ITBA20120052A1 - "DEVICE FOR THE GASIFICATION OF A LIPID MATRIX IN ENVIRONMENT AT A CONTROLLED TEMPERATURE" - Google Patents

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ITBA20120052A1
ITBA20120052A1 IT000052A ITBA20120052A ITBA20120052A1 IT BA20120052 A1 ITBA20120052 A1 IT BA20120052A1 IT 000052 A IT000052 A IT 000052A IT BA20120052 A ITBA20120052 A IT BA20120052A IT BA20120052 A1 ITBA20120052 A1 IT BA20120052A1
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Description

"Dispositivo e metodo di gassificazione di una matrice lipidica in ambiente a temperatura controllata" "Device and method of gasification of a lipid matrix in a controlled temperature environment"

Forma oggetto del presente trovato un procedimento per la gassificazione di una o più matrici lipidiche in tempi ed in ambienti a temperature controllate, al fine di ottenere molecole o nuovi composti chimici o migliorare le caratteristiche chimiche e/o fisiche delle matrici lipidiche utilizzate. The present invention relates to a process for the gasification of one or more lipid matrices in times and in environments at controlled temperatures, in order to obtain molecules or new chemical compounds or to improve the chemical and / or physical characteristics of the lipid matrices used.

Dette molecole o detti nuovi composti o dette matrici migliorate, sono da utilizzare in campo medico, chirurgico, farmaceutico, veterinario e cosmetico per, ad esempio, terapie antibatteriche, antineoplastiche, antiradicali, ed altro ancora, o nei settori agroalimentare e chimico industriale. Said molecules or said new compounds or said improved matrices, are to be used in the medical, surgical, pharmaceutical, veterinary and cosmetic fields for, for example, antibacterial, antineoplastic, antiradical therapies, and more, or in the agri-food and chemical industrial sectors.

In particolare, scopo del presente trovato à ̈ quello di fornire un dispositivo ed un metodo per ottenere una reazione all'interno di una matrice lipidica, costituita ad esempio da olio extra vergine di oliva, olio di colza, olio di semi di girasole, olio di mandorla, olio di argan, oli essenziali ecc, attraverso un gas fatto gorgogliare ail'interno di detta matrice lipidica opportunamente predisposta ailo scopo. In particular, the object of the present invention is to provide a device and a method for obtaining a reaction within a lipid matrix, consisting for example of extra virgin olive oil, rapeseed oil, sunflower oil, oil of almond, argan oil, essential oils, etc., through a gas bubbled inside said lipid matrix suitably prepared for the purpose.

L'ossido nitrico o altre serie di gas, quali, ad esempio, l'ozono, il monossido di carbonio, i gas medicali o loro isotopi ecc., possono essere utilmente utilizzati per la realizzazione del metodo, i quali reagiranno all'interno dell'olio extra vergine di oliva o di altra matrice lipidica, ottenendo cosi, molecole di gas rese stabili da sostanze naturali, o la formazione di nuove molecole o composti chimici di particolare interesse conseguenti alle reazioni chimiche complesse avvenute, o il miglioramento delle caratteristiche chimico-fisiche delle matrici lipidiche utilizzate. Nitric oxide or other series of gases, such as, for example, ozone, carbon monoxide, medical gases or their isotopes, etc., can be usefully used for the realization of the method, which will react inside the 'extra virgin olive oil or other lipid matrix, thus obtaining gas molecules made stable by natural substances, or the formation of new molecules or chemical compounds of particular interest resulting from the complex chemical reactions that have taken place, or the improvement of the chemical characteristics. physics of the lipid matrices used.

II metodo prevede che possano essere fatti gorgogliare uno o più gas contemporaneamente o in successione, compatibilmente con le proprietà chimicofisiche dei vari gas al fine di evitare condizioni dannose agli operatori e all'ambiente. Un ulteriore scopo del presente trovato à ̈ quello fornire un metodo per la solubilizzazione e stabilizzazione di molecole di gas (NO, CO, 03, ecc.) ai fine di farle penetrare all'interno di olio extravergine di oliva o altra idonea matrice lipidica, con controllo delle temperature e delle portate di erogazione a seconda del gas utilizzato. The method envisages that one or more gases can be bubbled simultaneously or in succession, compatibly with the chemical and physical properties of the various gases in order to avoid conditions that are harmful to operators and the environment. A further object of the present invention is to provide a method for the solubilization and stabilization of gas molecules (NO, CO, 03, etc.) in order to make them penetrate into extra virgin olive oil or other suitable lipid matrix, with control of temperatures and delivery rates depending on the gas used.

In altri termini, il trovato ha lo scopo di ottenere molecole di gas, circondate da olio extravergine di oliva, rese stabili da altre sostanze naturali, o nuove molecole o composti chimici o il miglioramento delle matrici lipidiche. In other words, the purpose of the invention is to obtain gas molecules, surrounded by extra virgin olive oil, made stable by other natural substances, or new molecules or chemical compounds or the improvement of lipid matrices.

Allo scopo di rilevare eventuali modifiche nella struttura molecolare dei diversi componenti della matrice lipidica e della sua frazione insaponificabile ovvero se ipotizzabile la formazione di nuove molecole utilizzabili ai fini di applicazioni scientifiche o industriali, sono state condotte delle prove di laboratorio da parte della Chemiservice S.r.l. (rap. 18063/12, 21541/12 e n. 21542/12). In order to detect any changes in the molecular structure of the different components of the lipid matrix and of its unsaponifiable fraction or, if it is conceivable, the formation of new molecules that can be used for scientific or industrial applications, laboratory tests were conducted by Chemiservice S.r.l. (rap. 18063/12, 21541/12 and n. 21542/12).

In particolare l'oggetto delle prove era: In particular, the object of the tests was:

- sul campione di olio extravergine relativo al rapporto di prova n. 11174/12 di verificare la determinazione dei polifenoli totali e la caratterizzazione dei Biofenoli; - on the sample of extra virgin olive oil relating to test report no. 11174/12 to verify the determination of the total polyphenols and the characterization of the Biophenols;

sul campione di olio extravergine di oliva sottoposto a insufflazione di Monossido di Azoto relativo al rapporto prova n. 18603/12 di verificare la presenza di composti epossidati presenti nei trigliceridi poiinsaturi; on the sample of extra virgin olive oil subjected to nitrogen monoxide insufflation relating to test report no. 18603/12 to verify the presence of epoxidized compounds present in the polyunsaturated triglycerides;

- sui campioni dello stesso olio extravergine di oliva sottoposto ad insufflazione con Monossido di Azoto, denominati con le indicazioni "stabilizzato" e "non stabilizzato", relativi ai rapporti di prova individuati con i numeri 21540/12 e 21541/12, di eseguire le seguenti prove: Esame Spettrofotometrico nell'Ll.V., composizione degli acidi grassi e dei trans isomeri degli acidi grassi, composizione della frazione sterolica, valore degli stigmastadieni, composizione dei Polifenoli, concentrazione di Azoto totale. - on the samples of the same extra virgin olive oil subjected to insufflation with nitrogen monoxide, denominated with the indications "stabilized" and "not stabilized", relative to the test reports identified with the numbers 21540/12 and 21541/12, to carry out the following tests: Spectrophotometric examination in the Ll.V., composition of fatty acids and trans isomers of fatty acids, composition of the sterol fraction, value of stigmastadienes, composition of polyphenols, concentration of total nitrogen.

La composizione dei Polifenoli, il cui esito viene riportato nel R.P. 11174/12, evidenzia un andamento tipico corrispondente ad un olio di oliva extra vergine di buona qualità. The composition of polyphenols, the result of which is reported in the R.P. 11174/12, shows a typical trend corresponding to a good quality extra virgin olive oil.

La ricerca di composti epossidati eseguita sul campione di olio extra vergine sottoposto a insufflazione di Monossido di Azoto, i cui risultati sono inseriti nel R.P. The search for epoxidized compounds performed on the sample of extra virgin oil subjected to nitrogen monoxide insufflation, the results of which are included in the R.P.

18603/12, espresso come ESBO e valutato anche come composti epossidati degli acidi grassi poiinsaturi (acido linoleico e linolenico) non ha evidenziato alcuna presenza. 18603/12, expressed as ESBO and also evaluated as epoxidized compounds of polyunsaturated fatty acids (linoleic and linolenic acid) did not show any presence.

Le prove eseguite sui due campioni di olio extra vergine sottoposti ad insufflazione di Monossido di Azoto, i cui valori sono inseriti nei R.P. 21541/12 e 21540/12, hanno evidenziato un notevole incremento dei valori Spettrofotometrici e degli Isomeri Trans degli acidi grassi mono e poiinsaturi, mentre non sono variati significativamente né i valori della composizione degli Steroli e neppure il valore dello Stigmastadiene. Su entrambi i campioni sono state rilevate presenze di Azoto totale normalmente non presente negli oli extra vergini di oliva. The tests carried out on the two samples of extra virgin olive oil subjected to nitrogen monoxide insufflation, the values of which are included in the R.P. 21541/12 and 21540/12, showed a significant increase in the spectrophotometric values and the trans isomers of the mono and polyunsaturated fatty acids, while neither the values of the composition of the sterols nor the value of the Stigmastadiene changed significantly. On both samples the presence of total nitrogen was found, normally not present in extra virgin olive oils.

Il valore dei Polifenoli totali à ̈ risultato più basso rispetto al valore rilevato sull'olio extravergine estratto a freddo da olive denocciolate, ma risulta stabile il tenore del Biofenoli liberi attivi (tirosolo e idrossitirosolo). The value of the total polyphenols was lower than the value measured on the extra virgin olive oil cold extracted from pitted olives, but the content of free active biophenols (tyrosol and hydroxytyrosol) is stable.

I risultati ottenuti dagli esami eseguiti sui campioni di olio extra vergine di oliva ha evidenziato che : The results obtained from the tests performed on the extra virgin olive oil samples showed that:

- il valore dei Polifenoli totali presenti nella quantità e composizione caratteristica degli oli extra vergini di oliva di buona qualità à ̈ risultata più bassa nei due campioni sottoposti a trattamento di insufflazione. La causa di ciò, non necessariamente à ̈ da ascrivere al trattamento effettuato con il monossido di azoto ma più verosimilmente al normale processo di invecchiamento dell'olio extra vergine di oliva. Occorre sottolineare che il prodotto ha conservato la quantità di Biofenoli attivi in forma libera; - the value of total polyphenols present in the quantity and characteristic composition of good quality extra virgin olive oils was lower in the two samples subjected to insufflation treatment. The cause of this is not necessarily due to the treatment carried out with nitrogen monoxide but more likely to the normal aging process of extra virgin olive oil. It should be emphasized that the product has preserved the quantity of active Biophenols in free form;

- il trattamento con Monossido di Azoto non ha prodotto composti epossidati (composti tossici che nei processi di ossidazione lipidica costituiscono una fase intermedia tra l'ossidazione primaria, instabile, e l'ossidazione secondaria) che risultano non presenti sia nelle prove eseguite in un primo laboratorio sia nelle verifiche affidate ad un secondo laboratorio accreditato; - the treatment with nitrogen monoxide did not produce epoxidized compounds (toxic compounds that in the lipid oxidation processes constitute an intermediate phase between the primary, unstable, and secondary oxidation) which are not present both in the tests performed in a first laboratory and in the verifications entrusted to a second accredited laboratory;

- la composizione della frazione sterolica non subisce sostanziali modifiche, ma si osserva la presenza, come riscontrabile nei relativi cromatogrammi, di segnali non presenti nel normale profilo gascromatografico della frazione sterolica degli oli extra vergini di oliva. La loro presenza potrebbe giustificare l'ipotesi di formazione di nuove molecole o la trasformazione di alcune sostanze presenti naturalmente nella frazione insaponificabile degli oli extra vergini di oliva {si veda gascromatogramma di cui a Fig. 2 e 3); - the composition of the sterol fraction does not undergo substantial changes, but we observe the presence, as can be seen in the relative chromatograms, of signals not present in the normal gas chromatographic profile of the sterol fraction of extra virgin olive oils. Their presence could justify the hypothesis of the formation of new molecules or the transformation of some substances naturally present in the unsaponifiable fraction of extra virgin olive oils (see gas chromatogram in Fig. 2 and 3);

- la concentrazione dello Stigmastadiene risulta inalterata e conserva il valore tipico degli oli vergini di oliva. - the concentration of Stigmastadiene is unaltered and retains the typical value of virgin olive oils.

Si deve considerare significativo l'incremento su entrambi i campioni dei valori Spettrofotometrici e degli isomeri trans degli acidi grassi. Si potrebbe ipotizzare che la causa di tale incremento sia, per i valori spettrofotometrici, l'incremento dei doppi legami coniugati degli acidi grassi poiinsaturi presenti nei trigliceridi oppure la formazione di nuove sostanze a seguito del trattamento con il Monossido di Azoto che ha contribuito anche all'incremento delle forme trans della composizione acidica rispetto alle forme cis. The increase in both the spectrophotometric values and the trans isomers of fatty acids must be considered significant. It could be hypothesized that the cause of this increase is, for the spectrophotometric values, the increase of the conjugated double bonds of the polyunsaturated fatty acids present in the triglycerides or the formation of new substances following the treatment with nitrogen monoxide which also contributed to the 'increase of the trans forms of the acidic composition compared to the cis forms.

Inoltre, la presenza Azoto Totale, anche in quantità abbastanza basse, lascia pensare o alla presenza di gas disciolto nell'olio o a nuove forme molecolari da meglio identificare. Furthermore, the presence of Total Nitrogen, even in fairly low quantities, suggests either the presence of gas dissolved in the oil or of new molecular forms to be better identified.

In conclusione, i risultati ottenuti in questa sperimentazione sono molto suggestivi ed evidenziano aspetti di valutazione analitica significativi e di forte impatto innovativo, tali da giustificare la successiva prosecuzione delle attività di ricerca, sia con gli stessi materiali che con altri, aventi differenti capacità di reazione. In conclusion, the results obtained in this experimentation are very suggestive and highlight significant aspects of analytical evaluation with a strong innovative impact, such as to justify the subsequent continuation of the research activities, both with the same materials and with others, having different reaction capacities. .

Ulteriori caratteristiche e vantaggi, come meglio appariranno dalla descrizione che segue, sono raggiunti dal procedimento di gassificazione di una matrice lipidica con ossido nitrico NO o altri gas alternativi quali ad esempio l'Ozono 03 ed il monossido di carbonio CO ecc. Further characteristics and advantages, as will become clearer from the following description, are achieved by the gasification process of a lipid matrix with nitric oxide NO or other alternative gases such as for example Ozone 03 and carbon monoxide CO etc.

L'invenzione à ̈ descritta di seguito, in una esecuzione preferita non limitativa di ulteriori sviluppi suscettibili di tutte le modifiche o variazioni con elementi innovativi, tecnicamente equivalenti e tutti rientranti nel concetto inventivo, con l'aiuto delle tavole di disegno allegate, in cui sono illustrati : The invention is described below, in a preferred non-limiting embodiment of further developments susceptible of all modifications or variations with innovative, technically equivalent elements and all falling within the inventive concept, with the help of the attached drawing tables, in which are illustrated:

Fig. 1, uno schema che riassume tutti i componenti del dispositivo ovvero l'attrezzatura necessaria per la realizzazione del metodo; Fig. 1, a diagram summarizing all the components of the device or the equipment necessary for carrying out the method;

Fig. 2, un gascromatogramma della frazione sterolica di un olio extravergine di oliva quando non sottoposto ad alcun trattamento; Fig. 2, a gas chromatogram of the sterol fraction of an extra virgin olive oil when not subjected to any treatment;

Fig. 3, un gascromatogramma della frazione sterolica dei due campioni di olio extravergine di oliva quando trattati con monossido di azoto; Fig. 3, a gas chromatogram of the sterol fraction of the two extra virgin olive oil samples when treated with nitrogen monoxide;

Fig. 4, una tabella in cui à ̈ evidenziata la percentuale di vitalità cellulare per dose di prodotto testato; Fig. 4, a table showing the percentage of cell viability per dose of tested product;

Fig. 5, la curva della vitalità cellulare dopo un trattamento con dosi crescenti di SLS (controllo positivo); Fig. 5, the cell viability curve after treatment with increasing doses of SLS (positive control);

Fig. 6, la curva di regressione per il calcolo dell'IC5O (Inhibiting Concentration 50); Fig. 7, una tabella che illustra la percentuale di mortalità cellulare alle diluizioni testate; Fig. 6, the regression curve for the calculation of IC5O (Inhibiting Concentration 50); Fig. 7, a table illustrating the percentage of cell mortality at the tested dilutions;

Fig. 8, la curva delia vitalità cellulare dopo trattamento con diverse diluizioni del prodotto testato; Fig. 8, the cell viability curve after treatment with different dilutions of the tested product;

Fig. 9, una tabella che evidenzia la mancanza di effetti citotossici alle concentrazioni testate su fibroblasti. Fig. 9, a table showing the lack of cytotoxic effects at the concentrations tested on fibroblasts.

Con riferimento alla Figura 1, il dispositivo per la gassificazione di una matrice lipidica, comprende: With reference to Figure 1, the device for the gasification of a lipid matrix comprises:

- un generatore di gas 2, quale ad esempio monossido di azoto, consistente, ad esempio, in una bombola già raffreddata e predisposta per uso medicale possibilmente priva di saldatura; - a gas generator 2, such as for example nitrogen monoxide, consisting, for example, of a cylinder already cooled and prepared for medical use, possibly without welding;

- un ozonizzatore, non illustrato, nel solo caso in cui il gas utilizzato à ̈ l'ozono; - un regolatore di pressione in uscita 3 (pressostato); - an ozonator, not shown, only in the case in which the gas used is ozone; - an outlet pressure regulator 3 (pressure switch);

- un rilevatore (manometro) della pressione del generatore 31; - a detector (manometer) of the pressure of the generator 31;

- un rilevatore della pressione di esercizio 32; - an operating pressure detector 32;

- un dispositivo di controllo della temperatura (termometro) 33; - a temperature control device (thermometer) 33;

- un flussimetro 4, per rilevare informazioni sulla quantità di volume nell'unità di tempo, ovvero, un mass flow controller, che consente di controllare l'erogazione della quantità di gas secondo portate molto piccole e sotto controllo elettronico; - a flowmeter 4, to detect information on the quantity of volume in the unit of time, that is, a mass flow controller, which allows to control the supply of the quantity of gas according to very small flow rates and under electronic control;

un gorgogliatore in vetro 5 a tenuta ermetica e raffreddato o in alternativa in acciaio inox a doppia camera con sistema di raffreddamento a serpentina, a celle di Peltier, ecc. a hermetically sealed and cooled glass bubbler 5 or alternatively in double-chamber stainless steel with a coil or Peltier cell cooling system, etc.

- una membrana con istmo poroso o cilindro poroso 51 in acciaio che permette una maggiore distribuzione favorendo la non aggregazione del gas; - a membrane with a porous isthmus or a porous cylinder 51 in steel which allows greater distribution by favoring the non-aggregation of the gas;

- una serie di anelli (non illustrati) o sfere di vetro 52 di riempimento del gorgogliatore e/o allungamento del gorgogliatore stesso, il cui scopo à ̈ quello di rallentare la risalita delle bollicine di gas per aumentare il tempo di contatto tra il gas e l'olio. L'utilizzo di questo materiale à ̈ molto utile in caso il gas erogato richieda tempi di solubilizzazione elevati come il monossido di azoto (NO); - a series of rings (not shown) or glass spheres 52 for filling the bubbler and / or lengthening the bubbler itself, the purpose of which is to slow down the rising of the gas bubbles to increase the contact time between the gas and the oil. The use of this material is very useful if the gas supplied requires high solubilization times such as nitrogen monoxide (NO);

- un sistema di ricircolo del gas in uscita 6 comprendente una pompa 61, una valvola per il recupero di eventuali vapori dell'olio 62, tubazioni 63, una valvola per il riciclo del gas 64, una valvola uscita gas 65; - an outlet gas recirculation system 6 comprising a pump 61, a valve for recovering any oil vapors 62, pipes 63, a gas recirculation valve 64, a gas outlet valve 65;

- la raccorderia e le tubazioni 63 per la realizzazione dei vari circuiti sono realizzati in acciaio AISI 316 per assicurare la resistenza all'attacco di gas reattivi; - the fittings and pipes 63 for the construction of the various circuits are made of AISI 316 steel to ensure resistance to attack by reactive gases;

- ambiente a temperatura controllata 1. - controlled temperature environment 1.

Tutti i componenti su descritti possono essere sostituiti da elementi dalle funzioni equivalenti. All the components described above can be replaced by elements with equivalent functions.

La matrice lipidica (olio) à ̈ il componente fondamentale delle nuove composizioni, di conseguenza à ̈ fondamentale selezionare in partenza un olio biologicamente puro con caratteristiche organolettiche opportune. The lipid matrix (oil) is the fundamental component of the new compositions, therefore it is essential to select a biologically pure oil with suitable organoleptic characteristics from the start.

Per effettuare le prime sperimentazioni à ̈ stato utilizzato olio extravergine di oliva della varietà cultivar "Coratina" denocciolato, ciò non significa che non possano essere utilizzate anche altre varietà magari autoctone pugliesi ed altri tipi di olio, li metodo prevede che il gas contenuto nella bombola 2 venga fatto uscire regolando la pressione in bar, mediante il regolatore di pressione 3, in modo che possa gorgogliare, nella matrice oleosa, in maniera controllata, To carry out the first experiments, extra virgin olive oil of the pitted "Coratina" cultivar variety was used, this does not mean that other Apulian autochthonous varieties and other types of oil cannot be used, the method provides that the gas contained in the cylinder 2 is released by regulating the pressure in bar, by means of the pressure regulator 3, so that it can bubble, in the oil matrix, in a controlled manner,

Una pressione ottimale di uscita del gas in modo che possa avvenire un efficace gorgogliamento à ̈ compresa fra 0,1 bar e 0,2 bar. La portata del gas prima che entri nel cilindro 5 per gorgogliare, à ̈ rilevata dal flussimetro o dal mass flow controller 4 e la temperatura da un termometro 33. An optimal gas outlet pressure so that effective bubbling can take place is between 0.1 bar and 0.2 bar. The flow rate of the gas before it enters cylinder 5 to bubble is detected by the flow meter or mass flow controller 4 and the temperature by a thermometer 33.

La rilevazione dei suddetti parametri (pressione, volume, massa), consentono di poter calcolare nell'unità di tempo (calcolata in gr/min o qualsiasi altra unità di misura) la massa di monossido di azoto o altro gas gorgogliato nell'olio. The detection of the aforementioned parameters (pressure, volume, mass), make it possible to calculate in the unit of time (calculated in g / min or any other unit of measurement) the mass of nitrogen monoxide or other gas bubbled in the oil.

Il gorgogliamento del monossido di azoto o altro gas nella matrice oleosa comporta da una parte la solubilizzazione del monossido di azoto o altro gas nella matrice oleosa e dall'altra parte la reazione chimica tra i doppi legami carbonio-carbonio della matrice oleosa e quindi alla formazione di nuove molecole rispetto alle molecole iniziali reagenti. The bubbling of nitrogen monoxide or other gas in the oil matrix involves on the one hand the solubilization of nitrogen monoxide or other gas in the oil matrix and on the other hand the chemical reaction between the carbon-carbon double bonds of the oil matrix and therefore the formation of new molecules with respect to the initial reacting molecules.

Alle temperature ideali, a seconda della natura del gas, laddove fosse necessario saranno utilizzati solubilizzatori ad uso medicale tipo "PEG - 40 Hydrogenated Castor Oil ", o il "PEG - 26", o il "Trideceth - 9". At ideal temperatures, depending on the nature of the gas, solubilizers for medical use such as "PEG - 40 Hydrogenated Castor Oil", or "PEG - 26", or "Trideceth - 9" will be used where necessary.

Ai fini di una corretta applicazione del metodo, à ̈ necessario che tutte le molecole del gas siano possibilmente stabilizzate, anche quelle che hanno reagito con il substrato della matrice olio, a tale scopo si utilizzerà, vitamina E acetato circa 0,5% e Acido tiottico allo 0,3%. For the purposes of a correct application of the method, it is necessary that all the gas molecules are possibly stabilized, even those that have reacted with the substrate of the oil matrix, for this purpose, vitamin E acetate about 0.5% and Acid will be used. thioctic at 0.3%.

Per una maggiore verifica sperimentale dei composto ottenuto, à ̈ stata effettuata Tanalisi dei perossidi confrontata con i dati preliminari della matrice lipidica utilizzata, in quanto quest'ultima, aveva valori più bassi del valore di 4,00 meq 0<2>/Kg., in quanto utilizzato olio extravergine denocciolato. For a greater experimental verification of the obtained compound, the analysis of the peroxides was carried out compared with the preliminary data of the lipid matrix used, as the latter had values lower than the value of 4.00 meq 0 <2> / Kg. , as pitted extra virgin olive oil is used.

In previsione di una possibile interazione tra l'ossigeno del monossido di azoto ed i doppi legami carbonio degli addi grassi presenti nella matrice, à ̈ stato ipotizzato, in fase sperimentale, quale conseguenza di un incremento dei perossidi costante nelle varie fasi dei tre prelievi di olio con diverso contento di gas disciolto, come legame intermedio la formazione di epossidi, per i quali à ̈ stato condotto un test di citotossicità, ed infine, di nuovi composti azotati e/o un miglioramento della matrice a seguito liberazione della frazione libera (attiva) dei biofenoli anche questi precedentemente testati. Infatti, sono stati eseguiti i test chimici, dei cui risultati, si à ̈ già avuto modo di scrivere. In anticipation of a possible interaction between the oxygen of nitrogen monoxide and the double carbon bonds of the fatty addi present in the matrix, it was hypothesized, in the experimental phase, as a consequence of a constant increase in peroxides in the various phases of the three samples of oil with different content of dissolved gas, as an intermediate bond the formation of epoxides, for which a cytotoxicity test was conducted, and finally, of new nitrogenous compounds and / or an improvement of the matrix following release of the free fraction (active ) of the biophenols also these previously tested. In fact, chemical tests have been performed, the results of which have already been written.

Per quanto riguarda il caso particolare dell' utilizzo di NO in olio di oliva à ̈ stato eseguito il procedimento eseguendo tre prelievi di 200 mi con intervalli di tempo di 20 minuti su campione di 10 L di olio gassificato con 25L di gas. Su tali campioni sono state fatte le analisi dei perossidi e di citotossicità, da parte del laboratorio ABIC di Verbania di cui si riportano i risultati. As regards the particular case of the use of NO in olive oil, the procedure was carried out by carrying out three samples of 200 ml with time intervals of 20 minutes on a sample of 10 L of gasified oil with 25L of gas. The peroxide and cytotoxicity analyzes were carried out on these samples by the ABIC laboratory in Verbania, the results of which are reported.

Analisi perossidi Peroxide analysis

1° prelievo: Numero di perossidi = 8.50 meq 0<2>/Kg 1st sampling: Number of peroxides = 8.50 meq 0 <2> / Kg

2° prelievo: Numero di perossidi = 14.60 meq O<z>/Kg 2nd sampling: Number of peroxides = 14.60 meq O <z> / Kg

3° prelievo: Numero di perossidi = 18.62 meq 0<2>/Kg 3rd sampling: Number of peroxides = 18.62 meq 0 <2> / Kg

Analisi citotossicità Cytotoxicity analysis

Solo su 3° prelievo: Only on 3rd withdrawal:

Il risultato à ̈ espresso come vitalità cellulare in percentuale secondo la formula: The result is expressed as a percentage of cell viability according to the formula:

% di vitalità cellulare = [OD(570 nm - 650 nm) prodotto testato/ OD{570 nm - 650 nm) controllo negativo] x 100 % cell viability = [OD (570 nm - 650 nm) product tested / OD {570 nm - 650 nm) negative control] x 100

Una riduzione della vitalità cellulare > 30% à ̈ considerato un effetto citotossico. A reduction in cell viability> 30% is considered a cytotoxic effect.

In tal caso à ̈ possibile calcolare il valore di IC50 (Inhibiting Concentration 50) che indica la concentrazione di prodotto che inibisce la vitalità cellulare del 50% (si vedano Fig. da 4 a 9). In this case it is possible to calculate the value of IC50 (Inhibiting Concentration 50) which indicates the concentration of product which inhibits cell viability by 50% (see Fig. 4 to 9).

Dallo studio delle figure n. 4, n. 5, n. 6, n. 7, n. 8 e n. 9, emerge che: From the study of figures n. 4, no. 5, no. 6, no. 7, no. 8 and n. 9, it emerges that:

Non ha causato effetti citotossici alle concentrazioni testate su fibroblasti. It did not cause cytotoxic effects at the concentrations tested on fibroblasts.

TEST Citotossicità sui Fibroblasti negativi. Cytotoxicity TEST on negative Fibroblasts.

TEST Ricerca Epossidi negativi. TEST Search for negative epoxides.

TEST Gascromatografia, analisi Spettrofotometriche ed altre indagini per la Ricerca dei Composti Azotati, positivi da dove si evince la Trasposizione degli elettroni negli acidi grassi passati dalla forma CIS alla forma TRANS, Presenza di Azoto e di nuovi composti azotati di norma mai presenti nell'olio extravergine di oliva. TEST Gas chromatography, spectrophotometric analyzes and other investigations for the research of nitrogen compounds, positive from which it is possible to infer the transposition of electrons in fatty acids passed from the CIS form to the TRANS form, Presence of nitrogen and new nitrogen compounds normally never present in the oil extra virgin olive oil.

Conformemente al presente metodo, a fini puramente esemplificativi ma non limitativi, un olio d'oliva à ̈ stato ozonizzato utilizzando una bombola di ossigeno 99,9% e attraverso un ozonizzatore consistente in un apparecchio che genera una piccola scarica elettrica che produce una parziale dissociazione dell'ossigeno formando una miscela composta dal 20 - 25 % di ozono e 75 - 80 % di ossigeno fatto gorgogliare nell'olio extravergine di oliva. In accordance with this method, for purely illustrative but not limiting purposes, an olive oil has been ozonated using a 99.9% oxygen cylinder and through an ozonator consisting of an apparatus that generates a small electrical discharge that produces a partial dissociation of oxygen forming a mixture of 20 - 25% ozone and 75 - 80% oxygen bubbled in extra virgin olive oil.

L'erogazione di tale miscela à ̈ stata regolata su 12 g/h attraverso l'utilizzo di un regolatore di pressione e confermata visivamente da un flussimetro. The delivery of this mixture was adjusted to 12 g / h through the use of a pressure regulator and confirmed visually by a flow meter.

Impostando una pressione di uscita della miscela ossigeno/ozono di 0,1 bar, la miscela di gas à ̈ fatta gorgogliare in un contenitore di vetro o di acciaio a doppia camera con sistema di controllo della temperatura del tipo descritto nella gassificazione con NO, a tenuta ermetica, contenente 1 litro di olio, per un tempo determinato. All'uscita del gorgogliatore à ̈ posto un sistema di recupero dei vapori. By setting an outlet pressure of the oxygen / ozone mixture of 0.1 bar, the gas mixture is bubbled into a double-chamber glass or steel container with a temperature control system of the type described in gasification with NO, to hermetic seal, containing 1 liter of oil, for a specified time. At the exit of the bubbler there is a vapor recovery system.

In particolare, nella sperimentazione condotta, sono stati effettuati trattamenti dell'olio con la miscela ossigeno/ozono, per tempi di 10, 20, 180 minuti. In particular, in the experimentation conducted, oil treatments were carried out with the oxygen / ozone mixture, for times of 10, 20, 180 minutes.

I campioni di olio così ozonizzato consentono di valutare l'efficacia delle modifiche prodotte, in riferimento agii usi cui l'olio à ̈ destinato, in confronto con composizioni analoghe contenenti l'olio di partenza non ozonizzato. The samples of oil thus ozonated allow to evaluate the effectiveness of the modifications produced, with reference to the uses for which the oil is intended, in comparison with similar compositions containing non-ozonated starting oil.

Sono stati valutati i seguenti parametri, utilizzando un olio extravergine di oliva non denocciolato: The following parameters were evaluated, using a non-pitted extra virgin olive oil:

Acidità — E' stata misurata secondo le indicazioni dettate dall'allegato II del Regolamento CEE N. 2568/91. L'olio tal quale (0TQ) mostra una acidità dello 0,7%; l'olio ozonizzato per 10 minuti (Oi0) ha lo stesso indice di acidità circa; i due campioni ozonizzati per un tempo maggiore, 20 minuti (O2o) a 180 minuti (Oi80), danno un indice di acidità superiore, intorno a 1,0%. Acidity â € ”It was measured according to the indications dictated by Annex II of the EEC Regulation No. 2568/91. The oil as it is (0TQ) shows an acidity of 0.7%; the ozonated oil for 10 minutes (Oi0) has approximately the same acidity index; the two samples ozonated for a longer time, 20 minutes (O2o) to 180 minutes (Oi80), give a higher acidity index, around 1.0%.

In complesso comunque tutti i campioni mostrano una bassa acidità. Overall, however, all the samples show low acidity.

1 valori sono risultati costanti a distanza di 3 mesi. The values were constant after 3 months.

Numero di perossidi — Il contenuto in perossidi à ̈ stato calcolato secondo le indicazioni dell'allegato III del Regolamento CEE N. 2568/91. Number of peroxides â € ”The peroxide content has been calculated according to the indications of Annex III of the EEC Regulation No. 2568/91.

Si sono ottenuti i seguenti valori: The following values were obtained:

OTQ = 8,74 meq Oz/Kg OTQ = 8.74 meq Oz / Kg

O10= 11,55 meq Oz/Kg O10 = 11.55 meq Oz / Kg

O20= 17,34 meq Oz/Kg O20 = 17,34 meq Oz / Kg

O180= 41,02 meq Oz/Kg O180 = 41.02 meq Oz / Kg

Come nelle previsioni, il numero di perossidi cresce con il crescere del tempo di trattamento dell'olio, con la miscela ossigeno/ozono. As in the forecasts, the number of peroxides increases as the oil treatment time increases, with the oxygen / ozone mixture.

Analisi spettrofotometrica nell'ultravioletto - Questa caratterizzazione à ̈ stata effettuata secondo le indicazioni dell'allegato IX del regolamento CEE N. 2568/91. Spectrophotometric analysis in the ultraviolet - This characterization was carried out according to the indications of Annex IX of the EEC regulation No. 2568/91.

Gli indici spettrofotometrici mostrano un aumento progressivo dall'olio 0TQa quello ozonizzato per più lungo tempo. The spectrophotometric indices show a progressive increase from the 0TQ oil to the ozonated one for a longer time.

In particolare gli indici spettrofotometrici dell'estinzione specifica a 232nm e 270nm sono: In particular, the spectrophotometric indices of the specific extinction at 232nm and 270nm are:

K232 medio à ̈ pari a 0,87 per l'olio 0TQAverage K232 is equal to 0.87 for 0TQ oil

K232 medio à ̈ pari a 1,02 per l'olio Οχ0Average K232 is equal to 1.02 for oil ÎŸÏ ‡ 0

K232 medio à ̈ pari a 1,24 per l'olio O2o Average K232 is equal to 1.24 for O2o oil

K232 medio à ̈ pari a 1,64 per l'olio Oi8o Average K232 is 1.64 for Oi8o oil

K270 medio à ̈ pari a 5,45 per l'olio 0TQAverage K270 is equal to 5.45 for 0TQ oil

K270 medio à ̈ pari a 5,78 per l'olio Oi0Average K270 is equal to 5.78 for Oi0 oil

K270 medio à ̈ pari a 6,19 per l'olio O2o Average K270 is equal to 6.19 for O2o oil

K270 medio à ̈ pari a 7,85 per l'olio Oi8o Average K270 is equal to 7.85 for Oi8o oil

Gli assorbimenti alle lunghezze d'onda riportate sono dovuti in generale alla presenza di sistemi dienici e/o trienici o alla presenza di funzioni carboniliche di diversa natura. L'aumento rilevato dei valori delle estinzioni specifiche permette di ipotizzare la comparsa e il relativo aumento, proporzionale ai tempi di ozonizzazione, di una frazione costituita da composti variamente ossidati di diverso peso molecoiare e in grado di dare assorbimento di radiazioni nella regione dell'ultravioletto. The absorptions at the indicated wavelengths are generally due to the presence of diene and / or triene systems or to the presence of carbonyl functions of different nature. The detected increase in the values of specific extinctions allows us to hypothesize the appearance and relative increase, proportional to the ozonation times, of a fraction consisting of variously oxidized compounds of different molecular weight and capable of absorbing radiation in the ultraviolet region. .

Questi valori sono stati confermati dall'analisi ripetuta a distanza di tre mesi. These values were confirmed by the repeated analysis three months later.

Determinazione della frazione gliceridica - La valutazione della frazione gliceridica e del contenuto di acidi grassi à ̈ stata effettuata secondo le indicazioni dettate dagli allegati VII, X "A" e X "B", del Regolamento CEE N. 2568/91 e secondo le indicazioni riportate da Gigliotti e coll. - Riv. (tal. Sostanze Grasse, 70, 483-489 (1993); Marini e coli. Riv. — Ital. Sostanze Grasse, 18, 75, 383-389 (1998). Determination of the glyceride fraction - The evaluation of the glyceride fraction and the content of fatty acids was carried out according to the indications dictated by annexes VII, X "A" and X "B", of the EEC Regulation No. 2568/91 and according to the indications reported by Gigliotti and coll. - Rev. (tal. Substances Grasse, 70, 483-489 (1993); Marini and coli. Riv. - Ital. Substances Grasse, 18, 75, 383-389 (1998).

La composizione dell'olio tal quale rispecchia, entro i limiti dell'errore sperimentale, i valori tipici per l'olio ottenuto dal frutto di Olea europea, con un contenuto di trigiiceridi del 97% circa, in cui gli acidi grassi più rappresentati sono: l'acido oleico (69%), il linoleico (12%) e il paimitico (10%). The composition of the oil as such reflects, within the limits of the experimental error, the typical values for the oil obtained from the fruit of Olea europea, with a trigiiceride content of about 97%, in which the most represented fatty acids are: oleic acid (69%), linoleic (12%) and paimitic (10%).

La composizione dell'olio O10presenta un contenuto di trigiiceridi del 93% circa, con gli stessi acidi grassi più rappresentati, cioà ̈ l'acido oleico (67%), il linoleico (10%) e il paimitico (9%). The composition of the O10 oil has a content of trigiicerides of about 93%, with the same fatty acids most represented, namely oleic acid (67%), linoleic (10%) and paimitic (9%).

La composizione dell'olio O20presenta un contenuto di trigiiceridi dell'89% circa, con l'acido oleico (63%), il linoleico (9%) e il paimitico (8%) sempre presenti in quantità prevalente. The composition of the O20 oil has a trigiiceride content of about 89%, with oleic acid (63%), linoleic (9%) and paimitic (8%) always present in prevailing quantities.

La composizione dell'olio O180presenta un contenuto di trigliceridi dell'85% circa, sempre con gli stessi acidi grassi più rappresentati: l’acido oleico (60%), il linoleico (7%) e il paimitico (5%). The composition of the O180 oil has a triglyceride content of about 85%, always with the same most represented fatty acids: oleic acid (60%), linoleic (7%) and paimitic (5%).

La reazione di ozonizzazione comporta una diminuzione della frazione gliceridica normalmente presente nell'olio tal quale, accompagnata dalla comparsa e dal relativo aumento, proporzionale ai tempi di ozonizzazione, di una frazione a più basso peso molecolare, variamente ossigenata, ottenuta per scissione ossidativa in corrispondenza delle insaturazioni presenti nella matrice di partenza. The ozonation reaction involves a decrease in the glyceride fraction normally present in the oil as it is, accompanied by the appearance and relative increase, proportional to the ozonation times, of a fraction with a lower molecular weight, variously oxygenated, obtained by oxidative cleavage in correspondence with of the unsaturations present in the starting matrix.

Determinazione della frazione non gliceridica - La valutazione della frazione e del contenuto in steroli à ̈ stata effettuata secondo le indicazioni dettate dall’allegato V, del Regolamento CEE N. 2568/91. Determination of the non-glyceride fraction - The evaluation of the fraction and of the sterol content was carried out according to the indications dictated by Annex V, of the EEC Regulation No. 2568/91.

La valutazione del contenuto in alcoli à ̈ stata effettuata secondo le indicazioni dettate dall’allegato VI del Regolamento CEE N. 2568/91. The assessment of the alcohol content was carried out according to the indications dictated by Annex VI of the EEC Regulation No. 2568/91.

La determinazione del contenuto in polifenoli totali à ̈ stata effettuata secondo le indicazioni riportate da Montedoro e coll. - Agr. Food Chem., 40, 1571-1576 (1992). La valutazione del contenuto di idrocarburi (cere) à ̈ stata effettuata secondo le indicazioni dell’allegato IV del Regolamento CEE N. 2568/91. The determination of the total polyphenol content was carried out according to the indications given by Montedoro and coll. - Agr. Food Chem., 40, 1571-1576 (1992). The evaluation of the content of hydrocarbons (waxes) was carried out according to the indications of Annex IV of the EEC Regulation No. 2568/91.

La frazione di natura non gliceridica dell’olio tal quale rappresenta circa il 3% del totale ed à ̈ costituita da: steroli, alcoli, polifenoli e idrocarburi. The non-glyceride fraction of the oil as it is represents about 3% of the total and is made up of: sterols, alcohols, polyphenols and hydrocarbons.

Gli steroli identificati sono 12 e tra questi predominano il β-sitosterolo, con una percentuale di circa 89% e il Δ5-avenasterolo, con una percentuale di circa 5%. The identified sterols are 12 and among them β-sitosterol predominates, with a percentage of about 89% and Î ”5-avenasterol, with a percentage of about 5%.

La composizione dell'olio ΟΠ̄0rispecchia entro i limiti dell'errore sperimentale quella dell'olio tal quale presentando gli stessi 12 steroli e, in particolare, il β-sitosterolo, con una percentuale di circa 87% e il A5-avenasterolo, con una percentuale di circa 4%. The composition of the oil ΟΠ̄0 reflects within the limits of the experimental error that of the oil as it is presenting the same 12 sterols and, in particular, the β-sitosterol, with a percentage of about 87% and the A5-avenasterol, with a percentage of about 4%.

Nell'olio O20erano rilevabili solo 9 steroli, non essendo stati rilevati quelli che nell'olio tal quale erano presenti in quantità inferiori al 3%, tra questi, Il β-sitosterolo e il A5-avenasterolo erano presenti in quantità pressoché invariate rispetto all'olio Only 9 sterols were detectable in the O20 oil, since those that in the oil as it were present in quantities less than 3% were not detected, among these, β-sitosterol and A5-avenasterol were present in almost unchanged quantities compared to 'oil

O20· O20

L'olio O180presenta solo sei steroli ma il β-sitosterolo e il A5-avenasterolo insieme costituivano il 78% della frazione. O180 oil has only six sterols but β-sitosterol and A5-avenasterol together made up 78% of the fraction.

In quest'ultimo olio erano presenti picchi relativi a derivati variamente ossigenati degli steroli presenti in quantità maggiori e a loro prodotti di degradazione, con una presenza valutabile intorno al 18%. In the latter oil there were peaks relating to variously oxygenated derivatives of sterols present in greater quantities and to their degradation products, with an estimated presence of around 18%.

La frazione aicoolica dell'olio tal quale risulta ricchissima di componenti, tra cui predominano quelli a catena C26 con il 31% e quelli a catena C28 con il 28%; comunque sono presenti percentuali molto alte anche per quelli a catena C24 (21%) e quelli a catena C22 (12%). The aicoolic fraction of the oil as it is is very rich in components, among which those in the C26 chain predominate with 31% and those in the C28 chain with 28%; however, very high percentages are also present for those with the C24 chain (21%) and those with the C22 chain (12%).

La composizione dell'olio a tempi di ozonizzazione intermedi (O10e O20) rispecchia entro i limiti dell’errore sperimentale quella dell'olio tal quale presentando gli stessi componenti. The composition of the oil at intermediate ozonation times (O10 and O20) reflects, within the limits of the experimental error, that of the oil as it is, having the same components.

Nell'olio O180era rilevabile un notevole cambiamento della composizione quali -quantitativa. Gli alcoli a catena C26 erano presenti con il 25%, quelli a catena C28 con il 20%, quelli a catena C24 con il 15% e quelli a catena C22 con 18%. In the O180 oil there was a noticeable change in the qualitative-quantitative composition. C26-chain alcohols were present with 25%, C28-chain alcohols with 20%, C24-chain alcohols with 15% and C22-chain alcohols with 18%.

Inoltre erano presenti numerosi componenti fortemente ossigenati, identificati come prodotti derivati dalla degradazione ossidativa delle componenti più abbondanti. Furthermore, there were numerous highly oxygenated components, identified as products derived from the oxidative degradation of the more abundant components.

Per quanto riguarda il contenuto di polifenoli totali per l'olio tal quale, à ̈ stata trovata una quantità media di 260 mg/Kg. La stessa quantità di polifenoli à ̈ stata rilevata negli oli ozonizzati a 10 e 20 minuti, mentre l'olio ozonizzato per 180 minuti risultava contenere una quantità media di 295 mg/Kg, più alta del 15%. As for the total polyphenol content for the oil as it is, an average quantity of 260 mg / kg was found. The same quantity of polyphenols was found in the ozonated oils at 10 and 20 minutes, while the ozonated oil for 180 minutes was found to contain an average quantity of 295 mg / kg, higher than 15%.

La frazione idrocarburica risulta ricca di componenti a catena C36, presenti con una concentrazione media del 29%, seguiti da quelli a catena C38 con il 22%, C40 con l' 8 %, C42 con il 15%, C44 con il 9%, e, infine, C46 con il 12%, The hydrocarbon fraction is rich in C36 chain components, present with an average concentration of 29%, followed by those in the C38 chain with 22%, C40 with 8%, C42 with 15%, C44 with 9%, and finally, C46 with 12%,

I tre oli ozonizzati presentavano, entro i limiti dell'errore sperimentale, la stessa composizione. The three ozonated oils had the same composition within the limits of the experimental error.

Come precedentemente detto, la composizione chimica e le caratteristiche chimicofisiche dell'olio impiegato nella sperimentazione a supporto della presente invenzione, sono state determinate soltanto con funzione esemplificativa e non limitativa degli oli che possono essere correttamente impiegati per ottenere i risultati ottimali nei campi d'impiego rivendicati. As previously mentioned, the chemical composition and the chemical-physical characteristics of the oil used in the experimentation to support the present invention have been determined only with an exemplary and non-limiting function of the oils that can be correctly used to obtain the optimal results in the fields of use. claimed.

Dopo tale sperimentazione si sono ridotti i tempi di saturazione aumentando in altezza e restringendo il diametro della camera di vetro o di gorgogliamento riempiendo il suo interno con delle palline di vetro più degli anelli a diverse altezze ed infine portando la temperatura di esercizio in erogazione a 0 gradi per l'ozono a differenza di altri gas che avranno differenti temperature di esercizio, da qui la necessità di avere un ambiente a temperatura controllata, After this experimentation, the saturation times were reduced by increasing the height and narrowing the diameter of the glass or bubbling chamber by filling its interior with glass balls plus the rings at different heights and finally bringing the operating temperature in dispensing to 0 degrees for ozone unlike other gases that will have different operating temperatures, hence the need to have a controlled temperature environment,

Per ottenere la massima saturazione si deve raggiungere la condizione in cui le molecole di gas non reagiscono più con la matrice lipidica M; si precisa che tale condizione si raggiungeva con la precedente metodica dopo 10 - 12 ore. To obtain maximum saturation, the condition in which the gas molecules no longer react with the lipid matrix M must be reached; it should be noted that this condition was reached with the previous method after 10 - 12 hours.

Claims (13)

RIVENDICAZIONI 1. Dispositivo e metodo di gassificazione di una matrice lipidica in ambiente a temperatura controllata, comprendente un ambiente a temperatura controllata (1), un generatore di gas (2), un regolatore di pressione in uscita (3), un rilevatore di pressione (31) di detto generatore di gas (2), un rilevatore (32) della pressione di esercizio in bar o psi, un rilevatore della temperatura del gas (7), un flussimetro dedicato (4) in base al tipo di gas o un mass flow controller, un cilindro o gorgogliatore (5) con alla base un dispositivo di agitatore regolabile, con possibilità di controllo della temperatura, una membrana con istmo poroso (51), ed un sistema di ricircolo del gas (6), caratterizzato dal fatto che il gas contenuto nel generatore di gas (2) à ̈ immesso, ad una determinata pressione controllata a seconda del tipo di gas, ad eccezione dell'ozono che richiede un ozonizzatore, ed in relazione alle proprie caratteristiche di solubilità, in una matrice lipidica M, costituita da olio extravergine di oliva o altre tipologie di olio, contenuta all'interno di detto gorgogliatore (5), in modo che il gas possa gorgogliare e dal fatto che le molecole così ottenute sono stabilizzate mediante l'aggiunta di sostanze naturali quali tocoferolo acetato circa 0,5% e acido tiottico allo 0,3%. CLAIMS 1. Device and method of gasification of a lipid matrix in a controlled temperature environment, comprising a controlled temperature environment (1), a gas generator (2), an outlet pressure regulator (3), a pressure detector ( 31) of said gas generator (2), a detector (32) of the operating pressure in bar or psi, a gas temperature detector (7), a dedicated flow meter (4) according to the type of gas or a mass flow controller, a cylinder or bubbler (5) with an adjustable agitator device at the base, with the possibility of temperature control, a membrane with a porous isthmus (51), and a gas recirculation system (6), characterized by the fact that the gas contained in the gas generator (2) is introduced, at a certain controlled pressure depending on the type of gas, with the exception of ozone which requires an ozonator, and in relation to its own solubility characteristics, into a lipid matrix M , consisting of ol I extra virgin olive oil or other types of oil, contained within said bubbler (5), so that the gas can bubble and the fact that the molecules thus obtained are stabilized by adding natural substances such as tocopherol acetate approximately 0.5% and 0.3% thioctic acid. 2. Dispositivo e metodo di gassificazione di una matrice lipidica di cui a rivendicazione 1, caratterizzato dal fatto che la solubilizzazione avviene dopo che il gas ha attraversato la membrana porosa (51) e dal fatto che la solubilizzazione può essere potenziata da sostanze solubilizzanti. 2. Device and method of gasification of a lipidic matrix according to claim 1, characterized in that the solubilization takes place after the gas has crossed the porous membrane (51) and by the fact that the solubilization can be enhanced by solubilizing substances. 3. Dispositivo e metodo di gassificazione di una matrice lipidica di cui ad una o più rivendicazioni precedenti, caratterizzato dal fatto che per effetto del gorgogliamento si ottiene un fenomeno di solubilizzazione che consiste nel passaggio del gas (NO, CO, 03, ecc.) nella matrice M costituita da olio extravergine di oliva o altro tipo di olio e provocando una reazione, di detto gas, con i doppi legami di carbonio presenti in detta matrice oleosa formando nuove molecole rispetto a quelle reagenti presenti inizialmente. 3. Device and method of gasification of a lipidic matrix as per one or more preceding claims, characterized in that as a result of the bubbling, a solubilization phenomenon is obtained which consists in the passage of gas (NO, CO, 03, etc.) in the matrix M consisting of extra virgin olive oil or other type of oil and causing a reaction, of said gas, with the double carbon bonds present in said oily matrix, forming new molecules with respect to those reactants initially present. 4. Dispositivo e metodo di gassificazione di una matrice lipidica di cui a una o più rivendicazioni precedenti, caratterizzato dal fatto che il gorgogliatore (5), in una esecuzione preferita, à ̈ in acciaio inox a doppia camera con sistema di raffreddamento a serpentina poggiato su un agitatore regolabile. La forma e il tipo di gorgogliatore influiscono sulla pressione finale di immissione del gas in quanto ad esso à ̈ associato un determinato valore di caduta di pressione. Tale valore à ̈ da tenere in conto in fase di regolazione del pressostato (3) o del mass flow controller (4). I sistemi di raffreddamento utilizzati essendo del tipo a celle di Peltier o del tipo utilizzante la tecnica del laser cooling o un ambiente climatizzato (1). 4. Device and method of gasification of a lipid matrix as per one or more preceding claims, characterized in that the bubbler (5), in a preferred embodiment, is made of double-chamber stainless steel with a resting coil cooling system on an adjustable agitator. The shape and type of bubbler affect the final gas inlet pressure as it is associated with a certain pressure drop value. This value must be taken into account when adjusting the pressure switch (3) or the mass flow controller (4). The cooling systems used being of the Peltier cell type or of the type using the laser cooling technique or an air-conditioned environment (1). 5. Dispositivo e metodo di gassificazione di una matrice lipidica di cui ad una o più rivendicazioni precedenti caratterizzato dal fatto che all'interno del gorgogliatore (5) sono presenti sfere (52) e/o anelli di vetro. 5. Device and method of gasification of a lipid matrix as per one or more preceding claims, characterized in that glass balls (52) and / or rings are present inside the bubbler (5). 6. Dispositivo e metodo di gassificazione di una matrice lipidica di cui ad una o più rivendicazioni precedenti, caratterizzato dal fatto che il flussimetro (4) può essere di tipo volumico o massico; il flussimetro di tipo massico (4) restituisce la massa nell'unità di tempo di gas gorgogliata nelle matrici lipidiche M; il flussimetro (4) essendo di tipo dedicato a seconda il gas utilizzato. 6. Device and method for gasification of a lipid matrix as per one or more preceding claims, characterized in that the flow meter (4) can be of the volume or mass type; the mass flowmeter (4) returns the mass in the unit of time of gas bubbled in the lipid matrices M; the flow meter (4) being of the dedicated type according to the gas used. 7. Dispositivo e metodo di gassificazione di una matrice lipidica di cui ad una o più rivendicazioni precedenti, caratterizzato dal fatto che il dispositivo à ̈ dotato di un sistema di ricircolo (6) del gas eventualmente non disciolto nella matrice lipidica M ed azionato da opportuna pompa (61). 7. Device and method of gasification of a lipid matrix as per one or more preceding claims, characterized in that the device is equipped with a recirculation system (6) of the gas possibly not dissolved in the lipid matrix M and operated by suitable pump (61). 8. Dispositivo e metodo di gassificazione di una matrice lipidica di cui ad una o più rivendicazioni precedenti, caratterizzato dal fatto che a valle del gorgogliatore (5) à ̈ presente una valvola di recupero di eventuali vapori dell' olio (62). 8. Device and method of gasification of a lipid matrix as per one or more preceding claims, characterized in that downstream of the bubbler (5) there is a valve for recovering any oil vapors (62). 9. Dispositivo e metodo di gassificazione di una matrice lipidica di cui ad una o più rivendicazioni precedenti, caratterizzato dal fatto che possono essere fatti gorgogliare uno o più gas contemporaneamente o in successione, compatibilmente con le proprietà fisico-chimiche dei vari gas e delle matrici lipidiche M al fine di evitare condizioni di rischio per operatori e fruitori o danni all'ambiente. 9. Device and method of gasification of a lipid matrix as per one or more preceding claims, characterized by the fact that one or more gases can be bubbled simultaneously or in succession, compatibly with the physico-chemical properties of the various gases and matrices lipid M in order to avoid risk conditions for operators and users or damage to the environment. 10. Dispositivo e metodo di gassificazione di una matrice lipidica di cui ad una o più rivendicazioni precedenti, caratterizzato dall'impiego di un solubilizzante ad uso medicale tipo PEG - 40 Hydrogenated Castor Oil o tipo PEG - 26 o Trideceth - 9, laddove necessario. 10. Device and method of gasification of a lipid matrix as per one or more preceding claims, characterized by the use of a solubilizer for medical use such as PEG - 40 Hydrogenated Castor Oil or type PEG - 26 or Trideceth - 9, where necessary. 11. Dispositivo e metodo di gassificazione di una matrice lipidica di cui ad una o più rivendicazioni precedenti, caratterizzato dal fatto che à ̈ utilizzato un sistema di misura quali - quantitativa della solubilizzazione raggiunta (possibile utilizzo di spettro gascromatografia o altro dispositivo). 11. Device and method of gasification of a lipid matrix as per one or more preceding claims, characterized in that a qualitative - quantitative measurement system of the achieved solubilization is used (possible use of gas chromatography spectrum or other device). 12. Dispositivo e metodo di gassificazione di una matrice lipidica di cui a rivendicazioni precedenti, caratterizzato dal fatto che, la matrice lipidica gassificata con ozono e stabilizzata così ottenuta, à ̈ utilizzabile in ampi campi della medicina come nella terapia antineoplastica, come terapeutico di varie infezioni ginecologiche (candidosi), odontoiatriche, riduzione e controllo batterico (stomatiti, implantologia, parodontopatie e carie), nel campo chirurgico per impregnare fili da sutura o membrane per la rigenerazione tissutale; otorino (otiti); malattie metaboliche (ulcere diabetiche ecc.); ulcere post trattamento radiazioni ionizzanti; neuropatie periferiche e patologie osteoarticolari. 12. Device and method of gasification of a lipid matrix as per the preceding claims, characterized in that the lipid matrix gasified with ozone and stabilized thus obtained, can be used in wide fields of medicine such as in antineoplastic therapy, as a therapeutic for various gynecological infections (candidiasis), dental, bacterial reduction and control (stomatitis, implantology, periodontal diseases and caries), in the surgical field to impregnate sutures or membranes for tissue regeneration; ENT (ear infections); metabolic diseases (diabetic ulcers etc.); ulcers after ionizing radiation treatment; peripheral neuropathies and osteoarticular pathologies. 13. Dispositivo e metodo di gassificazione di una matrice lipidica di cui a rivendicazioni precedenti caratterizzato dai fatto che tutte le molecole o composti derivanti dalia gassificazione delle varie matrici con i vari gas, possono essere utilizzati per scopi e fini in medicina, chirurgia, farmacia, veterinaria, cosmetica, in campo agro alimentare o nel settore chimico industriale, dove il concepito à ̈ suscettibile di numerose modifiche e varianti e dove tutti i dettagli sono sostituibili da elementi tecnicamente equivalenti tutti rientranti nell'ambito del concetto inventivo.13. Device and method of gasification of a lipid matrix as per the preceding claims characterized in that all the molecules or compounds deriving from the gasification of the various matrices with the various gases, can be used for purposes and purposes in medicine, surgery, pharmacy, veterinary, cosmetic, agro-food or industrial chemical sector, where the product is susceptible of numerous modifications and variations and where all the details can be replaced by technically equivalent elements all falling within the scope of the inventive concept.
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