JP2000187030A - 育毛剤の評価法 - Google Patents
育毛剤の評価法Info
- Publication number
- JP2000187030A JP2000187030A JP11008578A JP857899A JP2000187030A JP 2000187030 A JP2000187030 A JP 2000187030A JP 11008578 A JP11008578 A JP 11008578A JP 857899 A JP857899 A JP 857899A JP 2000187030 A JP2000187030 A JP 2000187030A
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- hair
- cells
- hair follicle
- animals
- follicle cells
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
Abstract
(57)【要約】
【課題】 本発明は、イン・ビボとの相関性が高いイン
・ビトロの育毛剤の評価法を提供することを課題とす
る。 【解決手段】 動物の毛乳頭細胞と毛包細胞とを共存さ
せて培養し、その増殖の度合いを指標とし、育毛剤をイ
ン・ビトロで評価する。本発明によれば、イン・ビボと
の相関性が高いイン・ビトロの育毛剤の評価法を提供す
ることができる。
・ビトロの育毛剤の評価法を提供することを課題とす
る。 【解決手段】 動物の毛乳頭細胞と毛包細胞とを共存さ
せて培養し、その増殖の度合いを指標とし、育毛剤をイ
ン・ビトロで評価する。本発明によれば、イン・ビボと
の相関性が高いイン・ビトロの育毛剤の評価法を提供す
ることができる。
Description
【０００１】
【発明の属する技術分野】本発明は、育毛作用を有する
物質のスクリーニングに好適な、育毛剤のイン・ビトロ
の評価法に関する。
物質のスクリーニングに好適な、育毛剤のイン・ビトロ
の評価法に関する。
【０００２】
【従来の技術】美しい黒髪を長い間維持しうることは、
万人誰もが願うことであるが、必ずしも実現しうるもの
ではない。特に、近年に於いては、著しい食生活の変
化、行動パターンの夜行化に伴うサーカディアンリズム
の変調、社会生活に於ける競争の激化とそれを起因とす
る心身への負荷ストレスの増大などが複雑に関連して、
禿、薄毛等の毛髪トラブルが急激に増大している。これ
を反映して、この様な毛髪トラブルに対処する育毛化粧
料が各種開発されているが、十分にこの様な毛髪トラブ
ルに対処しているとは言えず、更なる育毛用の化粧料の
登場が待たれていた。この為には、新規の育毛素材の開
発が必要となる。
万人誰もが願うことであるが、必ずしも実現しうるもの
ではない。特に、近年に於いては、著しい食生活の変
化、行動パターンの夜行化に伴うサーカディアンリズム
の変調、社会生活に於ける競争の激化とそれを起因とす
る心身への負荷ストレスの増大などが複雑に関連して、
禿、薄毛等の毛髪トラブルが急激に増大している。これ
を反映して、この様な毛髪トラブルに対処する育毛化粧
料が各種開発されているが、十分にこの様な毛髪トラブ
ルに対処しているとは言えず、更なる育毛用の化粧料の
登場が待たれていた。この為には、新規の育毛素材の開
発が必要となる。
【０００３】育毛素材の開発は、各種生薬などを、例え
ば、マウス等の実験動物の皮膚に投与して、毛髪の生え
方を指標としてイン・ビボの試験によって評価してき
た。しかしながら、この様なスクリーニング法では、非
常に多くの動物を用いなければならず、動物愛護の観点
での問題があったり、評価に要する時間が非常に長いと
いう問題があり、こなせるサンプルの数も自ずと限られ
ていた。イン・ビトロの育毛剤の評価法としては、毛包
細胞を培養し、その増殖の度合いを指標とする評価法が
知られているが、この方法ではイン・ビボとの相関性に
問題ある場合があり、一次スクリーニングとしてしか使
用できないと言う問題があった。又、一方発毛に於け
る、毛包細胞と毛乳頭細胞の相互関係については、明確
な関係が見いだされていなかった。更に、毛乳頭細胞と
毛包細胞を共存して培養する共存培養系で育毛剤の評価
に於いて、単独培養系ではスクリーニングで引っかける
ことのできなかったイン・ビボ評価で有効な物質が引っ
かけられることは全く知られていなかった。この様な状
況を反映して、簡便で素早く評価ができ、多くのサンプ
ルのスクリーニングが可能な、イン・ビボとの相関性が
高いイン・ビトロの育毛剤の評価法が望まれていた。
ば、マウス等の実験動物の皮膚に投与して、毛髪の生え
方を指標としてイン・ビボの試験によって評価してき
た。しかしながら、この様なスクリーニング法では、非
常に多くの動物を用いなければならず、動物愛護の観点
での問題があったり、評価に要する時間が非常に長いと
いう問題があり、こなせるサンプルの数も自ずと限られ
ていた。イン・ビトロの育毛剤の評価法としては、毛包
細胞を培養し、その増殖の度合いを指標とする評価法が
知られているが、この方法ではイン・ビボとの相関性に
問題ある場合があり、一次スクリーニングとしてしか使
用できないと言う問題があった。又、一方発毛に於け
る、毛包細胞と毛乳頭細胞の相互関係については、明確
な関係が見いだされていなかった。更に、毛乳頭細胞と
毛包細胞を共存して培養する共存培養系で育毛剤の評価
に於いて、単独培養系ではスクリーニングで引っかける
ことのできなかったイン・ビボ評価で有効な物質が引っ
かけられることは全く知られていなかった。この様な状
況を反映して、簡便で素早く評価ができ、多くのサンプ
ルのスクリーニングが可能な、イン・ビボとの相関性が
高いイン・ビトロの育毛剤の評価法が望まれていた。
【０００４】
【発明が解決しようとする課題】本発明はこの様な状況
を踏まえて為されたものであり、イン・ビボとの相関性
が高いイン・ビトロの育毛剤の評価法を提供することを
課題とする。
を踏まえて為されたものであり、イン・ビボとの相関性
が高いイン・ビトロの育毛剤の評価法を提供することを
課題とする。
【０００５】
【課題の解決手段】本発明者らは、この様な状況に鑑み
て、イン・ビボとの相関性が高いイン・ビトロの育毛剤
の評価法を求めて鋭意研究を重ねた結果、動物の毛乳頭
細胞と毛包細胞とを共存させて培養し、その増殖の度合
いを指標とすることにより、その様なイン・ビトロの評
価が可能となることを見いだし、発明を完成させるに至
った。以下、本発明について、発明の実施の形態を中心
に詳細に説明を加える。
て、イン・ビボとの相関性が高いイン・ビトロの育毛剤
の評価法を求めて鋭意研究を重ねた結果、動物の毛乳頭
細胞と毛包細胞とを共存させて培養し、その増殖の度合
いを指標とすることにより、その様なイン・ビトロの評
価が可能となることを見いだし、発明を完成させるに至
った。以下、本発明について、発明の実施の形態を中心
に詳細に説明を加える。
【０００６】
【発明の実施の形態】本発明の育毛剤のイン・ビトロの
評価法は、動物の毛乳頭細胞と毛包細胞とを共存させて
培養し、その増殖の度合いを指標とすることを特徴とす
る。ここで使用する動物としては、毛髪を有する動物で
あれば特段の限定なく使用することができ、例えば、マ
ウス、ラット、ハムスター、モルモット、ウサギ、ブタ
何れの動物も使用可能である。この中で特に好ましい動
物は、ラットである。これは、毛乳頭細胞や毛包細胞の
採取が行いやすい、評価の再現性が良い、安価で入手し
やすい等の多くの利点を有する為である。又、使用する
毛髪としては、髭を使用するのが好ましい。これは、毛
包細胞や毛乳頭細胞を無菌的に取り出すに都合が良いこ
とと、スクリーニングに於ける相関性と精度に優れる等
の利点を有するためである。ラットの髭より毛乳頭細胞
や毛包細胞を取り出す方法は、例えば、次の通りであ
る。即ち、毛乳頭細胞は、ラットより左右両側の口唇部
を無菌的にメスで切り出し、実体顕微鏡下で成長期の髭
毛包を摘出し、当該毛包を毛球部の真上で切断し、毛球
部からは毛乳頭を切り出し、これらを通常の細胞培養手
段に従って培養すればよい。又、毛包細胞は、外毛根鞘
部を含む部分の毛包外殻をメス及び２６Ｇの注射針を用
いて注意深く取り除き、１ｍｇ／ｍｌコラゲナーゼ／デ
ィスパーゼ中で処理した後、結合織鞘を取り除き、トリ
プシン処理して細胞を集め、培養すればよい。これらに
ついては、小林らのが既に報じている。(Proc.Natl.Aca
d.Sci.90:7391-7395,1993) 培養は、例えば、ウシ胎仔
血清を加えたイーグルの最少培地で培養すればよい。必
要に応じて、ＥＧＦ、インシュリン、ハイドロコルチゾ
ン等を添加することもできる。かくして、得られた毛乳
頭細胞と毛包細胞とを共存下、スクリーニングするべき
素材を存在させて培養し、その増殖の程度を測定し、増
殖を促進すれば、育毛剤として評価でき、その増殖の促
進作用が大きければ大きいほど育毛効果の大きい育毛剤
である評価できる。この方法については、既に藤江らが
報じているが、藤江らの報告には、育毛素材の非存在下
の単独培養と共存培養に於いては、共存下の方が毛包細
胞の増殖が促進されることが報じられているが、育毛素
材の存在下で単独培養と共存培養の差が更に増幅される
ことは述べられていない。ここで、共存下とは、両細胞
が影響を及ぼし合う環境にあることを言い、別々のシャ
ーレにあっても、寒天ブリッジ等でメーディエーター類
を交換しうる環境にあれば共存下ということができる。
後記実施例に示すように、毛乳頭細胞と毛包細胞とを共
存させることにより、育毛剤であって、どちらか一方で
は増殖促進を認めない物質でも、共存下にあることによ
り増殖促進作用を呈し、確実に実状に則したスクリーニ
ングをすることができる。これらの細胞の増殖の測定
は、常法に従って行えば良く、例えば、14Ｃや3Ｈ等の
放射性元素でラベルした、チミジン等の必須成分の取込
量を調べる方法などが例示できる。最も好ましいもの
は、3Ｈでラベルしたチミジンの取込量を調べる方法で
ある。
評価法は、動物の毛乳頭細胞と毛包細胞とを共存させて
培養し、その増殖の度合いを指標とすることを特徴とす
る。ここで使用する動物としては、毛髪を有する動物で
あれば特段の限定なく使用することができ、例えば、マ
ウス、ラット、ハムスター、モルモット、ウサギ、ブタ
何れの動物も使用可能である。この中で特に好ましい動
物は、ラットである。これは、毛乳頭細胞や毛包細胞の
採取が行いやすい、評価の再現性が良い、安価で入手し
やすい等の多くの利点を有する為である。又、使用する
毛髪としては、髭を使用するのが好ましい。これは、毛
包細胞や毛乳頭細胞を無菌的に取り出すに都合が良いこ
とと、スクリーニングに於ける相関性と精度に優れる等
の利点を有するためである。ラットの髭より毛乳頭細胞
や毛包細胞を取り出す方法は、例えば、次の通りであ
る。即ち、毛乳頭細胞は、ラットより左右両側の口唇部
を無菌的にメスで切り出し、実体顕微鏡下で成長期の髭
毛包を摘出し、当該毛包を毛球部の真上で切断し、毛球
部からは毛乳頭を切り出し、これらを通常の細胞培養手
段に従って培養すればよい。又、毛包細胞は、外毛根鞘
部を含む部分の毛包外殻をメス及び２６Ｇの注射針を用
いて注意深く取り除き、１ｍｇ／ｍｌコラゲナーゼ／デ
ィスパーゼ中で処理した後、結合織鞘を取り除き、トリ
プシン処理して細胞を集め、培養すればよい。これらに
ついては、小林らのが既に報じている。(Proc.Natl.Aca
d.Sci.90:7391-7395,1993) 培養は、例えば、ウシ胎仔
血清を加えたイーグルの最少培地で培養すればよい。必
要に応じて、ＥＧＦ、インシュリン、ハイドロコルチゾ
ン等を添加することもできる。かくして、得られた毛乳
頭細胞と毛包細胞とを共存下、スクリーニングするべき
素材を存在させて培養し、その増殖の程度を測定し、増
殖を促進すれば、育毛剤として評価でき、その増殖の促
進作用が大きければ大きいほど育毛効果の大きい育毛剤
である評価できる。この方法については、既に藤江らが
報じているが、藤江らの報告には、育毛素材の非存在下
の単独培養と共存培養に於いては、共存下の方が毛包細
胞の増殖が促進されることが報じられているが、育毛素
材の存在下で単独培養と共存培養の差が更に増幅される
ことは述べられていない。ここで、共存下とは、両細胞
が影響を及ぼし合う環境にあることを言い、別々のシャ
ーレにあっても、寒天ブリッジ等でメーディエーター類
を交換しうる環境にあれば共存下ということができる。
後記実施例に示すように、毛乳頭細胞と毛包細胞とを共
存させることにより、育毛剤であって、どちらか一方で
は増殖促進を認めない物質でも、共存下にあることによ
り増殖促進作用を呈し、確実に実状に則したスクリーニ
ングをすることができる。これらの細胞の増殖の測定
は、常法に従って行えば良く、例えば、14Ｃや3Ｈ等の
放射性元素でラベルした、チミジン等の必須成分の取込
量を調べる方法などが例示できる。最も好ましいもの
は、3Ｈでラベルしたチミジンの取込量を調べる方法で
ある。
【０００７】
【実施例】以下に実施例を挙げて、本発明について更に
詳細に説明を加えるが、本発明がこれら実施例にのみ限
定を受けないことは言うまでもない。
詳細に説明を加えるが、本発明がこれら実施例にのみ限
定を受けないことは言うまでもない。
【０００８】＜実施例１＞２１日齢のウィスター系ラッ
ト（雄性）を用い、毛包細胞と毛乳頭細胞とを単離し
た。即ち、ラット１匹分の左右両側の口唇部を無菌的に
メスで切り出し、実体顕微鏡下で成長期の髭毛包２０本
を摘出した。摘出した毛包を毛球部の真上で切断し、毛
球部からは毛乳頭を取り出し、直径３５ｍｍの組織培養
用ディッシュに付着させて静置培養した。培地は最初の
４日間は２０％ＦＢＳ加イーグルの最少培地で培養し
た。その後１０％ＦＢＳ加イーグルの最少培地で培養し
た。継代培養は、培養４週間後に燐酸緩衝生理食塩水：
カルシウム、マグネシウムフリー（以下、ＰＢＳ
（−））でディッシュ表面を１回洗浄した後０．２５％
トリプシン−１ｍＭ ＥＤＴＡで３７℃、１時間処理
し、細胞を分散させて遠心分離で回収したものを用い
た。毛包細胞は、外毛根鞘部を含む部分の毛包外殻をメ
ス及び注射針で注意深く取り除き、１ｍｇ／ｍｌコラゲ
ナーゼ／ディスパーゼ中で３７℃、３０分間処理した
後、結合織鞘を取り除き、０．０５％トリプシン−０．
５３ｍＭ ＥＤＴＡで１時間処理し、分散した細胞を遠
心分離で集め、コラーゲンコートディッシュに播種し培
養した。培地は、ヒトリコンビナントＥＧＦ１０ｎｇ／
ｍｌ、ヒトリコンビナントインシュリン４μｇ／ｍｌ、
ハイドロコルチゾン０．４μｇ／ｍｌ、１５％ＦＢＳ加
イーグルの最少培地を用いた。継代培養は、培養２週間
後に燐酸緩衝生理食塩水：カルシウム、マグネシウムフ
リー（以下、ＰＢＳ（−））でディッシュ表面を１回洗
浄した後０．２５％トリプシン−１ｍＭ ＥＤＴＡで３
７℃、１時間処理し、細胞を分散させて遠心分離で回収
したものを用いた。培養は全て５％炭酸ガス、９５％エ
アーで３７℃で行った。
ト（雄性）を用い、毛包細胞と毛乳頭細胞とを単離し
た。即ち、ラット１匹分の左右両側の口唇部を無菌的に
メスで切り出し、実体顕微鏡下で成長期の髭毛包２０本
を摘出した。摘出した毛包を毛球部の真上で切断し、毛
球部からは毛乳頭を取り出し、直径３５ｍｍの組織培養
用ディッシュに付着させて静置培養した。培地は最初の
４日間は２０％ＦＢＳ加イーグルの最少培地で培養し
た。その後１０％ＦＢＳ加イーグルの最少培地で培養し
た。継代培養は、培養４週間後に燐酸緩衝生理食塩水：
カルシウム、マグネシウムフリー（以下、ＰＢＳ
（−））でディッシュ表面を１回洗浄した後０．２５％
トリプシン−１ｍＭ ＥＤＴＡで３７℃、１時間処理
し、細胞を分散させて遠心分離で回収したものを用い
た。毛包細胞は、外毛根鞘部を含む部分の毛包外殻をメ
ス及び注射針で注意深く取り除き、１ｍｇ／ｍｌコラゲ
ナーゼ／ディスパーゼ中で３７℃、３０分間処理した
後、結合織鞘を取り除き、０．０５％トリプシン−０．
５３ｍＭ ＥＤＴＡで１時間処理し、分散した細胞を遠
心分離で集め、コラーゲンコートディッシュに播種し培
養した。培地は、ヒトリコンビナントＥＧＦ１０ｎｇ／
ｍｌ、ヒトリコンビナントインシュリン４μｇ／ｍｌ、
ハイドロコルチゾン０．４μｇ／ｍｌ、１５％ＦＢＳ加
イーグルの最少培地を用いた。継代培養は、培養２週間
後に燐酸緩衝生理食塩水：カルシウム、マグネシウムフ
リー（以下、ＰＢＳ（−））でディッシュ表面を１回洗
浄した後０．２５％トリプシン−１ｍＭ ＥＤＴＡで３
７℃、１時間処理し、細胞を分散させて遠心分離で回収
したものを用いた。培養は全て５％炭酸ガス、９５％エ
アーで３７℃で行った。
【０００９】共存培養は、継代培養２回目でサブコンフ
ルエントになった、毛包細胞をＩＶ型コラーゲンコート
プレートに２×１０2個／ｃｍ2の割合で播種し、同じく
継代培養２回目のサブコフルエントになった、毛乳頭細
胞をＩ型コラーゲンコートセルカルチャーインサート
（ポアサイズ３μｍ）に、４×１０3個／ｃｍ2の割合で
播種した。培養２４時間にセルカルチャーインサートを
プレートのウェルに移し、それぞれ共存させて培養し
た。培養培地には、育毛効果がイン・ビボで確かめられ
ているサンシャエキスを終濃度０％、１０-7％、１０-5
％、１０-3％で含んだ１０％ＦＢＳ加イーグルの最少培
地を用いた。共存培養３日後にセルカルチャーインサー
トを除き、3Ｈ−チミジン１μＣｉ／ｍｌを添加し更に
５時間培養を続けた。常法に従って細胞内に取り込まれ
た放射活性を測定し増殖活性とした。比較として、セル
カルチャーインサートをインサートしないものを用い、
単独培養とした。結果を図１に示す。これより、単独培
養では、育毛剤であるサンシャエキスの育毛効果は認め
られないが、共存培養でははっきりと有意差をもってサ
ンシャエキスの育毛効果が認められていることがわか
る。又、細胞の起源が同一動物であるので、動物差を考
えずに比較することもできるし、マイクロプレートでス
クリーニングできるので、同一条件で多種のサンプルの
スクリーニングを短時間で行うこともできる。
ルエントになった、毛包細胞をＩＶ型コラーゲンコート
プレートに２×１０2個／ｃｍ2の割合で播種し、同じく
継代培養２回目のサブコフルエントになった、毛乳頭細
胞をＩ型コラーゲンコートセルカルチャーインサート
（ポアサイズ３μｍ）に、４×１０3個／ｃｍ2の割合で
播種した。培養２４時間にセルカルチャーインサートを
プレートのウェルに移し、それぞれ共存させて培養し
た。培養培地には、育毛効果がイン・ビボで確かめられ
ているサンシャエキスを終濃度０％、１０-7％、１０-5
％、１０-3％で含んだ１０％ＦＢＳ加イーグルの最少培
地を用いた。共存培養３日後にセルカルチャーインサー
トを除き、3Ｈ−チミジン１μＣｉ／ｍｌを添加し更に
５時間培養を続けた。常法に従って細胞内に取り込まれ
た放射活性を測定し増殖活性とした。比較として、セル
カルチャーインサートをインサートしないものを用い、
単独培養とした。結果を図１に示す。これより、単独培
養では、育毛剤であるサンシャエキスの育毛効果は認め
られないが、共存培養でははっきりと有意差をもってサ
ンシャエキスの育毛効果が認められていることがわか
る。又、細胞の起源が同一動物であるので、動物差を考
えずに比較することもできるし、マイクロプレートでス
クリーニングできるので、同一条件で多種のサンプルの
スクリーニングを短時間で行うこともできる。
【００１０】
【発明の効果】本発明によれば、イン・ビボとの相関性
が高いイン・ビトロの育毛剤の評価法を提供することが
できる。
が高いイン・ビトロの育毛剤の評価法を提供することが
できる。
【図１】 サンシャエキスの育毛効果について、単独培
養と共存培養で試験した結果を示す図である。
養と共存培養で試験した結果を示す図である。
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (72)発明者 鈴木 正巳 神奈川県横浜市戸塚区柏尾町560 ポーラ 化成工業株式会社戸塚研究所内
Claims (4)
- 【請求項１】 動物の毛乳頭細胞と毛包細胞とを共存さ
せて培養し、その増殖の度合いを指標とすることを特徴
とする、育毛剤のイン・ビトロの評価法。 - 【請求項２】 毛乳頭細胞と毛包細胞が髭由来の細胞で
あることを特徴とする、請求項１に記載の育毛剤のイン
・ビトロの評価法。 - 【請求項３】 更に、毛包細胞のみを単独培養させて、
この増殖の度合いを測定し、共存下での培養との差を指
標とすることを特徴とする、請求項１又は２に記載の育
毛剤の評価法。 - 【請求項４】 イン・ビボとの相関性が良好であること
を特徴とする請求項１〜３の何れか一項に記載の育毛剤
の評価法。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP00857899A JP4257879B2 (ja) | 1998-01-19 | 1999-01-18 | 育毛剤の評価法 |
Applications Claiming Priority (3)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP2152098 | 1998-01-19 | ||
| JP10-21520 | 1998-01-19 | ||
| JP00857899A JP4257879B2 (ja) | 1998-01-19 | 1999-01-18 | 育毛剤の評価法 |
Publications (3)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JP2000187030A true JP2000187030A (ja) | 2000-07-04 |
| JP2000187030A5 JP2000187030A5 (ja) | 2006-03-02 |
| JP4257879B2 JP4257879B2 (ja) | 2009-04-22 |
Family
ID=26343119
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP00857899A Expired - Fee Related JP4257879B2 (ja) | 1998-01-19 | 1999-01-18 | 育毛剤の評価法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JP4257879B2 (ja) |
Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2005053763A1 (ja) * | 2003-12-05 | 2005-06-16 | Biointegrence Inc. | 発毛方法 |
| US7985537B2 (en) | 2007-06-12 | 2011-07-26 | Aderans Research Institute, Inc. | Methods for determining the hair follicle inductive properties of a composition |
| JP2014204711A (ja) * | 2013-03-19 | 2014-10-30 | 国立大学法人 千葉大学 | 三次元培養皮膚モデルの製造方法およびその利用 |
-
1999
- 1999-01-18 JP JP00857899A patent/JP4257879B2/ja not_active Expired - Fee Related
Cited By (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2005053763A1 (ja) * | 2003-12-05 | 2005-06-16 | Biointegrence Inc. | 発毛方法 |
| CN100438926C (zh) * | 2003-12-05 | 2008-12-03 | 英泰格伦斯生物株式会社 | 生发组合物及其应用 |
| US7985537B2 (en) | 2007-06-12 | 2011-07-26 | Aderans Research Institute, Inc. | Methods for determining the hair follicle inductive properties of a composition |
| JP2014204711A (ja) * | 2013-03-19 | 2014-10-30 | 国立大学法人 千葉大学 | 三次元培養皮膚モデルの製造方法およびその利用 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JP4257879B2 (ja) | 2009-04-22 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Kosher et al. | In vitro studies on the morphogenesis and differentiation of the mesoderm subjacent to the apical ectodermal ridge of the embryonic chick limb-bud | |
| Dollé et al. | Retinoic acid receptors and cellular retinoid binding proteins: I. A systematic study of their differential pattern of transcription during mouse organogenesis | |
| Reynolds et al. | Hair matrix germinative epidermal cells confer follicle-inducing capabilities on dermal sheath and high passage papilla cells | |
| Jahoda et al. | Vibrissa dermal papilla cell aggregative behaviour in vivo and in vitro | |
| Lu et al. | Towards the development of a simplified long‐term organ culture method for human scalp skin and its appendages under serum‐free conditions | |
| Reynolds et al. | Hair follicle stem cells? A distinct germinative epidermal cell population is activated in vitro by the presence of hair dermal papilla cells | |
| Larderet et al. | Human side population keratinocytes exhibit long-term proliferative potential and a specific gene expression profile and can form a pluristratified epidermis | |
| Scharner et al. | The muscle satellite cell at 50: the formative years | |
| CN103785064B (zh) | 一种皮肤模型及应用 | |
| Ghetti et al. | Subpopulations of dermal skin fibroblasts secrete distinct extracellular matrix: implications for using skin substitutes in the clinic | |
| Tickle et al. | Retinoic acid application to chick wing buds leads to a dose-dependent reorganization of the apical ectodermal ridge that is mediated by the mesenchyme | |
| HUT56393A (en) | Three dimensional cell and tissue culturing systems | |
| Liu et al. | Hair follicle stem cells combined with human allogeneic acellular amniotic membrane for repair of full thickness skin defects in nude mice | |
| US10398735B2 (en) | Compositions and methods for producing reconstituted skin | |
| Chen et al. | Cellular events associated with lung branching morphogenesis including the deposition of collagen type IV | |
| Ataç et al. | The microfollicle: a model of the human hair follicle for in vitro studies | |
| Washburn | Comparative histochemical observations on wound healing in adult rats and cultured adult human epithelium | |
| US11174463B2 (en) | Method for the production of hair follicles and de novo papillae, and use thereof for in vitro tests and in vivo implants | |
| JP2000187030A (ja) | 育毛剤の評価法 | |
| Kazama et al. | Histologic and cell kinetic studies of hair loss and subsequent recovery process of human scalp hair follicles grafted onto severe combined immunodeficient mice | |
| Inanç et al. | In vitro differentiation and attachment of human embryonic stem cells on periodontal tooth root surfaces | |
| Flaxman | Cell identification in primary cell cultures from skin | |
| Wang et al. | Engineered skin substitute regenerates the skin with hair follicle formation | |
| CN109722410B (zh) | 一种3d全层皮肤模型及用于其形成的培养基、制备方法 | |
| Szabad et al. | Human adult epidermal melanocytes cultured without chemical mitogens express the EGF receptor and respond to EGF |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| A521 | Written amendment |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20060112 |
|
| A621 | Written request for application examination |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A621 Effective date: 20060112 |
|
| A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20081202 |
|
| A521 | Written amendment |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20081226 |
|
| TRDD | Decision of grant or rejection written | ||
| A01 | Written decision to grant a patent or to grant a registration (utility model) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A01 Effective date: 20090202 |
|
| A01 | Written decision to grant a patent or to grant a registration (utility model) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A01 |
|
| A61 | First payment of annual fees (during grant procedure) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A61 Effective date: 20090202 |
|
| R150 | Certificate of patent or registration of utility model |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R150 |
|
| FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20150213 Year of fee payment: 6 |
|
| LAPS | Cancellation because of no payment of annual fees |