JP2001046052A - 白色腐朽菌の培養方法ならびに難分解性物質の処理方法および処理剤 - Google Patents
白色腐朽菌の培養方法ならびに難分解性物質の処理方法および処理剤Info
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- JP2001046052A JP2001046052A JP11218496A JP21849699A JP2001046052A JP 2001046052 A JP2001046052 A JP 2001046052A JP 11218496 A JP11218496 A JP 11218496A JP 21849699 A JP21849699 A JP 21849699A JP 2001046052 A JP2001046052 A JP 2001046052A
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Abstract
(57)【要約】
【課題】 古紙を培養基材として用いて、低コストで簡
単に白色腐朽菌を培養し、この白色腐朽菌を用いて難分
解性物質を効率よく分解する。 【解決手段】 難分解性物質分解能を有する白色腐朽菌
を、古紙を培養基材とする培地で培養し、増殖させた白
色腐朽菌と難分解性物質とを接触させて難分解性物質を
分解する。
単に白色腐朽菌を培養し、この白色腐朽菌を用いて難分
解性物質を効率よく分解する。 【解決手段】 難分解性物質分解能を有する白色腐朽菌
を、古紙を培養基材とする培地で培養し、増殖させた白
色腐朽菌と難分解性物質とを接触させて難分解性物質を
分解する。
Description
【０００１】
【発明の属する技術分野】本発明は、難分解性物質分解
能を有する白色腐朽菌の培養方法、ならびに白色腐朽菌
を用いた難分解性物質の処理方法および処理剤に関す
る。
能を有する白色腐朽菌の培養方法、ならびに白色腐朽菌
を用いた難分解性物質の処理方法および処理剤に関す
る。
【０００２】
【従来の技術】わが国では年間３０００万トンの紙・板
紙が生産されており、増加傾向にある。このうち１６０
０万トン強の古紙が回収・リサイクルされており古紙利
用率は平成８年で５３．６％である。近年の自治体の資
源回収の取り組み推進や有料化の実施、住民の環境問題
に対する意識の高まりなどによって、需給バランスが崩
れ、余剰古紙の発生が問題となっている。現在の回収状
況は分別回収が行われていないため、印刷、情報用紙な
どの利用可能な紙も雑誌古紙に入ってしまい、雑誌古紙
の余剰化に拍車をかけている。またすべての古紙が回収
可能なわけではなく、製紙業界の試算によれば回収可能
率は６５％といわれており、現在の回収率は回収可能率
の約８割に達している。平成１２年には容器包装リサイ
クル法が完全施行され、紙の回収は生産量の５６％（約
１６８０万トン）に引き上げられる見通しで、現状では
１００万トン以上の余剰古紙が発生すると予測されてい
る。このような状況において、余剰古紙問題に対応する
製紙以外の新規用途開発は今後ますます重要であり、古
紙を製紙用途以外に再利用する方法が求められている。
紙が生産されており、増加傾向にある。このうち１６０
０万トン強の古紙が回収・リサイクルされており古紙利
用率は平成８年で５３．６％である。近年の自治体の資
源回収の取り組み推進や有料化の実施、住民の環境問題
に対する意識の高まりなどによって、需給バランスが崩
れ、余剰古紙の発生が問題となっている。現在の回収状
況は分別回収が行われていないため、印刷、情報用紙な
どの利用可能な紙も雑誌古紙に入ってしまい、雑誌古紙
の余剰化に拍車をかけている。またすべての古紙が回収
可能なわけではなく、製紙業界の試算によれば回収可能
率は６５％といわれており、現在の回収率は回収可能率
の約８割に達している。平成１２年には容器包装リサイ
クル法が完全施行され、紙の回収は生産量の５６％（約
１６８０万トン）に引き上げられる見通しで、現状では
１００万トン以上の余剰古紙が発生すると予測されてい
る。このような状況において、余剰古紙問題に対応する
製紙以外の新規用途開発は今後ますます重要であり、古
紙を製紙用途以外に再利用する方法が求められている。
【０００３】木材腐朽菌の中でも白色腐朽菌はリグニン
分解能が最も高いことで知られており、セルロース、ヘ
ミセルロースを栄養源として生育し、蓄えたエネルギー
でリグニンを完全に分解し、最終的に二酸化炭素と水に
する性質を有している。白色腐朽菌の中でもPhanerocha
ete chrysosporium（ファネロキーテ クリソスポリウ
ム）およびPhanerochaete sordida（ファネロキーテ
ソルディダ）、ならびに食用として利用されているCori
olus versicolor（コリオラス バージコラー）（カワ
ラタケ）およびPleurotus ostrealus（プロイロータス
オストリアタス）（ヒラタケ）等を用いて難分解性物
質を分解する事例が多く報告されており、高い分解率が
得られている（BIO INDUSTRY, VOL. 14, NO. 10, 199
7）。
分解能が最も高いことで知られており、セルロース、ヘ
ミセルロースを栄養源として生育し、蓄えたエネルギー
でリグニンを完全に分解し、最終的に二酸化炭素と水に
する性質を有している。白色腐朽菌の中でもPhanerocha
ete chrysosporium（ファネロキーテ クリソスポリウ
ム）およびPhanerochaete sordida（ファネロキーテ
ソルディダ）、ならびに食用として利用されているCori
olus versicolor（コリオラス バージコラー）（カワ
ラタケ）およびPleurotus ostrealus（プロイロータス
オストリアタス）（ヒラタケ）等を用いて難分解性物
質を分解する事例が多く報告されており、高い分解率が
得られている（BIO INDUSTRY, VOL. 14, NO. 10, 199
7）。
【０００４】従来の白色腐朽菌の培養は、一般的にカビ
などと同様に、白色腐朽菌の分生子や菌子体の切片をシ
ャーレ等の容器に植えて行われている。またこのように
して培養した新鮮な菌類を液体培地に植菌し、静地培養
が行われている。従来の培養で使用されている培地は、
天然においてリグニンが分解される場合と同じように窒
素源が少ない培地（低窒素培地）が一般的に用いられて
いる。
などと同様に、白色腐朽菌の分生子や菌子体の切片をシ
ャーレ等の容器に植えて行われている。またこのように
して培養した新鮮な菌類を液体培地に植菌し、静地培養
が行われている。従来の培養で使用されている培地は、
天然においてリグニンが分解される場合と同じように窒
素源が少ない培地（低窒素培地）が一般的に用いられて
いる。
【０００５】また白色腐朽菌は、パルプ化プロセスでの
リグニン分解菌として検討されている。いわゆる微生物
を使ってのパルプ化、漂白、排液処理の研究である。バ
イオメカニカルパルプ（ＢＭＰ）化法と呼ばれ、広葉
樹、針葉樹のチップを処理し、パルプ強度を増し、リフ
ァイニングエネルギーを節減できると報告されている。
このような事例から、白色腐朽菌の培養はウッドチップ
を使うことが通例となり、研究されている（紙パ技協
誌、第４７巻第８号、１９９３年８月）。
リグニン分解菌として検討されている。いわゆる微生物
を使ってのパルプ化、漂白、排液処理の研究である。バ
イオメカニカルパルプ（ＢＭＰ）化法と呼ばれ、広葉
樹、針葉樹のチップを処理し、パルプ強度を増し、リフ
ァイニングエネルギーを節減できると報告されている。
このような事例から、白色腐朽菌の培養はウッドチップ
を使うことが通例となり、研究されている（紙パ技協
誌、第４７巻第８号、１９９３年８月）。
【０００６】このような状況において、環境問題に対す
る意識が高まっており、また白色腐朽菌のダイオキシン
の分解作用が報告（BIO INDUSTRY, Vol14, No.19, 5-1
2, 1997）されており、今後白色腐朽菌による難分解性
物質の分解用途ニーズが拡大することが予想されるが、
従来培地として使用されているウッドチップは成型、加
工が必要であり、スラリー化が困難なため使用範囲が狭
くなるなど、使用用途が制限されるという問題点があ
る。またウッドチップ内部への菌糸の侵入に長期間を要
し、菌糸を増殖させるのに数週間、時には数か月間かか
り、特にマツ、スギ、ヒノキ等の針葉樹のウッドチップ
を用いた場合には、材に菌糸成長を阻害する物質が含ま
れているため培養期間が長期化し、場合によっては培養
ができないこともある。
る意識が高まっており、また白色腐朽菌のダイオキシン
の分解作用が報告（BIO INDUSTRY, Vol14, No.19, 5-1
2, 1997）されており、今後白色腐朽菌による難分解性
物質の分解用途ニーズが拡大することが予想されるが、
従来培地として使用されているウッドチップは成型、加
工が必要であり、スラリー化が困難なため使用範囲が狭
くなるなど、使用用途が制限されるという問題点があ
る。またウッドチップ内部への菌糸の侵入に長期間を要
し、菌糸を増殖させるのに数週間、時には数か月間かか
り、特にマツ、スギ、ヒノキ等の針葉樹のウッドチップ
を用いた場合には、材に菌糸成長を阻害する物質が含ま
れているため培養期間が長期化し、場合によっては培養
ができないこともある。
【０００７】近年ゴミ焼却場周辺土壌、不法投棄などに
よる汚染サイト、難分解性物質保管不備による周辺土壌
への汚染等その修復には莫大な設備、工事が要求される
ケースが発生している。これらの難分解性物質の浄化に
は、溶融炉や焼却炉による熱によって分解する処理方法
が検討されている。しかし汚染地に電極を入れ溶融する
以外は汚染地周辺の土壌、廃棄物等汚染源を溶融・焼却
炉まで運搬して処理しなければならず、莫大なコストが
かかる。
よる汚染サイト、難分解性物質保管不備による周辺土壌
への汚染等その修復には莫大な設備、工事が要求される
ケースが発生している。これらの難分解性物質の浄化に
は、溶融炉や焼却炉による熱によって分解する処理方法
が検討されている。しかし汚染地に電極を入れ溶融する
以外は汚染地周辺の土壌、廃棄物等汚染源を溶融・焼却
炉まで運搬して処理しなければならず、莫大なコストが
かかる。
【０００８】また、下水、し尿等生活排水の汚泥処理、
または食品等各種産業排水汚泥の処理において、難脱水
性汚泥の脱水に古紙を使用し、その繊維質を利用して汚
泥の含水率の低減、脱水機操業の安定化などを図る場合
がある。汚泥を有効利用したり廃棄する場合、汚泥中に
環境汚染物質などの難分解性物質が含有されている場
合、そのままでは有効利用したり廃棄することはできな
いので、有効な浄化方法が必要である。
または食品等各種産業排水汚泥の処理において、難脱水
性汚泥の脱水に古紙を使用し、その繊維質を利用して汚
泥の含水率の低減、脱水機操業の安定化などを図る場合
がある。汚泥を有効利用したり廃棄する場合、汚泥中に
環境汚染物質などの難分解性物質が含有されている場
合、そのままでは有効利用したり廃棄することはできな
いので、有効な浄化方法が必要である。
【０００９】ところで、特表平６−５０５６３４号に
は、シュガービート（砂糖大根）パルプを用いて白色腐
朽菌を培養する方法および土壌中の芳香族化合物を分解
する方法が記載されている。しかし、上記方法では、シ
ュガービートパルプは腐敗しやすいので保管にコストが
かかり、またシュガービートパルプは生産地以外では入
手が困難であるので、培養が高コストなものとなるほ
か、都市近郊の汚染土壌の修復への使用は制限される。
は、シュガービート（砂糖大根）パルプを用いて白色腐
朽菌を培養する方法および土壌中の芳香族化合物を分解
する方法が記載されている。しかし、上記方法では、シ
ュガービートパルプは腐敗しやすいので保管にコストが
かかり、またシュガービートパルプは生産地以外では入
手が困難であるので、培養が高コストなものとなるほ
か、都市近郊の汚染土壌の修復への使用は制限される。
【００１０】
【発明が解決しようとする課題】本発明の課題は、古紙
を培養基材として用いて、低コストで簡単に白色腐朽菌
を培養することができる白色腐朽菌の培養方法を提案す
ることである。本発明の他の課題は、古紙および白色腐
朽菌を用いて難分解性物質を効率よく分解することがで
きる難分解性物質の処理方法および処理剤を提供するこ
とである。
を培養基材として用いて、低コストで簡単に白色腐朽菌
を培養することができる白色腐朽菌の培養方法を提案す
ることである。本発明の他の課題は、古紙および白色腐
朽菌を用いて難分解性物質を効率よく分解することがで
きる難分解性物質の処理方法および処理剤を提供するこ
とである。
【００１１】
【課題を解決するための手段】本発明は次の難分解性物
質分解能を有する白色腐朽菌の培養方法、ならびに難分
解性物質の処理方法および処理剤である。 （１） 難分解性物質分解能を有する白色腐朽菌の培養
方法であって、古紙を培養基材とする培地で白色腐朽菌
を培養することを特徴とする白色腐朽菌の培養方法。 （２） 古紙が段ボールである上記（１）記載の培養方
法。 （３） 難分解性物質分解能を有する白色腐朽菌および
古紙の混合物と、難分解性物質とを接触させることを特
徴とする難分解性物質の処理方法。 （４） 白色腐朽菌を含む古紙で、難分解性物質に汚染
された土壌を被覆することを特徴とする上記（３）記載
の処理方法。 （５） 白色腐朽菌を含む古紙を、難分解性物質に汚染
された土壌に混合することを特徴とする上記（３）記載
の処理方法。 （６） 古紙と白色腐朽菌とを含む難分解性物質処理
剤。
質分解能を有する白色腐朽菌の培養方法、ならびに難分
解性物質の処理方法および処理剤である。 （１） 難分解性物質分解能を有する白色腐朽菌の培養
方法であって、古紙を培養基材とする培地で白色腐朽菌
を培養することを特徴とする白色腐朽菌の培養方法。 （２） 古紙が段ボールである上記（１）記載の培養方
法。 （３） 難分解性物質分解能を有する白色腐朽菌および
古紙の混合物と、難分解性物質とを接触させることを特
徴とする難分解性物質の処理方法。 （４） 白色腐朽菌を含む古紙で、難分解性物質に汚染
された土壌を被覆することを特徴とする上記（３）記載
の処理方法。 （５） 白色腐朽菌を含む古紙を、難分解性物質に汚染
された土壌に混合することを特徴とする上記（３）記載
の処理方法。 （６） 古紙と白色腐朽菌とを含む難分解性物質処理
剤。
【００１２】本発明で用いる白色腐朽菌は難分解性物質
を分解することができるものであれば特に限定されな
い。白色腐朽菌の具体的なものとしては、ファネロキー
テ（Phanerochaete）属、プロイロータス（Pleurotus）
属、トラメテス（Trametes）属、コリオラス（Coriolu
s）属、ブジョルカンデラ（Bjerkandera）属などがあげ
られる。これらの中ではファネロキーテ クリソスポリ
ウム（Phanerochaete chrysosporium）、ファネロキー
テ ソルディダ（Phanerochaete sordida）、プロイロ
ータス オストリアタス（Pleurotus ostrealus）、コ
リオラス バージコラー（Coriolus versicolor）など
がダイオキシンなどの難分解性物質分解能が高いことが
報告されており、これらの菌を本発明に使用するのが好
ましい。これらの白色腐朽菌は財団法人発酵研究所、Ａ
ＴＣＣ（American Type Culture Collection）などから
入手可能である。なお、植物防疫上の問題などにより、
日本国内では食用キノコであるPleurotus ostrealus、
またはCoriolus versicolorの使用が最も好ましい。白
色腐朽菌は１種単独で使用することもできるし、２種以
上を組み合せて使用することもできる。
を分解することができるものであれば特に限定されな
い。白色腐朽菌の具体的なものとしては、ファネロキー
テ（Phanerochaete）属、プロイロータス（Pleurotus）
属、トラメテス（Trametes）属、コリオラス（Coriolu
s）属、ブジョルカンデラ（Bjerkandera）属などがあげ
られる。これらの中ではファネロキーテ クリソスポリ
ウム（Phanerochaete chrysosporium）、ファネロキー
テ ソルディダ（Phanerochaete sordida）、プロイロ
ータス オストリアタス（Pleurotus ostrealus）、コ
リオラス バージコラー（Coriolus versicolor）など
がダイオキシンなどの難分解性物質分解能が高いことが
報告されており、これらの菌を本発明に使用するのが好
ましい。これらの白色腐朽菌は財団法人発酵研究所、Ａ
ＴＣＣ（American Type Culture Collection）などから
入手可能である。なお、植物防疫上の問題などにより、
日本国内では食用キノコであるPleurotus ostrealus、
またはCoriolus versicolorの使用が最も好ましい。白
色腐朽菌は１種単独で使用することもできるし、２種以
上を組み合せて使用することもできる。
【００１３】前記難分解性物質（persistent organic p
ollutants：POPs）としては難分解性の環境汚染物質が
代表的なものであり、具体的にはＰＣＢ（ポリ塩化ビフ
ェニル）、ＤＤＴ（ｐ，ｐ’−ジクロロジフェニルトリ
クロロエタン）、ダイオキシン類、クロルデン、ベンゼ
ンヘキサクロリド、クロロベンゼン類、２，４−ジクロ
ロフェノール、トリクロロフェノール、ペンタクロロフ
ェノール、２，４−ジクロロフェノキシ酢酸、２，４，
５−トリクロロフェノキシ酢酸、エンドサルファン、ア
ラクロール、ジベンゾパラジオキシン、２，７−ジクロ
ロジベンゾパラジオキシン、２，４−ジニトロトルエ
ン、２，４，６−トリニトロトルエン、四塩化炭素、ク
ロロアニリン、ディルドリン、フェナントレン、ベンゾ
ピレン、ベンゼン、トルエン、エチルベンゼン、キシレ
ン、アントラセン、アゾ色素、アトラジン、クリスタル
バイオレット、その他の単環または多環芳香族炭化水
素、樹脂および未知の化合物などがあげられる。これら
の難分解性物質は、白色腐朽菌が生産する菌体外酵素で
ある芳香族化合物分解酵素の働きにより分解されるもの
と推測される。
ollutants：POPs）としては難分解性の環境汚染物質が
代表的なものであり、具体的にはＰＣＢ（ポリ塩化ビフ
ェニル）、ＤＤＴ（ｐ，ｐ’−ジクロロジフェニルトリ
クロロエタン）、ダイオキシン類、クロルデン、ベンゼ
ンヘキサクロリド、クロロベンゼン類、２，４−ジクロ
ロフェノール、トリクロロフェノール、ペンタクロロフ
ェノール、２，４−ジクロロフェノキシ酢酸、２，４，
５−トリクロロフェノキシ酢酸、エンドサルファン、ア
ラクロール、ジベンゾパラジオキシン、２，７−ジクロ
ロジベンゾパラジオキシン、２，４−ジニトロトルエ
ン、２，４，６−トリニトロトルエン、四塩化炭素、ク
ロロアニリン、ディルドリン、フェナントレン、ベンゾ
ピレン、ベンゼン、トルエン、エチルベンゼン、キシレ
ン、アントラセン、アゾ色素、アトラジン、クリスタル
バイオレット、その他の単環または多環芳香族炭化水
素、樹脂および未知の化合物などがあげられる。これら
の難分解性物質は、白色腐朽菌が生産する菌体外酵素で
ある芳香族化合物分解酵素の働きにより分解されるもの
と推測される。
【００１４】本発明で培養基材として用いる古紙は特に
限定されず、使用済みの紙または板紙、および紙または
板紙の裁断くずなどが使用できる。古紙の具体的なもの
としては、新聞紙、ＯＡ用紙、雑誌、チラシ、段ボール
およびこれらの混合物などがあげられる。これらの中で
は短繊維を多く含むので段ボールが好ましい。古紙の大
きさ、破砕状態、セルロース含有量、ヘミセルロース含
有量、リグニン含有量、含水率、複数の種類の古紙を用
いる場合の配合割合など、紙の物理的化学的状態は特に
制限されない。
限定されず、使用済みの紙または板紙、および紙または
板紙の裁断くずなどが使用できる。古紙の具体的なもの
としては、新聞紙、ＯＡ用紙、雑誌、チラシ、段ボール
およびこれらの混合物などがあげられる。これらの中で
は短繊維を多く含むので段ボールが好ましい。古紙の大
きさ、破砕状態、セルロース含有量、ヘミセルロース含
有量、リグニン含有量、含水率、複数の種類の古紙を用
いる場合の配合割合など、紙の物理的化学的状態は特に
制限されない。
【００１５】例えば、回収古紙をそのまま使用すること
もできるし、雑誌等の背糊をカットして２ｃｍ程度に破
砕したもの（すなわち一次破砕したもの）、５ｍｍ程度
に破砕したもの（すなわち二次破砕したもの）、解繊機
にかけて繊維状まで解繊したものなど、いずれのもので
も使用することができる。またこれらを任意の割合で混
合して使用することもできる。このため回収古紙の種
類、粉砕状態などに関係なく、回収古紙を用いて培養す
ることができる。また紙の種類によっては、インクや填
料などの阻害剤が含まれている場合もあるが、そのまま
使用することができ、この場合阻害の程度により菌の増
殖速度が低下するが、時間の経過とともに増殖速度は増
加する。
もできるし、雑誌等の背糊をカットして２ｃｍ程度に破
砕したもの（すなわち一次破砕したもの）、５ｍｍ程度
に破砕したもの（すなわち二次破砕したもの）、解繊機
にかけて繊維状まで解繊したものなど、いずれのもので
も使用することができる。またこれらを任意の割合で混
合して使用することもできる。このため回収古紙の種
類、粉砕状態などに関係なく、回収古紙を用いて培養す
ることができる。また紙の種類によっては、インクや填
料などの阻害剤が含まれている場合もあるが、そのまま
使用することができ、この場合阻害の程度により菌の増
殖速度が低下するが、時間の経過とともに増殖速度は増
加する。
【００１６】本発明において白色腐朽菌を培養する培地
は古紙および水だけでよいが、古紙として新聞、雑誌お
よびチラシ等の印刷物古紙やＯＡ用紙等を用いる場合、
インク等の菌体成長阻害剤が含まれているため、炭素原
子／窒素原子比が１６０〜１０、好ましくは１００〜５
０となるように窒素を添加するのが望ましい。添加する
窒素源としては、硝酸アンモニウム、酒石酸アンモニウ
ム、酵母抽出物、麦芽抽出物などがあげられる。
は古紙および水だけでよいが、古紙として新聞、雑誌お
よびチラシ等の印刷物古紙やＯＡ用紙等を用いる場合、
インク等の菌体成長阻害剤が含まれているため、炭素原
子／窒素原子比が１６０〜１０、好ましくは１００〜５
０となるように窒素を添加するのが望ましい。添加する
窒素源としては、硝酸アンモニウム、酒石酸アンモニウ
ム、酵母抽出物、麦芽抽出物などがあげられる。
【００１７】本発明の培養方法では、古紙を含む上記培
地に白色腐朽菌を植菌し、白色腐朽菌の増殖に適した条
件に維持することにより培養することができる。培養条
件は、温度が１５〜３５℃、好ましくは２０〜３０℃、
時間が７〜３０日、好ましくは７〜２１日、培地（古
紙）含水率が５０〜８５重量％、好ましくは６０〜６５
重量％、ｐＨが３〜７、好ましくは４〜５とするのが望
ましい。含水率の調整には殺菌水を使用するのが好まし
い。また子実体形成を抑制して菌糸を成長させるために
光照射を行わず、培養温度を一定に保つことが好まし
い。また培地の含水率の低下、栄養物質の減少により子
実体形成が開始される可能性があるため、３〜６日に一
回程度水分および／または窒素源となる物質を添加し、
子実体形成を防止するのが好ましい。
地に白色腐朽菌を植菌し、白色腐朽菌の増殖に適した条
件に維持することにより培養することができる。培養条
件は、温度が１５〜３５℃、好ましくは２０〜３０℃、
時間が７〜３０日、好ましくは７〜２１日、培地（古
紙）含水率が５０〜８５重量％、好ましくは６０〜６５
重量％、ｐＨが３〜７、好ましくは４〜５とするのが望
ましい。含水率の調整には殺菌水を使用するのが好まし
い。また子実体形成を抑制して菌糸を成長させるために
光照射を行わず、培養温度を一定に保つことが好まし
い。また培地の含水率の低下、栄養物質の減少により子
実体形成が開始される可能性があるため、３〜６日に一
回程度水分および／または窒素源となる物質を添加し、
子実体形成を防止するのが好ましい。
【００１８】本発明の難分解性物質の処理方法は、難分
解性物質分解能を有する前記白色腐朽菌および古紙の混
合物と、難分解性物質とを接触させて難分解性物質を分
解する難分解性物質の処理方法である。上記白色腐朽菌
および古紙の混合物は、前記培養方法で培養した培養物
であってもよいし、培養する前のものであってもよい。
培養物を使用する場合は、白色腐朽菌は既に増殖してい
るので、難分解性物質の分解は速い。一方培養前の混合
物を使用する場合は、白色腐朽菌が増殖するまでの時間
が必要であるが、増殖後は培養物を用いた場合と同様に
分解が進行する。
解性物質分解能を有する前記白色腐朽菌および古紙の混
合物と、難分解性物質とを接触させて難分解性物質を分
解する難分解性物質の処理方法である。上記白色腐朽菌
および古紙の混合物は、前記培養方法で培養した培養物
であってもよいし、培養する前のものであってもよい。
培養物を使用する場合は、白色腐朽菌は既に増殖してい
るので、難分解性物質の分解は速い。一方培養前の混合
物を使用する場合は、白色腐朽菌が増殖するまでの時間
が必要であるが、増殖後は培養物を用いた場合と同様に
分解が進行する。
【００１９】培養物を使用する場合、培養物をそのまま
使用することもできるし、スラリー状にしたものを使用
することもできる。例えば、白色腐朽菌を培養した古紙
をそのまま使用することができる。
使用することもできるし、スラリー状にしたものを使用
することもできる。例えば、白色腐朽菌を培養した古紙
をそのまま使用することができる。
【００２０】本発明の処理方法の対象となる被処理物と
しては、難分解性物質に汚染されている土壌、汚泥、廃
棄物、および最終処分場や各産業上発生する排水等があ
げられる。これらの被処理物中には難分解性物質が２種
以上含まれていてもよいし、また未知の難分解性物質が
含まれていてもよい。接触方法は特に限定されず、白色
腐朽菌を含む古紙を被処理物と混合する方法、白色腐朽
菌を含む古紙で被処理物を被覆する方法、白色腐朽菌を
培養した古紙塊を排水ろ過体として使用し、このろ過体
に難分解性物質含有水を通水する方法などがあげられ
る。
しては、難分解性物質に汚染されている土壌、汚泥、廃
棄物、および最終処分場や各産業上発生する排水等があ
げられる。これらの被処理物中には難分解性物質が２種
以上含まれていてもよいし、また未知の難分解性物質が
含まれていてもよい。接触方法は特に限定されず、白色
腐朽菌を含む古紙を被処理物と混合する方法、白色腐朽
菌を含む古紙で被処理物を被覆する方法、白色腐朽菌を
培養した古紙塊を排水ろ過体として使用し、このろ過体
に難分解性物質含有水を通水する方法などがあげられ
る。
【００２１】具体的には、白色腐朽菌を含む古紙を土壌
と混合する方法、白色腐朽菌を含む古紙で土壌を被覆す
る方法、白色腐朽菌を含む古紙を難分解性物質含有汚泥
に混合する方法、白色腐朽菌を含む古紙を難分解性物質
含有水に混合する方法などがあげられる。このようにし
て白色腐朽菌および古紙の混合物と、難分解性物質とを
接触させることにより、時間の経過とともに、白色腐朽
菌により難分解性物質が分解される。
と混合する方法、白色腐朽菌を含む古紙で土壌を被覆す
る方法、白色腐朽菌を含む古紙を難分解性物質含有汚泥
に混合する方法、白色腐朽菌を含む古紙を難分解性物質
含有水に混合する方法などがあげられる。このようにし
て白色腐朽菌および古紙の混合物と、難分解性物質とを
接触させることにより、時間の経過とともに、白色腐朽
菌により難分解性物質が分解される。
【００２２】本発明の処理方法において、白色腐朽菌を
含む古紙で汚染土壌を被覆する場合は、難分解性物質の
分解とともに汚染土壌の飛散を防止することもできる。
また処分場浸出水の排水処理工程において、排水に対し
て本発明の処理方法を適用することにより、難分解性物
質が分解可能となり、排水処理設備の負荷軽減になる。
含む古紙で汚染土壌を被覆する場合は、難分解性物質の
分解とともに汚染土壌の飛散を防止することもできる。
また処分場浸出水の排水処理工程において、排水に対し
て本発明の処理方法を適用することにより、難分解性物
質が分解可能となり、排水処理設備の負荷軽減になる。
【００２３】本発明の処理方法によれば、汚染が発生し
ている地点で難分解性物質を分解することができるの
で、低コストでの処理が可能である。例えば、汚染土壌
を浄化する場合には汚染土壌を別の場所に運搬すること
なく、汚染が発生している地点の土壌に白色腐朽菌を含
む古紙を混合するかまたは被覆することにより汚染物質
（難分解性物質）を分解することができるので、低コス
トで浄化することができる。
ている地点で難分解性物質を分解することができるの
で、低コストでの処理が可能である。例えば、汚染土壌
を浄化する場合には汚染土壌を別の場所に運搬すること
なく、汚染が発生している地点の土壌に白色腐朽菌を含
む古紙を混合するかまたは被覆することにより汚染物質
（難分解性物質）を分解することができるので、低コス
トで浄化することができる。
【００２４】本発明の難分解性物質処理剤は、古紙と白
色腐朽菌とを含む処理剤であり、前記の難分解性物質の
処理方法に使用される処理剤である。本発明の難分解性
物質処理剤を難分解性物質を含む汚泥の処理に使用する
場合は、脱水肋剤としても機能するので、脱水および難
分解性物質の分解の両方を効率よく行うことができる。
色腐朽菌とを含む処理剤であり、前記の難分解性物質の
処理方法に使用される処理剤である。本発明の難分解性
物質処理剤を難分解性物質を含む汚泥の処理に使用する
場合は、脱水肋剤としても機能するので、脱水および難
分解性物質の分解の両方を効率よく行うことができる。
【００２５】本発明の培養方法で、Coriolus versicolo
r（コリオラス バージコラー）（カワラタケ）およびP
leurotus ostrealus（プロイロータス オストリアタ
ス）（ヒラタケ）等のキノコを培養した場合、これらの
キノコは食用にすることもできる。従って、本発明の培
養方法は、食用キノコの栽培やキノコ種菌の生産にも利
用することができる。また、古紙に他の栄養素を添加す
ることにより、リグニン分解能を持たない菌類（＝担子
菌以外。例えばペニシリンを生産する不完全菌や子嚢菌
など）の培養にも利用することができる。
r（コリオラス バージコラー）（カワラタケ）およびP
leurotus ostrealus（プロイロータス オストリアタ
ス）（ヒラタケ）等のキノコを培養した場合、これらの
キノコは食用にすることもできる。従って、本発明の培
養方法は、食用キノコの栽培やキノコ種菌の生産にも利
用することができる。また、古紙に他の栄養素を添加す
ることにより、リグニン分解能を持たない菌類（＝担子
菌以外。例えばペニシリンを生産する不完全菌や子嚢菌
など）の培養にも利用することができる。
【００２６】本発明の培養方法は古紙を培養基材として
利用することができるので、回収古紙を製紙利用以外の
用途に使用することができ、余剰古紙問題の解決策の一
助となる。また古紙は都市部で多量に発生するので、古
紙を輸送する点において、都市または都市近郊の汚染土
壌の浄化を低コストで行うことができる。すなわち、本
発明の培養方法は、培養に特別な施設は必要なく、一般
的な古紙加工設備において容易に培養することができる
ので、古紙が多量に発生する都市部またはその近郊にお
いて培養を行うことができ、このため古紙の運搬費を削
減して低コストで培養することができ、しかもこの培養
物を使用することにより都市部または都市近郊の汚染土
壌を低コストで浄化することができる。
利用することができるので、回収古紙を製紙利用以外の
用途に使用することができ、余剰古紙問題の解決策の一
助となる。また古紙は都市部で多量に発生するので、古
紙を輸送する点において、都市または都市近郊の汚染土
壌の浄化を低コストで行うことができる。すなわち、本
発明の培養方法は、培養に特別な施設は必要なく、一般
的な古紙加工設備において容易に培養することができる
ので、古紙が多量に発生する都市部またはその近郊にお
いて培養を行うことができ、このため古紙の運搬費を削
減して低コストで培養することができ、しかもこの培養
物を使用することにより都市部または都市近郊の汚染土
壌を低コストで浄化することができる。
【００２７】また、本発明の培養方法に従って培養した
菌糸塊から難分解性物質（リグニン含む）の分解酵素を
公知の方法により単離することにより、この酵素を有害
汚染物質の分解や、パルプの漂白などに利用することも
できる。
菌糸塊から難分解性物質（リグニン含む）の分解酵素を
公知の方法により単離することにより、この酵素を有害
汚染物質の分解や、パルプの漂白などに利用することも
できる。
【００２８】
【発明の効果】本発明の白色腐朽菌の培養方法は、古紙
を培養基材として用いて、低コストで簡単に難分解性物
質分解能を有する白色腐朽菌を培養することができる。
を培養基材として用いて、低コストで簡単に難分解性物
質分解能を有する白色腐朽菌を培養することができる。
【００２９】本発明の難分解性物質の処理方法は、難分
解性物質分解能を有する白色腐朽菌および古紙の混合物
と、難分解性物質とを接触させているので、回収古紙を
再利用して難分解性物質を低コストで効率よく分解する
ことができる。本発明の難分解性物質処理剤は、古紙と
難分解性物質分解能を有する白色腐朽菌とを含んでいる
ので、回収古紙を再利用して難分解性物質を低コストで
効率よく分解することができる。
解性物質分解能を有する白色腐朽菌および古紙の混合物
と、難分解性物質とを接触させているので、回収古紙を
再利用して難分解性物質を低コストで効率よく分解する
ことができる。本発明の難分解性物質処理剤は、古紙と
難分解性物質分解能を有する白色腐朽菌とを含んでいる
ので、回収古紙を再利用して難分解性物質を低コストで
効率よく分解することができる。
【００３０】
【発明の実施の形態】次に本発明の実施例について説明
する。使用した菌および培地は次の通りである。
する。使用した菌および培地は次の通りである。
【００３１】《Phanerochaete chrysosporium》 財団法人発酵研究所より入手 《Phanerochaete sordida YK-624》 ＡＴＣＣより入手（ＡＴＣＣ ９０８７２）
【００３２】《Ｋｉｒｋ培地》 ●Ｋｉｒｋ液体培地（１ liter） ｐＨ４．５ １０ｇ ：グルコース（炭素源） ０．２２１ｇ：酒石酸アンモニウム（窒素源） １ｇ ：Ｔｗｅｅｎ８０（界面活性剤） １．６４ｇ ：酢酸ナトリウム（ｐＨ緩衝剤）または
２．９２ｇの２，２−ジメチルコハク酸 １００ｍｌ ：下記Ｋｉｒｋ ｓａｌｔ ｓｏｌｕｔｉ
ｏｎ（多量無機成分） ６０ｍｌ ：下記Ｋｉｒｋ ｔｒａｃｅ ｅｌｅｍｅ
ｎｔ ｓｏｌｕｔｉｏｎ（微量無機成分） ●Ｋｉｒｋ ｓａｌｔ ｓｏｌｕｔｉｏｎ（１ liter）
ｐＨ４．５ ２０ｇ ：ＫＨ2ＰＯ4 ５ｇ ：ＭｇＳＯ4・７Ｈ2Ｏ １．３ｇ ：ＣａＣｌ2・２Ｈ2Ｏ １０ｍｇ ：チアミン塩酸塩 １６．７ｍｌ：Ｋｉｒｋ ｔｒａｃｅ ｅｌｅｍｅｎｔ
ｓｏｌｕｔｉｏｎ ●Ｋｉｒｋ ｔｒａｃｅ ｅｌｅｍｅｎｔ ｓｏｌｕｔ
ｉｏｎ（１ liter） ｐＨ４．５ ９ｇ ：ニトリロ三酢酸 ３ｇ ：ＭｇＳＯ4・７Ｈ2Ｏ ２．７３ｇ ：ＭｎＳＯ4 ６ｇ ：ＮａＣｌ ０．６ｇ ：ＦｅＳＯ4・７Ｈ2Ｏ １．１ｇ ：ＣｏＳＯ4・７Ｈ2Ｏ ０．６ｇ ：ＣａＣｌ2・２Ｈ2Ｏ １．１ｇ ：ＺｎＳＯ4・７Ｈ2Ｏ ６０ｍｇ ：ＣｕＳＯ4・７Ｈ2Ｏ １１０ｍｇ ：ＡｌＫ（ＳＯ4）2・１２Ｈ2Ｏ ６０ｍｇ ：Ｈ3ＢＯ3 ７０ｍｇ ：Ｎａ2ＭｏＯ4・２Ｈ2Ｏ
２．９２ｇの２，２−ジメチルコハク酸 １００ｍｌ ：下記Ｋｉｒｋ ｓａｌｔ ｓｏｌｕｔｉ
ｏｎ（多量無機成分） ６０ｍｌ ：下記Ｋｉｒｋ ｔｒａｃｅ ｅｌｅｍｅ
ｎｔ ｓｏｌｕｔｉｏｎ（微量無機成分） ●Ｋｉｒｋ ｓａｌｔ ｓｏｌｕｔｉｏｎ（１ liter）
ｐＨ４．５ ２０ｇ ：ＫＨ2ＰＯ4 ５ｇ ：ＭｇＳＯ4・７Ｈ2Ｏ １．３ｇ ：ＣａＣｌ2・２Ｈ2Ｏ １０ｍｇ ：チアミン塩酸塩 １６．７ｍｌ：Ｋｉｒｋ ｔｒａｃｅ ｅｌｅｍｅｎｔ
ｓｏｌｕｔｉｏｎ ●Ｋｉｒｋ ｔｒａｃｅ ｅｌｅｍｅｎｔ ｓｏｌｕｔ
ｉｏｎ（１ liter） ｐＨ４．５ ９ｇ ：ニトリロ三酢酸 ３ｇ ：ＭｇＳＯ4・７Ｈ2Ｏ ２．７３ｇ ：ＭｎＳＯ4 ６ｇ ：ＮａＣｌ ０．６ｇ ：ＦｅＳＯ4・７Ｈ2Ｏ １．１ｇ ：ＣｏＳＯ4・７Ｈ2Ｏ ０．６ｇ ：ＣａＣｌ2・２Ｈ2Ｏ １．１ｇ ：ＺｎＳＯ4・７Ｈ2Ｏ ６０ｍｇ ：ＣｕＳＯ4・７Ｈ2Ｏ １１０ｍｇ ：ＡｌＫ（ＳＯ4）2・１２Ｈ2Ｏ ６０ｍｇ ：Ｈ3ＢＯ3 ７０ｍｇ ：Ｎａ2ＭｏＯ4・２Ｈ2Ｏ
【００３３】《ＰＤＡ培地》 ポテト抽出物：２００ｇ／ｌ グルコース ：２０ｇ／ｌ 寒天 ：１５ｇ／ｌ 《ＰＤＢ培地》 ポテト抽出物：２００ｇ／ｌ グルコース ：２０ｇ／ｌ 《ＰＤ液体培地》 ＰＤＢ培地 ：２４ｇ／ｌ Ｔｗｅｅｎ８０：０．１重量％
【００３４】実施例１ 古紙を培養基材として用いて、白色腐朽菌の培養を行っ
た。白色腐朽菌としては、Phanerochaete chrysosporiu
mまたはPhanerochaete sordida YK-624を使用した。培
養基材となる古紙としては、新聞紙、ＯＡ用紙（コピー
用紙）、チラシまたは段ボールを使用し、これらの古紙
に水、Ｋｉｒｋ培地またはＰＤＢ培地を添加したものを
培地として使用した。各白色腐朽菌は、まずＰＤＡ培地
にて前培養し、さらにＰＤＢ培地で１０日間前培養した
後、下記の培養に供した。
た。白色腐朽菌としては、Phanerochaete chrysosporiu
mまたはPhanerochaete sordida YK-624を使用した。培
養基材となる古紙としては、新聞紙、ＯＡ用紙（コピー
用紙）、チラシまたは段ボールを使用し、これらの古紙
に水、Ｋｉｒｋ培地またはＰＤＢ培地を添加したものを
培地として使用した。各白色腐朽菌は、まずＰＤＡ培地
にて前培養し、さらにＰＤＢ培地で１０日間前培養した
後、下記の培養に供した。
【００３５】２００ｍｌ三角フラスコを複数用意し、各
フラスコに新聞紙、ＯＡ用紙、チラシまたは段ボールを
入れた。古紙の使用量は新聞紙、ＯＡ用紙およびチラシ
は２．６３ｇ（絶乾重量２．５ｇ）、段ボールは３．０
９ｇ（絶乾重量３．０ｇ）とした。次に、各フラスコに
Ｋｉｒｋ培地、ＰＤＢ培地または純水を５ｍｌ加えた。
このフラスコをオートクレーブを用いて殺菌した。
フラスコに新聞紙、ＯＡ用紙、チラシまたは段ボールを
入れた。古紙の使用量は新聞紙、ＯＡ用紙およびチラシ
は２．６３ｇ（絶乾重量２．５ｇ）、段ボールは３．０
９ｇ（絶乾重量３．０ｇ）とした。次に、各フラスコに
Ｋｉｒｋ培地、ＰＤＢ培地または純水を５ｍｌ加えた。
このフラスコをオートクレーブを用いて殺菌した。
【００３６】前記の前培養した菌体を滅菌水で洗浄し、
ミキサーにて懸濁液とし、これをガラス繊維ろ紙に１ｍ
ｌとり、乾燥させて、菌体濃度を測定した。この菌体懸
濁液を、菌体重量対古紙３重量％になるように、前記オ
ートクレーブで殺菌した培地に添加し、３０℃で２０日
間培養した。
ミキサーにて懸濁液とし、これをガラス繊維ろ紙に１ｍ
ｌとり、乾燥させて、菌体濃度を測定した。この菌体懸
濁液を、菌体重量対古紙３重量％になるように、前記オ
ートクレーブで殺菌した培地に添加し、３０℃で２０日
間培養した。
【００３７】目視による観察では、菌株の種類により菌
糸成長に違いが見られた。菌糸の成長の目安として、古
紙の重量減少率を測定した。Phanerochaete chrysospor
iumの結果を図１、Phanerochaete sordida YK-624の結
果を図２に示す。図１の結果からわかるように、Phaner
ochaete chrysosporiumではいずれの古紙培地において
も重量減少が認められた。４種類の古紙の中では段ボー
ルを培養基材とした場合の成長が最も良好であった。図
２の結果からわかるように、Phanerochaete sordida YK
-624では「新聞紙＋ＰＤＢ培地」の培地、「チラシ＋Ｋ
ｉｒｋ培地」の培地で重量が増加したが、それ以外の培
地では重量減少が認められた。新聞およびチラシで重量
が増加したものは、インクや填料などが阻害物質として
作用していると推測される。
糸成長に違いが見られた。菌糸の成長の目安として、古
紙の重量減少率を測定した。Phanerochaete chrysospor
iumの結果を図１、Phanerochaete sordida YK-624の結
果を図２に示す。図１の結果からわかるように、Phaner
ochaete chrysosporiumではいずれの古紙培地において
も重量減少が認められた。４種類の古紙の中では段ボー
ルを培養基材とした場合の成長が最も良好であった。図
２の結果からわかるように、Phanerochaete sordida YK
-624では「新聞紙＋ＰＤＢ培地」の培地、「チラシ＋Ｋ
ｉｒｋ培地」の培地で重量が増加したが、それ以外の培
地では重量減少が認められた。新聞およびチラシで重量
が増加したものは、インクや填料などが阻害物質として
作用していると推測される。
【００３８】実施例２ 《ダイオキシンの分解処理》古紙を用いて培養した白色
腐朽菌を用いてダイオキシンの分解を行った。白色腐朽
菌としては、Phanerochaete chrysosporiumを使用し
た。培養基材となる古紙としては、新聞紙、ＯＡ用紙
（コピー用紙）、チラシまたは段ボールを使用し、これ
らの古紙にＰＤＢ培地を添加したものを培地として使用
した。白色腐朽菌は、ＰＤＢ培地で５日間前培養した
後、下記の試験に供した。
腐朽菌を用いてダイオキシンの分解を行った。白色腐朽
菌としては、Phanerochaete chrysosporiumを使用し
た。培養基材となる古紙としては、新聞紙、ＯＡ用紙
（コピー用紙）、チラシまたは段ボールを使用し、これ
らの古紙にＰＤＢ培地を添加したものを培地として使用
した。白色腐朽菌は、ＰＤＢ培地で５日間前培養した
後、下記の試験に供した。
【００３９】２００ｍｌ三角フラスコを複数用意し、各
フラスコに新聞紙、ＯＡ用紙、チラシまたは段ボールを
入れた。古紙の使用量は新聞紙、ＯＡ用紙およびチラシ
は２．６３ｇ（絶乾重量２．５ｇ）、段ボールは３．０
９ｇ（絶乾重量３．０ｇ）とした。次に、各フラスコに
ＰＤＢ培地を５ｍｌ加え、オートクレーブを用いて１２
１℃で２０分間殺菌した。
フラスコに新聞紙、ＯＡ用紙、チラシまたは段ボールを
入れた。古紙の使用量は新聞紙、ＯＡ用紙およびチラシ
は２．６３ｇ（絶乾重量２．５ｇ）、段ボールは３．０
９ｇ（絶乾重量３．０ｇ）とした。次に、各フラスコに
ＰＤＢ培地を５ｍｌ加え、オートクレーブを用いて１２
１℃で２０分間殺菌した。
【００４０】この培地に菌体重量対古紙３重量％となる
ように、前記の前培養したPhanerochaete chrysosporiu
mの菌体懸濁液を添加し、３０℃で１０日間培養した。
培養後、ＤＭＦ（Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド）に１
ｍＭの濃度で溶解した２，７−ＤＣＤＤ（２，７−ジク
ロロジベンゾ−ｐ−ジオキシン）溶液を各フラスコに５
００μｌ添加し、３０℃で７日間処理した。なお、前培
養した菌体を１２０℃で５分間オートクレーブにより加
熱処理して用いたものをコントロールとした。
ように、前記の前培養したPhanerochaete chrysosporiu
mの菌体懸濁液を添加し、３０℃で１０日間培養した。
培養後、ＤＭＦ（Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド）に１
ｍＭの濃度で溶解した２，７−ＤＣＤＤ（２，７−ジク
ロロジベンゾ−ｐ−ジオキシン）溶液を各フラスコに５
００μｌ添加し、３０℃で７日間処理した。なお、前培
養した菌体を１２０℃で５分間オートクレーブにより加
熱処理して用いたものをコントロールとした。
【００４１】反応は、ｎ−ヘキサンを６０ｍｌ加えて一
晩放置することにより停止し、２および３回目３０ｍ
ｌ、４回目２０ｍｌのｎ−ヘキサンで抽出した。抽出の
際、ｎ−ヘキサンを加える度にウルトラソニックで超音
波抽出を２０分間ずつ行った。エバポレーターで約１ｍ
ｌまで濃縮後、パスツールピペットに高さ３ｃｍとなる
ようにシリカゲルを充填し、溶離液にｎ−ヘキサンを用
いて３０ｍｌで溶出し、精製した。
晩放置することにより停止し、２および３回目３０ｍ
ｌ、４回目２０ｍｌのｎ−ヘキサンで抽出した。抽出の
際、ｎ−ヘキサンを加える度にウルトラソニックで超音
波抽出を２０分間ずつ行った。エバポレーターで約１ｍ
ｌまで濃縮後、パスツールピペットに高さ３ｃｍとなる
ようにシリカゲルを充填し、溶離液にｎ−ヘキサンを用
いて３０ｍｌで溶出し、精製した。
【００４２】内部標準物質として１２５０μＭのアント
ラセン（ＤＭＦ溶液）を５０μｌ添加し、約１ｍｌまで
濃縮した後、下記分析条件でＧＣ／ＭＳで分析し、２，
７−ＤＣＤＤの減少率を算出した。結果を図３に示す。 カラム：GL Sciencces社製NEUTRA BOND-5 30×0.25mm
i.d. 0.4μm film thichness 温度条件：１６０℃で２分間維持した後、２０℃／分の
温度上昇割合で２５０℃まで昇温し、次に２５℃／分の
温度上昇割合で３２０℃まで昇温し、３２０℃に達した
ところでこの温度を１分間維持した。
ラセン（ＤＭＦ溶液）を５０μｌ添加し、約１ｍｌまで
濃縮した後、下記分析条件でＧＣ／ＭＳで分析し、２，
７−ＤＣＤＤの減少率を算出した。結果を図３に示す。 カラム：GL Sciencces社製NEUTRA BOND-5 30×0.25mm
i.d. 0.4μm film thichness 温度条件：１６０℃で２分間維持した後、２０℃／分の
温度上昇割合で２５０℃まで昇温し、次に２５℃／分の
温度上昇割合で３２０℃まで昇温し、３２０℃に達した
ところでこの温度を１分間維持した。
【００４３】図３の結果から、チラシまたは段ボールで
培養したPhanerochaete chrysosporiumを２，７−ＤＣ
ＤＤと接触させることにより、２，７−ＤＣＤＤが分解
したことがわかる。
培養したPhanerochaete chrysosporiumを２，７−ＤＣ
ＤＤと接触させることにより、２，７−ＤＣＤＤが分解
したことがわかる。
【００４４】実施例３ 《ダイオキシンの分解処理》古紙を用いて培養した白色
腐朽菌を用いてダイオキシンの分解を行った。白色腐朽
菌としては、Phanerochaete chrysosporiumを使用し
た。培養基材となる古紙としては、新聞紙、ＯＡ用紙
（コピー用紙）、チラシまたは段ボールを使用し、これ
らの古紙に米糠および純水を添加したものを培地として
使用した。白色腐朽菌は、ＰＤ液体培地で３日間前培養
した後、下記の試験に供した。
腐朽菌を用いてダイオキシンの分解を行った。白色腐朽
菌としては、Phanerochaete chrysosporiumを使用し
た。培養基材となる古紙としては、新聞紙、ＯＡ用紙
（コピー用紙）、チラシまたは段ボールを使用し、これ
らの古紙に米糠および純水を添加したものを培地として
使用した。白色腐朽菌は、ＰＤ液体培地で３日間前培養
した後、下記の試験に供した。
【００４５】１００ｍｌ共栓付き三角フラスコを複数用
意し、各フラスコに新聞紙、ＯＡ用紙、チラシまたは段
ボールを入れた。古紙の使用量は新聞紙、ＯＡ用紙およ
びチラシは２．０６ｇ（絶乾重量２．０ｇ）、段ボール
は２．１０ｇ（絶乾重量２．０ｇ）とした。次に、各フ
ラスコに米糠０．５５ｇ（絶乾重量０．５ｇ、古紙に対
する絶乾重量比１／４）を入れ、ガラス棒でよくかき混
ぜた。次に、各フラスコに純水を６ｍｌ加えた後、オー
トクレーブにより１２１℃で２０分間殺菌した。
意し、各フラスコに新聞紙、ＯＡ用紙、チラシまたは段
ボールを入れた。古紙の使用量は新聞紙、ＯＡ用紙およ
びチラシは２．０６ｇ（絶乾重量２．０ｇ）、段ボール
は２．１０ｇ（絶乾重量２．０ｇ）とした。次に、各フ
ラスコに米糠０．５５ｇ（絶乾重量０．５ｇ、古紙に対
する絶乾重量比１／４）を入れ、ガラス棒でよくかき混
ぜた。次に、各フラスコに純水を６ｍｌ加えた後、オー
トクレーブにより１２１℃で２０分間殺菌した。
【００４６】この培地に菌体重量対古紙３重量％となる
ように、前記の前培養したPhanerochaete chrysosporiu
mの菌体懸濁液を添加し、３０℃で７日間培養した。培
養後、ＤＭＦに１ｍＭの濃度で溶解した２，７−ＤＣＤ
Ｄ溶液を各フラスコに５００μｌ添加し、３０℃で７日
間インキュベートした。なお、前培養した菌体を１２０
℃で５分間オートクレーブにより加熱処理して用いたも
のをコントロールとした。
ように、前記の前培養したPhanerochaete chrysosporiu
mの菌体懸濁液を添加し、３０℃で７日間培養した。培
養後、ＤＭＦに１ｍＭの濃度で溶解した２，７−ＤＣＤ
Ｄ溶液を各フラスコに５００μｌ添加し、３０℃で７日
間インキュベートした。なお、前培養した菌体を１２０
℃で５分間オートクレーブにより加熱処理して用いたも
のをコントロールとした。
【００４７】反応は、ｎ−ヘキサンを５０ｍｌ加えて一
晩放置することにより停止し、２および３回目４０ｍ
ｌ、４回目２０ｍｌのｎ−ヘキサンで抽出した。その後
は実施例２と同じＧＣ／ＭＳ法で分析し、２，７−ＤＣ
ＤＤの減少率を算出した。結果を図４に示す。
晩放置することにより停止し、２および３回目４０ｍ
ｌ、４回目２０ｍｌのｎ−ヘキサンで抽出した。その後
は実施例２と同じＧＣ／ＭＳ法で分析し、２，７−ＤＣ
ＤＤの減少率を算出した。結果を図４に示す。
【００４８】加熱滅菌しないPhanerochaete chrysospor
iumを培養したサンプルでは、いずれのサンプルでも
２，７−ＤＣＤＤの量は減少しており、それらの物質の
分解がなされていると考えられる。
iumを培養したサンプルでは、いずれのサンプルでも
２，７−ＤＣＤＤの量は減少しており、それらの物質の
分解がなされていると考えられる。
【００４９】実施例４ 《菌糸成長試験》古紙を培養基材として用いて白色腐朽
菌の培養を行い、菌糸の成長を観察した。白色腐朽菌と
しては、Phanerochaete chrysosporiumを使用した。培
養基材となる古紙としては、新聞紙、ＯＡ用紙（コピー
用紙）、チラシまたは段ボールを使用し、これらの古紙
に米糠および純水を添加したものを培地として使用し
た。またコントロールとして、木粉に米糠および純水を
添加した培地を使用した。古紙、木粉および米糠の含水
率を測定したところ、次の通りであった。 新聞 ：３重量％ ＯＡ用紙：３重量％ チラシ ：３重量％ 段ボール：５重量％ 木粉 ：１３重量％ 米糠 ：１０重量％
菌の培養を行い、菌糸の成長を観察した。白色腐朽菌と
しては、Phanerochaete chrysosporiumを使用した。培
養基材となる古紙としては、新聞紙、ＯＡ用紙（コピー
用紙）、チラシまたは段ボールを使用し、これらの古紙
に米糠および純水を添加したものを培地として使用し
た。またコントロールとして、木粉に米糠および純水を
添加した培地を使用した。古紙、木粉および米糠の含水
率を測定したところ、次の通りであった。 新聞 ：３重量％ ＯＡ用紙：３重量％ チラシ ：３重量％ 段ボール：５重量％ 木粉 ：１３重量％ 米糠 ：１０重量％
【００５０】予めそれぞれの古紙または木粉と、米糠と
を絶乾重量比４／１で混合し、含水率を６５重量％に調
整した。直径９ｃｍのシャーレに、上記の調整した古紙
を２１ｇずつ、木粉は２９ｇ入れた。また直径４ｃｍ、
深さ１３ｃｍの培養試験管に古紙を４０ｇずつ、木粉は
１１５ｇ、高さ８ｃｍになるように入れた。これらをオ
ートクレーブにより１２１℃で２０分間殺菌した。シャ
ーレに蔓延したPhanerochaete chrysosporiumのディス
クを中央に１つずつ置き、３０℃で培養し、菌糸の成長
を観察した。結果を図５および図６に示す。
を絶乾重量比４／１で混合し、含水率を６５重量％に調
整した。直径９ｃｍのシャーレに、上記の調整した古紙
を２１ｇずつ、木粉は２９ｇ入れた。また直径４ｃｍ、
深さ１３ｃｍの培養試験管に古紙を４０ｇずつ、木粉は
１１５ｇ、高さ８ｃｍになるように入れた。これらをオ
ートクレーブにより１２１℃で２０分間殺菌した。シャ
ーレに蔓延したPhanerochaete chrysosporiumのディス
クを中央に１つずつ置き、３０℃で培養し、菌糸の成長
を観察した。結果を図５および図６に示す。
【００５１】図５および図６の結果からわかるように、
成長速度に若干の違いはあるものの、約７〜１０日で、
各古紙とも木粉とほぼ同等の成長になる。
成長速度に若干の違いはあるものの、約７〜１０日で、
各古紙とも木粉とほぼ同等の成長になる。
【図１】実施例１のPhanerochaete chrysosporiumの結
果を示すグラフである。
果を示すグラフである。
【図２】実施例１のPhanerochaete sordida YK-624の結
果を示すグラフである。
果を示すグラフである。
【図３】実施例２の結果を示すグラフである。
【図４】実施例３の結果を示すグラフである。
【図５】実施例４のシャーレの場合の結果を示すグラフ
である。
である。
【図６】実施例４の試験管の場合の結果を示すグラフで
ある。
ある。
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き Ｆターム(参考） 4B065 AA01X AC20 BB01 BB26 BB40 BC03 CA56 4D040 DD01 4D059 BA22
Claims (6)
- 【請求項１】 難分解性物質分解能を有する白色腐朽菌
の培養方法であって、古紙を培養基材とする培地で白色
腐朽菌を培養することを特徴とする白色腐朽菌の培養方
法。 - 【請求項２】 古紙が段ボールである請求項１記載の培
養方法。 - 【請求項３】 難分解性物質分解能を有する白色腐朽菌
および古紙の混合物と、難分解性物質とを接触させるこ
とを特徴とする難分解性物質の処理方法。 - 【請求項４】 白色腐朽菌を含む古紙で、難分解性物質
に汚染された土壌を被覆することを特徴とする請求項３
記載の処理方法。 - 【請求項５】 白色腐朽菌を含む古紙を、難分解性物質
に汚染された土壌に混合することを特徴とする請求項３
記載の処理方法。 - 【請求項６】 古紙と白色腐朽菌とを含む難分解性物質
処理剤。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP11218496A JP2001046052A (ja) | 1999-08-02 | 1999-08-02 | 白色腐朽菌の培養方法ならびに難分解性物質の処理方法および処理剤 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP11218496A JP2001046052A (ja) | 1999-08-02 | 1999-08-02 | 白色腐朽菌の培養方法ならびに難分解性物質の処理方法および処理剤 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JP2001046052A true JP2001046052A (ja) | 2001-02-20 |
Family
ID=16720854
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP11218496A Pending JP2001046052A (ja) | 1999-08-02 | 1999-08-02 | 白色腐朽菌の培養方法ならびに難分解性物質の処理方法および処理剤 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JP2001046052A (ja) |
Cited By (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2002088326A1 (fr) * | 2001-04-25 | 2002-11-07 | Idemitsu Petrochemical Co., Ltd. | Procede de decomposition de copolymere d'acide carboxylique insature |
| KR100442086B1 (ko) * | 2001-12-06 | 2004-07-30 | 김보국 | 백색부후균을 함유한 폐수처리용 고정화 담체, 그제조방법 및 이 담체를 이용한 폐수처리방법 |
| JP2012040497A (ja) * | 2010-08-19 | 2012-03-01 | Ehime Univ | アゾ染料分解剤およびアゾ染料の分解方法 |
| CN104402120A (zh) * | 2014-09-25 | 2015-03-11 | 湖南大学 | 用白腐菌处理废水中亚甲基蓝的方法 |
| CN106638081A (zh) * | 2016-10-28 | 2017-05-10 | 河南华禹环保科技有限公司 | 用于白腐菌培养的滤纸纤维载体的制备方法 |
| CN115944879A (zh) * | 2023-01-16 | 2023-04-11 | 广州大学 | 一种利用白腐真菌降解多环芳烃芘与苯并[a]芘的方法 |
-
1999
- 1999-08-02 JP JP11218496A patent/JP2001046052A/ja active Pending
Cited By (7)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2002088326A1 (fr) * | 2001-04-25 | 2002-11-07 | Idemitsu Petrochemical Co., Ltd. | Procede de decomposition de copolymere d'acide carboxylique insature |
| KR100442086B1 (ko) * | 2001-12-06 | 2004-07-30 | 김보국 | 백색부후균을 함유한 폐수처리용 고정화 담체, 그제조방법 및 이 담체를 이용한 폐수처리방법 |
| JP2012040497A (ja) * | 2010-08-19 | 2012-03-01 | Ehime Univ | アゾ染料分解剤およびアゾ染料の分解方法 |
| CN104402120A (zh) * | 2014-09-25 | 2015-03-11 | 湖南大学 | 用白腐菌处理废水中亚甲基蓝的方法 |
| CN106638081A (zh) * | 2016-10-28 | 2017-05-10 | 河南华禹环保科技有限公司 | 用于白腐菌培养的滤纸纤维载体的制备方法 |
| CN115944879A (zh) * | 2023-01-16 | 2023-04-11 | 广州大学 | 一种利用白腐真菌降解多环芳烃芘与苯并[a]芘的方法 |
| CN115944879B (zh) * | 2023-01-16 | 2024-03-29 | 广州大学 | 一种利用白腐真菌降解多环芳烃芘与苯并[a]芘的方法 |
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