JP2001506268A

JP2001506268A - 皮膚移植片の取込みの改善のためのペプチドの使用

Info

Publication number: JP2001506268A
Application number: JP52798898A
Authority: JP
Inventors: ロジャース，カスリーン，イー．; ディゼレガ，ジーア，ストッダー
Original assignee: ザユニバーシティオブサザーンカリフォルニア
Priority date: 1996-12-16
Filing date: 1997-12-16
Publication date: 2001-05-15
Also published as: KR20000057598A; US6110895A; CA2272853A1; AU723373B2; AU5709298A; WO1998026795A1; EP0944393A1

Abstract

(57)【要約】皮膚移植片の下層組織中への取込みを促進するための医薬の調製にペプチド化合物が用いられる。本発明に関連して有用な組成物は、アンギオテンシンII（ＡII）、ＡII類似体、ＡII断片およびその類似体、アンギオテンシノーゲンおよびその類似体、ならびにアンギオテンシノーゲン断片およびその類似体を包含する。

Description

【発明の詳細な説明】皮膚移植片の取込みの改善のためのペプチドの使用技術分野本発明は、一般に、生化学および医学の分野に関する。詳しくは本発明は、皮膚移植片の増殖および癒合を促進するのに用いるための組成物および方法に関する。発明の背景哺乳類組織における創傷（すなわち、裂創または開口）は、創傷面で組織破壊および微小血管系の凝固を引き起こす。こうした組織の修復は、損傷に対して秩序正しく制御された細胞の応答の現れである。すべての軟組織創傷は、サイズとは無関係に、同じように治癒する。組織の成長および修復は生物学的システムであり、細胞増殖と血管形成は酸素勾配（oxygen gradient）の存在下で起こる。連続的な形態学的変化および構造的変化は組織修復中に起こるものであるが、こうした変化は非常に詳細に特徴付けられており、定量されている例もある（Hunt et al.，"Coagulation and macrophage stimulation of angiogenesis and wou nd healing,"in The surgical wound，pp．1-18，ed．F．Dineen & G．Hildrick -Smith(Lea & Febiger，Philadelphia:1981)）。細胞形態形成は、３つの異なる区域から構成される。中心の無血管創傷空間は、酸素が欠乏しており、酸血性および炭酸過剰性であり、乳酸塩濃度が高い。創傷空間には局部貧血（虚血）の勾配帯（gradient zone）が隣接しており、ここでは繊維芽細胞が分裂して増殖する。この先導帯に続くのが活性コラーゲン合成領域であり、成熟繊維芽細胞と多数の新たに形成された毛細管（血管新生）を特徴とする。この新たな血管の成長（血管形成）は創傷組織の治癒に必要である一方、一般に血管形成剤では、予てからの要望である組織修復に対する付加的生合成効果を提供することは不可能である。創傷（重度の熱傷、外科的切開、裂傷やその他の外傷）をさらに迅速に治癒させる必要があるのにも関わらず、今日まで、医薬を用いた創傷治癒の促進でうまくいった例は限られている。米国特許第５，０１５，６２９号（DiZerega）（この記載内容は、参照により本明細書中に含まれる）は、創傷組織の治癒速度の増大のための方法であって、前記増大に十分な量のアンギオテンシンII（ＡII）をこのような組織へ適用することを含む方法を記載する。アンギオテンシンIIの創傷組織への適用は、創傷治癒速度を有意に増大し、より迅速な再上皮形成および組織修復をもたらす。アンギオテンシンIIという用語は、配列Ａｓｐ−Ａｒｇ−Ｖａｌ−Ｔｙｒ−Ｉｌｅ− Ｈｉｓ−Ｐｒｏ−Ｐｈｅ（配列番号１）を有するヒトおよびその他の種に存在するオクタペプチドを指す。アンギオテンシンIIは公知の昇圧剤であり、市販されている。創傷治癒の促進におけるアンギオテンシンIIの効用にもかかわらず、創傷治癒を促すのに有用な別の薬剤が依然として必要とされている。さらに、アンギオテンシンIIより高血圧を誘発する効力の低い薬剤を用いることは非常に有益である。ＡＴ２受容体に対して選択性のペプチドアゴニスト（このペプチドはＡＴ２に対する親和性がＡＴ１より１００倍高い）が同定された。ｐ−アミノフェニルアラニン６−ＡIIまたは「ｐ−ＮＨ₂−Ｐｈｅ６−ＡII」と呼ばれるこのペプチドは、配列Ａｓｐ−Ａｒｇ−Ｖａｌ−Ｔｙｒ−Ｉｌｅ−Ｘａａ−Ｐｒｏ−Ｐｈｅ（配列番号２）（ここで、Ｘａａはｐ−ＮＨ₂−Ｐｈｅである）を有する（Speth e t al.，Biochem．Biophys．Res．Commun．169:997(1990)）。２つのアンギオテンシンII受容体サブタイプは、アンギオテンシンIIの選択性作動性類似体すなわちｐ−アミノフェニルアラニン６アンギオテンシンIIで区別される（Biochem．B iophys．Res．Commun．169:997）。このペプチドは、試験した実験モデルにおいてＡＴ２アンタゴニストに匹敵する結合特性を示した（Catalioto et al.，Eur ．J．Pharmacol.256:93(1994);Bryson et al.，Eur．J．Pharmacol．225:119(19 92)）。今までに知られている組成物のすべての欠点を有さない組成物および方法を提供することが、本発明の目的である。発明の概要本発明の一態様は、哺乳類の下層組織(underlying tissue)中への皮膚移植片の取込み(incorporation)を促進する方法に関する。この方法は、（１）アンギオテンシンIIおよび製薬上許容可能な担体を含む、移植片取込み促進に有効な量の組成物を皮膚移植片または下層組織に適用し、（２）皮膚移植片と下層組織とを接触させ、そして（３）皮膚移植片を下層組織に固定する工程を含み、それにより前記皮膚移植片の前記下層組織中への取込みが促進される方法である。一実施態様によれば、皮膚移植片は自己移植片である。本発明の好ましい実施態様によれば、製薬上許容可能な担体としては、緩衝生理食塩水溶液が挙げられる。担体が緩衝生理食塩水を含む場合、アンギオテンシンIIを含有する組成物は、皮膚移植片を浸漬することにより適用工程で適用され得る。あるいは、製薬上許容可能な担体としては、カルボキシメチルセルロースが挙げられる。組成物がカルボキシメチルセルロースおよびアンギオテンシンIIを含む場合、それは下層組織に適用され得る。別の好ましい実施態様によれば、緩衝生理食塩水溶液およびアンギオテンシンIIを含む組成物は、下層組織に適用され得る。さらに好ましい別の実施態様によれば、固定工程は、縫合、包帯または生物学的接着剤の適用のいずれかにより成し遂げられる。本発明の別の態様は、哺乳類の下層組織への皮膚移植片の取込みを促進する方法に関する。この方法は、（１）製薬上許容可能な担体および一般式：Ｒ¹−Ｒ²−Ｒ³−Ｒ⁴−Ｒ⁵−Ｒ⁶−Ｒ⁷−Ｒ⁸ （式中、Ｒ¹およびＲ²は共に式：Ｘ−Ｒ^A−Ｒ^B （ここで、ＸはＨまたは１〜３個のペプチド基であり、Ｒ^AとＲ^Bとの間のペプチド結合はアミノペプチダーゼＡ切断に対して不安定である）の基を形成し、Ｒ³はＶａｌ、Ａｌａ、Ｌｅｕ、ｎｏｒＬｅｕ、Ｉｌｅ、Ｇｌｙ、Ｐｒｏ、Ａｉｂ、ＡｃｐｃおよびＴｙｒからなる群から選択され、Ｒ⁴はＴｙｒ、Ｔｙｒ（ＰＯ₃）₂、Ｔｈｒ、Ｓｅｒ、ｈｏｍｏＳｅｒおよびａｚａＴｙｒからなる群から選択され、Ｒ⁵はＩｌｅ、Ａｌａ、Ｌｅｕ、ｎｏｒＬｅｕ、ＶａｌおよびＧｌｙからなる群から選択され、Ｒ⁶はＨｉｓ、Ａｒｇまたは６−ＮＨ₂−Ｐｈｅであり、Ｒ⁷はＰｒｏまたはＡｌａであり、そしてＲ⁸はＰｈｅ、Ｐｈｅ（Ｂｒ）、ＩｌｅおよびＴｙｒからなる群から選択され、但し末端Ｔｙｒ基としてＲ⁴を含む配列を除く）の基Ｒ¹〜Ｒ⁸の少なくとも３つの連続するアミノ酸からなるペプチドを含む、移植片取込み促進に有効な量の組成物を皮膚移植片または下層組織に適用し、（２）皮膚移植片と下層組織とを接触させ、そして（３）皮膚移植片を下層組織に固定する工程を含み、それにより前記皮膚移植片の前記下層組織中への取込みが促進される方法である。一実施態様によれば、皮膚移植片は自己移植片である。本発明の好ましい実施態様によれば、製薬上許容可能な担体としては、緩衝生理食塩水溶液が挙げられる。担体が緩衝生理食塩水を含む場合、ペプチドを含有する組成物は、皮膚移植片を浸漬することにより適用工程で適用され得る。あるいは、製薬上許容可能な担体としては、カルボキシメチルセルロースが挙げられる。組成物がカルボキシメチルセルロースおよびペプチドを含有する場合、それは下層組織に適用され得る。別の好ましい実施態様によれば、緩衝生理食塩水溶液およびペプチドを含有する組成物は、下層組織に適用され得る。さらに別の好ましい実施態様によれば、固定工程は、縫合、包帯または生物学的接着剤の適用のいずれかにより成し遂げられる。本発明のさらに別の態様は、哺乳類の下層組織中への皮膚移植片の取込みを促進する方法に関する。この方法は、（１）製薬上許容可能な担体および一般式：Ｒ²−Ｒ³−Ｒ⁴−Ｒ⁵−Ｒ⁶−Ｒ⁷−Ｒ⁸ （式中、Ｒ²はＨ、Ａｒｇ、Ｌｙｓ、Ａｌａ、Ｏｒｎ、Ｓｅｒ（Ａｃ）、Ｓａｒ、Ｄ−ＡｒｇおよびＤ−Ｌｙｓからなる群から選択され、Ｒ³はＶａｌ、Ａｌａ、Ｌｅｕ、ｎｏｒＬｅｕ、Ｉｌｅ、Ｇｌｙ、Ｐｒｏ、Ａｉｂ、ＡｃｐｃおよびＴｙｒからなる群から選択され、Ｒ⁴はＴｙｒ、Ｔｙｒ（ＰＯ₃）₂、Ｔｈｒ、Ｓｅｒ、ｈｏｍｏＳｅｒおよびａｚａＴｙｒからなる群から選択され、Ｒ⁵はＩｌｅ、Ａｌａ、Ｌｅｕ、ｎｏｒＬｅｕ、ＶａｌおよびＧｌｙからなる群から選択され、Ｒ⁶はＨｉｓ、Ａｒｇまたは６−ＮＨ₂−Ｐｈｅであり、Ｒ⁷はＰｒｏまたはＡｌａであり、そしてＲ⁸はＩｌｅ、Ｐｈｅ、Ｐｈｅ（Ｂｒ）およびＴｙｒからなる群から選択される）を有するペプチドを含む、移植片取込み促進に有効な量の組成物を皮膚移植片または下層組織に適用し、（２）皮膚移植片と下層組織とを接触させ、そして（３）皮膚移植片を下層組織に固定する工程を含み、それにより前記皮膚移植片の前記下層組織中への取込みが促進される方法である。一実施態様によれば、皮膚移植片は自己移植片である。本発明の好ましい実施態様によれば、製薬上許容可能な担体としては、緩衝生理食塩水溶液が挙げられる。担体が緩衝生理食塩水を含む場合、ペプチドを含有する組成物は、皮膚移植片を浸漬することにより適用工程で適用され得る。あるいは、製薬上許容可能な担体としては、カルボキシメチルセルロースが挙げられる。組成物がカルボキシメチルセルロースおよびペプチドを含有する場合、それは下層組織に適用され得る。別の好ましい実施態様によれば、緩衝生理食塩水溶液およびペプチドを含有する組成物は、下層組織に適用され得る。さらに別の好ましい実施態様によれば、固定工程は、縫合、包帯または生物学的接着剤の適用のいずれかにより成し遂げられる。図面の簡単な説明本発明は、添付の図面を参照することにより、よりよく理解され得る。図１は、類似体１および４を用いたビヒクル処置対照に対する創傷閉鎖における対照反応のパーセントを示す。図２は、２つの異なる用量で類似体２および３を用いたビヒクル処置対照に対する創傷閉鎖における対照反応のパーセントを示す。図３は、類似体２を用いたビヒクル処置対照に対する創傷閉鎖における対照反応のパーセントを示す。図４は、類似体５〜８を用いたビヒクル処置対照に対する創傷閉鎖における対照反応のパーセントを示す。図５は、類似体９〜１２を用いたビヒクル処置対照に対する創傷閉鎖における対照反応のパーセントを示す。図６は、類似体６〜８を用いた肉芽組織の形成における対照反応のパーセントを示す。図７は、類似体９〜１１を用いた肉芽組織の形成における対照反応のパーセントを示す。図８は、ＡIIIを用いたビヒクル処置対照に対する創傷閉鎖の増大パーセントを示す。図９は、種々のＡIII類似体を用いたビヒクル処置対照に対する創傷閉鎖における対照反応のパーセントを示す。図１０は、種々のＡIII類似体を用いたビヒクル処置対照に対する創傷閉鎖における対照反応のパーセントを示す。図１１は、種々のＡIII類似体を用いた肉芽組織の形成における対照反応のパーセントを示す。図１２は、種々のＡIII類似体を用いた肉芽組織の形成における対照反応のパーセントを示す。図１３は、ＡIIの種々の断片を用いたビヒクル処置対照に対する創傷閉鎖における対照反応のパーセントを示す。図１４は、ＡIIの種々の断片を用いたビヒクル処置対照に対する創傷閉鎖における対照反応のパーセントを示す。図１５は、ＡIIの種々の断片で処置した動物の対照創傷における肉芽組織の形成を示す。図１６は、ＡIIの種々の断片で処置した動物の対照創傷における肉芽組織の形成を示す。図１７は、ＡIIの種々の断片で処置した動物における肉芽組織の形成を示す。図１８は、ＡIIの種々の断片で処置した動物における肉芽組織の形成を示す。図１９は、種々のＡII断片で処置した動物の対照創傷における肉芽組織の形成を示す。図２０は、種々のＡII断片で処置した動物における肉芽組織の形成を示す。図２１は、ＡIIの種々の断片を用いたビヒクル処置対照に対する創傷開鎖における対照反応のパーセントを示す。図２２は、（ｐ−ＮＨ₂−Ｐｈｅ）６−ＡIIを用いたビヒクル処置対照に対する創傷閉鎖における対照反応のパーセントを示す。図２３は、ビヒクル処置、あるいはＡIIまたはｐ−ＮＨ₂−Ｐｈｅ６−ＡII処置創傷における肉芽組織の形成を示す。図２４は、無作為皮弁モデルにおける損傷後の種々の時点での移植片痂皮化または壊死％として測定した場合の移植片取り込みに対するＡII含有薬の効果を示す。図２５は、無作為皮弁モデルにおける損傷後の種々の時点での移植片痂皮化または壊死％として測定した場合の移植片取り込みに対するＡII含有薬の効果を示す。図２６は、損傷後８および１２日目の完全に生存する皮弁のパーセンテージに対するＡIIの種々の濃度の効果を示す。図２７は、損傷後８および１２日目の生存する皮弁のパーセンテージに対するＡIIの種々の濃度の効果を示す。図２８は、手術後７および９日目の高倍率視野当たりの移植境界面での内皮細胞の数に対するＡIIの効果を示す。図２９は、手術後７および９日目の高倍率視野当たりの移植境界面での赤血球を含有する血管の数に対するＡIIの効果を示す。図３０は、移植境界面での内皮細胞の数が浸漬溶液中のＡIIの濃度に依存する様式を示す。図３１は、移植境界面での血管の数が浸漬溶液中のＡIIの濃度に依存する様式を示す。好適な実施態様の詳細な説明本発明によれば、哺乳類における皮膚移植片の癒合は、有効量の少なくとも１つのＡＴ２アゴニスト、アンギオテンシンＩ（ＡＩ）またはその類似体(analog) 、アンギオテンシノーゲンまたはその類似体、ＡII、活性ＡII類似体、ＡIIまたはその類似体の断片を含む組成物の使用により促進される。さらに、これらの化合物に代謝される前駆体も、本発明による皮膚移植片の癒合の促進に際しての使用が考えられ、したがって、本発明の範囲内であると意図される。ＡＴ２受容体サブタイプのアゴニストは創傷修復に利点を有するが、しかし血圧増大および口渇といったようなＡIIの多数の副作用を示さない。活性物質は一般に、基質またはミセル溶液、あるいは晶質組成物として投与され、極低濃度でも再表皮形成および組織修復を促進するのに有効である。後述するように、本発明に用いるのに好ましい種類のＡＴ２アゴニストは、ＡＩまたはその類似体、アンギオテンシノーゲンまたはその類似体、ＡII、ＡIIの６位に相当する位置にｐ−ＮＨ₂−Ｐｈｅを有するＡII類似体またはその活性断片を包含する。ペプチド剤の他に、必要なＡＴ２アゴニスト活性を有する種々の非ペプチド剤（例えばペプチド擬似物質）も本発明による使用が考えられる。本発明で特別に重要な活性ＡII類似体、ＡIIの断片およびそれらの類似体は、下記一般式Ｉの配列中の基Ｒ¹〜Ｒ⁸の少なくとも３つの連続するアミノ酸からなる配列を含むことを特徴とする。Ｒ¹−Ｒ²−Ｒ³−Ｒ⁴−Ｒ⁵−Ｒ⁶−Ｒ⁷−Ｒ⁸ （Ｉ）（式中、Ｒ¹およびＲ²は共に式：Ｘ−Ｒ^A−Ｒ^B （ここで、ＸはＨまたは１〜３個のペプチド基であり、Ｒ^AとＲ^Bとの間のペプチド結合はアミノペプチダーゼＡ切断に対して不安定である）の基を形成し、Ｒ³はＶａｌ、Ａｌａ、Ｌｅｕ、ｎｏｒＬｅｕ、Ｉｌｅ、Ｇｌｙ、Ｐｒｏ）Ａｉｂ、ＡｃｐｃおよびＴｙｒからなる群から選択され、Ｒ⁴はＴｙｒ、Ｔｙｒ（ＰＯ₃）₂、Ｔｈｒ、Ｓｅｒ、ｈｏｍｏＳｅｒおよびａｚａＴｙｒからなる群から選択され、Ｒ⁵はＩｌｅ、Ａｌａ、Ｌｅｕ、ｎｏｒＬｅｕ、ＶａｌおよびＧｌｙからなる群から選択され、Ｒ⁶はＨｉｓ、Ａｒｇまたは６−ＮＨ₂−Ｐｈｅであり、Ｒ⁷はＰｒｏまたはＡｌａであり、そしてＲ⁸はＰｈｅ、Ｐｈｅ（Ｂｒ）、ＩｌｅおよびＴｙｒからなる群から選択され、但し末端Ｔｙｒ基としてＲ⁴を含む配列を除く）本発明の実施に有用なＡＴ２アゴニストの範疇に入る化合物としては、Ｒ⁶がｐ−ＮＨ₂−Ｐｈｅであるという制限を受ける前記のＡII類似体が挙げられる。好ましい実施態様の一つの種類では、Ｒ^AはＡｓｐ、Ｇｌｕ、Ａｓｎ、Ａｃｐｃ（１−アミノシクロペンタンカルボン酸）、Ａｌａ、Ｍｅ²Ｇｌｙ、Ｐｒｏ、Ｂｅｔ、Ｇｌｕ（ＮＨ₂）、Ｇｌｙ、Ａｓｐ（ＮＨ₂）およびＳｕｃから適切に選択される。Ｒ^Bは、Ａｒｇ、Ｌｙｓ、Ａｌａ、Ｏｒｎ、Ｓｅｒ（Ａｃ）、ｓａｒ、Ｄ−ＡｒｇおよびＤ−Ｌｙｓから適切に選択される。Ｒ^AとＲ^Bの特に好ましい組合せは、Ａｓｐ−Ａｒｇ、Ａｓｐ−Ｌｙｓ、Ｇｌｕ−ＡｒｇおよびＧｌｕ−Ｌｙｓである。この種類の特に好ましい実施態様を以下に示す。ＡII、ＡIII、または、ＡII （２−８）すなわちＡｒｇ−Ｖａｌ−Ｔｙｒ−Ｉｌｅ−Ｈｉｓ−Ｐｒｏ−Ｐｈｅ（配列番号３）、ＡII（３−８）すなわちｄｅｓ１−ＡIIIもしくはＡIVとしても既知のＶａｌ−Ｔｙｒ−Ｉｌｅ−Ｈｉｓ−Ｐｒｏ−Ｐｈｅ（配列番号４）、Ａ II（１−７）すなわちＡｓｐ−Ａｒｇ−Ｖａｌ−Ｔｙｒ−Ｉｌｅ−Ｈｉｓ−Ｐｒｏ（配列番号５）、ＡII（２−７）すなわちＡｒｇ−Ｖａｌ−Ｔｙｒ−Ｉｌｅ− Ｈｉｓ−Ｐｒｏ（配列番号６）、ＡII（３−７）すなわちＶａｌ−Ｔｙｒ−Ｉｌｅ−Ｈｉｓ−Ｐｒｏ（配列番号７）、ＡII（５−８）すなわちＩｌｅ−Ｈｉｓ− Ｐｒｏ−Ｐｈｅ（配列番号８）、ＡII（１−６）すなわちＡｓｐ−Ａｒｇ−Ｖａｌ−Ｔｙｒ−Ｉｌｅ−Ｈｉｓ（配列番号９）、ＡII（１−５）すなわちＡｓｐ− Ａｒｇ−Ｖａｌ−Ｔｙｒ−Ｉｌｅ（配列番号１０）、ＡII（１−４）すなわちＡｓｐ−Ａｒｇ−Ｖａｌ−Ｔｙｒ（配列番号１１）、およびＡII（１−３）すなわちＡｓｐ−Ａｒｇ−Ｖａｌ（配列番号１２）。その他の好ましい実施態様としては、以下のものが挙げられる：Ａｒｇ−ｎｏｒＬｅｕ−Ｔｙｒ−Ｉｌｅ−Ｈｉｓ −Ｐｒｏ−Ｐｈｅ（配列番号１３）およびＡｒｇ−Ｖａｌ−Ｔｙｒ−ｎｏｒＬｅｕ−Ｈｉｓ−Ｐｒｏ−Ｐｈｅ（配列番号１４）。本発明の範囲内に包含されるさらに別の好ましい実施態様は、配列Ａｓｐ−Ａｒｇ−Ｐｒｏ−Ｔｙｒ−Ｉｌｅ− Ｈｉｓ−Ｐｒｏ−Ｐｈｅ（配列番号３２）を有するペプチドである。ＡII（６− ８）すなわちＨｉｓ−Ｐｒｏ−Ｐｈｅ（配列番号１５）およびＡII（４−８）すなわちＴｙｒ−Ｉｌｅ−Ｈｉｓ−Ｐｒｏ−Ｐｈｅ（配列番号１６）も試験されたが、有効でないことが判明した。本発明で特別に重要な別の種類の化合物は、下記一般式IIを有するものである。Ｒ²−Ｒ³−Ｒ⁴−Ｒ⁵−Ｒ⁶−Ｒ⁷−Ｒ⁸ （II）（式中、Ｒ²はＨ、Ａｒｇ、Ｌｙｓ、Ａｌａ、Ｏｒｎ、Ｓｅｒ（Ａｃ）、Ｓａｒ、Ｄ−ＡｒｇおよびＤ−Ｌｙｓからなる群から選択され、Ｒ³はＶａｌ、Ａｌａ、Ｌｅｕ、ｎｏｒＬｅｕ、Ｉｌｅ、Ｇｌｙ、Ｐｒｏ、Ａｉｂ、ＡｃｐｃおよびＴｙｒからなる群から選択され、Ｒ⁴はＴｙｒ、Ｔｙｒ（ＰＯ₃）₂、Ｔｈｒ、Ｓｅｒ、ｈｏｍｏＳｅｒおよびａｚａＴｙｒからなる群から選択され、Ｒ⁵はＩｌｅ、Ａｌａ、Ｌｅｕ、ｎｏｒＬｅｕ、ＶａｌおよびＧｌｙからなる群から選択され、Ｒ⁶はＨｉｓ、Ａｒｇまたは６−ＮＨ₂−Ｐｈｅであり、Ｒ⁷はＰｒｏまたはＡｌａであり、そしてＲ⁸はＩｌｅ、Ｐｈｅ、Ｐｈｅ（Ｂｒ）およびＴｙｒからなる群から選択される）一般式IIの特に好ましい亜種の化合物は次式を有する。Ｒ²−Ｒ³−Ｔｙｒ−Ｒ⁵−Ｈｉｓ−Ｐｒｏ−Ｐｈｅ（配列番号１７）（式中、Ｒ²、Ｒ³およびＲ⁵は前記と同様である）特に好ましいのは、式Ａｒｇ−Ｖａｌ−Ｔｙｒ−Ｉｌｅ−Ｈｉｓ−Ｐｒｏ−Ｐｈｅ（配列番号３）のアンギオテンシンIII（ＡIII）である。その他の好ましい化合物としては、構造式Ａｒｇ−Ｖａｌ−Ｔｙｒ−Ｇｌｙ−Ｈｉｓ−Ｐｒｏ−Ｐｈｅ（配列番号１８）およびＡｒｇ−Ｖａｌ−Ｔｙｒ−Ａｌａ−Ｈｉｓ−Ｐｒｏ− Ｐｈｅ（配列番号１９）を有するペプチドが挙げられる。断片ＡII（４−８）は、反復試験で有効でなかった。これは、Ｎ末端の露出チロシンのためであると考えられる。前記の式中では、標準的なアミノ酸残基の三文字略記が用いられている。特に指示がない場合は、アミノ酸はＬ体が意図される。他の残基は以下のように略される。表１アミノ酸の略語ＡIIおよびその類似体は、ガンマまたはベータターンを取ることが示唆されている（Regoli et al.，Pharmacological Reiews 26:69(1974)）。概して、位置Ｒ³、Ｒ⁵およびＲ⁷における中性側鎖は、受容体との結合および／または固有の活性に基本的に関与する位置Ｒ⁴、Ｒ⁶およびＲ⁸における活性基間の適切な距離を保持するのに関与すると思われる。位置Ｒ³、Ｒ⁵およびＲ⁸における疎水性側鎖は、またペプチドの全体の立体配座において重要な役割を果たし、および／または仮説的疎水性ポケットの形成に関与し得る。位置Ｒ²のアミノ酸の適切な側鎖は、標的受容体に対する化合物の親和性に寄与し、および／またはペプチドの立体配座に重要な役割を果たし得る。この理由のために、ＡｒｇおよびＬｙｓがＲ²として特に好ましい。本発明の目的のために、Ｒ³は、Ｒ⁵（ガンマターンモデルで）またはＲ⁶（ベータターンモデルで）との線状または非線状水素結合の形成に関与し得ると考えられる。Ｒ³は、ベータ逆平行構造（これもまた考え得る構造として提案された）における第１ターンにも関与する。一般式Ｉにおける他の位置に対比して、ベータおよびガンマ分枝はこの位置で等しく有効であると思われる。さらに、単一水素結合は、相対的に安定な立体配座を保持するのに十分であり得る。したがって、Ｒ³は、Ｖａｌ、Ａｌａ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｇｌｙ、Ｐｒｏ、Ａｉｂ、ＡｃｐｃおよびＴｙｒから適切に選択され得る。Ｒ⁴に関しては、立体配座分析は、この位置での（ならびにＲ³およびＲ⁵での）側鎖が、受容体の占有および刺激に不可欠と思われる疎水性クラスターに関与することが示唆される。したがって、Ｒ⁴は、好ましくはＴｙｒ、Ｔｈｒ、ＳｅｒおよびａｚａＴｙｒから選択される。この位置では、フェノール性ヒドロキシルから水素を受容可能な受容体部位との水素結合を形成し得るので、Ｔｙｒが特に好ましい（Regoli et al．（1974）,上記）。位置Ｒ⁵では、β脂肪族または脂環式鎖を有するアミノ酸が特に好ましい。したがって、Ｇｌｙが位置Ｒ⁵に適している一方、この位置のアミノ酸はＩｌｅ、Ａｌａ、ＬｅｕおよびＶａｌから選択されるのが好ましい。本発明で特別に重要なＡIIの類似体、断片および断片の類似体において、Ｒ⁶ はＨｉｓ、Ａｒｇまたは６−ＮＨ₂−Ｐｈｅである。ヒスチジンのイミダゾール環の独特の特性（例えば、生理学的ｐＨでのイオン化、プロトン供与体または受容体として作用する能力、芳香族特性）は、Ｒ⁶としてその特定の有用性に寄与すると考えられる。例えば、立体配座モデルは、Ｈｉｓが水素結合形成（ベータモデルで）に、またはＲ⁷の配向に影讐を及ぼすことにより逆平行構造の第二ターンに関与し得ることを示唆する。同様に、Ｒ⁷は、Ｒ⁸の最も望ましい配向を提供するために、Ｐｒｏであるべきであると、目下考えられている。位置Ｒ⁸では、疎水性環および陰イオン性カルボキシル末端はともに、当該類似体の受容体との結合に特に有用であるようである。したがって、Ｔｙｒそして特にＰｈｅは、本発明の目的のために好ましい。特に重要な類似体を以下に示す。表２アンギオテンシンII類似体アンギオテンシンIIは、毛管を形成するために分枝した小動脈、すなわち細動脈の収縮を引き起こすことが知られている最も強力な血管収縮薬の１つである。アンギオテンシンの生物学的生成は、血漿基質アンギオテンシノーゲンに対するレニンの作用により開始される。生成される物質は、アンギオテンシンＩと呼ばれるデカペプチドであり、これは、アンギオテンシンＩからＣ末端のＨｉｓ−Ｌｅｕ残基を除去する変換酵素アンギオテンシナーゼによりアンギオテンシンIIに変換される。レニン−アンギオテンシン系の血管作用性生成物であるＡIIは、創傷修復に関与する成長因子の放出、有糸分裂、走化性および培養細胞の細胞外基質の放出を増大することが研究により示されている（Dzau et al.，J．Mol．Cell Cardiol ．21（Suppl．III）:S7（1989）;Berk et al.，Hypertension 13:305（1989）;K awahara et al.，BBRC 150:52（1988）；Naftilan et al.，J.Clin．Invest．8 3:1419（1989）；Taubman et al.，J．Biol.Chem．264:526（1989）；Nakahara et al.，BBRC 184:811-8（1992）；Stouffer et al.，Circ．Res．70:820（1992 ）；Wolf et al.，Am．J．Pathol．140:95（1992）；Bell et al.，Am．J．Path ol．137:7(1990)）。さらに、ＡIIは、ウサギ眼の角膜およびニワトリ漿尿膜モデルにおいて脈管形成性であることが示された（Fcmandez et al.，J．Lab．Cli n．Med．105:141（1985）；LeNoble et al.，Eur．J．Pharmacol．195:305(199 1)）。したがって、ＡIIは、新生脈管形成、成長因子放出、再表皮形成および細胞外基質の産生の増大により創傷修復を促進する可能性がある。損傷組織への血液および栄養分の流量の増大により、ＡIIは創傷修復速度を増大する可能性がある。ＡIIは、損傷部位での成長因子の生成によっても創傷修復を促進する可能性がある。成長因子の外因性付加は種々のメカニズムにより創傷修復を促進することが示されている（Grotendorst et al.，J．Clin．Invest．76:2323（1985）； Mustoe et al.，Science 237:1333（1987）；Pierce et al.，J．Exp．Med．167 :974（1988）；Lynch et al.，J．Clin．Invest．84:640（1989）；Greenhalgh et al.，Am．J．Pathol．136:1235(1990)）。近年の研究は、ＡIIが損傷後の頸動脈および大動脈における新内膜形成を増大することを示した（Powell et al. ，Science 245:186（1989）;Powell et al.，J．Cardiovasc．Pharmacol．16(su ppl 4):S42-9（1991）；Capron et al.，J．Cardiovasc．Pharmacol．18:207（1 991）；Osterriedes et al.，Hypertension 18:Suppl II 60-64（1991）；Daeme n et al.，Circ．Res．68:450（1991））。これらの観察の結果、内因性ＡIIが内皮過形成を誘導し得るメカニズムを確定するために、研究が実施された。ＡII は、平滑筋細胞、繊維芽細胞および内皮細胞のためのマイトジェンとして作用することが示された（Schelling et al.，J．Cell．Physiol．98:503（1979）；Ca mpbell-Boswell Exp．Mol．Pathol．35:265（1981）；Emmett et al.，J．Cell ．Biol．103:171（1986）；Paquet et al.，J.Hypertens．8:565（1990）；Dzau et al.,上記）。ＡIIは、血管平滑筋細胞のタンパク質含量およびサイズも増大する（Berk et al．（1989）,上記; Geisterfer et al.，Cir．Res．62:749（1988））。ＡIIは、平滑筋細胞、内皮細胞および心臓繊維芽細胞からの種々の型の成長因子、例えばＰＤＧＦ、ヘパリン結合ＥＧＦおよびトランスフォーミング成長因子β（ＴＧＦβ）、ならびに成長関連原癌遺伝子の放出を増大することを、研究は示した（Kawahara et al．（ 1988）,上記;Naftilan，A.J.，J．Cardiovas．Pharmacol．20:S37（1992）；Naf tilan et al．（1989），上記;Taubman et al．（1989），上記;Nakahara et al ．（1992），上記;Temizer et al．（1992）,上記;Gibbons et al.，J．Clin．I nvest．90:456（1992）；Bell et al.，J．Clin．Invest．89:315（1992）；Sto uffer et al．（1992）,上記）。ＡIIによる血管平滑筋細胞の肥厚は、ＰＤＧＦにより媒介された（Berk et al.，J．Cell．Physiol．154:368（1993））。したがって、ＡIIは、創傷組織におけるこれらの成長因子のレベルを増大することにより創傷修復を促進するよう作用する、と考えられる。さらに、ＡIIは、コラーゲン合成を刺激することが示され、それにより細胞外基質形成におけるこの因子に関する役割が示唆される（Wolf et al.，Cell．Reg．2:219（1991）;Wo lf et al．（1992）,上記;Zhou et al.，FASEB．J．6:A1914（1992））。創傷修復は、必要な細胞型の創傷床への走化性も関与する。ＡIIは、in vitroの内皮細胞および平滑筋細胞の移動を誘導することも示された（Bell et al．（1990）, 上記）。近年の研究は、ＡII受容体の発現が創傷修復過程で変化することも示した（Vi swanathan et al.，Peptides 13:783（1992）；Kimura et al.，BBRC 187:1083 （19920））。これらの変化は、修復部位でのＡIIの局所産生の増大の証拠とともに、ＡIIが創傷修復の過程で鍵となる役割を果たし得ることを示唆する。創傷修復に関与し得るＡIIの作用は、近年、再検討された（Phillips et al .，Angiotensin receptor stimulation of transforming growth factor-βin r at skin and wound healing．In Angiotensin Receptors（ed JM Saavedra and PBMWM Timmermans），Plenum Press，New York，NY，pp 377-396（1994））。報告された研究の大半において、これらの効果はＡＴ１受容体により媒介されることが示された。ＡIIの血圧作用（そしてアルドステロン分泌および口渇増大といったような他のほとんどの効果）は、１型受容体（ＡＴ１受容体）により媒介される（Wong， PC Angiotensin antagonists in models of hypertension．In:Angiotensin Rec eptors （JM． Saavedra and PBMWM Timmermans）,Plenum Press NY，NY pp 319-336（1994）;M acKenzie et al.，J．Hypertension 12（Suppl 9）:S11-S16（1994）；Gupta et al.，Hypertension 25:443（1995）；Llorens-Cortes et al.，Hypertension 2 4:538（1994）；Wong et al.，Eur.J．Pharmacol．220:267（1992））。この結論は、受容体サブタイプ特異的アンタゴニストによるＡIIの作用の遮断に基づいている。ＡIIおよびＡIIアンタゴニストの効果は、血管の損傷および修復の２つの実験モデルで実験された。血管系へのバルーン損傷後の血管の過形成へのＡＴ２の関与に関して、研究は結びつけられた。ラット頸動脈では、大多数の受容体がＡＴ２である（Pratt et al.，Hypertension 20:432（1992））。対照的に、損傷ラット胸大動脈の新内皮細胞は、主にＡＴ１受容体を発現する（Viswanathan et a l.，J．Clin．Invest．90:1707（1992））。ＰＤ１２３３１９（ＡＴ２特異的アンタゴニスト）によるラットの処置は内皮増殖を７３％低減し、一方、ロサルタン(losartan)（ＡＴ１特異的アンタゴニスト）は内皮面積を９５％低減した（ Pratt et al.，（1992）,上記）。同様のモデルにおいて、１４日間血管周囲に注入されたＣＧＰ４２１１２（ＡＴ２アンタゴニスト）は、新内皮形成を阻止したが、低用量のロサルタンは無効であった（Janiak et al.，Hypertension 20 :737（1992））。他の研究では、高用量のロサルタンは有効であることが判明した（Fomey Prescott et al.，Am．J．Pathol．139:1291（1991）；Kauffman et al.，Life Sci．49:223（1991））。したがって、両方の受容体サブタイプは、バルーン損傷後の血管病変の形成にある役割を果たし得る、と考えられる。若い動物における実験的創傷治癒中に、ＡII受容体の発現は、創傷周囲の皮膚の浅在真皮内の組織の局在化帯(localized band)中で有意に増大する。この増大のほとんどが、ＡＴ２受容体によるものである（Viswanathan et al.，Pepati des 13:783（1992）；Kimura et al.，Biochem．Biophys．Res．Commun．187:10 83（1992））。これらの結果、ならびに本明細書で以下に開示される結果は、実験動物として成熟ラットを用いた手法により得られた。ＡＴ１受容体は、成熟ラットにおける切開創傷の形成後に変化する。これらの後者の研究における実験計画は、創傷の真皮と他の部分との間を区別しない。ＡIIおよびＡIIIは、いくつかの点で全く異なる生物学的活性を有する、ということが観察されている。例えばＡIIは惹起性ニューロンノルエピネフリン放出に対して二相性作用を示し（初期低減、その後増大）、一方、１２分後にのみ、特発性ノルエピネフリン放出を増大した。ＡIIIは惹起性および特発性の両方のニューロンノルエピネフリン放出に対して二相性作用を示した（Vatta et al.，Ca n．J．Physiol．Pharmacol．70:821（1992））。さらに、ＡIIおよびＡIIIは、圧受容器−心臓−反射に異なる影響を及ぼす。ＡIIは反射の感度を増強し、一方ＡIIIはそれを減損する（Brattstrom et al.，Progress in Brain Research 91: 75（1992））。意外なことに、ＡIIとＡIIIとの間の生物学的活性におけるこれらの有意の差にもかかわらず、ＡIIIおよびその特定の類似体は、創傷治癒の促進に有用である。多くの研究がその活性を評価するためにＡII（１−７）に集中した。ＡII（１ −７）の多数の作用は、ＡＴ２受容体を介した作用と考えられる。しかしながら、これは一貫せず、実験した組織に依存している。ＡII（１−７）は、ＡIIの作用の多くを有さない。ＡII（１−７）は、昇圧活性を欠き、あるいは、試験したモデルおよび投与経路によって、血圧に非常に穏やかな（AIIの用量の１０，０００〜１００，０００倍で有効）作用を及ぼす。実際、ＡII（１−７）は、プロスタノイド合成により媒介され得る血圧降圧作用を示す。さらに、ＡIIの作用に対比して、ＡII（１−７）はカテコールアミン放出およびアルドステロン放出を引き起こさず、口渇誘発性でない（Webb et al. ，Peptides 13:499（1992）；Cheng et al.，Am．J．Physiol．266:H2247-H2255 (1944);Moriguchi etal.，Am．J．Physiol．267:R786-R791(1944);Schiavone et al.，J．Cardiovascular Pharmacol．16（Suppl．4）:S19-S24（1990）；F errario et al.，Hypertension 19（suppl．III）：III-126-III-133（1991））。ある報告では、ＡII（１−７）は匹敵する反応を得るのに、ＡIIより１０，０００倍多いＡII（１−７）を必要とする弱昇圧剤である（Benter et al.，Pepti des 14:679（1993））。この系では、ＡII（１−７）は用量依存性の長期抑制作用を有した。ＡII（３−７）はＡII（１−７）より低い昇圧作用を有したが、しかし抑制作用は有さなかった。ＡII（１−７）、ＡII（２−７）およびＡII（３ −７）はドーパミン系および記憶に影響を及ぼし得る、ということも注目される（精神活性作用を示唆する）。いくつかの系では、ＡII（１−７）の作用はＡIIと全く異なる。ＡIIは、ＡＴ１受容体によりラットメサンギウム細胞におけるコリン産生を刺激する；ＡII（１−７）およびＡII（１−６）はこのパラメーターに非常に弱い作用を及ぼす（ Pfeilschifer et al.，Eur．J．Pharmacol．225:57（1992））。ブタ大動脈内皮細胞では、ＡＩおよびＡII（１−７）はプロスタグランジンＥ２および１２の放出を刺激したが、しかしＡIIはこの作用を有さなかった（Jais wal et al.，Hypertension 19（Suppl II）:11-49-II-55（1992））。ＡIIは、他の細胞型において、そして無傷血管においてプロスタノイドの放出を刺激し得るが、ヒトまたはブタ内皮細胞ではできない。内皮細胞に対する作用は、ＡＴ１およびＡＴ２とは異なる受容体によるものであった。ラット糸球体標晶では、ＡIIは、ＡＴ１受容体により、ヒスタミン、セロトニンおよび上皮小体ホルモンに応答するｃＡＭＰの形成を阻害した（Edwards et a l.，J．Pharmacol．Exper．Ther．266:506（1993））。ＡII（１−７）は、この作用を有さなかった。ブタ血管平滑筋細胞およびヒト星状膠細胞では、ＡIIおよびＡＩ（１−７）はプロスタグランジン放出を増大するが、アンギオテンシンIIだけが細胞内Ｃａ²⁺ の放出を増大する（Jaiswal et al.，J．Pharmacol．and Exp．Therapeutic 265 :664（1993）；Jaiswal et al.，Hypertension 17:1115（1991））。ＡII（１−７）は、おそらく一酸化窒素により、ブタ冠状動脈環を拡張する（ Porsti et al.，Br．J．Pharmacol．111:652（1994））。これはＡII、ＡIIIまたはＡII（３−８）を用いた場合には観察されなかった。この作用は、ＡＴ１またはＡＴ２受容体のアンタゴニストにより減衰されなかった。ＡIIはラット単離結節性神経節の脱分極を引き起こすが、ＡII（１−７）は引き起こさない（Widdop et al.，Clin．and Exper．Hyper-Theory and Practice A14:597（1992））。実際上、ＡII（１−７）は脳機能に対して新規の作用を有する（Schiavone et al.，J．Cardiovascular Pharmacol.16（Suppl 4）:S19-S2 4（1990））。バソプレッシンの放出および近位尿細管細胞におけるホスホリパーゼＡ２活性の調節といったような、ＡII（１−７）がＡIIと共通する活性がある（Andreatt a-Van Leyen et al.，Kidney International 44:932（1993）；Moriguchi et al ．Am．J． Physiol．267:R786-R791（1994）；Ferrario et al.，Hypertension 19（suppl III）:III-126-III-133（1991））。しかしながら、これらの活性は創傷修復に関与するとは思えない。ＡIIのその他の断片の作用は、ほとんど研究されていない。室傍核におけるほとんどのニューロンはＡII（１−７）、ＡIIおよびＡIIIにより興奮させられるが、しかしＡII（１−７）はこの作用が弱く、多くのニューロンではＡII（２− ７）は不活性である（Ambuhl et al.，Regulatory Peptides 38:111（1992））。側脳室に注入されたＡIIは運動性、常同症および条件回避反応の習熟を増大したが、ＡII（１−６）およびＡII（２−６）はこれらの精神作用性活動においては活性でなかった（Holy et al.，Polish J．Pharmacol．45:31（1993））。ＡII（４−８）、ＡII（５−８）およびＡII（１−４）は、ラットの前方間脳中に注入した場合、水分摂取にわずかに影響を及ぼしただけであったが、ＡII（１−７）は完全に不活性であった（Fitzsimmons J．Physiol．214:295（1971））。ラットにおけるＡII断片（ＡII（４−８）およびＡII（５−８））の脳室内注入は、血圧を増大するＡIIの濃度の１，０００倍の濃度で投与した場合でも、血圧に及ぼす作用は最小度であった（Wright et al.，Am．J．Physiol．257:R15 51（1989））。これらの両研究では、断片は脳に直接注入されたが、これは非常に人為的で、全身性代謝を可能にしない。本発明の方法によれば、本発明のＡII、活性ＡII類似体、ＡII断片またはその類似体は、組織の治癒速度を増大するのに十分な量で、皮膚移植片を包含する創傷組織に適用される。これらの化合物は、in vivoでナノモルレベルで治癒速度を有意に促進し得る。所与の活性物質のいずれに関しても、所与の処方物のための最適濃度を経験的に容易に確定することができる。一般的には、本発明に用いるのに適した活性物質の量は、体重１ｋｇ当たり約０．００１μｇ〜約１０ｍｇ、または創傷面積１ｃｍ²当たり約１ｎｇ〜１００μｇの範囲である。本発明の化合物は、種々の溶液中で適用され得る。本発明に用いるのに適した溶液は滅菌され、十分量のペプチドを溶解し、創傷組織に有害でない。これに関しては、本発明の組成物は非常に安定であるが、しかし強酸および強塩基により加水分解される。本発明の化合物は有機溶媒に、そして水性溶液にｐＨ５．８で可溶性である。一定期間に組織中への活性物質の流入を可能にする適用手段のいずれも用いることかできる。例えば、水性溶液はガーゼの包帯またはストリップを介して創傷組織に適用されるか、あるいはこのような溶液は定期還流（例えば、リポソーム、軟膏、ミセルなどを用いて）が得られるように製剤化されよう。本発明の化合物を用いたこれらの製剤の製造方法は、当業者には明らかである。組織修復作用は、化合物がナノモル量で存在する場合でも認められるので、用いられる活性物質の具体的濃度は臨界的ではない。好ましくは、基質、ミセルまたは晶質溶液は、少なくとも０．０１μｇ／ｍｌの濃度で存在する活性物質とともに用いられる。後記の実施例で有益に用いられている具体的基質溶液は、ＨＹＤＲＯＮの商標でHydro Med Sciences（New Br unswick，NJ）により販売されている半固体ポリエチレングリコールポリマーである。別の好ましい溶液は、ＰＬＵＲＯＮＩＣＳＦ１０８の商標でBASF（Ludw igshafen，Germany）により販売されているミセル溶液である。室温条件下で、この溶液は液体であるが、しかし温組織に適用した場合、溶液は、数日間の期間中の創傷組織への活性物質の注入を可能にするゲルを生成する。その他の好ましい製剤としては、カルボキシメチルセルロース調製物（本明細書の実施例で用いられる）、晶質調製物（例えば食塩溶液、リンガー乳酸溶液、５％デキストロースを含有するリンガー乳酸溶液、リン酸緩衝生理食塩水等）、粘弾性物質、ポリエチレングリコール、ポリプロピレングリコール、膠剤(glue)、または組織接着剤(例えばフィブリン膠)、アルブミン膠、トロンボーゲンまたはコラーゲンシーラント）、そして創傷保護用品（例えば包帯等）が挙げられる。本発明の化合物の治癒作用は、種々の場合に提供され得る。溶液は、潰瘍、病変、損傷、糖尿病性潰瘍、熱傷、外傷、うっ血性潰瘍、歯周症状、裂傷およびその他の症状の治療において、表面創傷組織に局所的に適用され得る。さらに、例えば侵襲性外科手術に起因するような腹腔内創傷組織は、本発明の組成物で処置されて、治癒を促進され得る。例えば、結腸切片またはその他の組織の外科的除去後、手術面は、内部毛管潅流および治癒を促進するために、手術部位を閉じる前に活性物質の溶液で覆われる。さらに、局所治癒の速度は、注入またはその他の方法により活性物質を皮下投与することにより増大され得る。添付の実施例を参照すると、本発明はより良好に理解され得るが、それらは本発明を説明するためのものであって、限定するものではなく、本発明の範囲は添付の請求の範囲に明記されている。下記のいくつかの実施例は、創傷治癒を促進するために本明細書に開示した組成物の一般的効用を示した。その後の実施例は、本明細書中に開示された組成物の皮膚移植片の癒合を促進するための使用方法を開示する。実施例１は、全層(full thickness)創傷の治癒がＡII類似体を含有する医薬の投与により促進されたことを確証するために用いられた方法を記載する。実施例１アンギオテンシンII類似体は全層創傷の治癒を促進する１２週齢の雄Sprague Dawleyラットを、Simonsen Laboratories（Gilroy，CA ）から入手した。手術当日に、手術の準備前に、ラットに筋注によるケタミン／ロンパム麻酔を行った。ラットの毛を剃り、ベタジンで洗った。各ラットの背面に４つの２ｘ２cmの全層皮膚創傷を作った。皮膚の切除後、創傷のサイズはガラススライド上に輪郭を取り、ベースライン創傷サイズを確定した。１０％ＨＹＤＲＯＮ、１％ポリエチレングリコール（分子量４００）および６０％エタノールを含有する溶液１００μｌ中の薬剤を投与した。被験物質は、無作為方式で投与した。全物質を３μｇ／創傷で試験し、類似体２および３は１０μｇ／創傷でも評価した。対照創傷は、ビヒクルのみを用いて処置した。被験物質投与後、ラットに包帯をして、麻酔から回復させた。２、５、６、８および１０日目に、メトキシフルラン麻酔（ＭＥＴＯＦＡＮＥとしてPittman-Moore，Mundelein，ILから市販されている）下で、各皮膚創傷の面積を測定した。創傷の面積は、以下のように測定した。（１）グラフ用紙（１ｘ１mm方眼）に創傷の形状をトレースし、（２）形状を切り取り、（３）紙を計量して、２ｘ２cm紙片と比較し、そして（４）グラフ用紙上の方眼の数を計数する。図に示したように、一般式Ｉにしたがった類似体１（図１）、２および３（図２）で試験創傷を処置した場合、全層創傷閉鎖は、対照に対して実質的に促進された。図に示した結果は、ビヒクル処置対照に対する創傷閉鎖の増加パーセントで示した。意外なことに、Ｒ^AがＳａｒであるために一般式Ｉの範囲外である類似体４（Ｓａｒ−Ａｒｇ−Ｖａｌ−Ｔｙｒ−Ｉｌｅ−Ｈｉｓ−Ｐｒｏ−Ｐｈｅ（配列番号３７））の投与は、創傷修復を促進しなかった（図１）。この類似体は、アンギオテンシンII受容体に対する完全な親和性および活性を有すると報告されたが、しかしアミノペプチダーゼによる切断に耐性である（Mendelsohn et al .，Proc．Nat．Acad．Sci．USA 81:1575（1984）；Israel et al.，Brain Res． 322:341（1984）；Harding et al.，Brain Res．424:299（1987））。図３は、１０μｇ用量は３μｇ用量よりも有効に創傷治癒を促進した、ということを示す。実施例２は、ＡII分子の８つのアミノ酸位置の各々が異なるアミノ酸に置換されて、前記の方法にしたがって治療効用を有する化合物に至る方法を体系的に説明する。実施例２８つの位置の各々で置換されたアンギオテンシン類似体は創傷治癒活性を保有する１２週齢の雌Sprague Dawleyラットを、Simonsen Laboratories（Gilroy,CA）から入手した。手術当日に、手術の準備前に、ラットに筋注によるケタミン／ロンパム麻酔を行った。ラットの毛を剃り、ベタジンで洗った。各ラットの背面に２つの１．５ｘ１．５cmの全層皮膚創傷を作った。皮膚の切除後、創傷のサイズはガラススライド上に輪郭を取り、ベースライン創傷サイズを確定した。１０％ＨＹＤＲＯＮ、１％ポリエチレングリコール（分子量４００）および６０％エタノールを含有する溶液１００μｌ中の薬剤を投与した。被験物質は、無作為方式で投与し、全物質を１０μｇ／創傷で試験した。対照創傷は、ビヒクルのみを用いて処置した。被験物質投与後、ラットに包帯をして、麻酔から回復させた。２、５、７および９日目に、メトキシフルラン麻酔下で、各皮膚創傷の面積を測定した。創傷の面積は、以下のように測定した。（１）グラフ用紙（１ｘ１mm方眼）に創傷の形状をトレースし、（２）形状を切り取り、（３）紙を計量して、１．５ｘ１．５cm紙片と比較し、そして（４）グラフ用紙上の方眼の数を計数する。さらに、２、５および７日目に、肉芽組織(granulation tissue)の面積を、類似体５〜１０を投与した動物に関して測定した。図４〜７に示したように、一般式Ｉにしたがった類似体４〜１１で試験創傷を処置した場合、創傷閉鎖は、対照創傷に対して実質的に促進された。図４および５は、ビヒクル処置対照に対する創傷閉鎖の対照反応のパーセントを示す。いずれの場合も、類似体の１つを投与すると、術後の創傷の閉鎖は促進された。図６および図７は、肉芽組織の形成における対照反応のパーセントを示す。さらに、いずれの場合も、類似体の１つを投与すると、ビヒクル単独投与と比較して、肉芽組織の形成は促進された。これらの結果は、本発明のアミノ酸配列を有するＡ II類似体を用いて創傷治癒を促進する方法を示す。実施例３は、ＡIIIが全層皮膚創傷の治癒を促進したことを実証するために用いた方法を記載する。実施例３アンギオテンシンIIIは全層皮膚創傷の治癒を促進する１２週齢の雄Sprague Dawleyラットを、Simonsen Laboratories（Gilroy,CA）から入手した。手術当日に、手術の準備前に、ラットに筋注によるケタミン／ロンパム麻酔を行った。ラットの毛を剃り、ベタジンで洗った。各ラットの背面に４つの２ｘ２cmの全層皮膚創傷を作った。皮膚の切除後、創傷のサイズはガラススライド上に輪郭を取り、ベースライン創傷サイズを確定した。１０％ＨＹＤＲＯＮ、１％ポリエチレングリコール（分子量４００）および６０％エタノールを含有する溶液１００μｌ中の薬剤を投与した。被験物質は、無作為方式で投与した。ＡIIIを３および１０μｇ／創傷で評価した。対照は、ビヒクルのみを用いて処置した。被験物質投与後、ラットに包帯をして、麻酔から回復させた。２、５、６、８および１０日目に、メトキシフルラン麻酔下で、各皮膚創傷の面積を測定した。創傷の面積は、以下のように測定した。（１）グラフ用紙（１ｘ１mm 方眼）に創傷の形状をトレースし、（２）形状を切り取り、（３）紙を計量して、２ｘ２cm紙片と比較し、そして（４）グラフ用紙上の方眼の数を計数する。図８に示したように、３μｇおよび１０μｇ用量の両方で、ＡIIIで被験動物を処置した場合、創傷閉鎖は、対照動物に対して実質的に促進された。図８に示した結果は、ビヒクル処置対照に対する創傷閉鎖の増加パーセントで示す。実施例４は、ＡIII類似体も全層皮膚創傷の治癒を促進するということを実証するために用いた方法を説明する。実施例４アンギオテンシンIII類似体は全層皮膚創傷の治癒を促進する１２週齢の雌Sprague Dawleyラットを、Simonsen Laboratories（Gilroy,CA）から入手し、実施例３に記載したように、手術の準備をした。各ラットの背面に２つの１．５ｘ１．５cmの全層皮膚創傷を作った。皮膚の切除後、創傷のサイズはガラススライド上に輪郭を取り、ベースライン創傷サイズを確定した。１０％ＨＹＤＲＯＮ、１％ポリエチレングリコール（分子量４００）および６０％エタノールを含有する溶液１００μｌ中の薬剤を投与した。被験物質は、無作為方式で投与し、全物質を１０μｇ／創傷で試験した。対照創傷は、ビヒクルのみを用いて処置した。被験物質投与後、ラットに包帯をして、麻酔から回復させた。２〜３、５、７〜８および９〜１０日目に、メトキシフルラン麻酔下で、皮膚創傷の面積を測定した（表３に示したように、類似体１Ａおよび２〜８に関して）。創傷の面積は、以下のように測定した。（１）グラフ用紙（１ｘ１mm方眼）に創傷の形状をトレースし、（２）形状を切り取り、（３）紙を計量して、１．５ｘ１．５cm紙片と比較し、そして（４）グラフ用紙上の方眼の数を計数する。さらに、２〜３、５および８日目に、肉芽組織の面積を、同様に測定した（類似体１Ａ、１Ｂおよび２〜７に関して）。これらの操作に用いた類似体は、表３に示した構造を有した。表３アンギオテンシンIII類似体図９〜１２に示したように、一般式ＩにしたがったＡIII類似体１〜８で試験創傷を処置した場合、創傷閉鎖は、対照創傷に対して実質的に促進された。図９および１０は、ビヒクル処置対照に対する創傷閉鎖の対照反応のパーセントを示す。いずれの場合も、類似体の１つを投与すると、術後の創傷の閉鎖は促進された。図１１および１２は、肉芽組織の形成における対照反応のパーセントを示す。さらに、いずれの場合も、類似体の１つを投与すると、ビヒクル単独投与と比較して、肉芽組織の形成は促進された。したがって、これらの類似体は、全層皮膚創傷の治癒を促進するのに明らかに有効であった。実施例５は、ＡII断片が全層皮膚創傷の治癒を促進するのに有用であったことを実証するために用いた方法を記載する。実施例５アンギオテンシンII断片は全層皮膚創傷の治癒を促進する体重１７５〜２００ｇの雌Sprague Dawleyラットを、Simonsen Laboratorie s（Gilroy，CA）から入手した。手術当日に、手術の準備前に、ラットに筋注によるケタミン／ロンパム麻酔を行った。ラットの毛を剃り、ベタジンで洗った。各ラットの背面に２つの１．５ｘ１．５cmの全層皮膚創傷を作った。皮膚の切除後、創傷のサイズはガラススライド上に輪郭を取り、１０％低粘度カルボキシメチルセルロース（Sigma）１００μｌ中の薬剤を投与した。被験物質は、無作為方式で投与した。全物質を１００μｇ／創傷で試験した。対照創傷は、ビヒクルのみを用いて処置した。被験物質投与後、ラットに包帯をして、麻酔から回復させた。術後１〜４日目に、さらに１００μｇの適切なペプチド処方物でラットを処置した。２、４、７および９日目に、メトキシフルラン麻酔下で、皮膚創傷の面積を測定した。創傷の面積は、以下のように測定した。（１）グラフ用紙（１ｘ１ mm方眼）に創傷の形状をトレースし、（２）形状を切り取り、（３）紙を計量して、１．５ｘ１．５cm紙片と比較し、そして（４）グラフ用紙上の方眼の数を計数する。さらに、２、４および７日目に、肉芽組織の面積も測定した。図１３〜２１に示したように、ＡII（６−８）およびＡII（４−８）を除くいずれの断片を用いて被験動物を処置した場合にも、創傷閉鎖は、対照動物に対して実質的に促進された。図１３，１４および２１は、本明細書に記載したようなＡIIの断片を用いたときの、ビヒクル処置対照に対する創傷閉鎖の対照反応のパーセントを示す。図１５〜１８および２０〜２１は、肉芽組織で充填したビヒクル対照創傷のパーセントとペプチド処置創傷のパーセントとを比較する。図１５、１６および１９は、それそれ図１７、１８および２０が比較されるべき対照創傷からのデータを反映する。本発明の重要な化合物では、Ｒ⁶はｐＮＨ₂−Ｐｈｅである。文献は、このアミノ酸がアゴニスト活性を付与することを示唆する。Ｒ⁸の最も望ましい配向を提供するために、Ｒ⁷はＰｒｏであるべきである、と目下考えられている。位置Ｒ⁸ では、疎水性環および陰イオン性カルボキシル末端はともに、当該類似体の受容体との結合に特に有用であると思われる。したがって、Ｔｙｒ、そして特にＰｈｅが、本発明の目的のために好ましい。ＡＴ２アゴニストｐ−ＮＨ₂−Ｐｈｅ６−ＡIIを皮膚修復に関してラットモデルで試験し、５日間、１００μｇ／日の用量でのＡIIに匹敵する結果を生じることが判明した。肉芽組織形成および創傷閉鎖がともに試験され、ｐ−ＮＨ₂−Ｐｈｅ６−ＡIIにより促進されることが判明した。本発明の方法によれば、少なくとも１つのＡＴ２アゴニストが組織の治癒速度を増大するのに十分な量で創傷組織に適用される。これらの化合物は、in vivo でナノモルレベルで治癒速度を有意に促進し得る。所与のアゴニスト（ペプチドまたは非ペプチド）に関して、所与の製剤中に用いるための最適レベルは経験的に容易に決定され得る。一般的には、本発明に用いるのに適した活性物質の量は、体重１ｋｇ当たり約０．０００１μｇ〜約１０ｍｇ、または約１ｎｇ〜１００ｍｇ／創傷面積１ｃｍ²の範囲である。実施例６は、ＡＴ２受容体アゴニストが全層皮膚創傷の治癒を促進するために有用であったことを実証するために用いられる方法を記載する。実施例６ＡＴ２受容体アゴニストは全層皮膚創傷の治癒を促進する体重１７５〜２００ｇの雌Sprague Dawleyラットを、Simonsen Laboratorie s（Gilroy，CA）から入手した。手術当日に、手術の準備前に、ラットに筋注によるケタミン／ロンパム麻酔を行った。ラットの毛を剃り、ベタジンで洗った。各ラットの背面に２つの１．５ｘ１．５cmの全層皮膚創傷を作った。皮膚の切除後、創傷のサイズはガラススライド上に輪郭を取り、ベースライン創傷サイズを確定した。１０％低粘度カルボキシメチルセルロース（Sigma）１００μｌ中の薬剤を投与した。ｐ−ＮＨ₂−Ｐｈｅ６−ＡII被験物質は、無作為方式で投与し、全物質を１００μｇ／創傷で試験した。対照創傷は、ビヒクルのみを用いて処置した。被験物質投与後、ラットに包帯をして、麻酔から回復させた。術後１〜４日目に、さらに１００μｇのペプチド処方物でラットを処置した。２、４、７および９日目に、メトキシフルラン麻酔下で、皮膚創傷の面積を測定した。創傷の面積は、以下のように測定した。（１）グラフ用紙（１ｘ１mm方眼）に創傷の形状をトレースし、（２）形状を切り取り、（３）紙を計量して、１．５ｘ１．５cm紙片と比較し、そして（４）グラフ用紙上の方眼の数を計数する。さらに、２、４および７日目に、肉芽組織の面積も同様に測定した。図２２〜２３に示したように、ＡＴ２アゴニストで被験動物を処置した場合、創傷閉鎖および肉芽組織の形成は、対照動物に対して実質的に促進された。図２２は、ビヒクル処置対照に対する創傷閉鎖における対照反応のパーセントを示す。図２３は、肉芽組織が、ビヒクル対照に対して、ＡIIおよびＡIIIのペプチド類似体での処置の結果として時間に伴っていかに低減するかを示す。実施例７は、ＡIIおよびＡIIIのさらに別の類似体が前記のin vivoモデルにおける創傷修復を促進するために有用であったことを実証するために用いられる方法を記載する。実施例７ＡIIおよびＡIIIの類似体は全層皮膚創傷の治癒を促進する表４に示した構造を有するＡIIおよびＡIIIの類似体を、自動ペプチド合成機と当業者によく知られた方法を用いて調製した。各類似体を、本質的に実施例６の方法により、創傷治癒を促進する能力に関して試験した。ビヒクル処置対照創傷のパーセンテージとして測定された、４および９日目の創傷閉鎖の程度の測定の結果も表４に示す。同一実験操作において類似体のすべてが試験されたわけではないため、ＡIIは、試験したペプチドの各群に関する陽性対照として含めた。下記のように、ペプチド類似体は、上付文字で示される位置でのアミノ酸置換を有するＡIIまたはＡIIIの類似体として示す。したがって、例えばＧｌｙ⁴−ＡII Iは、ＡIIIの位置４で置換されたＧｌｙ残基を有するＡIII類似体を示す。一群として試験された類似体の結果は、以下の表中で一まとめにしてある。表４ペプチド有効性のまとめ表４に示した数値は、本手法で試験したほぼすべての類似体が全層創傷の閉鎖を有効に促進したことを示す。以下の実施例は、一般的に、ＡII（ＡＴ２アゴニスト）、ＡII類似体、ＡII断片またはその類似体、アンギオテンシノーゲンおよびその類似体、アンギオテンシノーゲン断片およびその類似体、アンギオテンシンＩおよびその類似体、そしてアンギオテンシンＩ断片およびその類似体を含む組成物を、どのようにして皮膚移植片の癒合を促進するために用い得るかについて説明する。皮膚移植片は前記の実施例に記載した開放創傷とは異なる構造を示す、と当業者は理解するであろう。さらに、アンギオテンシンIIおよび血小板由来成長因子（ＰＤＧＦ）はともに、動物モデルにおいて創傷組織の修復を促進し、肉芽組織の形成を増大し得ることを、従来の研究は示している（diZerega，米国特許第５，０１５，６２９号； Grotendorst et al.，J．Clin．Invest．76:2323（1985）；Pierce et al.，J． Exp．Med．167:974（1988））。近年の研究は、ＰＤＧＦが、ウサギ耳潰瘍において肉芽組織の形成を増大する一方、皮膚移植片生存を有効に増大しなかったことを示した（Brown et al.，Am．J．Surg．171:247（1996））。これらのデータは、Eberhard等（Annals of Plastic Surgery 32:361（1994））、Hom等（Ann O tol Rhinol Laryngol 105:109（1996））、Stepnick等（Arch Otolaryngol Head Neck Surg 121:667（1995））およびNail等（Arch Otolaryngol Head Neck Sur g 122:171（1996））による開示とともに、創傷修復を促進するのに有用な薬剤は移植片生存すなわち「生着」を増大するのに有用であると合理的に予測され得ないことを示している。本明細書中で用いる場合、皮膚移植片は、身体皮膚表面の損失部分を置換するために移植され得る一片の移植物質である。それは全層、分離皮膚または中間層皮膚移植片であり得る。本発明に関連して有用な移植物質は、移植片を受容する同一生物体から採取される移植物質であるが、しかし同一種の非同一メンバーから採取または調製される同種移植物質でもよい。移植片を受容する生物体に関して異なる種のメンバーである生物体から採取される異種移植片である移植物質も、本発明による使用を意図される。すべての場合に、移植物質はドナー生物体から単離された後にさらに加工処理されてもよい。いくつかの場合には、移植物質は、 Hansbrough等（J．Burn Care & Rehab．15:346（1994））が記載した種類の人工皮膚であり得る。さらに、本発明に関連して使用を意図される移植物質は、生きているもの、死んだものまたは無生物性のものであり得る。無生物性物質は、無細胞性物質からなるものが意図される。本発明に関連して有用な移植物質の具体例としては、以下のものが挙げられる。ＩＮＴＥＧＲＡ、すなわちウシコラーゲンおよびコンドロイチン硫酸の無細胞性皮膚異種移植片（Integra Life Science s）、ＤＥＲＭＡＧＲＡＦＴ、すなわちVicrylメッシュバックボーン上のヒト繊維芽細胞の同種真皮移植片（Advanced Tissue Sciences;San Diego，CA）、ＤＥＲＭＡＧＲＡＦＴＴＣ、すなわちシリコーンシートを有するナイロンメッシユ上のヒト繊維芽細胞の一時性同種移植片、そしてＡＬＬＯＤＥＲＭ、すなわち細胞が除去されるよう加工処理された死体真皮(cadaver dermis)からの同種移植片（ Life Cell，Inc.）。実施例８は、前記の治療用ペプチドが下層組織への皮膚移植片の取込みをいかに有益に促進し得るかを説明する。特に、この実施例は、治療用ペプチドが哺乳類において全層創傷欠損の閉鎖を補助するための生存培養皮膚置換(living cult ured skin repalacement)と組合せて用いられる方法を記載する。実施例８下層組織中への皮膚移植片の取込みを増強する方法１８匹の雌ヌードマウスを、先ず業者から入手する。手術当日に、手術の準備前に、マウスに筋注によるケタミン／ロンパム麻酔を行う。マウスをベタジンで洗った後、各マウスの背面に１ｘ１cmの全層皮膚創傷を作る。９匹のマウスに、生体皮膚置換移植片の１ｘ１cm切片からなる移植片を施し、移植片の角をその場に縫合する。移植片と創傷床とが接触する前に、１０％カルボキシメチルセルロースを含有する製薬上許容可能なビヒクルの１００μｌ試料を創傷床に適用する。縫合完了後、ビヒクルのさらに別の１００μｌ試料を移植片の外表面に適用する。いかなる治療的ペプチドも投与されていない６匹のマウスのこの第１群は、陰性対照群である。９匹のマウスの第２群は、試験群である。試験群のマウスにも同様に人工皮膚の１ｘ１cm移植片を施したが、しかし移植片をその場に縫合する前に、薬剤の１００μｌ試料を付加的に適用する。薬剤は、１０％低粘度カルボキシメチルセルロース中に分散されたＡIIペプチドを含む。縫合完了後、薬剤のさらに別の１００μｌ試料を移植物質の外表面に適用する。陰性対照群と試験群の両方のマウスに包帯をして、麻酔から回復させる。２群のマウスには、適切な場合には、ビヒクルまたは薬剤を毎日適用する。移植操作の結果を、肉眼的および顕微鏡的に評価する。術後６日目と１５日目に、各群の３匹のマウスを屠殺し、組織学的分析のために移植片領域の組織切片を調製する。顕微鏡分析の結果は、術後６日目、１５日目ともに、治療ペプチドを含有する薬剤を投与した移植片の皮膚で陰性対照移植片より非常に多く脈管形成されることを示す。術後６日目から１５日目までの間に、血管の数およびサイズは増大する。残りのマウス対の術後２１日目の肉眼的検査は、治療ペプチドを投与された移植片の両方が下層組織にしっかり付着していることを示す。これに対比して、ビヒクル単独で処置した移植片の一方は、接着しない。薬剤処置移植片の脈管形成増大および付着は、治療ペプチドの適用が、哺乳類における皮膚移植片の癒合を有益に促進することを示す。実施例９は、ＡIIを含有した薬剤が下層組織中への自己皮膚移植片の「生着」または取込みを促進するのに有用であったことを実証するために用いられる方法を記載する。これらの手法では、ＡII含有薬剤が皮弁(skin flap)の下層の創傷床に適用された。皮弁は、皮筋層まで達する全層切開をおこない、持ち上げて、次に皮弁を元へ戻すことにより、実験動物の背中に皮弁を作った。以下の手順では、リン酸緩衝生理食塩水および１０％カルボキシメチルセルロースを担体として用いたが、ＡII、活性ＡII類似体、ＡII断片またはその類似体、アンギオテンシノーゲンおよびその類似体、アンギオテンシノーゲン断片およびその類似体、アンギオテンシンＩおよびその類似体、そしてアンギオテンシンＩ断片およびその類似体を投与するために有用なその他の多数の担体が、当業者に明らかである。実施例９アンギオテンシンIIは無作為皮弁モデルにおける移植を増強する雌Sprague Dawleyラットに筋注によるケタミン／キシラシン麻酔を行った。動物用バリカンを用いてラットの毛を剃り、ポビドンヨードおよびイソプロピルアルコールで洗った。麻酔動物の目に人工涙を入れた。尻尾から頭の先の方向に、肩胛骨の真下から始まる７cmの長さの２本の切開を１．２cmの間隔をあけて背中に作った。切開の尻尾側の先端で、１．２cmの長さで横断方向に切開し、３つの切開が皮弁の３つの縁を確定して連結されるようにした。皮弁を筋膜から持ち上げて、結合組織があればそれをそぎ落とした。次に０．３ｍｌ容量の薬剤を創傷床に適用した。皮弁を元に戻して、Ethicon（Rantan，NJ）から入手した５−０ＥＴＨＩＬＯＮ縫合糸を用いて８針縫合し付着皮膚の接触を保持した。本手法で試験した薬剤処方物を以下に示す。（１）リン酸緩衝生理食塩水（ＰＢＳ）陰性対照、（２）ＰＢＳ中のＩｍｇ／ｍｌのＡII、（３）ＰＢＳ中の１０ｍｇ／ｍｌのＡII、（４）第二陰性対照としての１０％低粘度カルボキシメチルセルロース、そして（５）１０％低粘度カルボキシメチルセルロース中の１ｍｇ／ｍｌのＡ II。3M Corp．（Minneapolis，MN）から入手したＴＥＧＡＤＥＲＭで縫合皮弁を包帯して、ベンゾインで縁を密封した。動物を術後回復させて、次に定期的に観察して移植片取込みのレベルを評価した。移植片取込みは、以下により評価した。（１）健康で無傷の外見により決定した、生存した移植片の数またはパーセンテージ（表５）、および（２）褪色、乾燥および壊死、非生存組織により示されるような移植片痴皮化の％（図２４および２５）。図２４および２５ならびに表５に示した結果は、ＡIIを含有する薬剤が移植片取込みの効率を実質的に改善し、生存移植片中に存在する壊死組織の割合を低減したことを示した。特に、表５の結果は、皮弁形成時点でのＰＢＳ中の１０ｍｇ／ｍｌのＡIIまたは１０％カルボキシメチルセルロース中の１ｍｇ／ｍｌのＡII の１回投与が１２日以内の移植片生着効率を実質的に増強することを示した。実際、ＡII含有薬剤のいずれかを投与された移植片だけが、下層創傷床中に首尾よく取り込まれた。２つの担体の一方だけで処置された対照移植片はすべて、１２および１６日目に移植片壊死を有した。ＰＢＳ中の１０ｍｇ／ｍｌのＡIIまたは１０％カルボキシメチルセルロース中の１ｍｇ／ｍｌのＡIIを投与されたラットの群では、移植片の６７％が生存し、切開は治癒された。残りの動物ではいくつかの移植片壊死が観察された。図２４および２５にグラフで示した結果は、移植片領域の約５０％が、２つの担体の一方で処置された陰性対照群で痴皮化または壊死を示したことを示す。移植片痴皮化のパーセンテージは、ＡIIを含有する薬剤の１つで処置された移植片に関しては低減された。ＰＢＳ中の１０ｍｇ／ｍｌのＡIIまたは１０％カルボキシメチルセルロース中の１ｍｇ／ｍｌのＡIIで処置された移植片は特に良好な結果を示したが、ＰＢＳ中の１ｍｇ／ｍｌのＡIIを用いて実施した試験でも壊死組織の生成低減を生じた。表５ＡIIは自己皮膚移植片の取り込みを増強する前記の実施例に示した結果は、下層創傷床中への自己移植片取込みの成功例と失敗例との間の劇的な差は、創傷床と下層移植片との間に適用された薬剤中のＡ IIの存在または非存在によることを示した。図２４および２５に示した時間経過の結果は、実験系中の移植片壊死の程度が術後８〜１２日の間は本質的に安定していることを示した。したがって、この時間枠を、ＡII投与と自己移植片取込みの程度との間の用量反応関係を確立するための後の手順に用いた。実施例１０は、下層組織中への皮膚移植片の取込みを促進するための最適用量を決定するために用いられた方法を記載する。これらの手法では、ＡIIは自己皮膚移植片の下層の創傷床に適用された。ＡIIは以下の手順で用いられたが、本発明にしたがった、活性ＡII類似体、ＡII断片またはその類似体、アンギオテンシノーゲンおよびその類似体、アンギオテンシノーゲン断片およびその類似体、アンギオテンシンＩおよびその類似体、そしてアンギオテンシンＩ断片およびその類似体の最適用量を決定するために同様の手法を用い得ることは、当業者には理解される。実施例１０アンギオテンシンIIは無作為皮弁モデルにおける移植を増強する前記の実施例の方法により皮弁を作製し、そして６つの実験処方物のうちの１つで処置した。処置皮弁を所定の位置に縫合後、動物に包帯を施して、回復させて、術後８および１２日目に移植片取込みを評価した。本手法で試験した薬剤処方物を以下に示す。（１）１０％低粘度カルボキシメチルセルロースからなる陰性対照、および（２）１０％低粘度カルボキシメチルセルロース中の０．０１〜１ｍｇ／ｍｌＡII。本手法で試験したＡIIの濃度は、１．０、０．３、０．１、０．０３および０．０１ｍｇ／ｍｌであった。図２６および２７に示した結果は、ＡIIが用量反応方式で移植を増強したことを確証した。より詳細には、図２６は、術後８および１２日目に完全に生存すると決定された皮弁のパーセンテージにより判定した場合、皮弁形成時点での１０％カルボキシメチルセルロース中の０．０１〜１ｍｇ／ｍｌＡIIの１回投与が下層組織中への移植片取込みの効率を増大したことを示す。さらに、図２７は、生存皮弁のパーセンテージがＡII含有薬剤を投与した試験で増大したことを示す。陰性対照として１０％カルボキシメチルセルロースを投与した実験動物はすべて術後８および１２日目に移植片壊死を示した。これに対比して、本手法で試験されたＡIIは最低用量でさえ、ビヒクル処置対照と比較した場合、部分皮弁生存を実質的に増大した。これらの結果は、移植片取込みに及ぼす観察された有効な作用がＡIIの活性によるものであることを立証した。さらに、これらの結果は、皮膚移植片の取込みを促進する治療化合物の用量を最適化する方法を実証する。最適用量は、完全生存皮弁の％の最高レベルを実質的に提供し、その相当する最低用量である薬剤の量である。例えば、薬剤が０．０３ｍｇ／ｍｌの特定のＡII 関連化合物を含有する場合に最大皮弁生存率が得られるならば、高濃度は付加的利点を提供しないので、最適用量は０．０３ｍｇ／ｍｌである。前記の手法は自己移植片モデルを用いて、本明細書で開示した組成物を用いて移植片取込みを促進する方法を示した。その場合、開示組成物が非自己移植片の取込みの促進にも有用であるか否かを調べることは、重要であった。以下の実施例では、人工皮膚、または「生体皮膚等価物(living skin equivalent)」は、Ａ IIでの処置後にのみ、全層切除により作製された創傷床上に生存移植片を形成した。その後の実施例は、創傷清拭化(debrided)熱傷モデルにおける同様の結果を記載する。本実施例に記載した手法に用いた種類の生体皮膚等価物は、市販供給元、例えば、Organogenesis，Inc．（Canton，Mass.）およびOrtec Inc．（New York， NY）から入手可能である。本実施例に開示した方法に用いられる皮膚置換物は、ウシコラーゲン格子を濃縮し、次に培養ヒトケラチノサイトを植え付けることによりヒト繊維芽細胞で構成された。繊維芽細胞を含有するコラーゲン格子は皮膚鋳型として機能し、上層ヒトケラチノサイトは合成皮膚置換物の表皮成分を形成する。この皮膚置換物の組成の説明は、Hansbrough等（J．Burn Care & Rehabil ．15:346（1994））（この論文の全開示は、参照により本明細書中に含まれる）により示されている。実施例１１は、ＡIIが全層切除モデルにおける生体皮膚等価物を用いて移植を増強するために如何に用いられるかを実証するために用いられた方法を記載する。同様の手法を用いて、活性ＡII類似体、ＡII断片またはその類似体、アンギオテンシノーゲンおよびその類似体、アンゲオテンシノゲン断片およびその類似体、アンギオテンシンＩおよびその類似体、そしてアンギオテンシンＩ断片およびその類似体を使用して様々な生体皮膚等価物の移植を増強することができる。実施例１１全層切除部位への人工皮膚の移植雄Swissヌードマウス（２２〜２４ｇ）６匹をTaconic Laboratories（Germant own，NY）から購入し、手術前に少なくとも２日間、検疫のため隔離した。Weste rn Medical Supply（Arcadia，CA）から入手したＫＥＴＡＳＥＴ／ＲＯＭＰＵＭの筋注による麻酔後、１cmｘ１cmの全層皮膚切除を各マウスの背中でおこなった。本質的にHansbrough等（上記）が記載した通りに製造された生体皮膚等価物を市販供給元から入手した。この物質を創傷欠損部に配置し、微小鋏でトリミングして、マウス皮膚の縁と移植物質との間に隙間が観察されないようにした。創傷床に置く前に、移植物質に与えた処置を基礎にして、マウスを各群２匹の３群に分けた。第１群では、生体皮膚等価物をその培養皿から取り出して、創傷床上に直接載せた。第２群のマウスは、５％デキストロースを含有する乳酸加リンガー液中に、創傷床に置く前に１０分間浸漬させておいた生体皮膚等価物を移植した。第３群では、生体皮膚等価物を、１ｍｇ／ｍｌのＡIIを含有する５％デキストロースを有する乳酸加リンガー液中に、創傷床に置く前に１０分間浸漬した。移植物質を配置後、マウスの背表面をペトロラタム埋込みガーゼで、その後２つの接着包帯で覆った。麻酔から回復後、マウスを個々のケージに戻して、安楽死まで毎日観察した。手術後最初の３日間は、全マウスに鎮痛薬を筋注した。７日目（各群から１匹）または９日目（各群から１匹）の剖検までに包帯をなくしたマウスはいなかった。剖検時に、移植片取込みの程度および移植片の外見を記録した後、１０％緩衝ホルマリン中で生検を施し、パラフィン包埋し、切片にして、ヘマトキシリン−エオシン染色した。これらの手法の結果は、ＡIIが全層創傷への生体皮膚等価物の取込みに有用な作用を及ぼしたことを示した。全移植片は健康に見えて、吻合は、７および９日目に移植片縁の８０〜１００％に関して認められた。したがって、乳酸加リンガー液中への生体皮膚等価物の浸漬は移植物質に悪影響を及ぼさなかった。顕微鏡分析は、ＡII処置移植片の１つが、術後７日目までに筋膜に対して下側に付着する多数の血管を有したことを示した。これは、未処置の２つの移植片でも、リンガー液に浸漬しておいた２つの移植片でも、ＡII含有溶液で処置しておいた移植片の１つでも認められなかった。組織学的分析も用いて、生体皮膚等価物と隣接マウス組織との間の境界面での２０×顕微鏡視野中で、内皮細胞の数、そして組織統合の測定値としての赤血球含有血管の数を評価した。この分析をおこなうために、各移植片に関して、９〜２０視野を計数した。創傷床への配置前に約１０分間、５％デキストロースを含有する乳酸加リンガー溶液中に浸漬しておいた移植片を用いて、対照データを得た。図２８および２９に示した結果は、配置前に１０分間、ＡII溶液中に生体皮膚等価物を浸漬すると、術後７および９日目両方において内皮細胞、および赤血球を含有する血管の数が増大したことを示す。このことは、マウス組織との一体化がより迅速に起きることを示唆する。両時点で、ＡIIで処置しておいた移植片に関して得られた結果は同様であった。しかしながら、７日目から９日目の間に、ビヒクル処置移植片に関しては、生体皮膚等価物とマウス組織との間の境界面で内皮細胞および血管の数の増大が認められた。ＡII含有調製物は下層組織中への自己移植片および生体皮膚等価物の取込みを増強したため、ＡII、活性ＡII類似体、ＡII断片またはその類似体、アンギオテンシノーゲンおよびその類似体、アンギオテンシノーゲン断片およびその類似体、アンギオテンシンＩおよびその類似体、そしてアンギオテンシンＩ断片およびその類似体の投与により改善される移植片適用の範囲をさらに調べることは重要であった。以下の実施例は、ＡIIが創傷清拭化熱傷損傷部位への生体皮膚等価物の取込みを促進するために用いられる方法を説明する。同様の結果は、活性ＡII 類似体、ＡII断片またはその類似体が、ＡII、アンギオテンシノーゲンおよびその類似体、アンギオテンシノーゲン断片およびその類似体、アンギオテンシンＩおよびその類似体、そしてアンギオテンシンＩ断片およびその類似体に置換された場合にも予期される。実施例１２は、本明細書に開示した種類の組成物が創傷清拭化熱傷損傷の部位への生体皮膚等価物の取込みを促進するのに有用であることを実証するために用いられる方法を記載する。実施例１２ヌードマウスにおける全層熱傷損傷後４８時間の創傷清拭部位への人工皮膚の移植雄Swissヌードマウス（２６ｇ）をTaconic Laboratories（Germantown，NY）から購入し、全層熱傷損傷の誘導前の５日間、検疫のため隔離した。１００℃に加熱しておいた真鍮棒を１０秒間、背中の皮膚に接触させて、熱傷損傷を生成した。熱傷誘発後２日目に、その部位を切除し、（１）生理食塩水、または（２）１ｍｇ／ｍｌのＡIIを含有する生理食塩水中に１０分間浸漬することにより前処理しておいた生体皮膚等価物をその領域に移植した。これらの操作の結果は、ＡIIが熱傷損傷部位での生体皮膚等価物の取込みを増強したことを示した。生理食塩水中に浸漬しておいた生体皮膚等価物を移植したマウスの１匹だけが、２１日目に依然として生存していた。この生存マウスの移植片は、縮み、非生存であった。同様に処置した移植片を移植された２番目のマウスは、術後６日目に壊死性移植片を有して死亡した。逆に、術後２１日目に、設置前にＡII溶液中に浸漬した生体皮膚等価物を移植された１匹のマウスは、十分に生存する移植片を有した。他の２匹のマウスは、部分的に収縮し、非生存の移植片を有した。したがって、創傷清拭化熱傷損傷の下層にある組織中にうまく取り込まれた移植片だけが、配置前にＡIIで処置されていた移植片であった。これは、本明細書中に開示した化合物が創傷清拭化熱傷損傷部位での移植片生着を増強するのに有用であることを確証した。以下の手法を実施して、定量的組織学的方法により、移植前に、デキストロースおよびＡIIを含有する乳酸加リンガー溶液中に生体皮膚等価物を予備浸漬することによる新生脈管形成に対する効果を調べた。実施例１３は、移植片配置前にＡIIを含有する溶液中に生体皮膚等価物を浸漬すると、移植境界面での内皮細胞の数および血管の数の有益な増大が示されることを実証するために用いられる方法を記載する。実施例１３ＡIIを含有する溶液中に生体皮膚等価物を浸漬すると下層組織中への取込みが改良される雄Swissヌードマウス（２２〜２４ｇ）１２匹をTaconic Laboratoriesから購入し、手術前に少なくとも２日間、検疫のため隔離した。ＫＥＴＡＳＥＴ／ＲＯＭＰＵＭの筋注によりマウスを麻酔し、１ヶ所の１cmｘ１cmの全層皮膚切除を各マウスの背表面でおこなった。本質的にHansbrough等（上記）が記載した種類の生体皮膚等価物を創傷欠損部に配置し、微小鋏でトリミングして、マウス皮膚の縁と生体皮膚等価物との間に隙間が観察されないようにした。創傷床に配置する前に、生体皮膚等価物を浸漬するために用いた溶液中のＡII濃度を基礎にして、マウスを各群３匹の４群に分けた。これらの操作に用いたＡII濃度を以下に示す。０、０．０１、０．１および１．０ｍｇ／ｍｌ。移植片配置後、マウスの背表面をペトロラタム埋込みガーゼで、その後２つの接着包帯（Baxter）で覆った。麻酔から回復後、マウスを個々のケージに戻して、安楽死まで毎日観察した。手術後最初の３日間は、マウスに鎮痛薬を筋注した。７日目の剖検前に包帯をなくしたマウスはいなかった。剖検時に、移植片取込みの程度および移植片組織の外見を記録した後、１０％緩衝ホルマリン中で生検を施して、パラフィン包埋し、切片にして、ヘマトキシリン−エオシン染色した。これらの手法の結果は、全移植片は健康に見えて（その移植片を失った対照動物１匹を除く）、吻合は、移植片縁の８０〜１００％に関して認められたことを示した。ＡII処置移植片の１つが、全層切除後にヌードマウスの筋膜に対して移植片の下側に付着する多数の血管を有した。これは、他のいかなるマウスでも認められなかった。生体皮膚等価物とヌードマウス組織との間の境界面に存在する２０×顕微鏡視野（マウス１匹当たり９〜２０視野を計数した）中で、内皮細胞の数、そして赤血球を含有する血管の数を測定した。ビヒクル対照として、約１０分間、デキストロースを含有する乳酸加リンガー溶液中に浸漬しておいた移植片から、対照データを得た。これらのデータを図３０および３１に示す。配置前に１０分間、０．０１〜１ｍｇ／ｌのＡII溶液中に生体皮膚等価物を浸漬すると、内皮細胞の数、および赤血球を含有する血管の数が増大した。したがって、この用量−反応実験は、次のことを示した。（１）生体皮膚等価物は移植片配置前１０分間、乳酸加リンガー溶液に浸漬しても、有害な影響を受けない。（２）Ａ IIで前処置した生体皮膚等価物は、移植片部位での内皮細胞数および血管数により測定した場合、新生脈管形成の促進を示した。さらに、これらのデータは、作用が濃度依存性であったことを示す。概して、前記の結果を総合すると、創傷治癒を促進するのに有用であることが示された前記の化合物は、下層組織中への皮膚移植片の取込みを促進するのにも有用である。前記の説明から、当業者は、本発明の本質的特徴を容易に確かめ得るし、本発明の精神および範囲を逸脱しない限り、種々の用途および条件を本発明に適応し得る。情況が示唆しまたは適当である場合には形態の変更および等価物の置換が意図され、本明細書中で用いられる特定の用語は本発明を説明するためであり、本発明を限定するものではない。

【手続補正書】特許法第１８４条の８第１項【提出日】平成１１年１月５日（１９９９．１．５）【補正内容】請求の範囲１．哺乳類の下層組織中への皮膚移植片の取込みを促進するための医薬の調製におけるアンギオテンシンII、アンギオテンシンIIの類似体、アンギオテンシン IIの断片またはアンギオテンシンIIの断片の類似体の使用であって、前記アンギオテンシンII、前記アンギオテンシンIIの類似体、前記アンギオテンシンIIの断片、または前記アンギオテンシンIIの断片の類似体が、下記一般式中の基Ｒ¹〜Ｒ⁸の少なくとも３つの連続するアミノ酸からなるペプチドを含む使用。Ｒ¹−Ｒ²−Ｒ³−Ｒ⁴−Ｒ⁵−Ｒ⁶−Ｒ⁷−Ｒ⁸ （式中、Ｒ¹はＡｓｐ、Ｇｌｕ、ＡＳｎ、Ａｃｐｃ、Ａｌａ、Ｍｅ²Ｇｌｙ、Ｐｒｏ、Ｂｅｔ、Ｇｌｕ（ＮＨ₂）、Ｇｌｙ、Ａｓｐ（ＮＨ₃）およびＳｕｃからなる群から選択され、Ｒ²はＡｒｇ、Ｌｙｓ、Ａｌａ、Ｏｒｎ、Ｓｅｒ（Ａｃ）、Ｓａｒ、Ｄ−ＡｒｇおよびＤ−Ｌｙｓからなる群から選択され、Ｒ³はＶａｌ、Ａｌａ、Ｌｅｕ、ｎｏｒＬｅｕ、Ｉｌｅ、Ｇｌｙ、Ｐｒｏ、Ａｉｂ、ＡｃｐｃおよびＴｙｒからなる群から選択され、Ｒ⁴はＴｙｒ、Ｔｙｒ（ＰＯ₃）₂、Ｔｈｒ、Ｓｅｒ、ｈｏｍｏＳｅｒおよびａｚａＴｙｒからなる群から選択され、Ｒ⁵はＩｌｅ、Ａｌａ、Ｌｅｕ、ｎｏｒＬｅｕ、ＶａｌおよびＧｌｙからなる群から選択され、Ｒ⁶はＨｉｓ、Ａｒｇまたは６−ＮＨ₂−Ｐｈｅであり、Ｒ⁷はＰｒｏまたはＡｌａであり、そしてＲ⁸はＰｈe、Ｐｈｅ（Ｂｒ）、ＩｌｅおよびＴｙｒからなる群から選択され、但し末端Ｔｙｒ基としてＲ⁴を含む配列を除く）２．前記医薬が、前記皮膚移植片を浸漬するためのものであり、かつ緩衝生理食塩溶液および／またはを製薬上許容可能な担体として含む請求の範囲第１項の使用。３．医薬がカルボキシメチルセルロースを含む製薬上許容可能な担体を含み、また、医薬が前記皮膚移植片を下層の組織に適用するためのものである請求の範囲第２項の使用。４．前記アンギオテンシンII、アンギオテンシンIIの類似体、アンギオテンシンIIの断片、またはアンギオテンシンIIの断片の類似体が下記一般式を有するペプチドを含む請求の範囲第１項の使用。Ｒ²−Ｒ³−Ｒ⁴−Ｒ⁵−Ｒ⁶−Ｒ⁷−Ｒ⁸ （式中、Ｒ²はＨ、Ａｒｇ、Ｌｙｓ、Ａｌａ、Ｏｒｎ、Ｓｅｒ（Ａｃ）、ｓａｒ、Ｄ−ＡｒｇおよびＤ−Ｌｙｓからなる群から選択され、Ｒ³はＶａｌ、Ａｌａ、Ｌｅｕ、ｎｏｒＬｅｕ、Ｉｌｅ、Ｇｌｙ、Ｐｒｏ、Ａｉｂ、ＡｃｐｃおよびＴｙｒからなる群から選択され、Ｒ⁴はＴｙｒ、Ｔｙｒ（ＰＯ₃）₂、Ｔｈｒ、Ｓｅｒ、ｈｏｍｏＳｅｒおよびａｚａＴｙｒからなる群から選択され、Ｒ⁵はＩｌｅ、Ａｌａ、Ｌｅｕ、ｎｏｒＬｅｕ、ＶａｌおよびＧｌｙからなる群から選択され、Ｒ⁶はＨｉｓ、Ａｒｇまたは６−ＮＨ₂−Ｐｈｅであり、Ｒ⁷はＰｒｏまたはＡｌａであり、そしてＲ⁸はＩｌｅ、Ｐｈｅ、Ｐｈｅ（Ｂｒ）およびＴｙｒからなる群から選択される）５．前記皮膚移植片が自己移植片である請求の範囲第１項の使用。６．前記皮膚移植片が同種移植片である請求の範囲第１項の使用。７．前記皮膚移植片が異種移植片である請求の範囲第１項の使用。８．製薬上許容可能な担体と、下記一般式中の基Ｒ¹〜Ｒ⁸の少なくとも３つの連続するアミノ酸からなるペプチドとを含む、移植片取込み促進に有効な量の組成物を皮膚移植片または下層組織に適用し、前記皮膚移植片と前記下層組織とを接触させ、そして前記皮膚移植片を前記下層組織に固定する工程を含み、それにより前記皮膚移植片の前記下層組織中への取込みが促進される、哺乳類の下層組織中への皮膚移植片の取込みを促進させる方法。Ｒ¹−Ｒ²−Ｒ³−Ｒ⁴−Ｒ⁵−Ｒ⁶−Ｒ⁷−Ｒ⁸ （式中、Ｒ¹はＡｓｐ、Ｇｌｕ、Ａｓｎ、Ａｃｐｃ、Ａｌａ、Ｍｅ²Ｇｌｙ、Ｐｒｏ、Ｂｅｔ、Ｇｌｕ（ＮＨ₂）、Ｇｌｙ、Ａｓｐ（ＮＨ₃）およびＳｕｃからなる群から選択され、Ｒ²はＡｒｇ、Ｌｙｓ、Ａｌａ、Ｏｒｎ、Ｓｅｒ（Ａｃ）、Ｓａｒ、Ｄ−ＡｒｇおよびＤ−Ｌｙｓからなる群から選択され、Ｒ³はＶａｌ、Ａｌａ、Ｌｅｕ、ｎｏｒＬｅｕ、Ｉｌｅ、Ｇｌｙ、Ｐｒｏ、Ａｉｂ、ＡｃｐｃおよびＴｙｒからなる群から選択され、Ｒ⁴はＴｙｒ、Ｔｙｒ（ＰＯ₃）₂、Ｔｈｒ、Ｓｅｒ、ｈｏｍｏＳｅｒおよびａｚａＴｙｒからなる群から選択され、Ｒ⁵はＩｌｅ、Ａｌａ、Ｌｅｕ、ｎｏｒＬｅｕ、ＶａｌおよびＧｌｙからなる群から選択され、Ｒ⁶はＨｉｓ、Ａｒｇまたは６−ＮＨ₂−Ｐｈｅであり、Ｒ⁷はＰｒｏまたはＡｌａであり、そしてＲ⁸はＰｈｅ、Ｐｈｅ（Ｂｒ）、ＩｌｅおよびＴｙｒからなる群から選択され、但し末端Ｔｙｒ基としてＲ⁴を含む配列を除く）９．前記化合物が下記一般式を有するペプチドである請求の範囲第８項の方法。Ｒ²−Ｒ³−Ｒ⁴−Ｒ⁵−Ｒ⁶−Ｒ⁷−Ｒ⁸ （式中、Ｒ²はＨ、Ａｒｇ、Ｌｙｓ、Ａｌａ、Ｏｒｎ、Ｓｅｒ（Ａｃ）、ｓａｒ、Ｄ−ＡｒｇおよびＤ−Ｌｙｓからなる群から選択され、Ｒ³はＶａｌ、Ａｌａ、Ｌｅｕ、ｎｏｒＬｅｕ、Ｉｌｅ、Ｇｌｙ、Ｐｒｏ、Ａｉｂ、ＡｃｐｃおよびＴｙｒからなる群から選択され、Ｒ⁴はＴｙｒ、Ｔｙｒ（ＰＯ₃）₂、Ｔｈｒ、Ｓｅｒ、ｈｏｍｏＳｅｒおよびａｚａＴｙｒからなる群から選択され、Ｒ⁵はＩｌｅ、Ａｌａ、Ｌｅｕ、ｎｏｒＬｅｕ、ＶａｌおよびＧｌｙからなる群から選択され、Ｒ⁶はＨｉｓ、Ａｒｇまたは６−ＮＨ₂−Ｐｈｅであり、Ｒ⁷はＰｒｏまたはＡｌａであり、そしてＲ⁸はＩｌｅ、Ｐｈｅ、Ｐｈｅ（Ｂｒ）およびＴｙｒからなる群から選択される）１０．前記皮膚移植片が生体皮膚等価物である請求の範囲第８の方法。１１．前記皮膚移植片が自己移植片である請求の範囲第８項の方法。１２．前記皮膚移植片が同種移植片である請求の範囲第８項の方法。１３．前記皮膚移植片が異種移植片である請求の範囲第８項の方法。１４．生体皮膚等価物が、Vicrylメッシュバックボーン上のヒト繊維芽細胞の同種真皮移植片、シリコーンシートを有するナイロンメッシュ上のヒト繊維芽細胞の一時性同種移植片、および細胞か除去されるよう加工処理された死体真皮からの同種移植片からなる群から選択される同種移植片である請求の範囲第１０項の方法。１５．生体皮膚等価物がウシコラーゲンおよびコンドロイチン硫酸の無細胞性真皮異種移植片である請求の範囲第１０項の方法。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (81)指定国ＥＰ(ＡＴ，ＢＥ，ＣＨ，ＤＥ，ＤＫ，ＥＳ，ＦＩ，ＦＲ，ＧＢ，ＧＲ，ＩＥ，ＩＴ，ＬＵ，ＭＣ，ＮＬ，ＰＴ，ＳＥ)，ＯＡ(ＢＦ，ＢＪ，ＣＦ，ＣＧ，ＣＩ，ＣＭ，ＧＡ，ＧＮ，ＭＬ，ＭＲ，ＮＥ，ＳＮ，ＴＤ，ＴＧ)，ＡＰ(ＧＨ，ＧＭ，ＫＥ，ＬＳ，ＭＷ，ＳＤ，ＳＺ，ＵＧ，ＺＷ)，ＥＡ(ＡＭ，ＡＺ，ＢＹ，ＫＧ，ＫＺ，ＭＤ，ＲＵ，ＴＪ，ＴＭ)，ＡＬ，ＡＭ，ＡＴ，ＡＵ，ＡＺ，ＢＡ，ＢＢ，ＢＧ，ＢＲ，ＢＹ，ＣＡ，ＣＨ，ＣＮ，ＣＵ，ＣＺ，ＤＥ，ＤＫ，ＥＥ，ＥＳ，ＦＩ，ＧＢ，ＧＥ，ＧＨ，ＨＵ，ＩＬ，ＩＳ，ＪＰ，ＫＥ，ＫＧ，ＫＰ，ＫＲ，ＫＺ，ＬＣ，ＬＫ，ＬＲ，ＬＳ，ＬＴ，ＬＵ，ＬＶ，ＭＤ，ＭＧ，ＭＫ，ＭＮ，ＭＷ，ＭＸ，ＮＯ，ＮＺ，ＰＬ，ＰＴ，ＲＯ，ＲＵ，ＳＤ，ＳＥ，ＳＧ，ＳＩ，ＳＫ，ＳＬ，ＴＪ，ＴＭ，ＴＲ，ＴＴ，ＵＡ，ＵＧ，ＵＺ，ＶＮ，ＹＵ，ＺＷ (72)発明者ディゼレガ，ジーア，ストッダーアメリカ合衆国，91106 カリフォルニア, パサデナ，ヒルクレストアベニュー 1270

Claims

【特許請求の範囲】１．哺乳類の下層組織中への皮膚移植片の取込みを促進するための医薬の調製におけるアンギオテンシンII、アンギオテンシンIIの類似体、アンギオテンシン IIの断片またはアンギオテンシンIIの断片の類似体の使用。２．前記医薬が、前記皮膚移植片を浸漬するためのものであり、かつ緩衝生理食塩溶液および／またはを製薬上許容可能な担体として含む請求の範囲第１項の使用。３．医薬がカルボキシメチルセルロースを含む製薬上許容可能な担体を含み、また、医薬が前記皮膚移植片を下層の組織に適用するためのものである請求の範囲第２項の使用。４．前記アンギオテンシンII、アンギオテンシンIIの類似体、アンギオテンシンIIの断片、またはアンギオテンシンIIの断片の類似体が、下記一般式中の基Ｒ¹ 〜Ｒ⁸の少なくとも３つの連続するアミノ酸からなるペプチドを含む請求の範囲第１項の使用。Ｒ¹−Ｒ²−Ｒ³−Ｒ⁴−Ｒ⁵−Ｒ⁶−Ｒ⁷−Ｒ⁸ （式中、Ｒ¹およびＲ²は共に式：Ｘ−Ｒ^A−Ｒ^B （ここで、ＸはＨまたは１〜３個のペプチド基であり、Ｒ^AとＲ^Bとの間のペプチド結合はアミノペプチダーゼＡ切断に対して不安定である）の基を形成し、Ｒ³はＶａｌ、Ａｌａ、Ｌｅｕ、ｎｏｒＬｅｕ、Ｉｌｅ、Ｇｌｙ、Ｐｒｏ、Ａｉｂ、ＡｃｐｃおよびＴｙｒからなる群から選択され、Ｒ⁴はＴｙｒ、Ｔｙｒ（ＰＯ₃）₂、Ｔｈｒ、Ｓｅｒ、ｈｏｍｏＳｅｒおよびａｚａＴｙｒからなる群から選択され、Ｒ⁵はＩｌｅ、Ａｌａ、Ｌｅｕ、ｎｏｒＬｅｕ、ＶａｌおよびＧｌｙからなる群から選択され、Ｒ⁶はＨｉｓ、Ａｒｇまたは６−ＮＨ₂−Ｐｈｅであり、Ｒ⁷はＰｒｏまたはＡｌａであり、そしてＲ⁸はＰｈｅ、Ｐｈｅ（Ｂｒ）、ＩｌｅおよびＴｙｒからなる群から選択され、但し末端Ｔｙｒ基としてＲ⁴を含む配列を除く）５．前記アンギオテンシンII、アンギオテンシンIIの類似体、アンギオテンシンIIの断片、またはアンギオテンシンIIの断片の類似体が下記一般式を有するペプチドを含む請求の範囲第１項の使用。Ｒ²−Ｒ³−Ｒ⁴−Ｒ⁵−Ｒ⁶−Ｒ⁷−Ｒ⁸ （式中、Ｒ²はＨ、Ａｒｇ、Ｌｙｓ、Ａｌａ、Ｏｒｎ、Ｓｅｒ（Ａｃ）、Ｓａｒ、Ｄ−ＡｒｇおよびＤ−Ｌｙｓからなる群から選択され、Ｒ³はＶａｌ、Ａｌａ、Ｌｅｕ、ｎｏｒＬｅｕ、Ｉｌｅ、Ｇｌｙ、Ｐｒｏ、Ａｉｂ、ＡｃｐｃおよびＴｙｒからなる群から選択され、Ｒ⁴はＴｙｒ、Ｔｙｒ（ＰＯ₃）₂、Ｔｈｒ、Ｓｅｒ、ｈｏｍｏＳｅｒおよびａｚａＴｙｒからなる群から選択され、Ｒ⁵はＩｌｅ、Ａｌａ、Ｌｅｕ、ｎｏｒＬｅｕ、ＶａｌおよびＧｌｙからなる群から選択され、Ｒ⁶はＨｉｓ、Ａｒｇまたは６−ＮＨ₂−Ｐｈｅであり、Ｒ⁷はＰｒｏまたはＡｌａであり、そしてＲ⁸はＩｌｅ、Ｐｈｅ、Ｐｈｅ（Ｂｒ）およびＴｙｒからなる群から選択される）６．前記皮膚移植片が自己移植片である請求の範囲第１項の使用。７．前記皮膚移植片が同種移植片である請求の範囲第１項の使用。８．前記皮膚移植片が異種移植片である請求の範囲第１項の使用。９．製薬上許容可能な担体と、アンギオテンシンII、アンギオテンシンIIの類似体、アンギオテンシンIIの断片、およびアンギオテンシンIIの断片の類似体からなる群から選択される化合物とを含む、移植片取込み促進に有効な量の組成物を皮膚移植片または下層組織に適用し、前記皮膚移植片と前記下層組織とを接触させ、そして前記皮膚移植片を前記下層組織に固定する工程を含み、それにより前記皮膚移植片の前記下層組織中への取込みが促進される、哺乳類の下層組織中への皮膚移植片の取込みを促進させる方法。１０．前記化合物が下記一般式中の基Ｒ¹〜Ｒ⁸の少なくとも３つの連続するアミノ酸からなるペプチドである請求の範囲第９項の方法。Ｒ¹−Ｒ²−Ｒ³−Ｒ⁴−Ｒ⁵−Ｒ⁶−Ｒ⁷−Ｒ⁸ （式中、Ｒ¹およびＲ²は共に式：Ｘ−Ｒ^A−Ｒ^B （ここで、ＸはＨまたは１〜３個のペプチド基であり、Ｒ^AとＲ^Bとの間のペプチド結合はアミノペプチダーゼＡ切断に対して不安定である）の基を形成し、Ｒ³はＶａｌ、Ａｌａ、Ｌｅｕ、ｎｏｒＬｅｕ、Ｉｌｅ、Ｇｌｙ、Ｐｒｏ、Ａｉｂ、ＡｃｐｃおよびＴｙｒからなる群から選択され、Ｒ⁴はＴｙｒ、Ｔｙｒ（ＰＯ₃）₂、Ｔｈｒ、Ｓｅｒ、ｈｏｍｏＳｅｒおよびａｚａＴｙｒからなる群から選択され、Ｒ⁵はＩｌｅ、Ａｌａ、Ｌｅｕ、ｎｏｒＬｅｕ、ＶａｌおよびＧｌｙからなる群から選択され、Ｒ⁶はＨｉｓ、Ａｒｇまたは６−ＮＨ₂−Ｐｈｅであり、Ｒ⁷はＰｒｏまたはＡｌａであり、そしてＲ⁸はＰｈｅ、Ｐｈｅ（Ｂｒ）、ＩｌｅおよびＴｙｒからなる群から選択され、但し末端ＴｙΓ基としてＲ⁴を含む配列を除く）１１．前記化合物が下記一般式を有するペプチドである請求の範囲第９項の方法。Ｒ²−Ｒ³−Ｒ⁴−Ｒ⁵−Ｒ⁶−Ｒ⁷−Ｒ⁸ （式中、Ｒ²はＨ、Ａｒｇ、Ｌｙｓ、Ａｌａ、Ｏｒｎ、Ｓｅｒ（Ａｃ）、Ｓａｒ、Ｄ−ＡｒｇおよびＤ−Ｌｙｓからなる群から選択され、Ｒ³はＶａｌ、Ａｌａ、Ｌｅｕ、ｎｏｒＬｅｕ、Ｉｌｅ、Ｇｌｙ、Ｐｒｏ、Ａｉｂ、ＡｃｐｃおよびＴｙｒからなる群から選択され、Ｒ⁴はＴｙｒ、Ｔｙｒ（ＰＯ₃）₂、Ｔｈｒ、Ｓｅｒ、ｈｏｍｏＳｅｒおよびａｚａＴｙｒからなる群から選択され、Ｒ⁵はＩｌｅ、Ａｌａ、Ｌｅｕ、ｎｏｒＬｅｕ、ＶａｌおよびＧｌｙからなる群から選択され、Ｒ⁶はＨｉｓ、Ａｒｇまたは６−ＮＨ₂−Ｐｈｅであり、Ｒ⁷はＰｒｏまたはＡｌａであり、そしてＲ⁸はＩｌｅ、Ｐｈｅ、Ｐｈｅ（Ｂｒ）およびＴｙｒからなる群から選択される）１２．前記皮膚移植片が生体皮膚等価物である請求の範囲第９項の方法。１３．前記皮膚移植片が自己移植片である請求の範囲第９項の方法。１４．前記皮膚移植片が同種移植片である請求の範囲第９項の方法。１５．前記皮膚移植片が異種移植片である請求の範囲第９項の方法。１６．生体皮膚等価物が、Vicrylメッシュバックボーン上のヒト繊維芽細胞の同種真皮移植片、シリコーンシートを有するナイロンメッシュ上のヒト繊維芽細胞の一時性同種移植片、および細胞が除去されるよう加工処理された死体真皮からの同種移植片からなる群から選択される同種移植片である請求の範囲第１２項の方法。１７．生休皮膚等価物がウシコラーゲンおよびコンドロイチン硫酸の無細胞性真皮異種移植片である請求の範囲第１２項の方法。