JP2001235401A - Method and apparatus for forming lamina sample - Google Patents

Method and apparatus for forming lamina sample

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JP2001235401A
JP2001235401A JP2000046231A JP2000046231A JP2001235401A JP 2001235401 A JP2001235401 A JP 2001235401A JP 2000046231 A JP2000046231 A JP 2000046231A JP 2000046231 A JP2000046231 A JP 2000046231A JP 2001235401 A JP2001235401 A JP 2001235401A
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Japan
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sample
carrier tape
sample block
slice
cut
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JP2000046231A
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Japanese (ja)
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Hisashi Ishida
尚志 石田
Hiroshi Nanto
寛 南都
Toshiro Higuchi
俊郎 樋口
Kenichi Kudo
謙一 工藤
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Kanagawa Academy of Science and Technology
Shibaura Machine Co Ltd
Original Assignee
Kanagawa Academy of Science and Technology
Toshiba Machine Co Ltd
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Abstract

PROBLEM TO BE SOLVED: To provide a method for forming a lamina sample capable of obtaining a three-dimensional image free from strain when the three-dimensional image is synthesized using the cross-sectional image of the lamina sample continuously cut off from one sample block. SOLUTION: A carrier tape 2 is bonded to the surface of the sample block 10 and an aligning reference mark 12 is applied to the carrier tape 2 in the peripheral part of the sample block 10 using a punch 7. Subsequently, the surface layer part of the sample block 10 is sliced using a cutter 1 and the cut-off lamina sample 11 is held to the carrier tape 2 to be recovered. By repeating this operation, the lamina sample 11 continuously cut off from the sample block 10 is successively held to the carrier tape 2 to be recovered. When the three- dimensional image is synthesized from the image of the cut surface of the lamina sample 11, the alignment of each image is performed using the reference mark 12 applied to the carrier tape 2.

Description

【発明の詳細な説明】DETAILED DESCRIPTION OF THE INVENTION

【0001】[0001]

【発明の属する技術分野】本発明は、生体試料、動植
物、食品などの組織の観察あるいは検査のために、生体
試料等から薄片状の試料を連続的に切り出して作製する
方法、及びそれに使用される装置に係る。
BACKGROUND OF THE INVENTION 1. Field of the Invention The present invention relates to a method for continuously cutting a flaky sample from a biological sample or the like for observation or inspection of a tissue such as a biological sample, animals, plants, foods, etc. Device.

【0002】[0002]

【従来の技術】生体試料中の特定の組織の三次元的な形
態を観察する際、次の様な処理が行われている。即ち、
先ず、生体試料をパラフィン等の中に包埋して試料ブロ
ックを作成する。次いで、この試料ブロックの表層部分
をミクロトームを用いて連続的に薄切りし、切り取られ
た薄片試料を順にキャリアテープの表面に貼り付けて回
収する。回収された各薄片試料の切断面を順に撮影し、
この様にして得られた切断面の画像に画像処理を施し
て、上記の組織の三次元イメージを合成する。
2. Description of the Related Art When observing the three-dimensional morphology of a specific tissue in a biological sample, the following processing is performed. That is,
First, a biological sample is embedded in paraffin or the like to prepare a sample block. Next, the surface layer portion of the sample block is continuously sliced using a microtome, and the cut slice samples are sequentially attached to the surface of the carrier tape and collected. Photograph the cut surface of each collected slice sample in order,
The image of the cut surface obtained in this manner is subjected to image processing to synthesize a three-dimensional image of the tissue.

【0003】この様な方法によって三次元イメージを合
成する場合、従来、各切断面の画像の位置合わせは目測
で行われていた。このため、位置合わせの精度に限界が
あり、作成された三次元イメージに歪を生じさせる要因
となっていた。
In the case of synthesizing a three-dimensional image by such a method, conventionally, alignment of images on each cut surface has been performed by eye measurement. For this reason, the accuracy of the alignment is limited, and this is a factor that causes distortion in the created three-dimensional image.

【0004】[0004]

【発明が解決しようとする課題】本発明は、上記の様な
従来の薄片試料の作成方法の問題点に鑑み成されたもの
で。本発明の目的は、一つの試料ブロックから連続的に
切り取られた薄片試料の断面画像を用いて三次元イメー
ジを合成する際、歪がない三次元イメージを得ることが
できる薄片試料の作成方法及びそのための装置を提供す
ることにある。
SUMMARY OF THE INVENTION The present invention has been made in view of the above-mentioned problems of the conventional method for producing a thin slice sample. An object of the present invention is to provide a method for producing a slice sample capable of obtaining a three-dimensional image without distortion when synthesizing a three-dimensional image using a cross-sectional image of a slice sample continuously cut out from one sample block, and An object of the present invention is to provide an apparatus for that purpose.

【0005】[0005]

【課題を解決するための手段】本発明の薄片試料作製方
法は、試料ブロックの表面にキャリアテープを貼り付け
た後、試料ブロックの表層部を薄切りし、切り取られた
薄片試料をキャリアテープの表面に保持して回収し、こ
れらの工程を繰り返すことによって、一つの試料ブロッ
クから連続的に切り取られた薄片試料を順にキャリアテ
ープの表面に並べて回収する薄片試料作成方法におい
て、試料ブロックの表面にキャリアテープを貼り付けた
後、試料ブロックの表層部を薄切りする前に、試料ブロ
ックの周辺部において、試料ブロックの表面に対して平
行な面内の一定の位置で、キャリアテープに位置合わせ
用の基準マークを付けることを特徴とする。
According to the method of the present invention, a carrier tape is adhered to the surface of a sample block, the surface layer of the sample block is sliced, and the sliced sample is removed from the surface of the carrier tape. In a method for preparing a slice sample in which thin sections continuously cut from one sample block are sequentially arranged on the surface of a carrier tape and collected by repeating these steps, the carrier is placed on the surface of the sample block. After attaching the tape and before slicing the surface layer of the sample block, the reference for positioning on the carrier tape at a fixed position in a plane parallel to the surface of the sample block around the sample block. Marking is provided.

【0006】本発明の薄片試料作成方法によれば、試料
ブロックの表層部を薄切りする際、試料ブロックの表面
に対して平行な面内の一定の位置で、キャリアテープに
基準マークが付けられる。従って、後続する工程におい
て、各薄片試料の切断面を撮影した画像から三次元イメ
ージを合成する際、キャリアテープに付けられた基準マ
ークを用いて各画像の位置合わせを行えば、各画像の相
対位置を正確に合わせることができる。その結果、歪み
がない三次元イメージを合成することができる。
According to the method for preparing a slice sample of the present invention, when the surface layer of the sample block is sliced, a reference mark is attached to the carrier tape at a predetermined position in a plane parallel to the surface of the sample block. Therefore, in a subsequent step, when synthesizing a three-dimensional image from an image obtained by photographing a cut surface of each slice sample, if the respective images are aligned using the fiducial mark attached to the carrier tape, the relative position of each image can be obtained. The position can be adjusted accurately. As a result, a three-dimensional image without distortion can be synthesized.

【0007】なお、試料ブロックの周辺部において、キ
ャリアテープに位置合わせ用の基準マークを付ける代わ
りに、試料ブロック自体にキャリアテープの裏面側から
位置合わせ用の基準マークを付けても良い。
[0007] In place of the reference mark for positioning on the carrier tape at the peripheral portion of the sample block, a reference mark for positioning may be provided on the sample block itself from the back side of the carrier tape.

【0008】好ましくは、前記基準マークを二箇所に付
ける。この様にすれば、後続する工程で三次元イメージ
を合成する際、各画像の位置合わせを、正確に且つ容易
に行うことができる。
Preferably, the fiducial marks are provided at two places. In this way, when synthesizing a three-dimensional image in a subsequent step, the positioning of each image can be performed accurately and easily.

【0009】なお、前記基準マークは、例えば、ポンチ
を用いて機械的に穴をあけるか、あるいは、レーザービ
ームを照射して穴をあけることにより付けることができ
る。
The reference mark can be formed by, for example, making a hole mechanically using a punch, or making a hole by irradiating a laser beam.

【0010】[0010]

【発明の実施の形態】本発明の薄片試料作成方法につい
て、図面を用いて説明する。
BEST MODE FOR CARRYING OUT THE INVENTION A method for producing a slice sample according to the present invention will be described with reference to the drawings.

【0011】図1に、本発明による薄片試料作成方法を
実施するための薄片試料作成装置の概略構成を示す。
FIG. 1 shows a schematic configuration of a slice sample preparation apparatus for carrying out a slice sample preparation method according to the present invention.

【0012】試料ブロック10は、生体試料をパラフィ
ンの中に包埋したものである。試料ブロック10は、表
面(この例では上面)を水平にして試料ホルダ5の上に
保持される。試料ホルダ5は上下方向に駆動される。試
料ホルダ5に隣接して、カッタ1が配置されている。カ
ッタ1は、水平方向に走行する。
The sample block 10 is obtained by embedding a biological sample in paraffin. The sample block 10 is held on the sample holder 5 with the surface (in this example, the upper surface) horizontal. The sample holder 5 is driven up and down. The cutter 1 is arranged adjacent to the sample holder 5. The cutter 1 runs in a horizontal direction.

【0013】試料ブロック10の上方には、キャリアテ
ープ2が供給される。キャリアテープ2の表面(この例
では下面)は、接着剤で被覆されている。キャリアテー
プ2は、繰り出しロール3から繰り出され、試料ブロッ
ク10の上方を通って、巻き取りロール4に巻き取られ
る。キャリアテープ2を間に挟んで、試料ホルダ5の上
方には、一対のポンチ7が配置されている。
A carrier tape 2 is supplied above the sample block 10. The surface (the lower surface in this example) of the carrier tape 2 is covered with an adhesive. The carrier tape 2 is unwound from the unwinding roll 3, passes over the sample block 10, and is wound on the winding roll 4. A pair of punches 7 is arranged above the sample holder 5 with the carrier tape 2 interposed therebetween.

【0014】この薄片試料作成装置を用いた試料作成の
工程は、次の様になる。
The process of preparing a sample using the thin sample preparing apparatus is as follows.

【0015】a.試料ブロック10を試料ホルダ5の上
に保持し、試料ホルダ5の上下方向の位置を調整した
後、カッタ1を走行させて試料ブロック10の表層部を
切り取り、カッタ1の走行面に対して平行な表面を作
る。
A. After holding the sample block 10 on the sample holder 5 and adjusting the vertical position of the sample holder 5, the cutter 1 is run to cut off the surface layer of the sample block 10 and is parallel to the running surface of the cutter 1. Make a perfect surface.

【0016】b.試料ホルダ5を、所定の距離、上方に
送り出す。
B. The sample holder 5 is sent upward by a predetermined distance.

【0017】c.キャリアテープ2を、試料ブロック1
0の表面に貼り付ける。
C. Transfer carrier tape 2 to sample block 1
Affix to the surface of No. 0.

【0018】d.ポンチ7を打ち込んで、キャリアテー
プ2に基準マーク(図示せず)を付ける。
D. The punch 7 is driven in to make a reference mark (not shown) on the carrier tape 2.

【0019】e.カッタ1を走行させて(この例では、
図の左から右へ走行させる)、試料ブロック10の表層
部を切断する。表層部は、先の試料ホルダ5の送り出し
量に相当する厚さで切り取られる。切り取られた薄片試
料は、キャリアテープ2の表面に保持されて、試料ブロ
ック10から引き離される。
E. Run the cutter 1 (in this example,
Then, the surface layer of the sample block 10 is cut. The surface layer is cut off at a thickness corresponding to the amount of the sample holder 5 sent out. The cut slice sample is held on the surface of the carrier tape 2 and separated from the sample block 10.

【0020】f.カッタ1を元の位置に戻した後(この
例では、図の右から左へ戻す)、繰り出しロール3及び
巻き取りロール4を駆動して、キャリアテープ2ととも
に薄片試料を巻き取りロール4側へ送る。
F. After returning the cutter 1 to its original position (in this example, returning from right to left in the figure), the feed roll 3 and the take-up roll 4 are driven to drive the thin sample together with the carrier tape 2 to the take-up roll 4 side. send.

【0021】上記の“b”以降の工程を繰り返すことに
よって、試料ブロック10から連続的に薄片試料が切り
取られ、切り取られた薄片試料は、順にキャリアテープ
2の表面に保持されて回収される。
By repeating the above steps "b" and subsequent steps, a thin sample is continuously cut from the sample block 10, and the cut thin samples are sequentially held on the surface of the carrier tape 2 and collected.

【0022】図2に、キャリアテープ2の表面に保持さ
れて回収された薄片試料の状態を示す。図2(a)に示
した例では、薄片試料11の周辺部の二箇所に、ポンチ
7によって基準マーク12が付けられている。図2
(b)に示した例では、薄片試料11の内部に、ポンチ
7によって基準マーク12が付けられている。各薄片試
料の切断面を順に撮影した後、撮影された画像を用いて
三次元イメージを合成する際、キャリアテープ2に付け
られた基準マーク12を用いて各画像の位置合わせを行
えば、各画像の相対位置を正確に合わせることができ
る。
FIG. 2 shows the state of the thin sample held and collected on the surface of the carrier tape 2. In the example shown in FIG. 2A, fiducial marks 12 are provided by punches 7 at two locations around the slice sample 11. FIG.
In the example shown in (b), the reference mark 12 is provided inside the thin sample 11 by the punch 7. After sequentially photographing the cut surface of each slice sample, when synthesizing a three-dimensional image using the photographed images, if each image is aligned using the reference mark 12 attached to the carrier tape 2, each The relative positions of the images can be accurately adjusted.

【0023】図3に、本発明の方法を実施するための薄
片試料作成装置の他の例を示す。この例では、図1に示
した例におけるポンチ7の代わりに、一対のレーザービ
ーム照射ヘッド8が使用されている。レーザービーム照
射ヘッド8は、キャリアテープ2の裏面側からキャリア
テープ2に二箇所の基準マーク12を付ける。その他の
構成及び使用方法は、図1に示した例と共通である。
FIG. 3 shows another example of a slice sample preparation apparatus for carrying out the method of the present invention. In this example, a pair of laser beam irradiation heads 8 are used instead of the punch 7 in the example shown in FIG. The laser beam irradiation head 8 makes two reference marks 12 on the carrier tape 2 from the back side of the carrier tape 2. Other configurations and methods of use are common to the example shown in FIG.

【0024】[0024]

【発明の効果】本発明の薄片試料作成方法によれば、各
薄片試料の切断面の画像から三次元イメージを合成する
際、キャリアテープに付けられた基準マークを用いて各
画像の位置合わせを正確に行うことができる。その結
果、歪みがない三次元イメージを得ることができる。
According to the method for producing a slice sample of the present invention, when synthesizing a three-dimensional image from the image of the cut surface of each slice sample, the alignment of each image is performed using the reference mark attached to the carrier tape. Can be done accurately. As a result, a three-dimensional image without distortion can be obtained.

【図面の簡単な説明】[Brief description of the drawings]

【図1】本発明の薄片試料作成方法を実施する装置の一
例を示す図。
FIG. 1 is a diagram showing an example of an apparatus for implementing a method for producing a slice sample of the present invention.

【図2】キャリアテープに保持された薄片試料と基準マ
ークについて説明する図、(a)はキャリアテープに基
準マークを付けた例、(b)は薄片試料の内部に基準マ
ークを付けた例を表す。
2A and 2B are diagrams illustrating a thin sample and a reference mark held on a carrier tape, FIG. 2A illustrates an example in which a reference mark is provided on a carrier tape, and FIG. 2B illustrates an example in which a reference mark is provided inside a thin sample. Represent.

【図3】本発明の薄片試料作成方法を実施する装置の他
の例を示す図。
FIG. 3 is a diagram showing another example of an apparatus for performing the method for producing a slice sample of the present invention.

【符号の説明】[Explanation of symbols]

1・・・カッタ、 2・・・キャリアテープ、 3・・・繰り出しロール、 4・・・巻き取りロール、 5・・・試料ホルダ、 7・・・ポンチ、 8・・・レーザービーム照射ヘッド、 9・・・電源装置、 10・・・試料ブロック、 11・・・薄片試料、 12・・・基準マーク。 DESCRIPTION OF SYMBOLS 1 ... cutter, 2 ... carrier tape, 3 ... payout roll, 4 ... take-up roll, 5 ... sample holder, 7 ... punch, 8 ... laser beam irradiation head, 9: Power supply unit, 10: Sample block, 11: Thin sample, 12: Reference mark.

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (72)発明者 南都 寛 静岡県沼津市大岡2068の3 東芝機械株式 会社沼津事業所内 (72)発明者 樋口 俊郎 神奈川県横浜市都筑区荏田東3−4−26 (72)発明者 工藤 謙一 東京都豊島区巣鴨5−15−16 Fターム(参考) 3C060 AA20 BA10 BF01 BF02  ────────────────────────────────────────────────── ─── Continued on the front page (72) Inventor Hiroshi Minato 2068-3, Ooka, Numazu-shi, Shizuoka Toshiba Machine Co., Ltd. Numazu Office (72) Inventor Toshiro Higuchi 3-4-26, Eda-Higashi, Tsuzuki-ku, Yokohama, Kanagawa 72) Inventor Kenichi Kudo 5-15-16 Sugamo, Toshima-ku, Tokyo F-term (reference) 3C060 AA20 BA10 BF01 BF02

Claims (10)

【特許請求の範囲】[Claims] 【請求項1】 試料ブロックの表面にキャリアテープを
貼り付けた後、試料ブロックの表層部を薄切りし、切り
取られた薄片試料をキャリアテープの表面に保持して回
収し、これらの工程を繰り返すことによって、一つの試
料ブロックから連続的に切り取られた薄片試料を順にキ
ャリアテープの表面に並べて回収する薄片試料作成方法
において、 試料ブロックの表面にキャリアテープを貼り付けた後、
試料ブロックの表層部を薄切りする前に、試料ブロック
の周辺部において、試料ブロックの表面に対して平行な
面内の一定の位置で、キャリアテープに位置合わせ用の
基準マークを付けることを特徴とする薄片試料作製方
法。
1. After a carrier tape is stuck to the surface of a sample block, the surface layer of the sample block is sliced, and the cut slice sample is held and collected on the surface of the carrier tape, and these steps are repeated. In the method for preparing a slice sample in which thin samples continuously cut from one sample block are sequentially arranged on the surface of the carrier tape and collected, after attaching the carrier tape to the surface of the sample block,
Before slicing the surface layer of the sample block, a reference mark for alignment is provided on the carrier tape at a fixed position in a plane parallel to the surface of the sample block at the periphery of the sample block. Sample preparation method.
【請求項2】 試料ブロックの表面にキャリアテープを
貼り付けた後、試料ブロックの表層部を薄切りし、切り
取られた薄片試料をキャリアテープの表面に保持して回
収し、これらの工程を繰り返すことによって、一つの試
料ブロックから連続的に切り取られた薄片試料を順にキ
ャリアテープの表面に並べて回収する薄片試料作成方法
において、 試料ブロックの表面にキャリアテープを貼り付けた後、
試料ブロックの表層部を薄切りする前に、試料ブロック
の表面に対して平行な面内の一定の位置で、試料ブロッ
クにキャリアテープの裏面側から位置合わせ用の基準マ
ークを付けることを特徴とする薄片試料作製方法。
2. After a carrier tape is attached to the surface of the sample block, the surface layer of the sample block is sliced, and the cut slice sample is held and collected on the surface of the carrier tape, and these steps are repeated. In the method for preparing a slice sample in which thin samples continuously cut from one sample block are sequentially arranged on the surface of the carrier tape and collected, after attaching the carrier tape to the surface of the sample block,
Before slicing the surface layer of the sample block, a reference mark for alignment is attached to the sample block from the back side of the carrier tape at a fixed position in a plane parallel to the surface of the sample block. Thin sample preparation method.
【請求項3】 前記基準マークを、二箇所に付けること
を特徴とする請求項1または2に記載の薄片試料作製方
法。
3. The method according to claim 1, wherein the fiducial marks are provided at two positions.
【請求項4】 前記基準マークを、ポンチを用いて付け
ることを特徴とする請求項1または2に記載の薄片試料
作製方法。
4. The method according to claim 1, wherein the reference mark is formed using a punch.
【請求項5】 前記基準マークを、レーザービームの照
射によって付けることを特徴とする請求項1または2に
記載の薄片試料作製方法。
5. The method according to claim 1, wherein the reference mark is formed by irradiating a laser beam.
【請求項6】 試料ホルダの前面に保持された試料ブロ
ックの表面にキャリアテープを貼り付けた後、試料ブロ
ックの表層部を薄切りし、切り取られた薄片試料をキャ
リアテープの表面に保持して回収し、これらの工程を繰
り返すことによって、一つの試料ブロックから連続的に
切り取られた薄片試料を順にキャリアテープの表面に並
べて回収する薄片試料作成装置において、 前記試料ホルダの正面に、試料ブロックの周辺部におい
て、キャリアテープの裏面側からキャリアテープに位置
合わせ用の基準マークを付ける穴あけ装置を備えたこと
を特徴とする薄片試料作製装置。
6. After attaching a carrier tape to the surface of a sample block held on the front surface of a sample holder, the surface layer of the sample block is sliced, and the cut-out thin sample is held and collected on the surface of the carrier tape. By repeating these steps, a slice sample preparation apparatus for sequentially collecting slice samples cut from one sample block on the surface of the carrier tape in order to collect the slice samples, comprising: A thin sample manufacturing apparatus, characterized in that the section has a punching device for making a reference mark for alignment on the carrier tape from the back side of the carrier tape.
【請求項7】 試料ホルダの前面に保持された試料ブロ
ックの表面にキャリアテープを貼り付けた後、試料ブロ
ックの表層部を薄切りし、切り取られた薄片試料をキャ
リアテープの表面に保持して回収し、これらの工程を繰
り返すことによって、一つの試料ブロックから連続的に
切り取られた薄片試料を順にキャリアテープの表面に並
べて回収する薄片試料作成装置において、 前記試料ホルダの正面に、キャリアテープの裏面側から
試料ブロックに位置合わせ用の基準マークを付ける穴あ
け装置を備えたことを特徴とする薄片試料作製装置。
7. After attaching a carrier tape to the surface of the sample block held on the front surface of the sample holder, the surface layer of the sample block is sliced, and the cut slice sample is held and collected on the surface of the carrier tape. By repeating these steps, a slice sample preparation apparatus for sequentially collecting slice samples cut from one sample block on the surface of the carrier tape in order to collect the slice samples, comprising: A thin sample manufacturing apparatus, comprising: a punching device for making a reference mark for alignment on a sample block from a side.
【請求項8】 前記穴あけ装置は、基準マークを二箇所
に付けるものであることを特徴とする請求項6または7
に記載の薄片試料作製装置。
8. The drilling device according to claim 6, wherein the reference mark is formed at two positions.
2. The thin-section sample preparation apparatus according to 1.
【請求項9】 前記穴あけ装置は、ポンチであることを
特徴とする請求項6または7に記載の薄片試料作製方
法。
9. The method according to claim 6, wherein the punching device is a punch.
【請求項10】 前記穴あけ装置は、レーザービーム照
射ヘッドであることを特徴とする請求項6または7に記
載の薄片試料作製方法。
10. The method according to claim 6, wherein the drilling device is a laser beam irradiation head.
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Cited By (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
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JP2020512529A (en) * 2016-11-18 2020-04-23 ティシュヴィジョン、インコーポレーテッド Automated tissue section capture, indexing and storage system
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