％） 39.08 3.64 5.06 18.95 8.31 3.73
実測値（％） 37.61 4.13 5.14 17.03 7.96 3.40
Ｈ2Ｏ ９．４７％
比施光度：〔α〕20 589 = -35.4; 〔α〕20 578 = -36.8; 〔α〕20 546 = -42.5; 〔α〕20 436 = -70.6; 〔α〕20 405 = -84.6; 〔α〕20 365 = -110.0（ｃ １．４０；Ｈ2Ｏ）
ＩＲ及びＭＳスペクトルは、表示構造に一致した。
【０１０４】
実施例２
Ｎａと塩形成（１：３）した〔４Ｓ−（４Ｒ*，１２Ｒ*）〕−４−カルボキシ−５，１１−ビス（カルボキシメチル）−１−フェニル−１２−〔（フェニルメトキシ）メチル〕−８−（ホスホノメチル）−２−オキサ−５，８，１１−トリアザトリデカン−１３−酸のガドリニウム錯体
【０１０５】
【化１９】
【０１０６】
Ａ）Ｎ−（２−ブロモエチル）−Ｎ−〔２−（１，１−ジメチルエトキシ）−２−オキソエチル〕−Ｏ−（フェニルメチル）−Ｌ−セリン １，１−ジメチルエチルエステル
この中間体は、スキーム１に要約される合成工程にしたがい、実施例１のそれと同様に調製した。
【０１０７】
あるいは、本プロセスの変法では、そして特にこの場合に、中間体４は、以下のとおり調製した：
無水ＴＨＦ（６００mL）中のＮ−〔２−（１，１−ジメチルエトキシ）−２−オキソエチル〕−Ｎ−（２−ヒドロキシエチル）−Ｏ−（フェニルメチル）−Ｌ−セリン １，１−ジメチルエチルエステル（WO 98/05625に記載されるように調製）（６１．７ｇ；１５０．７mmol）及びトリエチルアミン（３１mL；２２０mmol）の溶液に、窒素雰囲気下、−１５／−１０℃で、メタンスルホニルクロリド（１２．５mL；１６０mmol）及び臭化リチウム（１１１ｇ；１．２５×１０ 3 mol）をゆっくり加えた。
【０１０８】
溶媒を留去し、そしてトルエン及びジエチルエーテルに残渣を溶解した後、溶液を水及び食塩水で洗浄し、次にＮａ2ＳＯ4で乾燥して、蒸発乾固することにより、標題生成物を無色の油状物（６９．７９ｇ；１４７７mmol）として得た。
【０１０９】
収率：９８％
ＴＬＣ：担体：シリカゲルプレート ６０Ｆ ２５４ メルク
溶離液：ｎ−ヘキサン／ＥｔＯＡｃ＝８：２
検出：１M ＮａＯＨ中０．５％ ＫＭｎＯ4；Ｉ2；２５４nm；Ｒｆ＝０．７５
1Ｈ−ＮＭＲ、13Ｃ−ＮＭＲ、ＩＲ及びＭＳスペクトルは、表示構造に一致した。
【０１１０】
Ｂ）〔４Ｓ−（４Ｒ*，１２Ｒ*）〕−８−〔（ジエトキシホスフィニル）メチル〕−４−〔（１，１−ジメチルエトキシ）カルボニル〕−５，１１−ビス〔２−（１，１−ジメチルエトキシ）−２−オキソエチル〕−１−フェニル−１２−〔（フェニルメトキシ）メチル〕−２−オキサ−５，８，１１−トリアザトリデカン−１３−酸１，１−ジメチルエチルエステル
ＣＨ3ＣＮ（２５０mL）及び２Mリン酸緩衝液pH＝８（２００mL）中の１Ｆに記載されるように調製したアミノホスホン酸エステル（１１．２３ｇ；６７．２０mmol）及び２Ａに記載されるように調製した臭化物（６８．７２ｇ；１４５．５mmol）の乳濁液を室温で２４時間激しく撹拌した。相を分離し、水相をＥｔＯＡｃ（２５０＋１００mL）で繰り返し抽出し、有機相は、減圧下で溶媒を留去し、次にＥｔＯＡｃにとった。合わせた有機相をＨ2Ｏ、食塩水で洗浄して、Ｎａ2ＳＯ4で乾燥した。粗生成物をフラッシュクロマトグラフィー（第１カラム：溶離液：トルエン／ＥｔＯＡｃ／ｉＰｒＯＨ＝８０：１８：２〜６６：３１：３；第２及び第３カラム：溶離液：ｎ−ヘキサン／ＥｔＯＡｃ／ｉＰｒＯＨ、６６：３２：２）により精製した。真空下で溶媒を留去することにより、生成物を無色の油状物（４４．８４ｇ；４７．１９mmol）として得た。
【０１１１】
収率：７０％
ＴＬＣ：担体：シリカゲルプレート ６０Ｆ ２５４ メルク
溶離液：ｎ−ヘキサン／ＥｔＯＡｃ／ｉＰｒＯＨ＝５０：４５：５
検出：１M ＮａＯＨ中０．５％ ＫＭｎＯ4；Ｉ2；２５４nm；Ｒｆ＝０．５
1Ｈ−ＮＭＲ、13Ｃ−ＮＭＲ、ＩＲ及びＭＳスペクトルは、表示構造に一致した。
【０１１２】
Ｃ）〔４Ｓ−（４Ｒ*，１２Ｒ*）〕−４−カルボキシ−５，１１−ビス（カルボキシメチル）−１−フェニル−１２−〔（フェニルメトキシ）メチル〕−８−（ホスホノメチル）−２−オキサ−５，８，１１−トリアザトリデカン−１３−酸
ＣＨ3ＣＮ ６００mL中のポイントＢで調製されたヘキサエステル（４２．０３ｇ；４４．２３mmol）の溶液に、−１５℃で不活性雰囲気下、ヨードトリメチルシラン（８０mL；５８８mmol）をゆっくり加えた。混合物を室温で２４時間撹拌した。氷上での冷却及び水（１５０mL）の添加後、揮発性物質を減圧下で除去し、６N ＫＯＨでpHを８に調整した。生じた溶液を濃縮し、Ｅｔ2Ｏ／ＥｔＯＡｃ、１：１（２×２５０mL）、ＣＨ2Ｃｌ2（２×２５０mL）で洗浄し、５０℃に加熱して、６N ＨＣｌでpH２．６まで酸性にした。ＣＨ3ＣＮ（１００mL）の添加後、まだ熱い生じた混合物をアンバーライト（登録商標）ＸＡＤ１６００樹脂のカラムにゆっくり載せて、次に生成物が完全に溶出するまで、これを水及びこれに続くＨ2Ｏ／ＣＨ3ＣＮ勾配（９５：５〜５０：５０）で溶出した。溶出混合物は、カラムへの生成物の沈殿を回避するために、定期的に加熱する必要があった。溶媒の留去後、所望の生成物を白色の固体（２３．５２ｇ；３５．１２mmol）として得た。
【０１１３】
収率：７９％
ＨＰＬＣ測定：１００％（面積％）
元素分析
C H N P
計算値（％） 52.02 6.02 6.28 4.63
実測値（％） 51.07 6.16 6.31 4.35 Ｈ2Ｏ ２．６７％
比施光度：〔α〕20 589 = +14.5; 〔α〕20 578 = +14.9; 〔α〕20 546 = +17.0; 〔α〕20 436 = +29.0; 〔α〕20 405 = +35.4 〔α〕20 365 = +46.5;（ｃ １．０６；ＣＨ3ＯＨ）
1Ｈ−ＮＭＲ、13Ｃ−ＮＭＲ、31Ｐ−ＮＭＲ、ＩＲ及びＭＳスペクトルは、表示構造に一致した。
【０１１４】
Ｄ）Ｎａと塩形成（１：３）した〔４Ｓ−（４Ｒ*，１２Ｒ*）〕−４−カルボキシ−５，１１−ビス（カルボキシメチル）−１−フェニル−１２−〔（フェニルメトキシ）メチル〕−８−（ホスホノメチル）−２−オキサ−５，８，１１−トリアザトリデカン−１３−酸のガドリニウム錯体
Ｈ2Ｏ／ＣＨ3ＣＮの８：１混合物（０．５Ｌ）中のポイントＣで調製されたリガンド（２２．１４ｇ；３３．０６mmol）の溶液に、Ｇｄ2Ｏ3（５．９３６ｇ；１６．３７mmol）及び１N ＮａＯＨ（８０mL）を加えた。ＨＰＬＣにより反応の進行を追跡しながら、反応混合物を６０℃で２０時間保持した。次に懸濁液をミリポア（登録商標）フィルターを通して濾過し、濃縮（１２０mL）し、ダウエックス（登録商標）ＣＣＲ３ＬＢカラム（Ｎａ+型；５０mL）でゆっくり浸出した。溶出液を最初にカルボピューロン（Carbopuron）（登録商標）２Ｓで処理し、次に濾紙及びミリポア（登録商標）ＶＣ ０．１μmフィルターを通して濾過した。溶媒の留去後、生成物を白色の固体（３０．５１ｇ；３４．２９mmol）として得た。
【０１１５】
収率：約１００％
融点：＞２５０℃（分解）
ＨＰＬＣ測定：１００％（面積％）
元素分析
C H N Gd Na P
計算値（％） 39.15 3.85 4.72 17.67 7.75 3.48
実測値（％） 35.62 4.46 4.43 16.00 6.86 2.86
Ｈ2Ｏ ８．５４％
比施光度：〔α〕20 589 = -26.0; 〔α〕20 578 = -27.4; 〔α〕20 546 = -31.2; 〔α〕20 436 = -50.0; 〔α〕20 405 = -58.3 〔α〕20 365 = -72.1;（ｃ １．１１５；Ｈ2Ｏ）
ＩＲ及びＭＳスペクトルは、表示構造に一致した。
【０１１６】
実施例３
Ｎａと塩形成（１：３）したＮ，Ｎ′−〔（ホスホノメチルイミノ）ジ−２，１−エタンジイル〕ビス〔Ｎ−カルボキシメチル−Ｌ−トリプトファン〕のガドリニウム錯体
【０１１７】
【化２０】
【０１１８】
Ａ）Ｎ−〔（フェニルメトキシ）カルボニル〕−Ｌ−トリプトファン １，１−ジメチルエチルエステル
ジメチルアセトアミド（７５０mL）中のＮ−〔（フェニルメトキシ）カルボニル〕−Ｌ−トリプトファン（３３．２７ｇ；９８．３２mmol）（Ｌ−トリプトファンとＣＢＺＣｌとをＨ2Ｏ及び１N ＮａＯＨ中で反応させることにより前もって調製）、塩化ベンジルトリエチルアンモニウム（ＢＴＥＡＣ）（２２．４ｇ；９８．３２mmol）及びＫ2ＣＯ3（１７６．９１ｇ；１．２８mol）の懸濁液に、臭化tert−ブチル（２６５mL；２３６mmol）を加えた。溶液を５５℃まで加熱して、１９時間激しく撹拌した。次に混合物を室温まで冷却し、Ｈ2Ｏ（３Ｌ）で希釈し、次にＥｔＯＡｃ（２×１Ｌ）で抽出した。有機相を蒸発乾固することにより、標題生成物を淡黄色の油状物（３６ｇ；９８mmol）として得た。
【０１１９】
収率：９９％
ＨＰＬＣ測定：９９％（面積％）
ＴＬＣ：担体：シリカゲルプレート ６０Ｆ ２５４ メルク
溶離液：ｎ−ヘキサン／ＥｔＯＡｃ＝７：３
検出：１M ＮａＯＨ中０．５％ ＫＭｎＯ4；２５４nm；Ｒｆ＝０．４４
1Ｈ−ＮＭＲ、13Ｃ−ＮＭＲ、ＩＲ及びＭＳスペクトルは、表示構造に一致した。
【０１２０】
Ｂ）Ｎ−〔２−（１，１−ジメチルエトキシ）−２−オキソエチル〕−Ｌ−トリプトファン １，１−ジメチルエチルエステル
ＣＨ3ＣＮ（１５０mL）及び２Mリン酸緩衝液（pH８；１５０mL）中の、ポイントＡで調製された生成物の接触水素化により得られたＬ−トリプトファン １，１−ジメチルエチルエステル（１７．１０ｇ；６５．６８mol）の溶液に、ブロモ酢酸tert−ブチル（１０．７mL；７２．２５mmol）を加え、生じた混合物を強力撹拌下に２３時間放置した。有機相を分離し、濃縮して残渣を得て、これをフラッシュクロマトグラフィー（溶離液：ｎ−ヘキサン／ＥｔＯＡｃ、８：２）により精製して、所望の生成物を淡赤色の油状物（２０．０７ｇ；５３．５９mmol）として得た。
【０１２１】
全収率：５４．５％（Ｌ−トリプトファンから）
ＨＰＬＣ測定：１００％（面積％）
ＴＬＣ：担体：シリカゲルプレート ６０Ｆ ２５４ メルク
溶離液：ｎ−ヘキサン／ＥｔＯＡｃ＝７：３
検出：１M ＮａＯＨ中０．５％ ＫＭｎＯ4；２５４nm；Ｒｆ＝０．２８
1Ｈ−ＮＭＲ、13Ｃ−ＮＭＲ、ＩＲ及びＭＳスペクトルは、表示構造に一致した。
【０１２２】
Ｃ）Ｎ−〔２−（１，１−ジメチルエトキシ）−２−オキソエチル〕−Ｎ−（２−ヒドロキシエチル）−Ｌ−トリプトファン １，１−ジメチルエチルエステル
ジャケット付き反応器に、ＣＨ3ＣＮ（２５mL）中のポイントＢで調製されたＮ−〔２−（１，１−ジメチルエトキシ）−２−オキソエチル〕−Ｌ−トリプトファン １，１−ジメチルエチルエステル（５ｇ；１３．３５mol）の溶液を入れた。−８０℃まで冷却したこの溶液に、エチレンオキシド（１３mL；２６０mmol）及びイッテルビウムトリフラート（０．８３ｇ；１．３４mol）を加えた。次にこの混合物を室温までゆっくり加温し、そして１５時間後、水（５０mL）で希釈してＥｔ2Ｏ（３×５０mL）で抽出した。有機相を蒸発乾固して粗生成物を得て、これをフラッシュクロマトグラフィー（溶離液：ｎ−ヘキサン／ＥｔＯＡｃ、７：３）により精製して、所望の生成物を淡黄色の油状物（４．３２ｇ；１０．３２mmol）として得た。
【０１２３】
収率：７７％
ＨＰＬＣ測定：９９％（面積％）
ＴＬＣ：担体：シリカゲルプレート ６０Ｆ ２５４ メルク
溶離液：ｎ−ヘキサン／ＥｔＯＡｃ＝７：３
検出：１M ＮａＯＨ中０．５％ ＫＭｎＯ4；２５４nm；Ｒｆ＝０．２３
1Ｈ−ＮＭＲ、13Ｃ−ＮＭＲ、ＩＲ及びＭＳスペクトルは、表示構造に一致した。
【０１２４】
Ｄ）Ｎ−（２−ブロモエチル）−Ｎ−〔２−（１，１−ジメチルエトキシ）−２−オキソエチル〕−Ｌ−トリプトファン １，１−ジメチルエチルエステル
ＣＨ2Ｃｌ2（４４mL）中の中間体Ｃ（４．６４ｇ；１１．０９mmol）の溶液に、窒素下、Ｐｈ3Ｐ（２．９ｇ；１１．０９mmol）を加えた。０℃に冷却した生じた混合物に、ＮＢＳ（１．９７ｇ；１１．０９mmol）を少量ずつ加えた。０℃で３時間及び室温で１時間後、Ｐｈ3ＰＯが白色の固体として沈殿するまで溶液を濃縮した。次に混合物を４℃で７２時間保持して沈殿を終了させた。沈殿物を濾過して、濾液を濃縮することにより粗生成物を得て、これをフラッシュクロマトグラフィー（溶離液：ｎ−ヘキサン／ＥｔＯＡｃ、８：２）により精製して、所望の生成物を淡黄色の油状物（４．４６ｇ；９．２６mmol）として得た。
【０１２５】
収率：８３％
ＨＰＬＣ測定：９４％（面積％）
ＴＬＣ：担体：シリカゲルプレート ６０Ｆ ２５４ メルク
溶離液：ｎ−ヘキサン／ＥｔＯＡｃ＝８：２
検出：１M ＮａＯＨ中０．５％ ＫＭｎＯ4；２５４nm；Ｒｆ＝０．４２
1Ｈ−ＮＭＲ、13Ｃ−ＮＭＲ、ＩＲ及びＭＳスペクトルは、表示構造に一致した。
【０１２６】
Ｅ）Ｎ，Ｎ′−〔〔〔（ジエトキシホスフィニル）メチル〕イミノ〕ジ−２，１−エタンジイル〕ビス〔Ｎ−〔２−（１，１−ジメチルエトキシ）−２−オキソエチル〕−Ｌ−トリプトファン １，１−ジメチルエチルエステル〕
ＣＨ3ＣＮ（１００mL）中のアミノメチルホスホン酸ジエチルエステル（実施例１Ｆのように調製）（５．２５ｇ；３１．４１mmol）及びポイント３Ｄで調製された中間体（３０．２５ｇ；６２．８２mmol）の溶液に、２Mリン酸緩衝液pH８（２００mL）を加えた。生じた２層性混合物を強力撹拌下に１８時間保持した；次に有機層を分離し、濃縮して、粗生成油を得て、これをフラッシュクロマトグラフィー（溶離液：ｎ−ヘキサン／ＥｔＯＡｃ／ＣＨ3ＯＨ、９：１：０．５）により精製して、ヘキサエステルをロウ状固体（２１．６ｇ；２２．３mmol）として得た。
【０１２７】
収率：７１％
ＨＰＬＣ測定：１００％（面積％）
ＴＬＣ：担体：シリカゲルプレート ６０Ｆ ２５４ メルク
溶離液：ｎ−ヘキサン／ＥｔＯＡｃ／ＣＨ3ＯＨ＝９：１：０．５
検出：１M ＮａＯＨ中０．５％ ＫＭｎＯ4；２５４nm；Ｒｆ＝０．４０
1Ｈ−ＮＭＲ、13Ｃ−ＮＭＲ、ＩＲ及びＭＳスペクトルは、表示構造に一致した。
【０１２８】
Ｆ）Ｎ，Ｎ′−〔（ホスホノメチルイミノ）ジ−２，１−エタンジイル〕ビス〔Ｎ−カルボキシメチル−Ｌ−トリプトファン〕
ＣＨ3ＣＮ（２００mL）中のポイントＥのように調製されたヘキサエステル（１５．１７ｇ；１５．６７mmol）の溶液に、窒素雰囲気下０℃で、（ＣＨ3）3ＳｉＩ（３２mL；２３５mmol）を加えた。次にこの溶液を室温で２２時間撹拌した。−５℃に冷却後、混合物をＨ2Ｏ（３０mL）で希釈して、Ｅｔ2Ｏ（２×４００mL）で洗浄した。水層を分離し、２N ＮａＯＨでpH７に中和して８０mLまで濃縮した。０〜５℃に冷却後、２N ＨＣｌ（３２mL）の添加により混合物を酸性にして、沈殿物を得たが、これを濾過し、Ｈ2Ｏで洗浄し、乾燥して、所望の生成物を結晶性の白色固体（８．３７ｇ、１２．１７mmol）として得た。
【０１２９】
収率：７８％
融点：１５７〜１６０℃
ＨＰＬＣ測定：９８％（面積％）
元素分析
C H N P
計算値（％） 54.15 5.57 10.18 4.50
実測値（％） 50.13 5.80 9.34 4.35 Ｈ2Ｏ ７．７８％
比施光度：〔α〕20 589 = -10.69; 〔α〕20 578 = -11.19; 〔α〕20 546 = -12.38; 〔α〕20 436 = -16.54;（ｃ ２．０２；ＮａＯＨ ０．１N）
1Ｈ−ＮＭＲ、13Ｃ−ＮＭＲ、31Ｐ−ＮＭＲ、ＩＲ及びＭＳスペクトルは、表示構造に一致した。
【０１３０】
Ｇ）Ｎ，Ｎ′−〔（ホスホノメチルイミノ）ジ−２，１−エタンジイル〕ビス〔Ｎ−カルボキシメチル−Ｌ−トリプトファン〕のガドリニウム錯体三ナトリウム塩
５℃に冷却したＨ2Ｏ（８０mL）中のポイントＦのように調製されたキレート化剤（６．０ｇ；８．７２mmol）の懸濁液に、最初に１N ＮａＯＨ（２８mL）を加えて清澄な溶液を得て、次に１N ＮａＯＨの同時添加によりpHを７に保持しながらＧｄＣｌ3（０．１７M溶液）（５１mL；８．７２mmol）を加えた。この溶液を室温で１時間放置し、ミリポア（登録商標）ＨＡＷＰ ０．４５μmフィルターを通して濾過し、続いてＨ2Ｏで溶出するアンバーライト（登録商標）ＸＡＤ１６００カラムを通して浸出した。溶出液を蒸発乾固することにより生成物を白色の固体（７．１２ｇ；７．８５mmol）として得た。
【０１３１】
収率：９０％
融点：＞２５０℃（分解）
ＨＰＬＣ測定：９９．６％（面積％）
元素分析
C H N P
計算値（％） 41.02 3.55 7.71 17.32 7.60 3.41
実測値（％） 36.18 4.42 7.55 16.79 6.54 3.18
Ｈ2Ｏ １１．７４％
比施光度：〔α〕20 589 = -20.96; 〔α〕20 578 = -21.60; 〔α〕20 546 = -24.55; 〔α〕20 436 = -40.61; 〔α〕20 405 = -47.83 〔α〕20 365 = -60.85;（ｃ ２．５０５；Ｈ2Ｏ）
ＩＲ及びＭＳスペクトルは、表示構造に一致した。
【０１３２】
実施例４
ナトリウムと塩形成（１：５）したＮ，Ｎ−ビス〔２−〔（カルボキシメチル）（ホスホノメチル）アミノ〕エチル〕−Ｏ−（４−ヒドロキシフェニル）−３，５−ジヨード−Ｌ−チロシンのガドリニウム錯体
【０１３３】
【化２１】
【０１３４】
Ａ）〔〔（２−ヒドロキシエチル）（フェニルメチル）アミノ〕メチル〕ホスホン酸１，１−ジメチルエチルエステル
氷浴で冷却した、水（３０mL）中の２−ベンジルアミノエタノール（３０．５９ｇ；１９６mmol）の溶液に、ホルムアルデヒド（３５％水溶液、１６．３mL；２０５mmol）を加えた。５分後、混合物を室温まで加温し、次にＣＨＣｌ3（３×４０mL）で抽出した。有機相をＭｇＳＯ4で乾燥し、蒸発乾固してアミナール（スキーム２の中間体２）を無色の油状物として回収し、これを真空下Ｐ2Ｏ5で更に乾燥した。
【０１３５】
ＣＨ2Ｃｌ2（３００mL）中の亜リン酸ジ−tert−ブチル（３８．１２ｇ；１９６mmol）及びトリエチルアミン（２８．０mL；２００mmol）の溶液に、クロロトリメチルシラン（２６．５mL；１９７mmol）を（３０分で）ゆっくり加え、１０分間撹拌した。中間体を含む生じた混合物に、次にＣＨ2Ｃｌ2（１００mL）中の上で調製されたアミナールの溶液を加え、次いでイッテルビウムトリフラート（１２．３６ｇ；１９．９mmol）を加え、反応物を室温で１．５時間保持した。水及び更にＣＨ2Ｃｌ2の添加後、不溶性塩をセライト（登録商標）を通して濾過し、溶液を真空下で濃縮した。生じた中間体は単離しなかったが、ＡｃＯＨ／ＴＨＦ／Ｈ2Ｏ混合物、３：１：１（２５０mL）で希釈し、生じた均質な溶液を真空下で濃縮した；トルエン及びＨ2Ｏとの共沸蒸留により大体のＡｃＯＨを除去して、Ｎａ2ＣＯ3の添加により溶液のpHを中性に調整した。混合物をＥｔＯＡｃ（３×８０mL）で抽出し、有機相をＭｇＳＯ4で乾燥し、次いで蒸発乾固することにより、生成物を無色の油状物（４３．４６ｇ；１２２mmol）として得た。
【０１３６】
収率：６２％
ＴＬＣ：担体：シリカゲルプレート ６０Ｆ ２５４ メルク
溶離液：ｉＰｒ2Ｏ／ＣＨ2Ｃｌ2／ｉＰｒＯＨ＝７０：２５：５
検出：１M ＮａＯＨ中０．５％ ＫＭｎＯ4；２５４nm；Ｉ2；Ｒｆ＝０．３８
1Ｈ−ＮＭＲ、13Ｃ−ＮＭＲ、ＩＲ及びＭＳスペクトルは、表示構造に一致した。
【０１３７】
Ｂ）〔〔（２−ヒドロキシエチル）アミノ〕メチル〕ホスホン酸１，１−ジメチルエチルエステル
無水ＭｅＯＨ（１Ｌ）中の中間体Ａ（４３．４６ｇ；１２２mmol）の溶液に、窒素下、触媒としてＰｄ（ＯＨ）2／Ｃ（４０ｇ）を注意深く加えた。次に混合物をＨ2雰囲気で２時間激しく撹拌した。ＭｇＳＯ4及びセライト（登録商標）を通す濾過後、生じた溶液から溶媒を留去した。残留メタノールは、シクロヘキサンとの共沸蒸留により留去して、所望の中間体を無色の油状物（３９．４５ｇ）として得て、これは溶媒痕跡量を含んでいるが、更に精製することなく次の反応に（そのまま）使用できた。
【０１３８】
ＴＬＣ：担体：シリカゲルプレート ６０Ｆ ２５４ メルク
溶離液：ＣＨ2Ｃｌ2／ＣＨ3ＯＨ／２５％（w/w）ＮＨ4ＯＨ＝８９：１０：１
検出：１M ＮａＯＨ中０．５％ ＫＭｎＯ4；エタノール中２％ニンヒドリン；Ｒｆ＝０．５
1Ｈ−ＮＭＲ、13Ｃ−ＮＭＲ、ＩＲ及びＭＳスペクトルは、表示構造に一致した。
【０１３９】
Ｃ）Ｎ−〔〔ビス（１，１−ジメチルエトキシ）〕ホスホノメチル〕−Ｎ−（２−ヒドロキシエチル）−グリシン １，１−ジメチルエチルエステル
アセトニトリル（２５０mL）及び２Mリン酸緩衝液pH８（２００mL）中の単離されたままの中間体Ｂ（３９．４５ｇ）、ブロモ酢酸tert−ブチル（１７．８mL；１２１mmol）の乳濁液を室温で４日間激しく撹拌した。相を分離した；有機相から溶媒を留去し、残渣をＥｔＯＡｃ（３×１５０mL）で処理した。合わせた有機相をＨ2Ｏ（２×２００mL）、食塩水（１００mL）で洗浄して、Ｎａ2ＳＯ4で乾燥した。粗生成物をフラッシュクロマトグラフィー（最初にｉＰｒ2Ｏ／ＣＨ2Ｃｌ2／ｉＰｒＯＨ＝７０：３０：２、次にＥｔ2Ｏ／ＣＨ2Ｃｌ2／ｉＰｒＯＨ＝７０：３０：２〜６０：４０：３で溶出）により精製して、所望の中間体を無色の油状物（２８．７１ｇ；７５．２７mmol）として得た。
【０１４０】
収率：６２％
ＴＬＣ：担体：シリカゲルプレート ６０Ｆ ２５４ メルク
溶離液：ｉＰｒ2Ｏ／ＣＨ2Ｃｌ2／ｉＰｒＯＨ＝６０：３５：５
検出：１M ＮａＯＨ中０．５％ ＫＭｎＯ4；Ｉ2；Ｒｆ＝０．４
1Ｈ−ＮＭＲ、13Ｃ−ＮＭＲ、ＩＲ及びＭＳスペクトルは、表示構造に一致した。
【０１４１】
Ｄ）Ｎ−〔〔ビス（１，１−ジメチルエトキシ）〕ホスホノメチル〕−Ｎ−（２−ブロモエチル）グリシン １，１−ジメチルエチルエステル
−１５℃に冷却した無水ＴＨＦ（５００mL）中の中間体Ｃ及びトリエチルアミンの溶液に、窒素下、メタンスルホニルクロリド（２．８mL；３６．１mmol）をゆっくり加えた。−１０℃で１．５時間後、臭化リチウム（２５．０ｇ；２８８mol）を加え、徐々に室温まで加温しながら、混合物を強力撹拌下に１６時間放置した。次に大体の揮発性物質を減圧下で留去した；残渣をＥｔＯＡｃ（３００mL）及びＥｔ2Ｏ（３００mL）で希釈してＨ2Ｏ（２×２００mL）で洗浄した。有機相をＨ2Ｏ／食塩水、１：１（２００mL）、食塩水（１００mL）で洗浄して、最後にＮａ2ＳＯ4で乾燥した。溶媒の留去後、粗残渣をフラッシュクロマトグラフィー（溶離液：ｎ−ヘキサン／Ｅｔ2Ｏ／ｉＰｒＯＨ、１：１：０．０１）により精製して、所望の中間体（１２．３５ｇ；２７．７９mmol）を得て、これを−１８℃で貯蔵すると結晶化した。
【０１４２】
収率：８３％
融点：５０〜５１℃
ＴＬＣ：担体：シリカゲルプレート ６０Ｆ ２５４ メルク
溶離液：ｉＰｒ2Ｏ／ＥｔＯＡｃ＝８：２
検出：１M ＮａＯＨ中０．５％ ＫＭｎＯ4；Ｉ2；Ｒｆ＝０．３５
1Ｈ−ＮＭＲ、13Ｃ−ＮＭＲ、ＩＲ及びＭＳスペクトルは、表示構造に一致した。
【０１４３】
Ｅ）Ｎ，Ｎ−ビス〔２−〔〔２−（１，１−ジメチルエトキシ）−２−オキソエチル〕〔〔（１，１−ジメチルエトキシ）ホスフィニル〕メチル〕アミノ〕エチル〕−Ｏ−（４−ヒドロキシフェニル）−３，５−ジヨード−Ｌ−チロシン １，１−ジメチルエチルエステル
アセトニトリル及び２Mリン酸緩衝液pH８中の中間体Ｄ（１２．０５ｇ；２７．１２mol）及び３，５−ジヨードチロシンメチルエステル（５．８５ｇ；１０．８５mmol）の乳濁液を室温で７２時間激しく撹拌した。水相を新鮮緩衝液で置換して、溶液を更に３日間撹拌下に放置した。次に相を分離した；水層をＥｔＯＡｃ（２５０＋１００mL）で抽出し、有機層から溶媒を留去して、残渣をＥｔＯＡｃにとった。合わせたＥｔＯＡｃ溶液をＨ2Ｏ（１００mL）、Ｈ2Ｏ／食塩水、１：１（１００mL）、食塩水（１００mL）で洗浄した。Ｎａ2ＳＯ4での乾燥及び溶媒の留去後、残渣をフラッシュクロマトグラフィー（溶離液：ｎ−ヘキサン／Ｅｔ2Ｏ／ｉＰｒＯＨ、７２：２０：８）により精製した。所望の中間体（スキーム２による中間体８）を、無色の油状物（１１．３２ｇ；８．９４mmol）として得た。
【０１４４】
収率：８２％
ＨＰＬＣ測定：９８．２％（面積％）
ＴＬＣ：担体：シリカゲルプレート ６０Ｆ ２５４ メルク
溶離液：トルエン／ＥｔＯＡｃ／ｉＰｒＯＨ＝１：１：０．０２
検出：１M ＮａＯＨ中０．５％ ＫＭｎＯ4；２５４nm；Ｉ2；Ｒｆ＝０．４０
1Ｈ−ＮＭＲ、13Ｃ−ＮＭＲ、ＩＲ及びＭＳスペクトルは、表示構造に一致した。
【０１４５】
Ｆ）Ｎ，Ｎ−ビス〔２−〔（カルボキシメチル）（ホスホノメチル）アミノ〕エチル〕−Ｏ−（４−ヒドロキシフェニル）−３，５−ジヨード−Ｌ−チロシン
１，４−ジオキサン（１００mL）中のポリエステルＥ）（２４．９ｇ；１９．６mmol）の溶液に、４N ＨＣｌ（１８０mL）を加えた。溶液を７０℃に３時間、次にＨＰＬＣにより反応の進行を追跡しながら、９０℃で１時間加熱した。混合物を室温に冷却し、２００mLまで濃縮して、アンバーライト（登録商標）ＸＡＤ１６００カラムにゆっくり載せた。最初のＨ2Ｏでの溶出後、Ｈ2Ｏ／ＣＨ3ＣＮに基づく勾配溶離液を使用することにより、所望の生成物を白色の固体（１５．５ｇ；１６．８６mmol）として得た。
【０１４６】
収率：８６％
ＨＰＬＣ測定：１００％（面積％）
元素分析
C H N I P
計算値（％） 32.81 3.63 4.59 27.23 6.77
実測値（％） 31.11 3.78 4.33 26.11 6.57
Ｈ2Ｏ ３．９６％
比施光度：〔α〕20 589 = +7.5; 〔α〕20 578 = +7.8; 〔α〕20 546 = +9.2; 〔α〕20 436 = +18.1; 〔α〕20 405 = +23.1 〔α〕20 365 = +33.3;（ｃ １．０３；ＣＨ3ＣＯＯＨ／ＨＣｌ ６N ４：１）
1Ｈ−ＮＭＲ、13Ｃ−ＮＭＲ、ＩＲ及びＭＳスペクトルは、表示構造に一致した。
【０１４７】
Ｇ）ナトリウムと塩形成（１：５）したＮ，Ｎ−ビス〔２−〔（カルボキシメチル）（ホスホノメチル）アミノ〕エチル〕−Ｏ−（４−ヒドロキシフェニル）−３，５−ジヨード−Ｌ−チロシンのガドリニウム錯体
リガンドＦ）（１５．３３mmol）の水溶液にpH７でＧｄ2Ｏ3（２．８０ｇ；１５．３９mmol）を加えた。この溶液をＨ2Ｏで２Ｌまで希釈して、ＨＰＬＣにより錯化の進行を追跡しながら、７０℃で６時間加熱した。変換がわずか約１４．５％であったため、２N ＮａＯＨでpHを約７に保持しながら、撹拌下この溶液に０．１６４M ａｑＧｄＣｌ3（７８．０mL；１２．８mmol）の溶液を加えた。錯化の終了後、混合物をミリポア（登録商標）ＨＡＷＰ ０．４５μmフィルターを通して濾過し、１Ｌまで濃縮して、ダウエックス（登録商標）ＣＣＲ３ＬＢカラム、Ｎａ+型を通して浸出した。溶出液を２５０mLまで濃縮してナノ濾過した。真空下で濃縮後、得られた暗色の溶液を６０℃でカルボピューロン（登録商標）２Ｓで処理し、濾過して最後に凍結乾燥することにより、まだ塩化物イオンを含む固体を得たが、次にこれをＨ2Ｏに溶解して、アンバーライト（登録商標）ＸＡＤ１６００での溶出（最初にＨ2Ｏで、次にＨ2Ｏ／ＣＨ3ＣＮ勾配で溶出）により精製して、所望のＧｄ錯体（１２．６７ｇ；１０．７４mmol）を得た。
【０１４８】
弱カチオン交換樹脂での錯体の精製により、元素分析によって確認されたように、フェノール基が脱プロトン化した生成物を得た。
【０１４９】
収率：７０％
融点：＞２８０℃
ＨＰＬＣ測定：９９．５％（面積％）
元素分析
C H Gd I N Na P
計算値（％） 25.46 2.14 13.33 21.52 3.56 9.75 5.25
実測値（％） 24.01 3.09 12.44 20.19 3.35 8.52 5.16
Ｈ2Ｏ ６．５６％
ＩＲ及びＭＳスペクトルは、表示構造に一致した。
【０１５０】
実施例５
Ｎａと塩形成（１：３）したＮ，Ｎ′−〔（ホスホノメチルイミノ）ジ−２，１−エタンジイル〕ビス〔Ｎ−（カルボキシメチル）グリシン〕のガドリニウム錯体
【０１５１】
【化２２】
【０１５２】
Ａ）Ｎ，Ｎ′−〔〔〔（ジエトキシホスフィニル）メチル〕イミノ〕ジ−２，１−エタンジイル〕ビス〔Ｎ−〔２−（１，１−ジメチルエトキシ）−２−オキソエチル〕グリシン〕１，１−ジメチルエチルエステル
生成物は、１Ｆに記載されるように調製したアミノホスホン酸エステル（１５．０９ｇ；９０．２８mmol）とJ. Org. Chem. 1993, 58, 1151に記載されるように調製した臭化物（７０．０９ｇ；１９９．０mmol）を反応させることにより調製した。反応は１Ｇに報告されるように行い、生成物は無色の油状物（３５．５９ｇ；５０．１４mmol）として回収した。
【０１５３】
収率：５６％
ＨＰＬＣ測定：９８．２％（面積％）
ＴＬＣ：担体：シリカゲルプレート ６０Ｆ ２５４ メルク
溶離液：トルエン／ＥｔＯＡｃ／ｉＰｒＯＨ＝５０：４５：５
検出：１M ＮａＯＨ中０．５％ ＫＭｎＯ4；２５４nm；Ｒｆ＝０．４０
1Ｈ−ＮＭＲ、13Ｃ−ＮＭＲ、ＩＲ及びＭＳスペクトルは、表示構造に一致した。
【０１５４】
Ｂ）Ｎ，Ｎ′−〔（ホスホノメチルイミノ）ジ−２，１−エタンジイル〕ビス〔Ｎ−（カルボキシメチル）−グリシン〕
ポイントＡで調製されたヘキサエステル（２９．２３ｇ；４１．１８mmol）を、１Ｈに報告されたのと同じ条件下、ヨードメチルシランで脱保護した。生じた粗生成物をリライト（Relite）（登録商標）３ＡＳ／ｆｂカラムに載せて、残留ヨウ化物が排除されるまで水で溶出し、次に６０℃に維持されたダウエックス（登録商標）ＣＣＲ３ＬＢ樹脂のカラムに載せた。精製化合物を含む溶液を凍結乾燥することにより、キレート化剤を白色の固体（９．６９ｇ；２２．６mmol）として得た。
【０１５５】
収率：５５％
融点：１１０〜１１４℃
ＨＰＬＣ測定：９６％（面積％）
元素分析
C H N P
計算値（％） 36.37 5.63 9.79 7.21
実測値（％） 35.03 5.76 9.43 6.92
Ｈ2Ｏ １．０５％
1Ｈ−ＮＭＲ、13Ｃ−ＮＭＲ、ＩＲ及びＭＳスペクトルは、表示構造に一致した。
【０１５６】
Ｃ）Ｎ，Ｎ′−〔（ホスホノメチルイミノ）ジ−２，１−エタンジイル〕ビス〔Ｎ−（カルボキシメチル）グリシン〕のガドリニウム錯体三ナトリウム塩
Ｈ2Ｏ（６０mL）中の工程Ｂのように得られたキレート化剤（６．０ｇ；１３．９７mmol）の溶液に、２N ＮａＯＨ（１５mL）及びＧｄ2Ｏ3（２．５３ｇ；６．９９mmol）を加えた。懸濁液を７０℃で１時間加熱し、次にミリポア（登録商標）ＨＡＷＰ ０．４５μmフィルターを通して濾過した。溶液を２N ＮａＯＨで中和し、乾燥するまで濃縮することにより、標題錯体を白色の固体（９．１ｇ；１４mmol）として定量的収率で得た。
【０１５７】
融点：＞２５０℃
ＨＰＬＣ測定：１００％（面積％）
元素分析
C H Gd N Na P
計算値（％） 24.04 2.79 24.21 6.47 10.62 4.77
実測値（％） 23.94 3.00 24.06 6.45 10.74 4.71
ＩＲ及びＭＳスペクトルは、表示構造に一致した。
【０１５８】
実施例６
Ｎａと塩形成（１：５）したＮ，Ｎ′−〔（ホスホノメチルイミノ）ジ−２，１−エタンジイル〕ビス〔Ｎ−（ホスホノメチル）グリシン〕のガドリニウム錯体
【０１５９】
【化２３】
【０１６０】
実施例１Ｆに記載されるように調製したアミノメチルホスホン酸ジエチルエステルを、実施例４Ｄにより調製されたブロモ誘導体と反応させた。
【０１６１】
生じたヘキサエステルを４Ｆに報告されたのと同じ条件下で脱保護した。単離された酸性キレート化剤を、３Ｇに報告された方法により錯化した。
【０１６２】
実施例７
トリエチルアミンと塩形成（１：４）したＮ，Ｎ′−〔〔〔３−カルボキシ−１−ホスホノプロピル〕イミノ〕ジ−２，１−エタンジイル〕ビス〔Ｎ−（カルボキシメチル）グリシン〕のガドリニウム錯体
【０１６３】
【化２４】
【０１６４】
Ａ）２，２′−（イミノジ−２，１−エタンジイル）ビス−１Ｈ−イソインドール−１，３（２Ｈ）−ジオン）
酢酸（１０６ｇ）中の無水フタル酸（３２．０ｇ；２１６mmol）とジエチレントリアミン（１０．３２ｇ；１００mmol）の混合物を１時間還流した。酢酸をロータリーエバポレーターで除去して、得られた淡黄色の油状物を一晩真空下で静置した。油状物が静置により凝固し、次にこれを重炭酸ナトリウムの飽和溶液で粉砕することにより、酢酸及び少量の未反応無水フタル酸を除去した。次に黄色の固体を濾過し、水で洗浄し、クロロホルム（５００mL）で溶解して、このクロロホルム溶液をＮａ2ＳＯ4で乾燥した。クロロホルムの留去により固体（２８．０ｇ）を得た。
【０１６５】
収率：７７．１％
分析試料は、エタノールから結晶化した。
融点：１８０〜８１℃
1Ｈ−ＮＭＲ、13Ｃ−ＮＭＲ、ＩＲ及びＭＳスペクトルは、表示構造に一致した。
ＨＰＬＣ測定：９６．７％（面積％）
【０１６６】
Ｂ）４−〔ビス〔２−（１，３−ジヒドロ−１，３−ジオキソ−２Ｈ−イソインドール−２−イル）エチル〕アミノ〕−４−〔ビス（１，１−ジメチルエトキシ）ホスフィニル〕ブタン酸フェニルメチルエステル
アセトニトリル（２５mL）中の３−ベンジルオキシカルボニルプロピオンアルデヒド（４．０ｇ；２０．８０mmol）の溶液を、アセトニトリル（７５mL）中のポイントＡ）で調製されたビス（フタルイミド）誘導体（６．８ｇ；１８．７０mmol）のスラリーに３０分かけて加えた。添加の間、反応混合物の温度を８０〜９０℃に維持した。反応混合物を８０℃で更に３０分間撹拌した。アルデヒドの添加の間に反応混合物の色は黄色に変わった。アセトニトリル（１５mL）中の亜リン酸トリス（tert−ブチル）（５．２ｇ；２０．８mmol）を滴下により加え、この反応混合物を室温で４８時間撹拌した。亜リン酸トリス（tert−ブチル）の添加後（〜３時間）、反応混合物は清澄な黄色の溶液になった。次にアセトニトリルを除去して、残渣をＥｔＯＡｃ（５０mL）で処理した。生成した固体を濾過して、このＥｔＯＡｃ溶液をシリカゲルのカラム（５０：５０のヘキサン−ＥｔＯＡｃで充填）に直接適用した。カラムは最初ヘキサン−ＥｔＯＡｃ（６００mL）で溶出し、次に７０：３０（ＥｔＯＡｃ：ヘキサン）で溶出した。生成物を含む画分を集めて、溶媒を留去することにより油状物を得た。これを真空下で乾燥することにより白色の固体（９．９ｇ）を得た。
【０１６７】
収率：７２％
分析試料は、ヘキサン−ＥｔＯＡｃから結晶化した。
融点：１２０〜１２１℃
ＨＰＬＣ測定：９９．２％（面積％）
元素分析
C H N
計算値（％） 64.00 6.30 5.70
実測値（％） 63.90 6.34 5.54
1Ｈ−ＮＭＲ、13Ｃ−ＮＭＲ、ＩＲ及びＭＳスペクトルは、表示構造に一致した。
【０１６８】
Ｃ）４−〔ビス（２−アミノエチル）アミノ〕−４−〔ビス（１，１−ジメチルエトキシ）ホスフィニル〕ブタン酸フェニルメチルエステル
ＣＨ2Ｃｌ2（５０．０mL）中のポイントＢ）で調製されたtert−ブトキシホスフィニル誘導体（５．６５ｇ；７．８０mmol）の溶液に、ヒドラジン（１．５ｇ；４６．８０mmol）、続いて水（０．２mL）を加え、反応混合物を室温で撹拌した。反応は、1Ｈ ＮＭＲにより追跡した（反応は３６時間で終了した）。沈殿したフタリルヒドラジドをセライト（登録商標）を通して濾過し、フィルターケーキをＣＨ2Ｃｌ2で洗浄した。合わせた塩化メチレン溶液から溶媒を留去することにより濃厚な油状物を得て、これを真空下で乾燥した。得られたジアミン（３．６１ｇ）は、更に精製することなく、アルキル化工程に使用した。
【０１６９】
収率：９７％
1Ｈ−ＮＭＲ、13Ｃ−ＮＭＲ、ＩＲ及びＭＳスペクトルは、表示構造に一致した。
【０１７０】
Ｄ）Ｎ，Ｎ′−〔〔〔１−〔ビス（１，１−ジメチルエトキシ）ホスフィニル〕−３−〔（フェニルメトキシ）カルボニル〕プロピル〕イミノ〕ジ−２，１−エタンジイル〕ビス〔Ｎ−〔２−（１，１−ジメチルエトキシ）−２−オキソエチル〕グリシン １，１−ジメチルエチルエステル〕
アセトニトリル（６０mL）中のポイントＣ）で調製されたジアミノ中間体（７．５ｇ；１５．９mmol）の溶液に、ジイソプロピルエチルアミン（１８．５５ｇ；２５mL；１４２mmol）及びブロモ酢酸tert−ブチル（１３．２ｇ；１０．０mL；６９．５mmol）を加え、混合物を室温で一晩撹拌した。アセトニトリル及び過剰のジイソプロピルエチルアミンをロータリーエバポレーターで除去して、残渣をＫ2ＣＯ3溶液（５％、１００mL）で塩基性にした。反応混合物をジエチルエーテル（２×１５０mL）で抽出し、ジエチルエーテル溶液を水で洗浄して乾燥（Ｎａ2ＳＯ4）した。ジエチルエーテルの留去により、油状物を得て、これをシリカゲルクロマトグラフィーにより精製した。カラムはヘキサン−ＥｔＯＡｃ（７：３）で充填して、ヘキサン−ＥｔＯＡｃ（７：３）（５００mL）及び次にヘキサン−ＥｔＯＡｃ（５：５）で溶出した。所望の化合物を含む画分（Ｒｆ ０．５）を集めて、溶媒を留去することにより、濃厚な粘性油状物（７．５ｇ）を得た。
【０１７１】
収率：５１％
1Ｈ−ＮＭＲ、13Ｃ−ＮＭＲ、ＩＲ及びＭＳスペクトルは、表示構造に一致した。
【０１７２】
Ｅ）Ｎ，Ｎ′−〔〔〔１−〔ビス（１，１−ジメチルエトキシ）ホスフィニル〕−３−カルボキシプロピル〕イミノ〕ジ−２，１−エタンジイル〕ビス〔Ｎ−〔２−（１，１−ジメチルエトキシ）−２−オキソエチル〕グリシン １，１−ジメチルエチルエステル〕
ＴＨＦ（３０mL）中のポイントＤ）で調製されたベンジルエステル（４．６３ｇ；５mmol）の溶液に、１０％ Ｐｄ−Ｃ（２．０ｇ、デグッサ（Degussa）型、〜５０％水）を加え、混合物を４５psiで１２時間水素化した。触媒をセライト（登録商標）を通して濾過し、フィルターケーキをＴＨＦ（２×３０mL）で洗浄した。合わせたＴＨＦ溶液をロータリーエバポレーターで濃縮することにより、酸を濃厚な粘性油状物として得た。これを真空下で２４時間乾燥して、所望の化合物（３．９８ｇ）を単離し、これを更に精製することなくそのまま使用した。
【０１７３】
収率：９５．２％
1Ｈ−ＮＭＲ、13Ｃ−ＮＭＲ、ＩＲ及びＭＳスペクトルは、表示構造に一致した。
【０１７４】
Ｆ）Ｎ，Ｎ′−〔〔〔３−カルボキシ−１−ホスホノプロピル〕イミノ〕ジ−２，１−エタンジイル〕ビス〔Ｎ−（カルボキシメチル）グリシン〕
工程Ｅ）で調製されたヘキサエステル（０．８４ｇ、１mmol）をＴＦＡに溶解して、この混合物を室温で２４時間撹拌した。ＴＦＡをロータリーエバポレーターで除去して、残渣を無水ジエチルエーテル（１０mL）で処理した。沈殿した固体を濾過して、真空下で乾燥することにより、酸キレート化リガンドをＴＦＡ塩（０．４５ｇ）として得た。
【０１７５】
収率：９０％
ＨＰＬＣ測定：８６％（面積％）
1Ｈ−ＮＭＲ、13Ｃ−ＮＭＲ、ＩＲ及びＭＳスペクトルは、表示構造に一致した。
【０１７６】
Ｇ）トリエチルアミンと塩形成したＮ，Ｎ′−〔〔〔３−カルボキシ−１−ホスホノプロピル〕イミノ〕ジ−２，１−エタンジイル〕ビス〔Ｎ−（カルボキシメチル）グリシン〕のガドリニウム錯体
工程Ｆ）で得られた酸キレート化リガンドＴＦＡ塩（０．２５ｇ）をアセトニトリルと水の１：１混合物（５mL）に溶解して、次にＧｄ（ＯＡｃ）3（０．２５ｇ；６mmol）を反応混合物に加えた。反応混合物の当初のpHは、１．２９であることが判った。次に１N ＮａＯＨの添加により溶液のpHを５．０に調整して、混合物を室温で２４時間撹拌した。次にＧｄ錯体を、トリエチルアミン重炭酸塩緩衝液を使用してＤＥＡＥセファデックス（Sephadex）クロマトグラフィーにより精製した。８００−mM緩衝液で溶出した画分を集めて、凍結乾燥することにより、Ｇｄ錯体をトリエチルアミン塩（０．２ｇ）として得た。
【０１７７】
ＨＰＬＣ測定：１００％（面積％）
元素分析：Ｃ16Ｈ25Ｎ3Ｏ13ＰＧｄ・２．６ Ｃ6Ｈ15Ｎ・３ Ｈ2Ｏに関して計算
C H Gd N H2O
計算値（％） 39.02 7.25 16.10 8.06 3.00
実測値（％） 39.09 7.33 16.19 8.25 3.03
ＩＲ及びＭＳスペクトルは、表示構造に一致した。
【０１７８】
実施例８
メグルミンと塩形成（１：４）した４−フェニル−Ｎ−〔trans−４−〔〔〔４−〔ビス〔２−〔ビス（カルボキシメチル）アミノ〕エチル〕アミノ〕−１−オキソ−４−ホスホノブチル〕アミノ〕メチル〕シクロヘキシルカルボニル〕−Ｌ−フェニルアラニンのガドリニウム錯体
【０１７９】
【化２５】
【０１８０】
Ａ）４−フェニル−Ｎ−〔〔〔trans−４−〔〔４−〔ビス〔２−〔ビス〔２−（１，１−ジメチルエトキシ）−２−オキソエチル〕アミノ〕エチル〕アミノ〕−４−〔ビス（１，１−ジメチルエトキシ）ホスフィニル〕−１−オキソブチル〕アミノ〕メチル〕シクロヘキシル〕カルボニル〕−Ｌ−フェニルアラニン フェニルメチルエステル
ＣＨ2Ｃｌ2（１５mL）中の実施例７のポイントＥ）で開示されるように得られたモノ酸（０．９ｇ；１．０７５mmol）の溶液に、ＨＡＴＵ（ヘキサフルオロリン酸Ｏ−（７−アザベンゾトリアゾール−１−イル）−Ｎ，Ｎ，Ｎ′，Ｎ′−テトラメチルウロニウム）（０．４７５ｇ；１．２５mmol）を加え、この混合物を０℃で１０分間撹拌した。次にジイソプロピルエチルアミン０．３９ｇ（３．０mmol）を加え、混合物を０℃で更に１０分間撹拌した。次にＴＦＡ塩〔４−フェニル−Ｎ−〔〔trans−４−（アミノメチル）シクロヘキシル〕カルボニル〕−Ｌ−フェニルアラニン フェニルメチルエステル〕（０．５８４ｇ；１．０mmol）（アミノ化合物７）を反応混合物に加え、０℃で２時間及び室温で２４時間撹拌した。ＣＨ2Ｃｌ2を除去して、残渣をＥｔＯＡｃ（７５．０mL）で抽出した。ＥｔＯＡｃ溶液をＫ2ＣＯ3溶液（１０％、２×５０mL）、水で洗浄して、乾燥（Ｎａ2ＳＯ4）した。ＥｔＯＡｃの留去により、油状物を得て、これを真空下で乾燥することにより、泡状固体を得て、これをＥｔＯＡｃを使用してシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより精製した。生成物含有画分を集めて、溶媒を留去することにより油状物を得て、これを真空下で乾燥することにより泡状固体（１．１ｇ）を得た。これは、分析的に純粋であることが判り、次の工程に使用した。
【０１８１】
収率：８５％
元素分析
C H N
計算値（％） 65.10 8.40 5.40
実測値（％） 64.55 7.86 5.31
1Ｈ−ＮＭＲ、13Ｃ−ＮＭＲ、ＩＲ及びＭＳスペクトルは、表示構造に一致した。
【０１８２】
Ｂ）４−フェニル−Ｎ−〔〔trans−４−〔〔〔４−〔ビス〔２−〔ビス〔２−（１，１−ジメチルエトキシ）−２−オキソエチル〕アミノ〕エチル〕アミノ〕−４−〔ビス（１，１−ジメチルエトキシ）ホスフィニル〕−１−オキソブチル〕アミノ〕メチル〕シクロヘキシル〕カルボニル〕−Ｌ−フェニルアラニン
ポイントＡ）で開示されるように得られたベンジルエステル（１ｇ；０．００７８mmol）の溶液に、１０％ Ｐｄ−Ｃ（０．５ｇ；デグッサ型、ほぼ５０％水）を加え、混合物を４５psiで８時間水素化した。触媒をセライト（登録商標）を通して濾過し、フィルターケーキをＴＨＦ（２×３０mL）で洗浄した。合わせたＴＨＦ溶液をロータリーエバポレーターで濃縮することにより、酸を濃厚な粘性油状物として得た。これを真空下で２４時間乾燥することにより、泡状固体（０．９ｇ）を得て、次にこれを更に精製することなくそのまま使用した。
【０１８３】
収率：９７％
1Ｈ−ＮＭＲ、13Ｃ−ＮＭＲ、ＩＲ及びＭＳスペクトルは、表示構造に一致した。
【０１８４】
Ｃ）４−フェニル−Ｎ−〔〔trans−４−〔〔〔４−〔ビス〔２−〔ビス（カルボキシメチル）アミノ〕エチル〕アミノ〕−１−オキソ−４−ホスホノブチル〕アミノ〕メチル〕シクロヘキシル〕カルボニル〕−Ｌ−フェニルアラニン
トリフルオロ酢酸（４mL）をポイントＢ）で調製されたヘキサ−（tert−ブチル）エステル（０．９ｇ；０．７５mmol）に加え、混合物を室温で１２時間撹拌した。次にジエチルエーテル（３０．０mL）を反応混合物に加えて、沈殿物を濾過して真空下で乾燥することにより、白色の固体（０．８ｇ）（収率：９７％）を得た。ＴＦＡ塩のＨＰＬＣ分析は、これがかなり純粋であり、そして更に精製することなくＧｄキレート化に有用であることを示した。ＴＦＡ塩（１００mg）から分取ＨＰＬＣにより分析用試料を得た。純粋な生成物を含む画分を集めて、凍結乾燥することにより、白色の飛散性固体（５０mg）を得た。
【０１８５】
精製収率：５０％
元素分析（Ｃ41Ｈ55Ｆ3Ｎ5Ｏ17Ｐ・２Ｈ2Ｏに関して計算）
C H N
計算値（％） 48.81 6.05 6.84
実測値（％） 48.60 5.90 6.90
1Ｈ−ＮＭＲ、13Ｃ−ＮＭＲ、31Ｐ−ＮＭＲ、ＩＲ及びＭＳスペクトルは、表示構造に一致した。
【０１８６】
Ｄ）４−フェニル−Ｎ−〔trans−４−〔〔〔４−〔ビス〔２−〔ビス（カルボキシメチル）アミノ〕エチル〕アミノ〕−１−オキソ−４−ホスホノブチル〕アミノ〕メチル〕シクロヘキシルカルボニル〕−Ｌ−フェニルアラニンのガドリニウム錯体
ポイントＣで開示されるように得られたＴＦＡ塩（０．３ｇ；０．２７５mmol）を、アセトニトリル（７．０mL）と水（２mL）との混合物に加えた。ここに水（２．０mL）中のＧｄ（ＯＡｃ）3（０．１３２ｇ；０．３２５mmol）の溶液を滴下により加えた。この溶液の当初のpHは１．２９であることが判った。溶液が混濁し、そして水中のメグルミンの溶液を加えることにより、溶液のpHを５．０に調整した。混濁した反応混合物を室温で４８時間撹拌した。次にメグルミン溶液の添加により反応混合物のpHを９．０に上昇させ、次いでアセトニトリル及び水を使用して分取ＨＰＬＣにより精製した。純粋な生成物を含む画分を集めて凍結乾燥することにより、飛散性固体（２２０mg）を得た。
【０１８７】
収率：７８．５％
ＨＰＬＣ測定：９７．７％（面積％）
Ｃ67Ｈ119Ｎ9Ｏ35ＰＧｄ・５Ｈ2Ｏの元素分析
C H N Gd
計算値（％） 42.60 6.88 6.67 8.32
実測値（％） 42.54 6.93 6.47 7.06
ＩＲ及びＭＳスペクトルは、表示構造に一致した。
【０１８８】
実施例９
ナトリウムと塩形成（１：４）した（３β，５β，７α，１２α）−３−〔〔４−〔ビス〔２−〔ビス（カルボキシメチル）アミノ〕エチル〕アミノ〕−１−オキソ−４−ホスホノブチル〕アミノ〕−７，１２−ジヒドロキシコラン−２４−酸のガドリニウム錯体
【０１８９】
【化２６】
【０１９０】
Ａ）（３α，５β，７α，１２α）−３−〔〔４−〔ビス〔２−〔ビス〔２−（１，１−ジメチルエトキシ）−２−オキソエチル〕アミノ〕エチル〕アミノ〕−４−〔ビス（１，１−ジメチルエトキシ）ホスフィニル〕−１−オキソブチル〕アミノ〕−７，１２−ジヒドロキシコラン−２４−酸メチルエステル
ＣＨ2Ｃｌ2中の実施例７のポイントＥ）で開示されるように得られたモノ酸（１．２ｇ；１．４mol）の溶液に、ＨＡＴＵ（０．６ｇ；１．５mol）を加え、この混合物を０℃で１０分間撹拌した。次にジイソプロピルエチルアミン（１mL）を加え、混合物を０℃で更に１０分間撹拌した。次に３β−アミノコール酸メチルエステル（WO 9532741に開示される化合物）（０．５２６ｇ；１．２５mmol）を混合物に加え、０℃で２時間及び室温で４８時間撹拌した。ＣＨ2Ｃｌ2をロータリーエバポレーターで除去して、残渣をＥｔＯＡｃで抽出した。ＥｔＯＡｃ層をＫ2ＣＯ3（１０％、２×３０mL）、水で洗浄して、乾燥（Ｎａ2ＳＯ4）した。ＥｔＯＡｃの留去により、油状物を得て、これをシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ＣＨ2Ｃｌ2：ＣＨ3ＯＨ、９５：５）により精製した。生成物含有画分（Ｒｆ＝０．５）を集めて、溶媒を留去することにより油状物を得て、これを真空下で乾燥することにより所望の化合物（１．１ｇ）を泡状固体として得た。
【０１９１】
収率：７１％
ＴＬＣ：担体：シリカゲルプレート ６０Ｆ ２５４ メルク
溶離液：ＣＨ2Ｃｌ2／ＣＨ3ＯＨ ９５：５
検出：Ｉ2；２５４nm；Ｒｆ＝０．５
1Ｈ−ＮＭＲ、13Ｃ−ＮＭＲ、ＩＲ及びＭＳスペクトルは、表示構造に一致した。
【０１９２】
Ｂ）（３α，５β，７α，１２α）−３−〔〔４−〔ビス〔２−〔ビス〔２−（１，１−ジメチルエトキシ）−２−オキソエチル〕アミノ〕エチル〕アミノ〕−４−〔ビス（１，１−ジメチルエトキシ）ホスフィニル〕−１−オキソブチル〕アミノ〕−７，１２−ビス（アセチルオキシ）コラン−２４−酸メチルエステル
ピリジンと無水酢酸との混合物（１：１、２mL）に、工程Ａ）で調製されたジヒドロキシコール酸誘導体（１．２４ｇ；１mmol）を加え、混合物を室温で４８時間撹拌した。過剰の無水酢酸及びピリジンを除去し、残渣を重炭酸ナトリウムの飽和溶液（５．０mL）で処理してジエチルエーテルで抽出した。このジエチルエーテル溶液を水で洗浄して乾燥（Ｎａ2ＳＯ4）した。ジエチルエーテルの留去により、粘性油状物を得て、これをＥｔＯＡｃ−ヘキサン（８：２）を使用するシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより精製した。生成物を含む画分を集めて、溶媒を留去することにより、油状物を得て、これを真空下で乾燥することにより、所望の二酢酸エステル（０．４４ｇ）を泡状固体として得た。
【０１９３】
収率：７５％
1Ｈ−ＮＭＲ、13Ｃ−ＮＭＲ、ＩＲ及びＭＳスペクトルは、表示構造に一致した。
【０１９４】
Ｃ）（３α，５β，７α，１２α）−３−〔〔４−〔ビス〔２−〔ビス（カルボキシメチル）アミノ〕エチル〕アミノ〕−１−オキソ−４−ホスホノブチル〕アミノ〕−７，１２−ジヒドロキシコラン−２４−酸
トリフルオロ酢酸（３mL）を工程Ｂ）で調製されたヘキサ（tert−ブチル）エステル（０．６６２ｇ；０．５mmol）に加え、混合物を室温で３０分間撹拌して、４℃で１８時間保持した。次にトリフルオロ酢酸を除去することにより、所望の脱保護中間体（０．５２ｇ）を油状物として得て、これを真空下で乾燥した。エタノール、水（１：１．５mL）中の該化合物の溶液に、水酸化ナトリウム（２０％、５mL）を加え、混合物を室温で２４時間撹拌した。反応の終了はＨＰＬＣにより追跡した。溶媒を除去して、１N ＨＣｌで残渣を中和することにより、完全に脱保護されたポリ酸を塩酸塩として得て、これを濾過して、真空下で乾燥することにより、所望のキレート化合物（０．３５ｇ）を得た。
【０１９５】
収率：７９％
ＨＰＬＣ測定：９８％（面積％）
1Ｈ−ＮＭＲ、13Ｃ−ＮＭＲ、ＩＲ及びＭＳスペクトルは、表示構造に一致した。
【０１９６】
Ｄ）ナトリウムと塩形成（１：４）した（３β，５β，７α，１２α）−３−〔〔４−〔ビス〔２−〔ビス（カルボキシメチル）アミノ〕エチル〕アミノ〕−１−オキソ−４−ホスホノブチル〕アミノ〕−７，１２−ジヒドロキシコラン−２４−酸のガドリニウム錯体
水（２mL）中のＧｄＣｌ3・６Ｈ2Ｏ（５０mg、０．１３５mmol）の溶液に、アセトニトリル−水の混合物（１：１．７mL）に溶解した工程Ｃ）で調製された塩酸塩（０．１０４ｇ；０．１mmol）を加えた。反応混合物の当初のpHは、１．２７であることが判った。１N ＮａＯＨの添加により、反応混合物のpHを５．５まで上昇させた。混濁した反応混合物を４８時間撹拌し、１N ＮａＯＨの添加により溶液のpHを１０に上昇させた。得られた混濁溶液を遠心分離し、清澄な上澄溶液を集めて、分取ＨＰＬＣにより精製した。純粋な生成物を含む画分を集めて凍結乾燥することにより、所望の化合物を得た。
【０１９７】
精製収率：６２％
ＨＰＬＣ測定：９８％（面積％）
元素分析（Ｃ40Ｈ60Ｎ4Ｏ16ＰＧｄ・４Ｎａ・８Ｈ2Ｏに関して）
C H Gd N
計算値（％） 37.62 6.00 12.31 4.39
実測値（％） 37.37 5.95 11.43 4.40
ＭＳ：（Ｍ＋Ｈ）+＝１０４６．４
ＩＲスペクトルは、表示構造に一致した。
[Document Name] Statement
Title of the Invention Chelate compounds and their complexes with paramagnetic metals
[Claims]
1. A compound of formula (I), both racemic and optically active
Embedded image
Y is a COOH group or PO (OH)TwoWherein at least one Y group is PO (OH)Two),
R represents a hydrogen atom or-(CHTwo)m-ORTwo, (C1-CFive) -Alkyl- (C6-CTen) -Aryl or (C1-CFive) -Alkyl-heteroaryl, wherein the aryl or heteroaryl residue optionally has one or more halogen atoms, OH groups, alkyl (C1-CFive) Group and / or ORThreeContaining one or two fused rings substituted with a group,
(Where RTwoIs (C1-CFive) -Alkyl- (C6-CTen) -Aryl (optionally one or more halogen atoms, OH and (C1-CFive) -Substituted with an alkyl group);
RThreeIs (C6-CTen) Aryl (optionally one or more halogen atoms, OH and / or (C1-CFive) -Substituted with an alkyl group);
m is in the range of 1 to 5)
R1May have the same meaning as R (where Y is PO (OH)Two, R1Is H, (CHTwo)mNHTwoOr (CHTwo)mCOOH or its amino derivative, and all three Y groups are PO (OH)Two, Two R groups and R1Is not H at the same time)]
A compound represented by the formula:
2. The compound of formula (I)
Embedded image
(In the formula,
Y is a COOH group or PO (OH)TwoWherein at least one Y group is PO (OH)Two),
R represents a hydrogen atom or-(CHTwo)m-ORTwo, (C1-CFive) -Alkyl- (C6-CTen) -Aryl or (C1-CFive) -Alkyl-heteroaryl, wherein the aryl or heteroaryl residue optionally has one or more halogen atoms, OH groups, alkyl (C1-CFive) Group and / or ORThreeContaining one or two fused rings substituted with a group,
(Where RTwoIs (C1-CFive) -Alkyl- (C6-CTen) -Aryl (optionally one or more halogen atoms, OH and (C1-CFive) -Substituted with an alkyl group);
RThreeIs (C6-CTen) Aryl (optionally one or more halogen atoms, OH and / or (C1-CFive) -Substituted with an alkyl group);
m is in the range of 1 to 5)
R1May have the same meaning as R (where Y is PO (OH)Two, R1Is H, (CHTwo)mNHTwoOr (CHTwo)mCOOH or an amino derivative thereof));
A chelated complex with an ion of a metal element having an atomic number ranging between 20-31, 39, 42, 43, 44, 49, and 57-83;
As well as those
Inorganic with a physiologically acceptable organic base selected from primary, secondary, tertiary amines or basic amino acids, or wherein the cation is selected from sodium, potassium, magnesium, calcium or mixtures thereof Salt with base.
3. Formula (II):
Embedded image
[Wherein, R and R1Has the same meaning as defined above.].
4. Formula (III):
Embedded image
[Wherein, R1Has the same meaning as defined above.].
5. Formula (IV):
Embedded image
3. The compound according to claim 1, wherein R is as defined above.
6. R or RTwoIs selected from benzyl, phenethyl or naphthylmethyl (C1-CFive) -Alkyl- (C6-CTen) -Aryl [where the aryl residue optionally has one or more halogen atoms or ORThreeGroup (where RThreeHas the same meaning as defined above).].
7. R is selected from pyridylmethyl or indolylmethyl (C1-CFive7. The compound according to any one of claims 1 to 6, which is a) -alkyl-heteroaryl.
8. N, N '-[(phosphonomethylimino) di-2,1-ethanediyl] bis [N-carboxymethyl-L-phenylalanine];
[4S- (4R*, 12R*)]-4-Carboxy-5,11-bis (carboxymethyl) -1-phenyl-12-[(phenyl-methoxy) methyl] -8- (phosphonomethyl) -2-oxa-5,8,11-triaza Tridecane-13-acid;
N, N '-[(phosphonomethylimino) di-2,1-ethanediyl] bis [N-carboxymethyl-L-tryptophan];
N, N-bis [2-[(carboxymethyl) (phosphonomethyl) amino] ethyl] -O- (4-hydroxy-phenyl) -3,5-diiodo-L-tyrosine;
N, N '-[(phosphonomethylimino) di-2,1-ethanediyl] bis [N- (carboxymethyl) -glycine];
N, N '-[(phosphonomethylimino) di-2,1-ethanediyl] bis [N- (phosphonomethyl) -glycine] gadolinium complex;
N, N '-[[[3-carboxy-1-phosphonopropyl] imino] di-2,1-ethanediyl] bis [N- (carboxymethyl) glycine];
4-phenyl-N- [trans-4-[[[4- [bis [2- [bis (carboxymethyl) amino] ethyl] amino] -1-oxo-4-phosphonobutyl] amino] methyl] cyclohexylcarbonyl]- L-phenylalanine;
(3β, 5β, 7α, 12α) -3-[[4- [bis [2- [bis (carboxymethyl) amino] ethyl] amino] -1-oxo-4-phosphonobutyl] amino] -7,12-dihydroxy Choran-24-acid;
N, N '-[[[3-amino-1-phosphonopropyl] imino] di-2,1-ethanediyl] bis [N- (carboxymethyl) glycine]
The compound according to any one of claims 1 to 7, which is selected from:
9. Gd (3+), Dy (3+), Fe (3+), Fe (2+) And Mn (2+9. The compound according to any one of claims 2 to 8, which is in the form of a chelate complex with a metal ion selected from).
10. The physiologically acceptable salt-forming organic base is selected from ethanolamine, diethanolamine, morpholine, glucamine, N, N-dimethylglucamine, N-methylglucamine, lysine, arginine, ornithine. The compound according to claim 2.
11. A τ of 100 ns or lessM10. The compound according to claim 9, having a value.
12. τ in the range of 10 to 100 nsM12. The compound of claim 11, having a value.
13. A τ in the range of 20 to 50 nsM13. The compound of claim 12, having a value.
14. The formula (II) wherein R1Is H, and R is as defined in claim 1).
a) esterification of the appropriate amino acids;
b) N-alkylation of the ester from step a) by reacting with the appropriate bromoacetic acid ester;
c) bromoalkylation of the intermediate from step b) by reacting with trifluoromethanesulfonic acid 2-bromoethyl ester prepared from bromoethanol, trifluoromethanesulfonic anhydride and 2,6-lutidine;
d) Preparation of aminomethylphosphonic acid diethyl ester by direct condensation of tribenzylhexahydrotriazine with the appropriate dialkyl phosphite followed by catalytic dehydrogenation of the condensation product;
e) bisalkylation of aminomethylphosphonic acid diethyl ester by reaction with the intermediate from step c) and isolation of the hexaester;
f) Deprotection of acidic functions of hexaester and isolation of acid chelating agent
A method comprising:
15. The process according to claim 14, wherein the bromoalkyl derivative from step c) is prepared by reacting with a suitable brominating agent, starting from the corresponding hydroxy derivative.
16. A compound of the formula (II) wherein R is H and R1Has the same meaning as in claim 1).
a) Preparation of 2,2 '-(iminodi-2,1-ethanediyl) bis-1H-isoindole-1,3 (2H) -dione by reacting phthalic anhydride with diethylenetriamine in acetic acid;
b) N-alkylation of the bis-phthalimide derivative from step a) by reaction with 3-benzyloxycarbonylpropionaldehyde in a suitable organic medium and then with tris (tert-butyl) phosphite ;
c) elimination of the phthalic acid group;
d) N-alkylation of the diamine from step c) by reacting with a suitable haloacetic acid ester;
e) debenzylation of the intermediate from d) by catalytic hydrogenation and isolation of the hexaester monocarboxylic acid derivative;
f) reaction of the hexaester monocarboxylic acid intermediate from e) with the appropriate amino compound and isolation of the corresponding amide;
g) Deprotection of acidic functional group of hexaester and recovery of acid chelating agent
A method comprising:
17. The method for producing a compound according to claim 4, having the formula (III),
a) bisaminomethylphosphonate by reacting appropriately activated bis tert-butyl phosphite with aminal and converting the resulting trimethylsilyl derivative directly to the corresponding hydroxy derivative by treatment with an appropriate aqueous acid solution Preparation of tert-butyl ester (bis-N-alkyl) derivative;
b) catalytic hydrogenation of the intermediate from step a);
c) N-alkylation of the compound resulting from step b) by reacting with a suitable haloacetic acid ester;
d) conversion of the amino alcohol from step c) to the corresponding bromo derivative by reacting with methanesulfonyl chloride and a suitable brominating agent;
e) condensation of the bromo derivative from step d) with a conveniently esterified convenient amino acid and recovery of the polyester;
f) Deprotection of acidic functional groups of polyester and recovery of chelating agent
A method comprising:
18. In the synthesis step a), the phosphonic acid tert-butyl ester is converted to MeThree18. The method of claim 17, wherein the method is activated with SiCl.
19. The process according to claim 17, wherein the synthesis of the aminomethylphosphonic acid bis tert-butyl ester (bis-N-alkyl) derivative in step a) is catalyzed by a catalytic amount of lanthanide triflate.
20. The method according to claim 19, wherein the lanthanide triflate used is ytterbium triflate.
21. A complex compound according to any one of claims 2 to 13 for diagnostic use.
22. A pharmaceutical composition for diagnostic imaging, comprising the chelate complex compound according to any one of claims 2 to 13 as a mixture with a suitable carrier.
23. Use of a chelate complex compound according to claims 2 to 13 for the preparation of a diagnostic formulation for imaging of organs and / or tissues of the human or animal body by MRI.
DETAILED DESCRIPTION OF THE INVENTION
[0001]
The present invention relates to new compounds capable of chelating paramagnetic divalent and trivalent metal ions, their chelation with said metal ions, and contrast agents in magnetic resonance imaging (MRI). As for its use as.
[0002]
From a radiologist's point of view, an improved radiographic image, which means better contrast enhancement between healthy and diseased tissue, would aid in the diagnosis that can be obtained by prior administration of an appropriate foreign substance.
[0003]
These substances cause significant denaturation of certain properties of water protons belonging to the tissue under examination, known as relaxivity (when such protons are exposed to an external magnetic field).
[0004]
These substances are known as contrast agents for MRI. Numerous chelate complexes of linear and cyclic polyaminopolycarboxylic acid ligands with paramagnetic metals are known to be useful as MRI contrast agents.
[0005]
The compounds generally have two basic polyaminopolycarboxylic acid structures: diethylenetriaminepentaacetic acid (DTPA) and 1,4,7,10-tetraazacyclododecane-1,4,7,10-tetraacetic acid (DOTA). ).
[0006]
The compounds of the present invention are novel polyamino derivatives, characterized in that they contain at least one phosphonic acid residue as one of the binding sites in the chelator structure.
[0007]
Relaxation (r1p) Are intrinsic properties of paramagnetic complexes, characterized by their ability to increase the nuclear magnetic relaxation rate of vicinal protons. In the case of a Gd (III) chelate where q ≧ 1 (where q is the number of coordinating water molecules), a significant contribution to the increased relaxation observed for the water protons of the solvent is due to the bound water (S. Aime et al., Chem. Soc. Rev., 1998, 27, 19).
[0008]
This contribution (ris 1p) Has the following equation:
[0009]
(Equation 1)
[0010]
Gives the relaxation time of the proton of the water molecule coordinated inside the coordination sphere (T1M) And residence time (τM).
[0011]
T1MIs the residence time τ of the protons of the coordinating water.MRelaxation time τ of metal and metal ionsSThrough the contribution τ from the reorientation of the paramagnetic speciesRReceive. And ris 1pIs T1M> ΤM(High-speed exchange condition) and T1MIs greatest when it is as short as possible.
[0012]
R at the value of the magnetic field conventionally used in clinical practice1pSignificantly reduces molecular tumbling in a variety of ways, and the resulting τRHas been achieved to date. However, the residence time of the water molecule τMDue to the limiting effect caused by1pNo increase has yet been observed. Τ of about 30 nsMOnly the value is τRT induced by the increase in1MFine tuning of this parameter has been the main focus of current research in the field of MRI, in order to be able to take full advantage of the decrease in NR. For this reason, the exchange rate values of water molecules in lanthanide (III) complexes are of utmost importance in the development of new MRI contrast agents. In fact, the residence time of the water molecule coordinated to the Gd (III) complex contributes directly to the nuclear-electron dipolar interaction and controls the efficiency of the transfer of the paramagnetic action of the solvent to the water molecule. In order to play a particularly important role.
[0013]
The above cited prior art contrast agents, which generally include polyaminopolycarboxylic acid derivatives, typically have a τ comprised between 200 and 2500 ns.MAlthough values are shown, such values are significantly higher than the optimal value of 30 ns.
[0014]
Optimization and coordination of the above parameters is still a very important goal for anyone engaged in the development of new MRI contrast agents.
[0015]
The present invention is capable of causing an increase in the rate of proton exchange, characterized in that it comprises at least one phosphonic acid residue as a binding site in the structure of the chelating agent, and thus advantageously has a τMLow polyamino derivatives.
[0016]
More specifically, an object of the present invention is to provide compounds of formula (I), both racemic and optically active:
[0017]
Embedded image
[0018]
(In the formula,
Y is a COOH group or PO (OH)TwoWherein at least one Y group is PO (OH)Two),
R represents a hydrogen atom or-(CHTwo)m-ORTwo, (C1-CFive) -Alkyl- (C6-CTen) -Aryl or (C1-CFive) -Alkyl-heteroaryl, wherein the aryl or heteroaryl residue optionally has one or more halogen atoms, OH groups, alkyl (C1-CFive) Group and / or ORThreeCharacterized in that it comprises one or two fused rings substituted by a group,
RTwoIs (C1-CFive) -Alkyl- (C6-CTen) -Aryl (optionally one or more halogen atoms, OH and (C1-CFive) -Substituted with an alkyl group);
RThreeIs (C6-CTen) Aryl (optionally one or more halogen atoms, OH and / or (C1-CFive) -Substituted with an alkyl group);
m ranges from 1 to 5;
R1May have the same meaning as R (where Y is PO (OH)Two, R1Is H, (CHTwo)mNHTwo, (CHTwo)mSelected from COOH or its amino derivative)]].
[0019]
A further object of the present invention is to provide a compound of formula (I) and a metal element having an atomic number ranging from 20 to 31, 39, 42, 43, 44, 49 or 57 to 83. Chelates with monovalent and trivalent ions, and with physiologically compatible organic bases selected from primary, secondary, tertiary amines or basic amino acids, or when the cation is sodium, potassium, magnesium , Calcium or a salt thereof with an inorganic base selected from a mixture thereof.
[0020]
It is a further object of the present invention to provide a compound of formula (I), a complex thereof with a paramagnetic metal and a physiological salt thereof for the preparation of a formulation for imaging organs and / or tissues of the human or animal body by using MRI. The use of that salt is compatible with.
[0021]
(C1-CFive) -Alkyl- (C6-CTenExamples of) -aryl groups are characterized in that they include benzyl, phenethyl, naphthylmethyl, wherein the aryl residue optionally has one or more halogen atoms or ORThreeGroup (where RThreeIs as defined above).
[0022]
(C1-CFiveExamples of) -alkyl-heteroaryl groups are characterized in that they include pyridylmethyl or indolylmethyl.
[0023]
(C6-CTenExamples of aryl groups are optionally one or more halogen atoms, OH and / or (C1-CFive) -Phenyl or naphthyl substituted with an alkyl group.
[0024]
(C1-CFiveExamples of) -alkyl groups are preferably characterized as comprising methyl, ethyl, isopropyl.
[0025]
Preferred are those of formula (II):
[0026]
Embedded image
[0027]
[Here, there are four side carboxylic acid groups and a central phosphonic acid group, and where R and R1Has the same meaning as defined above. Among the compounds of formula (II), particularly preferred are R1Is a hydrogen atom, and R can assume all of the aforementioned meanings.
[0028]
Also preferred are those of formula (III):
[0029]
Embedded image
[0030]
[Here, there are two flanking phosphonic acid groups and three carboxylic acid groups, and where R1Takes all the above-mentioned values], and the general formula (IV):
[0031]
Embedded image
[0032]
Wherein three phosphonic acid groups and two carboxylic acid groups are present, and wherein R has the values described above.
[0033]
Particularly preferred are the following compounds:
N, N '-[(phosphonomethylimino) di-2,1-ethanediyl] bis [N-carboxymethyl-L-phenylalanine];
[[4S- (4R*, 12R*)]-4-Carboxy-5,11-bis (carboxymethyl) -1-phenyl-12-[(phenyl-methoxy) methyl] -8- (phosphonomethyl) -2-oxa-5,8,11-triaza Tridecane-13] acid;
N, N '-[(phosphonomethylimino) di-2,1-ethanediyl] bis [N-carboxymethyl-L-tryptophan];
N, N-bis [2-[(carboxymethyl) (phosphonomethyl) amino] ethyl] -O- (4-hydroxyphenyl) -3,5-diiodo-L-tyrosine;
N, N '-[(phosphonomethylimino) di-2,1-ethanediyl] bis [N- (carboxymethyl) -glycine];
N, N '-[(phosphonomethylimino) di-2,1-ethanediyl] bis [N- (phosphonomethyl) glycine] gadolinium complex;
N, N '-[[[3-carboxy-1-phosphonopropyl] imino] di-2,1-ethanediyl] bis [N- (carboxymethyl) glycine];
4-phenyl-N- [trans-4-[[[4- [bis [2- [bis (carboxymethyl) amino] ethyl] amino] -1-oxo-4-phosphonobutyl] amino] methyl] cyclohexylcarbonyl]- L-phenylalanine;
(3β, 5β, 7α, 12α) -3-[[4- [bis [2- [bis (carboxymethyl) amino] ethyl] amino] -1-oxo-4-phosphonobutyl] amino] -7,12-dihydroxy Choran-24-acid;
N, N '-[[[3-amino-1-phosphonopropyl] imino] di-2,1-ethanediyl] bis [N- (carboxymethyl) glycine];
And their paramagnetic chelate complexes and their physiologically compatible salts.
[0034]
Preferred chelates are those wherein the divalent or trivalent metal ion is Gd (3+), Dy (3+), Fe (3+), Fe (2+) And Mn (2+). Particularly preferred is Gd (3+) Chelate.
[0035]
Preferred cations of inorganic bases that are optionally suitable for salifying the chelate complexes of the present invention include, in particular, ions of alkali or alkaline earth metals, such as potassium, sodium, calcium, magnesium and mixtures thereof. It is characterized by.
[0036]
Preferred cations of organic bases suitable for this purpose are primary, secondary and tertiary such as, inter alia, ethanolamine, diethanolamine, morpholine, glucamine, N-methylglucamine, N, N-dimethylglucamine. It is obtained by protonation of a secondary amine.
[0037]
Preferred cations of amino acids include, for example, lysine, arginine or ornithine cations.
[0038]
Unexpectedly, the introduction of at least one phosphonic acid group as a binding site in the structure of the chelating agent unexpectedly increases the rate of proton exchange, and thus the particularly low τMA contrast agent having a value was provided.
[0039]
In particular, the chelate complexes of the present inventionMIt is characterized by a value of <100 ns, preferably between 10 and 100 ns, most preferably between 20 and 50 ns.
[0040]
Among various synthetic approaches to the compounds of the present invention, compounds of formula (II), in particular R1Is preferred for the preparation of compounds wherein R is H and R is as defined in claim 1, as reported in Scheme 1 below:
[0041]
Embedded image
[0042]
Wherein R has the value defined above for compound (I).
[0043]
Briefly, the synthesis process of Scheme 1 is characterized by comprising the following steps:
a) Esterification of the appropriate amino acids. The esterification is advantageously carried out with an amino acid and an alkyl acetate and HClO.FourBy reacting with an acid such as In a variant, amino acids previously N-protected by reaction with CBZCl are converted to KTwoCOThreeEsterification by reaction with an alkyl halide in the presence of a base such as
[0044]
b) N-alkylation of the resulting ester (Intermediate 1) by reaction with a suitable bromoacetate such as tert-butyl bromoacetate. The reaction is preferably carried out in an organic solvent selected from acetonitrile, THF, EtOAc and in the presence of a pH 8 buffer;
[0045]
c) Bromoalkylation of intermediate 2 by reacting with trifluoromethanesulfonic acid 2-bromoethyl ester previously prepared from bromoethanol, trifluoromethanesulfonic anhydride and 2,6-lutidine (intermediate 3). The bromoalkylation is suitably performed, for example, in an organic solvent selected from toluene, acetonitrile, dichloroethane and in the presence of an ethylenediamine, diisopropylethylamine, amine selected from triethylamine, Intermediate 4 is obtained. In a variant of the invention, alternatively, compound 4 is the corresponding N- (2-hydroxyl) obtained as described in WO 98/05625, which is hereby incorporated by reference in its entirety. (Ethyl) derivatives, can be prepared by reacting with a brominating agent such as NBS in the presence of triphenylphosphine;
[0046]
d) Preparation of aminomethylphosphonic acid diethyl ester (intermediate 5) by direct condensation of tribenzylhexahydrotriazine with the appropriate dialkyl phosphite followed by debenzylation by catalytic hydrogenation of the condensation product;
[0047]
e) Bisalkylation of intermediate 5 by reaction with intermediate 4 and isolation of hexaester 6. In the process of the present invention, the bisalkylation reaction is preferably performed in an organic solvent such as acetonitrile, ethyl acetate and in the presence of a pH 8 buffer;
[0048]
f) Deprotection of the acidic function of intermediate 6 and isolation of acid chelator 7 The deprotection comprises converting the hexaester and iodotrimethylsilane to CH 2ThreeIt can be achieved by reacting in an organic solvent such as CN.
[0049]
While R is H and R1A different synthetic approach for the preparation of compounds of formula (II), wherein is as defined in claim 1, is reported in Scheme 1 (2) below:
[0050]
Embedded image
[0051]
Embedded image
[0052]
[Herein, by way of example, the preparation of one of the preferred complex compounds of the invention is detailed].
[0053]
The synthesis process of Scheme 1 (2) is essentially characterized by comprising the following steps:
a) 2,2 '-(iminodi-2,1-ethanediyl) bis-1H-isoindole-1,3 (2H) -dione) by reacting phthalic anhydride with diethylenetriamine in acetic acid (intermediate Preparation of 1);
[0054]
b) Reaction of 3-benzyloxycarbonylpropionaldehyde (intermediate 2) in a suitable organic medium followed by reaction with tris (tert-butyl) phosphite gives intermediate 3, bis- N-alkylation of phthalimide derivative 1;
[0055]
c) elimination of the phthalic acid group, for example by reaction with hydrazine, yielding the corresponding diamine (intermediate 4);
[0056]
d) N-alkylation of diamine 4 by reaction with a suitable haloacetic ester such as, for example, tert-butyl bromoacetate, to give intermediate 5. The reaction is preferably carried out in an organic solvent selected from acetonitrile, ethyl acetate and in the presence of a suitable tertiary amine such as, for example, diisopropylethylamine.
[0057]
e) Debenzylation of intermediate 5 by catalytic hydrogenation and isolation of hexaester monocarboxylic acid 6. In a preferred process, the hydrogenation is performed in an organic solvent such as, for example, THF and catalyzed by 10% Pd-C;
[0058]
f) Reaction of hexaester monocarboxylic acid 6 with the appropriate amino compound (compound 7) and isolation of the corresponding amide (derivative 8). In a preferred process, the reaction is carried out in the presence of HATU (O- (7-azabenzotriazol-1-yl) -N, N, N ', N'-tetramethyluronium hexafluoro-phosphate). The
[0059]
g) Deprotection of the acidic functional group of the hexaester and recovery of the acid chelator (compound 10). In one preferred process of the invention, deprotection of the acidic function is performed on the hexaester derivative prepared in step e) (intermediate 6), for example as disclosed later in the experimental part of the invention. Thus, the acid chelating agent of Example 7 is obtained. In the process of Scheme 1 (2), the deprotection would otherwise be the first debenzylation step by catalytic hydrogenation of the benzyl ester contained in the amide derivative 8 and the hexaester, which would give the chelating agent 10 A second step involving the deprotection of 9 residual acidic functional groups. The hydrogenation is preferably performed in an organic solvent such as, for example, THF and catalyzed by 10% Pd-C. Subsequent deprotection can be carried out, for example, by reacting hexaester 9 with trifluoroacetic acid.
[0060]
On the other hand, compounds of general formula (III) are preferably prepared according to Scheme 2 below.
[0061]
Embedded image
[0062]
[Wherein, R1Has the values defined above for compound (I)].
[0063]
The synthesis process of Scheme 2 is characterized by comprising the following steps:
a) bis-tert-butyl aminomethylphosphonic acid (bis-N-alkyl) derivative by reacting suitably activated bis tert-butyl phosphite (intermediate 1) with aminal (intermediate 2) Preparation of (Intermediate 3). In particular, in the process of the present invention, the phosphonic acid tert-butyl ester is advantageously used in a reaction carried out in an organic solvent and in the presence of an amine such as triethylamine, e.ThreeActivated with SiCl. The resulting trimethylsilyl derivative is reacted with intermediate 2 obtained from 2-benzylaminoethanol and aqueous formaldehyde. The reaction is activated by the presence of a catalytic amount of lanthanide triflate. Particularly preferred is ytterbium triflate. In the process of the present invention, the resulting trimethylsilyl derivative is not isolated, but is directly converted to the corresponding hydroxy derivative by treatment with an appropriate aqueous acid such as aqueous acetic acid.
[0064]
b) Catalytic hydrogenation of intermediate 3. In a preferred process, the reaction is carried out in an alcoholic medium and Pd (OH)Two/ C catalyzed.
[0065]
c) N-alkylation of the compound resulting from step b) (intermediate 4) by reaction with a suitable haloacetic ester, such as tert-butyl bromoacetate. The reaction is preferably carried out in an organic solvent selected from acetonitrile, ethyl acetate and in the presence of a buffer pH 8.
[0066]
d) Conversion of the isolated amino alcohol (intermediate 5) to the corresponding bromo derivative by reacting with a brominating agent such as methanesulfonyl chloride and lithium bromide. This reaction is carried out in an organic solvent selected from THF, acetonitrile and ethyl acetate under a nitrogen atmosphere and in the presence of an amine selected from triethylamine and diisopropylethylamine at a temperature in the range of 20 to -5 ° C. Will be
[0067]
e) Condensation of the bromo derivative (Intermediate 6) with a suitably esterified convenient amino acid (Intermediate 7) and isolation of the polyester (Intermediate 8). The reaction is advantageously performed in an organic solvent, preferably selected from acetonitrile, THF, ethyl acetate, and in the presence of a buffer pH 8.
[0068]
f) Deprotection of the acidic functional groups of the polyester and isolation of the chelating agent (compound 9). For deprotection, for example, polyester, HCl, HTwoSOFourThis is achieved by reacting with an acid selected from in an aqueous mixture of an organic solvent such as dioxane.
[0069]
The compounds of the present invention have wide applicability because they can be used for intravascular (eg, intra-arterial, intra-coronary, intraventricular, etc.), intrathecal, intraperitoneal, intralymphatic and intraluminal administration. . In addition, the compounds are suitable for oral or enteral administration and are therefore particularly suitable for imaging of the gastrointestinal tract.
[0070]
For parenteral administration, preferably they can be formulated as sterile aqueous solutions or suspensions, the pH of which may range from 6.0 to 8.5.
[0071]
These aqueous solutions or suspensions can be administered at concentrations ranging from 0.002 to 1.0M. These formulations may be supplied lyophilized for reconstitution before use.
[0072]
For gastrointestinal use or for intracavitary injection, these substances may be formulated as solutions or suspensions, optionally with suitable excipients, for example, to control viscosity.
[0073]
For oral administration, they may be prepared by methods commonly used in the pharmaceutical arts, or to obtain additional protection against acidic pH in the stomach (thus occurring especially at pH values typical of gastric juices, (Prevents the release of chelating metal ions).
[0074]
Other excipients, such as sweeteners and / or flavors, can also be added by known methods of formulating.
[0075]
Solutions or suspensions of the compounds of the present invention can also be formulated as aerosols for use in aerosol-bronchiography and infusion.
[0076]
The compounds of the present invention can optionally be chemically conjugated to a suitable polymer, targeting vector, or encapsulated in a suitable carrier.
[0077]
For example, they can also be encapsulated in liposomes, or they can be a component of their chemical structure and used as single or multilamellar vesicles.
[0078]
To better illustrate the broad application potential of the present invention, a non-limiting list of preferred compounds of the present invention is reported below.
[0079]
Embedded image
[0080]
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[0081]
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[0082]
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[0083]
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[0084]
Experimental part
Example 1
Gadolinium complex of [N, N '-[(phosphonomethylimino) di-2,1-ethanediyl] bis [N-carboxymethyl-L-phenylalanine] salt-formed (1: 3) with Na
[0085]
[0086]
A) L-phenylalanine 1,1-dimethylethyl ester
L-phenylalanine (62.6 g; 379) in tert-butyl acetate (320 mL) cooled in an ice bath and stirred vigorously.mmol) Is added to 70% HClOFourAqueous solution (35 mL, 407mmol) Was added slowly. After stirring at room temperature for 11 days, the mixture was diluted with 100 mL of water and cooled in an ice bath. The mixture was made basic with 5N NaOH and a white solid (unreacted phenylalanine) precipitated, which was filtered. The mixture was then extracted with EtOAc (4 × 200 mL) and the combined organic phases were combined with water (2 × 200 mL) and 5% Na.TwoCOThree(300 mL). NaTwoSOFourAfter drying over and carefully removing the solvent under vacuum, the desired compound was obtained as a colorless oil (53.53 g; 242mmol) Which did not require further purification and was stored at -18 ° C.
[0087]
Yield: 64%
TLC: Carrier: silica gel plate 60F 254 Merck
Eluent: CHClThree/ CHThreeOH / 25% NHFourOH 90: 9: 1.
Detection: 0.2% (w / v) ninhydrin in ethanol Rf = 0.6
1H-NMR,13C-NMR, IR and MS spectra were consistent with the indicated structure.
[0088]
B) N- [2- (1,1-dimethylethoxy) -2-oxoethyl] -L-phenylalanine 1,1-dimethylethyl ester
L-Phenylalanine 1,1-dimethylethyl ester (compound prepared at point A) (53.53 g; 242) in acetonitrile (400 mL) and 2 M phosphate buffer pH 8 (200 mL)mmol), Tert-butyl bromoacetate (37.3 mL; 254)mmol) Was vigorously stirred at room temperature for 16 hours. After separation, the organic phase was evaporated and the residue was taken up in EtOAc; the aqueous phase was extracted with EtOAc (3 × 200 mL). The combined organic phases were washed with water (2 × 300 mL), brine (200 mL) and finally NaTwoSOFourAnd dried. The crude product was purified by flash chromatography (n-hexane / EtOAc, 9: 1 to 75:25). After removal of the solvent under vacuum, the desired compound is a colorless oil (66.04 g; 196.90).mmol).
[0089]
Yield: 81%
TLC: Carrier: silica gel plate 60F 254 Merck
Eluent: CHClThree/ CHThreeOH 95: 5.
Detection: 0.2% (w / v) ninhydrin in ethanol Rf = 0.5
1H-NMR,13C-NMR, IR and MS spectra were consistent with the indicated structure.
[0090]
C) trifluoromethanesulfonic acid 2-bromoethyl ester
240 g of trifluoromethanesulfonic anhydride (850 mmol) For 1.5 hours under an inert atmosphere, cooled to -5 ° C.TwoClTwoBromoethanol (57 mL; 0.80 mol) and 2,6-lutidine (104 mL;890 mmol). After 10 minutes, the mixture was concentrated to 1/4 volume and then eluted through a small layer of silica gel (eluent: n-hexane / EtOAc = 9: 1). Evaporation of the solvent and drying gave the desired product (147.2 g;570 mmol).
[0091]
Yield: 72%
TLC: Carrier: silica gel plate 60F 254 Merck
Eluent: n-hexane / iPrTwoO = 8: 2
Detection: 0.5% KMnO in 1M NaOHFour Rf = 0.6
1H-NMR,13C-NMR, IR and MS spectra were consistent with the indicated structure.
[0092]
D) N- (2-bromoethyl) -N- [2- (1,1-dimethylethoxy) -2-oxoethyl] -L-phenylalanine 1,1-dimethyl ester
Intermediate prepared in point C) (147.2 g; 573)mmol) Under nitrogen in N- [2- (1,1-dimethylethoxy) -2-oxoethyl] -L-phenylalanine 1,1-dimethylethyl ester (65.93 g; 197) in 600 mL of anhydrous toluene.mmol) And 2,6-lutidine (72 mL; 620mmol) At -15 ° C. After 16 hours at room temperature, 200 mL of EtOAc, HTwo200 mL of O and 50 mL of ethylenediamine were added to the mixture. Organic phase HTwoO 300 mL, acetate buffer pH = 5.8 100 mL, CuSOFourSaturated aqueous solution (hereinafter aqCuSOFour) 100 mL, saturated aqNHFourWash with 200 mL of ClTwoSOFourAnd the solvent was distilled off. This residue is iPrTwoO and quickly filtered through a small layer of silica gel. The desired product was obtained by removing the solvent from the filtrate (83.08 g; 188).mmol).
[0093]
Yield: 95.4%
GC measurement: 97% (area%)
TLC: Carrier: silica gel plate 60F 254 Merck
Eluent: n-hexane / EtOAc = 9: 1
Detection: 0.5% KMnO in 1M NaOHFour Rf = 0.5
1H-NMR,13C-NMR, IR and MS spectra were consistent with the indicated structure.
[0094]
E) [(Phenylmethyl) amino] methylphosphonic acid diethyl ester
1,3,5-tribenzylhexahydro-1,3,5-triazine (98%; 12.48 g; 34.21mmol) Was treated with diethyl phosphite (94%; 15.5 mL; 113mmol). The mixture was then cooled to room temperature, taken up in ethyl ether (150 mL) and acidified with 6N HCl (20 mL). The organic phase was extracted with 1N HCl (10 mL), the aqueous phase was basified with 5N KOH and then Et.TwoExtract with O (300 + 150 mL), wash with brine (100 mL) and finally NaTwoSOFourAnd dried. After evaporation of the solvent under vacuum, the product was converted to a colorless oil (25.05 g; 97.37).mmol) And stored at a temperature of -18 ° C.
[0095]
Yield: 95%
TLC: Carrier: silica gel plate 60F 254 Merck
Eluent: toluene / EtOAc / iPrOH 7: 2: 1
Detection: 0.5% KMnO in 1M NaOHFour Rf = 0.38
1H-NMR,13C-NMR, IR and MS spectra were consistent with the indicated structure.
[0096]
F) Aminomethylphosphonic acid diethyl ester
Compound prepared at point E in methanol (600 mL) (28.3 g; 110mmol) Is converted to Pd (OH)Two/ C (32g) and HCOONHFour(120 g) under vigorous stirring for 6 hours. The mixture was then filtered through a layer of Celite® and the solvent was removed from the filtered solution to give a residue, which was taken up in ethanol (200 mL) and treated with OH-Molded with Amberlite® IRA400 resin (150 mL, previously adjusted with absolute ethanol) for 3 hours. The suspension was then filtered and the solution was evaporated to dryness to give an oil (20.47 g), which was purified by flash chromatography (CHTwoClTwo/ CHThreeOH / 25% NHFourOH, 54: 40: 6 to 89: 10: 1) to give 15.09 g (90.3) of product.mmol) Was obtained as a colorless oil.
[0097]
Yield: 82%
TLC: Carrier: silica gel plate 60F 254 Merck
Eluent: CHTwoClTwo/ CHThreeOH / NHFourOH 25% 89: 10: 1
Detection: 254 nm; 0.5% KMnO in 1 M NaOHFour0.2% (w / v) ninhydrin in ethanol Rf = 0.5
1H-NMR,13C-NMR, IR and MS spectra were consistent with the indicated structure.
[0098]
G) N, N '-[[[(diethoxyphosphinyl) methyl] imino] di-2,1-ethanediyl] bis [N- [2- (1,1-dimethylethoxy) -2-oxoethyl]- L-phenylalanine] 1,1-dimethylethyl ester
CHThreeAminomethylphosphonate (8.29 g; 496) prepared with CN (300 mL) and point F in 2M phosphate buffer pH = 8 (200 mL).mmol), Bromide (prepared at point D) (62.92 g; 103.8)mmol) Was vigorously stirred at room temperature for 16 hours. After replacing the aqueous phase with fresh buffer (200 mL), the mixture was stirred for a further 32 hours. The organic phase was evaporated under reduced pressure, taken up in EtOAc, and the aqueous phase was extracted repeatedly with EtOAc (3 × 150 mL). Combine the combined organic phases with HTwoO, washed with saline, NaTwoSOFourAnd the solvent was distilled off under reduced pressure. The crude product was purified by flash chromatography (eluent: n-hexane / EtOAc / iPrOH = 7: 3: 0.1 to 6: 4: 0.2) to give the desired product (31.38 g; 35 .25mmol) Got.
[0099]
Yield: 71%
HPLC measurement: 97% (area%)
TLC: Carrier: silica gel plate 60F 254 Merck
Eluent: n-hexane / iPrTwoO = 65: 35
Detection: 0.5% KMnO in 1M NaOHFour Rf = 0.6
1H-NMR,13C-NMR, IR and MS spectra were consistent with the indicated structure.
[0100]
H) N, N '-[(phosphonomethylimino) di-2,1-ethanediyl] bis [N-carboxymethyl-L-phenylalanine]
CHThreeHexaester prepared at point G in 500 mL CN (31.21 g; 35.06)mmol) Was added to a solution of iodotrimethylsilane (80 mL; 588) at -15 ° C under an inert atmosphere.mmol) Was added slowly. The mixture was then stirred at room temperature for 3 days. Cooling on ice and HTwoAfter the addition of O (300 mL), the volatiles were removed under reduced pressure and the pH of the remaining mixture was adjusted to 8 with 6N NaOH. The crude product is then chromatographed through Amberlite® XAD1600 resin (water, 7% aqNaTwoSOThreeAnd finally HTwoO / CHThreePurify by CN gradient (eluting with 95: 5 to 30:70) to give the desired product (19.66 g; 32.25).mmol) Got.
[0101]
Yield: 92%
HPLC measurement: 100% (area%)
Elemental analysis
CH NP
Calculated value (%) 53.20 5.95 6.89 5.08
Actual value (%) 52.93 6.18 6.83 4.21 HTwoO 1.51%
TLC: Carrier: silica gel plate 60F 254 Merck
Eluent: n-hexane / EtOAc = 9: 1
Detection: 0.5% KMnO in 1M NaOHFour Rf = 0.5
Comparative light intensity: [α]20 589 = +8.4; (α)20 578 = +8.7; (α)20 546 = +10.6; (α)20 436 = +24.9; (α)20 405 = +34.1; (α)20 365 = +55.1 (c 1.17; 0.5 N NaOH)
1H-NMR,13C-NMR,31P-NMR, IR and MS spectra were consistent with the indicated structure.
[0102]
I) Gadolinium complex trisodium salt of N, N '-[(phosphonomethylimino) di-2,1-ethanediyl] bis [N-carboxymethyl-L-phenylalanine]
Compound prepared at point H (19.66 g; 32.25mmol), While maintaining the pH in the range of 6-7,Three・ 6HTwoO (32.25mmol) And 2N NaOH were added. The progress of the reaction was checked by HPLC. After 18 hours, the solution was filtered through a Millipore® filter, nanofiltered and concentrated (250 mL). The desalted solution is applied to a Dowex® CCR3LB column (Na+(35 mL), slowly leaching through the desired product (25.48 g; 30.71).mmol) Got.
[0103]
Yield: 95%
Melting point:> 210 ° C (decomposition)
HPLC measurement: 100% (area%)
Elemental analysis
C H N Gd Na P
Calculated value (%) 39.08 3.64 5.06 18.95 8.31 3.73
Actual value (%) 37.61 4.13 5.14 17.03 7.96 3.40
HTwoO 9.47%
Comparative light intensity: [α]20 589 = -35.4; (α)20 578 = -36.8; (α)20 546 = -42.5; (α)20 436 = -70.6; (α)20 405 = -84.6; (α)20 365 = -110.0 (c 1.40; HTwoO)
IR and MS spectra were consistent with the indicated structure.
[0104]
Example 2
[4S- (4R)*, 12R*)]-4-Carboxy-5,11-bis (carboxymethyl) -1-phenyl-12-[(phenylmethoxy) methyl] -8- (phosphonomethyl) -2-oxa-5,8,11-triazatri Gadolinium complex of decane-13-acid
[0105]
Embedded image
[0106]
A) N- (2-bromoethyl) -N- [2- (1,1-dimethylethoxy) -2-oxoethyl] -O- (phenylmethyl) -L-serine 1,1-dimethylethyl ester
This intermediate was prepared analogously to that of Example 1 according to the synthetic steps outlined in Scheme 1.
[0107]
Alternatively, in a variation of this process, and especially in this case, Intermediate 4 was prepared as follows:
N- [2- (1,1-dimethylethoxy) -2-oxoethyl] -N- (2-hydroxyethyl) -O- (phenylmethyl) -L-serine 1,1-dimethyl in anhydrous THF (600 mL) Ethyl ester (prepared as described in WO 98/05625) (61.7 g; 150.7mmol) And triethylamine (31 mL;220 mmol) Was added to a solution of methanesulfonyl chloride (12.5 mL; 160mmol) And lithium bromide (111 g; 1.25)× 10 Three mol) was added slowly.
[0108]
After evaporating the solvent and dissolving the residue in toluene and diethyl ether, the solution is washed with water and brine, then NaTwoSOFourAnd evaporated to dryness to give the title product as a colorless oil (69.79 g; 1477 mmol).
[0109]
Yield: 98%
TLC: Carrier: silica gel plate 60F 254 Merck
Eluent: n-hexane / EtOAc = 8: 2
Detection: 0.5% KMnO in 1M NaOHFour; ITwo254 nm; Rf = 0.75
1H-NMR,13C-NMR, IR and MS spectra were consistent with the indicated structure.
[0110]
B) [4S- (4R*, 12R*)]-8-[(Diethoxyphosphinyl) methyl] -4-[(1,1-dimethylethoxy) carbonyl] -5,11-bis [2- (1,1-dimethylethoxy) -2-oxoethyl ] -1-Phenyl-12-[(phenylmethoxy) methyl] -2-oxa-5,8,11-triazatridecane-13-acid 1,1-dimethylethyl ester
CHThreeAminophosphonate (11.23 g; 67.20) prepared as described for IF in CN (250 mL) and 2 M phosphate buffer pH = 8 (200 mL).mmol) And 2ADescription(68.72 g; 145.5) prepared asmmol) Was vigorously stirred at room temperature for 24 hours. The phases were separated, the aqueous phase was extracted repeatedly with EtOAc (250 + 100 mL), the organic phase was evaporated under reduced pressure and then taken up in EtOAc. Combine the combined organic phases with HTwoO, washed with saline, NaTwoSOFourAnd dried. The crude product was purified by flash chromatography (first column: eluent: toluene / EtOAc / iPrOH = 80: 18: 2-66: 31: 3; second and third columns: eluent: n-hexane / EtOAc / iPrOH) , 66: 32: 2). The product was removed by evaporation of the solvent under vacuum to a colorless oil (44.84 g; 47.19).mmol).
[0111]
Yield: 70%
TLC: Carrier: silica gel plate 60F 254 Merck
Eluent: n-hexane / EtOAc / iPrOH = 50: 45: 5
Detection: 0.5% KMnO in 1M NaOHFour; ITwo254 nm; Rf = 0.5
1H-NMR,13C-NMR, IR and MS spectra were consistent with the indicated structure.
[0112]
C) [4S- (4R*, 12R*)]-4-Carboxy-5,11-bis (carboxymethyl) -1-phenyl-12-[(phenylmethoxy) methyl] -8- (phosphonomethyl) -2-oxa-5,8,11-triazatri Decane-13-acid
CHThreeHexaester prepared at point B (42.03 g; 44.23) in 600 mL CNmmol) Was added to a solution of iodotrimethylsilane (80 mL; 588) at -15 ° C under an inert atmosphere.mmol) Was added slowly. The mixture was stirred at room temperature for 24 hours. After cooling on ice and adding water (150 mL), the volatiles were removed under reduced pressure and the pH was adjusted to 8 with 6N KOH. Concentrate the resulting solution and Et.TwoO / EtOAc, 1: 1 (2 × 250 mL), CHTwoClTwo(2 × 250 mL), heated to 50 ° C. and acidified to pH 2.6 with 6N HCl. CHThreeAfter addition of CN (100 mL), the still hot resulting mixture was slowly loaded onto a column of Amberlite® XAD1600 resin, which was then mixed with water and H 2 until the product was completely eluted.TwoO / CHThreeElution was with a CN gradient (95: 5 to 50:50). The elution mixture needed to be heated periodically to avoid precipitation of the product on the column. After evaporation of the solvent, the desired product was converted to a white solid (23.52 g; 35.12).mmol).
[0113]
Yield: 79%
HPLC measurement: 100% (area%)
Elemental analysis
C H N P
Calculated value (%) 52.02 6.02 6.28 4.63
Actual value (%) 51.07 6.16 6.31 4.35 HTwoO 2.67%
Comparative light intensity: [α]20 589 = +14.5; (α)20 578 = +14.9; (α)20 546 = +17.0; (α)20 436 = +29.0; (α)20 405 = +35.4 (α)20 365 = +46.5; (c 1.06; CHThreeOH)
1H-NMR,13C-NMR,31P-NMR, IR and MS spectra were consistent with the indicated structure.
[0114]
D) Salt formation (1: 3) with Na [4S- (4R*, 12R*)]-4-Carboxy-5,11-bis (carboxymethyl) -1-phenyl-12-[(phenylmethoxy) methyl] -8- (phosphonomethyl) -2-oxa-5,8,11-triazatri Gadolinium complex of decane-13-acid
HTwoO / CHThreeLigand prepared at point C in an 8: 1 mixture of CN (0.5 L) (22.14 g; 33.06)mmolGd)TwoOThree(5.936 g; 16.37mmol) And 1 N NaOH (80 mL) were added. The reaction mixture was kept at 60 ° C. for 20 hours while monitoring the progress of the reaction by HPLC. The suspension was then filtered through a Millipore® filter, concentrated (120 mL) and a Dowex® CCR3LB column (Na+(Type: 50 mL). The eluate was first treated with Carbopuron® 2S and then filtered through filter paper and a Millipore® VC 0.1 μm filter. After evaporation of the solvent, the product was converted to a white solid (30.51 g; 34.29).mmol).
[0115]
Yield: about 100%
Melting point:> 250 ° C (decomposition)
HPLC measurement: 100% (area%)
Elemental analysis
C H N Gd Na P
Calculated value (%) 39.15 3.85 4.72 17.67 7.75 3.48
Actual value (%) 35.62 4.46 4.43 16.00 6.86 2.86
HTwoO 8.54%
Comparative light intensity: [α]20 589 = -26.0; (α)20 578 = -27.4; (α)20 546 = -31.2; (α)20 436 = -50.0; (α)20 405 = -58.3 (α)20 365 = -72.1; (c 1.115; HTwoO)
IR and MS spectra were consistent with the indicated structure.
[0116]
Example 3
Gadolinium complex of N, N '-[(phosphonomethylimino) di-2,1-ethanediyl] bis [N-carboxymethyl-L-tryptophan] salt-formed (1: 3) with Na
[0117]
Embedded image
[0118]
A) N-[(phenylmethoxy) carbonyl] -L-tryptophan 1,1-dimethylethyl ester
N-[(phenylmethoxy) carbonyl] -L-tryptophan (33.27 g; 98.32) in dimethylacetamide (750 mL).mmol) (L-tryptophan and CBZCl were converted to HTwoO) and benzyltriethylammonium chloride (BTEAC) (22.4 g; 98.32).mmol) And KTwoCOThree(176.91 g; 1.28 mol) in tert-butyl bromide (265 mL;236 mmol) Was added. The solution was heated to 55 ° C. and stirred vigorously for 19 hours. The mixture is then cooled to room temperature and HTwoDilute with O (3 L) and then extract with EtOAc (2 × 1 L). Evaporate the organic phase to dryness to give the title product as a pale yellow oil (36 g; 98mmol).
[0119]
Yield: 99%
HPLC measurement: 99% (area%)
TLC: Carrier: silica gel plate 60F 254 Merck
Eluent: n-hexane / EtOAc = 7: 3
Detection: 0.5% KMnO in 1M NaOHFour254 nm; Rf = 0.44
1H-NMR,13C-NMR, IR and MS spectra were consistent with the indicated structure.
[0120]
B) N- [2- (1,1-dimethylethoxy) -2-oxoethyl] -L-tryptophan 1,1-dimethylethyl ester
CHThreeL-tryptophan 1,1-dimethylethyl ester (17.10 g; 65) obtained by catalytic hydrogenation of the product prepared at point A in CN (150 mL) and 2 M phosphate buffer (pH 8; 150 mL). Tert-butyl bromoacetate (10.7 mL; 72.25).mmol) Was added and the resulting mixture was left under vigorous stirring for 23 hours. The organic phase was separated and concentrated to give a residue, which was purified by flash chromatography (eluent: n-hexane / EtOAc, 8: 2) to give the desired product as a pale red oil (20 .07g; 53.59mmol).
[0121]
Total yield: 54.5% (from L-tryptophan)
HPLC measurement: 100% (area%)
TLC: Carrier: silica gel plate 60F 254 Merck
Eluent: n-hexane / EtOAc = 7: 3
Detection: 0.5% KMnO in 1M NaOHFour254 nm; Rf = 0.28
1H-NMR,13C-NMR, IR and MS spectra were consistent with the indicated structure.
[0122]
C) N- [2- (1,1-dimethylethoxy) -2-oxoethyl] -N- (2-hydroxyethyl) -L-tryptophan 1,1-dimethylethyl ester
CH to jacketed reactorThreeSolution of N- [2- (1,1-dimethylethoxy) -2-oxoethyl] -L-tryptophan 1,1-dimethylethyl ester (5 g; 13.35 mol) prepared at point B in CN (25 mL) Was put. To this solution cooled to -80 ° C was added ethylene oxide (13 mL;260 mmol) And ytterbium triflate (0.83 g; 1.34 mol) were added. The mixture was then slowly warmed to room temperature and after 15 h, diluted with water (50 mL) andTwoExtracted with O (3 × 50 mL). The organic phase was evaporated to dryness to give the crude product, which was purified by flash chromatography (eluent: n-hexane / EtOAc, 7: 3) to give the desired product as a pale yellow oil ( 4.32 g; 10.32.mmol).
[0123]
Yield: 77%
HPLC measurement: 99% (area%)
TLC: Carrier: silica gel plate 60F 254 Merck
Eluent: n-hexane / EtOAc = 7: 3
Detection: 0.5% KMnO in 1M NaOHFour254 nm; Rf = 0.23
1H-NMR,13C-NMR, IR and MS spectra were consistent with the indicated structure.
[0124]
D) N- (2-bromoethyl) -N- [2- (1,1-dimethylethoxy) -2-oxoethyl] -L-tryptophan 1,1-dimethylethyl ester
CHTwoClTwoIntermediate C (4.64 g; 11.09) in (44 mL)mmol) Into the solution under nitrogenThreeP (2.9 g; 11.09mmol) Was added. To the resulting mixture cooled to 0 ° C. was added NBS (1.97 g; 11.09 g).mmol) Was added in small portions. After 3 hours at 0 ° C. and 1 hour at room temperature, PhThreeThe solution was concentrated until PO precipitated as a white solid. The mixture was then kept at 4 ° C. for 72 hours to complete the precipitation. The precipitate was filtered and the filtrate was concentrated to give the crude product, which was purified by flash chromatography (eluent: n-hexane / EtOAc, 8: 2) to give the desired product Yellow oil (4.46 g; 9.26)mmol).
[0125]
Yield: 83%
HPLC measurement: 94% (area%)
TLC: Carrier: silica gel plate 60F 254 Merck
Eluent: n-hexane / EtOAc = 8: 2
Detection: 0.5% KMnO in 1M NaOHFour254 nm; Rf = 0.42
1H-NMR,13C-NMR, IR and MS spectra were consistent with the indicated structure.
[0126]
E) N, N '-[[[(diethoxyphosphinyl) methyl] imino] di-2,1-ethanediyl] bis [N- [2- (1,1-dimethylethoxy) -2-oxoethyl]- L-tryptophan 1,1-dimethylethyl ester]
CHThreeAminomethylphosphonic acid diethyl ester (prepared as in Example 1F) in CN (100 mL) (5.25 g; 31.41)mmol) And the intermediate prepared at point 3D (30.25 g; 62.82)mmol2) Phosphate buffer pH 8 (200 mL) was added to the solution of (2). The resulting biphasic mixture was kept under vigorous stirring for 18 hours; the organic layer was then separated and concentrated to give a crude oil, which was flash chromatographed (eluent: n-hexane / EtOAc / EtOAc). CHThreeOH, 9: 1: 0.5) to afford the hexaester as a waxy solid (21.6 g; 22.3).mmol).
[0127]
Yield: 71%
HPLC measurement: 100% (area%)
TLC: Carrier: silica gel plate 60F 254 Merck
Eluent: n-hexane / EtOAc / CHThreeOH = 9: 1: 0.5
Detection: 0.5% KMnO in 1M NaOHFour254 nm; Rf = 0.40
1H-NMR,13C-NMR, IR and MS spectra were consistent with the indicated structure.
[0128]
F) N, N '-[(phosphonomethylimino) di-2,1-ethanediyl] bis [N-carboxymethyl-L-tryptophan]
CHThreeHexaester prepared as for point E in CN (200 mL) (15.17 g; 15.67mmol) In a nitrogen atmosphere at 0 ° C.Three)ThreeSiI (32 mL;235 mmol) Was added. The solution was then stirred at room temperature for 22 hours. After cooling to −5 ° C., the mixture isTwoDiluted with O (30 mL), EtTwoWashed with O (2 × 400 mL). The aqueous layer was separated, neutralized to pH 7 with 2N NaOH and concentrated to 80 mL. After cooling to 0-5 ° C., the mixture was acidified by the addition of 2N HCl (32 mL) to give a precipitate, which was filtered and filtered.TwoWash with O and dry to give the desired product as a crystalline white solid (8.37 g, 12.17 g).mmol).
[0129]
Yield: 78%
Melting point: 157-160 ° C
HPLC measurement: 98% (area%)
Elemental analysis
C H N P
Calculated value (%) 54.15 5.57 10.18 4.50
Actual value (%) 50.13 5.80 9.34 4.35 HTwoO 7.78%
Comparative light intensity: [α]20 589 = -10.69; (α)20 578 = -11.19; (α)20 546 = -12.38; (α)20 436 = -16.54; (c 2.02; NaOH 0.1N)
1H-NMR,13C-NMR,31P-NMR, IR and MS spectra were consistent with the indicated structure.
[0130]
G) Gadolinium complex trisodium salt of N, N '-[(phosphonomethylimino) di-2,1-ethanediyl] bis [N-carboxymethyl-L-tryptophan]
H cooled to 5 ° CTwoChelator prepared as for point F in O (80 mL) (6.0 g; 8.72)mmol1) NaOH (28 mL) was added first to obtain a clear solution, and then the pH was kept at 7 by simultaneous addition of 1 N NaOH while maintaining the pH at 7.Three(0.17 M solution) (51 mL; 8.72mmol) Was added. The solution was left at room temperature for 1 hour, filtered through a Millipore® HAWP 0.45 μm filter, followed by H 2TwoLeached through an Amberlite® XAD1600 column eluting with O. The product was evaporated to dryness to give a white solid (7.12 g; 7.85).mmol).
[0131]
Yield: 90%
Melting point:> 250 ° C (decomposition)
HPLC measurement: 99.6% (area%)
Elemental analysis
C H N P
Calculated value (%) 41.02 3.55 7.71 17.32 7.60 3.41
Actual value (%) 36.18 4.42 7.55 16.79 6.54 3.18
HTwoO 11.74%
Comparative light intensity: [α]20 589 = -20.96; (α)20 578 = -21.60; (α)20 546 = -24.55; (α)20 436 = -40.61; (α)20 405 = -47.83 (α)20 365 = -60.85; (c 2.505; HTwoO)
IR and MS spectra were consistent with the indicated structure.
[0132]
Example 4
Of N, N-bis [2-[(carboxymethyl) (phosphonomethyl) amino] ethyl] -O- (4-hydroxyphenyl) -3,5-diiodo-L-tyrosine salt-formed with sodium (1: 5) Gadolinium complex
[0133]
Embedded image
[0134]
A) [[(2-Hydroxyethyl) (phenylmethyl) amino] methyl] phosphonic acid 1,1-dimethylethyl ester
2-benzylaminoethanol (30.59 g; 196) in water (30 mL) cooled in an ice bathmmol) Was added to formaldehyde (35% aqueous solution, 16.3 mL; 205)mmol) Was added. After 5 minutes, the mixture was warmed to room temperature and then CHClThree(3 × 40 mL). MgSO 4FourAnd evaporate to dryness to recover the aminal (intermediate 2 of Scheme 2) as a colorless oil, which is purified under vacuum with PTwoOFiveAnd further dried.
[0135]
CHTwoClTwoDi-tert-butyl phosphite (38.12 g; 196) in (300 mL).mmol) And triethylamine (28.0 mL; 200mmol) In a solution of chlorotrimethylsilane (26.5 mL; 197).mmol) Was added slowly (in 30 minutes) and stirred for 10 minutes. The resulting mixture containing the intermediate, then CH2TwoClTwo(100 mL) was added to a solution of the above prepared aminal, then ytterbium triflate (12.36 g; 19.9).mmol) Was added and the reaction was kept at room temperature for 1.5 hours. Water and even CHTwoClTwoAfter addition of the insoluble salt was filtered through Celite® and the solution was concentrated under vacuum. The resulting intermediate was not isolated, but AcOH / THF / HTwoThe O mixture was diluted with 3: 1: 1 (250 mL) and the resulting homogeneous solution was concentrated in vacuo; toluene and HTwoMost AcOH is removed by azeotropic distillation with OTwoCOThreeThe pH of the solution was adjusted to neutral by the addition of. The mixture was extracted with EtOAc (3 × 80 mL) and the organic phase was extracted with MgSO 4.FourAnd then evaporated to dryness to give the product as a colorless oil (43.46 g; 122mmol).
[0136]
Yield: 62%
TLC: Carrier: silica gel plate 60F 254 Merck
Eluent: iPrTwoO / CHTwoClTwo/ IPrOH = 70: 25: 5
Detection: 0.5% KMnO in 1M NaOHFour254 nm; ITwoRf = 0.38
1H-NMR,13C-NMR, IR and MS spectra were consistent with the indicated structure.
[0137]
B) [[(2-hydroxyethyl) amino] methyl] phosphonic acid 1,1-dimethylethyl ester
Intermediate A (43.46 g; 122 in anhydrous MeOH (1 L)mmolPd (OH) as a catalyst under nitrogen in a solution ofTwo/ C (40 g) was added carefully. Then the mixture is HTwoStir vigorously in the atmosphere for 2 hours. MgSOFourAfter filtration through Celite (registered trademark), the solvent was distilled off from the resulting solution. Residual methanol is distilled off azeotropically with cyclohexane to give the desired intermediate as a colorless oil (39.45 g) which contains traces of solvent but without further purification. It could be used (as is) for the next reaction.
[0138]
TLC: Carrier: silica gel plate 60F 254 Merck
Eluent: CHTwoClTwo/ CHThreeOH / 25% (w / w) NHFourOH = 89: 10: 1
Detection: 0.5% KMnO in 1M NaOHFour2% ninhydrin in ethanol; Rf = 0.5
1H-NMR,13C-NMR, IR and MS spectra were consistent with the indicated structure.
[0139]
C) N-[[bis (1,1-dimethylethoxy)] phosphonomethyl] -N- (2-hydroxyethyl) -glycine 1,1-dimethylethyl ester
Intermediate B (39.45 g) as isolated in acetonitrile (250 mL) and 2 M phosphate buffer pH 8 (200 mL), tert-butyl bromoacetate (17.8 mL; 121mmol) Was vigorously stirred at room temperature for 4 days. The phases were separated; the organic phase was evaporated and the residue was treated with EtOAc (3 × 150 mL). Combine the combined organic phases with HTwoO (2 x 200 mL), washed with brine (100 mL)TwoSOFourAnd dried. The crude product is purified by flash chromatography (first with iPrTwoO / CHTwoClTwo/ IPrOH = 70: 30: 2, then EtTwoO / CHTwoClTwo/ IPrOH = 70: 30: 2 to 60: 40: 3) to afford the desired intermediate as a colorless oil (28.71 g; 75.27).mmol).
[0140]
Yield: 62%
TLC: Carrier: silica gel plate 60F 254 Merck
Eluent: iPrTwoO / CHTwoClTwo/ IPrOH = 60: 35: 5
Detection: 0.5% KMnO in 1M NaOHFour; ITwoRf = 0.4
1H-NMR,13C-NMR, IR and MS spectra were consistent with the indicated structure.
[0141]
D) N-[[bis (1,1-dimethylethoxy)] phosphonomethyl] -N- (2-bromoethyl) glycine 1,1-dimethylethyl ester
To a solution of Intermediate C and triethylamine in anhydrous THF (500 mL) cooled to −15 ° C. under nitrogen was added methanesulfonyl chloride (2.8 mL; 36.1).mmol) Was added slowly. After 1.5 hours at −10 ° C., lithium bromide (25.0 g; 288 mol) was added and the mixture was left under vigorous stirring for 16 hours while gradually warming to room temperature. Then most volatiles were distilled off under reduced pressure; the residue was removed with EtOAc (300 mL) and Et.TwoDiluted with O (300 mL)TwoWashed with O (2 × 200 mL). Organic phase HTwoWash with O / brine, 1: 1 (200 mL), brine (100 mL) and finally NaTwoSOFourAnd dried. After the solvent was distilled off, the crude residue was subjected to flash chromatography (eluent: n-hexane / Et).TwoPurification by O / iPrOH, 1: 1: 0.01) gave the desired intermediate (12.35 g; 27.79).mmol) Which crystallized upon storage at -18 ° C.
[0142]
Yield: 83%
Melting point: 50-51 ° C
TLC: Carrier: silica gel plate 60F 254 Merck
Eluent: iPrTwoO / EtOAc = 8: 2
Detection: 0.5% KMnO in 1M NaOHFour; ITwoRf = 0.35;
1H-NMR,13C-NMR, IR and MS spectra were consistent with the indicated structure.
[0143]
E) N, N-bis [2-[[2- (1,1-dimethylethoxy) -2-oxoethyl] [[(1,1-dimethylethoxy) phosphinyl] methyl] amino] ethyl] -O- (4 -Hydroxyphenyl) -3,5-diiodo-L-tyrosine 1,1-dimethylethyl ester
Intermediate D (12.05 g; 27.12 mol) and 3,5-diiodotyrosine methyl ester (5.85 g; 10.85) in acetonitrile and 2 M phosphate buffer pH 8mmol) Was vigorously stirred at room temperature for 72 hours. The aqueous phase was replaced with fresh buffer and the solution was left under stirring for a further 3 days. The phases were then separated; the aqueous layer was extracted with EtOAc (250 + 100 mL), the organic layer was evaporated and the residue was taken up in EtOAc. Combined EtOAc solution with HTwoO (100 mL), HTwoWashed with O / brine, 1: 1 (100 mL), brine (100 mL). NaTwoSOFourAfter drying with hexane and evaporation of the solvent, the residue was flash chromatographed (eluent: n-hexane / Et).TwoO / iPrOH, 72: 20: 8). The desired intermediate (Intermediate 8 according to Scheme 2) was converted to a colorless oil (11.32 g; 8.94).mmol).
[0144]
Yield: 82%
HPLC measurement: 98.2% (area%)
TLC: Carrier: silica gel plate 60F 254 Merck
Eluent: toluene / EtOAc / iPrOH = 1: 1: 0.02
Detection: 0.5% KMnO in 1M NaOHFour254 nm; ITwoRf = 0.40;
1H-NMR,13C-NMR, IR and MS spectra were consistent with the indicated structure.
[0145]
F) N, N-bis [2-[(carboxymethyl) (phosphonomethyl) amino] ethyl] -O- (4-hydroxyphenyl) -3,5-diiodo-L-tyrosine
Polyester E) in 1,4-dioxane (100 mL) (24.9 g; 19.6)mmol) Was added to 4N HCl (180 mL). The solution was heated to 70 ° C. for 3 hours and then at 90 ° C. for 1 hour while monitoring the progress of the reaction by HPLC. The mixture was cooled to room temperature, concentrated to 200 mL, and slowly loaded on an Amberlite® XAD1600 column. First HTwoAfter elution with O, HTwoO / CHThreeThe desired product was converted to a white solid (15.5 g; 16.86) by using a gradient eluent based on CN.mmol).
[0146]
Yield: 86%
HPLC measurement: 100% (area%)
Elemental analysis
C H N I P
Calculated value (%) 32.81 3.63 4.59 27.23 6.77
Actual value (%) 31.11 3.78 4.33 26.11 6.57
HTwoO 3.96%
Comparative light intensity: [α]20 589 = +7.5; (α)20 578 = +7.8; (α)20 546 = +9.2; (α)20 436 = +18.1; (α)20 405 = +23.1 (α)20 365 = +33.3; (c 1.03; CHThreeCOOH / HCl 6N 4: 1)
1H-NMR,13C-NMR, IR and MS spectra were consistent with the indicated structure.
[0147]
G) N, N-bis [2-[(carboxymethyl) (phosphonomethyl) amino] ethyl] -O- (4-hydroxyphenyl) -3,5-diiodo-L- salt-formed (1: 5) with sodium Gadolinium complex of tyrosine
Ligand F) (15.33mmolGd at pH 7 in aqueous solutionTwoOThree(2.80 g; 15.39mmol) Was added. This solution isTwoDiluted to 2 L with O and heated at 70 ° C. for 6 hours, monitoring the progress of complexation by HPLC. Since the conversion was only about 14.5%, 0.164 M aqGdCl was added to this solution with stirring while maintaining the pH at about 7 with 2N NaOH.Three(78.0 mL; 12.8mmol) Was added. After completion of the complexation, the mixture was filtered through a Millipore® HAWP 0.45 μm filter, concentrated to 1 L and a Dowex® CCR3LB column, Na+Leached through the mold. The eluate was concentrated to 250 mL and nanofiltered. After concentration under vacuum, the resulting dark solution was treated with Carbopuron® 2S at 60 ° C., filtered and finally lyophilized to give a solid still containing chloride ions. And then HTwoDissolved in O and eluted with Amberlite® XAD1600 (HTwoO, then HTwoO / CHThreePurification by elution with a CN gradient) afforded the desired Gd complex (12.67 g; 10.74).mmol) Got.
[0148]
Purification of the complex on a weak cation exchange resin yielded a product in which the phenol group was deprotonated, as confirmed by elemental analysis.
[0149]
Yield: 70%
Melting point:> 280 ° C
HPLC measurement: 99.5% (area%)
Elemental analysis
C H Gd I N Na P
Calculated value (%) 25.46 2.14 13.33 21.52 3.56 9.75 5.25
Actual value (%) 24.01 3.09 12.44 20.19 3.35 8.52 5.16
HTwoO 6.56%
IR and MS spectra were consistent with the indicated structure.
[0150]
Example 5
Gadolinium complex of N, N '-[(phosphonomethylimino) di-2,1-ethanediyl] bis [N- (carboxymethyl) glycine] salt-formed (1: 3) with Na
[0151]
Embedded image
[0152]
A) N, N '-[[[(diethoxyphosphinyl) methyl] imino] di-2,1-ethanediyl] bis [N- [2- (1,1-dimethylethoxy) -2-oxoethyl] glycine ] 1,1-dimethylethyl ester
The product was an aminophosphonic ester (15.09 g; 90.28) prepared as described in 1F.mmol) And bromide prepared as described in J. Org. Chem. 1993, 58, 1151 (70.09 g; 199.0).mmol) Was reacted. The reaction was carried out as reported in 1G and the product was a colorless oil (35.59 g; 50.14 g).mmol).
[0153]
Yield: 56%
HPLC measurement: 98.2% (area%)
TLC: Carrier: silica gel plate 60F 254 Merck
Eluent: toluene / EtOAc / iPrOH = 50: 45: 5
Detection: 0.5% KMnO in 1M NaOHFour254 nm; Rf = 0.40
1H-NMR,13C-NMR, IR and MS spectra were consistent with the indicated structure.
[0154]
B) N, N '-[(phosphonomethylimino) di-2,1-ethanediyl] bis [N- (carboxymethyl) -glycine]
Hexaester prepared at point A (29.23 g; 41.18)mmol) Was deprotected with iodomethylsilane under the same conditions as reported for 1H. The resulting crude product is loaded onto a Relite® 3AS / fb column, eluted with water until residual iodide is eliminated, and then Dowex® CCR3LB maintained at 60 ° C. Loaded on resin column. The chelating agent was lyophilized from the solution containing the purified compound to give the chelating agent a white solid (9.69 g; 22.6).mmol).
[0155]
Yield: 55%
Melting point: 110-114 ° C
HPLC measurement: 96% (area%)
Elemental analysis
C H N P
Calculated value (%) 36.37 5.63 9.79 7.21
Actual value (%) 35.03 5.76 9.43 6.92
HTwoO 1.05%
1H-NMR,13C-NMR, IR and MS spectra were consistent with the indicated structure.
[0156]
C) Trisodium gadolinium complex of N, N '-[(phosphonomethylimino) di-2,1-ethanediyl] bis [N- (carboxymethyl) glycine]
HTwoThe chelating agent obtained as in step B in O (60 mL) (6.0 g; 13.97mmol2) NaOH (15 mL) and GdTwoOThree(2.53 g; 6.99mmol) Was added. The suspension was heated at 70 ° C. for 1 hour and then filtered through a Millipore® HAWP 0.45 μm filter. The title complex was converted to a white solid (9.1 g; 14%) by neutralizing the solution with 2N NaOH and concentrating to dryness.mmol) In quantitative yield.
[0157]
Melting point:> 250 ° C
HPLC measurement: 100% (area%)
Elemental analysis
C H Gd N Na P
Calculated value (%) 24.04 2.79 24.21 6.47 10.62 4.77
Actual value (%) 23.94 3.00 24.06 6.45 10.74 4.71
IR and MS spectra were consistent with the indicated structure.
[0158]
Example 6
Gadolinium complex of N, N '-[(phosphonomethylimino) di-2,1-ethanediyl] bis [N- (phosphonomethyl) glycine] salt-formed (1: 5) with Na
[0159]
Embedded image
[0160]
Aminomethylphosphonic acid diethyl ester prepared as described in Example 1F was reacted with the bromo derivative prepared according to Example 4D.
[0161]
The resulting hexaester was deprotected under the same conditions as reported for 4F. The isolated acidic chelator was complexed by the method reported in 3G.
[0162]
Example 7
Gadolinium of N, N '-[[[3-carboxy-1-phosphonopropyl] imino] di-2,1-ethanediyl] bis [N- (carboxymethyl) glycine] salt-formed (1: 4) with triethylamine Complex
[0163]
Embedded image
[0164]
A) 2,2 '-(iminodi-2,1-ethanediyl) bis-1H-isoindole-1,3 (2H) -dione)
Phthalic anhydride in acetic acid (106 g) (32.0 g;216 mmol) And diethylenetriamine (10.32 g;100 mmol) Was refluxed for 1 hour. The acetic acid was removed on a rotary evaporator and the resulting pale yellow oil was placed under vacuum overnight. The oil solidified on standing, which was then triturated with a saturated solution of sodium bicarbonate to remove acetic acid and some unreacted phthalic anhydride. The yellow solid is then filtered, washed with water, dissolved with chloroform (500 mL) and the chloroform solution isTwoSOFourAnd dried. Chloroform was distilled off to obtain a solid (28.0 g).
[0165]
Yield: 77.1%
Analytical samples were crystallized from ethanol.
Melting point: 180-81 ° C
1H-NMR,13C-NMR, IR and MS spectra were consistent with the indicated structure.
HPLC measurement: 96.7% (area%)
[0166]
B) 4- [Bis [2- (1,3-dihydro-1,3-dioxo-2H-isoindol-2-yl) ethyl] amino] -4- [bis (1,1-dimethylethoxy) phosphinyl] Butanoic acid phenyl methyl ester
3-Benzyloxycarbonylpropionaldehyde (4.0 g; acetonitrile (25 mL);20.80 mmol)) Was prepared using the bis (phthalimide) derivative prepared at point A) in acetonitrile (75 mL) (6.8 g;18.70 mmolWas added to the slurry over 30 minutes. During the addition, the temperature of the reaction mixture was maintained at 80-90C. The reaction mixture was stirred at 80 ° C. for another 30 minutes. During the addition of the aldehyde, the color of the reaction mixture turned yellow. Tris (tert-butyl) phosphite in acetonitrile (15 mL) (5.2 g;20.8 mmol) Was added dropwise and the reaction mixture was stirred at room temperature for 48 hours. After the addition of tris (tert-butyl) phosphite (〜3 hours), the reaction mixture became a clear yellow solution. Then the acetonitrile was removed and the residue was treated with EtOAc (50 mL). The resulting solid was filtered and the EtOAc solution was applied directly to a column of silica gel (packed with 50:50 hexane-EtOAc). The column eluted first with hexane-EtOAc (600 mL) and then at 70:30 (EtOAc: Hexane). The fractions containing the product were collected and the solvent was distilled off to obtain an oil. This was dried under vacuum to obtain a white solid (9.9 g).
[0167]
Yield: 72%
An analytical sample was crystallized from hexane-EtOAc.
Melting point: 120-121 ° C
HPLC measurement: 99.2% (area%)
Elemental analysis
C H N
Calculated value (%) 64.00 6.30 5.70
Actual value (%) 63.90 6.34 5.54
1H-NMR,13C-NMR, IR and MS spectra were consistent with the indicated structure.
[0168]
C) 4- [bis (2-aminoethyl) amino] -4- [bis (1,1-dimethylethoxy) phosphinyl] butanoic acid phenylmethyl ester
CHTwoClTwoTert-butoxyphosphinyl derivative prepared in point B) (5.65 g;7.80 mmol) In a solution of hydrazine (1.5 g;46.80 mmol) Followed by water (0.2 mL) and the reaction mixture was stirred at room temperature. The reaction is1Followed by 1 H NMR (reaction was completed in 36 hours). The precipitated phthalyl hydrazide was filtered through Celite® and the filter cake was washed with CHTwoClTwoAnd washed. Evaporation of the solvent from the combined methylene chloride solutions gave a thick oil which was dried under vacuum. The resulting diamine (3.61 g) was used in the alkylation step without further purification.
[0169]
Yield: 97%
1H-NMR,13C-NMR, IR and MS spectra were consistent with the indicated structure.
[0170]
D) N, N '-[[[1- [bis (1,1-dimethylethoxy) phosphinyl] -3-[(phenylmethoxy) carbonyl] propyl] imino] di-2,1-ethanediyl] bis [N- [2- (1,1-dimethylethoxy) -2-oxoethyl] glycine 1,1-dimethylethyl ester]
Diamino intermediate prepared with point C) in acetonitrile (60 mL) (7.5 g;15.9 mmol) In a solution of diisopropylethylamine (18.55 g; 25 mL;142 mmol) And tert-butyl bromoacetate (13.2 g; 10.0 mL;69.5 mmol) Was added and the mixture was stirred at room temperature overnight. Acetonitrile and excess diisopropylethylamine were removed on a rotary evaporator and the residueTwoCOThreeBasified with solution (5%, 100 mL). The reaction mixture was extracted with diethyl ether (2 × 150 mL), the diethyl ether solution was washed with water and dried (NaTwoSOFour)did. Evaporation of the diethyl ether gave an oil which was purified by silica gel chromatography. The column was packed with hexane-EtOAc (7: 3) and eluted with hexane-EtOAc (7: 3) (500 mL) and then hexane-EtOAc (5: 5). Fractions containing the desired compound (Rf 0.5) were collected and the solvent was distilled off to give a thick viscous oil (7.5 g).
[0171]
Yield: 51%
1H-NMR,13C-NMR, IR and MS spectra were consistent with the indicated structure.
[0172]
E) N, N '-[[[1- [bis (1,1-dimethylethoxy) phosphinyl] -3-carboxypropyl] imino] di-2,1-ethanediyl] bis [N- [2- (1, 1-dimethylethoxy) -2-oxoethyl] glycine 1,1-dimethylethyl ester]
Benzyl ester prepared with point D) in THF (30 mL) (4.63 g;5 mmol) Was added to a solution of 10% Pd-C (2.0 g, Degussa type, ５０50% water) and the mixture was hydrogenated at 45 psi for 12 hours. The catalyst was filtered through Celite® and the filter cake was washed with THF (2 × 30 mL). Concentration of the combined THF solution on a rotary evaporator provided the acid as a thick viscous oil. It was dried under vacuum for 24 hours to isolate the desired compound (3.98 g), which was used without further purification.
[0173]
Yield: 95.2%
1H-NMR,13C-NMR, IR and MS spectra were consistent with the indicated structure.
[0174]
F) N, N '-[[[3-carboxy-1-phosphonopropyl] imino] di-2,1-ethanediyl] bis [N- (carboxymethyl) glycine]
The hexaester prepared in step E) (0.84 g,1 mmol) Was dissolved in TFA and the mixture was stirred at room temperature for 24 hours. TFA was removed on a rotary evaporator and the residue was treated with anhydrous diethyl ether (10 mL). The precipitated solid was filtered and dried under vacuum to give the acid chelating ligand as a TFA salt (0.45 g).
[0175]
Yield: 90%
HPLC measurement: 86% (area%)
1H-NMR,13C-NMR, IR and MS spectra were consistent with the indicated structure.
[0176]
G) Gadolinium complex of N, N '-[[[3-carboxy-1-phosphonopropyl] imino] di-2,1-ethanediyl] bis [N- (carboxymethyl) glycine] salt-formed with triethylamine
The acid-chelating ligand TFA salt obtained in step F) (0.25 g) is dissolved in a 1: 1 mixture of acetonitrile and water (5 mL) and then Gd (OAc)Three(0.25 g;6 mmol) Was added to the reaction mixture. The initial pH of the reaction mixture was found to be 1.29. The pH of the solution was then adjusted to 5.0 by the addition of 1N NaOH and the mixture was stirred at room temperature for 24 hours. The Gd complex was then purified by DEAE Sephadex chromatography using triethylamine bicarbonate buffer. The fraction eluted with the 800-mM buffer was collected and freeze-dried to obtain a Gd complex as a triethylamine salt (0.2 g).
[0177]
HPLC measurement: 100% (area%)
Elemental analysis: C16Htwenty fiveNThreeO13PGd ・ 2.6 C6HFifteenN ・ 3 HTwoCalculate for O
C H Gd N HTwoO
Calculated value (%) 39.02 7.25 16.10 8.06 3.00
Actual value (%) 39.09 7.33 16.19 8.25 3.03
IR and MS spectra were consistent with the indicated structure.
[0178]
Example 8
4-phenyl-N- [trans-4-[[[4- [bis [2- [bis (carboxymethyl) amino] ethyl] amino] -1-oxo-4-) salt-formed with meglumine (1: 4) Gadolinium complex of phosphonobutyl] amino] methyl] cyclohexylcarbonyl] -L-phenylalanine
[0179]
Embedded image
[0180]
A) 4-phenyl-N-[[[trans-4-[[4- [bis [2- [bis [2- (1,1-dimethylethoxy) -2-oxoethyl] amino] ethyl] amino] -4 -[Bis (1,1-dimethylethoxy) phosphinyl] -1-oxobutyl] amino] methyl] cyclohexyl] carbonyl] -L-phenylalanine phenylmethyl ester
CHTwoClTwoMonoacid (0.9 g; 1.075) obtained as disclosed in Example 7, point E) (15 mL).mmolHATU (O- (7-azabenzotriazol-1-yl) -N, N, N ', N'-tetramethyluronium hexafluorophosphate) (0.475 g; 1.25)mmol) Was added and the mixture was stirred at 0 ° C. for 10 minutes. Next, 0.39 g of diisopropylethylamine (3.0mmol) Was added and the mixture was stirred at 0 ° C. for a further 10 minutes. Next, the TFA salt [4-phenyl-N-[[trans-4- (aminomethyl) cyclohexyl] carbonyl] -L-phenylalanine phenylmethyl ester] (0.584 g; 1.0mmol) (Amino compound 7) was added to the reaction mixture and stirred at 0 ° C for 2 hours and at room temperature for 24 hours. CHTwoClTwoWas removed and the residue was extracted with EtOAc (75.0 mL). EtOAc solutionTwoCOThreeSolution (10%, 2 × 50 mL), washed with water and dried (NaTwoSOFour)did. Evaporation of EtOAc gave an oil, which was dried under vacuum to give a foamy solid, which was purified by silica gel column chromatography using EtOAc. The product-containing fractions were collected and the solvent was distilled off to give an oil which was dried under vacuum to give a foamy solid (1.1 g). It was found to be analytically pure and was used in the next step.
[0181]
Yield: 85%
Elemental analysis
C H N
Calculated value (%) 65.10 8.40 5.40
Actual value (%) 64.55 7.86 5.31
1H-NMR,13C-NMR, IR and MS spectra were consistent with the indicated structure.
[0182]
B) 4-Phenyl-N-[[trans-4-[[[4- [bis [2- [bis [2- (1,1-dimethylethoxy) -2-oxoethyl] amino] ethyl] amino] -4] -[Bis (1,1-dimethylethoxy) phosphinyl] -1-oxobutyl] amino] methyl] cyclohexyl] carbonyl] -L-phenylalanine
Benzyl ester obtained as disclosed in point A) (1 g; 0.0078)mmol)), 10% Pd-C (0.5 g; Degussa type, approximately 50% water) was added and the mixture was hydrogenated at 45 psi for 8 hours. The catalyst was filtered through Celite® and the filter cake was washed with THF (2 × 30 mL). Concentration of the combined THF solution on a rotary evaporator provided the acid as a thick viscous oil. This was dried under vacuum for 24 hours to give a foamy solid (0.9 g), which was used as such without further purification.
[0183]
Yield: 97%
1H-NMR,13C-NMR, IR and MS spectra were consistent with the indicated structure.
[0184]
C) 4-phenyl-N-[[trans-4-[[[4- [bis [2- [bis (carboxymethyl) amino] ethyl] amino] -1-oxo-4-phosphonobutyl] amino] methyl] cyclohexyl ] Carbonyl] -L-phenylalanine
Hexa- (tert-butyl) ester (0.9 g; 0.75) prepared with trifluoroacetic acid (4 mL) at point B).mmol) And the mixture was stirred at room temperature for 12 hours. Next, diethyl ether (30.0 mL) was added to the reaction mixture, and the precipitate was filtered and dried under vacuum to obtain a white solid (0.8 g) (yield: 97%). HPLC analysis of the TFA salt showed that it was fairly pure and useful for Gd chelation without further purification. An analytical sample was obtained from the TFA salt (100 mg) by preparative HPLC. Fractions containing the pure product were collected and lyophilized to give a white fugitive solid (50 mg).
[0185]
Purification yield: 50%
Elemental analysis (C41H55FThreeNFiveO17P ・ 2HTwoCalculated for O)
C H N
Calculated value (%) 48.81 6.05 6.84
Actual value (%) 48.60 5.90 6.90
1H-NMR,13C-NMR,31P-NMR, IR and MS spectra were consistent with the indicated structure.
[0186]
D) 4-Phenyl-N- [trans-4-[[[4- [bis [2- [bis (carboxymethyl) amino] ethyl] amino] -1-oxo-4-phosphonobutyl] amino] methyl] cyclohexylcarbonyl ] -Gadolinium complex of L-phenylalanine
TFA salt obtained as disclosed in point C (0.3 g; 0.275mmol) Was added to a mixture of acetonitrile (7.0 mL) and water (2 mL). Here Gd (OAc) in water (2.0 mL)Three(0.132 g; 0.325mmol) Was added dropwise. The initial pH of this solution was found to be 1.29. The solution became cloudy and the pH of the solution was adjusted to 5.0 by adding a solution of meglumine in water. The cloudy reaction mixture was stirred at room temperature for 48 hours. The pH of the reaction mixture was then raised to 9.0 by the addition of a meglumine solution and then purified by preparative HPLC using acetonitrile and water. Fractions containing pure product were collected and lyophilized to give a frangible solid (220 mg).
[0187]
Yield: 78.5%
HPLC measurement: 97.7% (area%)
C67H119N9O35PGd ・ 5HTwoElemental analysis of O
C H N Gd
Calculated value (%) 42.60 6.88 6.67 8.32
Actual value (%) 42.54 6.93 6.47 7.06
IR and MS spectra were consistent with the indicated structure.
[0188]
Example 9
(3β, 5β, 7α, 12α) -3-[[4- [bis [2- [bis (carboxymethyl) amino] ethyl] amino] -1-oxo-4- salt-formed (1: 4) with sodium Gadolinium complex of phosphonobutyl] amino] -7,12-dihydroxychoran-24-acid
[0189]
Embedded image
[0190]
A) (3α, 5β, 7α, 12α) -3-[[4- [bis [2- [bis [2- (1,1-dimethylethoxy) -2-oxoethyl] amino] ethyl] amino] -4- [Bis (1,1-dimethylethoxy) phosphinyl] -1-oxobutyl] amino] -7,12-dihydroxycholane-24-acid methyl ester
CHTwoClTwoHATU (0.6 g; 1.5 mol) was added to a solution of the monoacid (1.2 g; 1.4 mol) obtained as disclosed in Example 7, point E). Stirred at C for 10 minutes. Then diisopropylethylamine (1 mL) was added and the mixture was stirred at 0 ° C. for another 10 minutes. Then, 3β-aminocholic acid methyl ester (compound disclosed in WO 9532741) (0.526 g; 1.25)mmol) Was added to the mixture and stirred at 0 ° C. for 2 hours and at room temperature for 48 hours. CHTwoClTwoWas removed on a rotary evaporator and the residue was extracted with EtOAc. EtOAc layer KTwoCOThree(10%, 2 × 30 mL), washed with water and dried (NaTwoSOFour)did. Evaporation of EtOAc gave an oil which was chromatographed on silica gel (CH 2TwoClTwo: CHThreeOH, 95: 5). The product containing fractions (Rf = 0.5) were collected and the solvent was distilled off to give an oil which was dried under vacuum to give the desired compound (1.1 g) as a foamy solid As obtained.
[0191]
Yield: 71%
TLC: Carrier: silica gel plate 60F 254 Merck
Eluent: CHTwoClTwo/ CHThreeOH 95: 5
Detection: ITwo254 nm; Rf = 0.5
1H-NMR,13C-NMR, IR and MS spectra were consistent with the indicated structure.
[0192]
B) (3α, 5β, 7α, 12α) -3-[[4- [bis [2- [bis [2- (1,1-dimethylethoxy) -2-oxoethyl] amino] ethyl] amino] -4- [Bis (1,1-dimethylethoxy) phosphinyl] -1-oxobutyl] amino] -7,12-bis (acetyloxy) choran-24-acid methyl ester
To a mixture of pyridine and acetic anhydride (1: 1, 2 mL) was added the dihydroxycholic acid derivative prepared in step A) (1.24 g; 1mmol) Was added and the mixture was stirred at room temperature for 48 hours. Excess acetic anhydride and pyridine were removed, and the residue was treated with a saturated solution of sodium bicarbonate (5.0 mL) and extracted with diethyl ether. The diethyl ether solution is washed with water and dried (NaTwoSOFour)did. Evaporation of diethyl ether gave a viscous oil, which was purified by silica gel column chromatography using EtOAc-hexane (8: 2). The fractions containing the product were collected and the solvent was distilled off to obtain an oil, which was dried under vacuum to obtain the desired diacetate (0.44 g) as a foamy solid. Was.
[0193]
Yield: 75%
1H-NMR,13C-NMR, IR and MS spectra were consistent with the indicated structure.
[0194]
C) (3α, 5β, 7α, 12α) -3-[[4- [bis [2- [bis (carboxymethyl) amino] ethyl] amino] -1-oxo-4-phosphonobutyl] amino] -7,12 -Dihydroxycholan-24-acid
Trifluoroacetic acid (3 mL) was added to the hexa (tert-butyl) ester prepared in step B) (0.662 g; 0.5mmol) And the mixture was stirred at room temperature for 30 minutes and kept at 4 ° C. for 18 hours. Removal of the trifluoroacetic acid then provided the desired deprotected intermediate (0.52 g) as an oil, which was dried under vacuum. To a solution of the compound in ethanol, water (1: 1.5 mL) was added sodium hydroxide (20%, 5 mL) and the mixture was stirred at room temperature for 24 hours. The end of the reaction was followed by HPLC. Removal of the solvent and neutralization of the residue with 1N HCl gives the fully deprotected polyacid as the hydrochloride, which is filtered and dried under vacuum to give the desired chelate compound (0.35 g) was obtained.
[0195]
Yield: 79%
HPLC measurement: 98% (area%)
1H-NMR,13C-NMR, IR and MS spectra were consistent with the indicated structure.
[0196]
D) (3β, 5β, 7α, 12α) -3-([4- [bis [2- [bis (carboxymethyl) amino] ethyl] amino] -1-oxo-) salt-formed (1: 4) with sodium Gadolinium complex of 4-phosphonobutyl] amino] -7,12-dihydroxychoran-24-acid
GdCl in water (2 mL)Three・ 6HTwoO (50 mg, 0.135mmol) Was added to the hydrochloride salt prepared in step C) (0.104 g; 0.1) dissolved in an acetonitrile-water mixture (1: 1.7 mL).mmol) Was added. The initial pH of the reaction mixture was found to be 1.27. The pH of the reaction mixture was raised to 5.5 by the addition of 1N NaOH. The cloudy reaction mixture was stirred for 48 hours and the pH of the solution was raised to 10 by the addition of 1N NaOH. The resulting turbid solution was centrifuged and the clear supernatant solution was collected and purified by preparative HPLC. The desired product was obtained by collecting and lyophilizing the fractions containing the pure product.
[0197]
Purification yield: 62%
HPLC measurement: 98% (area%)
Elemental analysis (C40H60NFourO16PGd ・ 4Na ・ 8HTwoAbout O)
C H Gd N
Calculated value (%) 37.62 6.00 12.31 4.39
Actual value (%) 37.37 5.95 11.43 4.40
MS: (M + H)+= 1046.4
The IR spectrum was consistent with the indicated structure.