ITMI992200A1 - Metodo per la crioconservazione del seme di teleostei - Google Patents
Metodo per la crioconservazione del seme di teleostei Download PDFInfo
- Publication number
- ITMI992200A1 ITMI992200A1 IT1999MI002200A ITMI992200A ITMI992200A1 IT MI992200 A1 ITMI992200 A1 IT MI992200A1 IT 1999MI002200 A IT1999MI002200 A IT 1999MI002200A IT MI992200 A ITMI992200 A IT MI992200A IT MI992200 A1 ITMI992200 A1 IT MI992200A1
- Authority
- IT
- Italy
- Prior art keywords
- specimens
- cryopreservation
- preserve
- methanol
- freezing
- Prior art date
Links
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 19
- 238000005138 cryopreservation Methods 0.000 title abstract description 8
- 241001454698 Teleostei Species 0.000 title abstract description 5
- 238000007710 freezing Methods 0.000 claims abstract description 11
- 230000008014 freezing Effects 0.000 claims abstract description 11
- 238000009395 breeding Methods 0.000 claims abstract description 4
- 230000001488 breeding effect Effects 0.000 claims abstract description 4
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims abstract 2
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 claims description 9
- 230000007613 environmental effect Effects 0.000 claims description 4
- 239000007788 liquid Substances 0.000 claims description 4
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 claims description 4
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 claims description 4
- 241000277331 Salmonidae Species 0.000 claims description 3
- 239000012678 infectious agent Substances 0.000 claims description 2
- 241000894007 species Species 0.000 claims description 2
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 6
- IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N Dimethylsulphoxide Chemical compound CS(C)=O IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 4
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 3
- QCVGEOXPDFCNHA-UHFFFAOYSA-N 5,5-dimethyl-2,4-dioxo-1,3-oxazolidine-3-carboxamide Chemical compound CC1(C)OC(=O)N(C(N)=O)C1=O QCVGEOXPDFCNHA-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 claims 1
- 102000002322 Egg Proteins Human genes 0.000 claims 1
- 108010000912 Egg Proteins Proteins 0.000 claims 1
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 claims 1
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 claims 1
- 230000003187 abdominal effect Effects 0.000 claims 1
- 229940098773 bovine serum albumin Drugs 0.000 claims 1
- 238000011109 contamination Methods 0.000 claims 1
- 239000002577 cryoprotective agent Substances 0.000 claims 1
- 235000014103 egg white Nutrition 0.000 claims 1
- 210000000969 egg white Anatomy 0.000 claims 1
- 238000012252 genetic analysis Methods 0.000 claims 1
- 238000009776 industrial production Methods 0.000 claims 1
- 230000001850 reproductive effect Effects 0.000 claims 1
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 claims 1
- 210000000582 semen Anatomy 0.000 abstract description 6
- 230000004720 fertilization Effects 0.000 abstract description 2
- 238000012248 genetic selection Methods 0.000 abstract 1
- 241000251468 Actinopterygii Species 0.000 description 3
- 239000003085 diluting agent Substances 0.000 description 3
- CSNNHWWHGAXBCP-UHFFFAOYSA-L Magnesium sulfate Chemical compound [Mg+2].[O-][S+2]([O-])([O-])[O-] CSNNHWWHGAXBCP-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 2
- JKMHFZQWWAIEOD-UHFFFAOYSA-N 2-[4-(2-hydroxyethyl)piperazin-1-yl]ethanesulfonic acid Chemical compound OCC[NH+]1CCN(CCS([O-])(=O)=O)CC1 JKMHFZQWWAIEOD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- UXVMQQNJUSDDNG-UHFFFAOYSA-L Calcium chloride Chemical compound [Cl-].[Cl-].[Ca+2] UXVMQQNJUSDDNG-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 241001327682 Oncorhynchus mykiss irideus Species 0.000 description 1
- 238000009360 aquaculture Methods 0.000 description 1
- 244000144974 aquaculture Species 0.000 description 1
- 239000012620 biological material Substances 0.000 description 1
- 239000008366 buffered solution Substances 0.000 description 1
- 239000001110 calcium chloride Substances 0.000 description 1
- 235000011148 calcium chloride Nutrition 0.000 description 1
- 229910001628 calcium chloride Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000001816 cooling Methods 0.000 description 1
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 1
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 1
- 238000011067 equilibration Methods 0.000 description 1
- 230000002068 genetic effect Effects 0.000 description 1
- 210000004602 germ cell Anatomy 0.000 description 1
- 229910052943 magnesium sulfate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000019341 magnesium sulphate Nutrition 0.000 description 1
- 238000004321 preservation Methods 0.000 description 1
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 1
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 1
- 238000010257 thawing Methods 0.000 description 1
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
- A01N—PRESERVATION OF BODIES OF HUMANS OR ANIMALS OR PLANTS OR PARTS THEREOF; BIOCIDES, e.g. AS DISINFECTANTS, AS PESTICIDES OR AS HERBICIDES; PEST REPELLANTS OR ATTRACTANTS; PLANT GROWTH REGULATORS
- A01N1/00—Preservation of bodies of humans or animals, or parts thereof
- A01N1/02—Preservation of living parts
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
- A01N—PRESERVATION OF BODIES OF HUMANS OR ANIMALS OR PLANTS OR PARTS THEREOF; BIOCIDES, e.g. AS DISINFECTANTS, AS PESTICIDES OR AS HERBICIDES; PEST REPELLANTS OR ATTRACTANTS; PLANT GROWTH REGULATORS
- A01N1/00—Preservation of bodies of humans or animals, or parts thereof
- A01N1/02—Preservation of living parts
- A01N1/0205—Chemical aspects
- A01N1/021—Preservation or perfusion media, liquids, solids or gases used in the preservation of cells, tissue, organs or bodily fluids
- A01N1/0226—Physiologically active agents, i.e. substances affecting physiological processes of cells and tissue to be preserved, e.g. anti-oxidants or nutrients
Landscapes
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Dentistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Zoology (AREA)
- Environmental Sciences (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Physiology (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Farming Of Fish And Shellfish (AREA)
- Nozzles (AREA)
- Liquid Crystal Substances (AREA)
- Machine Translation (AREA)
- Breeding Of Plants And Reproduction By Means Of Culturing (AREA)
- Soil Working Implements (AREA)
- Pretreatment Of Seeds And Plants (AREA)
- Catching Or Destruction (AREA)
- Agricultural Chemicals And Associated Chemicals (AREA)
Description
Domanda di brevetto per invenzione industriale dal titolo:
“Metodo per la crioconservazione del seme di Teleostei”
CAMPO DELL’INVENZIONE
Il campo dell’invenzione riguarda metodi di crioconservazione degli spermatozoi di Teleostei, di utilità’ in campo zootecnico.
TECNICA ANTERIORE
I metodi di crioconservazione del materiale biologico di varia natura (cellule, tessuti, gameti) sono da lungo tempo oggetto di studi sia a livello scientifico che a livello industriale in campo zootecnico. In campo zootecnico le ragioni di questo interesse, in particolare rivolte alla conservazione delle cellule germinali, risiedono principalmente nella maggior compattezza dell'informazione genetica in queste cellule rispetto all'animale intero, e quindi nella possibilità’ di facilitare o permettere selezioni o incroci particolarmente vantaggiosi altrimenti improbabili per condizioni ambientali o geografiche.
Tra i vantaggi di queste metodologie ricordiamo:
- possibilità di conservazione del materiale genetico;
- possibilità' di analisi e di comparazione del materiale genetico, tra vari individui di una specie;
- facilitazione negli scambi, rispetto allo scambio di animali;
- possibilità' di selezionare gli incroci più adatti a diverse condizioni ambientali;
- possibilità’ di controllo verso gli agenti infettivi.
- economicità della conservazione di volumi ridotti di liquido, rispetto al mantenimento di animali in allevamento.
Diversi metodi per la crioconservazione dello sperma di specie animali di interesse zootecnico ed in particolare di pesci di interesse industriale, sono attualmente disponibili. Una rassegna e' presentata in: Maisse G. et al. JIMRA Prod. Anim. 1998, 11:57-65.
Anche Lahnsteiner et al. in Aquaculture (1996) 144:265-274 presentano un metodo di congelamento che risulta particolarmente vantaggioso per la conservazione dello sperma di pesce. Tuttavia, anche in questo caso, le limitazioni principali dei metodi finora proposti risiedono in una mancata standardizzazione dell'intero procedimento, tale da garantire riproducibilità su larga scala indispensabile per applicazioni in campo industriale.
SOMMARIO
L'invenzione descrive un procedimento per la conservazione del liquido seminale di specie animali quale i Teleostei, altamente standardizzato grazie all'utflizzo di una curva di congelamento riproducibile. Il metodo dell'invenzione e' di particolare utilità’ negli allevamenti industriali di specie animali quali i salmonidi.
Il procedimento dell’invenzione consente la crioconservazione a livello industriale di campioni di sperma che mantengono dopo il trattamento ed il successivo scongelamento, una buona efficienza di fertilizzazione.
DESCRIZIONE DETTAGLIATA DELL’INVENZIONE
La presente invenzione riguarda un procedimento industrialmente riproducibile di crioconservazione del seme di varie specie animali, basato sulla definizione e sull’utilizzo di una curva di congelamento dei campioni, corrispondente ad un raffreddamento di 30°C/min, da 4°C a -110°C.
Il procedimento comprende i seguenti passaggi:
a) diluizione in un opportuno diluente in rapporti seme/diluente compresi tra 1:3 e 1:5 e suddivisione della soluzione di seme diluito in “paillettes" da 0.5 mi
b) equilibramento delle aliquote per un tempo inferiore ai 15‘, ad una temperatura compresa tra i 2-6°C
c) congelamento mediante riduzione della temperatura ad una velocità di 30°C/min, da 4°C a -110°C.
La velocita' di congelamento descritta (curva di congelamento), può' essere ottenuta con una unita’ programmabile di congelamento, quale la -Digitcool 5300<®>.
Il procedimento dell'invenzione e' stato applicato con successo al congelamento del seme di pesci di allevamento, quali quello ottenuto da esemplari della famiglia dei Salmonidi. In particolare, e' risultato vantaggioso per il congelamento del seme di trota iridea ( Oncorhyncus mykiss).
Come diluente del liquido spermatico e' stata utilizzata una soluzione tamponata, osmoticamente compatibile con tale liquido, costituita da: NaCl 103 mM, KCl 40mM, CaCl2 1mM, MgSO4 0.8mM, Hepes 20mM-pH
Claims (1)
- 7.8; Metanolo 10%, bovine serum albumin 1.5%, albume d’uovo 7%, saccarosio 0.5%. Altre soluzioni osmoticamente compatibili possono contenere dimetilsolfossido (DMSO) 5% e glicerolo 1% come agenti crioprotettori al posto del metanolo. Il procedimento dell’invenzione e’ risultato in particolare vantaggioso per la produzione a livello industriale di esemplari d’allevamento del genere Oncorhyncus mykiss, ma può’ essere applicato con successo a tutti quei procedimenti industriali che necessitano di: - conservare il materiale genetico di animali con qualità’ utili per il miglioramento delle specie da allevamento; - conservare il materiale genetico di esemplari "selvatici”,, messi in pericolo da condizioni ambientali estreme (inquinamento ecc.); - analisi genetiche degli esemplari con particolari proprietà’; - facilitare gli scambi, rispetto allo scambio di animali interi; - selezionare gli incroci più adatti a condizioni ambientali diverse; - controllo verso la contaminazione con agenti infettivi; - ridurre i costi di mantenimento degli esemplari vivi per la riproduzione. PARTE SPERIMENTALE Esempio 1: Raccolta e congelamento del seme di trota (Oncorhyncus mykiss). Lo sperma e' stato raccolto dagli individui riproduttori, preventivamente sedati, mediante massaggio addominale. Il volume del liquido raccolto e' stato determinato mediante micropipettatore; i campioni contaminati sono stati scartati.
Priority Applications (10)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| IT1999MI002200A IT1314198B1 (it) | 1999-10-20 | 1999-10-20 | Metodo per la crioconservazione del seme di teleostei |
| AT00972780T ATE259588T1 (de) | 1999-10-20 | 2000-10-17 | Verfahren zum cryopräservieren von teleostei- samen |
| CA002388741A CA2388741A1 (en) | 1999-10-20 | 2000-10-17 | Method for cryopreservation of teleostei semen |
| AU11391/01A AU1139101A (en) | 1999-10-20 | 2000-10-17 | Method for cryopreservation of teleostei semen |
| EP00972780A EP1223805B1 (en) | 1999-10-20 | 2000-10-17 | Method for cryopreservation of teleostei semen |
| PCT/EP2000/010182 WO2001028326A1 (en) | 1999-10-20 | 2000-10-17 | Method for cryopreservation of teleostei semen |
| DK00972780T DK1223805T3 (da) | 1999-10-20 | 2000-10-17 | Fremgangsmåde til cryopræservering af Teleostei-sæd |
| SI200030372T SI1223805T1 (en) | 1999-10-20 | 2000-10-17 | Method for cryopreservation of teleostei semen |
| DE60008404T DE60008404D1 (de) | 1999-10-20 | 2000-10-17 | Verfahren zum cryopräservieren von teleostei-samen |
| NO20021864A NO320450B1 (no) | 1999-10-20 | 2002-04-19 | Fremgangsmate for kryokonservering av Teleostei-saed og fremgansmater der slik kryokonservering benyttes |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| IT1999MI002200A IT1314198B1 (it) | 1999-10-20 | 1999-10-20 | Metodo per la crioconservazione del seme di teleostei |
Publications (3)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| ITMI992200A0 ITMI992200A0 (it) | 1999-10-20 |
| ITMI992200A1 true ITMI992200A1 (it) | 2001-04-20 |
| IT1314198B1 IT1314198B1 (it) | 2002-12-06 |
Family
ID=11383821
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| IT1999MI002200A IT1314198B1 (it) | 1999-10-20 | 1999-10-20 | Metodo per la crioconservazione del seme di teleostei |
Country Status (9)
| Country | Link |
|---|---|
| EP (1) | EP1223805B1 (it) |
| AT (1) | ATE259588T1 (it) |
| AU (1) | AU1139101A (it) |
| CA (1) | CA2388741A1 (it) |
| DE (1) | DE60008404D1 (it) |
| DK (1) | DK1223805T3 (it) |
| IT (1) | IT1314198B1 (it) |
| NO (1) | NO320450B1 (it) |
| WO (1) | WO2001028326A1 (it) |
Families Citing this family (13)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| DE102004030285B4 (de) * | 2004-06-23 | 2007-08-02 | Franz Lahnsteiner | Gefrierkonservierung von Eiern und Embryonen von Fischen |
| CN103404508B (zh) * | 2013-06-19 | 2014-12-24 | 浙江省淡水水产研究所 | 花*精子超低温冷冻保存和复苏方法 |
| CN103900884B (zh) * | 2014-04-11 | 2016-09-14 | 深圳市博锐德生物科技有限公司 | 精浆复合质控品及其制备方法、试剂盒 |
| CN104304234B (zh) * | 2014-09-17 | 2016-05-18 | 中山大学 | 豹纹鳃棘鲈精子冷冻保护液及其保存方法 |
| CN104396943A (zh) * | 2014-11-28 | 2015-03-11 | 陈小洁 | 一种淡水白鲨精液保存方法 |
| CN104396944A (zh) * | 2014-11-28 | 2015-03-11 | 陈小洁 | 一种淡水白鲨精液专用稀释液 |
| CN105360109B (zh) * | 2015-12-02 | 2017-11-14 | 中国科学院海洋研究所 | 一种黄颡鱼精子超低温冷冻保存方法 |
| CN105494314B (zh) * | 2015-12-17 | 2018-01-09 | 武汉先锋水产科技有限公司 | 一种黑尾近红鲌精子保存方法 |
| CN105532639B (zh) * | 2015-12-18 | 2018-03-02 | 中国科学院海洋研究所 | 一种鞍带石斑鱼精子大容量、高效超低温冷冻保存的方法 |
| CN109644983A (zh) * | 2018-12-17 | 2019-04-19 | 浙江万里学院 | 以中华鳖冬眠血清为基础的猪精子低温稀释液 |
| CN109819976B (zh) * | 2019-03-06 | 2021-07-27 | 中国科学院海洋研究所 | 一种卵胎生鱼类许氏平鲉精子超低温保存及激活方法 |
| CN111771869A (zh) * | 2020-06-28 | 2020-10-16 | 广西壮族自治区水产科学研究院 | 大鳞副泥鳅精液超低温冷冻保存方法 |
| CN114271264A (zh) * | 2022-01-11 | 2022-04-05 | 新疆农业大学 | 一种江鳕精液冷冻保存液、制备方法及其用途 |
-
1999
- 1999-10-20 IT IT1999MI002200A patent/IT1314198B1/it active
-
2000
- 2000-10-17 DK DK00972780T patent/DK1223805T3/da active
- 2000-10-17 WO PCT/EP2000/010182 patent/WO2001028326A1/en active IP Right Grant
- 2000-10-17 CA CA002388741A patent/CA2388741A1/en not_active Abandoned
- 2000-10-17 AT AT00972780T patent/ATE259588T1/de not_active IP Right Cessation
- 2000-10-17 EP EP00972780A patent/EP1223805B1/en not_active Expired - Lifetime
- 2000-10-17 AU AU11391/01A patent/AU1139101A/en not_active Abandoned
- 2000-10-17 DE DE60008404T patent/DE60008404D1/de not_active Expired - Lifetime
-
2002
- 2002-04-19 NO NO20021864A patent/NO320450B1/no active IP Right Review Request
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| IT1314198B1 (it) | 2002-12-06 |
| DE60008404D1 (de) | 2004-03-25 |
| EP1223805A1 (en) | 2002-07-24 |
| DK1223805T3 (da) | 2004-06-14 |
| ATE259588T1 (de) | 2004-03-15 |
| WO2001028326A1 (en) | 2001-04-26 |
| EP1223805B1 (en) | 2004-02-18 |
| NO320450B1 (no) | 2005-12-05 |
| ITMI992200A0 (it) | 1999-10-20 |
| NO20021864D0 (no) | 2002-04-19 |
| CA2388741A1 (en) | 2001-04-26 |
| AU1139101A (en) | 2001-04-30 |
| NO20021864L (no) | 2002-06-13 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Collins et al. | Viability assessment of honey bee, Apis mellifera, sperm using dual fluorescent staining | |
| Tsai et al. | Advantages and applications of cryopreservation in fisheries science | |
| ITMI992200A1 (it) | Metodo per la crioconservazione del seme di teleostei | |
| Liu et al. | Production of donor-derived offspring from cryopreserved ovarian tissue in Japanese quail (Coturnix japonica) | |
| Hassan et al. | Sperm cryopreservation in oysters: A review of its current status and potentials for future application in aquaculture | |
| Yang et al. | Evaluation of cryoprotectant and cooling rate for sperm cryopreservation in the euryhaline fish medaka Oryzias latipes | |
| Castelo et al. | Influence of the thawing rate on the cryopreservation of semen from collared peccaries (Tayassu tajacu) using Tris-based extenders | |
| Wegener et al. | A successful new approach to honeybee semen cryopreservation | |
| Paredes | Exploring the evolution of marine invertebrate cryopreservation–Landmarks, state of the art and future lines of research | |
| Vitiello et al. | Effects of cooling and freezing on the motility of Ostrea edulis (L., 1758) spermatozoa after thawing | |
| Machado et al. | Maintenance of Brazilian Biodiversity by germplasm bank | |
| Hui et al. | Hatchery-scale trials using cryopreserved spermatozoa of black-lip pearl oyster, Pinctada margaritifera | |
| Singh et al. | Heparin binding proteins of buffalo bull seminal plasma and their relationship with semen freezability | |
| Smith et al. | Cryopreservation of shellfish sperm, eggs and embryos | |
| KR20130069378A (ko) | 루코스포리디움 속 미생물 유래 결빙 방지 단백질을 이용한 생식 세포 또는 생체 조직의 동결 보존 방법 | |
| Dolfi et al. | Sperm cryopreservation and in vitro fertilization techniques for the African turquoise killifish Nothobranchius furzeri | |
| Judycka et al. | Development of an efficient and standardized method for the cryopreservation of Arctic charr milt and its use in the fertilization of brook trout eggs to produce ‘sparctic’hybrids | |
| Abinawanto et al. | Effect of egg yolk on the spermatozoa quality of the botia Chromobotia macracanthus (Bleeker, 1852)(Cyprinidae) after short-term cryopreservation. | |
| Judycka et al. | Cryopreserved rainbow trout semen can be used for the fertilization of up to 8000 eggs in a single application | |
| Ojaghi et al. | Testis-specific isoform of angiotensin-converting enzyme (tACE) as a candidate marker for bull fertility | |
| Ansari et al. | Cryopreservation of Sahiwal bull epididymal spermatozoa. | |
| Afreen | Significance of cryopreservation biotechnology for protection of aquatic species | |
| Salte et al. | A protocol for the on-site use of frozen milt from rainbow trout (Oncorhynchus mykiss Walbaum) applied to the production of progeny groups: comparing males from different populations | |
| Lucas et al. | Cryoprotectant agents and cooling effect on embryos of Macrobrachium amazonicum | |
| Andriani et al. | Preliminary Study on Testicular Germ Cell Transplantation of Endemic Species Oryzias celebensis |