FR3106061A1 - Composition cosmétique comprenant des extraits de Padina Pavonica pour améliorer la formation et la maturation du stratum corneum - Google Patents

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Abstract

La présente invention concerne l’utilisation cosmétique d’extraits de Padina Pavonica pour améliorer la formation et la maturation du stratum corneum, ainsi qu’une composition cosmétique pour améliorer la formation et la maturation du stratum corneum comprenant des extraits de Padina Pavonica, et un procédé de soin cosmétique pour améliorer la formation et la maturation du stratum corneum comprenant une étape d’application sur une zone de la peau d’une composition selon l’invention.

Description

Composition cosmétique comprenant des extraits de Padina Pavonica pour améliorer la formation et la maturation du stratum corneum
DOMAINE DE L'INVENTION
La présente invention concerne l’utilisation cosmétique d’extraits de Padina Pavonica pour améliorer la formation et la maturation du stratum corneum, ainsi qu’une composition cosmétique pour améliorer la formation et la maturation du stratum corneum comprenant des extraits de Padina Pavonica, et un procédé de soin cosmétique pour améliorer la formation et la maturation du stratum corneum comprenant une étape d’application sur une zone de la peau d’une composition selon l’invention.
ETAT DE LA TECHNIQUE
Le concept de l'exposome a été introduit en tant qu'équivalent environnemental du génome afin d'établir le rôle des expositions environnementales sur un fond génétique donné (Wild C.P. 2005 - Cancer Epidemiol. Biomarkers Prev. 14: 1847-50).
L’exposome comprend l'ensemble des expositions environnementales externes spécifiques et non spécifiques (exposome externe, par exemple l’environnement, mode de vie, stress, alimentation, tabagisme et bruit) auxquelles un sujet est exposé et leurs conséquences au niveau des organes et des cellules (exposome interne, par exemple métabolisme, stress psychologique, manque de sommeil, comportement sédentaire). L'exposome est donc souvent divisé en exposome externe et interne (Vrijheid M. 2014- Thorax 69 : 876-878).
L'exposome est dynamique par opposition au génome qui se veut relativement statique. Les expositions varient d'une heure à l'autre ou d'une année à l'autre, tant à l'extérieur qu'à l'intérieur de l’environnement.
Les gènes et les protéines offrant une protection efficace contre de tels environnements peuvent être considérés comme "défensifs". Le terme "défensome" (defensome en anglais) a d'abord été utilisé dans la littérature en lien avec les infections des plantes (de Torres M. et al. 2003- Plant J. 33 : 665-676) et le comportement du "défensome chimique" étudié par Goldstone J.V. et al (2006- Dev Biol. 300 (1) : 366-384), et plus exactement les réponses du génome de l'oursin Strongylocentrotus purpuratus en réponse aux stress environnementaux. Le concept du défensome semble être presque universellement applicable comme l'ont montré Goldstone J.V. et ses collaborateurs chez les animaux marins.
Le défensome est un réseau intégré de gènes et de voies régulées par de nombreux facteurs de transcription qui permettent à un organisme ou à un tissu de créer une défense orchestrée contre les facteurs de stress exogènes et/ou endogènes.
La peau est une interface majeure entre l'organisme et les facteurs externes d'exposition qui constituent notre première défense contre l'environnement. C'est aussi l'une des principales voies de pénétration des agents pathogènes. Elle joue un rôle protecteur grâce à sa barrière physique épidermique et à ses fonctions de barrière antimicrobienne (Grice E.A. et J.A. Segre 2011 - Nat. Rev. Microbiol.9 (4) : 244-253 ; Grice E.A. 2014- Semin. Cutan. Méd. Chirurgie. 33 : 98–103).
Il est bien documenté que les facteurs liés à l’exposome agissent sur la barrière cutanée naturelle et sur l'immunité cutanée, ce qui entraîne différents changements cutanés, par exemple une dysrégulation de l'homéostasie, une hyperkératinisation et une activation de l'immunité innée, induisant ainsi des maladies cutanées possibles, comme la dermatite atopique et l'acné (Valacchi G. et al. 2012 - Ann. N. Y Acad. Sci. 1271:75-81 ; Murillo N. et D. Raoult 2013 - Future Microbiol 8 : 209-222 ; Michael R. et al. 2015 - Currergy Asthma Rep. 15 : 65-DOI 10.1007/s11882-015-0567-4 ; Dreno B. et al. 2018 - J. Eur. Acad Dermatol. Venereol. 32 : 812–819). Ces facteurs influencent également le vieillissement cutané en déclenchant des processus moléculaires induisant des dommages structurels de la peau (Krutmann J. et al. 2017 - J Derm Sc. 85(3) : 152‐161). Il est bien connu qu'avec l'âge, le remplacement cellulaire de la peau et la protection mécanique diminuent continuellement et la guérison des plaies et les réponses immunitaires sont retardées. Le stratum corneum (SC) ou l'enveloppe cornée (EC) est une structure spécialisée essentielle pour assurer une fonction de barrière épidermique adéquate. L’exposome agit au niveau de la peau sur cette barrière épithéliale, en diminuant son intégrité, et en agissant de manière néfaste sur la formation et la maturation du stratum corneum. En effet, au cours du vieillissement, la composition du stratum corneum change en raison de la modification des modèles d'expression des gènes codant pour les principaux composants. Ainsi, la fonction de barrière est réduite, ce qui augmente la susceptibilité aux assauts mécaniques. De plus, elle est diminuée par une teneur élevée en protéases et une diminution de la production de facteur naturel hydratant (NMF) formé par la protéolyse de la filaggrine.
Au cours du processus de kératinisation, de nombreux gènes sont régulés par le calcium. Au cours du vieillissement, le gradient de calcium est considérablement affecté et le modèle d'expression des gènes spécifiques du stratum corneum change autant pour le vieillissement intrinsèque que le vieillissement extrinsèque en raison, par exemple, de la pollution environnementale connue pour perturber la barrière cutanée. Des changements dans la composition du stratum corneum peuvent également être observés dans plusieurs maladies de la peau, par exemple le psoriasis, la dermatite atopique (Streubel M.K et al. 2015 - In Textbook of Aging Skin, M. A. Farage et al. eds. Springer-Verlag Berlin Heidelberg DOI 10.1007/978-3-642-27814-3-112-1).
Il perdure ainsi un besoin de renforcer l’intégrité épidermique, en particulier au niveau du stratum corneum, dont la formation et la maturation sont compromises par l’exposome.
D’une manière surprenante, la Demanderesse a mis en évidence que des extraits de Padina Pavonica présentait un effet sur l’amélioration de la formation et de la maturation du stratum corneum.
Il est à cet effet proposé, selon un premier aspect de l’invention, l’utilisation cosmétique d’extraits de Padina Pavonica pour améliorer la formation et la maturation du stratum corneum.
Padina pavonica est une algue brune également dénommée Queue de paon ou padine, largement répandue dans les zones tempérées chaudes aux zones tropicales en Europe, Océan Atlantique, Mer Adriatique, Mer Méditerranée, Amérique du Sud et Amérique Centrale, Asie (Inde, Taiwan, Japon, Indonésie), Australie et Nouvelle-Zélande. Cette algue est constituée d’un thalle érigé divisé en frondes de couleur blanchâtre à brun-brunâtre en forme d'éventail, et fixé au substrat par un crampon rhizoïdal. Des bandes capillaires concentriques de 1 à 2 mm de large se trouvent tous les 2,5 à 3 mm des deux côtés du thalle mais sont plus proéminentes sur la face dorsale (Carter P.W. 1927 - An. Bot. 41 : 139-159). La croissance de la fronde est initiée par une rangée marginale entière de cellules méristématiques dans un pli apical involutif dirigé vers la surface interne du thalle. La pointe apicale des frondes est enroulée vers la partie ventrale du thalle. Elle peut atteindre jusqu'à 15 cm de longueur en été. Le cycle de vie de Padina est haplodiplontique isomorphe. Le thalle se détache chaque hiver et repousse au printemps. Cette algue est l'une des deux seules algues brunes calcifiées connues aujourd'hui, la deuxième étant Newhousia imbricata (Silberfeld T. et al. 2013 - J. Phycol. 49 : 130-142 ; Johnson V.R. et al. 2012 - Global Change Biol. 18 : 2792-2803).
Cette algue contient des protéines, des lipides, des acides gras, des fibres, des pigments (dont chlorophylle c1, c2, la fucoxanthine, le fucoxanthol, la flavoxanthine et la diatoxanthine), des terpènes, des stérols (le fucostérol serait le principal stérol), ainsi que des polysaccharides, tels que des alginates, des fucoidanes et de la cellulose. Le rendement de l'extraction des alginates atteindrait 66,72% avec 9,7% d'acide uronique seulement (Abid M.D. et al. 2019- Trends J. Sc. Res. 4 (2) : 62-67.)
Par extraits de Padina Pavonica sont entendus notamment des extraits qui comprennent un certain nombre d'espèces potentiellement actives.
Par extraits de Padina Pavonica sont entendus notamment des extraits aqueux ou extrait éthanolique ou extrait acétonique de Padine. De préférence l’extrait est sur base de paraffine (par exemple commercialisé sous le nom d’actif HPS3 d’ALBAN MULLER situé au 8, rue Charles Pathe-94300 Vincennes-France), d’huile végétale de Simmondsia chinensis (par exemple commercialisé sous le nom de Padinami d’ALBAN MULLER) ou de glycerine (par exemple commercialisé sous le nom de Protectami d’ALBAN MULLER et Neurodermine de Matriscience). De manière préférée, l’extrait de Padina Pavonica est le HPS3 d’Alban Muller.
Le contenu exact, la concentration et la quantité d’extrait de Padina Pavonica utilisé peuvent varier d'une application à l'autre comme décrit ci-dessus, à savoir, la capacité d'obtenir une amélioration statistiquement significative d'une mesure décrite ici par rapport à un témoin.
L’homme du métier peut aisément trouver dans ses connaissances générales un procédé d’obtention d’un tel extrait de Padina Pavonica. Il pourra par exemple s’agir d’extraits des thalles entiers de Padina Pavonica sous pression à froid pendant 4h suivie d’une ultrafiltration pour calibrer l’extrait, puis après vérification des spécifications, filtration en salle stérile sous hotte à flux laminaire.
L’homme du métier pourra également se référer au procédé tel que décrit dans le document de brevet FR2743723, dont les pages 3 et 4 sont reprises ci-dessous :
PREPARATION DE L'EXTRAIT
On prépare l'extrait en faisant sécher la plante après récolte, si possible à l'abri de la lumière, pour garder intactes ses propriétés pharmacologiques (…). On a procédé au séchage des plantes broyées ou brutes, par ventilation sans chauffage et on a obtenu ainsi un matériel végétal de couleur marron foncé sur lequel contrastent vivement les stries blanches de carbonate de calcium (…).
Le rapport utilisé est de 1 gramme de matière végétale sèche pour 5 ml de solvant (…). Les solvants les plus commodes à utiliser sont l'éthanol, I'hexane, le cyclohexane, le chloroforme, le dichlorométhane, I'heptane, I'acétate d'éthyle, I'acétone. La plupart des solvants organiques conviennent cependant, seul ou en association. De plus, bien que plus délicate à mettre en œuvre, l'extraction aqueuse en milieu ammoniacal donne des résultats satisfaisants. Pour réaliser l'extrait il n'est pas nécessaire de faire macérer les matières dans le solvant choisi, il est possible de faire passer en continu le solvant sur la poudre (percolation). Il suffit de régler le débit et de concentrer l'extrait pour obtenir une solution d'activité choisie.
Les extraits obtenus avec les solvants organiques, sont souvent délicats à manipuler (évaporation, hydratation, risque de déflagration ...), il est donc souhaitable de les fixer sur un ou des supports solides tel qu'un polymérie organique absorbant comme par exemple la cellulose, des minéraux ou des compositions minérales absorbantes ou des adsorbants (Silice colloïdale ...), des produits plus inertes comme les paraffines, les polyéthylènes glycols (PEG) les propylène glycols, polyvinylpyrrolidone etc… Tous les supports inertes peu oxygénés peuvent convenir (…).
A titre d'exemple, l'extrait utilisé dans la présente invention est obtenu par macération de 1g, de matière végétale séche dans 5 ml d'éthanol pur pendant 12 heures.
Le stratum corneum (SC) ou l'enveloppe cornée (EC) est une structure spécialisée essentielle pour assurer une fonction de barrière épidermique adéquate. Sa formation se déroule en trois étapes principales, en commençant dans les couches épineuses supérieures de l'épiderme:
- Pendant la phase d'initiation de l'élévation des taux de calcium intracellulaire, il y a accumulation de trois protéines : l'involucrine, l'envoplakine et la périplakine qui forment une couche monomoléculaire sur toute la surface interne de la membrane plasmatique avec la participation de l'enzyme transglutaminase 1. Cette enzyme relie les plakins et l'involucrine en formant des liaisons transversales. Il réticule également d'autres protéines membranaires et desmosomales qui contribuent aux propriétés dynamiques des jonctions cellulaires et des interactions cytosquelettiques.
- La deuxième étape conduit à la formation de corps lamellaires à partir de l'activité de l'appareil de Golgi. Après un afflux de calcium dans les kératinocytes, les corps lamellaires fusionnent avec la membrane plasmique. Cela modifie la composition de la membrane cellulaire et l'enrichit en céramides.
- Dans la dernière étape, le renforcement de la membrane est dû à la loricrine et aux protéines riches en petites protéines (SPR) qui sont réticulées ensemble par l'enzyme cytosol transglutaminase 3 pour former des homodimères et hétérodimères. De plus, de petites quantités d'autres protéines, comme la trichohyaline, la cystatine et l'élafine, sont réticulées à l'enveloppe cornée.
Les cellules mortes ainsi incrustées dans les lamelles lipidiques assurent les fonctions vitales de barrière mécanique et de perméabilité à l'eau nécessaires pour maintenir l'homéostasie (Kalinin A. et al. 2001 - J. Cell Sc. 114 : 3069-3070).
Le stratum corneum est constituée de différents types de protéines structurales et régulatrices issues du complexe de différenciation épidermique du groupe de gènes "complexe de différenciation épidermique". Ces gènes sont d'une importance cruciale pour la différenciation des kératinocytes et les propriétés de l'enveloppe cornée. Ils sont divisés en trois familles de gènes (Kypriotou M. et al. 2012- Exp. Dermatol. 21 : 643-649) :
(1) Précurseurs de l'enveloppe cornée (EC), y compris l'involucrine, la loricrine et le complexe cornifine/petite protéines riches en proline (SPRR) et protéines d'enveloppe tardive (LCE),
(2) S100A et
(3) Gènes fusionnés S100
L'involucrine forme la charpente du stratum corneum. Elle est renforcée par la loricrine et les SPRRs. Les hétérodimères d'Envoplakin-periplakin conjuguent les filaments kératiniques (Egawa G & K. Kabashima 2018- Allergology International 67 : 3e11).
Concernant la maturation du stratum corneum, après la kératinisation, les couches mortes de la couche cornée sont empilées et modifient leurs propriétés par diverses réactions chimiques. Le stratum corneum entre en maturation par des réactions séquentielles se produisant dans les différentes couches du stratum corneum. Au niveau de la dernière couche supérieure, chaque cornéocyte doit se détacher par un processus appelé " desquamation ".
La desquamation est la production naturelle et continue d'une nouvelle couche cornée afin de maintenir une épaisseur constante et une bonne homéostasie.
Elle dépend de l'équilibre entre la synthèse des protéines structurales des cornéodesmosomes et leur dégradation par des protéases spécifiques notamment les kallicréines (Egelrud J.P. 2000 - Acta Derm. Venereol Suppl 208 : 44-45 ; Hachem J.P. et al. 2010 - J. Invest. Dermatol. 130 : 500-510).
Le cornéodesmosome est un desmosome modifié contenant des constituants extracellulaires majeurs tels que la desmogleine 1, la desmocolline 1 et la cornéodesmosine.
Les protéases impliquées dans la dégradation des cornéodesmosomes sont sécrétées à partir de granules lamellaires dans la couche cellulaire granulaire. Leur activité est strictement régulée par un cocktail d'inhibiteurs de protéase, dont l'inhibiteur lymphoépithélial Kazal de type 5 sérine protéase (LEKTI) codé par l'inhibiteur sérine protéase Kazal type 5 (SPINK5).
La famille des peptidases liées à la kallicréine humaine (KLK) comprend 14 sérine-protéases (KLK2 à KLK15) qui agissent comme enzymes desquamantes par le biais d'une cascade protéolytique orchestrée dans la peau (Eissa A. et al. 2011 - J. Biol. Chem. 286 : 687- 706).
Les perturbations de la desquamation entraînent l'accumulation à la surface de la peau de cellules partiellement détachées avec ou sans épaississement concomitant de la couche cornée. La sévérité des perturbations peut varier avec une sensation de rugosité et de sécheresse de la surface de la peau et l'accumulation possible d'écailles. Les défauts génétiques des inhibiteurs de la cornéodesmosine et de la protéase entraînent une desquamation accélérée et une altération grave de la barrière. Ainsi, le bon fonctionnement de la fonction barrière repose sur un équilibre entre la prolifération cellulaire et la mort cellulaire.
Selon un deuxième aspect, l’invention concerne une composition cosmétique pour améliorer la formation et la maturation du stratum corneum comprenant des extraits de Padina Pavonica.
De manière préférée, lesdits extraits de Padina Pavonica sont des extraits des thalles de Padina Pavonica.
De manière préférée, ladite composition comprend de 0,01 à 10% en poids de la composition d’extraits de Padina Pavonica, de préférence de 0,50 et 6%, de manière encore plus préférée 3%.
De manière préférée, ladite composition comprend également au moins un autre composé cosmétiquement acceptable, de préférence choisi parmi les agents permettant d’améliorer la formation et/ou la maturation du stratum corneum, les agents favorisant la cicatrisation, les agents apaisants, les agents restructurant, les agents régénérants, les agents revitalisants, les filtres solaires, les agents antirides, les agents hydratants, les agents anti-âges, les agents tensioactifs, les corps gras, les solvants organiques, les agents solubilisant, les agents épaississants et gélifiants, les lissants, les agents renforçant la fermeté, l’élasticité et/ou l’effet barrière de la peau, les antioxydants, les opacifiants, les agents stabilisants, les agents moussants, les parfums, les émulsionnants ioniques ou non, les charges, les séquestrants et les chélateurs, les parfums, les filtres, les huiles essentielles, les matières colorantes, les pigments, les actifs hydrophiles ou lipophiles, les vésicules lipidiques encapsulant un ou plusieurs actifs et/ou les conservateurs.
La composition selon l'invention peut contenir également les adjuvants habituels dans les domaines cosmétique et dermatologique, tels que les gélifiants hydrophiles ou lipophiles, les actifs hydrophiles ou lipophiles, les conservateurs, les antioxydants, les solvants, les parfums, les charges, les filtres, les pigments, les absorbeurs d'odeur et les matières colorantes. Les quantités de ces différents adjuvants sont celles classiquement utilisées dans les domaines considérés, et par exemple de 0,01 à 20 % du poids total de la composition. Ces adjuvants, selon leur nature, peuvent être introduits dans la phase grasse, dans la phase aqueuse, dans les vésicules lipidiques et/ou dans les nanoparticules.
De manière préférée, ladite composition cosmétique comprend du 1,3 propanediol.
De manière préférée, ladite composition cosmétique comprend entre 0,1 et 10% en poids, de préférence entre 1 et 5%, de manière encore préférée entre 2 et 4%, de manière particulièrement préférée environ 3% en poids, d’une composition dite «active» comprenant entre 15 et 50%, de préférence entre 30 et 40%, de manière encore plus préférée environ 32% en poids d’extraits de Padina Pavonica, entre 10 et 30% en poids, de préférence 20% de 1,3 propanediol, et QSP eau.
De manière préférée, la composition cosmétique selon l’invention comprend de 0,01 à 10% en poids de la composition d’extraits de Padina Pavonica, de préférence de 0,50 à 3%, de manière encore plus préférée entre 0,9 et 1%, de manière particulièrement préférée environ 0,96%.
Ainsi si la composition cosmétique comprend 3% d’une composition active comprenant 32% en poids d’extraits de Padina Pavonica, alors la composition cosmétique comprend 0,96% d’extraits de Padina Pavonica.
De manière encore plus préférée, ladite composition comprenden outre au moins un conservateur, de préférence choisi parmi du phenoxyéthanol ou un mélange d’eau, de potassium sorbate et de sodium benzoate.
Le mélange d’eau, de potassium sorbate et de sodium benzoate est par exemple commercialisé sous le nom commercial Microcare SB.
De manière préférée, ladite composition cosmétique est formulée sous forme de crème, d'une pommade, d’un onguent, d’un masque, d’un sérum, d'un lait, d'une lotion, d'une pâte, d'une mousse, d'un aérosol, d’un stick, d’un shampooings, d’un d’après-shampooings, de patchs, d'une solution aqueuse hydroalcoolique ou huileuse, d'une émulsion huile-dans-eau ou eau-dans-huile ou multiple, d'un gel aqueux ou huileux, d'un produit anhydre liquide, pâteux ou solide, et/ou d'une dispersion d'huile dans une phase aqueuse à l'aide de sphérules, ces sphérules pouvant être des nanoparticules polymériques telles que les nanosphères et les nanocapsules ou des vésicules lipidiques de type ionique et/ou non-ionique.
De manière préférée, ladite composition augmente l’expression d’au moins un des gènes choisis parmi SPRR2A, IVL, SPRR3, SPRR1B, SPRR2E, SPRR1A, SPRR2F, SPRR2G, LOR, LCE3D, LCE2B, LCE1F, LCE1D, LCE2A, LCE3C, LCE6A, S100A9, S100A8, S100A7, S100A4, FLG, CRNN, TGM1, TGM3, CRCT1, GRHL3, ZNF750, KLF4, PGLYRP4, KPRP, SLPI, KLK7, CST6, PI3, SPINK5, KLK5, CTSV, CDSN, et CTSD.
Selon un troisième aspect, l’invention concerne un procédé de soin cosmétique pour améliorer la formation et la maturation du stratum corneum comprenant une étape d’application sur une zone de la peau d’une composition selon l’invention.
De manière préférée, une quantité de 0,1 à 50 mg/cm2, de préférence 0,25 à 2,5 mg/cm2, de composition cosmétique selon l’invention est appliqué sur la zone de la peau.
De manière préférée, la composition cosmétique selon l’invention est appliquée une à deux fois par jour, de préférence 2 fois par jour, pendant au moins 7 jours, de préférence au moins 15 jours, de manière encore préférée au moins un mois, de manière particulièrement préférée au moins 2 mois, et de manière plus particulièrement préférée au moins 3 mois. De manière tout particulièrement préférée, la composition cosmétique est appliquée dans le procédé selon l’invention 2 fois par jour pendant au moins 3 mois.
De manière préférée selon l’invention, ladite zone de la peau est le visage, le cou et/ou le décolleté.
DESCRIPTION DES FIGURES
D’autres caractéristiques, buts et avantages de l’invention ressortiront de la description qui suit, qui est purement illustrative et non limitative, et qui doit être lue en regard des dessins annexés sur lesquels :
La figure 1 illustre l’expression de familles de gènes majeures du stratum corneum. Les histogrammes en noir sont les petites protéines riches en proline, les histogrammes en gris foncés sont les protéines LCE, les histogrammes en gris sont les S100A et les histogrammes en gris clair les protéines de fusion S100. Chaque étiquette liée à l’histogramme indique le gène et son fold changes. Un fold-change de 2 pour exemple indique une expression doublée de l’expression du gène.
La figure 2 illustre le résultat de l’immunofluorescence sur le pourcentage d’expression de SPRR1A sur des NHEKs traités avec l’extrait selon l’invention, et non traités. CTL NT veut dire contrôle non traité; Solvant est 3% de propanediol; *** Très hautement significatif; ** hautement significatif; OH = Extrait selon l’invention à 1% et 3%. N=3
Exemple:
L’effet de la composition selon l’invention a été étudié par analyse transcriptomique du génome complet et confirmé par microscopie à immunofluorescence.
Exemple 1: Analyse complète du transcriptome du génome
Méthode
Afin de mieux caractériser les effets de la composition sur les cellules cutanées, des kératinocytes humains normaux ont été cultivés in vitro en présence ou en l'absence de l’extrait selon l’invention afin d'évaluer les doses cytotoxiques.
Ensuite, le profil complet d'expression des gènes du génome a été établi. Il a été réalisé à l'aide de puces à ADN Affymetrix qui permettent d'identifier et de caractériser un grand nombre de gènes et de voies qui sont régulés à la hausse ou à la baisse dans des conditions spécifiques.
La dose testée a été de 3 % (aucune dose cytotoxique) appliquée pendant 24 heures (n=3).
Les données ont été analysées dans la base de données "StratiCell Skin Knowledge".
Résultats
Les résultats fournissent des connaissances approfondies sur les mécanismes d'action de la composition selon l’invention.
Les données ont été annotées à deux niveaux d'analyse :
  • L'analyse individuelle a été effectuée selon la définition de la sonde Affymetrix afin de sélectionner les gènes exprimés de manière différentielle entre les cultures traitées ou non avec l'actif pour un fold-change (FC >1 (régulation positive) ou < 1 (régulation négative) pour une p-value P < 0,05.
Lorsque des kératinocytes ont été cultivés en présence de 3% de la composition selon l’invention pendant 24h, l'expression de 3363 gènes a été trouvée modulée, significativement pour une p-value de P < 0,05.
Ces données correspondent à 1528 gènes régulés à la hausse (augmentation entre 1,x et 4,5x) et 1835 gènes régulés à la baisse (diminution entre 1,2x et 7x). Lorsque le fold-change est placé à x2, 269 gènes sont régulés à la hausse et 111 gènes à la baisse.
Ces données prouvent le potentiel élevé de la composition sur le stratum corneum.
  • L'analyse des groupes fonctionnels de gènes particulièrement pertinents pour la biologie de la peau a complété la première analyse.
L'analyse thématique de ces gènes sélectionnés par le biais de la base de données propriétaire Straticell sur la peau a révélé l'importance de gènes pertinents pour le stratum corneum.
Exemple 2: Etude d’immunofluorescence
Des NHEK ont été cultivés dans le milieu EpilifeTM à 37 °C pendant 24 heures, puis traités pendant 72 heures avec soit une composition cosmétique neutre comprenant 1% ou 3% de composition active selon l’invention comprenant 32% en poids d’extraits de Padina Pavonica, 20% en poids de 1,3 propanediol, 48% en poids d’eau dans le même milieu Epilife, soit 3% de 1,3 propanediol dilué dans de l’eau. En parallèle, des cellules ont également été cultivées en solution hypercalcique (1,8 mM Ca Cl2) afin d'induire l'expression de la molécule de référence.
Les cultures ont été réalisées en trois exemplaires (n=3) pour chaque immunomarquage.
Les NHEK ont été fixés et incubés avec des anticorps primaires dirigés contre DSG1 (Abcam AB12077) et SPRR1A (Bioconnect LS-C499866-50) suivis par des anticorps secondaires fluorescents appropriés (Molecular Probes A11001 ou A11008). De plus, une molécule fluorescente, le DAPI (4,6-diamino-2-phénylindole) a permis la détection des noyaux des kératinocytes. Pour mieux caractériser cet effet, la composition selon l’invention a été comparé à Ca++, un facteur de différenciation épidermique terminal bien connu qui contrôle la conformation des intégrines, l'activité des cadhérines, la formation et le maintien des desmosomes.
Les différentes images de fluorescences, obtenues à partir d'une caméra Leica (DFC420C, obj. 40x), ont été analysées par un logiciel dédié (QWin/Leica/3 images par culture). L'application du test de Student a validé cette étude.
Exemple 3: Impact sur la formation du stratum corneum par analyse transcriptomique.
Les résultats ont été démontrés par une analyse transcriptomique complète (Exemple 1-3) et une étude d'immunofluorescence (exemple 2-4). Seuls les gènes présentant un fold-change (FC) ≥ 1,3 et une p-value < 0,05 ont été sélectionnés comme étant exprimés différemment.
La composition selon l’invention module les principaux gènes participant à la formation du % d’OCEA HEALTH et 3% de propanediol . stratum corneum. L'expression d'un ensemble de 33 gènes a été trouvée modifié de manière significatif dans le groupe de gènes "différenciation épidermique".
D'importants gènes appartenant aux grandes familles des petites protéines riches en proline (SPRRs), la loricrine, l'involucrine et les protéines tardives de l'enveloppe cornée (LCE) sont augmentées avec une importante valeur de fold-change.
Les résultats sont présentés dans le tableau 1 suivant, et la figure 1.
Tableau 1: Augmentation de l’expression de gènes des précurseurs du stratum corneum après exposition avec l’extrait selon l’invention
L'involucrine (IVL -FC : 8,9 5 - p : 3,3E-09) est une composante mineure du stratum corneum (Steven A.C. & P.M. Steinert - 1994- J. Cell Sci. 1,7 (Pt 2) : 693-700) mais importante lors des premières étapes de formation de celui-ci, établissant la couche la plus externe de protéine (Eckert R.L. et al. 1993- J. Invest. Dermatol. 100 : 613- 617 ; Marekov L.N. & P.M. Steinert - 1998 - J. Biol. Chimie. 273 : 17763-1770).
La loricrine (LOR- FC : 1,4 - p : 3,3E-02) est une protéine structurelle à différenciation terminale constituant plus de 70% de l'enveloppe cornée. Elle s'exprime tardivement dans le stratum granulosum. Augmenter l’expression de la loricrine améliore la fonction de barrière défensive.
Les petites protéines riches en proline (SPRR) servent de récepteurs de pontage croisé et de donneurs de groupes aminés à tous les stades de la formation du stratum corneum. Leurs proportions relatives modulent les propriétés biomécaniques (Kypriotou M. et al 2012- Exp. Dermatol. 21 : 643-649).
Il est important de noter le fold-change (FC) de plusieurs SPRR, notamment SPRR2A (FC : 9.0- p : 4.2E-07) et SPRR3 (FC : 7.1 - p : 1.01E-07) exprimé avec 3% de la solution selon l’invention.
Outre leur fonction biomécanique, les SPRR font partie d'une réponse tissulaire adaptative, offrant des fonctions distinctes avec une sensibilité spécifique au stress environnemental (Jackson B. et al. 2005 - J. Invest. Dermatol. 124 (5) : 1062-1070). Ils ont d'importantes propriétés antioxydantes et détoxifient les espèces réactives de l'oxygène (Vermeij W.P. & C. Backendorf 2010 - PLos ONE 5 : e 11957 ; Vermeij W.P. et al. 2011 - J. Invest. Dermatol. 131 : 1435-1441).
Les protéines tardives de l'enveloppe cornée (LCE) sont connues comme précurseurs de l'enveloppe cornée du stratum corneum.
D'autres familles de protéines participent à la formation de l'enveloppe cornée, notamment les protéines S 100 et la famille des protéines de type fusionné S 100 (SFTP).
Les données relatives à ces familles de protéines surexprimées par l’actif selon l’invention sont présentées ci-dessous en tableau 2.
Tableau 2: Augmentation de l’expression de gènes S100 après exposition avec l’extrait selon l’invention
La famille des protéines S100 se compose de 24 membres impliqués dans de nombreux processus tels que la régulation de la prolifération, la différenciation, l'apoptose, l'homéostasie Ca2+, le métabolisme énergétique, l'inflammation et la migration/invasion par des interactions avec une variété de protéines cibles incluant les enzymes, sous-unités cytosquelettiques, récepteurs, facteurs de transcription et acides nucléiques. Ils s'expriment principalement dans les épithéliums stratifiés.
S100A8 (FC : 9.6 - p :1.72E-09) et S100A9 (FC : 6.1 - p :2.71E-08) sont connus pour réguler la réponse épidermique aux lésions, inflammations et maladies des tissus (Eckert R.L. et al. 2004- J. Invest. Dermatol. 123 :23-33 ; Donato R. et al. 2013 - Curr. Mol. Méd. 13 (1) : 24-57).
La famille des protéines de type fusionnées S100 (SFTP) ou famille de gènes fusionnés joue un rôle majeur dans l'homéostasie épithéliale. Comme les protéines S100, elles contiennent deux motifs mains-EF liant le calcium. Elles sont associées à des filaments intermédiaires cytoplasmiques ainsi qu'à des composants mineurs de la CE. Ils regroupent spécialement la filaggrine (FLG) et la cornuline (CRNN).
La filaggrine (FLG- FC : 2.4 - p :2.2E-03) agit comme une protéine structurale majeure. Elle est donc en première ligne de défense et protège la peau de l'entrée de substances étrangères dans l'environnement (Sandilands A. et al. 2009- J. Cell Sci. 122 : 1285-1294). Elle agrège les filaments de kératine en faisceaux serrés, qui compactent les cellules en une forme aplatie.
La cornuline (CRNNN- FC : 1.3 - p : 8.7E-03) est située à la périphérie des kératinocytes granulaires et des cornéocytes inférieurs, ce qui suggère son implication dans la formation du stratum corneum.
Les protéines précurseurs du stratum corneum sont réticulées par les transglutaminases (TGases).
Ces enzymes catalysent la formation de réticulations protéine-protéine isopeptide. Ce sont des enzymes clés impliquées dans la formation du stratum corneum, chaque TGase ayant des rôles distincts et complémentaires dans l'assemblage des enveloppes.
Trois TGase sont connus pour être actifs dans ce processus, en particulier TGase 1 et TGase 3. Le TGM1 est exprimé par voie suprabasale et relie les protéines précurseurs du CE tandis que le TGM3 se trouve dans la couche granulaire.
Les anomalies des TGases ont des conséquences dramatiques. Les mutations du TGM1 provoquent une ichtyose lamellaire caractérisée par une hyperkératose proliférative (Eckert R.L. et al. 2005 - J. Invest. Dermatol. 124 : 481- 492).
Les extraits selon l’invention permettent de surexprimer les gènes liés à TG1 et TG3 (Tableau 3).
Tableau 3: Augmentation de l’expression de gènes de transglutaminases après exposition avec l’extrait selon l’invention
Les extraits selon l’invention permettent de surexprimer également d'importants facteurs de transcription qui contrôlent les gènes du complexe de différenciation épidermique, certains d'entre eux étant essentiels à la formation d'une barrière épidermique mature (tableau 4).
Tableau 4: Augmentation de l’expression de gènes de facteurs de après exposition avec l’extrait selon l’invention
Le gène C-terminal 1 riche en cystéine (NICE-1- FC:10.4 - p:2.37E-08) est surexprimé pendant la différenciation terminale de l'épiderme (Marenholz I et al. 2001- Genome Res. 11 :341-365).
Le facteur de transcription 3 (GRHL3 - FC:9.7 - p:1.3E-08) favorise la différenciation et la migration (Klein R.H. et al. 2017 - PLoS Genet 13 (4) : e1006745).
La protéine 750 en doigt de zinc (ZNF750 - FC : 9,4 - p : 3,2E-09) est une protéine nucléaire exprimée dans les couches épidermiques suprabasales. Elle régule la différenciation terminale des kératinocytes (Cohen I. et al. 2012 - PloS One 7 : e42628).
Le Kruppel-like factor 4 (KLF4 - FC : 2,3 - p : 7,9E-05) joue un rôle important dans la prolifération et la différenciation terminale. Il serait crucial pour la formation d'une barrière épidermique mature.
En résumé, l’extrait selon l’invention est capable d'influencer les principaux gènes participant à la formation du stratum corneum. Par conséquent, il renforce l'intégrité de la couche cornée mature et maintient la reconstruction complète de l'enveloppe cornée en évitant les dommages causés par des facteurs environnementaux.
Exemple 4: Impact sur la formation du stratum corneum par immunofluorescence.
Pour mieux caractériser l'action de l’extrait selon l’invention sur la formation de l'enveloppe cornée, une analyse par immuno-fluorescente du SPPR1A a été réalisée et a confirmé les résultats génomiques.
SPRR1A a été fortement stimulé lorsque les NHEKs ont été cultivés en présence de 1,8 mM de CaCl2 ainsi qu'en présence de l’extrait selon l’invention (OH) de manière très significative pour 3% et très significative pour 1%.
Les résultats sont décrits en figure 2.
Un effet important a été observé en présence de CaCl2. Cependant, cet effet est plus faible que celui observé pour 3 % d’extraits selon l’invention.
Exemple 5: Impact de l’extrait selon l’invention sur la maturation du stratum corneum:
L’extrait selon l’invention permet de surexprimer 9 gènes jouant un rôle clé dans le procédé de desquamation amenant à la maturation du stratum corneum.
Tableau5: gènes surexprimés ayant un rôle dans la maturation du stratum corneum
Les deux kallitrines KLK5 (FC : 8.5 - p : 2.2E-09) et KLK7 (FC :2.8 - p : 1.2E-06) jouent un rôle important dans la desquamation en digérant les cornéodesmosomes (Borgono C.A. et al. 2007- J. Biol. Chimie. 282 (6) : 3640-3652).
SLPI (FC : 9,9 - p : 6,1E-10) ainsi que PI3 (FC : 5,1 - p : 7,1E-07) sont fortement impliqués dans la régulation de la desquamation.
Cystatin M/E CST6 (FC : 5.8 - p : 1.0E-08) assure des fonctions de régulation et de protection contre la protéolyse non contrôlée par les protéases cystéine. Elle est connue comme molécule clée qui contrôle la formation de la barrière cutanée (Zeeuwen, P. L. et al. 2009 - J. Invest. Dermatol. 129 : 1327-1338).
La cathepsine V (CTSV (FC :2.6 - p : 1.8E-06) est impliquée dans l'activation des TGase 1 et 3 (Egberts F. et al. 2004 - J. Cell Sci. 117 :2295-2307).
Ainsi l’extrait selon l’invention a un impact majeur dans la régulation de la maturation du stratum corneum.

Claims (9)

  1. Utilisation cosmétique d’extraits de Padina Pavonica pour améliorer la formation et la maturation du stratum corneum.
  2. Utilisation cosmétique selon la revendication précédente, caractérisée en ce que lesdits extraits de Padina Pavonica sont des extraits des thalles de Padina Pavonica.
  3. Composition cosmétique pour améliorer la formation et la maturation du stratum corneum comprenant des extraits de Padina Pavonica dans un solvant.
  4. Composition cosmétique selon la revendication précédente, caractérisée en ce que lesdits extraits de Padina Pavonica sont des extraits des thalles de Padina Pavonica.
  5. Composition cosmétique selon les revendications 3 et 4, caractérisée en ce que ladite composition comprend de 0,01 à 10% en poids de la composition d’extraits de Padina Pavonica, de préférence de 0,50 à 3%, de manière encore plus préférée entre 0,9 et 1%, et de manière particulièrement préférée 0,96%.
  6. Composition cosmétique selon l’une quelconque des revendications 3 à 5, caractérisée en ce que ladite composition comprend également au moins un autre composé cosmétiquement acceptable, de préférence choisi parmi les agents permettant d’améliorer la formation et/ou la maturation du stratum corneum, les agents apaisants, les agents restructurant, les agents régénérants, les agents revitalisants, les filtres solaires, les agents antirides, les agents hydratants, les agents anti-âges, les agents tensioactifs, les corps gras, les solvants organiques, les agents solubilisant, les agents épaississants et gélifiants, les lissants, les agents renforçant la fermeté, l’élasticité et/ou l’effet barrière de la peau, les antioxydants, les opacifiants, les agents stabilisants, les agents moussants, les parfums, les émulsionnants ioniques ou non, les charges, les séquestrants et les chélateurs, les parfums, les filtres, les huiles essentielles, les matières colorantes, les pigments, les actifs hydrophiles ou lipophiles, les vésicules lipidiques encapsulant un ou plusieurs actifs et/ou les conservateurs.
  7. Composition cosmétique selon l’une quelconque des revendications 3 à 6, caractérisée en ce que ladite composition cosmétique comprend du 1,3 propanediol.
  8. Composition cosmétique selon l’une quelconque des revendications 3 à 7, caractérisée en ce que ladite composition cosmétique est formulée sous forme de crème, d'une pommade, d’un onguent, d’un masque, d’un sérum, d'un lait, d'une lotion, d'une pâte, d'une mousse, d'un aérosol, d’un stick, d’un shampooings, d’un d’après-shampooings, de patchs, d'une solution aqueuse hydroalcoolique ou huileuse, d'une émulsion huile-dans-eau ou eau-dans-huile ou multiple, d'un gel aqueux ou huileux, d'un produit anhydre liquide, pâteux ou solide, et/ou d'une dispersion d'huile dans une phase aqueuse à l'aide de sphérules, ces sphérules pouvant être des nanoparticules polymériques telles que les nanosphères et les nanocapsules ou des vésicules lipidiques de type ionique et/ou non-ionique.
  9. Procédé de soin cosmétique pour améliorer la formation et la maturation du stratum corneum comprenant une étape d’application sur une zone de la peau d’une composition selon les revendications 3 à 8.
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