JP2002255996A

JP2002255996A - New compound f-15078c and f-15078d

Info

Publication number: JP2002255996A
Application number: JP2001051492A
Authority: JP
Inventors: Azusa Yoshida; あずさ吉田; Toshio Takatsu; 敏夫高津; Tatsuya Yano; 辰也矢野; Itsushin Tanaka; 一新田中
Original assignee: Sankyo Co Ltd
Current assignee: Sankyo Co Ltd
Priority date: 2001-02-27
Filing date: 2001-02-27
Publication date: 2002-09-11

Abstract

PROBLEM TO BE SOLVED: To obtain a new compound having antifungal activity. SOLUTION: This compound is represented by formula (1) or its salt.

Description

DETAILED DESCRIPTION OF THE INVENTION

【０００１】[0001]

【発明の属する技術分野】本発明は、抗真菌活性を有す
る新規化合物、該化合物生産菌を培養することによる該
化合物の製造法、該化合物からなる医薬、該化合物を有
効成分とする真菌感染症の治療剤及び予防剤、該化合物
の生産菌等に関する。TECHNICAL FIELD The present invention relates to a novel compound having antifungal activity, a method for producing the compound by culturing the compound-producing bacterium, a medicament comprising the compound, and a fungal infection containing the compound as an active ingredient. The present invention relates to a therapeutic agent and a prophylactic agent, and a bacterium producing the compound.

【０００２】[0002]

【従来の技術】抗真菌活性を有するペプチド系の化合物
としては、従来、ザレリオン（Ｚａｌｅｒｉｏｎ）属等
が生産するニューモカンジン（ｐｎｅｕｍｏｃａｎｄｉ
ｎ）類（Ｊ．Ａｎｔｉｂｉｏｔｉｃｓ４５，１８８６
−１８９１（１９９２））、アスペルギルス（Ａｓｐｅ
ｒｇｉｌｌｕｓ）属等が生産するエキノカンジン（ｅｃ
ｈｉｎｏｃａｎｄｉｎ）類（Ｈｅｖ．Ｃｈｉｍ．Ａｃ
ｔａ５７，２４５９−２４７７（１９７４））、又、
オーレオバシジウム（Ａｕｒｅｏｂａｓｉｄｉｕｍ）属
が生産するオーレオバシジン（ａｕｒｅｏｂａｓｉｄｉ
ｎ）類（Ｊ．Ａｎｔｉｂｉｏｔｉｃｓ，４４，９１９
−９２４（１９９１））が報告されている。2. Description of the Related Art Peptide compounds having antifungal activity include pneumocandi (pneumocandi) conventionally produced by the genus Zalerion.
n) Classes (J. Antibiotics 45, 1886)
-1891 (1992)), Aspergillus (Aspe)
rgillus) and other echinocandin (ec)
hinocandins (Hev. Chim. Ac)
ta 57, 2459-2477 (1974))
Aureobasidin produced by the genus Aureobasidium
n) Classes (J. Antibiotics, 44, 919)
-924 (1991)).

【０００３】現在まで小房子のう菌のホーマ属が、ペプ
チド系の抗真菌物質を生産するという報告はない。[0003] To date, there has been no report that the genus Hosoma, an acetobacterium, produces a peptide-based antifungal substance.

【０００４】[0004]

【発明が解決しようとする課題】本発明者らは、東京都
小笠原村父島において採集した土壌より採取されたホー
マ・エスピー（Ｐｈｏｍａｓｐ．）ＳＡＮＫ１３８９
９株より、新規抗真菌物質Ｆ−１５０７８を単離・精製
し、本発明を完成した。すなわち、本発明は、（１）下記式（Ｉ）DISCLOSURE OF THE INVENTION The inventors of the present invention have proposed a method of producing a spoma collected from soil collected at Chichijima, Ogasawara-mura, Tokyo.
From 9 strains, a novel antifungal substance F-15078 was isolated and purified to complete the present invention. That is, the present invention provides: (1) the following formula (I)

【０００５】[0005]

【化３】 Embedded image

【０００６】で表される化合物又はその塩、（２）下記の理化学的性状を有する化合物又はその塩：１）物質の性状：塩基性脂溶性無色粉末２）分子式：Ｃ₅₄Ｈ₉₆Ｎ₈Ｏ₁₄ ３）分子量：１０８０（ＬＣ／ＥＳＩＭＳ法による）４）ＴＯＦ−ＭＳ［Ｍ＋Ｈ］⁺（Ｃ₅₄Ｈ₉₇Ｎ₈Ｏ₁₄とし
て）実測値：１０８１．７１２６計算値：１０８１．７１２４５）紫外線吸収スペクトル：末端吸収６）赤外線吸収スペクトル（臭化カリウム錠剤中ｃｍ
^-1）：３４３４，３３３８，２９６１，２９３６，２８７３，
２８０５，１７４９，１６８４，１６４１，１５０８，
１４７０，１４１２，１３８５，１３７１，１３１２，
１２７０，１２０３，１１５５，１１２７，１０８６，
１０７３，１０２０７）旋光度：［α］_D ²⁵−１１６°（ｃ０．３７，メ
タノール）８）¹Ｈ−核磁気共鳴スペクトル：重クロロホルム中、
テトラメチルシランを内部標準として測定した核磁気共
鳴スペクトル（５００ＭＨｚ）は、次に示す通りであ
る。０．７８（３Ｈ），０．７８（３Ｈ），０．８１（３
Ｈ），０．８２（３Ｈ），０．８６（３Ｈ），０．９１
（３Ｈ），０．９２（３Ｈ），０．９２（３Ｈ），０．
９３（３Ｈ），０．９４（３Ｈ），０．９６（３Ｈ），
１．００（３Ｈ），１．００（３Ｈ），１．０１（３
Ｈ），１．０５（３Ｈ），１．２２（１Ｈ），１．４０
（３Ｈ），１．４５（１Ｈ），１．４８（１Ｈ），１．
４８（１Ｈ），１．５１（３Ｈ），１．５４（１Ｈ），
１．６４（１Ｈ），１．６９（２Ｈ），１．７３（１
Ｈ），１．８２（１Ｈ），１．８８（１Ｈ），１．８９
（１Ｈ），２．２７（１Ｈ），２．３１（１Ｈ），２．
３６（１Ｈ），２．４９（３Ｈ），２．８８（３Ｈ），
２．９３（３Ｈ），２．９６（１Ｈ），３．２８（３
Ｈ），３．５６（１Ｈ），４．０４（１Ｈ），４．１５
（１Ｈ），４．７２（１Ｈ），４．７７（１Ｈ），４．
８２（１Ｈ），４．９０（１Ｈ），４．９７（１Ｈ），
５．２４（１Ｈ），５．２７（１Ｈ），５．５５（１
Ｈ）ｐｐｍ９）¹³Ｃ−核磁気共鳴スペクトル：重クロロホルム中、
テトラメチルシランを内部標準として測定した核磁気共
鳴スペクトル（１２５ＭＨｚ）は、次に示す通りであ
る。１１．９（ｑ），１５．０（ｑ），１５．９（ｑ），１
６．７（ｑ），１７．４（ｑ），１８．０（ｑ），１
８．３（ｑ），１８．７（ｑ），１８．７（ｑ），１
９．１（ｑ），１９．３（ｑ），２０．９（ｑ），２
１．４（ｑ），２２．１（ｑ），２３．１（ｑ），２
３．５（ｑ），２３．６（ｑ），２４．６（ｄ），２
４．８（ｄ），２５．４（ｄ），２５．４（ｔ），２
７．６（ｄ），２９．５（ｑ），２９．８（ｄ），３
０．２（ｑ），３２．１（ｄ），３６．１（ｑ），３
６．４（ｔ），３７．７（ｔ），３８．４（ｄ），３
９．７（ｔ），４０．８（ｑ），４６．２（ｄ），５
１．８（ｄ），５４．４（ｄ），５４．７（ｄ），５
５．１（ｄ），６３．９（ｄ），６４．７（ｄ），６
８．１（ｄ），７０．０（ｄ），７３．４（ｄ），７
４．３（ｄ），７７．０（ｄ），１６９．０（ｓ），１
６９．１（ｓ），１６９．７（ｓ），１６９．９
（ｓ），１６９．９（ｓ），１７０．３（ｓ），１７
１．９（ｓ），１７３．３（ｓ），１７３．７（ｓ），
１７３．９（ｓ）ｐｐｍ１０）高速液体クロマトグラフィー：カラム：ＳｈｏｄｅｘＡｓａｈｉｐａｋＣ８Ｐ
５０４Ｅ（直径４．６ｍｍ×２５０ｍｍ：昭和電工（株）製）移動相：アセトニトリル：１０ｍＭ炭酸水素アンモニ
ウム水＝１３：７流速：０．７ｍｌ／分検出波長：λ２１０ｎｍ保持時間：１０．１２分１１）溶解性：ジメチルスルホキシド、メタノール、ク
ロロホルムに可溶。１２）アミノ酸分析：加水分解物としてスレオニン、ア
ラニン、バリンが認められた。（３）下記式（ＩＩ）(2) Compound having the following physicochemical properties or salt thereof: 1) Property of substance: basic fat-soluble colorless powder 2) Molecular formula: C ₅₄ H ₉₆ N ₈ O ₁₄ 3) Molecular weight: 1080 (by LC / ESI MS method) 4) TOF-MS [M + H] ⁺ (as C ₅₄ H ₉₇ N ₈ O ₁₄ ) Observed: 1081.7126 Calculated: 1081.7124 5) Ultraviolet absorption Spectrum: terminal absorption 6) Infrared absorption spectrum (cm in potassium bromide tablet)
^-1 ): 3434, 3338, 2961, 936, 2873,
2805, 1749, 1684, 1641, 1508,
1470, 1412, 1385, 1371, 1312
1270, 1203, 1155, 1127, 1086
1073, 1020 7) Optical rotation: [α] _D ²⁵ -116 ° (c 0.37, methanol) 8) ¹ H-nuclear magnetic resonance spectrum:
The nuclear magnetic resonance spectrum (500 MHz) measured using tetramethylsilane as an internal standard is as follows. 0.78 (3H), 0.78 (3H), 0.81 (3
H), 0.82 (3H), 0.86 (3H), 0.91
(3H), 0.92 (3H), 0.92 (3H), 0.
93 (3H), 0.94 (3H), 0.96 (3H),
1.00 (3H), 1.00 (3H), 1.00 (3
H), 1.05 (3H), 1.22 (1H), 1.40
(3H), 1.45 (1H), 1.48 (1H), 1.
48 (1H), 1.51 (3H), 1.54 (1H),
1.64 (1H), 1.69 (2H), 1.73 (1
H), 1.82 (1H), 1.88 (1H), 1.89
(1H), 2.27 (1H), 2.31 (1H), 2.
36 (1H), 2.49 (3H), 2.88 (3H),
2.93 (3H), 2.96 (1H), 3.28 (3
H), 3.56 (1H), 4.04 (1H), 4.15
(1H), 4.72 (1H), 4.77 (1H), 4.
82 (1H), 4.90 (1H), 4.97 (1H),
5.24 (1H), 5.27 (1H), 5.55 (1
H) ppm 9) ¹³ C-nuclear magnetic resonance spectrum:
The nuclear magnetic resonance spectrum (125 MHz) measured using tetramethylsilane as an internal standard is as follows. 11.9 (q), 15.0 (q), 15.9 (q), 1
6.7 (q), 17.4 (q), 18.0 (q), 1
8.3 (q), 18.7 (q), 18.7 (q), 1
9.1 (q), 19.3 (q), 20.9 (q), 2
1.4 (q), 22.1 (q), 23.1 (q), 2
3.5 (q), 23.6 (q), 24.6 (d), 2
4.8 (d), 25.4 (d), 25.4 (t), 2
7.6 (d), 29.5 (q), 29.8 (d), 3
0.2 (q), 32.1 (d), 36.1 (q), 3
6.4 (t), 37.7 (t), 38.4 (d), 3
9.7 (t), 40.8 (q), 46.2 (d), 5
1.8 (d), 54.4 (d), 54.7 (d), 5
5.1 (d), 63.9 (d), 64.7 (d), 6
8.1 (d), 70.0 (d), 73.4 (d), 7
4.3 (d), 77.0 (d), 169.0 (s), 1
69.1 (s), 169.7 (s), 169.9
(S), 169.9 (s), 170.3 (s), 17
1.9 (s), 173.3 (s), 173.7 (s),
173.9 (s) ppm 10) High performance liquid chromatography: Column: Shodex Asahipak C8P
504E (diameter 4.6 mm x 250 mm: manufactured by Showa Denko KK) Mobile phase: acetonitrile: 10 mM ammonium bicarbonate water = 13: 7 Flow rate: 0.7 ml / min Detection wavelength: λ 210 nm Retention time: 10.12 minutes 11) Solubility: Soluble in dimethyl sulfoxide, methanol and chloroform. 12) Amino acid analysis: Threonine, alanine and valine were recognized as hydrolysates. (3) The following formula (II)

【０００７】[0007]

【化４】 Embedded image

【０００８】で表される化合物又はその塩、（４）下記の理化学的性状を有する化合物又はその塩：１）物質の性状：塩基性脂溶性無色粉末２）分子式：Ｃ₅₄Ｈ₉₆Ｎ₈Ｏ₁₄ ３）分子量：１０８０（ＬＣ／ＥＳＩＭＳ法による）４）ＴＯＦ−ＭＳ［Ｍ＋Ｈ］⁺（Ｃ₅₄Ｈ₉₇Ｎ₈Ｏ₁₄とし
て）実測値：１０８１．７１２２計算値：１０８１．７１２４５）紫外線吸収スペクトル：末端吸収６）赤外線吸収スペクトル（臭化カリウム錠剤中ｃｍ
^-1）：３３３４，２９６１，２９３７，２８７４，２８
０５，１７４９，１６８４，１６４０，１５０９，１４
６９，１４１２，１３８５，１３７０，１３１２，１２
７１，１２０２，１１５５，１１２８，１０８８，１０
７２，１０２２７）旋光度：［α］_D ²⁵−１１６°（ｃ０．３８，メ
タノール）８） ¹Ｈ−核磁気共鳴スペクトル：重クロロホルム中、
テトラメチルシランを内部標準として測定した核磁気共
鳴スペクトル（５００ＭＨｚ）は、次に示す通りであ
る。０．７８（３Ｈ），０．７８（３Ｈ），０．８０（３
Ｈ），０．８２（３Ｈ），０．８４（１Ｈ），０．９０
（３Ｈ），０．９２（３Ｈ），０．９２（３Ｈ），０．
９２（３Ｈ），０．９２（３Ｈ），０．９５（３Ｈ），
０．９５（３Ｈ），１．００（３Ｈ），１．００（３
Ｈ），１．０２（３Ｈ），１．２１（１Ｈ），１．３６
（３Ｈ），１．４０（３Ｈ），１．４３（１Ｈ），１．
４７（１Ｈ），１．４７（１Ｈ），１．４８（１Ｈ），
１．５４（１Ｈ），１．６１（３Ｈ），１．６３（１
Ｈ），１．６８（１Ｈ），１．７１（１Ｈ），１．８０
（１Ｈ），１．８５（１Ｈ），２．２７（１Ｈ），２．
２９（３Ｈ），２．３３（１Ｈ），２．４９（１Ｈ），
２．９２（１Ｈ），２．９４（１Ｈ），２．９５（３
Ｈ），３．２８（３Ｈ），３．５３（３Ｈ），３．５７
（３Ｈ），３．８８（１Ｈ），３．９４（１Ｈ），４．
７７（１Ｈ），４．８４（１Ｈ），４．８７（１Ｈ），
４．９７（１Ｈ），５．０２（１Ｈ），５．２２（１
Ｈ），５．２８（１Ｈ），５．５３（１Ｈ）ｐｐｍ９） ¹³Ｃ−核磁気共鳴スペクトル：重クロロホルム
中、テトラメチルシランを内部標準として測定した核磁
気共鳴スペクトル（１２５ＭＨｚ）は、次に示す通りで
ある。１１．１（ｑ），１１．９（ｑ），１５．２（ｑ），１
５．４（ｑ），１６．０（ｑ），１６．６（ｑ），１
７．４（ｑ），１８．４（ｑ），１８．７（ｑ），１
９．１（ｑ），２１．０（ｑ），２１．４（ｑ），２
２．２（ｑ），２３．１（ｑ），２３．５（ｑ），２
３．６（ｑ），２４．１（ｑ），２４．６（ｑ），２
４．８（ｔ），２５．３（ｔ），２５．４（ｄ），２
７．９（ｄ），２９．５（ｄ），２９．８（ｄ），３
０．２（ｑ），３６．１（ｄ），３６．４（ｑ），３
７．３（ｄ），３８．４（ｑ），３８．８（ｔ），３
９．６（ｔ），４０．９（ｄ），４５．９（ｄ），４
９．３（ｄ），５３．３（ｄ），５４．７（ｄ），５
５．１（ｄ），６３．９（ｄ），６４．１（ｄ），６
５．１（ｄ），７０．１（ｄ），７３．３（ｄ），７
４．３（ｄ），７７．０（ｄ），１６９．００（ｓ），
１６９．０４（ｓ），１６９．６（ｓ），１６９．７３
（ｓ），１６９．７５（ｓ），１６９．８３（ｓ），１
７１．９（ｓ），１７２．４（ｓ），１７３．６
（ｓ），１７４．０（ｓ）ｐｐｍ１０）高速液体クロマトグラフィー：カラム：ＳｈｏｄｅｘＡｓａｈｉｐａｋＣ８Ｐ
５０４Ｅ（直径４．６ｍｍ×２５０ｍｍ：昭和電工（株）製）移動層：アセトニトリル：１０ｍＭ炭酸水素アンモニ
ウム水＝１３：７流速：０．７ｍｌ／分検出波長：λ２１０ｎｍ保持時間：８．９３分１１）溶解性：ジメチルスルホキシド、メタノール、ク
ロロホルムに可溶１２）アミノ酸分析：加水分解物としてセリン、アラニ
ン、イソロイシンが認められた。（５）ホーマ（Ｐｈｏｍａ）属に属する、（１）乃至
（４）のいずれか一つに記載の化合物の生産菌を培養
し、その培養物より該化合物を採取することを特徴とす
る、該化合物の製造方法、（６）ホーマ（Ｐｈｏｍａ）属に属する、（１）乃至
（４）のいずれか一つに記載の化合物の生産菌がホーマ
・エスピー（Ｐｈｏｍａｓｐ．）ＳＡＮＫ１３８
９９（ＦＥＲＭＢＰ−６８５１）株である、（５）に
記載の製造方法、（７）（１）乃至（４）のいずれか一つに記載の化合物
又はその塩を含有する医薬、（８）（１）乃至（４）のいずれか一つに記載の化合物
若しくはその塩を有効成分とする真菌感染症の治療剤又
は予防剤、及び、（９）ホーマ・エスピー（Ｐｈｏｍａｓｐ．）ＳＡ
ＮＫ１３８９９（ＦＥＲＭＢＰ−６８５１）株、に関する。(4) A compound having the following physicochemical properties or a salt thereof: 1) Property of substance: basic fat-soluble colorless powder 2) Molecular formula: C ₅₄ H ₉₆ N ₈ O ₁₄ 3) Molecular weight: 1080 (by LC / ESI MS method) 4) TOF-MS [M + H] ⁺ (as C ₅₄ H ₉₇ N ₈ O ₁₄ ) Observed value: 1081.7122 Calculated value: 1081.7124 5) Ultraviolet absorption Spectrum: terminal absorption 6) Infrared absorption spectrum (cm in potassium bromide tablet)
^-1 ): 3334,2961,937,2874,28
05, 1749, 1684, 1640, 1509, 14
69, 1412, 1385, 1370, 1312, 12
71,1202,1155,1128,1088,10
72, 1022 7) Optical rotation: [α] _D ²⁵ -116 ° (c 0.38, methanol) 8) ¹ H-nuclear magnetic resonance spectrum:
The nuclear magnetic resonance spectrum (500 MHz) measured using tetramethylsilane as an internal standard is as follows. 0.78 (3H), 0.78 (3H), 0.80 (3
H), 0.82 (3H), 0.84 (1H), 0.90
(3H), 0.92 (3H), 0.92 (3H), 0.
92 (3H), 0.92 (3H), 0.95 (3H),
0.95 (3H), 1.00 (3H), 1.00 (3
H), 1.02 (3H), 1.21 (1H), 1.36
(3H), 1.40 (3H), 1.43 (1H), 1.
47 (1H), 1.47 (1H), 1.48 (1H),
1.54 (1H), 1.61 (3H), 1.63 (1
H), 1.68 (1H), 1.71 (1H), 1.80
(1H), 1.85 (1H), 2.27 (1H), 2.
29 (3H), 2.33 (1H), 2.49 (1H),
2.92 (1H), 2.94 (1H), 2.95 (3
H), 3.28 (3H), 3.53 (3H), 3.57
(3H), 3.88 (1H), 3.94 (1H), 4.
77 (1H), 4.84 (1H), 4.87 (1H),
4.97 (1H), 5.02 (1H), 5.22 (1
H), 5.28 (1H), 5.53 (1H) ppm 9) ¹³ C-nuclear magnetic resonance spectrum: A nuclear magnetic resonance spectrum (125 MHz) measured in tetrachloromethane using tetramethylsilane as an internal standard is as follows. As shown in FIG. 11.1 (q), 11.9 (q), 15.2 (q), 1
5.4 (q), 16.0 (q), 16.6 (q), 1
7.4 (q), 18.4 (q), 18.7 (q), 1
9.1 (q), 21.0 (q), 21.4 (q), 2
2.2 (q), 23.1 (q), 23.5 (q), 2
3.6 (q), 24.1 (q), 24.6 (q), 2
4.8 (t), 25.3 (t), 25.4 (d), 2
7.9 (d), 29.5 (d), 29.8 (d), 3
0.2 (q), 36.1 (d), 36.4 (q), 3
7.3 (d), 38.4 (q), 38.8 (t), 3
9.6 (t), 40.9 (d), 45.9 (d), 4
9.3 (d), 53.3 (d), 54.7 (d), 5
5.1 (d), 63.9 (d), 64.1 (d), 6
5.1 (d), 70.1 (d), 73.3 (d), 7
4.3 (d), 77.0 (d), 169.00 (s),
169.04 (s), 169.6 (s), 169.73
(S), 169.75 (s), 169.83 (s), 1
71.9 (s), 172.4 (s), 173.6
(S), 174.0 (s) ppm 10) High performance liquid chromatography: Column: Shodex Asahipak C8P
504E (diameter 4.6 mm × 250 mm: manufactured by Showa Denko KK) Moving bed: acetonitrile: 10 mM ammonium bicarbonate water = 13: 7 Flow rate: 0.7 ml / min Detection wavelength: λ 210 nm Retention time: 8.93 minutes 11) Solubility: Soluble in dimethyl sulfoxide, methanol, chloroform 12) Amino acid analysis: Serine, alanine and isoleucine were recognized as hydrolysates. (5) culturing a bacterium producing the compound according to any one of (1) to (4), which belongs to the genus Pharma, and collecting the compound from the culture. (6) A method for producing a compound according to any one of (1) to (4), which belongs to the genus of Pharmaceuticals, and is a microorganism producing the compound according to any one of (1) to (4).
99 (FERM BP-6861) strain, the method according to (5), (7) a medicine containing the compound or salt thereof according to any one of (1) to (4), (8) (1) A therapeutic or prophylactic agent for a fungal infection comprising the compound according to any one of (1) to (4) or a salt thereof as an active ingredient; and (9) Pharma sp. SA
NK 13899 (FERMBP-6841) strain.

【０００９】本発明は上記（１）乃至（４）に記載され
た化合物を提供する。このうち、上記（１）及び（３）
記載の化合物は、下記一般式（ＩＩＩ）The present invention provides the compounds described in the above (1) to (4). Among them, the above (1) and (3)
The compound described has the following general formula (III)

【００１０】[0010]

【化５】 Embedded image

【００１１】により表すことができ、本発明においては
上記一般式（ＩＩＩ）で表される化合物を総称してＦ−
１５０７８Ｃ及びＦ−１５０７８Ｄという。In the present invention, the compounds represented by the above general formula (III) are collectively referred to as F-
15078C and F-15078D.

【００１２】上記（１）記載の化合物は、上記一般式
（ＩＩＩ）で表され且つＲ¹が水素原子、Ｒ²がＣＨ₃で
ある化合物であり、上記（２）記載の物理化学的性状を
有する。本発明において、該化合物をＦ−１５０７８Ｃ
という。The compound described in the above (1) is a compound represented by the above general formula (III), wherein R ¹ is a hydrogen atom and R ² is CH ₃ , and has the physicochemical properties described in the above (2). Have. In the present invention, the compound is represented by F-15078C
That.

【００１３】上記（３）記載の化合物は、上記一般式
（ＩＩＩ）で表され且つＲ¹がＣＨ₃、Ｒ²が水素原子で
ある化合物であり、上記（４）記載の物理化学的性状を
有する。本発明において、該化合物をＦ−１５０７８Ｄ
という。The compound described in the above (3) is a compound represented by the above general formula (III), wherein R ¹ is CH ₃ and R ² is a hydrogen atom, and has the physicochemical properties described in the above (4). Have. In the present invention, the compound is represented by F-15078D
That.

【００１４】Ｆ−１５０７８Ｃ及びＦ−１５０７８Ｄ
は、常法に従って塩にすることができる。Ｆ−１５０７
８Ｃ及びＦ−１５０７８Ｄの塩は、医学用途、獣医学用
途及びそれ以外の用途のいずれにも適用され得る。F-15078C and F-15078D
Can be converted to a salt according to a conventional method. F-1507
The salts of 8C and F-15078D may be applied for any of medical, veterinary and other uses.

【００１５】Ｆ−１５０７８Ｃ及びＦ−１５０７８Ｄの
塩が医学用途及び／又は獣医学用途に適用される場合、
該化合物の塩としては、薬理上許容されるものであれば
特に限定されるものではなく、例えば、塩酸塩のような
無機塩、パモ酸塩のような有機酸塩等が例示できる。When the salts of F-15078C and F-15078D are applied for medical and / or veterinary use,
The salt of the compound is not particularly limited as long as it is pharmacologically acceptable, and examples thereof include inorganic salts such as hydrochloride, and organic acid salts such as pamoate.

【００１６】Ｆ−１５０７８Ｃ及びＦ−１５０７８Ｄの
塩が医学用途及び獣医学用途以外の用途、例えば、合成
中間体として使用される場合は特に限定はない。その様
な塩としては、例えば、酢酸塩、臭化物塩、塩化物塩、
塩酸塩、臭酸塩、ヨウ化物塩、硫酸塩、リン酸塩、ニリ
ン酸塩のような無機塩；クエン酸塩、マレイン酸塩、パ
モ酸塩、酒石酸塩のような有機酸塩を例示することがで
きる。There is no particular limitation when the salts of F-15078C and F-15078D are used for purposes other than medical and veterinary uses, for example, as synthetic intermediates. Such salts include, for example, acetate, bromide, chloride,
Inorganic salts such as hydrochloride, bromate, iodide, sulfate, phosphate, diphosphate; organic acid salts such as citrate, maleate, pamoate, tartrate be able to.

【００１７】また、本発明のＦ−１５０７８Ｃ及びＦ−
１５０７８Ｄは種々の立体構造を有する。言い換えれ
ば、Ｆ−１５０７８Ｃ及びＦ−１５０７８Ｄには種々の
異性体が存在する。本発明においてはこれらの異性体が
全て単一の式で示されており、本発明はこれらの異性体
及びこれらの異性体の混合物をも全て含むものである。Further, the F-15078C and the F-
15078D has various stereostructures. In other words, various isomers exist in F-15078C and F-15078D. In the present invention, all of these isomers are represented by a single formula, and the present invention includes all of these isomers and a mixture of these isomers.

【００１８】さらに、本発明は、Ｆ−１５０７８Ｃ又は
Ｆ−１５０７８Ｄが溶剤和物（例えば水和物）を形成す
る場合には、これらもすべて含むものである。Further, the present invention includes all the cases where F-15078C or F-15078D forms solvates (for example, hydrates).

【００１９】例えば、本発明のＦ−１５０７８Ｃ又はＦ
−１５０７８Ｄが、大気中に放置されたり、又は再結晶
をすることにより、水分を吸収し、吸着水が付着した
り、水和物を形成する場合がある。本発明にはこのよう
な溶剤和物も含まれる。For example, F-15078C or F-15078 of the present invention
When -15078D is left in the atmosphere or recrystallized, it may absorb moisture, adsorbed water may adhere thereto, or form a hydrate. The present invention includes such a solvate.

【００２０】また、本発明は、生体内において代謝され
てＦ−１５０７８Ｃ又はＦ−１５０７８Ｄに変換される
化合物、いわゆるプロドラッグもすべて含むものであ
る。The present invention also includes all compounds that are metabolized in vivo and converted into F-15078C or F-15078D, so-called prodrugs.

【００２１】[0021]

【発明の実施の形態】［生産菌］Ｆ−１５０７８Ｃ又は
Ｆ−１５０７８Ｄは該化合物を生産する真菌の培養物よ
り得ることができる。Ｆ−１５０７８Ｃ又はＦ−１５０
７８Ｄの生産菌としては、例えば、ホーマ（Ｐｈｏｍ
ａ）属に属する真菌株等をあげることができ、好適には
ホーマ・エスピー（Ｐｈｏｍａｓｐ．）ＳＡＮＫ１３
８９９株（以下、単に「ＳＡＮＫ１３８９９株」とい
う。）である。ＳＡＮＫ１３８９９株は、東京都小笠原
村父島において採集した土壌より得られたものである。
本菌の菌学的性状を観察するため、以下に記載する各培
地上で培養を行った。BEST MODE FOR CARRYING OUT THE INVENTION [Producing bacteria] F-15078C or F-15078D can be obtained from a culture of a fungus producing the compound. F-15078C or F-150
Examples of 78D-producing bacteria include, for example, Phom (Phom
a) Fungal strains belonging to the genus and the like, and preferably, Spoma sp.
899 strains (hereinafter simply referred to as “SANK 13899 strains”). SANK13899 strain was obtained from soil collected at Chichijima, Ogasawara-mura, Tokyo.
In order to observe the mycological properties of the bacterium, cultivation was performed on each of the media described below.

【００２２】使用した各培地の組成を以下に記載する。ＰＤＡ（ポテトデキストロース寒天：ＰｏｔａｔｏＤｅｘｔｒｏｓｅＡｇａｒ）培地ニッスイポテトデキストロース寒天培地（日水製薬（株）製）３９ｇ蒸留水１０００ｍｌＣＭＡ（コーンミール寒天：ＣｏｒｎＭｅａｌＡｇａｒ）培地コーンミールアガール（日水製薬（株）製）１７ｇ蒸留水１０００ｍｌＷＳＨ培地クエーカーオートミール１０ｇ硫酸マグネシウム七水和物１ｇリン酸二水素カリウム１ｇ硝酸ナトリウム１ｇ寒天２０ｇ蒸留水１０００ｍｌ三浦培地グルコース１ｇリン酸二水素カリウム１ｇ硫酸マグネシウム七水和物０．２ｇ塩化カリウム０．２ｇイーストエキス０．２ｇ硝酸ナトリウム２ｇ寒天２０ｇ蒸留水１０００ｍｌＣＹＡ培地（ザペックイーストエキス寒天：ＣｚａｐｅｋＹｅａｓｔＥｘｔｒａｃｔＡｇａｒ）培地リン酸水素ニカリウム１ｇザペック濃縮液＊１０ｍｌイーストエキス５ｇシュークロース３０ｇ寒天１５ｇ蒸留水１０００ｍｌＭＥＡ培地（モルトエキス寒天：ＭａｌｔＥｘｔｒａｃｔＡｇａｒ）培地モルトエキス２０ｇペプトン１ｇグルコース２０ｇ寒天２０ｇ蒸留水１０００ｍｌＧ２５Ｎ培地（２５％グリセロール硝酸寒天）培地リン酸水素ニカリウム０．７５ｇザペック濃縮液７．５ｍｌイーストエキス３．７ｇグリセロール２５０ｇ寒天１２ｇ蒸留水７５０ｍｌ＊ザペック濃縮液とは、以下の組成の溶液を示す。The composition of each medium used is described below. PDA (Potato Dextrose Agar) medium Nissui potato dextrose agar medium (manufactured by Nissui Pharmaceutical Co., Ltd.) 39 g distilled water 1000 ml CMA (corn meal agar: Corn Meal Agar) medium Corn water Agar (water pharmaceutical) 17 g distilled water 1000 ml WSH medium Quaker oatmeal 10 g magnesium sulfate heptahydrate 1 g potassium dihydrogen phosphate 1 g sodium nitrate 1 g agar 20 g distilled water 1000 ml Miura medium glucose 1 g potassium dihydrogen phosphate 1 g magnesium sulfate heptahydrate 0 0.2 g Potassium chloride 0.2 g Yeast extract 0.2 g Sodium nitrate 2 g Agar 20 g Distilled water 1000 ml CYA medium (Zapek Yeast Agar: Czapek Ye St Extract Agar) Medium Dipotassium hydrogen phosphate 1 g Zapec concentrate * 10 ml Yeast extract 5 g Sucrose 30 g Agar 15 g Distilled water 1000 ml MEA medium (malt extract agar: Malt extract Agar) Malt extract 20 g peptone g g 1000 ml G25N medium (25% glycerol nitrate agar) medium Dipotassium hydrogen phosphate 0.75 g Zapec concentrate 7.5 ml Yeast extract 3.7 g Glycerol 250 g Agar 12 g Distilled water 750 ml .

【００２３】硝酸ナトリウム３０ｇ塩化カリウム５ｇ硫酸マグネシウム七水和物５ｇ硫酸鉄（ＩＩ）七水和物０．１ｇ硫酸亜鉛七水和物０．１ｇ硫酸銅五水和物０．０５ｇ蒸留水１００ｍｌ色調の表示は「メチューン・ハンドブック・オブ・カラ
ー」（Ｋｏｒｎｅｒｕｐ，Ａ．ａｎｄＷａｎｓｃｈ
ｅｒ，Ｊ．Ｈ．（１９７８）ＭｅｔｈｕｅｎＨａｎｄ
ｂｏｏｋｏｆＣｏｌｏｕｒ（３ｒｄ．ｅｄｉｔｉｏ
ｎ）．ＥｒｙｅＭｅｔｈｕｅｎ，Ｌｏｎｄｏｎ．）に
従った。Sodium nitrate 30 g Potassium chloride 5 g Magnesium sulfate heptahydrate 5 g Iron (II) sulfate heptahydrate 0.1 g Zinc sulfate heptahydrate 0.1 g Copper sulfate pentahydrate 0.05 g Distilled water 100 ml Is shown in the "Mettune Handbook of Color" (Kornerup, A. and Wansch
er, J. et al. H. (1978) MethuenHand
book of Color (3rd.editio
n). Erye Methuen, London. A).

【００２４】ＳＡＮＫ１３８９９株の培養下での菌学的
性状は次の通りである。The bacteriological properties of the SANK 13899 strain under culture are as follows.

【００２５】ＰＤＡ培地上での成長は、２３℃、２週間
の培養で直径１３乃至１７ｍｍである。コロニーは綿毛
状、中央部で羊毛状に隆起し、コロニーの縁辺部はやや
歯状である。コロニー表面は、グレー（３Ｂ１）乃至白
色である。裏面はブラウン（６Ｅ５乃至４）である。The growth on the PDA medium is 13 to 17 mm in diameter at 23 ° C. for 2 weeks. The colonies are fluffy, wobbly in the center, and slightly marginal at the margins of the colonies. The colony surface is gray (3B1) to white. The back surface is brown (6E5 to 4).

【００２６】ＣＭＡ培地上での成長は、２３℃、２週間
の培養で直径１５乃至１７ｍｍである。コロニーは粉状
で、コロニーの縁辺部は歯状である。コロニー表面はグ
レーイッシュグリーン（２７Ｅ５）乃至ダルグリーン
（２７Ｅ４）である。裏面はダークグリーン（２７Ｆ
４）である。The growth on CMA medium is 15 to 17 mm in diameter at 23 ° C. for 2 weeks. The colonies are powdery and the margins of the colonies are toothy. The colony surface is grayish green (27E5) to dull green (27E4). The back is dark green (27F
4).

【００２７】三浦培地上での成長は、２３℃、２週間の
培養で直径２２乃至３３ｍｍである。コロニーは圧伏
し、コロニーの縁辺部は全縁である。コロニー表面は白
色である。裏面はイエローイッシュホワイト（３Ａ２）
乃至白色である。The growth on the Miura medium is 22 to 33 mm in diameter at 23 ° C. for 2 weeks. The colonies are compacted and the margins of the colonies are whole. The colony surface is white. The back is yellowish white (3A2)
To white.

【００２８】ＷＳＨ培地上での成長は、２３℃、２週間
の培養で直径３３乃至３４ｍｍである。コロニーは圧伏
し、コロニーの縁辺部は全縁である。コロニー表面はペ
ールイエロー（３Ａ３）乃至イエローイッシュホワイト
（３Ａ２）である。裏面はコロニー表面と同色である。The growth on WSH medium is 33 to 34 mm in diameter at 23 ° C. for 2 weeks. The colonies are compacted and the margins of the colonies are whole. The colony surface is pale yellow (3A3) to yellowish white (3A2). The back is the same color as the colony front.

【００２９】ＣＹＡ培地上での成長は、２３℃、２週間
の培養で直径３４乃至３５ｍｍである。コロニーは綿毛
状であり、中央部で羊毛状に隆起し、弱い可溶性色素を
分泌する。コロニーの縁辺部は圧伏し、全縁である。コ
ロニー表面はグレーイッシュオレンジ（６Ｂ３）であ
る。裏面はブラウニッシュオレンジ（６Ｃ８）乃至ブラ
ウン（６Ｄ８）である。The growth on the CYA medium is 34 to 35 mm in diameter at 23 ° C. for 2 weeks. The colonies are fluffy, wobbly in the center and secrete a weak soluble pigment. The margins of the colonies are constricted and are all-edge. The colony surface is grayish orange (6B3). The back side is brownish orange (6C8) to brown (6D8).

【００３０】ＭＥＡ培地上での成長は、２３℃、２週間
の培養で直径１５乃至２３ｍｍである。コロニーは綿毛
状、中央部で羊毛状に隆起する。コロニーの縁辺部は圧
伏し、全縁乃至やや歯状である。コロニー表面は白色乃
至グレー（３Ｂ１）である。裏面はダークグリーン（２
８Ｆ４乃至３）である。The growth on the MEA medium is 15 to 23 mm in diameter at 23 ° C. for 2 weeks. The colony is fluffy and wobbly in the center. The margins of the colonies are constricted and are full-edge or slightly tooth-like. The colony surface is white to gray (3B1). The back is dark green (2
8F4 to 3F).

【００３１】Ｇ２５Ｎ培地上では生育しない。It does not grow on G25N medium.

【００３２】菌糸は直径０．５乃至３μｍであり、しば
しば束状になり、薄壁乃至厚壁で、滑面乃至粗面で、無
色乃至褐色である。Mycelia are 0.5 to 3 μm in diameter, often bundled, thin to thick walled, smooth to rough, colorless to brown.

【００３３】ＳＡＮＫ１３８９９株は、ＯＤＡ培地や三
浦培地などで１月間以上培養を継続することにより、セ
クターを形成し、その部分の寒天培地内に埋没した分生
子殻を形成した。その菌学的性状は次の通りである。The SANK13899 strain formed a sector by continuously culturing it in an ODA medium or Miura medium for one month or more, and formed a conidial shell buried in the agar medium in that sector. The bacteriological properties are as follows.

【００３４】分生子殻は直径１００乃至２００μｍ、寒
天培地にすべて埋没乃至一部埋没し、球形乃至亜球形で
褐色乃至黒色である。開口部は観察されなかった。分生
子形成細胞は７．５乃至９μｍ×１．３乃至１．８μｍ
で、球形の分生子殻内層細胞の上に形成され、単細胞で
円筒形乃至ペン先形であり、無色である。フィアロ型分
生子は３．５乃至４．７μｍ×１．３乃至１．８μｍ
で、円筒形、単細胞で無色である。菌糸は直径０．５乃
至３ μｍで、しばしば束状になり、薄壁乃至厚壁で、
滑面乃至粗面であり、無色乃至褐色である。小林の文献
（小林享夫：Ｐｈｙｌｌｏｓｔｉｃｔａ属・Ｐｈｏｍａ
属及びＭａｃｒｏｐｈｏｍａ属（２）．Ｊ．Ａｎｔｉ
ｂａｃｔ．Ａｎｔｉｆｕｎｇ．Ａｇｅｎｔｓ，２２，７
５７−７６３（１９９４））などを参考にした結果、本
菌株をホーマ・エスピーと同定した。The conidial shells are 100 to 200 μm in diameter, all buried or partially buried in an agar medium, and are spherical or subspherical brown or black. No openings were observed. Conidia forming cells are 7.5-9 μm × 1.3-1.8 μm
, Formed on spherical conidia inner lining cells, single cells, cylindrical or nib-shaped, and colorless. Phyaro-type conidia are 3.5 to 4.7 μm × 1.3 to 1.8 μm
It is cylindrical, single cell and colorless. Hyphae are 0.5 to 3 μm in diameter, often bundled, thin or thick walled,
It is smooth or rough and colorless to brown. Kobayashi's reference (Yoshio Kobayashi: genus Phyllosticta, Pharma)
Genus and Macrophoma genus (2). J. Anti
bac. Antifung. Agents, 22, 7
57-763 (1994)), the strain was identified as Houma SP.

【００３５】なお、ＳＡＮＫ１３８９９株は、平成１１
年８月２０日に日本国茨城県つくば市東１−１−３の通
商産業省工業技術院生命工学工業技術研究所に国際寄託
され、受託番号ＦＥＲＭＢＰ−６８５１を付与され
た。The SANK13899 strain was
Was deposited internationally with the Institute of Biotechnology and Industrial Technology of the Ministry of International Trade and Industry of 1-1-3 Higashi, Tsukuba, Ibaraki, Japan on August 20, 2008, and was assigned the accession number FERM BP-6851.

【００３６】周知の通り、真菌類は、自然界に存在する
諸因子又は人工的な操作、例えば、紫外線照射、放射線
照射、化学薬品処理等により、変異を起こしやすく、本
発明のＳＡＮＫ１３８９９株もそのような変異を起こし
やすい。本発明において、ＳＡＮＫ１３８９９株はその
変異株を全て包含する。また、これらの変異株の中に
は、遺伝的方法、例えば、遺伝子組換え、形質導入、形
質転換等により得られたものも包含される。Ｆ−１５０
７８Ｃ及びＦ−１５０７８Ｄを生産するＳＡＮＫ１３８
９９株、その変異株及びそれらと明確に区別されない菌
株は、全てＳＡＮＫ１３８９９株に包含される。［培養法及び精製法］本発明のＦ−１５０７８Ｃ及び／
又はＦ−１５０７８Ｄを生産する微生物の培養は、微生
物の二次代謝産物の生産に慣用される培地を用いて行う
ことができる。このような培地は、微生物が資化し得る
炭素源、窒素源及び無機塩を含有する。As is well known, fungi are liable to be mutated by factors existing in nature or by artificial operations such as ultraviolet irradiation, irradiation, chemical treatment, etc., and the SANK13899 strain of the present invention is also so. Easy mutation. In the present invention, the SANK13899 strain includes all mutants thereof. These mutants also include those obtained by genetic methods, for example, gene recombination, transduction, transformation, and the like. F-150
SANK138 producing 78C and F-15078D
The 99 strains, mutants thereof and strains not clearly distinguished therefrom are all included in the SANK13899 strain. [Culture method and purification method] F-15078C of the present invention and / or
Alternatively, the culture of a microorganism that produces F-15078D can be performed using a medium commonly used to produce secondary metabolites of the microorganism. Such a medium contains a carbon source, a nitrogen source and inorganic salts that can be assimilated by the microorganism.

【００３７】炭素源としては、例えば、グルコース、フ
ラクトース、マルトース、シュークロース、マンニトー
ル、グリセリン、デキストリン、オート麦、ライ麦、ト
ウモロコシデンプン、ジャガイモ、トウモロコシ粉、大
豆油、綿実油、糖蜜、クエン酸、酒石酸等をあげること
ができる。これらの炭素源は単独で、又は２種以上を組
み合わせて用いることができる。Examples of the carbon source include glucose, fructose, maltose, sucrose, mannitol, glycerin, dextrin, oats, rye, corn starch, potato, corn flour, soybean oil, cottonseed oil, molasses, citric acid, tartaric acid and the like. Can be given. These carbon sources can be used alone or in combination of two or more.

【００３８】培地に含有せしめる炭素源の量は、培地中
の他の成分等に依存するが、通常、１乃至１０重量％で
ある。The amount of the carbon source contained in the medium depends on other components in the medium, but is usually 1 to 10% by weight.

【００３９】窒素源としては、例えば、大豆粉、フス
マ、落下生粉、綿実紛、カゼイン加水分解物、ファーマ
ミン、コーンスチープリカー、ペプトン、肉エキス、イ
ースト、イーストエキス、マルトエキス、硝酸ナトリウ
ム、硝酸アンモニウム、硫酸アンモニウム等である。こ
れらの窒素源は単独で、又は２種以上を組み合わせて用
いることができる。Examples of the nitrogen source include soybean flour, bran, fallen raw flour, cottonseed powder, casein hydrolyzate, pharmamine, corn steep liquor, peptone, meat extract, yeast, yeast extract, malt extract, sodium nitrate , Ammonium nitrate, ammonium sulfate and the like. These nitrogen sources can be used alone or in combination of two or more.

【００４０】培地に含有せしめる窒素源の量は、培地中
の他の成分等に依存するが、通常、０．２乃至６重量％
である。The amount of the nitrogen source contained in the medium depends on other components in the medium, but is usually 0.2 to 6% by weight.
It is.

【００４１】炭素源及び窒素源は、純粋な標品に限定さ
れず、微量の生育因子、ビタミン及び無機栄養を含むよ
り純度の低いものを用いてもよい。また、ナトリウム、
カリウム、マグネシウム、アンモニウム、カルシウム、
リン酸、硫酸、塩酸、炭酸等のイオンを得ることの出来
る通常の塩類を培地中に加えてもよい。また、菌の資化
しうるビタミンＢ１、ビオチンのようなビタミン類、チ
アミンのような菌体増殖促進物質等も必要に応じて添加
してもよい。さらに、マンガン、モリブデン、その他の
金属塩を含有せしめてもよい。また、シリコンオイル、
ポリアルキレングリコールエーテル、植物油、動物油、
界面活性剤のような消泡剤を培地に添加してもよく、特
に液体培養には好適である。[0041] The carbon source and the nitrogen source are not limited to pure preparations, and may be of lower purity containing trace amounts of growth factors, vitamins and inorganic nutrients. Also, sodium,
Potassium, magnesium, ammonium, calcium,
Ordinary salts capable of obtaining ions such as phosphoric acid, sulfuric acid, hydrochloric acid, and carbonic acid may be added to the medium. In addition, vitamin B1 which can be assimilated by bacteria, vitamins such as biotin, a cell growth promoting substance such as thiamine and the like may be added as necessary. Further, manganese, molybdenum, and other metal salts may be added. Also, silicone oil,
Polyalkylene glycol ether, vegetable oil, animal oil,
An antifoaming agent such as a surfactant may be added to the medium, which is particularly suitable for liquid culture.

【００４２】ＳＡＮＫ１３８９９株の培養に使用する培
地のｐＨは、ｐＨ５．０乃至７．０の範囲であるのが好
ましい。The pH of the medium used for culturing the SANK 13899 strain is preferably in the range of pH 5.0 to 7.0.

【００４３】ＳＡＮＫ１３８９９株の生育温度の上限は
３５乃至３７℃、下限は１５乃至２０℃であり、好適に
は２０乃至３５℃である。また、Ｆ−１５０７８Ｃ及び
／又はＦ−１５０７８Ｄを製造するためのＳＡＮＫ１３
８９９株の培養温度は、好適には２０乃至２６℃であ
り、より好適には２０乃至２３℃である。The upper limit of the growth temperature of SANK13899 strain is 35 to 37 ° C., and the lower limit is 15 to 20 ° C., preferably 20 to 35 ° C. Also, a SANK13 for producing F-15078C and / or F-15078D.
The culture temperature of the 899 strain is preferably 20 to 26 ° C, more preferably 20 to 23 ° C.

【００４４】培養方法としては、微生物の培養法として
慣用される方法であれば特に限定される物ではなく、例
えば、固形培地を用いた培養法、攪拌培養法、振とう培
養法、通気培養法等を挙げることができ、好適には、好
気的な液体培養法である攪拌培養法、振とう培養法、通
気培養法であり、より好適には、振とう培養法である。
大きな規模の培養には、通気攪拌培養法が適している。The culturing method is not particularly limited as long as it is a method commonly used for culturing microorganisms, and examples thereof include a culturing method using a solid medium, a stirring culturing method, a shaking culturing method, and an aeration culturing method. The aerobic liquid culture method is preferably a stirring culture method, a shaking culture method, or an aeration culture method, and more preferably a shaking culture method.
For a large-scale culture, the aeration-agitation culture method is suitable.

【００４５】種培養は、上述の如き液体培地を入れた三
角フラスコを用い、２０乃至２３℃にて数日間、振とう
することにより行う。種培養は、必要なら２段階以上に
分け、段階的にスケールアップして行なう。得られた種
培養液は本培養に供する。The seed culture is performed by shaking at 20 to 23 ° C. for several days in an Erlenmeyer flask containing the liquid medium as described above. Seed culture is divided into two or more stages, if necessary, and the scale is increased stepwise. The obtained seed culture is used for main culture.

【００４６】本培養は、基本的に種培養と同様の条件で
行なう。すなわち、種培養液を本培養培地に接種し、一
定温度にて数日間振とう培養する。The main culture is performed basically under the same conditions as the seed culture. That is, a seed culture solution is inoculated into a main culture medium and cultured with shaking at a constant temperature for several days.

【００４７】本培養をより大きなスケールで行なう場合
には、攪拌装置及び通気装置を備えたジャーファーメン
ター又はタンクを使用する。その場合、培地はジャーフ
ァーメンター又はタンク中で調製する。培地を１２１℃
にて２０分間滅菌し、冷却した後、種培養液を接種す
る。培養は２０乃至２３℃にて通気攪拌法により行な
う。When the main culture is performed on a larger scale, a jar fermenter or a tank equipped with a stirrer and an aeration device is used. In that case, the medium is prepared in a jar fermenter or tank. Medium at 121 ° C
After sterilizing for 20 minutes and cooling, a seed culture solution is inoculated. Culture is performed at 20 to 23 ° C. by aeration and agitation.

【００４８】ＳＡＮＫ１３８９９株を上述の条件で液体
培養すると、通常、Ｆ−１５０７８Ｃ及び／又はＦ−１
５０７８Ｄの生産量は、培養開始から１４４乃至１９２
時間で最高値に達する。When the SANK13899 strain is subjected to liquid culture under the above-mentioned conditions, usually, F-15078C and / or F-1
The production amount of 5078D was 144 to 192 from the start of culture.
Reach the highest value in time.

【００４９】培養物等に存在するＦ−１５０７８Ｃ及び
／又はＦ−１５０７８Ｄは、高速液体クロマトグラフィ
ー（ＨｉｇｈＰｅｒｆｏｒｍａｎｃｅＬｉｑｕｉｄ
Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ：以下、「ＨＰＬＣ」
という。）、抗菌活性等を用い、定量的に又は定性的に
測定することができる。そのような目的に用いるＨＰＬ
Ｃの条件として、下記ＨＰＬＣの条件（１）を例示する
ことができる。ＨＰＬＣの条件（１）カラム：ＳｈｏｄｅｘＡｓａｈｉｐａｋＣ８Ｐ５０４Ｅ（直径４．６ｍｍ×２５０ｍｍ：昭和電工（株）製）移動相：アセトニトリル：１０ｍＭ炭酸水素アンモニウム水＝１３：７流速：０．７ｍｌ／分検出波長：λ２１０ｎｍ上記ＨＰＬＣの条件（１）によるＨＰＬＣにおいて、Ｆ
−１５０７８Ｃの保持時間は１０．１２分であり、Ｆ−
１５０７８Ｄの保持時間は８．９３分である。F-15078C and / or F-15078D present in a culture or the like can be analyzed by high performance liquid chromatography (High Performance Liquid).
Chromatography: Hereinafter, "HPLC"
That. ), And can be quantitatively or qualitatively measured using antibacterial activity and the like. HPL used for such purpose
As the condition of C, the following HPLC condition (1) can be exemplified. HPLC conditions (1) Column: Shodex Asahipak C8P 504E (4.6 mm diameter x 250 mm: manufactured by Showa Denko KK) Mobile phase: acetonitrile: 10 mM aqueous ammonium bicarbonate = 13: 7 Flow rate: 0.7 ml / min Detection wavelength: λ 210 nm In the HPLC under the above HPLC conditions (1), F
The retention time of -15078C is 10.12 minutes and F-
The retention time of 15078D is 8.93 minutes.

【００５０】培養終了後、培養液中に存在するＦ−１５
０７８Ｃ及び／又はＦ−１５０７８Ｄは、培養液を珪藻
土をろ過助剤とするろ過操作若しくは遠心分離操作によ
り得られるろ液、上清又は菌体、又は、培養液から、そ
の物理化学的性状を利用し抽出精製することができる。
ろ液又は上清に含有されるＦ−１５０７８Ｃ及びＦ−１
５０７８Ｄは、中性ｐＨ条件下で、水と混和しない有機
溶剤、例えば、酢酸エチル、クロロホルム、塩化エチレ
ン、塩化メチレン、ブタノール等若しくはそれら２種以
上の混合溶媒による抽出操作、活性炭、アンバーライト
ＸＡＤ−２、ＸＡＤ−４（以上、いずれもローム・アン
ド・ハース社製）等や、ダイアイオンＨＰ−１０、ＨＰ
−２０、ＣＨＰ−２０Ｐ、ＨＰ−５０、セパビーズＳＰ
−２０７（以上、いずれも三菱化学（株）社製）等の吸
着剤による分画操作等により、粗画分として得ることが
できる。吸着剤を用いる場合、Ｆ−１５０７８Ｃ及び／
又はＦ−１５０７８Ｄを含むろ液又は上清を吸着剤と接
触させ、不純物を吸着させて取り除くか、又は、Ｆ−１
５０７８Ｃ及び／又はＦ−１５０７８Ｄを吸着剤に吸着
させ非吸着画分と分離した後、メタノール水、アセトン
水、ブタノ−ル水等を用いて吸着剤から所望の化合物を
溶出させることにより得られる。菌体に含有されるＦ−
１５０７８Ｃ及び／又はＦ−１５０７８Ｄは、５０乃至
９０％の含水アセトン又は含水メタノールにより抽出し
有機溶剤を除去した後、ろ液又は上清と同様の操作に供
することにより、粗画分として得ることができる。培養
液に含有されるＦ−１５０７８Ｃ及び／又はＦ−１５０
７８Ｄ、培養液に、適当な量の含アセトン又はメタノー
ル、好適には終濃度５０％のアセトン又はメタノールを
添加して抽出し、珪藻土をろ過助剤とするろ過操作を行
ない、得られた抽出液を、ろ液又は上清と同様の操作に
供することにより、粗画分として得ることができる。After completion of the culture, F-15 present in the culture solution
078C and / or F-15078D utilize the physicochemical properties of a filtrate, a supernatant or a cell obtained by a filtration operation or a centrifugation operation using diatomaceous earth as a filter aid, or a culture solution. And can be extracted and purified.
F-15078C and F-1 contained in filtrate or supernatant
5078D is an organic solvent that is immiscible with water under neutral pH conditions, for example, an extraction operation with ethyl acetate, chloroform, ethylene chloride, methylene chloride, butanol, or a mixed solvent of two or more thereof, activated carbon, Amberlite XAD- 2, XAD-4 (all of which are manufactured by Rohm and Haas), Diaion HP-10, HP
-20, CHP-20P, HP-50, Sepabeads SP
The crude fraction can be obtained by a fractionation operation using an adsorbent such as -207 (all manufactured by Mitsubishi Chemical Corporation) or the like. When using an adsorbent, F-15078C and / or
Alternatively, the filtrate or supernatant containing F-15078D is brought into contact with an adsorbent to adsorb and remove impurities, or
It is obtained by adsorbing 5078C and / or F-15078D on an adsorbent and separating it from a non-adsorbed fraction, and then eluting a desired compound from the adsorbent using methanol water, acetone water, butanol water or the like. F- contained in cells
15078C and / or F-15078D can be obtained as a crude fraction by extracting with 50 to 90% hydrated acetone or hydrated methanol to remove the organic solvent, and then subjecting to the same operation as the filtrate or supernatant. it can. F-15078C and / or F-150 contained in the culture solution
78D, an appropriate amount of acetone-containing or methanol, preferably 50% final concentration of acetone or methanol is added to the culture solution for extraction, and a filtration operation using diatomaceous earth as a filter aid is performed. Can be obtained as a crude fraction by subjecting it to the same operation as for the filtrate or supernatant.

【００５１】このようにして得られたＦ−１５０７８Ｃ
及び／又はＦ−１５０７８Ｄは、更にＴＳＫゲルトヨパ
ールＨＷ−４０Ｆ（東ソー（株）社製）、セファデック
スＬＨ−２０（アマシャムファルマシア社製）等を用い
た分配カラムクロマトグラフィーあるいはコスモシール
１４０Ｃ１８（ナカライテスク社製）等を用いた逆層カ
ラムクロマトグラフィーを用いて部分精製できる。ま
たこのようにして部分精製されたＦ−１５０７８Ｃ及び
Ｆ−１５０７８Ｄは、更にショウデックスアサヒパック
Ｃ８Ｐ５０−４Ｅ（昭和電工（株）社製）、ＹＭＣパッ
クＯＤＳ−ＡＭ（（株）ワイエムシィ社製）、カプセル
パックＵＧ１２０（資生堂社製）等の逆層カラムを用い
たＨＰＬＣ等で精製することができる。The thus obtained F-15078C
And / or F-15078D can be further distributed column chromatography using TSK Gel Toyopearl HW-40F (manufactured by Tosoh Corporation), Sephadex LH-20 (manufactured by Amersham Pharmacia), or Cosmo Seal 140C18 (Nacalai Tesque, Inc.) ) Can be partially purified using reverse-layer column chromatography. In addition, F-15078C and F-15078D partially purified in this manner were further used as Showdex Asahi Pack C8P50-4E (manufactured by Showa Denko KK), YMC Pack ODS-AM (manufactured by YMC), and It can be purified by HPLC or the like using a reverse layer column such as Capsule Pack UG120 (manufactured by Shiseido Co., Ltd.).

【００５２】これらの抽出精製手段を、単独で、２種以
上を組み合わせて、又は、反復して用いることにより、
Ｆ−１５０７８Ｃ及び／又はＦ−１５０７８Ｄを単離す
ることができる。By using these extraction and purification means alone, in combination of two or more, or repeatedly,
F-15078C and / or F-15078D can be isolated.

【００５３】本発明のＦ−１５０７８Ｃ及びＦ−１５０
７８Ｄ並びにそれらの塩は、優れた抗真菌作用を有し、
真菌感染症の予防薬又は治療薬として有用である。F-15078C and F-150 of the present invention
78D and their salts have excellent antifungal activity,
It is useful as a prophylactic or therapeutic agent for fungal infections.

【００５４】本発明のＦ−１５０７８Ｃ及びＦ−１５０
７８Ｄ並びにそれらの塩を、真菌感染症の予防薬又は治
療薬として用いる場合、種々の形態で投与される。その
投与形態としては特に限定はなく、各種製剤形態、患者
の年齢、性別その他の条件、疾患の程度等に応じて決定
される。錠剤、丸剤、散剤、顆粒剤、シロップ剤、液
剤、懸濁剤、乳剤、顆粒剤、カプセル剤等は経口投与さ
れる。注射剤は、単独で、ブドウ糖、アミノ酸等の通常
の補液との混合として、又はポリオキシエチレンソルビ
タン脂肪酸エステル類等とのエマルジョンとして、静脈
内投与される。また、注射剤は、筋肉内投与、皮内投
与、皮下投与又は腹腔内投与される。坐剤は、直腸内投
与される。F-15078C and F-150 of the present invention
When 78D and salts thereof are used as prophylactic or therapeutic agents for fungal infections, they are administered in various forms. The administration form is not particularly limited, and is determined according to various preparation forms, patient age, sex and other conditions, degree of disease, and the like. Tablets, pills, powders, granules, syrups, solutions, suspensions, emulsions, granules, capsules and the like are administered orally. The injection is administered intravenously, alone, as a mixture with a normal replacement fluid such as glucose or amino acid, or as an emulsion with polyoxyethylene sorbitan fatty acid esters or the like. The injection is administered intramuscularly, intradermally, subcutaneously or intraperitoneally. Suppositories are administered rectally.

【００５５】これらの各種製剤は、常法に従い、主薬に
賦形剤、結合剤、崩壊剤、滑沢剤、溶解剤、矯味矯臭
剤、コーティング剤等既知の医薬製剤分野において通常
使用しうる公知の補助剤を用いて製剤化することができ
る。According to a conventional method, these various preparations can be used in the field of known pharmaceutical preparations such as excipients, binders, disintegrants, lubricants, solubilizers, flavoring agents, coating agents, etc. Can be formulated by using the following auxiliary agents.

【００５６】錠剤の形態に成形するに際しては、当該分
野で公知の担体を広く含有せしめることができ、乳糖、
白糖、塩化ナトリウム、ブドウ糖、尿素、澱粉、炭酸カ
ルシウム、カオリン、結晶セルロース、珪酸等の賦形
剤、水、エタノール、プロパノール、単シロップ、ブド
ウ糖液、澱粉液、ゼラチン溶液、カルボキシメチルセル
ロース、セラック、メチルセルロース、リン酸カリウ
ム、ポリビニルピロリドン等の結合剤、乾燥澱粉、アル
ギン酸ナトリウム、カンテン末、ラミナラン末、炭酸水
素ナトリウム、炭酸カルシウム、ポリオキシエチレンソ
ルビタン脂肪酸エステル類、ラウリル硫酸ナトリウム、
ステアリン酸モノグリセリド、澱粉、乳糖等の崩壊剤、
白糖、ステアリン、カカオバター、水素添加油等の崩壊
抑制剤、第四級アンモニウム塩基、ラウリル硫酸ナトリ
ウム等の吸収促進剤、グリセリン、澱粉等の保湿剤、澱
粉、乳糖、カオリン、ベントナイト、コロイド状珪酸等
の吸着剤、精製タルク、ステアリン酸塩、硼酸末、ポリ
エチレングリコール等の滑沢剤を例示することができ
る。また、錠剤は、必要に応じ、当該分野で公知の剤皮
を施した錠剤、例えば、糖衣錠、ゼラチン被包錠、腸溶
被錠、フィルムコーティング錠とすることができる。さ
らに、錠剤は、二重錠又は多重錠であってもよい。In forming into tablets, carriers well known in the art can be widely contained, and lactose,
Excipients such as sucrose, sodium chloride, glucose, urea, starch, calcium carbonate, kaolin, crystalline cellulose, silicic acid, water, ethanol, propanol, simple syrup, glucose solution, starch solution, gelatin solution, carboxymethyl cellulose, shellac, methyl cellulose , Potassium phosphate, a binder such as polyvinylpyrrolidone, dried starch, sodium alginate, agar powder, laminaran powder, sodium hydrogen carbonate, calcium carbonate, polyoxyethylene sorbitan fatty acid esters, sodium lauryl sulfate,
Disintegrating agents such as stearic acid monoglyceride, starch, lactose,
Disintegration inhibitors such as sucrose, stearin, cocoa butter, hydrogenated oil, etc., absorption promoters such as quaternary ammonium bases, sodium lauryl sulfate, humectants such as glycerin and starch, starch, lactose, kaolin, bentonite, colloidal silica And lubricants such as purified talc, stearate, boric acid powder, polyethylene glycol and the like. In addition, the tablet can be a tablet coated with a coating known in the art, if necessary, for example, a sugar-coated tablet, a gelatin-encapsulated tablet, an enteric-coated tablet, or a film-coated tablet. Further, tablets may be double or multiple tablets.

【００５７】丸剤の形態に成形するに際しては、当該分
野で公知の担体を含有せしめることができ、ブドウ糖、
乳糖、澱粉、カカオ脂、硬化植物油、カオリン、タルク
等の賦形剤、アラビアゴム末、トラガント末、ゼラチ
ン、エタノール等の結合剤、ラミナラン、カンテン等の
崩壊剤を例示することができる。When the pill is formed into a pill, it can contain a carrier known in the art.
Excipients such as lactose, starch, cocoa butter, hardened vegetable oil, kaolin, and talc; binders such as gum arabic powder, tragacanth powder, gelatin and ethanol; and disintegrants such as laminaran and agar can be exemplified.

【００５８】坐剤の形態に成形するに際しては、当該分
野で公知の担体を含有せしめることができ、そのような
担体として、ポリエチレングリコール、カカオ脂、高級
アルコール、高級アルコールのエステル類、ゼラチン、
半合成グリセライドを例示することができる。For shaping in the form of suppositories, carriers known in the art can be incorporated. Examples of such carriers include polyethylene glycol, cocoa butter, higher alcohols, esters of higher alcohols, gelatin,
Semi-synthetic glycerides can be exemplified.

【００５９】注射剤として調製される場合、液剤、乳剤
及び懸濁剤は、殺菌され且つ血液と等張であることが好
ましく、液剤、乳剤及び懸濁剤の形態に形成するに際し
ては、当該分野で慣用されている希釈剤を含有せしめる
ことができ、そのような希釈剤として、水、エチルアル
コール、プロピレングリコール、エポキシ化イソステア
リルアルコール、ポリオキシ化イソステアリルアルコー
ル、ポリオキシエチレンソルビタン脂肪酸エステル類を
例示することができる。また、注射剤には、等張性を維
持するのに必要且つ充分な量の食塩、ブドウ糖、グリセ
リン等を含有せしめてもよい。さらに、注射剤には、当
該分野で慣用される溶解補助剤、緩衝剤、無痛化剤糖を
添加してもよい。When prepared as an injection, the liquid, emulsion, and suspension are preferably sterilized and isotonic with blood. And diluents commonly used in the art. Examples of such diluents include water, ethyl alcohol, propylene glycol, epoxidized isostearyl alcohol, polyoxylated isostearyl alcohol, and polyoxyethylene sorbitan fatty acid esters. can do. Further, the injection may contain a sufficient amount of salt, glucose, glycerin and the like to maintain isotonicity. Further, a solubilizer, a buffer, and a soothing agent sugar commonly used in the art may be added to the injection.

【００６０】また、これらの各種製剤には、必要に応
じ、着色剤、保存剤、香料、風味剤、甘味剤、他の医薬
品等を含有せしめてもよい。In addition, these various preparations may contain a coloring agent, a preservative, a flavor, a flavoring agent, a sweetening agent, other pharmaceuticals and the like, if necessary.

【００６１】こえれの製剤中に含まれるＦ−１５０７８
Ｃ及び／又はＦ−１５０７８Ｄの量は、特に限定される
ものではないが、通常１乃至７０重量％であり、好適に
は１乃至３０重量％である。F-15078 contained in these preparations
The amount of C and / or F-15078D is not particularly limited, but is usually 1 to 70% by weight, and preferably 1 to 30% by weight.

【００６２】さらに、Ｆ−１５０７８Ｃ及び／又はＦ−
１５０７８Ｄの投与量は、症状、年齢、体重、投与方
法、剤形等に依存するが、成人に対して１日に投与する
量の上限は２０乃至２０００ｍｇ、下限は０．００１乃
至０．１ｍｇであり、好適には０．０１乃至２００ｍ
ｇ、より好適には０．１乃至２０ｍｇである。Further, F-15078C and / or F-
The dose of 15078D depends on symptoms, age, body weight, administration method, dosage form, etc., but the upper limit of the daily dose to an adult is 20 to 2000 mg, and the lower limit is 0.001 to 0.1 mg. Yes, preferably 0.01 to 200 m
g, more preferably 0.1 to 20 mg.

【００６３】[0063]

【実施例】次に、実施例、試験例及び製造例を挙げ、本
発明をさらに具体的に説明するが、本発明はこれらに限
定されるものではない。実施例１．Ｆ−１５０７８Ｃの製造［ＳＡＮＫ１３８９９株の培養］表１記載の組成を有す
る種培養培地１００ｍｌを入れた５００ｍｌ容三角フラ
スコ３本を１２１℃、３０分間滅菌し、該三角フラスコ
にＳＡＮＫ１３８９９株を１白金耳接種し、２３℃、２
１０ｒｐｍ（回転半径７ｃｍ）の条件下で６日間培養し
た。得られた培養液を、同じ組成の培地４００ｍを含む
２Ｌ容三角フラスコ９本に５％接種し、２３℃、２１
０ｒｐｍ（回転半径７ｃｍ）の条件下で２日間培養し
た。１２１℃、３０分間滅菌した表２記載の組成を有す
る本培養培地１５Ｌを含む３０Ｌ容ジャー培養機４基
に、種培養液を７５０ｍｌずつ植菌し、２０℃、通気量
１ｖｖｍ、１００乃至４６０ｒｐｍ、溶存酸素量５．０
ｐｐｍの条件下で１３日間培養した。Next, the present invention will be described more specifically with reference to examples, test examples and production examples, but the present invention is not limited to these examples. Embodiment 1 FIG. Production of F-15078C [Culture of strain SANK13899] Three 500 ml Erlenmeyer flasks containing 100 ml of a seed culture medium having the composition shown in Table 1 were sterilized at 121 ° C. for 30 minutes, and one platinum loop of SANK13899 strain was added to the Erlenmeyer flask. Inoculate, 23 ° C, 2
The cells were cultured for 6 days under the conditions of 10 rpm (rotation radius: 7 cm). 5% of the obtained culture solution was inoculated into nine 2 L Erlenmeyer flasks containing 400 m of medium having the same composition,
The cells were cultured for 2 days under the condition of 0 rpm (rotation radius: 7 cm). 750 ml of the seed culture was inoculated into four 30 L jar incubators each containing 15 L of the main culture medium having the composition shown in Table 2 and sterilized at 121 ° C. for 30 minutes, at 20 ° C., aeration rate of 1 vvm, 100 to 460 rpm, Dissolved oxygen amount 5.0
The cells were cultured for 13 days under the condition of ppm.

【表１】種培養培地の組成グリセリン３０ｇグルコース３０ｇ可溶性澱粉２０ｇ大豆粉１０ｇゼラチン２．５ｇイーストエキス（Ｄｉｆｃｏ社製）２．５ｇＮＨ₄ＮＯ₃ ２．５ｇ消泡剤＊０．１ｍｌ水道水１０００ｍｌ（ｐＨは調整せず。）[Table 1] Composition of seed culture medium Glycerin 30 g Glucose 30 g Soluble starch 20 g Soybean flour 10 g Gelatin 2.5 g Yeast extract (manufactured by Difco) 2.5 g NH ₄ NO ₃ 2.5 g Defoamer * 0.1 ml Tap water 1000 ml (The pH is not adjusted.)

【表２】本培養培地の組成グルコース１００ｇマルトエキス（Ｄｉｆｃｏ社製）２０ｇファーマメディア１０ｇＧＥ９０Ｍ（ＤＥＬＴＯＷＮ社製）１０ｇＮＨ₄ＮＯ₃ １ｇＮａＮＯ₃ １ｇＫＨ₂ＰＯ₄ １ｇＭｇＳＯ₄・７Ｈ₂Ｏ１ｇ消泡剤＊０．１ｍｌ水道水１０００ｍｌ（ｐＨは調整せず。）＊ニッサン・ディスフォームＣＢ−４４２（日本油脂
（株）製）［Ｆ−１５０７８Ｃの単離］得られた本培養液５５Ｌに
濾過助剤（セライト５４５：セライト・コーポレーショ
ン社製）を３ｋｇ加え、フィルタープレスによる濾過を
行なった。得られた菌体９ｋｇにメタノール４０Ｌを加
えて攪拌後、濾過した。この濾液を１５Ｌになるまで濃
縮してメタノールを留去した後、水２０Ｌを加えて希釈
し、６．２５規定の水酸化ナトリウムでｐＨ７に調整し
た。希釈液に酢酸エチル２０Ｌを加えて抽出を行なっ
た。得られた溶媒層１５Ｌを１０Ｌの飽和食塩水で洗浄
後、１ｋｇの無水硫酸ナトリウムを加えて１時間脱水し
た。フィルタープレスを用いた濾過により硫酸ナトリウ
ムを除去した後、濾液を減圧濃縮乾固し、１０７ｇの油
状物質が得られた。濃縮物を、メタノール２００ｍｌに
溶解して、アセトニトリル：０．０５％トリフルオロ酢
酸水＝３：７で平衡化した３Ｌのコスモシール１４０Ｃ
１８（ナカライテスク（株）製）カラムに供与した。カ
ラムを同一溶媒で展開し、溶出液を２Ｌ毎に分画し、Ｆ
−１５０７８Ｃを主成分とするフラクション番号６の画
分２Ｌを得た。この画分を減圧濃縮乾固し、３．７５ｇ
の油状物質を得た。この油状物質を１００ｍｌのメタノ
ールに溶解した後、この溶液を、１００μｌで１回、３
００μｌで１０回の、計１１回に分け、下記ＨＰＬＣの
条件（２）によるＨＰＬＣに供した。保持時間１６．７
分のＦ−１５０７８Ｃを含有する画分を回収し、濃縮、
凍結乾燥を行ない、Ｆ−１５０７８Ｃを１９．５ｍｇ得
た。ＨＰＬＣの条件（２）：カラム：ＳｈｏｄｅｘＡｓａｈｉｐａｋＣ８Ｐ９０２Ｆ直径２０ｍｍ×２５０ｍｍ（昭和電工（株）製）溶媒：アセトニトリル：１０ｍＭ炭酸水素アンモニウム水＝６：４検出波長：ＵＶ２１０ｎｍ流速：１４ｍｌ／分温度：室温実施例２．Ｆ−１５０７８Ｄの製造［ＳＡＮＫ１３８９９株の培養］実施例１記載の条件に
て培養を行った。［Ｆ−１５０７８Ｄの単離］得られた本培養液５５Ｌに
濾過助剤（セライト５４５：セライト・コーポレーショ
ン社製）を３ｋｇ加え、フィルタープレスによる濾過を
行なった。得られた菌体９ｋｇにメタノール４０Ｌを
加えて攪拌後、濾過した。この濾液を１５Ｌになるまで
濃縮してメタノールを留去した後、水２０Ｌを加えて希
釈し、６．２５規定の水酸化ナトリウムでｐＨ７に調整
した。希釈液に酢酸エチル２０Ｌを加えて抽出を行なっ
た。得られた溶媒層１５Ｌを１０Ｌの飽和食塩水で洗浄
後、１ｋｇの無水硫酸ナトリウムを加えて１時間脱水し
た。フィルタープレスを用いた濾過により硫酸ナトリウ
ムを除去した後、濾液を減圧濃縮乾固し、１０７ｇの油
状物質が得られた。濃縮物を、メタノール２００ｍｌに
溶解して、アセトニトリル：０．０５％トリフルオロ酢
酸水＝３：７で平衡化した３Ｌのコスモシール１４０Ｃ
１８（ナカライテスク（株）製）カラムに供与した。カ
ラムを同一溶媒で展開し、溶出液を２Ｌ毎に分画し、Ｆ
−１５０７８Ｄを主成分とするフラクション番号６の画
分２Ｌを得た。この画分を減圧濃縮乾固し、３．７５ｇ
の油状物質を得た。この油状物質を１００ｍｌのメタノ
ールに溶解した後、この溶液を、１００μｌで１回、３
００μｌで１０回の、計１１回に分け、実施例１記載の
ＨＰＬＣの条件（２）によるＨＰＬＣに供した。保持時
間１４．３分のＦ−１５０７８Ｄを含有する画分を回収
し、濃縮、凍結乾燥を行ない、Ｆ−１５０７８Ｄを６．
３ｍｇ得た。試験例１．Ｆ−１５０７８Ｃ及びＦ−１５０７８Ｄの抗
真菌活性Ｆ−１５０７８Ｃ及びＦ−１５０７８Ｄの抗真菌活性、
すなわち被検菌に対する最小発育阻止濃度測定は、０．
１６５Ｍ３−［Ｎ−モルフォリノ］プロパンスルホン
酸（シグマ社製）緩衝液を含むＲＰＭＩ１６４０培地を
用いた９６穴マイクロタイタープレートによるブロス希
釈法により行なった（Ｊ．Ｍｅｄ．Ｍｙｃｏｌ．３６，
６１−８６（１９９５））。測定結果を表３に示す。TABLE 2 (manufactured by Difco Co.) Composition glucose 100g maltose extract of the culture medium 20g Pharmamedia 10 g GE90M (manufactured DELTOWN _{_{Co.) 10g NH 4 NO 3 1g NaNO}} 3 1g KH 2 PO 4 1g MgSO 4 · 7H 2 O 1g vanishing Foaming agent * 0.1 ml Tap water 1000 ml (pH is not adjusted) * Nissan Deform CB-442 (manufactured by NOF Corporation) [Isolation of F-15078C] Filtration into 55 L of the obtained main culture solution 3 kg of an auxiliary agent (Celite 545: manufactured by Celite Corporation) was added, and the mixture was filtered by a filter press. To 9 kg of the obtained cells, 40 L of methanol was added, and the mixture was stirred and filtered. The filtrate was concentrated until the volume became 15 L, and methanol was distilled off. Then, 20 L of water was added for dilution, and the pH was adjusted to pH 7 with 6.25 N sodium hydroxide. Extraction was performed by adding 20 L of ethyl acetate to the diluted solution. After 15 L of the obtained solvent layer was washed with 10 L of a saturated saline solution, 1 kg of anhydrous sodium sulfate was added thereto and dehydrated for 1 hour. After removing sodium sulfate by filtration using a filter press, the filtrate was concentrated under reduced pressure to dryness to obtain 107 g of an oily substance. The concentrate was dissolved in 200 ml of methanol, and 3 L of Cosmoseal 140C equilibrated with acetonitrile: 0.05% aqueous trifluoroacetic acid = 3: 7.
18 (Nacalai Tesque, Inc.) column. The column was developed with the same solvent, and the eluate was fractionated every 2 L.
2 L of a fraction having a fraction number 6 and containing -15078C as a main component was obtained. This fraction was concentrated under reduced pressure to dryness, and 3.75 g
Oil was obtained. After dissolving the oil in 100 ml of methanol, the solution was diluted once with 100 μl
The sample was divided into 11 times, 10 times with 00 μl, and subjected to HPLC under the following HPLC conditions (2). Retention time 16.7
The fraction containing F-15078C is collected, concentrated,
Lyophilization was performed to obtain 19.5 mg of F-15078C. HPLC conditions (2): Column: Shodex Asahipak C8P 90 2F Diameter 20 mm × 250 mm (manufactured by Showa Denko KK) Solvent: Acetonitrile: 10 mM aqueous ammonium bicarbonate = 6: 4 Detection wavelength: UV 210 nm Flow rate: 14 ml / Min Temperature: room temperature Production of F-15078D [Culture of SANK13899 strain] Culture was performed under the conditions described in Example 1. [Isolation of F-15078D] To 55 L of the obtained main culture solution, 3 kg of a filter aid (Celite 545: manufactured by Celite Corporation) was added, and filtration was performed using a filter press. To 9 kg of the obtained cells, 40 L of methanol was added, and the mixture was stirred and filtered. The filtrate was concentrated until the volume became 15 L, and methanol was distilled off. Then, 20 L of water was added for dilution, and the pH was adjusted to pH 7 with 6.25 N sodium hydroxide. Extraction was performed by adding 20 L of ethyl acetate to the diluted solution. After 15 L of the obtained solvent layer was washed with 10 L of a saturated saline solution, 1 kg of anhydrous sodium sulfate was added thereto and dehydrated for 1 hour. After removing sodium sulfate by filtration using a filter press, the filtrate was concentrated under reduced pressure to dryness to obtain 107 g of an oily substance. The concentrate was dissolved in 200 ml of methanol, and 3 L of Cosmoseal 140C equilibrated with acetonitrile: 0.05% aqueous trifluoroacetic acid = 3: 7.
18 (Nacalai Tesque, Inc.) column. The column was developed with the same solvent, and the eluate was fractionated every 2 L.
2 L of a fraction having a fraction No. 6 containing -15078D as a main component was obtained. This fraction was concentrated under reduced pressure to dryness, and 3.75 g
Oil was obtained. After dissolving the oil in 100 ml of methanol, the solution was diluted once with 100 μl
The resultant was divided into 11 times, 10 times with 00 μl, and subjected to HPLC under the HPLC conditions (2) described in Example 1. The fraction containing F-15078D with a retention time of 14.3 minutes was collected, concentrated and lyophilized to give F-15078D.
3 mg were obtained. Test Example 1. Antifungal activity of F-15078C and F-15078D Antifungal activity of F-15078C and F-15078D,
That is, the minimum growth inhibitory concentration measurement for a test bacterium is 0.1%.
This was performed by a broth dilution method using a 96-well microtiter plate using an RPMI1640 medium containing a 165M 3- [N-morpholino] propanesulfonic acid (manufactured by Sigma) buffer (J. Med. Mycol. 36,
61-86 (1995)). Table 3 shows the measurement results.

【００６４】[0064]

【表３】Ｆ−１５０７８Ｃ及びＦ−１５０７８Ｄの抗真菌活性 ―――――――――――――――――――――――――――――――――――― 被検真菌最小発育阻止濃度（μｇ／ｍｌ） ――――――――――――――― F-15078C F-15078D ―――――――――――――――――――――――――――――――――――― Candida albicans ATCC90028 8 16 Aspergillus fumigatus IAM2034 2 8 Cryptococcus neoformans IAM4772 0.5 0.25 ―――――――――――――――――――――――――――――――――――― 表３に示す通り、Ｆ−１５０７８Ｃ及びＦ−１５０７８
Ｄは優れた抗真菌活性を示した。製剤例１．経口用カプセル剤Ｆ−１５０７８Ｃ３０ｍｇ乳糖１７０ｍｇトウモロコシ澱粉１５０ｍｇステアリン酸マグネシウム２ｍｇ ――――――――――――――――――――――― 合計３５２ｍｇ上記処方の粉末を混合し、３０メッシュのふるいを通し
た後、この粉末をゼラチンカプセルに入れ、カプセル剤
とする。[Table 3] Antifungal activity of F-15078C and F-15078D ――――――――――――――――――――――――――――――――――― ― Test fungi Minimum growth inhibitory concentration (μg / ml) ――――――――――――――― F-15078C F-15078D ―――――――――――――――― ―――――――――――――――――――― Candida albicans ATCC90028 8 16 Aspergillus fumigatus IAM2034 2 8 Cryptococcus neoformans IAM4772 0.5 0.25 ――――――――――――――― ――――――――――――――――――――― As shown in Table 3, F-15078C and F-15078
D showed excellent antifungal activity. Formulation Example 1 Oral Capsules F-15078C 30mg Lactose 170mg Corn Starch 150mg Magnesium Stearate 2mg ――――――――――――――――――――――――― Total 352mg Mix the above formula powder, After passing through a 30 mesh sieve, this powder is placed in a gelatin capsule to form a capsule.

【００６５】[0065]

【発明の効果】本発明の提供する新規化合物Ｆ−１５０
７８Ｃ及びＦ−１５０７８Ｄ並びにそれらの塩は抗真菌
作用を示し、各種真菌感染症の予防及び／又は治療に有
用である。The novel compound F-150 provided by the present invention
78C and F-15078D and their salts exhibit antifungal activity and are useful for the prevention and / or treatment of various fungal infections.

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.⁷ 識別記号ＦＩテーマコート゛(参考） //(Ｃ１２Ｐ 21/02 Ｃ１２Ｒ 1:645）Ｃ１２Ｒ 1:645）Ａ６１Ｋ 37/02 (72)発明者矢野辰也東京都品川区広町１丁目２番58号三共株式会社内 (72)発明者田中一新茨城県つくば市御幸が丘33 三共株式会社内Ｆターム(参考） 4B064 AG37 BA10 BE07 BE09 BE19 BG01 BG09 CA05 CC03 CD02 CE08 CE16 DA03 4B065 AA58X AC12 AC13 AC14 BA22 CA24 CA44 4C084 AA02 AA06 AA07 BA01 BA17 BA27 CA04 DA43 NA14 ZA902 ZB352 4H045 AA10 BA14 CA15 EA29 FA71 HA03 ──────────────────────────────────────────────────続き Continued on the front page (51) Int.Cl. ⁷ Identification symbol FI Theme coat ゛ (Reference) // (C12P 21/02 C12R 1: 645) C12R 1: 645) A61K 37/02 (72) Inventor Yano Tatsuya 1-58, Hiromachi, Shinagawa-ku, Tokyo Sankyo Co., Ltd. (72) Inventor Kazunori Tanaka 33 Miyukigaoka, Tsukuba, Ibaraki Prefecture Sankyo Co., Ltd. F-term (reference) 4B064 AG37 BA10 BE07 BE09 BE19 BG01 BG09 CA05 CC03 CD02 CE08 CE16 DA03 4B065 AA58X AC12 AC13 AC14 BA22 CA24 CA44 4C084 AA02 AA06 AA07 BA01 BA17 BA27 CA04 DA43 NA14 ZA902 ZB352 4H045 AA10 BA14 CA15 EA29 FA71 HA03

Claims

[Claims]

(1) The following formula (I): Or a salt thereof.

2. Compounds having the following physicochemical properties or salts thereof: 1) Properties of substance: basic fat-soluble colorless powder 2) Molecular formula: C ₅₄ H ₉₆ N ₈ O ₁₄ 3) Molecular weight: 1080 (LC / ESI) 4) TOF-MS [M + H] ⁺ (as C ₅₄ H ₉₇ N ₈ O ₁₄ ) Actual value: 1081.7126 Calculated value: 1081.7124 5) Ultraviolet absorption spectrum: terminal absorption 6) Infrared absorption spectrum ( Potassium bromide tablets in cm
^-1 ): 3434, 3338, 2961, 936, 2873,
2805, 1749, 1684, 1641, 1508,
1470, 1412, 1385, 1371, 1312
1270, 1203, 1155, 1127, 1086
1073, 1020 7) Optical rotation: [α] _D ²⁵ -116 ° (c 0.37, methanol) 8) ¹ H-nuclear magnetic resonance spectrum: Nuclear magnetic resonance measured in heavy chloroform using tetramethylsilane as an internal standard. The spectrum (500 MHz)
It is as follows. 0.78 (3H), 0.78 (3H), 0.81 (3
H), 0.82 (3H), 0.86 (3H), 0.91
(3H), 0.92 (3H), 0.92 (3H), 0.
93 (3H), 0.94 (3H), 0.96 (3H),
1.00 (3H), 1.00 (3H), 1.00 (3
H), 1.05 (3H), 1.22 (1H), 1.40
(3H), 1.45 (1H), 1.48 (1H), 1.
48 (1H), 1.51 (3H), 1.54 (1H),
1.64 (1H), 1.69 (2H), 1.73 (1
H), 1.82 (1H), 1.88 (1H), 1.89
(1H), 2.27 (1H), 2.31 (1H), 2.
36 (1H), 2.49 (3H), 2.88 (3H),
2.93 (3H), 2.96 (1H), 3.28 (3
H), 3.56 (1H), 4.04 (1H), 4.15
(1H), 4.72 (1H), 4.77 (1H), 4.
82 (1H), 4.90 (1H), 4.97 (1H),
5.24 (1H), 5.27 (1H), 5.55 (1
H) ppm 9) ¹³ C-nuclear magnetic resonance spectrum:
The nuclear magnetic resonance spectrum (125 MHz) measured using tetramethylsilane as an internal standard is as follows. 11.9 (q), 15.0 (q), 15.9 (q), 1
6.7 (q), 17.4 (q), 18.0 (q), 1
8.3 (q), 18.7 (q), 18.7 (q), 1
9.1 (q), 19.3 (q), 20.9 (q), 2
1.4 (q), 22.1 (q), 23.1 (q), 2
3.5 (q), 23.6 (q), 24.6 (d), 2
4.8 (d), 25.4 (d), 25.4 (t), 2
7.6 (d), 29.5 (q), 29.8 (d), 3
0.2 (q), 32.1 (d), 36.1 (q), 3
6.4 (t), 37.7 (t), 38.4 (d), 3
9.7 (t), 40.8 (q), 46.2 (d), 5
1.8 (d), 54.4 (d), 54.7 (d), 5
5.1 (d), 63.9 (d), 64.7 (d), 6
8.1 (d), 70.0 (d), 73.4 (d), 7
4.3 (d), 77.0 (d), 169.0 (s), 1
69.1 (s), 169.7 (s), 169.9
(S), 169.9 (s), 170.3 (s), 17
1.9 (s), 173.3 (s), 173.7 (s),
173.9 (s) ppm 10) High performance liquid chromatography: Column: Shodex Asahipak C8P
504E (diameter 4.6 mm x 250 mm: manufactured by Showa Denko KK) Mobile phase: acetonitrile: 10 mM ammonium bicarbonate water = 13: 7 Flow rate: 0.7 ml / min Detection wavelength: λ 210 nm Retention time: 10.12 minutes 11) Solubility: Soluble in dimethyl sulfoxide, methanol and chloroform. 12) Amino acid analysis: Threonine, alanine and valine were recognized as hydrolysates.

3. A compound represented by the following formula (II): Or a salt thereof.

4. A compound having the following physicochemical properties or a salt thereof: 1) Substance property: basic fat-soluble colorless powder 2) Molecular formula: C ₅₄ H ₉₆ N ₈ O ₁₄ 3) Molecular weight: 1080 (LC / ESI) 4) TOF-MS [M + H] ⁺ (as C ₅₄ H ₉₇ N ₈ O ₁₄ ) Actual value: 1081.7122 Calculated value: 1081.7124 5) Ultraviolet absorption spectrum: terminal absorption 6) Infrared absorption spectrum ( Potassium bromide tablets in cm
^-1 ): 3334,2961,937,2874,28
05, 1749, 1684, 1640, 1509, 14
69, 1412, 1385, 1370, 1312, 12
71,1202,1155,1128,1088,10
72, 1022 7) Optical rotation: [α] _D ²⁵ -116 ° (c 0.38, methanol) 8) ¹ H-nuclear magnetic resonance spectrum:
The nuclear magnetic resonance spectrum (500 MHz) measured using tetramethylsilane as an internal standard is as follows. 0.78 (3H), 0.78 (3H), 0.80 (3
H), 0.82 (3H), 0.84 (3H), 0.90
(1H), 0.92 (3H), 0.92 (3H), 0.
92 (3H), 0.92 (3H), 0.95 (3H),
0.95 (3H), 1.00 (3H), 1.00 (3
H), 1.02 (3H), 1.21 (1H), 1.36
(1H), 1.40 (3H), 1.43 (1H), 1.
47 (1H), 1.47 (1H), 1.48 (3H),
1.54 (1H), 1.61 (1H), 1.63 (1
H), 1.68 (2H), 1.71 (1H), 1.80.
(1H), 1.85 (1H), 2.27 (1H), 2.
29 (1H), 2.33 (1H), 2.49 (3H),
2.92 (3H), 2.94 (3H), 2.95 (1
H), 3.28 (3H), 3.53 (1H), 3.57
(1H), 3.88 (1H), 3.94 (1H), 4.
77 (1H), 4.84 (1H), 4.87 (1H),
4.97 (1H), 5.02 (1H), 5.22 (1
H), 5.28 (1H), 5.53 (1H) ppm 9) ¹³ C-nuclear magnetic resonance spectrum: The nuclear magnetic resonance spectrum (125 MHz) measured in tetrachloromethane using tetramethylsilane as an internal standard is as follows. As shown in FIG. 11.1 (q), 11.9 (q), 15.2 (q), 1
5.4 (q), 16.0 (q), 16.6 (q), 1
7.4 (q), 18.4 (q), 18.7 (q), 1
9.1 (q), 21.0 (q), 21.4 (q), 2
2.2 (q), 23.1 (q), 23.5 (q), 2
3.6 (q), 24.1 (t), 24.6 (d), 2
4.8 (d), 25.3 (d), 25.4 (t), 2
7.9 (d), 29.5 (q), 29.8 (d), 3
0.2 (q), 36.1 (q), 36.4 (t), 3
7.3 (t), 38.4 (d), 38.8 (d), 3
9.6 (t), 40.9 (q), 45.9 (d), 4
9.3 (d), 53.3 (d), 54.7 (d), 5
5.1 (d), 63.9 (t), 64.1 (d), 6
5.1 (d), 70.1 (d), 73.3 (d), 7
4.3 (d), 77.0 (d), 169.00 (s),
169.04 (s), 169.6 (s), 169.73
(S), 169.75 (s), 169.83 (s), 1
71.9 (s), 172.4 (s), 173.6
(S), 174.0 (s) ppm 10) High performance liquid chromatography: Column: Shodex Asahipak C8P
504E (diameter 4.6 mm x 250 mm: manufactured by Showa Denko KK) Moving bed: acetonitrile: 10 mM ammonium bicarbonate water = 13: 7 Flow rate: 0.7 ml / min Detection wavelength: λ 210 nm Retention time: 8.93 minutes 11) Solubility: Soluble in dimethyl sulfoxide, methanol, chloroform 12) Amino acid analysis: Serine, alanine and isoleucine were recognized as hydrolysates.

5. The method according to claim 1, wherein a bacterium producing the compound according to any one of claims 1 to 4 belonging to the genus Poma is cultured, and the compound is collected from the culture. A method for producing a compound.

6. A bacterium producing the compound according to any one of claims 1 to 4, which belongs to the genus Phoma, and is a bacterium of the genus Phoma sp. SANK13.
The method according to claim 5, which is 899 (FERM BP-6851) strain.

7. A medicament comprising the compound according to claim 1 or a salt thereof.

8. A therapeutic or prophylactic agent for a fungal infection, comprising the compound according to any one of claims 1 to 4 or a salt thereof as an active ingredient.

9. A spoma (Phoma sp.)
SANK 13899 (FERMBP-6841)
stock.