JP2002509535A - 血液を含まない液体で平衡が保たれる血液処理チャンバ - Google Patents

血液を含まない液体で平衡が保たれる血液処理チャンバ

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ジェイ. カントゥ,ロバート
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Abstract

(57)【要約】 血液処理システムおよび方法が開示される。回転エレメント上で回転する処理チャンバ(14)は、第1の区画(38)と、第2の区画(40)とを含む。成分に遠心分離される血液は、第1の区画(38)に運ばれる。血液を含まない液体は、第2の区画(40)を占有し、回転エレメント上での回転中に第1の区画(38)との平衡を保つ。1つの実施形態では、第2の区画(40)は、単一の流体アクセスにより供給される。使用前に、単一のアクセスはチューブに連結され、このチューブを通して真空が引き込まれ、第2の区画(40)から空気を除去する。真空がある間に、チューブと液体源との間の連通が開かれる。真空は、単一のアクセスを通して第2の区画(40)内に液体を引き込み、それにより第2の区画(40)がプライミングされて、使用される。

Description

【発明の詳細な説明】 血液を含まない液体で平衡が保たれる血液処理チャンバ発明の分野 本発明は、遠心処理システムおよび装置に関する。発明の背景 今日の血液収集組織は日常的に、遠心分離により、全血を、赤血球、血小板お よび血漿などの、様々な治療成分に分離している。 従来の血液処理システムおよび方法は、1回の使用に関連する耐久性のある遠 心分離機器、典型的にはプラスチックからなる滅菌処理チャンバを使用する。遠 心分離機器は、これらのチャンバを回転させながらチャンバに全血を導入して、 遠心力場(centrifugal field)を作り出す。 全血は、回転しているチャンバ内で、遠心力場の影響下で、より高密度の赤血 球と、血小板の豊富な血漿とに分離する。白血球からなる中間層は、赤血球と、 血小板の豊富な血漿との間の界面を形成する。発明の要旨 本発明の1つの局面は、回転エレメント上に保持される処理チャンバを含む血 液処理システムおよび方法を提供する。この処理チャンバは、成分に遠心分離さ れる血液を含む第1の区画を含む。この処理チャンバはまた、血液を含まない液 体を含む第2の区画を含む。この第2の区画内の液体は、回転エレメント上での 回転中に第1の区画との平衡を保つ。 好適な実施形態では、第2の区画は、実質的に空気を含まず、第2の区画内の 液体は、正圧を受ける。 1つの実施形態では、第2の区画は、単一のアクセスを含み、例えば、単一の アクセスポートを含むか、または、単一のアクセス経路により供給される多数の ポートを含み、区画に同時に出入りする2方向の流体の流れを不可能にする。本 発明の別の局面は、単一アクセス区画をプライミングする(prime)か、または 、単一のアクセスにより供給される任意の同様のチャンバをプライミングするシ ス テムおよび方法を提供する。このシステムおよび方法は、ポンプエレメントを動 作させて、単一のアクセスを通してチャンバに真空を引き込む。このシステムお よび方法は、真空がある間に、チャンバと液体源との間の連通を開く。真空は、 単一のアクセスを通してチャンバ内に液体を引き込み、チャンバをプライミング する。 好適な実施形態では、システムおよび方法は、真空がチャンバに液体を引き込 んでいる間に、ポンプエレメントにも、チャンバ内に液体を運ぶよう命令する。 それにより、プライミングされるチャンバに正圧状態が確立される。 本発明のその他の特徴および利点は、以下の明細書、図面、および添付の請求 の範囲を検討すれば、明らかになる。図面の簡単な説明 図1は、本発明の特徴を実施する分離チャンバを有する血液遠心分離機の側断 面図である。 図2は、図1に示される遠心分離機に関連するスプールエレメントを示し、使 用のために、関連する処理容器がスプールエレメントの周りに巻き付けられてい た状態である。 図3Aは、図1に示される遠心分離機の斜視図であり、ボウルおよびスプール エレメントがそのアクセス位置まで旋回された状態である。 図3Bは、ボウルおよびスプールエレメントの斜視図であり、図2に示される 処理容器をスプールエレメントの周りに固定することを可能にするために、ボウ ルおよびスプールエレメントが互いに分離された状態である。 図4は、図2に示される処理容器の平面図である。 図5は、処理容器に関連する流体回路であって、遠心分離機のポンプステーシ ョンに関連して取り付けられるカセットを含む流体回路の斜視図である。 図6は、図5に示される流体回路の概略図である。 図7は、図6に示される流体回路の部分を形成するカセットの裏面の斜視図で ある。 図8は、図7に示されるカセットの正面の斜視図である。 図9は、図7に示されるカセット内に形成される流れチャネルおよびバルブス テーションの概略図である。 図10は、図7に示されるタイプのカセットを受け入れるために意図されたポ ンプステーションの概略図である。 図11は、図10に示されるポンプステーションに取り付けられた、図9に示 されるカセットの概略図である。 図12は、図6に示される流体回路の部分を形成するカセットおよびポンプス テーションの斜視図である。 図13は、図6に示される流体回路の部分を形成する蠕動ポンプの上面図であ り、ポンプロータが退縮位置にある状態である。 図14は、図6に示される流体回路の部分を形成する蠕動ポンプの上面図であ り、ポンプロータが、ポンプチューブを係合する伸長位置にある状態である。 図15は、図1に示される遠心分離機の分離チャンバの概略上面図であり、高 G壁および低G壁の動径方向の輪郭を示すようにレイアウトされている。 図16Aおよび図16Bは、分離チャンバ内の血小板の豊富な血漿の収集ゾー ンの部分を幾分か概略的に示し、高G壁表面が、赤血球と血小板の豊富な血漿と の間の界面を含み且つこの界面の位置を制御するためのテーパ状ウェッジを形成 する。 図17は、処理チャンバの内部の幾分か概略的な図であり、全血が処理チャン バに入り赤血球と血小板の豊富な血漿とに分離され、且つ、血小板の豊富な血漿 が処理チャンバに収集される領域で、低G壁から高G壁の方を見た図である。 図18は、図17に示される血液分離チャンバ内にMNCを閉じ込めて「とど まらせる(park)」、確立された動的な流れ状態を示す概略図である。 図19は、所定のMNC収集手順を行うように図6に示される流体回路を構成 するプロセスコントローラの概略図である。 図20は、図19に示されるコントローラが支配するMNC収集手順の様々な サイクルおよびフェーズを示すフローチャートである。 図21は、図20に示される手順の予備処理サイクル中の、図6に示される回 路内での血液成分および流体の運搬を示す概略図である。 図22は、図20に示される手順のMNC蓄積フェーズ中の、図6に示される 回路内での血液成分および流体の運搬を示す概略図である。 図23は、図20に示される手順のPRBC収集フェーズ中の、図6に示され る回路内での血液成分および流体の運搬を示す概略図である。 図24Aは、図20に示される手順のMNC除去フェーズの開始時の、図6に 示される回路内での血液成分および流体の運搬を示す概略図である。 図24Bは、図20に示される手順のMNC除去フェーズ中の、図6に示され る回路内での血液成分および流体の運搬を示す概略図である。 図24Cは、図20に示される手順のMNC除去フェーズの終了時の、図6に 示される回路内での血液成分および流体の運搬を示す概略図である。 図25は、図20に示される手順のPRPフラッシュフェーズ中の、図6に示 される回路内での血液成分および流体の運搬を示す概略図である。 図26は、図20に示される手順のMNC懸濁フェーズ中の、図6に示される 回路内での血液成分および流体の運搬を示す概略図である。 図27は、図20に示される手順のクリーンアップフエーズ中の、図6に示さ れる回路内での血液成分および流体の運搬を示す概略図である。 図28は、図6に示される回路に関連して使用され、採取のためのMNC領域 を検知および定量化するための光センサの概略図である。 図29は、MNCの収集および採取に適した流体回路の別の実施形態を示す。 図30は、図20に示される手順のPRBC収集フェーズ中の、図29に示さ れる回路内での血液成分および流体の運搬を示す概略図である。 図31は、図20に示される手順のMNC除去フェーズ中の、図29に示され る回路内での血液成分および流体の運搬を示す概略図である。 本発明は、本発明の精神または本質的な特徴から逸脱することなく、幾つかの 形で実施され得る。本発明の範囲は、添付の請求の範囲の前に示される具体的な 説明ではなく、添付の請求の範囲において規定される。従って、請求の範囲の等 価物の意味および範囲内にある実施形態はすべて、請求の範囲に含まれることが 意図される。好適な実施形態の説明 I.遠心分離機 図1は、全血から単核細胞(MNC)を採取するのに適した血液処理チャンバ 12を有する血液遠心分離機10を示す。チャンバ12の境界は、回転するスプ ールエレメント18とボウルエレメント20との間の環状間隙16内に保持され る可撓性のある処理容器14により形成される。示された好適な実施形態では、 処理容器14は、細長いチューブの形を取り(図2参照)、使用前にスプールエ レメント18の周りに巻き付けられる。 遠心分離機10のさらなる詳細は、「Enhanced Yield Platelet Systems and Methods」と題された米国特許第5,370,802号に示される。本明細書において、上 記特許を参考として援用する。 ボウルおよびスプールエレメント18および20は、ヨーク22を中心に、図 3Aおよび図3Bが示すような直立位置と、図1が示すような懸架位置との間で 旋回される。 直立状態であるとき、ボウルおよびスプールエレメント18および20は、ユ ーザによるアクセスのために与えられる。機構は、図3Bが示すようにスプール およびボウルエレメント18および20が開かれることを可能にし、そのため、 オペレータは、図2が示すように容器14をスプールエレメント20の周りに巻 き付けることができる。スプールエレメント20上のピン150は、容器14上 の切り抜き部を係合し、容器14をスプールエレメント20上に固定する。 スプールおよびボウルエレメント18および20は、閉じられると、図1に示 される懸架位置に旋回され得る。動作において、遠心分離機10は、懸架された ボウルおよびスプールエレメント18および20を、軸28を中心に回転させ、 処理チャンバ12内に遠心力場を作り出す。 今説明したスプールエレメント18および20の相対移動を引き起こすための 機構のさらなる詳細は、「Centrlfuge With Separable Bowl and Spool Element s Providing Accessto the Separation Chamber」と題された米国特許第5,360,5 42号に開示されている。本明細書において、上記特許を参考として援用する。 遠心力場の動径方向の境界(図1参照)は、ボウルエレメント18の内壁24 と、スプールエレメント20の外壁26とにより形成される。ボウル内壁24は 、高G壁を規定する。スプール外壁26は、低G壁を規定する。 II.処理容器 示された実施形態(図4参照)では、第1の周囲シール42が、容器14の外 縁部を形成する。第2の内部シール44は、回転軸28にほぼ平行に延び、容器 14を2つの区画38および40に分割する。 使用中、全血は、区画38で遠心分離される。使用中、区画40は、生理食塩 水などの液体を保持し、区画38との平衡を保つ。図4に示される実施形態では 、区画38は、約1〜約1.2の容積測定比だけ、区画40よりも大きい。 3つのポート46、48および50は、処理区画38に連通し、全血およびそ の成分を運ぶ。2つの追加ポート52および54は、バラスト区画40に連通し 、平衡を保つ流体を運ぶ。 III.流体処理回路 流体回路200(図4)は、容器14に連結される。図5は、流体回路200 の全体的なレイアウトを、可撓性のあるチューブ、液体ソースおよび収集容器、 インラインポンプ、ならびにクランプのアレイに関して示す。これらはすべて、 以下に詳細に説明される。図6は、流体回路200の詳細を概略図の形で示す。 示された実施形態では、左、中央および右カセット23L、23Mおよび23 Rは、流体回路200のバルブおよびポンプ機能の多くを集中させる。左、中央 および右カセット23L、23Mおよび23Rは、それぞれPSL、PSMおよ びPSRとして示される、遠心分離機10の左、中央および右ポンプステーショ ンと対になる(mate)。 A.カセット 各カセット23L、23Mおよび23Rは、同じように構成されるため、1つ のカセット23Lの説明は、すべてのカセットに当てはまる。図7および図8は 、カセット23Lの構造の詳細を示す。 カセット23Lは、成形されたプラスチックボディ202を含む。液体流れチ ャネル208は、ボディ202の前側204に一体に成形される。剛性パネル2 14が、ボディの前側204を覆い且つ封止する。 バルブステーション210は、カセットボディ202の裏側206に成形され る。可撓性のあるダイアフラム212が、ボディ202の裏側206を覆い且つ 封止する。 図9は、各カセットの流れチャネル208およびバルブステーション210の 代表的なアレイを概略的に示す。示されるように、チャネルC1〜C6は、交差 して星形アレイを形成し、中央ハブHから放射状に広がる。チャネルC7はチャ ネルC5に交差し、チャネルC8はチャネルC6に交差し、チャネルC9はチャ ネルC3に交差し、そして、チャネル10はチャネルC2に交差する。言うまで もなく、その他のチャネルパターンを用いてもよい。 この構成では、バルブステーションVS1、VS2、VS9およびVS10は 、ハブHの共通交点のすぐ隣で、チャネルC2、C3、C5およびC6にそれぞ れ配置される。バルブステーションVS3、VS4、VS5、VS6、VS7お よびVS8は、チャネルC8、C1、C2、C5、C4およびC3の外先端に配 置される。 各カセット23Lは、カセット23Lの外側でチャネルC7とチャネルC6と の間に延びる可撓性のある上側チューブループULと、カセットの外側でチャネ ルC3とチャネルC10との間に延びる下側チューブループLLとを有する。使 用中、チューブループULおよびLLは、関連するポンプステーションのポンプ の蠕動ポンプロータを係合する。 B.ポンピングステーション ポンプステーションPSL、PSMおよびPSRは、カセット23L、23M および23Rと同様に、同一に構成されるため、1つのステーションPSLの説 明が、すべてのステーションに当てはまる。図12は、左ポンプステーションP SLの構造の詳細を示す。図10は、左ポンプステーションPSLをより概略的 な形で示す。 ステーションPSLは、2つの蠕動ポンプを含むため、回路200には、P1 〜P6として示される合計6つのポンプがある。(図6参照)。ステーションP SLはまた、10個のバルブアクチュエータのアレイ(図10に示す)を含むた め、回路200には、VA1〜VA30として示される合計30個のバルブアク チュエータがある(図6参照)。 使用中(図11参照)、カセット23LのチューブループULおよびLLは、 左ポンプステーションPSLのポンプP1およびP2を係合する。同様の態様で (図6が示すように)、中央カセット23MのチューブループULおよびLLは 、ポンプP3およびP4を係合する。右カセット23LのチューブループULお よびLLは、ポンプP5およびP6を係合する。 図11が示すように、カセット23LのバルブステーションVS1〜VS10 は、左ポンプステーションPSLのバルブアクチュエータV1〜V10と整列す る。図6が示すように、中央および右カセット23Mおよび23Rのバルブステ ーションも同様に、それぞれ中央および右ポンプステーションPSMおよびPS Rのバルブアクチュエータと整列する。 以下の表1は、図6に示されるポンプステーションバルブアクチュエータV1 〜V30と、カセットバルブアクチュエータVS1〜VS10との動作上の関連 をまとめている。 表1:カセットバルブステーションとバルブアクチュエータとの整列 カセット23L、23Mおよび23Rは、カセットの裏側206を下にして、 それぞれのポンプステーションPSL、PSM,PSRに取り付けられ、そのた め、ダイアフラム212は、バルブアクチュエータに面し且つバルブアクチュエ ータを係合する。バルブアクチュエータVnは、バルブ閉鎖位置に向かって付勢 されるソレノイド作動式ラム215である(図12参照)。バルブアクチュエー タVnは、表1に示された態様でカセットバルブステーションVSnと整列する ようなパターンで配置される。所定のラム215が付勢されると、関連するカセ ットバルブステーションが開き、液体の通過を可能にする。ラム215が付勢さ れていないとき、ラム215は、ダイアフラム215を、関連するバルブステー ション内に変位し、関連するバルブステーションを通る液体の通過を阻止する。 示された実施形態では、図12が示すように、各ポンプステーションPS、P SMおよびPSRのポンプP1〜P6は、回転する蠕動ポンプロータ216を含 む。ロータ216は、それぞれのチューブループを係合していない退縮状態(図 13に示される)と、ロータ216がそれぞれのチューブループをポンプレース 218に抗して係合する動作状態(図14に示される)との間で動かされ得る。 それにより、ポンプP1およびP6は、以下の3つの状態で動作し得る。 (i)ポンプオン状熊:(図14が示すように)この状態の間、ポンプロー タ216は回転し、動作位置にあり、ポンプチューブをポンプレース218に抗 して係合する。従って、回転するポンプロータ216は、蠕動的に流体をチュー ブループを通して運ぶ。 (ii)開ポンプオフ状態:(図13が示すように)この状態の間、ポンプ ロータ216は回転せず、退縮位置にあり、ポンプチューブループを係合しない 。従って、この開ポンプオフ状態は、ポンプロータの回転がない場合に、ポンプ チューブループを通る流体の流れを可能にする。 (iii)閉ポンプオフ状態:この状態の間、ポンプロータ216は回転せ ず、ポンプロータは動作状態にある。それにより、静止したポンプロータ216 がポンプチューブループを係合し、クランプとしての役割を果たして、ポンプチ ューブループを通る流体の流れを遮断する。言うまでもなく、退縮しない蠕動ポ ンプロータを用いて、ポンプロータの上流および下流にクランプおよびチューブ 経路を適切に配置することにより、ポンプ状態の等価な組み合わせを達成しても よい。 カセット23L、23M、23R、蠕動ポンプP1〜P6、およびバルブアク チュエータV1〜V30の構造についてのさらなる詳細は、本発明に不可欠なも のではない。これらの詳細は、「Peristaltic Pump Tube Cassette with Angle Port Tube Connectors」と題された米国特許第5,427,509号に記載されている。 本明細書において、上記特許を参考として援用する。 C.流体流れチューブ 流体回路200は、図6でT1〜T20として示される、ある長さの可撓性の あるプラスチックチューブをさらに含む。可撓性のあるチューブT1〜T20は 、カセット23L、23Mおよび23Rを、処理容器14、外部ソースおよび収 集バッグまたは容器、ならびに供血者/患者に連結する。 MNCの収集および採取に関するチューブT1〜T20の流体流れ機能につい ては、後で説明する。図6に示されるようなチューブT1〜T20の取り付けを 、構造上の観点から、以下にまとめる。 チューブT1は、供血者/患者から(図示しない従来の静脈切開針を介して) 外部クランプC2を通って左カセット23LのチャネルC4に延びる。 チューブT2は、チューブT1から、外部クランプC4を通って中央カセット 23MのチャネルC5に延びる。 チューブT3は、空気検出チャンバD1から左カセット23LのチャネルC9 に延びる。 チューブT4は、滴下(drip)チャンバD1から処理容器14のポート48に 延びる。 チューブT5は、処理容器14のポート50から中央カセット23Mのチャネ ルC4に延びる。 チューブT6は、中央カセット23MのチャネルC9から延び、チャンバD1 の下流にあるチューブT4に結合する。 チューブT7は、右カセット23RのチャネルC8から左カセット23Lのチ ャネルC8に延びる。 チューブT8は、中央カセット23MのチャネルC1から延び、チューブT7 に結合する。 チューブT9は、左カセット23LのチャネルC5から、空気検出チャンバD 2および外部クランプC3を通って(図示しない従来の静脈切開針を介して)供 血者/患者に延びる。 チューブT10は、処理容器14のポート46から、インライン光センサOS を通って右カセット23RのチャネルC4に延びる。 チューブT11は、右カセット23RのチャネルC9からチャンバD1に延び る。 チューブT12は、右カセット23RのチャネルC2から、pPPとして示さ れる、血小板の乏しい血漿を受けるように意図された容器に延びる。重量スケー ル(weight scale)(図示せず)は、流体容積の変化を得る目的で、容器PPP の重量を検知する。 チューブT13は、右カセット23RのチャネルC1から、MNCとして示さ れる、単核細胞を受けるように意図された容器に延びる。 チューブT14は、中央カセット23MのチャネルC2から、PRBCとして 示される、濃縮赤血球を受けるように意図された容器に延びる。重量スケールW Sは、流体容積の変化を得る目的で、容器PRBCの重量を検知する。 チューブT15は、ACDとして示された抗凝血剤の容器から、中央カセット 23MのチャネルC8に延びる。重量スケール(図示せず)は、流体容積の変化 を得る目的で、容器ACDの重量を検知する。 チューブT16およびT17は、PRIMEとして示された、生理食塩水など のプライミング液体(priming liquid)の容器から延び、すべてのカセット23 L、23Mおよび23Rを迂回し、外部クランプC1を通って、チューブT9( 空気検出チャンバD2とクランプC3との間)およびチューブT1(クランプC 3の上流)にそれぞれ交差する。重量スケール(図示せず)は、流体容積の変化 を得る目的で、容器PRIMEの重量を検知する。 チューブT18は、処理容器14のポート52から、右カセット23Rのチャ ネルC5に延びる。 チューブT19は、処理容器14のポート54から延び、チューブT18に交 差する。 チューブT20は、左カセット23LのチャネルC2から、WASTEとして 示される、廃棄プライミング液体を受けるように意図された容器に延びる。重量 スケール(図示せず)は、流体容積の変化を得る目的で、容器WASTEの重量 を検知する。 チューブの部分は、臍部(umbilicus)30において合わせられる(図1参照 )。臍部30は、遠心力場内にある処理容器14の内部と、遠心力場外にある回 路200のその他の静止構成要素との間の流体流連通を提供する。非回転(ゼロ オメガ)ホルダ32は、臍部30の上部を、懸架されたスプールおよびボウルエ レメント18および20の上で、非回転位置に保持する。ヨーク22上のホルダ 34は、臍部30の中央部を、懸架されたスプールおよびボウルエレメント18 および20の周りで第1の(1オメガ)速度で回転させる。別のホルダ36は、 臍部30の下端部を、1オメガ速度の2倍の第2の速度(2オメガ速度)で回転 させる。懸架されたスプールおよびボウルエレメント18および20もまた、こ の速度で回転する。このような臍部30の公知の相対回転は、臍部30をねじれ ない状態に保ち、このようにして、回転するシールの必要性を回避する。 IV.血液処理チャンバでの分離(概要) 容器14および流体回路200を用いてMNCを収集する手順の詳細を説明す る前に、主に図4および図15〜図17を参照して、処理区画38での全血分離 の流体力学について、まず大まかに説明する。 まず図4を参照して、抗凝血処理された全血(WB)が、供血者/患者から引 き込まれ、ポート48を通して処理区画内に運ばれる。血液処理区画38は、内 部シール60および66を含む。内部シール60および66は、WB流入領域7 4に通じるWB入口通路72を形成する。 WBが、回転軸28を中心に、区画38内の円周流路に従うため、容器14の 側壁は、スプールエレメント18の外(低G)壁26およびボウルエレメント2 0の内(高G)壁24の輪郭と一致するように広がる。 図17が示すように、WBは、血液処理区画38内の遠心力場において、高G 壁24に向かって移動する濃縮赤血球(参照番号96で示されるPRBC)と、 PRBC96の移動により、低G壁26に向かって動かされる血小板の豊富な血 漿(参照番号98で示されるPRP)とに分離する。界面と呼ばれる中間層(参 照番号58で示される)が、PRBC96とPRP98との間に形成される。 再び図4を参照して、内部シール60はまた、血液処理区画38内にPRP収 集領域76を作り出す。図17がさらに示すように、PRP収集領域76は、W B流入領域74に隣接する。PRBC96が遠心力に応答して高G壁24に向か って移動する速度は、血液処理区画38内の他のどの場所よりも、WB流入領域 74で最も速い。WB流入領域74には、低G壁26に向かって移動する比較的 より多くの血漿容積もある。その結果、WB流入領域74において、低G壁26 に向かう比較的大きい動径方向の血漿速度が起こる。このような低G壁26に向 かう大きい動径方向速度により、PRBC96から、すぐ近くのPRP収集領域 76に多数の血小板が溶出される。 図4が示すように、内部シール66はまた、PRBC収集通路78を規定する ドッグレッグ70を形成する。強化バリア115(図15参照)は、高G壁24 に沿ったPRBC質量内に延び、強化バリア115と、それに面する等動径方向 の高G壁24との間に、制限された通路114を作り出す。制限された通路11 4は、高G壁24に沿って存在するPRBC96が、バリア115を越えてPR BC収集領域50内に移動して、PRBC収集通路78によりPRBCポート5 0に運ばれることを可能にする。それと同時に、強化バリア115は、強化バリ ア115を越えるPRP98の通過を阻止する。 図15、図16Aおよび図16Bが示すように、高G壁24はまた、低G壁2 6に向かって突出し、PRP収集領域76にテーパ状のランプ84を形成する。 ランプ84は、低G壁26に沿って、狭窄通路90を形成し、PRP98の層は 、この通路90に沿って延びる。ランプ84は、界面58およびPRBC96を 、PRP収集ポート46に近づけないようにしながら、PRP98がPRP収集 ポート46に到達することを可能にする。 示された好適な実施形態(図16A参照)では、ランプ84は、PRPポート 46の軸に対して45°未満(好ましくは、約30°)の平行でない角度αの向 きで配置される。角度αは、界面およびPRBCが、狭窄通路90を通ってあふ れ出るのを調停する(mediates)。 図16Aおよび図l6Bが示すように、ランプ84はまた、関連する界面コン トローラ220(図19参照)により容器14の側壁を通して見るために、界面 26を見せる。界面コントローラ220は、それぞれのポート48、50および 46を通るWB、PRBCおよびPRPの相対流量を制御する。このようにして 、コントローラ220は、界面58を、(図16Aが示すように)狭窄通路90 に近い位置か、または、(図16Bが示すように)狭窄通路90から間隔があけ られた位置のいずれかの、ランプ上の所定の位置に維持することができる。 狭窄通路90に対する界面58のランプ84上での位置を制御することにより 、コントローラ220はまた、ポート46を通して収集される血漿の血小板含有 量を制御することができる。血漿中の血小板濃度は、界面58に近接するに従っ て増加する。(図16Bに示すように)界面58をランプ84上の比較的低い位 置に維持することにより、血小板の豊富な領域は、ポート46から離され、ポー ト46により運ばれる血漿は、比較的低い血小板含有量を有する。(図16Aが 示すように)界面58を、ポート46により近い、ランプ84上の高い位置に維 持することにより、ポート46により運ばれる血漿には、血小板が豊富である。 上記の代わりに、または上記と組み合わせて、コントローラは、WBが血液処 理区画38に導入されるレート、または、PRBCが血液処理区画134から運 ばれるレート、またはその両方を変えることにより、界面58の位置を制御し得 る。 界面コントローラの好適な実施形態のさらなる詳細は、米国特許第5,316,667 号に記載されている。本明細書において、上記特許を参考として援用する。 図15が示すように、動径方向に対向した表面88および104は、WB流入 領域74の高G壁24に沿って、流れ制限領域108を形成する。図17にも示 すように、領域108は、WB流入領域74においてWBの流れを制限して、そ の通過を低減し、それにより、WBを、低G壁26に沿って血液処理区画38内 により均一に潅流させる。このWBの均一な潅流は、PRP収集領域76に隣接 して起こり、且つ、界面58の好適な制御された位置がある平面とほぼ同じ平面 で起こる。一旦ゾーンダム104の狭窄領域108を越えると、PRBC96は 、遠心力に応答して、急速に高G壁24に向かって移動する。 狭窄領域108は、WBを、ほぼ界面58の好適な制御された高さで、流入領 域74内に運ぶ。界面58の制御された高さよりも下または上の高さで流入領域 74に運ばれたWBは、すぐに界面の高さを探す。そしてWBは、界面の高さを 探すときに界面の高さの周りで振動し、界面58に沿って不必要な二次的な流れ および乱れ(perturbations)を引き起こす。領域108は、WBをほぼ界面レ ベルで流入領域74内に運ぶことにより、界面58に沿った二次的な流れおよび 乱れの発生を低減する。 図15が示すように、低G壁26は、回転軸28から外側に高G壁24に向か ってWBの流れ方向にテーパ状になっており、それに面する高G壁24は、一定 の半径を保持している。テーパは、(図15が示すように)連続していてもよく 、階段状になっていてもよい。高G壁24および低G壁26に沿ったこれらの輪 郭は、PRP収集領域76の方向の遠心力場に対してほぼ横方向の動的な円周方 向の血漿流れ状態を作り出す。図18に概略的に示されるように、この方向(矢 印214)に起こる円周方向の血漿流れ状態は、界面58をPRP収集領域76 の方に絶えず引き戻す。PRP収集領域76では、既に説明したより高い動径方 向の血漿流れ状態が存在し、さらに多くの血小板を界面58から取り除く。それ と同時に、逆流パターンは、界面58のその他のより重い成分(リンパ球、単球 、および顆粒球)を循環させて、PRPストリームから離れたPRBC質量に戻 す役割を果たす。 この動的な円周方向の血漿流れ状態内で、MNC(図18などに示される)は 最初に、高G壁24に沿って落ち着くが、最終的には、高ヘマトクリットPRB C収集領域50付近の界面58の表面に浮かぶ。テーパ状になった低G壁は、図 18に矢印214で示される血漿逆流パターンを作り出す。この逆流パターン2 14は、MNCを低ヘマトクリットPRP収集領域76の方に引き戻す。MNC は再び、低ヘマトクリットPRP収集領域76付近で、高G壁24に向かって落 ち着く。 MNCは、図18に216で示されるこの経路で循環するが、WBは、PRB CとPRPとに分離される。MNCはこのように収集され、そして、PRBC収 集領域50およびPRP収集領域76の両方から離れた、区画38内のこの閉じ 込められた経路216に「とどまらされる」。 処理区画38で起こる分離の力学のさらなる詳細は、米国特許第5,573,678号 に見られる。本明細書において、上記特許を参考として援用する。 V.単核細胞処理手順 遠心分離機10は、プロセスコントローラ222(図19参照)を含む。プロ セスコントローラ222は、流体回路200の動作を命令し、容器14を用いた 所定のMNC収集および採取手順224を実行する。 図20が示すように、手順224は、流体回路200にプライミングする(pr imes)前処理プライミングサイクル226を含む。手順224は次に、予備処理 サイクル228を含む。予備処理サイクル228では、供血者/患者から得られ た全血からPPPを処理し、手順224の遅くに、採取されたMNCの懸濁培地 として使用する。手順224は次に、少なくとも1回の主処理サイクル230を 含む。主処理サイクル230は、収集ステージ232を含み、その後に採取ステ ージ234を含む。 収集ステージ232は、収集フェーズ236および238の連続を含み、これ らの収集フェーズの間、上記の態様で全血が処理され、第1の区画38に単核細 胞を蓄積する。 採取ステージは同様に、採取フェーズ240、242、244および246の 連続を含み、これらの採取フェーズの間、単核細胞の蓄積は、第1の区画38か ら、回路200に連結された収集容器MNCに移される。予備処理サイクル22 8の間に収集された懸濁培地は、MNCに付加される。 通常、主処理サイクル230は、所定の手順224の間に1回よりも多く行わ れる。所定の手順224で行われる処理サイクル230の回数は、収集したいM NCの総容積に依存する。 例えば、代表的な手順224では、主処理サイクル230は、続けて5回繰り 返される。各主処理サイクル230の間、1サイクルあたり約3mlのMNC容 積を得るために、約1500〜約3000mlの全血が処理され得る。5回の処 理サイクル230の終わりで、約15mlのMNC容積が収集され得、このMN C容積が、約200mlの最終希釈PPPに懸濁される。 A.前処理プライミング/バラストシーケンス 供血者/患者を(チューブT1およびT9を介して)流体回路200につなぐ 前に、コントローラ222は、プライミングサイクル228を行う。プライミン グサイクル228の間、コントローラ222は、遠心分離機10に、軸28を中 心にスプールおよびボウルエレメント18および20を回転させるよう命令する とともに、ポンプP1〜P6に、流体回路15および容器14の全体にわたって 、生理食塩水などの滅菌プライミング液体を容器PRIMEから運び、抗凝血剤 を容器ACDから運ぶよう命令する。プライミング液体は、回路15および容器 14から空気を追い出す。 第2の区画40は、単一のチューブT18により扱われるため、事実上、単一 のアクセスポートを有する。プライミングを達成するために、区画40は、プラ イミング液体との流れ連通から分離され、ポンプP5は、区画40から空気を引 き込むように動作し、それにより、区画40に負圧(真空)状態を作り出す。区 画40から空気を除去すると、次いで、プライミング液体の流れに連通が開かれ 、プライミング液体が、真空により区画40に引き込まれる。ポンプP5はまた 、区画40内への液体の運搬を助け、且つ、区画40に正圧状態を作り出すよう に動作する。コントローラ222は、プライミング液体を第2の区画40に保持 して、血液処理中に第1の区画38との平衡を保つ。 言うまでもなく、この真空プライミング手順が、単一のアクセスポートまたは その等価物により扱われる実質的にいかなる容器のプライミングにも適用可能で あることが認識されるはずである。 B.予備処理サイクル 容器MNCで採取されるMNCは、好ましくは、MNC供血者/患者から得ら れる血小板の乏しい血漿(PPP)培地に懸濁される。予備処理サイクル228 の間、コントローラ222は、流体回路222を、供血者/患者から予め確立さ れたPPP容積を収集して容器PPPに保持するように構成する。この容積は後 に、処理中にMNCの懸濁媒体として使用されるとともに、処理後にMNCに付 加されて、所望の最終希釈容積を達成する。 一旦供血者/患者を瀉血すると、コントローラ222は、ポンプステーション PSL、PSMおよびPSRを、予備処理サイクル228を開始するように構成 する。このサイクル228の間、上記のように、全血は、区画38で、濃縮赤血 球(PRBC)と、血小板の豊富な血漿(PRP)とに遠心分離される。PRB Cは、供血者/患者に戻され、単核細胞は、区画38に蓄積する。 MNCが区画38に蓄積すると、分離された血漿成分の部分が取り除かれ、収 集されて、MNC懸濁培地として使用される。このサイクル228の間、コント ローラ222は、(図16Bに示されるように)界面58をランプ84上の比較 的低い位置に維持する。その結果、区画38から運ばれ、容器PPPに保存され る血漿には、血小板が比較的乏しいため、この血漿を、PPPとして特徴付ける ことができる。区画38から運ばれたPPPの残りは、このサイクル228の間 に、供血者/患者に戻される。 予備処理サイクル228中の流体回路200の構成を、図21に示し、さらに 以下の表2にまとめる。 表2:予備処理サイクル ここで、 チューブを係合して、流体を蠕動的に運ぶ。 らず、この状態では、ポンプロータは、ポンプチューブループを係合しないため 、ポンプチューブループを通る流体の流れを可能にする。 らず、この状態では、ポンプロータは、ポンプチューブループと係合するため、 ポンプチューブループを通る流体の流れを可能にしない。 予備サイクル228の間、ポンプP2は、全血(WB)を供血者/患者からチ ューブT1を介して左カセット23Lに引き込み、チューブT3に引き込んで、 チャンバD1を通り、そしてチューブT4を通して血液処理区画38に引き込む 。ポンプP3は、抗凝血剤ACDを、チューブT15を通して中央カセット23 Mに引き込み、そしてチューブT2に引き込んで、全血と混合する。 抗凝血処理された全血は、ポート48を通って区画38に運ばれる。上記のよ うに、全血は、PRPと、PRBCと、界面(MNCを含む)とに分離される。 ポート50は、PRBC96を、血液処理区画38からチューブT5を通して 中央カセット23Mに運ぶ。PRBCは、チューブT8を通ってチューブT7に 入り、左カセット23LおよびチューブT9を介して供血者/患者に戻る。 ポート46は、血液処理区画38からPPPを運ぶ。PPPは、チューブT1 0をたどって、右カセット23Rに入る。ポンプP5は、PPPの部分をチュー ブT7に運び、PRBCとともに供血者/患者に戻す。界面コントローラ220 は、(図16Bに示されるように)界面をランプ84上の低い位置に維持するよ うにポンプP5の流量を設定し、それにより、このサイクル中に区画38から運 ばれる血小板の濃度を最小にする。ポンプP6は、MNC懸濁および最終希釈の ための所定の容積が収集されるまで、PPPの部分を、チューブT12を通して 容器PPPに運ぶ。この容積は、VOLSUSとして示される。 C.主処理サイクル 1.単核細胞(MNC)収集ステージ (i)MNC蓄積フェーズ コントローラ222は次に、主処理サイクル230のMNC収集ステージ23 2に切り替わる。まず、コントローラ222は、MNC蓄積フェーズ236用に 流体回路200を構成する。 フェーズ236のために、コントローラ222は、PPPの収集を停止するよ う、ポンプステーションPSRの構成を変える。コントローラ222はまた、界 面コントローラ220に、ポンプP5の流量を維持して(図16Aに示されるよ うに)界面をランプ84上のより高い位置に維持するよう命令し、それにより、 PRPの分離を可能にする。 構成を変えたため、ポンプP6はまた、以下により詳細に説明されるように、 PRPの部分を血液処理チャンバ38に再循環して血小板分離効率を高める。 MNC収集ステージ232のMNC蓄積フェーズ236の構成を、図22に示 し、さらに以下の表3にまとめる。 表3:単核細胞収集状態 (MNC蓄積フエーズ) ここで、 チューブを係合して、流体を蠕動的に運ぶ。 らず、この状態では、ポンプロータは、ポンプチューブループを係合しないため 、 ポンプチューブループを通る流体の流れを可能にする。 らず、この状態では、ポンプロータは、ポンプチューブループと係合するため、 ポンプチューブループを通る流体の流れを可能にしない。 1.PRPの再循環による高血小板分離効率の促進 通常、血小板は、MNC手順中は収集されない。その代わりに、血小板を供血 者/患者に戻すことが望ましいと考えられる。分離された血小板の平均血小板容 積MPV(フェムトリットルflまたは立方ミクロンで表される)が高いことは 、高い血小板分離効率を示すため、望ましい。MPVは、従来の技術により、P RPサンプルから測定され得る。より大きい血小板(即ち、約20フェムトリッ トルよりも大きい)は、最も界面58に捕らえられやすく、供血者/患者に戻さ れるPRPに入らない。その結果、供血者/患者に戻されるPRP中のより大き い血小板の数(population)が低減され、従って、MPVもより低くなる。 上記のような、界面58からより大きい血小板を持ち上げるのに十分な動径方 向の血漿流れ状態の確立は、血液処理区画38に入るWBの流入ヘマトクリット Hiに大きく依存する。この理由のため、ポンプ6は、チューブT10を流れる PRPの部分を再循環させて、WB入口ポート48に戻す。再循環するPRPは 右カセット23Rを通り、入口ポート48に連結されるチューブT4に結合する チューブT11に流入する。再循環するPRPは、血液処理区画38に入るWB と混ざり、それにより、流入ヘマトクリットHiを低下させる。 コントローラは、所望の流入ヘマトクリットHiを達成するように、ポンプP 6のPRP再循環流量QRecircを設定する。好適な実現では、Hi,は、約40% 以下であり、最も好適には、約32%である。これらの値は、高MPVを達成す る。 流入ヘマトクリットHiは、従来、チューブT4のインラインセンサ(図示せ ず)により測定され得る。本願と同時係属中の米国特許出願シリアル番号第08/4 71,883号に開示されるように、流入ヘマトクリットHiはまた、検知された流れ 状態に基づいて、経験的に判定され得る。本明細書において、上記出願を参考と して援用する。 2.PRBCの再循環による高MNC濃度および純度の促進 図18に概略的に示されるように、区画38内の血漿の逆流(矢印214)は 、界面58を、PRP収集領域76の方に引き戻す。このPRP収集領域76で 、増強された動径方向の血漿流れ状態が、界面58から血小板を取り除いて、供 血者/患者に戻す。逆流パターン214はまた、リンパ球、単球、および顆粒球 などの、界面58のその他のより重い成分を循環させ、再びPRBC質量内に循 環させる。 一方、PRBC収集領域80のヘマトクリットが比較的高いため、MNCは、 領域80付近で、界面58の表面に浮かぶ。そこで、MNCは、血漿逆流214 により、低ヘマトクリットPRP収集領域76の方に引き寄せられる。この領域 76のヘマトクリットがより低いため、MNCは、再び高G壁24の方に移動す る。図18の矢印216は、MNCが区画38に蓄積するときのMNCの所望の 循環流を示す。 PRBC収集領域50において所望のPRBC流出ヘマトクリットHoを維持 することが重要である。PRBCの流出ヘマトクリットHoが、所定の低しきい 値(例えば、約60%)を下回ると、MNCの大多数は、図18の矢印216で 示されるように、細胞質量として循環しない。低Hoに曝露されると、MNCの すべてまたは幾つかは、界面58の方に浮かばない。その代わりに、MNCは、 高G壁に沿って集まったままとなり、PRBCとともに、区画38から運び出さ れる。結果として得られるMNC収率は、不十分である。 一方、Hoが所定の高しきい値(例えば、85%)を上回ると、より重い顆粒 球がより多く界面58に浮かぶ。その結果、より少ない顆粒球が、界面58から 運び去られ、PRBCとともに供血者/患者に戻される。その代わりに、より多 くの顆粒球が、界面58を占有し、MNCに混入する。 この理由のため、MNC収集ステージ232の間、プロセスコントローラ22 2は、ポンプP4に、チューブT5を流れるPRBCの部分を再循環してWB入 ロポート48に戻すよう命令する。図21および図22が示すように、再循環す るPRBCは中央カセット23Mを通り、入口ポート48に連結されたチューブ T4に結合するチューブT6に流れる。再循環するPRBCは、血液処理区画3 8に入るWBと混ざる。 概して、流出ヘマトクリットHoの大きさは、ポンプP4(PRBC)および ポンプP2(WB)により左右されるPRBC再循環流量Qrの関数として逆に 変わる。ポンプP2により設定されたWB流量が与えられると、流出ヘマトクリ ットHoは、Qrを低下させることにより増加され得、逆に、流出ヘマトクリット Hoは、Qrを増加させることにより低減され得る。QrとHoとの間の厳密な関係 は、区画38内での流体の遠心加速度(区画38内の遠心力の大きさにより左右 される)と、区画38の面積と、区画38への流入流量全血(Qb)(ポンプP 2により左右される)および区画38からの流出流量PRP(Qp)(界面制御 ポンプP5により左右される)とを考慮に入れる。 この関係を表し、それによりQrを所望のHoに基づいて定量化する方法には様 々なものがある。示された実施形態では、コントローラ222は、Qb,Qpおよ びQrを周期的にサンプリングする。区画38内で活性(active)である遠心力 ファクタをさらに考慮して、コントローラは、以下のように、目標のHoに基づ いて、ポンプP4の新しいPRBC再循環ポンプレートQr(NEW)を得る。 (i)サンプル時間n=0で開始する。 (ii)現在のQrを以下のように計算する。 ここで、 Hoは、目標の流出ヘマトクリット値であり、小数で表される(例えば、75 %の場合、0.75)。 aは、遠心力により左右される流体の加速度であり、以下のように計算される 。 ここで、 Ωは、区画38の回転レートであり、ラジアン/秒で表される。 rは、回転の半径である。 gは、単位重力であり、98lcm/sec2に等しい。 Aは、区画38の面積である。 kは、ヘマトクリット定数であり、mは、分離性能定数である。kおよびmは 、経験データおよび/または理論モデリングに基づいて得られる。好適な実施形 態では、以下の理論モデルが使用される。 ここで、 であり、 βは、剪断に敏感な項であり、以下のように規定される。 ここで、 経験データに基づいて、b=6.0s-nであり、n=0.75であり、剪断レ ートは、以下のように規定される。 ここで、(u)は、流体速度であり、(y)は、空間寸法である。 そして、 Srは、経験的に得られる赤血球沈降ファクタであり、このファクタは、実験 データに基づいて、95×10-9sに設定され得る。 このモデルは、Brown、「The Physics of Continuous Flow Centrifugal Cell Separation」、Artificial Organs;13(1):4-20、Raven Press,Ltd.、New Yo rk(1989)(「Brown Article」)の式(19)に基づくものである。本明細書 において、上記文献を参考として援用する。このモデルのプロットは、Brown Ar ticleの図9に出てくる。 上記モデルは、予想される実際的な血液処理状態動作範囲にわたって単純な線 形回帰を用いて線形化される。代数代入(algebraic substitutions)は、以下 の式に基づいて行われる。 ここで、Qoは、出口チューブT5を流れるPRBCの流量であり、以下のよ うに表され得る。 この線形化により、(m)の値が傾きを構成し、(k)の値がy切片を構成す る単純化された曲線が得られる。 この単純化された曲線において、傾き(m)は、以下のように表される。 ここで、 β/Srは、経験データに基づいて、1.57/μsの一定値として表され得 る。 従って、単純化された曲線において、mは、531.13の値を有する。mの 値については、約500と約600との間の範囲が、概して、遠心力による連続 流れ全血分離手順に適用可能であると考えられる。 単純化された曲線の場合、(k)のy切片値は、0.9489に等しい。kの 値については、約0.85と約1.0との間の範囲が、概して、遠心力による連 続流れ全血分離手順に適用可能であると考えられる。 (iii)平均Qrを計算する。 Qrは、選択された間隔で測定され、これらの瞬間測定値が、処理期間にわた って以下のように平均される。 (iv)新しいQrを以下のように計算する。 ここで、 Fは、Qrの制御を可能にする(F=1の場合)か、または、Qrの制御を不能 にする(F=0の場合)か、または、システムの変動に基づいてQrのスケーリ ングを可能にする(Fが0と1との間の分数として表される場合)、任意の制御 ファクタである。Fは、定数を含んでいてもよく、あるいは、処理時間の関数と して変動してもよく、例えば、所定手順の開始時に第1の値で始まり、手順が進 むに従って第2またはそれ以上の値に変わってもよい。 (v)Qrを所定の範囲内(例えば、0ml/minと20ml/minとの 間)に維持する。 MNC収集ステージ232(図22)の間、コントローラ222は、高純度M NCの高収率の蓄積に最適な区画38の処理状態を達成するように、多数のポン プ流量を同時に設定し且つ維持する。コントローラは、WB流入流量Qb(ポン プP2を介して)と、PRP流出流量Qp(ポンプP5を介して)と、PRP再 循環流量QRecirc(ポンプP6を介して)と、PRBC再循環流量Qr(ポン プP4を介して)とを設定し且つ維持する。典型的には供血者/患者の快適さと 、許容可能な処理時間の達成とに合わせて設定されるWB流入流量Qbが与えら れると、コントローラ222は、 (i)ポンプP5に、ランプ84上の所望の界面位置を保持するように設定さ れたQpを維持するよう命令し、それにより、血漿中の所望の血小板濃度(PP PまたはPRP)を達成し、 (ii)ポンプP6に、所望の流入ヘマトクリットHi(約32%と約34% との間)を保持するように設定されたQRecircを維持するよう命令し、それによ り、高い血小板分離効率を達成し、そして、 (iii)ポンプP4に、所望の流出ヘマトクリットHo(約75%と約85 %との間)を保持するように設定されたQrを維持するよう命令し、それにより 、顆粒球の混入を防ぐとともに、MNC収率を最大にする。 (ii)第2のフェーズ(PRBC収集) コントローラ222は、予め確立された全血容積(例えば、1500ml〜3 000ml)が処理されると、MNC蓄積フェーズ236を終了する。あるいは 、MNC蓄積フェーズは、目標のMNC容積が収集されたときに終了されてもよ い。 次いで、コントローラ22は、MNC収集ステージ232のPRBC収集フェ ーズ238に入る。このフェーズ238では、(V14を閉じることにより)P RBCを供血者/患者に戻すのを停止し、(バルブV18を閉じ、ポンプP4を 閉ポンプオフ状態にすることにより)PRBCの再循環を停止し、そしてその代 わりに(V15を開くことにより)PRBCを容器PRBCに運ぶよう、ポンプ ステーションPSMの構成が変えられる。 この新しい構成を、図23に示し、さらに以下の表4にまとめる。 表4:単核細胞収集ステージ (PRBC収集フェーズ) ここで、 チューブを係合して、流体を蠕動的に運ぶ。 らず、この状態では、ポンプロータは、ポンプチューブループを係合しないため 、ポンプチューブループを通る流体の流れを可能にする。 らず、この状態では、ポンプロータは、ポンプチューブループと係合するため、 ポンプチューブループを通る流体の流れを可能にしない。 このフェーズ238では、ラインT5中のPRBCは、中央カセット23Mを 通ってラインT14に運ばれ、そして容器PRBCに運ばれる。コントローラ2 22は、容器PRBCに所望の容積のPRBC(例えば、35ml〜50ml) が集まるまで、このフェーズ238で動作する。以下により詳細に説明されるよ うに、このPRBC容積は後に、MNC採取ステージ234のMNC除去フェー ズ240で使用される。 コントローラ222は、容器PRBCが所望の容積のPRBCを保持している ことを(重量スケールWSを用いて、重量測定により)検知すると、PRBC収 集フェーズ238を終了する。 このようにして、主処理サイクル230のMNC収集ステージ232を終了す る。 2.単核細胞採取ステージ (i)第1のフェーズ(MNC除去) コントローラ222は、主処理サイクル230のMNC採取ステージ234に 入る。このステージ234の第1のフェーズ240では、全血が引き込まれ、そ して血液処理区画38を通らずに再循環されて供血者/患者に戻される。区画3 8を回転させ続けながら、前のPRBC収集フェーズ238で容器PRBCに収 集されたPRBCがWB入口チューブT4を通して処理区画38に戻される。M NC収集ステージ232中に区画38に蓄積されたMNCは、PRPとともに、 チューブT10を通って区画38から運び出される。 MNC採取ステージ234のMNC除去フェーズ240中の流体回路15の構 成を図24Aに示し、さらに以下の表5にまとめる。 表5:単核細胞採取ステージ (MNC除去フェーズ) ここで、 チューブを係合して、流体を蠕動的に運ぶ。 らず、この状態では、ポンプロータは、ポンプチューブループを係合しないため 、ポンプチューブループを通る流体の流れを可能にする。 らず、この状態では、ポンプロータは、ポンプチューブループと係合するため、 ポンプチューブループを通る流体の流れを可能にしない。 図24Aが示すように、PRBCがポンプP4により容器PRBCからチュー ブT14およびT6を通してチューブT4に運ばれ、WB入口ポート48を通し て区画38に導入されている間、コントローラ222は、PRBC出口チューブ T5を閉じる。コントローラ222は、TCYCSTARTでサイクル時間カウンタ を開始する。 容器PRBCからWB入口ポート48を通って入るPRBCの流入は、PRP 収集領域76のヘマトクリットを増加する。それに応答して、区画38に蓄積さ れたMNCの集中領域(図18に示されるような)は、界面58の表面に浮かぶ 。入ってくるPRBC容積は、PRPを、PRP出口ポート46を通して追い出 す。界面58、および界面58とともにMNC集中領域(図24AでMNC領域 として示される)もまた、PRP出口ポート46を通して区画38から追い出さ れる。MNC領域は、PRPチューブT10に沿って、光センサOSの方に移動 する。 図28が示すように、チューブT10内では、MNC集中領域の前に、PRP 領域112がある。この領域112のPRPは、(図24Aが示すように)右カ セット23RおよびチューブT12を通して容器PPPに運ばれる。チューブT 10内ではまた、MNC集中領域の後に、PRBC領域114が続く。 PRP領域112とMNC集中領域との間に、第1の遷移領域116がある。 第1の遷移領域116は、着実に減少する濃度の血小板(図28に正方形模様で 示される)と、着実に増加する数のMNC(図28にテクスチャ模様で示される )とからなる。 MNC集中領域とPRBC領域114との間に、第2の遷移領域118がある 。第2の遷移領域118は、着実に減少する濃度のMNC(図28にテクスチャ 模様で示される)と、着実に増加する数のPRBC(図28に波模様で示される )とからなる。 光センサOSで見ると、MNC領域の前にある領域112および116と、M NC領域の後に続く領域118および114とは、遷移光学密度を示し、これら の密度で、MNC領域が識別され得る。光センサOSは、PRP出口ポート46 と右カセット23Rとの間で、チューブT10により運ばれる液体の光学密度の 変化を検知する。図28が示すように、光学密度は、MNC領域が光センサOS を通り過ぎて進むに従って、光透過性が高い(即ち、PRP領域112である) ことを示す低い値から、光吸収性が高い(即ち、PRBC領域114である)こ とを示す高い値に変わる。 図28に図示される示された実施形態では、光センサOSは、例えばBaxter H ealthcare CorporationのFenwal Divisionにより市販されているAutopheresis-C T10を通して光を出射する赤発光ダイオード102を含む。言うまでもなく、 緑または赤外のようなその他の波長を使用してもよい。センサOSはまた、チュ ーブT10の反対側に、PINダイオード検出器106を含む。 コントローラ222は、処理エレメント100を含む。処理エレメント100 は、発光装置102および検出器106から受け取った電圧信号を分析して、チ ューブT10内の液体の光透過を計算する。この光透過を、OPTTRANSと 呼ぶ。 OPTTRANSを計算するために、処理エレメント100により様々なアル ゴリズムが使用され得る。 例えば、OPTTRANSは、赤発光ダイオード102がオンであり、液体が チューブT10を通って流れているときのダイオード検出器106の出力(RE D)に等しい値であり得る。 OPTTRANSを得るために、背景光学「雑音」は、以下のようにREDか らフィルタリングされ得る。 ここで、COR(RED SPILL)は、以下のように計算される。 ここで、 REDは、赤発光ダイオード102がオンであり、液体がチューブT10を 通って流れているときのダイオード検出器106の出力であり、 REDBKGRDは、赤発光ダイオード102がオフであり、液体がチュー ブT10を通って流れているときのダイオード検出器106の出力である。 そして、CORREFは、以下のように計算される。 ここで、 REFは、赤発光ダイオード102がオンであるときのダイオードの出力で あり、 REFBKGRDは、赤発光ダイオード102がオフであるときのダイオー ドの出力である。 処理エレメント100は、供血者/患者のPRPがチューブT10を通って運 ばれているとき、前のMNC収集ステージ232中のセンサOSからのデータを 得ることにより、センサOSを、供血者/患者のPRPの光学密度に正規化する 。このデータは、チューブおよび供血者/患者のPRPについてのベースライン 光透過値(OPTTRANSBASE)を確立する。例えば、OPTTRANSBASE は、上記のように、フィルタリングされた検出機構またはフィルタリングされて いない検出機構のいずれかを用いて、収集ステージ232中の選択された時間に 測定され得、例えば、ステージ232の半ばで測定され得る。あるいは、フィル タリングされた検出機構またはフィルタリングされていない検出機構のいずれか を用いて、MNC収集ステージ232中に、光透過値の組が計算される。この値 の組は、収集ステージ全体にわたって平均され、OPTTRANSBASEが得られ る。 その後のMNC除去フェーズ240の間、処理エレメント100は、MNC除 去フェーズ240中のチューブT10およびチューブT10を流れる液体につい ての1つ以上の光透過値(OPTTRANSHARVEST)を検知し続ける。OPT TRANSHARVESTは、MNC除去フェーズ240の選択された時間(例えば、 フェーズ240の半ば)に検知された単一の読み出しを含んでいてもよく、MN C除去フェーズ240の間に得られた多数の読み出しの平均を含んでいてもよい 。 処理エレメント100は、OPTTRANSBASEを0.0として確立し、光学 飽和値を1.0として確立し、そして、正規化された0.0〜1.0の値の範 囲にOPTTRANSHARVESTの値を比例して当てはめることにより、正規化さ れた値DENSITYを得る。 図28が示すように、処理エレメント100は、2つの所定しきい値THRE SH(1)およびTHRESH(2)を保持する。THRESH(1)の値は、 DENSITYの選択された公称値(例えば、0.0〜1.0の正規化されたス ケールでは0.45)に対応する。この公称値は、第1の遷移領域116のMN C濃度が予め選択された処理目標を満たすときに起こると経験的に判定されてい る値である。THRESH(2)の値は、DENSITYの別の選択された公称 値(例えば、0.0〜1.0の正規化されたスケールでは0.85)に対応する 。この公称値は、第2の遷移領域118のPRBC濃度が予め選択された処理目 標を上回るときに起こると経験的に判定されている値である。 光センサOSと、右カセット23RのバルブステーションV24との間のチュ ーブT10の液体容積は、第1のオフセット容積VOLOFF(1)としてコントロー ラ222に入力される既知の値を構成する。コントローラ222は、VOLOFF( 1) と、ポンプP4のポンプレート(QP4)とに基づいて、以下のように第1の制 御時間値Time1を計算する。 示された好適な実施形態では、オペレータは、合計MNC採取容積VOLMNC を増加するために、公称の追加容積を表す第2のオフセット容積VOLOFF(2)( 図28に図示)を特定して、コントローラ222に入力し得る。VOLOFF(2)の 量は、システムおよび処理の変動と、供血者/患者の間でのMNC純度の変動と を考慮に入れたものである。コントローラ222は、VOLOFF(2)と、ポンプP 4のポンプレート(QP4)とに基づいて、以下のように第2の制御時間値Tim e2を計算する。 ポンプP4の動作によりPRBCがWB入口ポート48を通して運ばれると、 界面58およびMNC領域は、PRPチューブT10内を、光センサOSに向か って進む。MNC領域の前にあるPRPは、光センサODを越え、チューブT1 2を通って容器PPPに入る。 MNC領域が光センサOSに到達すると、センサOSは、DENSITY=T HRESH(1)を検知する。この事象が起こると、コントローラ222は、第 1の時間カウンタTC1を開始する。光センサOSがDENSITY=THRE SH(2)を検知すると、コントローラ222は、第2の時間カウンタTC2を 開始する。検知MNC容積は、所定のQP4についてのTC1とTC2との間の間隔 に基づいて得られ得る。 時間が進むと、コントローラ222は、TC1の大きさを第1の制御時間T1と 比較するとともに、TC2を第2の制御時間T2と比較する。TC1=T1のとき、 図24Bが示すように、対象のMNC領域の前縁が、バルブステーションV24 に到達している。コントローラ222は、バルブステーションV24に開くよう 命令し、バルブステーションV25に閉じるよう命令する。コントローラ222 は、サイクル時間カウンタに、この事象をTCYCSWITCHとして記す。対象のM NC領域は、容器MNCに通じるチューブT13に運ばれる。TC2=T2のとき 、図24Cが示すように、第2のオフセット容積VOLOFF(2)もまた、チューブ T13に運ばれる。それにより、所定のサイクルについて選択された合計MNC 採取容積(VOLMNC)が、チューブT13に存在する。TC2=T2になると、 コントローラ222は、ポンプP4に、停止するよう命令する。従って、チュー ブT13内でVOLMNCがそれ以上前進しなくなる。 コントローラ222は、前のMNC除去フェーズ中に容器PPPに運ばれたP RPの容積を得る。このPRP容積(VOLPRPとして示される)は、以下のよ うに得られる。 好適な実施形態では、ポンプP4がTCYCSTART後に特定のPRBC流体容 積よりも多くの容積(例えば、60mlよりも多くの容積)を運ぶと、コントロ ーラ222は、TC1およびTC2に関係なくMNC除去フェーズを終了する。こ のタイムアウト環境は、例えば、光センサOSがTHRESH(1)を検出しな い場合などに起こり得る。この容積測定によるタイムアウト環境では、VOLP RP=60−VOLOFF(1)である。容積測定タイムアウトの代わりに、または容 積測定タイムアウトと組み合わせて、コントローラ222は、容器PRBCの重 量スケールWSが所定値未満の重量(例えば、4グラム未満、または、4ml未 満の流体容積と等価な重量)を検知すると、TC1およびTC2に関係なくMNC 除去フェーズを終了してもよい。 (ii)第2のフェーズ(PRPフラッシュ) 一旦MNC領域が図24Cに示されるような位置になると、コントローラ22 2は、MNC採取ステージ234のPRPフラッシュフェーズ242に入る。こ のフェーズ242の間、コントローラ222は、VOLPRPを容器PPPおよび チューブT12から出して血液処理区画38に入れるよう回路200を構成する 。 PRPフラッシュフェーズ242の間の流体回路200の構成を、図25に示 し、さらに表6にまとめる。 表6:単核細胞採取ステージ (PRPフラッシュフェーズ) ここで、 チューブを係合して、流体を蠕動的に運ぶ。 らず、この状態では、ポンプロータは、ポンプチューブループを係合しないため 、ポンプチューブループを通る流体の流れを可能にする。 らず、この状態では、ポンプロータは、ポンプチューブループと係合するため、 ポンプチューブループを通る流体の流れを可能にしない。 PRPフラッシュステージ242の間、コントローラ222は、区画38を回 転させ続けながら、全血再循環を停止し、VOLPRPをポンプによりチューブT 11を通して処理区画38に送るようポンプステーションPSL、PSMおよび PSRを構成する。VOLPRPは、ポンプP6により、チューブT12を通って 右カセット23Rに運ばれ、次いでチューブT11に運ばれ、チューブT4およ びポート48を通って処理区画38に入る。PRBCは、処理区画38からポー ト50およびチューブT5を通って中央カセット23Mに運ばれ、次いでチュー ブT8およびT7に運ばれて、左カセット23Lに入る。PRBCは、チューブ T9に運ばれ、供血者/患者に戻る。このフェーズ242の間、流体回路15に おいて、その他の流体は運ばれない。 VOLPRPを戻すことにより、容器PPP内の液体の容積を、上述の予備処理 サイクル228の間に収集されたVOLSUSに回復する。また、VOLPRPを戻す ことにより、MNCの懸濁のために予定された容器PPP内のVOLSUS中の低 い血小板数(population)が保たれる。また、VOLPRPを戻すことにより、T C1=T1の前に第1の遷移領域116に存在する残留MNCが処理区画38に戻 され(従って、VOLMNCの部分は戻されず)、その後の主処理サイクル230 においてさらに収集される。 (iii)第3のフェーズ(MNC懸濁) VOLPRPを区画38に戻して、コントローラ222は、MNC採取ステージ 234のMNC懸濁フェーズ244に入る。このフェーズ244の間、容器PP P内のVOLSUSの部分は、VOLMNCとともに容器MNCに運ばれる。 MNC懸濁フェーズ244中の流体回路200の構成を図26に示し、さらに 以下の表7にまとめる。 表7:単核細胞採取ステージ (MNC懸濁フェーズ) ここで、 チューブを係合して、流体を蠕動的に運ぶ。 らず、この状態では、ポンプロータは、ポンプチューブループを係合しないため 、ポンプチューブループを通る流体の流れを可能にする。 らず、この状態では、ポンプロータは、ポンプチューブループと係合するため、 ポンプチューブループを通る流体の流れを可能にしない。 MNC懸濁フェーズ244では、コントローラは、C3を閉じて、PRBCを 供血者/患者に戻すのを停止する。VOLSUSの所定のアリコート(例えば、5 ml〜10ml)が、ポンプP6によりチューブT12を通して右カセット23 Rに運ばれ、次いでチューブT13に運ばれる。図26が示すように、VOLSU S のアリコートは、チューブT13を通るVOLMNCをさらに容器MNCに前進さ せる。 (iii)第4のフェーズ(クリーンアップ) このとき、コントローラ222は、MNC採取ステージ234の最後のクリー ンアップフェーズ246に入る。このフェーズ246の間、コントローラ222 は、チューブT10にあるPRBCを所定区画38に戻す。 クリーンアップフェーズ246中の流体回路200の構成を図27に示し、さ らに以下の表7にまとめる。 表7:単核細胞採取ステージ (クリーンアップフェーズ) ここで、 チューブを係合して、流体を蠕動的に運ぶ。 らず、この状態では、ポンプロータは、ポンプチューブループを係合しないため 、ポンプチューブループを通る流体の流れを可能にする。らず、この状態では、ポンプロータは、ポンプチューブループと係合するため、 ポンプチューブループを通る流体の流れを可能にしない。 クリーンアップフェーズ246は、TC2=T2の後に第2の遷移領域118( 図28参照)にあるいかなる残留MNCも処理区画38に戻し(従って、VOLSEN の部分は戻さず)、その後の処理サイクルにおいてさらに収集される。 クリーンアップフェーズ246では、コントローラ222は、左および中央カ セット23Lおよび23Mのすべてのバルブステーションを閉じ、そして、PR BCをチューブT10から循環させてチューブT11およびT4を通して処理区 画38に戻すよう右ポンプステーションPSRを構成する。この期間中、供血者 /患者からはいかなる成分も引き込まれておらず、または、供血者/患者にはい かなる成分も戻されていない。 クリーンアップフェーズ246の終わりで、コントローラ222は、新しい主 処理サイクル230を開始する。コントローラ222は、手順全体で目標にされ た所望のMNC容積に達するまで、主処理サイクル230の連続を繰り返す。 最後の主処理サイクル230の終わりで、オペレータは、手順中に収集された MNCをさらに希釈するために、追加のVOLSUSを求め得る。この環境では、 コントローラ222は、上記のような予備処理サイクル228を実行して容器P PPに追加のVOLSUSを収集するように流体回路200を構成するよう命令さ れ得る。次いで、コントローラ222は、MNC懸濁フェーズ244を実行して 追加のVOLSUSを容器MNCに運び、VOLMNCの所望の希釈を達成するように 流体回路200を構成する。 IV.別の単核細胞処理手順 図29は、MNCの収集および採取に適した流体回路300の別の実施形態を 示す。回路300は、ほとんどの点で、図6に示される回路200と同じであり 、共通の構成要素には、同じ参照番号が付されている。 回路300は、容器14の第2の区画310が区画38と同一であり、それに より、第2の区画310自体が、区画38と同じ特徴を有する第2の血液処理区 画を含むという点で、回路200とは異なる。区画310は、図4で区画38に ついて示されたような内部シールを含み、PRPおよびPRBCのための同じ血 液収集領域を作り出すため、これらの血液収集領域の詳細は、図29には示され ていない。区画310は、全血を区画310に運ぶためのポート304と、区画 310からPRPを運ぶためのポート306と、区画310からPRBCを運ぶ ためのポート302とを含む。区画310はまた、図16Aおよび図16Bに示 され、区画38に関して以前に説明されたようなテーパ状のランプ84を含む。 流体回路300はまた、チューブT14、T18およびT19が含まれないと いう点でも、流体回路200とは異なる。さらに、容器PRBCが含まれない。 その代わりに、流体回路300は、以下のような幾つかの新しいチューブ経路お よびクランプを含む。 チューブ経路T21は、区画310のPRP出口ポート306から、新しいク ランプC5を通って、チューブ経路T10に結合する。 チューブ経路T22は、区画310のWB入口ポート306から、新しい空気 検出器D3および新しいクランプC6を通って、チューブ経路T3に結合する。 チューブ経路T33は、区画310のPRBC出口ポート302から、新しい クランプC8を通って、チューブT4に結合する。 新しいクランプC7は、空気検出器D1の上流のチューブT3にも設けられる 。 新しいクランプC9は、光センサOSと新しいチューブT21の結合部との間 のチューブT10にも設けられる。 回路300を用いて、コントローラ222は、回路200について以前に説明 された上記のプライミングサイクル226、予備処理サイクル228、および主 処理サイクル230を進み、MNC蓄積フェーズ236まで進む。回路300を 使用する場合、PRBC収集フェーズ238は、その後に区画38からMNCを 除去するために使用されるPRBCが、第2の区画310で処理および収集され るという点で異なる。 具体的には、図30に示されるように、PRBC収集フェーズ238の間、コ ントローラ222は、供血者/患者からの全血の容積を第2の区画310に運ぶ 。全血容積は、ポンプP2により、チューブT1を通ってチューブT3内に引き 込まれ、次いで、開いたクランプC6を通って、区画310につながるチューブ T22に引き込まれる。採取のためにMNCが蓄積されている区画38への全血 の運搬を遮るために、クランプC7が閉じられる。区画38からのPRPの運搬 を遮るために、クランプC9も閉じられ、それにより、区画38においてMNC の蓄積が乱されない状態に保つ。 区画310において、全血容積は、区画38でPRBCおよびPRPが分離さ れた態様と同じ態様で、PRBCとPRPとに分離される。PRPは、ポンプP 5の動作により、区画310からチューブT23と開いたクランプC5とを通っ て運ばれ、供血者/患者に戻される。区画310にPRBCを保持するために、 クランプC8は閉じられる。 コントローラ222はまた、回路300を用いて異なるMNC除去フェーズ2 40を行う。図31に示されるように、MNC除去フェーズ240の間、コント ローラ222は、引き込まれた全血の部分を再循環して供血者/患者に戻し、全 血の別の部分を、図30に関して以前に説明された経路と同じ経路をたどって区 画310に送る。コントローラ222は、クランプC8およびC9を開き、クラ ンプC5を閉じる。区画310に入る全血は、PRBCを、PRBC出口ポート 302を通してチューブT23に追い出す。区画310からのPRBCは、区画 38のWB入口ポート48に入る。上記のように、区画38の外側から入ってく るPRBCの流れは、区画38内のPRBCのヘマトクリットを増加し、蓄積さ れたMNCを界面58に浮かばせる。上記のように、区画38の外側から入って くるPRBCは、図31に示されるMNC領域とともに、PRPを、PRPポー ト46を通して追い出す。このMNC領域は、回路200について説明された態 様と同じ態様で、光センサOSにより検出され、そしてその後の処理242、2 44および246で採取される。 本発明の様々な特徴は、以下の請求の範囲に示される。
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (72)発明者 レイツ,ダグラス ダブリュー. アメリカ合衆国 イリノイ 60048,グリ ーン オークス,キャリアッジ コート 1635

Claims (1)

  1. 【特許請求の範囲】 1.血液処理システムであって、 回転エレメントと、 該回転エレメント上にあり、該回転エレメントと共通回転する処理チャンバと 、を含み、該処理チャンバは、成分に遠心分離される血液を含む第1の区画を含 み、該処理チャンバはまた、血液を含まない液体を含む第2の区画を含み、該液 体は、該回転エレメント上での回転中に該第1の区画との平衡を保つ、血液処理 システム。 2.血液処理システムであって、 円周を有する回転エレメントと、 該回転エレメント上にあり、該回転エレメントと共通回転する処理チャンバと 、を含み、該処理チャンバは、成分に遠心分離される血液を含む第1の区画を含 み、該第1の区画は、該回転エレメントの該円周の全体未満を占有し、該処理チ ャンバはまた、血液を含まない液体を含む第2の区画を含み、該液体は、該回転 エレメント上での回転中に該第1の区画との平衡を保つ、血液処理システム。 3.前記第2の区画が、単一の流体流れアクセスを含む、請求項1または2に記 載のシステム。 4.前記第2の区画が、実質的に空気を含まない、請求項1または2に記載のシ ステム。 5.前記第2の区画中の前記液体が、正圧を受ける、請求項1または2に記載の システム。 6.血液処理システムであって、 単一の流体流れアクセスを有する処理チャンバと、 該単一のアクセスに連通するチューブと、 該チューブにあるポンプエレメントと、 該ポンプエレメントに連結されるコントローラと、を含み、該ポンプエレメン トは、該処理チャンバに真空を引き込むよう該ポンプエレメントを動作させる第 1のモードで動作し、該ポンプエレメントは、該処理チャンバ内に該真空がある 間に該チューブと液体源との連通を開く第2のモードで動作し、それにより、該 真空が、該処理チャンバ内に液体を引き込み、該処理チャンバをプライミングす る、血液処理システム。 7.前記第2のモードの間、前記コントローラは、前記真空が前記処理チャンバ 内に前記液体を引き込んでいる間に、前記ポンプエレメントにも、該処理チャン バに該液体を運ぶよう命令する、請求項6に記載の血液処理システム。 8.血液処理システムであって、 回転エレメントと、 該回転エレメントに固定され、該回転エレメントと共通回転する処理チャンバ と、を含み、該処理チャンバは、第1の区画を含み、該第1の区画は、成分に遠 心分離される血液を該第1の区画に運ぶための入口ポートと、分離された成分を 該第1の区画から運ぶための出口ポートと、を有し、該処理チャンバはまた、第 2の区画を含み、該第2の区画は、該回転エレメント上での回転中に該第1の区 画との平衡を保つために、該第2の区画に液体を運ぶための単一の流体流れアク セスを含み、該血液処理システムは、 該単一のアクセスに連通するチューブと、 該チューブにあるポンプエレメントと、 該ポンプエレメントに連結されるコントローラと、をさらに含み、該ポンプエ レメントは、該第2の区画に真空を引き込むよう該ポンプエレメントを動作させ る第1のモードで動作し、該ポンプエレメントは、該第2の区画内に該真空があ る間に該チューブと液体源との連通を開く第2のモードで動作し、それにより、 該真空が、該第2の区画内に液体を引き込み、該第2の区画をプライミングして 該第1の区画との平衡を保つ、血液処理システム。 9.前記第2のモードの間、前記コントローラは、前記真空が前記第2の区画内 に前記液体を引き込んでいる間に、前記ポンプエレメントにも、該第2の区画に 該液体を運ぶよう命令し、該第2の区画に正圧状態を付与する、請求項8に記載 の血液処理システム。 10.回転エレメント上で処理チャンバを回転させる工程を包含し、該処理チャ ンバは、第1の区画および第2の区画を含み、 成分に遠心分離される血液を該第1の区画に運ぶ工程と、 血液を含まない液体を該第2の区画に充填して、該回転エレメント上での回転 中に該第1の区画との平衡を保つ工程と、を包含する、血液処理方法。 11.単一の流体流れアクセスを有する容器をプライミングする方法であって、 (i)ポンプエレメントを含むチューブに、該単一のアクセスを連結する工程 と、 (ii)該ポンプエレメントを動作させて該容器内に真空を引き込み、それに より、該単一のアクセスを通して該容器から空気を除去する工程と、 (iii)該工程(ii)の後、該容器内に該真空がある間に、該チューブと 液体源との間の連通を開くことにより、該真空が、該単一のアクセスを通して該 容器に液体を引き込み、それにより該容器をプライミングする工程と、を包含す る、方法。 12.前記工程(iii)は、前記真空が前記単一のアクセスを通して前記容器 内に前記液体を引き込んでいる間に、前記ポンプエレメントにも、該単一のアク セスを通して該容器内に該液体を運ぶよう動作させる工程を包含する、請求項1 1に記載の方法。
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