IT201800004625A1 - DEVICE FOR THE SEPARATION OF A BIOLOGICAL SAMPLE - Google Patents
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Description
Descrizione di Brevetto per Invenzione Industriale avente per titolo: Description of Patent for Industrial Invention entitled:
“DISPOSIT IV O PE R L A SE PAR AZIONE DI UN CAMPIONE BIOL OGICO”. “PROVISION FOR AN ORGANIC SAMPLE SE PAR A TION”.
A nome: BIOAR T SR L S, una società costituita ed esistente secondo la legge italiana, avente sede in 20154 MILANO (MI). In the name: BIOAR T SR L S, a company incorporated and existing under Italian law, having its registered office in 20154 MILANO (MI).
Inventori designati: DAL CANT O Mariabeatrice, PARME GIANI L odovico. Designated inventors: DAL CANT O Mariabeatrice, PARME GIANI L odovico.
DE SCR IZIONE DESCRIPTION
La presente invenzione si riferisce ad un dispositivo di separazione di un campione biologico. The present invention refers to a biological sample separation device.
Come noto, a seguito dell’estrazione di un campione biologico da un distretto anatomico di interesse è necessario sottoporlo a trattamenti di separazione ed analisi al fine di renderlo idoneo per le successive fasi di incubazione e coltura. As is known, following the extraction of a biological sample from an anatomical district of interest, it is necessary to subject it to separation and analysis treatments in order to make it suitable for the subsequent incubation and culture phases.
Un campione biologico è una miscela di componenti cellulari e tissutali di stato e natura differente di cui solo uno o alcuni di essi sono di reale interesse clinico per le successive fasi di incubazione e coltura. A biological sample is a mixture of cellular and tissue components of different state and nature of which only one or some of them are of real clinical interest for the subsequent incubation and culture phases.
Generalmente tali campioni comprendono una frazione liquida ed una frazione cellulare da separare una dall’altra. Generally, these samples include a liquid fraction and a cell fraction to be separated from each other.
Nel caso specifico di campioni biologici comprendenti ovociti, la frazione liquida consiste nel liquido follicolare e la frazione cellulare comprende cumoli oofori. In the specific case of biological samples including oocytes, the liquid fraction consists of the follicular fluid and the cell fraction comprises cumulus oophores.
I cumoli oofori sono complessi cellulari consistenti in ovociti rivestiti di cellule follicolari tenute insieme da una matrice extracellulare viscoelastica, e prelevati dal distretto ovarico generalmente mediante aspirazione transvaginale. Cumulus oophores are cellular complexes consisting of oocytes lined with follicular cells held together by a viscoelastic extracellular matrix, and taken from the ovarian district generally by transvaginal aspiration.
Tuttavia, per procedere con le successive fasi di incubazione e coltura, è necessario separare i complessi cumolo oofori dal liquido follicolare per poi predisporli all’interno dell’idoneo terreno di coltura. However, to proceed with the subsequent incubation and culture phases, it is necessary to separate the cumulus-oophor complexes from the follicular fluid and then arrange them within the suitable culture medium.
Attualmente la separazione dei complessi cumolo oofori dal liquido follicolare avviene manualmente mediante procedimenti di separazione meccanica che prevedono diverse fasi operative separate tra loro. Currently the separation of the cumulus-oophor complexes from the follicular liquid takes place manually by means of mechanical separation processes which provide for various operating steps separated from each other.
Tali procedimenti comprendono il trasferimento del campione biologico, nella fattispecie dei cumoli oofori e del liquido follicolare, all’interno di apposite provette. These procedures include the transfer of the biological sample, in this case the heaps of oophores and follicular fluid, inside special tubes.
Il campione biologico viene quindi suddiviso in aliquote pari al volume di contenimento di ciascuna provetta, determinando l’impiego di numerose provette. The biological sample is then divided into aliquots equal to the containment volume of each tube, resulting in the use of numerous tubes.
Inoltre, è necessario etichettare ciascuna provetta con i dati di un corrispondente paziente, e successivamente sottoporla ad una fase di screening visivo da parte di un operatore. Furthermore, it is necessary to label each tube with the data of a corresponding patient, and subsequently subject it to a phase of visual screening by an operator.
La suddetta fase di screening visivo prevede l’impiego di un dispositivo a pipetta mediante il quale l’operatore estrae manualmente i complessi cumolo oofori dal liquido follicolare, trasferendoli in piastre di coltura provviste dell’apposito terreno di crescita. The aforementioned phase of visual screening involves the use of a pipette device by which the operator manually extracts the complex cumulus oophores from the follicular fluid, transferring them to culture plates equipped with the appropriate growth medium.
Tuttavia, tali procedimenti presentano numerosi inconvenienti legati in particolare alla necessità di effettuare molteplici fasi operative separate tra loro. However, these processes have numerous drawbacks linked in particular to the need to carry out multiple operating steps that are separate from each other.
Inoltre, ciascuna fase necessita di appositi contenitori e dispositivi per essere realizzata, aumentando notevolmente i tempi operativi ed il rischio di contaminazione ambientale del campione biologico. Furthermore, each phase requires special containers and devices to be carried out, considerably increasing the operating times and the risk of environmental contamination of the biological sample.
A questo proposito, il fatto di prevedere una fase di etichettatura di ciascuna provetta ed una fase di screening visivo del campione biologico in essa contenuto aumenta sensibilmente l’incidenza dell’errore umano. In this regard, the fact of providing a labeling phase for each tube and a phase of visual screening of the biological sample contained in it significantly increases the incidence of human error.
Risulta facile comprendere come quest’ultimo sia legato oltre che al rischio di un’errata assegnazione dell’etichetta alla corrispondente provetta del paziente, anche alla mancata individuazione di uno o più complessi cumolo oofori, causandone quindi la perdita. It is easy to understand how the latter is linked not only to the risk of an incorrect assignment of the label to the patient's corresponding test tube, but also to the failure to identify one or more complex heaps of holes, thus causing their loss.
A ciò si aggiunge il fatto che la necessità di trasferire i complessi cumoli oofori dalle provette alle piastre di coltura aumenta lo stress ambientale a cui sono sottoposti sia in termini di temperatura che di condizioni chimicofisiche. Added to this is the fact that the need to transfer the complex heaps of oophores from the test tubes to the culture plates increases the environmental stress to which they are subjected both in terms of temperature and chemical-physical conditions.
Un ulteriore inconveniente da considerare è dovuto all’elevata produzione di rifiuti sanitari legata alla necessità di operare mediante due differenti dispositivi di contenimento, cioè le provette e le piastre di coltura, che unitamente all’utilizzo di etichette e di dispositivi a pipetta, aumenta notevolmente il consumo di materiali sanitari impiegati per l’esecuzione della separazione del campione biologico. A further drawback to consider is due to the high production of medical waste linked to the need to operate using two different containment devices, i.e. test tubes and culture plates, which, together with the use of labels and pipette devices, considerably increases the consumption of sanitary materials used for carrying out the separation of the biological sample.
Il compito principale della presente invenzione è quello di escogitare un dispositivo per la separazione di un campione biologico che consenta di eliminare l’impiego di diversi dispositivi nelle corrispondenti fasi operative, realizzando tale separazione mediante l’utilizzo di un unico dispositivo. The main task of the present invention is to devise a device for the separation of a biological sample that allows to eliminate the use of different devices in the corresponding operating phases, achieving this separation through the use of a single device.
A ll’interno di questo compito, uno scopo del presente trovato è quello di escogitare un dispositivo di separazione di un campione biologico che consenta di diminuire sensibilmente il rischio di contaminazione ambientale del campione biologico, realizzando una separazione asettica all’interno di un solo dispositivo. Within this aim, an object of the present invention is to devise a device for separating a biological sample which allows to significantly reduce the risk of environmental contamination of the biological sample, realizing an aseptic separation within a single device. .
A ltro scopo del presente trovato è quello di escogitare un dispositivo per la separazione di un campione biologico che consenta di diminuire sensibilmente lo spreco di materiale sanitario legato all’esecuzione della separazione del campione biologico stesso. For the other purpose of the present invention is to devise a device for the separation of a biological sample which allows to significantly reduce the waste of sanitary material related to the execution of the separation of the biological sample itself.
Ulteriore scopo del presente trovato è quello di escogitare un dispositivo di separazione di un campione biologico che diminuisca i tempi operativi rispetto a quelli legati all’impiego di dispositivi noti. A further object of the present invention is to devise a device for separating a biological sample which reduces operating times compared to those related to the use of known devices.
A ltro scopo del presente trovato è quello di escogitare un dispositivo per la separazione di un campione biologico che consenta di superare i menzionati inconvenienti della tecnica nota nell’ambito di una soluzione semplice, razionale, di facile ed efficace impiego e dal costo contenuto. Gli scopi sopra esposti sono raggiunti dal presente dispositivo per la separazione di un campione biologico avente le caratteristiche di rivendicazione 1. For the other purpose of the present invention is to devise a device for the separation of a biological sample which allows to overcome the aforementioned drawbacks of the prior art in the context of a simple, rational, easy and effective use and low cost solution. The above objects are achieved by the present device for separating a biological sample having the characteristics of claim 1.
A ltre caratteristiche e vantaggi della presente invenzione risulteranno maggiormente evidenti dalla descrizione di una forma di esecuzione preferita, ma non esclusiva, di un dispositivo per la separazione di un campione biologico, illustrata a titolo indicativo, ma non limitativo, nelle unite tavole di disegni in cui: Other characteristics and advantages of the present invention will become more evident from the description of a preferred, but not exclusive, embodiment of a device for the separation of a biological sample, illustrated by way of example, but not of limitation, in the accompanying tables of drawings in which:
la figura 1 è una vista in esploso del dispositivo secondo il trovato in una prima forma di realizzazione; Figure 1 is an exploded view of the device according to the invention in a first embodiment;
la figura 2 è una vista in sezione dell’esploso di figura 1; figure 2 is a sectional view of the exploded view of figure 1;
la figura 3 è una vista dall’alto del dispositivo di figura 1 nella prima configurazione; Figure 3 is a top view of the device of Figure 1 in the first configuration;
la figura 3a è una vista in sezione lungo il piano IIIa-IIIa di figura 3; figure 3a is a section view along the plane IIIa-IIIa of figure 3;
la figura 4 è una vista dall’alto del dispositivo di figura 1 nella seconda configurazione; Figure 4 is a top view of the device of Figure 1 in the second configuration;
la figura 4a è una vista in sezione lungo il piano IV a-IV a di figura 4; figure 4a is a sectional view along the plane IV a-IV a of figure 4;
la figura 5 è una vista dall’alto del dispositivo di figura 1 nella terza configurazione operativa; Figure 5 is a top view of the device of Figure 1 in the third operating configuration;
la figura 5a è una vista in sezione lungo il piano V a-V a di figura 5; figure 5a is a sectional view along the plane V a-V a of figure 5;
la figura 6 è una vista in esploso del dispositivo secondo il trovato in una seconda forma di realizzazione; figure 6 is an exploded view of the device according to the invention in a second embodiment;
la figura 7 è una vista in sezione di figura 6; figure 7 is a sectional view of figure 6;
la figura 8 è una vista dall’alto del dispositivo di figura 6 nella prima configurazione; figure 8 is a top view of the device of figure 6 in the first configuration;
la figura 8a è una vista in sezione lungo il piano V IIIa-V IIIa di figura 8; la figura 9 è una vista dall’alto del dispositivo di figura 6 nella seconda configurazione operativa; figure 8a is a section view along the plane V IIIa-V IIIa of figure 8; figure 9 is a top view of the device of figure 6 in the second operating configuration;
la figura 9a è una vista in sezione lungo il piano IX a-IX a di figura 9; figure 9a is a sectional view along the plane IX a-IX a of figure 9;
la figura 10 è una vista dall’alto del dispositivo di figura 6 nella terza configurazione operativa; Figure 10 is a top view of the device of Figure 6 in the third operating configuration;
la figura 10a è una vista in sezione lungo il piano X a-X a di figura 10. Figure 10a is a sectional view along the plane X a-X a of Figure 10.
Con particolare riferimento a tali figure, si è indicato globalmente con 1 un dispositivo per la separazione di un campione biologico. With particular reference to these figures, the reference numeral 1 generally designates a device for separating a biological sample.
Il dispositivo 1 comprende un corpo cavo 2 provvisto di una sezione di entrata 3 di un campione biologico 4, 5 comprendente una frazione liquida 4 e una frazione cellulare 5. The device 1 comprises a hollow body 2 provided with an inlet section 3 of a biological sample 4, 5 comprising a liquid fraction 4 and a cellular fraction 5.
Con riferimento ad una preferita forma di realizzazione, il campione biologico 4, 5, nella fattispecie la frazione cellulare 5, comprende ovociti. Il corpo cavo 2 presenta una conformazione allungata assialsimmetrica rispetto ad un asse longitudinale A. With reference to a preferred embodiment, the biological sample 4, 5, in this case the cellular fraction 5, comprises oocytes. The hollow body 2 has an axially symmetrical elongated conformation with respect to a longitudinal axis A.
La forma del corpo cavo 2 è sostanzialmente cilindrica bombata e termina in una prima porzione estremale 6 ed in una seconda porzione estremale 7 contrapposte tra loro e di conformazione cilindrica a sezione costante, con allineamento coassiale rispetto al corpo cavo 2; non si escludono, tuttavia, alternative forme di attuazione in cui le pareti della prima porzione estremale 6 e della seconda porzione estremale 7 abbiano forma differente e, ad esempio, non siano coassiali al corpo cavo 2. The shape of the hollow body 2 is substantially rounded cylindrical and ends in a first extremal portion 6 and in a second extremal portion 7 opposite each other and of cylindrical shape with constant section, with coaxial alignment with respect to the hollow body 2; However, alternative embodiments are not excluded in which the walls of the first extremal portion 6 and of the second extremal portion 7 have a different shape and, for example, are not coaxial to the hollow body 2.
Nel dettaglio, la prima porzione estremale 6 è realizzata in corrispondenza della sezione di entrata 3. In detail, the first extremal portion 6 is made in correspondence with the inlet section 3.
Il dispositivo 1 comprende una sezione di scarico 8 del campione biologico 4, 5 disposta a valle della sezione di entrata 3 rispetto alla direzione di avanzamento D del campione biologico 4, 5 all’interno del corpo cavo 2. Nel dettaglio, la sezione di scarico 8 è disposta inferiormente alla sezione di entrata 3. The device 1 comprises a discharge section 8 of the biological sample 4, 5 arranged downstream of the inlet section 3 with respect to the direction of advancement D of the biological sample 4, 5 inside the hollow body 2. In detail, the discharge section 8 is arranged below the inlet section 3.
V antaggiosamente, la seconda porzione estremale 7 è realizzata in corrispondenza della porzione di scarico 8. Advantageously, the second extremal portion 7 is made in correspondence with the discharge portion 8.
A questo proposito si specifica che, nell’ambito della presente trattazione, espressioni come “alto”, “basso”, “superiore”, “inferiore”, “sopra”, “sotto” e simili sono da considerare con riferimento ad una configurazione operativa in cui il dispositivo 1 è impiegato con la direzione di avanzamento D ortogonale al suolo. In this regard, it is specified that, in the context of this discussion, expressions such as "high", "low", "upper", "lower", "above", "below" and the like are to be considered with reference to an operational configuration in which the device 1 is used with the direction of advancement D perpendicular to the ground.
Tuttavia, non si esclude dall’ambito della presente trattazione che il dispositivo 1 possa essere impiegato con la direzione di avanzamento D sostanzialmente parallela al suolo. However, it is not excluded from the scope of this discussion that the device 1 can be used with the direction of advancement D substantially parallel to the ground.
Inoltre, il dispositivo 1 comprende mezzi di filtraggio 9 del campione biologico 4, 5 nella frazione liquida 4 e nella frazione cellulare 5 interposti tra la sezione di entrata 3 e la sezione di scarico 8. Furthermore, the device 1 comprises filtering means 9 of the biological sample 4, 5 in the liquid fraction 4 and in the cellular fraction 5 interposed between the inlet section 3 and the discharge section 8.
Secondo il trovato, la frazione cellulare 5 è trattenuta nella sezione di entrata 3 dai mezzi di filtraggio 9 e la frazione liquida 4 è scaricata nella sezione di scarico 8. According to the invention, the cellular fraction 5 is retained in the inlet section 3 by the filtering means 9 and the liquid fraction 4 is discharged into the discharge section 8.
Preferibilmente, la frazione cellulare 5 comprende ovociti. Preferably, the cellular fraction 5 comprises oocytes.
I mezzi di filtraggio 9 comprendono una pluralità di fori passanti 9a realizzati su di una parete perimetrale 17 di una camera di raccolta 11 descritta nel dettaglio nel prosieguo della presente trattazione. The filtering means 9 comprise a plurality of through holes 9a made on a perimeter wall 17 of a collection chamber 11 described in detail in the rest of the present description.
I fori passanti 9a presentano un diametro compreso tra 50 µ m e 200 µ m. Preferibilmente, i fori passanti 9a presentano un diametro compreso tra 70 µ m e 150 µ m. The through holes 9a have a diameter between 50 µ m and 200 µ m. Preferably, the through holes 9a have a diameter comprised between 70 µ m and 150 µ m.
Il diametro dei fori passanti 9a è atto a consentire il passaggio della frazione liquida 4 ed il trattenimento della frazione cellulare 5 al di sopra degli stessi. The diameter of the through holes 9a is adapted to allow the passage of the liquid fraction 4 and the retention of the cellular fraction 5 above them.
A questo proposito, quando il dispositivo 1 è impiegato per la separazione di ovociti, presentanti generalmente un diametro medio superiore a 300 µ m, il diametro dei fori passanti 9a garantisce la separazione di questi ultimi dalla frazione liquida 4. In this regard, when the device 1 is used for the separation of oocytes, generally having an average diameter greater than 300 µm, the diameter of the through holes 9a guarantees the separation of the latter from the liquid fraction 4.
La sezione di entrata 3 comprende una camera di introduzione 12 del campione biologico 4, 5 disposta a monte dei mezzi di filtraggio 9 rispetto alla direzione di avanzamento D. The inlet section 3 comprises a chamber 12 for introducing the biological sample 4, 5 arranged upstream of the filtering means 9 with respect to the direction of advance D.
Preferibilmente, la camera di introduzione 12 è disposta superiormente ai mezzi di filtraggio 9. Preferably, the introduction chamber 12 is arranged above the filtering means 9.
La camera di introduzione 12 presenta una conformazione sostanzialmente semisferica ed è realizzata almeno in parte in un materiale polimerico elasticamente deformabile del tipo ad esempio di silicone. The introduction chamber 12 has a substantially hemispherical conformation and is made at least in part of an elastically deformable polymeric material such as, for example, silicone.
Inoltre, la camera di introduzione 12 è associata al corpo cavo 2 per interposizione di mezzi di unione 13, 14. Furthermore, the introduction chamber 12 is associated with the hollow body 2 by interposition of joining means 13, 14.
I mezzi di unione 13, 14 comprendono un bordo di riscontro 13 realizzato sporgente dalla superficie esterna della camera di introduzione 12 ed una scanalatura 14 realizzata internamente al corpo cavo 2 ed in cui è inseribile il bordo di riscontro 13. The joining means 13, 14 comprise an abutment edge 13 made protruding from the external surface of the introduction chamber 12 and a groove 14 formed inside the hollow body 2 and into which the abutment edge 13 can be inserted.
Come visibile nelle figure, il bordo di riscontro 13 e la scanalatura 14 sono realizzati in prossimità della prima porzione estremale 6. As can be seen in the figures, the abutment edge 13 and the groove 14 are made in proximity to the first extremal portion 6.
Ancora, la camera di introduzione 12 comprende una parete di fondo 15 ed un foro centrale 16 realizzato su quest’ultima e atto a consentire il passaggio del campione biologico 4, 5 dalla sezione di entrata 3 alla sezione di scarico 8. Furthermore, the introduction chamber 12 includes a bottom wall 15 and a central hole 16 made on the latter and adapted to allow the passage of the biological sample 4, 5 from the inlet section 3 to the discharge section 8.
Parallelamente, la sezione di scarico 8 comprende una camera di raccolta 11 della frazione liquida 4 provvista di una parete perimetrale 17 su cui sono realizzati i mezzi di filtraggio 9. At the same time, the discharge section 8 comprises a chamber 11 for collecting the liquid fraction 4 provided with a perimeter wall 17 on which the filtering means 9 are made.
Più nel dettaglio, la parete perimetrale 17 comprende: More specifically, the perimeter wall 17 includes:
- una porzione apicale 18 affacciata alla sezione d’entrata 3 e presentante, rispetto alla direzione di avanzamento D, una conformazione sostanzialmente convessa, ed su cui sono realizzati i fori passanti 9a; - an apical portion 18 facing the inlet section 3 and presenting, with respect to the direction of advancement D, a substantially convex conformation, and on which the through holes 9a are made;
- una porzione estremale 19 opposta alla porzione apicale 18, affacciata alla sezione di scarico 8 e presentante, rispetto alla direzione di avanzamento D, una conformazione sostanzialmente concava all’interno della quale è raccolta la frazione liquida 4; - an extremal portion 19 opposite the apical portion 18, facing the discharge section 8 and presenting, with respect to the direction of advancement D, a substantially concave conformation within which the liquid fraction 4 is collected;
- una porzione di collegamento 20 della porzione apicale 18 e della porzione estremale 19 disposta sostanzialmente trasversalmente rispetto all’asse longitudinale A passante per il corpo cavo 2 e atta a consentire lo scivolamento della frazione cellulare 5 dalla porzione apicale 18 alla sezione di scarico 8. - a connecting portion 20 of the apical portion 18 and of the extremal portion 19 arranged substantially transversely with respect to the longitudinal axis A passing through the hollow body 2 and designed to allow the sliding of the cellular fraction 5 from the apical portion 18 to the discharge section 8.
Nel dettaglio, i fori passanti 9a definiscono sulla porzione apicale 18 una porzione di filtraggio 9b coassiale alla camera di introduzione 12. In detail, the through holes 9a define on the apical portion 18 a filtering portion 9b coaxial to the introduction chamber 12.
V antaggiosamente, la porzione di filtraggio 9b presenta una conformazione ed un’estensione coincidente con la rispettiva conformazione ed estensione del foro centrale 16. Advantageously, the filtering portion 9b has a conformation and an extension coinciding with the respective conformation and extension of the central hole 16.
In altre parole, la porzione di filtraggio 9b presenta conformazione circolare avente diametro combaciante con il diametro del foro centrale 16. Secondo una preferita forma di realizzazione dei mezzi di filtraggio 9, questi ultimi comprendono una membrana filtrante 9c su cui sono realizzati i fori passanti 9a, ed associata alla camera di raccolta 11 per interposizione di mezzi di supporto 21. In other words, the filtering portion 9b has a circular shape having a diameter matching the diameter of the central hole 16. According to a preferred embodiment of the filtering means 9, the latter comprise a filtering membrane 9c on which the through holes 9a are made , and associated with the collection chamber 11 by interposition of support means 21.
La porzione apicale 18, nella fattispecie la porzione di filtraggio 9b, comprende una luce di ingresso. The apical portion 18, in this case the filtering portion 9b, comprises an inlet port.
V antaggiosamente, la luce di ingresso presenta una conformazione sostanzialmente circolare. Advantageously, the inlet port has a substantially circular shape.
Ciò significa che la luce di ingresso coincide con la porzione di filtraggio 9b. This means that the inlet port coincides with the filtering portion 9b.
Parallelamente, i mezzi di supporto 21 comprendono una pluralità di elementi di supporto della membrana filtrante 9c. At the same time, the support means 21 comprise a plurality of support elements of the filtering membrane 9c.
Come visibile nelle figure, gli elementi di supporto 21 sono disposti radialmente all’interno della luce di ingresso in modo da garantire il mantenimento in tensione della membrana filtrante 9c. As can be seen in the figures, the support elements 21 are arranged radially within the inlet port so as to ensure the maintenance of tension of the filter membrane 9c.
Inoltre, la sezione di scarico 8 comprende una camera di estrazione e coltura 22 della frazione cellulare 5 disposta a valle della camera di raccolta 11 rispetto alla direzione di avanzamento D. Furthermore, the discharge section 8 comprises an extraction and culture chamber 22 for the cell fraction 5 arranged downstream of the collection chamber 11 with respect to the direction of advance D.
La camera di estrazione e coltura 22 comprende un elemento piastriforme 23 associato amovibilmente al corpo cavo 2 per interposizione di mezzi di aggancio 24, 25 atti a consentirne il reciproco incastro. The extraction and culture chamber 22 comprises a plate-like element 23 removably associated with the hollow body 2 by interposition of hooking means 24, 25 suitable for allowing mutual interlocking thereof.
I mezzi di aggancio 24, 25 comprendono una parete marginale 24 sporgente a sbalzo dall’elemento piastriforme 23 ed una superficie di incastro 25 realizzata internamente alla seconda porzione estremale 7 e atta a riscontrare ad incastro la parete perimetrale stessa. The coupling means 24, 25 comprise a marginal wall 24 projecting cantilevered from the plate-like element 23 and an interlocking surface 25 made internally to the second extremal portion 7 and adapted to interlock the perimeter wall itself.
In altre parole, la parete marginale 24 è inseribile sostanzialmente a misura o con leggera interferenza all’interno della seconda porzione estremale 7. Come visibile nelle figure, la parete marginale 24 definisce un bordo marginale 26 realizzato sull’elemento piastriforme 23 esternamente alla parete marginale stessa e atto a riscontrare in battuta la seconda porzione estremale 7. In other words, the marginal wall 24 can be inserted substantially to size or with slight interference inside the second extremal portion 7. As can be seen in the figures, the marginal wall 24 defines a marginal edge 26 made on the plate-like element 23 outside the marginal wall itself and able to abut the second extremal portion 7.
Inoltre, il bordo marginale 26 è atto ad essere afferrato dall’operatore per consentire l’inserimento e la rimozione della camera di estrazione e coltura 22. Furthermore, the marginal edge 26 is able to be grasped by the operator to allow the insertion and removal of the extraction and culture chamber 22.
Il fatto di prevedere una camera di estrazione e coltura 22 associata amovibilmente alla seconda porzione estremale 7 consente di eliminare il trasferimento della frazione cellulare 5 in appositi dispositivi di coltura, ma al contrario di impiegare direttamente la camera di estrazione e coltura 22 per le successive fasi di trattamento della frazione cellulare stessa. The fact of providing an extraction and culture chamber 22 removably associated with the second extremal portion 7 allows to eliminate the transfer of the cellular fraction 5 into suitable culture devices, but on the contrary to directly use the extraction and culture chamber 22 for the subsequent phases of treatment of the cellular fraction itself.
Come sopra anticipato, il dispositivo 1 comprende mezzi di movimentazione 27, 28, 29, 30 associati al corpo cavo 2 e atti a movimentare la camera di raccolta 11 rispetto alla camera di introduzione 12. As mentioned above, the device 1 comprises movement means 27, 28, 29, 30 associated with the hollow body 2 and adapted to move the collection chamber 11 with respect to the introduction chamber 12.
A questo proposito, la camera di raccolta 11 è mobile in allontanamento dalla camera di introduzione 12 tra: In this regard, the collection chamber 11 is movable away from the introduction chamber 12 between:
- una prima configurazione (figure 3-3a) in cui la camera di introduzione 12 è isolata dalla camera di raccolta 11; - a first configuration (Figures 3-3a) in which the introduction chamber 12 is isolated from the collection chamber 11;
- una seconda configurazione (figure 4-4a) in cui la camera di introduzione 12 è in comunicazione fluidica con la camera di raccolta 11 ed è isolata dalla camera di estrazione e coltura 22; e - a second configuration (Figures 4-4a) in which the introduction chamber 12 is in fluid communication with the collection chamber 11 and is isolated from the extraction and culture chamber 22; And
- una terza configurazione (figure 5-5a) in cui la camera di introduzione 12 è in comunicazione fluidica con la camera di estrazione e coltura 22. I mezzi di movimentazione 27, 28, 29, 30 comprendono una porzione di attivazione 27 associata al corpo cavo 2 in prossimità della sezione d’entrata 3 e afferrabile dall’operatore per consentirne la rispettiva rotazione attorno ad un asse di rotazione R passante per il corpo cavo 2. Preferibilmente, l’asse di rotazione R coincide con l’asse longitudinale A. La porzione di attivazione 27 è associata al corpo cavo 2 in corrispondenza della prima porzione estremale 6. - a third configuration (Figures 5-5a) in which the introduction chamber 12 is in fluid communication with the extraction and culture chamber 22. The handling means 27, 28, 29, 30 comprise an activation portion 27 associated with the body cable 2 near the inlet section 3 and graspable by the operator to allow its respective rotation around a rotation axis R passing through the hollow body 2. Preferably, the rotation axis R coincides with the longitudinal axis A. The activation portion 27 is associated with the hollow body 2 at the first extremal portion 6.
Preferibilmente, la porzione di attivazione 27 comprende una superficie esterna di conformazione anulare provvista di un bordo di accoppiamento 31 atto a consentire l’associazione per incastro con la prima porzione estremale 6. Preferably, the activation portion 27 comprises an external surface of annular conformation provided with a coupling edge 31 suitable for allowing the association by interlocking with the first extremal portion 6.
A questo scopo, la porzione di attivazione 27 è associata al corpo cavo 2 per interposizione di mezzi di accoppiamento 32, 33. For this purpose, the activation portion 27 is associated with the hollow body 2 by interposition of coupling means 32, 33.
I mezzi di accoppiamento 32, 33 comprendono una prima superficie di accoppiamento 32 realizzata esternamente al corpo cavo 2 in corrispondenza della sezione di entrata 3, ed una seconda superficie di accoppiamento 33 realizzata internamente alla porzione di attivazione 27. Preferibilmente, la prima superficie di accoppiamento 32 è realizzata in corrispondenza della prima porzione estremale 6 e la seconda superficie di accoppiamento 33 è realizzata in corrispondenza del bordo di accoppiamento 31. The coupling means 32, 33 comprise a first coupling surface 32 made externally to the hollow body 2 at the inlet section 3, and a second coupling surface 33 made inside the activation portion 27. Preferably, the first coupling surface 32 is made at the first end portion 6 and the second coupling surface 33 is made at the coupling edge 31.
V antaggiosamente, la prima superficie di accoppiamento 32 e la seconda superficie di accoppiamento 33 sono filettate, facilitando notevolmente la rotazione della porzione di attivazione 27 rispetto al corpo cavo 2. Advantageously, the first coupling surface 32 and the second coupling surface 33 are threaded, considerably facilitating the rotation of the activation portion 27 with respect to the hollow body 2.
In altre parole, la seconda superficie di accoppiamento 33 è in contatto di strisciamento rotoidale sulla prima superficie di accoppiamento 32. In other words, the second coupling surface 33 is in rotoidal sliding contact on the first coupling surface 32.
Nella presente trattazione, il fatto che la porzione di attivazione 27 sia scorrevole in rotazione sul corpo cavo 2 significa che esse sono vincolate in modo da definire una generica coppia cinematica, nella fattispecie rotoidale, la cui libertà di movimento permette la rotazione della porzione di attivazione stessa sulla prima porzione estremale 6. In the present discussion, the fact that the activation portion 27 is sliding in rotation on the hollow body 2 means that they are constrained so as to define a generic kinematic pair, in this case rotoidal, whose freedom of movement allows the rotation of the activation portion same on the first extremal portion 6.
A questo proposito, la porzione di attivazione 27 comprende una superficie di presa 37 atta ad essere afferrata dall’operatore durante la movimentazione della porzione di attivazione stessa. In this regard, the activation portion 27 comprises a gripping surface 37 suitable for being grasped by the operator during the movement of the activation portion itself.
Per agevolare la messa in rotazione della porzione di attivazione 27, la superficie di presa 37 può comprendere uno o più rilievi, oppure essere zigrinata. To facilitate the rotation of the activation portion 27, the gripping surface 37 can comprise one or more reliefs, or be knurled.
La porzione di attivazione 27 comprende una superficie circolare 46 da cui si estende la superficie di presa 37. The activation portion 27 comprises a circular surface 46 from which the gripping surface 37 extends.
Inoltre, il dispositivo 1 comprende un’apertura d’entrata 34 realizzata sulla porzione di attivazione 27 e collegabile a mezzi di introduzione del campione biologico 4, 5 nella sezione d’entrata 3. In addition, the device 1 includes an inlet 34 made on the activation portion 27 and connectable to means of introduction of the biological sample 4, 5 in the inlet section 3.
A titolo esemplificativo, i mezzi di introduzione, non rappresentati nelle figure, sono del tipo di un dispositivo di estrazione del campione biologico 4, 5. By way of example, the introduction means, not shown in the figures, are of the type of a device for extracting the biological sample 4, 5.
Con riferimento ad una preferita forma di realizzazione del dispositivo 1 in cui è utilizzato per l’estrazione di ovociti, i mezzi di introduzione sono del tipo di un dispositivo di aspirazione dotato di un elemento ad ago inseribile in un follicolo ovarico. With reference to a preferred embodiment of the device 1 in which it is used for the extraction of oocytes, the introduction means are of the type of an aspiration device equipped with a needle element that can be inserted into an ovarian follicle.
Non si escludono, altresì, alternative soluzioni realizzative in cui il dispositivo 1 è utilizzato per l’estrazione di campioni biologici differenti, ad esempio bioptici. Also, alternative construction solutions are not excluded in which the device 1 is used for the extraction of different biological samples, for example biopsy.
I mezzi di movimentazione 27, 28, 29, 30 comprendono un elemento di collegamento 28 provvisto di una prima estremità 35 associata alla porzione di attivazione 27 e di una seconda estremità 36 associata alla camera di raccolta 11. The handling means 27, 28, 29, 30 comprise a connection element 28 provided with a first end 35 associated with the activation portion 27 and with a second end 36 associated with the collection chamber 11.
Come visibile dalle figure, l’elemento di collegamento 28 è del tipo di un elemento a perno. As can be seen from the figures, the connecting element 28 is of the type of a pin element.
In accordo con una prima forma di realizzazione del dispositivo 1 rappresentata nelle figure 1-5, i mezzi di movimentazione 27, 28, 29, 30 comprendono un elemento a pulsante 29 associato alla prima estremità 35 dell’elemento di collegamento 28 e premibile dall’operatore per consentire il passaggio della camera di introduzione 12 dalla prima configurazione alla seconda configurazione. In accordance with a first embodiment of the device 1 shown in Figures 1-5, the movement means 27, 28, 29, 30 comprise a button element 29 associated with the first end 35 of the connection element 28 and which can be pressed from operator to allow passage of the introduction chamber 12 from the first configuration to the second configuration.
Inoltre, i mezzi di movimentazione 27, 28, 29, 30 comprendono un setto di collegamento 30 della porzione di attivazione 27 con la camera di introduzione 12. Furthermore, the handling means 27, 28, 29, 30 comprise a septum 30 for connecting the activation portion 27 with the introduction chamber 12.
Il setto di collegamento 30 presenta una conformazione sostanzialmente allungata ed è provvisto di estremità associate rispettivamente alla porzione di attivazione 27 e ad un bordo di chiusura 38. The connecting partition 30 has a substantially elongated conformation and is provided with ends associated respectively with the activation portion 27 and with a closing edge 38.
Come visibile nelle figure 1-5, il setto di collegamento 30 è calzato attorno all’elemento di collegamento 28. As visible in figures 1-5, the connecting partition 30 is fitted around the connecting element 28.
Inoltre, il bordo di chiusura 38 è inserito sostanzialmente a misura all’interno del foro centrale 16. Furthermore, the closing edge 38 is substantially inserted to size inside the central hole 16.
Ciò significa che, nella prima configurazione (figure 3-3a), il bordo di chiusura 38 riscontra i margini del foro centrale 16 occludendo quest’ultimo. This means that, in the first configuration (Figures 3-3a), the closing edge 38 meets the margins of the central hole 16 occluding the latter.
Nella fattispecie, i margini del foro centrale 16 sono allineati con il bordo di chiusura 38 che occupa lo spazio vuoto definito dal foro centrale stesso. Nello specifico, in accordo con la prima forma di realizzazione del dispositivo 1, il setto di collegamento 30 è associato solidalmente all’elemento di collegamento 28 per interposizione di mezzi di attacco 39, 40. In this case, the margins of the central hole 16 are aligned with the closing edge 38 which occupies the empty space defined by the central hole itself. Specifically, in accordance with the first embodiment of the device 1, the connecting partition 30 is integrally associated with the connecting element 28 by interposition of attachment means 39, 40.
I mezzi di attacco 39, 40 comprendono un elemento di attacco 39 associato alla porzione di attivazione 27, ed una pluralità di scanalature di alloggiamento 40 realizzate sull’elemento di collegamento 28 in prossimità dell’elemento a pulsante 29. The attachment means 39, 40 comprise an attachment element 39 associated with the activation portion 27, and a plurality of housing grooves 40 made on the connection element 28 near the button element 29.
Le scanalature di alloggiamento 40 sono realizzate lungo l’elemento di collegamento 28 ad una distanza predefinita. The housing grooves 40 are made along the connecting element 28 at a predefined distance.
Con riferimento alla particolare soluzione realizzativa rappresentata nelle figure 1-5a, i mezzi di attacco 39, 40 comprendono una prima scanalatura di alloggiamento 40a realizzata inferiormente ad una seconda scanalatura di alloggiamento 40b. With reference to the particular embodiment shown in Figures 1-5a, the attachment means 39, 40 comprise a first housing groove 40a made below a second housing groove 40b.
Nella prima configurazione, l’elemento di attacco 39 è inserito all’interno della prima scanalatura di alloggiamento 40a. In the first configuration, the attachment element 39 is inserted inside the first housing groove 40a.
A questo proposito, in uso, l’elemento di collegamento 28 è mobile assialmente per effetto della forza esercitata dall’operatore sull’elemento a pulsante 29 (indicata in figura 4a con la freccia P); ciò significa che lo spostamento assiale dell’elemento di collegamento 28 determina lo spostamento verso il basso della camera di raccolta 11. In this regard, in use, the connection element 28 is axially movable due to the force exerted by the operator on the button element 29 (indicated in figure 4a with the arrow P); this means that the axial displacement of the connecting element 28 determines the downward displacement of the collection chamber 11.
La distanza percorsa dall’elemento di collegamento 28, cioè la distanza percorsa dalla camera di raccolta 11 quando l’operatore preme l’elemento a pulsante 29, è sostanzialmente pari alla distanza tra le scanalature di alloggiamento 40. The distance traveled by the connection element 28, i.e. the distance traveled by the collection chamber 11 when the operator presses the button element 29, is substantially equal to the distance between the housing grooves 40.
In altre parole, la forza esercitata dall’operatore sull’elemento di collegamento 28 determina lo spostamento dell’elemento di attacco 39 dalla prima scanalatura di alloggiamento 40a alla seconda scanalatura di alloggiamento 40b. In other words, the force exerted by the operator on the connecting element 28 determines the displacement of the attachment element 39 from the first housing groove 40a to the second housing groove 40b.
Simultaneamente, il peso esercitato dal campione biologico 4, 5 sulla parete di fondo 15 in combinazione con la traslazione assiale della camera di raccolta 11 determina lo spostamento della parete di fondo 15 definendo una luce di passaggio 41 del campione biologico stesso. Simultaneously, the weight exerted by the biological sample 4, 5 on the bottom wall 15 in combination with the axial translation of the collection chamber 11 determines the displacement of the bottom wall 15 defining a passage opening 41 of the biological sample itself.
La luce di passaggio 41 è ottenuta sfruttando la deformabilità della parete di fondo 15. The passage opening 41 is obtained by exploiting the deformability of the bottom wall 15.
In altre parole, la deformabilità della parete di fondo 15 in combinazione con la mancanza di appoggio di quest’ultima sulla porzione apicale 18 determinano la formazione della luce di passaggio 41. In other words, the deformability of the bottom wall 15 in combination with the lack of support of the latter on the apical portion 18 determine the formation of the passage opening 41.
La luce di passaggio 41 consente alla frazione liquida 4 di fluire verso la porzione di filtraggio 9b e, simultaneamente, il deposito della frazione cellulare 5 su quest’ultima. The passage opening 41 allows the liquid fraction 4 to flow towards the filtering portion 9b and, simultaneously, the deposit of the cellular fraction 5 on the latter.
A l fine di diminuire il rischio di perdita di campione biologico 4, 5 legato alla dispersione di quest’ultimo lungo le pareti interne alla camera di introduzione 12, l’operatore inserisce attraverso l’apertura d’entrata 34 un liquido di lavaggio e coltura 42. In order to reduce the risk of loss of biological sample 4, 5 linked to the dispersion of the latter along the internal walls of the introduction chamber 12, the operator inserts a washing and culture liquid through the inlet opening 34 42.
Il liquido di lavaggio e coltura 42 è del tipo di un terreno di coltura cellulare variabile in funzione delle diverse tipologie di campione biologico 4, 5. The washing and culture liquid 42 is of the type of a cell culture medium which varies according to the different types of biological sample 4, 5.
A seguito dello spostamento della camera di raccolta 11, la porzione di attivazione 27 è ruotata attorno all’asse di rotazione R determinando il passaggio della camera di introduzione 12 dalla seconda configurazione alla terza configurazione (figure 5-5a). Following the movement of the collection chamber 11, the activation portion 27 is rotated around the axis of rotation R causing the passage of the introduction chamber 12 from the second configuration to the third configuration (Figures 5-5a).
Nel dettaglio, la porzione di attivazione 27 è ruotabile attorno all’asse di rotazione R per effetto della forza applicata dall’operatore sulla superficie di presa 37. In detail, the activation portion 27 can be rotated around the rotation axis R due to the force applied by the operator on the gripping surface 37.
La rotazione della porzione di attivazione 27 realizza un ulteriore spostamento della camera di raccolta 11 verso il basso. The rotation of the activation portion 27 achieves a further movement of the collection chamber 11 downwards.
Infatti, i mezzi di attacco 39, 40 sono atti a consentire lo spostamento assiale dell’elemento di collegamento 28 e, parallelamente, la rotazione della porzione di attivazione 27 attorno all’asse di rotazione R. In fact, the attachment means 39, 40 are designed to allow the axial displacement of the connecting element 28 and, in parallel, the rotation of the activation portion 27 around the rotation axis R.
In altre parole, l’associazione solidale della porzione di attivazione 27 all’elemento di collegamento 28 consente, attraverso la rotazione della porzione di attivazione stessa, lo spostamento verso il basso della camera di raccolta 11. In other words, the integral association of the activation portion 27 to the connecting element 28 allows, through the rotation of the activation portion itself, the downward movement of the collection chamber 11.
Come visibile nelle figure 5-5a, la rotazione della porzione di attivazione 27 è arrestata dal riscontro del bordo di accoppiamento 31 con un rispettivo bordo di arresto 43 realizzato sul corpo cavo 2. As can be seen in Figures 5-5a, the rotation of the activation portion 27 is stopped by the abutment of the coupling edge 31 with a respective stop edge 43 made on the hollow body 2.
Infatti, la rotazione della porzione di attivazione 27 è consentita finché il bordo di accoppiamento 31 non riscontra in battuta il bordo di arresto 43. A questo punto, la camera di introduzione 12 è in comunicazione con la camera di estrazione e coltura 22. In fact, the rotation of the activation portion 27 is allowed until the coupling edge 31 strikes the stop edge 43. At this point, the introduction chamber 12 is in communication with the extraction and culture chamber 22.
Con lo scopo di favorire lo scivolamento della frazione cellulare 5, nella fattispecie degli ovociti, lungo la parete perimetrale 17, l’operatore inserisce nuovamente all’interno della camera di introduzione 12 il liquido di lavaggio e coltura 42. In order to facilitate the sliding of the cellular fraction 5, in this case the oocytes, along the perimeter wall 17, the operator reinserts the washing and culture liquid 42 inside the introduction chamber 12.
In questo modo, il liquido di lavaggio e coltura 42 fluisce dalla camera di introduzione 12, passando attraverso la luce di passaggio 41, per poi colare trainando la frazione cellulare 5 sulla parete perimetrale 17 ed essere raccolto nella camera di estrazione e coltura 22; ciò è consentito dal fatto che i fori passanti 9c sono ostruiti dalla frazione cellulare 5. In this way, the washing and culture liquid 42 flows from the introduction chamber 12, passing through the passage opening 41, and then pours, pulling the cellular fraction 5 on the perimeter wall 17 and is collected in the extraction and culture chamber 22; this is allowed by the fact that the through holes 9c are blocked by the cellular fraction 5.
Il dispositivo 1 comprende mezzi di segnalazione 44, 45, 46, 47 della configurazione della camera di introduzione 12. The device 1 comprises means 44, 45, 46, 47 of the configuration of the introduction chamber 12.
Con riferimento alla prima forma di realizzazione del dispositivo 1, i mezzi di segnalazione 44, 45, 46, 47 comprendono un’apertura di visualizzazione 44 passante e realizzata sulla porzione di attivazione 27, e una pluralità di elementi di segnalazione, non rappresentati in dettaglio nelle figure 1-5a, realizzati sulla prima porzione estremale 6 del corpo cavo 2 e atti a consentire la visualizzazione della configurazione della camera di introduzione 12 all’operatore. With reference to the first embodiment of the device 1, the signaling means 44, 45, 46, 47 comprise a display opening 44 passing through and made on the activation portion 27, and a plurality of signaling elements, not shown in detail in figures 1-5a, made on the first extremal portion 6 of the hollow body 2 and able to allow the operator to view the configuration of the introduction chamber 12.
Il funzionamento del dispositivo 1 in accordo con la prima forma di realizzazione nell’esecuzione del metodo secondo il trovato è il seguente. Il metodo oggetto della presente invenzione prevede una fase di fornitura di del dispositivo 1. The operation of the device 1 in accordance with the first embodiment in the execution of the method according to the invention is as follows. The method object of the present invention provides for a supply step of the device 1.
Parallelamente, il metodo prevede una fase di fornitura del campione biologico 4, 5 comprendente la frazione liquida 4 e la frazione cellulare 5. Secondo il trovato, il metodo in oggetto prevede una fase di introduzione di del campione biologico 4, 5 nella sezione d’entrata 3. At the same time, the method provides for a step of supplying the biological sample 4, 5 comprising the liquid fraction 4 and the cellular fraction 5. According to the invention, the method in question provides for a step of introducing the biological sample 4, 5 in the section of entrance 3.
In pratica, l’operatore inserisce il campione biologico 4, 5 all’interno della camera di introduzione 12 attraverso l’apertura d’entrata 34. In practice, the operator inserts the biological sample 4, 5 inside the introduction chamber 12 through the entrance opening 34.
Il metodo prevede, inoltre, una prima fase di separazione in cui la camera di introduzione 12 è isolata dalla camera di raccolta 11. The method also provides for a first separation step in which the introduction chamber 12 is isolated from the collection chamber 11.
A questo proposito, la camera di introduzione 12 è nella prima configurazione (figure 3-3a) ed il campione biologico 4, 5 è contenuto all’interno di quest’ultima in appoggio sulla parete di fondo 15. In this regard, the introduction chamber 12 is in the first configuration (Figures 3-3a) and the biological sample 4, 5 is contained within the latter resting on the back wall 15.
A seguire, il metodo comprende una seconda fase di separazione in cui la camera di introduzione 12 è in comunicazione fluidica con la camera di raccolta 11, ed in cui gli ovociti sono trattenuti dai mezzi di filtraggio 9 e la frazione liquida 4 è raccolta nella camera di raccolta 11. Subsequently, the method comprises a second separation step in which the introduction chamber 12 is in fluid communication with the collection chamber 11, and in which the oocytes are retained by the filtering means 9 and the liquid fraction 4 is collected in the chamber. collection 11.
In uso, l’operatore preme sull’elemento a pulsante 29, come indicato dalla freccia P in figura 4, determinando lo spostamento della camera di introduzione 12 dalla prima configurazione alla seconda configurazione (figure 4-4a). In use, the operator presses on the button element 29, as indicated by the arrow P in figure 4, causing the displacement of the introduction chamber 12 from the first configuration to the second configuration (figures 4-4a).
La traslazione assiale verso il basso compiuta dalla camera di raccolta 11 definisce la luce di passaggio 41; ciò significa che la parete di fondo 15 subisce una lieve deformazione elastica dovuta alla forza peso esercitata dal campione biologico 4, 5 sulla parete di fondo stessa e dallo spostamento del punto di appoggio della camera di introduzione 12 sulla camera di raccolta 11. The downward axial translation performed by the collection chamber 11 defines the passage opening 41; this means that the bottom wall 15 undergoes a slight elastic deformation due to the weight force exerted by the biological sample 4, 5 on the bottom wall itself and by the displacement of the resting point of the introduction chamber 12 on the collection chamber 11.
Il campione biologico 4, 5 riscontra quindi i mezzi di filtraggio 9. Nella fattispecie, la frazione liquida 4 è raccolta, attraversando i fori passanti 9, nella camera di raccolta 11, mentre la frazione cellulare 5 è trattenuta dalla porzione di filtraggio 9b al di sopra dei fori passanti 9a. The biological sample 4, 5 therefore encounters the filtering means 9. In this case, the liquid fraction 4 is collected, passing through the through holes 9, in the collection chamber 11, while the cellular fraction 5 is retained by the filtering portion 9b beyond above the through holes 9a.
In altre parole, la viscosità e la consistenza della frazione cellulare 5 ne consentono il trattenimento sulla membrana filtrante 9c. In other words, the viscosity and consistency of the cellular fraction 5 allow it to be retained on the filter membrane 9c.
A questo punto, la seconda fase di separazione comprende una prima fase di lavaggio della camera di introduzione 12 mediante il liquido di lavaggio e coltura 42. At this point, the second separation step comprises a first washing step of the introduction chamber 12 by means of the washing and culture liquid 42.
In pratica, l’operatore introduce il liquido di lavaggio e coltura 42 all’interno della camera di introduzione 12 in modo da rimuovere l’eventuale campione biologico 4, 5 residuo rimasto adeso internamente alla camera di introduzione 12. In practice, the operator introduces the washing and culture liquid 42 inside the introduction chamber 12 in order to remove any residual biological sample 4, 5 remaining adhered inside the introduction chamber 12.
Eventuali residui della frazione cellulare 5 sono quindi convogliati ai mezzi di filtraggio 9 passando attraverso la luce di passaggio 41. Any residues of the cellular fraction 5 are then conveyed to the filtering means 9 passing through the passage port 41.
Anche in questo caso, la frazione liquida 4 del campione biologico 4, 5 è introdotta nella camera di raccolta 11 passando attraverso i fori passanti 9, mentre la frazione cellulare 5 entra in contatto con la membrana filtrante 9b rimanendo trattenuta dalla stessa. Also in this case, the liquid fraction 4 of the biological sample 4, 5 is introduced into the collection chamber 11 passing through the through holes 9, while the cellular fraction 5 comes into contact with the filtering membrane 9b and remains retained by it.
Inoltre, il metodo comprende una terza fase di separazione in cui la camera di introduzione 12 è in comunicazione fluidica con la sezione di scarico 8. In uso, l’operatore afferra la superficie di presa 37 ruotando la porzione di attivazione 27 attorno all’asse di rotazione R. Furthermore, the method comprises a third separation step in which the introduction chamber 12 is in fluid communication with the discharge section 8. In use, the operator grasps the gripping surface 37 by rotating the activation portion 27 around the axis of rotation R.
La rotazione della porzione di attivazione 27 determina un ulteriore abbassamento della camera di raccolta 11 e l’allineamento del bordo di chiusura 38 con il foro centrale 16. The rotation of the activation portion 27 determines a further lowering of the collection chamber 11 and the alignment of the closing edge 38 with the central hole 16.
In altre parole, il bordo di chiusura 38 è sostanzialmente complanare al foro centrale 16 senza tuttavia esservi contiguo in modo da non occludere la luce di passaggio 41. In other words, the closing edge 38 is substantially coplanar with the central hole 16 without however being contiguous to it so as not to occlude the passage opening 41.
Ciò significa che la rotazione della porzione di attivazione 27 determina il passaggio della camera di raccolta 11 dalla seconda configurazione (figure 4-4a) alla terza configurazione (figure 5-5a). This means that the rotation of the activation portion 27 determines the passage of the collection chamber 11 from the second configuration (Figures 4-4a) to the third configuration (Figures 5-5a).
L’operatore pone in rotazione la porzione di attivazione 27 fino a riscontrare il bordo di arresto 43. The operator rotates the activation portion 27 until the stop edge 43 is encountered.
Nel dettaglio, la porzione di attivazione 27 compie una rotazione avente un’estensione angolare sostanzialmente pari a 90°. In detail, the activation portion 27 performs a rotation having an angular extension substantially equal to 90 °.
Analogamente alla seconda fase di separazione, anche la terza fase di separazione comprende una seconda fase di lavaggio mediante il liquido di lavaggio e coltura 42 in cui la frazione cellulare 5, cioè gli ovociti, trattenuta dai detti mezzi di filtraggio 9 scivola lungo la parete perimetrale 17 venendo scaricata nella sezione di scarico 8. Similarly to the second separation phase, the third separation phase also comprises a second washing phase by means of the washing and culture liquid 42 in which the cellular fraction 5, i.e. the oocytes, retained by the said filtering means 9 slides along the perimeter wall 17 being discharged into the discharge section 8.
In altre parole, l’operatore introduce quindi il liquido di risciacquo e coltura 42 all’interno della camera di introduzione 12. In other words, the operator then introduces the rinsing and culture liquid 42 into the introduction chamber 12.
Tale liquido di risciacquo e coltura 42, passando attraverso la luce di passaggio 41, contatta la frazione cellulare 5 adesa alla membrana filtrante 9c provocandone lo scivolamento lungo la parete perimetrale 17. Said rinsing and culture liquid 42, passing through the passage opening 41, contacts the cellular fraction 5 adhered to the filtering membrane 9c causing it to slide along the perimeter wall 17.
Quando la frazione cellulare 5 è raccolta nella camera di estrazione e coltura 22, cioè all’interno dell’elemento piastriforme 23, l’operatore afferra il bordo marginale 26 e, premendolo verso il basso, disimpegna la parete marginale 24 e la superficie di incastro 25 rimuovendone il reciproco l’incastro. When the cellular fraction 5 is collected in the extraction and culture chamber 22, i.e. inside the plate-like element 23, the operator grasps the marginal edge 26 and, pressing it downwards, disengages the marginal wall 24 and the interlocking surface 25 by removing the reciprocal joint.
In pratica, la separazione della camera di estrazione e coltura 22 dal corpo cavo 2 ne consente l’immediato impiego nelle successive fasi di incubazione e coltura, eliminando la necessità di trasferimento della frazione cellulare 5 all’interno di ulteriori dispositivi di trattamento. In practice, the separation of the extraction and culture chamber 22 from the hollow body 2 allows its immediate use in the subsequent incubation and culture phases, eliminating the need to transfer the cell fraction 5 inside further treatment devices.
In altre parole, la frazione cellulare 5 è direttamente disponibile per le successive fasi di trattamento come ad esempio l’incubazione. In other words, the cellular fraction 5 is directly available for subsequent treatment steps such as incubation.
Nelle figure 6-10 è rappresentata una seconda forma di realizzazione del dispositivo 1 del tutto analoga a quella descritta in precedenza a riguardo della prima forma di realizzazione (figure 1-5), alla cui descrizione di dettaglio si rimanda integralmente, ad esclusione che per i mezzi di movimentazione 27, 28, 29, 30, la porzione di attivazione 27 ed i mezzi di segnalazione 44, 45, 46, 47. Figures 6-10 show a second embodiment of the device 1 entirely similar to the one described above with regard to the first embodiment (Figures 1-5), to the detailed description of which reference is made in full, except that for the handling means 27, 28, 29, 30, the activation portion 27 and the signaling means 44, 45, 46, 47.
In questa forma di realizzazione (figure 6-10), i mezzi di movimentazione 27, 28, 29, 30 comprendono un elemento di separazione 47 della sezione d’entrata 3 atto a suddividerla in un primo spazio 48 interno alla camera di introduzione 12 ed in un secondo spazio 49 esterno alla camera di introduzione 12. In this embodiment (Figures 6-10), the handling means 27, 28, 29, 30 comprise a separation element 47 of the inlet section 3 adapted to divide it into a first space 48 inside the introduction chamber 12 and in a second space 49 outside the introduction chamber 12.
L’elemento di separazione 47 comprende un elemento a flangia 50 provvisto di un foro di collegamento 51 ed associato al setto di collegamento 30. The separation element 47 includes a flange element 50 provided with a connection hole 51 and associated with the connection partition 30.
A l fine di consentire l’introduzione del campione biologico 4, 5 all’interno della camera di introduzione 12, l’elemento di separazione 47 è provvisto di una luce d’entrata 52 del campione biologico stesso. In order to allow the introduction of the biological sample 4, 5 inside the introduction chamber 12, the separation element 47 is provided with an inlet port 52 of the biological sample itself.
Nello specifico, la luce d’entrata 52 è realizzata sull’elemento a flangia 50. A questo proposito, in questa forma di realizzazione, il setto di collegamento 30 è associato all’elemento a flangia 50 e la porzione di attivazione 27 comprende un perno di collegamento 53 cavo. Specifically, the inlet port 52 is made on the flange element 50. In this respect, in this embodiment, the connecting septum 30 is associated with the flange element 50 and the activation portion 27 comprises a pin 53 cable.
In fase di assemblaggio, come rappresentato nelle figure 6 e 7, il perno di collegamento 53 è inserito all’interno del foro di collegamento 51 e, a sua volta, alloggia l’elemento di collegamento 28. During the assembly phase, as shown in Figures 6 and 7, the connecting pin 53 is inserted inside the connection hole 51 and, in turn, houses the connecting element 28.
Infatti, in accordo con questa forma di realizzazione, la prima estremità 35 dell’elemento di collegamento 28 è associata solidalmente alla porzione di attivazione 27; ciò significa che la rotazione della porzione di attivazione 27 determina lo spostamento della camera di raccolta 11 verso il basso. In fact, in accordance with this embodiment, the first end 35 of the connecting element 28 is integrally associated with the activation portion 27; this means that the rotation of the activation portion 27 causes the collection chamber 11 to move downwards.
Nella fattispecie, la presente forma di realizzazione non presenta l’elemento a pulsante 29 e la camera di raccolta 11 è assialmente mobile per il solo effetto della rotazione della porzione di attivazione 27 attorno all’asse di rotazione R. In this case, the present embodiment does not have the button element 29 and the collection chamber 11 is axially movable for the sole effect of the rotation of the activation portion 27 around the rotation axis R.
L’elemento a flangia 50 comprende, inoltre, un foro di collegamento 51 atto ad accogliere, in fase di assemblaggio, un rispettivo setto di collegamento 30 associato a mezzi di movimentazione 27, 28, 29, 30 descritti nel dettaglio nel prosieguo della presente trattazione. The flange element 50 also comprises a connection hole 51 suitable for receiving, during the assembly phase, a respective connection partition 30 associated with handling means 27, 28, 29, 30 described in detail in the rest of the present discussion. .
Si specifica che il fatto di prevedere la porzione di attivazione 27 scorrevole in rotazione sulla prima porzione estremale 6 e sull’elemento di separazione 47 significa che essi sono vincolati in modo da definire una generica coppia cinematica, nella fattispecie rotoidale, la cui libertà di movimento permette la rotazione della porzione di attivazione stessa sull’elemento a flangia 50. It is specified that the fact of providing the activation portion 27 sliding in rotation on the first extremal portion 6 and on the separation element 47 means that they are constrained in such a way as to define a generic kinematic pair, in this case rotoidal, whose freedom of movement it allows the rotation of the activation portion itself on the flange element 50.
In altre parole, la porzione di attivazione 27 e l’elemento di separazione 47 sono bloccati in modo da non consentire alcun movimento traslatorio relativo, ma solo movimenti di rotazione. In other words, the activation portion 27 and the separation element 47 are blocked so as not to allow any relative translational movement, but only rotational movements.
Inoltre, in questa forma di realizzazione, i mezzi di segnalazione 44, 45 comprendono l’apertura di visualizzazione 44 realizzata sulla porzione di attivazione 27, e parallelamente gli elementi di segnalazione 45 sono invece realizzati sull’elemento a flangia 50. Furthermore, in this embodiment, the signaling means 44, 45 comprise the viewing opening 44 made on the activation portion 27, and in parallel the signaling elements 45 are instead made on the flange element 50.
Come visibile in figura 6, i mezzi di segnalazione 44, 45 comprendono un primo elemento di segnalazione 45a, un secondo elemento di segnalazione 45b ed un terzo elemento di segnalazione 45c rispettivamente corrispondenti alla prima configurazione, alla seconda configurazione ed alla terza configurazione della camera di raccolta 11. As can be seen in Figure 6, the signaling means 44, 45 comprise a first signaling element 45a, a second signaling element 45b and a third signaling element 45c respectively corresponding to the first configuration, the second configuration and the third configuration of the chamber. collection 11.
Nello specifico, la porzione di attivazione 27 è mobile tra: Specifically, the activation portion 27 is mobile between:
- una prima posizione (figure 8-8a) in cui la luce d’entrata 52 è disposta combaciante con l’apertura d’entrata 34, la camera di introduzione 12 è nella prima configurazione ed il primo spazio 48 è isolato dal secondo spazio 49; - a first position (Figures 8-8a) in which the inlet port 52 is arranged to mate with the inlet opening 34, the introduction chamber 12 is in the first configuration and the first space 48 is isolated from the second space 49 ;
- una seconda posizione (figure 9-9a) in cui la luce d’entrata 52 è sfalsata rispetto all’apertura d’entrata 34 di un angolo sostanzialmente pari a 90°, la camera di introduzione 12 è nella seconda configurazione, il primo spazio 48 è in comunicazione fluidica con il secondo spazio 49 e quest’ultimo è isolato dalla camera di coltura/estrazione 22; e - a second position (Figures 9-9a) in which the inlet opening 52 is offset with respect to the inlet opening 34 by an angle substantially equal to 90 °, the introduction chamber 12 is in the second configuration, the first space 48 is in fluid communication with the second space 49 and the latter is isolated from the culture / extraction chamber 22; And
- una terza posizione (figure 10-10a) in cui la luce d’entrata 52 è sfalsata rispetto all’apertura d’entrata 34 di un angolo sostanzialmente pari a 180°, la camera di introduzione 12 è nella terza configurazione e il primo spazio 48, il secondo spazio 49 sono in comunicazione fluidica tra loro e la camera di coltura/estrazione 22. - a third position (Figures 10-10a) in which the inlet opening 52 is offset with respect to the inlet opening 34 by an angle substantially equal to 180 °, the introduction chamber 12 is in the third configuration and the first space 48, the second space 49 are in fluid communication between them and the culture / extraction chamber 22.
Quando la porzione di attivazione 27 è nella prima posizione (figure 8-8a), l’apertura di visualizzazione 44 combacia con il primo elemento di segnalazione 45a. When the activation portion 27 is in the first position (Figures 8-8a), the viewing opening 44 matches the first signaling element 45a.
Parallelamente, quando la porzione di attivazione 27 è nella seconda posizione (figure 9-9a), l’apertura di visualizzazione 44 combacia con il secondo elemento di segnalazione 45b. In parallel, when the activation portion 27 is in the second position (Figures 9-9a), the viewing opening 44 matches the second signaling element 45b.
Analogamente alla prima ed alla seconda posizione, quando la porzione di attivazione 27 è nella terza posizione (figure 10-10a), l’apertura di visualizzazione 44 combacia con il terzo elemento di segnalazione 45c. Inoltre, quando la porzione di porzione di attivazione 27 è nella terza posizione (figure 10-10a), l’elemento di separazione 47, nella fattispecie l’elemento a flangia 50, è disposto in prossimità della superficie circolare 46. Similarly to the first and second positions, when the activation portion 27 is in the third position (Figures 10-10a), the viewing opening 44 matches the third signaling element 45c. Furthermore, when the portion of the activation portion 27 is in the third position (Figures 10-10a), the separation element 47, in this case the flange element 50, is arranged near the circular surface 46.
La distanza tra l’elemento a flangia 50 e la superficie circolare 46 definisce uno spazio vuoto, indicato in figura 10 con la freccia S, e atto a consentire il passaggio del liquido di lavaggio e coltura 42 inseribile all’interno del corpo cavo 2 attraverso l’apertura d’entrata 34. The distance between the flange element 50 and the circular surface 46 defines an empty space, indicated in figure 10 with the arrow S, and suitable for allowing the passage of the washing and culture liquid 42 which can be inserted inside the hollow body 2 through the entrance opening 34.
Il funzionamento del dispositivo 1 in accordo con la seconda forma di realizzazione nell’esecuzione del metodo secondo il trovato è il seguente. Il funzionamento della seconda forma di realizzazione, per quanto concerne la fase di fornitura del dispositivo 1, del campione biologico 4, 5, la fase di introduzione di quest’ultimo all’interno della camera di introduzione 12 e la prima fase di separazione è del tutto analogo al funzionamento della forma di realizzazione precedente, alla cui descrizione di dettaglio si rimanda integralmente. The operation of the device 1 in accordance with the second embodiment in the execution of the method according to the invention is as follows. The operation of the second embodiment, as regards the step of supplying the device 1, of the biological sample 4, 5, the step of introducing the latter into the introduction chamber 12 and the first separation step is of the all analogous to the operation of the previous embodiment, to the detailed description of which reference is made in full.
In accordo con questa forma di realizzazione, quando l’operatore introduce il campione biologico 4, 5 all’interno della camera di introduzione 12, la porzione di attivazione 27 è nella prima posizione (figure 8-8a). In accordance with this embodiment, when the operator introduces the biological sample 4, 5 into the introduction chamber 12, the activation portion 27 is in the first position (Figures 8-8a).
Nello specifico, la luce d’entrata 52 è disposta combaciante con l’apertura d’entrata 34, e l’apertura di visualizzazione 44 è disposta combaciante con il primo elemento di segnalazione 45a. Specifically, the entrance opening 52 is arranged to mate with the entrance opening 34, and the viewing opening 44 is arranged to mate with the first signaling element 45a.
A differenza di quanto accadeva in precedenza dove l’operatore premeva l’elemento a pulsante 29, nella suddetta forma di realizzazione l’operatore afferra la superficie di presa 37 per la messa in rotazione della porzione di attivazione 27. Unlike what happened previously where the operator pressed the button element 29, in the aforementioned embodiment the operator grasps the gripping surface 37 for the rotation of the activation portion 27.
Quest’ultima, ruotando, determina il passaggio della camera di introduzione 12 dalla prima configurazione (figure 8-8a) alla seconda configurazione (figure 9-9a). The latter, by rotating, determines the passage of the introduction chamber 12 from the first configuration (Figures 8-8a) to the second configuration (Figures 9-9a).
La porzione di attivazione 27 compie una rotazione di un angolo sostanzialmente pari a 90° e, simultaneamente, si avvicina all’elemento a flangia 50. The activation portion 27 performs a rotation of an angle substantially equal to 90 ° and, simultaneously, approaches the flange element 50.
Parallelamente, l’apertura di visualizzazione 44 è posizionata in corrispondenza del secondo elemento di segnalazione 45b. At the same time, the viewing opening 44 is positioned in correspondence with the second signaling element 45b.
L’allontanamento della parete di fondo 15 dal bordo di chiusura 38 determina la messa in comunicazione del primo spazio 48 con il secondo spazio 49. The removal of the back wall 15 from the closing edge 38 determines the communication of the first space 48 with the second space 49.
In questo modo, quando l’operatore introduce il liquido di lavaggio e coltura 42 all’interno della sezione di entrata 3, quest’ultimo fluisce all’interno della camera di introduzione 12 lambendo l’elemento a flangia 50, ed attraversando il foro di collegamento 51 e la luce di passaggio 41. Ciò consente il lavaggio delle pareti interne della camera di introduzione 12, diminuendo notevolmente il rischio di perdita di eventuali residui della frazione cellulare 5. In this way, when the operator introduces the washing and culture liquid 42 inside the inlet section 3, the latter flows inside the introduction chamber 12, licking the flange element 50, and passing through the connection 51 and the passage opening 41. This allows washing of the internal walls of the introduction chamber 12, considerably reducing the risk of loss of any residues of the cellular fraction 5.
La frazione liquida 4, passando attraverso i fori passanti 9a, viene raccolta all’interno della camera di raccolta 11. The liquid fraction 4, passing through the through holes 9a, is collected inside the collection chamber 11.
A questo punto, il passaggio della camera di raccolta 12 dalla seconda configurazione (figure 9-9a) alla terza configurazione (figure 10-10a) è del tutto analogo alla precedente forma di realizzazione alla cui descrizione di dettaglio si rimanda integralmente. At this point, the passage of the collection chamber 12 from the second configuration (Figures 9-9a) to the third configuration (Figures 10-10a) is completely analogous to the previous embodiment, to which the detailed description is referred to in full.
Si è in pratica constatato come l’invenzione descritta raggiunga gli scopi proposti. In practice it has been found that the described invention achieves the proposed purposes.
Si sottolinea il fatto che il particolare accorgimento di prevedere un unico corpo cavo provvisto di mezzi di filtrazione consente di realizzare la separazione del campione biologico, nella fattispecie degli ovociti dal liquido follicolare, all’interno di un unico dispositivo eliminando la necessità di impiegare diversi dispositivi per ciascuna fase di separazione. A ciò si aggiunge che il particolare accorgimento di prevedere un corpo cavo provvisto della camera di estrazione e coltura, della camera di raccolta del liquido follicolare e dei mezzi di filtrazione realizzati su quest’ultima consente di diminuire notevolmente lo spreco di materiale ed i tempi operativi rispetto all’impiego di diversi dispositivi noti in combinazione tra loro. It is emphasized that the particular expedient of providing a single hollow body equipped with filtration means allows the separation of the biological sample, in this case the oocytes from the follicular liquid, within a single device, eliminating the need to use different devices for each separation phase. Added to this is that the particular expedient of providing a hollow body equipped with the extraction and culture chamber, the chamber for collecting the follicular liquid and the filtration means made on the latter allows to considerably reduce the waste of material and operating times. with respect to the use of various known devices in combination with each other.
Ancora, il fatto di eliminare la necessità di trasferire il campione biologico durante le diverse fasi della separazione, ma al contrario il fatto di prevedere la camera di estrazione e coltura associata amovibilmente al corpo cavo consente di ottenere un campione biologico direttamente predisposto per le successive fasi di incubazione e coltura. Furthermore, the fact of eliminating the need to transfer the biological sample during the different phases of separation, but on the contrary, the fact of providing the extraction and culture chamber removably associated with the hollow body allows to obtain a biological sample directly prepared for the subsequent phases. incubation and culture.
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