JP2001516355A

JP2001516355A - 花粉粒の発芽を刺激するための組成物と方法

Info

Publication number: JP2001516355A
Application number: JP54021198A
Authority: JP
Inventors: イヴァン，ジャン−クロード; ルヴァサール，フローランス; タン，キエム−ゴクトラン; ルビュイ，ヴァン
Original assignee: ラボラトワールゴエマールエス．アー．
Priority date: 1997-03-19
Filing date: 1998-03-19
Publication date: 2001-09-25
Also published as: US6303587B1; FR2761058B1; WO1998041091A1; CA2283710C; FR2761058A1; CN1254254A; CA2283710A1; AU6925598A; EP0971586A1

Abstract

(57)【要約】本発明は、ビヒクル、特に葉へ適用される組成物の通常の成分、及び活性物質を含有する、特に葉に適用される組成物において、活性成分が、１０までの重合度を有し、β１-３、β１-４及びα１-３が結合した１０までの、好ましくは５までの、より好ましくは２つの糖質単位を有するオリゴ糖、特にラミナリビオース、セロビオース、ニガーロース、ラミナリトリオース、ラミナリテトラオース及びラミナリペンタオースからなる群のもの；遊離のアノマー炭素又は遊離水酸化物を担持する全ての炭素原子において、Ｃ₁からＣ₅アルキル基、好ましくはメチル基；Ｃ₁からＣ₅アシル基、好ましくはアセチル基；アリール基、好ましくはピリジルアミノ基：Ｃ_xからＣ_yのシクロアルキル基；アミン類；Ｎ-アセチル基；及びサルフェート及びホスフェート基からなる群から選択される基が置換された上記オリゴ糖の誘導体からなる群から選択される花粉粒の発芽を刺激しうる少なくとも１種の植物衛生物質により構成されることを特徴とする組成物に関する。

Description

【発明の詳細な説明】花粉粒の発芽を刺激するための組成物と方法本発明は、花粉粒の発芽を刺激することができる少なくとも１種の植物衛生物質を活性成分として含有してなる組成物に関する。また本発明は特に葉へ上記組成物を適用することによる、花粉粒の発芽を刺激するための植物の処理方法にも関する。最後に本発明は、上記刺激のための用途が考えられるところから、新しい産業製品としての、上記組成物の活性成分を構成する植物衛生産物に関する。花粉粒が花まで輸送され柱頭の受入面に保たれる受粉の後に花粉粒の発芽は生じる；これにより受精が可能になり、花粉粒を起源とする花粉管と呼ばれる器官の形成により胚が構成される；この器官は柱頭、ついで花柱に埋まり、最終的に受精が起こる胚嚢まで浸透する。ひとたび受粉が生じると花粉粒の寿命は短く、通常は２４時間の期間を越えないことはよく知られている（例えば、１９６９年にMasson & Cieにより刊行されたP．Champagnat、P．Ozenda及びL．BaillaudによるBIOLOGIE VEGETALE「Croiss ance Morphogenese Reproduction」を参照されたい）。そして、所定の花粉粒の発芽がこの短い期間内に生じないときは、誘発された受精が起こらず、植物の可能な子孫の一つが失われる。従って、当業者は花粉粒の発芽を助け、もって収穫高を増大させる方法を探求した。しかして、ホウ酸塩溶液を農産物に適用することにより花粉粒の発芽を刺激することが既に提案されている。記録された結果は使用者には満足すべきものではないことが見出されている。更に、植物においての最も豊富な糖であるショ糖が、花粉粒の発芽をある程度刺激しうることが知見されている；その不十分な結果のために、この知見を導く研究は決して研究室段階を越えるものではなかった。しかして、本発明はかかる状況を克服することを目的とし、満足できる形でとにかくショ糖とホウ酸塩溶液よりも更に良好に様々な実用的必要性に応える上述の植物衛生物質を提供することを目的とする。そして、本出願人会社は、鋭意研究した結果、この目的が、意外にもまた驚くべきことに、ショ糖のものとは異なるその構造から、群の代表的なものに非常に近い構造を有するある種のオリゴ糖が花粉粒の発芽に対して活性を持っていないので、所望の刺激特性を保有しているであろうことを予測することが殆ど無理であったあるオリゴ糖を含んでなる群の物質を上述の植物衛生物質として利用することにより達成されることを見出した。従って、本発明に係る特に葉に適用される組成物は、賦形剤、特に葉へ適用される組成物の通常の成分、及び活性成分を含有し、該活性成分が、 − １０までの重合度を有し、β１-３、β１-４及びα１-３が結合した１０までの、好ましくは５までの、より好ましくは２つの糖質単位を有するオリゴ糖、特にラミナリビオース(laminaribiose)、セロビオース、ニガーロース(nigerose )、ラミナリトリオース、ラミナリテトラオース及びラミナリペンタオースからなる群のもの、 − 遊離のアノマー炭素又は遊離水酸化物を持つ全ての炭素原子において、 − Ｃ₁からＣ₅アルキル基、好ましくはメチル基、 − Ｃ₁からＣ₅アシル基、好ましくはアセチル基、 − アリール基、好ましくはピリジルアミノ基、 − Ｃ_xからＣ_yのシクロアルキル基、 − アミン類、 − Ｎ-アセチル基、及び − サルフェート及びホスフェート基、からなる群から選択される基が置換された上記オリゴ糖の誘導体、からなる群から選択される花粉粒の発芽を刺激しうる少なくとも１種の植物衛生物質により構成されることを特徴とする。花粉粒の発芽を刺激するための植物の処理方法は、本発明に係る組成物を、特に葉に適用することを含んでなることを特徴とする。本発明に係る組成物の好適な実施態様においては、組成物は、花粉粒の発芽を刺激しうる植物衛生物質により構成される活性剤と組合わせて、少なくとも１種の他の植物衛生物質、特に殺菌剤を含有する。本発明は、以下の更なる説明と好適な実施態様に対して提供する非限定的な実施例により一層良く理解されるであろう。従って、以下に、花粉粒の発芽を刺激する方法及び等価な方法を提案する。刺激される植物は、賦形剤と組成物の通常の成分に加えて、上記花粉粒の発芽を刺激しうる上述の群から選択される少なくとも１種の植物衛生物質を含有する、特に葉へ適用される組成物で処理される。この処理は、開花時、より特定的には受粉時になされる。該処理は、好ましくは葯が開く前もしくは開く瞬間になされる。該処理は、本発明に係る組成物を散布することにより行うことができる。一回の散布とすることができる；しかしながら、この操作を少なくとも一回繰り返すことが好ましい：この場合は、最初の散布は葯が開く二日前に好ましくは行われ、まさに葯が開く日に二回目の散布を行う。特定の瞬間が、処理される植物に応じて選択される。上記植物は、受精が(異質受粉と呼ばれる)他家受粉のメカニズムか、花粉と柱頭が同じ個体に属する(同質受粉と呼ばれる)直接的受粉のメカニズムの何れかを必要とする農業的もしくは装飾的に興味深いあらゆる植物により構成されうる。本発明の対象とならない植物は、開かない外部花被を持ち、受粉が花粉を放出しないで葯において直接発芽してなされるものである；これは閉鎖花の場合である。良好な結果は、 − タバコ、 − ニンジン、トマト、カリフラワー及びジャガイモのような野菜植物、 − リンゴ、桜及びプラムのような果物の木、 − 大豆、ヒマワリ及び菜種のような油を含む植物、 − とうもろこしのような穀物、 − ユリのような花、のような種々の植物で得られた。本発明に係る葉に適用される組成物中の活性成分の濃度は１から２０重量％、好ましくは１．５から１０重量％、更により好ましくは２から８重量％である。適用される組成物のヘクタール当りの量は、エーカー１０から１０００ｇ、好ましくは２０から５００ｇ、更により好ましくは５０から２５０ｇの活性剤となるようなものである。組成物が液体の場合は、賦形剤は一般に水である。しかしながら、鉱油、植物油、あらゆる液状脂肪及びアルコール、特にプロピレングリコール又はグリセリンからなる群から選ばれる賦形剤を水の代りに使用することができる。本発明に係る組成物の必須の通常の成分は処理される植物の活性物質に依存する；かかる成分は、固形のバルク剤、溶剤、界面活性剤、分散剤及び乳化剤からなる群から一般に選ばれる。本発明にかかる組成物が粉体の形態である場合、賦形剤は好適にはバルク剤、特に無機のバルク剤から構成される。このバルク剤はカオリン、微細に分散したクレー及びタルクからなる群から選択することができる。粉体の形態の組成物の場合は、通常の成分はデキストランからなる群から一般に選択される。粉体の形態の組成物は、特に水により構成される賦形剤に、使用時に希釈される。本発明に係る組成物は、モリブデン及びマンガンの塩からなる群から選ぶことができる一又は複数の残余のオリゴ要素と任意に組合わせて、上述の群の少なくとも１種の植物衛生物質をベースとする液体肥料の形態をとりうる。本発明に係る組成物の幾つかの実施例を以下に示す。実施例１ラミナリビオースをベースとする農業用組成物この組成物において、ラミナリビオースは液体肥料の形態のオリゴ要素を伴っている。１ｋｇの重量／重量で、この組成物は、 − 硫酸マグネシウム，７Ｈ₂Ｏ０．３０１０ｋｇ − 硫酸マンガン，１Ｈ₂Ｏ０．０５１０ｋｇ − 硫酸亜鉛,７Ｈ₂Ｏ０．１０６０ｋｇ − ラミナリビオース０．０３５０ｋｇ − トィーン８００．００５０ｋｇ − 水０．５０２０ｋｇ１．００００ｋｇこの組成物は果物の木に開花段階において３リットル／ヘクタールの用量で使用することができる。実施例２セロビオースとニガーロースをベースとする農業用組成物この組成物は、ホウ素及びモリブデンと組合わせて活性剤を含む液体肥料の形態である。１ｋｇの重量／重量で、この組成物は、 − ホウ酸０．１５０ｋｇ − モリブデン酸ナトリウム０．００５ｋｇ − セロビオース０．０３０ｋｇ − ニガーロース０．０３０ｋｇ − 水０．７８０ｋｇ − ナトリウムメチルパラベン０．００５ｋｇ１．０００ｋｇこの組成物はリンゴの木に受粉時に３リットル／ヘクタールの用量で使用することができる。実施例３ラミナリビオースをベースとする農業用組成物この可溶な組成物は、ホウ素及びモリブデンと組合わせて活性物質を含む粉体肥料の形態である。１ｋｇの重量／重量で、この組成物は、 − ホウ酸０．３００ｋｇ − モリブデン酸ナトリウム０．０１０ｋｇ − ラミナリビオース０．１７０ｋｇ − カオリン０．５２０ｋｇ１．０００ｋｇこの組成物は野菜植物の開花の時に１０ｇ／ｌで水に希釈して使用することができる。実施例４ニガーロースと殺菌剤をベースとする農業用組成物１ｇのニガーロースを６９９ｇの水に溶解する。この溶液に、ＡＰＶ７００００７３の番号でブルジョア社により市販されている商標マンガニル(Manganil)８０の殺菌剤を３００ｇ懸濁させる：この殺菌剤はマネブからなる活性剤を８０％含有している。このようにして得られた懸濁液は０．１％のニガーロース量と２４％のマネブ量を有している。これは、０．１と５０ｍｌ／ｌの間の濃度で水への希釈後に散布することにより葉の表面に適用することができる。適用される量は５リットル／ヘクタールである。この組成物は殺菌保護と同時に受精への刺激効果を有している。これは、ブドウの木とトマトのうどん粉病に対して好適に使用される。輸送と貯蔵をより容易にするために、好適には濃縮物を調製しておき、使用時に、適切な量の賦形剤で希釈して直ぐに使用できる組成物とする。濃縮物は本発明に係る組成物の全ての成分を、使用される成分中のこれら成分の重量比で含有している；他方、賦形剤は散布形態に適合する量でのみ存在する。油系の散布可能な組成物又は乳化可能な組成物は、特に更なる水不溶性物質を伴う混合物の場合に特に使用することができる。本発明に係る組成物に使用される活性物質は、市場で入手できない場合は、これらを含む物質の既知の酵素もしくは酸分解反応により入手されうる。例として、セロビオース、ラミナリビオース及びニガーロースを以下に記載する。実施例５セロビオース(β１-４-ジグルコース)の調製使用される原材料はセルロースである。１００ｇの市販セルロース、すなわちフルカ(Fluka)社により市販のセルロースを、１０００ｍｌのＨ₂Ｏに溶解後、β(１-４)-グルカノヒドラーゼ又は市販のセルラーゼ、すなわちＥＣ３.２.１.４としてシグマシミーにより市販のセルラーゼと反応させる。添加される酵素の量は１ｇ、すなわち３００単位である。加水分解条件は次の通りである： − ｐＨ：５ − 温度：３７℃ − 加水分解時間：５時間この５時間のインキュベーション後、酵素を１５分間１００℃で加熱することにより阻害する。このようにして得られた溶液を、ミリポア社により商標ペリコン(PELLICON)を付して市販されている装置でタンジェンシャル限外濾過にかける：この装置はミリポア社から商標プロコン(PROCON)で市販されているポンプを組合わせた１０００ダルトンの空隙率のカセットを装備している。得られた濾液は真空下で蒸発により濃縮され、ついで凍結乾燥される；純粋なセロビオースに相当する５０ｇの粉末が得られる；このセロビオースの純度は高圧液体クロマトグラフィー、より特定的には、ダウの姉妹会社であるディオネックス・ケミカル社により商標ディオネックス(DIONEX)を付して市販されているイオン交換樹脂を使用する電流測定と組合わせたイオンクロマトグラフィーにより、実証される。実施例６ラミナリビオース(β１-３-ジグルコース)の調製原材料はカードラン(curdlan)、すなわちアルカリジェネス・ファエカリス(Al caligenes faecalis)から抽出されたポリマーである。１００ｇのシグマ・シミー社により参照番号Ｃ７８２１で市販のカードランを、１０００ｍｌの水に溶解後、シグマ・シミー社により参照番号Ｃ４５１１で市販されているβ-１-３-エンドグルカナーゼＥＣ３.２.１.２.１の作用を受けさせる。使用される酵素の量は１ｇ、すなわち６０単位である。加水分解条件は次の通りである： − ｐＨ：６ − 温度：４０℃ − 加水分解時間：６時間６時間のインキュベーション後、酵素反応を１５分間１００℃で加熱することにより停止させる。このようにして得られた溶液を、ミリポア社により商標ペリコンを付されて市販されている装置でタンジェンシャル限外濾過にかける；この装置はミリポア社から商標プロコンを付されて市販されているポンプを組合わせた１０００ダルトンの空隙率のカセットを装備している。ついで濾液が逆浸透法により濃縮され、ついで凍結乾燥され、５０／５０の割合のグルコースとラミナリビオースからなる７０ｇの粉末が得られる。ラミナリビオースの分解を伴わないでグルコースを特異的に代謝する菌株分裂酵母ポンベ(Shizosaccharomyces pombe)ＩＦＯ０３５８から得られた酵母の混合物に添加されて単離される。酵母細胞の除去後、９０％の純度のラミナリビオースが得られる。実施例７ニガーロース(α-１-３-ジグルコース)の調製原材料は市販のニガーラン(nigeran)である。１００ｇのシグマ・シミー社により参照番号Ｎ２８８８で市販のニガーランを、約８０℃の温度で６時間の間０．１Ｍの硫酸溶液の作用を受けさせる。この加水分解に、６と８の間のｐＨが得られるまでＮａＯＨのような強塩基を添加する中和工程が続き、ついでイオン交換樹脂上を中和した生成物を通過させることによる脱塩工程が続き、最後にアトマイゼーションによる粉末への還元工程が続く。３５ｇのグルコースと混合した約３５ｇのニガーロースを含む７０ｇの粉末がこのようにして得られる。ファーマシアにより商標セファデックス(SEPHADEX)Ｇ１０を付して市販されている樹脂が充填されたクロマトグラフィーカラムでニガーロース＋グルコース混合物を通過させることによりニガーロースを単離する。二つの別個の画分、すなわち一方はグルコース、他方は純度９０％のニガーロースがその分子量の関数として得られる。他の好適なオリゴ糖、すなわちラミナリトリオース、ラミナリテトラオース及びラミナリペンタオースは、β-１-３グルカンの酵素分解に精製が続く実施例６に示した方法を適用することにより調製することができる。鋭意選択研究を行った結果、本研究において創造され以下に記載する実験室試験によって、本出願人会社は上述の組成物において本発明に従って使用される植物衛生物質を同定することができた。これらの試験によりまた上記組成物中の活性成分の最適な濃度の決定も可能になった。得られた結果は野外散布実験により実証された。本試験の基礎は、それ自体が独創的なものであるが、発芽の活性の刺激の観点から試験される植物衛生物質の水溶液中で与えられた植物の花粉粒を発芽させることからなる。この実験が行われる水は非常に高純度のものであることが重要である；純度の最小度合いは１０メガΩｘｃｍを超える抵抗率により特徴付けることができる。上記の試験は特定の植物、すなわちタバコへの応用について以下に説明する。タバコ・タバカム(Nicotiana tabacum)由来の花粉粒をよく開花した花の丁度大きく口を開いた葯から収穫する；各花は５つの葯を有している。この収穫に対して、葯をその花糸から離脱させる：４つの葯が花糸の長さについて同一である。より短い花糸を有する五番目のものは均一性を保持するために使用されない。より簡単には、操作は双眼拡大鏡下で行われる；花粉粒を離脱させるために上記の純度の条件に対応する水を満たした時計皿に配した後、葯の壁部が取除かれる。花粉粒は同じ純水で３回か４回洗浄することで清浄にする。水をデカントし、浮かんでいる粒子を除去する。過剰な水を除去し、水１ｍｌ当り約１００の花粉粒を含む「ＳＰ」と命名された花粉粒の懸濁液が得られる。花粉粒の発芽に対する可能な刺激活性の観点から試験される物質の濃度を増加させた水溶液がまた調製される；これらの増加した濃度は、５μｇ／ｍｌ、１０ μｇ／ｍｌ、５０μｇ／ｍｌ、１００μｇ／ｍｌ、５００μｇ／ｍｌ、１０００ μｇ／ｍｌ、１５００μｇ／ｍｌ、２０００μｇ／ｍｌ、２５００μｇ／ｍｌ、３０００μｇ／ｍｌ、４０００μｇ／ｍｌ、５０００μｇ／ｍｌ、６０００μｇ／ｍｌである。実用的な観点から、例えば１ｃｍの直径と１ｃｍの深さを持つ６列の４ウェルを含む滴定プレートが使用される。滴定プレートの代りにペトリ皿を使用してもよい。上述の濃度の一つで試験される物質の一つを含む１００μｌの溶液が各ウェルに導入される。１００μｌの懸濁液「ＳＰ」の所定容量もまた各ウェルに導入される。混合物をホモジェナイズする。花粉粒の発芽が生じ、植物衛生物質の刺激活性が研究されるのは滴定プレートのウェル内においてである。各実験は少なくとも５回行われ、各回において各物質に対して２回繰り返される。好適には、第１回目のアプローチでは、５００から１０００μｇ／ｍｌの中間濃度が試験され、得られた結果の関数として、試験のフィールドがより高いもしくは低い濃度に対して拡大される。同時に、二つの比較試験がなされる。第１の比較試験は、純度の上記の条件に対応する水において、すなわち懸濁液「ＳＰ」で直接行われる。第２の比較試験は、水中に、 − １２重量％のショ糖、 − ０．０１重量％のホウ酸、 − ０．３重量％のカルシウム二水和物の塩化物を含有する発芽バッファーを使用して行われる。このバッファーにおいては、ショ糖は１２％で存在する；ショ糖が既知の研究室実験で使用されたのはこの用量であった：バッファーはまた花粉粒の発芽の刺激に対して知られているホウ酸塩組成物において使用されたものに相当する濃度でホウ素イオンを含む。滴定プレートをついで２２℃ないし２４℃の温度で２４ないし４８時間暗所に維持する。一回目の観察を実験開始５ないし６時間後に、二回目を２４時間後に、三回目を３６時間後に双眼拡大鏡で行う。これらの観察の各々において、ある数のパラメータに留意する、すなわち、 − 発芽している花粉粒の密度、 − 花粉管の長さ、この測定は内部標準を持つ双眼拡大鏡を使用して容易になされる、 − 花粉粒の凝集反応の強さ、及び − これら花粉粒の溶解、に留意する。これらのパラメータは、容易には定量化できず、花粉管の長さでさえ、花粉管は必ずしも真直ぐではないのでしかりである。処理されたウェル内に発生した花粉管の数が対照を含むウェルに発生した花粉管の数よりも大きい場合に刺激が生じたものと考えられる。試験された物質に対して観察された刺激の強さを解釈するために、 − 刺激がない場合、活性は０％であると考えられる、− 刺激が花粉粒の全体的かつ完全な発芽として観察される場合、活性は１００％であると考えられ、 − ％で表される中間の活性値は花粉粒の一部の発芽として観察される刺激に相当する、ことが了解される。タバコの場合、本発明に係る組成物において使用され、上述の好適な群に属する植物衛生物質に対して見出される活性、並びにこれらの物質に対して決定された最適濃度は、各対象の物質の化学組成もまた示されている以下の表Ａに与えられる。ガラクトース、マンノース及びフコースからなる群の単糖類に適用される同じ試験により、これらの物質の活性は５％を超えず、最適な濃度は３０００μｇ／ｍｌのオーダーであることが示された。表Ａに示される結果に鑑みると、ラミナリビオースとニガーロースが特に好適である。水中での比較試験では活性はなかった；発芽バッファーでの比較試験では５％の活性で３５００μｇ／ｍｌの最適濃度であった。上記の表に示された最適濃度は上において提案された濃度範囲の下限に近いという事実は、研究室での実験に対して使用される非常に特定の条件を考慮すると驚くべきことではない。本発明は、選択された物質に近い構造の物質、すなわち − マルトース(グルコース−グルコース，α１-４) − マルトトリオース(グルコース-グルコース-グルコース，α１-４) − α-トレハロース(グルコース-グルコース，α１-１) − β-トレハロース(グルコース-グルコース，β１-１) − ソホロース(グルコース-グルコース，β１-２) − ガラクトビオース(ガラクトース-ガラクトース，β１-６) − ツラノース(グルコース-フルクトース，α１-３) − マルチトール(グルコース-ソルビトール，α１-４) − ラフィノース(ガラクトース-グルコース-フルクトース，α１-６，α１-２) に対して活性が見出されなかったことを考えると、一層驚くべきことで予想できないことである。ラミナリビオースの最適濃度がまた、 − ユリ、 − リンゴの木及び − 桜の木、の花粉粒の刺激について決定された。これをなすために、上記の条件に対応する純度と８０重量％の噴霧可能な組成物の形態のラミナリビオースを試験した。この組成物は１μｇ／ｍｌから３００μｇ／ｍｌの濃度で水に希釈した後に試験した。ユリの場合に１００から３００μｇ／ｍｌのラミナリビオース濃度、リンゴの木の場合に２００から３００μｇ／ｍｌの濃度で８０％の活性が、桜の木の場合に５０から３００μｇ／ｍｌの濃度で５０％の活性が見出された。本発明に係る方法と組成物に使用される植物衛生物質による花粉粒の発芽の刺激を野外試験により確認した。実施例８野外におけるとうもろこしの処理野外におけるこの試験は、次のような成分の８０重量％のラミナリビオースを含む組成物を適用することによりとうもろこし農産物を処理した： − ラミナリビオース８０％ − 水分５％ − 無機物質１０％ − マンニトール５％１００％この組成物は水溶性の粉末の形態である。とうもろこし植物への適用には、上記の噴霧可能な組成物から出発して、ヘクタール当り２．５から１００ｇのラミナリビオースの用量の適用を可能にする濃度で水溶液を調製した。これらの溶液を異なった品質のとうもろこしの２つの株Ａ及びＢに適用した；株Ａはあまり花粉を作らなかったが、株Ｂは多量の花粉を作った。二つの株Ａ及びＢの各々に対して、８列のとうもろこし植物の２倍を含む区画において試験を実施した。処理の各態様は、２０の雄植物の列と２０の雌植物の列からなり、二つの列が隣り合うものからなる。最初の処理態様を構成した最初の二つの列は対照列であった。２ないし４番目の処理態様の列の対は２．５ｇ／ｈａ、５ｇ／ｈａ及び１０ｇ／ｈａのラミナリビオースの用量でそれぞれ上記組成物で処理した。処理の５番目の態様はまた２つの対照列からなる。６ないし８番目の処理態様の列の対は５０ｇ／ｈａ、７５ｇ／ｈａ及び１００ｇ／ｈａのラミナリビオースの用量でそれぞれ上記組成物で処理した。各場合、発芽した花粉粒のパーセントＧに留意した。開花の異なった段階で試験を実施した。葯が開くときに適用をすると最良の結果が得られた。株Ａ及びＢで得られたこれらの最新の結果を、唯一の図面に表し、ラミナリビオースの用量Ｌ(ｇ／ｈａ)の関数として発芽花粉粒のパーセントＧを示す二つの棒グラフＩ及びＩＩにプロットした。棒グラフＩ及びＩＩを調べると、株Ａの場合には４０％を超え、株Ｂの場合には３５％を超える活性が５０ｇ／ｈａから１００ｇ／ｈａのラミナリビオースの用量に対して得られた。実施例９野外における種々のプラムの木の処理この野外試験は、１５年の樹齢のＥｎｔｅプラムの木(クローンＰ２７３３) の果樹園を処理することからなる。次のような成分の６５重量％のラミナリビオースを含む組成物が使用された： − ラミナリビオース６５％ − 水分７％ − 無機物質１５％ − マンニトール１３％１００％この組成物は水溶性の粉末の形態である。プラムの木への適用には、この組成の水溶液を、ヘクタール当り６５ｇのラミナリビオースの投与を可能にする濃度で調製した。対照区画は純水で処理した。満開の間に適用を行った。処理区画及び対照区画の満開の花の代表的なプラムツリーから枝を除去した。掻き取ることにより葯を、口を開かせるために２４時間デシケータに配したペトリ皿に回収した。葯がひとたび「熟す」と、花粉が試験のために冷蔵庫に配される。花粉の発芽率はゲロース化媒体(１％のゲロースと１５％のショ糖)上に播種後に実証された。花粉の播種は乾燥ブラシを使用して行われた。１０のペトリ皿の２つの群に対照区画及び処理区画からの花粉でそれぞれ播種した。ついでペトリ皿を２２−２３℃でインキュベートし、観測、すなわち計数を播種２４時間後に実施した。双眼拡大鏡を使用して観測を実施した。２０の花粉粒の１０の観測(双眼拡大鏡のフィールドに対応)をペトリ皿につき実施した；２０００の花粉粒が処理区画に対して観測され、２０００が対照区画に対して観測された。対照区画に関する１０ペトリ皿に対して行った１００の観測及び、処理区画に関する１０のペトリ皿で行った１００の観測の間、次のものを他方で計数した： − 発芽しなかった花粉粒、 − 花粉管の骨格、 − 花粉粒の直径の１から３倍に等しい長さの花粉管、 − 花粉粒の直径の１から３倍より長い長さの花粉管、 − 発芽した花粉粒のパーセント。以下の表Ｂに、これらの観測の結果並びに対照区画に対して得られた結果と組成物で処理した区画のものとの間の変化のパーセントを示す；これらの変化のパーセントは処理効果を示す。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (81)指定国ＥＰ(ＡＴ，ＢＥ，ＣＨ，ＤＥ，ＤＫ，ＥＳ，ＦＩ，ＦＲ，ＧＢ，ＧＲ，ＩＥ，ＩＴ，ＬＵ，ＭＣ，ＮＬ，ＰＴ，ＳＥ)，ＯＡ(ＢＦ，ＢＪ，ＣＦ，ＣＧ，ＣＩ，ＣＭ，ＧＡ，ＧＮ，ＭＬ，ＭＲ，ＮＥ，ＳＮ，ＴＤ，ＴＧ)，ＡＰ(ＧＨ，ＧＭ，ＫＥ，ＬＳ，ＭＷ，ＳＤ，ＳＺ，ＵＧ，ＺＷ)，ＥＡ(ＡＭ，ＡＺ，ＢＹ，ＫＧ，ＫＺ，ＭＤ，ＲＵ，ＴＪ，ＴＭ)，ＡＬ，ＡＭ，ＡＴ，ＡＵ，ＡＺ，ＢＡ，ＢＢ，ＢＧ，ＢＲ，ＢＹ，ＣＡ，ＣＨ，ＣＮ，ＣＵ，ＣＺ，ＤＥ，ＤＫ，ＥＥ，ＥＳ，ＦＩ，ＧＢ，ＧＥ，ＧＨ，ＧＭ，ＧＷ，ＨＵ，ＩＤ，ＩＬ，ＩＳ，ＪＰ，ＫＥ，ＫＧ，ＫＰ，ＫＲ，ＫＺ，ＬＣ，ＬＫ，ＬＲ，ＬＳ，ＬＴ，ＬＵ，ＬＶ，ＭＤ，ＭＧ，ＭＫ，ＭＮ，ＭＷ，ＭＸ，ＮＯ，ＮＺ，ＰＬ，ＰＴ，ＲＯ，ＲＵ，ＳＤ，ＳＥ，ＳＧ，ＳＩ，ＳＫ，ＳＬ，ＴＪ，ＴＭ，ＴＲ，ＴＴ，ＵＡ，ＵＧ，ＵＳ，ＵＺ，ＶＮ，ＹＵ，ＺＷ (72)発明者トランタン，キエム−ゴクフランス国Ｆ―91190 ジフシュールイヴェット，アヴェニューデュジェネラルルクレール 104 (72)発明者ビュイ，ヴァンルフランス国Ｆ―91190 ジフシュールイヴェット，シュマンデムーラン９

Claims

【特許請求の範囲】１．賦形剤、特に葉へ適用される組成物の通常の成分、及び活性成分を含有する、特に葉に適用される組成物において、該活性成分が、 − １０までの重合度を有し、β１-３、β１-４及びα１-３が結合した１０までの、好ましくは５までの、より好ましくは２つの糖質単位を有するオリゴ糖、特にラミナリビオース、セロビオース、ニガーロース、ラミナリトリオース、ラミナリテトラオース及びラミナリペンタオースからなる群のもの、 − 遊離のアノマー炭素又は遊離水酸化物を持つ全ての炭素原子において、 − Ｃ₁からＣ₅アルキル基、好ましくはメチル基、 − Ｃ₁からＣ₅アシル基、好ましくはアセチル基、 − アリール基、好ましくはピリジルアミノ基、 − Ｃ_xからＣ_yのシクロアルキル基、 − アミン類、 − Ｎ-アセチル基、及び − サルフェート及びホスフェート基、からなる群から選択される基が置換された上記オリゴ糖の誘導体、からなる群から選択される花粉粒の発芽を刺激しうる少なくとも１種の植物衛生物質により構成されることを特徴とする組成物。２．花粉粒の発芽を刺激しうる植物衛生物質により構成される活性剤と組合わせて、少なくとも１種の他の植物衛生物質を含有することを特徴とする請求項１に記載の組成物。３．花粉粒の発芽を刺激しうる植物衛生物質により構成される活性剤と組合わせて、少なくとも１種の殺菌剤を含有することを特徴とする請求項１に記載の組成物。４．活性物質の濃度は１から２０重量％、好ましくは１．５から１０重量％、より好ましくは２から８重量％であることを特徴とする請求項１ないし３の何れか１項に記載の組成物。５．活性成分がラミナリビオース及び／又はニガーロースからなることを特徴とする請求項１ないし４の何れか１項に記載の組成物。６．花粉粒の発芽を刺激するための植物の処理方法において、請求項１ないし５の何れか１項に記載の組成物を、特に葉に適用することを含んでなることを特徴とする処理方法。７．請求項１ないし５の何れか１項に記載の組成物の適用は、ヘクタール当り１０から１０００ｇ、好ましくは２０から５００ｇ、更により好ましくは５０から２５０ｇの活性剤となる量でなされることを特徴とする請求項６に記載の処理方法。８．請求項１ないし５の何れか１項に記載の組成物の適用を、開花時、より特定的には受粉時であって、好ましくは葯が開く前もしくは開く瞬間になすことを特徴とする請求項６又は７に記載の処理方法。