ITDP930003A1

ITDP930003A1 - PIPETTING AND / OR SUCTION DEVICE FOR LIQUIDS, FLUIDS AND IN VITRO GROWING GROUNDS

Info

Publication number: ITDP930003A1
Application number: IT000003A
Authority: IT
Inventors: Impiombato Francesco Saverio Ambesi; Francesco Curcio
Original assignee: Impiombato Francesco Saverio Ambesi; Francesco Curcio
Priority date: 1993-07-13
Filing date: 1993-07-13
Publication date: 1995-01-13
Also published as: IT1265917B1; ITDP930003A0

Description

Descrizione del trovato avente per titolo: Description of the invention having as title:

"DISPOSITIVO DI PIPETTAGGIO E/0 ASPIRAZIONE PER LIQUIDI, FLUIDI E PER TERRENI DI COLTURE IN VITRO". "DEVICE FOR PIPETTING AND / 0 SUCTION FOR LIQUIDS, FLUIDS AND FOR MEDIUMS OF IN VITRO CULTURES".

RIASSUNTO SUMMARY

Dispositivo di aspirazione per terreni di colture in vitro o altri fluidi, quali soluzioni o sospensioni o liquidi o gel o semisolidi, sterili o meno, per lo svuotamento parziale o totale di recipienti, quando siano da evitarsi contaminazioni o cross-contaminazioni da cellule eucariote note o ignote e/o da microorganismi noti o ignoti e/o da agenti saprofiti noti o ignoti e/o da agenti indifferenti noti o ignoti e/o da agenti parassiti noti o ignoti e/o da agenti simbiotici noti o ignoti comprendente un tubicino di pipettaggio o suzione (1,11), un'impugnatura (5,15), mezzi di aspirazione (8,9,19) per creare il vuoto nel detto tubicino di pipettaggio o suzione (1,11), eventuali mezzi a valvola di controllo (7,9,18) di detto vuoto, detto tubicino di pipettaggio o suzione (1,11) presentando diametro interno e spessore di pareti adatti relativamente all'uso e al tipo di materiale e venendo sottoposto, tra un pipettaggio e l'altro, o tra l'aspirazione di un terreno di coltura e l'altro ad un ciclo di riscaldo ad una temperatura di almeno 500?C per almeno un secondo e di successivo raffreddamento a temperatura ambiente. Suction device for in vitro culture media or other fluids, such as solutions or suspensions or liquids or gels or semisolids, sterile or not, for the partial or total emptying of containers, when contamination or cross-contamination by known eukaryotic cells is to be avoided or unknown and / or from known or unknown microorganisms and / or from known or unknown saprophytic agents and / or from known or unknown indifferent agents and / or from known or unknown parasitic agents and / or from known or unknown symbiotic agents comprising a tube of pipetting or suction (1,11), a handle (5,15), suction means (8,9,19) to create the vacuum in the said pipetting or suction tube (1,11), eventual valve means control (7,9,18) of said vacuum, said pipetting or suction tube (1,11) having an internal diameter and thickness of walls suitable for the use and type of material and being subjected, between a pipetting and the other, or between the aspiration of a culture medium and the other to u n heating cycle at a temperature of at least 500 ° C for at least one second and subsequent cooling at room temperature.

CAMPO DI APPLICAZIONE FIELD OF APPLICATION

Forma oggetto del presente trovato un dispositivo di pipettaggio o di aspirazione per liquidi, fluidi o terreni di colture in vitro come espresso nella rivendicazione principale. The present invention relates to a pipetting or suction device for liquids, fluids or media of in vitro cultures as expressed in the main claim.

Il dispositivo di pipettaggio o di aspirazione secondo il trovato ha vantaggiosa applicazione sia in laboratori di ricerca che di analisi, in ospedali o altre strutture biomediche e sanitarie in cui si usano colture in vitro o in cui occorre pipettare con precisione quantit? o microquantit? note di liquidi o fluidi. The pipetting or suction device according to the invention has an advantageous application both in research and analysis laboratories, in hospitals or other biomedical and sanitary structures in which in vitro cultures are used or in which it is necessary to pipette accurately quantities. or microquantit? notes of liquids or fluids.

Pi? particolarmente, il dispositivo di pipettaggio e/o aspirazione secondo il trovato viene utilizzato ogni qualvolta bisogna eseguire le operazioni di pipettaggio di quantit? o microquantit? di liquidi o fluidi diversi, oppure ogni qualvolta ? necessario eseguire operazioni di svuotamento o cambio del terreno di coltura in cui vivono le dette colture e siano assolutamente da evitarsi, contaminazioni o cross-contaminazioni. Pi? in particular, the pipetting and / or aspiration device according to the invention is used whenever it is necessary to carry out quantity pipetting operations. or microquantit? of different liquids or fluids, or whenever? it is necessary to empty or change the culture medium in which these cultures live and contamination or cross-contamination must be absolutely avoided.

STATO DELLA TECNICA STATE OF THE TECHNIQUE

Pipettare ripetutamente con precisione quantit? e soprattutto microquantit? note di soluzioni, liquidi e fluidi, in particolare se si tratta di materiale sterile e/o scevro da RNAsi e/o DNAsi o da acidi nucleici (DNA, RNA) , richiede l'uso di pipette o micropipette automatiche dotate di puntali monouso, anche steriliz zabili , o acquistati gi? sterili. Repeatedly pipette accurately quantity? and above all microquantit? known of solutions, liquids and fluids, in particular if it is sterile and / or free from RNase and / or DNAse or nucleic acids (DNA, RNA), requires the use of automatic pipettes or micropipettes equipped with disposable tips, also sterilizable, or purchased already? sterile.

Uno degli aspetti pi? critici del pipettaggio di detti liquidi o fluidi consiste nel cambio del puntale, in alcune applicazioni molto frequente. Questo comporta costi dovuti al numero dei puntali, spesso sterili, monouso e soprattutto in relazione al tempo necessario al cambio di detti puntali, spesso da eseguirsi con mani guantate (guanti in latex o altro materiale) cos? come richiesto dalle tecniche di sterilit?, cosa che per? richiede abilit? e tempo. One of the most important aspects? critical of the pipetting of said liquids or fluids consists in the change of the tip, in some applications very frequent. This involves costs due to the number of tips, often sterile, disposable and above all in relation to the time needed to change said tips, often to be performed with gloved hands (latex gloves or other material). as required by infertility techniques, what for? requires skills? and time.

Le operazioni di svuotamento dei recipienti o di cambio di terreni di coltura sono eseguiti in diverse applicazioni biomediche: le colture in vitro sono oggi largamente diffuse, e il loro uso si va ulteriormente e rapidamente espandendo sia nelle applicazioni della ricerca biomedica sia nei laboratori di ricerca che in ospedali o in altre strutture biomediche e sanitarie. Uno degli aspetti pi? critici delle colture in vitro, specie se si tratta di cellule umane o di altro animale , ? il mantenimento di rigorose condizioni di sterilit? che evit ino le contaminaz ioni da micro organismi (batteri, microplasmi, virus ecc) e/o da miceti e/o da altre linee cellulari (cross- contaminazioni) . The operations of emptying the containers or changing the culture media are performed in various biomedical applications: in vitro cultures are now widespread, and their use is further and rapidly expanding both in biomedical research applications and in research laboratories. than in hospitals or other biomedical and health facilities. One of the most important aspects? critical of in vitro cultures, especially if they are human or other animal cells,? the maintenance of strict conditions of sterility? which avoids contamination by micro organisms (bacteria, microplasmas, viruses, etc.) and / or by fungi and / or other cell lines (cross-contamination).

Mentre le contaminazioni da batteri e/o miceti sono spesso controllabili con l'aggiunta di antibiotici e/o antimicotici al terreno di coltura, le contaminazioni da micoplasmi e le cross-contaminazioni da altri tipi cellulari non lo sono ancora e possono portare ad alterazioni che inficiano i risultati sperimentali. While bacterial and / or fungal contaminations are often controllable by adding antibiotics and / or antifungals to the culture medium, mycoplasma contamination and cross-contamination from other cell types are not yet and can lead to alterations that invalidate the experimental results.

Queste problematiche sono molto sentite da tutti gli operatori nel campo, per esempio, delle "Banche di Cellule", dove le colture in vitro sono raccolte, amplificate, caratterizzate e congelate, per poi essere messe, su richiesta, a disposizione degli utenti. La maggior parte delle contaminazioni o crosscontaminazioni avvengono durante il cambio di terreno che si effettua almeno bisettimanalmente ed ? indispensabile per la sopravvivenza delle colture. Nelle tecnologie di colture cellulari, per aggiungere fluidi ai terreni di coltura si utilizzano pipette sterili e monouso in plastica, o in vetro, comunque sterilizzate ovvero sterilizzabili al calore, mentre, per prelevare il terreno da scartare vengono attualmente usate pipette, ad esempio "Pasteur", in origine anch'esse sterili, che dovrebbero essere sostituite dopo ogni applicazione. Queste pipette sono collegate ad un sistema che, per suzione, permette di aspirare il terreno dal recipiente contenente le colture. Il terreno cos? aspirato viene, in genere, eliminato periodicamente dopo averlo lasciato accumulare in apposite "trappole". Al momento del cambio del terreno, un numero notevole di contenitori vengono trasferiti dall 'incubatore per colture alla cappa sterile al cui interno sono generalmente presenti un sistema di vuoto ed un "becco Bunsen" per sterilizzare alla fiamma. Sotto detta cappa sterile, i contenitori delle colture, possono quindi essere aperti in condizioni di sterilit? per il tempo necessario ad espletare le varie operazioni. L'operazione pi? frequente e routinaria ? il cambio di terreno durante il quale quello esaurito viene tutto, o in parte, scartato e sostituito con terreno fresco. Per far ci?, ogni recipiente deve essere, nel pi? breve tempo possibile, sottoposto alle operazioni di apertura, aspirazione del terreno di coltura usato, aggiunta del terreno nuovo e chiusura. Infine le colture devono essere riposte nuovamente nell 'incubatore . Tutta la procedura deve durare pochi minuti perch? le colture non resistono a lungo al di fuori della particolare atmosfera dell 'incubatore . Si tratta di procedure impegnative, necessariamente rapide, ripetitive e routinarie: in queste condizioni avviene di rado, e sempre con notevole dispendio di tempo, che l'operatore cambi ogni volta, tra un contenitore di colture e l'altro, la pipetta di aspirazione. La pratica piu' frequente ? quella di aspirare il terreno da una serie di contenitori, di solito qualche decina, prima di sostituire la pipetta di aspirazione. Durante queste operazioni routinarie di cambio del terreno di colture, succede che un intero gruppo di contenitori venga contaminato da microorganismi quali virus, batteri, lieviti, muffe o cellule diverse. La contaminazione pu? avvenire attraverso la punta della pipetta di prelievo a causa di gocce microscopiche depositate sull'esterno o interno della stessa pipetta. Oltre al costo insito del materiale che da sostituirsi dopo ogni applicazione bisogna tenere in conto anche il costo del tempo speso per effettuare la sostituzione del dispositivo, pipetta o altro, tra operazioni successive, nonch?' i costi delle eventuali contaminazioni: molto spesso i tempi di sostituzione del dispositivo di aspirazione sono uguali o addirittura superiori ai tempi necessari per l'esecuzione della manipolazione vera e propria delle colture. Per questo motivo, molto spesso l'operatore evita di cambiare il dispositivo in oggetto tra un'operazione e l'altra con le conseguenze catastrofiche di possibili contaminazioni o cross-contaminazioni. Per ovviare agli inconvenienti della tecnica nota e per ottenere altri, ulteriori vantaggi i proponenti hanno studiato e sperimentato il presente trovato. These problems are deeply felt by all operators in the field, for example, of "Cell Banks", where in vitro cultures are collected, amplified, characterized and frozen, and then made available, upon request, to users. Most of the contaminations or cross-contaminations occur during the change of soil which is carried out at least biweekly and? indispensable for the survival of crops. In cell culture technologies, sterile and disposable plastic or glass pipettes, in any case sterilized or heat sterilizable, are used to add fluids to culture media, while pipettes, for example "Pasteur ", also originally sterile, which should be replaced after each application. These pipettes are connected to a system which, by suction, allows the soil to be aspirated from the container containing the cultures. The land so? aspirated is generally eliminated periodically after having allowed it to accumulate in special "traps". When the medium is changed, a considerable number of containers are transferred from the culture incubator to the sterile hood which generally contains a vacuum system and a "Bunsen burner" for flame sterilization. Under this sterile hood, the culture containers can therefore be opened in sterile conditions. for the time necessary to carry out the various operations. The operation pi? frequent and routine? the change of land during which the used one is all or part of it discarded and replaced with fresh soil. To do this, each container must be, in the most? short time possible, subjected to the operations of opening, aspiration of the used culture medium, addition of new soil and closure. Finally, the cultures must be returned to the incubator. The whole procedure must last a few minutes why? the cultures do not resist for long outside the particular atmosphere of the incubator. These are demanding procedures, necessarily rapid, repetitive and routine: in these conditions it rarely happens, and always with considerable expenditure of time, that the operator changes the suction pipette every time, between one container of cultures and another. . The most frequent practice? that of sucking the soil from a series of containers, usually a few dozen, before replacing the suction pipette. During these routine operations of changing the culture medium, it happens that a whole group of containers is contaminated by microorganisms such as viruses, bacteria, yeasts, molds or different cells. Contamination can? occur through the tip of the withdrawal pipette due to microscopic droplets deposited on the outside or inside of the pipette itself. In addition to the inherent cost of the material that must be replaced after each application, it is also necessary to take into account the cost of the time spent to replace the device, pipette or other, between successive operations, as well as? ' the costs of any contamination: very often the replacement times of the suction device are equal to or even higher than the times necessary for the execution of the actual manipulation of the crops. For this reason, very often the operator avoids changing the device in question between operations with the catastrophic consequences of possible contamination or cross-contamination. In order to obviate the drawbacks of the known art and to obtain other advantages, the proponents have studied and tested the present invention.

ESPOSIZIONE DEL TROVATO EXPOSURE OF THE FOUND

II presente trovato ? espresso e caratterizzato nella rivendicazione principale. The present invention? expressed and characterized in the main claim.

Le rivendicazioni secondarie espongono varianti all'idea di soluzione principale. The secondary claims set out variants to the main solution idea.

Scopo del presente trovato ? quello di fornire un dispositivo di pipettaggio o di aspirazione di semplice realizzazione e di estrema efficacia, per pipettare liquidi e/o fluidi anche in microquantit?, o per aspirare, mediante collegamento ad un sistema di vuoto, il terreno di coltura da contenitori di colture di cellule o di microorganismi o di virus (piastre di "Petri", tubi ecc.) o per aspirare altri fluidi. Il dispositivo di pipettaggio e aspirazione secondo il trovato pu? essere usato nei laboratori di qualsiasi tipo e natura, o in laboratori per colture di cellule e/o tessuti, o microbiologici, o virologici per sostituire le pipette, automatiche e non, di tipo noto. Purpose of the present invention? that of providing a pipetting or aspiration device that is simple to make and extremely effective, to pipette liquids and / or fluids, even in microquantities, or to aspirate, by connecting to a vacuum system, the culture medium from culture containers of cells or microorganisms or viruses ("Petri dishes", tubes, etc.) or to aspirate other fluids. The pipetting and suction device according to the invention can? be used in laboratories of any type and nature, or in laboratories for cell and / or tissue culture, or microbiological, or virological to replace automatic and non-automatic pipettes of known type.

Il dispositivo secondo il trovato presenta inoltre caratteristiche di solidit? e di resistenza a stress meccanici, chimici e soprattutto a variaz ioni rapide e ripetute di temperatura . I l trovato consi s te nella previsione di un tubicino in metallo o in materiale ceramico o plastico o vetroso termoresistente, di adatto diametro, con una estremit? collegata, vantaggiosamente in maniera meccanicamente modulabile, mediante un raccordo facilmente impugnabile, termoresistente e termoisolante, ad un sistema di creazione del vuoto e/o ad un sistema in grado di generare e modulare pressioni negative e positive. La sua estremit? distale o punta, quando deve entrare in contatto in maniera sequenziale con una pluralit? di liquidi o fluidi, ovvero di terreni presenti in diversi contenitori di colture, pu? essere sterilizzata rapidamente e ripetutamente alla fiamma, per una lunghezza di 1-4 cm, tra un pipettaggio e l'altro, ovvero tra uno svuotamento e l'altro. Durante la fase di pulizia e/o di sterilizzazione, la sua estremit? distale deve raggiungere una temperatura uguale o superiore ad almeno 500?C per almeno un secondo. Successivamente alla purificazione e/o sterilizzazione il dispositivo secondo il trovato ? in grado di raffreddarsi rapidamente, rendendo cos? possibile effettuare il pipettaggio e/o l'aspirazione seriale di liquidi o fluidi, o terreni, in maniera sequenziale, in un notevole numero di contenitori anche per colture in tempi molto brevi, dell'ordine di 2-5 secondi per contenitore. Inoltre la sistematica purificazione e/o sterilizzazione del dispositivo secondo il trovato garantisce l'eliminazione di diverse impurit? chimiche e l'assoluta assenza di contaminazioni e/o di cross-contaminazioni delle colture da parte di altre popolazioni cellulari o microbiologiche o virali. The device according to the invention also has characteristics of solidity. and resistance to mechanical and chemical stresses and above all to rapid and repeated temperature variations. The invention consists in the provision of a tube made of metal or of ceramic or plastic or heat-resistant glass material, of suitable diameter, with one end. connected, advantageously in a mechanically modulable manner, by means of an easily gripable, heat-resistant and heat-insulating connection, to a vacuum creation system and / or to a system capable of generating and modulating negative and positive pressures. Its extremity? distal or tip, when it must come into contact sequentially with a plurality? of liquids or fluids, or of soils present in different containers of crops, pu? be quickly and repeatedly flame sterilized, for a length of 1-4 cm, between one pipetting and the next, or between one emptying and the next. During the cleaning and / or sterilization phase, its extremity? distal must reach a temperature equal to or higher than at least 500 ° C for at least one second. After purification and / or sterilization, the device according to the invention? able to cool down quickly, making it so? It is possible to carry out pipetting and / or serial aspiration of liquids or fluids, or soils, in a sequential manner, in a considerable number of containers, even for cultures, in a very short time, of the order of 2-5 seconds per container. Furthermore, the systematic purification and / or sterilization of the device according to the invention guarantees the elimination of various impurities. and the absolute absence of contamination and / or cross-contamination of the cultures by other cellular or microbiological or viral populations.

II trovato permette di sostituire tutti i tipi di pipette attualmente usate nella manipolazione di quantit? e/o microquantit? di liquidi o fluidi e nello svuotamento di contenitori per colture. Il trovato permette di risparmiare sia tempo di esecuzione che costi globali, dando risultati garantiti di assenza di impurit?, di contaminazione e di cross-contaminazione. La procedura di utilizzo del dispositivo pipettatore o aspiratore secondo il trovato ? valida ogni qualvolta si deve manipolare con precisione quantit? o microquantit? di liquidi o fluidi, o aspirare, eliminando completamente o in parte, il terreno o il mezzo liquido o semi-solido da un qualsiasi contenitore sterile contenente colture ovvero sedimenti o precipitati. The invention makes it possible to replace all types of pipettes currently used in the manipulation of quantities. and / or microquantit? liquids or fluids and when emptying crop containers. The invention allows to save both execution time and overall costs, giving guaranteed results of absence of impurities, contamination and cross-contamination. The procedure for using the pipettor or aspirator device according to the invention? valid whenever it is necessary to manipulate with precision quantity? or microquantit? of liquids or fluids, or suck up, completely or partially eliminating, the medium or liquid or semi-solid medium from any sterile container containing cultures or sediments or precipitates.

Impugnando il raccordo termoisolante, vantaggiosamente presente ma non vincolante, che collega il dispositivo secondo il trovato al sistema di creazione di vuoto, il dispositivo secondo il trovato viene utilizzato per pulire o sterilizzare la punta, per poter sterilmente ed in assenza di impurit?, pipettare con precisione quantit? o microquant it? di liquidi o fluidi, o aspirare il terreno da diversi contenitori di colture, o altri contenitori che richiedono manipolazioni sterili. La punta del nuovo dispositivo, sottoposta alla fiamma, raggiunge istantaneamente temperature elevatissime per la lunghezza interessata in quanto viene mantenuta una vigorosa aspirazione di aria grazie al collegamento con il sistema di vuoto e grazie allo spessore ottimale della parete del tubicino. Ad esempio nel caso di dispositivo realizzato in materiale termoresistente che diventa rosso a temperature elevate, il raggiungimento di una completa sterilizzazione del nuovo dispositivo pu? essere visivamente controllato per il raggiungimento del color rosso. In caso di fiamma insufficiente, di vuoto insufficiente, di non corretta durata dell?esposizione alla fiamma o di non corretto posizionamento della punta del nuovo dispositivo rispetto alla fiamma, la punta non diventa rossa. A questo punto il problema pu? essere facilmente identificato l'operazione ripetuta fino al raggiungimento della temperatura corretta . Nessun enzima o organi smo n? DNA o alt ro mater iale genet ico o biologico noto ? in grado di sopravvivere e rimanere funzionale, tantomeno infettante a quel le temperature. La pulizia e la sterilit? del nuovo dispositivo ? quindi certa ed assoluta. Non appena viene tolta dalla fiamma, la punta si raffredda, sempre per effetto della vigorosa aspirazione di aria attraverso il lume interno di piccolo diametro e grazie allo spessore ottimale della parete, in un tempo dell'ordine del secondo circa, riassumendo il colore originale. La rapidit? del raffreddamento dipende anch'essa dalla vigorosa aspirazione dell'aria che viene mantenuta durante la fase di raffreddamento e dal ridotto spessore del lume interno e della parete del tubicino. Dopo un tempo dell'ordine di uno o due secondi, la punta purificata e sterilizzata del dispositivo secondo il trovato pu? essere immersa nel liquido del contenitore, dove il liquido o fluido deve essere ancora prelevato o pipettato, ovvero il terreno deve essere ancora eliminato. In pratica questo intervallo corrisponde materialmente al tempo che si impiega per trasferire il dispositivo secondo il trovato dalla fiamma al successivo contenitore. Nell'attimo in cui l'estremit? sterilizzata del dispositivo secondo il trovato entra in contatto con il liquido o fluido, o con il terreno del successivo contenitore, ? possibile un'ulteriore verifica della correttezza della procedura. Se del liquido "schizza" nel punto di contatto tra la punta e la superficie del terreno, significa che la temperatura della punta del dispositivo secondo il trovato ? ancora troppo elevata, il che pu? essere conseguenza di un vuoto insufficiente o di un intervallo di tempo troppo breve. E? da notare che la procedura consente delle verifiche di pulizia e sterilit? della punta del dispositivo che non erano possibili con la tecnica precedente. La pulizia e la sterilizzazione rapidissima e assoluta che si raggiunge e che ? accertabile mediante una semplice osservazione visiva, permette di escludere qualsiasi fonte di impurit? o di contaminazione o di cross-contaminazione durante l'aspirazione. By holding the thermo-insulating fitting, advantageously present but not binding, which connects the device according to the invention to the vacuum creation system, the device according to the invention is used to clean or sterilize the tip, in order to be able to pipette sterile and in the absence of impurities. with precision quantity? or microquant it? of liquids or fluids, or vacuuming soil from different crop containers, or other containers that require sterile handling. The tip of the new device, subjected to the flame, instantly reaches very high temperatures for the length concerned as a vigorous suction of air is maintained thanks to the connection with the vacuum system and thanks to the optimal thickness of the tube wall. For example, in the case of a device made of heat-resistant material that turns red at high temperatures, the achievement of complete sterilization of the new device can? be visually checked for the attainment of the red color. In case of insufficient flame, insufficient vacuum, incorrect duration of exposure to the flame or incorrect positioning of the tip of the new device with respect to the flame, the tip does not turn red. At this point the problem can? be easily identified the repeated operation until the correct temperature is reached. No enzyme or organism n? DNA or other known genetic or biological material? able to survive and remain functional, let alone infectious at those temperatures. Cleanliness and sterility of the new device? therefore certain and absolute. As soon as it is removed from the flame, the tip cools, again due to the vigorous suction of air through the small diameter internal lumen and thanks to the optimal thickness of the wall, in a time of about a second, summarizing the original color. The speed of the cooling also depends on the vigorous suction of the air which is maintained during the cooling phase and on the reduced thickness of the internal lumen and of the wall of the tube. After a time of the order of one or two seconds, the purified and sterilized tip of the device according to the invention can? be immersed in the liquid of the container, where the liquid or fluid has yet to be withdrawn or pipetted, i.e. the medium has yet to be discarded. In practice, this interval corresponds materially to the time it takes to transfer the device according to the invention from the flame to the next container. In the moment in which the extremity? after sterilization of the device according to the invention, it comes into contact with the liquid or fluid, or with the ground of the subsequent container, further verification of the correctness of the procedure is possible. If liquid "splashes" at the point of contact between the tip and the surface of the ground, does this mean that the temperature of the tip of the device according to the invention? still too high, which can? be the consequence of insufficient vacuum or too short a time interval. AND? to note that the procedure allows for the verification of cleanliness and sterility? of the device tip that were not possible with the prior technique. The rapid and absolute cleaning and sterilization that can be achieved and what? ascertainable through a simple visual observation, allows to exclude any source of impurities? or contamination or cross-contamination during aspiration.

DESCRIZIONE DEi DISEGNi DESCRIPTION OF THE DRAWINGS

Con riferimento alla figura 1 allegata, il numero di riferimento 1 indica generalmente un dispositivo di pipettaggio secondo il trovato. With reference to the attached figure 1, the reference number 1 generally indicates a pipetting device according to the invention.

Con riferimento alla figura 2 allegata, il numero di riferimento 10 indica generalmente un dispositivo di aspirazione secondo il trovato. Il dispositivo di aspirazione 10 secondo il trovato ? costituito da un tubicino 11 in metallo, ovvero in materiale ceramico o plastico o vetroso termoresistente, di diametro ottimale a seconda del materiale in cui e' realizzato. Detto tubicino 11 presenta una punta 12 libera e aperta e l?altra punta 13 collegata con un raccordo 14 associato ad un sistema di creazione del vuoto 19 di tipo meccanico o idraulico. Detto raccordo 14 pu? essere costituito in materiale parzialmente termoresistente ed elastico quale gomma al silicone, o rigido quale resine epossidiche, o materiali analoghi. Detto tubicino 11 ? vantaggiosamente associato ad un'impugnatura 15 termoresistente e termoisolante, costituita nel caso di specie da un tubo a pareti spesse di gomma al silicone o di altro materiale analogo. In un punto intermedio del condotto 16 collegante l'impugnatura 15 con il sistema di creazione del vuoto 19 ? vantaggiosamente inserita almeno una trappola 17 per il recupero del fluido o dei terreni aspirati. Il tubicino sottile 11 costituente il dispositivo di aspirazione 10 secondo il trovato ? costituito in platino, in lega metallica quale platinoiridio o in altri metalli o in materiale ceramico o plastico o vetroso termoresistente, in grado di sopportare numerosi e rapidi cambiamenti di temperatura dalla temperatura ambiente ad una temperatura di almeno 500?C e viceversa. In una forma preferenziale di realizzazione, il tubicino sottile 11 realizzato in lega di platino-iridio ha una lunghezza compresa tra dieci e venti centimetri, un diametro esterno dell'ordine di 2 mm circa ed uno spessore della parete compreso tra 0 , 3 e 0 , 7 mm, vantaggiosamente 0 , 5 mm . Nel caso di specie , l'impugnatura 15 presenta mezzi ' di temporanea interruzione 18 che, chiudendo il collegamento fra il tubicino 11 ed il sistema di creazione del vuoto 19, bloccano l'aspirazione. Nel dispositivo di aspirazione 10 secondo il trovato, fra un'operazione di aspirazione e l'altra, un tratto di lunghezza definita della punta libera 12 del tubicino 11 viene riscaldato fino ad una temperatura di almeno 500?C per almeno un secondo, ad esempio facendolo cooperare con la fiamma del becco Bunsen, e quindi fatto raffreddare all'aria per assicurare una sterilizzazione efficace e sicura dello stesso tubicino 11. Nel caso di tubicino 11 in materiale metallico, questo riscaldamento della punta 12 ? realizzato fino a portare detta punta 12 al calor rosso. With reference to the attached figure 2, the reference number 10 generally indicates a suction device according to the invention. The suction device 10 according to the invention? consisting of a metal tube 11, or in ceramic or plastic or heat-resistant glass material, of optimal diameter according to the material in which it is made. Said tube 11 has a free and open tip 12 and the other tip 13 connected to a fitting 14 associated with a mechanical or hydraulic vacuum creation system 19. Said fitting 14 can? be made of partially heat-resistant and elastic material such as silicone rubber, or rigid such as epoxy resins, or similar materials. Said tube 11? advantageously associated with a heat-resistant and heat-insulating handle 15, constituted in this case by a thick-walled tube of silicone rubber or other similar material. At an intermediate point of the duct 16 connecting the handle 15 with the vacuum creation system 19? advantageously inserted at least one trap 17 for the recovery of the sucked fluid or soils. The thin tube 11 constituting the suction device 10 according to the invention? made of platinum, metal alloy such as platinum iridium or other metals or ceramic or plastic or heat-resistant glass material, capable of withstanding numerous and rapid changes in temperature from ambient temperature to a temperature of at least 500 ° C and vice versa. In a preferential embodiment, the thin tube 11 made of platinum-iridium alloy has a length of between ten and twenty centimeters, an external diameter of the order of about 2 mm and a wall thickness of between 0, 3 and 0. , 7 mm, advantageously 0, 5 mm. In this case, the handle 15 has temporary interruption means 18 which, by closing the connection between the small tube 11 and the vacuum creation system 19, block the suction. In the suction device 10 according to the invention, between one suction operation and the next, a portion of defined length of the free tip 12 of the small tube 11 is heated up to a temperature of at least 500 ° C for at least one second, for example making it cooperate with the flame of the Bunsen burner, and then allowing it to cool in the air to ensure an effective and safe sterilization of the same tube 11. In the case of tube 11 made of metal material, this heating of the tip 12? made to bring said tip 12 to red heat.

Sia durante l'operazione di riscaldamento che durante l'operazione di raffreddamento, il tubicino ? in collegamento con il sistema di vuoto 19 per assicurare una aspirazione cont?nua di aria tale da garantire tempi di riscaldamento/raffreddamento molto ridotti, di almeno un secondo. Queste operazioni di riscaldamento e raffreddamento sono molto semplici e veloci e rendono l'operazione di sterilizzazione molto pratica e sicura. Le due figure allegate sono fornite a titolo esemplificativo, non limitativo, ed illustrano due soluzioni preferenziali del dispositivo di pipettaggio ed aspirazione secondo il trovato. Both during the heating operation and during the cooling operation, the tube? in connection with the vacuum system 19 to ensure a continuous suction of air such as to guarantee very short heating / cooling times, of at least one second. These heating and cooling operations are very simple and fast and make the sterilization operation very practical and safe. The two attached figures are provided by way of non-limiting example and illustrate two preferential solutions of the pipetting and suction device according to the invention.

Claims

CLAIMS 1 - Pipetting or suction device for liquids or fluids, such as solutions or suspensions or liquids or gels or semisolids, free from RNase, and / or DNAse, and / or nucleic acids (RNA, DNA), and / or sterile or not or for in vitro culture media, or for the partial or total emptying of in vitro culture media, from containers, when passive transport of impurities is to be avoided, or contamination or cross-contamination by known or unknown eukaryotic cells and / or from known or unknown microorganisms and / or from known or unknown saprophytic agents and / or from known or unknown indifferent agents and / or from known or unknown parasitic agents and / or from known or unknown symbiotic agents comprising a pipetting or suction tube (1 , 11), a handle (5,15), suction means (8,9,19) to create the vacuum in said pipetting or suction tube (1,11), possible control valve means (7, 9.18) of said vacuum, characterized in that the pipetting or suction tube (1.11) has internal meter and walls of suitable thickness in relation to the use and type of material, resistant to a temperature of at least 500 ° C for at least one second. 2 - Device as claimed in Claim 1, characterized in that the pipetting or suction tube (1.11) has a length of between five and twenty cm. 3 - Device as claimed in Claim 1 or 2, characterized in that the pipetting or suction tube (1, 11) has an external diameter of around 2 mm. 4 - Device as claimed in one or the other of the preceding claims, characterized in that the pipetting or suction tube (1,11), if it is made of metal or metal alloy, has a wall thickness of between 0 , 3 and 0.7 mm, advantageously 0.5 mm. 5 - Device as claimed in any one of the preceding claims to 4, characterized in that said pipetting or suction tube (1.11)? in platinum. 6 - Device as claimed in one or the other of the preceding claims to 4, characterized in that said pipetting or suction tube (1,11)? in metal alloy such as platinum-iridium. 7 - Device as claimed in one or the other of the preceding claims to 4, characterized in that said pipetting or suction tube (1,11)? in ceramic material. 8 - Device as claimed in any one of the preceding claims to 4, characterized in that said pipetting or suction tube (1.11)? in plastic material. 9 - Device as claimed in one or the other of the preceding claims to 4, characterized in that said pipetting or suction tube (1,11)? in heat-resistant glass material. 10 - Method of sterilizing a pipetting or suction device (0,10) for liquids or fluids, or for in vitro culture media of the type referred to in the preceding claims, characterized in that the end part of the pipetting tube or of suction (1.11), between the pipetting of one liquid or fluid and another, or between the aspiration of a culture medium and the other, is subjected to a heating cycle at a temperature of at least 500? Celsius for at least one second and subsequent cooling to room temperature. 11 - Method according to one or the other of the preceding claims from 10 onwards, characterized in that the vacuum creation system (9,19) is activated during heating. 12 - Method as claimed in one or the other of the preceding claims from 10 onwards, characterized in that the vacuum creation system (9,19) is operated during the cooling process. 13 - Sterilization method as claimed in Claim 10, characterized in that the end part (12) of the suction tube (11) is heated for a length of 2-4 cm. 14 - Pipetting method by means of a special button, characterized by the fact that it allows the fine modulation of the positive and negative pressure (7).