FR3142885A1 - COSMETIC/DERMATOLOGICAL EMULSION - Google Patents

COSMETIC/DERMATOLOGICAL EMULSION Download PDF

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Gérard Redziniak
Fanny REDZINIAK
Valérie SABATIER
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Benu Blanc
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Abstract

L’invention concerne une émulsion huile dans l’eau comprenant une phase lipophile et une phase hydrophile. L’émulsion est dépourvue d’émulsionnant. La phase hydrophile comprend entre 1 et 10 % massique de particules de protéines insolubles. La phase lipophile représente entre 10 et 50 %, du volume total de l’émulsion. Figure pour l’abrégé : 1BThe invention relates to an oil-in-water emulsion comprising a lipophilic phase and a hydrophilic phase. The emulsion is free of emulsifier. The hydrophilic phase comprises between 1 and 10% by weight of insoluble protein particles. The lipophilic phase represents between 10 and 50% of the total volume of the emulsion. Figure for abstract: 1B

Description

EMULSION COSMETIQUE/DERMATOLOGIQUECOSMETIC/DERMATOLOGICAL EMULSION

La présente invention se rapporte au domaine général des produits à usages topiques.The present invention relates to the general field of products for topical uses.

L’invention concerne en particulier une émulsion, une émulsion pour une utilisation comme médicament, une émulsion pour une utilisation dans le traitement ou la prévention de désordres dermatologiques ou encore une utilisation cosmétique d’une telle composition pour l’hydratation de la peau par exemple.The invention relates in particular to an emulsion, an emulsion for use as a medicine, an emulsion for use in the treatment or prevention of dermatological disorders or even a cosmetic use of such a composition for hydrating the skin for example. .

ÉTAT DE LA TECHNIQUE ANTÉRIEURESTATE OF PRIOR ART

Les émulsions sont des mélanges, macroscopiquement homogènes mais microscopiquement hétérogènes comprenant une phase aqueuse ou hydrophile et une phase huileuse ou lipophile. Les deux liquides étant non miscibles, une dispersion d’un liquide en fines gouttelettes dans l’autre liquide est obtenue. Le liquide sous forme de gouttelettes étant la phase dispersée, aussi nommée phase discontinue ou phase interne, l’autre liquide étant la phase dispersante hydrophile, aussi nommée phase continue ou phase externe.Emulsions are mixtures, macroscopically homogeneous but microscopically heterogeneous, comprising an aqueous or hydrophilic phase and an oily or lipophilic phase. The two liquids being immiscible, a dispersion of one liquid into fine droplets in the other liquid is obtained. The liquid in the form of droplets being the dispersed phase, also called discontinuous phase or internal phase, the other liquid being the hydrophilic dispersing phase, also called continuous phase or external phase.

Des émulsions stables huile dans l’eau sont couramment utilisées dans les compositions à usage topique de produits cosmétiques et/ou pharmaceutiques et/ou dermatologiques.Stable oil-in-water emulsions are commonly used in compositions for topical use in cosmetic and/or pharmaceutical and/or dermatological products.

Ces émulsions sont généralement des émulsions à haut pourcentage en phase continue hydrophile, c'est-à-dire que la phase aqueuse peut représenter plus de 80% en volume total de l’émulsion.These emulsions are generally high percentage emulsions in hydrophilic continuous phase, that is to say that the aqueous phase can represent more than 80% by total volume of the emulsion.

Cependant, pour être stables, ces émulsions nécessitent l’ajout d’émulsifiants de synthèse (aussi appelés émulsionnants de synthèse), comme par exemple le cétyl diméthicone polyol, l’alcool stéarylique ou encore le cétyl glucoside. Or, la présence de produits de synthèse dans des émulsions destinées à une application topique peut provoquer des réactions irritantes voir allergiques lors de leur mise en contact avec la peau en particulier lors de leur mise en contact avec des peaux sensibles.However, to be stable, these emulsions require the addition of synthetic emulsifiers (also called synthetic emulsifiers), such as cetyl dimethicone polyol, stearyl alcohol or cetyl glucoside. However, the presence of synthetic products in emulsions intended for topical application can cause irritant or even allergic reactions when they come into contact with the skin, particularly when they come into contact with sensitive skin.

Un but de la présente invention est de proposer une composition remédiant au moins en partie aux inconvénients de l’art antérieur, et en particulier, une composition stable qui répond aux désirs des utilisateurs en étant dépourvue d’émulsifiant, en particulier d’émulsifiants de synthèses, et pouvant en particulier être utilisée dans le traitement de désordres cutanés ou en tant que produit cosmétique à usage dermatologique.An aim of the present invention is to propose a composition which at least partly remedies the drawbacks of the prior art, and in particular, a stable composition which meets the desires of users by being devoid of emulsifier, in particular emulsifiers of syntheses, and can in particular be used in the treatment of skin disorders or as a cosmetic product for dermatological use.

Pour cela, la présente invention propose une émulsion huile dans l’eau comprenant une phase lipophile et une phase hydrophile. L’émulsion selon l’invention est dépourvue d’émulsionnant (aussi appelé émulsifiant). La phase hydrophile comprend entre 1 et 10 % massique de particules de protéines insolubles, par exemple 10 % massique de particules de protéines insolubles en tant qu’agents actifs essentiels. La phase lipophile représente entre 10 et 50 % du volume total de l’émulsion, par exemple 30% du volume total de l’émulsion. For this, the present invention provides an oil-in-water emulsion comprising a lipophilic phase and a hydrophilic phase. The emulsion according to the invention is devoid of emulsifier (also called emulsifier). The hydrophilic phase comprises between 1 and 10% by weight of insoluble protein particles, for example 10% by weight of insoluble protein particles as essential active agents. The lipophilic phase represents between 10 and 50% of the total volume of the emulsion, for example 30% of the total volume of the emulsion.

L’invention se distingue fondamentalement de l’art antérieur par la présence de particules de protéines insolubles (en particulier des particules de protéine de soie). Ainsi, l’émulsion présente un haut pourcentage en phase interne lipophile. L’émulsion est stable même si elle est dépourvue d’émulsionnant.The invention fundamentally differs from the prior art by the presence of insoluble protein particles (in particular silk protein particles). Thus, the emulsion has a high percentage of lipophilic internal phase. The emulsion is stable even if it is devoid of emulsifier.

Avantageusement, les protéines insolubles sont des particules de fibroïne, les particules de fibroïne ayant un diamètre compris entre 0,1 à 10 micromètres, par exemple 5 micromètres.Advantageously, the insoluble proteins are fibroin particles, the fibroin particles having a diameter of between 0.1 to 10 micrometers, for example 5 micrometers.

Avantageusement, la phase hydrophile comprend en outre entre 1 et 5% massique de particules de protéines solubles.Advantageously, the hydrophilic phase also comprises between 1 and 5% by weight of soluble protein particles.

Avantageusement, les protéines solubles sont issues des hydrolysats de protéines végétales (par exemple des hydrolysats de protéines de soja et/ou des hydrolysats de protéines de riz) et/ou les protéines solubles sont issues des hydrolysats de protéines de soie (comme la séricine).Advantageously, the soluble proteins come from plant protein hydrolysates (for example soy protein hydrolysates and/or rice protein hydrolysates) and/or the soluble proteins come from silk protein hydrolysates (such as sericin). .

Avantageusement, la phase hydrophile comprend des peptides d’origine biosynthétique ou microbiologique.Advantageously, the hydrophilic phase comprises peptides of biosynthetic or microbiological origin.

Avantageusement, la phase hydrophile comprend, en outre, un ou plusieurs des éléments suivants : de la bétaïne, de la glycine, de la nisine et du NaCl.Advantageously, the hydrophilic phase further comprises one or more of the following elements: betaine, glycine, nisin and NaCl.

L’invention concerne également une émulsion telle que décrite précédemment pour son utilisation comme médicament, de préférence un médicament à usage topique.The invention also relates to an emulsion as described above for its use as a medication, preferably a medication for topical use.

L’invention concerne également une émulsion telle que décrite précédemment pour son utilisation dans le traitement ou la prévention de désordres cutanés (inflammation de la peau par exemple).The invention also relates to an emulsion as described above for its use in the treatment or prevention of skin disorders (inflammation of the skin for example).

L’invention concerne également une utilisation non thérapeutique (cosmétique) d’une émulsion telle que décrite précédemment pour l’hydratation de la peau ou réduire/enlever les rides de la peau.The invention also relates to a non-therapeutic (cosmetic) use of an emulsion as described above for hydrating the skin or reducing/removing wrinkles from the skin.

L’invention concerne également une utilisation d’une émulsion telle que décrite précédemment en tant que véhicule pour la libération d’un ou plusieurs principes actifs. En particulier, il s’agit d’une utilisation en tant que véhicules pour la libération percutanée d’un ou plusieurs principes actifs.The invention also relates to a use of an emulsion as described above as a vehicle for the release of one or more active ingredients. In particular, it is a use as vehicles for the percutaneous release of one or more active ingredients.

D’autres caractéristiques et avantages de l’invention ressortiront du complément de description qui suit.Other characteristics and advantages of the invention will emerge from the additional description which follows.

Il va de soi que ce complément de description n’est donné qu’à titre d’illustration de l’objet de l’invention et ne doit en aucun cas être interprété comme une limitation de cet objet.It goes without saying that this additional description is given only by way of illustration of the object of the invention and should in no way be interpreted as a limitation of this object.

La présente invention sera mieux comprise à la lecture de la description d’exemples de réalisation donnés à titre purement indicatif et nullement limitatif en faisant référence aux figures annexées pour lesquelles :The present invention will be better understood on reading the description of exemplary embodiments given for purely indicative purposes and in no way limiting with reference to the appended figures for which:

La est un cliché photographique, d’un explant de peau 3 heures après l’élimination d’une partie des lipides par un traitement chimique sans application d’une quelconque crème, exemple donné à titre comparatif,There is a photographic shot of a skin explant 3 hours after the elimination of part of the lipids by a chemical treatment without application of any cream, example given for comparison,

La représente la photographie, d’un explant de peau 3 heures après l’élimination d’une partie des lipides par un traitement chimique et sur lequel une émulsion selon un mode de réalisation particulier de l’invention a été appliquée,There represents the photograph of a skin explant 3 hours after the elimination of part of the lipids by a chemical treatment and to which an emulsion according to a particular embodiment of the invention has been applied,

La représente la photographie d’un immunomarquage de la filaggrine, d’un explant de peau 3 heures après l’élimination d’une partie des lipides par un traitement chimique et sur lequel aucune émulsion n’a été appliquée,There represents the photograph of an immunostaining of filaggrin, of a skin explant 3 hours after the elimination of part of the lipids by a chemical treatment and to which no emulsion has been applied,

La représente la photographie d’un immunomarquage de la filaggrine, d’un explant de peau 3 heures après l’élimination d’une partie des lipides par un traitement chimique et sur lequel une émulsion selon un mode de réalisation particulier de l’invention a été appliquée,There represents the photograph of an immunostaining of filaggrin, of a skin explant 3 hours after the elimination of part of the lipids by a chemical treatment and on which an emulsion according to a particular embodiment of the invention has been applied,

La représente la photographie d’un immunomarquage de la transglutaminase, d’un explant de peau 3 heures après l’élimination d’une partie des lipides par un traitement chimique et sur lequel aucune émulsion n’a été appliquée,There represents the photograph of an immunostaining of transglutaminase, of a skin explant 3 hours after the elimination of part of the lipids by a chemical treatment and to which no emulsion has been applied,

La représente la photographie d’un immunomarquage de la transglutaminase, d’un explant de peau 3 heures après l’élimination d’une partie des lipides par un traitement chimique et sur lequel une émulsion selon un mode de réalisation particulier de l’invention a été appliquée,There represents the photograph of an immunostaining of transglutaminase, of a skin explant 3 hours after the elimination of part of the lipids by a chemical treatment and on which an emulsion according to a particular embodiment of the invention has been applied,

La représente la photographie d’un immunomarquage de LEKTI, d’un explant de peau 3 heures après l’élimination d’une partie des lipides par un traitement chimique et sur lequel aucune émulsion n’a été appliquée,There represents the photograph of LEKTI immunostaining, of a skin explant 3 hours after the elimination of part of the lipids by a chemical treatment and to which no emulsion has been applied,

La représente la photographie d’un immunomarquage de LEKTI, d’un explant de peau 3 heures après l’élimination d’une partie des lipides par un traitement chimique et sur lequel une émulsion selon un mode de réalisation particulier de l’invention a été appliquée.There represents the photograph of an immunostaining of LEKTI, of a skin explant 3 hours after the elimination of part of the lipids by a chemical treatment and to which an emulsion according to a particular embodiment of the invention has been applied .

EXPOSÉ DÉTAILLÉ DE MODES DE RÉALISATION PARTICULIERSDETAILED DESCRIPTION OF PARTICULAR EMBODIMENTS

Bien que cela ne soit aucunement limitatif, l’invention trouve particulièrement des applications dans le domaine non thérapeutique (cosmétique) et/ou dans le domaine thérapeutique.Although this is in no way limiting, the invention particularly finds applications in the non-therapeutic field (cosmetics) and/or in the therapeutic field.

L’émulsion peut, en particulier, être utilisée dans le traitement de désordres cutanés cosmétiques et/ou dermatologiques. Notamment, l’émulsion présente des propriétés hydratantes, cicatrisantes et/ou anti-inflammatoires.The emulsion can, in particular, be used in the treatment of cosmetic and/or dermatological skin disorders. In particular, the emulsion has moisturizing, healing and/or anti-inflammatory properties.

En particulier, cette composition à usage cosmétique peut être utilisée pour prévenir les symptômes du vieillissement cutané et stimuler la cicatrisation cutanée.In particular, this composition for cosmetic use can be used to prevent the symptoms of skin aging and stimulate skin healing.

En particulier, le traitement cosmétique/thérapeutique peut concerner les cicatrices d’acné, les vergetures.In particular, cosmetic/therapeutic treatment may concern acne scars, stretch marks.

Nous allons dans un premier temps donner quelques définitions.We will first give some definitions.

On entend par « la phase lipophile représente environ 30% du volume total de l’émulsion » que la phase lipophile représente entre 27 à 33 % du volume total de l’émulsion, de préférence 30%.By “the lipophilic phase represents approximately 30% of the total volume of the emulsion” we mean that the lipophilic phase represents between 27 to 33% of the total volume of the emulsion, preferably 30%.

On entend par « phase aqueuse isotonique » une phase aqueuse ou hydrophile contenant une quantité de solutés dissous égale à celle du cytoplasme des cellules épithéliales soit 0.15 molaire.By “isotonic aqueous phase” is meant an aqueous or hydrophilic phase containing a quantity of dissolved solutes equal to that of the cytoplasm of the epithelial cells, i.e. 0.15 molar.

On entend par « protéines insolubles » toutes protéines hydrophobes telles que des particules de fibroïne (par exemple calibrée entre 0,5 et 10μm, et plus particulièrement 5microns), des particules de laine ou des particules de protéines de kératine.The term “insoluble proteins” means any hydrophobic proteins such as fibroin particles (for example calibrated between 0.5 and 10 μm, and more particularly 5 microns), wool particles or keratin protein particles.

On entend par « protéines solubles » toutes protéines hydrophiles telles que les protéines issues d’hydrolysats enzymatiques ou chimiques de protéines végétales tels que les hydrolysats de protéines végétales de riz ou de soja.The term “soluble proteins” means all hydrophilic proteins such as proteins derived from enzymatic or chemical hydrolysates of plant proteins such as hydrolysates of rice or soy plant proteins.

On entend par « peptide d’origine biosynthétique ou microbiologique », tout peptide synthétisé par des microorganismes ayant des propriétés antibactériennes, anti-inflammatoires et/ou cicatrisantes pouvant être notamment de la Nisine ou des bactériocines de Lactobacilles.The term “peptide of biosynthetic or microbiological origin” means any peptide synthesized by microorganisms having antibacterial, anti-inflammatory and/or healing properties which may be in particular Nisin or Lactobacillus bacteriocins.

On entend par « acide aminés » tous les acides aminés et leurs dérivés ou un mélange de ceux-ci, sous une forme libre, notamment la glycine, la bétaïne issue d’extrait de betteraves.By “amino acid” we mean all amino acids and their derivatives or a mixture of these, in a free form, in particular glycine, betaine from beet extract.

On entend par « glycérides » tous glycérides tels que les monoglycérides diglycérides ou triglycérides ou un mélange de ceux-ci notamment les huiles végétales, les beurres par exemple l’huile d’amande douce ou le beurre de Karité.The term “glycerides” means all glycerides such as monoglycerides, diglycerides or triglycerides or a mixture of these, in particular vegetable oils, butters, for example sweet almond oil or Shea butter.

On entend par « squalane », tous squalanes issu de l’hydrogénation du squalène notamment issu du squalène de plantes.The term “squalane” means all squalanes resulting from the hydrogenation of squalene, particularly from plant squalene.

On entend par « ester d’acides gras » tous les esters issus d’huile végétale notamment d’huile de carthame, d’olive, et de tournesol.By “fatty acid ester” we mean all esters derived from vegetable oil, particularly safflower, olive and sunflower oil.

On entend par « stérols » tous stérols notamment tous stérols issus des plantes tels que le béta-sitostérol issu d’écorce de pin.By “sterols” we mean all sterols, in particular all sterols from plants such as beta-sitosterol from pine bark.

On entend par « lipopeptides » tous lipopeptides tels que les lipomonopeptides, lipo-dipeptides, lipo-tripeptides ou un mélange de ceux-ci notamment.The term “lipopeptides” means all lipopeptides such as lipomonopeptides, lipo-dipeptides, lipo-tripeptides or a mixture of these in particular.

On entend par « principes actifs » toutes molécules liposolubles ayant des propriétés cosmétiques, curatives ou préventives telles que la caféine, le rétinol (Vitamine A).By “active ingredients” we mean all fat-soluble molecules having cosmetic, curative or preventive properties such as caffeine, retinol (Vitamin A).

On entend par « diamètre », soit le diamètre d’une particule dans le cas d’une particule sphérique soit la plus grande dimension d’une particule, dans le cas d’une particule non sphérique.By “diameter” we mean either the diameter of a particle in the case of a spherical particle or the largest dimension of a particle in the case of a non-spherical particle.

De plus par « entre X et Y », on entend que les bornes X et Y sont incluses.Furthermore, by “between X and Y”, we mean that the terminals X and Y are included.

Nous allons maintenant décrire plus en détail l’émulsion selon l’invention.We will now describe the emulsion according to the invention in more detail.

L’émulsion est une émulsion stable dans le temps et ne comprend pas d’émulsifiant et en particulier elle ne comprend pas d’émulsifiant de synthèse.The emulsion is a stable emulsion over time and does not include an emulsifier and in particular it does not include a synthetic emulsifier.

L’émulsion est une émulsion du type huile dans l’eau. La phase interne est une phase lipophile et la phase continue est la phase hydrophile (ou phase aqueuse).The emulsion is an oil-in-water type emulsion. The internal phase is a lipophilic phase and the continuous phase is the hydrophilic phase (or aqueous phase).

La phase lipophile de l’émulsion représente entre 10 et 50 % du volume total de l’émulsion, de préférence entre 20% et 40% du volume total de l’émulsion. Par exemple, la phase lipophile représente environ 30% du volume total de l’émulsion.The lipophilic phase of the emulsion represents between 10 and 50% of the total volume of the emulsion, preferably between 20% and 40% of the total volume of the emulsion. For example, the lipophilic phase represents approximately 30% of the total volume of the emulsion.

La phase hydrophile comprend, au moins entre 1 % et 10 % massique, de préférence entre 5 % et 10 % massique, par exemple 10 grammes d’une poudre de protéine insoluble en tant que principe actif (ou agent actif) pour 100 grammes de produit fini. De particules, la poudre est une poudre de protéine de fibroïne. La fibroïne est une des deux protéines du cocon de soie.The hydrophilic phase comprises at least between 1% and 10% by weight, preferably between 5% and 10% by weight, for example 10 grams of an insoluble protein powder as active principle (or active agent) per 100 grams of final product. Particulate, the powder is a fibroin protein powder. Fibroin is one of the two proteins in the silk cocoon.

De préférence, les particules de la poudre de fibroïne ont un diamètre compris entre 0,1 et 10µm, de préférence compris entre 3 et 7µm, par exemple 5 micromètres.Preferably, the particles of the fibroin powder have a diameter of between 0.1 and 10 μm, preferably between 3 and 7 μm, for example 5 micrometers.

Les particules sont de préférence sphériques ou sensiblement sphériques.The particles are preferably spherical or substantially spherical.

De préférence, la phase hydrophile de l’émulsion comprend, en outre, un ou plusieurs des éléments suivants : des protéines solubles, des peptides d’origine biosynthétique ou microbiologiques, des acides aminés, des sels minéraux.Preferably, the hydrophilic phase of the emulsion further comprises one or more of the following elements: soluble proteins, peptides of biosynthetic or microbiological origin, amino acids, mineral salts.

La phase hydrophile comprend, avantageusement, entre 5% et 20% massique, par exemple 15% massique, d’un mélange de protéines de protéines insolubles, de protéines solubles, de peptides et acides aminés.The hydrophilic phase advantageously comprises between 5% and 20% by weight, for example 15% by weight, of a mixture of proteins, insoluble proteins, soluble proteins, peptides and amino acids.

Les éléments du mélange peuvent être repartis selon les quantités suivantes (en pourcentage massique) :The elements of the mixture can be distributed according to the following quantities (in percentage by mass):

− Des protéines insolubles de 1 à 10%− Insoluble proteins of 1 to 10%

− Des protéines solubles de 1 à 5%− Soluble proteins of 1 to 5%

− Des peptides d’origine biosynthétique ou microbiologique de 0,001 à 5%− Peptides of biosynthetic or microbiological origin from 0.001 to 5%

− Des acides aminés de 1 à 5%− Amino acids of 1 to 5%

− Des sels minéraux de 0,1 à 0,9 %.− Mineral salts of 0.1 to 0.9%.

De préférence, la phase interne lipophile de l’émulsion comprend un ou plusieurs des éléments suivants : des glycérides, du squalane, de l’octyldodecyl PCA, de l’ester d’aminopropanediol, des esters d’acides gras, des stérols, des lipopeptides.Preferably, the lipophilic internal phase of the emulsion comprises one or more of the following: glycerides, squalane, octyldodecyl PCA, aminopropanediol ester, fatty acid esters, sterols, lipopeptides.

Par exemple, la phase interne lipophile de l’émulsion comprend (en pourcentage massique) :For example, the lipophilic internal phase of the emulsion comprises (in mass percentage):

− Des glycérides de 0,1 à 5%− Glycerides of 0.1 to 5%

− Du squalane de 0,1 à 4%− Squalane from 0.1 to 4%

− D’octyldodécyl PCA de 0,1 à 3%− Octyldodecyl PCA from 0.1 to 3%

− De l’ester d’aminopropanediol de 0,01 à 1%− Aminopropanediol ester from 0.01 to 1%

− Des esters d’acides gras de 0,01 à 1%− Fatty acid esters of 0.01 to 1%

− Des stérols de 0,01 à 0,1%− Sterols of 0.01 to 0.1%

− Des Lipopeptides de 0,1 à 1%− Lipopeptides from 0.1 to 1%

Avantageusement, les émulsions sans émulsionnant selon l’invention peuvent être utilisées en tant que véhicules pour la libération percutanée d’un ou plusieurs principes actifs, notamment des principes actifs liposolubles.Advantageously, the emulsions without emulsifier according to the invention can be used as vehicles for the percutaneous release of one or more active ingredients, in particular fat-soluble active ingredients.

Le procédé de fabrication des émulsions huile dans l’eau comprend une étape au cours de laquelle la phase lipophile est mélangée avec la phase hydrophile. De préférence, la phase lipophile est introduite dans la phase hydrophile. Le mélange est avantageusement réalisé sous agitation et à une température comprise entre 25° et 90°, par exemple à une température de 80°C.The process for manufacturing oil-in-water emulsions includes a step during which the lipophilic phase is mixed with the hydrophilic phase. Preferably, the lipophilic phase is introduced into the hydrophilic phase. The mixture is advantageously carried out with stirring and at a temperature between 25° and 90°, for example at a temperature of 80°C.

Exemples illustratifs et non limitatifs :Illustrative and non-limiting examples:

L’exemple suivant est un exemple, donné à titre illustratif et non limitatif, d’une émulsion sans émulsionnant huile dans l’eau.The following example is an example, given for illustrative and non-limiting purposes, of an emulsion without an oil-in-water emulsifier.

Dans un premier temps, la phase lipophile a été préparée. Afin d’obtenir 300g de phase lipophile, les réactifs suivants ont été mélangés à 80°C (en pourcentage massique) :First, the lipophilic phase was prepared. In order to obtain 300g of lipophilic phase, the following reagents were mixed at 80°C (in mass percentage):

- Huile d’amande douce 37 %- Sweet almond oil 37%

- Beurre de Karité 5%- Shea Butter 5%

- Phytosqualane 35%- Phytosqualane 35%

- Octyldodecyl PCA 16,10%- Octyldodecyl PCA 16.10%

- Ester d’Aminopropanediol et d’acides gras de carthame 3,75%- Ester of Aminopropanediol and safflower fatty acids 3.75%

- Beta-sitostérol 0,15%- Beta-sitosterol 0.15%

- Lipo-tripeptide 3%- Lipo-tripeptide 3%

Après le mélange des réactifs sous agitation, la phase lipophile homogène a été laissée à 80°C avant l’introduction dans la phase hydrophile.After mixing the reagents with stirring, the homogeneous lipophilic phase was left at 80°C before introduction into the hydrophilic phase.

Dans un second temps, 700g de phase hydrophile isotonique ont été préparés. Dans cette phase la fraction en poids des protéines insolubles, solubles, peptides et acide aminés additionnés représentent 15% massique. Les réactifs suivants ont été mélangés à 80°C (en pourcentage massique) :Secondly, 700g of isotonic hydrophilic phase were prepared. In this phase the fraction by weight of insoluble, soluble proteins, peptides and added amino acids represents 15% by mass. The following reagents were mixed at 80°C (in mass percentage):

- Eau 83,71 %- Water 83.71%

- NaCl 0,29 %- NaCl 0.29%

- Bétaïne 1,17 %- Betaine 1.17%

- Glycine 1 %- Glycine 1%

- Hydrolysat de protéines de riz 3,82 %- Rice protein hydrolyzate 3.82%

- Nisine 0,01 %- Nisin 0.01%

- Poudre de fibroïne calibrée 5 microns 10 %- Calibrated fibroin powder 5 microns 10%

Dans cette phase agitée vigoureusement et, toujours sous agitation, a été versée lentement la phase lipophile, elle-même maintenue sous agitation.Into this vigorously stirred phase and, still under stirring, the lipophilic phase was slowly poured, itself kept under stirring.

L’émulsion, sans émulsionnant, ainsi formée est utilisée pour la réalisation de tests ex-vivo sur explants de peau humaine maintenue en survie pour mesurer ses propriétés d’hydratation, anti-inflammatoire et cicatrisantes, en vue de son utilisation pour le traitement de désordres cutanés cosmétiques ou dermatologiques.The emulsion, without emulsifier, thus formed is used for carrying out ex-vivo tests on human skin explants maintained in survival to measure its hydration, anti-inflammatory and healing properties, with a view to its use for the treatment of cosmetic or dermatological skin disorders.

a. Propriétés d’hydratation :has. Hydration properties:

Les propriétés d’hydratation de crème selon la formulation ci-dessus a été évaluée par :The hydration properties of cream according to the above formulation were evaluated by:

- une expertise histologique de la morphologie générale de la peau.- histological expertise of the general morphology of the skin.

- Immunomarquage de la filaggrine- Filaggrin immunostaining

- Immunomarquage de la transglutaminase membranaire (TGM)- Immunostaining of membrane transglutaminase (TGM)

- Immunomarquage de LEKTI- LEKTI immunostaining

Préparation des explants :Preparation of explants:

27 explants d’un diamètre d’environ 10 mm ont été préparés à partir d’une plastie abdominale d’une femme avec son consentement éclairé (référence P942-AB20. Hôpital de Lonjumeau). Les explants ont été mis en survie en milieu BEM (BIO-EC’s Explants Medium -Sigma) à 37°C en atmosphère humide, enrichie de 5 % de CO2.27 explants with a diameter of approximately 10 mm were prepared from an abdominoplasty of a woman with her informed consent (reference P942-AB20. Lonjumeau Hospital). The explants were placed in survival mode in BEM (BIO-EC’s Explants Medium -Sigma) medium at 37°C in a humid atmosphere, enriched with 5% CO2.

Les explants ont été séparés en 3 groupes de 9 explants.The explants were separated into 3 groups of 9 explants.

Délipidation :Delipidation:

Une délipidation a été effectuée pour permettre d’altérer la fonction barrière du stratum corneum sur les groupes 2, et 3. La délipidation a été réalisée grâce à un mélange de solvants organiques (éther/acétone 50/50) (1 ml-Fluka) qui a été appliqué sur les explants pendant 2 minutes. Le mélange a été ensuite aspiré et la peau essuyée à l’aide d’un coton.Delipidation was carried out to alter the barrier function of the stratum corneum on groups 2 and 3. Delipidation was carried out using a mixture of organic solvents (ether/acetone 50/50) (1 ml-Fluka) which was applied to the explants for 2 minutes. The mixture was then aspirated and the skin wiped with a cotton ball.

Application de la crème :Application of the cream:

Immédiatement après la délipidation, la crème a été appliquée sur les explants du groupe 3 à raison de 4 mg par explant et étalée à l’aide d’une spatule afin d’obtenir une couche uniforme. Aux jours J1, J2 et J3, la crème a été une nouvelle fois appliquée sur les explants du groupe 3 à raison de 2 mg par explant et étalée uniformément à l’aide d’une spatule. Le tableau suivant représente la répartition des explants et les traitements subis : Groupe Nombre d’explants Délipidation Application de la crème 1 9 2 9 Oui 3 9 Oui Oui Immediately after delipidation, the cream was applied to the explants of group 3 at a rate of 4 mg per explant and spread using a spatula to obtain a uniform layer. On days D1, D2 and D3, the cream was once again applied to the explants of group 3 at a rate of 2 mg per explant and spread evenly using a spatula. The following table represents the distribution of explants and the treatments undergone: Band Number explants Delipidation Applying the cream 1 9 2 9 Yes 3 9 Yes Yes

Prélèvements :Specimens :

Des prélèvements ont été effectués pour permettre la réalisation d’observations histologiques et d’immunomarquage en vue de déterminer les propriétés d’hydratation de la crème comprenant 90% de l’émulsion.Samples were taken to allow histological observations and immunostaining to be carried out with a view to determining the hydration properties of the cream comprising 90% of the emulsion.

A J0+3heures, J1 et J4, 3 explants de chaque groupe ont été prélevés et coupés en 2.On D0+3 hours, D1 and D4, 3 explants from each group were taken and cut in two.

Une moitié a été fixée par du formol tamponné et l’autre moitié a été congelée à –80°C.One half was fixed with buffered formalin and the other half was frozen at –80°C.

Traitements histologiques :Histological treatments:

Après 24 heures de fixation dans le formol tamponné, les prélèvements ont été déshydratés et imprégnés en paraffine à l’aide d’un automate de déshydratation Leica TP 1020 selon le mode opératoire MO-H-149.After 24 hours of fixation in buffered formalin, the samples were dehydrated and impregnated in paraffin using a Leica TP 1020 dehydration machine according to the MO-H-149 operating mode.

Les prélèvements ont été mis en bloc selon le mode opératoire MO-H-153 à l’aide d’une station d’enrobage Leica EG.The samples were blocked according to the MO-H-153 procedure using a Leica EG embedding station.

Des coupes de 5 μm ont été réalisées selon le mode opératoire MO-H-173 à l’aide d’un microtome type Minot, Leica RM 2125 et montées sur des lames de verre histologiques Superfrost®.Sections of 5 μm were made according to the MO-H-173 procedure using a Minot type microtome, Leica RM 2125 and mounted on Superfrost® histological glass slides.

Les prélèvements congelés ont été coupés à 7 μm dans un cryostat Leica CM 3050.Frozen samples were cut at 7 μm in a Leica CM 3050 cryostat.

Les coupes ont été collées sur des lames de verre histologique silanisées Superfrost® Plus, pour réaliser les immunomarquages.The sections were glued to Superfrost® Plus silanized histological glass slides to carry out immunostaining.

Les observations microscopiques ont été réalisées en microscopie optique, à l’aide d’un microscope Leica type Orthoplan ou DMLB. Les prises de vue ont été réalisées avec une caméra Olympus DP72 et le logiciel Cell^D.The microscopic observations were carried out by optical microscopy, using a Leica Orthoplan or DMLB type microscope. The shots were taken with an Olympus DP72 camera and Cell^D software.

Examen de la morphologie générale :Examination of general morphology:

La morphologie générale a été examinée sur des coupes en paraffine colorées au trichrome de Masson variante de Goldner, selon le mode opératoire MO-H-157.The general morphology was examined on paraffin sections stained with Masson's trichrome variant of Goldner, according to the MO-H-157 procedure.

La morphologie générale a été évaluée par un examen microscopique, essentiellement sur la structure du stratum corneum.The general morphology was assessed by microscopic examination, mainly on the structure of the stratum corneum.

Immunomarquages :Immunomarkings:

Tous les immunomarquages ont été réalisés à l’aide d’un automate d’immunomarquages (commercialisé par Dako, AutostainerPlus) en suivant les instructions du fabricant et le marquage a été évalué par un examen microscopique à fluorescence.All immunostaining was carried out using an immunostaining machine (marketed by Dako, AutostainerPlus) following the manufacturer's instructions and the marking was evaluated by fluorescence microscopic examination.

Immunomarquage de la filaggrine :Filaggrin immunostaining:

La protéolyse de la filaggrine produit des acides aminés, importants composants du NMF (commercialisé par Natural Moisturizing Factor) formant le cément intercornéocytaire responsable de la fonction barrière du stratum corneum.The proteolysis of filaggrin produces amino acids, important components of NMF (marketed by Natural Moisturizing Factor) forming the intercorneocytic cementum responsible for the barrier function of the stratum corneum.

La filaggrine a été marquée sur coupes paraffine formolées, avec un anticorps monoclonal anti-filaggrine, clone AKH1, (commercialisé par Santa Cruz sous la référence sc-66192), fait sur souris au 1/3200ème pendant 1h à 20°C avec un système amplificateur biotine/streptavidine (commercialisé par Sigma) et révélée en FITC (commercialisé par Sigma)Filaggrin was marked on formalin paraffin sections, with an anti-filaggrin monoclonal antibody, clone AKH1, (marketed by Santa Cruz under the reference sc-66192), made on mice at 1/3200 for 1 hour at 20°C with a system biotin/streptavidin amplifier (marketed by Sigma) and revealed in FITC (marketed by Sigma)

Les noyaux ont été contre colorés à l’iodure de propidium (commercialisé par Sigma).The nuclei were counterstained with propidium iodide (marketed by Sigma).

Immunomarquage de laImmunostaining of the transglutaminasetransglutaminase membranaire (TGM)membrane (TGM) ::

La TGM est une enzyme impliquée dans la formation des enveloppes cornées du stratum corneum.TGM is an enzyme involved in the formation of the horny envelopes of the stratum corneum.

La TGM a été marquée sur coupes congelées à l’aide d’un anti-corps monoclonal anti-TGM, clone B.C1, (commercialisé par Harbor BioProducts, sous la référence 621), fait sur souris, dilué au 1/100ème pendant 1 nuit à 20°C avec un système amplificateur Vectastain RTU Universal VECTOR avidine/biotine (commercialisé par Sigma) et révélée en FITC (sigma). Les noyaux ont été contre colorés à l’iodure de propidium (commercialisé par Sigma).The TGM was marked on frozen sections using an anti-TGM monoclonal antibody, clone B.C1, (marketed by Harbor BioProducts, under the reference 621), made on mice, diluted 1/100 for 1 night at 20°C with a Vectastain RTU Universal VECTOR avidin/biotin amplifier system (marketed by Sigma) and revealed in FITC (sigma). The nuclei were counterstained with propidium iodide (marketed by Sigma).

Immunomarquage de LEKTI :LEKTI immunostaining:

LEKTI est un inhibiteur de sérines protéases qui régule la desquamation du stratum corneum.LEKTI is a serine protease inhibitor that regulates stratum corneum desquamation.

LEKTI a été marqué sur coupes paraffine formol à l’aide d’un anti-corps monoclonal anti-LEKTI, clone 1C11G6, (commercialisé par Santa Cruz, sous la référence 32330), fait sur souris, dilué au 1/100ème pendant 24h à TA avec un système amplificateur Vectastain RTU Universal VECTOR avidine/biotine (commercialisé par Sigma) et révélé en FITC(sigma) Les noyaux ont été contre colorés à l’iodure de propidium (commercialisé par Sigma).LEKTI was marked on formalin paraffin sections using an anti-LEKTI monoclonal antibody, clone 1C11G6, (marketed by Santa Cruz, under the reference 32330), made on mice, diluted 1/100 for 24 hours at TA with a Vectastain RTU Universal VECTOR avidin/biotin amplifier system (marketed by Sigma) and revealed in FITC (sigma). The nuclei were counterstained with propidium iodide (marketed by Sigma).

Résultats :Results :

Des comparaisons entre des photographies des groupes témoins (Figures 1A, 2A, 3A et 4A) et du groupe traité (Figures 1B, 2B, 3B et 4B) ont été réalisées.Comparisons between photographs of the control groups (Figures 1A, 2A, 3A and 4A) and the treated group (Figures 1B, 2B, 3B and 4B) were made.

La comparaison entre les figures 1A et 1B montre notamment un stratum corneum mieux feuilleté pour l’explant de la .The comparison between Figures 1A and 1B shows in particular a better laminated stratum corneum for the explant of the .

Par ailleurs, il y a une bonne activité de restructuration de la barrière cutanée pour l’explant ayant bénéficié de l’application d’émulsion, sans émulsionnant, caractérisée par :Furthermore, there is a good restructuring activity of the skin barrier for the explant having benefited from the application of emulsion, without emulsifier, characterized by:

- Une inhibition totale de la baisse d’expression de filaggrine induite par la délipidation comme le montrent la .- Total inhibition of the drop in filaggrin expression induced by delipidation as shown in .

- Une inhibition totale de la baisse d’expression de la TGM induite par la délipidation comme le montrent la .- Total inhibition of the drop in TGM expression induced by delipidation as shown in .

- Une inhibition partielle de la baisse d’expression de LEKTI induite par la délipidation comme le montrent la .- Partial inhibition of the drop in LEKTI expression induced by delipidation as shown in .

Les observations des prélèvements à 4 jours confirment les résultats décrits ci-dessus.Observations of samples at 4 days confirm the results described above.

Conclusion sur les propriétés d’hydratation :Conclusion on hydration properties:

A la lecture de ces résultats, l’émulsion sans émulsionnant, selon l’invention présente de bonnes propriétés d’hydratation et peut être utilisée pour le traitement de désordres cutanés cosmétiques ou dermatologiques.Reading these results, the emulsion without emulsifier, according to the invention has good hydration properties and can be used for the treatment of cosmetic or dermatological skin disorders.

b. Propriétés anti-inflammatoires :b. Anti-inflammatory properties:

Lorsque du LPS (lipopolysaccharide) est appliqué sur de peau humaine une réaction inflammatoire est déclenchée.When LPS (lipopolysaccharide) is applied to human skin an inflammatory reaction is triggered.

Dès lors les cellules secrètent des cytokines notamment des interleukines IL1α et IL8 et le facture de nécrose tumorale TNFα dans le milieu extracellulaire.From then on, the cells secrete cytokines, notably interleukins IL1α and IL8, and the cause of tumor necrosis TNFα in the extracellular environment.

Ces cytokines peuvent alors quantifiées afin d’évaluer les propriétés antiinflammatoires de produits.These cytokines can then be quantified in order to evaluate the anti-inflammatory properties of products.

Préparation des explants :Preparation of explants:

18 explants d’un diamètre d’environ 10 mm (± 1 mm) ont été préparés à partir d’une plastie abdominale d’une femme (référence P946-AB-Hopital Longjumeau) . Les explants ont été mis en survie en milieu BEM (BIOEC’s Explants Medium- Sigma) à 37°C en atmosphère humide, enrichie de 5 % de CO2.18 explants with a diameter of approximately 10 mm (± 1 mm) were prepared from an abdominoplasty of a woman (reference P946-AB-Hopital Longjumeau). The explants were placed in survival mode in BEM (BIOEC’s Explants Medium-Sigma) medium at 37°C in a humid atmosphere, enriched with 5% CO2.

Les explants ont été séparés en 3 groupes de 6 explants.The explants were separated into 3 groups of 6 explants.

Application des produits :Application of products:

Du LPS à raison de 2mg/cm², a été appliqué sur les groupes 2 et 3.LPS at a rate of 2 mg/cm² was applied to groups 2 and 3.

Sur le groupe 3, de l’émulsion a été appliquée et étalée uniformément à l’aide d’une spatule,On group 3, emulsion was applied and spread evenly using a spatula,

Au jour J1, 2 mL du milieu de culture a été renouvelé pour l’ensemble des explants.On day D1, 2 mL of the culture medium was renewed for all explants.

Aux jours J1 et J2, un disque de papier filtre imprégné de 30 μL de LPS (à 60 000 U/mg) a été appliqué, pendant 1 heure, à la surface des explants des 2 groupes préalablement traités.On days D1 and D2, a disc of filter paper impregnated with 30 μL of LPS (at 60,000 U/mg) was applied, for 1 hour, to the surface of the explants of the 2 previously treated groups.

Le tableau suivant représente la répartiton des explants et les traitements subis : Groupe Nombre d’explants Traitement LPS Application de la crème 1 6 2 6 Oui 3 6 Oui Oui The following table represents the distribution of explants and the treatments undergone: Band Number of explants LPS treatment Applying the cream 1 6 2 6 Yes 3 6 Yes Yes

Au jour J2 soir, 2ml de chacun des milieux de culture ont été prélevés, pour quantifier la concentration d’IL1α, d’IL8 et de TNFα.On day D2 evening, 2ml of each of the culture media were taken, to quantify the concentration of IL1α, IL8 and TNFα.

Dosages :Dosages:

Les concentrations d’IL1α, d’IL8 et de TNFα ont été déterminées par un dosage par absorbance selon les méthodes connues de l’homme du métier.The concentrations of IL1α, IL8 and TNFα were determined by an absorbance assay according to methods known to those skilled in the art.

Toutes les absorbances ont été mesurées à l’aide d’un lecteur de microplaque commercialisé sous la référence Tecan Infinite M200 Pro, associé au logiciel Magellan selon les instructions du fabricantAll absorbances were measured using a microplate reader marketed under the reference Tecan Infinite M200 Pro, associated with Magellan software according to the manufacturer's instructions.

Une moyenne de la concentration d’IL1α, d’IL8 et de TNFα en pg.mL-1a été déterminée pour chaque groupe.An average of the concentration of IL1α, IL8 and TNFα in pg.mL -1 was determined for each group.

Dosage d’IL1α :IL1α dosage:

La concentration en IL1α dans les milieux de culture a été déterminée à l’aide d’un kit de dosage EIA kit (commercialisé par Cayman, sous la référence 583301) selon les instructions du fabricant.The concentration of IL1α in the culture media was determined using an EIA kit assay kit (marketed by Cayman, under the reference 583301) according to the manufacturer's instructions.

Les résultats du dosage d’IL1α en pg.mL-1sont les suivants :The results of the IL1α dosage in pg.mL -1 are as follows:

- groupe 1 : Moyenne 14,7- group 1: Average 14.7

- groupe 2 : moyenne 15,5- group 2: average 15.5

- groupe 3 : moyenne 9,8- group 3: average 9.8

Dosage d’IL8 :Dosage of IL8:

La concentration en IL-8 dans les milieux de culture a été déterminée à l’aide d’un kit de dosage (RayBiotech, ref ELH-IL8-001) selon les instructions du fabricant.The concentration of IL-8 in the culture media was determined using an assay kit (RayBiotech, ref ELH-IL8-001) according to the manufacturer's instructions.

Les résultats du dosage d’IL8 en pg.mL-1sont les suivants :The results of the IL8 dosage in pg.mL -1 are as follows:

- groupe 1 : Moyenne 8,34- group 1: Average 8.34

- groupe 2 : moyenne 30,20- group 2: average 30.20

- groupe 3 : moyenne 14,66- group 3: average 14.66

Dosage de TNFα :Dosage of TNFα:

La concentration en TNFα dans les milieux de culture a été déterminée à l’aide d’un kit de dosage EIA kit (Cayman, ref. 589201) selon les instructions du fabricant.The concentration of TNFα in the culture media was determined using an EIA kit assay kit (Cayman, ref. 589201) according to the manufacturer's instructions.

Les résultats du dosage de TNFα en pg.mL-1:The results of the TNFα dosage in pg.mL -1 :

- groupe 1 : Moyenne 6,0- group 1: Average 6.0

- groupe 2 : moyenne 23,1- group 2: average 23.1

- groupe 3 : moyenne 11,2- group 3: average 11.2

Résultats :Results :

Dans les conditions opératoires décrites ci-dessus, après 2 jours de traitement et en comparant le groupe 2 (LPS uniquement) et le groupe 3 (LPS + Émulsion) il a été montré que l’émulsion selon l’invention a induit :Under the operating conditions described above, after 2 days of treatment and by comparing group 2 (LPS only) and group 3 (LPS + Emulsion) it was shown that the emulsion according to the invention induced:

- une diminution de 37% de d’IL1α- a 37% reduction in IL1α

- une diminution de 51% de d’IL8- a 51% reduction in IL8

- une diminution de 51% de TNFα- a 51% reduction in TNFα

Conclusion de l’étude sur les propriétés anti-inflammatoiresConclusion of the study on anti-inflammatory properties ::

A la lecture de ces résultats, l’émulsion, sans émulsionnant, selon l’invention présente de bonnes propriétés anti-inflammatoires et peut donc être utilisée pour le traitement de désordres cutanés cosmétiques ou dermatologiques.Reading these results, the emulsion, without emulsifier, according to the invention has good anti-inflammatory properties and can therefore be used for the treatment of cosmetic or dermatological skin disorders.

c. Propriétés de cicatrisation :vs. Healing properties:

Les propriétés de cicatrisation sont une des autres propriétés intéressantes des produits cosmétiques et/ou pharmaceutiques et/ou dermatologiques pour leurs utilisations dans le traitement de désordres cutanés cosmétiques ou dermatologiques.Healing properties are one of the other interesting properties of cosmetic and/or pharmaceutical and/or dermatological products for their uses in the treatment of cosmetic or dermatological skin disorders.

Ces propriétés ont été évaluées à l’aide d’une comparaison entre les effets de l’émulsion, sans émulsionnant, selon l’invention et les effets d’une crème commerciale (commercialisé sous le nom Cicalfate) connue pour ses effets cicatrisants, appliquée sur des explants de peau présentant des lésions dues à une irradiation par des UVB.These properties were evaluated using a comparison between the effects of the emulsion, without emulsifier, according to the invention and the effects of a commercial cream (marketed under the name Cicalfate) known for its healing effects, applied on skin explants showing lesions due to UVB irradiation.

Cette comparaison a été effectuée sur les bases :This comparison was carried out on the bases:

- une expertise histologique de la morphologie générale de la peau- histological expertise of the general morphology of the skin

- Immunomarquage de la fibronectine- Immunostaining of fibronectin

- Immunomarquage de l’intégrine β4- Immunostaining of β4 integrin

Préparation des explants :Preparation of explants:

27 explants d’environ 12 mm de diamètre ont été préparés à partir d’une plastie abdominale d’une femme au consentement éclairé (référence P943-AB39- Hôpital de Longjumeau).27 explants of approximately 12 mm in diameter were prepared from an abdominoplasty of a woman with informed consent (reference P943-AB39- Longjumeau Hospital).

Les explants ont été mis en survie en milieu BEM (BIO-EC’s Explants Medium-sigma) à 37°C en atmosphère humide, enrichie de 5 % de CO2.The explants were placed in survival medium in BEM (BIO-EC's Explants Medium-sigma) at 37°C in a humid atmosphere, enriched with 5% CO 2 .

Les explants ont été séparés en 3 groupes de 9 explants.The explants were separated into 3 groups of 9 explants.

Réalisation des lésions dues à l’irradiation :Realization of lesions due to irradiation:

Tous les explants ont été irradiés en leur centre avec une dose d’UVB de 10 J/ cm².All explants were irradiated at their center with a UVB dose of 10 J/cm².

Application des produits :Application of products:

Aux jours J0, J1, J3, J5, J7 et J8, l l’émulsion selon l’invention et de la crème cicatrisante du commerce ont été appliquées respectivement sur les explants des groupes 2 et 3 par voie topique à raison de 2mg/cm².On days D0, D1, D3, D5, D7 and D8, the emulsion according to the invention and commercial healing cream were applied respectively to the explants of groups 2 and 3 topically at a rate of 2 mg/cm² .

Le milieu de culture a été renouvelé pour moitié (1 mL) aux jours et J2, J4, J6 et J8.The culture medium was renewed by half (1 mL) on days 2, 4, 6 and 8.

Prélèvements :Specimens :

Aux jours J0, J2, et J9, 3 explants de chaque lot ont été prélevés et coupés en deux.On days D0, D2, and D9, 3 explants from each batch were taken and cut in half.

Une partie a été fixée dans une solution de formol tamponné et la 2èmepartie a été congelée à –80°C.One part was fixed in a buffered formalin solution and the 2nd part was frozen at –80°C.

Traitements histologiques :Histological treatments:

Les traitements histologiques ont été identiques aux traitements reçus par les explants lors de l’étude sur les propriétés d’hydratation de l’émulsion selon l’invention (comme décrit précédemment).The histological treatments were identical to the treatments received by the explants during the study on the hydration properties of the emulsion according to the invention (as described previously).

Examen de la morphologie générale :Examination of general morphology:

La morphologie générale a été examinée aux jours J0, J2 et J9 sur des coupes en paraffine colorées au trichrome de Masson variante de Goldner, selon le mode opératoire MO-H-157.The general morphology was examined on days D0, D2 and D9 on paraffin sections stained with Masson's trichrome variant of Goldner, according to the MO-H-157 procedure.

La morphologie générale a été évaluée par un examen microscopique.General morphology was assessed by microscopic examination.

Immunomarquages :Immunomarkings:

Tous les immunomarquages ont été réalisés à l’aide d’un automate d’immunomarquages (Dako, AutostainerPlus) en suivant les instructions du fabricant et le marquage a été évalué par un examen microscopique à fluorescence.All immunostaining was carried out using an immunostaining machine (Dako, AutostainerPlus) following the manufacturer's instructions and the marking was evaluated by fluorescence microscopic examination.

Immunomarquage de la fibronectine :Fibronectin immunostaining:

La fibronectine joue un rôle dans la migration cellulaire, et dans l’adhésion des cellules entre elles et la matrice extracellulaire, sa présence est un témoin d’un processus de cicatrisation cellulaire.Fibronectin plays a role in cell migration, and in the adhesion of cells to each other and the extracellular matrix, its presence is a witness to a cellular healing process.

La fibronectine a été marquée aux jours J0 et J2 sur coupes congelées, avec un anti-corps monoclonal anti-fibronectine, clone TV-1, fait sur souris de chez Chemicon (commercialisé sous la référence MAB 88904), au 1/50ème pendant 1h à température ambiante avec un système amplificateur biotine/streptavidine (commercialisé par Sigma) révélée en FITC (commercialisé par Sigma).Fibronectin was marked on days D0 and D2 on frozen sections, with a monoclonal anti-fibronectin antibody, clone TV-1, made on mice from Chemicon (marketed under the reference MAB 88904), at 1/50 for 1 hour at room temperature with a biotin/streptavidin amplifier system (marketed by Sigma) revealed in FITC (marketed by Sigma).

Les noyaux ont été contre colorés à l’iodure de propidium (commercialisé par Sigma).The nuclei were counterstained with propidium iodide (marketed by Sigma).

Immunomarquage de l’intégrine β4 :Immunostaining of β4 integrin:

L’intégrine β4 est une protéine transmembranaire qui permet aux cellules d’adhérées entre elles, sa présence est un autre témoin d’un processus de cicatrisation.β4 integrin is a transmembrane protein which allows cells to adhere to each other; its presence is another indicator of a healing process.

L’intégrine β4 a été marquée aux jours J0 et J9 sur coupes congelées, avec un anti-corps monoclonal antiintégrine β4 clone 3 E1 (CD104), fait sur souris de chez Chemicon (commercialisé sous la référence MAB 1964), au 1/600ème pendant 1h à température ambiante avec un système amplificateur biotine/streptavidine (commercialisé par Sigma) révélée en FITC (commercialisé par Sigma).The β4 integrin was marked on days D0 and D9 on frozen sections, with a monoclonal anti-integrin β4 antibody clone 3 E1 (CD104), made on mice from Chemicon (marketed under the reference MAB 1964), at 1/600 scale. for 1 hour at room temperature with a biotin/streptavidin amplifier system (marketed by Sigma) revealed in FITC (marketed by Sigma).

Les noyaux ont été contre colorés à l’iodure de propidium (commercialisé par Sigma).The nuclei were counterstained with propidium iodide (marketed by Sigma).

Résultats :Results :

Des comparaisons ont été réalisées entre des photographies du groupe d’explants irradiés ayant reçu l’émulsion selon l’invention et du groupe d’explants irradiés ayant reçu la crème commerciale Cicalfate.Comparisons were made between photographs of the group of irradiated explants having received the emulsion according to the invention and the group of irradiated explants having received the commercial Cicalfate cream.

Ces comparaisons montrent une présence similaire de fibronectine et d’intégrine β4 quelque soit le traitement reçu.These comparisons show a similar presence of fibronectin and β4 integrin whatever the treatment received.

Conclusion sur les propriétés de cicatrisation :Conclusion on healing properties:

A la lecture de ces résultats, l’émulsion selon l’invention présente une activité cicatrisante et peut être utilisée pour le traitement de désordres cutanés cosmétiques ou dermatologiques.Reading these results, the emulsion according to the invention exhibits healing activity and can be used for the treatment of cosmetic or dermatological skin disorders.

Claims (8)

Emulsion huile dans l’eau comprenant une phase lipophile et une phase hydrophile, caractérisée en ce que :
- l’émulsion est dépourvue d’émulsionnant,
- la phase hydrophile comprend entre 1 et 10 % massique de particules de protéines insolubles,
- la phase lipophile représente entre 10 % et 50 % du volume total de l’émulsion.
Oil-in-water emulsion comprising a lipophilic phase and a hydrophilic phase, characterized in that:
- the emulsion is free of emulsifier,
- the hydrophilic phase comprises between 1 and 10% by weight of insoluble protein particles,
- the lipophilic phase represents between 10% and 50% of the total volume of the emulsion.
Emulsion selon la revendication 1, caractérisée en ce que les protéines insolubles sont des particules de fibroïne, les particules de fibroïne ayant un diamètre entre 0,1 à 10 micromètres.Emulsion according to claim 1, characterized in that the insoluble proteins are fibroin particles, the fibroin particles having a diameter between 0.1 to 10 micrometers. Emulsion selon l’une des revendications précédentes, caractérisée en ce que la phase hydrophile comprend entre 1 et 5% massique de particules de protéines solubles.Emulsion according to one of the preceding claims, characterized in that the hydrophilic phase comprises between 1 and 5% by weight of soluble protein particles. Emulsion selon la revendication précédente, caractérisée en ce que les protéines solubles sont issues des hydrolysats de protéines végétales, par exemple des hydrolysats de protéines de soja ou de riz, ou en ce que les protéines solubles sont issues des hydrolysats de protéines de soie comme la séricine.Emulsion according to the preceding claim, characterized in that the soluble proteins come from hydrolysates of plant proteins, for example hydrolysates of soy or rice proteins, or in that the soluble proteins come from hydrolysates of silk proteins such as sericin. Emulsion selon l’une des revendications précédentes, caractérisée en ce que la phase hydrophile comprend des peptides d’origine biosynthétique ou microbiologique.Emulsion according to one of the preceding claims, characterized in that the hydrophilic phase comprises peptides of biosynthetic or microbiological origin. Emulsion selon l’une des revendications précédentes, caractérisée en ce que la phase hydrophile comprend, en outre, un ou plusieurs des éléments suivants : de la bétaïne, de la glycine, de la nisine et du NaCl.Emulsion according to one of the preceding claims, characterized in that the hydrophilic phase further comprises one or more of the following elements: betaine, glycine, nisin and NaCl. Emulsion selon l’une quelconque des revendications 1 à 6 pour sonutilisation comme médicament, de préférence un médicament à usage topique.Emulsion according to any one of claims 1 to 6 for its use as a medicine, preferably a medicine for topical use. Emulsion selon l’une quelconque des revendications 1 à 6 pour son utilisation dans le traitement ou la prévention de désordres cutanés, par exemple une inflammation de la peau.Emulsion according to any one of claims 1 to 6 for its use in the treatment or prevention of skin disorders, for example inflammation of the skin.
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Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
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