Claims (9)
1. Postupak za proizvodnju šećera ili šećera od lignoceluloznog materijala, koji obuhvaća:
a) predobradu lignoceluloznog materijala prije enzimatske obrade izlaganjem (vrućoj) vodi, pari (eksplozija pare), kiselini, bazi, otapalu, toplini, peroksidu, ozonu, mehaničkom usitnjavanju, brušenju, mljevenju ili brzom smanjenju tlaka, kombinaciji bilo koje dvije ili više njih;
b) predsaharifikaciju lignoceluloznog materijala inkubacijom s enzimom ili smjesom enzima;
c) dovođenje u kontakt lignoceluloznog materijala s (i) polipeptidom koji sadrži aminokiselinsku sekvencu navedenu u SEQ ID NO:2 ili njegovom varijantom polipeptida, pri čemu varijanta polipeptida ima najmanje 98% istovjetnosti sekvence sa sekvencom navedenom u SEQ ID NO:2, pri čemu polipeptid ima aktivnost beta-glukozidaze i pri čemu varijanta polipeptida ima katalitički ostatak Asp277 - Glu505 (položaji kao u SEQ ID NO: 2), ili (ii) pripravkom koji sadrži polipeptid iz (i).1. Process for the production of sugar or sugar from lignocellulosic material, which includes:
a) pretreatment of lignocellulosic material before enzymatic treatment by exposure to (hot) water, steam (steam explosion), acid, base, solvent, heat, peroxide, ozone, mechanical shredding, grinding, grinding or rapid pressure reduction, a combination of any two or more of them ;
b) pre-saccharification of lignocellulosic material by incubation with an enzyme or a mixture of enzymes;
c) bringing the lignocellulosic material into contact with (i) a polypeptide containing the amino acid sequence listed in SEQ ID NO:2 or a polypeptide variant thereof, wherein the polypeptide variant has at least 98% sequence identity to the sequence listed in SEQ ID NO:2, wherein the polypeptide has beta-glucosidase activity and wherein the polypeptide variant has the catalytic residue Asp277 - Glu505 (positions as in SEQ ID NO: 2), or (ii) by a preparation containing the polypeptide from (i).
2. Postupak u skladu s patentnim zahtjevom 1, naznačen time što se temperatura koraka predsaharifikacije kreće u rasponu od 20°C do 85°C.2. The method according to claim 1, characterized in that the temperature of the pre-saccharification step ranges from 20°C to 85°C.
3. Postupak u skladu s patentnim zahtjevom 1 ili 2, naznačen time što se pH smjese predsaharifikacije kreće u rasponu od 3,0 do 7,0.3. The method according to claim 1 or 2, characterized in that the pH of the pre-saccharification mixture ranges from 3.0 to 7.0.
4. Postupak u skladu s bilo kojim od patentnih zahtjeva 1 do 3, naznačen time što se predsaharifikacija odvija u vremenu od 2 sata do 48 sati.4. The process according to any one of patent claims 1 to 3, characterized in that the pre-saccharification takes place in a time from 2 hours to 48 hours.
5. Postupak prema bilo kojem od patentnih zahtjeva 1 do 4, naznačen time što pripravak koji sadrži polipeptid iz (i) nadalje sadrži celulazu i/ili hemicelulazu i/ili pektinazu.5. The method according to any one of claims 1 to 4, characterized in that the preparation containing the polypeptide from (i) further contains cellulase and/or hemicellulase and/or pectinase.
6. Postupak u skladu s patentnim zahtjevom 5, naznačen time što je celulaza celobiohidrolaza, endo-beta-1,4-glukanaza, beta-glukozidaza ili beta-(1,3)(1,4)-glukanaza.6. The method according to claim 5, characterized in that the cellulase is cellobiohydrolase, endo-beta-1,4-glucanase, beta-glucosidase or beta-(1,3)(1,4)-glucanase.
7. Postupak u skladu s patentnim zahtjevom 5 ili 6, naznačen time što je hemicelulaza endoksilanaza, β- ksilozidaza, α-L-arabionofuranozidaza, α-D-glukuronidaza, acetil-ksilan esteraza, feruloil esteraza, kumaroil esteraza, α-galaktozidaza, β-galaktozidaza, β-mananaza ili β- manozidaza.7. The method according to patent claim 5 or 6, characterized in that the hemicellulase is endoxylanase, β-xylosidase, α-L-arabionofuranosidase, α-D-glucuronidase, acetyl-xylan esterase, feruloyl esterase, coumaroyl esterase, α-galactosidase, β-galactosidase, β-mannanase or β-mannosidase.
8. Postupak prema bilo kojem od patentnih zahtjeva 5 do 7, naznačen time što je pektinaza endo poligalakturonaza, pektin metil esteraza, endo-galaktanaza, beta-galaktozidaza, pektin acetil esteraza, endo-pektin liaza, pektat liaza, alfa ramnozidaza, egzo-galakturonaza, egzo-poligalakturonat liaza, ramnogalakturonan hidrolaza, ramnogalakturonan liaza, ramnogalakturonan acetil esteraza, ramnogalakturonan galakturonohidrolaza ili ksilogalakturonaza.8. The method according to any of claims 5 to 7, characterized in that the pectinase is endo polygalacturonase, pectin methyl esterase, endo-galactanase, beta-galactosidase, pectin acetyl esterase, endo-pectin lyase, pectate lyase, alpha rhamnosidase, exo- galacturonase, exo-polygalacturonate lyase, rhamnogalacturonan hydrolase, rhamnogalacturonan lyase, rhamnogalacturonan acetyl esterase, rhamnogalacturonan galacturonohydrolase or xylogalacturonase.
9. Postupak prema bilo kojem od patentnih zahtjeva 1 do 8, naznačen time što pripravak nadalje sadrži enzim iz obitelji GH61 ili drugi enzim koji ima aktivnost pojačavanja celulaze.9. The method according to any one of patent claims 1 to 8, characterized in that the preparation further contains an enzyme from the GH61 family or another enzyme that has cellulase-enhancing activity.