JP2001518074A

JP2001518074A - Ｂ細胞の免疫寛容誘導

Info

Publication number: JP2001518074A
Application number: JP53321498A
Authority: JP
Inventors: アロンサール
Original assignee: バイオトランスプラントインク．
Priority date: 1997-02-05
Filing date: 1998-02-05
Publication date: 2001-10-09
Also published as: WO1998033528A9; WO1998033528A3; EP0969872A2; WO1998033528A2; AU6319198A; CA2279544A1

Abstract

(57)【要約】本発明は、第１動物において、第２動物から得た移植体に存在するＧａｌα１，３Ｇａｌエピトープに対する寛容状態を促進する方法及び化合物を提供し、これにより、移植体の超急性拒絶（ＨＡＲ）を防止せんとするものである。本発明に従う方法と化合物は、特定のリンパ球細胞を除去又はアネルギー（anergy）状態を引き起こすものであり、該特定のリンパ球細胞は、移植体のＨＡＲの原因となる免疫原にリアクティブなナチュラル抗体（ＸＮＡｓ）を産生するものである。第１番目の態様において、本発明は、Ｇａｌα１，３Ｇａｌエピトープに対して特異的なＢ細胞にアネルギー状態を誘導する方法と、この方法で使用する免疫寛容化合物を提供する。第２番目の態様において、本発明は、Ｇａｌα１，３Ｇａｌエピトープに対して特異的なＢ細胞にアポプトーシス（apoptosis）を誘導する方法と、この方法で使用する免疫寛容化合物を提供する。

Description

【発明の詳細な説明】Ｂ細胞の免疫寛容誘導発明の背景本発明はＢ細胞の免疫寛容誘導に関するものである。より特定すれば、本発明は、ヒト以外の臓器を移植する際に起きる移植臓器に対する超急性の拒絶を緩和若しくは除去する、Ｂ細胞の免疫寛容誘導に関するものである。関連技術の概要過去十年間に実施された臓器移植はその成功例が増加しているものの、ヒト臓器の提供が極度に下足している。推定によると、アメリカ合衆国において３万３千有余人の患者さんが臓器移植を受けるべく待避しているが、毎年約五千の臓器が提供されているのみである。このギャッブを埋める可能性のある一アプローチは、ヒト以外の臓器移植である。スインドル（Swindle et al.）らによって編集され、１９９２年にアイオア州立大学プレスより発行された書名を「Swine as Models In Biomedical」とする文献中において、サックス（sachs）は、ブタが、サイズ、入手易要性（availab ility）及び遺伝操作の観点から、最も研究されたドナー種であることを教示する。ブタ由来の移植体は、不幸にして、霊長類に属する宿主によっては直ちに拒絶される。ガリリー（Galili）は、ブタから霊長類に移植された有血管臓器が最初に遭遇する移植バリアーが、超急性拒絶（hyperacute rejection：ＨＡＲ）であること、及びＨＡＲは、外因物質に反応する抗体（ＸＮＡｓ）がブタ内皮細胞表面上に吸着する（deposition）ことで開始され、ついで宿主の補体が活性化をうけ、移植片は血栓症（thrombosis）、出血（hemorrhage）並びに水種（edema ）によって破壊されることを教示する(Galili,Immunol．Today，14，480(1993)) 。ガリリー、同文献にてさらに、ヒトＸＮＡｓにより認識される免疫原は、ガラクトースαガラクトース抗原決定基（Ｇａｌα１，３Ｇａｌエピトープ）であることを教示する。ガリリー、その指導者（supra）らは、これら抗Ｇａｌ抗体は、霊長類にあっては、総ＩｇＭの１〜４％であり、そして総ＩｇＧの１％であることを教示する。サンドリンらは、ブタ細胞上でヒト補体を活性化するのは、ＩｇＭＸＮＡｓであり、その大部分がＧａｌα１，３Ｇａｌエピトープに特異的であることを教示する（Sandrin et al.，Proc．Natl．Acad．Sci.，90:11391-11395 (1993))）。従って、移植体の生存維持の可能性向上には、これらのＩｇＭＸＮＡｓを除去する必要がある。ラチネらは、ＸＮＡｓを除去すると、拒絶されるであろう移植体の生存を延長でき、そしてプラスマフェレーシス（plasmapheresis）、ドナー臓器を環流すること、又は免疫吸収法（immunoadsorption）にて達成できることを教する（Latinne et al，Transplant proc．250:3:36(1993)）。不幸にして、これらの手技の他に、霊長類からＸＮＡｓを永久に除去する方法は他にはない。であるから、移植体の拒絶は現実には依然として起きる。そのため、ＸＮＡｓを永久除去する方法を確率する必要性がある。ＸＮＡｓを永久除去する可能性をもった一アプローチは、Ｇａｌα（１，３）Ｇａｌエピトープに対する免疫寛容原(tolerogen)を用いて免疫寛容の状態（a state of to lerance）を誘導することである。免疫寛容原とは、免疫原の一であり、この抗原に感作した後についでこれに感作されてもリンパ球の活性化が阻害されるもののことである。ダイジスとダイジスは、抗原を適量適用した時、Ｔ細胞非依存型免疫応答及びＴ細胞依存型免疫応答の進行中に、免疫抑制することができることを教示する（Dintzis and Dintzis,Proc．Natl．Acad．Sci．USA，89:1113-1117 (1992)）。コンラッドらは、自己免疫疾患であるエリテマトーデス（lupus eryt hematosus）を治療するための化合物（composition）を教示する（Conrad et al ，米国特許第5,276,013号及び米国特許第5,162,515号）。この化合物は、エリテマトーデスに含まれろ自己抗原に対する免疫寛容を誘導するために有効な免疫原性のない骨格（backborn）を持ったコンジュゲートと化学的に定義されるものを含んでいる。キースリングらは、単量体リガンドに関連した特異な生物学的特性を有するポリグリコマーを開示しているが、免疫寛容への影響について示唆していない（kiessling al.，WO96/20236）。、本発明にてチャレンジすることは、Ｇａｌα１，３Ｇａｌエピトープに対するこのような免疫寛容を誘導する有効な化合物及び方法を開発することである。発明の簡単な概要本発明は、第１動物において、第２動物から得た移植体に存在するＧａｌα １，３Ｇａｌエピトープに対する寛容状態を促進する方法及び化合物を提供し、これにより、移植体の超急性拒絶（ＨＡＲ）を防止せんとするものである。本発明に従う方法と化合物は、特定のリンパ球細胞を除去する又はアネルギー（aner gy）状態を引き起こすものであり、該特定のリンパ球細胞は、移植体のＨＡＲの原因となる免疫原にリアクティブなナチュラル抗体（ＸＮＡｓ）を産生するものである。第１番目の態様において、本発明は、Ｇａｌα１，３Ｇａｌエピトープに対して特異的なＢ細胞にアネルギー状態を誘導する方法と、この方法において使用する免疫寛容化合物を提供せんとするものである。本発明のこの態様に従う免疫寛容化合物は、つぎに示す構造を含む。Ｈｎ−Ｂここで、「Ｈ」はＧａｌα１，３Ｇａｌエピトープを含むハプテンを表しており、「Ｂ」は骨格（hackborn）を表しており、「−」はオペラブル結合（operable linkage）を表しており、そして「ｎ」は１から100,000,000までの整数を表している。本発明のこの態様に従う化合物の一好適な実施例において、「Ｈ」は末端にＧａｌα１，３Ｇａｌエピトープをもったガクトシルガラクトースオリゴサッカライドである。好ましい実施例において、「Ｈ」はガラクトシルガラクトース又はトリサッカライド（三糖）であり、最も好適には、Ｇａｌα１，３Ｇａｌβ１，４Ｇｌｃ若しくはＧａｌα１，３Ｇａｌβ１，４Ｇ１ｃＮＡｃである。トリサッカライド（三糖）が最も好ましい。「Ｈ」は、それ自身では免疫原性を持っていないが、例えば糖脂質又は糖蛋白質のような免疫原性キャリアー分子に結合したとき、免疫原となるものである。本発明のこの態様に従えば、「Ｈ」は骨格に結合した時、免疫寛容性となる。オペラブル結合は「Ｈ」と「Ｂ」間の連結を含んでいる。好適な一オペラブル結合は、「Ｈ」と「Ｂ」間の共有結合である、より好ましくは、こＤ共有結合は、「Ｈ」は前記骨格に統合させるために、「Ｈ」と「Ｂ」間をダイレクトに結合するものである。一方、この共有結合は、例えば、オリゴサッカライド、糖蛋白質類、自己性ＩｇＧ（autologous ＩｇＧ）若しくは脂肪族炭化水素鎖のような好適には非免疫原性で延びた長い構造を介していることがある。他の好適なオペラブル結合は、疎水性の連結(lipophilic association）を含んでいる。例えば、「Ｂ」を含み、そして、疎水性分子と共有結合してリポソームに連結する「Ｈ」をもったリポソームの形成である。好適な実施例において、「Ｂ」は非免疫原性の骨格である。好ましくは分子量が約5, 000ダルトン（Da）から約100,000ダルトン（Da）にある非免疫原性ポリマーであり、最も好ましくは、分子量が100,000ダルトン（Da）以上の非免疫原性ポリマーである。これらの好ましい非免疫原性ポリマーを特定すれば、ポリビニルエタノールアミン類、ポリアクリルアミド類、デキストラン、及びポリグリコマー類（polyglycomers）が含まれる。他の好適実施例において、「Ｂ」は、非免疫原性の細胞抗原（cellular antigen）である。特に好適な非免疫原性の細胞抗原は、自己性の（autologous）、協力性の（syngeneic）、若しくは外因性の赤血球を含む。本発明のこの態様に従う免疫寛容化合物はまた、薬剤学的に容認できるキャリアー（carriers）、賦形剤（diluents）及び／又は溶出調整剤（controll ed release agents）を含んでいてもよい。「Ｂ」はまた、Ｔ細胞及びＢ細胞に対してサイトトキシックであるか又はＴ細胞及びＢ細胞の機能をダウンモジュレートする試薬（agent）を表している。本発明のこの態様に従う好適な試薬となる「Ｂ」は、ＤＭＳ、抗ＩｇＭ、疎水性トキシン（lipophilic toxins）、ラジオアイソトープ、ジフテリア毒素（diphtheria toxin）及びリシンＡ鎖を含むが、これらを限定するものではない。本発明に従う他の態様において、「Ｂ」は免疫原性のキャリアーである。該免疫原性のキャリアーとしては、免疫原性蛋白質、脂質、炭水化物、及びブタ細胞や家兎赤血球のような細胞を含んでいるが、これらを限定するものではない。他の好適な実施例は、末端がαガラクトース構造であるリポソーム、若しくはＮ，Ｎジメチルスフィンゴシンに取り込んだ「Ｂ」を含んでいる。本発明のこの第１態様に従う方法は、第１動物において、第２動物から得た移植体に存在するＧａｌα１，３Ｇａｌエピトープに対する寛容状態を促進し、これにより、移植体の超急性拒絶（ＨＡＲ）を防止するものである。本発明のこの態様に従う方法は、第１動物に、本発明に係る免疫寛容性化合物（ tolerogenic composition）の寛容量（tolerogenic amount）を適用することを含む。この適用は、経口適用、静脈適用、筋内適用、皮下適用、鼻内適用、皮内適用、若しくは座薬経路を介するか、あるいは埋込み適用による。第２番目の態様において、本発明は、Ｇａｌα１，３Ｇａｌエピトープに特異的なＢ細胞のアポプトーシス（apoptosis）を誘導する方法、及びこの方法に適用される免疫寛容化合物の提供にある。本発明のこの態様に従う免疫寛容化合物は、つぎの構造を含む。Ｈｎ−Ｔここで、「Ｈ」は、本発明の第１の態様において記載した、Ｇａｌα１，３Ｇａｌエピトープを含むハプテンを表しており、「Ｔ」は、Ｔ細胞及びＢ細胞を傷害する、又はＴ細胞及びＢ細胞の機能をダウンモジュレートする試薬（agent）を表しており、「−」は［オペラブル結合（operable linkage）を表しており、そして「ｎ」は１から1,000までの整数を表している。本発明のこの態様に従う好適な試薬「Ｔ」は、ＤＭＳ、抗ＩｇＭ、疎水性トキシン（lipophilic toxins）、ラジオアイソトープ、ジフテリア毒素（diphthe ria toxin）及びリジンＡ鎖を含むが、これらを限定するものではない。オペラブル結合は、「Ｈ」と「Ｔ」間の連結を含んでおり、この連結は、「Ｈ」に働き掛けさせて、Ｇａｌα１，３Ｇａｌエピトープに特異的であるＢ細胞又はＴ細胞を攻撃させる。、好適な一オペラブル結合は、「Ｈ」と「Ｔ」間をダイレクトに連結する共有結合である。一方、「Ｈ」と「Ｔ」はともにキャリアー分子に共有結合されているかもしれない。他の好適なオペラブル結合は、疎水性の連結（li pophilic association）を含んでいる。例えば、「Ｔ」を含み、そして、疎水性分子と共有結合してリポソームに連結する「Ｈ」をもったリポソームの形成である。ある実施例において、例えば「Ｈ」が一方のリポソームに結合しておりそして「Ｔ」が他のリポソームに結合している時は、オペラブルな連結（operable ass ociation）は物理的な連結ではなくて、単にリポソーム中に共存しているものである。「Ｈ」に対して特異的なＴ細胞に、アポップトーシス（apoptosis）を誘導するため、この態様に従う免疫寛容化合物は、さらに、Ｔ細胞レセプターに結合するペプチド若しくは蛋白質に対してオパラブリーに結合されるかもしれない。本発明の第２の態様に従う方法は、第１動物において、第２動物から得た移植体に存在するＧａｌα１，３Ｇａｌエピトープに対する寛容状態を促進し、これにより、移植体の超急性拒絶（ＨＡＲ）を防止するものである。特に好適な実施例において、第１動物がヒトであり、第２動物がブタである。本発明のこの態様に従う方法は、第１動物に、本発明のこの態様に係る免疫寛容性化合物（tolero genic composition）の寛容量（tolerogenic amount）を適用することを含む。第３番目の態様において、本発明は、第１動物において、第２動物から得た移植体に存在するＧａｌα１，３Ｇａｌエピトープに対する寛容状態を促進し、これにより、移植体の超急性拒絶（ＨＡＲ）を防止するさらにもう１つの方法を提供する、特に好適な実施例にあっては、第１動物がヒトであり、第２動物がブタである。本発明のこの態様に従う方法は、第１動物につぎの構造を有する化合物を適用することを含んでいる。Ｈｎ−Ｉここで、［Ｈ］は本発明の第１の態様で述べた、Ｇａｌα１，３Ｇａｌエピトープを含むハプテンを表しており、「Ｉ」は免疫原性のキャリアーを表しており、「−」はオペラブル結合（operable linkage）を表しており、「ｎ」は１から10 0,000,000までの整数を表しており、そして動物は化学療法剤にて処置されている。免疫寛容化合物にさらすと、「Ｈ」に対して特異的な記憶Ｂ細胞（memory B cells）ならびに未熟B細胞（immature B cells）の分化を引き起こし、これらの細胞を化学療法剤に対して感受性（sensitive）にする。本発明のこの態様に従えば、「Ｈ」は本発明の第１の態様において記載したとおりであり、エペラブル結合は、本発明の第２の態様において記載したとおりである。特に好適な免疫原性化合物、「Ｉ」は、蛋白質、脂質、炭水化物、及び例えばブタの細胞や家兎赤血球のような細胞を含んでいるが、これらに限定されるものではない。特に好適な化学療法剤は、シクロホスファミド、レフノミド（leflunomide）、マイコフェノレートモフェティル（mycophenolate mofetil）、ボキソルビシン（boxorubicin）、2 ,3-ジデオキシイノシン（2,3-dideoxyinosine）、クロラムビシル（chlorambuci l）、ステロイドホルモン、アドリアマイシン、ブレキナー誘導体（brequinar a nalogs）、及びメルファラン（melphalan）を含んでいるが、これらに限定されるものではない。本明細書に記載の各方法を行うために、Ｇａｌα１，３Ｇａ１エピトープに特異的なプラズマ細胞を除去させるべく、プラズマ細胞を枯渇処理することも好ましい、好適には、このようなプラズマ細胞の枯渇処理は、抗ＣＤ３８イムノトキシン、抗ＨＭ1.24抗体、又はラジオヌクリドコンジュゲート（radionuclide c onjugates）が使用されるであろう。図面の簡単な説明図１は、ヒヒ脾臓細胞を使用した抗ＧａｌＥＬＩＳＰＯＴアッセイの特異性を図示したものである。図２は、ＧａｌＴ（-/-）マウス脾臓細胞を使用した抗ＧａｌＥＬＩＳＰＯＴアッセイの特異性を示す。図３は、α１，３Ｇａｌ−ＢＳＡ及びシクロホスファミド処理により得られる、Ｇａｌα１，３ＧａｌＸＮＡの引き起こすＢ細胞の免疫応答を示す。図３Ａは、ＩｇＭ免疫応答を示しており、図３Ｂは、ＩｇＧ免疫応答を示している。図４は、クロホスファミド単独処理により得られる、Ｇａｌα１，３ＧａｌＸＮＡの引き起こすＢ細胞応答を示す。図４ＡにはＩｇＭ免疫応答が示されており、図４ＢにはＩｇＧ免疫応答が示されている。図５は、αＧａｌ−ＢＳＡ注射しついでシクロホスファミド適用することが、ブタＰＢＭＣチャレンジ後２週目のＢ免疫細胞応答に対して及ぼす影響を示すものである、ＭＦＩは「平均蛍光強度」の略であり、ＣＹＰはシクロホスファミドの略である。図６は、ブタＰＢＭＣに対するＢ細胞の応答に及ぼす、αＧａｌ−ＢＳＡが存在しない場合のシクロホスファミドの影響を示すものである。ＭＦＩは「平均蛍光強度」の略であり、ＣＹＰはシクロホスファミドの略である。図７は、抗原パルス（antigen pulses）を含むαＧａｌを適用しついで代謝を阻害した場合の、Ｇａｌ（-/-）マウスの抗Ｇａｌ抗体産生に及ぼすインビボ系での影響を図示したものである。図７ＡにはＩｇＭ免疫応答が示されており、図７ＢにはＩｇＧ免疫応答が示されている。図８は、αＧａｌ及びαＧａｌ／ＤＭＳを含むリポソームが、インビトロ系で、抗Ｇａｌ抗体産生を完全阻害していることを示している。好適実施例の詳細な説明本発明は、Ｂ細胞の免疫寛容誘導に関するものである。さらに特定すれば、本発明は、外因性の臓器移植体に対する超急性拒絶（ＨＡＲ）を緩和若しくは除去する、Ｂ細胞の免疫寛容誘導に関するものである。ここに記載された発明及び明細書は、この技術分野に属するいわゆる当業者に有益な知識を例示しており、そっくりそのままレファレンスとして引用できる。本発明は、第１動物において、第２動物から得た移植体に存在するＧａｌ α１，３Ｇａｌエピトープに対する免疫寛容状態を促進する方法及び化合物を提供し、これにより、移植体の超急性拒絶（ＨＡＲ）を防止せんとするものである。本発明に従う方法と化合物は、特定リンハ球細胞の除去又はアネルギー（aner gy）状態を引き起こす。この特定のリンパ球細胞は、移植体のＨＡＲの原因となるナチュラル抗体（ＸＮＡｓ）の産生に対応するものである。かかる特定のリンパ球細胞を除去又はアネルギー（anergy）状態となったことは、Ｇａｌα１，３Ｇａｌ抗原決定基（エピトープ）に対して特異的な抗体レベルを評価することによりモニターされる。かかる除去又はネレルギー状態になったことはまた、移植した外因性の臓器若しくは移植体の生存期間の改善からモニターできる。本発明に従う方法と化合物は、ヒトに、外因性臓器や細胞性移植体を首尾良く移植することを推進するために使用される。加えて、本発明に従う方法及び化合物は、ヒト以外の霊長類に、外因性臓器や細胞性移植体を移植する研究を推進するために使用される。第１の態様において、本発明は、Ｂ細胞中に、Ｇａｌα１，３Ｇａｌ抗原決定基（エピトープ）に対して特異的なアネルギー状態を誘導する方法及びこの方法に使用される免疫寛容化合物を提供する。本発明の目的に対して、”Ｇａｌα１，３Ｇａｌエピトープ”なる用語は、αＧａｌ（１−３）βＧａｌ（１−４）β ＧｌｃＮＡｃ若しくはαＧａｌ（１−３）βＧａｌ（１−４）βＧｌｃ構造中にあるガラクトシル（α１，３）ガラクトース構造のような、ガラクトシル（α１，３）ガラクトース構造上に抗原決定基（エピトープ）の全てが又は部分的に局在する抗原決定基を指す。本発明のこの態様に従う免疫寛容化合物は、つぎに示す構造を含む。Ｈｎ−Ｂここで、「Ｈ」は、Ｇａｌα１，３Ｇａｌエピトープを含むハプテンを表しており、「Ｂ」は骨格（backborn）を表しており、「−」はオペラブル結合（operab le linkage）を表しており、そして「ｎ」は１から1，000までの整数を表している。本発明のこの態様に従う化合物の一好適な実施例において、「Ｈ」は，末端にＧａｌα１，３Ｇａｌエピトープをもったガラクトシル（α１，３）ガラクトース部分である。好ましい実施例において、「Ｈ」はガラクトシルガラクトースなるジサッカライド（二糖）又はトリサッカライド（三糖）であり、最も好適には、Ｇａｌα１，３Ｇａｌβ１，４Ｇｌｃ若しくはＧａｌα１，３Ｇａｌβｌ，４ＧｌｃＮＡｃである。最も好適な実施例は、トリサッカライド（三糖）である。「Ｈ」は、それ自身では免疫原性を持っていないが、例えば糖脂質又は糖蛋白質のような免疫原性キャリアー分子に結合したとき、免疫原となるものである。本発明のこの態様に従えば、「Ｈ」は骨格に結合した時、免疫寛容性となる。オペラブル結合は「Ｈ」と「Ｂ」間の連結を含んでいる。好適な一オペラブル結合は、「Ｈ」と「Ｂ」間の共有結合である。より好ましくは、この共有結合は、「Ｈ」と「Ｂ」間をダイレクトに結合するものであり、「Ｈ」は前記骨格に統合される。一方、この共有結合は、好適には非免疫原性であり延びた長い構造、例えば、オリゴサッカライド、糖蛋白質類、自己のＩｇＧ（autologous ＩｇＧ）若しくは脂肪族炭化水素鎖を介していることがある。骨格のコンジュゲート化は、「Ｈ」を若しくは「Ｈ」をオプション的に連結した延長構造中の「Ｈ」を、活性基にて活性化し、ついで活性化された「Ｈ」を骨格の官能基にカップリングさせることにより達成できる。例えば、「Ｈ」がＧａｌα１，３Ｇａｌβ１，４ＧｌｃＮＡｃの時は、還元末端に１−Ｎグリシルイソチオシアネート（1-N glycylisotjioc yanate）をコンジュゲートすることで活性化し、ついで、骨格のアミノ基にコンジュゲートすることによって達成できる。他の適当な活性基は、７−オキサノンボルネン（7-oxanonbornene）を含むが、これを限定ずるものではない。活性化「Ｈ」にコンジュゲート化するために適当な骨格中の官能基は、１級アミン（pr imary amines）、−ＯＨ（ヒドロキシル類：hydroxyls）、−ＳＨ（スルフヒドリル類：sulfhydryls）、及び酸無水物類（anhydrides）を含むが、これらを限定するものではない。他の好適なオペラブル結合は、疎水性の連結（lipophilic association）を含んでいる。例えば、疎水性の連結は、「Ｂ」を含み、そして、疎水性分子と共有結合してリポソームに連結する「Ｈ」をもったリポソームの形成である。従って、他の好適な実施例は、末端にαガラクトシル構造を有しリポソーム中に取り込まれた「Ｂ」、又はＮ，Ｎジメチルスフィンゴシン（N,N-Di methylsphingosine）を含んでいる。好適な実施例において、「Ｂ」は非免疫原性の骨格であり、最も好ましくは、分子量が100,000ダルトン（Da）以上の非免疫原性ポリマーであり、好ましくは分子量が5,000ダルトン（Da）から100,000ダルトン（Da）のポリマーである。これらの好ましい非免疫原性ポリマーには、ポリビニルエタノールアミン群、ホリアクリルアミド群、デキストラン群、及びポリグリコマー群（polyglycomers ）が含まれる。特に好ましいポリビニルエタノールアミン群は、その分子量が、 10,000ダルトン（Da）から約14,000ダルトン（Da）の範囲にあるポリビニルエタノールアミンを含む。「Ｂ」がこのようなポリビニルエタノールアミンである時、「ｎ」は、好ましくは１〜５であり、最も好ましくは１．５〜３である、特に好ましいポリアクリルアミド群は、その分子量が約40,000ダルトン（Da）から約 60,000ダルトン（Da）の範囲にあるポリビニルエタノールアミド／アミンを含む。「Ｂ」がこのようなポリビニルエタノールアミド／アミンである時、「ｎ」は、好ましくは６〜２５であり、最も好ましくは約１１〜１９である。特に好ましいデキストラン群は、その分子量が約60,000ダルトン（Da）から約10 0,000ダルトン（Da）の範囲にあるデキストランを含み、デキストラン７０が最も好適である。「Ｂ」がこのようなデキストランポリビニルエタノールアミド／アミンである時、「ｎ」は、好ましくは約２０〜約４０であり、最も好ましくは約３０である。特に好ましいポリグリコマー群は、その分子量が約5,000ダルトン（Da）から約100,000ダルトン（Da）の範囲にあるポリグリコマーであり、そして、所定間隔で離間する２価のＧａｌα１，３ＧａｌβＤ１，４ＧｌｃＮＡｃを含有するモノマー分子（一量体）を重合させることで生成するポリグリコマー類を含む。係る重合に適したモノマー類は、７-オキサノンボルネンー「Ｈ」（7 -oxanonbornene−Ｈ）を含むが、これを限定するものではない。「Ｂ」がこのようなポリグリコマーである時、「ｎ」は、好ましくは約２０〜約４０であり、最も好ましくは約３０である。他の好適な非免疫原性の細胞抗原（cellular antigen）は、自己性の（auto logous）、協力性の（syngeneic）若しくは外因性の赤血球を含む。このような細胞抗原は、上述したような非免疫原性ポリマーと同様の方法で、「Ｈ」を例えば細胞表面蛋白質のイプシロンアミノ基にコンジュゲートすることで、コンジュゲート化することができる。一方、このような細胞抗原が、Ｇａｌα１，３Ｇａｌエピトープの発現していない自己赤血球若しくは外因性赤血球である場合には、係るエピトープを、酵素学的には、α１，３ガラクトシルトランスフェラーゼｃＤＮＡ若しくはｍＲＮＡを感作することによって、発現させることができる。他の好適な細胞抗原には、「Ｈ」に連結した協力性（syngeneic）赤血球を含むが、これを限定するものではない。「Ｂ」がこのような細胞抗原であるとき、「ｎ」は、好ましくは約100,000〜約100,000,000であり、最も好ましくは約1,000, 000〜約10,000,000である。本発明において、「Ｂ」が細胞抗原である場合の実施例のために、”共有結合（covalent linkage）”に、疎水性の連結を包含させるつもりである。疎水性の連結は、「Ｔ」を含み、そして、疎水性分子と共有結合してリポソームに連結する「Ｈ」をもったリポソームの形成である。一般に、本発明のこの態様に従う免疫寛容化合物にとって好ましい骨格「Ｂ」は、つぎの基準に従って同定することができる。第１番目は、これらは、ヒトを含む霊長類に適用された時、好ましくは非免疫原性であることである。実際には、このことは、霊長類に属する動物（ヒトを含む）の末梢血液中での候補（candidate）骨格分子に対する抗体レベルを該候補骨格分子を適用する前に測定しついでこの霊長類に属する動物に対してこの候補骨格分子を適用すること、候補骨格分子適用後に、この骨格分子に対する抗体レベルを測定すること、及び候補骨格分子を適用した後の抗体レベルを、適用前の抗体レベルと比較することによって評価することができる。好ましい候補骨格（ candidates）は、候補骨格分子に対する抗体レベルが有意に増加することを引き起こすことはないであろう。第２番目は、好ましい非免疫原性の骨格は、活性化した「Ｈ」とコンジュゲート化できる適当な官能基をもっていることである。実際には、「Ｈ」分子を活性化し、「Ｂ」に対してコンジュゲート化を試み、このコンジュゲート化が成功したか否かを決定することで、評価することができる。前記決定は、「Ｈ」を放射ラベル化し、コンジュゲート化した反応混合物の中に存在する放射活性化されたコンジュゲートの分子サイズを評価するという方法にて実施することができる。第３番目は、好ましい非免疫原性の骨格には毒性が全くなくて、霊長類（ヒトを含む）に対して安全に適用できることである。最後に、「Ｈ」とコンジュゲート化された時、好ましい非免疫原性の骨格は、後述するように、霊長類動物に対してＧａｌα１，３Ｇａｌエピトープに対する免疫寛容状態を誘導するコンプレックス（化合物）を形成することである。一方、「Ｂ」はまた、Ｔ細胞及びＢ細胞に対してサイトトキシックであるか又はＴ細胞及びＢ細胞の機能をダウンモジュレートする試薬（agent）を表している。本発明のこの態様に従う好適な試薬「Ｂ」は、ＤＭＳ、抗ＩｇＭ、疎水性トキシン類（lipophilic toxins）、ラジオアイソトープ類、ジフテリア毒素（d iphtheria toxin）及びリシンＡ鎖を含むが、限定するものではない。本発明に従う他の態様において、「Ｂ」は免疫原性のキャリアーである。該免疫原性のキャリアーとしては、免疫原性蛋白質、脂質、炭水化物、及びブタ細胞や家兎赤血球のような細胞を含むが、これらを限定するものではない。本発明のこの態様に従う免疫寛容化合物はまた、薬剤学的に容認できるキャリアー（carriers）、賦形剤（diluents）及び／又は溶出調整剤（controlled r elease agents）を含んでいてもよい。かかるキャリアー、賦形剤及び／又は溶出調整剤を若干例示すると、緩衝化した生理食塩水、オイル、埋込みポンプ、及びカプセルに詰めたビーズを含むが、これに限定されるものではない。本発明のこの第１態様に従う方法は、第１動物において、第２動物から得た移植体に存在するＧａｌα１，３ＧａＩエピトープに対する寛容状態を促進し、これにより、移植体の超急性拒絶（ＨＡＲ）を防止する。特に好適な実施例において、前記第１動物はヒトであり、前記第２動物はブタである。本発明のこの態様に従う方法は、第１動物に、本発明に係る免疫寛容性化合物（tolerogenic co mposition）の寛容量（tolerogenic amount）を適用することを含む。この適用は、経口適用、静脈適用、筋内適用、皮下適用、鼻内適用、皮内適用、若しくは座薬経路を介するか、あるいは埋込み適用による。最初に適用するために、適用量は、動物サイズと使用する特定の免疫寛容化合物のハプテン密度に依存するであろう。一般的に述べると、最初の投与量は、好ましくは、体重２５ｋｇ当たり約０．１〜１０ｇの範囲であり、最も好ましくは、１ｇ／２５ｋｇである。投与量の範囲は、特定された個々の動物において得られる応答に基づき適正化されるであろう。例えば、ある場合には、一回の注射にて免疫寛容を十分に誘導するかもしれない。他の場合には、１日量を複数に分割して適用するかもしれないし、免疫寛容を観察してこれに比例して適用量を減量するかもしれない。Ｇａｌα１，３Ｇａｌエピトープに対する免疫寛容を獲得していない特異的な細胞は、化学療法剤の適用により除去することができる。このことは、本発明の第３態様において記載する。免疫寛容は、好適には、Ｇａｌα１，３Ｇａｌエピトープに対して特異的な抗体を用いた標準的免疫測定法でモニターされる。特定すれば、ＥＬＩＳＰＯＴアッセイは、αＧａｌ分泌Ｂ細胞の出現頻度（frequency）を測定することにより実施される。ここで使用する”免疫寛容”とは、Ｇａｌα１，３Ｇａｌエピトープに対して特異的な免疫応答が、本発明の係る方法を適用していなかった時に得られるであろうレベルよりもさらに低いレベルにまで減少することを意味している。この免疫応答の減少は、体液性、細胞性若しくはその両方である。かかる免疫寛容は、例えばＧａｌα１，３Ｇａｌエピトープに特異的な抗体量の減少を定量することにより測定できる。好適には、この免疫寛容は、この抗体量を、９０％又はそれ以上、最も好ましくは９９％〜１００％、減少させるように導くことができる。免疫寛容の状態は、例えば外因性（異種）骨髄を移植するような、外因性（異種）組織の移植によって追認することができる。一度このような免疫寛容が獲得されると、臓器移植体、細胞移植体のいずれかの形態で存在させる、又は細胞性及び／又は可溶性免疫寛容原(tolerogen)を所定間隔で繰り返し免疫寛容することで、組織関与の若しくは可溶性Ｇａｌα１，３Ｇａｌエピトープの継続的な存在を維持させることができる。第２番目の態様において、本発明は、Ｇａｌα１，３Ｇａｌエピトープに特異的なＢ細胞のアポプトーシス（apoptosis）を誘導する方法及びこの方法に使用する免疫寛容化合物の提供にある。本発明のこの態様に従う免疫寛容化合物は、つぎの構造を含む。Ｈｎ−Ｔここで、「Ｈ」は、本発明の第１番目の態様において記載のＧａｌα１，３Ｇａ１エピトープを含むハプテンを表しており、「Ｔ」は、Ｔ細胞及びＢ細胞に対してサイトトキシックである、又はＴ細胞及びＢ細胞の機能をダウンモジュレートする試薬（agent）を表しており、「−」はオペラブル結合（operable linkage ）を表しており、そして「ｎ」は１から1,000までの整数を表している。本発明のこの態様に従う好適なサイトトキシックな試薬「Ｔ」は、セラミド、抗ＩｇＭ、ＤＭＳのような疎水性トキシン類（lipophilic toxins）、ＴＭＳ、セラミド類似体、Ｔｃや¹³¹Ｉや⁹⁰Ｙｔのようなラジオアイソトープ（放射同位体：radioisotope）、ジフテリア毒素（diphtheria toxin）、リシンＡ鎖及びドキソルビシン（doxorubicin）を含むが、これらを限定するものではない。オペラブル結合は、「Ｈ」と「Ｔ」間の連結を含んでおり、この連結は、「Ｈ」に働き掛けさせて、Ｇａｌα１，３Ｇａｌエピトープに特異的であるＢ細胞又はＴ細胞を攻撃させる。好適な一オペラブル結合は、「Ｈ」と「Ｔ」間をダイレクトに結合する共有結合である。このタイプの結合は、「Ｈ」を活性化し、活性化された「Ｈ」を、「Ｔ」上の適当な官能基にカップリングすることにより形成することができる。一方、「Ｈ」は、「Ｔ」に対して、「Ｈ」と「Ｔ」をキャリアー分子にカップリングすることを介した間接的な共有結合にてコンジュゲート化されているかもしれない。この実施例において、好適なキャリアー分子は、ネオグリコプロテイン（neoglycoproteins）、牛血清アルブミン（ＢＳＡ）又はヒト血清アルブミンのような糖蛋白質、イムノグロブリンのような他の糖蛋白質、インターロイキン類、ＨＤＰＥ及びセラミドのような糖脂質類と同様、前記ネオグリコプロテイン若しくは糖蛋白質、及びポリグリコマー類のような合成キャリアーを含むが、これらを限定するものではない。「Ｈ」及び「Ｔ」間の直接的及び間接的な共有結合の両方は、本発明の第１番目の態様に従う化合物で述べた方法で形成することができる。他の好適なオペラブル結合は、疎水性の連結を（lipophilic association）含んでいる。例えば、疎水性の連結は、「Ｔ」を含み、そして、疎水性分子と共有結合してリポソームに連結する「Ｈ」をもったリポソームの形成である。このような疎水性分子は、ホスファチジルコリン、コレステロールとホスファチジルエタノールアミン、及びシアリルラクトＮＡｃ−ＨＤＰＥ（sialyllacNAc-HDPE ）のような合成ネオグリコリヒド類（neoglycilipids）を含むが、これらを限定するものではない。オペラブル結合として疎水性の連結を有する特に好適な実施例において、「Ｔ」は、セラミドペンタヘキソサイドのような、セラミドである、この実施例においては、ＰＫＣが機能している時、アポプトーシス（apopto sis）を促進させるために、スフィンゴシンのような、そして最も好適にはＮ，Ｎ−ジメチルスフィンゴシン（ＤＭＳ）若しくはＮ，Ｎ，Ｎ−トリメチルスフィンゴシン（ＴＭＳ）の如き、ＰＫＣ又はＢｃｌ−２の阻害剤をさらに含むことがある。ある好適な実施例において、例えば「Ｈ」が一方のリポソームに連結しておりそして「Ｔ」が他のリポソームに連結している時は、オペラブル連結（oper ahle association）は、物理的な連結ではなくて単にリポソームボデー中に共存しているだけである。「Ｈ」に対して特異的なＴ細胞に、アポップトーシス（ap optos is）を誘導するため、この態様に従う免疫寛容化合物は、さらに、Ｔ細胞のレセプターに結合するペプチド若しくは蛋白質に対してオパラブリーに結合されているかもしれない。本発明の第２番目の態様はまた、第１動物において、第２動物から得た移植体に存在するＧａｌα１，３Ｇａｌエピトープに対する寛容状態を促進し、これにより、移植体の超急性拒絶（ＨＡＲ）を防止する方法を提供する。特に好適な実施例において、第１動物がヒトであり、第２動物がブタである。本発明のこの態様に従う方法は、第１動物に、本発明のこの態様に係る免疫寛容性化合物（tole rogenic composition）の寛容量（tolerogenic amount）を適用することを含む、適用方法、適用量及びモニター波、本発明の第１番目の態様に従う方法において全て記載した。第３番目の態様において、本発明は、第２動物から得た移植体に存在するＧａｌα１，３Ｇａｌエピトープに対する寛容状態を第１動物において促進し、これにより、移植体の超急性拒絶（ＨＡＲ）を防止するさらにもう１つの方法を提供する。特に好適な実施例にあっては、第１動物がヒトであり、第２動物がブタである。本発明のこの態様に従う方法は、第１動物に対して、つぎに示す構造をもった免疫原性化合物を適用することを含んでいる。Ｈｎ−Ｉここで、［Ｈ］は、本発明の第１の態様で述べたＧａｌα１，３Ｇａｌエピトープを含むハプテンを表しており、「Ｉ」は免疫原性のキャリアーを表しており、「−」はオペラブル結合（operable linkage）を表しており、「ｎ」は１から10 ,000までの整数を表しており、そして動物は化学療法剤にて処置されている。免疫原性化合物にさらすと、「Ｈ」に対して特異的な記憶Ｂ細胞（memory B cells ）ならびに未熟Ｂ細胞の分化を引き起こし、これらの細胞を化学療法剤に対して感受性（Sensitive）にする。本発明のこの態様に従えば、「Ｈ」は、本発明の第１番目の態様において記載したとおりであり、オペラブル結合は、本発明の第２番目の態様において記載したとおりである。特に好適な免疫原性分子種「Ｉ」は、家兎赤血球膜ような免疫原性脂質類、分子量が100,000ダルトン以上のデキストランポリマーのような免疫原性炭水化物、ＢＳＡ，ＫＬＨ，コレラ毒素Ｂのサブユニットのごとき蛋白質、及び分子量が100,000ダルトン（Da）以上のポリマーを含んでいるが、これらに限定されるものではない。好適な化学療法剤は、シクロホスファミド、レフルノミド（leflunomide）、マイコフェノレートモフェティル（mycophenolate mofetil）、ドキソルビシン（doxorubicin）、２，３-ジデオキシイノシン（2,3-dideoxyinosine）、クロラムビシル（chlorambucil）、ステロイドホルモン、アドリアマイシン、ブッレキナー誘導体（brequinar analogs）、及びメルファラン（melphalan）を含んでいるが、これらに限定されるものではない。本発明のこの態様に従う免疫原性化合物は、好適には、アジュバント存在下で適用されるか、或いは、アジュバンドなしで外因性のリンパ球（lymphocytes）若しくは骨髄細胞とともに適用される。好適なアジュバント（adjuvant）は、アルミ（alum）、リビ（RIBI）アジュバント、及びフロイント完全アジュバントを含むが、これらに限定されるものではない、好適な外因性リンパ球（lymphocytes）若しくは骨髄細胞は、第２動物から採取した各細胞である。本明細書に記載の各方法を行うために、Ｇａｌα１，３Ｇａ１エピトープに特異的なプラズマ細胞を除去させるべく、プラズマ細胞を枯渇処理ずることが好ましい、好適には、このようなプラズマ細胞の枯渇処理は、抗ＣＤ３８イムノトキシン、ラジオヌクリドコンジュゲート（radionuclide conjugates）、又は抗ＨＭ1.24抗体を使用する。好適な抗ＣＤ３８イムノトキシンは、リシンＡ鎖、ジフテリア毒素Ａ鎖、及びサポニンを含むが、これらを限定するものではない。好適なラジオヌクリドコンジュゲート（radionuclide conjugates）は、Ｔｃ、¹³¹ Ｉ、⁹⁰Ｙｔのような放射同位体（radioisotope）を含むが、これらを限定するものではない。好適実施例：前記方法はさらに、提供（donor）動物から得た移植体を受領（recipient）動物に導入することを含む。提供動物は前記第２の動物であり、例えばブタ（sw ine）のようにＧａｌα（１，３）Ｇａｌ部分を常時発現する種、例えばミニブタ（miniature swine）のようにα１，３ガラクトシルトランスフェラーゼ活性を発現する種である。前記方法は、提供動物から得た例えば肝臓若しくは腎臓のような器官を血液環流することによって、あるいは、不溶性の基質にカップリングさせたガラクトシルα（１，３）ガラクトース部を受領動物の血液に接触させることで、ＸＮＡｓを発現するＢ細胞の活性を阻害する薬物（例えばデオキシスベルグアリン（de oxyspergualin）、ＤＳＧ、ブリストール（bristol））を適用する、若しくは受領動物の抗ＩｇＭ抗体を適用することによって、受領動物の血液からＸＮＡｓを除くことを含む。さらにまた、前記方法は、第２の提供動物から得た移植体に対する免疫寛容状態を、第１の受領動物に、誘導する方法に特色がある。この方法は、造血幹細胞（hematopoietic stem cells）を例えば静脈注射にて受領動物に導入する工程と、（オクションであるが）受領動物のナチュラルキラー細胞を不活化する工程と、好適には受領動物内に移植体を埋め込む工程を含んでいる。造血幹細胞（he matopoietic stem cells）は、Ｂ細胞及びＴ細胞のレベルにおいて、その免疫寛容を誘導し若しくは維持することにより、受領動物に移植体を受け入れる準備をさせると信じられている。前記方法は、造血スペース(hematopoiteic space)を創出して、導入された造血幹細胞を受領動物の移植体に植え付けろようにすることを含んでいる、もし造血スペースを創り出す必要があれば、骨随細胞を枯渇させる抗体又は薬剤を適用する。例えばＤＳＧのような細胞増殖の阻害剤、又は例えばブレキナー（Breq uinar）のような抗代謝物、又は抗ＣＤ４抗体か抗ＣＤ８抗体のうちのどちら一方若しくはその両方のような抗Ｔ細胞抗体を適用することによって実施される。造血スベースはまた、受領動物に例えば約１００〜４００ラド（rads）の範囲にある低量の放射線を照射ずることにより創り出すことができ、全身照射ずると受領動物の骨髄細胞を枯渇又は部分的に枯渇させることができる。造血スペースを創り出すことは、受領動物の骨髄細胞を全て除去（ablate）することではなく、混合型のキメラ状態を創出することである。造血スペースの必要性は、受領動物中に胸腺スペース（thymic space）を創出することによって最小化できる。他の好適な実施例は、例えば受領動物の胸腺に例えば１００〜１０００、より好適には３００〜７００、例えば７００ラド（rad）を照射するという、放射線照射によって、又は、胸腺細胞を不活化するために十分量の抗Ｔ細胞抗体を適用することによって、受領動物に胸腺スペースを創出するステップを含んでいる。胸腺スペースを創出する他の方法は、ステロイド、コルチコステロイド、ブレキナー（Brequinar）、又はラパマイシン（rapamycin）、シクロスポリン（cycl osporin）、若しくはＦＫ５０６のような免疫抑制剤の適用を含んでいる。胸腺スペースを創り出す方法は、米国仮特許出願第６０／０１７，０９９号に開示されており、ここにレファレンスとして引用する。ここで開示する本発明に係る方法は、米国仮出願第６０／０１７，０９９号に開示された方法に組み合わせて実施することができる。他の好適な実施例における方法は、例えば受領細胞若しくは移植体を受領動物に導入する前に、受領動物のＴ細胞と結合する抗体をその受領動物に導入することにより、当該動物のＴ細胞を不活化することを含んでいる。好適な実施例において、当該方法は、例えば受領細胞若しくは移植体を受領動物に導入する前に、受領動物にこの動物のナチュラルキラー細胞（ＮＫ細胞）と結合する抗体を導入することによって、当該動物のナチュラルキラー細胞を不活化ずることを含んでいる抗ＮＫ細胞抗体の１ソースは、抗ヒト胸腺細胞ポリクロナル抗血清である。以下で述べるように、好ましくは、第２の抗成熟Ｔ細胞抗体を適用することができ、この抗体は、ＮＫ細胞と同様、Ｔ細胞をもリシス（lyses）する。Ｔ細胞をリシスすることは、骨髄細胞と移植体の両方を生存維持するために有効である、抗Ｔ細胞抗体は、抗胸腺細胞抗血清中に、抗ＮＫ細胞抗体と共に存在している、抗ＮＫ細胞又は抗Ｔ細胞抗体を繰り返し適用することが好ましい。モノクロナール抗体標品を、本発明の方法に使用することができる。ここに記載された方法は、１９９４年６月２７日付で出願の米国特許出願第０８／２６６，４２７号に記載された免疫寛容誘導方法に組み合わせることができる。この公報に記載された内容を、ここにレファレンスとして引用する。それ故、本発明として開示する方法は、提供側のＭＨＣクラスＩ遺伝子若しくはＭＩＩＣクラスＩＩ遺伝子（又はその両方）を発現する受領細胞を、受領側に適用することを含む。提供側のＭＨＣ遺伝子を発現する細胞は、ガラクトースα１，３部分を発現する細胞と同一細胞であっても異なる細胞であってもよい。好適な実施例において、受領細胞又は移植体に対する免疫寛容を誘導するために簡便な処理方法を使用できる。特定すれば、この方法は、１９９５年６月１日付け出願の米国特許出願第０８／４５８，７２０号に記載されており、その内容をここにレファレンスとして引用する。本発明として開示する方法に組合わせできる。好適な実施例において、受領動物にＴ細胞活性を抑制するために簡便な免疫抑制剤の適用法が使用される。特に、１９９５年６月１日付け出願の米国特許出願第０８／４５８，７２０号に記載されており、その内容をここにレファレンスとして引用する方法は、本発明が開示する方法に組合わせることができる。本発明による免疫寛容誘導方法はまた、つぎに示す他の免疫寛容を誘導する方法と組み合わせすることができる。・免疫寛容を誘導する提供側の幹細胞（stem cells）を移植する方法であり、この方法は、例えば１９９５年５月２６日付け出願の米国特許出願第０８／４５１，２１０号に記載されており、その内容をここにレファレンスとして引用する。・遺伝子工学的に操作したブタの幹細胞（stem cells）若しくは他の組織を使用ずる方法であり、遺伝子工学的に操作したブタは、例えば１９９４年８月１９日付け出願の米国特許出願第０８／２９２，５６５号に記載されており、その内容をここにレファレンスとして引用する、あるいは、１９９６年８月２日付け出願の米国特許出願第０８／６９２，８４３号に記載されており、これらの内容をともにここにレファレンスとして引用する。・免疫寛容を誘導するため、外因性の胸腺移植体を移植する方法であり、この方法は、例えば１９９３年１２月７日付け出願の米国特許出願第０８／１６３，９１２号に記載されており、その内容をここにレファレンスとして引用する。・免疫寛容促進する若しくはＧＶＨＤ阻害するサイトキニンの活性レベルを増加させるか、又は免疫寛容を阻害する若しくはＧＶＨＤを促進するサイトキニンの活性レベルを減少させる方法であり、この方法は、例えば１９９３年８月３０日付け出願の米国特許出願第０８／１１４，０７２号に記載されており、その内容をここにレファレンスとして引用する。・免疫寛容を誘導する臍帯血細胞を使用する方法であり、この方法は例えば１９９３年１１月１０日付け出願の米国特許出願第０８／１５０，７３９号に記載されており、その内容をここにレファレンスとして引用する。・ＧＶＨＤを妨害する方法であり、この方法は例えば１９９５年６月５日付け出願の米国特許出願第０８／４６１，６９３号に記載されており、その内容をここにレファレンスとしで引用する。・胸腺機能を高揚若しくは維持することによって免疫寛容を高める方法であり、この方法は、例えば１９９４年８月２６日付け出願の米国特許出願第０８／２９７，２９１号に記載されており、その内容をここにレファレンスとして引用する。・ブタレトロウイルス遺伝子配列の存在を検出する方法であり、この方法は例えば１９９５年１２月１４日付け出願の米国特許出願第０８／５７２，６４５号に記載されており、その内容をここにレファレンスとして引用する。・シークス（Syles）とサックス（Sachs）が１９９４年２月１４日付けで出願した、ＰＣＴ／ＵＳ９４／０１６１６公報に記載の、免疫寛容を誘導するための方法であり、その内容をここにレファレンスとして引用する。つぎに示す例は、本発明の好適な実施例をさらに例示するものであるが、その特性を限定するためのものではない。例１多価Ｇａｌα１，３Ｇａｌβ１，４ＧｌｃＮＡｃを含むポリグリコマーの合成Ｇａｌα１，３Ｇａｌβ１，４ＧｌｃＮＡｃトリサッカリドは、ＧｌｃＮＡｃモノマーとＧａｌモノマーから調整する。α-Ｄ-ＧｌｃＮＡｃ・４酢酸は、アルバータリサーチコンシル（エドモントン、アルバータ、カナダ国）（Albe rta Research Council:Edmonton，Alberta，Canada）より購入する。保護したＧｌｃＮＡｃ（１当量）を乾燥アセトニトリルに溶解し、４℃まで窒素下で冷却する。アリルトリメチルシラン（３．５ｍｌ、３当量）、用事蒸留した三ふっ化ほう素エチルエーテル錯体（borontrifluoride etherate）（１．８ｍｌ、２当量）及びトリメチルシリルトリフレート（trimethylsilyl triflate）（０．５６ｍｌ、０．４当量）を連続的（sequentilly）に加える。４℃にて２時間攪拌し、ついで２０℃にて２時間攪拌した後、反応混合物を４℃に冷却し、そして過剰の酸を１２ｍｌの炭酸ナトリウム溶液で希釈する。この溶液をロータリーエバポレータで濃縮し、塩化メチレン７５ｍｌで３回抽出する。合した有機層を乾燥してエバポレートする。ついで、残留物をフラッシュクロマトグラフィー法で精製する。得られた１−Ｃ−アリルＧｌｃＮＡｃを，水酸化ナトリウム-メタノール溶液（２ｍｇ／ｍｌ）で処理して脱アシル化する。残留物をシリカゲルブラグにてろ過する。生成物（１当量）を、蒸留ピリジン３０ｍｌ中に僅かに暖めながら溶解し、アルゴン雰囲気下で４℃まで冷却する、トリエチルシリルトリフレート（tr iethylsilyl triflate）（８当量）を滴下する。混合物を室温で８時間攪拌、エーテル（２００ｍｌ）にて希釈し、ついで相分離する。エーテル層を塩化アンモニウム水溶液で３回洗浄し、乾燥してエバポレートする。得られた残留物をフラッシュクロマトグラフィー法で精製すると、１−Ｃ−アリル−３，４，５−テトラ−Ｏ−トリエチル−β−Ｄ−ＧｌｃＮＡｃが得られる。この生成物（１．５ｍｍｏｌ）を塩化メチレン／メタノール（１：２）混合液１２ｍｌ中に溶解し、−７８℃に冷やす、この溶液にオゾンを６分間バブリングさせて溶液をオゾンで飽和させる。水素化ほう素ナトリウム（１５ｍｍｏｌ）を加え、混合物を−７８℃で１時間攪拌し、さらに３℃で１時間攪拌する。反応混合物中に塩化アンモニウム（１５ｍｌ）を加え、３℃で１時間攪拌する。ジエチルエーテル２０ｍｌを加え、水層をエーテル１５ｍｌで３回抽出する。合したエーテル層を食塩水（brine）で洗浄、硫酸マグネシウムで乾燥し、エバポレートする。粗アルコール生成物であるところの１−Ｃ−ＥｔＯＨ−３，４，５−テトラ−Ｏ−トリエチルシリル−β−Ｄ−ＧｌｃＮＡｃ（1-C-EtOH-3,4,5-tetra-O-t riethylsilyl−β-D-GlcNAc）を、フラッシュクロマトグラフィー法で精製する。４−Ｃ−ＯＨ−１，２，３，５−テトラ−Ｏ−トリエチルシリル−β−Ｄ− Ｇａｌアルコール（4-C-OH-1,2,3,5-tetra-O-triethylsilyl-β-D-Gal alcohol ）は、出発化合物がα−Ｄ−Ｇａｌ−１，２，３，５-テトラアセテート(α-D-G al-1,3,4,5-tetraacetate)であることを除けば、同様にして製造できる。アルコール生成物は、水を除去すべくトルエンとともに蒸留することで、分離できる。３−Ｃ−ＯＨ−１，２，４，５−テトラ−Ｏ−トリエチルシリル−β−Ｄ− Ｇａｌアルコール（3-C-OH-1,2,4,5-tetra-O-triethylsilyl-β-D-Gal alcohol ）は、出発化合物がβ−Ｄ−Ｇａｌ−１，２，４，５-テトラアセテート(β-D-G al-1,2,4,5-tetraacetate)であることを除けば、同様にして調整できる。１−ＯＨジサッカライド（二糖）は、上記と同様、水素化ほう素ナトリウム処理にて生成される。トリサッカライド（三糖）は、Ｇａｌとジサッカライド（二糖）間を縮合することにより生成される。トリサッカライド（三糖）アルコールは、フラッシュクロマトグラフィー法で精製される。ついで、３，６−オキシ−１，２，３，６−テトラヒドロフタル酸無水物（ 3,6-oxy-1,2,3,6-tetrahydrophtalic anhydride）（１当量）、ジメチルアミノピリジン（4-dimethylamino pyridine）（０．４当量）、及びよう化２−クロロ −１−メチルピリジニウム（2-chloro-1-methylpyridinium iodide）（１．２当量）を、１当量のトリサッカライド（三糖）アルコールに加える。フラスコ内をアルゴンで満たして塩化メチレン２．０ｍｌを加え、さらにトリプロピルアミン（３当量）を加え、ついで２２℃で１夜攪拌して溶液となす、この溶液をエーテル２０ｍｌで希釈し、エーテル層を塩化アンモニウム水溶液で２回洗浄、食塩水で２回洗浄した後、硫酸マグネシウムで乾燥してエバポレートする。ＴＥＳ保護トリサッカライド−置換モノマーをフラッシュクロマトグラフィーで精製し、ついでトルエンと共沸混合させ、ＴＨＦ７．５ｍｌに溶解する。得られた溶液を氷浴中で冷却し、ＨＦ／ピリジン混合液１ｍｌを滴下する。得られた混合物を、０ ℃で９０分攪拌し、減圧下で濃縮する。残留物をフラッシュクロマトグラフィーで精製する。得られた７−オキサノボルネン（7-oxanobornene）を、脱水した窒素ガス雰囲気下で５５−６０℃に加熱しつつ、塩化ルテニウム（ＲｕＣｌ₃.Ｈ₂ Ｏ）で重合させる、１８時間後、ゲル状生成物をアセトンで洗浄、ついでメタノールで洗浄して固体となし、これを水１０ｍｌ中に溶解、２ｍｌに濃縮してメタノール１０ｍｌで沈殿させる。余剰の溶媒を減圧下で濃縮する。例２Ｇａｌα１，３Ｇａｌβ１，４ＧｌｃＮＡｃコンジュゲートデキストランの合成デキストラン７０は、シグマ（St．Louis，MO）から購入し、ブロムシアンでポリアミンにコンバートした。Ｇａｌα１，３Ｇａｌβ１，４ＧｌｃＮＡｃトリサッカライドは、例１に記載の方法で合成し、Ｎ，Ｎ−カルボニルジイミダダゾール（N,N-carbonyl diimidadazole）との反応でイミジアゾレート化した（im idiazolated）。ついで、ＰＢＳ（ｐＨ５．０）中にて４℃でインキュベートすることによって、Ｇａｌα１，３Ｇａｌβ１，４ＧｌｃＮＡｃ−イミダダゾールを、デキストラン７０ポリアミンに、コンジュゲートさせた。Ｇａｌα１，３Ｇａｌエピトープをこのコンジュゲート分子当たり約２０〜４０個とするためには、モル比３０：１が使用される。例３Ｇａｌα１，３Ｇａｌβ１，４ＧｌｃＮＡｃ／セラミド／スフィンゴシンリポソームの調整Ｇａｌα１，３Ｇａｌβ１，４ＧｌｃＮＡｃ-リピド（ＨＤＰＥ）は、デキストララボ（Reading，UK）から購入する。セラミドペンタヘキソシド（cer anide pentahexoside）は、家兎赤血球膜から、クロロホルム／メタノール混合液（２：１，ついで１：１，ついで１：２）で抽出した後、容積７．５ｍｌのＣ１８カラムを用い、クロロホルム／メタノール（１：１）を溶出液とする逆相高速液体クロマト（ＲＰＬＣ）にて精製する。各フラクション（１ｍｌ）を得、オルシノール反応で染色しでモニターする。Ｎ，Ｎ，−ジメチルスフィンゴシン（ＤＭＳ）は、カルビオケミ社（Calbiochem：La Jolla,CA）から購入した。これらの分子類は、約０．５％〜２５％のＧａｌα１，３Ｇａｌβ１，４ＧｌｃＮＡｃ-リピド、０．５％〜１０％のセラミドペンタヘキソシド、及び０．５％〜１０％のＤＭＳを含有するリポソームの形成に使用した。凍結乾燥し、ついで、凍結溶解及び高圧若しくは透析リポソーム形成により達成される。例４ポリビニルエタノールアミン−Ｇａｌα１，３Ｇａｌβ１，４ＧｌｃＮＡｃコンジュゲートの調整ポリビニルエタノールアミン（ＰＶＥ、分子量＝１０，０００〜１４，０００）はシグマ社から購入した。Ｇａｌα１，３Ｇａｌβ１，４ＧｌｃＮＡｃは、例２に記載の方法で活性化した。ＰＶＥ及び活性化した三糖を、モル比１；２〜１：１０で、１〜２時間室温（２０〜３７℃）にてインキュベートし、１分子当たり１．５〜３個のＧａｌα１，３Ｇａｌエピトープをもったコンジュゲートを得た。例５抗Ｇａｌ抗体分泌Ｂ細胞を測定するためのＥＬＩＳＰＯＴアッセイ法の開発免疫寛容誘導を目的とした実験が，抗Ｇａｌ抗体産生にどのように影響するかを測定するため、ＥＬＩＳＰＯＴアッセイ法を開発した。この方法は、インビトロ系で１夜細胞培養したときのＢ細胞による抗Ｇａｌ抗体産生を測定するものであった。この測定法は、人工ネオグリコプロテイン−コートマイクロウエルに、各細胞が分泌した抗体を結合させて検出することに基づいている。この方法の本質は、リンパ球、若しくは様々な組織から得たＢ細胞含有量の高いリンパ標品を分離することであった。これらの細胞は、インシュリン、トランスフェリン、及びセレニウム（selenium）を含有するハイブリドーマ培養培地を培地として、牛胎児血清存在下又は不存在下にマイクロウエル中でインキュベートされる。ある場合には、細胞は、、抗原をコートしたニトロセルロース底マイクロタイターウエル中に直ちに移された。又は、細胞は、抗原コートマイクロウエルに加える前に、異なったサイトキニン類及び／又は抗体と３日間以上インキュベートされた。抗原をコートしたマイクロ（タイター）ウエル中で一夜インキュベートした後に、細胞を洗い流し、そして、西洋わさび由来ベルオキシダーゼを標識したヤギ抗マウスＩｇＧ抗体、若しくは西洋わさび由来ベルオキシダーゼを標識したヤギＩｇＭ抗体を添加した。インキュベートして上記第２試薬（コンジュゲート）を除去した後、ベルオキシダーゼの基質を添加した。スポットとして発色させると、抗原に特異的な抗体を分泌するクローンを示すスポットが得られる。各抗原特異的なクローンは、スポット形成ユニット（ＳＦＵ）として表される。抗体分泌細胞の頻度（frequency）は、前記マイクロウエルに添加された細胞、１０⁵個当たりの数として算定される。本開発（studies）では、ＧａｌＴ（-/-）マウスを、Ｇａｌα１，３Ｇａｌ特異的ＸＮＡをもったモデルマウスとして使用した。ガラクトシルトランスフェラーゼ遺伝子がノックアウト（knockout）された胎児性幹細胞(embryonic stem cell)がある。得られた結果は、Ｇａｌα１，３Ｇａｌに特異的なＸＮＡを示すマウスのものである。特に、方法論は以下の通りである。マイクロタイタープレート（Millipore 96-well filtration plate,0.45μm surfactant-free mixed cellulose Ester membrane,Qyt:10/pack,Cat♯MAHAS45 10）を、ウエル当たり１００μｌのαＧａｌ−ＢＳＡの１ｘＰＢＳ溶液（５μｇ／ｍｌ）、及び／又はウエル当たり１００μｌの未標識ＩｇＭ及びＩｇＧ抗体の１ｘＰＢＳ溶液（５μｇ／ｍｌ）にて無菌的にコートした。適当なコントロール、例えばＮ−アセチルラクトサミン-ＢＳＡを含んでいた。コートしたプレートを、４℃で一晩又は３７℃で２時間、インキュベートした。インキュベートした後、抗原溶液を無菌的にプレートよりピペット除去した。このプレートを、ウエル当たり２００μｌの１ｘＰＢＳを使用してピペッティング洗浄した（５分間静置しついで溶液をピぺッティングにて除去した）。各ウエルを、ウエル当たり２００μｌのＰＢＳで洗浄し、そして、１ｘＰＢＳを使用して上下方向にピペッティングした。ついで、０．４％ＢＳＡ及びゲンタマイシン１ｍｌ／５００ｍｌでサプリメントとしたＩＭＤＭ培地（Iscove'ｓ Modified Dulbecco's Medium）、２００μｌ／ウエルの割合で加え、そして３７℃で１時間インキュベートすることで、マイクロタイターのウエルを非特異的な抗体結合によってブロックした。ブロッキング媒体は、ピペッティグで除去した。細胞培養培地を２００μｌ／ウエルの割合で列Ｂ−Ｄ及び列Ｆ−Ｈに加えた、この細胞培養培地は、１０％牛胎児血清を含むＩＭＤＭ培地として調整されている。ついで、牌臓細胞をｍｌ当たり４ｘ１０⁶個の割合で含む細胞標品を、ウエル当たり２５０μｌの割合で加えた。各ウエルを１／５の割合となるように段階希釈した。すなわち、列Ａから５０μｌ取り出し列Ｂに移し、列Ｂから５０μｌ取り出し列Ｃに移し、同様に列Ｃから列Ｄに移した。最後に列Ｄから５０μｌ取り出してこれを破棄し、各ウエルに２００μｌを含むようにした。この希釈方法を、列Ｅから列Ｈに適用した。プレートを、５％ＣＯ₂雰囲気下、３７℃で一夜インキュベートした。インキュベーションについで、プレートの内容物を投げ捨てそして軽く叩いて空っぽにした。ついで、ウエル当たり２００μｌの１ｘＰＢＳで３回洗浄した、最初の２回は、膜に付着した細胞の除去するためとバックグランドを低減するために、上下にピペッティングした。ついで、プレートを、ウエル当たり２００μｌの０．１％ツイン２０含有の１ｘＰＢＳで３回洗浄した。つぎに、抗マウスＩｇＧ抗体のＨＲＰコンジュゲート又は抗マウスＩｇＭ抗体のＨＲＰコンジュゲートをウエル当たり１０μｌの割合で加え、０．５％ツイン及び０．４％ＢＳＡをサブリメントした１ｘＰＢＳにて１／１０００に希釈した。ついで、内容物を投げ捨てそして軽く叩いて空っぽにした。ついで、プレートを、ウエル当たり２００μｌの０．１％ツイン２０含有１ｘＰＢＳで３回洗浄し、さらにウエル当たり２００μｌの１ｘＰＢＳで３回洗浄した。基質溶液をウエル当たり１００μｌの割合で加え、室温で３０分間インキュベートした。基質溶液は、２．５ｍｌのジメチルフォルムアミド（ＤＭＦ）中に、１個のＡＥＣ錠（3-amino-9-ethylcarbazole：シグマ社製、Ａ−６９２６）を溶解して調整した、錠剤を溶かした後、５０ｍＭ酢酸緩衝液、ｐＨ５．０（７４ｍｌの０．２Ｎ酢酸及び１７６ｍｌの０．２Ｍ酢酸ナトリウムの混合液に、脱イオン水を加えて全量を１，０００ｍｌとしたもの）を４７，５ｍｌ加えた。プレートにこの基質液を添加する前に、用事調整した３％Ｈ₂Ｏ₂を２５μｌ加えた。プレートに水道水を流し込むことで反応を停止させ、ウエル中の水を流しに投げ捨て、軽く叩き、そして吸い取った。プレートのプラスチック底部分を取り外し、Ｃホールドタオルの上に置いた。プレートをアルミニウム箔で包み込み、１日から２日間室温で乾燥した。スポットは、実体顕微鏡（stereomicroscopy）で観察され、垂直方向の白色光を照射して分析された。スポットは、ウエル当たりの、拡散リングをもった暗中心の数としてカウントした。３重測定の平均値を得、８で割って細胞１０⁶個当たりのＳＦＵ（Spot Forming Units）値を求めた。例えば、 4.0x10⁶細胞／ml x 0.2ml/ウエル＝8.0x10⁵細胞／ウエル１／５倍希釈＝1.6x10⁵細胞／ウエル１／５倍希釈＝3.2x10⁴細胞／ウエル１／５倍希釈＝1.6x10³細胞／ウエルＧａｌα１，３Ｇａｌエピトープに対する抗ＧａｌＥＬＩＳＰＯＴ法の特異性は、例えばＢＳＡにコンジュゲートしたラクト−Ｎ−フコペンタオス（ＬＮＦＰ）若しくはＮ−アセチルラクトサミン（ＬａｃＮＡｃ）のような、末端にＧａｌα１，３Ｇａｌを有するものでコートしたプレート中で、ＧａＬ（-/-）脾臓細胞又は凍結ヒヒ脾臓細胞のいずれかとともに、一夜インキュベートすることにより証明した。特定のスポット形成は、ヒヒ脾臓細胞をＧａｌα１，３Ｇａｌにリンクさせたネオグリコプロテイン上で培養したとき、バックグランドに対してのみ有意であった（図１）。ＧａｌＴ（-/-）マウス脾臓細胞を使用した抗ＧａｌＥＬＩＳＰＯＴの特異性もまた、ヒヒ脾臓ＥＬＩＳＰＯＴのデータ（図２）と同様な方法で示された。これらの実験結果は、このＥＬＩＳＰＯＴアッセイ法が、抗Ｇａｌ抗体を分泌するプラズマ細胞の頻度検出に極めて特異的であることを示した。それ故、このＥＬＩＳＰＯＴアッセイ法は、以後の多くの実験において、Ｂ細胞による抗Ｇａｌ抗体産生状態を決定するための基礎として活用されている。例６免疫原感作とこれに続く代謝阻害によって創出される、Ｂ細胞の脱免疫応答（hy poresponsiveness）の誘導血清から抗Ｇａｌα１，３Ｇａｌ抗体を枯渇するために現在使用されているプロトコールは、これらナチュラル抗体の産生に影響を及ぼさない。ブタ骨髄細胞はＧａｌα１，３Ｇａｌエピトープを発現しているため、これら抗体を継続産生することは、骨髄細胞の継代と生存に対して有害であると考えられる。抗Ｇａｌα１，３Ｇａｌ抗体の産生がスタンダード条件摂生（standard conditioning regimen）に難治である理由を説明するであろう一仮説によれば、条件摂生時に（at the time of conditioning）、Ｇａｌα１，３Ｇａｌエピトープにて活性化されるＢ細胞の一部分のみが刺激されるということである。そのため、活性化されなかった他のＢ細胞は、デオキシスペルグアリン（deoxyspergualin）のような試薬にて代謝阻害を逃れ、そしてついで遭遇する抗原によって、抗体分泌細胞に分化するように刺激させ得る。この問題にアプローチする１つの方法は、抗Ｇａｌα１，３Ｇａｌ抗体産生Ｂ細胞の細胞表面を過度に刺激することである。過度に刺激すると、これら細胞に対して抗原誘導分化をもたらすであろう。これらＢ細胞がひとたび細胞周期に入りＤＮＡ合成を開始し始めると、シクロホスファミドのようなＤＮＡアルキル化試薬に対して反応し易く（sensitive）なる。この仮説を検討するため、α１，３ガラクトシルトランスフェラーゼ遺伝子の活性を除去するために遺伝操作された、ＧａｌＴ（-/-）マウスを使用した、。これらのマウスは、ナチュラルな抗Ｇａｌα１，３Ｇａｌ抗体を産生する。そのため、Ｇａｌα１，３Ｇａｌエピトープに対する免疫寛容を評価するための小動物モデルとして使用することができる。特定の方法は、以下の通りである。：５０％フロイント完全アジュバント／ＰＢＳ中に、５０μｇ／３００ｍｌとなるように懸濁した１分子当たり１７個のＧａｌα１，３Ｇａｌβ１，４ＧｌｃＮＡｃ構造をもつＧａｌα１，３Ｇａｌ−ＢＳＡ（アルバータリサーチカウンシル社製：Alber-ta Research Council）懸濁液を、腹腔内に注射し、この日を０日目とした。Ｇａｌα１，３Ｇａｌ−ＢＳＡを腹腔内に注射した後、２時間目、１日目、２日目、３日目、４日目に、ｋｇ当たり２００ｍｇ相当のシクロホスファミド（シダマ社製）を均質（single bolus）に含むＰＢＳ２００μｌを腹腔内に注射した。コントロールマウスは、シクロホスファミド単独若しくはＧａｌα１，３Ｇａｌ−ＢＳＡ単独のいずれかが投与されたものである。７日目すなわちＧａｌα１，３Ｇａｌ−ＢＳＡ投与後１週間目後に、ブタＰＢＭＣ１０⁷ 個を腹腔内に注入した。三匹づつのマウスが、シクロホスファミドの各投与時に、使用された。血清は、ＧａｌＴ（-/-）又はワイルドマウスの尾静脈から、０日目（免疫原注射前）、７日目（ブタＰＢＭＣチャレンジ前）、及び１４日目と２１日目（すなわち、ブタＰＢＭＣを注射した後１週間目と２週間目）に採取された。抗Ｇａｌα１，３Ｇａｌ抗体に対する抗ブタ応答を、２１日目に採決した血清を、上述したフローサイトメトリック分析法にて測定した。抗Ｇａｌα１，３Ｇａｌ抗体の血清レベルは、ＥＬＩＳＡ法を用いて測定した。Ｂ細胞のインビボで抗Ｇａｌα１，３Ｇａｌ抗体分泌体として成熟するＢ細胞の能力を阻害するため、前記方法は、細胞表面のイムノグロブリンレセプターに抗原が結合することで先ずＢ細胞が刺激され有糸分裂するように工夫された。この抗原刺激の後に、シクロホスファミドの多量を単一適用することによりＤＮＡ合成を阻害した、Ｇａｌα１，３Ｇａ１−ＢＳＡによる抗原刺激についで、タイムコースに従って、ＧａｌＴ（-/-）マウスにシクロホスファミドを単一腹腔内注射した。抗原刺激した後の７日目に、ブタＰＢＭＣを当該マウスの腹腔内に注射し、マウスの血清内抗Ｇａｌα１，３Ｇａｌ抗体産生能を、ＥＬＩＳＡ法で測定した。これらの結果は、抗原刺激後、３日目又は４日目ではなく１日目−２日目にシクロホスファミドを適用すると、ブタＰＢＭＣに応答する抗Ｇａｌα１，３Ｇａｌ抗体ＩｇＭ及びＩｇＧ抗体の両方を抑制することを示している（図３）。ブタＰＭＢＣに応答する抗Ｇａｌα１，３Ｇａｌ抗体の産生の阻害が、Ｇａｌα１，３Ｇａｌ−ＢＳＡによる抗原刺激の結果起こるものであるかどうかを検討するため、Ｇａｌα１，３Ｇａｌ−ＢＳＡを注射しない実験を行った。抗原刺激のない場合には、抗Ｇａｌα１，３Ｇａｌ抗体産生の阻害は認められなかった（図４）。ブタＰＭＢＣ注射後２週間目に採取した血清サンプルを、ブタ抗原との反応性を検討するために、フローサイトメトリー法で分析した。Ｇａｌα１，３Ｇａｌ−ＢＳＡを適用したマウスにおいて、ブタＰＢＭＣによる刺激後、すなわちＣＹＰを投与しないコントロールの、抗Ｇａｌα１，３Ｇａｌ抗体ＩｇＭ画分は約８０％であり；抗ＩＧａｌα１，３ＧａｌＩｇＧ抗体は非常に少なかった（図５）。抗原刺激後１日目又は２日目にシクロホスファミド処理したマウスより採取したサンプルの分析は、抗ブタＩｇＭ抗体の全体的なレベルは減少したこと、及びサンプル中の非Ｇａｌα１，３ＧａｌＩｇＭは変化しないことを示した。この結果が示していることは、（ａ）抗ブタ抗体応答の減少は、Ｂ細胞の大部分が抗原刺激前にＧａｌα１，３Ｇａｌに反応性があることを反映していること、及び（ｂ）抗Ｇａｌα１，３ＧａｌＩｇＭ応答が特異的に減少していること、である。４日目にシクロホスファミド処理したマウスから採取した検体は、Ｇａｌ α１，３Ｇａｌに特異的な抗ブタ抗体画分がコントロールよりも増加したことを証明しており、このことは、抗Ｇａｌα１，３Ｇａｌ応答のアクティブな刺激があったことを示唆している。シクロホスファミド単独処理した（すなわち、Ｇａｌα１，３Ｇａｌ−ＢＳＡ処理していない）動物において、その後ブタＰＢＭＣ注射をすると、Ｇａｌα １，３Ｇａｌ部分に対して主に向けられたＩｇＭの応答が起きた（図６）。これらの実験は、Ｇａｌα１，３Ｇａｌ−ＢＳＡ刺激とこれに続くシクロホスファミド投与は、本来の免疫原であるブタＰＢＭＣに対して応答する、マウスの抗Ｇａｌα１，３Ｇａｌ抗体の産生能を阻害することを証明している。シクロホスファミドが抗Ｇａｌα１，３Ｇａｌ抗体分泌に対して多大な影響を及ぼすという経時的な観察は、抗原刺激に応答するＢ細胞の分化は、他のモデル系で観察されているのと同様に、比較的速いことを示唆している。ＧａｌＴ（-/-）マウスによる抗Ｇａｌα１，３Ｇａｌ抗体産生のような準備された系（primed sysyt em）において、免疫原たる抗原に対する顕著な応答は、抗原を感作した後の１週間以内に観察される。例７抗Ｇａｌ抗体の脱免疫応答（anti-Gal hyporesponsiveness）維持に及ぼす、α Ｇａｌ−ＢＳＡバルスと組合わせたシクロホスファミド投与の影響Ｂ細胞のインビボで抗Ｇａｌα１，３Ｇａｌ抗体分泌体として成熟する能力を阻害するため、前記方法は、細胞表面のイムノグロブリンレセプターに抗原が結合することで先ずＢ細胞が刺激され有糸分裂するように工夫された。この抗原刺激の後に、シクロホスファミドの多量を単一適用することによりＤＮＡ合成が阻害された。マウスに免疫寛容を誘導する実験モデルに基づいて、αＧａｌエピトープに対する脱免疫応答（hyporesponsiveness）の維持が、継続的な免疫原（すなわち、Ｇａｌα１，３Ｇａｌエピトープ）に依存しているのであろうと予測された、それ故、つぎの実験において、αＧａｌエピトープを発現する細胞に対して、ＧａｌＴ（-/-）マウス中の脱免疫応答期間の延長を誘導することが証明された。特定の方法は、つぎのとおりである。多量のαＧａｌ−ＢＳＡ（５００μｇ）を適用し、４０時間後にシクロホスファミド（２００ｍｇ／ｋｇ）を腹腔内に注射したその後、１日おきに脱会合α Ｇａｌ−ＢＳＡ（５０μｇ）をブースター適用した。上記各条件時において、上記処理マウス及びコントロールマウスより週単位で血清を採取し、マウス抗Ｇａ１抗体に特異的な抗ＧａｌＥＬＩＳＡ法で分析した。得られた結果は、図７に示すように、データポイント毎のマウス４匹の平均抗Ｇａｌ抗体産生を表している。これらのデータは、抗原による刺激とそれに続くシクロホスファミドによる代謝阻害が、ブタ細胞のαＧａｌエピトープに対するインビボでの感受性を減少させることができることを証明した。これらデータから、αＧａｌ−ＢＳＡのブースタ刺激（pulses）は、シクロホスファミド刺激のない場合、ＩｇＭから抗ＧａｌＩｇＧ抗体へのクラス変更に影響を及ぼしているものと推察された。しかしながら、抗原刺激に続きシクロホスファミド刺激をすると、ブタＰＢＭＣチャレンジに対して抗Ｇａｌ抗体ＩｇＧ応答が鈍化し、抗Ｇａｌ抗体ＩｇＭ応答が消失する結果となった。抗原刺激につぐシクロホスファミド刺激及びαＧａｌ−ＢＳＡのブースタ刺激（pulses）は、仮に２週間毎に実施したとすると、抗Ｇａｌ抗体ＩｇＭ及び抗Ｇａｌ抗体ＩｇＧ応答の両方を消失するようになるであろうことが期待された。例８Ｇａｌα１，３Ｇａｌと骨髄移植体に対する、Ｇａｌα１，３Ｇａｌ欠損マウスの免疫寛容ＧａｌＴ-/-マウスはトールらにより記載されている（Thall e al.，J．Bio l．Chem.，270:21437-21440(1995)）。これらマウスは、α１，３ガラクトシルトランスフェラーゼ遺伝子が崩壊されておりＧａｌα１，３Ｇａｌエピトープがない。これらは、ワイルドタイプ組織に対するＨＡＲをマウント（mounting）することができる。例４に従って調整したコンジュゲートを体重２５ｋｇ当たり１ｇの割合で単ショットにて腹腔内に注射し、ついで、１日おきに８日間、体重２５ｋｇ当たり０．１ｇの割合で注射した。ついで、ワイルドタイプのマウス骨髄細胞を尾静脈から移植した。この移植体は、見せかけ処理したコントロールよりも長く生存することが期待される。例９マウスモデルにおけるブタ移植体の免疫寛容Ｇａｌα１，３Ｇａｌβ１，４ＧｌｃＮＡｃ−ＢＳＡ（１７ハプテン／ＢＳＡ）は、アルバータリサーチカウンシル社（Alberta Research Council:Edm onton，Alberta，Canada）より購入した。この化合物を、５０％フロイント完全アジュバン／生理食塩水３００ｍｌ中に溶解し、その５０μｇ相当をＧａｌＴ-/ -マウスの腹腔内に注射した。Ｇａｌα１，３Ｇａ１β１，４ＧｌｃＮＡｃ−ＢＳＡを注射した後の２時間目、１日目、２日目、３日目、及び４日目に、ＰＢＳ２００μｌ中で均質化したシクロホスファミド（シグマ社製）を２００ｍｇ／ｋｇの割合でマウスに腹腔内注射した。ブタ末梢血白血球を、チャールスリバー系ミニブタ（Charles River mini-swine）より、慣用のハイバキュ（Hypaque）密度勾配分離法で調整した、Ｇａｌα１，３Ｇａｌβ１，４ＧｌｃＮＡｃ−ＢＳＡを注射した後の１週間目に、マウスにブタ末梢血白血球１０⁷個を腹腔内に注射した。Ｇａｌα１，３Ｇａｌβ１，４ＧｌｃＮＡｃ−ＢＳＡを注射する前と、ブタ骨髄細胞をチャレンジする前と、ブタ骨髄細胞をチャレンジした後１週間目及び２週間目にマウスから血清を採取した。血清をＰＢＳ中で１：２０に希釈し、Ｇａｌα１，３Ｇａｌβ１，４ＧｌｃＮＡｃ−ＢＳＡでコートしたミクロタイターウエル中に、段階的に５倍希釈した。３７℃で１時間インキュベートした後、ＰＢＳで洗浄し、ベルオキシダーゼの基質を加え、発色させた。Ｇａｌα１，３Ｇａｌβ１，４ＧｌｃＮＡｃ−ＢＳＡに対する抗体レベルを、ＯＤ測定にて定量した。Ｇａｌα１，３Ｇａｌβ１，４ＧｌｃＮＡｃ−ＢＳＡに特異的なＩｇＭ及びＩｇＧの両血清レベルは、Ｇａｌα１，３Ｇａｌβ１，４ＧｌｃＮＡｃ−ＢＳＡを注射しついでシクロホスファミド処理を行わなかったコントロールマウスの血清レベルより、又はＧａｌα１，３Ｇａ１β１，４ＧｌｃＮＡｃ−ＢＳＡを注射することなくシクロホスファミド処理を行なったコントロールマウスの血清レベルよりも、有意に低下していた、、この結果は、Ｇａｌα１，３エピトープを含む免疫原によって刺激しついで化学療法剤にて処理することで、Ｇａｌα１，３エピトープに対する免疫寛容が誘導できることを証明する。例１０ブタ移植体に対する霊長類の免疫寛容臓器移植１７日前に、成熟ヒヒに循環ループを形成するため、大動脈及び大静脈を露出させ、シリコンシャント（silastic shunt）を用いて大動脈及び大静脈にカニューレ挿入を施し、ラインをセットアップする。このラインは、製造元の指示書に従って調整した、シンソルブ９０Ｇａｌα１，３Ｇａｌアフィニティカラム（アルバータリサーチカウンシル社）を介している。この方法を実施する間、ヒヒをハロタンで麻酔し、血圧、血中酸素濃度、血液ガス及びｐＨをモニターしながら通常の気管挿入麻酔で麻酔維持する。ヒヒの血液を、６０分間前記カラムを介して循環させる。Ｇａｌα１，３Ｇａｌエピトープに対して特異的な抗体を除去するためのこの方法の実効性（efficacy）は、フローサイトメトリーで測定する。ヒヒの血液は、１５日前及び１４日前に、全血の３倍量に相当する量を循環させる。脾臓摘出術を１６日前に施した。ヒヒのＧａｌα１，３Ｇａｌエピトープに対する免疫寛容は、免疫寛容化合物のいずれか、例えばＧａｌ α１，３Ｇａｌβ１，４ＧｌｃＮＡｃ−ＢＳＡ（例７及び例９を参照）を使用して達成する。３日前、２日前そして１日前に、５０ｍｇ／ｋｇＡＴＧを適用する。６日前及び５日目に、全身に１５０（ラド）の照射を２量相当（doses）適用した。１日前に、７００ラドの胸腺照射を適用し、ブタ骨髄細胞（１x１０⁸細胞／ｋｇ〜２０ｘ１０⁸細胞／ｋｇ）を適用する。また、ヒヒの心臓若しくは腎臓を、提供側骨髄細胞と同じブタＭＨＣハプロタイプ（haplotype）を有するチャールスリバー系ＳＬＡ埋込ミニブタ（Charles River SLA imbed miniswine）の心臓若しくは腎臓に置き換える。シクロスポリンＡ（cyclosporin A）を、血中レベル１，６００／ｍｌで維持できるように投与する。ブタのサイトカイニンであるＩＬ− ３、幹細胞因子、及びＧＭ−ＣＳＦのそれぞれを１００μｇ／ｋｇ毎日適用し始める。これらのサイトカイニンは、米国特許第５，５８９，５８２号の記載に従い製造されており、これをここにレファレンスとして引用する。他の処置は、デオキシスベルグアリン（deoxyspergualin）又はモフェチル（Mofetil）の投与を含んでもよい。例１１Ｇａｌα１，３Ｇａ１β１，４ＧｌｃＮＡｃ／セラミド／スフィンゴシンリポソームを使用したマウスの免疫寛容シクロホスファミドを適用しない点と、ブタ骨髄細胞を例３に従って調整したリホソーム（１ｍｇ／ｋｇ）に置き換えた点を除き、ヒヒを、例１０に記載のとおりに正確に処置した、再び、この器官（移植体）は、見せかけ処理したコントロールよりも長く生存することが期待される。例１２マウスインビトロ並びにインビボにおける、αＧａｌ含有リポソームとαＧａｌ／ＤＭＳ含有リポソームの抗Ｇａｌ抗体産生に及ぼす影響スフィンゴシン代謝経路の最終化合物であるＮ，Ｎ−ジメチルスフィンゴシン（ＤＭＳ：N,N-dimethylsphingosine）は、他の研究者によって、アポプトーシスを介しヒトＢ細胞の増殖を阻害することが示されている。組織から得た抗Ｇａ１抗体分泌細胞もまた、スフィンゴシン細胞死の代謝系を介し代謝阻害されやすいかどうかを検討するため、これらリンパ球をＧａｌＴ-/-マウスの脾臓から除去した。これら細胞をＤＭＳ及びαＧａｌ含有リポソームにて処理し、例５において記載した抗αＧａｌ抗体に特異的なＥＬＩＳＰＯＴアッセイ法を実施した。特定の方法論はつぎのとおりである。ブランクとなるリポソームは、ホスファチジルコリン（ＰＣ）及びコレステロール（Ｃ）を６０：４０の割合で含んでいた。αＧａｌ含有リポソームは、ＰＣ：Ｃ：Ｇａｌ−ＨＤＰＥを６０：４０：３の割合で含んでいる。αＧａｌ／ＤＭＳ含有リポソームは、ＰＣ：Ｃ：ＤＭＳ：Ｇａｌ−ＨＤＰＥを６０：４０：６：３の割合で含んでいた。リポソームは、真空雰囲気下で化合物を乾燥し、ついで、リペックス押し出し機（Lipex extruder:Lipex Biomembranes，Vancouver， B.C.）中で再水和し押し出して１００ｎｍリポソームとすることで、調整した。リポソームのサイズは、粒径アナライザー（particle size analyzer:Brookhave n Insruments，Holtsville，N.Y）で追認した。図８は、αＧａｌ含有リポソームとαＧａｌ／ＤＭＳ含有リポソームが、インビトロの系でαＧａｌ産生を完全阻害することを示している。これらのデータは、末端にα−ガラクトシル構造を有する或いはＮ，Ｎ−ジメチルスフィンゴシンを含むグリコリヒッドを取り込んだリポソームが、抗Ｇａｌ抗体産生をダウンモジュレートすることができることを証明している。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.⁷ 識別記号ＦＩテーマコート゛(参考）Ａ６１Ｋ 31/56 Ａ６１Ｋ 31/56 31/675 31/675 31/704 31/704 Ａ６１Ｐ 37/06 Ａ６１Ｐ 37/06 (81)指定国ＥＰ(ＡＴ，ＢＥ，ＣＨ，ＤＥ，ＤＫ，ＥＳ，ＦＩ，ＦＲ，ＧＢ，ＧＲ，ＩＥ，ＩＴ，ＬＵ，ＭＣ，ＮＬ，ＰＴ，ＳＥ)，ＯＡ(ＢＦ，ＢＪ，ＣＦ，ＣＧ，ＣＩ，ＣＭ，ＧＡ，ＧＮ，ＭＬ，ＭＲ，ＮＥ，ＳＮ，ＴＤ，ＴＧ)，ＡＰ(ＧＨ，ＧＭ，ＫＥ，ＬＳ，ＭＷ，ＳＤ，ＳＺ，ＵＧ，ＺＷ)，ＥＡ(ＡＭ，ＡＺ，ＢＹ，ＫＧ，ＫＺ，ＭＤ，ＲＵ，ＴＪ，ＴＭ)，ＡＬ，ＡＭ，ＡＴ，ＡＵ，ＡＺ，ＢＡ，ＢＢ，ＢＧ，ＢＲ，ＢＹ，ＣＡ，ＣＨ，ＣＮ，ＣＵ，ＣＺ，ＤＥ，ＤＫ，ＥＥ，ＥＳ，ＦＩ，ＧＢ，ＧＥ，ＧＨ，ＨＵ，ＩＬ，ＩＳ，ＪＰ，ＫＥ，ＫＧ，ＫＰ，ＫＲ，ＫＺ，ＬＣ，ＬＫ，ＬＲ，ＬＳ，ＬＴ，ＬＵ，ＬＶ，ＭＤ，ＭＧ，ＭＫ，ＭＮ，ＭＷ，ＭＸ，ＮＯ，ＮＺ，ＰＬ，ＰＴ，ＲＯ，ＲＵ，ＳＤ，ＳＥ，ＳＧ，ＳＩ，ＳＫ，ＳＬ，ＴＪ，ＴＭ，ＴＲ，ＴＴ，ＵＡ，ＵＧ，ＵＺ，ＶＮ，ＹＵ，ＺＷ

Claims

【特許請求の範囲】１．つぎに示す構造を含む免疫寛容化合物（tolerogenic composition）。Ｈｎ−Ｂここで、「Ｈ」はＧａｌα１，３Ｇａ１エピトープを含むハプテンであり、「Ｂ」は骨格（backbone）であり、「−」はオペラブル結合（operable linka ge）であり、そして、「ｎ」は１から１００，０００，０００までの整数である。２．前記「Ｈ」が、末端にＧａｌα１，３Ｇａｌエピトープを有することを特徴とする請求の範囲第１項に記載の免疫寛容化合物。３．前記「Ｈ」が、ガクトシル（α１，３）ガラクトースを有するジサッカライド又はトリサッカライドであることを特徴とする請求の範囲第２項に記載の免疫寛容化合物。４．前記「Ｈ」が、Ｇａｌα１，３Ｇａｌβ１，４Ｇｌｃ又はＧａｌα１，３Ｇａｌβ１，４ＧｌｃＮＡｃであることを特徴とする請求の範囲第３項に記載の免疫寛容化合物。５．前記「Ｂ」が、免疫原性を持っていない骨格であることを特徴とする請求の範囲第１項に記載の免疫寛容化合物、６．前記「Ｂ」が、分子量が約５，０００ダルトン（Da）から約１００，０００ダルトン（Da）の範囲にある免疫原性をもっていないポリマーであることを特徴とする請求の範囲第１項に記載の免疫寛容化合物。７．前記免疫寛容化合物において、前記「Ｂ」が、ポリビニルエタノールアミン類、ポリアクリルアミド類、デキストラン、及びポリグリコマー類（polyglyc omers）からなる群より選択されていることを特徴とする請求の範囲第６項に記載の免疫寛容化合物。８．前記「Ｂ」がポリビニルエタノールアミン類であり、その分子量が約１０，０００ダルトン（Da）から約１４，０００ダルトン（Da）の範囲内にあることを特徴とする請求の範囲第７項に記載の免疫寛容化合物。９．前記免疫寛容化合物において、前記「ｎ」が、１から５であることを特徴とする請求の範囲第８項に記載の免疫寛容化合物。１０．前記「Ｂ」がリポソーム（liposome）に取り込まれていることを特徴とする請求の範囲第１項に記載の免疫寛容化合物。１１．前記「Ｂ」が、ポリアクリルアミド／アミン類であり、その分子量が約４０，０００ダルトン（Da）から約６０，０００ダルトン（Da）の範囲内にあることを特徴とする請求の範囲第７項に記載の免疫寛容化合物。１２．前記免疫寛容化合物において、前記「ｎ」が、約６から約２５であることを特徴とする請求の範囲第１１項に記載の免疫寛容化合物。１３．前記「ｎ」が、約１１から１９であることを特徴とする請求の範囲第１２項に記載の免疫寛容化合物。１４．前記「Ｂ」がデキストランであり、その分子量が約６０，０００ダルトン（Da）から約１００，０００ダルトン（Da）の範囲内にあることを特徴とする請求の範囲第７項に記載の免疫寛容化合物。１５．前記「Ｂ」が、デキストラン７０であることを特徴とする請求の範囲第１４項に記載の免疫寛容化合物。１６．前記免疫寛容化合物において、前記「ｎ」が、約２０から約４０であることを特徴とする請求の範囲第１４項に記載の免疫寛容化合物。１７．前記「ｎ」が、約３０であることを特徴とする請求の範囲第１４項に記載の免疫寛容化合物。１８．前記「Ｂ」がポリグリコマーであり、その分子量が約５，０００ダルトン（Da）から約１００，０００ダルトン（Da）の範囲内にあることを特徴とする請求の範囲第７項に記載の免疫寛容化合物。１９．前記ポリグリコマーが、所定の一定間隔で離間した二価のＧａｌα１，３ＧａｌβＤ１，４ＧｌｃＮＡｃ又はＧａｌα１，３Ｇａｌを含んでいることを特徴とする請求の範囲第１８項に記載の免疫寛容化合物。２０．前記免疫寛容化合物において、前記「ｎ」が、約２０から約４０であることを特徴とする請求の範囲第１８項に記載の免疫寛容化合物。２１．前記「ｎ」が、約３０であることを特徴とする請求の範囲第２０項に記載の免疫寛容化合物。２２．前記「Ｂ」が、免疫原性をもっていない細胞抗原であることを特徴とする請求の範囲第１項に記載の免疫寛容化合物。２３．前記「Ｂ」が、自己（autologous）赤血球、協力性（syngeneic）赤血球、若しくは外因性（xenogeneic）赤血球のうちのいずれかであることを特徴とする請求の範囲第２２項に記載の免疫寛容化合物。２４．前記免疫寛容化合物において、前記「ｎ」が、約１から約１，０００であることを特徴とする請求の範囲第２３項に記載の免疫寛容化合物。２５．第１動物において、第２動物から得た移植体に存在するＧａｌα１，３Ｇａｌエピトープに対する寛容状態を促進するための方法であって、前記第１動物に、請求の範囲第１項に記載の免疫寛容化合物の免疫寛容量を適用するステップを含むことを特徴とする方法。２６．前記第１動物がヒトであり、前記第２動物がブタであろことを特徴とする請求の範囲第２５頃に記載の方法。２７．つぎに示す構造を含む免疫寛容化合物（tolerogenic composition）。Ｈｎ−Ｔここで、「Ｈ」はＧａｌα１，３Ｇａ１エピトープを含むハプテンであり、「Ｔ」はＴ細胞及びＢ細胞に対してサイトトキシックである試薬(agents)又はＴ細胞及びＢ細胞の機能をモジュレートする試薬（agents）であり、「−」はオペラブル結合（operable linkage）であり、そして、「ｎ」は１から１，０００までの整数である。２８．「Ｈ」が、末端にＧａｌα１，３Ｇａ１エピトープを有することを特徴とする請求の範囲第２７項に記載の免疫寛容化合物。２９．前記「Ｈ」が、ガラクトシル（α１，３）ガラクトースを有するジサッカライド（二糖）又はトリサッカライド（三糖）であることを特徴とする請求の範囲第２８項に記載の免疫寛容化合物。３０．前記「Ｈ」が、Ｇａｌα１，３Ｇａｌβ１，４Ｇｌｃ又はＧａｌα１，３Ｇａｌβ１，４ＧｌｃＮＡｃであることを特徴とする請求の範囲第２９項に記載の免疫寛容化合物。３１．前記免疫寛容化合物において、前記「Ｔ」が、セラミド、疎水性トキシン、ラジオアイソトープ、ジフテリア毒素、リシンＡ鎖、サポニン及びドキソルビシン（doxorubicin）からなる群より選択されていることを特徴とする請求の範囲第２７項に記載の免疫寛容化合物。３２．前記「Ｔ」が、セラミドペンタヘキソサイド（ceramide pentahexoside ）であることを特徴とする請求の範囲第３１項に記載の免疫寛容化合物。３３．前記疎水性トキシンが、ＤＭＳ、ＴＭＳ及びセラミドアナローグ（cera mide analogs）から選択されていることを特徴とする請求の範囲第３１項に記載の免疫寛容化合物。３４．前記ラジオアイソトープが、Ｔｃ、¹³¹Ｉ及び⁹⁰Ｙｔから選択されていることを特徴とする請求の範囲第３１項に記載の免疫寛容化合物。３５．前記オペラブル結合（operable linkage）が、前記「Ｈ」と前記「Ｔ」の間をダイレクトに連結する共有結合であることを特徴とする請求の範囲第２７項に記載の免疫寛容化合物。３６．前記「Ｈ」と前記「Ｔ」が、キャリアー分子（carrier molecule）に結合されていることを特徴とする請求の範囲第２７項に記載の免疫寛容化合物。３７．前記キャリアー分子が、ネオグリコプロテイン（neoglycoprotein）、糖蛋白質、ペプチド、糖脂質、自己ＩｇＧ、又は合成キャリアーのうちから選択されていることを特徴とする請求の範囲第３６項に記載の免疫寛容化合物。３８．前記ネオグリコプロテイン（neoglycoprotein）が、牛血清アルブミン（ＢＳＡ）又はヒト血清アルブミンであることを特徴とする請求の範囲第３７項に記載の免疫寛容化合物。３９．前記糖脂質（glycolipid）が、ＨＤＰＥ、セラミド及びセラミドアナローグ（ceramide analogs）からなる群より選択されていることを特徴とする請求の範囲第37項に記載の免疫寛容化合物。４０．前記合成キャリアーが、シアリルラクＮＡｃ−ＨＤＰＥ（syalyllacNAc-H DPE）であることを特徴とする請求の範囲第３７項に記載の免疫寛容化合物。４１．前記オペラブル結合（operahle linkage）が、疎水性の会合（lipophili c association）であることを特徴とする請求の範囲第２７項に記載の免疫寛容化合物。４２．前記疎水性の会合（lipophilic association）が、リポソーム（liposom eを形成することを特徴とする請求の範囲第４１項に記載の免疫寛容化合物。４３．前記リポソームが「Ｔ」を含み、前記「Ｈ」が前記リポソームと会合する疎水性の分子に共有結合していることを特徴とする請求の範囲第４２項に記載の免疫寛容化合物。４４．前記疎水性の分子が、ホスファチジルコリン、コレステロール、ホスファチジルエタノールアミン及び合成ネオグリコリヒッド（synthetic neoglycoli pids）からなる群より選択されていることを特徴とする請求の範囲第４３項に記載の免疫寛容化合物。４５．前記合成ネオグリコリピッド（synthetic neoglycolipids）が、シアリルラクＮＡｃ−ＨＤＰＥ（syalyllacNAc-HDPE）であることを特徴とする請求の範囲第４４項に記載の免疫寛容化合物。４６．前記免疫寛容化合物において、前記「Ｔ」が、セラミドであることを特徴とする請求の範囲第４５項に記載の免疫寛容化合物。４７．前記「Ｔ」が、セラミドベンタヘキソサイド（pentahexoside）であることを特徴とする請求の範囲第４６項に記載の免疫寛容化合物。４８．前記免疫寛容化合物において、ＰＫＣ又はＢｃｌ−２の阻害剤がさらに含まれていることを特徴とする請求の範囲第４７項に記載の免疫寛容化合物。４９．前記ＰＫＣ又はＢｃｌ−２の阻害剤が、スフィンゴシンであることを特徴とする請求の範囲第４８項に記載の免疫寛容化合物。５０．前記スフィンゴシンが、Ｎ，Ｎ−ジメチルスフィンゴシン（N,N-dimethy lsphingosine）又はＮ，Ｎ，Ｎ−トリメチルスフィンゴシン（N,N,N-trimeth ylsphingosine）であることを特徴とする請求の範囲第４９項に記載の免疫寛容化合物。５１．前記免疫寛容化合物において、Ｔ細胞レセプター結合ペプチド又はＴ細胞レセプター結合蛋白質にさらにオペラブルに結合されていることを特徴とする請求の範囲第２７項に記載の免疫寛容化合物。５２．第１動物において、第２動物から得た移植体に存在するＧａｌα１，３Ｇａｌエピトープに対する寛容状態を促進するための方法であって、前記第１動物に請求の範囲第２６項に従う免疫寛容化合物の免疫寛容量を適用することを含むことを特徴とする方法。５３．前記第１動物がヒトであり、前記第２動物がブタであることを特徴とする請求の範囲第５２項に記載の方法。５４．第１動物において、第２動物から得た移植体に存在するＧａＩα１，３Ｇａｌエピトープに対する寛容状態を促進するための方法であって、前記第１動物に、つぎの構造を含む免疫原性をもった化合物量を適用することと、前記第１動物を化学療法剤により処理することを含む。Ｈｎ−Ｉここで、「Ｈ」は、本発明の第１番目の態様において記載されたＧａｌα１，３Ｇａｌエピトープを含むハプテンであり、「Ｉ」は免疫原性のキャリアーであり、「−」はオペラブル結合（operable linkage）であり、そして、「ｎ」は１から１００，０００，０００までの整数である。５５．前記第１動物がヒトであり、前記第２動物がブタであることを特徴とする請求の範囲第５４項に記載の方法。５６．前記「Ｈ」が、末端にＧａｌα１，３Ｇａｌエピトープを有することを特徴とする請求の範囲第５４項に記載の方法。５７．前記「Ｈ」が、ガラクトシル（α１，３）ガラクトースを有するジサッカライド（二糖）又はトリサッカライド（三糖）であることを特徴とする請求の範囲第５６項に記載の方法。５８．前記「Ｈ」が、Ｇａｌα１，３Ｇａｌβ１，４Ｇｌｃ、又はＧａｌα１，３Ｇａｌβ１，４ＧｌｃＮＡｃであることを特徴とする請求の範囲第５７項に記載の方法。５９．前記方法において、前記「Ｉ」が、免疫原性を有する蛋白質、免疫原性を有する脂質及び免疫原性を有する炭水化物からなる群より選択されていることを特徴とする請求の範囲第５４項に記載の方法。６０．前記免疫原性を有する蛋白質が、ＢＳＡ，ＫＬＨ及びコレラ毒素Ｂサブユニットからからなる群より選択されていることを特徴とする請求の範囲第５９項に記載の方法。６１．前記免疫原性を有する脂質が、家兎赤血球膜であることを特徴とする請求の範囲第５９項に記載の方法。６２．前記免疫原性を有する炭水化物が、１００，０００ダルトン（Da）以上の分子量をもったポリマーであることを特徴とする請求の範囲第５９項に記載の方法。６３．前記方法において、前記化学療法剤が、シクロホスファミド（cyclophosphamide）、レフルノミド (leflunomide）、マイコフェノレート（mycophenolate）、モフェチル（mofe til）、ドキソルビシン（doxorubicin）、２，３−ジデオキシイノシン（2,3- dideoxyinosine）、クロラムブシル（chloramhucil）、ステロイドホルモン、アドリアマイシン（adriamycin）、ブレキイナーアナローグ（brequinar an alogs）、及びメルファラン（melphalan）からなる群より選択されていること特徴とする請求の範囲第５４項に記載の方法。６４．前記方法において、前記免疫原性を有する化合物が、アジュバントと共に適用されることを持徴とする請求の範囲第５４項に記載の方法。６５．前記アジュバントが、アルム（alum）、リビ（RIBI）アジュバント、及びフロイント完全アジュバントからなる群より選択されていることを特徴とする請求の範囲第６４頃に記載の方法。６６．前記方法において、前記免疫原性を有する化合物が、外因性のリンパ球又は外因性の骨髄細胞と共に適用されることを特徴とする請求の範囲第５４項に記載の方法。６７．前記方法において、前記外因性のリンパ球又は前記外因性の骨髄細胞が前記第２動物由来であることを特徴とする請求の範囲第６６項に記載の方法。６８．αＧａｌ分泌Ｂ細胞の頻度（frequency）の測定方法であって、該方法は、ＥＬＩＳＰＯＴアッセイ法を行うことを特徴とする測定方法。６９．前記ＥＬＩＳＰＯＴアッセイ法が、つぎのステップを含むことを特徴とする請求の範囲第６８項に記載の測定方法。、ａ．リンパ球又はＢ細胞に富むリンパ球標品を単離するステップ；ｂ．単離細胞を、ミクロウエル中のハイブリドーマ培養培地とともにインキュベートするステップ；ｃ．細胞を、抗原でコートされたニトロセルロース底マイクロタイターウエルに移すステップ；ｄ．細胞を、マイクロタイターウエル中で一夜インキュベートするステップ；ｅ．マイクロタイターウエルの壁面より細胞を洗い落とすステップ；ｆ．マイクロタイターウエルに、西洋わさび由来ペルオキシダーセをコンジュゲートさせたヒツジ抗マウスＩｇＭ又はＩｇＧ抗体を添加するステップ；ｇ．マイクロタイターウエルに、ペルオキシダーゼ基質を添加するステップ；ｈ．抗原に特異的な抗体を分泌するクローンとして、マイクロタイターウエル中に形成されるスポットをカウントするステップ；そして、ｉ．マイクロタイターウエル中に加えた細胞１０⁵個当たりの抗体分泌細胞の頻度を決定するステップ。