JP2001089391A - Ｉｒｄｓおよびａｌｉの治療用の製薬的組成物、その使用、およびそれを有する製品 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】 【解決手段】 Ｃ_１−ＩＮＨと肺表面活性物質との組合
せから成るＩＲＤＳおよびＡＬＩ（ＡＲＤＳを含む）の
予防又は治療用の製薬的組成物 【効果】 本発明による組成物は、早産におけるＩＲＤ
Ｓの治療または予防および成人におけるＡＲＤＳを含む
ＡＬＩの治療または予防に適切であるだけではなく、肺
炎、気管支炎、胎便吸引症候群、ＣＯＰＤ（慢性閉塞性
肺疾患）、喘息および嚢胞性線維症の治療または予防の
ために適切である。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【発明の属する技術分野】技術分野 本発明は、急性または成人呼吸促迫症候群（ＡＲＤＳ）
を含む新生児特発性呼吸窮迫症候群（ＩＲＤＳ）および
急性肺障害（ＡＬＩ）と呼ばれる疾病の症状の治療のた
めの新規の組合せおよび方法に関する。

【０００２】

【従来の技術】先行技術 成人呼吸促迫症候群（ＡＲＤＳ）は、それが重度のガス
交換疾患（特に動脈低酸素血症）を伴うものであれば、
様々な病因から成る多くの急性、び慢性、湿潤性の肺疾
患に適合することを開示された表現である。ＡＲＤＳと
いう表現は、新生児特発性呼吸窮迫症候群（ＩＲＤＳ）
と多くの臨床的および病理学的に特徴のある共通点をも
つことから用いられる。また、ＩＲＤＳの場合には、早
産によって引き起こされる肺表面活性物質の欠損が主因
であり、さらにＡＲＤＳの場合には、様々な病因がもと
である肺の状態により、肺表面活性物質の機能不全が生
じる。

【０００３】ＡＲＤＳを含むＡＬＩ（急性肺障害）の引
き金となる原因は、例えば（citedin accordance with
Harrison's Principles of intrnal Medicine 10th Ed.
1983 McGraw-Hill Int.Book Comp.）び慢性的な肺の感
染症（例えば、ウイルス、バクテリア、菌類による）、
例えば胃液または溺れた場合の吸引、毒物または刺激物
（例えば、塩素ガス、窒素酸化物、煙）の吸息、直接的
または間接的外傷（例えば多発性骨折または肺挫傷）、
全身性疾患による肺表面の炎症（例えば、出血性膵炎、
グラム陰性敗血症）、血液の大量の輸注またはその他に
心肺バイパスによる多量の輸血である。

【０００４】死亡率５０〜６０％である（survey in Sc
huster Chest 1995,107:1721-26)、ＡＲＤＳ患者の予後
は、いまだ不良であるとされている。

【０００５】ＡＲＤＳの治療は、主に膜型人工肺による
酸素化（ＥＣＭＯ; Zapol and Lemaire Adult Respirat
ory Distress Syndrome, Marcel Dekker Inc. 1991）に
至るまでの、様々な換気形態［例えば、ＰＥＥＰ（終末
呼気陽圧）、呼吸気の酸素濃度を上昇させること、ＳＩ
ＭＶ（同調間欠的強制呼吸; Harrison's Principlesof
Internal Medicine 10th Ed 1983 McGraw-Hill Int.Boo
k Comp）］の最も早期な使用から成り立っている。

【０００６】

【発明が解決しようとする課題】様々な換気技術の特殊
な使用は、単に死亡率のわずかな減少を導くだけであ
り、かつ悪循環の作用が起こる危険をも含む。圧力と高
いＦｉＯ₂（吸入された酸素画分：呼吸気中の酸素の割
合）の換気により、肺自体は損傷を受けかねず、結果と
して、血液の適度な酸素供給を得るために、より高い圧
力およびＦｉＯ₂が必要とされる。

【０００７】今日では、その問題を解決する様々な薬理
学的方法も追求されている。それは、例えばプロスタグ
ランジンＥ₁（PGE₁: Abraham et al. Crit Care Med 19
96 ,24:10-15）または糖質コルチコステロイド（Bernar
d et al. N Engl J Med 1987. 317 : 1565-70 ）を用い
た単なる抗炎症的な治療に適した肺表面活性物質の代用
物［概説、例えば、B.Lachmann,D Gommers and E.P Eij
ing : Exogenous surfactant therapy in adults, Atem
w.-Lungenkrkh, 1993, 19:581-91 ; T.J.Gregory et a
l; Survanta supplementation in patients with acute
respiratory distress syndrome（ARDS）, Am .J.Resp
ir, Crit, Care Med, 1994, 149:A567］を含む。しかし
特異的な成功は、肺表面活性物質の投与（例えば、Walm
rath etal. Am J Resp Crit Care Med 1996 ,154:57-6
2)により達成されたにもかかわらず、単なる抗炎症的な
治療は殆ど成功しなかった。これは、ＡＲＤＳの病理学
的または病理組織学的な発見とはまさに対照的なもので
あった。従って、塊状多形核白血球の湿潤を（概説、例
えば Thiel et al. Anesthesis 1996,45:113-130）ＡＲ
ＤＳ患者の肺および洗浄部位より発見し、かつ多数の炎
症性化学伝達物質を検出することができた。試験におい
て、ＰＧＥ₁は付加的にリポソームの静脈内投与形態（A
braham et al.Crit Care Med 1996,24:10-15）中ならび
にホスファチジン酸の抑制を意図した物質（例えば、Li
sofylline: Rice et al.Proc NatlAcad Sci 1994.91:38
57-61）、または組換体ヒトインターロイキン１（IL-
1）受容体拮抗物質（Fisher et al.JAMA 1994,271:1836
-43）中に存在しする。しかし、ＰＧＥ₁およびＩＬ−１
受容体拮抗物質は双方ともそれらの治療の有用性は副作
用により制限されている。

【０００８】ＷＯ９８／３５６８３には、Ｎ−（３，５
−ジクロロピリド−４−イル）−３−シクロプロピルメ
トキシ−４−ジフルオロメトキシベンズアミドおよび肺
表面活性物質を含有するＡＲＤＳおよびＩＲＤＳの治療
のための組成物が示されている。ＷＯ９６／０９８３１
には、糖質コルチコステロイドおよび肺表面活性物質を
含有するＡＲＤＳおよびＩＲＤＳの治療用の組成物が示
されている。欧州特許第０４５１２１５号明細書には、
肺を経由した製薬的活性をもつ化合物の投与のための組
成物が記載されている。これらの組成物は、製薬的活性
をもつ化合物および肺表面活性タンパク質を含有するリ
ポソームを有する。欧州特許第００５５０４１号明細書
には、呼吸器官障害の治療のための吸入製剤または注入
製剤が記載されており、この場合これらの製剤は、呼吸
器官障害に対して活性の化合物および天然の肺表面活性
物質を含有する。ＡＲＤＳおよびＩＲＤＳの治療のため
の組成物は開示されていない。

【０００９】

【課題を解決するための手段】本発明の開示 ところで、意外なことに、Ｃ_１−阻害剤および肺表面活
性物質を組合せた物の投与により、ＡＲＤＳを含むＩＲ
ＤＳおよびＡＬＩの治療において相乗効果を達成するこ
とができる事が見出された。

【００１０】本発明は第１に、Ｃ_１−阻害剤と肺表面活
性物質の組合せから成るＩＲＤＳおよびＡＲＤＳの治療
のための製剤の組成物に関する。

【００１１】さらに、本発明の実施態様は特許請求の範
囲の記載に従う。

【００１２】本発明に関してのＣ_１−阻害剤（以後Ｃ_１
ＩＮＨと表す）は、補体系のＣ_１−エステラーゼを阻害
する能力によりＣ_１−抑制剤と称されるタンパク質を意
味する。Ｃ_１−阻害剤は、当業者に公知の方法による血
漿からの単離により製造することができる。治療目的の
ためのＣ_１−阻害剤の製造方法は、例えば欧州特許第０
１０１９３５号明細書の中で開示されている。述べるこ
とのできるＣ_１−阻害剤を含有する市販の製品は、Beri
nert^(R)HS[Centeon Pharma, Marburg (Lahn),Germany]
である。

【００１３】肺表面活性物質は、本発明によれば天然の
肺表面活性物質の機能を有する公知の多くの組成物およ
びそれらの修飾物を意味するものと解釈されている。天
然の肺表面活性物質は、表面活性の性質を有し、肺の肺
胞領域において表面張力を減少させる。表面活性製剤の
表面活性を測定するための勘弁かつ迅速で定量的な生体
外検定は、例えば、ヴィルヘミナーバランス（Wilhelmy
balance）［Goerke,J Biochim Biophys Acta. 344:241
-261(1974); King R.J. and Clemens J.A.AmJ Physiol
223:715-726(1972)］である。この検定は、表面張力を
ほぼゼロｍＮ／ｍに接近する能力によって表面活性物質
の品質の１つの尺度を与える。さらに、リン脂質の定義
された濃度で表面活性物質懸濁液を水和溶液中に導入す
ることにより実施した。リン脂質をいわゆる単層を形成
する気体−液体相に拡散した。この単層は、水和溶液の
表面張力を減少させた。白金板を注意深く溶液中に浸漬
した。この時、白金板を引き下ろす力は高感度変換器を
用いて測定してもよい。この力は表面張力に比例し、か
つ白金板の寸法に依存する。表面活性製剤の表面活性を
記載するためのもう１つの方法は、脈動性気泡界面活性
測定器［Possmayer F.YuS.and Weber M.,Prog Resp Re
s, Ed.v.Wichert, Vol.18:112-120( 1984)]である。ま
た、表面活性製剤の活性は、例えば下記の薬理学の章で
記載されているような生体内検定、またはHaefner et a
lで記載されているような検定によって評価されてもよ
い（D.Haefer et al.:D.Haefner et al.:Effects of rS
P-C surfactant on oxygenation and histology in a r
at lung lavage model of acute lung injury. Am. J.
Respir. Crit.Care Med.1998. 158: 270-278）。肺の圧
縮性、血液ガスおよび人工呼吸器の圧力の測定は、活性
の指数を提供するであろう。

【００１４】肺表面活性物質は、本発明によれば、この
ような検定で活性を示す組成物として有利に認識される
べきである。このような検定で天然の、特にヒトの肺表
面活性物質と同等またはそれ以上の活性を示すであろう
組成物について特に挙げることができる。

【００１５】特に肺表面活性物質の組成物は、リン脂質
を有し、特に付加的に肺表面活性タンパク質を含有する
ことができる。本発明に関連して挙げることができる有
利なリン脂質は、ジパルミトイルホスファチジルコリン
（DPPC）、パルミトイルオレイルホスファチジルグリセ
ロール（POPG）および／またはホスファチジルグリセロ
ール（PG）である。有利なリン脂質は、ジパルミトイル
ホスファチジルコリン（DPPC）およびパルミトイルオレ
イルホスファチジルグリセロール（POPG）の混合物、特
に７：３〜３：７の比のものである。可能性のある肺表
面活性タンパク質は双方とも、例えば、肺の洗浄物また
は羊水からの抽出物のような天然源から得られたタンパ
ク質であり、さらに合成的または遺伝子工学的につくら
れたタンパク質である。本発明によれば、ＳＰ−Ｂおよ
びＳＰ−Ｃと称される肺表面活性タンパク質ならびにそ
れらの修飾された誘導体は特に重要である。この肺表面
活性タンパク質のアミノ酸塩基配列、それらの遺伝子工
学技術による単離または製造は公知である（例えば、WO
-86/03408、EP-A-0251,449、WO-89/04326、WO-87/0694
3、WO-88/03170、EP-A-0368823およびEP-A-0348967）。
一定のアミノ酸の置換によりヒトＳＰ−Ｃとは異なるＳ
Ｐ−Ｃの修飾された誘導体は、例えばＷＯ９１／１８０
１５およびＷＯ９５／３２９９２に開示されている。Ｗ
Ｏ９５／３２９９２に開示されているＳＰ−Ｃ誘導体
は、特に挙げられていてもよい。本発明によれば、特に
組み換えＳＰ−Ｃ誘導体を示す表面活性タンパク質［以
下、r-SP-Cまたはr-SP-C(FF/I)と呼ぶ］は、４位および
５位におけるフェニルアラニンによる２つのシステイン
の置換および３２位におけるイソロイシンによるメチオ
ニンの置換によりヒトＳＰ−Ｃとは異なっている。ここ
で使用される肺表面活性タンパク質という言葉は、異な
る肺表面活性タンパク質の混合物もまた意味する。

【００１６】さらに肺表面活性物質の組成物中に存在す
ることができる成分は、脂肪酸、例えばパルミチン酸で
ある。肺表面活性物質の組成物は、カルシウム、マグネ
シウムおよび／またはナトリウム塩（例えば塩化カルシ
ウム、塩化ナトリウムおよび／または炭酸水素ナトリウ
ム）のような電解質を含有することもでき、良好な粘性
を与える。当業者は、肺表面活性物質の組成物の個々の
成分の種類および量の決定を一方では天然の肺表面活性
物質の公知の組成物に基づいて、他方では先行技術中、
例えば、欧州特許出願公開第０１１９０５６号明細書お
よび欧州特許出願公開第０４０６７３２号明細書中の様
々な提案に基づいて行う。

【００１７】欧州特許第０１００９１０号明細書、欧州
特許出願公開第０１１０４９８号明細書、欧州特許第０
１１９０５６号明細書、欧州特許第０１４５００５号明
細書および欧州特許第０２８６０１１号明細書には、例
えば、本発明による製剤の成分として適切な肺表面活性
タンパク質を用いたもの、または用いていないリン脂質
の組成物が記載されている。

【００１８】挙げることができる商業的に入手可能な製
品は、ホモジナイズされたブタの肺からの高度に純化さ
れた天然活性物質であるクロサーフ(Curosurf^(R)) (Ser
ono,Pharma GmbH, Unterschleissheim ）、子牛の肺の
抽出物のサーバンタ(Survanta^(R)）（Aboott GmbH, Wie
sbandan）およびアルヴェオファクト（Alveofact^(R)）
(Dr.Karl Thomae GmcH, Biberach）、および助剤を有す
る合成リン脂質のエクソサーフ（Exosurf^(R)）(Deutsch
e wellcome GmbH, Burgwedel）である。

【００１９】本発明に関する肺表面活性物質の組成物
は、リン脂質８０〜９５質量％、表面活性タンパク質
０．２〜５質量％、脂肪酸２〜１５質量％および電解質
０〜５質量％（乾燥質量）を便宜的に含有する。

【００２０】本発明に関する有利な肺表面活性物質の組
成物は、リン脂質８０〜９５質量％、表面活性タンパク
質０．５〜３.０質量％、脂肪酸３〜１５質量％および
塩化カルシウム０〜３質量％（乾燥質量）を含有する。

【００２１】本発明に関する有利な肺表面活性物質の組
成物は、リン脂質８０〜９５質量％、表面活性タンパク
質０．５〜３.０質量％、脂肪酸４〜７質量％、有利に
はパルミチン酸および塩化カルシウム１〜３質量％（乾
燥質量）を含有する。

【００２２】本発明に関しての組み合わせは、一定およ
び自由な組合せ、すなわちＣ₁−ＩＮＨおよび肺表面活
性物質が１つの投薬単位に一緒に存在するか、またはＣ
₁−ＩＮＨおよび肺表面活性物質が別々の投薬単位に存
在するかのどちらかが、直接連続的にまたは比較的長い
時間間隔をおいて投与されることを意味する；比較的長
い時間間隔とは最大２４時間までの範囲を意味する。別
々の投薬単位として使用するために、これらを一緒にま
とめて利用することが有利である。

【００２３】肺表面活性物質およびＣ₁−ＩＮＨの別々
の投薬単位は、当業者に公知の方法により製造され、場
合によりさらに適切な製薬的助剤を使用する。Ｃ₁−Ｉ
ＮＨは、別々の投薬単位と関連して凍結乾燥の形態で存
在するのが有利である。適切な生成物は、商標Ｂｅｒｉ
ｎｅｒｔ^(R)ＨＳとして当業者に公知である。肺表面活
性物質の組成物の製造は、当業者に公知の方法、例えば
ＷＯ９５／３２９９２に記載されているような、例えば
表面活性タンパク質をリン脂質基質中に挿入することに
より達成される。本発明に関連して、肺表面活性物質の
組成物は凍結乾燥した形態で特に噴霧乾燥した形態で有
利に利用される。噴霧乾燥した組成物は例えばＷＯ９７
／３５８８２、ＷＯ９５／３２９９２、ＷＯ９１／００
８７１から公知であり、およびドイツ連邦共和国特許出
願公開第３２２９１７９号明細書、ＷＯ９７／２６８６
３号明細書は噴霧乾燥による粉末の形態の肺表面活性物
質の組成物の製造を記載している。

【００２４】一定の組合せに関して、さらに適切な製薬
的助剤を使用する場合は、本発明による組成物は当業者
に公知の方法で製造することができる。粉末の形態は、
例えば、粉末状にしたＣ₁−ＩＮＨおよび肺表面活性物
質を直接混合することによるか、または液状の肺表面活
性物質の調製物、例えば水性懸濁液をＣ₁−ＩＮＨの水
性懸濁液と混合し、次にそれを凍結乾燥およびホモジナ
イズすることによって得ることができる。また、肺表面
活性物質およびＣ₁−ＩＮＨの溶液を適切な溶媒中で凍
結乾燥させ、次に超微粉砕し、水性の肺表面活性物質の
懸濁液および水性Ｃ₁−ＩＮＨ懸濁液の混合物または、
場合により付加的に水を含有していてもよい適切な溶
媒、たとえばアルコール（例えば、メタノール、エタノ
ール、２−プロパノール）、クロロホルム、ジクロロメ
タン、アセトンおよびそれらの混合物中の肺表面活性物
質およびＣ₁−ＩＮＨの溶液を噴霧乾燥することによ
り、任意に粉末状製剤を導くことができる。

【００２５】薬理学 材料および方法 動物製剤 研究プロトコールは、倫理的動物研究のためのガイドラ
インに従ったドイツ国フライブルク地区機関で実験動物
保護委員会により再調査および許可された。研究は、体
重（b.w）２４２〜２６４ｇを有する、全３６個体の雄
のスプレイグドーリー（Sprague Dawley）ラット（Harl
an CBP, Zeist, The Netherlands）を用いて実施され
た。

【００２６】酸素中にハロタンおよび亜酸化窒素を用い
た一般の麻酔の誘導の後、留置カテーテルを頸動脈中に
装入した。ペントバルビタール（60mg/kg b.w.）の腹腔
内注射の後、ラットを気管切開しかつチューブを各々の
動物の気管中に確保した。機械的呼吸が始まる前に、動
物は臭化パンクロニウム（2mg/kg b.w.）の筋内（i.
m.）注射を受けた。６個体の動物の気管内チューブを分
配器に接続し、速度３０呼吸／分、吸入された酸素画分
（FiO₂）１．０、吸気／呼気の割合１：２、吸気圧（PI
P）ピーク１５ｃｍＨ₂Ｏおよび終末呼気陽圧（PEEP）２
ｃｍＨ₂ＯでＳｅｒｖｏ ９００Ｃ人工呼吸器（Siemens
Elema, Solna, Sweden）を用いて動物を同時に呼吸さ
せた。付加的にペントバルビトール（i.p.,15mg/kg b.
w.）および臭化パンクロニウム（i.m.,2 mg/kg b.w.）
を適切なときに与えた。

【００２７】Ｃ₁−阻害剤 殺菌したヒトＣ₁−阻害剤（Berinert^(R)HS, Centeon, G
ermany）を通常の生理食塩水９ｍｌを用いて再懸濁し、
濃度５０ユニット（Ｕ）／ｍｌを達成した。１ユニット
とは、通常のヒト血漿１ｍｌ中に存在するＣ₁−ＩＮＨ
の量である（２７０μｇに等しい）。Ｃ₁−阻害剤で処
理した動物は動脈内に２００Ｕ／ｋｇ ｂ．ｗ．を受け
た。

【００２８】表面活性物質 ｒ−ＳＰ−Ｃ表面活性物質（Byk Gulden, Germany)を、
２％組換え表面活性タンパク質Ｃ（ r-SP-Cは、ヒトSP-
C 配列の４および５位で２つのシステインの代わりにフ
ェニルアラニンを有し、および３２位でメチオニンの代
わりにイソロイシンを有するヒトSP-Cと同様のものであ
る）をリン脂質基質中に埋め込んだ。それは、ジパルミ
トイルホスファチジルコリンおよびパルミトイルオレオ
イルホスファチジルグリセロールを７０：３０の割合
で、さらにリン脂質（PL）に関して５％（w/w）のパル
ミチン酸から成る。ｒ−ＳＰ−Ｃ表面活性物質を通常の
生理食塩水を用いて再懸濁し、１ｍｌ当たり２５ｍｇＰ
Ｌの濃度を達成した。表面活性物質を気管内に体重１ｋ
ｇ当たり２５ｍｇＰＬのボーラスとして、動物１個体当
たり１．２ｍｌの量で点滴注入（i.t）した。ｒ−ＳＰ
−Ｃ表面活性物質を０．９％の生理食塩水で希釈し、
１．２ｍｌ当たり全部でＰＬ６．２５ｍｇの必要な濃度
を達成した。

【００２９】実験プロトコール 計測の後、血液ガスおよびＣ₁−ＩＮＨレベルの基準決
定のために血液試料を動脈カテーテルから抜き出した。
ＰａＯ₂値が４８０ｍｍＨｇよりも多い動物のみが実験
に含まれた。吸気圧ピーク（PIP）を２８ｃｍＨ₂Ｏま
で、かつＰＥＥＰを８ｃｍＨ₂Ｏまで上昇させ、等張性
生理食塩水１ｍｌ／３０ｇb.w.を用いて動物を多重に肺
洗浄（６〜８回）をした。代謝性アシドーシスを回避す
るために、グルコース／ＮａＨＣＯ₃溶液（５ｇグルコ
ース−モノヒドレートおよび８．４ｇＮａＨＣＯ₃を
０．９％ＮａＣｌ溶液１００ｍｌ中に溶解した）を洗浄
後にi.p.注射により各々の動物に与えた。実験の間に動
脈のＨＣＯ₃が２０mmol/lを下回って減少する場合にグ
ルコース／ ＮａＨＣＯ₃の投与を繰り返した。最後の洗
浄の５，３０および６０分後にＡＢＬ−５００血液ガス
分析器（Radiometer, Copenhagen, Denmark）を用いて
血液ガスを測定した。洗浄処置後、ＰａＯ₂値５０〜１
１０ｍｍＨｇを有する動物のみが研究に含まれた。

【００３０】４つの実験群および２つの対照群を研究し
た：群１では動物を最後の洗浄の１時間後に屠殺、群２
では最後の洗浄の２１０分後に屠殺し、およびこれらの
動物はいずれの処理も受けなかった。群３ではＣ₁−Ｉ
ＮＨ（200 U/kg b.w.）を最後の洗浄（p.l.）の６０分
後に投与した。群４では動物はｒ−ＳＰ−Ｃ表面活性物
質２５ｍｇ／ｋｇ b.w.を６０min.p.l.で投与された。
群５では動物をＣ₁−ＩＮＨおよびｒ−ＳＰ−Ｃ表面活
性物質を６０min.p.l.で処理した。群６ではＣ₁阻害剤
を１０min.p.l.で投与した。引き続き、血液ガスを最後
の洗浄の１２０、１５０、１８０および２１０分後に測
定した。全体の実験過程の間、ＰＩＰおよびＰＥＥＰを
それぞれ２８ｃｍＨ₂Ｏおよび８ｃｍＨ₂Ｏで一定に維持
した。動物を最後の洗浄処置の２１０分後に屠殺した。

【００３１】肺の製造 肺を注意深く一括して切除し、８％リン酸緩衝液のホル
マリン中で２４時間固定した。続いて全ての裂片の固定
ブロックを切開し、ヘマトキシリンおよびエオシン（H
E）で染色した。ランダム化およびコディフィケーショ
ン（codification）した後、各々の断面を光学顕微鏡で
検査した。肺硝子膜形成を等級に関して変更した以前に
使用した技術（９）により半定量的に評価した。肺硝子
膜形成の重さは、０〜４＋にランクされる（０、肺硝子
膜形成なし：１＋、観察領域あたり低い数（１−３）で
時折領域が示す肺硝子膜形成（最小）；２＋、観察領域
あたり増加した数（＞３）で時折領域が示す肺硝子膜形
成（軽度）；３＋、全ての部分ではないが多くの領域で
示した肺硝子膜形成（中程度）；４＋、検査した全ての
領域中の肺硝子膜形成（重度））。ＰＭＮＬの肺胞間の
蓄積の分配および重さは、肺硝子膜形成の等級に匹敵す
る０〜４＋に半定量的に等級別にしたが、但し炎症性の
細胞数およびこれらの細胞の場所を考慮した。肺胞間お
よび血管周辺の出血疾患の重さは、同様のスケール０〜
４＋を用いて半定量的に等級別にした。

【００３２】試料採取方法およびＣ₁−ＩＮＨ検定 Ｃ₁−ＩＮＨ測定のための血液試料が基線および２１０m
in.pl.で動脈のカテーテルから得られ、３．８％クエン
酸ナトリウムを含有するプラスチック管に装入した。プ
ラズマが１５分間２５００ｇで遠心分離した血液試料か
ら得られた。全ての試料をマイナス７０℃で貯蔵した。
Ｃ₁−阻害剤の活性を過剰のＣ₁エステラーゼおよびＣ₂
Ｈ₅Ｃｏ−Ｌｙｓ（Ｅ−Ｃｂｏ）−Ｇｌｙ−Ａｒｇ−ｐ
Ｎａを基質としてアミド分解法により測定した（Berich
rom C₁-INH、Behring Diagnostics、Marburg、German
y）。この検定で、Ｃ₁−ＩＮＨはＣ₁エステラーゼによ
り色素デンプンの切断を阻害した。試料のＣ₁−ＩＮＨ
活性は、ヒト標準血漿から調整された表示曲線から計算
した。

【００３３】統計値 結果は平均値±標準偏差で示した。研究プロトコールの
間の全体的な変動は、クラスカル・ワーリス（Kruskal-
Wallis ）検定を用いて分析した（ノンパラメトリック
の一元配置分散分析法）。続いて群間の比較はウイルコ
クソン（Wilcoxon）検定を用いて分析し、多重試験のた
めの調整をした。全ての試験はトゥートールド（two−t
alled）であり、およびｐ＜０．５が統計学的に重要で
あると考えられた。

【００３４】結果 酸素化 洗浄処置の後、動脈酸素圧は５３０±１４ｍｍＨｇ（基
準線）〜８４±１０ｍｍＨｇに減少した。対照群の動物
は実験期間の間、動脈中のｐＯ₂は自発的な上昇を示さ
なかった。動脈のｐＯ₂は、群４（r-SP-C表面活性物
質）では４９６±５４ｍｍＨｇまで、および群５（r-SP
-C表面活性物質およびC₁-INH）では４４６±６５ｍｍＨ
ｇまで３０分間でかなり上昇し、屠殺されるまで高く留
まった。Ｃ₁−阻害剤のみで処理した動物のＰａＯ₂値
は、洗浄の６０分後にＣ₁−ＩＮＨを投与される動物の
ＰａＯ₂値よりも高い傾向を有する対照群に匹敵した。
図１は、動脈のｐＯ₂におけるＣ₁−ＩＮＨおよびｒ−Ｓ
Ｐ−Ｃ表面活性材の投与の効果を示している。

【００３５】Ｃ₁−阻害剤 Ｃ₁−阻害剤活性の基準線レベルは、ヒト標準血漿の４
４±１２％であった。Ｃ₁−ＩＮＨ濃度で（群３、５お
よび６）で処理した群では血漿レベルは２１０±４１％
に上昇した。対照群（群１および２）およびｒ−ＳＰ−
Ｃ表面活性物質のみで処理した動物（群４）では、Ｃ₁
−ＩＮＨ活性は３６±１４％に留まった。

【００３６】病理組織学的評価 観察された病理組織学的変化の等級を図２に示した。未
処理の対照群では、最後の洗浄の６０分後に肺の中でゆ
るやかな肺硝子膜形成のみが存在した。肺硝子膜形成の
平均的な重さは、実験の間６０分 p.l.で２．５０から
屠殺時で３．１６まで上昇した。それに加えて、血管内
および肺胞内顆粒球（多形核の中性好性白血球、ＰＭＮ
Ｌの辺縁趨向）の等級、肺胞内出血および浮腫の形成は
同様に時間に依存した上昇を示した。

【００３７】洗浄の２１０分後に、肺硝子膜の形成は群
３（r-SP-C表面活性物質、図２参照）でかなり減少し
た。ｒ−ＳＰ−Ｃ表面活性物質とＣ₁−ＩＮＨの組合せ
（群４）および洗浄の６０分後のＣ₁−ＩＮＨのモノセ
ラピー（monotherapy)（群５）は、肺硝子膜形成の予防
においてｒ−ＳＰ−Ｃ表面活性物質のモノセラピー（mo
notherapy)に匹敵する効果を示した（図２）。洗浄の１
０分後のＣ₁−ＩＮＨの投与（群６）は、肺硝子膜形成
の予防において少ない効果を示した（図２）。ｒ−ＳＰ
−Ｃ表面活性物質の気管内の適用（群３）は、血管内お
よび肺胞内の顆粒球の病理組織学的等級を上昇させた、
というのは肺胞内出血および浮腫が図２に示されている
ように２１０分の対照群（群２）の特殊な平均的重度の
等級に匹敵したからである。ｒ−ＳＰ−Ｃ表面活性物質
のモノセラピー（monotherapy)の後に観察された病理組
織学的変化は、ｒ−ＳＰ−Ｃ表面活性物質がＣ₁−ＩＮ
Ｈと組み合わされた場合には重度ではなかった（図
２）。Ｃ₁−阻害剤のモノセラピー（monotherapy)（群
５および６）は、血管内および肺胞内顆粒球の病理組織
学的等級をかなり減少させた。

【００３８】本発明による組成の研究において、Ｃ₁−
ＩＮＨおよび肺表面活性物質から成るこのモデルでは、
肺表面活性物質またはＣ₁−ＩＮＨの足裏への投与と比
較して酸素化および病理組織学的変化が改善されたこと
が見出された。

【００３９】商業的有用性 成人呼吸促迫症候群（ＡＲＤＳ）は、それが重度のガス
交換疾患（特に動脈低酸素血症）を伴うものであれば、
様々な病因から成る多くの急性、慢性、湿潤性の肺疾患
に適合することを開示された表現である。ＡＲＤＳとい
う表現は、新生児特発性呼吸窮迫症候群（ＩＲＤＳ）と
多くの臨床的および病理学的に特徴のある共通点をもつ
ことから用いられる。また、ＩＲＤＳの場合には、早産
によって引き起こされる肺表面活性物質の欠損が主因で
あり、従ってＡＲＤＳの場合には、様々な病因がもとで
ある肺の状態により、肺表面活性物質の機能不全が生じ
る。

【００４０】ＡＲＤＳを含むＡＬＩ（急性肺障害）の引
き金となる原因は、例えば（citedin accordance with
Harrison's Principles of intrnal Medicine 10th Ed.
1983 McGraw-Hill Int.Book Comp.）び慢性的肺の感染
症（例えば、ウイルス、バクテリア、菌類による）、例
えば胃液または溺れた場合の吸引、毒物または刺激物
（例えば、塩素ガス、窒素酸化物、煙）の吸息、直接的
または間接的外傷（例えば多発性骨折または肺挫傷）、
全身性疾患による肺表面の炎症（例えば、出血性膵炎、
グラム陰性敗血症）、血液の大量の輸注またはその他に
心肺バイパスによる多量の輸血である。

【００４１】本発明による組成物は、早産におけるＩＲ
ＤＳの治療または予防および成人におけるＡＲＤＳを含
むＡＬＩの治療または予防に適切であるだけではなく、
肺炎、気管支炎、胎便吸引症候群、ＣＯＰＤ（慢性閉塞
性肺疾患）、喘息および嚢胞性線維症の治療または予防
のために適切である。

【００４２】本発明による組成物の投与は、当業者に公
知の方法により成し遂げられる。有利には、本発明によ
る組成物を投与に適切な溶剤又は再懸濁溶媒中で溶解ま
たは再懸濁させる。噴霧乾燥または凍結乾燥された組成
物の場合は、特に有利である。有利には生理食塩水を適
切な再懸濁媒体として使用する。懸濁液または溶剤１ｍ
ｌ当たりリン脂質１２．５〜１００ｍｇを含有する本発
明による組成物の懸濁液または溶剤を投与することも有
利である。体重１ｋｇ当たりリン脂質１２．５〜２００
ｍｇを含有する本発明による組成物の懸濁液または溶剤
を投与すること（per single administration）が有利
である。便宜的に組成物を１日当たりに１〜３回、１〜
７日間の間投与した。

【００４３】一定の組合せに関して、製薬学的組成物の
投与は気管内の点滴注射（輸液またはボーラス）または
微粒化の方法により有利に成し遂げられる。

【００４４】自由な組合せに関して、肺表面活性物質の
組成物の投与は気管内の点滴注射（輸液またはボーラ
ス）または微粒化の方法により有利に成し遂げられ、
およびＣ₁−ＩＮＨの組成物投与は注射または輸液によ
り有利に成し遂げられる。別々の投与単位の場合、Ｃ₁
−ＩＮＨおよび肺表面活性物質は直接的に連続してまた
は比較的長い時間間隔をおいて；比較的長い時間間隔と
は最大２４時間までの範囲を意味する。

【００４５】好ましくは、本発明による組成物の投与の
前に気管支肺胞洗浄を、有利には希釈した肺表面活性物
質の懸濁液を用いて実施することができる。そのような
治療は例えばＧｏｍｍｅｒｓ ｅｔ ａｌにより［Bron
choalveolar lavage with adiluted surfactant suspen
sion prior to surfactant instillation improvesthe
effectiveness of surfactant therapy in experimenta
l acute respiratorydistress syndorome(ARDS),intens
ive Care Med.1998,24:494-500]およびＷＯ９８／４９
１９１に記載されている。

【００４６】さらに本発明は、肺炎、気管支炎、胎便吸
引症候群、ＣＯＰＤ（慢性閉塞性肺疾患）、喘息、嚢胞
性線維症、ＩＲＤＳおよび／またはＡＬＩ（ＡＲＤＳを
含む）を患っているヒトを含む、動物の治療方法に関す
る。その方法は、本発明による組成物を治療的に活性で
あり、および製薬学的に効果があり、および許容可能な
量で病気の動物に投与することで特徴づけられる。

【００４７】さらに本発明は、本発明による組成物の肺
炎、気管支炎、胎便吸引症候群、ＣＯＰＤ（慢性閉塞性
肺疾患）、喘息、嚢胞性線維症、ＩＲＤＳおよび／また
はＡＬＩ（ＡＲＤＳを含む）の治療用の医薬品の製造の
ために使用することに関する。

【００４８】本発明のさらなる課題は、慣用の２次的包
装材料と２次的包装材料中に含まれる適切な１次的包装
材料（例えばアンプルまたはバイアル）中の製薬的組成
物とを有し、その際製薬的組成物はＣ_１−ＩＮＨを肺表
面活性物質と組合せた形で、場合により適切な製薬的助
剤（例えば活性物質が粉末状の場合に再懸濁させるため
の生理食塩水）と一緒にした形で有し、かつその際１次
的および／または２次的包装材料は、該製薬的組成物が
肺炎、気管支炎、胎便吸引症候群、ＣＯＰＤ（慢性閉塞
性肺疾患）、喘息、嚢胞性線維症、ＩＲＤＳおよび／又
はＡＬＩ（ＡＲＤＳを含む）の予防又は治療に有効であ
ることを表示しているラベル又は包装添付文書を有する
製品である。この２次的包装材料、１次的包装材料およ
びラベルまたは包装添付文書は、当業者がこの種類の製
薬的組成物のための基準として考慮したものに応じてい
てもよい。

【図面の簡単な説明】

【図１】実験群のＰａＯ₂［平均±SD］の時間経過。Ｃ
_１−ＩＮＨ：２００Ｕ／ｋｇ b.w.でＣ_１−ＩＮＨを動
脈内に適用、ＬＳＦ：２５ｍｇ／ｋｇb.w.で ｒ−ＳＰ
−Ｃ表面活性物質を動脈内に適用。

【図２】肺硝子膜形成の病理組織学的等級、好中球浸
潤、出血および浮腫。データは、病理組織学的評価のコ
ードの後、群当たり全６個体の各々の動物の平均的な重
さの等級を示している。Ｃ_１−ＩＮＨ：２００Ｕ／ｋｇ
b.w.でＣ_１−ＩＮＨを動脈内に適用、ＬＳＦ：２５ｍ
ｇ／ｋｇb.w.でｒ−ＳＰ−Ｃ表面活性物質を動脈内に適
用。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (71)出願人 500092479 アベンティス ベーリング ゲゼルシャフ ト ミット ベシュレンクテル ハフツン グ ドイツ連邦共和国 マールブルク（番地な し) (72)発明者 ディートリッヒ ヘーフナー ドイツ連邦共和国 コンスタンツ ベート ーヴェンシュトラーセ ５ (72)発明者 ブルクハルト ヴァンゲロウ ドイツ連邦共和国 ロンネンベルク ヴァ イツェンカンプ 22 (72)発明者 ホルスト リュッコルト ドイツ連邦共和国 ハノーファー シュヴ ァネンリング 24 (72)発明者 ゲルノット マルクス ドイツ連邦共和国 ハノーファー ヘルツ シュトラーセ ９ (72)発明者 ミヒャエル コバス マイヤー ドイツ連邦共和国 ハノーファー ベルタ フォン ズットナー−プラッツ ２ (72)発明者 マーティン ロイヴァー ドイツ連邦共和国 ヴンストルフ ブライ ヒェンシュトラーセ 81 エフ (72)発明者 パウル−ゲオルク ゲルマン ドイツ連邦共和国 トシュテット ロート ケールヒェンヴェーク 19 (72)発明者 ニルス オット ドイツ連邦共和国 ケルン クリーラーシ ュトラーセ 81 Ｆターム(参考） 4C084 AA02 BA44 BA47 DC50 MA02 ZA592 ZA612

Claims (9)

【特許請求の範囲】
1. 【請求項１】 Ｃ_１−ＩＮＨと肺表面活性物質との組合
   せから成るＩＲＤＳおよびＡＬＩ（ＡＲＤＳを含む）の
   予防又は治療用の製薬的組成物。
2. 【請求項２】 Ｃ_１−ＩＮＨおよび肺表面活性物質が一
   定の組合せの形で存在する、請求項１に記載の製薬的組
   成物。
3. 【請求項３】 肺表面活性物質としてリン脂質の混合物
   を含有する、請求項１に記載の組成物。
4. 【請求項４】 天然の肺表面活性物質中に存在するリン
   脂質を含有する、請求項３に記載の組成物。
5. 【請求項５】 肺表面活性タンパク質を付加的に含有す
   る、請求項３または４に記載の組成物。
6. 【請求項６】 ＳＰ−Ｂおよび／またはＳＰ−Ｃおよび
   ／またはそれらの修飾された誘導体を含有する、請求項
   ５に記載の組成物。
7. 【請求項７】 肺洗浄により得られた肺表面活性物質を
   含有する、請求項１に記載の組成物。
8. 【請求項８】 肺炎、気管支炎、胎便吸引症候群、ＣＯ
   ＰＤ（慢性閉塞性肺疾患）、喘息、嚢胞性線維症、ＩＲ
   ＤＳおよび／またはＡＬＩ（ＡＲＤＳを含む）の治療用
   の医薬品製造のための請求項１に記載の組成物の使用。
9. 【請求項９】 慣用の２次的包装材料と２次的包装材料
   中に含まれる適切な１次的包装材料中の製薬的組成物と
   を有し、その際製薬的組成物はＣ_１−ＩＮＨを肺表面活
   性物質と組合せた形で、場合により適切な製薬的助剤と
   一緒にした形で有し、かつその際１次的および／または
   ２次的包装材料は、該製薬的組成物が肺炎、気管支炎、
   胎便吸引症候群、ＣＯＰＤ（慢性閉塞性肺疾患）、喘
   息、嚢胞性線維症、ＩＲＤＳおよび／又はＡＬＩ（ＡＲ
   ＤＳを含む）の予防又は治療に有効であることを表示し
   ているラベル又は包装添付文書を有する製品。